本申请要求于 2011 年 08 月 26 日提交中国专利局、 申请号为 201110248968.2、 发明名称为"一种硫氰酸红霉素的制备方法，� �的中国专利 申请的优先权， 其全部内容通过引用结合在本申请中。 技术领域

本发明涉及制药领域， 特别涉及一种硫氰酸红霉素的制备方法。 背景技术

目前， 全球抗感染药物市场的三大主导药物是头孢菌 素 /半合成青霉 素类、 氟喹诺酮类和大环内酯类， 这三类药物合计占了 80%的抗感染药 物市场份额。 其中， 以第三代红霉素 (如阿奇霉素、 克拉霉素和罗红霉素 等)领衔的大环内酯类抗生素近年来在国际市� �所占份额稳步上升。 目前， 我国已成为世界上大环内酯类抗生素原料药第 一大生产国，我国大环内酯 类原料药的总产量已逾 1万吨， 占世界总产量的 2/3。

硫氰酸红霉素 （ Erythromycin thiocyanate ) , 主要用于治疗革兰氏阳 性菌和支原体、衣原体等感染，是国内红霉素 衍生物系列产品如阿奇霉素、 克拉霉素和罗红霉素等的基础原料。由于红霉 素及其衍生物和下游系列产 品在临床的大量应用， 使其成为世界抗生素市场上的第三大药物， 因此， 与之相适应的原料药也具有广阔的市场空间。 硫氰酸红霉素的含量和质量 检测一般是通过对主组分红霉素 Α的含量进行测定来评价， 《中国药典》 2005年版录有其检测方法。 本领域的技术人员熟知， 目前原料药生产厂 家众多， 但产品质量参差不齐， 如陈悦在中国药学杂志 2007年 12月第 42卷第 23期 《反相 HPLC分析硫氰酸红霉素的相关物质及主组分含� �》 中测定的两家公司主组分含量为 68.2%~71.8%和 73.8%〜76.0%。魏琦等人 在基层医学论坛 2009年第 13卷 10月上旬刊中发表了 《反相高效液相色 谱法测定硫氰酸红霉素组分》 ， 其测定的硫氰酸红霉素主组分红霉素 A 的含量为 68.7%〜70.5%。 本领域的技术人员熟知， 质量差的产品， 通常指 主组分红霉素 A低于 72%以下的产品， 只能用作兽用药。 即使质量稍好

修改页 （条约第 19条) 的产品作为衍生物的起始物料， 质量不同所生产的衍生物质量也是相差 大， 只有质量高， 成本低的产品在市场上才会占据有利的竟争优 势。

硫氰酸红霉素分为如式 I所示的硫氰酸红霉素 A、 硫氰酸红霉素 B、 硫氰酸红霉素 C及其它的相关杂质， 硫氰酸红霉素 A是需要的产品， 而 其它物质均是杂质。 这些杂质在硫氰酸红霉素 A结晶时可能会共结晶出 来或被吸附在晶体上，造成产品杂质含量高， 这些杂质含量的高低除了与 结晶过程的控制有很大关系外， 与原溶剂种类也有很大关系。

式 I

由于硫氰酸红霉素 A与硫氰酸红霉素^ C、 D、 E等杂质在分子上基 团不同导致了它们之间极性的差异，因此在不 同极性的溶剂中其溶解度也 会有差别，为了提高产品纯度，应选择一种溶 剂体系使杂质的溶解度较高， 而不与硫氰酸红霉素 A共结晶或者析出来极少量， 同时， 溶剂还会影响 晶体的外形， 良好的晶体性质有助于过滤， 分离、 洗涤和干燥。

现有技术大多利用溶剂萃取或固定床吸附获得 乙酸丁酯或辛醇或一些 非水溶性混合溶剂的红霉素溶液， 再经过分离、 洗涤、 过滤后， 加入硫氰 酸水溶液搅拌混合， 緩慢滴加醋酸溶液， 得到含有硫氰酸红霉素的晶浆， 晶浆离心分离并洗涤得到碗氰酸红霉素湿品， 该湿品经粉碎、干燥得到硫 氰酸红霉素产品。专利 CN 200810179653.5也应用了乙酸丁酯作为溶媒介 质。

