喹唑淋衍生物及用途

技术领域

本发明涉及一类结构新颖的舍异噁唑杂环的喹 唑啉衍生物及含该类衍生物的药物组合物及 其用途，具体而言，涉及具有抑制表皮生长因 子蛋白酪氣酸激 (EGFR-TK)活性的喹唑淋化合 物或其药物組合物，该类化合物或其盐具有抑 制大肠癌细! &株 (HCT-116)和人肺癌细肐林 (A549) 活性， 部分化合物对表皮生长因子受体鉻氣酸激醉 ( EGFR-TK )具有较强的抑制活性， 该类 物质可作为治疗与蛋白輅氨酸激眸有关的肿瘤 、 癌症等疾病的药物或先导化合物. 背景技术

表皮生长因子（ Epidermal Growth Factor, EGF )与表皮生长因子受体（ Epidermal Growth Factor Receptor, EGFR )结合可以激活路氨酸激酶的活性， 并因此激活导致细胞增殖的反应. EGFR的过度表达和活性增强可以最终导致不可� �的细胞分裂.

表皮生长因子受体鉻氛酸激酵 (EGFR-TK)是最早发现的蛋白路氨酸激醉，广泛地 分布于人 组织的细胞膜上， 其在大多 ¾Jit瘤 (如： 膀耽癌、 非小细 J ^癌、 卵巢癌、 乳腺癌、 胃癌、 食道癌等)中过表达， EGFR的胞内区有三碑 «^(ATP)的结合位点， EGFR抑制剂可以竟争 性的与 ATP结合位点相结合， 从而抑制 EGFR的磷酸化， 阻断下游信号的传导， 进而抑制肿 瘤细胞的生长、分化和转移.以 EGFR受体为耙点进行耙向治疗肿瘤是当今癌症� �疗中研究十 分活跃的领域之一.在临床研究中也已经取得� �显著的疗效. 其中以喹唑啉为母核的小分子化 合物研究最为突出.

专利申请公开号 W096/33977、 W096/33978, W096/33979、 WO%/33980、 W096/33981、 WO97/30034 , WO97/30035、 W097/38994、 W098/13354、 WO00/55141、 WO00/56720、 WO02/41882, WO03/82290, EP566226和 EP837063公开了在 4 上携带苯胺基取代和在 6- 和 /或 7 上携带取^ ^的某些喹唑啉化合物， 具有受体酸氣酸激醉抑制活性. 上述所有文献 引 文作为参考.

3-二卤代苯胺基)喹唑啉化合物， 所述化合物是 erbB尤其是 EGFR駱氨酸激醉抑制剂 .上述所 有文献引^^文作为参考.

替换页 （细则第 26条) 基于 EGFR受体和以喹唑啉为母核的小分子抗肿瘤药� �如： 吉非替尼 (易瑞沙)、 厄罗替尼 和拉帕替尼已相继被 FDA批准用于临床。 我国王印祥博士和丁列明博士研发的基于厄罗 替尼 (特罗凯)的 EGFR受体抑制剂埃克替尼 (凯美纳)， 三期临床研究表明其疗效和厄罗替尼相当， 安全性更好， 给药剂量和方案更适合中国人， 已于 2011年 6月被中国食品药品监督管理局批 准用于晚期非小细胞肺癌的治疗。

本发明基于厄罗替尼和埃克替尼， 将异噁唑杂环引入喹唑啉母核， 合成了一系列含异噁唑 杂环的喹唑啉化合物，体外抑制表皮生长因子 蛋白酪氨酸激酶 (EGFR-TK)活性表明该类化合物 具有较强的抑 EGFR-TK活性， 可作为抗肿瘤药物或者先导化合物。 发明内容

本发明的目的在于， 提供了如式 (I)所示的含异噁唑杂环的喹唑啉化合物。 经过活性研究表 明， 以该化合物作为活性成分具有抑制 EGFR-TK活性。 以该化合物作为活性成分抗大肠癌细 胞株 (HCT-116)和人肺癌细胞株 (A549)活性， 可作为抗肿瘤的先导化合物。 同时该化合物单独 或结合一种或几种药学上可接受的、 惰性的、 无毒的赋形剂或载体组成药物组合物。

本发明通过如下技术方案实现：

一种式 (I)所示的喹唑啉化合物或 上可接受的盐

其中，

、 和11 ₇ 各自独立地选自氢， C _1-6 烷基， C _1-6 烷氧基， 羟基 C 烷基， 羟基 C _1-6 烷氧基， 卤代 C _1-6 烷基， 卤代 C _1-6 烷氧基， C _1-6 烷氧基 C _1-6 烷氧基， C _3-8 环烷氧基， 任选被 R6取代的芳 基， 任选被 取代的杂芳基， 硝基， 氨基， C _1-6 烷基 二（C _1-6 烷基） 含有至少一 个选自 N， 0， S杂原子的 杂环烷氧基；

Z为 -NR4-, C(R ₅ ) ₂ ， S或 -0-, 其中 为氢或 C _1-3 坑基， R ₅ 相同或不同， 选自氢或 C _1-3 烷 基；

R ₃ 选自氢、 卤素， C _1-6 烷基、 C _1-6 烷氧基或卤代 C _1-6 烷基； R6各自独立地选自氢， 羟基， 巯基， 氰基， 硝基， 卤素， c _1-6 烷基， c _1-6 烷氧基； C _1-6 烷硫基， 卤代 C _1-6 烷基， 或卤代 C _1-6 烷氧基； n为 0-5的整数。

根据本发明的优选技术方案， 式（I ) 中，

、 和11 ₇ 各自独立地选自氢， C _1-3 烷基， C _1-3 烷氧基， C _1-3 烷氧基 C _1-3 烷氧基， 任选被 取代的苯基， 任选被 取代的吡啶基， 硝基， 含有至少一个选自 N, O, S杂原子的 C _3-8 杂环烷氧基；

Z为 -NH-, CH ₂ 或 -0-; R ₃ 选自氢、 氟、 氯、 溴、 甲基、 曱氧基或三氟曱基， n优选为 1-4， 更优选 2-3。

根据本发明的优选技术方案， 式（ I ) 中：

、 和11 ₇ 各自独立地选自氢， C _1-3 烷基， C _1-3 烷氧基， C _1-6 烷氧基 C _1-6 烷氧基， 任选被 取代的苯基， 硝基；

Z为 -NH-, -CH ₂ 或 -0-; R6各自独立选自氢， d~C ₃ 烷基， 羟基， 卤素， C _1-3 烷氧基；

R ₃ 选自氢、 氟、 氯、 溴、 曱基、 甲氧基或三氟曱基， n优选为 1-4， 更优选 2-3。

根据本发明的更优选技术方案， 式（I ) 中： Z为 -NH-或 -0-; 和 为氢， C _1-3 烷氧基，

Ci _-3 烷氧基 d_ ₃ 烷氧基或硝基； R ₇ 为氢或苯；

R6各自独立选自氢， 坑基， 羟基， 卤素， C _1-3 烷氧基； R ₃ 在异噁唑环的邻位或对位， 更优选为 4-氟、 4-氯、 2-氯、 4-溴、 2,4-二氯、 4-曱基、 4-甲氧基、 氢、 4-三氟曱基或 2,4-二甲 氧基。

根据本发明， 还提供一种式IA)所示的喹唑啉化合物， 或其药学上可接受的盐

其中， 和 各自独立地选自氢， C _1-6 烷基， C _1-6 烷氧基， 羟基 C _1-6 烷基， 羟基 C _1-6 烷氧 基， 卤代 C _1-6 烷基， 卤代 C _1-6 烷氧基， C _1-6 烷氧基 C _1-6 烷氧基， C _3-8 环烷氧基， 任选被 R6取代 的芳基， 任选被 取代的杂芳基， 硝基， 氨基， C _1-6 烷基氨基， 二（C _1-6 烷基）氨基； 含有至 少一个选自 N， O, S杂原子的 杂环烷氧基；

Z为 -NR4-, C(R ₅ ) ₂ ， S或 -0-, 其中 为氢或 C _1-3 坑基， R ₅ 相同或不同， 选自氢或 C _1-3 烷 基；

R ₃ 选自氢、 卤素， C _1-6 烷基、 C _w 烷氧基或卤代 C _1-6 烷基；

R6各自独立地选自氢， 羟基， 巯基， 氰基， J-, 硝基， 卤素， C _1-6 烷基， C _1-6 烷氧基； C _1-6 烷硫基， 卤代 C _1-6 烷基， 或卤代 C _1-6 烷氧基； n为 0-5的整数。

根据本发明， 式（IA )中， 和 各自独立地选自氢， C _1-6 烷基， C _1-6 烷氧基， 卤代 C _1-6 烷氧基， C _1-6 烷氧基 C _1-6 烷氧基， C _3-8 环烷氧基， 含有至少一个选自 N， O, S杂原子的 C _3-8 杂环烷氧基；

Z为 -NR4-, C(R ₅ ) ₂ ， S或 -0-， 其中 R4为氢或 d Cs)^基， R ₅ 相同或不同， 选自氢或 C _1-3 烷基；

R ₃ 选自氢、 卤素， C _w 烷基、 C _w 烷氧基或卤代 C _w 烷基； n为 0-5的整数。

根据本发明的优选技术方案， 式（IA ) 中： 和 R ₂ 为氢， C _1-3 烷氧基， C _1-6 烷氧基 C _1-6 烷氧基， 含有至少一个选自 N, O, S杂原子的 C _3-8 杂环烷氧基； Z为 -NH-, CH ₂ 或 -0-;

R ₃ 选自氢、 氟、 氯、 溴、 曱基、 甲氧基或三氟曱基， n优选为 1-4， 更优选 2-3。

根据本发明的更优选技术方案， 式（IA )中： Z为 -NH-或 -0-; 和 为氢， C _1-3 烷氧基，

C _1-3 烷氧基 C _1-3 烷氧基； R ₃ 优选在异噁唑环的邻位或对位， 更优选为 4-氟、 4-氯、 2-氯、 4-溴、

2,4-二氯、 4-甲基、 4-曱氧基、 氢、 4-三氟曱基或 2,4-二甲氧基。

根据本发明， 还提供一种式IB)所示的喹唑啉衍生物， 或其药学上可接受的盐

其中： 和11 ₇ 各自独立地选自氢， C _1-6 烷基， C _1-6 烷氧基， 羟基 C _1-6 烷基， 羟基 C _1-6 烷氧 基， 卤代 C _1-6 烷基， 卤代 C _1-6 烷氧基， C _1-6 烷氧基 C _1-6 烷氧基， C _3-8 环烷氧基， 任选被 R6取代 的芳基， 任选被 取代的杂芳基， 硝基， 氨基， C _1-6 烷基氨基， 二（C _1-6 烷基）氨基； 含有至 少一个选自 N， O, S杂原子的 杂环烷氧基；

