本発明は、エピガロカテキンガレート及び/ 又はその異性体と、エピカテキンガレート及 び/又はその異性体を含有し、
(1)(A)ミリセチン、(B)ケルセチン及び(C)ケンフ ェロールの含有質量の和と、(D)エピガロカテ キンガレート及び(E)ガロカテキンガレートの 含有質量の和との比が((A)+(B)+(C))/((D)+(E))=0.0000 001~0.010、
(2)非重合体カテキン類中の(D)エピガロカテキ ンガレートと(E)ガロカテキンガレートの含有 質量の和((D)+(E))が0.01~29質量%、
(3)非重合体カテキン類中のガレート体率が0.0 1~49質量%
であることを特徴とする精製緑茶抽出物を提 供するものである。
 また本発明は上記の精製緑茶抽出物を配合� ��た飲食品を提供するものである。

 本発明は、苦味と後味を改善させる精製� ��茶抽出物、及び該精製緑茶抽出物を含有す� ��飲食品を提供することにある。

 本発明者は、高濃度にカテキンを含む茶� ��出物の継続摂取性には、緑茶抽出物の苦味� ��改善と、摂取後の後味の改善が重要である� ��の知見に基づき検討した結果、精製緑茶抽� ��物の苦味と後味を改善させるには、フラボ� ��ール類と共に非重合体カテキン類中のガレ� ��ト体率を低下させることが必要であること� ��見出した。本発明者は更に詳細に検討した� ��ころ、このような精製緑茶抽出物では着色� ��併せて抑えられることも見出した。

 本発明により、苦味と後味が改善される� ��共に着色が抑えられた精製緑茶抽出物が提� ��される。したがって、該精製緑茶抽出物を� ��食品へ配合することで、幅広い用途展開が� ��能になる。

 本発明で非重合体カテキン類とは、カテ� ��ン、ガロカテキン、カテキンガレート、ガ� ��カテキンガレートなどの非エピ体カテキン� ��及びエピカテキン、エピガロカテキン、エ� ��カテキンガレート、エピガロカテキンガレ� ��トなどのエピ体カテキンをあわせての総称� ��ある。

 本発明における非重合体カテキン類ガレー� ��体とは、カテキンガレート、ガロカテキン� ��レート、エピカテキンガレート及びエピガ� ��カテキンガレートをあわせての総称である� ��本発明の精製緑茶抽出物は、エピガロカテ� ��ンガレート及び/又はその異性体と、エピカ テキンガレート及び/又はその異性体を含有� �るものが好ましい。
 また非重合体カテキン類中のガレート体率� ��は、これら4種の総和質量の非重合体カテキ ン類8種の総和質量に対する百分率で表した� �値である。また本発明のエピガロカテキン� �レートの異性体とはガロカテキンガレート� �あり、エピカテキンガレートの異性体とは� �テキンガレートである。

 本発明におけるフラボノール類とは、ミ� ��セチン、ケルセチン及びケンフェロールを� ��い、フラボノール類の含有質量の和とはこ� ��ら3種のフラボノール類の総和質量である。 これらフラボノール類の含有質量はHPLCによ� �分離分析により各成分個別に定量すること� �できる。

 本発明における総ポリフェノール類とは� ��その含有質量を酒石酸鉄法により、標準液� ��して没食子酸エチルを用い、没食子酸の換� ��量として求めるものをいう。また本発明に� ��けるカフェインの含有質量はHPLCによる分離 分析により定量することができる。

 本発明におけるフラボノール類((A)ミリセチ ン、(B)ケルセチン及び(C)ケンフェロール)の� �有質量の和と、(D)エピガロカテキンガレー� �及び(E)ガロカテキンガレートの含有質量の� �との比は((A)+(B)+(C))/((D)+(E))=0.0000001~0.010であ� �が、好ましくは0.00001~0.009、更に好ましくは0 .0001~0.0085、特に好ましくは0.0001~0.007である。
 一方、本発明における非重合体カテキン類� ��のガレート体率は0.01~49質量%であるが、好� �しくは0.1~44質量%、更に好ましくは1~39質量%� �特に好ましくは5~29質量%である。
 また、本発明における非重合体カテキン類� ��の(D)エピガロカテキンガレートと(E)ガロカ� ��キンガレートの含有質量の和((D)+(E))は0.01~29 質量%であるが、好ましくは0.01~27質量%、更に 好ましくは0.1~25質量%、特に好ましくは1~23質� ��%である。
 本発明の精製緑茶抽出物中のフラボノール� ��、ガレート体並びにエピガロカテキンガレ� ��ト及びその異性体が上記三つを満足するこ� ��で精製緑茶抽出物摂取時の苦味と後味を改� ��できると共に着色を抑えられる。

