Formulation à action rapide d'insuline comprenant un composé anionique substitué et un composé polyanionique

[0001] La présente invention concerne une formulation à action rapide d'insuline comprenant au moins un composé anionique substitué et au moins un composé polyanionique, et ledit composé anionique substitué en tant que tel.

[0002] Depuis la production d'insuline par génie génétique, au début des années 80, les patients diabétiques bénéficient d'insuline humaine pour se traiter. Ce produit a grandement amélioré cette thérapie puisque les risques immunologiques liés à l'utilisation d'insuline non humaine en particulier de porc se trouvent éliminés. Cependant, l'insuline humaine injectée par voie sous-cutanée a un effet hypoglycémiant seulement après 60 minutes, ce qui implique que les patients diabétiques traités avec l'insuline humaine doivent procéder à l'injection 30 minutes avant le repas.

[0003] Un des problèmes à résoudre pour améliorer la santé et le confort des patients diabétiques est de mettre à leur disposition des formulations d'insuline qui permettent d'apporter une réponse hypoglycémiante plus rapide que celle de l'insuline humaine et si possible s'approchant de la réponse physiologique de la personne saine après la prise d'un repas. La sécrétion d'insuline endogène chez l'individu sain est immédiatement déclenchée par l'augmentation de la glycémie. L'objectif est de réduire le plus possible le délai entre l'injection d'insuline et le début du repas.

[0004] Aujourd'hui, il est admis que la mise à disposition de telles formulations est utile pour que la prise en charge de la maladie soit la meilleure possible.

[0005] Le génie génétique a permis d'apporter une réponse avec le développement d'insulines analogues rapides. Ces insulines sont modifiées sur un ou deux acides aminés pour être plus rapidement absorbées dans le compartiment sanguin après une injection sous-cutanée. Ces insulines lispro (Humalog®, Eli Lilly), aspart (Novolog®,Novo Nordisk) et glulisine (Apidra®, Sanofi Aventis) sont des solutions stables d'insuline avec une réponse hypoglycémiante plus rapide que celle de l'insuline humaine. Dès lors, les patients traités avec ces insulines analogues rapides peuvent procéder à l'injection d'insuline seulement 15 minutes avant le repas.

[0006] Le principe des insulines analogues rapides est de former des hexamères à la concentration de 100 UI/mL pour assurer la stabilité de l'insuline dans le produit commercial tout en favorisant la dissociation très rapide de ces hexamères en monomères après injection sous-cutanée afin d'obtenir une action rapide.

[0007] L'insuline humaine telle que formulée sous sa forme commerciale, ne permet pas d'obtenir une réponse hypoglycémiante proche en terme de cinétique de la réponse physiologique générée par le début d'un repas (hausse de la glycémie), car à la concentration d'usage (100 UI/mL), en présence de zinc et d'autres excipients tels que le phénol ou le m-crésol, elle s'assemble sous forme d'hexamères alors qu'elle est active sous forme de monomère et de dimère. L'insuline humaine est préparée sous forme d'hexamères pour être stable près de 2 ans à 4°C car sous forme de monomères, elle a une très forte propension à s'agréger puis à fi briller ce qui lui fait perdre son activité. De plus sous cette forme agrégée, elle présente un risque immunologique pour le patient.

[0008] Les dissociations des hexamères en dimères et des di mères en monomères retardent son action de près de 20 minutes comparativement à une insuline analogue rapide (Brange J., et al, Advanced Drug Delivery Review, 35,1999, 307-335).

[0009] En outre, la cinétique de passage des insulines analogues dans le sang, ainsi que leur cinétique de réduction de la glycémie, ne sont pas optimales et il existe un réel besoin d'une formulation ayant un temps d'action encore plus court afin de s'approcher des cinétiques de sécrétion d'insuline endogène chez les personnes saines.

[00010] La société Biodel a proposé une solution à ce problème avec une formulation d'insuline humaine comprenant de l'EDTA et de l'acide citrique telle que décrite dans la demande de brevet US200839365. L'EDTA par sa capacité à complexer les atomes de zinc et l'acide citrique par ses interactions avec les zones cationiques présentes à la surface de l'insuline sont décrits comme déstabilisant la forme hexamèrique de l'insuline et réduisant ainsi son temps d'action.

[00011] Cependant, une telle formulation présente notamment comme inconvénient de dissocier dans la forme pharmaceutique la forme hexamèrique de l'insuline qui est la seule forme stable susceptible de répondre aux exigences de stabilité de la réglementation pharmaceutique.

[00012] On connait également au nom de la demanderesse, les demandes PCT WO2010/122385 et WO2013/064787 qui décrivent des formulations d'un polysaccharide ou d'un oligosaccharide substitué comprenant des groupes carboxyles.

[00013] On connaît encore la demande PCT/FR2013/052736 déposée le 13 novembre 2013 au nom de la demanderesse qui décrit des formulations d'insuline humaine ou analogue et qui permet également de résoudre les différents problèmes évoqués ci- dessus par l'addition d'un composé anionique substitué.

[00014] Les polysaccharides décrits dans les demandes WO 2010/122385A1 et US 2012/094902A1 comme excipients sont des composés constitués de chaînes dont les longueurs sont statistiquement variables et qui présentent une grande richesse de sites d'interaction possibles avec des principes actifs protéiques. Cette richesse pourrait induire un manque de spécificité en termes d'interaction et une molécule plus petite et mieux définie pourrait permettre d'être davantage spécifique à ce sujet. [00015] En outre, une molécule avec un squelette bien défini est en général plus facilement traçable (MS/MS par exemple) dans les milieux biologiques lors d'expériences de pharmacocinétique ou d'ADME (administration, distribution, métabolisme, élimination) par rapport à un polymère qui donne généralement un signal très diffus et bruité en spectrométrie de masse.

[00016] A contrario, il n'est pas exclu qu'une molécule bien définie et plus courte puisse présenter un déficit de sites d'interaction possibles avec des principes actifs protéiques. En effet, en raison de leur taille réduite ils ne présentent pas les mêmes propriétés que les polymères de type polysaccharide car il y a perte de l'effet polymère.

[00017] En dépit de ces inconvénients potentiels, la demanderesse a mis au point des formulations susceptibles d'accélérer l'insuline en utilisant un composé anionique substitué en combinaison avec un composé poiyanionique.

La présente invention comme celle décrite dans la demande PCT/FR2013/052736 permet de résoudre les différents problèmes ci-dessus exposés.

[00018] L'invention consiste en une composition, en solution aqueuse, comprenant de l'insuline sous forme hexamèrique, au moins un composé anionique substitué et un composé poiyanionique. [00019] L'invention consiste en une composition, en solution aqueuse, comprenant de l'insuline sous forme hexamèrique, au moins un composé anionique substitué et au moins un composé poiyanionique,

ledit composé anionique substitué étant constitué d'un nombre discret n compris entre 1 et 8 d'unité(s) saccharidique(s) identiques ou différentes, liées par des liaisons glycosidiques identiques ou différentes, ladite unité saccharidique ou l'une desdites unités saccharidiques étant sous forme ouverte, oxydée ou réduite, ledit composé comportant des groupes carboxyles salifiables et ledit composé anionique substitué portant sur son bout de chaîne réducteur au moins un radical AA issu d'un acide aminé aromatique comportant un phényle ou un indole, substitué ou non substitué, ou d'un dérivé d'acide aminé aromatique comportant un phényle ou un indole, substitué ou non substitué.

[00020] Pour un composé anionique substitué, le nombre discret n compris entre 1 et 8 d'unité(s) saccharidique(s) a une valeur unique choisie dans le groupe constitué par 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 ou 8.

[00021] Ledit composé anionique substitué, constitué d'un nombre discret n compris entre 1 et 8 d'unité(s) saccharidique(s) identiques ou différentes, liées par des liaisons glycosidiques identiques ou différentes, ladite unité saccharidique ou l'une desdites unités saccharidiques étant sous forme ouverte, oxydée ou réduite est issu d'un composé constitué d'un nombre discret n compris entre 1 et 8 d'unité(s) saccharidique(s) identiques ou différentes, liées par des liaisons glycosidiques identiques ou différentes et portant à son extrémité un bout de chaîne réducteur.

[00022] On entend par « unité saccharidique ouverte » une unité saccharidique issue d'une unité saccharidique portant une extrémité réductrice.

[00023] On entend par « reducing end group », « bout de chaîne réducteur », ou « extrémité réductrice », l'extrémité de la chaîne formée d'un nombre défini d'unités saccharidiques portant une fonction hémi-acétal ou aldéhyde. Il se comporte comme un agent réducteur dans le test de Tollens, par exemple, qui permet de doser les bouts de chaîne portant un aldéhyde chez les sucres :

Sucre-CHO + 2Ag ⁺ ( _aq > + 3HO → Sucre-COO ^" + 2Ag< _S ) + 2h O

[00024] On entend par « forme oxydée » que la fonction aldéhyde est sous forme amide, représentée -C(0)N-.

[00025] On entend par « forme réduite » que la fonction aldéhyde est sous forme aminé, représentée -CH2-N-.

[00026] Ledit composé anionique substitué constitué d'un nombre discret n compris entre 1 et 8 d'unité(s) saccharidique(s) identiques ou différentes, liées par des liaisons glycosidiques identiques ou différentes comprend une unité saccharidique sous forme ouverte, oxydée ou réduite, les n-1 autres unités saccharidiques étant sous forme fermée, encore appelée forme cyclique. [00027] Selon un mode de réalisation, le radical AA porté par le bout de chaîne réducteur est lié directement à celui-ci .

[00028] Selon un autre mode de réalisation, le radical AA porté par le bout de chaîne réducteur est lié à celui-ci via un bras de liaison E, au moins divalent.

[00029] Dans un mode de réalisation, le bras de liaison E est issu d'un acide aminé, d'une diamine ou d'un amino-alcool .

[00030] Selon un mode de réalisation, le composé anionique substitué est choisi parmi les composés de formule I, ladite formule I représentant l'unité saccharidique sous forme ouverte dans laquelle au plus l'un des R2, R3, F , R& représente un squelette saccharidique formé d'un nombre discret d'unités saccharidiques fermées :

Formule I

dans laquelle :

1) Z est soit un radical -C=0-, soit un radical -CH2-,

2) X est soit un radical -C=0-, soit un radical -CH2-,

3) Rs est soit un radical -OH, soit un radical -f-[A]-COOH,

4) R2, R3, R , R6 identiques ou différents sont choisis dans le grou e constitué par les radicaux -OH, -f-[A]-COOH et au plus un des R2, R3, R4, R6 est un radical issu d'un squelette saccharidique formé d'un nombre discret n-1 compris entre 1 et 7 (1 < n-1 < 7) d'unités saccharidiques fermées identiques ou différentes dont les fonctions hydroxyles sont substituées ou non substituées par un radical -f- [A]-COOH,

5) -[A]- est un radical au moins divalent comprenant de 1 à 4 atomes de carbone choisi dans le groupe constitué par les radicaux alkyles -(CH2)x- 1 < x < 4, les radicaux comprenant au moins un hétéroatome choisi parmi

0, N et S et les radicaux porteurs de fonctions carboxyles et/ou -f-[A]- COOH est issu d'un acide aminé ou d'un alcoolacide, comprenant de 2 à 5 atomes de carbone, et est lié aux unités saccharidiques du composé par une fonction f ;

6) f est choisie dans le groupe constitué par les fonctions éther, carbamate, ou amide ;

7) Ri est un radical -N (L) _s ([E]-(o-[AA])u)t ou -N(L) _S [AA]

- le bras de liaison -E- est un radical au moins divalent comprenant de 1 à 10 atomes de carbone comprenant éventuellement au moins un hétéroatome choisi parmi O, N et S, et éventuellement porteur de fonctions carboxyle, et/ou -N(L) _s -([E]-(o-) _u ) est issu d'un acide aminé, d'une diamine, d'un amino-alcool, d'une aminé diacide, d'une triamine, d'une tétraamine, d'un amino-diol ou d'un amino-triol comprenant de 2 à 12 atomes de carbone dont les fonctions aminés sont primaires et/ou secondaires;

- -[AA] est un radical issu d'un acide aminé aromatique comportant un phényle ou un indole, substitué ou non substitué, ou d'un dérivé d'acide aminé aromatique comportant un phényle ou un indole, substitué ou non substitué,

- o est une fonction amide, carbamate ou carbamide, u = 1, 2 ou 3 et

lorsque Ri est un radical -N(L) _s ([E]-(o-[AA] ) _u )t et

- lorsque X est un radical -C-O- alors

o s = 0 ou 1, t = 1 ou 2 et s+t = 2 ;

o L est choisi dans le groupe constitué de

• -H, et

^■ un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone, et

- lorsque X est un radical -Chh-, alors

o s = 0, 1 ou 2, t = 1 ou 2 et s+t = 2 ou 3 ;

o si s = 1, L est choisi dans le groupe constitué de

^■ -H, et

^■ -H et/ou -[A]-COOH si f telle que définie au point 6) est une fonction éther,

■ -H et/ou -CO-NH-[A]-COOH si f telle que définie au point 6) est une fonction carbamate, et

^■ un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone, et

o si s = 2, L est choisi dans le groupe constitué de :

^■ -H, et

• -H et/ou -[A]-COOH si f telle que définie au point 6) est une fonction éther, et

■ un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone, et

lorsque Ri est un radical -N(L) _S [AA] et

- lorsque X est un radical -C=0- alors s = 1 et L est choisi dans le groupe constitué de :

^■ -H,

^■ un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone,

- lorsque X est un radical -CH2-, alors s = 1 ou 2 et

o si s = 1, L est choisi dans le groupe constitué de :

^■ -H, et

• -H et/ou -[A]-COOH si f telle que définie au point 6) est une fonction éther,

■ -H et/ou-CO-NH-[A]-COOH si f telle que définie au point 6) est une fonction carbamate, et ■ un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone, et

o si s = 2, L est choisi dans le groupe constitué de

« -H, et

■ -H et/ou -[A]-COOH si f telle que définie au point 6) est une fonction éther, et

■ un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone, et

8) le degré de substitution, représenté par p, est le nombre de fonctions carboxylates par unité saccharidique, lesdites fonctions carboxylates étant éventuellement des fonctions carboxylates naturellement présentes sur les unités saccharidiques, étant issues de la substitution par des radicaux -[A]- COOH et/ou des radicaux -[AA] et 6 > p > 0,1 ,

et les fonctions acides étant sous forme de sels de cations alcalins choisis dans le groupe constitué par Na ⁺ et K ⁺ .

[00031] Quand u est supérieur ou égal à 2, alors les radicaux -[AA] peuvent être identiques ou différents.

[00032] Quand t est égal à 2, alors les -([E]-(o-[AA]) _u ) peuvent être identiques ou différents.

[00033] Quand s est égal à 2, alors :

- soit t = 1 et l'atome d'azote de -N(L) _s ([E]-(o-[AA]) _u ) est sous forme d'ammonium quaternaire, c'est-à-dire sous forme -N ⁺ (L)2([E]-(o-[AA]) _u ), et

- soit -N(L) _S [AA] est sous forme d'ammonium quaternaire, c'est-à-dire sous forme -

N ⁺ (L) ₂ [AA].

[00034] En fonction du pH, les fonctions aminés peuvent ou non être sous forme de sels d'ammonium.

[00035] Dans un mode de réalisation, le composé anionique substitué est choisi parmi les composés de formule I, dans laquelle f est une fonction éther, et

- lorsque Ri est un radical -N(L) _s ([E]-(o-[AA]) _u )t et N(L) _s -([E]-(o-) _u ) est issu d'un acide aminé, d'une diamine ou d'un amino-alcool porteur de fonctions aminé primaire :

lorsque X est un radical -C=0- alors

- s = 0 ou 1, t = 1 ou 2 et s+t = 2 et L est -H, et lorsque X est un radical -CH2-, alors

o s = 0, 1 ou 2, t = 1 ou 2 et s+t = 2 ou 3 et L est H et/ou - [A]-COOH

lorsque Ri est un radical -N(L) _S [AA] et lorsque X est un radical -C=0- alors s = 1 et L est -H, lorsque X est un radical -CH2-, alors s = 1 ou 2 et L est H et/ou -[A]- COOH.

[00036] Dans un mode de réalisation, le composé anionique substitué est choisi parmi les composés de formule I, dans laquelle f est une fonction carbamate, et

- lorsque Ri est un radical -N(L) _s ([E]-(o-[AA]) _u ) _t et N(L) _s -([E]-(o-) _u ) est issu d'un acide aminé, d'une diamine ou d'un amino-alcool porteur de fonctions aminé primaire :

- lorsque X est un radical -C=0- alors

« s = 0 ou 1, t = 1 ou 2 et s+t = 2 et L -H, et lorsque X est un radical -CH2-, alors

o s = 0, 1 ou 2, t = 1 ou 2 et s+t = 2 ou 3 ;

- si s = 1, L est H et/ou-CO-NH-[A]-COOH, et

■ si s = 2, L est -H, ou L est H et -CO-NH-[A]-COOH lorsque Ri est un radical -N(L) _S [AA] et

- lorsque X est un radical -C=0- alors s = 1 et L est -H,

- lorsque X est un radical -CH2-, alors s = 1 ou 2 et, L est -H et/ou -CO-

NH-[A]-COOH,.

[00037] Dans un mode de réalisation, le composé anionique substitué est choisi parmi les composés de formule I, dans laquelle lorsque Ri est un radical -N(L) _S ([E]- (o-[AA]) _u )t et N(L) _s -([E]-(o-)u) est issu d'un acide aminé, d'une diamine ou d'un amino-alcool porteur de fonctions aminé secondaire :

- lorsque Ri est un radical -N(L) _s ([E]-(o-[AA]) _u )t et

- lorsque X est un radical -C=0- alors

■ s = 1, t = 1 et L est un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone, et

- lorsque X est un radical -CH2-, alors

o s = 1 ou 2, t = 1 ou 2 et s+t = 2 ou 3 ;

o si s = 1, L est un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone, et

o si s = 2, L est choisi dans le groupe constitué de :

■ un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone, et

■ un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone et/ou -H, et ■ un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone et/ou -[A]-COOH si f est une fonction éther, et

■ un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone et/ou -CO-NH-[A]-COOH si f est une fonction carbamate

lorsque Ri est un radical -N(L) _S [AA] et

- lorsque X est un radical -OO- alors s = 1 et L est un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone,

- lorsque X est un radical -CH2-, alors s = 1 ou 2

o si s = 1, L est un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone, et

o si s = 2, L est choisi dans le groupe constitué de :

■ un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone, et

■ un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone et/ou -H, et

■ un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone et/ou -[A]-COOH si f est une fonction éther, et

■ un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone et/ou -CO-NH-[A]-COOH si f est une fonction carbamate

[00038] Le radical -[AA] est issu d'un acide aminé aromatique comportant un phényle ou un indole, substitué ou non substitué, ou d'un dérivé d'acide aminé aromatique comportant un phényle ou un indole, substitué ou non substitué.

[00039] Par « acide aminé aromatique comportant un phényle ou un indole, substitué ou non substitué », on entend un composé comprenant de 7 à 20 atomes de carbone, un phényle ou un indole, substitué ou non substitué, au moins une fonction aminé et au moins une fonction acide.

[00040] Dans un mode de réalisation, le composé anionique substitué est choisi parmi les composés de formule I, dans laquelle le radical -[AA] est issu d'un acide aminé aromatique comportant un phényle ou un indole, substitué ou non substitué.

[00041] Le radical -[AA] est lié au radical -E- ou à -X- suite à une réaction de l'amine du précurseur de -[AA], acide aminé aromatique ou dérivé d'acide aminé aromatique, avec un précurseur du radical -E- ou avec l'extrémité réductrice de la chaîne saccharidique, éventuellement oxydée. [00042] Dans un mode de réalisation, le composé anionique substitué est choisi parmi les composés de formule I, dans laquelle le radical -[AA] est issu d'un acide aminé aromatique comportant un phényle ou un indole, substitué ou non substitué, choisi parmi les acides alpha- ou béta-aminés.

[00043] Dans un mode de réalisation, le composé anionique substitué est choisi parmi les composés de formule I, dans laquelle le radical -[AA] est issu d'un acide aminé aromatique comportant un phényle ou un indole, substitué ou non substitué comprenant une unique fonction aminé et une unique fonction acide.

[00044] Dans un mode de réalisation, le composé anionique substitué est choisi parmi les composés de formule I, dans laquelle le radical -[AA] est issu d'un acide aminé aromatique comportant un phényle ou un indole, substitué ou non substitué choisi dans le groupe constitué par la phénylalanine, l'alpha-méthyl phénylalanine, la 3,4-dihydroxyphénylalanine, l'alpha phénylglycine, la 4-hydroxy phénylglycine, la 3,5- phénylglycine, la tyrosine, l'alpha-méthyl tyrosine, la O-méthyl tyrosine et le tryptophane.

[00045] Dans un mode de réalisation, le composé anionique substitué est choisi parmi les composés de formule I, dans laquelle le radical -[AA] est issu d'un acide aminé aromatique comportant un phényle ou un indole, substitué ou non substitué choisi dans le groupe constitué par les acides aminés naturels.

[00046] Dans un mode de réalisation, les acides aminés naturels sont choisis dans le groupe constitué par la phénylalanine, la tyrosine et le tryptophane.

[00047] Dans un mode de réalisation, l'acide aminé naturel est la phénylalanine.

[00048] L'acide aminé aromatique comportant un phényle ou un indole, substitué ou non substitué, et ses dérivés peuvent, être sous forme lévogyre, dextrogyre ou sous forme racémique.

[00049] Dans un mode de réalisation, il est sous forme lévogyre.