Z为 -NR4-, C(R ₅ ) ₂ ， S或 -0-, 其中 为氢或 C _1-3 坑基， R ₅ 相同或不同， 选自氢或 C _1-3 烷 基；

R ₃ 选自氢、 卤素， C _1-6 烷基、 C _1-6 烷氧基或卤代 C _1-6 烷基； R6各自独立地选自氢， 羟基， 巯基， 氰基， 硝基， 卤素， c _1-6 烷基， c _1-6 烷氧基； C _1-6 烷硫基， 卤代 C _1-6 烷基， 或卤代 C _1-6 烷氧基； n为 0-5的整数。

根据本发明的式（IB )， 其中， 和 R ₇ 各自独立地选自氢， C _1-6 坑基， C _1-6 烷氧基， 卤代 C _1-6 烷基， 卤代 C _1-6 烷氧基， C _1-6 烷氧基 C _1-6 烷氧基， C _3-8 环烷氧基， 任选被 R6取代的芳基， 任选被 R6取代的杂芳基， 硝基， 氨基， C _1-6 烷基氨基， 二（C _1-6 烷基）氨基；

Z为 -NR4-, C(R ₅ ) ₂ , -S-或 -0-, 其中 R4为氢或 C _1-3 坑基， R ₅ 相同或不同， 选自氢或 C _1-3 烷基；

R ₃ 选自氢、 卤素， C _1-6 烷基、 C _w 烷氧基或卤代 C _1-6 烷基；

R6各自独立地选自氢， 羟基， 巯基， 氰基， J-, 硝基， 卤素， C _1-6 烷基， C _1-6 烷氧基； C _1-6 烷硫基， 卤代 C _1-6 烷基， 或卤代 C _1-6 烷氧基； n为 0-5的整数。

根据本发明的优选技术方案， 式（ IB ) 中：

R ₇ 和 R ₂ 各自独立地选自氢， C _1-3 烷基， C _1-3 烷氧基， C _1-6 烷氧基 C _1-6 烷氧基， 任选被 R6 取代的苯基， 硝基； Z为 -NH -， -CH ₂ 或 -0-;

R ₃ 选自氢、 氟、 氯、 溴、 曱基、 甲氧基或三氟曱基， n优选为 1-4， 更优选 2-3。

根据本发明的更优选技术方案， 式（ IB ) 中：

Z为 -NH-或 -0-; R ₇ 优选为氢或苯， R ₂ 优选为氢或硝基，

R ₃ 优选在异噁唑环的邻位或对位， 更优选为 4-氟、 4-氯、 2-氯、 4-溴、 2,4-二氯、 4-曱基、 4-曱氧基、 氢、 4-三氟曱基或 2,4-二甲氧基。

根据本发明， 更优选所述式 (I)所示的喹唑啉化合物选自下述任一种化合物 或其药学上可接 受的盐：

4-[(3-苯基-异噁唑 -5-基) -甲氧基-】 -喹唑啉；

4-{[3-(4-氟苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲氧基+喹唑啉；

4-{[3-(4-氯苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲氧基+喹唑啉；

4-{[3-(2-氯苯基) -异噁唑 -5-基卜甲氧基+喹唑啉；

4-{[3-(4-溴苯基) -异噁唑 -5-基】-甲氧基+喹唑啉；

4-{ [3-(2，4-二氯苯基) -异噁唑 -5-基】 -曱氧基+喹唑啉；

4-{[3-(4-曱基苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲氧基+喹唑啉；

4-{ [3-(4-曱氧基苯基) -异噁唑 -5-基】 -曱氧基 +喹唑啉；

4-{[3-(4-三氟甲基苯基) -异噁唑 -5-基】 -曱氧基+喹唑啉； 4-{[3-(2，4-二甲氧基苯基) -异噁唑 -5-基卜甲氧基 +喹唑啉；

6,7-二甲氧基 -4-[(3-苯基-异噁唑 -5-基) -甲氧基-】 -喹唑啉；

6,7-二曱氧基 -4-{[3-(4-氟苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲氧基+喹唑啉；

6,7-二甲氧基 -4-{[3-(4-氯苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲氧基+喹唑啉；

6,7-二曱氧基 -4-{[3-(2-氯苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲氧基+喹唑啉；

6,7-二甲氧基 -4-{[3-(4-溴苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲氧基+喹唑啉；

6,7-二曱氧基 -4-{[3-(2，4-二氯苯基) -异噁唑 -5-基】 -曱氧基+喹唑啉；

6,7-二甲氧基 -4-{[3-(4-甲基苯基) -异噁唑 -5-基】 -曱氧基+喹唑啉；

6,7-二曱氧基 -4-{[3-(4-甲氧基苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲氧基+喹唑啉；

6,7-二甲氧基 -4-{[3-(4-三氟甲基苯基) -异噁唑 -5-基卜甲氧基+喹唑啉；

6,7-二曱氧基 -4-{[3-(2，4-二甲氧基苯基) -异噁唑 -5-基】 -曱氧基+喹唑啉；

[6,7-二 (2-甲氧乙氧基 )】-4-[(3-苯基-异噁唑 -5-基) -甲氧基-】 -喹唑啉；

[6,7-二 (2-甲氧乙氧基 )】-4-{[3-(4-氟苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲氧基+喹唑啉；

[6,7-二 (2-甲氧乙氧基 )】-4-{[3-(4-氯苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲氧基+喹唑啉；

[6,7-二 (2-甲氧乙氧基 )】-4-{[3-(2-氯苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲氧基+喹唑啉；

[6,7-二 (2-甲氧乙氧基 )】-4-{[3-(4-溴苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲氧基+喹唑啉；

[6,7-二 (2-甲氧乙氧基 )】-4-{[3-(2，4-二氯苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲氧基+喹唑啉；

[6,7-二 (2-甲氧乙氧基 )】-4-{[3-(4-甲基苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲氧基 +喹唑啉；

[6,7-二 (2-甲氧乙氧基 )】-4-{[3-(4-甲氧基苯基) -异噁唑 -5-基】 -曱氧基+喹唑啉；

[6,7-二 (2-甲氧乙氧基 )】-4-{[3-(4-三氟甲基苯基) -异噁唑 -5-基卜甲氧基+喹唑啉；

[6,7-二 (2-甲氧乙氧基 )】-4-{[3-(2，4-二曱氧基苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲氧基+喹唑啉;

4-[(3-苯基-异噁唑 -5-基) -甲氨基-】 -喹唑啉；

4-{[3-(4-氟苯基) -异噁唑 -5-基卜甲 -}-喹唑啉；

4-{[3-(4-氯苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲 -}-喹唑啉；

4-{[3-(2-氯苯基) -异噁唑 -5-基卜甲氨基+喹唑啉；

4-{[3-(4-溴苯基) -异噁唑 -5-基卜甲 喹唑啉；

4-{ [3-(2，4-二氯苯基) -异噁唑 -5-基】 -曱氨基+喹唑啉；

4-{[3-(4-曱基苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲 喹唑啉；

4-{[3-(4-曱氧基苯基) -异噁唑 -5-基】 -曱 -}-喹唑啉； 4-{[3-(4-三氟甲基苯基)-异噁唑 -5-基】 -曱氨基+喹唑啉；

4-{[3-(2，4-二甲氧基苯基) -异噁唑 -5-基卜甲 喹唑啉；

6,7-二曱氧基 -4-[(3-苯基-异噁唑 -5-基) -甲 JH-喹唑啉；

6,7-二甲氧基 -4-{[3-(4-氟苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲 喹唑啉；

6,7-二曱氧基 -4-{[3-(4-氯苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲 -}-喹唑啉；

6,7-二甲氧基 -4-{[3-(2-氯苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲 喹唑啉；

6,7-二曱氧基 -4-{[3-(4-溴苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲 -}-喹唑啉；

6,7-二甲氧基 -4-{[3-(2，4-二氯苯基) -异噁唑 -5-基】 -曱氧基+喹唑啉；

6,7-二曱氧基 -4-{[3-(4-甲基苯基) -异噁唑 -5-基】 -曱氨基+喹唑啉；

6,7-二甲氧基 -4-{[3-(4-甲氧基苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲 喹唑啉；

6,7-二曱氧基 -4-{[3-(4-三氟曱基苯基) -异噁唑 -5-基卜甲 喹唑啉；

6,7-二甲氧基 -4-{[3-(2，4-二甲氧基苯基) -异噁唑 -5-基】 -曱氨基+喹唑啉;

[6,7-二 (2-甲氧乙氧基)】 -4-[(3-苯基-异噁唑 -5-基) -甲 喹唑啉；

[6,7-二 (2-甲氧乙氧基)】 -4-{[3-(4-氟-苯基)-异噁唑 -5-基】 -曱氨基+喹唑啉；

[6,7-二 (2-甲氧乙氧基)】 -4-{[3-(4-氯苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲 M^-}-喹唑啉；

[6,7-二 (2-甲氧乙氧基)】 -4-{[3-(2-氯苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲 喹唑啉；

[6,7-二 (2-甲氧乙氧基)】 -4-{[3-(4-溴苯基) -异噁唑 -5-基卜甲 M^-}-喹唑啉；

[6,7-二 (2-甲氧乙氧基)】 -4-{[3-(2，4-二氯苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲 喹唑啉；

[6,7-二 (2-甲氧乙氧基)】 —4-{[3-(4-甲基苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲氨基+喹唑啉；

[6,7-二 (2-甲氧乙氧基)】 -4-{[3-(4-甲氧基苯基) -异噁唑 -5-基】 -曱氨基+喹唑啉；

[6,7-二 (2-甲氧乙氧基)】 -4-{[3-(4-三氟曱基苯基) -异噁唑 -5-基卜甲 喹唑啉；

[6,7-二 (2-甲氧乙氧基)】 -4-{[3-(2，4-二甲氧基苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲 喹唑啉;

2-苯基 -4-[(3-苯基-异噁唑 -5-基) -曱氧基小喹唑啉；

2-苯基 -4-{[3-(4-曱基-苯基) -异噁唑 -5-基】 -曱氧基+喹唑啉；

2-苯基 -4-{[3-(4-曱氧基苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲氧基 +喹唑啉；

2-苯基 -4-{[3-(4-三氟甲基苯基) -异噁唑 -5-基卜甲氧基+喹唑啉；

2-苯基 -4-{[3-(2，4-二甲氧基苯基) -异噁唑 -5-基】 -曱氧基+喹唑啉;

2-苯基 -4-{[3-(4-氟苯基) -异噁唑 -5-基】 -曱氧基+喹唑啉；

2-苯基 -4-{[3-(4-氯苯基) -异噁唑 -5-基】 -曱氧基+喹唑啉； -苯基 -4-{ [3- (2-氯苯基) -异噁唑 -5-基】國曱氧基+喹唑啉；

