卓忠浩 (中国上海市金都路4258号, Shanghai 8, 201108, CN)
TANG, Zhijun (No. 4258, Jindu Road, Shanghai 8, 201108, CN)
唐志军 (中国上海市金都路4258号, Shanghai 8, 201108, CN)
XU, Tianhui (No. 4258, Jindu Road, Shanghai 8, 201108, CN)
许天惠 (中国上海市金都路4258号, Shanghai 8, 201108, CN)
上海天伟生物制药有限公司 (中国上海市金都路4258号, Shanghai 8, 201108, CN)
ZHUO, Zhonghao (No. 4258, Jindu Road, Shanghai 8, 201108, CN)
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| 权 利 要 求 1.一种如式 1所示化合物的纯化方法， 其特征在于， 所述的方法包括步骤: ( 1 ) 将化合物 1的粗品上样至大孔吸附树脂； ( 2 )用水溶液、有机溶剂、或有机溶剂与水的混合溶液洗涤大孔吸附树脂; ( 3 ) 用水溶液、 有机溶剂、 或有机溶剂与水的混合溶液进行洗脱， 得到纯 化的如式 1所 2.如权利要求 1所述的纯化方法， 其特征在于， 所述的大孔吸附树脂选 自由苯乙烯与二乙烯苯聚合而成的非极性的芳香吸附树脂； 或具有甲基丙烯 酸酯单元结构的中等极性的甲基丙烯酸吸附树脂。 3.如权利要求 2所述的纯化方法， 其特征在于， 所述的大孔吸附树脂选 自下述树月旨的一种或一种以上： XAD- 1、 XAD- 2、 XAD- 3、 XAD- 4、 XAD- 5、 XAD- 16、 XAD- 16HP ; 或下述树月旨的一种或一种以上： HP- 10、 HP- 20、 HP- 20s s、 HP- 21、 HP - 30、 HP - 40、 HP - 50、 SP - 825、 SP - 850、 SP - 70、 SP - 700、 SP-207 ; 或下述 树月旨的一种或一种以上： XAD- 6、 XAD- 7、 XAD- 7HP、 XAD- 8 ; 或是 HP- 2MG。 4.如权利要求 1所述的纯化方法，其特征在于，所述有机溶剂选自 C1-C4 醇、 C1-C4酮、 乙腈或四氢呋喃。 5. 如权利要求 4所述的纯化方法， 其特征在于， 所述 C1-C4醇选自下 述的一种或一种以上： 甲醇、 乙醇、 丙醇、 丁醇； 所述 C1-C4酮选自下述的 一种或一种以上： 丙酮、 丁酮。 6. 如权利要求 1 所述的纯化方法， 其特征在于， 所述水溶液、 有机溶 剂、 或有机溶剂与水的混合溶液 pH 7。 7.如权利要求 1 所述的纯化方法， 其特征在于， 步骤 （3) 中使用水溶 液、 有机溶剂、 或有机溶剂与水的混合溶液进行洗脱时有机溶剂浓度（v/v%) 由低到高分梯度进行洗脱。 8. 如权利要求 1一 7任一所述的纯化方法， 其特征在于， 所述步骤 （3) 后还包括步骤： (4) 将纯化的如式 1 所示化合物进行结晶得到纯度大于 99%的如式 1 所示化合物。 9.一种如权利要求 8所述的纯化方法得到的纯度大于 99%的如式 1所示 化合物。 10.一种如权利要求 9所述的纯度大于 99%的如式 1所示化合物的晶体， 其 X-射线粉末衍射（XRPD)图上在下述 2 Θ 衍射角有特征峰： 2.940 ±0.2° ， 5.061±0.2α ， 5.880±0.2α 禾口 8.960 ± 0.2 α 。 11.如权利要求 10所述的纯度大于 99%的如式 1所示化合物的晶体，其 X-射线粉末衍射（XRPD) 图上在下述 2 Θ 衍射角还有特征峰： 6.661±0.2° ， 10· 299±0· 2° 和 17· 900±0· 2° 。 12. 如权利要求 10所述的纯度大于 99%的如式 1所示化合物的晶体 其特征在于， 所述的化合物晶体具有如图 5所示的红外光谱图。 13. 如权利要求 10所述的纯度大于 99%的如式 1所示化合物的晶体 其特征在于， 所述化合物晶体的差示扫描量热法图 （DSC) 上 140-146°C有 大吸热峰。 |