[00050] Par « dérivé d'acide aminé aromatique », on entend les dérivés décarboxylés, les dérivés amino-alcools, ou amino-amides correspondant aux acides aminés aromatiques comportant un phényle ou un indole, substitué ou non substitué.

[00051] Dans un mode de réalisation, le « dérivé d'acide aminé aromatique », comportant un phényle ou un indole, substitué ou non substitué, est choisi dans le groupe constitué par les amino-alcools et les amino-amides.

[00052] Dans un mode de réalisation, le composé anionique substitué est choisi parmi les composés de formule I, dans laquelle la fonction f est une fonction éther.

[00053] Dans un mode de réalisation, le composé anionique substitué est choisi parmi les composés de formule I, dans laquelle la fonction f est une fonction carbamate. [00054] Dans un mode de réalisation, le composé anionique substitué est choisi parmi les composés de formule I, dans laquelle la fonction f est une fonction amide.

[00055] Dans un mode de réalisation, le composé anionique substitué est choisi parmi les composés de formule I, dans laquelle le radical -f-[A]-COOH est choisi dans le groupe constitué par les enchaînements suivants, f ayant la signification donnée ci- dessus :

ou leur sels de cations alcalins choisis dans le groupe constitué de Na ⁺ et K ⁺ .

[00056] Dans un mode de réalisation, le radical -f-[A]-COOH comprend un radical - [A]- comprenant 1 ou 2 atomes de carbone, en particulier ledit radical - [A]- est lié à une unité saccharidique par une fonction f éther.

[00057] Dans un mode de réalisation, le composé anionique est choisi parmi les composés de formule I, dans laquelle le radical -f-[A]-COOH est -f-CH ₂ -COOH et f est une fonction éther.

[00058] Dans un mode de réalisation le composé anionique substitué est choisi parmi les composés de formule I, dans laquelle le radical -f-[A]-COOH est issu d'un acide aminé comprenant de 2 à 5 atomes de carbone ; et -f- est une fonction amide ou carbamate.

[00059] Dans un mode de réalisation, f est une fonction amide.

[00060] Dans un mode de réalisation, le composé anionique substitué est choisi parmi les composés de formule I, dans laquelle l'acide aminé comprenant de 2 à 5 atomes de carbone est la glycine.

[00061] Selon un mode de réalisation, le composé anionique substitué comprend au moins une fonction carboxylate. La fonction carboxylate peut être présente naturellement sur les unités saccharidiques, cycliques ou ouverte, ou provenir d'un radical - -[A]-COOH ou d'un radical -[AA] .

[00062] Selon un mode de réalisation p > 0, 1.

[00063] Selon un mode de réalisation p > 0,2.

[00064] Selon un mode de réalisation p > 0,3.

[00065] Selon un mode de réalisation p > 0,5.

[00066] Selon un mode de réalisation p > 0,7.

[00067] Selon un mode de réalisation p > 0,9. [00068] Selon un mode de réalisation 3,5 > p.

[00069] Selon un mode de réalisation 3,2 > p.

[00070] Selon un mode de réalisation 3 > p.

[00071] Selon un mode de réalisation 2,8 > p.

[00072] Selon un mode de réalisation 2,5 > p.

[00073] Selon un mode de réalisation 2 > p.

[00074] Selon un mode de réalisation 3,5 > p > 0,1.

[00075] Selon un mode de réalisation 3,2 > p > 0,2.

[00076] Selon un mode de réalisation 3 > p > 0,3.

[00077] Selon un mode de réalisation 2,8 > p > 0,5.

[00078] Selon un mode de réalisation 2,5 > p > 0,7.

[00079] Selon un mode de réalisation 2 > p > 0,9.

[00080] Dans un mode de réalisation, le composé anionique substitué est choisi parmi les composés de formule I, dans laquelle au plus un des R2, R3, R4, R6 est un radical issu d'un squelette formé d'un nombre discret n-1 compris entre 1 et 6, soit 1 < n-1 < 6.

[00081] Dans un mode de réalisation, 1 < n-1 < 5.

[00082] Dans un mode de réalisation, 2 < n-1 < 4.

[00083] Dans un mode de réalisation n-1 est égal à 1.

[00084] Dans un mode de réalisation n-1 est égal à 2.

[00085] Dans un mode de réalisation n-1 est égal à 3.

[00086] Dans un mode de réalisation n-1 est égal à 4.

[00087] Dans un mode de réalisation n-1 est égal à 5.

[00088] Dans un mode de réalisation n-1 est égal à 6.

[00089] Dans un mode de réalisation n-1 est égal à 7.

[00090] On entend par squelette ou squelette saccharidique, un radical, formé d'un nombre discret n-1 compris entre 1 et 7 d'unités saccharidiques fermées, identiques ou différentes.

[00091] Dans un mode de réalisation le composé anionique substitué est choisi parmi les composés de formule I, dans laquelle au plus un des R2, R3, R4, R6 est un radical issu d'un squelette saccharidique formé d'un nombre discret n-1 d'unités saccharidiques identiques ou différentes et lesdites unités saccharidiques sont choisies dans le groupe constitué par les pentoses, les hexoses, les acides uroniques et les N- acétylhexosamines. [00092] Dans un mode de réalisation, au moins une unité saccharidique du squelette saccharidique est choisie dans le groupe des pentoses.

[00093] Dans un mode de réalisation, les pentoses sont choisis dans le groupe constitué de l'arabinose, du ribulose, du xylulose, du lyxose, du ribose, du xylose et du désoxyribose.

[00094] Dans un mode de réalisation, au moins une unité saccharidique du squelette saccharidique est choisie dans le groupe des acides uroniques.

[00095] Dans un mode de réalisation, les acides uroniques sont choisis dans le groupe constitué de l'acide glucuronique, de l'acide iduronique, de l'acide galacturonique, de l'acide gluconique, de l'acide mucique, de l'acide glucarique et de l'acide galactonique.

[00096] Dans un mode de réalisation, au moins une unité saccharidique du squelette saccharidique est choisie dans le groupe des N-acétylhexosamines.

[00097] Dans un mode de réalisation, la N-acétylhexosamine est choisie dans le groupe constitué de la N-acétylgalactosamine, de la N-acétylglucosamine et de la N- acétylmannosamine.

[00098] Dans un mode de réalisation, les unités saccharidiques du squelette saccharidique, identiques ou différentes sont liées par des liaisons glycosidiques identiques ou différentes, notamment par des liaisons glycosidiques de type (1,1), (1,2), (1,3), (1,4) et/ou (1,6).

[00099] Dans un mode de réalisation, les liaisons glycosidiques du squelette saccharidique sont de types (1,4) ou (1,6).

[000100] Dans un mode de réalisation, les liaisons glycosidiques du squelette saccharidique sont de types (1,4).

[000101] Dans un mode de réalisation, au moins une unité saccharidique du squelette saccharidique est choisie dans le groupe des hexoses.

[000102] Tout particulièrement, toutes les unités saccharidiques du squelette saccharidique sont des hexoses.

[000103] Dans un mode de réalisation, les hexoses sont choisis dans le groupe constitué du mannose, du glucose, du fructose, du sorbose, du tagatose, du psicose, du galactose, de l'allose, de l'altrose, du talose, de l'idose, du gulose, du fucose, du fuculose et du rhamnose.

[000104] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique est formé d'un nombre discret n-l = l unité saccharidique choisies parmi les hexoses. Plus particulièrement choisi dans le groupe constitué du mannose, du glucose, du fructose, du sorbose, du tagatose, du psicose, du galactose, de l'allose, de l'altrose, du talose, de l'idose, du gulose, du fucose, du fuculose et du rhamnose. [000105] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique est formé d'un nombre discret n-l=2 d'unités saccharidiques identiques ou différentes choisies parmi les hexoses liées par une liaison glycosidique de type (1, 1).

[000106] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique est formé d'un nombre discret n-l=2 d'unités saccharidiques différentes choisies parmi les hexoses et liées par une liaison glycosidique de type (1, 1), ledit squelette saccharidique étant choisi dans le groupe constitué du tréhalose et du sucrose.

[000107] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique est formé d'un nombre discret n-l=2 d'unités saccharidiques identiques ou différentes choisies parmi les hexoses liées par une liaison glycosidique de type (1,2).

[000108] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique est formé d'un nombre discret n-l=2 d'unités saccharidiques identiques ou différentes choisies parmi les hexoses liées par une liaison glycosidique de type (1,2), ledit squelette saccharidique étant le kojibiose.

[000109] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique est formé d'un nombre discret n-l=2 d'unités saccharidiques identiques ou différentes choisies parmi les hexoses liées par une liaison glycosidique de type (1,3).

[000110] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique est formé d'un nombre discret n-l=2 d'unités saccharidiques identiques ou différentes choisies parmi les hexoses liées par une liaison glycosidique de type (1,3), ledit squelette saccharidique étant du nigeriose ou du laminaribiose.

[000111] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique est formé d'un nombre discret n-l=2 d'unités saccharidiques identiques ou différentes choisies parmi les hexoses liées par une liaison glycosidique de type (1,4).

[000112] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique est formé d'un nombre discret n-l=2 d'unités saccharidiques identiques ou différentes choisies parmi les hexoses liées par une liaison glycosidique de type (1,4), ledit squelette saccharidique étant un dissacharide choisi dans le groupe constitué du maltose, du lactose et de la cellobiose.

[000113] Dans un mode de réalisation le squelette saccharidique est formé d'un nombre discret n-l=2 d'unités saccharidiques identiques ou différentes choisies parmi les hexoses liées par une liaison glycosidique de type (1,6).

[000114] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique formé d'un nombre discret n-l = 2 d'unités saccharidiques identiques ou différentes choisies parmi les hexoses liées par une liaison glycosidique de type (1,6), ledit squelette saccharidique étant un dissacharide choisi dans le groupe constitué de l'isomaltose, du mélibiose et de la gentiobiose. [000115] Dans un mode de réalisation, le composé anionique substitué est choisi parmi les composés anioniques constitués d'un squelette saccharidique formé d'un nombre discret n-l=2 d'unités saccharidiques identiques ou différentes choisies parmi les hexoses liées par une liaison glycosidique de type (1,6), ledit squelette saccharidique étant l'isomaltose.

[000116] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique du composé anionique substitué est formé d'un nombre discret 3 < n-1 < 8 d'unités saccharidiques identiques ou différentes.

[000117] Dans un mode de réalisation, au moins une des unités saccharidiques identiques ou différentes, qui composent le squelette saccharidique formé d'un nombre discret 3 ≤ n-1 ≤ 8 d'unités saccharidiques est choisie dans le groupe constitué des hexoses reliés par des liaisons glycosidiques identiques ou différentes.

[000118] Dans un mode de réalisation, les unités saccharidiques identiques ou différentes, qui composent le squelette saccharidique formé d'un nombre discret 3 < n-1 < 8 d'unités saccharidiques sont choisies parmi les hexoses et liées par au moins une liaison glycosidique de type (1,2).

[000119] Dans un mode de réalisation, les unités saccharidiques identiques ou différentes, qui composent le squelette saccharidique formé d'un nombre discret 3 < n-1 < 8 d'unités saccharidiques sont choisies parmi les hexoses et liées par au moins une liaison glycosidique de type (1,3).

[000120] Dans un mode de réalisation, les unités saccharidiques identiques ou différentes, qui composent le squelette saccharidique formé d'un nombre discret 3 < n-1 < 8 d'unités saccharidiques sont choisies parmi les hexoses et liées par au moins une liaison glycosidique de type (1,4).

[000121] Dans un mode de réalisation, les unités saccharidiques identiques ou différentes, qui composent le squelette saccharidique formé d'un nombre discret 3 < n-1 < 8 d'unités saccharidiques sont choisies parmi les hexoses et liées par au moins une liaison glycosidique de type (1,6). [000122] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique est formé d'un nombre discret n-1-3 d'unités saccharidiques identiques ou différentes.

[000123] Dans un mode de réalisation, les trois unités saccharidiques du squelette saccharidique sont identiques.

[000124] Dans un mode de réalisation, deux des trois unités saccharidiques du squelette saccharidique sont identiques.

[000125] Dans un mode de réalisation, les unités saccharidiques du squelette saccharidique sont identiques ou différentes et sont choisies parmi les hexoses, l'hexose central étant lié aux deux autres unités saccharidiques par une liaison glycosidique de type (1,2) et par une liaison glycosidique de type (1,4).

[000126] Dans un mode de réalisation, les unités saccharidiques identiques ou différentes du squelette saccharidique sont choisies parmi les hexoses et l'hexose central est lié aux deux autres unités saccharidiques par une liaison glycosidique de type (1,3) et par une liaison glycosidique de type (1,4).

[000127] Dans un mode de réalisation, les unités saccharidiques identiques ou différentes du squelette saccharidique sont choisies parmi les hexoses et l'hexose central est lié aux deux autres unités saccharidiques par une liaison glycosidique de type (1,2) et par une liaison glycosidique de type (1,6).

[000128] Dans un mode de réalisation, les unités saccharidiques identiques ou différentes du squelette saccharidique sont choisies parmi les hexoses et l'hexose central est lié aux deux autres unités saccharidiques par une liaison glycosidique de type (1,2) et par une liaison glycosidique de type (1,3).

[000129] Dans un mode de réalisation, les unités saccharidiques identiques ou différentes du squelette saccharidique sont choisies parmi les hexoses et l'hexose central est lié aux deux autres unités saccharidiques par une liaison glycosidique de type (1,4) et par une liaison glycosidique de type (1,6).

[000130] Dans un mode de réalisation, les trois unités saccharidiques identiques ou différentes du squelette saccharidique sont des motifs hexose choisis dans le groupe constitué par le mannose et le glucose.

[000131] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique est le maltotriose.

[000132] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique du composé anionique substitué est l'isomaltotriose.

[000133] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique est formé d'un nombre discret n-l=4 d'unités saccharidiques identiques ou différentes.

[000134] Dans un mode de réalisation, les quatre unités saccharidiques du squelette saccharidique substitué sont identiques.

[000135] Dans un mode de réalisation, trois des quatre unités saccharidiques du squelette saccharidique sont identiques.

[000136] Dans un mode de réalisation, les quatre unités saccharidiques du squelette saccharidique sont des motifs hexose choisis dans le groupe constitué par le mannose et le glucose.

[000137] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique est du maltotétraose.

[000138] Dans un mode de réalisation, les unités saccharidiques identiques ou différentes du squelette saccharidique sont choisies parmi les hexoses, un hexose terminal est lié à une unité saccharidique par une liaison glycosidique de type (1,2) et les autres sont liés entre eux par une liaison glycosidique de type (1,6).

[000139] Dans un mode de réalisation, les unités saccharidiques identiques ou différentes du squelette saccharidique sont choisies parmi les hexoses et liées par une liaison glycosidique de type (1,6).

[000140] Dans un mode de réalisation, les unités saccharidiques identiques ou différentes du squelette saccharidique sont choisies parmi les hexoses et liées par une liaison glycosidique de type (1,4).

[000141] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique est formé d'un nombre discret n-l=5 d'unités saccharidiques identiques ou différentes.

[000142] Dans un mode de réalisation, les cinq unités saccharidiques du squelette saccharidique sont identiques.

[000143] Dans un mode de réalisation, les cinq unités saccharidiques du squelette saccharidique sont des motifs hexose choisis dans le groupe constitué par le mannose et le glucose.

[000144] Dans un mode de réalisation, les unités saccharidiques identiques ou différentes du squelette saccharidique sont choisies parmi les hexoses et liées par une liaison glycosidique de type (1,4).

[000145] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique est du maltopentaose.

[000146] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique du composé anionique substitué est formé d'un nombre discret n-l=6 d'unités saccharidiques identiques ou différentes.

[000147] Dans un mode de réalisation, les six unités saccharidiques du squelette saccharidique sont identiques. Dans un mode de réalisation, les unités saccharidiques identiques ou différentes du squelette saccharidique sont choisies parmi les hexoses et liées par une liaison glycosidique de type (1,4).

[000148] Dans un mode de réalisation, les six unités saccharidiques identiques ou différentes du squelette saccharidique sont des motifs hexose choisis dans le groupe constitué par le mannose et le glucose.

[000149] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique est du maltohexaose.

[000150] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique est formé d'un nombre discret n-l =7 d'unités saccharidiques identiques ou différentes.

[000151] Dans un mode de réalisation, les sept unités saccharidiques du squelette saccharidique sont identiques. [000152] Dans un mode de réalisation, les unités saccharidiques identiques ou différentes du squelette saccharidique sont choisies parmi les hexoses et liées par une liaison glycosidique de type (1,4).

[000153] Dans un mode de réalisation, les sept unités saccharidiques du squelette saccharidique sont des motifs hexose choisis dans le groupe constitué par le mannose et le glucose.

[000154] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique du composé anionique substitué est du maltoheptaose. [000155] Le composé anionique substitué est choisi parmi les composés de formule I, dans laquelle l'unité saccharidique sous forme ouverte est issue d'une unité saccharidique choisie dans le groupe constitué par les pentoses, les hexoses, les acides uroniques et les les N-acétylhexosamines.

[000156] Dans un mode de réalisation, le pentose est choisi dans le groupe constitué de l'arabinose, du ribulose, du xylulose, du lyxose, du ribose, du xylose et du désoxyribose.

[000157] Dans un mode de réalisation, l'hexose est choisi dans le groupe constitué du mannose, du glucose, du fructose, du sorbose, du tagatose, du psicose, du galactose, de l'allose, de l'altrose, du talose, de l'idose, du gulose, du fucose, du fuculose et du rhamnose.

[000158] Dans un mode de réalisation, l'acide uronique est choisi dans le groupe constitué de l'acide glucuronique, de l'acide iduronique, de l'acide gaiacturonique, de l'acide gluconique, de l'acide mucique, de l'acide glucarique et de l'acide galactonique.

[000159] Dans un mode de réalisation, la N-acétylhexosamine est choisie dans le groupe constitué de la N-acétylgalactosamine, de la N-acétylglucosamine et de la N- acétylmannosamine

[000160] Dans un mode de réalisation le composé anionique substitué est choisi parmi les composés de formule I, dans laquelle aucun des Rz, S¾, R ₄ , RÔ n'est un radical issu d'un squelette saccharidique formé d'un nombre discret n-1 compris entre 1 et 7 (1 < n-1 < 7) d'unités saccharidiques identiques ou différentes. Dans ce mode de réalisation n= l et le composé anionique substitué est constitué de la seule unité saccharidique ouverte.

[000161] Dans un mode de réalisation, le composé anionique substitué est choisi parmi les composés de formule I, dans laquelle l'un des R2, R3, R ₄ , RÔ qui est un radical issu d'un squelette saccharidique est lié à l'unité saccharidique ouverte par une liaison glycosidique de type (1,2), (1,3), (1,4) ou ( 1,6). [000162] Dans un mode de réalisation, l'un des R2, R3, R4, R6 qui est un radical issu d'un squelette saccharidique est lié à l'unité saccharidique ouverte par une liaison glycosidique de type (1,4) ou (1,6).

[000163] Dans un mode de réalisation, l'un des R2, R3, R4, Re qui est un radical issu d'un squelette saccharidique est lié à l'unité saccharidique ouverte par une liaison glycosidique de type (1,4).

[000164] Dans un mode de réalisation, les unités saccharidiques du squelette saccharidique et l'unité saccharidique dont est issue l'unité saccharidique ouverte sont identiques.

[000165] Dans un mode de réalisation, les unités saccharidiques du squelette saccharidique et l'unité saccharidique dont est issue l'unité saccharidique ouverte sont des hexoses.

[000166] Dans un mode de réalisation l'enchaînement saccharidique, c'est-à-dire les n unité(s) saccharidique(s), du composé anionique substitué est issu d'un composé naturel.

[000167] Dans un mode de réalisation, l'enchaînement saccharidique du composé anionique substitué est issu d'un composé synthétique.

[000168] Dans un mode de réalisation, l'enchaînement saccharidique du composé anionique substitué est issu d'un composé obtenu par dégradation enzymatique d'un polysaccharide suivie d'une purification.

[000169] Dans un mode de réalisation, l'enchaînement saccharidique du composé anionique substitué est issu d'un composé obtenu par dégradation chimique d'un polysaccharide suivie d'une purification.

[000170] Dans un mode de réalisation, l'enchaînement saccharidique du composé anionique substitué est issu d'un composé obtenu par voie chimique, par couplage covalent de précurseurs de plus bas poids moléculaire.

[000171] Dans un mode de réalisation, l'enchaînement saccharidique du composé anionique substitué est issu d'un oligosaccharide choisi parmi le sophorose, le lactulose, le maltulose, le leucrose, le rutinose, l'isomaltulose, le fucosyllactose, le panose.

[000172] Dans un mode de réalisation, le composé anionique substitué est issu d'un composé portant un bout de chaîne réducteur sous forme fermée ou cyclique.

[000173] Le composé anionique substitué comporte à une de ses extrémités une unité saccharidique ouverte, sous forme réduite suite à une réaction d'amination réductrice (tel que décrit par exemple dans les publications M. Yalpani et al ., Journal of Polymer Science ; Polymer Chemistry Edition 1985, 23, 1395-1405, ou B.T. Chao et al ., Tetrahedron 2005, 61, 5725-5734) ou sous forme oxydée suite à une oxydation de la fonction hémiacétal suivie de l'ouverture du cycle oxydé par réaction avec une molécule portant une fonction aminé (tel que décrit par exemple dans les publications T. Zhang et al ., Macromolecules 1994, 27, 7302-7308 ou S. Takeoka et al., Journal of the Chemical Society, Faraday Transactions 1998, 94(15), 2151-2158) .