-苯基 -4-{ [3- (2,4-二氯苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲氧基+喹唑啉；-苯基 -4-{ [3- (4-溴苯基) -异噁唑 -5-基】國曱氧基+喹唑啉；

-苯基 -4-[ (3-苯基-异噁唑 -5-基) -曱氨基小喹唑啉；

-苯基 -4-{ [3- (4-曱基-苯基) -异噁唑 -5-基】 -曱 -}-喹唑啉；

-苯基 -4-{ [3- (4-曱氧基苯基) -异噁唑 -5-基卜甲 喹唑啉；-苯基 -4-{ [3- (4-三氟曱基苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲 -}-喹唑啉；-苯基 -4-{ [3- (2,4-二甲氧基苯基) -异噁唑 -5-基】 -曱氨基+喹唑啉;-苯基 -4-{ [3- (4-氟苯基) -异噁唑 -5-基】 -曱氨基+喹唑啉；

-苯基 -4-{ [3- (4-氯苯基) -异噁唑 -5-基】 -曱氨基+喹唑啉；

-苯基 -4-{ [3- (2-氯苯基) -异噁唑 -5-基】 -曱氨基+喹唑啉；

-苯基 -4-{ [3- (2,4-二氯苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲氨基+喹唑啉；-苯基 -4-{ [3- (4-溴苯基) -异噁唑 -5-基】 -曱氨基+喹唑啉； 一硝基一4-[ (3-苯基-异噁唑 -5-基) -曱氧基-】 -喹唑啉；

-硝基 -4-{ [3- (4-曱基-苯基) -异噁唑 -5-基】 -曱氧基+喹唑啉； 一硝基一4-{ [3- (4-曱氧基苯基) -异噁唑 -5-基卜甲氧基+喹唑啉；-硝基 -4-{ [3- (4-三氟曱基苯基) -异噁唑 -5-基卜甲氧基+喹唑啉； 一硝基一4-{ [3- (2,4-二甲氧基苯基) -异噁唑 -5-基】國曱氧基+喹唑啉;-硝基 -4-{ [3- (4-氟苯基) -异噁唑 -5-基】 -曱氧基+喹唑啉； 一硝基一4-{ [3- (4-氯苯基) -异噁唑 -5-基】 -曱氧基+喹唑啉；

-硝基 -4-{ [3- (2-氯苯基) -异噁唑 -5-基】國曱氧基+喹唑啉； 一硝基一4-{ [3- (2,4-二氯苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲氧基+喹唑啉；-硝基 -4-{ [3- (4-溴苯基) -异噁唑 -5-基】國曱氧基+喹唑啉； 一硝基一4-[ (3-苯基-异噁唑 -5-基) -曱氨基小喹唑啉；

-硝基 -4-{ [3- (4-曱基-苯基) -异噁唑 -5-基】 -曱 -}-喹唑啉； 一硝基一4-{ [3- (4-曱氧基苯基) -异噁唑 -5-基卜甲 喹唑啉；-硝基 -4-{ [3- (4-三氟曱基苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲 -}-喹唑啉； 一硝基一4-{ [3- (2,4-二甲氧基苯基) -异噁唑 -5-基】 -曱氨基+喹唑啉;-硝基 -4-{ [3- (4-氟苯基) -异噁唑 -5-基】 -曱氨基+喹唑啉； ₇ _硝基 _4-{[3-(4-氯苯基) -异噁唑 -5-基】 -曱氨基+喹唑啉；

₇ —硝基 _4-{[3-(2-氯苯基) -异噁唑 -5-基】 -曱氨基+喹唑啉；

7-硝基 -4-{[3-(2，4-二氯苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲 J~-}-喹唑啉； 和

₇ -硝基 _4-{[3-(4-溴苯基) -异噁唑 -5-基】 -曱氨基+喹唑啉。

式 (I)所示的喹唑啉化合物， 可以分别选择与药学上可接受的酸形成药学上 可接受的盐。 其 中术语"药学上可接受的盐"包括但不限于与无� ��酸形成的盐， 如盐酸盐、 磷酸盐、 二磷酸盐、 氢溴酸盐、 硫酸盐、 亚磺酸盐、 硝酸盐、 及其类似盐； 也包括与有机酸形成的盐， 如草酸盐、 苹果酸盐、 马来酸盐、 富马酸盐、 酒石酸盐、 琥珀酸盐、 柠檬酸盐、 乳酸盐、 磺酸盐、 对曱苯 磺酸盐、 2-羟乙基磺酸盐、 苯曱酸盐、 水杨酸盐、 硬脂酸盐、 三氟乙酸或氨基酸和链烷酸盐如 醋酸盐， HOOC-(CH2)n-COOH其中 n是 0-4的盐， 及其类似盐。 类似地， 药学上可接受的阳 离子包括但不限于钠、 钾、 钙、 铝、 锂和铵。

本发明还提供一种药物组合物， 其包括前述任一项的式 (I)所示的喹唑啉化合物， 或其药学 上可接受的盐， 以及至少一种药学上可接受的、 惰性的、 无毒的赋形剂或载体或稀释剂。

本发明还提供一种包括前述任一项的式 (I)所示的喹唑啉衍生物和医学上可接受的一种 或 多种选自填充剂、 崩解剂、 润滑剂、 助流剂、 泡腾剂、 矫味剂、 防腐剂和包衣材料形成的药物 组合物。

本发明还提供一种药物制剂， 其包括前述任一项的式 (I)所示的喹唑啉化合物， 或其药学上 可接受的盐， 以及至少一种药学上可接受的、 惰性的、 无毒的赋形剂或载体或稀释剂。

根据本发明的药物制剂 , 其特征在于， 所述制剂优选为固体口服制剂、 液体口服制剂或注 射剂。

根据本发明的药物制剂， 所述制剂选自片剂、 片、 肠溶片、 嚼片、 口崩片、 胶嚢、 颗粒剂、 口服溶液剂、 注射用水针、 注射用冻干粉针、 大输液或小输液。

本发明还提供用作药物的前述任一项的式 (I)所示的喹唑啉化合物或其药学上可接受的盐 ， 尤其是一种用于治疗对于抑制 EGFR过渡表达和 /或活性过高有效的肿瘤的药物。

本发明还提供一种前述任一项的式 (I)所示的喹唑啉化合物或其药学上可接受的盐 在制备 用于抗肿瘤或癌症药物中的应用。

根据本发明， 所述的肿瘤或癌症是与 EGFR过渡表达和 /或活性过高的癌症。 更优选地， 所述肿瘤或癌症选自： 膀胱癌， 非小细胞肺癌， 卵巢癌， 乳腺癌， 胃癌， 食道癌， 肺癌， 头颈 癌， 结肠癌， 咽癌， 和胰腺癌等， 更是非小细胞肺癌中的应用。 本发明还提供一种前述任一项的式 (I)所示的喹唑啉化合物和 /或药学上可接受的盐在制备 抑制 EGFR的过渡表达和 /或活性过高的抑制剂中的应用。

本发明还提供一种式 (I)所示的含异噁唑杂环的喹唑啉化合物的制备 方法， 其特征在于， 所 述方法包括如下步骤：

以 2， 6, 7-三取代 -4-氯-喹唑啉（式 II )和 3-取代苯基 -5-羟曱基-异噁唑（式 III )或 3-取代 苯基 -5-氨 基-异噁唑（式 IV )为原料， 在干燥的有机溶剂和碱性缚酸剂体系中反应制 备。

其中， 各取代基如前述所定义。

如果需要， 可以将式（II ) 中的任何官能团予以保护。

并且其后， 如果有必要（以任何次序）：

( 1 )除去任何保护剂， 和

( 2 )形成式 I化合物的药学上可接受的盐。

同时， 对于 Z为其他取代基的式（I )化合物， 例如 R ₅ 为其他取代基的 -NR ₅ , C(R6) ₂ ， S 时， 可采用 （II )与 -NH ( R ₅ )或 C1-C(R6) ₂ 或 3-取代苯基 -5-巯基异噁唑通过相应的偶联反应 制备， 其中 3-取代苯基 -5-巯基异噁唑以丙炔硫醇为原料， 采用式（ III )的合成过程制备。

根据本发明， 所述反应温度为 -20°C至回流条件， 优选室温至回流条件。

根据本发明，所述有机溶剂为芳烃，卤代烃， C _w 低级醇类，四氢呋喃或二甲基亚砜（ DMF )。 优选所述溶剂为苯、 曱苯、 二曱苯、 二氯曱烷、 氯仿、 异丙醇、 四氢呋喃或 DMF， 更优选异 丙醇。

根据本发明， 所述碱性縛酸剂为有机碱或无机碱， 所述有机碱优选为三乙胺、 三丙胺、 DMAP、叔丁醇钾等； 所述无机碱优选为碳酸钾、 氢化钠、碳酸钠等。优选的缚酸剂为三乙胺。

本发明还提供一种式 (IA)所示的含异噁唑杂环的喹唑啉化合物的制� �方法， 其特征在于， 所述方法包括如下步骤：

以 6,7-二取代 4-氯-喹唑啉（式 IIA )和 3-取代苯基 -5-羟曱基-异噁唑（式 III )或 3-取代苯 基 -5-氨曱基-异噁唑（式 IV )为原料， 在干燥的有机溶剂和碱性縛酸剂体系中反应制 备。

如果需要， 可以将式（IIA )中的任何官能团予以保护。 并且其后， 如果有必要（以任何次 序）：

( 1 )除去任何保护剂， 和

( 2 )形成式（IA-1 )或 （IA-2 )化合物的药学上可接受的盐。

其中， 各取代基如前述所定义。

根据本发明， 所述反应温度为 -20°C至回流条件， 优选室温至回流条件。

根据本发明， 所述有机溶剂为苯、 曱苯、 二曱苯、 二氯曱烷、 氯仿、 异丙醇、 四氢呋喃或 DMF, 更优选异丙醇。

根据本发明， 所述碱性縛酸剂为有机碱或无机碱， 所述有机碱优选为三乙胺、 三丙胺、 DMAP、叔丁醇钾等； 所述无机碱优选为碳酸鉀、 氢化钠、碳酸钠等。优选的缚酸剂为三乙胺。

根据本发明， 所述式（IIA )的中间体 6,7-二取代 4-氯-喹唑啉可通过如下方法制备： 以 6,7- 二取代 -喹唑啉酮为原料， 在二氯亚砜或三氯氧磷体系中回流制备 (R _{1 ;} R ₂ 同前述所定义)：

式（VA ) 式 (IIA)