现有技术存在如下缺点： 现有技术所得到的产品硫氰酸红霉素 A小

修改页 （条约第 19条) 于 78%, 由于纯度较低， 杂质太多， 不能作为起始物料合成符合欧洲标 准和美国标准的阿奇霉素、 克拉霉素等衍生物。 发明内容

有鉴于此，本发明提供一种硫氰酸红霉素的制 备方法。本发明提供的 制备方法提供一种硫氰酸红霉素的制备方法， 可获得主组分红霉素 A含 量更高， 杂质含量更少的产品， 能作为合成阿奇霉素、 克拉霉素并满足欧 洲标准和美国标准的优良起始原料。本工艺所 得产品质量更优，成本更低， 在市场上占据有利的竟争优势。

在下面的内容中， 无论是否使用 "大约" 或 "约" 等字眼， 所有在 此公开了的数字均为近似值。 每一个数字的数值有可能会出现 1%、 2%、 5%、 7%、 8%、 10%、 15%或 20%等差异。 每当公开一个具有 N值的数字 时， 任何具有 N+/-l%, N+/-2%, N+/-3%, N+/-5%, N+/-7%, N+/-8%, N+/-10%, N+/-15% or N+/-20%值的数字会被明确地公开， 其中 "+/-"是指 加或减。 每当公开一个数值范围中的一个下限， RL, 和一个上限， RU, 时， 任何处于该公开了的范围之内的数值会被明确 地公开。 特别是， 包含 了该范围内的以下数值： R=RL+K*(RU-RL), 其中 K是一个按 1%的增量 增加的从 1%到 100%的变量。 如： 1%、 2%、 3%、 4%、 5%...50%、 51%、 52%...95%、 96%、 97%、 98%、 99%或 100%。 另外， 还特别包含了在此 公开了的上述以两个 R数字定义的数值范围。

本文所有涉及到的术语 "弱酸"， 是指 pKa值大于 -1.76的酸， 在一 些实施例中， 弱酸为稀醋酸、 稀盐酸、 稀^■酸、 稀磷酸、 稀硝酸。

本文所有涉及到的术语 "稀"， 是指酸的质量分数为 1%-50%, 或者 为 1%-40%, 或者为 1%-30%, 或者为 1%-20%, 或者为 1%-10%, 或者为 1%-5% 。

郭敦佳等人发表了文献《硫氰酸红霉素的制备 》（精细石油化工， 1999 年 11月， 第 6期），他们用醋酸和硫氰酸钠在水中和红霉� �工业品进行反 应，得到硫氰酸红霉素，物料摩尔比为红霉素 ： HAc: NaSCN= l : 1.30: 1.15 , pH值控制为 7.2时， 收率可达 95%左右， 该工艺所使用的红霉素工业品

修改页 （条约第 19条) 价格比硫氰酸红霉素要高得多，所以没有一家 生产厂家会使用红霉素工业 成品来制备硫氰酸红霉素。那么只能使用含大 量杂质的红霉素粗品制备硫 氰酸红霉素， 而使用红霉素粗品经过此方法所得的产品含量 较低，杂质较 多， 不能起到纯化的效果，我们按文献中最佳配比 使用红霉素粗品进行精 制得到硫氰酸红霉素， 其主组分红霉素 A含量仅 74.3% (按干品计）， 其 结果见具体实施方案中实施例 7。

为了实现上述发明目的， 本发明提供以下技术方案：

这里提供的一种能得到含量高、 质量好的疏氰酸红霉素的制备方法采 用红霉素或红霉素盐类化合物作为原料,选用� �酮或含有丙酮的混合溶剂 作为反应溶剂或结晶溶剂。

所述制备方法包括以下步骤：

a) 在碱性条件下将红霉素或红霉素盐类化合物或 其混合物溶解到丙酮或 含有丙酮的混合溶剂中， 得到红霉素或红霉素盐类化合物的溶液； b) 向溶液中加入硫氰酸盐；

c) 调节体系 pH在中性偏酸性或者中性偏碱性， 结晶。

其中， 在上文或下文中所述的原料红霉素或红霉素盐 类化合物可以是 粗品的形式,也可以是经过其他方法精制后含� �未达到本发明所能达到的 含量的产品。 所述红霉素盐类化合物为硫氰酸红霉素或乳酸 红霉素。

