GARCIA BORREGO ARANZAZU (ES)
DE CASTRO GOMEZ-MILLAN ANTONIO (ES)
MEDINA PRADAS EDUARDO (ES)
BRENES BALBUENA MANUEL (ES)
REJANO ZAPATA LUIS (ES)
AGRO SEVILLA ACEITUNAS S C A (ES)
ROMERO BARRANCO CONCEPCION (ES)
GARCIA BORREGO ARANZAZU (ES)
DE CASTRO GOMEZ-MILLAN ANTONIO (ES)
MEDINA PRADAS EDUARDO (ES)
BRENES BALBUENA MANUEL (ES)
REJANO ZAPATA LUIS (ES)
| ES2111498A1 | 1998-03-01 | |||
| EP1431379A1 | 2004-06-23 | |||
| ES2301336A1 | 2008-06-16 |
| REIVINDICACIONES 1. Procedimiento de obtención de un extracto que contiene ácidos triterpénicos caracterizado porque se emplean soluciones del aderezo de aceitunas, y porque comprende las siguientes etapas: a. acidificación a pH inferior a 4 de Ia solución inicial; b. centrifugación y secado del sólido obtenido en el paso (a); c. extracción de los ácidos triterpénicos con un solvente orgánico; d. centrifugación de Ia suspensión y dilución en agua; e. eliminación del solvente orgánico del sobrenadante mediante evaporación; f. congelación y liofilización de Ia suspensión obtenida en (e) o secado de Ia suspensión obtenida en (e). 2. Procedimiento según Ia reivindicación 1 , donde las soluciones del aderezo de aceitunas son las soluciones de hidróxido sódico (lejías) del proceso de elaboración de aceitunas verdes y/o negras, con o sin reutilización, aguas de lavado de los procesos de elaboración de aceitunas verdes y/o negras, o precipitados formados en los fermentadores de aceitunas. 3. Procedimiento según Ia reivindicación 1 , donde los ácidos triterpénicos son ácidos maslínico y oleanólico. 4. Procedimiento según Ia reivindicación 2, donde si se emplean soluciones de lejías de aceitunas verdes y/o negras reutilizadas Ia etapa (a) de acidificación es posterior a Ia etapa (b) de centrifugación. 5. Procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, donde las soluciones iniciales pueden ser concentradas antes de Ia etapa (c) de extracción. 6. Procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, donde Ia dilución del paso (d) se lleva a cabo mediante Ia adición de agua en una proporción de entre el 5% y el 30% en volumen con respecto al sobrenadante. 7. Procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, donde Ia acidificación se lleva a cabo con un ácido inorgánico seleccionado de Ia lista que comprende ácido fosfórico, sulfúrico, nítrico o clorhídrico. 8. Procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, donde Ia centrifugación y secado del sólido es a una temperatura entre 5O0C y 12O 0C. 9. Procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, donde el disolvente orgánico de extracción se selecciona de entre Ia lista que comprende etanol, metanol, acetato de etilo o cualquiera de sus combinaciones. 10. Extracto obtenible por el procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, con un contenido de ácidos triterpénicos entre un 70 % y un 85 % en peso del extracto total. 11. Extracto según Ia reivindicación 10, con un porcentaje de ácido maslínico superior al 50 % en peso con respecto al contenido de ácidos triterpénicos del extracto. 12. Uso del extracto según cualquiera de las reivindicaciones 10 u 11 , en las industrias de alimentación, cosmética o farmacéutica. |
ÁCIDOS TRITERPÉNICOS A PARTIR DE SOLUCIONES DEL
PROCESO DE ELABORACIÓN DE ACEITUNAS DE MESA
La presente invención se refiere a un procedimiento de obtención de un extracto con una elevada proporción de ácido triperpénicos, preferiblemente de ácido oleanólico y maslínico, a partir de las soluciones obtenidas en el proceso de elaboración de aceitunas de mesa.
ESTADO DE LA TÉCNICA ANTERIOR
La presencia de ácidos triterpénicos, en particular ácido oleanólico, en las hojas y frutos del olivo se conoce desde principios del siglo XX, cuando se descubrió Ia presencia y obtención a nivel de laboratorio de los ácidos oleanólico y maslínico, también conocido este último como cratególico, en pulpa de aceitunas, orujos del proceso de extracción del aceite de oliva y lejías del aderezo de aceitunas verdes (Bianchi European Journal of Lipid Science and Technoloαv. 2003, 105, 224-243).