其中， 各取代基如前述所定义。

根据本发明， 所述式（ III ) 的中间体 3-取代苯基 -5-羟甲基 -异噁唑或式（ IV ) 的中间体 3- 取代苯基 -5-氨甲基-异噁唑可通过如下方法制备： 以取代苯曱酪为原料， 通过合成肟、 1,3-偶极 环加成反应、 甲磺酰酯化反应、 叠氮化、 还原反应制备 (R ₃ 如上所述)。

根据本发明，所述式（ III )的中间体 3-取代苯基 -5-羟甲基-异噁唑通过如下方法制备： ( 1 ) 以取代苯甲醛为原料， 通过和羟胺或盐酸羟胺反应合成肟 (V); ( 2 )将肟（V )和丙炔醇在 N- 氯丁二酰亚胺 (NCS)和三乙胺作用下发生 1,3-偶极环加成反应， 生成中间体（111 )。

根据本发明， 式（IV ) 的中间体 3-取代苯基 -5-氨曱基-异噁唑通过如下方法制备：

(3) 中间体式（III )和甲磺酖氯反应， 合成甲磺酰酯式（VI );

(4) 曱磺酰酯式（VI )和叠氮钠反应， 生成中间体式 (VII);

(5) 中间体式 (VII)在锌粉和氯化铵体系中还原得到中间体式� ��IV )。

根据本发明 , 所述式 (III)的中间体 3-取代苯基 -5-羟曱基-异噁唑通过如下的方法制备： ( 1 )取代苯甲醛与羟胺或羟胺盐酸盐在甲醇 /水体系中， 在碳酸钠的催化下反应生成相应 的苯甲趁肟；

( 2 )将步骤（ 1 )制得的苯甲趁肟与丙炔醇在 TV-溴丁二酰亚胺（ NCS )和碱性縛酸剂的作 用下通过 1,3-偶极环加成反应形成式（ III )异噁唑化合物。

根据本发明， 优选地， 所述的碱性缚酸剂选自有机碱或无机碱， 所述有机碱选自三乙胺、 三丙胺、 DMAP、 DMF、 N-甲基吗啉等； 所述的无机碱选自碳酸钾、 氢化钠、 碳酸钠等。 更 优选的碱性缚酸剂为三乙胺。

其中， 步骤（1 ) 的反应温度为 -20°C至回流条件， 优选室温 （25°C )至回流条件。

其中， 步骤（2 ) 的反应温度为 -20°C至回流条件， 优选 0°C至回流条件。

根据本发明 , 所述式 (IV)的中间体 3-取代苯基 5-氨曱基 -异噁唑通过如下的方法制备：

( 3 )式（III ) 的异噁唑化合物（优选通过前述方法获得）与 磺酰氯反应获得式（VI )化 合物，；

根据本发明的优选技术方案， 步骤（3 )中， 所述磺酰氯选自： 曱磺酰氯、 苯磺酖氯、 取代 苯磺酰氯（如卤代苯磺酰氯、 烷基苯磺酰氯）等， 更优选为甲磺酰氯。 所述反应温度为 -5度至 回流温度， 优选室温至回流温度。 所述反应溶剂选自苯、 甲苯、 卤代芳烃、 卤代烷烃（如氯仿 或二氯曱烷）、 四氢呋喃、 乙腈及离子液体。 更优选地， 所述反应在二氯甲烷体系中回流反应。

( 4 )式（ VI )化合物与叠氮化钠反应 (优选在 DMF体系中， 60°C温度下）反应获得式（ VII ) 化合物；

( 5 )式（VII )化合物与氯化铵及锌粉、 铁粉或钯碳催化还原制备式（IV )化合物， 优选 所述催化剂在无机酸条件下进行催化， 优选为盐酸或硫酸， 所述催化剂优选为锌粉和氯化铵。 其中， 步骤（3 ) 的反应温度为 -20°C至回流条件， 优选 0°C至室温条件。

其中， 步骤（4 ) 的反应温度为 -20°C至回流条件， 优选 0°C至 80°C， 更优选室温至 60°C。 步骤（5 )中优选的反应溶剂是水或有机溶剂 （例如醇类， 卤代烃类， 芳烃类等）或其混合 物， 优选为乙醇和水的反应体系。

更优选地， 所述式（III )或式（IV ) 的具体制备方法如下述流程所示：

( IV )

更优选地， 所述制备方法如下述流程所示:

其中各取代基如前述所定义。 同时， 对于 Z为其他取代基， 例如 CH ₂ , S时， 可采用相应 的丙炔基氯， 丙炔硫醇进行制备。

本发明还提供一种式 (IB)所示的含异噁唑杂环的喹唑啉衍生物的制� �方法， 其特征在于， 所述方法包括如下步骤：

6或 7-取代 4-氯-喹唑啉 (式 IIB)和 3-取代苯基 -5-羟曱基-异噁唑 (式 III)或 3-取代苯基 -5-氨甲 基-异噁唑 (式 IV)在干燥的有机溶剂和碱性縛酸剂体系中反应 制备;

其中各取代基如前述所定义。

如果需要， 可以将式 (II)中的任何官能团予以保护。

并且其后， 如果有必要 (以任何次序）：

(1) 除去任何保护剂， 和

(2) 形成式（IB-1 )或式（IB-2 )化合物的药学上可接受的盐。

根据本发明， 所述反应温度为 -20°C至回流条件， 优选室温至回流条件。

根据本发明， 所述有机溶剂为芳烃或烷基取代的芳烃， 卤代烃， 醇类 （如 C _w —元醇类）， 四氢咬喃， DMF或例子液体。

根据本发明， 所述有机溶剂优选为苯、 甲苯、 二甲苯、 二氯曱烷、 氯仿、 异丙醇、 四氢呋 喃或 DMF或离子液体， 更优选异丙醇。

根据本发明， 所述碱性縛酸剂为有机碱或无机碱， 所述有机碱优选为三乙胺、 三丙胺、 DMAP、 氢化钠、 叔丁醇钾等； 所述无机碱优选为碳酸钾、 氢化钠、 碳酸钠等。 优选的缚酸剂 为三乙胺。

根据本发明， 所述式 (IIB)的中间体 2-苯基 -4-氯-喹唑啉可以根据已知方法制备或者商购� � 例如购自阿拉丁试剂公司。

式 (IIB)的中间体 7-硝基 -4-氯-喹唑啉可通过如下方法制备： 以 2-氨基 -4-硝基-苯甲酸和醋酸 曱脒为原料， 通过在乙醇中反应 （所述反应温度优选为 -20°C至回流条件）制得 7-硝基喹唑啉 -4(1H)-酮， 然后在二氯亚砜或三氯氧磷体系中反应 （优选反应温度为 -20°C至回流条件）制备 7-硝基 -4-氯-喹唑啉。 更具体的反应过程如下述流程式所示：

本发明所述式 I化合物， 包括但不限于： 它们的光学异构体， 外消旋体及其混合物。

本发明所述的 环烷氧基中的 环烷基可以为环丙基， 环丁基， 环戊基， 环己基， 环 庚基， 环辛基， 优选为环丙基， 环戊基或环己基。

本发明所述的含有至少一个选自 N， O, S杂原子的 C _3-8 杂环烷氧基中， C _3-8 杂环烷基可以 为哌漆基， 哌啶基， 吗啉基， 吡咯烷基， 高哌嗪基， 优选为旅噪基， 吗啉基或哌啶基。

术语"有效量 "指的是， 所述至少一种化合物和 /或至少一种药学上可接受的盐对于能有效 "治疗 "个体的一种疾病或不适的用量。 如果是癌症时， 有效量能减少癌症或肿瘤细胞的数目； 缩小肿瘤的大小；抑制或阻止肿瘤细胞向周边 器官的侵入，例如，肿瘤蔓延入软组织或骨骼 中； 抑制或阻止肿瘤的转移； 抑制或阻止肿瘤的生长；一定程度上减轻一种 或多种与癌症相关的症 状； 减少发病率和死亡率； 提高生活质量； 或者是上述效果的结合。 有效量可以是通过抑制 EGFR活性来减少疾病症状的用量。 对于癌症治疗， 体内实验的效果可以通过评估如存活期、 疾病进展时间（Time to DiseaseProgression, TTP)、 反应率 (Response Rates, RR)、 持续反应期 和 /或生活质量来测量。 专业人员已经意识到， 有效量可以随着给药的途径、 赋形剂的剂量、 以及与其他药物的合用而变化。

术语"有效量"还可指得是所述至少一种化合物� �� /或其至少一种药学上可接受的盐对抑制 EGFR的过度表达和 /或活性过高有效的剂量。

本发明的化合物具有抗肿瘤、 抗癌活性， 尤其是对人肺癌细胞株 A549具有很强的抑制活 性。化合物 P-26在 lxl(T ⁴ M浓度下对人肺癌细胞 Α549珠的抑制率为 91.2%， Ρ-24在 lxl(T ⁴ M 浓度下对人肺癌细胞 A549珠的抑制率为 84.9%， P-22在 lxl(T ⁴ M浓度下对人肺癌细胞 A549 珠的抑制率为 81.5%。 部分化合物对大肠癌细胞株 HCT-116也显示出较强的抑制活性： 化合 物 P-27在 lxl(T ⁴ M浓度下对大肠癌细胞株 HCT-116的抑制率为 63.9%，化合物 P-25在 lxl(T ⁴ M 浓度下对大肠癌细胞株 HCT-116的抑制率为 55.1%; 部分化合物选择性对 EGFR酶也显示出 了抑制活性： 化合物 Q-15在 lxl(T ⁴ M浓度下对 EGFR酶的抑制活性为 30.7%, 化合物 Q-21 在 lxl(T ⁴ M浓度下对 EGFR酶的抑制活性为 30.9%。

因而本发明的化合物可用作治疗肿瘤、 癌症的候选药物或先导化合物。 具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步的说明。 需要说明的是， 下述实施例不能作为对本发明 保护范围的限制， 任何在本发明 上做出的改进都不违背本发明的精神。

其中， 中间体和目标化合物的合成过程均以实施例中 的代表说明， 其余的中间体和目标化 合物的合成过程同代表化合物。

仪器与试剂：

AVANCE III 核磁共振仪（400MHz, DMSO-d ₆ ,TMS 为内标）， 离子阱液质连用仪 (DECAX-30000 LCQ Deca XP), Shimadzu FTIR-8400S(日本岛津制作所生产）， XT5数字显示 显微熔点测定仪 (北京市科仪电光仪器厂制造， 温度未经校正）， 可调波长式微孔板酶标仪 (Molecular Devies SPECTRAMAX190).