[000174] Dans un mode de réalisation, le radical Ri est choisi parmi les radicaux de formule -N(L) _s -([E]-(o-[AA]„)t.

[000175] Dans un mode de réalisation, E comprend 1 à 8 atomes de carbone.

[000176] Dans un mode de réalisation, E comprend 1 à 6 atomes de carbone.

[000177] Dans un mode de réalisation, E comprend 1 à 4 atomes de carbone.

[000178] Dans un mode de réalisation, E comprend 1 ou plusieurs hétéroatomes choisi parmi O, N et S.

[000179] Dans un mode de réalisation, le radical -N(L) _s -([E]-(o-[AA] _u )t est choisi parmi les radicaux dans lesquels -N(L) _s -( [E]-(o-) _u )- est un radical au moins divalent issu d'un acide aminé comprenant de 2 à 12 atomes de carbone.

[000180] Dans un mode de réalisation, l'acide aminé comprend de 2 à 10 atomes de carbone.

[000181] Dans un mode de réalisation, l'acide aminé est choisi dans le groupe constitué par la glycine, la leucine, la phénylalanine, la lysine, l'isoleucine, l'alanine, la valine, la sérine, la thréonine, l'acide aspartique et l'acide glutamique.

[000182] Dans un mode de réalisation, l'acide aminé est choisi dans le groupe constitué de l'acide aspartique ou de l'acide glutamique.

[000183] L'acide aminé peut être soit lévogyre, soit dextrogyre, soit sous forme racémique.

[000184] Dans un mode de réalisation, l'acide aminé est lévogyre. [000185] Dans un mode de réalisation, le radical -N(L) _s -([E]-(o-) _u ) est un radical au moins divalent issu d'une diamine, d'une triamine, d'une tétraamine, d'un amino- alcool, d'un amino-diol ou d'un amino-triol.

[000186] Dans un mode de réalisation les fonctions aminés de ces composés sont des aminés primaires.

[000187] Dans un mode de réalisation les fonctions aminés de ces composés sont des aminés secondaires porteuses d'un radical alkyle linéaire ou ramifié comprenant de 1 à 4 atomes de carbone. [000188] Dans un mode de réalisation, le radical -N(L) _s -([E]-(o-) _u ) est un radical au moins divalent issu d'un mono- ou polyéthylène glycol aminé.

[000189] Dans un mode de réalisation, le radical -N(L) _s -([E]-(o-) _u ) est un radical au moins divalent issu d'un mono- ou polyéthylène glycol aminé choisi dans le groupe constitué par l'éthanolamine, le diéthylène glycol aminé et le triéthylène glycol aminé.

[000190] Dans un mode de réalisation, le radical -N(L) _s -([E]-(o-) _u ) est un radical au moins divalent issu d'un mono- ou polyéthylène glycol diamine.

[000191] Dans un mode de réalisation, le radical -N(L) _s -([E]-(o-) _u ) est un radical au moins divalent issu de l'éthylènediamine.

[000192] Dans un mode de réalisation, le radical -N(L) _s -([E]-(o-)u) est un radical au moins divalent issu d'un polyéthylène glycol diamine choisi dans le groupe constitué par le diéthylène glycol diamine et le triéthylène glycol diamine.

[000193] Selon un mode de réalisation, le radical -N(L) _s -([E]-(o-)u) est un radical trivalent, notamment -N(L) _s -([E]-(o-) _u ) est issu d'une triamine.

[000194] Dans un mode de réalisation, le radical -N(L) _s -([E]-(o-) _u ) est un radical trivalent, notamment -N(L) _s -([E]-(o-) _u ) est issu d'une triamine, notamment -N(L) _S -

([E]-(o-)u) est issu d'un acide aminé portant deux fonctions aminés, comme la lysine ou l'ornithine, amidifié par une diamine, comme l'éthylènediamine.

[000195] Dans un mode de réalisation -N(L) _s -([E]-(o-) _u ) est un radical tétravalent, notamment -N(L) _s -([E]-(o-) _u ) est issu du trishydroxyméthylaminométhane, encore appelé 2-amino-2-hydroxyméthyl-l,3-propanediol, ou TRIS.

[000196] Dans un mode de réalisation, le composé anionique substitué répond à la Formule I dans laquelle :

1) X est un radical -CH ₂ -,

2) Ri est un radical -N(L) _s ([E]-(o-[AA]) _u )t, L, E, AA, s, t, u et o étant tels que définis ci-dessus.

[000197] Dans un mode de réalisation, L est -H et/ou -[AJ-COOH si f est une fonction éther.

[000198] Dans un mode de réalisation, s = 1.

[000199] Dans un mode de réalisation, t = 1.

[000200] Dans un mode de réalisation, E est issu d'un acide aminé, d'une aminé diacide, d'une diamine, d'une triamine, d'une amine-alcool ou d'un amino-diol.

[000201] Dans un mode de réalisation, E est issu d'un acide aminé, de l'éthylène diamine ou de l'éthanolamine.

[000202] Dans un mode de réalisation, -[AA] est issu de la phénylalanine, de la phénylglycine, de la tyrosine ou du tryptophane. [000203] Dans un mode de réalisation, -[AA] est issu de la phénylalanine.

[000204] Dans un mode de réalisation, u = 1 ou 2.

[000205] Dans un mode de réalisation, L est -H et/ou -[A]-COOH si f est une fonction éther ; s = l ; t = l ; u = l ou 2 ; E est issu d'un acide aminé, d'une diamine, d'une aminé diacide, d'une triamine, d'une amine-alcool ou un amino-diol; -[AA] est issu de la phénylalanine, de la phénylglycine, de la ty rosi ne et du tryptophane.

[000206] Dans un mode de réalisation, L est -H et/ou -[A]-COOH si f est une fonction éther ; s = l ; t = l ; u = l ; E est issu d'un acide aminé, d'une diamine, d'une aminé diacide, d'une triamine, d'une amine-alcool ou un amino-diol, ; -[AA] est issu de la phénylalanine, de la phénylglycine, de la tyrosine et du tryptophane.

[000207] Dans un mode de réalisation, L est -H et/ou -[A]-COOH si f est une fonction éther ; s = 1 ; t = 1 ; u = 1 ou 2 ; E est issu d'un acide aminé, de l'éthylène diamine ou de l'éthanolamine ; -[AA] est issu de la phénylalanine, de la phénylglycine, de la tyrosine et du tryptophane.

[000208] Dans un mode de réalisation, L est -H et/ou -[AJ-COOH si f est une fonction éther ; s = l ; t = l ; u = l ou 2 ; E est issu d'un acide aminé, d'une diamine, d'une aminé diacide, d'une triamine, d'une amine-alcool ou un amino-diol; -[AA] est issu de la phénylalanine. [000209] Dans un mode de réalisation, -Ri est choisi parmi les radicaux de formule - N(L) _s ([E]-(o-[AA])u)t dans laquelle L, E, AA, s, t, u et o ont les significations données ci-dessus, et X est un radical -C=0-.

[000210] Dans un mode de réalisation, le composé anionique substitué répond à la Formule I dans laquelle :

1) X est un radical -CO-,

2) Ri est un radical -N(L) _s ([E]-(o-[AA])u)t, L, E, AA, s, t, u et o étant tels que définis ci-dessus.

[000211] Dans un mode de réalisation, L est -H.

[000212] Dans un mode de réalisation, L est un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone.

[000213] Dans un mode de réalisation, s= 1.

[000214] Dans un mode de réalisation, t= 1.

[000215] Dans un mode de réalisation, E est issu d'un acide aminé, d'une aminé diacide, d'une diamine, d'une triamine, d'une amine-alcool ou d'un amino-diol.

[000216] Dans un mode de réalisation, E est issu d'un acide aminé, de l'éthylène diamine ou de l'éthanolamine. [000217] Dans un mode de réalisation, -[AA] est issu de la phénylalanine, de la phénylglycine, de la ty rosi ne ou du tryptophane.

[000218] Dans un mode de réalisation, -[AA] est issu de la phénylalanine.

[000219] Dans un mode de réalisation, u = 1 ou 2.

[000220] Dans un mode de réalisation, L est -H ; s = 1 ; t = 1 ; u = 1 ou 2 ; E est issu d'un acide aminé, d'une aminé diacide, d'une diamine, d'une triamine, d'une amine-alcool ou un amino-diol ; AA est issu de la phénylalanine, de la phénylglycine, de la ty rosi ne ou du tryptophane.

[000221] Dans un mode de réalisation, L est -H s = 1 ; t = 1 ; u = 1 ; E est issu d'un acide aminé, d'une aminé diacide, d'une diamine, d'une triamine, d'une amine- alcool ou un amino-diol ; -[AA] est issu de la phénylalanine, de la phénylglycine, de la ty rosi ne ou du tryptophane.

[000222] Dans un mode de réalisation, L est -H ; s = 1 ; t = 1 ; u = 1 ou 2 ; E est issu d'un acide aminé, de l'éthylène diamine ou de l'éthanolamine ; - [AA] est issu de la phénylalanine, de la phénylglycine, de la tyrosine ou du tryptophane.

[000223] Dans un mode de réalisation, L est -H ; s = 1 ; t = 1 ; u = 1 ou 2 ; E est issu d'un acide aminé, d'une aminé diacide, d'une diamine, d'une triamine, d'une amine-alcool ou un amino-diol ; -[AA] est issu de la phénylalanine. [000224] Selon un mode de réalisation, le composé anionique substitué répond à la Formule I dans laquelle Z est un radical -CH2- et X est un radical -CH2- et est choisi parmi les composés de Formule II :

Formule II dans laquelle

R2, R3, R4, R5, Rô, A et p ont les valeurs données dans la définition de la formule I, et

1) f est une fonction éther ;

2) Ri est un radical -N(L) _S [AA], avec -[AA] étant un radical issu d'un acide aminé aromatique ou d'un dérivé d'acide aminé aromatique; s = 1 ou 2 ; et

a. si s = 1, L est choisi dans le groupe constitué par -H, -H et/ou -[A]- COOH, -H et un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone, et

b. si s = 2, L est choisi parmi -H, -H et/ou ~[A]-COOH, un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone. [000225] Selon un mode de réalisation, le composé anionique substitué répond à la Formule I dans laquelle Z est un radical -CH2- et X est un radical -CH2- et est choisi parmi les composés de Formule II

Formule II dans laquelle

R2, R3, R4, R5, Re, A et p ont les valeurs données dans la définition de la formule I, et

1) f est une fonction éther, et

2) Ri est un radical -N(L) _S [AA], avec -[AA] étant un radical issu d'un acide aminé aromatique ou d'un dérivé d'acide aminé aromatique;, s = 1 ou 2 ; et

a. si s = 1, L est choisi dans le groupe constitué par -H, -H et/ou -[A]- COOH, et

b. si s = 2, L est choisi parmi H ou -H et/ou -[AJ-COOH.

[000226] Selon un mode de réalisation, le composé anionique substitué répond à la Formule I dans laquelle Z est un radical -CH2- et X est un radical -C=0- et est choisi parmi les composés

Formule III dans laquelle

R2, R3, R4, R5, R&, A et p ont les valeurs données dans la définition de la formule I, et

1) f est une fonction éther, et

2) Ri est un radical -N(L)s[AA], avec -[AA] est un radical issu d'un acide aminé aromatique ou d'un dérivé d'acide aminé aromatique ; s = 1 ; et L est choisi dans le groupe constitué par -H et un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone.

[000227] Selon un mode de réalisation, le composé anionique substitué répond à la Formule I dans laquelle Z est un radical -CH2- et X est un radical -CH2- et est choisi parmi les composés de Formule II : Formule II

dans laquelle

R2, R3, R.4, Rs, R6, A et p ont les valeurs données dans la définition de la formule I, et 1) f est une fonction éther, et

2) Ri est un radical -N(L) _s ([E]-(o-[AA] ) _u )t, avec -N((L) _s -([E]-(o-) _u ) est issu d'un acide aminé, d'une amine-diacide, d'une diamine, d'une triamine, d'une amine- alcool ou d'un amino-diol ; 0 est une fonction amide, carbamate ou carbamide ; -[AA] est un radical issu d'un acide aminé aromatique ou d'un dérivé d'acide aminé aromatique ; u = l ou 2 ; t = l ; s = l ou 2 ; et

L est choisi dans le groupe constitué par -H, -H et/ou -[A]-COOH et un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone.

[000228] Selon un mode de réalisation, le composé anionique substitué répond à la Formule I dans laquelle Z est un radical -CH2- et X est un radical -CH2- et est choisi parmi les composés de Formule II :

Formule II dans laquelle

R2, R3, R4, Rs, Rô, A et p ont les valeurs données dans la définition de la formule I, et

1) f est une fonction éther, et

2) Ri est un radical -N(L) _s ([E]-(o-[AA] ) _u )t, avec -N((L) _s -([E]-(o-) _u ) est issu d'un acide aminé, d'une amine-diacide, d'une diamine, d'une triamine, d'une amine- alcool ou d'un amino-diol ; 0 est une fonction amide, carbamate ou carbamide ; -[AA] est un radical issu d'un acide aminé aromatique ou d'un dérivé d'acide aminé aromatique ; u = 1 ou 2 ; t = 1 ; s = 1 ou 2 ; et

L est choisi dans le groupe constitué par -H, et -H et/ou -[A] -COOH .

[000229] Selon un mode de réalisation, le composé anionique substitué répond à la Formule I dans laquelle Z est un radical -CH2- et X est un radical -C(O)- et est choisi parmi les composés de Formule III : ^R 6 ^ ^2 Formule III

dans laquelle

R2, R3, R ₄ , Rs, 6, A et p ont les valeurs données dans la définition de la formule I, et

1) fest une fonction éther, et

2) Ri est un radical -N(L) _s ([E]-(o-[AA])u)t, avec -N((L) _s -([E]-(o-) _u ) est issu d'un acide aminé, d'une amine-diacide, d'une diamine, d'une triamine, d'une amine- alcool ou d'un amino-diol ; 0 est une fonction amide, carbamate ou carbamide ; -[AA] est un radical issu d'un acide aminé aromatique ou d'un dérivé d'acide aminé aromatique ; u = l ou 2 ; t = l ; s = l ; et l_ est choisi parmi -H et un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone.

[000230] Selon un mode de réalisation, le composé anionique substitué répond à la Formule I dans laquelle Z est un radical -CH2- et X est un radical -C=0- et est choisi parmi les composés de Formule III :

Formule III dans laquelle

R2, R3, R ₄ , Rs, R6, A et p ont les valeurs données dans la définition de la formule I, et

1) est une fonction éther, et

2) Ri est un radical -N(L) _s ([E]-(o-[AA]) _u ) _t , avec -N((L) _s -([E]-(o-) _u ) est issu d'un acide aminé, d'une amine-diacide, d'une diamine, d'une triamine, d'une amine- alcool ou d'un amino-diol ; o est une fonction amide, carbamate ou carbamide ; -[AA] est un radical issu d'un acide aminé aromatique ou d'un dérivé d'acide aminé aromatique ; u = l ou 2 ; t = l ; s = l ; etL est -H.

[000231] Tout particulièrement, dans les sept modes de réalisation précédents le radical -[AA] est issu d'un acide aminé aromatique, et plus particulièrement de la phénylalanine. [000232] Selon un mode de réalisation, le composé anionique substitué est choisi parmi les composés de Formule I dans laquelle Z est un radical -CH2- et R ₄ est issu d'un squelette saccharidique formé d'un nombre discret n-1 d'unités saccharidiques glucose et est représenté par la formule IV ;

Formule IV

dans laquelle

Ri, R2, R3, Rs, R6, X, A et n ont les valeurs données dans la définition de la formule I, et

R est -OH ou -f- [A]-COOH .

[000233] Selon un mode de réalisation, le composé anionique substitué répond à la Formule IV :

Formule IV

dans laquelle

R2, R3, R5, Rô, A et n ont les valeurs données dans la définition de la formule I, et

- R est -OH ou -f-[A]-COOH, et

X est un radical -CH2-

- f est une fonction éther ;

Ri est un radical -N(L)s[AA], avec -[AA] étant un radical issu d'un acide aminé aromatique ou d'un dérivé d'acide aminé aromatique; s = 1 ou 2 ; et a . si s = 1, L est choisi dans le groupe constitué par -H, -H et/ou -[A]- COOH, -H et un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone, et

b. si s = 2, L est choisi parmi H, -H et/ou -[A]-COOH, un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone.

[000234] Selon un mode de réalisation, les composés anioniques substitués répondent à la Formule IV :

dans laquelle

R2, R3, R5, Rô, A et n ont les valeurs données dans la définition de la formule I, et

- R est -OH ou -f

- -[A]-COOH, et

X est un radical -CH2-,

est une fonction éther, et

- Ri est un radical -N(L) _S [AA], avec -[AA] étant un radical issu d'un acide aminé aromatique ou d'un dérivé d'acide aminé aromatique; s = 1 ou 2 ; et a. si s = 1, L est choisi dans le groupe constitué par -H, -H et/ou -[A]- COOH, et

b. si s = 2, L est choisi parmi H ou -H et/ou -[A]-COOH .

[000235] Selon un mode de réalisation, le composé anionique substitué répond à la Formule IV :

Formule IV dans laquelle

R2, R3, R5, Re, A et n ont les valeurs données dans la définition de la formule I, et

- R est -OH ou -f-[A]-COOH, et

- X est un radical -C=0-

- f est une fonction éther, et

- Ri est un radical -N(L) _S [AA], avec -[AA] est un radical issu d'un acide aminé aromatique ou d'un dérivé d'acide aminé aromatique ; s = 1 ; et L est choisi dans le groupe constitué par -H et un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone.

[000236] Selon un mode de réalisation, le composé anionique substitué répond à la Formule IV ; Formule IV

dans laquelle

R ₂ , R3, Rs, et Reont les valeurs données dans la définition de la formule I, et

- R est -OH ou -f-[A]-COOH, et

- n = 3,

-[A]- est un radical -CH2-,

X est un radical -CH2-,

- f est une fonction éther, et

- Ri est un radical -N(L) _S [AA], avec -[AA] est un radical issu de la phénylalanine ; s = 1 ou 2 ; et L est -H et/ou -[A]-COOH.

[000237] Selon un mode de réalisation, le composé anionique substitué répond à I Formule IV :

Formule IV dans laquelle

R2, R3, R5, Re, A et n ont les valeurs données dans la définition de la formule I, et

- R est -OH ou -f- [A]-COOH, et

- X est un radical -CH2- f est une fonction éther, et

- Ri est un radical -N(L) _s ([E]-(o- [AA] ) _u )t, avec -N ((L) _s -([E] -(o-) _u ) est issu d'un acide aminé, d'une amine-diacide, d'une diamine, d'une triamine, d'une amine-alcool ou d'un amino-diol ; o est une fonction amide, carbamate ou carbamide ; - [AA] est un radical issu d'un acide aminé aromatique ou d'un dérivé d'acide aminé aromatique ; u = l ou 2 ; t = l ; s = l ou 2 ; et L est choisi dans le groupe constitué par -H, -H et/ou -[A]-COOH et un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone. [000238] Selon un mode de réalisation, le composé anionique substitué répond à la Formule IV ;

Formule IV dans laquelle

R2, R3, R5, RÔ, A et n ont les valeurs données dans la définition de la formule I, et

- R est -OH ou -f-[A]-COOH, et

X est un radical -CH2- f est une fonction éther, et

- Ri est un radical -N(L) _s ([E]-(o-[AA]) _u ) _t , avec -N((L) _s -([E]-(o-) _u ) est issu d'un acide aminé, d'une amine-diacide, d'une diamine, d'une triamine, d'une amine-alcool ou d'un amino-diol ; 0 est une fonction amide, carbamate ou carbamide ; -[AA] est un radical issu d'un acide aminé aromatique ou d'un dérivé d'acide aminé aromatique ; u = 1 ou 2 ; t = 1 ; s = 1 ou 2 ; et

L est choisi dans le groupe constitué par -H, et -H et/ou ~[A]-COOH ,

[000239] Selon un mode de réalisation, le composé anionique substitué répond à la Formule IV :

Formule IV dans laquelle

R2, R3, Rs, Re, A et n ont les valeurs données dans la définition de la formule I, et

- R est -OH ou -f- [A]-COOH, et

X est un radical -C=0- - f est u ne fonction éther, et

- Ri est un radical -N(L) _s ( [E]-(o-[AA] ) _u )t, avec -N((L) _s -([E]-(o-) _u ) est issu d'un acide aminé, d'une amine-diacide, d'une diamine, d'une triamine, d'une amine-alcool ou d'un amino-diol ; 0 est une fonction amide, carbamate ou carbamide ; -[AA] est un radical issu d'un acide aminé aromatique ou d'un dérivé d'acide aminé aromatique ; u = l ou 2 ; t = l ; s = l ; et L est choisi parmi -H et un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone. [000240] Selon un mode de réalisation, le composé anionique substitué répond à la Formule IV :

Formule IV dans laquelle

F , R3, R5, Ô, A et n ont les valeurs données dans la définition de la formule I, et

- R est -OH ou -f-[A]-COOH, et

- X est un radical -C=0- - est une fonction éther, et

- Ri est un radical -N(L) _s ([E]-(o-[AA]) _u )t, avec -N((L) _s -([E]-(o-)u) est issu d'un acide aminé, d'une amine-diacide, d'une diamine, d'une triamine, d'une amine-alcool ou d'un amino-diol ; o est une fonction amide, carbamate ou carbamide ; -[AA] est un radical issu d'un acide aminé aromatique ou d'un dérivé d'acide aminé aromatique ; u = 1 ou 2 ; t = 1 ; s = 1 ; et L est -H.

