PROCéDé DE TRAITEMENT DES œUFS AU MOYEN DE L ¹ EUGENOL ₁

L'ISOEUGéNOL OU L ¹ HUILE DE GIROFLE

L'invention concerne un procédé de traitement des œufs par application auxdits œufs d'une composition traitante à base d'eugénol, d'isoeugénol et/ou d'huile de girofle.

Il importe que les œufs ne perdent pas leurs qualités nutritives et conservent un aspect engageant lors de leur mise sur le marché. Les phénomènes susceptibles d'altérer l'aspect et les propriétés des œufs sont notamment la perte de poids au cours du stockage. Il a été envisagé d'appliquer un enrobage sur les œufs afin de réduire leur perte de poids et de maintenir leur qualité interne, mesurée par plusieurs indices tels que la hauteur de la chambre à air, les paramètres d'Haugh, l'index de jaune et le pH du blanc de l'œuf. Ainsi, Wong et al. {Poultry Science, 75, 417-422, 1996) ont observé que les œufs de poule revêtus de film à base de zéine permettaient de limiter la perte d'eau et de maintenir les valeurs des paramètres d'Haugh pendant la période de stockage, en comparaison avec les œufs traités avec des solutions contenant de l'albumine d'oeuf, un isolât de protéine de soja, du gluten de blé et une huile minérale. Le revêtement améliorait aussi la résistance de la coquille à la cassure en générant une barrière protectrice. De même, Alleoni et al., Sci. agric. (Piracicaba, Braz.), vol. 61 n°3, Piracicaba May/June 2004 ont évalué ces paramètres dans le cas d'un revêtement à base de lactosérum.

Ainsi, la FDA préconise, par exemple, l'utilisation d'huiles minérales pour le traitement des œufs. De la même façon, la Food and Agriculture Organisation of the United Nations recommande notamment de recouvrir les œufs avec de l'huile afin que le revêtement remplisse les pores et réduise l'évaporation. L'application peut être effectuée en trempant les œufs dans l'huile. Des huiles minérales sans odeur, sans couleur et de faible viscosité peuvent être utilisées. Si celles-ci ne sont pas disponibles, d'autres huiles minérales légères ou tout autre huile de cuisine peut être utilisée à cet effet.

Par ailleurs, il est tout particulièrement important protéger l'intérieur de l'œuf de la contamination éventuelle par des bactéries, et notamment les salmonelies. Depuis de nombreuses années, Salmonella constitue la cause majeure des infections du tractus digestif humain, liées à la consommation de denrées alimentaires d'origine animale. Parmi ces denrées, les produits de viande de volaille et, en particulier, les œufs sont fortement impliqués. La contamination de l'homme par Salmonella Typhi est la cause de la fièvre typhoïde, maladie infectieuse aiguë. Néanmoins, le sérotype Entéritidis est

actuellement le plus répandu dans Ie secteur avicole. Une fois qu'un élevage a été contaminé, il est très difficile d'éliminer cette contamination par les mesures hygiéniques classiques. Le mécanisme de transmission dans les œufs n'est toujours pas complètement élucidé, ce qui constitue un obstacle majeur pour le développement de nouvelles mesures de prévention et de traitement (Van Immerseel et al., Ann. Méd. Vét. 2005, 149, 34-48). Plusieurs pistes ont néanmoins été explorées. Ainsi, après la ponte, il est possible que les œufs soient contaminés par S. Entérinais à travers la coquille de l'œuf quand l'œuf est contaminé par des matières fécales (Gast et al., Avian Dis., 1990, 34, 438-446). Etant donné que la grande majorité des cas humains provient d'une consommation d'œufs contaminés, il est impératif de prendre toutes les mesures visant une réduction des taux de contamination des œufs. Cependant,- les moyens de lutte sont limités. La décontamination des œufs à l'aide de désinfectants, qui vise à réduire la contamination de la surface des œufs, est toutefois dans la Communauté Européenne. A ce jour, la principale mesure consiste à refroidir les œufs et maintenir une chaîne du froid pour éviter la multiplication des Salmonelles éventuellement présentes dans les œufs. Il est donc particulièrement désirable de mettre à disposition un procédé de traitement permettant d'éviter la contamination des œufs par les salmonelles ou autres bactéries.

Il existe également des présomptions selon lesquelles les œufs pourraient être infectés par d'autres contaminants, tels que les virus et notamment la grippe aviaire. La grippe aviaire, ou grippe du poulet, est une infection due à un virus de la famille des Orthomyxoviridae qui comprend plusieurs genres (ou types) dont Influenzavirus A. Celui-ci est divisé en sous-types parmi lesquels les sous-types H5 et H7.

