«В» И «С»

Область изобретения

[0001] Настоящее изобретение относится к субстанциям или частицам, состоящим из полоксамера, жирной кислоты и/или фосфолипидов, представляющим собой систему доставки, которая увеличивает транспорт любых биологически активных генно - инженерных (рекомбинантных) препаратов (интерферонов, интерлейкинов, цитокинов, колониистимулирующих факторов, факторов роста, гормонов) и пептидов. Настоящее изобретение относится к субстанциям, содержащим по мимо специальной системы доставки, интерферон, интерлейкин, колониистимулирующий фактор (Г-КСФ, М-КСФ, ГМ-КСФ) и их фармацевтическим композициям для парентерального и перорального применения с улучшенной биодоступностью для лечения заболеваний человека, в том числе для лечения хронических вирусных гепатитов В и С.

Технический уровень

[0002] Человеческие интерфероны, например, интерферон-альфа, интерферон-бета, и интерферон-гамма, а так же интерлейкины, например, интерлейкин 1 альфа, интерлейкин 1 бета широко используются как терапевтические агенты для лечения заболеваний человека, в том числе для лечения хронических вирусных гепатитов В и С. Единственным практическим способом доставки интерферонов и интерлейкинов в системный кровоток является парентеральный путь введения. Однако парентеральное введение обеспечивает быстрое начало действия с быстрым снижением системного уровня интерферона и интерлейкина. Вместе с тем, часто желательно поддерживать системные уровни интерферона в терапевтически эффективных концентраций так долго, как того требует лечение. Это требует частых инъекций, что в конечном итоге причиняет дискомфорт пациенту. По этой причине существует необходимость в создании пролонгированных лекарственных форм, которые могут уменьшить общее количество инъекций при сохранении эффективности лечения, улучшить фармакоэкономические показатели лечения и будут более удобны для пациента. Колониистимулирующий фактор добавлен в лечение вирусных гепатитов В и С, поскольку он усиливает противовирусный сигналинг интерферона альфа.

[0003] Инкапсуляция активной фармацевтической субстанции в липидные частицы - перспективный подход к созданию фармацевтической композиции с улучшенными фармакокинетическими характеристиками (см, например, Wissing SA, Kayser О, Muller RH, Solid lipid nanoparticle for parenteral drug delivery. Advanced Drug Delivery Review, 56. 2004. 1257-1272. Joshi Medha. Muller Rainer, Lipid nanoparticles for parenteral delivery of actives. Euro. J. of Pharm. And Biopharm., 71 , 2009, 161-172). Терапевтические средства, встроенные в частицы на основе липидов показали улучшение биодоступности. Однако есть много практических проблем, ограничивающих использование частиц на основе липидов в производстве фармацевтических композиций. Некоторые из проблем, ограничивающих производство и развитие частиц на основе липидов, включают проблемы со стабильностью, воспроизводимостью от партии к партии, трудностью стерилизации, низким захватом субстанции, контроль среднего размера частиц, производство большого размера партии, и краткое время полураспада частиц в кровотоке (Sharma A, Sharma U, Liposomes in drug delivery: progress and limitations. International Journal of Pharmaceutics. 154, 1997, 123-140У Таким образом, существует необходимость в разработке частиц на основе липидов с улучшенной стабильностью, воспроизводимостью от партии к партии, повышенным содержанием субстанции в частице, а также продленным временем жизни в системном кровотоке.

[0004] Мы обнаружили, что комбинация интерферона + интерлейкина + колониистимулирующего фактора, жирной кислоты, фосфотидилхолина и полоксамера дает стабильные и воспроизводимые частицы с высоким захватом активного вещества, которым являются интерфероны, интерлейкины и колониестимулирующие факторы и продленным временем жизни в системном кровотоке. Критическим преимуществом таких частиц, образованных жирной кислотой, фосфотидилхолином и полоксамером по сравнению с другими частицами на основе липидов, является меньший средний размер частиц, что обеспечивает повышенную биодоступность интерферона + интерлейкина + колониистимулирующего фактора, помещенных в эти частицы, при парентеральном, оральном и местном введении млекопитающим, нуждающемся в этом.