化学试剂均为市售的分析纯或化学纯试剂， RPMI1640 购自 Gibco 公司， 磺酰罗丹明 B(Sulforodamine B, SRB) 购自 Sigma公司， 三氯乙酸 (TCA)、 醋酸和 Tris base unbuffer 均为 国产分析纯试剂。

酪氨酸激酶 (EGFR)利用昆虫杆状病毒表达系统表达， 用 Νί-ΝΤΑ柱亲和纯化得到， 经检验 符合实验标准， 激酶反应底物 Poly(Glu，Tyr) _4:1 (Sigma公司）， 抗磷酸化酪氨酸的单克隆抗体 PY99(Santa Cruz公司）， 辣根过氧化酶标记羊抗鼠的 IgG(Calbiochem公司）， ATP 、 DTT 、 OPD(Amresco公司）， 酶标板 (Corning公司）， 其它试剂均为市售的分析纯， 在使用前没有特 殊说明未进行处理， 异丙醇在使用前用干燥分子筛处理。

实施例 1 6,7-二甲氧基 -4-氯-喹唑啉的合成

将 4.12 g (20 mmol) 6,7-二曱氧基-喹唑啉酮加入 500 mL单口圆低烧瓶中，接着緩慢加入含 有 1滴 DMF的重蒸的二氯亚砜中 120 mL, 回流反应， TLC检测反应完成后， 减压蒸除过量 的二氯亚砜， 剩余物用 300 mL乙酸乙酯溶解， 用饱和的碳酸氢钠溶液洗至中性， 有机层无水 硫酸钠干燥， 浓缩后柱分离（ «: 乙 4: 1-2: 1)即得 6,7-二甲氧基 -4-氯-喹唑啉， 产率： 85%, 1H NMR(DMSO-i/ ₆ , 400MHz): 4.01(s， 6H, 2CH ₃ )， 7.38(s, 1H)， 7.45(s, 1H)， 8.88(s，lH); ESI-MS(100%): 224([M】+， 100).

实施例 2 7-硝基-喹唑啉酮的合成 将 46g (0.25 mol) 2- J^-4-硝基苯曱酸和 52g (0.5 mol)醋酸曱脒加入 500mL单口圆底烧瓶 中， 加入 200 mL无水乙醇， 回流反应 4~6 h， 体系中将会有大量的土黄色沉淀析出. 此时停 止加热，体系冷却至 50°C左右，真空除去部分乙醇至体系大约 50mL，向体系中加入 30mL水， 体系搅拌数分钟后冷藏 1 h, 过滤， 滤饼依次用冷藏的乙醇 (3xl0mL)洗涤， 水 (2xl0mL)洗涤， 真空干燥即得 7-硝基-喹唑啉酮 2，土黄色针状固体 39.6g，收率： 82.8%, m.p: 282-284 °C, IR(KBr) v: 3174, 3064, 2960, 1683, 1613, 1528， 803;此化合物不必进一步纯化可直接用于下步� �取代反 应。

实施例 3 7-硝基 -4-氯-喹唑啉的合成

取 19.1g (O.lmol)的 7-硝基 -喹唑啉酮于 250mL三口瓶中， 搅拌下緩慢滴加入 60 mL含 2 滴 DMF的新蒸的 SOCl ₂ , 加完后回流反应， TLC监测反应的进程， 反应完成后， 减压蒸出过 量的 SOCl ₂ ， 残渣用冷藏的乙醚 (5x20mL)洗涤即得粗产物，粗产物用石油醚和乙� ��乙酯重结晶 即得化合物中间体 7-硝基 -4-氯-喹唑啉 19.0g,白色针状晶体.收率： 90.6%, m.p: 150-151 °C, 1H NMR(CDC1 ₃ , 400 MHz)<5: 8.55(s, 2H， Ph-H), 8.98(s,lH, Ph-H), 9.23(s，lH，Ar-H); IR(KBr) v: 3057, 2959, 1528, 1469, 1357, 805, 743 .

实施例 4 中间体 3-取代苯基 -5-羟曱基-异噁唑 (III)及 3-取代苯基 -5-氨曱基-异噁唑 (IV)的 合成

其中以 R ₃ 为 H作为示例：

( 1 )苯甲酪

10.0 mmol苯甲酪溶解在 30 mL 30% CH ₃ OH和 H ₂ 0溶液中 ,加入装有磁力搅拌器的三角 瓶中， 搅拌下加入 10.0 mmol盐酸羟氨， 等盐酸羟氨溶解后緩慢加入 5.0 mmol干燥研细的碳 酸钠。室温反应， TLC检测反应完成后，体系减压蒸除曱醇后，加 入 30 mL H ₂ 0，二氯曱烷 (3x30 mL)萃取， 合并有机层， 无水硫酸钠干燥有机层. 脱溶剂即得苯曱醛肟粗产物， 收率 86.2 %。 该粗产物不用分离纯化直接进行下步反应。

( 2 ) 3-苯基 -5-羟曱基-异噁唑

将 10.0 mmol苯甲趁肟和 30 mL干燥的二氯曱烷加入 250 mL单口圆底烧瓶中， 搅拌下加 入 1.60g (12.0 mmol) N-氯丁二酖亚胺（ NCS )， 啟加热至 NCS全部溶解后， 滴加 0.56 g (10.0 mmol)2-丙炔 -1-醇， 随后緩慢滴加入 20 mL含 10.1 g (10.0 mmol)三乙胺的二氯甲烷溶液， 加 完后体系回流. TLC检测反应完成后，母液水洗，无 7«酸钠干燥，柱分离（ 5:1-2:1) 即得 3-苯基 -5-羟曱基-异噁唑， 收率 76.8 %

( 3 ) 3-苯基 -5-氨曱基-异噁唑

将 10.0 mmol 5-羟甲基 -3-苯基-异噁唑和 30 mL干燥的二氯甲坑加入 250 mL单口圆底烧 瓶中， 冰 拌下将含 1.01g(10.0 mmol)三乙胺的 20 mL二氯曱烷溶液加入体系中， 接着将 溶有 1.37g (12.0 mmol) 曱磺酰氯（MsCl )的 5 mL二氯甲烷溶液緩慢滴加入体系中， 冰浴反 应 2 h后， 室温反应。 TLC检测反应完成后， 母液水洗， 5 %的碳酸氢钠溶液洗， 水洗， 无水 硫酸钠干燥， 减压脱溶剂得粗产物 5-曱磺酸 -3-苯基-异噁唑 -5-曱醇酯， 收率 68.0 %。 粗产物不 必纯化直接进行下步反应。

将 5.0 mmol 5-曱磺酸 -3-苯基-异噁唑 -5-曱醇酯溶解在 20 mL干燥的 DMF中， 加入 0.34 g ( 5.20 mmol ) 叠氮化钠， 室温搅拌溶解后， 置于 45°C-50°C油浴中反应， TLC指示反应完成 后，过滤，滤饼用乙醚（ 2x30mL )洗涤，合并有机层，向有机层中加 lOOmL水，用乙醚（ 5x30mL ) 萃取， 合并有机层， 有机层水洗 2次， 无水硫酸钠干燥， 脱溶剂后得粗产物 3-苯基 -5-叠氮曱基 -异噁唑， 收率 90% ， 粗产物直接进行下面的还原反应.

5.0 mmol 5-叠氮甲基 -3-苯基-异噁唑溶解在 80 mL乙醇和 20 mL水的混合溶液中，将 0.17g ( 2.6 mmol )的锌粉和 0.28g ( 5.2 mmol )的 NH ₄ C1加入体系， 回流 lh, 真空脱去乙醇， 向体 系加入 20mL水， 用 20% 的氢氧化钠溶液调至 pH值到 12, 向体系中加入 50mLDCM， 搅拌 均匀后， 过滤， 滤渣在用少量的水溶解， 过滤， 合并两次的滤液， 分出有机层， 有机层， 水洗， 无水硫酸钠干燥， 真空脱溶剂， 残渣柱分离 （ V 10: 1 )得产物 3-苯基 -5-氨曱基 -异噁唑， 收率 75%. 浅黄色固体， m.p: 39-40 °C 1H-NMR (400MHz,CDCl ₃ ,TMS),6ppm: 1.60 ( s, 2H NH ₂ ) 3.91 (s, 2H CH ₂ ), 6.40 (s, 1H), 7.39 (m, 2H Ar-H), 7.76 (m, 2H Ar-H). 实施例 5

[6,7-二 (曱氧乙氧基 )】-4-[(3-苯基-异噁唑 -5-基) -曱氧基小喹唑啉

0.3 g (lmmol)的 [6,7-二（曱氧乙氧基）】-4-氯-喹唑啉溶解在 5 mL干燥的异丙醇中， 搅拌下将 溶有 0.175g(lmmol) 5-羟甲基 -3-苯基-异噁唑的 5 mL异丙醇溶液緩慢滴加入反应体系，接着加 入 0.101 g (lmmol)新蒸的三乙胺，体系室温搅拌 30 rnin后， 60°C反应， TLC检测反应完成后， 反应液真空浓缩， 残渣直接柱分离 油 ): ( n =5:l~2:l )即得目标化合物 [6,7-二（甲氧 乙氧基）】-4-{[3-(4-甲基-苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲氧基+喹唑啉（下表 Q-15 )。 其余的化合物按照

[6,7-二（2-曱氧乙氧基）卜 4-{[3-(4-甲基-苯基) -异噁唑 -5-基卜甲氧基 +喹唑啉的合成过程合成。 其结构均通过 IR， 1H NMR, ESI-MS等分析方法进行了表征。 优选出的化合物的物性常数及光 语数据以列表的形式进行说明：

优选出的化合物的结构、 编号 ^称如下表所示：

表 1-优选化合物表 1-优选化合物

4-Br Q-2 6,7-二甲氧基 -4-{[3-(4-溴-苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲氧基+喹

N H Q-2 6,7-二甲氧基 -4-[(3-苯基-异噁唑 -5-基) -甲 -卜喹唑啉

4-CH ₃ Q-2 6,7-二甲氧基 -4-{[3-(4-曱基-苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲氨基+ 啉

4-OCH Q-2 6,7-二曱氧基 -4-{[3-(4-曱氧基-苯基) -异噁唑 -5-基卜曱氨基 峻啉

2-C1 Q-2 6,7-二甲氧基 -4-{[3-(2-氯-苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲氨基+喹

4-C1 Q-2 6,7-二甲氧基 -4-{[3-(4-氯-苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲氨基+喹

2,4- 二 Q-2 6,7-二甲氧基 -4-{[3-(2，4-二氯-苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲氨基 峻啉

4-Br Q-2 6,7-二甲氧基 -4-{[3-(4-溴-苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲氨基+喹