Asimismo, se ha descrito como estos ácidos triterpénicos se encuentran sobre todo en el epicarpio de las aceitunas, detectándose en aceite de oliva virgen extra cantidades menores de 100 ppm; aunque superiores a 300 ppm en aceites de orujo. Recientemente, se ha descrito una acumulación significativa de estos ácidos en los aceites de alpeorujo debido a su enriquecimiento en Ia fase oleosa durante el almacenamiento de Ia pasta al aire durante meses.
De otra parte, se Ie ha atribuido desde hace años un gran número de propiedades beneficiosas para Ia salud humana a estos ácidos triterpénicos. Los ácidos oleanólico y maslínico pueden ejercer una acción hepatoprotectora y antimicrobiana. De hecho, se ha propuesto el ácido maslínico como aditivo en alimentación animal debido a que mejora Ia función hepática de truchas. Ambos ácidos, oleanólico y maslínico, poseen además efectos terapéuticos sobre dietas hiperlipidémicas debido a Ia inhibición de Ia absorción de colesterol. También, poseen actividad hipoglucémica, antiinflamatoria y anticancerígena. Esta actividad antitumoral es sobre Ia que más estudios científicos se han llevado a cabo recientemente ya que se ha demostrado, tanto in vitro como in vivo, mediante experimentación animal, que ambos ácidos, oleanólico y maslínico, pueden inhibir Ia profileración de células cancerosas y podrían, por tanto, ser útiles para Ia prevención de dicha enfermedad o incluso para su tratamiento.
Es por ello, que existen un gran número de publicaciones tanto para Ia obtención de estos ácidos triterpénicos, oleanólico y maslínico, y su empleo en Ia industria de alimentación, cosmética, famacéutica y otras. De hecho, se han publicado solicitudes de patente que describen Ia utilización de estas sustancias obtenidas a partir de productos de Ia oliva para su uso en el enriquecimiento de aceites, bebidas y alimentos funcionales (EP 1013752 A1 , ES 2 264 880 B1 , ES 2267 403 A1 ).
Además, se han publicado diferente métodos para Ia obtención de estos ácidos triterpénicos a partir de diversas fuentes relacionadas con el olivo y sus aceitunas. Así, se ha propuesto Ia obtención de ácido oleanólico y maslínico de los orujos y alpeorujos producidos durante el proceso de obtención de aceite de oliva (ES 2111 498 A1 , US 30171613 A1 ) y de Ia hoja del olivo (ES 2160 553 B1 , GR 911 00047, WO 2005 5075614 A1 ).
Como se ha indicado anteriormente, diversos autores han identificado oleanólico y maslínico en las lejías del proceso de elaboración de aceitunas verdes, y se describió como al acidificar estas soluciones con ácido sulfúrico se producía un precipitado rico en estos ácidos triterpénicos (Vázquez y Janer, Grasas y Aceites, 1969, 20, 133-137). Debido a Ia importancia de estos ácidos triterpénicos en diferentes campos de Ia técnica, existe Ia necesidad de obtener procedimientos alternativos para Ia obtención de dichos compuestos.
DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN
La presente invención proporciona un procedimiento para Ia obtención de extractos ricos en los ácidos triterpénicos, preferiblemente ácido maslínico y oleanólico, a partir de las distintas soluciones resultantes del proceso de elaboración de aceitunas de mesa. Estas soluciones serán las lejías alcalinas, producidas en un solo tratamiento o reutilizadas varias veces, y las aguas de lavado de Ia elaboración tanto de aceitunas verdes estilo español como negras oxidadas, junto con los precipitados formados en los fermentadores de aceitunas.
El procedimiento de Ia invención comprende diferentes etapas tales como centrifugación, acidificación, secado, extracción con solvente orgánico, evaporación y liofilización. El resultado del procedimiento consiste en un polvo blanquecino con un porcentaje del 70-85% en ácidos triterpénicos, enriquecido particularmente en ácido maslínico, y que puede ser empleado por Ia industria alimentaria, cosmética y farmacéutica, entre otras.