 更に、((A)+(B)+(C))/((D)+(E))を上記範囲とす� �には、飲食品中のフラボノール類の絶対量� �少なくするか、又は飲食品中に含まれるフ� �ボノール類がカテキンのガレート体との関� �で相対的に少なくすることが必要である。� �えば、各成分を上記関係が成り立つように� �食品中へ加える方法のほか、緑茶抽出物を� �ルコール類単独またはアルコール類含有の� �囲気下で後述するような吸着剤処理を施す� �法や、緑茶抽出物を水又は有機溶媒と水と� �混合液に分散又は溶解した後、後述するよ� �に活性炭と、酸性白土又は活性白土とで接� �処理する方法、あるいはこれらの組み合わ� �などが挙げられる。

 本発明における(F)カフェイン/(G)非重合体 カテキン類の含有質量比は0.0001~0.25が好まし� ��、より好ましくは0.001~0.15が好ましく、更に 好ましくは0.001~0.1、特に好ましくは0.001~0.08� �ある。この範囲であれば非重合体カテキン� �の摂取に際してカフェインが過多にならず� �苦味、後味の点でも好ましい。

 本発明における(G)非重合体カテキン類/(H) 総ポリフェノール類の含有質量比は0.80~1.2が� ��ましく、より好ましくは0.85~1.15、更に好ま� ��くは0.9~1.1である。この範囲であれば精製緑 茶抽出物中に存在する非重合体カテキン類を 除いた他の成分の存在比が低減される為、好 ましい。

 本発明の精製緑茶抽出物は、簡便に大量� ��カテキンを摂取するという目的から、その� ��形分中に、非重合体カテキン類を25~95質量%� ��有することが好ましく、40~95質量%、更に50~9 0質量%、特に55~80質量%含有することが好まし� ��。

 本発明で用いる緑茶抽出物としては、緑茶� ��から得られた抽出液が挙げられる。使用す� ��茶葉としては、より具体的には、Camellia属� �例えばC.sinensis、C.assamica及びやぶきた種又は それらの雑種等から得られる茶葉から製茶さ れた茶葉が挙げられる。製茶された茶葉には 、煎茶、番茶、玉露、てん茶、釜炒り茶等の 緑茶類がある。また、超臨界状態の二酸化炭 素接触処理を施した茶葉を用いてもよい。
 茶を抽出する方法については、攪拌抽出、� ��ラム法、ドリップ抽出など従来の方法によ� ��行う。また抽出時の水にあらかじめアスコ� ��ビン酸ナトリウムなどの有機酸又は有機酸� ��類を添加してもよい。また煮沸脱気や窒素� ��ス等の不活性ガスを通気して溶存酸素を除� ��しつつ、いわゆる非酸化的雰囲気下で抽出� ��る方法も併用してもよい。このようにして� ��られた抽出液は、そのままでも、乾燥、濃� ��しても本発明の精製緑茶抽出物の調製に使� ��できる。茶抽出物の形態としては、液体、� ��ラリー、半固体、固体の状態が挙げられる� ��

 本発明に使用する緑茶抽出物には、茶葉か� ��抽出した抽出液を使用する代わりに、緑茶� ��出物の濃縮物を水又は有機溶媒に溶解又は� ��釈して用いても、茶葉からの抽出液と緑茶� ��出物の濃縮物とを併用してもよい。
 ここで、緑茶抽出物の濃縮物とは、緑茶葉� ��ら熱水又は水溶性有機溶媒により抽出され� ��抽出物を濃縮したものであり、例えば、特� ��昭59-219384号公報、特開平4-20589号公報、特開 平5-260907号公報、特開平5-306279号公報等に記� �されている方法により調製したものをいう� �具体的には、緑茶抽出物として、市販の東� �フードテクノ社製「ポリフェノン」、伊藤� �社製「テアフラン」、太陽化学社製「サン� �ェノン」等の粗カテキン製剤を固体の緑茶� �出物として用いることもできる。