[0005] Объектом настоящего изобретения являются частицы со средним размером от 1 до 350 нанометров, содержащие интерферон, интерлейкин, колониестимулирующий фактор, полоксамер, фосфотидилхолин и жирные кислоты, а также методы их получения и фармацевтические композиции на их основе.

Краткое описание чертежей

[0006] Рис.1 показывает распределение среднего размера вещества в частицах, состоящих из интерферона, интерлейкина, олеиновой кислоты и полоксамера 470, определенное фотонной корреляционной спектроскопией.

[0007] Рис.2 представляет распределение среднего размера вещества в частицах состоящих из интерферона, интерлейкина, олеиновой кислоты, лецитина и полоксамера 470, определенное фотонной корреляционной спектроскопией.

[0008] Рис.3 показывает уровни интерферона в системном кровотоке после парентерального введения фармацевтической композиции данного изобретения.

Подробное описание изобретения

[0009] Настоящее изобретение по одному из вариантов относится к субстанциям или частицам, состоящим из жирной кислоты, фосфолипидов и полоксамеров, являющиеся универсальной системой доставки генно - инженерных препаратов и пептидов.

Настоящее изобретение по второму из вариантов относится к частицам, содержащим (а) интерферон; (б) интерлейкин; (с) колониестимулирующий фактор, (д) полоксамер; (е) и жирную кислоту, служащим для лечения заболеваний человека, в том числе лечения хронических вирусных гепатитов В и С.

В частности, настоящее изобретение относится к частицам, содержащим в своем составе:

1. (а) интерферон, (б) интерлейкин; (в) полоксамер и (г) жирную кислоту;

2. (а) интерферон, (б) интерлейкин; (в) полоксамер; (г) жирную кислоту и (д) фосфотидилхолин или лецитин;

3. (а) интерферон, (б) интерлейкин, (в) колониистимулирующий фактор; (г) полоксамер; (д) жирную кислоту и (е) фосфотидилхолин или лецитин;

4. Данные частицы с интерфероном альфа, интерлейкином 1 бета и колониистимулирующим фактором разработаны для лечения заболеваний человека, в том числе для лечения хронических вирусных гепатитов В и С; 5. Полоксамер, жирная кислота и фосфолипиды представляют собой универсальную систему доставки, которая увеличивает транспорт любых биологически активных генно - инженерных препаратов и пептидов.

[0010] Используемый здесь термин "частицы" относится к частицам, имеющим средний размер от 1 до 350 нанометров.

[ООП] Используемый здесь термин "интерферон" относится к интерферону, полученному с помощью системы экспрессии интерферона, например, в E.coli или дрожжах. Неисключительные примеры интерферонов включают интерферон-а1рпа2Ь, интерферон-бета и интерферон-гамма. Используемый здесь термин "интерлейкин" относится к интерлейкину, полученному с помощью системы экспрессии интерлейкина, например, в E.coli или дрожжах. Неисключительные примеры интерлейкинов включают интерлейкин1 альфа, интерлейкин 1 бета, интерлейкин 2, интерлейкин 4, интерлейкин 6, интерлейкин 8, интерлейкин 18.

[0012] В некоторых предпочтительных вариантах изобретения, интерферон выбирается из группы, состоящей из рекомбинантного человеческого интерферона-а1рЬа2Ь, интерферона-бета, и интерферона-гамма.

[0013] Используемый далее термин "аналог" относится к любому интерферону, который содержит одну или более аминокислотных замен, удалений, добавлений или перестановок аминокислот по сравнению с природным интерфероном в таких положениях, что интерферон аналог по- прежнему сохраняет в естественных условиях биологическую активность интерферона.