Cette infection peut toucher presque toutes les espèces d'oiseaux, sauvages ou domestiques. Elle peut être fortement contagieuse surtout chez les poulets et les dindes, et est susceptible d'entraîner une mortalité élevée dans ces espèces.

Grippe saisonnière

Les souches faiblement pathogènes de ce virus peuvent muter génétiquement en se propageant d'un élevage à l'autre, en particulier si les barrières sanitaires entre élevages sont insuffisantes.

A partir d'une certaine virulence, ces souches provoquent une maladie appelée l'influenza aviaire dont une des plus pathogènes est celle provoquée par le virus H5N1, susceptible d'infecter d'autres espèces animales comme le porc ou d'autres

mammifères. On parle d'épizootie de grippe aviaire lorsque la maladie affecte brutalement un grand nombre d'animaux à la fois dans une région donnée.

Les risques liés au virus H5N1 Sur les 15 sous-types de virus grippal aviaire, le H5N1 est le plus inquiétant pour plusieurs raisons. Il mute rapidement et il a une propension avérée à acquérir les gènes des virus infectant d'autres espèces.

Les oiseaux qui survivent à cette infection, excrètent le virus pendant dix jours au moins, par voie orale et dans les fèces, ce qui facilite sa propagation sur les marchés de volailles vivantes et par les oiseaux migrateurs.

Sur le plan animal, les mesures recommandées consistent, dans un premier temps, en une mise en quarantaine des foyers animaux touchés par le virus aviaire. Ensuite, il faut procéder à leur abattage, ainsi que celui des animaux potentiellement exposés au virus. A titre de précaution humaine, il est recommandé de ne pas consommer de volaille ou de produits à base d'œufs insuffisamment cuits et de suivre des règles d'hygiène générales.

Néanmoins, il n'existe à ce jour aucun moyen de traitement des œufs permettant d'éviter leur contamination éventuelle par le virus. Par ailleurs, pour la décontamination particulière de denrées alimentaires, il est important que ces compositions soient non toxiques et acceptables sur le plan alimentaire.

L'eugénol est un terpène issu de l'huile de girofle. L'utilisation d'une composition contenant de l'eugénol pour Iβ traitement de fruits et légumes après récolte en vue de prolonger leur durée de conservation a été décrite dans la demande FR 98 08 995. Le procédé décrit comprend l'application de ladite composition sur les fruits et légumes.

Par ailleurs, un procédé anti-germinatif de pommes de terre utilisant l'eugénol a été décrit dans la demande FR 98 15 305. Le procédé comprend l'application par immersion ou douchage de la composition ou l'application par thermonébulisation aux pommes de terre.

Néanmoins, son utilisation pour la protection des œufs n'a été, à ce jour, ni décrite ni suggérée.

Les présents inventeurs ont maintenant découvert, et c'est un des objets de la présente invention, que l'eugénol, l'isoeugénol ou l'huile de girofle présentait, de façon tout à fait inattendue, une activité permettant d'améliorer la protection des œufs. En

effet, ils ont démontré que des concentrations mêmes très faibles d'eugénol permettent d'améliorer les enrobages habituellement utilisés pour les oeufs. D'autre part, ils ont découvert que l'eugénol présente une activité bactéricide tout à fait intéressante pour la protection des œufs. Par ailleurs, l'eugénol étant un produit d'origine naturelle, il convient tout particulièrement au traitement de denrées alimentaires.

Selon un premier objet, la présente invention concerne donc un procédé de traitement d'œufs comprenant l'application sur la coquille de l'œuf d'une composition comprenant de l'eugénol, de l'isoeugénol ou de l'huile de girofle.

Ledit procédé peut être mis en oeuvre pour réduire la perte de poids des oeufs, en tant que traitement anti-microbien, notamment pour la protection contre les Salmonelles, ou en tant que traitement anti-viral, par exemple pour empêcher la contamination par la grippe aviaire.

Selon un premier aspect, le procédé de traitement est mis en œuvre au moyen d'une composition traitante dite de cirage à base de cire, graisse ou huile comprenant de l'eugénol, de l'isoeugénol ou de l'huile de girofle.