 本発明においては、苦味と後味の改善、� ��色抑制の観点から、精製緑茶抽出物の原料� ��なる緑茶抽出物として((A)+(B)+(C))/((D)+(E))の� �量比が0.0035~0.01(好ましくは0.004~0.0095、更に� �ましくは0.0045~0.009)であり、非重合体カテキ� ��類濃度が20~50質量%(好ましくは25~45質量%、更 に好ましくは30~40質量%)であり、非重合体カ� �キン類中のガレート体率が5~53質量%(好まし� �は10~52質量%、更に好ましくは15~49質量%)であ� ��、カフェイン/非重合体カテキン類の含有質 量比が0.01~0.25(好ましくは0.01~0.22、更に好ま� �くは0.01~0.20)であるものを使用することが好� ��しい。

 本発明においては、緑茶抽出物をそのまま� ��又は水若しくは有機溶媒水溶液に分散又は� ��解した状態で、活性炭と、酸性白土及び/又 は活性白土(以下、「酸性白土等」ともいう)� ��に接触させることにより、緑茶抽出物を精� ��することができる。
 緑茶抽出物を、活性炭及び酸性白土等と接� ��させる順序は特に限定されず、例えば、(1)� ��茶抽出物を水又は有機溶媒水溶液に分散又� ��溶解させた後、活性炭と、酸性白土等と接� ��させる方法、(2)水又は有機溶媒水溶液に活� ��炭及び酸性白土等を分散させた後、緑茶抽� ��物と接触処理させる方法、(3)緑茶抽出物と� ��水又は有機溶媒水溶液とを酸性白土等の存� ��下に接触させ、次いで活性炭と接触させる� ��法が挙げられ、中でも(1)及び(3)の方法が好� ��しい。(1)~(3)の方法における各工程間にはろ 過工程を入れて、ろ別してから次の工程に移 行してもよい。

 接触処理の際には、pHを4~6の範囲に調整� �て行うことが、非重合体カテキン類を効率� �く抽出した精製緑茶抽出物を得るために好� �しい。pHを調整するために、クエン酸、乳酸 、酒石酸、コハク酸、リンゴ酸等の有機酸を 、有機酸と非重合体カテキン類の質量比率(� �機酸/非重合体カテキン類)が0.01~0.20の範囲で 添加することができる。

 接触処理は、バッチ式、カラムによる連� ��処理等のいずれの方法で行ってもよく、例� ��ば、緑茶抽出物と活性炭との接触方法は、� ��性炭カラムによる連続処理等の方法で行う� ��とができる。一般には、粉末状の活性炭等� ��添加、撹拌し、カフェインを選択的に吸着� ��、ろ過操作によりカフェインを除去したろ� ��を得る方法又は顆粒状の活性炭等を充填し� ��カラムを用いて連続処理によりカフェイン� ��選択的に吸着する方法等が採用される。

 緑茶抽出物の精製に使用する有機溶媒とし� ��は、水溶性有機溶媒が好ましく、例えば、� ��タノール、エタノール等のアルコール類、� ��セトン等のケトン類、酢酸エチル等のエス� ��ル類が挙げられ、特に飲食品への使用を考� ��すると、エタノールが好ましい。水として� ��、イオン交換水、水道水、天然水等が挙げ� ��れ、特に味の点からイオン交換水が好まし� ��。
 有機溶媒と水との混合質量比は、好ましく� ��60/40~97/3、更に好ましくは60/40~75/25、特に好� ��しくは85/15~95/5とするのが、非重合体カテキ ン類の抽出効率、緑茶抽出物の精製効率等の 点で好ましい。

 緑茶抽出物と、水又は有機溶媒水溶液と� ��割合は、混合液等100質量部に対して、緑茶� ��出液(乾燥質量換算)を10~40質量部、更に10~30� ��量部、特に15~30質量部添加して処理するの� �、緑茶抽出物を効率よく処理できるので好� �しい。

 接触処理には、10~180分程度の熟成時間を� ��けることが好ましく、これらの処理は10~60� �で行うことができ、特に10~50℃、更に10~40℃� ��行うのが好ましい。