技术领域
本发明涉及有机化学领域， 尤其涉及一种如式 1所示的氮杂环六肽或其 盐的纯化方法。 背景技术
由于侵入性医疗程序和广谱抗生素的广泛使用 ， 以及癌症和器官移植患 者的化疗， 恶性血液病， 和艾滋病所导致的免疫缺陷的患者数量的急剧 增加， 使得严重和威胁生命的真菌感染在过去的几十 年显著增加。 由于毒性， 药物 相互作用和耐受性使为数不多的抗菌药的使用 受到限制。
1974年， 人们发现了棘球白素类的化合物具有良好的抗 菌活性。 其作用 机理为： 通过阻滞病原真菌 e - (i，3) -D-葡聚糖的合成， 从而阻碍病原真菌 的细胞壁的合成， 起到抗真菌效果。 直至 2001 年， 卡泊芬净正式得到美国 FDA 的批准上市， 人们对抗真菌的药物的研究得到了突破性的进 展。 卡泊芬 净是一个作用位点独特， 广谱且低毒的药物， 其最初由默克公司作为广谱抗 真菌 /抗肺囊虫病药物开发而得， 化学结构如式 1所示。
1994年，欧洲专利 EP0620232公开了以棘白菌素 B。为原料的卡泊芬净的 合成和纯化方法。 随后美国专利 US5552521继续公开了改进了的卡泊芬净合 成纯化方法。 两篇专利报道的有关中间体和纯品的纯化方法 均采用 C 18硅胶 制备柱进行柱层析分离纯化， 收集液采用冷冻干燥的方法， 但是， 在中间体 和成品的纯化和干燥过程中采用 C 18硅胶柱和冷冻干燥， 不仅使得工艺本身 的操作难度增大， 能耗和对设备要求也都非常高， 而且对设备的损坏非常严 重， 并无法规模化生产。
因此， 本领域迫切需要提供一种新的如式 1所示的氮杂环六肽或其盐的 纯化方法。 发明内容
本发明旨在提供一种新的如式 1所示的氮杂环六肽或其盐的纯化方法。 在本发明的第一方面， 提供了一种如式 1 所示化合物的纯化方法， 所述的 方法包括步骤：
(1) 将化合物 1的粗品上样至大孔吸附树脂；
(2)用水溶液、有机溶剂、或有机溶剂与水的混 合溶液洗涤大孔吸附树脂;
(3) 用水溶液、 有机溶剂、 或有机溶剂与水的混合溶液进行洗脱， 得到纯 化的如式 1所
所述的大孔吸附树脂选自由苯乙烯与二乙烯苯 聚合而成的非极性的芳 香吸附树脂； 或具有甲基丙烯酸酯单元结构的中等极性的甲 基丙烯酸吸附树 月旨； 较佳地， 所述的大孔吸附树脂选自下述树脂的一种或一 种以上： XAD-1、 XAD- 2、 XAD- 3、 XAD- 4、 XAD- 5、 XAD- 16、 XAD-16HP; 或下述树月旨的一种或一 种以上： HP - 10、 HP - 20、 HP-20ss, HP - 21、 HP - 30、 HP - 40、 HP - 50、 SP-825, SP- 850、 SP- 70、 SP- 700、 SP- 207; 或下述树脂的一种或一种以上： XAD- 6、 XAD-7、 XAD-7HP, XAD - 8; 或是 HP - 2MG。
所述有机溶剂选自 C1-C4醇、 C1-C4酮、 乙腈或四氢呋喃； 较佳地， 所 述 C1-C4醇选自下述的一种或一种以上： 甲醇、乙醇、丙醇、丁醇；所述 C1-C4 酮选自下述的一种或一种以上： 丙酮、 丁酮。
所述水溶液、 有机溶剂、 或有机溶剂与水的混合溶液 pH 7。
较佳地， 步骤 （3) 中使用水溶液、 有机溶剂、 或有机溶剂与水的混合 溶液进行洗脱时有机溶剂浓度 （v/v%) 由低到高分梯度进行洗脱。 在另一优选例中， 所述步骤 （3) 后还包括步骤：