[0014] Используемый далее термин "производные" относится к природному интерферону и аналогу интерферона, которые химически или ферментативно модифицированы по одной или нескольким аминокислотным остаткам, включая модификации боковой цепи, модификации основной цепи, a N- и С- концевые модификации, например ацетилирование, ацилирование, гидроксилирование, метилирование, амидирование, фосфорилирование, пегилирование, или гликозилирование, и которые сохраняют в естественных условиях биологическую активность интерферона. Примерами таких производных интерферона являются миристоил-интерферон и HisTag- интерферон.

[0015] В некоторых предпочтительных вариантах изобретения, частицы содержат от около 0,000001 до 10% по весу интерферона; примерно от 5 до 70% по весу полоксамера, и от 3 до 60% по весу жирной кислоты.

[0016] Используемый здесь термин "полоксамер" относится к любому неионному сополимеру, состоящему из трех блоков, а именно центральной гидрофобной цепи полиоксипропилена (polypropyleneoxide) расположенной между двумя гидрофильными цепями полиоксиэтилена (полиэтиленоксида). Неисключительные примеры полоксамера включают 124 полоксамер, 188, 237, 338 и 407, которые были включены в национальную фармакопею США с 1990 года. Другие примеры полоксамера раскрыты в патенте США 3740421 и в Руководстве Handbook of biodegradable polymers. Domb AJ et al. Harwood Academic Publisher, 1997.

[0017] Используемый здесь термин "жирные кислоты" относится к любой карбоновой кислоте с насыщенной или ненасыщенной алифатической цепью, состоящей из 4-28 атомов углерода. Насыщенные жирные кислоты - это длинноцепочечные карбоновые кислоты, которые, как правило, имеют 12-24 атомов углерода и не имеют двойных связей. Неисключительные примеры насыщенных жирных кислот включают лауриновую кислоту, миристиновую кислоту, пальмитиновую кислоту, стеариновую кислоту и арахидоновую кислоту. Ненасыщенные жирные кислоты в отличие от насыщенных жирных кислот имеют одну или несколько двойных связей. Неисключительные примеры ненасыщенных жирных кислот включают миристолеиновую кислоту, пальмитолеиновой кислоту, сапменовую кислоту, олеиновую кислоту, линолевую кислоту, α-линоленовую кислоту, арахидоновую кислоту, эйкозапентаеновую кислоту, эруковую кислоту и докозагексаеновую кислоту.

[0018] Частицы настоящего изобретения могут дополнительно содержать другие ингредиенты. Такие необязательные ингредиенты обычно используются индивидуально на уровне примерно от 0,0005% до 80,0% по весу частиц.

[0019] Примеры необязательных подходящих ингредиентов включают, но не ограничиваются, фосфолипидами, такие как лецитин, фосфотидилхолин, а также полимерами, такими, как поли (D, Ь-лактид)-поли (этилен гликоль)- поли (D, L-лактид) и поливинилпирролидон.

[0020] Далее, настоящее изобретение обеспечивает способ получения частиц, содержащих интерферон, интерлейкин, полоксамер, и жирную кислоту, включающий стадии: (а) получение частиц эмульсии жирной кислоты в воде; (б) вложение интерферона и интерлейкина в частицы эмульсии; (с) вложение полоксамера в частицы эмульсии и (г) выделение частиц.

[0021] В некоторых вариантах изобретения, стадия получения частиц ^• эмульсии жирной кислоты в воде с воспроизводимым средним размером частиц от 1 до 350 нанометров может быть реализована с использованием устройства Microfluidizer Processor MHO EN-30 (USA) как это описано в статье Mayhew Е. Lazo R, Vail WJ, King J, Green AM. Characterization of liposomes prepared using a microemulsifier. Biochim Biophys Acta. 1984, 775(2): 169-74. Кратко, эмульсия пропускается через керамическую камеру специфической формы со скоростью 500 м / с до получения желаемых частиц эмульсии.