 接触処理に用いる活性炭としては、一般に� ��業レベルで使用されているものであれば特� ��制限されず、例えば、ZN-50(北越炭素社製)、 クラレコールGLC、クラレコールPK-D、クラレ� �ールPW-D(クラレケミカル社製)、白鷲AW50、白� ��A、白鷲M、白鷲C(武田薬品工業社製)等の市� �品を用いることができる。
 活性炭の細孔容積は0.01~0.8mL/g、特に0.1~0.8mL/ gが好ましい。また、比表面積は800~1600m ² /g、特に900~1500m ² /gの範囲のものが好ましい。なお、これらの� ��性値は窒素吸着法に基づく値である。

 活性炭は、水又は有機溶媒水溶液100質量� ��に対して0.5~8質量部、特に0.5~3質量部添加す るのが、カフェイン除去効率、ろ過工程にお けるケーク抵抗が小さい点で好ましい。

 接触処理に用いる酸性白土又は活性白土は� ��ともに一般的な化学成分として、SiO ₂ 、Al ₂ O ₃ 、Fe ₂ O ₃ 、CaO、MgO等を含有するものであるが、SiO ₂ /Al ₂ O ₃ 比が3~12、特に4~9であるものが好ましい。ま� �、Fe ₂ O ₃ を2~5質量%、CaOを0~1.5質量%、MgOを1~7質量%含有� ��る組成のものが好ましい。
 活性白土は天然に産出する酸性白土(モンモ リロナイト系粘土)を硫酸等の鉱酸で処理し� �ものであり、大きい比表面積と吸着能を有� �る多孔質構造をもった化合物である。酸性� �土を更に酸処理することにより比表面積が� �化し、脱色能の改良及び物性が変化するこ� �が知られている。

 酸性白土又は活性白土の比表面積は、酸処� ��の程度等により異なるが、50~350m ² /gであるのが好ましく、pH(5質量%サスペンジ� �ン)は2.5~8、特に3.6~7のものが好ましい。例え ば、酸性白土としては、ミズカエース#600(水� ��化学社製)等の市販品を用いることができる 。

 また、活性炭と、酸性白土等との割合は� ��質量比で活性炭1に対して1~10が好ましく、� �性炭:酸性白土又は活性白土=1:1~1:6であるの� �好ましい。

 酸性白土等は、水又は有機溶媒水溶液100� ��量部に対して2.5~25質量部、特に2.5~15質量部� ��加するのが好ましい。酸性白土等の添加量� ��少なすぎると、カフェイン除去効率が低下� ��る傾向にあり、また多すぎるとろ過工程に� ��けるケーク抵抗が大きくなる傾向にある。

 水又は有機溶媒水溶液から活性炭等を分離� ��るときの温度は、-15~78℃、更に-5~40℃であ� �のが好ましい。この温度の範囲外であると� �分離性が劣り、また溶液の性状に変化が見� �れるような場合がある。
 分離方法は公知の技術が応用でき、例えば� ��いわゆるフィルター分離や遠心分離等の手� ��のほか、活性炭等の粒状物質が詰まったカ� ��ムを通すことでの分離等でもよい。

 また、本発明においては、緑茶抽出物を� ��製する際に合成吸着剤を使用することがで� ��る。合成吸着剤は、一般に不溶性の三次元� ��橋構造ポリマーでイオン交換基のような官� ��基を実質的に持たないものである。好まし� ��は、イオン交換能が1meq/g未満のものを用い� ��ことができる。本発明に用いる合成吸着剤� ��しては、その母体がスチレン系、例えばア� ��バーライトXAD4、XAD16HP、XAD1180、XAD2000、(供� �元:米国ローム&ハース社)、ダイヤイオンH P20、HP21(三菱化学社製)、セパビーズSP850、SP82 5、SP700、SP70(三菱化学社製)、VPOC1062(Bayer社製) ;臭素原子を核置換して吸着力を強めた修飾� �チレン系、例えばセパビーズSP205、SP206、SP20 7(三菱化学社製);メタクリル系、例えばダイ� �イオンHP1MG、HP2MG(三菱化学社製);フェノール� ��、例えばアンバーライトXAD761(ロームアンド ハース社製);アクリル系、例えばアンバーラ� ��トXAD7HP(ロームアンドハース社製);ポリビニ� ��系、例えばTOYOPEARL、HW-40C(東ソー社製);デキ� ��トラン系、例えばSEPHADEX、LH-20(ファルマシ� �社製)等が使用できる。

