技术领域

本发明属于医药技术领域， 特别是涉及一种欤瑞塞尔合成方法。 背景技术

欤瑞塞尔（Torisel )是一种主要用于治疗进行性肾细胞癌， 也是第 一个治疗肾癌的靶向治疗药物， 而且是唯一上市的特异性抑制 mTOR激 酶的药物。 mTOR激酶是用于调节细胞增殖、 生长和细胞存活的重要蛋 白质。 在体外研究中发现， 欤瑞塞尔抑制 mTOR激酶后导致一定的血管 生长因子如血管内皮生长因子的水平下降， 进而阻止新生血管的发展， 结果导致癌细胞死亡。 目前其是唯一能够显著延长肾癌患者生存期的 药

1994年由 Jerauld, S.Skotnicki等首次报道了欤瑞塞尔的制备方法以 及生物活性（US5362718 ) ， 其合成路线如图 2所示。 该方法通过用 2,2- 甲氧基丙垸保护的 2,2-羟甲基丙酸和 2,4,6-三氯苯甲酰氯反应得到酸酐， 再与雷帕霉素 (Rapamycm)缩合， 经分离得到中间体 A-1 , 最后脱保护基 得到欤瑞塞尔， 但是该方法的缺点是 31和 42位羟基同时酯化的副产物 与产物的分离困难， 而总收率为 20%。 Shaw, Chia-Cheng等改进了其合 成路线， 其合成路线如图 3所示。 该方法是将雷帕霉素 31， 42位的羟基 用三甲基氯硅垸保护， 然后选择性脱 42位的保护基而得到中间体 B-1 , 再与上述的酸酐缩合得到中间体 B-2 , 最后脱保护基得到欤瑞塞尔 WO0123395;>。 虽然该方法能够将总收率提高到 47%， 但缺点是反应歩 骤多， 并且操作过程繁琐。 Warren, Chew等在 Shaw, Chia-Cheng等合成 路线的基础上改用苯硼酸保护 2,2-羟甲基丙酸， 最后用 2-甲基 -2,4-戊二 醇脱保护基得到欤瑞塞尔 （US2005033046) ， 其合成路线如图 4所示。 随后， Gu, jianxm等利用酶催化的雷帕霉素 42位羟基与垸基保护的 2,2- 羟甲基丙酸烯酯反应， 再脱保护基得到欤瑞塞尔 （US2005234086) ， 其 合成路线如图 5所示， 虽然该方法的收率高， 但是生产成本也高。 综上 所述， 已有文献提供的欤瑞塞尔合成方法存在收率低 、 反应歩骤多、 操 作过程繁琐以及生产成本高等缺点。

发明内容

为了解决上述问题，本发明的目的在于提供一 种操作过程相对简单、 成本较低且收率较高的欤瑞塞尔合成方法。

为了达到上述目的， 本发明提供的欤瑞塞尔合成方法包括按顺序进 行的下列歩骤：

1 ) 以 2,2-羟甲基丙酸和不同取代基的硼酸作为原料� � 将上述原料溶 于四氢呋喃中， 在室温下进行反应， 然后加入甲苯加热回流， 再加入环 己垸而得到中间体 Π:

其中 R表示氢原子、 一个至六个碳原子的垸基、 一个至六个碳原子 环垸基或取代的环垸基、 一个至六个碳原子的烯基、 一个至六个碳原子 的炔基、 苄基以及取代的苄基、 七至二十个碳原子的芳香环以及取代的 芳香环、 四至二十个碳原子芳香杂环以及取代的芳香杂 环； 2)将上述中间体 II溶于有机溶剂中， 然后依次加入碱和 2,4,6-三氯 苯甲酰氯， 在氮气保护和 -20~40°C的温度下反应 4-8 小时， 然后将反应 液冷却至 -10°C， 加入雷帕霉素和缚酸剂， 自然升温， 室温下反应过夜， 用硅胶柱层析分离而得到中间体 III：