[0022] В некоторых вариантах изобретения, стадия вложения интерферона и интерлейкина в частицы эмульсии может быть реализована методами, хорошо известно из уровня техники. Такие методы включают экструзию водной смеси интерферона и интерлейкина и липидов через фильтры с прогрессирующим уменьшением размера пор с 400 нм до 200 нм, а затем 100 нм; ультразвуковую дезинтеграцию, как описано в Martins S, et al., Lipid- based colloidal carriers for peptide and interferon delivery - liposomes versus lipid nanoparticles. Int J Nanomedicine. 2007; 2(4 :595-607; и методы конъюгации интерферонов и интерлейкинов с липидами.

[0023] В предпочтительном варианте изобретения, солюбилизированный интерферон с интерлейкином может быть смешан с эмульсией жирных кислот и смесь пропущена со скоростью 500 м / с через керамическую камеру Microfluidizer Processor MHO EN-30 (USA), чтобы получить частицы эмульсии с внедренным интерфероном и интерлейкином с воспроизводимым средним размером частиц от 1 до 350 нанометров.

[0024] В другом предпочтительном варианте осуществления изобретения солюбилизированный интерферон с интерлейкином может быть смешан с жирной кислотой в воде и смесь пропущена со скоростью 500 м / с через керамическую камеру Microfluidizer Processor MHO EN-30 (USA), чтобы получить частицы эмульсии с внедренным интерфероном и воспроизводимым средним размером частиц от 1 до 350 нанометров.

[0025] В некоторых вариантах изобретения, стадия вложения полоксамера в частицы эмульсии может быть реализована путем смешивания полоксамера с частицами эмульсии жирных кислот с вложенным интерфероном и интерлейкином и пропусканием смеси через Micro fluidizer Processor MHO EN-30 (USA), чтобы получить частицы эмульсии жирной кислоты с внедренным интерфероном и интерлейкином и полоксамером с воспроизводимым средним размером частиц от 1 до 350 нанометров.

[0026] В предпочтительном варианте изобретения, солюбилизированный интерферон с интерлейкином может быть смешан с жирной кислотой и полоксамером в заданном соотношении и смесь пропущена со скоростью 500 м / с через керамическую камеру Microfluidizer Processor Ml 10 EN-30 (USA), чтобы получить частицы изобретения с воспроизводимым средним размером от 1 до 350 нанометров.

[0027] Далее, настоящее изобретение предлагает фармацевтическую композицию для парентерального введения, характеризующуюся тем, что эта композиция содержит (а) частицы, которые содержат интерферон, интерлейкин, полоксамер, и жирную кислоту, а также (б) фармацевтически приемлемый носитель.

[0028] Используемый здесь термин "парентеральный" относится к подкожным, внутрикожным, внутривенным, внутримышечным инъекциям, а также различным методам инфузий.

[0029] Вследствие того, что белки, такие как интерферон и интерлейкин вложены в частицы, фармацевтические композиции по настоящему изобретению обладают повышенной терапевтической эффективностью. По сравнению с обычными инъекциями интерферона и интерлейкина, взятого в той же дозе, введение интерферона и интерлейкина встроенных в частицы обеспечивает более длительное нахождение интерферона и интерлейкина в системном кровотоке в терапевтически эффективных концентрациях, уменьшает общее количество инъекций для достижения эффективного излечения, улучшает фармакоэкономические показатели лечения и обеспечивает удобство для пациента.

[0030] Из-за высокой стабильности и воспроизводимости частиц, состоящих из жирной кислоты и полоксамера, фармацевтические композиции настоящего изобретения не имеют обычных практических проблем, связанных с использованием частиц, содержащих лекарственные средства, таких, как проблемы со стабильностью, воспроизводимостью от партии к партии, трудностями с выбором методов стерилизации, низкой концентрацией интерферона в частице, контролем среднего размера частиц, трудностью производства больших промышленных количеств и недостаточно длительным временем жизни частиц в кровотоке.