(4) 将纯化的如式 1 所示化合物进行结晶得到纯度大于 99%的如式 1 所示化合物。 在本发明的第二方面， 提供了一种上所述的本发明提供的纯化方法得 到 的纯度大于 99%的如式 1所示化合物。 在本发明的第三方面，提供了一种如上所述的 纯度大于 99%的如式 1所 示化合物的晶体， 所述化合物晶体 X-射线粉末衍射 （XRPD) 图上在下述 2 Θ 衍射角有特征峰： 2.940 ±0.2° ， 5.061 ±0.2° ， 5.880 ±0.2° 和 8.960±0.2° ； 较佳地， 所述化合物晶体 X-射线粉末衍射 （XRPD) 图上在下 述 2 Θ 衍射角还有特征峰： 6.661±0.2° ， 10.299±0.2° 和 17.900±0.2° 。
同时， 所述的化合物晶体具有如图 5所示的红外光谱图。 并且所述化合 物晶体的差示扫描量热法图 （DSC) 上 140-146°C有最大吸热峰。 据此， 本发明提供了一种新的如式 1所示的氮杂环六肽或其盐的纯化方 法。 附图说明
图 1显示了采用 US5552521A合成路线合成的化合物 1粗品的 HPLC图谱。 图 2显示了采用 CN101648994A合成路线合成的化合物 1粗品的 HPLC图 谱。
图 3显示了由本发明实施例 3制备得到的卡泊芬净醋酸盐的 HPLC图谱。 图 4显示了本发明实施例 3制备得到的卡泊芬净醋酸盐的 XRPD图谱。 图 5显示了本发明实施例 3制备得到的卡泊芬净醋酸盐的红外光谱。 图 6显示了本发明实施例 3制备得到的卡泊芬净醋酸盐的 DSC图谱。 图 7显示了本发明实施例 4制备得到的卡泊芬净醋酸盐的 HPLC图谱。 上述 HPLC图谱表格中的文字说明如下：
RT表示保留时间； Area表示峰面积； ％ Area表示峰面积占总峰面积的 百分比； Height表示峰高。 具体实施方式
发明人发现在一定条件下， 使用大孔吸附树脂便能对化合物 1有相当好 的分离、 纯化作用。 如本文所用， "如式 1所示化合物" 或 "化合物 1 " 可以互换使用， 都 是指具有以下结构
如本文所用， "药学上可接受的盐 "是指同选自下述酸形成的盐类： 盐酸、 氢溴酸、 磷酸、 硫酸、 马来酸、 柠檬酸、 醋酸、 酒石酸、 琥珀酸、 酢浆草酸、 苹果酸、 谷氨酸、 或其它同歹 Li于 Journal of Pharmaceutical Science, 66 : 2 (1977)上的药学上可接受的盐有关的酸。
如本文所用， "如式 1所示化合物的纯度"、 "化合物 1的纯度 "或 "化 合物 1 的 HPLC 纯度" 可以互换使用， 都是指在本发明提供的高效液相色谱 ( HPLC ) 检测条件下， 测得的化合物 1的峰面积和所有峰的峰面积之和的百分 比。
如本文所用， "如式 1 所示化合物的粗品" 或 "化合物 1 的粗品" 可以 互换使用， 都是指在本发明提供的高效液相色谱 （HPLC ) 检测条件下， 化合物 1 的含量 < 90 %的混合物。 可以使用本领域现有的方法得到化合物 1 的粗品， 例如但不限于， 以微生物发酵产物纽莫康定 B。为起始原料， 通过多步化学反 应得到化合物 1 的粗品， 参见 US5552521A实施例 1和 CN101648994A实施例 1-7中描述的方法。
如本文所用， "含有如式 1所示化合物的粗品的溶液" 或 "含有化合物 1 的粗品的溶液" 可以互换使用， 是指含有目标化合物 1和一种或多种非目 标化合物的溶液， 可以是化合物 1 的粗品溶解于水或者 ra 7的缓冲溶液获 得， 也可以是任何过程得到的化合物 1 的反应液， 通过与水或者 PH 7的缓 冲溶液混合所得的含有有机溶剂的混合溶液。 可以使用本领域现有的制备化 合物 1的方法所获得的化合物 1的反应液， 例如但不限于， 以微生物发酵产物 纽莫康定 B。为起始原料，通过多步化学反应得到的反 液。比如： US5552521A 报道其的合成方法， 纽莫康定 B。上的活泼酰胺基用硼烷还原成胺， 该胺上的 活泼羟基与强离去基团化合物， 如苯硫酚， 反应得到苯硫醚化合物， 苯硫醚 化合 经乙二胺氨解得到化合物 1 的甲醇反应液（如下路线）：