 合成吸着剤としては、その母体がスチレ� ��系、メタクリル系、アクリル系、ポリビニ� ��系が好ましく、特にスチレン系がカテキン� ��カフェインの分離性の点から好ましい。

 本発明において緑茶抽出物を合成吸着剤� ��吸着させる手段としては、緑茶抽出物に合� ��吸着剤を添加、撹拌し吸着後、ろ過操作に� ��り合成吸着剤を回収するバッチ方法又は合� ��吸着剤を充填したカラムを用いて連続処理� ��より吸着処理を行なうカラム方法が採用さ� ��るが、生産性の点からカラムによる連続処� ��方法が好ましい。合成吸着剤の使用量は、� ��茶抽出物に対して、好ましくは10体積%、更� ��好ましくは15体積%、特に好ましくは20体積%� ��あることが、非重合体カテキン類の吸着効� ��等の点で好ましい。

 合成吸着剤が充填されたカラムは、予めSV(� ��間速度)=0.5~10[h ^-1 ]、合成吸着剤に対する通液倍数として2~10[v/v ]の通液条件で95vol%エタノール水溶液による� �浄を行い、合成吸着剤の原料モノマーやそ� �他の不純物等を除去するのが好ましい。そ� �て、その後SV=0.5~10[h ^-1 ]、合成吸着剤に対する通液倍数として1~60[v/v ]の通液条件により水洗を行い、エタノール� �除去して合成吸着剤の含液を水系に置換す� �方法により非重合体カテキン類の吸着能が� �上する。

 カラムに緑茶抽出物を通液するときの条� ��としては、合成吸着剤に吸着させる場合、� ��茶抽出物中の非重合体カテキン類の濃度は� ��好ましくは0.1~22質量%、より好ましくは0.1~15 質量%、更に好ましくは0.5~10質量%、特に好ま� ��くは0.5~3質量%であることが、樹脂への吸着� ��率の点から好ましい。

 緑茶抽出物を、合成吸着剤を充填したカラ� ��に通液する条件としては、SV(空間速度)=0.5~1 0[h ^-1 ]の通液速度で、合成吸着剤に対する通液倍� �として0.5~20[v/v]で通液するのが好ましい。10[ h ^-1 ]以下の通液速度や20[v/v]以下の通液量である� ��非重合体カテキン類の吸着が十分である。

 緑茶抽出物を吸着後、合成吸着剤は、水� ��は有機溶媒水溶液で洗浄するのが好ましい� ��合成吸着剤の洗浄に使用する水溶液として� ��、非重合体カテキン類の回収率の点からpH7� ��下の水が好ましく、水溶性有機溶媒との混� ��系においても使用することができる。水溶� ��有機溶媒としては、アセトン、メタノール� ��エタノールなどが挙げられ、飲食品への使� ��の観点から、エタノールが好ましい。含有� ��る有機溶媒の濃度は、0~20質量%、好ましく� �0~10質量%、より好ましくは0~5質量%が非重合� �カテキン類の回収率の点から好ましい。

 この洗浄工程においては、SV(空間速度)=0.5~1 0[h ^-1 ]の通液速度で、合成吸着剤に対する通液倍� �として1~10[v/v]で、合成吸着剤に付着した不� �物を除去することが好ましい。更にSV=0.5~5[h ^-1 ]の通液速度で、通液倍数として1~5[v/v]で洗浄 することが夾雑物の除去効果及び非重合体カ テキン類の回収率の点から好ましい。