所述含有丙酮的混合溶剂中丙酮的体积含量约 大于 40%, 或者约大于 50%, 或者约大于 60%, 或者约大于 70%, 或者约大于 80%, 或者约大 于 90%。 其他溶剂可以是醇溶剂、 醚溶剂、 卤代溶剂、 酯类溶剂、 除丙 酮外的其他酮类溶剂、 水或其组合； 所述醇类溶剂为 C1~C6的醇， 例如 曱醇、 乙醇、 正丙醇、 异丙醇、 正丁醇或其组合； 所述的醚溶剂为四氢呋 喃、 乙醚、 二氧六环、 甲基叔丁基醚、 二曱氧乙烷、 二乙二醇二曱醚、 三 甘醇二甲醚或其组合； 所述的卤代溶剂为二氯甲烷、 1,2-二氯乙烷、 氯仿 或其组合。所述的酯类溶剂为乙酸乙酯、乙酸 异丙酯、乙酸丁酯或其组合。 所述其他酮类溶剂为丁酮。

所述碱性条件是指红霉素溶解时溶液的 pH 在 7.5~11.0 , 或者在 8.5~10.0或者在 9.0~9.5 。 可以采用氢氧化钠、 氢氧化钾、 氢氧化铵、 碳

修改页 （条约第 19条) 酸钠、 碳酸钾、 碳酸氢钠、 碳酸氢钾或其组合作为 pH调节剂。

步骤 a中， 所述溶液中红霉素或红霉素盐类化合物的含量 为 5%〜35%, 或者为 10%~30%, 或者为 10%~25%。

所述硫氰酸盐为硫氰酸钠、 硫氰酸钾、 硫氰酸铵或其组合， 所用的量 与红霉素或红霉素盐类化合物的摩尔比为 0.1 : 1-5: 1 , 或者为 0.1 : 1-3: 1 , 或者为 0.2: 1-2: 1。

步骤 c中， 所述体系 pH调节在 6.0 8.0, 在一些实施例中为 6.0〜7.5 , 在一些实施例中为 7.0~7.5。 可以采用弱酸作为 pH调节剂， 所述弱酸可 以为无机酸、有机酸或其组合，或者所述弱酸 为稀醋酸、稀盐酸、稀硫酸、 稀磷酸、 稀硝酸或其组合。

所述制备方法， 其温度需要进行阶梯降温， 在步骤 a和步骤 b中， 溶 液温度控制在 3(rC~60°C、 或在 35 °C~55 °C、 或在 35 °C〜50°C , 在一些实 施例中为 40°C〜5(TC , 在一些实施例中为 40°C〜45 °C。 在步骤 c中将温度 降至 -10X：〜 15 °C , 或者 0°C~10°C , 在一些实施例中为 0°C〜5 °C , 在一些 实施例中 5 °C~10°C , 在一些实施例中为 0°C、 或 5 °C、 或 10° (。

在一些实施例中， 在加入硫氰酸盐之前如果有固体不溶性杂质， 则可 以在加入硫氰酸盐之前对溶液进行过滤， 但并不是必须的。

通过这里所述制备方法得到的晶体， 可以采取本领域技术人员熟知的 方法进行收取， 比如分离、 洗涤、 和干燥。 所述分离可采用本领域常用的 设备， 比如离心机、 过滤机、 压滤机等设备。

离心分离得到的硫氰酸红霉素结晶可以使用水 、 有机溶剂、 或其组合 进行淋洗， 所述有机溶剂可为乙酸乙酯、 丙酮、 乙酸丁酯、 辛醇等的一种 或多种， 并采用干燥得方法除去残留溶剂。

经检测，本发明所得到的硫氰酸红霉素结晶中 主组分红霉素 A ( HPLC 方法检测）含量约大于 78%, 或约大于 79%, 或约大于 80%, 或约大于 81%, 或约大于 82%， 或约大于 83%, 或约大于 84%, 或约大于 85% (以 干品计）。

这里提供的制备方法有以下优点：

1、 用丙酮代替现有技术的乙酸丁酯或水等溶剂， 选择性更优。 本发明所

修改页 （条约第 19条) 得产品纯度高， 所得到的硫氰酸红霉素其红霉素 A含量约大于 78%, 或 约大于 79%, 或约大于 80%, 或约大于 81%， 或约大于 82%, 或约大于 83%, 或约大于 84%, 或约大于 85%, 以此为原料生产的阿奇霉素等质量 更好， 转化率更高。