也可以是中国专利申请 CN101648994A 中所描述的方法， 即以微生物发 酵产物纽莫康定 B。为起始原料，纽莫康定 B。上的活泼羟基与强离去基团化合 物， 如苯硫酚， 反应得到苯硫醚化合物， 苯硫醚化合物在甲醇溶液中经乙二 胺氨解得到胺， 该胺在四氢呋喃中与硼烷作用， 还原得到化合物 1 的四氢呋 喃反应
以上化合物 1 的反应液仅是举例， 本发明所述的化合物 1 的反应液应当 不受此限制。
如本文所用， "大孔吸附树脂"主要包括： a、 由苯乙烯与二乙烯苯聚合 而成的非极性的芳香吸附树脂， 可以举例的是美国罗门哈斯 （Rohmhaas) 公 司生产的 XAD 系列吸附树脂中的： XAD- 1、 XAD-2、 XAD- 3、 XAD- 4、 XAD- 5、 XAD-16、 XAD-16HP、 或它们的混合物， 以及日本三菱化学公司生产 Diaion HP 系列吸附树) ^中的 HP— 10、 HP— 20、 HP-20ss, HP— 21、 HP— 30、 HP— 40、 HP— 50、 SP- 825、 SP- 850、 SP- 70、 SP- 700、 SP- 207、 或它们的混合物； b、 具有甲基 丙烯酸酯单元结构的中等极性的甲基丙烯酸吸 附树脂， 可以举例的是美国罗 门哈斯（Rohmhaas)公司生产 XAD系列吸附树月旨中的： XAD- 6、 XAD- 7、 XAD- 7HP、 XAD-8, 或它们的混合物， 也可以是日本三菱化学公司生产 Diaion HP 系列 吸附树脂中的 HP-2MG。
如本文所用， "上样" 是指将含有化合物 1 的粗品的溶液和大孔吸附树 脂接触， 使化合物 1 的粗品吸附到大孔吸附树脂上的过程。 所述的接触包括 将大孔吸附树脂直接投入溶液中， 然后搅拌吸附； 还有将大孔吸附树脂装入 层析装置中， 使溶液流过层析柱。
"洗涤" 大孔吸附树脂， 指使合适的缓冲液在大孔吸附树脂中或上通 过。
如本文所用， "洗涤缓冲液"指在洗脱目标化合物 1之前，用来洗涤（主 要是有机相） 大孔吸附树脂的缓冲液。 方便的， 洗涤缓冲液和加样缓冲液可 以是同一 pH值， 但这不是必须的。
将分子从大孔吸附树脂上 "洗脱" 下来， 指通过改变大孔吸附树脂周围 的缓冲液极性从大孔吸附树脂上除下该分子， 该极性能使缓冲液与分子竞争 大孔吸附树脂上的吸附位点。
如本文所用， "洗脱缓冲液" 用来将目标化合物 1从固相上洗脱下来。 洗脱缓冲液的 pH能使目标化合物 1从大孔吸附树脂上洗脱下来。
从含有目标化合物 1和一种或多种非目标化合物的组合物中 "纯化" 化 合物 1， 指通过从组合物中 （完全或部分的） 除去至少一种非目标化合物来 提高组合物中化合物 1的纯度。 本发明提供的如式 1所示化合物的纯化方法， 所述的方法包括步骤： ( 1 ) 将化合物 1的粗品上样至大孔吸附树脂；
( 2 )用水溶液、有机溶剂、或有机溶剂与水的混 溶液洗涤大孔吸附树脂;
( 3 ) 用水溶液、 有机溶剂、 或有机溶剂与水的混合溶液进行洗脱， 得 到纯化的化合物 1 (纯度 90 % ) 。
上述纯化方法的步骤 （3 ) 后还包括结晶步骤以得到高纯度化合物 1 (纯 度 99 % ) 。 在本发明的一个实施例中， 所述的纯化方法包括步骤：
第一步， 将化合物 1 的粗品上样至大孔吸附树脂；
第二步， 用大量的水溶液洗涤大孔吸附树脂， 除去有机相；
第三步， 用有机溶剂与水的混合溶液进行梯度洗脱， 洗脱时有机溶剂浓 度 （v/v% ) 在 5%-95%之间， 由低到高分两个或两个以上浓度梯度进行， 收集 合格的流出液 （化合物 1纯度 90 % ) ， 合并合格的流出液， 得到纯化的化 合物 1 (纯度 90%) 。