[0031] Из-за того, что частицы образованные жирной кислотой и полоксамером являются биологически разлагаемыми, фармацевтические композиции по настоящему изобретению являются безопасными и хорошо переносятся пациентом.

[0032] Из-за меньшего среднего размера частиц частицы, образованные жирными кислотами и полоксамерами по сравнению с частицами на основе других липидов, фармацевтические композиции по настоящему изобретению могут быть эффективными при оральном и наружном введении.

[0033] Далее, настоящее изобретение предлагает фармацевтическую композицию для перорального введения характеризующуюся тем, что эта композиция содержит (а) частицы, которые содержат интерферон, интерлейкин, полоксамер, и жирную кислоту, а также (б) фармацевтически приемлемый носитель. [0034] Из-за того, что частицы образованные жирной кислотой и полоксамером представляют собой систему доставки, которая увеличивает транспорт биологически активных генно - инженерных препаратов, например активного интерферона и интерлейкина через слизистую в системный кровоток, фармацевтические композиции настоящего изобретения могут быть введены перорально в форме таблеток, капсул, драже, порошков, гелей, сиропов, и других обычных пероральных форм.

[0035] Далее, настоящее изобретение предлагает фармацевтическую композицию для наружного введения характеризующуюся тем, что эта композиция содержит (а) частицы, которые содержат интерферон, интерлейкин, полоксамер, и жирную кислоту, а также (б) фармацевтически приемлемый носитель.

[0036] Из-за того, что частицы образованные жирной кислотой и полоксамером представляют собой систему доставки, которая увеличивает транспорт биологически активного интерферона через слизистую в системный кровоток, фармацевтические .композиции настоящего изобретения могут быть введены наружно в виде гелей, растворов, капель и других обычных наружных форм.

[0037] Композиции настоящего изобретения могут быть получены с помощью процедур, хорошо известных из уровня техники. Такие процедуры включают, но не ограничиваются, смешением частиц с другими ингредиентами состава обычным способом. Руководство по подготовке фармацевтические композиции изобретения можно найти в «Remington: The science and practice of pharmacy" 20th ed. Mack Publishing, Easton PA. 2000 ISBN 0-912734-04-3 and "Encyclopedia of Pharmaceutical Technology", edited bv Swarbrick. J. & J. C. Boylan. Marcel Dekker. Inc.. New York. 1988 ISBN 0- 8247-2800-9» или более новой редакции этой книги. [0038] Термин "фармацевтически приемлемый носитель" относится к носителю совместимому с активным интерфероном, активным интерлейкином и не вредным для субъекта, подлежащего лечению. Неисключительные примеры таких носителей включают, но не ограничиваются, водой для инъекций, маннитолом, лактозой, крахмалом, тальком, стеаратом магния, и т.д.

[0039] Следующие примеры представлены для демонстрации изобретения. Примеры только иллюстрируют изобретение и не ограничивают заявленного объема.

Пример 1

[0040] Приготовление частиц, содержащих человеческий интерферон-а1рпа2Ь (таблица 1) и частиц, содержащих интерферон-а1рЬа2Ь и интерлейкин 1 бета (таблица 2).