Tout particulièrement, dans les huit modes de réalisation précédents le radical -[AA] est issu d'un acide aminé aromatique, et plus particulièrement de la phénylalanine. [000241] Les composés anioniques substitués comportent au moins un radical -f-[A]- COOH. Le ou les radicaux -f-[A]-COOH peuvent être introduits sur les unités saccharidiques par greffage statistique.

[000242] Dans un mode de réalisation, les composés anioniques substitués sont choisis parmi les composés anioniques substitués dans lesquels les radicaux -f-[A]- COOH sont obtenus par greffage à des positions précises sur les unités saccharidiques par un procédé mettant en uvre des étapes de protection/déprotection des groupements alcool ou acide carboxylique naturellement portés par les unités saccharidiques. Cette stratégie conduit à un greffage sélectif, notamment régiosélectif, des substituants sur les unités saccharidiques. Les groupements protecteurs incluent sans limitation ceux décrits dans l'ouvrage (Wuts, PGM et al., Greene's Protective Groups in Organic Synthesis 2007) .

[000243] Le précurseur saccharidique du composé anionique substitué peut être obtenu par dégradation d'un polysaccharide de haut poids moléculaire. Les voies de dégradation incluent sans limitation la dégradation chimique et/ou la dégradation enzymatique. [000244] Le précurseur saccharidique du composé anionique substitué peut également être obtenu par formation de liaisons glycosidiques entre des molécules monosacchariques ou oligosaccharidiques en utilisant une stratégie de couplage chimique ou enzymatique, le saccharide alors obtenu comporte une extrémité réductrice. Les stratégies de couplage comptent celles décrites dans la publication (Smooth, JT et al., Ad van ces in Carbohydrate Chemistry and Biochemistry 2009, 62, 162-236) et dans l'ouvrage (Lindhorst, TK, Essentiels of Carbohydrate Chemistry and Biochemistry 2007, 157-209). Les réactions de couplage peuvent être effectuées en solution ou sur support solide. Les molécules saccharidiques avant couplage peuvent porter des substituants d'intérêt et/ou être fonctionnalisées une fois couplées entre elles de façon statistique ou régiosélective.

[000245] Ainsi, à titre d'exemples, les composés anioniques substitués peuvent être obtenus selon l'un des procédés suivants :

■ le greffage de radicaux -f-[A]-COOH par greffage statistique sur le squelette saccharidique couplé à l'unité saccharidique ouverte portant un radical -[AA]

■ une ou plusieurs étapes de glycosylation entre des molécules mono- saccharidiques ou oligosaccharidiques portant des radicaux -f-[A]-COOH et le squelette saccharidique couplé à l'unité saccharidique ouverte portant un radical -[AA]

■ une ou plusieurs étapes de glycosylation entre une ou des molécules mono- saccharidiques ou oligosaccharidiques portant des radicaux - -[A]-COOH et une ou des molécules mono-saccharidiques ou oligosaccharidiques et le squelette saccharidique couplé à l'unité saccharidique ouverte portant un radical -[AA]

■ une ou plusieurs étapes d'introduction de groupements protecteurs sur des alcools ou acides naturellement portés par le squelette saccharidique couplé à l'unité saccharidique ouverte portant un radical -[AA] suivie d'une ou plusieurs réactions de greffage pour introduire des radicaux -f-[A]-COOH et enfin une étape d'élimination des groupements protecteurs

■ une ou plusieurs étapes de glycosylation entre une ou des molécules mono- saccharidiques ou oligosaccharidiques portant des groupements protecteurs sur des alcools ou acides naturellement portés par les unités saccharidiques, un de ces saccharides portant un radical -[AA], une ou des étapes de greffage pour introduire des radicaux -f-[A]-COOH sur le squelette obtenu puis une étape d'élimination des groupements protecteurs,

■ une ou plusieurs étapes de glycosylation entre une ou des molécules mono- saccharidiques ou oligosaccharidiques portant des groupements protecteurs sur des alcools ou acides naturellement portés par les unités saccharidiques, et une ou des molécules mono-saccharidiques ou oligosaccharidiques, une de ces molécules portant un radical -[AA], une ou des étapes de greffage pour introduire des -f-[A]-COOH puis une étape d'élimination des groupements protecteurs,

■ une étape de protection du bout de chaîne réducteur présent sur le précurseur du composé anionique substitué, une étape d'introduction de radicaux -f-[A]-COOH sur les unités saccharidiques, une étape de déprotection du bout de chaîne réducteur puis une étape d'introduction d'un radical -N(L) _s ([E]-(o-[AA]) _u )t ou -N(L) _S [AA] par réaction avec le bout de chaîne réducteur.

[000246] Les composés anioniques substitués, isolés ou en mélange, peuvent être séparés et/ou purifiés de différentes manières, notamment après leur obtention par les procédés ci-dessus décrits.

[000247] On peut en particulier citer les méthodes chromatographiques, notamment celles dites « préparatives » ou « préparatrices » comme :

■ les chromatographies éclairs ou « flash chromatography », notamment sur silice, et

■ les chromatographies du type HPLC (high performance liquid chromatography) (Chromatographie liquide haute performance), en particulier RP-HPLC ou « reverse phase HPLC » (Chromatographie liquide haute performance en phase inverse).

[000248] Des méthodes de précipitation sélective peuvent également être utilisées.

[000249] Dans un mode de réalisation, les ratios molaires composé anionique substitué/insuline sont compris entre 0,6 et 75.

[000250] Dans un mode de réalisation, les ratios molaires composé anionique substitué/insuline sont compris entre 0,7 et 50.

[000251] Dans un mode de réalisation, les ratios molaires composé anionique substitué/insuline sont compris entre 1,4 et 35.

[000252] Dans un mode de réalisation, les ratios molaires composé anionique substitué/insuline sont compris entre 1,9 et 30.

[000253] Dans un mode de réalisation, les ratios molaires composé anionique substitué/insuline sont compris entre 2,3 et 30.

[000254] Dans un mode de réalisation, le ratio molaire composé anionique substitué/insuline est égal à 8, 12 ou 16.

[000255] Dans les ratios molaires ci-dessus, le nombre de moles d'insuline s'entend comme le nombre de moles de monomère d'insuline.

[000256] Dans un mode de réalisation, les ratios massiques composé anionique substitué/insuline sont compris entre 0,5 et 10. [000257] Dans un mode de réalisation, les ratios massiques anionique substitué/insuline sont compris entre 0,6 et 7.

[000258] Dans un mode de réalisation, les ratios massiques composé anionique substitué/insuline sont compris entre 1,2 et 5.

[000259] Dans un mode de réalisation, les ratios massiques composé anionique substitué/insuline sont compris entre 1,6 et 4.

[000260] Dans un mode de réalisation, les ratios massiques composé anionique substitué/insuline sont compris entre 2 et 4.

[000261] Dans un mode de réalisation, le ratio massique composé anionique substitué/insuline est 2, 3, 4 ou 6.

[000262] Dans un mode de réalisation, la concentration en composé anionique substitué est comprise entre 1,8 et 36 mg/mL.

[000263] Dans un mode de réalisation, la concentration en composé anionique substitué est comprise entre 2,1 et 25 mg/mL.

[000264] Dans un mode de réalisation, la concentration en composé anionique substitué est comprise 4,2 et 18 mg/mL.

[000265] Dans un mode de réalisation, la concentration en composé anionique substitué est comprise entre 5,6 et 14 mg/mL.

[000266] Dans un mode de réalisation, la concentration en composé anionique substitué est comprise entre 7 et 14 mg/mL.

[000267] Dans un mode de réalisation, la concentration en composé polyanionique est comprise entre 5 et 150 mM.

[000268] Dans un mode de réalisation, la concentration en composé polyanionique est comprise entre 5 et 100 mM.

[000269] Dans un mode de réalisation, la concentration en composé polyanionique est comprise entre 5 et 75 mM.

[000270] Dans un mode de réalisation, la concentration en composé polyanionique est comprise entre 5 et 50 mM.

[000271] Dans un mode de réalisation, la concentration en composé polyanionique est comprise entre 5 et 30 mM.

[000272] Dans un mode de réalisation, la concentration en composé polyanionique est comprise entre 5 et 20 mM.

[000273] Dans un mode de réalisation, la concentration en composé polyanionique est comprise entre 5 et 10 mM.

[000274] Dans un mode de réalisation, la concentration en composé polyanionique est comprise entre 1 et 30 mg/mL. [000275] Dans un mode de réalisation, la concentration en composé polyanionique est comprise entre 1,5 et 25 mg/mL.

[000276] Dans un mode de réalisation, la concentration en composé polyanionique est comprise entre 2 et 25 mg/mL.

[000277] Dans un mode de réalisation, la concentration en composé polyanionique est comprise entre 2 et 10 mg/mL.

[000278] Dans un mode de réalisation, la concentration en composé polyanionique est comprise entre 2 et 8 mg/mL.

[000279] Dans un mode de réalisation, l'insuline est l'insuline humaine.

[000280] On entend par insuline humaine une insuline obtenue par synthèse ou recombinaison dont la séquence peptidique est la séquence de l'insuline humaine, incluant les variations alléliques et les homologues.

[000281] Dans un mode de réalisation, l'insuline est une insuline humaine recombinante telle que décrite dans la Pharmacopée Européenne et la Pharmacopée américaine.

[000282] Dans un mode de réalisation, l'insuline est une insuline analogue.

[000283] On entend par insuline analogue une insuline recombinante dont la séquence primaire contient au moins une modification par rapport à la séquence primaire de l'insuline humaine.

[000284] Dans un mode de réalisation l'insuline analogue est choisie dans le groupe constitué par l'insuline lispro (Humalog®), l'insuline aspart (Novolog®, Novorapid®) et l'insuline glulisine (Apidra®) .

[000285] Dans un mode de réalisation, l'insuline analogue est l'insuline lispro (Humalog®) .

[000286] Dans un mode de réalisation, l'insuline analogue est l'insuline aspart (Novolog®, Novorapid®).

[000287] Dans un mode de réalisation, l'insuline analogue est l'insuline glulisine (Apidra®).

[000288] Dans un mode de réalisation, l'insuline est sous forme hexamèrique.

[000289] Dans un mode de réalisation, la formulation pharmaceutique est caractérisée en ce que la concentration en insuline est comprise entre 240 et 3000 μΜ (40 à 500 UI/mL) .

[000290] Dans un mode de réalisation, la formulation pharmaceutique est caractérisée en ce que la concentration en insuline est comprise entre 600 et 3000 μΜ (100 à 500 UI/mL) . [000291] Dans un mode de réalisation, la formulation pharmaceutique est caractérisée en ce que la concentration en insuline est comprise entre 600 et 2400 μΜ (100 à 400 UI/mL).

[000292] Dans un mode de réalisation, la formulation pharmaceutique est caractérisée en ce que la concentration en insuline est comprise entre 600 et 1800 μΜ (100 à 300 UI/mL).

[000293] Dans un mode de réalisation, la formulation pharmaceutique est caractérisée en ce que la concentration en insuline est comprise entre 600 et 1200 μΜ (100 à 200 UI/mL).

[000294] Dans un mode de réalisation, elle concerne une formulation pharmaceutique caractérisée en ce que la concentration en insuline est 600 μΜ (100 UI/mL), 1200 μΜ (200 UI/mL), 1800 μΜ (300 UI/mL), 2400 μΜ (400 UI/mL) ou 3000 μΜ (500 UI/mL).

[000295] Dans un mode de réalisation, le composé polyanionique (PNP) présente une affinité pour le zinc inférieure à l'affinité de l'insuline pour le zinc et une affinité pour le calcium définie par une constante de dissociation Kdca = [composé PNP] ^r [Ca ²⁺ ]7[(composé PNP) _r -(Ca ²⁺ ) _s ] est inférieure ou égale à 10 ¹ - ⁵ .

[000296] Cette constante de dissociation est la constante de réaction associée à la dissociation du complexe (composé PNP) _r -(Ca ²⁺ ) _s , c'est-à-dire à la réaction suivante : (composé PNP) _r -(Ca ²⁺ )s - - r( composé PNP) + sCa ²⁺ .

[000297] Les constantes de dissociation (Kd) des différents composés polyanioniques vis à vis des ions de calcium sont déterminées par calibration externe à l'aide d'une électrode spécifique aux ions Calcium (Mettler Toledo) et d'une électrode de référence. Toutes les mesures sont effectuées dans 150 mM de NaCI à pH 7. Seules les concentrations en ions calcium libres sont déterminées ; les ions calcium liés au composé polyanionique n'induisent pas de potentiel d'électrode.

[000298] Dans un mode de réalisation, le composé polyanionique est une molécule anionique choisie dans le groupe constitué de l'acide citrique, l'acide aspartique, l'acide glutamique, l'acide malique, l'acide tartrique, l'acide succinique, l'acide adipique, l'acide oxalique, le phosphate, les polyacides phosphoriques, comme le triphosphate et leur sels de Na ⁺ , K ⁺ , Ca ²⁺ ou Mg ²⁺ . [000299] Dans un mode de réalisation, la molécule anionique est l'acide citrique et ses sels de Na\ K ⁺ , Ca ²⁺ ou Mg ²⁺ . [000300] Dans un mode de réalisation, le composé polyanionique est choisi parmi les composés anioniques constitués d'un squelette saccharidique formé d'un nombre discret u compris entre 1 et 8 ( 1 < u < 8) d'unités saccharidiques, lesdites unités saccharidiques étant choisies dans le groupe constitué par, les hexoses, sous forme cyclique ou sous forme réduite ouverte, identiques ou différentes, liées par des liaisons glycosidiques identiques ou différentes substitués par des groupes carboxyles, et leurs sels.

[000301] Dans un mode de réalisation, le composé polyanionique constitué d'un squelette saccharidique formé d'un nombre discret d'unités saccharidiques est obtenu à partir d'un composé disaccharide choisi dans le groupe constitué par le tréhalose, le maltose, le lactose, le saccharose, le cellobiose, l'isomaltose, le maltitol et l'isomaltitol .

[000302] Dans un mode de réalisation, le composé polyanionique constitué d'un squelette saccharidique formé d'un nombre discret d'unités saccharidiques est obtenu à partir d'un composé constitué d'un squelette formé d'un nombre discret d'unités saccharidiques choisi dans le groupe constitué par le maltotriose, le maltotétraose, le maltopentaose, le maltohexaose, le maltoheptaose, le maltooctaose et l'isomaltotriose [000303] Dans un mode de réalisation, le composé polyanionique constitué d'un squelette saccharidique formé d'un nombre discret d'unités saccharidiques est choisi dans le groupe constitué par le carboxyméthylmaltotriose, le carboxyméthylmaltotétraose, le carboxyméthylmaltopentaose, le carboxyméthylmaltohexaose, le carboxyméthylmaltoheptaose, le carboxyméthylmaltooactose et le carboxyméthylisomaltotriose. [000304] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention comprend de l'insuline, notamment telle que définie ci-dessus, au moins un composé anionique substitué tel que défini ci-dessus, et de l'acide citrique ou ses sels de Na ⁺ , K ⁺ , Ca ^{2 +} ou Mg ²⁺ , notamment tels que définis ci-dessus. [000305] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention comprend de l'insuline, notamment telle que définie ci-dessus, au moins un composé anionique substitué répondant à la Formule I telle que défini ci-dessus, et de l'acide citrique ou ses sels de Na ⁺ , K ⁺ , Ca ^{2 +} ou Mg ²⁺ , notamment tels que définis ci-dessus. [000306] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention comprend de l'insuline, notamment telle que définie ci-dessus, au moins un composé anionique substitué répondant à la Formule II telle que défini ci-dessus, et de l'acide citrique ou ses sels de Na ⁺ , K ⁺ , Ca ^{2 +} ou Mg ²⁺ , notamment tels que définis ci-dessus. [000307] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention comprend de l'insuline, notamment telle que définie ci-dessus, au moins un composé anionique substitué répondant à la Formule III telle que défini ci-dessus, et de l'acide citrique ou ses sels de Na ⁺ , K ⁺ , Ca ²⁺ ou Mg ²⁺ , notamment tels que définis ci-dessus.

[000308] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention comprend de l'insuline, notamment telle que définie ci-dessus, au moins un composé anionique substitué répondant à la Formule IV telle que défini ci-dessus, et de l'acide citrique ou ses sels de Na ⁺ , K ⁺ , Ca ²⁺ ou Mg ²⁺ , notamment tels que définis ci-dessus.

[000309] L'invention concerne également l'utilisation d'un composé anionique substitué de formule I, éventuellement combiné avec au moins un composé polyanionique, pour la préparation de formulations pharmaceutiques. [000310] Il est connu de l'homme de l'art que le délai d'action des insulines est dépendant de la concentration en insuline. Seules les valeurs de délai d'action des formulations à 100 UI/mL sont documentées.

[000311] Les formulations d'insuline humaine « regular » sur le marché à une concentration de 600 μΜ (100 UI/mL) ont un délai d'action compris entre 50 et 90 minutes et une fin d'action d'environ 360 à 420 minutes chez l'humain. Le temps pour atteindre la concentration maximale en insuline dans le sang est compris entre 90 et 180 minutes chez l'humain.

[000312] Les formulations d'insulines analogues rapides sur le marché à une concentration de 600 μΜ (100 UI/mL) ont un délai d'action compris entre 30 et 60 minutes et une fin d'action d'environ 240-300 minutes chez l'humain. Le temps pour atteindre la concentration maximale en insuline dans le sang est compris entre 50 et 90 minutes chez l'humain.

[000313] L'invention concerne également une méthode de préparation d'une formulation d'insuline humaine ayant une concentration en insuline comprise entre 240 et 3000 μΜ (40 et 500 UI/mL), dont le délai d'action chez l'humain est inférieur à celui de la formulation de référence à la même concentration en insuline en l'absence de composé anionique substitué et de composé polyanionique caractérisée en ce qu'elle comprend (1) une étape d'addition à ladite formulation d'au moins un composé anionique substitué et (2) une étape d'addition à ladite formulation d'au moins un composé polyanionique.

[000314] Dans un mode de réalisation, l'insuline est sous forme hexamèrique. [000315] L'invention concerne également une méthode de préparation d'une formulation d'insuline humaine ayant une concentration en insuline comprise entre 600 et 1200 μΜ (100 et 200 UI/mL), dont le délai d'action chez l'humain est inférieur à celui de la formulation de référence à la même concentration en insuline en l'absence de composé anionique substitué et de composé polyanionique caractérisée en ce qu'elle comprend (1) une étape d'addition à ladite formulation d'au moins un composé anionique substitué et (2) une étape d'addition à ladite formulation d'au moins un composé polyanionique.

[000316] Dans un mode de réalisation, l'insuline est sous forme hexamèrique.

[000317] L'invention concerne également une méthode de préparation d'une formulation d'insuline humaine ayant une concentration en insuline de 600 μΜ ( 100 UI/mL), dont le délai d'action chez l'humain est inférieur à 60 minutes caractérisée en ce qu'elle comprend (1) une étape d'addition à ladite formulation d'au moins un composé anionique substitué et (2) une étape d'addition à ladite formulation d'au moins un composé polyanionique.

[000318] Dans un mode de réalisation, l'insuline est sous forme hexamèrique.

[000319] L'invention concerne également une méthode de préparation d'une formulation d'insuline humaine ayant une concentration en insuline de 1200 μΜ (200 UI/mL), dont le délai d'action chez l'humain est inférieur d'au moins 10% à celui de la formulation de l'insuline humaine à la même concentration (200 UI/mL) et en l'absence de composé anionique substitué et de composé polyanionique caractérisée en ce qu'elle comprend ( 1) une étape d'addition à ladite formulation d'au moins un composé anionique substitué, et (2) une étape d'addition à ladite formulation d'au moins un composé polyanionique.

[000320] Dans un mode de réalisation, l'insuline est sous forme hexamèrique.

[000321 ] L'invention concerne également une méthode de préparation d'une formulation d'insuline humaine ayant une concentration en insuline de 1800 μΜ (300 UI/mL), dont le délai d'action chez l'humain est inférieur d'au moins 10% à celui de la formulation de l'insuline humaine à la même concentration (300 UI/mL) et en l'absence de composé anionique substitué et de composé polyanionique caractérisée en ce qu'elle comprend (1) une étape d'addition à ladite formulation d'au moins un composé anionique substitué et (2) une étape d'addition à ladite formulation d'au moins un composé polyanionique.

[000322] Dans un mode de réalisation, l'insuline est sous forme hexamèrique. [000323] L'invention concerne également une méthode de préparation d'une formulation d'insuline humaine ayant une concentration en insuline de 2400 μΜ (400 UI/mL), dont le délai d'action chez l'humain est inférieur d'au moins 10% à celui de la formulation de l'insuline humaine à la même concentration (400 UI/mL) et en l'absence de composé anionique substitué et de composé polyanionique caractérisée en ce qu'elle comprend (1) une étape d'addition à ladite formulation d'au moins un composé anionique substitué et (2) une étape d'addition à ladite formulation d'au moins un composé polyanionique.

[000324] Dans un mode de réalisation, l'insuline est sous forme hexamèrique.

[000325] L'invention concerne également une méthode de préparation d'une formulation d'insuline humaine ayant une concentration en insuline de 3000 μΜ (500 UI/mL), dont le délai d'action chez l'humain est inférieur d'au moins 10% à celui de la formulation de l'insuline humaine à la même concentration (500 UI/mL) et en l'absence de composé anionique substitué et de composé polyanionique caractérisée en ce qu'elle comprend (1) une étape d'addition à ladite formulation d'au moins un composé anionique substitué et (2) une étape d'addition à ladite formulation d'au moins un composé polyanionique.