上述纯化方法的第三步后还包括第四步： 将纯化的化合物 1 (纯度 90 %) 和溶解液 （乙醇 /水 /醋酸） 混合后， 滴加乙酸乙酯进行结晶， 过滤， 得 到高纯度化合物 1 (纯度 99%) 。
在第一步中， 所述的上样是将含有化合物 1 的粗品的溶液和大孔吸附树 脂接触， 所述的含有化合物 1 的粗品的溶液 pH 7， 优选 pH 4.5-6.0, 更 佳地 pH 5.0-5.5ο 所述的含有化合物 1 的粗品的溶液可以将化合物 1 的反 应液， 直接用水稀释， 配置成含有机溶剂 10%以下的溶液， 然后用常用的酸， 如醋酸、 盐酸等调节 pH到 ρΗ 7。 在本发明的另一实施例中， 所述的纯化方法包括步骤：
Α,使含有化合物 1粗品的溶液与大孔吸附树脂接触；
Β， 使含有化合物 1粗品的溶液与所述树脂分离；
C， 用选自水溶液、 有机溶剂或它们的混合物的洗涤液洗涤步骤 B 中留 下的大孔吸附树脂；
D， 用选自水溶液、 有机溶剂或它们的混合液的洗脱液与步骤 C 中得到 的洗涤过的吸附树脂接触， 然后收集含有化合物 1 的洗脱液；
E， 将收集的洗脱液减压浓缩干， 结晶后得到高纯度的化合物 1 (纯度 99%) 。
步骤 B中所述的分离包括过滤。 化合物 1 由于本身的性质不太稳定， 所以对纯化工艺的要求相当严格； 化合物 1是作为醋酸盐的形式用于临床， 所以本发明举例提供其醋酸盐的纯 化方法：
首先将化合物 1 的反应液， 直接用水稀释， 配置成含有机剂 10%以下的 溶液， 用醋酸调节 pH到 pH 7， 用事先处理好的大孔吸附树脂进行吸附， 用 大量的 pH 7的醋酸水溶液洗涤， 除去有机相。 然后按照 pH 7的醋酸水溶 液， 有机溶剂含量在 5%-95%分梯度， 依次进行洗脱， 并收集合格流分， 合并 收集液。 浓缩， 结晶并可以得到白色结晶粉末， 为高纯度化合物 1 的醋酸盐 (纯度 99%) 。
所述卡泊芬净醋酸盐晶体在其 X-射线粉末衍射（XRPD) 图上下述 2 Θ 衍 射角有特征峰： 2.940 ±0.2° ， 5.061±0.2° ， 5.880±0.2° ±0.2° 和 8.960±0.2° 。 更优的， 在其 X-射线粉末衍射 （XRPD) 图上下述 2 Θ 衍射角 还有特征峰： 6.661±0.2° ， 10.299±0.2° 和 17.900±0.2° 。 在本发明提供的所有纯化方法中， 所述的水溶液 ρΗ Ί， 优选 ρΗ 4.5 一 6.0， 更佳地 ρΗ 5.0-5.5； 包括醋酸溶液、 盐酸溶液等。
在本发明提供的所有纯化方法中， 所述的有机溶剂与水的混合溶液以总 体积计， 含有有机溶剂 5%-95%， 优选 10%— 60% (ν/ν) 。
在本发明提供的所有纯化方法中，所述的有机 溶剂选自 C1-C4醇、 C1-C4 酮、 乙腈或四氢呋喃； 所述 C1-C4醇选自下述的一种或一种以上： 甲醇、 乙 醇、 丙醇、 丁醇； 所述 C1-C4酮选自下述的一种或一种以上： 丙酮、 丁酮。 本发明提到的上述特征， 或实施例提到的特征可以任意组合。 本案说明书 所揭示的所有特征可与任何组合物形式并用， 说明书中所揭示的各个特征， 可 以任何可提供相同、 均等或相似目的的替代性特征取代。 因此除有特别说明， 所揭示的特征仅为均等或相似特征的一般性例 子。 本发明的主要优点在于：
1、 本发明提供了一种成本低廉的纯化氮杂环六肽 ， 特别是棘白菌素类 化合物的纯化新方法。
2、 本发明提供的方法所经过的纯化步骤具有路线 短、 条件温和、 纯化 收率高、 处理简单等特点， 在很大程度上减轻了工艺操作和对设备要求， 降 低了生产成本。