III

其中 R与中间体 II中的 R结构相同；

3 ) 将上述中间体 III溶于有机溶剂中， 然后加入二醇， 在 -20~20°C 的温度下反应 8~14小时，脱溶，用硅胶柱层析进行分离而得� �欤瑞塞尔。

所述的歩骤 1；)中不同取代基的硼酸选自乙基硼酸、 丙基硼酸、 环己 基硼酸和苄基硼酸中的一种； 2,2-羟甲基丙酸和不同取代基的硼酸的摩尔 比为 1 :1。

所述的歩骤 2)中雷帕霉素、 中间体 II和 2,4,6-三氯苯甲酰氯的摩尔 比为 1 :1 ~1.5 _: 1~1.4； 有机溶剂选自甲苯、 苯、 二甲苯、 乙醚、 甲基叔丁 醚、 四氢呋喃、 二氯甲垸、 三氯甲垸、 四氯化碳、 1,2-二氯乙垸和乙酸乙 酯中的一种； 碱选自三乙胺、 Ν,Ν-二异丙基乙胺和 Ν,Ν-二甲基苯胺中的 一种； 缚酸剂选自吡啶、 DMAP、 4-吡咯垸基吡啶和 N-甲基咪唑中的一 种。

所述歩骤 3)中的二醇选自 1,2-,1,3-,1,4-,1,5-二醇以及各种 C _r C ₆ 垸基 取代的二醇中的一种； 中间体 III与二醇的摩尔比为 1 :1~10； 有机溶剂选 自甲苯、 苯、 二甲苯、 乙醚、 甲基叔丁醚、 四氢呋喃、 二氯甲垸、 三氯 甲垸、 四氯化碳、 1,2-二氯乙垸、 乙酸乙酯和丙酮中的一种。

本发明提供的欤瑞塞尔合成方法是通过两歩反 应而制成欤瑞塞尔， 总收率为 54.8% ,较首次报道的合成方法中 20%的总收率有了较大提高。 另外， 合成歩骤比 WO0123395和 US2005033046中公开的歩骤少， 并且 成本低于目前已报道文献方法的成本。

附图说明

图 1为本发明提供的欤瑞塞尔合成方法合成路线� �。

图 2为 US5362718中公开的欤瑞塞尔合成方法合成路线图 。

图 3为 WO0123395中公开的欤瑞塞尔合成方法合成路线图 。

图 4为 US2005033046中公开的欤瑞塞尔合成方法合成路线 图。 图 5为 US2005234086中公开的欤瑞塞尔合成方法合成路线 图。 具体实施方式

下面将通过实施例对本发明作进一歩描述， 这些描述不是对本发明 内容的进一歩的限定。 本领域的技术人员应理解， 对本发明的技术特征 所做的等同替换或相应的改进， 仍属于本发明的保护范围之内。

实施例 1:

1 ) 在 250mL 的单口瓶中分别加入 2,2-二羟甲基丙酸 13.36g, 0.098mol), 乙基硼酸（7.40g, 0.098mol)和 50mL四氢呋喃， 将反应液在 室温下搅拌 3小时， 然后加入 80mL甲苯， 加热回流 1小时。 将反应液 冷却至室温， 加入 80mL环己垸至有固体析出， 再加热至回流， 自然冷 却结晶。 过滤， 在 70-75°C下真空干燥至恒重， 得到 11.97g中间体 11-1， 收率为 71.0%。