Ladite cire, graisse ou huile peut être choisie parmi toute cire ou huile habituellement utilisée dans l'agroalimentaire, pour l'enrobage des œufs et peut être notamment choisie parmi :

- les huiles minérales, notamment sous forme d'émulsion, par exemple les émulsions d'huile minérale à environ 20% dans 70% d'eau, ionique (par exemple en présence d'agents tels que l'oléate de morpholine ou d'alcanolamine, à hauteur de 5 à 10%, de préférence 8%, et de lauryl sulfate de sodium à hauteur de 1 à 5%, de préférence 2%), ou non ionique (en dispersant à l'aide de Tween 80 et/ou Span 80, à hauteur de 5 à 20%, par exemple à 10%) ;

- les huiles végétales, notamment sous forme d'émulsion, toute huile alimentaire ou zéine, protéine de soja. Les émulsions peuvent contenir des émulsifiants soit anioniques (de type lauryl sulfate de sodium) ou non ioniques (acides gras éthoxylés, alcools gras éthoxylés, lécithine déhuilée naturelle, sucro ester, Tween, Span).

- les cires végétales (de carnauba, de candelilla), ou des agents d'enrobage tel que la lécithine, la zéine, ou les protéines de soja, notamment sous forme d'émulsion. Les émulsions peuvent contenir des émulsifiants soit anioniques (de

type lauryl sulfate de sodium) ou non ioniques (acides gras éthoxylés, alcools gras éthoxylés, lécithine déhuilée naturelle, sucro ester, Tween, Span). Tous les pourcentages et rapports donnés s'entendent en poids par rapport à la composition finale. Généralement, la composition traitante à base de cire, graisse ou huile comprenant de Feugénol, de l'isoeugénol ou de l'huile de girofle comprend :

- de 10 à 95%, de préférence de 15 à 80% de cire, graisse ou huile, de préférence une huile végétale ;

- de 0,1 à 40% d'eugénol, de l'isoeugénol ou de l'huile de girofle ; - de 0 à 40% d'agent(s) de formulation

II est particulièrement avantageux d'utiliser la composition diluée dans l'eau, par exemple l'eau adoucie. Généralement, la composition est diluée dans un rapport de 1 à 2 à 1 à 3 dans l'eau, soit une dilution de 1/3 à 1/4.

La composition diluée contient alors : - de 2,5% à 20% de cire, graisse ou huile, de préférence une huile végétale ;

- de 0,025% à 10% d'eugénol, de l'isoeugénol ou de l'huile de girofle ;

- de 0 à 10% d'agent(s) de formulation dans l'eau.

Lesdits agents de formulation sont de préférence des émulsifiants, préférentiellement non ioniques, tels que Tween, par exemple Tween 80, ou dérivés du cocoate tel que le cocoate de glycérol.

Une composition diluée préférée contient :

- environ 16% de cire de camauba ou de candelilla ;

- environ 4% de lécithine ; - environ 4% de Tween 80 ;

- environ 1% d'eugénol ;

Ladite cire, graisse ou huile peut être appliquée par tout moyen connu. Notamment, la composition selon l'invention peut être appliquée par aspersion, immersion. Ladite composition diluée peut être mise en œuvre notamment lors du lavage des œufs, notamment par trempage, aspersion ou immersion.

Ladite cire, graisse ou huile et/ou solution peut contenir d'autres agents ou additifs habituellement utilisés. Il peut s'agir notamment d'agents de formulation tels que les agents réduisant l'évaporation du principe actif et les tensioactifs ou émulsifiants, etc.

Dans ce qui précède et ce qui suit, les pourcentages sont en poids/volume par rapport au volume total de la composition.

Selon un deuxième aspect, le procédé peut être mis en œuvre par lavage avec une composition contenant l'eugénol, isoeugénol ou huile de girofle. La dite composition est alors une solution dite de lavage, qui peut être non ionique ou anionique. Généralement, ladite solution de lavage contient 5 à 20% d'eugénol, 2 à 10 de savon, dilués dans l'eau. A titre de savon, on entend un savon ionique tel que du type laurylsulfate de sodium, ou non ionique du type alcool ou acide gras éthoxylé, à différents niveaux d'éthoxylation. Le procédé par lavage est particulièrement avantageux pour la désinfection de la coquille de l'oeuf.

Selon un troisième aspect, le procédé selon l'invention comprend l'étape de lavage suivie de l'étape de cirage selon les deux aspects précédemment discutés. Cette alternative est particulièrement avantageuse dans la mesure où la première étape au moyen de la solution dite de cirage permet la désinfection de la coquille tandis que la seconde étape consistant à l'application d'une composition dite de cirage à base de cire, graisse ou huile comprenant de l'eugénol, de l'isoeugénol ou de l'huile de girofle permet d'éviter la réinfection de l'œuf en maintenant l'effet bactéricide grâce à l'effet anti-transpirant de la cire.