Ri=R ₂ O H Q-2 [6,7-二 (2-甲氧乙氧基)】-4-[(3-苯基-异噁唑 -5-基) - 甲氧基

"峻啉

CH ₃ 0 4-CH ₃ Q-3 6,7-二 (2-曱氧乙氧基) -4-{[3-(4-曱基-苯基) -异噁唑 -5-基】 -CH2O- 5-基- } -会峻啉

4-OCH Q-3 6,7-二 (2-甲氧乙氧基) -4-{[3-(4-曱氧基-苯基) -异噁唑 -5-基】 - 基- } -全峻啉

2-C1 Q-3 [6,7-二 (2-曱氧乙氧基)】-4-{[3-(2-氯-苯基) -异噁唑 -5-基】 - 曱 喹唑啉

4-C1 Q-3 [6,7-二 (2-曱氧乙氧基)】-4-{[3-(4-氯-苯基) -异噁唑 -5-基】- 曱 喹唑啉

2,4- 二 Q-3 [6,7-二 (2-甲氧乙氧基)】 -4-{[3-(2，4-二氯-苯基) -异噁唑 -5- - 曱氧基 -}-喹唑啉

4-Br Q-3 [6,7-二 (2-曱氧乙氧基)】-4-{[3-(4-溴-苯基) -异噁唑 -5-基】 - 甲 喹唑啉

N H Q-3 [6,7-二 (2-甲氧乙氧基)】-4-[(3-苯基-异噁唑 -5-基) - 甲氨基

"峻啉

4-CH ₃ Q-3 6,7-二 (2-曱氧乙氧基) -4-{[3-(4-曱基-苯基) -异噁唑 -5-基】 - 一会峻啉

4-OCH Q-3 6,7-二 (2-甲氧乙氧基) -4-{[3-(4-曱氧基-苯基) -异噁唑 -5-基】 - 基- } -会峻啉

2-C1 Q-3 [6,7-二 (2-曱氧乙氧基)】-4-{[3-(2-氯-苯基) -异噁唑 -5-基】 - 曱 喹唑啉

4-C1 Q-4 [6,7-二 (2-曱氧乙氧基)】-4-{[3-(4-氯-苯基) -异噁唑 -5-基】- 曱 喹唑啉

2,4- 二 Q-4 [6,7-二 (2-曱氧乙氧基)】 -4-{[3-(2，4-二氯-苯基) -异噁唑 -5- - 曱氨基+喹唑啉

4-Br Q-4 [6,7-二 (2-曱氧乙氧基)】-4-{[3-(4-溴-苯基) -异噁唑 -5-基】 - 甲 喹唑啉 实施例 6 7-硝基 -4-[(3-苯基-异噁唑 -5-基) -曱氧基-】 -喹唑啉

将 0.209 g (lmmol)的 7-硝基 -4-氯-喹唑啉溶解在 5 mL干燥的异丙醇中， 搅拌下将溶有 0.175g(lmmol) 5-羟甲基 -3-苯基-异噁唑的 5 mL异丙醇溶液緩慢滴加入反应体系， 接着加入 0.101 g (lmmol)新蒸的三乙胺， 体系室温搅拌 30 rnin后， 60°C反应， TLC检测反应完成后， 反应液真空浓缩， 残渣直接柱分离（ y c =5:1~2:1)即得目标化合物 7-硝基 -4-[(3-苯 基) -异噁唑 -5-基】 -曱氧基-喹唑啉 (下表 Q-l)。 其余的化合物按照 7-硝基 -4-[(3-苯基) -异噁唑 -5- 基】 -甲氧基-喹唑啉。 其结构均通过 IR H NM ESI-MS等分析方法进行了表征。 优选出的化 合物的物性常数及光谱数据以列表的形式进行 说明：

实施例 7 2-苯基 -4-[(3-苯基-异噁唑 -5-基) -曱氧基-】 -喹唑啉

将 0.24 g (lmmol)的 2-苯基 -4-氯-喹唑啉溶解在 5 mL干燥的异丙醇中， 搅拌下将溶有 0.175g(lmmol) 5-羟甲基 -3-苯基-异噁唑的 5 mL异丙醇溶液緩慢滴加入反应体系， 接着加入 0.101 g (lmmol)新蒸的三乙胺， 体系室温搅拌 30 rnin后， 60°C反应， TLC检测反应完成后， 反应液真空浓缩， 残渣直接柱分离（ y c =5:1~2:1)即得目标化合物 2-苯基 -4-[(3-苯 基) -异噁唑 -5-基卜曱氧基-喹唑啉 (下表 Q-ll)。 其余的化合物按照 2-苯基 -4-[(3-苯基) -异噁唑 -5- 基】 -曱氧基-喹唑啉。 其结构均通过 IR H NM ESI-MS等分析方法进行了表征。 优选出的化 合物的物性常数及光谱数据以列表的形式进行 说明。

优选出的化合物的结构、 编 ^称如下表所示：

表 2-优选化合物

il 4-CF ₃ P-9 ₇ —硝基 _4_{[ ₃ _ ₍₄ _三氟曱基-苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲氧基+

2,4- 二 P-10 ₇ ·硝基 _4-{[3-[4-(2，4-二曱氧基-苯基)】 -异噁唑 -5-基】 -甲氧 基 }一会峻啉

N H P-ll ₇ —硝基 _ ₄ _[(3-苯基-异噁唑 -5-基) -曱氨基-】 -喹唑啉

4-CH ₃ P-12 ₇ —硝基 _ ₄ _{[3-(4-甲基-苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲氨基 +喹唑

4-OCH P-13 ₇ _硝基 _ ₄ _{[ ₃ _ ₍₄ _甲氧基-苯基)—异噁唑 _ ₅ _基】 -曱氨基+喹

2-C1 P-14 ₇ _硝基 _ ₄ _{[3-(2-氯-苯基) -异噁唑 -5-基】 -曱氨基+喹唑啉

4-C1 P-15 ₇ -硝基 _ ₄ _{[3-(4-氯-苯基) -异噁唑 -5-基】 -曱氨基+喹唑啉

2,4- 二 P-16 ₇ _硝基 _ ₄ _{[ ₃ _(2，4-二氯-苯基) -异噁唑 -5-基】 -曱氨基+喹

4-Br P-17 ₇ _硝基 _ ₄ _{[3-(4-溴-苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲氨基+喹唑啉

4-F P-18 ₇ _硝基 _ ₄ _{[3-(4-氟-苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲氨基+喹唑啉

4-CF ₃ P-19 ₇ —硝基 _ ₄ _{[ ₃ _ ₍₄ _三氟甲基-苯基)-异噁唑 -5-基】 -甲 -}-

2,4- 二 P-20 ₇ ·硝基 _4-{[3-[4-(2，4-二甲氧基-苯基)】 -异噁唑 -5-基】 -甲氨 基 }一会峻啉

O H P-21 2-苯基 -4-[(3-苯基-异噁唑 -5-基) -曱氧基-】 -喹唑啉

R ₂ =-H 4-CH ₃ P-22 2-苯基 -4-{[3-(4-甲基-苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲氧基 +喹唑

4-OCH P-23 2-苯基 -4-{[3-(4-甲氧基-苯基) -异噁唑 -5-基】 -曱氧基+喹

2-C1 P-24 2-苯基 -4-{[3-(2-氯-苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲氧基+喹唑啉

4-C1 P-25 2-苯基 -4-{[3-(4-氯-苯基) -异噁唑 -5-基】 -曱氧基+喹唑啉

2,4- 二 P-26 2-苯基 -4-{[3-(2，4-二氯-苯基) -异噁唑 -5-基】 -曱氧基+喹

4-Br P-27 2-苯基 -4-{[3-(4-溴-苯基) -异噁唑 -5-基】 -曱氧基+喹唑啉 4-F P-28 2-苯基 -4-{[3-(4-氟-苯基) -异噁唑 -5-基】 -曱氧基+喹唑啉

4-CF ₃ P-29 2-苯基 -4-{[3-(4-三氟甲基-苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲氧基+

2,4- 二 P-30 2-苯基 -4-{[3-[4-(2，4-二甲氧基-苯基)】 -异噁唑 -5-基】 -甲氧 基 }一会峻啉

N H P-31 2-苯基 -4-[(3-苯基-异噁唑 -5-基) -曱氨基-】 -喹唑啉

4-CH3 P-32 2-苯基 -4-{[3-(4-曱基-苯基）-异噁唑 -5-基卜甲 喹唑

4-OCH P-33 2-苯基 -4-{[3-(4-甲氧基 -苯基 ) -异噁唑 -5-基】 -曱氨基+

2-C1 P-34 2-苯基 -4-{[3-(2-氯-苯基) -异噁唑 -5-基】 -曱氨基+喹唑啉

4-C1 P-25 2-苯基 -4-{[3-(4-氯-苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲氨基+喹唑啉

2,4- 二 P-36 2-苯基 -4-{[3-(2，4-二氯-苯基) -异噁唑 -5-基】 -曱氨基+喹

4-Br P-37 2-苯基 -4-{[3-(4-溴-苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲氨基+喹唑啉

4-F P-38 2-苯基 -4-{[3-(4-氟-苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲氨基+喹唑啉

4-CF ₃ P-39 2-苯基 -4-{[3-(4-三氟甲基-苯基) -异噁唑 -5-基】 -甲 -}-

2,4- 二 P-40 2-苯基 -4-{[3-[4-(2，4-二甲氧基-苯基)】 -异噁唑 -5-基】 -甲氨 基 }一全峻啉

表 3-表 1化合物的物性常数、 IR和 MS数据

Q-4 白色固体 104-105 3120,2934,1617,1499,1503,1444, 338 ( [M+l] ⁺ ,100 )

1361,1281,1091,958,817

Q-5 白色固体 145-148 3120,2934,1617,1499,1503,1444, 338 ( [M+l] ⁺ ,100 )

1361,1281,1091,958,817

Q-6 白色固体 146-147 3120,2934,1617,1499,1503,1444, 373 ( [M+2] ⁺ ,20 )

1361,1281,1091,958,817

Q-7 白色固体 158-160 3120,2934,1617,1499,1503,1444,

1361,1281,1091,958,817

Q-8 白色固体 3237,3079,2927,1590,1544,1433, 303 ( [M+l] ⁺ ,100 )

1232,1106,799

Q-9 白色固体 3237,3079,2927,1590,1544,1433, 317 ( [M+l] ⁺ ,100 )

1232,1106,799

Q-10 白色固体 3237,3079,2927,1590,1544,1433, 333 ( [M+l] ⁺ ,100 )

1232,1106,799

Q-ll 白色固体 3237,3079,2927,1590,1544,1433, 337 ( [M+l] ⁺ ,100 )

1232,1106,799

Q-12 白色固体 3237,3079,2927,1590,1544,1433, 337 ( [M+l] ⁺ ,100 )

1232,1106,799

Q-13 白色固体 3237,3079,2927,1590,1544,1433, 372 ( [M+2] ⁺ ,20 )