La presente invención se refiere a un procedimiento para Ia obtención de extractos muy ricos en ácidos triterpénicos, preferiblemente maslínico y oleanólico a partir de soluciones del aderezo de aceitunas. Se han identificado varias soluciones de estos procesos industriales como fuentes de una gran concentración en estos ácidos triterpénicos. Las lejías del procesamiento de aceitunas verdes estilo español poseen entre 800-1200 ppm y las de negras oxidadas unas 300-800 ppm; sin embargo, las soluciones con mayor cantidad de estas sustancias son las lejías reutilizadas tanto del proceso de elaboración de aceitunas verdes estilo español como de negras oxidadas. El contenido en estos ácidos triterpénicos puede ser superior a 10000 ppm, esto es superior a 10 g /I. De otra parte, otra fuente importante identificada de estas sustancias son las aguas de lavado tanto del proceso de verdes estilo español como negras oxidadas (300-700 ppm) y los precipitados que se producen durante los primeros meses en los fermentadores donde se procesan las aceitunas verdes estilo español (300-1500 ppm).
Todas estas soluciones son vertidos contaminantes, con pH alcalino, que representan un problema medioambiental para las industrias y, sin embargo, son una fuente importante de ácidos triterpénicos como maslínico y oleanólico.
Por tanto, un primer aspecto de Ia presente invención se refiere a un procedimiento de obtención de un extracto que contiene ácidos triterpénicos caracterizado porque se emplean soluciones del aderezo de aceitunas, que comprende las siguientes etapas: a. acidificación a pH inferior a 4 de Ia solución inicial; b. centrifugación y secado del sólido obtenido en Ia etapa (a); c. extracción de los ácidos triterpénicos del sólido obtenido en Ia etapa (b) con un solvente orgánico; d. centrifugación de Ia suspensión obtenida en (c) y dilución mediante Ia adición de agua; e. eliminación del solvente orgánico del sobrenadante obtenido en
Ia etapa (d) mediante evaporación; f. congelación y liofilización de Ia suspensión obtenida en Ia etapa (e) o secado de Ia suspensión obtenida en Ia etapa (e).
Por "soluciones inicial" ó "solución de aderezo de aceitunas" se refiere a las soluciones de hidróxido sódico (lejías) del proceso de elaboración de aceitunas de mesa, preferiblemente verdes y/o negras, con o sin reutilización, aguas de lavado de los procesos de elaboración de aceitunas verdes y/o negras, y precipitados formados en los fermentadores de aceitunas.
Por "ácidos triterpénicos" se entiende en Ia presente invención, sobre todo, a los ácidos maslínico y oleanólico.
Cuando Ia solución inicial son lejías de aceitunas verdes y/o negras reutilizadas, el procedimiento de Ia invención comprende las siguientes dos primeras etapas: a. centrifugación de Ia solución inicial; b. acidificación a pH inferior a 4 del sólido húmedo obtenido en Ia etapa (a). Las siguientes etapas, (c) a (f), son las descritas anteriormente.
En una realización preferida del procedimiento de Ia invención, Ia etapa de acidificación se lleva a cabo con un ácido inorgánico, como por ejemplo pero sin limitarse al ácido fosfórico, sulfúrico, nítrico o clorhídrico. Más preferentemente el pH en esta etapa es menor a 2.8.
Otra relajación preferida del procedimiento de obtención, comprende Ia centrifugación a 2000-6000 rpm, durante 5-15 minutos a 5-25 0 C.
En una realización preferida del procedimiento de Ia invención, las soluciones empleadas se concentran antes de Ia etapa de extracción. Se pueden concentrar estas soluciones previamente mediante tecnologías de evaporación, concentración por membranas o cualquier otro método conocido por un experto en Ia materia. Normalmente antes de Ia etapa de extracción, las soluciones tratadas se pueden someter a secado a temperatura de entre 50 0 C y 120 0 C durante un tiempo aproximado de entre 10 horas y 48 horas, preferentemente a 105 0 C durante 20 horas.
Otra realización preferida de Ia presente invención, comprende un disolvente orgánico de extracción seleccionado de Ia lista que comprende etanol, metanol, acetato de etilo o cualquiera de sus combinaciones. Preferentemente el disolvente orgánico es etanol y más preferiblemente se mantienen en contacto durante 5-60 minutos.