2、 丙酮溶解红霉素或红霉素盐类化合物的浓度高 达 20%, 丙酮用量仅为 乙酸丁酯或水的用量 （乙酸丁酯或水等仅能溶解 5%以下） 的 25%以下， 并且丙酮沸点低， 可对丙酮回收后可重复使用， 成本下降， 且不会产生废 水， 污染环境。

3、 丙酮属低毒性溶剂， 与乙酸丁酯等溶剂比毒性更低， 更有利于保护生 产人员健康。 附图说明

图 1示实施例 1所得的硫氰酸红霉素 A的高效液相色谱图；

图 2示实施例 2所得的硫氰酸红霉素 A的高效液相色诰图；

图 3示实施例 3所得的硫氰酸红霉素 A的高效液相色语图；

图 4示实施例 4所得的硫氰酸红霉素 A的高效液相色诰图；

图 5示实施例 5所得的硫氰酸红霉素 A的高效液相色谱图；

图 6示实施例 6所得的硫氰酸红霉素 A的高效液相色语图；

图 7示实施例 7所得的硫氰酸红霉素 A的高效液相色谱图；

图 8示实施例 8的标准品红霉素 A的高效液相色谱图。 具体实施方式

本发明公开了一种制备精制或制备的硫氰酸红 霉素方法，本领域技术 人员可以借鉴本文内容， 适当改进工艺参数实现。 特别需要指出的是， 所 有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是 显而易见的，它们都被视为 包括在本发明。本发明的方法已经通过较佳实 施例进行了描述，相关人员 明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对 本文所述的方法和应用进行 改动或适当变更与组合， 来实现和应用本发明技术。本发明所使用的试 剂 均可以从市场上购得或者可以通过本发明所描 述的方法制备而得。

修改页 （条约第 19条) 为了使本领域的技术人员更好地理解本发明的 技术方案，下面结合具体实 施例对本发明作进一步的详细说明。 实施例 1

取粗品红霉素 100 g, 加入丙酮 600 mL, 置于水浴中加热至 35 。C , 调节 pH至 8.5 , 过滤得滤液， 将滤液保温于 35 V , 加入硫氰酸钠， 加量 摩尔比 2: 1 , 搅拌使其溶解后， 使用醋酸调节溶液 pH至 6.0, 緩慢降温 至 10 °C , 保温约 15 min后离心分离， 使用 100 mL纯化水淋洗， 粉碎后 烘干得硫氰酸红霉素， 其主组分红霉素 A含量 85.1% ( HPLC方法检测， 以干品计） 。 实施例 2

取粗品硫氰酸红霉素 150 g, 加入丙酮 600 mL, 置于水浴中加热至 45 V , 调节 pH至 10.0, 过滤得滤液， 将滤液保温于 45 V , 加入 υ氰酸 钾，加量摩尔比 0.2: 1 ,撹拌使其溶解后，使用稀盐酸调节溶液 pH至 7.5, 緩慢降温至 0°C , 保温约 15 min后离心分离， 使用 100 mL纯化水淋洗， 粉碎后烘干得硫氰酸红霉素， 其主组分红霉素 A含量 84.7% ( HPLC方法 检测， 以干品计） 。 实施例 3

取粗品乳酸红霉素 150 g， 加入丙酮 600 mL, 置于水浴中加热至 40 。C , 调节 pH至 9.0, 过滤得滤液， 将滤液保温于 45 V， 加入硫氰酸铵， 加量摩尔比 2: 1， 搅拌使其溶解后， 使用稀盐酸调节溶液 pH至 7.5 , 緩 慢降温至 5 。C , 保温约 15 min后离心分离， 使用 100 mL纯化水淋洗， 粉碎后烘干得硫氰酸红霉素， 其主组分红霉素 A含量 84.9% ( HPLC方法 检测， 以干品计） 。 实施例 4

取红霉素及含有其它杂质的混合物 150 g, 加入丙酮 600 mL, 置于

修改页 （条约第 19条) 水浴中加热至 45 °C ,调节 pH至 9.5 ,过滤得滤液，将滤液保温于 45 °C , 加入硫氰酸铵， 加量摩尔比 2: 1 , 搅拌使其溶解后， 使用稀硫酸调节溶 液 pH至 7.0,緩慢降温至 10 °C ,保温约 15 min后离心分离，使用 100 mL 纯化水淋洗，粉碎后烘干得硫氰酸红霉素，其 主组分红霉素 A含量 85.0% ( HPLC方法检测， 以干品计）。 实施例 5