1232,1106,799

Q-14 白色固体 3237,3079,2927,1590,1544,1433,

1232,1106,799

Q-15 白色固体 163-164 3120,2934,1617,1499,1503,1444, 364 ( [M+l] ⁺ ,100 )

1361,1281,1091,958,817

Q-16 白色固体 169-171 3120,2934,1617,1499,1503,1444, 378 ( [M+l] ⁺ ,100 )

1361,1281,1091,958,817

Q-17 白色固体 158-161 3121,2934,1617,1570,1503,1444, 394 ( [M+l] ⁺ ,100 )

1361,1281,1091,958,817

Q-18 白色固体 163-165 3121,2934,1617,1570,1503,1444, 398 ( [M+l] ⁺ ,100 ) 1361,1281,1091,958,817

Q-19 白色固体 176-178 3121,2934,1617,1570,1503,1444, 398 ( [M+l] ⁺ ,100 )

1361,1281,1091,958,817

Q-20 白色固体 185-187 3120,2934,1617,1499,1503,1444, 432 ( [M+l] ⁺ ,100 )

1361,1281,1091,958,817

Q-21 白色固体 178-179 3121,2934,1617,1570,1503,1444, 442 ( [M+l] ⁺ ,100 )

1361,1281,1091,958,817

Q-22 白色固体 3237,3079,2927,1590,1544,1433, 363 ( [M+l] ⁺ ,100 )

1232,1106,799

Q-23 白色固体 3237,3079,2927,1590,1544,1433, 377 ( [M+l] ⁺ ,100 )

1232,1106,799

Q-24 白色固体 3237,3079,2927,1590,1544,1433, 393 ( [M+l] ⁺ ,100 )

1232,1106,799

Q-25 白色固体 3237,3079,2927,1590,1544,1433, 397 ( [M+l] ⁺ ,100 )

1232,1106,799

Q-26 白色固体 3237,3079,2927,1590,1544,1433, 397 ( [M+l] ⁺ ,100 )

1232,1106,799

Q-27 白色固体 3237,3079,2927,1590,1544,1433, 431 ( [M+l] ⁺ ,100 )

1232,1106,799

Q-28 白色固体 3237,3079,2927,1590,1544,1433, 441 ( [M+l] ⁺ ,100 )

1232,1106,799

Q-29 白色固体 112-113 3120,2934,1617,1499,1503,1444, 452 ( [M+l] ⁺ ,100 )

1361,1281,1091,958,817

Q-30 白色固体 115-117 3120,2934,1617,1499,1503,1444, 466 ( [M+l] ⁺ ,100 )

1361,1281,1091,958,817

Q-31 白色固体 136-137 3121,2934,1617,1570,1503,1444, 482 ( [M+l] ⁺ ,100 )

1361,1281,1091,958,817

Q-32 白色固体 133-134 3120,2934,1617,1499,1503,1444, 486 ( [M+l] ⁺ ,100 )

1361,1281,1091,958,817 Q-33 白色固体 117-118 3121,2934,1617,1570,1503,1444, 586 ( [M+l] ⁺ ,100 )

1361,1281,1091,958,817

Q-34 白色固体 121-122 3120,2934,1617,1499,1503,1444, 520 ( [M+l] ⁺ ,100 )

1361,1281,1091,958,817

Q-35 白色固体 119-120 3121,2934,1617,1570,1503,1444, 530([M+1] ⁺ ,100 )

1361,1281,1091,958,817

Q-36 白色固体 3237,3079,2927,1590,1544,1433, 451 ( [M+l] ⁺ ,100 )

1232,1106,799

Q-37 白色固体 3237,3079,2927,1590,1544,1433, 465 ( [M+l] ⁺ ,100 )

1232,1106,799

Q-38 白色固体 3237,3079,2927,1590,1544,1433, 481 ( [M+l] ⁺ ,100 )

1232,1106,799

Q-39 白色固体 3237,3079,2927,1590,1544,1433, 485 ( [M+l] ⁺ ,100 )

1232,1106,799

Q-40 白色固体 3237,3079,2927,1590,1544,1433, 485 ( [M+l] ⁺ ,100 )

1232,1106,799

Q-41 白色固体 3237,3079,2927,1590,1544,1433, 519 ( [M+l] ⁺ ,100 )

1232,1106,799

Q-42 白色固体 3237,3079,2927,1590,1544,1433, 529([M+1] ⁺ ,100 )

1232,1106,799 表 4-表 1化合物的物性常数 1H NMR数据

azole-H), 7.37(d, 2H， J=4.8Hz), 7.84(d, 2H， J=7.6Hz), 8.69(s, 1H).

Q-18 3.97(s, 6H, 2CH ₃ )， 5.87(s， 2H， CH ₂ )， 7.16(s, 1H， isoxazole-H), 7.37(m, 2H)， 7.48-7.56(m, 2H)， l-7.73(m,2H), 8.70(s， 1H).

Q-19 3.97(s, 6H,2CH ₃ ), 5.85(s， 2H， CH ₂ )， 7.30(s, 1H， isoxazole-H), 7.37(d, 2H， J=6.4Hz),7.60(d, 2H， .4Hz),7.94(d, 2H， J=8.8Hz), 8.69(s, 1H).

Q-20 3.91(s, 6H,2CH ₃ ), 5.87(s， 2H， CH ₂ )， 7.17(s， 1H， isoxazole-H), 7.37(m, 2H),7.58-7.60(m,lH), i(d， 1H， J=8.4Hz), 7.84-7.85(m, 1H)， 8.70(s，lH).

Q-21 3.97 (s, 6H,2CH ₃ ), 5.84 (s, 2H， CH ₂ )， 7.29 (s, 1H， isoxazole-H), 7.37(d, 2H， J=8.0Hz), 7.73 (d，lH， .4Hz )， 7.86 (d, 1H， J=8.4Hz), 8.69 (s，lH).

Q-22 3.95(s, 6H, 3CH ₃ ), 4.29(t, J=6.6Hz,lH, NH), 5.84-5.85(m, 2H, CH ₂ ), 7.24 (s, 1H, isoxazole-H), l(d, 2H, J=6.8Hz), 7.51-7.53 (m, 2H), 7.65-7.72(m, 1H), 7.89-7.91(m, 2H), 8.70(s, 1H).

Q-23 2.36(s, 3H, CH ₃ ), 3.97(s, 6H, 2CH ₃ ), 4.29(t, J=6.6Hz,lH, NH), 5.83-5.85(m, 2H, CH ₂ ), 7.23(s, 1H, azole-H), 7.33(d, 2H， J=8.0Hz), 7.37(d, 2H， J=6.0Hz), 7.79(d, 2H， J=8.0Hz), 8.70(s，lH).

Q-24 3.82(s,3H, OCH ₃ ), 3.97( s, 6H, 2CH ₃ )， 4.29(t, J=6.6Hz,lH, NH), 5.82-5.83(m, 2H， CH ₂ )， 7.07(d， J=7.6Hz), 7.20(s， 1H， isoxazole-H), 7.37(d, 2H， J=4.8Hz), 7.84(d, 2H， J=7.6Hz), 8.69(s, 1H).

Q-25 3.97(s, 6H, 2CH ₃ ), 4.3 l(t, J=6.6Hz,lH, NH), 5.87-5.89(m, 2H, CH ₂ ), 7.16(s, 1H, isoxazole-H), (m, 2H)， 7.48-7.56(m, 2H)， 7.64-7.73(m,2H), 8.70(s， 1H).

Q-26 3.97(s, 6H,2CH ₃ ), 4.31(t, J=6.6Hz,lH, NH), 5.85-5.86(m, 2H, CH ₂ ), 7.30(s, 1H, isoxazole-H), (d, 2H， J=6.4Hz),7.60(d, 2H， J=8.4Hz),7.94(d, 2H， J=8.8Hz), 8.69(s, 1H).

Q-27 3.91(s, 6H,2CH ₃ ), 4.31(t, J=6.6Hz,lH, NH), 5.87-5.88(m, 2H, CH ₂ ), 7.17(s， 1H, isoxazole-H), (m, 2H),7.58-7.60(m,lH), 7.76(d, 1H， J=8.4Hz), 7.84-7.85(m, 1H)， 8.70(s，lH).

Q-28 3.97 (s, 6H,2CH ₃ ), 4.31(t, J=6.6Hz,lH, NH), 5.84-5.85 (m, 2H， CH ₂ )， 7.29 (s, 1H， isoxazole-H), (d, 2H， J=8.0Hz), 7.73 (d，lH， J=8.4Hz )， 7.86 (d, 1H， J=8.4Hz), 8.69 (s，lH).

Q-29 3.35(s, 6H, 2CH ₃ ), 3.72-3.76(m, 4H, 2CH ₂ )， 4.26-4.33(m, 4H, 2CH ₂ ),5.83(s, 2H， CH ₂ )， 7.23 (s, isoxazole-H),7.42(d, 2H， J=12.0Hz),7.50-7.54(m, 3H),7.89-7.91(m, 2H),8.69(s,lH).

Q-30 2.36(s, 3H, Ph-CH ₃ ),3.36(s, 6H, 2CH ₃ ),3.72-3.76(m, 4H, 2CH ₂ ), 4.25-4.33(m, 4H, 2CH ₂ ), 5.81 (s, CH ₂ ), 7.23 (s, 1H, isoxazole-H),7.31-7.35(m, 2H), 7.38-7.41(m, 2H), 7.77-7.79(m, 2H), 8.68(s,lH).

Q-31 3.34 (s, 6H, 2CH ₃ ), 3.72-3.76 (m, 4H, 2CH ₂ )， 3.81 (s, 3H, Ph-OCH ₃ ), 4.25-4.33 (m, 4H, 2CH ₂ )，

1 (s, 2H， CH ₂ )， 7.07(d， 2H， J=8.8 Hz), 7.20 (s, 1H， isoxazole-H), 7.41 (d, 2H， J=12.0Hz), 8.69

l-5.85(m, 2H, CH ₂ )， 7.30(s, 1H， isoxazole-H),7.40(d, 2H， J=12.8Hz),7.72-7.74(m, 2H)， i-7.87(m, 2H)， 8.68(s, IH). 表 5-表 2部分化合物的 NMR数据

编号 ^J H NMR ( 400MHz, DMSO-< ₆ )

P-11 4.28 (t, J= 6.5 Hz, IH, NH), 4.99 (s, 2H, CH ₂ ), 7.04 (s, IH, isoxazole-H), 7.18-7.92 (m, 4H, Ph-H), -8.62 (s, 3H,Ph-H), 8.67 (s，lH).

P-12 3.17 (s, 3H, CH ₃ ), 4.22(t, J= 6.6 Hz, 1H， NH), 5.00(s, 2H, CH ₂ ), 7.01

(s, 1H， isoxazole-H), 7.67-7.75(m, 4H, Ph-H),8.28-8.51(m, 3H, Ph-H), 8.71(s， IH).