Эмульсии были получены из смеси олеиновой кислоты и воды при массовом соотношении 1 :4, рН 4,9 и использовании устройства Microfluidizer Processor MHO EN-30 (USA). Лиофилизированный рекомбинантный человеческий интерферон alpha2b был добавлен в эмульсии и смесь подвергли повторной процедуре получения частиц с использованием Microfluidizer Processor Ml 10 EN-30 (USA). Эмульсии подверглись ультрафильтрации. В частицы эмульсии был вложен предварительно подвергнутый ультрафильтрации гель полоксамера 470. Полученные таким образом частицы были лиофилизированы. Рис.1 показывает распределение частиц по размеру, определенное методом фотонной корреляционной спектроскопии. Средний размер частиц составлял около 50 нм и около 80% частиц имели средний размер частиц от 10 до 100 нм для частиц, полученных из олеиновой кислоты и полоксамера 470, взятых в массовом соотношении 1 :5. При желании, на стадии приготовления эмульсии может быть добавлен лецитин. Рис.1б показывает распределение среднего размера частиц приготовленных с использованием лецитина в массовом соотношении 5:1 :5 для лецитина, олеиновой кислоты, и полоксамера 470, соответственно. Средний размер частиц был около 75 нм. Таким образом, использование жирной кислоты в сочетании с полоксамером обеспечивает меньшие частицы, чем те, которые производятся с добавлением лецитина. Таблицах 1 и 2 демонстрируют содержание лиофилизированных частиц в лекарственной форме.

Таблица 1

Ингредиент Содержание rh-Интерферон alpha2b 3 миллиона Ед.

Олеиновая кислота 20 %

Poloxamer 470 около 80%

Таблица 2

Ингредиент Содержание rh-Интерферон alpha2b 3 миллиона Ед.

rh-Интерлейкин 1 бета 1.0* 10 ⁵ Ед.

Олеиновая кислота 9 %

Poloxamer 470 45 %

Лецитин до 100 %

Пример 2

[0041] Частицы содержащие гранул оцитарный колониистимулирующий фактор, человеческий рекомбинантный интерферон-бета и гамма- интерферон.

Таблицы 3 и 4 показывают лиофилизированные частицы, полученные методом как описано в примере 1 в дозированной лекарственной форме.

Таблица 3 Ингредиент Содержание rh-Интерферон beta la 30 мкг

Олеиновая кислота 20 %

Poloxamer 470 около 80%

Таблица 4

Ингредиент Содержание rh-Интерферон gamma 50 мкг

Олеиновая кислота 20 %

Poloxamer 470 около 80%

Таблица 5

Ингредиент Содержание

Г-КСФ 2 миллиона Ед.

Олеиновая кислота 20 %

Poloxamer 470 около 80%

Пример 3

[0042] Улучшение фармакокинетики фармацевтической композиции, содержащей частицы согласно примеру 1.

Фармацевтическая композиция, содержащая частицы в соответствии с примером 1 была приготовлена растворением единичной дозы лиофилизированных частиц, содержащих 3 миллиона Ед. HR-интерферона- alpha2b в 2 мл воды для инъекций (табл. 6).

Таблица 6

Ингредиент Содержание гп-Интерферон-а1рЬа2Ь (частицы) 3 миллиона Ед

Натрия Хлорид 0.9 %

Полученный раствор вводили однократно подкожно мышам весом 20-22 грамма (п = 20) в дозе 57 нг интерферона на мышь. Другие мыши получали однократную подкожную инъекцию физиологического раствора (п = 20), контрольный раствор интерферона-а1рЬа2Ь 57 нг / мышь (п = 20), или пегилированного интерферона в качестве интерферона длительного действия (положительный контроль). Уровни интерферон в плазме были измерены в течение 7 дней. Хотя введение контрольного раствора интерферона-а1рпа2Ь продемонстрировало значительное увеличение его уровня в плазме в первый день, не было разницы в плазме крови на 2-й день между группой, получавшей физиологический раствор и раствор интерферона-а1рпа2Ь. Этот результат показывает, что интерферон-а1рЬа2Ь полностью элиминируется в течение 24 часов. Однако, интерферон-а1рпа2Ь встроенный в частицы настоящего изобретения показал долговременное увеличение уровня интерферона в крови. Рис. 3 показывает, что однократное введение интерферона-а!рпа2Ь встроенного в частицы поддерживает терапевтически эффективный уровень интерферона-а1рпа2Ь в крови, по крайней мере 5 дней, что сравнимо с длительностью действия пэгилированного интерферона. Таким образом, фармацевтическая композиция интерферона, содержащая частицы в соответствии с настоящим изобретением, обладает улучшенными фармакокинетическими свойствами по сравнению с обычной композицией интерферона, поддерживает желательные терапевтические уровни интерферона в кровотоке в течение длительного времени, и может уменьшить общее количество инъекций, сохраняя при этом эффективность лечения и фармакоэкономические показатели.