取硫氰酸红霉素及含有其它杂质的混合物 150 g, 加入丙酮 600 mL, 置于水浴中加热至 47 。C , 调节 pH至 10.0, 过滤得滤液， 将滤液保温于 47 V , 加入硫氰酸钾， 加量摩尔比 0.2: 1 , 搅拌使其溶解后， 使用稀硝 酸调节溶液 pH至 7.5， 緩慢降温至 0°C , 保温约 15 min后离心分离， 使 用 100 mL 丙酮淋洗， 粉碎后烘干得硫氰酸红霉素， 其主组分红霉素 A 含量 84.9% ( HPLC方法检测， 以干品计） 。 实施例 6

取乳酸红霉素及含有其它杂质的混合物 150 g, 加入丙酮 600 mL， 置于水浴中加热至 40 °C , 滴加氢氧化钾溶液， 调节 pH至 9.5 , 过滤得滤 液， 将滤液保温于 45 V , 加入硫氰酸铵， 加量摩尔比 2: 1 , 搅拌使其溶 解后， 使用稀盐酸调节溶液 pH至 7.5， 緩慢降温至 5 V， 保温约 15 min 后离心分离， 使用 100 mL纯化水淋洗， 粉碎后烘干得硫氰酸红霉素， 其 主组分红霉素 A含量 84.6% ( HPLC方法检测， 以干品计） 。 实施例 7

取粗品红霉素（红霉素及含有其它杂质的混合 物） 30 g , 加入纯化水 300 mL, 启动搅拌， 慢慢滴加 20%冰醋酸 9.9 mL , 搅拌约 20min, 由于 粗品含有不溶性杂质， 对溶解液进行过滤， 向过滤液中滴加 20%^氰酸 钠溶液 18.4 mL ( 0.038mol ), 继续搅拌， 调节 pH至 7.2， 反应约 1.5h, 沉淀完全后， 冷冻结晶， 抽滤， 纯化水洗涤 3次， 抽滤后烘干得硫氰酸红 霉素， 其主组分红霉素 A含量 74.3% ( HPLC方法检测， 以千品计）。

修改页 （条约第 19条) 实施例 8: HPLC检测方法和检测结果

对以上实施例所得到得产品按 HPLC色谱、 外标法进行检测， 检测结 果如图 1〜图 6所示。 检测方法如下：

色傅系统： Agilent 1200, 色谱柱： XBridge C8 4.6 mmx250 mm 5 um, 检测器： 紫外检测器，检测波长： 215 nm,进样体积： 20 ul,柱温： 40 V , 流动相：氨水： 乙腈 =57:43 稀释 500倍， 流速 1.0 ml/min，记录图谱时间： 60 min。

溶液 A: 取纯化水与乙腈按照 57:43比例混合。

标准溶液： 精密称取红霉素 A标准品约 80 mg至 25 mL容量瓶中， 用 2 ml乙腈溶解后， 用溶液 A定容， 摇匀， 用 0.45 um微孔滤膜过滤后 进样。

供试液：精密称取硫氰酸红霉素约 200 mg至 50 ml容量瓶中，用 4 ml 乙腈溶解后， 用溶液 A定容， 摇匀， 用 0.45 um微孔滤膜过滤后进样。

图 8中保留时间 RT大约 17min的主峰为标准品红霉素 A峰。

氰酸红霉素中主组分红霉素 A组分按下述方法进行计算：

红霉素 A (干品）％= ( AtxMsxVtxPs% ) 100%/ ( AsxMtxVs ) I ( l〜Wt% ) 式中： At—供试品溶液进样红霉素 A峰的峰面积；

As—标准溶液两次进样红霉素 A峰的平均峰面积；

Ms―标准品质量；

Mt—供试品质量；

Vs—标准溶液体积；

Vt—供试品溶液体积；

Ps%~^i霉素标准品中红霉素 A的纯度；

Wt%_供试品水分。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指 出，对于本技术领域的 普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前 提下，还可以做出若干改进 和润饰， 例如改变结晶溶剂的用量， 在一定程度上调整温度， 结晶时间， 以及酸或碱的用量，或者调整硫氰酸盐的用量 等等，这些改进和润饰也应 视为本发明的保护范围。

修改页 （条约第 19条)