Después de Ia extracción con un disolvente orgánico se lleva a cabo otra centrifugación de Ia solución resultante, preferiblemente este proceso es a 2000-6000 rpm, durante 5-15 minutos a 5-25 0 C y se adiciona agua en una proporción del 5-30% en volumen al sobrenadante.
Posteriormente a Ia etapa de centrifugado se elimina el solvente orgánico del sobrenadante mediante evaporación, preferiblemente evaporación a vacío o cualquier otro sistema de eliminación de solvente orgánico de una mezcla con agua conocido por cualquier experto en Ia materia.
En una realización preferida del procedimiento de Ia invención, Ia etapa de congelación se lleva a cabo a una temperatura inferior a 5 0 C, preferiblemente a una temperatura de entre -2O 0 C y -6O 0 C, y posteriormente se liofiliza con Io que se obtiene un polvo blanquecino rico en los ácidos maslínico y oleanólico. De manera alternativa a Ia etapa de congelación, Ia suspensión acuosa puede secarse a temperatura de entre 5O 0 C y 12O 0 C o incluso concentrarse antes de llevar a cabo el proceso de secado. Mediante el procedimiento de Ia invención se consigue recuperar entre un 85-95% del contenido inicial de las soluciones en dichos ácidos triterpénicos.
Otro aspecto de Ia presente invención se refiere a un extracto con un alto contenido, entre un 70% y un 85% en peso del extracto total, en ácidos triterpénicos, más concretamente en ácidos maslínico y oleanólico. Más preferiblemente el extracto contiene un porcentaje de ácido maslínico superior al 50 %, más preferiblemente entre un 60% y un 80% en peso del contenido total de ácidos triterpénicos.
Otro aspecto de Ia presente invención se refiere al uso del extracto de Ia invención en las industrias de alimentación, cosmética, farmacéutica, entre otras, debido a su alto contenido en ácidos triterpénicos, en particular ácido maslínico.
A Io largo de Ia descripción y las reivindicaciones Ia palabra "comprende" y sus variantes no pretenden excluir otras características técnicas, aditivos, componentes o pasos. Para los expertos en Ia materia, otros objetos, ventajas y características de Ia invención se desprenderán en parte de Ia descripción y en parte de Ia práctica de Ia invención. Los siguientes ejemplos se proporcionan a modo de ilustración, y no se pretende que sean limitativos de Ia presente invención.
EJEMPLOS
Mediante el esquema siguiente se proponen las posibles etapas del procedimiento que se tendrán en cuenta para ilustrar el ejemplo. Esquema 1.- Esquema del proceso de obtención de un extracto rico en ácidos maslínico y oleanólico a partir de soluciones del aderezo de aceitunas. Lejías del proceso de aceitunas negras y verdes
I Aguas de lavado de aceitunas negras y verdes
Precipitados de termentadores de aceitunas verdes i i 2a Acidificación Reuso lejías 2b
3a Centrifugación Centrifugación 3b
5 Secado <- <- <- <- Acidificación 4 i
6 Extracción con solvente orgánico i
7 Centrifugación i 8 Adición de agua i
9 Eliminación de solvente orgánico
10 Congelar suspensión acuosa i
I 1 Liofilización i 12 Producto
Se partió de 1 litro de lejía reutilizada del proceso de elaboración de aceitunas negras oxidadas (2b) con un contenido inicial de ácido maslínico y oleanólico de 13,9 g. Se centrifugó (3b) a 3500 rpm durante 5 minutos a 2O 0 C y el sólido resultante se acidificó (4) con ácido fosfórico del 85 % hasta pH 2.8. A continuación, se secó (5) a 105 0 C durante 20 horas y se resuspendió (6) en 200 mi de etanol durante 10 minutos. La solución alcohólica se centrifugó (7) a 3500 rpm durante 5 minutos a 2O 0 C y se Ie añadieron 30 mi de agua (8) al sobrenadante, el cual se sometió a evaporación a vacío (9) hasta eliminación del solvente orgánico. La suspensión acuosa se congeló (10) a -3O 0 C y se liofilizó (11 ). Se obtuvieron 11.8 g de un polvo blanquecino (12) con un contenido del 85 % en ácidos maslínico y oleanólico, representando el contenido de ácido maslínico el 70 % del total de ácidos triterpénicos.