Пример 4 [0043] Демонстрирует оральные фармацевтические композиции настоящего изобретения, содержащие частицы в соответствии с примерами 1 и 2. В таблице 6 показан пример подъязычных таблеток, содержащих частицы с терапевтически эффективным количеством интерферона и интерлейкина.

Таблица 6

Ингредиент Содержание, %

Частицы примеров 1 или 2 0.001-1

Лимонная кислота 0.8

Натрия кроскамелоза 3.6

Магния стеарат 1.6

Маннитол до 100

Ингредиенты (кроме лабриканта) были добавлены в V-блендер (Patterson- Келли V-блендер) и перемешивались в течение примерно 15 минут. После гомогенизации, лабрикант был добавлен и далее смесь перемешивали в течение примерно 3 минут. Смесь была загружена в пресс (Ayush Minipress- II, with Natoli punches and 0.2969 inch die) и доведена до желаемого веса таблетки и толщины. Таблетки были проверены на рН, жесткость, распад, и содержание примесей.

Пример 5

[0044] Демонстрирует наружную фармацевтическую композицию настоящего изобретения, содержащую частицы согласно примерам 1 и 2. В таблице 7 показан состав наружного геля, содержащего частицы с терапевтически эффективным количеством интерферона.

Таблица 7

Ингредиент Содержание, % Частицы примеров 1 или 2 0.100

Натрий карбоксиметилцеллюлоза 2.400

Хлористый натрий 0.809

Натрия ацетат тригидрат 0.157

Ледяная уксусная кислота 0.007

Метилпарабен 0.162

Пропилпарабен 0.018

т-Крезол 0.090

L-Лизина гидрохлорид 0.500

Вода для инъекций до 100

Гель получают путем смешивания ингредиентов в воде и постепенным добавлением натрия карбоксиметилцеллюлозы при постоянном перемешивании.

Пример 6

[0045] Демонстрирует улучшенную фармакокинетику оральной фармацевтической композиции настоящего изобретения, содержащую частицы в соответствии с примером 1.

Частицы согласно примеру 1, наполненные гЬ-интерфероном-а1рпа2Ь вводили в ротовую полость мышей (20-22 г веса) в дозе 57 нг интерферона на мышь (п = 6). Контрольный раствор, содержащий то же количество rh- интерфероном-а1рЬа2Ь, вводили контрольным мышам. Концентрации интерферона-а1рпа2Ь в плазме измеряли через 1 час после введения. Плазменные уровни интерферона в группе, получавшей частицы, оказался 47 ± 17% (уровни, достигаемые подкожной инъекцией, были приняты за 100%), в то время как уровни в контрольной группе оказались ниже предела обнаружения метода. Пример 7

[0046] Демонстрирует улучшенную фармакокинетику наружной фармацевтической композиции настоящего изобретения содержащей частицы в соответствии с примером 1.

Гель согласно примеру 5, содержащий частицы, наполненные rh- интерфероном-а1рпа2Ь наносили на бритую спину мышей (20-22 г веса) в дозе 57 нг интерферона на мышь (п = 6). Контрольный гель, содержащий то же количество гп-интерфероном-а1рпа2Ь, наносили на мышей контрольной группы. Концентрации интерферона-а1рЬа2Ь в плазме измеряли через 1 час после местного применения. Плазменные уровни интерферона в группе, получавшей частицы оказался 21 ± 10% (уровни, достигаемые подкожной инъекцией, были приняты за 100%), в то время как уровни в контрольной группе оказались ниже предела обнаружения метода.

Распредел ение результатов

Распредел ение резул ьтатов

ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)