Il est possible entre les deux étapes de rincer les oeufs afin d'éliminer les résidus de lavage.

La formulation de la composition traitante dépend de son mode d'application.

Les agents réduisant l'évaporation du principe actif sont connus dans la technique et peuvent être notamment choisis parmi les polyterpènes dispersables dans l'eau, les esters de glycérol de la résine de pin, les gommes laques, les lécithines, les huiles sicatives, l'alcool polyvinylique, la polyvinyle pyrrolidone, les polyacrylates de métaux alcalins, la gomme arabique. Les tensioactifs ou émulsifiants variés connus en soi.

Selon la présente invention, on entend par "émulsifiant" tout type d'agent habituellement utilisé à cet effet, tels que les alcools gras éthoxylés, les acides gras éthoxylés, les alkylphénols éthoxylés ou tout autre produit non ionique.

Les tensioactifs préférablement utilisés dans le cadre de l'invention sont des tensioactifs anioniques ou non ioniques.

Des exemples de tensioactifs non ioniques utilisables selon l'invention sont notamment :

- le produit de condensation d'un alcool gras aliphatique, de préférence en C ₈ -C ₂₂ , avec un oxyde d'alkylène en C ₂ -C ₃ . L'oxyde d'alkylène en C ₂ -C ₃ peut être l'oxyde d'éthylène, l'oxyde de propylène, ou bien un mélange d'oxyde d'éthylène et d'oxyde de propylène dans des proportions quelconques. Un exemple de tels tensioactifs est le produit de condensation de l'alcool laurylique (ou alcool n-dodécyclique) avec 30 moles d'oxyde d'éthylène;

- le produit de condensation d'un alkylphénol dans lequel la chaîne alkyle est en C ₈ -C ₂₂ avec un oxyde d'alkylène en C ₂ -C ₃ . Là encore, les produits de condensation avec l'oxyde d'éthylène, l'oxyde de propylène ou bien un mélange d'oxyde d'éthylène et l'oxyde de propylène dans des proportions quelconques sont également avantageux. A titre d'exemple de tels tensioactifs, on peut citer le produit de condensation du n- nonylphénol avec 10 moles d'oxyde d'éthylène; - le produit de condensation d'un acide gras de préférence en Ce-C ₂₂ avec un oxyde d'alkylène en C ₂ -C ₃ , par exemple l'oxyde d'éthylène ou l'oxyde de propylène ou un mélange d'oxyde d'éthylène et d'oxyde de propylène dans des proportions quelconques. Ces produits de condensation présentent une chaîne alkoxylée au niveau de la fonction hydroxyle du groupe carboxylique. Des tensioactifs préférés de ce groupe sont les produits de condensation obtenus à partir de l'acide ricinoléique avec 10 moles d'oxyde d'éthylène.

Des exemples de tensioactifs anioniques utilisables selon l'invention sont notamment :

- les sels hydrosolubles d'alkylsulfates à longue chaîne, et notamment les sels hydrosolubles de (C ₈ -C ₂₄ )alkylsufates, tels que les laurylsulfates de métaux alcalins et plus particulièrement le laurylsulfate de sodium; et

- les sels hydrosolubles d'alkylarylsulfonates et notamment les sels hydrosolubles de (C8-C24)alkyl-(C6-Cio)arylsulfonates, tels que les dodécyl-benzènesulfonates de métaux alcalins et plus particulièrement le dodécyl-benzènesulfonate de sodium. L'invention n'est cependant pas limitée à l'utilisation de ces tensioactifs particuliers.

Les solvants pouvant être utilisés dans la composition traitante sont notamment choisis parmi les alcools aliphatiques en C ₁ -C ₁₂ , les glycols et les esters alkyliques d'acides carboxyliques.

Plus précisément, les glycols désignent, dans le cadre de l'invention, les alkylèneglycols et les polyalkylèneglycols.

On entend par alkylèneglycol les alcools dihydroxylés dérivés d'hydrocarbures aliphatiques par remplacement de deux atomes d'hydrogène avec deux groupes hydroxyle. On préfère les (C ₂ -C ₆ ) alkylèneglycol tels que l'éthylèneglycol et le propylèneglycol. On entend par polyalkylèneglycol, les composés de formule

HO-(CpH _2p O) _n -H où p et n sont des entiers compris entre 2 et 6.

A titre d'exemple, on peut citer le dipropylèneglycol.