 次いで、非重合体カテキン類を有機溶媒水� ��液又は塩基性水溶液で溶出させる。
 有機溶媒水溶液としては、水溶性有機溶媒� ��水との混合系が用いられ、水溶性有機溶媒� ��しては、アセトン、メタノール、エタノー� ��などが挙げられる。中でも、飲食品への使� ��の観点から、エタノールが好ましい。水溶� ��有機溶媒の濃度は、20~70質量%、好ましくは3 0~60質量%、より好ましくは30~50質量%が非重合� ��カテキン類の回収率の点から好ましい。
 非重合体カテキン類の溶出に用いる塩基性� ��溶液としては、アルカリ金属塩及びアルカ� ��土類のアルカリ水溶液、好ましくは、ナト� ��ウム系のアルカリ性水溶液、例えば水酸化� ��トリウム水溶液、炭酸ナトリウム水溶液等� ��好適に用いることができる。また、アルカ� ��性水溶液のpHは7~14の範囲が好ましい。非重� ��体カテキン類回収率の点から9~14.0、特に10~1 3.5が好ましい。pH7~14のナトリウム系水溶液と しては、4%以下の水酸化ナトリウム水溶液、1 N-炭酸ナトリウム水溶液等が挙げられる。塩� ��性水溶液に、水溶性有機溶媒を混合するこ� ��ができる。有機溶媒の濃度としては、カフ� ��インとカテキンの分離性の点から0~90質量%� �範囲が好ましく、0~50質量%がより好ましく、 0~20質量%が更に好ましい。

 溶出工程においては、溶出に用いる塩基� ��水溶液として互いにpHが異なる2種以上の塩� ��性水溶液を用い、これら塩基性水溶液をpH� �低い順に合成吸着剤に接触させることがで� �る。それぞれのpH区分で異なる非重合体カテ キン類や他の成分を脱着することができる。

 SV(空間速度)=2~10[h ^-1 ]の通液速度で、合成吸着剤に対する通液倍� �として1~30[v/v]で、非重合体カテキン類を溶� �することが好ましい。更にSV=3~7[h ^-1 ]の通液速度で、通液倍数として3~15[v/v]で溶� �することが生産性及び非重合体カテキン類� �回収率の点から好ましい。

 本発明で使用される合成吸着剤は精製処� ��後に所定の方法を用いることにより再使用� ��きる。具体的には、エタノールのような有� ��溶媒を通液し合成吸着剤上に吸着したカフ� ��イン等の不要分を脱着させる。又は水酸化� ��トリウムのようなアルカリ水溶液を通液・� ��浄し、合成吸着剤上に残存する水溶性成分� ��すべて脱着できる。更に水蒸気による洗浄� ��組み合わせても良い。

 非重合体カテキン類を塩基性水溶液で溶� ��した溶出液は塩基性であるが、非重合カテ� ��ン類の安定性の観点から、通常、溶出液のp Hを7以下に、より好ましくはpHを1~6、更に好� �しくは1~5、特に好ましくは2~4に調整するこ� �が望ましい。具体的には酸による中和、電� �透析によるアルカリ金属イオンの除去、又� �イオン交換樹脂によるアルカリ金属イオン� �除去が利用できる。イオン交換樹脂として� �特にH型のカチオン交換樹脂を用いるのが好� ��しい。プロセスの簡便性からイオン交換樹� ��によるpH調整が好ましい。カチオン交換樹� �としては、具体的には、アンバーライト200CT 、IR120B、IR124、IR118(供給元:米国ローム&ハ� ��ス社)、ダイヤイオンSK1B、SK1BH、SK102、PK208� �PK212(三菱化学社製)等を用いることができる� ��

 非重合体カテキン類の溶出液は、濃縮し� ��出物を固液分離除去することが、呈味及び� ��品の安定性向上のため好ましい。濃縮は、� ��圧蒸留、薄膜蒸留、膜濃縮等により実施す� ��ことができる。濃縮倍率としては、呈味及� ��析出物の分離性の点から2~500倍、更に2~250倍 、特に2~125倍が好ましい。濃縮後の非重合体� ��テキン類の濃度は、呈味及び析出物の分離� ��の点から0.1~70質量%、更に0.2~50質量%、特に0. 5~25質量%が好ましい。固液分離の具体的な操� ��としては、ろ過及び/又は遠心分離処理等が 挙げられる。緑茶抽出物水溶液を固液分離し て得られる水溶性部分である緑茶抽出物水溶 液の濁度は、0.1~100NTU、より好ましくは0.5~70NT U、更に好ましくは1~50NTUであると、飲料の呈� ��及び安定性の点で好ましい。