3、 本发明提供的方法能得到较稳定的目标产物， 有利于终产品的质量 控制， 有利于工业化大生产。 下面结合具体实施例， 进一步阐述本发明。 应理解， 这些实施例仅用于 说明本发明而不用于限制本发明的范围。 下列实施例中未注明具体条件的实 验方法， 通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条 件。 除非另外说明， 否则所有的百分数、 比率、 比例、 或份数按重量计。
本发明中的重量体积百分比中的单位是本领域 技术人员所熟知的， 例如 除非另行定义， 文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟 练人员所 熟悉的意义相同。 此外， 任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆 可应 用于本发明方法中。 文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用 。 本发明样品 （化合物 1) 检测的高效液相色谱条件：
色谱仪： waters高效液相色谱系统
色谱柱： Kromasil 0DS 250*4.6mm, 5 μ m
流动相 A: 0.1% (V/V) 高氯酸水溶液
流动相 B: 乙腈
程序
进样量： 10 μ 1
柱温： 35 °C
检测波长： 220nm
流速： 1. Oml/min 实施例 1
采用 US5552521A合成路线合成化合物 1
以 B Q (45.0g， 42.24mmol) 为原料， 按照 US5552521A合成路线合成， 得到化合物 1 的反应液 500ml， HPLC检测纯度为 78.64% (图 1) ， 待纯化。 实施例 2
采用 CN101648994A合成路线合成化合物 1
以 B Q (50.0g， 47mmol) ， 按照 CN101648994A合成路线合成， 得到化合 物 1 的反应液 1.6L， HPLC检测纯度为 47.09% (图 2) ， 待纯化。 实施例 3
化合物 1的纯化
将化合物 1 (由实施例 1所得） 的反应液 30ml， 在 20°C以下， 加入纯化 水 250ml稀释， 用醋酸调节 PH到 5.0-5.5， 控制流速为 lL/h， 用事先处理 好的 HP20ss树脂 100ml进行吸附，用 300ml的 PH在 5-5.5之间的 0.016%(V/V) 的醋酸溶液洗涤， 除去有机相。 然后按照 PH为 5-5.5 之间醋酸水溶液， 丙 酮含量在 10%， 20%和 25%的 0.016%(V/V)的醋酸溶液， 分 3个梯度， 依次进 行洗脱， 并收集合格流份 （纯度 90%) ， 合并收集液， 共收集约 4 个柱体 积， 浓缩干。
用乙醇 /水 /醋酸 =207.8/19.4/l( V /v/v)溶解液 7.3ml 将纯度 90%的化 合物 1 溶解， 室温条件下， 开始滴加乙酸乙酯结晶， 滴加完毕， 保温搅拌 1 小时， 过滤， 滤饼用 （水： 乙醇： 乙酸乙酯 = 1.0: 10.7： 17.1) 溶液洗涤， 得到白色结晶固体即卡泊芬净醋酸盐 （0.73g， 纯度为 99.85%) (图 3) 。
使用型号为 RIGAKU D/max 2550VB/PC的 X-射线衍射仪， 对该白色卡泊 芬净醋酸盐粉末进行 X射线衍射测定， 测定时以 2° 每分钟的扫描速度获得 图谱。 使用铜辐射靶， 结果获得如图 4所示的 X射线粉末衍射图谱。
使用型号为 PE SPEGRUM 1B 的红外光谱仪， 对该白色卡泊芬净醋酸盐 粉末进行红外光谱测定， 获得如图 5所示的红外光谱图。
使用型号为 WATERS Q20 的示差扫描量热仪， 对该白色卡泊芬净醋酸盐 粉末进行差热测定， 获得如图 6所示的 DSC图谱。 实施例 4
化合物 1的纯化