II- 1

2 )在 1 OOmL的四口瓶中加入上述中间体 II- l(0.24g, 1.42mmol)、 20mL 二氯甲垸、 Ν,Ν-二异丙基乙胺 (0.28g, 2.18mmol)和 2,4,6-三氯苯甲酰氯 (0.32g, 1.31mmol), 氮气保护下， 在 14°C下搅拌 4小时。 然后将反应液 冷至 -10°C， 加入雷帕霉素（l.OOg, 1.09mmol)和 DMAP(0.27g, 2.18mmol), 升温至 14°C。反应 14小时后， 向反应液中加入 30mL水并充分搅拌， 然 后倒入分液漏斗中， 分离有机相和水相， 将有机相分别用 2N 的硫酸 ( 10mLx2)、 水 （10mL)、 5%碳酸氢钠水溶液 （10mL) 的饱和食盐水 ( lOmL) 进行洗涤， 无水硫酸镁干燥。 过滤， 脱溶， 硅胶柱层析分离， 得到 0.31g白色固体状中间体 111-1，收率为 74.8% (以反应的雷帕霉素计 算）。

III-l

3 ) 在 lOOmL 的单口瓶中依次加入上述中间体 III-l(0.31 _g , 0.287mmol)、 10mL四氢呋喃和 2-甲基 -2,4-戊二醇 (0.08g, 0.678mmol)，将 反应液在 14°C下搅拌过夜。反应 14小时后， 脱溶， 硅胶柱层析 (200~300 目， 洗脱剂为石油醚： 乙酸乙酯 =1 :1)分离， 得到 0.22g 白色固体状欤瑞 塞尔 ， 收率为 73.3% 。 MS:[M+Na] ⁺ 1052.6; ^J H NMR (CDC1 ₃ , 300MHz):4.70(m, 1H), 3.86(d, 2H), 3.81(d, 2H), 1.12(s, 3H)。

实施例 2:

1 ) 在 250mL 的单口瓶中分别加入 2,2-二羟甲基丙酸 13.36g, 0.098mol)、 环己基硼酸 （12.54g, 0.098mol) 和 50mL四氢呋喃， 将反应 液在室温下搅拌 3小时， 然后加入 80mL甲苯， 加热回流 1小时。 将反 应液冷却至室温， 加入 80mL环己垸至有固体析出， 再加热至回流， 自 然冷却结晶。 过滤， 在 70-75°C下真空干燥至恒重， 得到 12.28g中间体 Π-2, 收率 75.0%。

Π-2

2) 在 lOOmL的四口瓶中加入中间体 II-2(0.32g, 1.42mmol)、 20mL 二氯甲垸、 Ν,Ν-二异丙基乙胺 (0.28g, 2.18mmol)和 2,4,6-三氯苯甲酰氯 (0.32g, 1.31mmol), 氮气保护下， 在 14°C下搅拌 4小时。 然后将反应液 冷至 -10°C， 加入雷帕霉素（l.OOg, 1.09mmol)和 DMAP(0.27g, 2.18mmol), 升温至 14°C。反应 14小时后， 向反应液中加入 30mL水并充分搅拌， 然 后倒入分液漏斗中， 分离有机相和水相， 将有机相分别用 2N 的硫酸 ( 10mLx2)、 水 （10mL)、 5%碳酸氢钠水溶液 （10mL) 和饱和食盐水 ( lOmL) 进行洗涤， 无水硫酸镁干燥。 过滤， 脱溶， 硅胶柱层析分离， 得到 0.40g白色固体状中间体 111-2，收率为 65.6% (以反应的雷帕霉素计 算）。

ΠΙ-2

3 )在 lOOmL的单口瓶中依次加入上述中间体 III-2(0.45g, 0.40mmol)、 lOmL四氢呋喃和 2-甲基 -2,4-戊二醇 (2.25g, 2.0mmol), 反应液在 0°C下搅 拌过夜。 反应 14小时后， 脱溶， 硅胶柱层析分离， 得到 0.31g白色固体 状欤瑞塞尔， 收率为 76.3%。

实施例 3:

在 lOOmL的四口瓶中加入由上述实施例 1制备出的中间体 II-1 0.24& 1.42mmol)、 20mL二氯甲垸、 三乙胺 (0.22g, 2.18mmol)和 2,4,6-三氯苯甲 酰氯 (0.32g, 1.31mmol) , 氮气保护下， 在 14°C下搅拌 4小时。 然后将反 应液冷至 -10 °C， 加入雷帕霉素（l .OOg, 1.09mmol)和 DMAP(0.27g, 2.18mmol) , 升温至 14 °C。 反应 14小时后， 向反应液中加入 30mL水并 充分搅拌， 然后倒入分液漏斗中， 分离有机相和水相， 将有机相分别用 2N的硫酸 （10mLx2 ) 、 水 （10mL) 、 5%碳酸氢钠水溶液 （10mL) 、 饱和食盐水 （10mL) 进行洗涤， 无水硫酸镁干燥。 过滤， 脱溶， 硅胶柱 层析分离， 得到 0.26g白色固体状中间体 111-1， 收率为 65.3% (以反应的 雷帕霉素计算） 。

实施例 4:

在 lOOmL 的四口瓶中加入由上述实施例 1 制备出的中间体 II-l(0.24g„ 1.42mmol)、 20mL 二氯甲垸、 Ν,Ν-二异丙基乙胺（0.28g, 2.18mmol)和 2,4,6-三氯苯甲酰氯 (0.32g, 1.31mmol)， 氮气保护下， 在 14 °C下搅拌 4 小时。 然后将反应液冷至 -10 °C， 加入雷帕霉素（l .OOg, 1.09mmol)和 N-甲基咪唑 (0.18g, 2.18mmol)， 升温至 14°C。 反应 14小时 后， 向反应液中加入 30mL水并充分搅拌， 然后倒入分液漏斗中， 分离 有机相和水相， 将有机相分别用 2N的硫酸 （10mLx2 ) 、 水 （10mL) 、 5%碳酸氢钠水溶液 （10mL) 及饱和食盐水 （10mL) 进行洗涤， 无水硫 酸镁干燥。 过滤， 脱溶， 硅胶柱层析分离， 得到 0.25g 白色固体状中间 体 111-1， 收率为 51.3% (以反应的雷帕霉素计算） 。

实施例 5:

在 lOOmL的四口瓶中加入由上述实施例 1制备出的中间体 II-1 0.24& 1.42mmol)、20mL二氯甲垸、 Ν,Ν-二异丙基乙胺 (0.28g, 2.18mmol)和 2,4,6- 三氯苯甲酰氯 0.32g, 1.31mmol), 氮气保护下， 在 14°C下搅拌 4小时。 然后将反应液冷至 -10°C，加入雷帕霉素 (l .OOg, 1.09mmol)和 DMAP(0.27 _g: 2.18mmoi;>。 反应液在 -10°C下反应 14小时后， 向反应液中加入 30mL水 并充分搅拌， 然后倒入分液漏斗中， 分离有机相和水相， 将有机相分别 用 2N的硫酸 （10mLx2 ) 、 水 （10mL) 、 5%碳酸氢钠水溶液 （10mL) 和饱和食盐水 （10mL)进行洗涤， 无水硫酸镁干燥。 过滤， 脱溶， 硅胶 柱层析分离， 得到 0. 29g白色固体状中间体 111-1， 收率为 73.2% (以反 应的雷帕霉素计算） 。

实施例 6··

在 lOOmL 的单口瓶中依次加入由上述实施例 1 制备出的中间体 III-l(0.31g, 0.287mmol)、 lOmL 四氢呋喃和 2-甲基 -2,4-戊二醇（1.55g, 1.435mmol), 反应液在 14°C下搅拌过夜。 反应 8小时后， 脱溶， 硅胶柱 层析分离， 得到 0.23g白色固体状欤瑞塞尔， 收率为 76.7%。

实施例 7:

在 lOOmL 的单口瓶中依次加入由上述实施例 1 制备出的中间体 III-l(0.31g, 0.287mmol)、 lOmL 乙醚和 2-甲基 -2,4-戊二醇（1.55g, 1.435mmol), 反应液在 14°C下搅拌过夜。 反应 8小时后， 脱溶， 硅胶柱 层析分离， 得到 0.21g白色固体状欤瑞塞尔， 收率为 70.0%。