 固液分離の方法は、食品工業で使用できる� ��法が適用できる。例えば、固液分離を膜ろ� ��で行う場合の膜ろ過条件としては、温度が5 ~70℃、更に10~40℃であるのが好ましい。膜孔� ��は、所定の濁度になるという点から、0.1~10� �mが好ましく、更に0.1~5μm、特に0.1~2μmである のがろ過に要する時間及び濁り成分の分離性 の点から好ましい。膜孔径の測定方法は、水 銀圧入法、バブルポイント試験、細菌ろ過法 などを用いた一般的な測定方法が挙げられる が、バブルポイント試験で求めた値を用いる のが好ましい。膜ろ過で使用する膜の材質は 、高分子膜、セラミック膜、ステンレス膜等 が使用できる。
 また、遠心分離機は、分離板型、円筒型、� ��カンター型などの一般的な機器が好ましい� ��遠心分離条件としては、温度が5~70℃、更に 10~40℃であるのが好ましく、回転数と時間は� ��所定の濁度になるように調整された条件で� ��ることが望ましい。例えば分離板型の場合� ��3000~10000rpm、更に5000~10000rpm、特に6000~10000rpm� ��、0.2~30分、更に0.2~20分、特に0.2~15分である� ��が好ましい。

 また、飲料の色調安定の観点から、非重� ��体カテキン類の溶出液を脱色することが好� ��しい。具体的な脱色操作としては、精製緑� ��抽出物をそのまま、又は水若しくは有機溶� ��水溶液に分散又は溶解し、活性炭、活性白� ��及び酸性白土から選ばれる少なくとも1種に 接触させることにより、脱色することができ る。なお、接触処理方法は、上記と同様の方 法を採用することができる。

 緑茶抽出物は、更に苦味を低減したい場合� ��タンナーゼ活性を有する酵素で処理するこ� ��ができる。呈味の点から合成吸着剤に吸着� ��る前に酵素処理することが好ましい。その� ��でもタンナーゼが好ましい。例えば、アス� ��ルギルス属、ペニシリウム属、リゾプス属� ��タンナーゼ生産菌を培養して得られるタン� ��ーゼが挙げられる。このうちアスペルギル� �� オリーゼ由来のものが好ましい。
 具体的には、タンナーゼ活性を有する酵素� ��して市販品では、ペクチナーゼPLアマノ(天� ��エンザイム社製)、ヘミセルラーゼアマノ90( 天野エンザイム社製)、タンナーゼKTFH(キッコ ーマン社製)等が利用できる。本発明で行う� �ンナーゼ活性を有する酵素処理、即ち酵素� �応は、タンニンアシルヒドラーゼEC3.1.1.20な� ��で行うことが好適である。市販品としては� ��商品名「タンナーゼ」キッコーマン(株)製� �びタンナーゼ「三共」三共(株)製などが挙げ られる。
 本発明で使用するタンナーゼ活性を有する� ��素は、500~100,000U/gの酵素活性を有すること� �好ましく、500U/g以下であると工業的に限ら� �た時間内で処理するためには多量の酵素が� �要となり、100,000U/g以上であると酵素反応速� ��が速すぎる為、反応系を制御することが困� ��となる。ここで1Unitは30℃の水中においてタ ンニン酸に含まれるエステル結合を1マイク� �モル加水分解する酵素量を示す。ここでタ� �ナーゼ活性を有するとは、タンニンを分解� �る活性を有するものであり、本活性を有す� �ば任意の酵素が使用できる。

 タンナーゼ活性を有する酵素で処理すると� ��の非重合体カテキン類の濃度は、好ましく� ��0.1~22質量%、更に好ましくは0.1~15質量%、特� �好ましくは0.5~10質量%、殊更好ましくは0.5~3� �量%である。
 緑茶抽出物中の非重合体カテキン類に対し� ��タンナーゼ活性を有する酵素を、好ましく� ��1~300Unit/g-非重合体カテキン類、更に好まし� ��は3~200Unit/g-非重合体カテキン類、特に好ま� ��くは5~150Unit/g-非重合体カテキン類になるよ� ��に添加する。
 酵素処理の温度は、最適な酵素活性が得ら� ��る0~70℃が好ましく、更に好ましくは0~60℃� �特に好ましくは5~50℃である。