[000326] Dans un mode de réalisation, l'insuline est sous forme hexamèrique.

[000327] L'invention consiste en la préparation d'une formulation d'insuline humaine dite rapide caractérisée en ce qu'elle comprend (1) une étape d'addition à ladite formulation d'au moins un composé anionique substitué et (2) une étape d'addition à ladite formulation d'au moins un composé polyanionique.

[000328] Dans un mode de réalisation, l'insuline est sous forme hexamèrique.

[000329] L'invention concerne également une méthode de préparation d'une formulation d'insuline humaine à une concentration de 600 μΜ (100 UI/mL) dont le délai d'action chez l'humain est inférieur à 60 minutes, de préférence inférieur à 45 minutes, et encore de préférence inférieur à 30 minutes caractérisée en ce qu'elle comprend (1) une étape d'addition à ladite formulation d'au moins un composé anionique substitué, et (2) une étape d'addition à ladite formulation d'au moins un composé polyanionique.

[000330] Dans un mode de réalisation, l'insuline est sous forme hexamèrique.

[000331] L'invention concerne également une méthode de préparation d'une formulation d'insuline analogue ayant une concentration en insuline comprise entre 240 et 3000 μΜ (40 et 500 UI/mL), dont le délai d'action chez l'humain est inférieur à celui de la formulation de référence à la même concentration en insuline en l'absence de composé anionique substitué et de composé polyanionique caractérisée en ce qu'elle comprend (1) une étape d'addition à ladite formulation d'au moins un composé anionique substitué, et (2) une étape d'addition à ladite formulation d'au moins un composé polyanionique.

[000332] Dans un mode de réalisation, l'insuline est sous forme hexamèrique.

[000333] L'invention concerne également une méthode de préparation d'une formulation d'insuline analogue ayant une concentration en insuline comprise entre 600 et 1200 μΜ (100 et 200 UI/mL), dont le délai d'action chez l'humain est inférieur à celui de la formulation de référence à la même concentration en insuline analogue en l'absence de composé anionique substitué composé anionique substitué et de composé polyanionique, caractérisée en ce qu'elle comprend (1) une étape d'addition à ladite formulation d'au moins un composé anionique substitué et (2) une étape d'addition à ladite formulation d'au moins un composé polyanionique.

[000334] Dans un mode de réalisation, l'insuline analogue est sous forme hexamèrique.

[000335] L'invention concerne également une méthode de préparation d'une formulation d'insuline analogue ayant une concentration en insuline de 600 pmol/L (100 UI/mL), dont le délai d'action chez l'humain est inférieur à 30 minutes, caractérisée en ce qu'elle comprend (1) une étape d'addition à ladite formulation d'au moins un composé anionique substitué et (2) une étape d'addition à ladite formulation d'au moins un composé polyanionique.

[000336] Dans un mode de réalisation, l'insuline analogue est sous forme hexamèrique.

[000337] L'invention concerne également une méthode de préparation d'une formulation d'insuline analogue ayant une concentration en insuline de 1200 μΜ (200 UI/mL), dont le délai d'action chez l'humain est inférieur d'au moins 10% à celui de la formulation de l'insuline analogue en l'absence de composé anionique substitué et de composé polyanionique caractérisée en ce qu'elle comprend (1) une étape d'addition à ladite formulation d'au moins un composé anionique substitué et (2) une étape d'addition à ladite formulation d'au moins un composé polyanionique.

[000338] Dans un mode de réalisation, l'insuline analogue est sous forme hexamèrique. [000339] L'invention concerne également une méthode de préparation d'une formulation d'insuline analogue ayant une concentration en insuline de 1800 μΜ (300 UI/mL), dont le délai d'action chez l'humain est inférieur d'au moins 10% à celui de la formulation de l'insuline analogue en l'absence de composé anionique substitué et de composé polyanionique caractérisée en ce qu'elle comprend (1) une étape d'addition à ladite formulation d'au moins un composé anionique substitué et (2) une étape d'addition à ladite formulation d'au moins un composé polyanionique.

[000340] Dans un mode de réalisation, l'insuline analogue est sous forme hexamèrique.

[000341] L'invention concerne également une méthode de préparation d'une formulation d'insuline analogue ayant une concentration en insuline de 2400 μΜ (400 UI/mL), dont le délai d'action chez l'humain est inférieur d'au moins 10% à celui de la formulation de l'insuline analogue en l'absence de composé anionique substitué et de composé polyanionique caractérisée en ce qu'elle comprend ( 1) une étape d'addition à ladite formulation d'au moins un composé anionique substitué et (2) une étape d'addition à ladite formulation d'au moins un composé polyanionique.

[000342] Dans un mode de réalisation, l'insuline analogue est sous forme hexamèrique.

[000343] L'invention concerne également une méthode de préparation d'une formulation d'insuline analogue ayant une concentration en insuline de 3000 μΜ (500 UI/mL), dont le délai d'action chez l'humain est inférieur d'au moins 10% à celui de la formulation de l'insuline analogue en l'absence de composé anionique substitué et de composé polyanionique caractérisée en ce qu'elle comprend ( 1) une étape d'addition à ladite formulation d'au moins un composé anionique substitué et (2) une étape d'addition à ladite formulation d'au moins un composé polyanionique.

[000344] Dans un mode de réalisation, l'insuline analogue est sous forme hexamèrique.

[000345] L'invention concerne également une formulation pharmaceutique selon l'invention, caractérisée en ce qu'elle est obtenue par séchage et/ou lyophilisation.

[000346] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent en outre l'addition de sels de zinc à une concentration comprise entre 0 et 500 μΜ, notamment entre 0 et 300 μΜ, et en particulier entre 0 et 200 μΜ.

[000347] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent des tampons à des concentrations comprises entre 0 et 100 mM, de préférence entre 0 et 50 mM, voire entre 15 et 50 mM. [000348] Dans un mode de réalisation le tampon est le Tris.

[000349] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent en outre des conservateurs.

[000350] Dans un mode de réalisation, les conservateurs sont choisis dans le groupe constitué par le m-crésol et le phénol seuls ou en mélange.

[000351] Dans un mode de réalisation, la concentration des conservateurs est comprise entre 10 et 50 mM, notamment entre 10 et 40 mM .

[000352] Les compositions selon l'invention peuvent en outre comprendre des additifs tels que des agents de tonicité comme la glycérine, le chlorure de sodium (NaCI), le mannitol et la glycine.

[000353] Les compositions selon l'invention peuvent en outre comprendre des additifs conformes aux pharmacopées comme des tensioactifs, par exemple du polysorbate.

[000354] Les compositions selon l'invention peuvent comprendre en outre tous les excipients conformes aux pharmacopées et compatibles avec les insulines utilisées aux concentrations d'usage.

[000355] Dans le cas des libérations locale et systémique, les modes d'administration envisagés sont par voie intraveineuse, sous-cutanée, intradermique ou intramusculaire. Tout particulièrement, le mode d'administration est la voie sous- cutanée.

[000356] Les voies d'administration transdermique, orale, nasale, vaginale, oculaire, buccale, pulmonaire sont également envisagées.

[000357] L'invention concerne également l'utilisation d'une composition selon l'invention pour la formulation d'une solution d'insuline humaine ou analogue de concentration de 100 UI/mL, 200 UI/mL ou 300 Ul/ml destinée aux pompes à insuline implantables ou transportables.

[000358] Selon un autre de ses aspects, l'invention porte également sur les composés anioniques substitués de formule I tels que définis ci-dessous : [000359] Dans un mode de réalisation, l'invention concerne un composé anionique substitué choisi parmi les composés de formule I, ladite formule I représentant l'unité saccharidique sous forme ouverte dans laquelle au plus l'un des R2, R3, R4, Re représente un squelette saccharidique formé d'un nombre discret d'unités saccharidiques fermées :

Formule I

dans laquelle :

1) Z est soit un radical -C=0-, soit un radical -CH2-,

2) X est soit un radical -C=0-, soit un radical -CH2-,

3) Rs est soit un radical -OH, soit un radical - - [A]-COOH,

4) R2, R3, R4, Re identiques ou différents sont choisis dans le groupe constitué par les radicaux -OH, -f-[A]-COOH et au plus un des R2, R3, R4, R6 est un radical issu d'un squelette saccharidique formé d'un nombre discret n-1 compris entre 1 et 7 (1 < n-1 < 7) d'unités saccharidiques fermées identiques ou différentes dont les fonctions hydroxyles sont substituées ou non substituées par un radical -f- [A] -COOH,

5) -[A]- est un radical au moins divalent comprenant de 1 à 4 atomes de carbone choisi dans le groupe constitué par les radicaux alkyles -(CH2)x- 1 < x < 4, les radicaux comprenant au moins un hétéroatome choisi parmi

0, N et S et les radicaux porteurs de fonctions carboxyles et/ou -f- [A]- COOH est issu d'un acide aminé ou d'un alcoolacide, comprenant de 2 à 5 atomes de carbone, et est lié aux unités saccharidiques du composé par une fonction f ;

6) f est choisie dans le groupe constitué par les fonctions éther, carbamate, ou amide ;

7) Ri est un radical -N(L) _s ([E]-(o-[AA]) _u )t ou -N(L) _S [AA]

- le bras de liaison -E- est un radical au moins divalent comprenant de 1 à 10 atomes de carbone comprenant éventuellement au moins un hétéroatome choisi parmi 0, N et S, et éventuellement porteur de fonctions carboxyle, et/ou -N(L) _s -( [E] -(o-) _u ) est issu d'un acide aminé, d'une diamine, d'un amino-alcool, d'une aminé diacide, d'une triamine, d'une tétraamine, d'un amino-diol ou d'un amino-triol comprenant de 2 à 12 atomes de carbone dont les fonctions aminés sont primaires et/ou secondaires;

- - [AA] est un radical issu d'un acide aminé aromatique comportant un phényle ou un indole, substitué ou non substitué, ou d'un dérivé d'acide aminé aromatique comportant un phényle ou un indole, substitué ou non substitué,

- 0 est une fonction amide, carbamate ou carbamide, u = 1, 2 ou 3 et

lorsque Ri est un radical -N(L) _s ([E]-(o-[AA] ) _u )t et

- lorsque X est un radical -C=0- alors

o s = 0 ou 1, t = 1 ou 2 et s+t = 2 ;

o L est choisi dans le groupe constitué de

^■ -H, et

^■ un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone, et

- lorsque X est un radical -CH2-, alors

o s = 0, 1 ou 2, t = 1 ou 2 et s+t = 2 ou 3 ;

o si s = 1, L est choisi dans le groupe constitué de

^■ -H, et

- -H et/ou -[A]-COOH si f telle que définie au point 6) est une fonction éther,

^■ -H et/ou-CO-NH-[A]-COOH si f telle que définie au point 6 est une fonction carbamate, et

^■ un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone, et

o si s = 2, L est choisi dans le groupe constitué de :

^■ -H, et

^« -H et/ou -[A]-COOH si f telle que définie au point 6) est une fonction éther, et

^■ un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone, et

lorsque Ri est un radical -N(L) _S [AA] et

- lorsque X est un radical -C=0- alors s = 1 et L est choisi dans le groupe constitué de :

^■ "H,

^■ un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone,

- lorsque X est un radical -CH2-, alors s = 1 ou 2 et

o si s = 1, L est choisi dans le groupe constitué de :

^■ -H, et

^■ -H et/ou -[A]-COOH si f telle que définie au point 6) est une fonction éther,

- -H et/ou-CO-NH-[A]-COOH si f telle que définie au point 6) est une fonction carbamate, et ^■ un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone, et

o si s = 2, L est choisi dans le groupe constitué de

■ -H, et

^■ -H et/ou -[A]-COOH si f telle que définie au point 6) est une fonction éther, et

■ un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone, et

8) le degré de substitution, représenté par p, est le nombre de fonctions carboxylates par unité saccharidique, lesdites fonctions carboxylates étant éventuellement des fonctions carboxylates naturellement présentes sur les unités saccharidiques, étant issues de la substitution par des radicaux -[A]- COOH et/ou des radicaux -[AA] et 6 > p > 0,1 ,

et les fonctions acides étant sous forme de sels de cations alcalins choisis dans le groupe constitué par Na ⁺ et K ⁺ .

[000360] Quand u est supérieur ou égal à 2, alors les radicaux -[AA] peuvent être identiques ou différents.

[000361] Quand t est égal à 2, alors les -([E]-(o-[AA])u) peuvent être identiques ou différents.

[000362] Quand s est égal à 2, alors :

- soit t = 1 et l'atome d'azote de -N(L) _s ([E]-(o-[AA]) _u ) est sous forme d'ammonium quaternaire, c'est-à-dire sous forme -N ⁺ (L)2([E]-(o-[AA]) _u ), et

- soit -N(L) _S [AA] est sous forme d'ammonium quaternaire, c'est-à-dire sous forme - N ⁺ (L) ₂ [AA] .

[000363] Dans un mode de réalisation, le composé anionique substitué est choisi parmi les composés de formule I, dans laquelle f est une fonction éther, et

lorsque Ri est un radical -N(L) _s ([E]-(o-[AA]) _u )t et N(L) _s -([E]-(o-) _u ) est issu d'un acide aminé, d'une diamine ou d'un amino-alcool porteur de fonctions aminé primaire :

lorsque X est un radical -C=0- alors

s = 0 ou 1, t = 1 ou 2 et s+t = 2 et L est -H, et lorsque X est un radical -CH2-, alors

o s = 0, 1 ou 2, t = 1 ou 2 et s+t = 2 ou 3 et L est H et/ou - [A]-COOH

lorsque Ri est un radical -N(L) _S [AA] et

lorsque X est un radical -C=0- alors s = 1 et L est -H, lorsque X est un radical -CH2-, alors s = 1 ou 2 et L est H et/ou -[A]- COOH .

[000364] Dans un mode de réalisation, le composé anionique substitué est choisi parmi les composés de formule I, dans laquelle f est une fonction carbamate, et

- lorsque Ri est un radical -N(L) _s ( [E]-(o-[AA]) _u )t et N(L) _s -([E]-(o-) _u ) est issu d'un acide aminé, d'une diamine ou d'un amino-alcool porteur de fonctions aminé primaire :

- lorsque X est un radical -C=0- alors

« s = 0 ou 1, t = 1 ou 2 et s+t = 2 et L -H, et lorsque X est un radical -CH2-, alors

o s = 0, 1 ou 2, t = 1 ou 2 et s+t = 2 ou 3 ;

■ si s = 1, L est H et/ou-CO-NH-[A]-COOH, et

■ si s = 2, L est -H, ou L est H et -CO-NH-[A]-COOH - lorsque Ri est un radical -N(L) _S [AA] et

- lorsque X est un radical -C=0- alors s = 1 et L est -H,

- lorsque X est un radical -CH2-, alors s = 1 ou 2 et, L est -H et/ou -CO- NH-[A]-COOH .

[000365] Dans un mode de réalisation, le composé anionique substitué est choisi parmi les composés de formule I, dans laquelle lorsque Ri est un radical -N(L) _S ([E]- (o-[AA]) _u )t et N(L)s-([E]-(o-)u) est issu d'un acide aminé, d'une diamine ou d'un amino-alcool porteur de fonctions aminé secondaire :

- lorsque Ri est un radical -N(L) _s ([E]-(o-[AA])u)t et

- lorsque X est un radical -C=0- alors

■ s = 1, t = 1 et L est un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone, et

- lorsque X est un radical -CH2-, alors

o s = 1 ou 2, t = 1 ou 2 et s+t = 2 ou 3 ;

o si s = 1 , L est un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone, et

o si s = 2, L est choisi dans le groupe constitué de :

■ un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone, et

■ un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone et/ou -H, et ■ un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1

à 4 atomes de carbone et/ou -[A]-COOH si f est une fonction éther, et

■ un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone et/ou -CO-NH-[A]-COOH si f est une fonction carbamate

lorsque Ri est un radical -N(L) _S [AA] et

- lorsque X est un radical -C=0- alors s = 1 et L est un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone,

- lorsque X est un radical -CH2-, alors s = 1 ou 2

o si s = 1, L est un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone, et

o si s = 2, L est choisi dans le groupe constitué de :

■ un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone, et

■ un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone et/ou -H, et

■ un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone et/ou -[Aj-COOH si f est une fonction éther, et

■ un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone et/ou -CO-NH-[A]-COOH si f est une fonction carbamate

[000366] Le radical -[AA] est issu d'un acide aminé aromatique comportant un phényle ou un indole, substitué ou non substitué, ou d'un dérivé d'acide aminé aromatique comportant un phényle ou un indole, substitué ou non substitué.

[000367] Par « acide aminé aromatique comportant un phényle ou un indole, substitué ou non substitué », on entend un composé comprenant de 7 à 20 atomes de carbone, un phényle ou un indole, substitué ou non substitué, au moins une fonction aminé et au moins une fonction acide.

[000368] Dans un mode de réalisation, le composé anionique substitué est choisi parmi les composés de formule I, dans laquelle le radical -[AA] est issu d'un acide aminé aromatique comportant un phényle ou un indole, substitué ou non substitué.

[000369] Le radical -[AA] est lié au radical -E- ou à -X- suite à une réaction de l'aminé du précurseur de -[AA], acide aminé aromatique ou dérivé d'acide aminé aromatique, avec un précurseur du radical -E- ou avec l'extrémité réductrice de la chaîne saccharidique, éventuellement oxydée. [000370] Dans un mode de réalisation, le composé anionique substitué est choisi parmi les composés de formule I, dans laquelle le radical -[AA] est issu d'un acide aminé aromatique comportant un phényle ou un indole, substitué ou non substitué, choisi parmi les acides alpha- ou béta-aminés.

[000371] Dans un mode de réalisation, le composé anionique substitué est choisi parmi les composés de formule I, dans laquelle le radical -[AA] est issu d'un acide aminé aromatique comportant un phényle ou un indole, substitué ou non substitué comprenant une unique fonction aminé et une unique fonction acide.

[000372] Dans un mode de réalisation, le composé anionique substitué est choisi parmi les composés de formule I, dans laquelle le radical -[AA] est issu d'un acide aminé aromatique comportant un phényle ou un indole, substitué ou non substitué choisi dans le groupe constitué par la phénylalanine, l'alpha-méthyl phénylalanine, la 3,4-dihydroxyphénylalanine, l'alpha phénylglycine, la 4-hydroxy phénylglycine, la 3,5- phénylglycine, la tyrosine, l'alpha-méthyl tyrosine, la O-méthyl ty rosi ne et le tryptophane.

[000373] Dans un mode de réalisation, le composé anionique substitué est choisi parmi les composés de formule I, dans laquelle le radical -[AA] est issu d'un acide aminé aromatique comportant un phényle ou un indole, substitué ou non substitué choisi dans le groupe constitué par les acides aminés naturels.

[000374] Dans un mode de réalisation, les acides aminés naturels sont choisis dans le groupe constitué par la phénylalanine, la tyrosine et le tryptophane.

[000375] Dans un mode de réalisation, l'acide aminé naturel est la phénylalanine.

[000376] L'acide aminé aromatique comportant un phényle ou un indole, substitué ou non substitué, et ses dérivés peuvent, être sous forme lévogyre, dextrogyre ou sous forme racémique.

[000377] Dans un mode de réalisation, il est sous forme lévogyre.

[000378] Par « dérivé d'acide aminé aromatique », on entend les dérivés décarboxylés, les dérivés amino-alcools, ou amino-amides correspondant aux acides aminés aromatiques comportant un phényle ou un indole, substitué ou non substitué.

[000379] Dans un mode de réalisation, le « dérivé d'acide aminé aromatique », comportant un phényle ou un indole, substitué ou non substitué, est choisi dans le groupe constitué par les amino-alcools et les amino-amides.

[000380] Dans un mode de réalisation, le composé anionique substitué est choisi parmi les composés de formule I, dans laquelle la fonction f est une fonction éther.

[000381] Dans un mode de réalisation, le composé anionique substitué est choisi parmi les composés de formule I, dans laquelle la fonction f est une fonction carbamate. [000382] Dans un mode de réalisation, le composé anionique substitué est choisi parmi les composés de formule I, dans laquelle la fonction est une fonction amide.

[000383] Dans un mode de réalisation, le composé anionique substitué est choisi parmi les composés de formule I, dans laquelle le radical -f-[A]-COOH est choisi dans le groupe constitué par les enchaînements suivants, f ayant la signification donnée ci- dessus :

ou leur sels de cations alcalins choisis dans le groupe constitué de Na ⁺ et K ⁺ .

[000384] Dans un mode de réalisation, le radical -f-[A]-COOH comprend un radical - [A]- comprenant 1 ou 2 atomes de carbone, en particulier ledit radical -[A]- est lié à une unité saccharidique par une fonction f éther.

[000385] Dans un mode de réalisation, le composé anionique est choisi parmi les composés de formule I, dans laquelle le radical -f-[A]-COOH est -f-CH2-COOH et f est une fonction éther.

[000386] Dans un mode de réalisation le composé anionique substitué est choisi parmi les composés de formule I, dans laquelle le radical -f-[A]-COOH est issu d'un acide aminé comprenant de 2 à 5 atomes de carbone ; et -f- est une fonction amide ou carbamate.

[000387] Dans un mode de réalisation, f est une fonction amide.

[000388] Dans un mode de réalisation, le composé anionique substitué est choisi parmi les composés de formule I, dans laquelle l'acide aminé comprenant de 2 à 5 atomes de carbone est la glycine.

[000389] Selon un mode de réalisation, le composé anionique substitué comprend au moins une fonction carboxylate. La fonction carboxylate peut être présente naturellement sur les unités saccharidiques, cycliques ou ouverte, ou provenir d'un radical -f-[A]-COOH ou d'un radical -[AA] .