将化合物 1 (由实施例 1所得） 的反应液 30ml， 在 20°C以下， 加入纯化 水 250ml稀释， 用醋酸调节 PH到 5.0-5.5， 控制流速为 lL/h， 用事先处理 好的 HP20ss树脂 100ml进行吸附，用 300ml的 PH在 5-5.5之间的 0.016%(V/V) 的醋酸溶液洗涤， 除去有机相。 然后按照 PH为 5-5.5 之间醋酸水溶液， 甲 醇含量在 25%， 30%和 50%的 0.016%(V/V)的醋酸溶液， 分 3个梯度， 依次进 行洗脱， 并收集合格流分 （纯度 90%) ， 合并收集液， 共收集约 3 个柱体 积， 浓缩干。
按照实施例 3 的结晶方法结晶， 得到白色结晶固体即卡泊芬净醋酸盐 (0.41g， 纯度为 99· 81%) (图 7) 。 实施例 5
化合物 1的纯化
将化合物 1 (由实施例 1所得） 的反应液 30ml， 在 20°C以下， 加入纯化 水 250ml稀释， 用醋酸调节 PH到 5.0-5.5， 控制流速为 lL/h， 用事先处理 好的 XAD-1600 树脂 100ml 进行吸附， 用 300ml 的 PH 在 5-5.5 之间的 0.016%(V/V)的醋酸溶液洗涤， 除去有机相。 然后按照 Γ¾为 5-5.5之间醋酸 水溶液， 丙酮含量在 20%， 30%和 40%的 0.016%(V/V)的醋酸溶液， 分 3个梯 度， 依次进行洗脱， 并收集合格流分 （纯度 90%) ， 合并收集液， 共收集 约 3个柱体积， 浓缩干。
按照实施例 3 的结晶方法结晶， 得到白色结晶固体即卡泊芬净醋酸盐 (0.51g， 纯度为 99· 46%) 。 实施例 6
化合物 1的纯化
将化合物 1 (由实施例 1所得） 的反应液 30ml， 在 20°C以下， 加入纯化 水 250ml稀释， 用醋酸调节 PH到 5.0-5.5， 控制流速为 lL/h， 用事先处理 好的 HZ-803树脂 100ml进行吸附，用 300ml的 PH在 5-5.5之间的 0.016%(V/V) 的醋酸溶液洗涤， 除去有机相。 然后按照 PH为 5-5.5 之间醋酸水溶液， 丙 酮含量在 30%， 40%和 50%的 0.016%(V/V)的醋酸溶液， 分 3个梯度， 依次进 行洗脱， 并收集合格流分 （纯度 90%) ， 合并收集液， 共收集约 3 个柱体 积， 浓缩干。
按照实施例 3 的结晶方法结晶， 得到白色结晶固体即卡泊芬净醋酸盐 (0.58g， 纯度为 99.88%) 。 实施例 7
化合物 1的纯化
将化合物 1 (由实施例 1所得） 的反应液 30ml， 在 20°C以下， 加入纯化 水 250ml稀释， 用醋酸调节 PH到 5.0-5.5， 控制流速为 lL/h， 用事先处理 好的 LD-605树脂 100ml进行吸附，用 300ml的 PH在 5-5.5之间的 0.016%(V/V) 的醋酸溶液洗涤， 除去有机相。 然后按照 PH为 5-5.5 之间醋酸水溶液， 丙 酮含量在 20%， 40%和 50%的 0.016%(V/V)的醋酸溶液， 分 3个梯度， 依次进 行洗脱， 并收集合格流分 （纯度 90%) ， 合并收集液， 共收集约 3 个柱体 积， 浓缩干。
按照实施例 3 的结晶方法结晶， 得到白色结晶固体即卡泊芬净醋酸盐 (0.65g， 纯度为 99.90%) 。 实施例 8
化合物 1的纯化
将化合物 1 (由实施例 2所得） 的反应液 160ml， 在 20°C以下， 加入纯 化水 1440ml稀释， 控制流速为 lL/h， 用事先处理好的 HP20ss树脂 170ml进 行吸附， 用 500ml的 ί¾在 5-5.5之间的 0.016%0^/^)的醋酸溶液洗涤， 除去 有机相。 然后按照 Γ¾为 5-5.5之间醋酸水溶液， 丙酮含量在 10%， 20%和 25% 的 0.016%(V/V)的醋酸溶液， 分 3个梯度， 依次进行洗脱， 并收集合格流分 (纯度 90%) ， 合并收集液， 共收集约 4个柱体积， 浓缩干。