P-13 3.65 (s, 3H, CH ₃ )， 4.35 (t, J= 6.3 Hz, 1H， NH), 4.96 (s, 2H， CH ₂ )， 7.10 (s, 1H， isoxazole-H), :-7.91(m, 4H, Ph-H), 8.31-8.62 (m, 3H, Ph-H), 8.68 (s, IH).

P-14 4.35 (t, J= 6.8 Hz, IH, NH), 4.98 (s, 2H, CH ₂ ), 7.04(s, IH, isoxazole-H ), 7.18-7.91(m, 4H, Ph-H), L-8.62 (m, 3H, Ph-H), 8.67(s,lH).

P-19 4.29(t, J= 6.4 Hz, 1H， NH), 4.99 (s, 2H， CH ₂ )， 7.13(s, 1H， isoxazole-H )， 7.84-8.09(dd, 4H, J=8.0, Hz, Ph-H), 8.25-8.47 (m, 3H, Ph-H), 8.66 (s, IH).

P-21 6.04(s, 2H, CH ₂ ), 7.37(s, IH, isoxazole-H), 7.52-7.62(m, 5H)， 7.71-7.78(m, IH), 7.90-7.92(m, 2H), L-8.03(m, 2H)， 8.14-8.20(m, 1H)， 8.26-8.32(m, 1H)， 8.50-8.59(m, 2H).

P-22 2.37(s, 3H, Ph-CH ₃ ), 6.02(s, 2H, CH ₂ )， 7.32(m, 2H)， 7.34(s, IH, isoxazole-H), 7.56-7.59(m, 3H), J-7.81(m, 3H), 8.01-8.03(m, 2H), 8.26-8.28(m, IH), 8.57-8.59(m, 2H).

P-23 2.82(s, 3H, Ph-OCH ₃ ), 6.02(s, 2H, CH ₂ ), 7.32(m, 2H)， 7.34(s, IH, isoxazole-H), 7.56-7.59(m, 3H), J-7.81(m, 3H), 8.01-8.03(m, 2H), 8.26-8.28(m, IH), 8.57-8.59(m, 2H).

P-24 6.04(s, 2H, CH ₂ ), 7.34(s, IH, isoxazole-H), 7.47-7.59(m, 5H)， 7.63-7.73(m, 3H), 7.99-8.04(m, 2H), l-8.25(m, 1H)， 8.58-8.60(m, 2H).

P-25 6.04(s, 2H, CH ₂ ), 7.40(s, IH, isoxazole-H), 7.56-7.62(m, 5H)， 7.69-7.73(m, IH), 7.93-7.96(m, 2H), >-8.059(m, 2H)， 8.18-8.28(m, 1H)， 8.57-8.59(m, 2H).

P-26 6.07(s, 2H, CH ₂ )， 7.28(s， IH, isoxazole-H), 7.57-7.57(m, 3H), 7.61(d, IH, J=2.4Hz), 7.68-7.72(m, ， 7.76(d, 1H， J=8.4Hz), 7.86(d, 1H， J=2.0Hz).

P-27 6.04(s, 2H, CH ₂ ), 7.40(s, IH, isoxazole-H), 7.56-7.59(m, 3H), 7.68-7.75(m, 3H), 7.86-7.89(m, 2H), >-8.05(m, 2H)， 8.28(d， 1H， J=8.0Hz).

TSZ980/Zl0ZN3/X3d 6ΐεε /ειοζ OAV 表 6-表 2部分化合物的 MS数据

实施例 8 4-[(3-苯基-异噁唑 -5-基) -甲氧基-】 -喹唑啉的盐酸盐和醋酸盐的制备

( 1 ) 4-[(3-苯基-异噁唑 -5-基) -甲氧基-】 -喹唑啉盐酸盐

将 O.Smmol 4- [(3-苯基-异噁唑 -5-基) -曱氧基-】 -喹唑啉加入 20 mL ( V： V, 1:1 ) 5%的盐酸溶 液和甲醇混合溶液中， 微热搅拌使其溶解后， 室温緩慢蒸发结晶即得 4-[(3-苯基-异噁唑 -5-基) - 曱氧基-】 -喹唑啉盐酸盐， 白色固体， 收率： 68%。

( 2 ) 4-[(3-苯基-异噁唑 -5-基) -甲氧基-】 -喹唑啉乙酸盐的制备：

将 0.5mmol 4-[(3-苯基-异噁唑 -5-基) -曱氧基-】 -喹唑啉加入盛有 10 mL干燥二氯甲烷的 50mL单口圆底烧瓶中， 搅拌下加入 2mL冰乙酸， 30°C~40°C搅拌 l~2h，冷却后冷藏结晶， 过 滤， 真空干燥后即得 4-[(3-苯基-异噁唑 -5-基) -甲氧基小喹唑啉乙酸盐， 无色固体， 收率： 58%。 实施例 9 部分化合物盐的制备

以 2-苯基 -4- [(3-苯基-异噁唑 -5-基) -甲氧基-】 -喹唑啉的盐酸盐和醋酸盐的制备为例说明 之， 其余化合物盐的制备同该过程。

( 1 ) 2-苯基 -4-[(3-苯基-异噁唑 -5-基) -曱氧基小喹唑啉盐酸盐的制备

将 O.Smmol 2-苯基 -4- [(3-苯基-异噁唑 -5-基) -甲氧基-】 -喹唑啉加入 20 mL(K: V, 1:1)5%的盐 酸溶液和甲醇混合溶液中， 微热搅拌使其溶解后， 室温緩慢蒸发结晶即得 2-苯基 -4-[(3-苯基- 异噁唑 -5-基) -甲氧基-】 -喹唑啉盐酸盐， 白色固体， 收率： 52%。 ( 2 ) 2-苯基 -4-[(3-苯基-异噁唑 -5-基) -曱氧基小喹唑啉乙酸盐的制备

将 0.5mmol 2-苯基 -4- [(3-苯基-异噁唑 -5-基) -曱氧基-】 -喹唑啉加入盛有 10 mL干燥二氯甲烷 的 50mL单口圆底烧瓶中， 搅拌下加入 2mL冰乙酸， 30°C~40°C搅拌 l~2h，冷却后冷藏结晶， 过滤， 真空干燥后即得 2-苯基 -4-[(3-苯基-异噁唑 -5-基) -曱氧基-】 -喹唑啉乙酸盐， 无色固体， 收 率： 58%。

表 7-式（I )所示的化合物分别和有机酸或无机酸所成的� �

实施例 10生物活性试验

本发明式（I )所示的喹 啉化合物或其药学上可接受的盐作为 EGFR酶抑制剂， 采用酶 联免疫吸附法测定所列举的化合物抑制 EGFR酶活性。

具体的实验步骤如下：

(1)酶反应底物 Poly(Glu，Tyr) _4:1 用无钾离子的 PBS稀释成 20 g/mL , 包被酶标板， 置于 37°C反应 12~16h后， 弃去孔中液体。

(2)接着用 T-PBS洗板三次， 每次 10 m i

(3) 于 ³⁷ °C烘箱中干燥酶标板

(4) 包被好的酶标板孔内加入受试样品（其中受试 样品临用前先用 DMSO配制成 lxl(T ² M 的储备液，再用反应緩冲液稀释到所需的浓度 后加至实验孔内，使其在 ΙΟΟμί反应体系中达到 相应的终浓度。

(5)加入 ΑΤΡ和受试酪氨酸激酶，加入用反应緩冲液稀 释的 ΑΤΡ溶液 (ΑΤΡ终浓度为 5μΜ) 及用反应緩冲液稀释的受试酪氨酸激酶。 反应的总体积为 100μί。 同时设立阴性对照孔和无酶 对照孔。

(6)将反应体系置于湿盒内， 37°C摇床避光反应 lh, 反应结束后 T-PBS 反 3次。

(7)每孔中加入抗体 PY99 ΙΟΟμί, 37°C摇床反应 30min, T-PBS 3次。

(8)每孔中加入辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠的 IgG ΙΟΟμί, 37°C摇床反应 30min, T-PBS 洗板 3次。

(9)每孔中加入 OPD显色液 ΙΟΟμί, 室温避光反应 l-10min。

(10)每孔中加入 21^的 H ₂ S0 ₄ 溶液终止反应，用可调波长式微孔板酶标 仪测 A ₄₉ 。值。采用 如下的公式计算酶抑制率。

化合物的 OD值 -无酶对照孔 OD值

抑制率 （％) = X 100

阴性对照 OD值 -无酶对照孔 OD值

采用如上的活性测试方法， 测得式 (I)所示的化合物或其盐对 EGFR酶的抑制活性。

表 10-部分化合物在 ΙΟΟμΜ浓度下抑制 EGFR酶的活性测试结果

实施例 11 生物活性试验

本发明式 (I)所示的化合物或其盐采用 SRB法进行了抗大肠癌细胞株 (HCT-116)和人肺癌细 胞株 (A549)活性筛选， 筛选过程参考文献 (Li M. H.; Miao Z. H.; Tan W. F. et al. Clin. Cancer Res. 2004, 10(24): 8266-8274)。

具体的实验步骤如下：

(1)根据肿瘤细胞的生长速率， 将处于对数生长期的大肠癌细胞株 (HCT-116)接种于 96孔 培养板， 贴壁生长 24小时后， 将 1χ1(Γ ⁴ Μ的药品加入， 其浓度设 3个复孔， 并设相应浓度的 生理盐水对照及无细胞调零孔， 肿瘤 /癌细胞在 37°C、 5%C0 ₂ 条件下培养 72小时。

(2)取出培养板， 每孔用 10%冷三乙酸 (TCA)溶液固定细胞， 4°C放置 1小时。

(3) 弃固定液， 用蒸餾水洗涤 5次， 空气中自然干燥。

(4) 然后加入由 1%的冰乙酸配制的 SRB溶液， 室温染色 15分钟。

(5)去上清夜， 用 1%的醋酸溶液洗涤 5次， 空气干燥。

(6) 最后加入 Tris溶液,在平板震荡器上震荡 5分钟。用可调波长式微孔板酶标仪测 560nm 波长下的吸光度值 (A ₅₆ 。)。 采用如下的公式计算酶抑制率。 采用如下的公式计算酶抑制率。

^A 560对照 - ^A 560给药

抑制率 （％) = X 100

A 560对照

采用如上的活性测试方法， 测得式 (I)所示的化合物或其盐在 lxl(T ⁴ M浓度下抑制大肠癌细 胞珠 (HCT-116) 和人肺癌细胞 A549的活性。 实验结果见下表。

表 11- 式 (I)中部分实施例化合物抑制大肠癌细胞珠 (HCT-116)活性测试结果