 酵素反応を終了させるには、酵素活性を失� ��させる。酵素失活の温度は、70~100℃が好ま� ��く、また、その保持時間は、10秒から20分が 好ましい。失活温度が低すぎると酵素を短時 間で充分に失活することが困難であるため反 応が進行し、所望の非重合体カテキン類ガレ ート体率の範囲内で酵素反応を停止すること ができない。又、失活温度に到達してから保 持時間が短すぎると酵素活性を充分に失活さ せることが困難であるため、酵素反応が進行 する。また、保持時間が長すぎると非重合体 カテキン類の非エピメリ化が起こる場合があ り好ましくない。
 酵素反応の失活方法は、バッチ式もしくは� ��レート型熱交換機のような連続式で加熱を� ��うことで停止することができる。又、タン� ��ーゼ処理の失活終了後、遠心分離などの操� ��により茶抽出物を清浄化することができる� ��

 このようにして得られた精製緑茶抽出物は� ��該精製緑茶抽出物を非重合体カテキン類濃� ��0.2質量%となるように調整し分光光度計によ り480nmにおける吸光度(OD480)を測定したときの 値が0.06以下、好ましくは0.05以下、より好ま� ��くは0.04以下とすることができる。
 したがって、本発明の精製緑茶抽出物は、� ��味と後味が改善されるだけでなく、着色も� ��制されているため幅広い用途展開が可能で� ��り、例えば、本発明の精製緑茶抽出物をそ� ��まま食品又は飲料に配合して使用すること� ��できる。その場合、減圧濃縮、薄膜濃縮な� ��の方法により溶媒を除去してもよい。また� ��製緑茶抽出物の製品形態として粉体が望ま� ��い場合は、噴霧乾燥や凍結乾燥等の方法に� ��り粉体化することができる。本発明で得ら� ��た精製緑茶抽出物は、苦味及び後味が低減� ��れていることから、飲料だけでなく種々の� ��品に原料として配合することができる。こ� ��うち、容器詰飲料とするのが特に好ましい� ��

 本発明の精製緑茶抽出物を用いた食品又� ��容器詰飲料の非重合体カテキン類の濃度を0 .05~0.5質量%、好ましくは0.06~0.5質量%、更に0.08 ~0.5質量%、更に好ましくは0.092~0.4質量%、殊更 好ましくは0.11~0.3質量%、特に好ましくは0.12~0 .3質量%に調整すると、深みがあり、雑味がな く良好な風味の食品又は容器詰飲料が得られ る点で好ましい。

 本発明の容器詰飲料は、苦渋味抑制剤を� ��合すると飲用しやすくなり好ましい。用い� ��苦渋味抑制剤としては、サイクロデキスト� ��ンが好ましい。サイクロデキストリンとし� ��は、α-、β-、γ-サイクロデキストリン及び� ��岐α-、β-、γ-サイクロデキストリンが使用� ��きる。本発明の容器詰飲料には、酸化防止� ��、香料、各種エステル類、有機酸類、有機� ��塩類、無機酸類、無機酸塩類、無機塩類、� ��素類、乳化剤、保存料、調味料、甘味料、� ��味料、ガム、油、ビタミン、アミノ酸、果� ��エキス類、野菜エキス類、花蜜エキス類、p H調整剤、品質安定剤等の添加剤を単独、あ� �いは併用して配合してもよい。

 本発明の容器詰飲料のpHは、25℃で2~7、好 ましくは2~6.5とするのが呈味及び非重合体カ� ��キン類の安定性の点で好ましい。

 本発明の容器詰飲料においても、非重合� ��カテキン類の生理効果を得るための一日当� ��の必要摂取量を確保する意味からも、非重� ��体カテキン類を本発明の容器詰飲料1本(350~5 00mL)当り300mg以上、好ましくは450mg以上、更に 好ましくは500mg以上の配合量であるものがよ� ��。

 本発明の容器詰飲料に使用される容器は� ��ポリエチレンテレフタレートを主成分とす� ��成形容器(いわゆるPETボトル)、金属缶、金� �箔やプラスチックフィルムと複合された紙� �器、瓶等の通常の形態で提供することがで� �る。

 また上記の容器詰飲料は、例えば、金属� ��のように容器に充填後、加熱殺菌できる場� ��にあっては食品衛生法に定められた殺菌条� ��で製造される。PETボトル、紙容器のように� ��トルト殺菌できないものについては、あら� ��じめ上記と同等の殺菌条件、例えばプレー� ��式熱交換器などで高温短時間殺菌後、一定� ��温度迄冷却して容器に充填する等の方法が� ��用される。また無菌下で、充填された容器� ��別の成分を配合して充填してもよい。