按照实施例 3 的结晶方法结晶， 得到白色结晶固体即卡泊芬净醋酸盐 (1.76g， 纯度为 99.71%) 。 实施例 9
化合物 1的纯化
将化合物 1 (由实施例 2所得） 的反应液 160ml， 在 20°C以下， 加入纯 化水 1440ml稀释， 控制流速为 lL/h， 用事先处理好的 HP20ss树脂 170ml进 行吸附， 用 500ml的 ί¾在 5-5.5之间的 0.016%0^/^)的醋酸溶液洗涤， 除去 有机相。 然后按照 1¾为 5-5.5之间醋酸水溶液， 甲醇含量在 25%， 30%和 50% 的 0.016%(V/V)的醋酸溶液， 分 3个梯度， 依次进行洗脱， 并收集合格流分 (纯度 90%) ， 合并收集液， 共收集约 3个柱体积， 浓缩干。
按照实施例 3 的结晶方法结晶， 得到白色结晶固体即卡泊芬净醋酸盐 ( 1.69g， 纯度为 99· 61%) 。 实施例 10
化合物 1的纯化
将化合物 1 (由实施例 2所得） 的反应液 160ml， 在 20°C以下， 加入纯 化水 1440ml稀释， 控制流速为 lL/h， 用事先处理好的 XAD-1600树脂 170ml 进行吸附， 用 500ml的 ί¾在 5-5.5之间的 0.016%0^/^)的醋酸溶液洗涤， 除 去有机相。 然后按照 ί¾为 5-5.5之间醋酸水溶液， 丙酮含量在 20%， 30%和 40%的 0.016% (V/V)的醋酸溶液， 分 3个梯度， 依次进行洗脱， 并收集合格流 分 （纯度 90%) ， 合并收集液， 共收集约 3个柱体积， 浓缩干。
按照实施例 3 的结晶方法结晶， 得到白色结晶固体即卡泊芬净醋酸盐 (1.63g， 纯度为 99· 01%) 。 实施例 11
化合物 1的纯化
将化合物 1 (由实施例 2所得） 的反应液 160ml， 在 20°C以下， 加入纯 化水 1440ml稀释， 控制流速为 lL/h， 用事先处理好的 HZ-803树脂 170ml进 行吸附， 用 500ml的 ί¾在 5-5.5之间的 0.016%0^/^)的醋酸溶液洗涤， 除去 有机相。 然后按照 1¾为 5-5.5之间醋酸水溶液， 丙酮含量在 30%， 40%和 50% 的 0.016%(V/V)的醋酸溶液， 分 3个梯度， 依次进行洗脱， 并收集合格流分 (纯度 90%) ， 合并收集液， 共收集约 3个柱体积， 浓缩干。
按照实施例 3 的结晶方法结晶， 得到白色结晶固体即卡泊芬净醋酸盐
(1.70g， 纯度为 99.71%) 。 实施例 12
化合物 1的纯化
将化合物 1 (由实施例 2所得） 的反应液 160ml， 在 20°C以下， 加入纯 化水 1440ml稀释， 用醋酸调节 Γ¾到 5.0-5.5， 控制流速为 lL/h， 用事先处 理好的 LD-605 树脂 170ml 进行吸附， 用 500ml 的 PH 在 5-5.5 之间的 0.016%(V/V)的醋酸溶液洗涤， 除去有机相。 然后按照 Γ¾为 5-5.5之间醋酸 水溶液， 丙酮含量在 20%， 40%和 50%的 0.016% (V/V)的醋酸溶液， 分 3个梯 度， 依次进行洗脱， 并收集合格流分 （纯度 90%) ， 合并收集液， 共收集 约 3个柱体积， 浓缩干。 按照实施例 3 的结晶方法结晶， 得到白色结晶固体即卡泊芬净醋酸盐 ( 1. 68g， 纯度为 99. 88% ) 。 以上所述仅为本发明的较佳实施例而已， 并非用以限定本发明的实质技 术内容范围， 本发明的实质技术内容是广义地定义于申请的 权利要求范围 中， 任何他人完成的技术实体或方法， 若是与申请的权利要求范围所定义的 完全相同， 也或是一种等效的变更， 均将被视为涵盖于该权利要求范围之中。
Next Patent: TOUCH LOCATING METHOD AND SYSTEM, DISPLAY