[000390] Selon un mode de réalisation p > 0, 1.

[000391] Selon un mode de réalisation p > 0,2.

[000392] Selon un mode de réalisation p > 0,3.

[000393] Selon un mode de réalisation p > 0,5.

[000394] Selon un mode de réalisation p > 0,7.

[000395] Selon un mode de réalisation p > 0,9. [000396] Selon un mode de réalisation 3,5 > p.

[000397] Selon un mode de réalisation 3,2 > p.

[000398] Selon un mode de réalisation 3 > p.

[000399] Selon un mode de réalisation 2,8 > p.

[000400] Selon un mode de réalisation 2,5 > p.

[000401] Selon un mode de réalisation 2 > p.

[000402] Selon un mode de réalisation 3,5 > p > 0,1.

[000403] Selon un mode de réalisation 3,2 > p > 0,2.

[000404] Selon un mode de réalisation 3 > p > 0,3.

[000405] Selon un mode de réalisation 2,8 > p > 0,5.

[000406] Selon un mode de réalisation 2,5 > p > 0,7.

[000407] Selon un mode de réalisation 2 > p > 0,9.

[000408] Dans un mode de réalisation, le composé anionique substitué est choisi parmi les composés de formule I, dans laquelle au plus un des R ₂ , F , R.4, Re est un radical issu d'un squelette formé d'un nombre discret n-1 compris entre 1 et 6, soit 1 < n-1 < 6.

[000409] Dans un mode de réalisation, 1 < n-1 < 5.

[000410] Dans un mode de réalisation, 2 < n-1 < 4.

[000411] Dans un mode de réalisation n-1 est égal à 1.

[000412] Dans un mode de réalisation n-1 est égal à 2.

[000413] Dans un mode de réalisation n-1 est égal à 3.

[000414] Dans un mode de réalisation n-1 est égal à 4.

[000415] Dans un mode de réalisation n-1 est égal à 5.

[000416] Dans un mode de réalisation n-1 est égal à 6.

[000417] Dans un mode de réalisation n-1 est égal à 7.

[000418] Dans un mode de réalisation le composé anionique substitué est choisi parmi les composés de formule I, dans laquelle au plus un des R2, R3, R ₄ , Re est un radical issu d'un squelette saccharidique formé d'un nombre discret n-1 d'unités saccharidiques identiques ou différentes et lesdites unités saccharidiques sont choisies dans le groupe constitué par les pentoses, les hexoses, les acides uroniques et les N- acétylhexosamines.

[000419] Dans un mode de réalisation, au moins une unité saccharidique du squelette saccharidique est choisie dans le groupe des pentoses.

[000420] Dans un mode de réalisation, les pentoses sont choisis dans le groupe constitué de l'arabinose, du ribulose, du xylulose, du lyxose, du ribose, du xylose et du désoxyribose. [000421] Dans un mode de réalisation, au moins une unité saccharidique du squelette saccharidique est choisie dans le groupe des acides uroniques.

[000422] Dans un mode de réalisation, les acides uroniques sont choisis dans le groupe constitué de l'acide glucuronique, de l'acide iduronique, de l'acide galacturonique, de l'acide gluconique, de l'acide mucique, de l'acide glucarique et de l'acide galactonique.

[000423] Dans un mode de réalisation, au moins une unité saccharidique du squelette saccharidique est choisie dans le groupe des N-acétylhexosamines.

[000424] Dans un mode de réalisation, la N-acétylhexosamine est choisie dans le groupe constitué de la N-acétylgalactosamine, de la N-acétylglucosamine et de la N- acétylmannosamine.

[000425] Dans un mode de réalisation, les unités saccharidiques du squelette saccharidique, identiques ou différentes sont liées par des liaisons glycosidiques identiques ou différentes, notamment par des liaisons glycosidiques de type (1,1), (1,2), (1,3), (1,4) et/ou (1,6).

[000426] Dans un mode de réalisation, les liaisons glycosidiques du squelette saccharidique sont de types (1,4) ou (1,6).

[000427] Dans un mode de réalisation, les liaisons glycosidiques du squelette saccharidique sont de types (1,4).

[000428] Dans un mode de réalisation, au moins une unité saccharidique du squelette saccharidique est choisie dans le groupe des hexoses.

[000429] Tout particulièrement, toutes les unités saccharidiques du squelette saccharidique sont des hexoses.

[000430] Dans un mode de réalisation, les hexoses sont choisis dans le groupe constitué du mannose, du glucose, du fructose, du sorbose, du tagatose, du psicose, du galactose, de l'allose, de l'altrose, du talose, de l'idose, du gulose, du fucose, du fuculose et du rhamnose.

[000431] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique est formé d'un nombre discret n-l = l unité saccharidique choisies parmi les hexoses. Plus particulièrement choisi dans le groupe constitué du mannose, du glucose, du fructose, du sorbose, du tagatose, du psicose, du galactose, de l'allose, de l'altrose, du talose, de l'idose, du gulose, du fucose, du fuculose et du rhamnose.

[000432] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique est formé d'un nombre discret n-l=2 d'unités saccharidiques identiques ou différentes choisies parmi les hexoses liées par une liaison glycosidique de type (1, 1).

[000433] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique est formé d'un nombre discret n-l = 2 d'unités saccharidiques différentes choisies parmi les hexoses et liées par une liaison glycosidique de type (1, 1), ledit squelette saccharidique étant choisi dans le groupe constitué du tréhalose et du sucrose.

[000434] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique est formé d'un nombre discret n-l=2 d'unités saccharidiques identiques ou différentes choisies parmi les hexoses liées par une liaison glycosidique de type (1,2).

[000435] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique est formé d'un nombre discret n-l=2 d'unités saccharidiques identiques ou différentes choisies parmi les hexoses liées par une liaison glycosidique de type (1,2), ledit squelette saccharidique étant le kojibiose.

[000436] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique est formé d'un nombre discret n-l=2 d'unités saccharidiques identiques ou différentes choisies parmi les hexoses liées par une liaison glycosidique de type (1,3).

[000437] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique est formé d'un nombre discret n-l = 2 d'unités saccharidiques identiques ou différentes choisies parmi les hexoses liées par une liaison glycosidique de type (1,3), ledit squelette saccharidique étant du nigeriose ou du laminaribiose.

[000438] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique est formé d'un nombre discret n-l=2 d'unités saccharidiques identiques ou différentes choisies parmi les hexoses liées par une liaison glycosidique de type (1,4).

[000439] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique est formé d'un nombre discret n-l=2 d'unités saccharidiques identiques ou différentes choisies parmi les hexoses liées par une liaison glycosidique de type (1,4), ledit squelette saccharidique étant un dissacharide choisi dans le groupe constitué du maltose, du lactose et de la cellobiose.

[000440] Dans un mode de réalisation le squelette saccharidique est formé d'un nombre discret n-l = 2 d'unités saccharidiques identiques ou différentes choisies parmi les hexoses liées par une liaison glycosidique de type (1,6).

[000441] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique formé d'un nombre discret n-l=2 d'unités saccharidiques identiques ou différentes choisies parmi les hexoses liées par une liaison glycosidique de type (1,6), ledit squelette saccharidique étant un dissacharide choisi dans le groupe constitué de l'isomaltose, du mélibiose et de la gentiobiose.

[000442] Dans un mode de réalisation, le composé anionique substitué est choisi parmi les composés anioniques constitués d'un squelette saccharidique formé d'un nombre discret n-l=2 d'unités saccharidiques identiques ou différentes choisies parmi les hexoses liées par une liaison glycosidique de type (1,6), ledit squelette saccharidique étant l'isomaltose. [000443] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique du composé anionique substitué est formé d'un nombre discret 3 < n-1≤ 8 d'unités saccharidiques identiques ou différentes.

[000444] Dans un mode de réalisation, au moins une des unités saccharidiques identiques ou différentes, qui composent le squelette saccharidique formé d'un nombre discret 3 < n-1 < 8 d'unités saccharidiques est choisie dans le groupe constitué des hexoses reliés par des liaisons glycosidiques identiques ou différentes.

[000445] Dans un mode de réalisation, les unités saccharidiques identiques ou différentes, qui composent le squelette saccharidique formé d'un nombre discret 3 < n-1 < 8 d'unités saccharidiques sont choisies parmi les hexoses et liées par au moins une liaison glycosidique de type (1,2).

[000446] Dans un mode de réalisation, les unités saccharidiques identiques ou différentes, qui composent le squelette saccharidique formé d'un nombre discret 3 < n-1 < 8 d'unités saccharidiques sont choisies parmi les hexoses et liées par au moins une liaison glycosidique de type (1,3).

[000447] Dans un mode de réalisation, les unités saccharidiques identiques ou différentes, qui composent le squelette saccharidique formé d'un nombre discret 3 ≤ n-1 < 8 d'unités saccharidiques sont choisies parmi les hexoses et liées par au moins une liaison glycosidique de type (1,4).

[000448] Dans un mode de réalisation, les unités saccharidiques identiques ou différentes, qui composent le squelette saccharidique formé d'un nombre discret 3 < n-1 < 8 d'unités saccharidiques sont choisies parmi les hexoses et liées par au moins une liaison glycosidique de type (1,6). [000449] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique est formé d'un nombre discret n- l=3 d'unités saccharidiques identiques ou différentes.

[000450] Dans un mode de réalisation, les trois unités saccharidiques du squelette saccharidique sont identiques.

[000451] Dans un mode de réalisation, deux des trois unités saccharidiques du squelette saccharidique sont identiques.

[000452] Dans un mode de réalisation, les unités saccharidiques du squelette saccharidique sont identiques ou différentes et sont choisies parmi les hexoses, l'hexose central étant lié aux deux autres unités saccharidiques par une liaison glycosidique de type (1,2) et par une liaison glycosidique de type (1,4).

[000453] Dans un mode de réalisation, les unités saccharidiques identiques ou différentes du squelette saccharidique sont choisies parmi les hexoses et l'hexose central est lié aux deux autres unités saccharidiques par une liaison glycosidique de type (1,3) et par une liaison glycosidique de type (1,4). [000454] Dans un mode de réalisation, les unités saccharidiques identiques ou différentes du squelette saccharidique sont choisies parmi les hexoses et l'hexose central est lié aux deux autres unités saccharidiques par une liaison glycosidique de type (1,2) et par une liaison glycosidique de type (1,6).

[000455] Dans un mode de réalisation, les unités saccharidiques identiques ou différentes du squelette saccharidique sont choisies parmi les hexoses et l'hexose central est lié aux deux autres unités saccharidiques par une liaison glycosidique de type (1,2) et par une liaison glycosidique de type (1,3).

[000456] Dans un mode de réalisation, les unités saccharidiques identiques ou différentes du squelette saccharidique sont choisies parmi les hexoses et l'hexose central est lié aux deux autres unités saccharidiques par une liaison glycosidique de type (1,4) et par une liaison glycosidique de type (1,6).

[000457] Dans un mode de réalisation, les trois unités saccharidiques identiques ou différentes du squelette saccharidique sont des motifs hexose choisis dans le groupe constitué par le mannose et le glucose.

[000458] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique est le maltotriose.

[000459] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique du composé anionique substitué est l'isomaltotriose. [000460] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique est formé d'un nombre discret n-l=4 d'unités saccharidiques identiques ou différentes.

[000461] Dans un mode de réalisation, les quatre unités saccharidiques du squelette saccharidique substitué sont identiques.

[000462] Dans un mode de réalisation, trois des quatre unités saccharidiques du squelette saccharidique sont identiques.

[000463] Dans un mode de réalisation, les quatre unités saccharidiques du squelette saccharidique sont des motifs hexose choisis dans le groupe constitué par le mannose et le glucose.

[000464] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique est du maltotétraose.

[000465] Dans un mode de réalisation, les unités saccharidiques identiques ou différentes du squelette saccharidique sont choisies parmi les hexoses, un hexose terminal est lié à une unité saccharidique par une liaison glycosidique de type (1,2) et les autres sont liés entre eux par une liaison glycosidique de type (1,6).

[000466] Dans un mode de réalisation, les unités saccharidiques identiques ou différentes du squelette saccharidique sont choisies parmi les hexoses et liées par une liaison glycosidique de type (1,6). [000467] Dans un mode de réalisation, les unités saccharidiques identiques ou différentes du squelette saccharidique sont choisies parmi les hexoses et liées par une liaison glycosidique de type (1,4). [000468] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique est formé d'un nombre discret n-l=5 d'unités saccharidiques identiques ou différentes.

[000469] Dans un mode de réalisation, les cinq unités saccharidiques du squelette saccharidique sont identiques.

[000470] Dans un mode de réalisation, les cinq unités saccharidiques du squelette saccharidique sont des motifs hexose choisis dans le groupe constitué par le mannose et le glucose.

[000471] Dans un mode de réalisation, les unités saccharidiques identiques ou différentes du squelette saccharidique sont choisies parmi les hexoses et liées par une liaison glycosidique de type (1,4).

[000472] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique est du maltopentaose.

[000473] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique du composé anionique substitué est formé d'un nombre discret n-l=6 d'unités saccharidiques identiques ou différentes.

[000474] Dans un mode de réalisation, les six unités saccharidiques du squelette saccharidique sont identiques. Dans un mode de réalisation, les unités saccharidiques identiques ou différentes du squelette saccharidique sont choisies parmi les hexoses et liées par une liaison glycosidique de type (1,4).

[000475] Dans un mode de réalisation, les six unités saccharidiques identiques ou différentes du squelette saccharidique sont des motifs hexose choisis dans le groupe constitué par le mannose et le glucose.

[000476] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique est du maltohexaose.

[000477] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique est formé d'un nombre discret n-l=7 d'unités saccharidiques identiques ou différentes.

[000478] Dans un mode de réalisation, les sept unités saccharidiques du squelette saccharidique sont identiques.

[000479] Dans un mode de réalisation, les unités saccharidiques identiques ou différentes du squelette saccharidique sont choisies parmi les hexoses et liées par une liaison glycosidique de type (1,4). [000480] Dans un mode de réalisation, les sept unités saccharidiques du squelette saccharidique sont des motifs hexose choisis dans le groupe constitué par le mannose et le glucose.

[000481] Dans un mode de réalisation, le squelette saccharidique du composé anionique substitué est du maltoheptaose.

[000482] Le composé anionique substitué est choisi parmi les composés de formule I, dans laquelle ["unité saccharidique sous forme ouverte est issue d'une unité saccharidique choisie dans le groupe constitué par les pentoses, les hexoses, les acides uroniques et les les N-acétylhexosamines.

[000483] Dans un mode de réalisation, le pentose est choisi dans le groupe constitué de l'arabinose, du ribulose, du xylulose, du lyxose, du ribose, du xylose et du désoxyribose.

[000484] Dans un mode de réalisation, l'hexose est choisi dans le groupe constitué du mannose, du glucose, du fructose, du sorbose, du tagatose, du psicose, du galactose, de l'allose, de l'altrose, du talose, de l'idose, du gulose, du fucose, du fuculose et du rhamnose.

[000485] Dans un mode de réalisation, l'acide uronique est choisi dans le groupe constitué de l'acide glucuronique, de l'acide iduronique, de l'acide galacturonique, de l'acide gluconique, de l'acide mucique, de l'acide glucarique et de l'acide galactonique.

[000486] Dans un mode de réalisation, la N-acétylhexosamine est choisie dans le groupe constitué de la N-acétylgalactosamine, de la N-acétylglucosamine et de la N- acétylmannosamine

[000487] Dans un mode de réalisation le composé anionique substitué est choisi parmi les composés de formule I, dans laquelle aucun des R2, R3, F , Re n'est un radical issu d'un squelette saccharidique formé d'un nombre discret n-1 compris entre 1 et 7 ( 1 < n- 1 < 7) d'unités saccharidiques identiques ou différentes. Dans ce mode de réalisation n= l et le composé anionique substitué est constitué de la seule unité saccharidique ouverte.

[000488] Dans un mode de réalisation, le composé anionique substitué est choisi parmi les composés de formule I, dans laquelle l'un des R2, R3, R4, Re qui est un radical issu d'un squelette saccharidique est lié à l'unité saccharidique ouverte par une liaison glycosidique de type ( 1,2), ( 1,3), ( 1,4) ou (1,6) .

[000489] Dans un mode de réalisation, l'un des R2, R3, R4, RÔ qui est un radical issu d'un squelette saccharidique est lié à l'unité saccharidique ouverte par une liaison glycosidique de type ( 1,4) ou (1,6). [000490] Dans un mode de réalisation, l'un des R2, R3, R4, Re qui est un radical issu d'un squelette saccharidique est lié à l'unité saccharidique ouverte par une liaison glycosidique de type (1,4). [000491] Dans un mode de réalisation, les unités saccharidiques du squelette saccharidique et l'unité saccharidique dont est issue l'unité saccharidique ouverte sont identiques.

[000492] Dans un mode de réalisation, les unités saccharidiques du squelette saccharidique et l'unité saccharidique dont est issue l'unité saccharidique ouverte sont des hexoses.

[000493] Dans un mode de réalisation l'enchaînement saccharidique, c'est-à-dire les n unité(s) saccharidique(s), du composé anionique substitué est issu d'un composé naturel.

[000494] Dans un mode de réalisation, l'enchaînement saccharidique du composé anionique substitué est issu d'un composé synthétique.

[000495] Dans un mode de réalisation, l'enchaînement saccharidique du composé anionique substitué est issu d'un composé obtenu par dégradation enzymatique d'un polysaccharide suivie d'une purification.

[000496] Dans un mode de réalisation, l'enchaînement saccharidique du composé anionique substitué est issu d'un composé obtenu par dégradation chimique d'un polysaccharide suivie d'une purification.

[000497] Dans un mode de réalisation, l'enchaînement saccharidique du composé anionique substitué est issu d'un composé obtenu par voie chimique, par couplage covalent de précurseurs de plus bas poids moléculaire.

[000498] Dans un mode de réalisation, l'enchaînement saccharidique du composé anionique substitué est issu d'un oligosaccharide choisi parmi le sophorose, le lactulose, le maltulose, le leucrose, le rutinose, l'isomaltulose, le fucosyllactose, le panose

[000499] Dans un mode de réalisation, le composé anionique substitué est issu d'un composé portant un bout de chaîne réducteur sous forme fermée ou cyclique.

[000500] Le composé anionique substitué comporte à une de ses extrémités une unité saccharidique ouverte, sous forme réduite suite à une réaction d'amination réductrice (tel que décrit par exemple dans les publications M. Yalpani et al., Journal of Polymer Science : Polymer Chemistry Edition 1985, 23, 1395-1405, ou B.T. Chao et al., Tetrahedron 2005, 61, 5725-5734) ou sous forme oxydée suite à une oxydation de la fonction hémiacétal suivie de l'ouverture du cycle oxydé par réaction avec une molécule portant une fonction aminé (tel que décrit par exemple dans les publications T. Zhang et al ., Macromolecules 1994, 27, 7302-7308 ou S. Takeoka et al ., Journal of the Chemical Society, Faraday Transactions 1998, 94( 15), 2151-2158).

[000501] Dans un mode de réalisation, le radical Ri est choisi parmi les radicaux de formule -N(L) _s -([E]-(o-[AA] _u )t.

[000502] Dans un mode de réalisation, E comprend 1 à 8 atomes de carbone.

[000503] Dans un mode de réalisation, E comprend 1 à 6 atomes de carbone.

[000504] Dans un mode de réalisation, E comprend 1 à 4 atomes de carbone.

[000505] Dans un mode de réalisation, E comprend 1 ou plusieurs hétéroatomes choisi parmi O, IM et S.

[000506] Dans un mode de réalisation, le radical -N(L) _s -( [E]-(o-[AA] _u )t est choisi parmi les radicaux dans lesquels -N(L) _s -([E]-(o-) _u )- est un radical au moins divalent issu d'un acide aminé comprenant de 2 à 12 atomes de carbone.

[000507] Dans un mode de réalisation, l'acide aminé comprend de 2 à 10 atomes de carbone.

[000508] Dans un mode de réalisation, l'acide aminé est choisi dans le groupe constitué par la glycine, la leucine, la phénylalanine, la lysine, l'isoleucine, l'alanine, la valine, la sérine, la thréonine, l'acide aspartique et l'acide glutamique.

[000509] Dans un mode de réalisation, l'acide aminé est choisi dans le groupe constitué de l'acide aspartique ou de l'acide glutamique.

[000510] L'acide aminé peut être soit lévogyre, soit dextrogyre, soit sous forme racémique.

[000511] Dans un mode de réalisation, l'acide aminé est lévogyre.

[000512] Dans un mode de réalisation, le radical -N(L) _s -( [E]-(o-) _u ) est un radical au moins divalent issu d'une diamine, d'une triamine, d'une tétraamine, d'un amino- alcool, d'un amino-diol ou d'un amino-triol.

[000513] Dans un mode de réalisation les fonctions aminés de ces composés sont des aminés primaires.

[000514] Dans un mode de réalisation les fonctions aminés de ces composés sont des aminés secondaires porteuses d'un radical alkyle linéaire ou ramifié comprenant de 1 à 4 atomes de carbone.

[000515] Dans un mode de réalisation, le radical -N(L) _s -([E]-(o-) _u ) est un radical au moins divalent issu d'un mono- ou polyéthylène glycol aminé. [000516] Dans un mode de réalisation, le radical -N(L) _s -([E]-(o-) _u ) est un radical au moins divalent issu d'un mono- ou polyéthylène glycol aminé choisi dans le groupe constitué par l'éthanolamine, le diéthylène glycol aminé et le triéthylène glycol aminé.