Selon l'invention, le groupe C _p H ₂ pO est linéaire ou ramifié. Le polyalkylèneglycol préféré selon l'invention est le dipropylèneglycol.

Les esters alkyliques d'acides carboxyliques préférés sont les esters d'alkyle en (Ci-C ₆ ) d'acide (Ci-C ₆ )alcanoïque tel que l'acétate de butyle.

Lorsque la composition traitante comprend un sel acceptable sur le plan alimentaire, celui-ci peut être introduit dans la composition lors de sa préparation sous forme de sel ou sous forme neutre. Dans cette dernière hypothèse, le sel est formé in situ par addition d'une base appropriée, telle qu'un hydroxyde de métal alcalin (soude ou potasse).

La quantité de la solution selon l'invention devant être appliquée dépend essentiellement de la méthode d'application sélectionnée. Plus généralement, on ajuste la quantité appliquée de principe actif en fonction de la durée de stockage.

Les compositions traitantes sont préparées de façon conventionnelle en soi par simple mélange de leurs constituants, éventuellement sous agitation.

Les compositions selon l'invention doivent être appliquées une ou plusieurs fois. Selon un aspect avantageux, un traitement est effectué juste après la ponte. La composition peut être notamment appliquée par aspersion ou immersion.

Avantageusement, la composition est appliquée à température ambiante, mais elle peut également être appliquée à chaud, à température comprise entre 40 et 6O ⁰ C.

La composition traitante est préparée de façon conventionnelle en soi par simple mélange de ses constituants.

Lorsque la composition traitante comprend un sel acceptable sur le plan alimentaire, celui-ci peut être introduit dans la composition, lors de sa préparation, sous forme de sel ou bien sous forme neutre ; dans cette dernière hypothèse, le sel est formé in situ par addition d'une base appropriée telle qu'un hydroxyde de métal alcalin (soude ou potasse). Les sels acceptables sur le plan alimentaire peuvent être

notamment les sels de métaux alcalins tels que les sels de sodium, les sels de lithium ou les sels de potassium.

En général, on applique environ 50 g et 5 kg en équivalent de composition solide par tonne d'oeufs traités.

Plus généralement, on ajuste la quantité appliquée de composition en fonction de la durée de stockage. L'eugénol et l'isoeugénol étant des produits odorants, il est préférable qu'à l'issue du stockage, la majorité du principe actif se soit évaporée afin de ne pas altérer la valeur commerciale des oeufs lors de leur mise sur le marché. La quantité de principe actif devant être appliquée dépend donc de la volatilité du principe actif utilisé et de la durée de stockage.

L'application peut être continue ou intermittente au cours de la durée du stockage.

Les exemples suivants sont donnés à titre illustratif et non limitatif de la présente invention.

EXEMPLE 1

La formulation suivante (avant dilution) a été utilisée à titre de composition de cirage :

Huile de carnauba : 16%

Lécithine : 4%

Tween 80 4%

Eugénol 0,5%

Monopropylène glycol 4%

Cocoate de glycérol 4,5%

Cette solution peut être diluée dans l'eau dans un rapport massique de 1à 3, soit 1/4.

EXEMPLE 2

La formulation suivante (avant dilution) a été utilisée à titre de composition de cirage :

Huile végétale : 90%

Acide oléique éthoxylé : 5% Eugénol 5%

EXEMPLE 3

Formulation avec l'huile minérale : Huile minérale blanche 80% Eugénol 5%

Emulsifiant non ionique 15%

EXEMPLE 4

Résultat antibactérien in vitro avec l'eugénol :

L'eugénol au cours de tests in vitro a permis d'abaisser le taux de contamination par des salmonelles de 92%, par rapport au témoin non traité.

EXEMPLE 5

Résultat perte de poids avec compositions des exemples 1, 2 et 3, après 15 jours de stockage : - à température ambiante, un oeuf perd en moyenne 3,7% de son poids initial ;

- un œuf enrobé d'une composition identique à la composition décrite dans l'exemple 1 perd 2,6% de son poids initial, l'enrobage étant appliqué à la dose de 1 kg de composition par tonne d'oeufs ;

- un œuf enrobé d'une composition identique à la composition décrite dans l'exemple 2 perd 0,4% de son poids initial, l'enrobage étant appliqué à la dose de 200 g de composition par tonne d'œufs ;

- un œuf enrobé d'une composition identique à la composition décrite dans l'exemple 3 perd 0% de son poids initial, l'enrobage étant appliqué à la dose de 200 g de composition par tonne d'œufs.