[000517] Dans un mode de réalisation, le radical -N(L) _s -([E]-(o-) _u ) est un radical au moins divalent issu d'un mono- ou polyéthylène glycol diamine.

[000518] Dans un mode de réalisation, le radical -N(L) _s -([E]-(o-)u) est un radical au moins divalent issu de l'éthylènediamine.

[000519] Dans un mode de réalisation, le radical -N(L) _s -([E]-(o-) _u ) est un radical au moins divalent issu d'un polyéthylène glycol diamine choisi dans le groupe constitué par le diéthylène glycol diamine et le triéthylène glycol diamine.

[000520] Selon un mode de réalisation, le radical -N(L) _s -([E]-(o-) _u ) est un radical trivalent, notamment -N(L) _s -([E]-(o-) _u ) est issu d'une triamine.

[000521] Dans un mode de réalisation, le radical -N(L) _s -([E]-(o-) _u ) est un radical trivalent, notamment -N(L) _s -([E]-(o-)u) est issu d'une triamine, notamment -N(L) _S - ([E]-(o-)u) est issu d'un acide aminé portant deux fonctions aminés, comme la lysine ou l'ornithine, amidifié par une diamine, comme l'éthylènediamine.

[000522] Dans un mode de réalisation -N(L) _s -([E]-(o-) _u ) est un radical tétravalent, notamment -N(L) _s -([E]-(o-) _u ) est issu du trishydroxyméthylaminométhane, encore appelé 2-amino-2-hydroxyméthyl-l,3-propanediol, ou TRIS.

[000523] Dans un mode de réalisation, le composé anionique substitué répond à la Formule I dans laquelle :

3) X est un radical -CH2-,

4) Ri est un radical -N(L) _s ([E]-(o-[AA]) _u )t, L, E, AA, s, t, u et 0 étant tels que définis ci-dessus.

[000524] Dans un mode de réalisation, L est -H et/ou -[AJ-COOH si f est une fonction éther.

[000525] Dans un mode de réalisation, s = 1.

[000526] Dans un mode de réalisation, t = 1.

[000527] Dans un mode de réalisation, E est issu d'un acide aminé, d'une aminé diacide, d'une diamine, d'une triamine, d'une amine-alcool ou d'un amino-diol.

[000528] Dans un mode de réalisation, E est issu d'un acide aminé, de l'éthylène diamine ou de l'éthanolamine.

[000529] Dans un mode de réalisation, -[AA] est issu de la phénylalanine, de la phénylglycine, de la tyrosine ou du tryptophane.

[000530] Dans un mode de réalisation, -[AA] est issu de la phénylalanine.

[000531] Dans un mode de réalisation, u = 1 ou 2. [000532] Dans un mode de réalisation, L est -H et/ou -[A]-COOH si f est une fonction éther ; s = l ; t = l ; u = l ou 2 ; E est issu d'un acide aminé, d'une diamine, d'une aminé diacide, d'une triamine, d'une amine-alcool ou un amino-diol ; -[AA] est issu de la phénylalanine, de la phénylglycine, de la ty rosi ne et du tryptophane.

[000533] Dans un mode de réalisation, L est -H et/ou -[A]-COOH si f est une fonction éther ; s = l ; t = l ; u = l ; E est issu d'un acide aminé, d'une diamine, d'une aminé diacide, d'une triamine, d'une amine-alcool ou un amino-diol, ; -[AA] est issu de la phénylalanine, de la phénylglycine, de la ty rosi ne et du tryptophane.

[000534] Dans un mode de réalisation, L est -H et/ou -[A]-COOH si f est une fonction éther ; s = l ; t = l ; u = l ou 2 ; E est issu d'un acide aminé, de l'éthylène diamine ou de l'éthanolamine ; -[AA] est issu de la phénylalanine, de la phénylglycine, de la tyrosine et du tryptophane.

[000535] Dans un mode de réalisation, L est -H et/ou -[A]-COOH si f est une fonction éther ; s = l ; t = l ; u = l ou 2 ; E est issu d'un acide aminé, d'une diamine, d'une aminé diacide, d'une triamine, d'une amine-alcool ou un amino-diol ; -[AA] est issu de la phénylalanine.

[000536] Dans un mode de réalisation, -Ri est choisi parmi les radicaux de formule - N(L)s([E]-(o-[AA]) _u )t dans laquelle L, E, AA, s, t, u et o ont les significations données ci-dessus, et X est un radical -C=0-.

[000537] Dans un mode de réalisation, le composé anionique substitué répond à la Formule I dans laquelle ;

3) X est un radical -CO-,

4) Ri est un radical -N(L) _s ([E]-(o-[AA])u)t, L, E, AA, s, t, u et o étant tels que définis ci-dessus.

[000538] Dans un mode de réalisation, L est -H.

[000539] Dans un mode de réalisation, L est un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone.

[000540] Dans un mode de réalisation, s= 1.

[000541] Dans un mode de réalisation, t= 1.

[000542] Dans un mode de réalisation, E est issu d'un acide aminé, d'une aminé diacide, d'une diamine, d'une triamine, d'une amine-alcool ou d'un amino-diol.

[000543] Dans un mode de réalisation, E est issu d'un acide aminé, de l'éthylène diamine ou de l'éthanolamine.

[000544] Dans un mode de réalisation, -[AA] est issu de la phénylalanine, de la phénylglycine, de la tyrosine ou du tryptophane.

[000545] Dans un mode de réalisation, -[AA] est issu de la phénylalanine. [000546] Dans un mode de réalisation, u = 1 ou 2.

[000547] Dans un mode de réalisation, L est -H ; s = 1 ; t = 1 ; u = 1 ou 2 ; E est issu d'un acide aminé, d'une aminé diacide, d'une diamine, d'une triamine, d'une amine-alcool ou un amino-diol ; -[AA] est issu de la phénylalanine, de la phénylglycine, de la ty rosi ne ou du tryptophane.

[000548] Dans un mode de réalisation, L est -H ; s = 1 ; t = 1 ; u = 1 ; E est issu d'un acide aminé, d'une aminé diacide, d'une diamine, d'une triamine, d'une amine- alcool ou un amino-diol ; -[AA] est issu de la phénylalanine, de la phénylglycine, de la tyrosine ou du tryptophane.

[000549] Dans un mode de réalisation, L est -H ; s = 1 ; t = 1 ; u = 1 ou 2 ; E est issu d'un acide aminé, de l'éthylène diamine ou de l'éthanolamine ; -[AA] est issu de la phénylalanine, de la phénylglycine, de la tyrosine ou du tryptophane.

[000550] Dans un mode de réalisation, L est -H ; s = 1 ; t = 1 ; u = 1 ou 2 ; E est issu d'un acide aminé, d'une aminé diacide, d'une diamine, d'une triamine, d'une amine-alcool ou un amino-diol ; -[AA] est issu de la phénylalanine.

[000551] Selon un mode de réalisation, le composé anionique substitué répond à la Formule I dans laquelle Z est un radical -CH2- et X est un radical -CH2- et est choisi parmi les composés de Formule II :

Formule II dans laquelle

R2, R3, R ₄ , R5, Rô, A et p ont les valeurs données dans la définition de la formule I, et

3) f est une fonction éther ;

4) Ri est un radical -N(L) _S [AA], avec -[AA] étant un radical issu d'un acide aminé aromatique ou d'un dérivé d'acide aminé aromatique; s = 1 ou 2 ; et

a. si s 1, L est choisi dans le groupe constitué par -H , -H et/ou -[A]- COOH, -H et un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone, et

b. si s = 2, L est choisi parmi -H, -H et/ou -[AJ-COOH, un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone.

[000552] Selon un mode de réalisation, le composé anionique substitué répond à la Formule I dans laquelle Z est un radical -CH2- et X est un radical -CH2- et est choisi parmi les composés de Formule II % ¾ ^R 2 Formule II

dans laquelle

R2, R3, R4, R5, RÔ, A et p ont les valeurs données dans la définition de la formule I, et

3) f est une fonction éther, et

4) Ri est un radical -N(L) _S [AA], avec -[AA] étant un radical issu d'un acide aminé aromatique ou d'un dérivé d'acide aminé aromatique; s = 1 ou 2 ; et

a. si s = 1, L est choisi dans le groupe constitué par -H, -H et/ou -[A]- COOH, et

b. si s = 2, L est choisi parmi H ou -H et/ou -[A]-COOH.

[000553] Selon un mode de réalisation, le composé anionique substitué répond à la Formule I dans laquelle Z est un radical -CH2- et X est un radical -C=0- et est choisi parmi les composés de Formule III :

Formule III dans laquelle

R2, R3, R ₄ , Rs, Re, A et p ont les valeurs données dans la définition de la formule I, et

3) f est une fonction éther, et

4) Ri est un radical -N(L)s[AA], avec -[AA] est un radical issu d'un acide aminé aromatique ou d'un dérivé d'acide aminé aromatique ; s = 1 ; et L est choisi dans le groupe constitué par -H et un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone.

[000554] Selon un mode de réalisation, le composé anionique substitué répond à la Formule I dans laquelle Z est un radical -CH2- et X est un radical -CH2- et est choisi parmi les composés de Formule II :

Formule II dans laquelle

R2, R3, R ₄ , R5, R6, A et p ont les valeurs données dans la définition de la formule I, et

3) f est une fonction éther, et

4) Ri est un radical -N(L) _s ([E]-(o-[AA] ) _u )t, avec -N((L) _s -([E]-(o-) _u ) est issu d'un acide aminé, d'une amine-diacide, d'une diamine, d'une triamine, d'une amine- alcool ou d'un amino-diol ; o est une fonction amide, carbamate ou carbamide ; -[AA] est un radical issu d'un acide aminé aromatique ou d'un dérivé d'acide aminé aromatique ; u = l ou 2 ; t = l ; s = l ou 2 ; et

L est choisi dans le groupe constitué par -H, -H et/ou -[A]-COOH et un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone.

[000555] Selon un mode de réalisation, le composé anionique substitué répond à la Formule I dans laquelle Z est un radical -CH2- et X est un radical -CH2- et est choisi parmi les composés de Formule II :

Formule II dans laquelle

R2, R3, R4, R5, R6, A et p ont les valeurs données dans la définition de la formule I, et

3) est une fonction éther, et

4) Ri est un radical -N(L) _s ([E]-(o-[AA]) _u ) _t , avec -N((L) _s -([E]-(o-) _u ) est issu d'un acide aminé, d'une amine-diacide, d'une diamine, d'une triamine, d'une amine- alcool ou d'un amino-diol ; 0 est une fonction amide, carbamate ou carbamide ; -[AA] est un radical issu d'un acide aminé aromatique ou d'un dérivé d'acide aminé aromatique ; u = 1 ou 2 ; t = 1 ; s = 1 ou 2 ; et

L est choisi dans le groupe constitué par -H, et -H et/ou -[A]-COOH.

[000556] Selon un mode de réalisation, le composé anionique substitué répond à la Formule I dans laquelle Z est un radical -CH2- et X est un radical -C(O)- et est choisi parmi les composés de Formule III :

Formule III dans laquelle R2, R3, R4, R5, RÔ, A et p ont les valeurs données dans la définition de la formule I, et

5) est une fonction éther, et

6) Ri est un radical -N(L)s([E]-(o-[AA] ) _u )t, avec -N((L) _s -([E]-(o-) _u ) est issu d'un acide aminé, d'une amine-diacide, d'une diamine, d'une triamine, d'une amine- alcool ou d'un amino-diol ; o est une fonction amide, carbamate ou carbamide ;

-[AA] est un radical issu d'un acide aminé aromatique ou d'un dérivé d'acide aminé aromatique ; u = 1 ou 2 ; t = 1 ; s = 1 ; et L est choisi parmi -H et un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone.

[000557] Selon un mode de réalisation, le composé anionique substitué répond à la Formule I dans laquelle Z est un radical -CH2- et X est un radical -C=0- et est choisi parmi les composés de Formule III :

Formule III dans laquelle

R2, R3, R ₄ , R5, RÔ, A et p ont les valeurs données dans la définition de la formule I, et

3) f est une fonction éther, et

4) Ri est un radical -N(L) _s ([E]-(o-[AA]) _u )t, avec -N(( L) _s -([E]-(o-)u) est issu d'un acide aminé, d'une amine-diacide, d'une diamine, d'une triamine, d'une amine- alcool ou d'un amino-diol ; 0 est une fonction amide, carbamate ou carbamide ; -[AA] est un radical issu d'un acide aminé aromatique ou d'un dérivé d'acide aminé aromatique ; u = 1 ou 2 ; t = 1 ; s = 1 ; et L est -H.

[000558] Tout particulièrement, dans les sept modes de réalisation précédents le radical -[AA] est issu d'un acide aminé aromatique, et plus particulièrement de la phénylalanine.

[000559] Selon un mode de réalisation, le composé anionique substitué est choisi parmi les composés de Formule I dans laquelle Z est un radical -CH2- et R ₄ est issu d'un squelette saccharidique formé d'un nombre discret n- 1 d'unités saccharidiques glucose et est représenté par la formule IV :

Formule IV dans laquelle

Ri, R2, R3, Rs, RÔ, X, A et n ont les valeurs données dans la définition de la formule I, et

R est -OH ou -f-[A]-COOH.

[000560] Selon un mode de réalisation, le composé anionique substitué répond à la Formule IV :

Formule IV dans laquelle

- R2, R3, Rs, R6, A et n ont les valeurs données dans la définition de la formule

I, et

- R est -OH ou -f-[A]-COOH, et

X est un radical -CH2- - f est une fonction éther ;

Ri est un radical -N(L)s[AA], avec -[AA] étant un radical issu d'un acide aminé aromatique ou d'un dérivé d'acide aminé aromatique; s = 1 ou 2 ; et c. si s = 1 , L est choisi dans le groupe constitué par -H, -H et/ou -[A]- COOH, -H et un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone, et

d. si s = 2, L est choisi parmi H, -H et/ou -[A]-COOH, un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone.

[000561] Selon un mode de réalisation, les composés anioniques substitués répondent à la Formule I

Formule IV dans laquelle

R ₂ , R3, Rs, Rô, A et n ont les valeurs données dans la définition de la formule I, et

- R est -OH ou -f-[A]-COOH, et

X est un radical -CH2-,

f est une fonction éther, et - Ri est un radical -N(L) _S [AA], avec -[AA] étant un radical issu d'un acide aminé aromatique ou d'un dérivé d'acide aminé aromatique; s = 1 ou 2 ; et c. si s = 1, L est choisi dans le groupe constitué par -H, -H et/ou -[A]-

COOH, et

d. si s = 2, L est choisi parmi H ou -H et/ou -[A]-COOH .

[000562] Selon un mode de réalisation, le composé anionique substitué répond à la Formule IV :

Formule IV dans laquelle

- R2, R3, Rs, Re, A et n ont les valeurs données dans la définition de la formule I, et

- R est -OH ou -f-[A]-COOH, et

X est un radical -C=0- - f est une fonction éther, et

- Ri est un radical -N(L) _S [AA], avec -[AA] est un radical issu d'un acide aminé aromatique ou d'un dérivé d'acide aminé aromatique ; s = 1 ; et L est choisi dans le groupe constitué par -H et un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone.

[000563] Selon un mode de réalisation, le composé anionique substitué répond à la Formule IV :

Formule IV dans laquelle

- R2, R3, Rs, et Rôont les valeurs données dans la définition de la formule I, et

- R est -OH ou -f-[A]-COOH, et

n = 3,

-[A]- est un radical -CH2-,

X est un radical -CH2-,

- f est une fonction éther, et

- Ri est un radical -N(L) _S [AA], avec -[AA] est un radical issu de la phénylalanine ; s = 1 ou 2 ; et L est -H . [000564] Selon un mode de réalisation, le composé anionique substitué répond à la Formule IV :

Formule IV dans laquelle

- R ₂ , R3, Rs, Rô, A et n ont les valeurs données dans la définition de la formule

I, et

- R est -OH ou -f-[A]-COOH, et

X est un radical -CH2-

- f est une fonction éther, et

- Ri est un radical -N(L) _s ([E]-(o-[AA] ) _u )t, avec -N((L) _s -([E]-(o-) _u ) est issu d'un acide aminé, d'une amine-diacide, d'une diamine, d'une triamine, d'une amine-alcool ou d'un amino-diol ; o est une fonction amide, carbamate ou carbamide ; -[AA] est un radical issu d'un acide aminé aromatique ou d'un dérivé d'acide aminé aromatique ; u = l ou 2 ; t = l ; s = l ou 2 ; et

L est choisi dans le groupe constitué par -H, -H et/ou -[A]-COOH et un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone.

[000565] Selon un mode de réalisation, le composé anionique substitué répond à la Formule IV :

Formule IV dans laquelle

R2, R3, Rs, RÔ, A et n ont les valeurs données dans la définition de la formule I, et

- R est -OH ou - -[A]-COOH, et

- X est un radical -CH2-

- f est une fonction éther, et

- Ri est un radical -N(L) _s ( [E] -(o- [AA] ) _u )t, avec -N((L) _s -([E]-(o-)u) est issu d'un acide aminé, d'une amine-diacide, d'une diamine, d'une triamine, d'une amine-alcool ou d'un amino-diol ; o est une fonction amide, carbamate ou carbamide ; -[AA] est un radical issu d'un acide aminé aromatique ou d'u dérivé d'acide aminé aromatique ; u = l ou 2 ; t = l ; s = l ou 2 ; et

L est choisi dans le groupe constitué par -H, et -H et/ou -[A]-COOH.

[000566] Selon un mode de réalisation, le composé anionique substitué répond à I Formule IV :

Formule IV dans laquelle

R2, R3, Rs, R6, A et n ont les valeurs données dans la définition de la formule I, et

- R est -OH ou -f-[A]-COOH, et

- X est un radical -C=0- f est une fonction éther, et

- Ri est un radical -N(L) _s ([E]-(o-[AA] ) _u )t, avec -N((L) _s -([E]-(o-) _u ) est issu d'un acide aminé, d'une amine-diacide, d'une diamine, d'une triamine, d'une amine-alcool ou d'un amino-diol ; o est une fonction amide, carbamate ou carbamide ; -[AA] est un radical issu d'un acide aminé aromatique ou d'un dérivé d'acide aminé aromatique ; u = 1 ou 2 ; t = 1 ; s = 1 ; et L est choisi parmi -H et un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 4 atomes de carbone.

[000567] Selon un mode de réalisation, le composé anionique substitué répond à la Formule IV :

Formule IV dans laquelle

R2, R3, Rs, R6, A et n ont les valeurs données dans la définition de la formule I, et

- R est -OH ou -f-[A]-COOH, et

X est un radical -C=0- - f est une fonction éther, et

- Ri est un radical -N(L) _s ([E]-(o-[AA])„) _t , avec -N((L) _s -([E]-(o-) _u ) est issu d'un acide aminé, d'une amine-diacide, d'une diamine, d'une triamine, d'une amine-alcool ou d'un amino-diol ; o est une fonction amide, carbamate ou carbamide ; -[AA] est un radical issu d'un acide aminé aromatique ou d'un dérivé d'acide aminé aromatique ; u = l ou 2 ; t = l ; s = l ; et L est -H. Tout particulièrement, dans les huit modes de réalisation précédents le radical -[AA] est issu d'un acide aminé aromatique, et plus particulièrement de la phénylalanine.

[000568] Les composés anioniques substitués comportent au moins un radical -f-[A]- COOH. Le ou les radicaux -f-[A]-COOH peuvent être introduits sur les unités saccharidiques par greffage statistique.

[000569] Dans un mode de réalisation, les composés anioniques substitués sont choisis parmi les composés anioniques substitués dans lesquels les radicaux -f-[A]- COOH sont obtenus par greffage à des positions précises sur les unités saccharidiques par un procédé mettant en œuvre des étapes de protection/déprotection des groupements alcool ou acide carboxylique naturellement portés par les unités saccharidiques. Cette stratégie conduit à un greffage sélectif, notamment régiosélectif, des substituants sur les unités saccharidiques. Les groupements protecteurs incluent sans limitation ceux décrits dans l'ouvrage (Wuts, PGM et al., Greene's Protective Groups in Organic Synthesis 2007).

[000570] Le précurseur saccharidique du composé anionique substitué peut être obtenu par dégradation d'un polysaccharide de haut poids moléculaire. Les voies de dégradation incluent sans limitation la dégradation chimique et/ou la dégradation enzymatique.

[000571] Le précurseur saccharidique du composé anionique substitué peut également être obtenu par formation de liaisons glycosidiques entre des molécules monosacchariques ou oligosaccharidiques en utilisant une stratégie de couplage chimique ou enzymatique, le saccharide alors obtenu comporte une extrémité réductrice. Les stratégies de couplage comptent celles décrites dans la publication (Smooth, JT et al., Advances in Carbohydrate Chemistry and Biochemistry 2009, 62, 162-236) et dans l'ouvrage (Lindhorst, TK, Essentiels of Carbohydrate Chemistry and Biochemistry 2007, 157-209). Les réactions de couplage peuvent être effectuées en solution ou sur support solide. Les molécules saccharidiques avant couplage peuvent porter des substituants d'intérêt et/ou être fonctionnalisées une fois couplées entre elles de façon statistique ou régiosélective. [000572] Ainsi, à titre d'exemples, les composés anioniques substitués peuvent être obtenus selon l'un des procédés suivants :

^■ le greffage de radicaux -[A]-COOH par greffage statistique sur le squelette saccharidique couplé à l'unité saccharidique ouverte portant un radical -[AA]

^■ une ou plusieurs étapes de glycosylation entre des molécules mono- saccharidiques ou oligosaccharidiques portant des radicaux f-[A]-COOH et le squelette saccharidique couplé à l'unité saccharidique ouverte portant un radical -[AA]

^■ une ou plusieurs étapes de glycosylation entre une ou des molécules mono- saccharidiques ou oligosaccharidiques portant des radicaux f-[A]-COOH et une ou des molécules mono-saccharidiques ou oligosaccharidiques et le squelette saccharidique couplé à l'unité saccharidique ouverte portant un radical -[AA]

^■ une ou plusieurs étapes d'introduction de groupements protecteurs sur des alcools ou acides naturellement portés par le squelette saccharidique couplé à l'unité saccharidique ouverte portant un radical -[AA] suivie d'une ou plusieurs réactions de greffage pour introduire des radicaux f-[A]-COOH et enfin une étape d'élimination des groupements protecteurs

^■ une ou plusieurs étapes de glycosylation entre une ou des molécules mono- saccharidiques ou oligosaccharidiques portant des groupements protecteurs sur des alcools ou acides naturellement portés par les unités saccharidiques, un de ces saccharides portant un radical -[AA] , une ou des étapes de greffage pour introduire des radicaux f-[A]-COOH sur le squelette obtenu puis une étape d'élimination des groupements protecteurs,

^■ une ou plusieurs étapes de glycosylation entre une ou des molécules mono- saccharidiques ou oligosaccharidiques portant des groupements protecteurs sur des alcools ou acides naturellement portés par les unités saccharidiques, et une ou des molécules mono-saccharidiques ou oligosaccharidiques, une de ces molécules portant un radical -[AA], une ou des étapes de greffage pour introduire des f-[A]-COOH puis une étape d'élimination des groupements protecteurs,

^■ une étape de protection du bout de chaîne réducteur présent sur le précurseur du composé anionique substitué, une étape d'introduction de radicaux f-[A]-COOH sur les unités saccharidiques, une étape de déprotection du bout de chaîne réducteur puis une étape d'introduction d'un radical -N(L) _s ([E]-(o-[AA] ) _u )t ou -N(L) _S [AA] par réaction avec le bout de chaîne réducteur. [000573] Les composés anioniques substitués, isolés ou en mélange, peuvent être séparés et/ou purifiés de différentes manières, notamment après leur obtention par les procédés ci-dessus décrits.

[000574] On peut en particulier citer les méthodes chromatographiques, notamment celles dites « préparatives » ou « préparatrices » comme :

■ les chromatographies éclairs ou « flash chromatography », notamment sur silice, et

■ les chromatographies du type HPLC (high performance liquid chromatography) (Chromatographie liquide haute performance), en particulier RP-HPLC ou « reverse phase HPLC » (Chromatographie liquide haute performance en phase inverse).

[000575] Des méthodes de précipitation sélective peuvent également être utilisées.

Partie  : Synthèse des composés anioniques substitués

Exemple Ai : composé anionique substitué AI

[000576] Composé 1 : produit obtenu par réaction d'amination réductrice entre le bout de chaîne réducteur du maltotriose et l'ester méthylique de la L-phénylalanine suivant la procédure modifiée de Sisu, E. et al, Central European Journal of Chemistry 2008, 7 (1), 66-73.

[000577] A une solution d'ester méthylique de la L-phénylalanine (11,13 g, 62,18 mmol) dans le DMSO (210 mL) à 50 °C sont ajoutés successivement de l'acide paratoluènesulfonique monohydraté (11,83 g, 62,18 mmol), du maltotriose (Carbosynth) (10,45 g, 20,72 mmol), de l'acide acétique (2,1 mL) et du cyanoborohydrure de sodium (13,02 g, 207,18 mmol). Après agitation à 50 °C pendant 4 jours, de l'acétone est ajoutée au milieu réactionnel et le précipité formé est isolé par filtration. Le précipité obtenu est solubilisé dans un volume minimum d'eau et est à nouveau précipité par ajout d'acétone. Après filtration, le mélange est isolé puis séché sous vide.

[000578] Rendement : 11,78 g (85%)

[000579] Le produit est analysé par R N ^J H en conditions d'hydrolyse de l'ester méthylique.

RMN ^J H (D ₂ 0 + NaOD + DCI , ppm) : 7,25-7,12 (m, 5H) ; 5,18 (d, 1H, J = 3,8 Hz) ; 4,89 (d, 1H, J = 3,8 Hz) ; 4,24 (dd, 1H, J = 6,6 et 6,6 Hz) ; 3,96 (m, 1H) ; 3,80-3,72 (m, 3H) ; 3,67-3,36 (m, 13H) ; 3,24-3,08 (m, 5H).

[000580] Seul le produit avec l'ester méthylique hydrolysé est observé en analyse LC/MS.

LC/MS (ESI-ES+) : 654,5 (calculé ([M+H] ⁺ ) : 654,3). Composé anionique substitué Al

[000581] Le composé 1 (11,7 g) est solubilisé dans 20 mL d'eau et la solution est chauffée à 55 °C. A cette solution est ajouté 3 mL de NaOH 10N et le mélange est agité à 55 °C pendant 10 minutes puis le pH de la solution est ajusté à 7 par ajout de 2,2 mL d'une solution HCI (37 %). Le mélange réactionnel est ensuite porté à 65 °C puis du chloroacétate de sodium (36,7 g, 315,1 mmol) est ajouté. Après 60 minutes d'agitation, 32 mL de NaOH 10 N sont ajoutés au goutte à goutte. 3h après le début de l'ajout de NaOH, du chloroacétate de sodium (18,4 g, 157,5 mmol) est ajouté. Après 20 minutes d'agitation, 16 mL supplémentaires de NaOH 10N sont ajoutés au goutte à goutte. Après 60 minutes d'agitation, le milieu réactionnel est dilué avec de l'eau, neutralisé par ajout d'acide acétique, puis purifié par ultrafiltration sur membrane PES de 1 kDa contre NaCI (0,9%) et de l'eau.

[000582] La concentration en composé anionique substitué Al de la solution finale est déterminée par extrait sec.

[000583] D'après l'extrait sec ; [Composé anionique substitué Al] = 11,9 mg/g

[000584] Le degré de substitution en méthylcarboxylate de sodium par unité saccharidique est déterminé par intégration relative du signal du carbonyl du motif méthyl carboxylate avec les signaux des carbones du cycle aromatique de la phénylalanine par RMN ^t3 C. Le degré de substitution en méthylcarboxylate de sodium par unité saccharidique est de 1,9.

Exemple A2 : composé anionique substitué A2

Composé anionique substitué A2

[000585] Le composé 1 (9 g) est solubilisé dans 12 mL d'eau et la solution est chauffée à 65 °C. Du chl oroacétate de sodium (18,2 g, 156 mmol) est ajouté. Après solubilisation complète du chloroacétate, 16 mL de NaOH 10N sont ajoutés au goutte à goutte. 3h après le début de l'ajout de NaOH, le milieu réactionnel est dilué avec de l'eau, neutralisé par ajout d'acide acétique, puis purifié par ultrafiltration sur membrane PES de 1 kDa contre NaCI (0,9%) et de l'eau.

[000586] La concentration en composé anionique substitué A2 de la solution finale est déterminée par extrait sec.

[000587] D'après l'extrait sec : [Composé anionique substitué A2] = 13,1 mg/g Le degré de substitution en méthylcarboxylate de sodium par unité saccharidique est déterminé par intégration relative du signal du carbonyl du motif méthyl carboxylate avec les signaux des carbones du cycle aromatique de la phénylalanine par RMN ¹³ C. Le degré de substitution en méthylcarboxylate de sodium par unité saccharidique est de 1,56.

Partie B : Préparation des solutions Bl. Solution d'Insuline analogue rapide Novolog® à ÎOO UI/mL

[000588] Cette solution est une solution commerciale d'insuline aspart de Novo Nordisk vendue sous le nom de Novolog ^® . Ce produit est une insuline analogue rapide.

B2. Solution d'insuline analogue rapide Humalog® à ÎOO UI/mL

[000589] Cette solution est une solution commerciale d'insuline lispro de Eli Lilly vendue sous le nom de Humalog ^® . Ce produit est une insuline analogue rapide. B3. Solution d'insuline humaine Humulln® R à 100 UI/ L

[000590] Cette solution est une solution commerciale d'insuline humaine de Eli Lilly vendue sous le nom d'Humulin® R. Ce produit est une formulation d'insuline humaine. B4. Solution d'insuline analogue rapide Apidra ^® à 100 UI/mL

[000591] Cette solution est une solution commerciale d'insuline glulisine de Sanofi vendue sous le nom d'Apidra®. Ce produit est une insuline analogue rapide.

BS. Préparation d'une solution de citrate de sodium à 1,188 M

[000592] La solution de citrate de sodium est obtenue en solubilisant 9,0811 g de citrate de sodium (30,9 mmol) dans 25 mL d'eau dans une fiole jaugée. Le pH est ajusté à 7,4 par ajout de 1 mL d'HCI 1M. La solution est filtrée sur 0,22 μιτι.

B6. Préparation d'une solution d'insuline lispro à 100 UI/mL en présence du composé anionique substitué Al

[000593] Pour un volume final de 100 mL de formulation, avec un ratio massique [composé anionique substitué Al]/[insuline lispro] de 2,0, les différents réactifs sont additionnés dans les quantités précisées ci-dessous et dans l'ordre suivant Composé lyophilisé (composé anionique substitué Al) 730 mg

Solution commerciale d'Humalog® 100 mL

[000594] Le pH final est ajusté à 7,4 ± 0,4.

[000595] La solution limpide est filtrée sur une membrane 0,22pm et stockée à 4°C. B7. Préparation d'une solution d'insuline lispro à 100 UI/mL en présence du composé anionique substitué Al et de citrate

[000596] Pour un volume final de 100 mL de formulation, avec un ratio massique [composé anionique substitué Al]/[insuline lispro] de 2,0 et une concentration de 9,3 mM de citrate, les différents réactifs sont additionnés dans les précisées ci-dessous et dans l'ordre suivant

Composé lyophilisé (composé anionique substitué Al) 730 mg

Solution commerciale d'Humalog ^® 100 mL

Solution de citrate de sodium à 1,188 M 783 pL

[000597] Le pH final est ajusté à 7,4 ± 0,4.

[000598] La solution limpide est filtrée sur une membrane 0,22 pm et stockée à 4°C. BB. Préparation d'une solution d'insuline humaine à 100 UI/mL en présence du composé anionique substitué Al et de citrate

[000599] Pour un volume final de 100 ml_ de formulation, avec un ratio massique [composé anionique substitué Al]/[insuline humaine] de 2,0 et une concentration de 9,3 mM de citrate, les différents réactifs sont additionnés dans les quantités précisées ci-dessous et dans l'ordre suivant

Composé lyophilisé (composé anionique substitué Al) 730 mg

Solution commerciale d'Humulin® R 100 mi-

Solution de citrate de sodium à 1,188 M 783 μΙ_

[000600] Le pH final est ajusté à 7,4 ± 0,4.

[000601] La solution limpide est filtrée sur une membrane 0,22 μητι et stockée à 4°C.

B9. Préparation d'une solution d'insuline aspart à 100 UI/mL en présence du composé anionique substitué Al et de citrate

[000602] Pour un volume final de 100 mL de formulation, avec un ratio massique [composé anionique substitué Al]/[insuline aspart] de 2,0 et une concentration de 9,3 mM de citrate, les différents réactifs sont additionnés dans les quantités précisées ci- dessous et dans l'ordre suivant

Composé lyophilisé (composé anionique substitué Al) 730 mg

Solution commerciale de Novolog® 100 mL

Solution de citrate de sodium à 1,188 M 783 pL

[000603] Le pH final est ajusté à 7,4 ± 0,4.

[000604] La solution limpide est filtrée sur une membrane 0,22 μητι et stockée à 4°C. BÎO. Préparation d'une solution d'insuline glulisine à ÎOO UI/mL en présence du composé anionique substitué Al et de citrate

[000605] Pour un volume final de 100 mL de formulation, avec un ratio massique [composé anionique substitué Al]/[insuline glulisine] de 2,0 et une concentration de 9,3 mM de citrate, les différents réactifs sont additionnés dans les quantités précisées ci-dessous et dans l'ordre suivant

Composé lyophilisé (composé anionique substitué Al) 730 mg

Solution commerciale d'Apidra ^® 100 mL

Solution de citrate de sodium à 1,188M 783 pL

[000606] Le pH final est ajusté à 7,4 ± 0,4.

[000607] La solution limpide est filtrée sur une membrane 0,22 pm et stockée à 4°C Exemple Bii : préparation d'une solution de composé anionique substitué Al à 315 mg/mL

[000608] Le composé anionique substitué Al obtenu dans l'exemple Al est lyophilisé. Une quantité de lyophilisât est solubilisée dans l'eau pour injection de sorte à obtenir une solution à 360 mg/mL à pH 7,5 de composé anionique substitué Al.

Exemple B12 : Préparation d'une solution d'insuline lispro à 100 UI/mL en présence du composé anionique substitué A2

[000609] Pour un volume final de 100 mL de formulation, avec un ratio massique [composé anionique substitué A2]/[insuline lispro] de 2,0, les différents réactifs sont additionnés dans les quantités précisées ci-dessous et dans l'ordre suivant

Composé lyophilisé (composé anionique substitué A2) 730 mg

Solution commerciale d'Humalog® 100 mL

[000610] Le pH final est ajusté à 7,4 ± 0,4.

[000611] La solution limpide est filtrée sur une membrane 0,22 μιτι et stockée à 4°C.

B13. Préparation d'une solution d'insuline lispro à 100 UI/mL en présence du composé anionique substitué A2 et de citrate

[000612] Pour un volume final de 100 mL de formulation, avec un ratio massique [composé anionique substitué A2]/[insuline lispro] de 2,0 et une concentration de 9,3 mM de citrate, les différents réactifs sont additionnés dans les précisées ci-dessous et dans l'ordre suivant

Composé lyophilisé (composé anionique substitué A2) 730 mg

Solution commerciale d'Humalog® 100 mL

Solution de citrate de sodium à 1,188 M 783 pL

[000613] Le pH final est ajusté à 7,4 ± 0,4.

[000614] La solution limpide est filtrée sur une membrane 0,22 pm et stockée à 4°C.

B14. Préparation d'une solution d'insuline humaine à 100 UI/mL en présence du composé anionique substitué A2 et de citrate

[000615] Pour un volume final de 100 mL de formulation, avec un ratio massique [composé anionique substitué A2]/[insuline humaine] de 2,0 et une concentration de 9,3 mM de citrate, les différents réactifs sont additionnés dans les quantités précisées ci-dessous et dans l'ordre suivant

Composé lyophilisé (composé anionique substitué A2) 730 mg

Solution commerciale d'Humulin® 100 mL

Solution de citrate de sodium à 1,188 M 783 pL

[000616] Le pH final est ajusté à 7,4 ± 0,4. [000617] La solution limpide est filtrée sur une membrane 0,22 μηι et stockée à 4°C.

BIS. Préparation d'une solution d'insuline aspart à 100 UI/mL en présence du composé anionique substitué A2 et de citrate

[000618] Pour un volume final de 100 ml_ de formulation, avec un ratio massique [composé anionique substitué A2]/[insuline aspart] de 2,0 et une concentration de 9,3 ITIM de citrate, les différents réactifs sont additionnés dans les quantités précisées ci- dessous et dans l'ordre suivant

Composé lyophilisé (composé anionique substitué A2) 730 mg

Solution commerciale de Novolog® 100 mL

Solution de citrate de sodium à 1, 188 M 783 μ!_

[000619] Le pH final est ajusté à 7,4 ± 0,4.

[000620] La solution limpide est filtrée sur une membrane 0,22 pm et stockée à 4°C. B16. Préparation d'une solution d'insuline glulisine à 100 UI/mL en présence du composé anionique substitué A2 et de citrate

[000621] Pour un volume final de 100 mL de formulation, avec un ratio massique [composé anionique substitué A2]/[insuline glulisine] de 2,0 et une concentration de 9,3 mM de citrate, les différents réactifs sont additionnés dans les quantités précisées ci-dessous et dans l'ordre suivant

Composé lyophilisé (composé anionique substitué A2) 730 mg

Solution commerciale d'Apidra® 100 mL

Solution de citrate de sodium à 1, 188M 783 pL

[000622] Le pH final est ajusté à 7,4 ± 0,4.

[000623] La solution limpide est filtrée sur une membrane 0,22 pm et stockée à 4°C.

Partie C: Test de solubilisation de l'insuline humaine à son point isoélectrique

[000624] L'insuline humaine a un point isoélectrique de 5,3. A un pH de 5,3, l'insuline humaine précipite à une concentration supérieure ou égale à 10 Ul/ml (0,36 mg/mL) . Un test démontrant une interaction entre l'insuline humaine et les composés anioniques substitués au point isoélectrique a été effectué. Si une interaction existe entre l'insuline humaine et le composé anionique substitué, il est possible alors de solubiliser l'insuline humaine à son point isoélectrique.

[000625] Une solution d'insuline humaine à 500 UI/mL est préparée. Un mélange entre une solution d'insuline humaine et la solution de composé anionique substitué Al préparée à l'exemple Bl l est effectué pour mener à une solution contenant 100 UI/mL d'insuline humaine et la concentration désirée en composé anionique Al . Le pH est ajusté à pH 5,3 par ajout d'acide chlorhydrique ou d'hydroxyde de sodium en fonction du pH atteint à la suite du mélange entre le composé anionique substitué Al et la solution d'insuline humaine.

[000626] L'aspect de la solution est documenté. Si la solution est turbide, le composé anionique substitué Al à la concentration testée ne permet pas la solubilisation de l'insuline humaine à son point isoélectrique. Si la solution est limpide, le composé anionique substitué Al permet la solubilisation de l'insuline humaine à la concentration testée. De cette façon, une estimation de la concentration en composé anionique substitué Al nécessaire pour solubiliser l'insuline humaine à son point isoélectrique peut être déterminée. Plus cette concentration est basse plus l'affinité du composé anionique substitué Al pour l'insuline humaine est importante. Les résultats obtenus sont présentés dans le Tableau 1.

Tableau 1

[000627] Les résultats montrent que le composé anionique substitué Al permet la solubilisation de l'insuline humaine à son point isoélectrique à une concentration de 50 mg/mL signe de la formation d'un complexe entre l'insuline humaine à son point isoélectrique et le composé anionique substitué Al.

D Pharmacodynamie et pharmacocinétique Dl : Protocole de mesure de la pharmacodynamie et pharmacocinétique des solutions d'insuline

[000628] 12 porcs domestiques d'environ 50 kg, préalablement cathétérisés au niveau de la veine jugulaire, sont mis à jeun 2,5 heures avant le début de l'expérience. Dans l'heure précédant l'injection d'insuline, 3 prélèvements sanguins sont réalisés afin de déterminer le niveau basai de glucose et d'insuline.

[000629] L'injection d'insuline à la dose de 0,09 Ul/kg pour l'insuline lispro est réalisée en sous-cutané au niveau du cou, sous l'oreille de l'animal à l'aide du stylo à insuline Novopen équipé d'une aiguille 31 G. [000630] Des prélèvements sanguins sont ensuite réalisés toutes les 4 minutes pendant 20 minutes puis toutes les 10 minutes jusqu'à 3 heures. Après chaque prélèvement, le cathéter est rincé avec une solution diluée d'héparine.

[000631] Une goutte de sang est prélevée pour déterminer la glycémie au moyen d'un glucomètre.

[000632] Les courbes de pharmacodynamie du glucose exprimées en delta du niveau basai de glucose (Delta Glucose) sont ensuite tracées et le temps nécessaire pour atteindre le taux minimum de glucose dans le sang pour chaque porc est déterminé et reporté comme Tmin glucose. La moyenne des Tmin glucose est ensuite calculée.

[000633] Le sang restant est collecté dans un tube sec et est centrifugé pour isoler le sérum. Les taux d'insuline dans les échantillons de sérum sont mesurés par la méthode immuno-enzymatique ELISA en sandwich pour chaque porc.

[000634] Les courbes de pharmacocinétique exprimées en delta du niveau basai de glucose (Delta Glucose) sont ensuite tracées. Le temps nécessaire pour atteindre la concentration maximale d'insuline dans le sérum pour chaque porc est déterminé et reporté comme Tmax insuline. La moyenne des Tmax insuline est ensuite calculée.

D2 : Résultats de pharmacodynamie et de pharmacocinétique des solutions d'insulines des exemples B2 et B7

[000635] Les résultats de pharmacodynamie obtenus avec les formulations décrites dans les exemples B2 et B7 sont présentés sur la figure 1. Selon l'invention, l'analyse de ces courbes montre que la formulation de l'exemple B7 comprenant le composé anionique substitué Al et le citrate à 9,3 mM comme excipients (courbe tracée avec les carrés correspondant à l'exemple B7, Tmin glucose = 31 ± 6 min) permet d'obtenir une action plus rapide que celle de la formulation commerciale Humalog ^® (insuline lispro) de l'exemple B2 (courbe tracée avec les triangles correspondant à l'exemple B2, Tmin glucose = 43 ± 8 min).

[000636] Les résultats de pharmacocinétique obtenus avec les formulations décrites dans les exemples B2 et B7 sont présentés sur la figure 2. Selon l'invention, l'analyse de ces courbes montre que la formulation de l'exemple B7 comprenant le composé anionique substitué Al et le citrate à 9,3 mM comme excipients (courbe tracée avec les carrés correspondant à l'exemple B7, Tmax insuline = 8 ± 4 min) induit une absorption plus rapide de l'insuline lispro que la formulation commerciale Humalog® (insuline lispro) de l'exemple B2 (courbe tracée avec les triangles correspondant à l'exemple B2, Tmax insuline = 23 ± 9 min).