CAMPO DE LA INVENCIÓN

La presente invención se refiere a la síntesis de intermedios de la TTX y sus análogos.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

La tetrodotoxina (TTX), octahidro-12-(hidroximetil)-2-imino-5,9:7,10a-dimetano- 10aH-[l,3]dioxocino[6,5-d]pirimidin-4,7,10,l l,12-pentol, es una potente neurotoxina que se une selectivamente a las proteínas del canal de sodio inhibiendo su función en la membrana celular. La tetrodotoxina se aisló por primera vez en 1909 de los ovarios del pez globo, y se llamó así por la familia del pez globo "Tetraodontidae". A pesar de ser una molécula pequeña, tiene una estructura extremadamente compleja caracterizada por un esqueleto de dioxadamantano, un resto de guanidina que es parte de un hemiaminal y un puente ortoácido.

TTX

También hay que destacar que la TTX normalmente está presente como una mezcla de dos posibles tautómeros: un ortoéster y una hidroxilactona (Esquema 1). La relación de ambos tautómeros depende del medio en el que está presente la TTX.

TTX TTX tautómero ortoéster tautómero hidroxilactona

Esquema 1

Debido a su estructura nueva y la alta densidad de grupos funcionales, sólo después de muchos esfuerzos Hirata-Goto y col. (Goto, T.; Kishi, Y.; Takahashi, S.; Hirata, Y., Tetrahedron 1965, 21, 2059-2088), Tsuda y col. (Tsuda, K.; Ikuma, S.; Kawamura, M.;

Tachikawa, K.; Sakai, K.; Tamura, C; Amakasu, O., Chem. Pharm. BuIl. 1964, 12,

1357-1374) y Woodward y col. (Woodward, R. B., Puré Appl. Chem. 1964, 9, 49-74;

Woodward, R. B.; Gougoutas, J. Z., J. Am. Chem. Soc. 1964, 86, 5030) llegaron de forma independiente a la misma estructura en 1964. Finalmente la estereoquímica absoluta se determinó de modo inequívoco en 1970 por análisis cristalográfico por rayos X de un derivado (Furusaki, A.; Tomie, Y.; Nitta, L, BuIl. Chem. Soc. Jpn. 1970,

45, 3325-3331).

La tetrodotoxina bloquea la difusión de sodio por el canal de sodio, evitando la despolarización y propagación de los potenciales de acción en las células nerviosas. El sitio de unión entre el canal de Na y la TTX es extremadamente fuerte (Kd = 10 ^"10 nM).

Por lo tanto es una herramienta esencial en los estudios farmacológicos relacionados con las proteínas del canal de sodio.

Además, la tetrodotoxina, debido a sus propiedades analgésicas, es un fármaco nuevo prometedor, candidato en el campo del tratamiento del dolor.

La extracción y purificación de la TTX natural es complicada y depende de la disponibilidad de la fuente animal adecuada. Por lo tanto, existe la necesidad de proporcionar grandes cantidades de tetrodotoxina y sus análogos, y los investigadores buscan nuevas síntesis baratas y eficaces. Hasta ahora sólo se han descrito unas pocas síntesis totales (Kishi, Y.; Nakatsubo, F.; Aratani, M.; Goto, T.; Inoue, S.; Kakoi, H.;

Tetrahedron Lett. 1970, 59, 5127-5128; Kishi, Y.; Nakatsubo, F.; Aratani, M.; Goto, T.;

Inoue, S.; Kakoi, H.; Tanino, H.; Sugiura, S., J. Am. Chem. Soc. 1972, 94, 9217-9219;

Kishi, Y.; Nakatsubo, F.; Aratani, M.; Goto, T.; Inoue, S.; Kakoi, H.; Tanino, H.;

Sugiura, S., J. Am. Chem. Soc. 1972, 94, 9219-9220; Kishi, Y.; Nakatsubo, F.; Aratani, M.; Goto, T.; Inoue, S.; Kakoi, H.; Tanino, H.; Sugiura, S., J. Am. Chem. Soc. 1972, 94,

9220-9221), Isobe y col. en enero de 2003 (Isobe, M. y col, J. Am. Chem. Soc, 2003, 125, 8798-8805). Dubois y col. en junio de 2003 (Du Bois, J.; Hinman, A. J. Am. Chem. Soc. 2003, 125, 11510-11511), e Isobe y col. han descrito una síntesis asimétrica total adicional que comprende 62 etapas y un rendimiento global de aproximadamente 1 % a partir del producto intermedio de metilo vinílico (Isobe, M.; Urabe, D.; Nishikawa, T.,

Angew. Chem. Int. Ed. 2004, 43, 4782-4785). Se han descrito mejoras adicionales del mismo autor en 2006 (Isobe, M.; Urabe, D.; Nishikawa, T.; Urabe, D. Chem. Asían. J. 2006, 1-2, 125-135). Para el propósito de la presente invención "análogos de TTX" son los descritos en el documento US 5.846.975 (incluido en el presente documento por referencia). De la línea 40 de la columna 3 a la línea 40 de la columna 6 el documento US 5.846.975 describe una fórmula general de análogos de TTX conocidos, por ejemplo anhidrotetrodotoxina, tetrodaminotoxina, metoxitetrodotoxina, etoxitetrodotoxina, desoxitetrodotoxina y ácido tetrodónico, 6-epi-tetrodotoxina, 11-desoxitetrodotoxina así como los derivados de TTX de tipo hemiacetal (p. ej . 4-epi-ΥΥX, 6-epi-ΥΥX, 11- desoxi-TTX, 4-epi-W-desoxi-ΥYX, TTX-8-O-hemisuccinato, chiriquitoxina, W-nor- TTX-6(S)-ol, l l-/ior-TTX-6(R)-ol, l l-/ior-TTX-6,6-diol, 11-oxo-TTX y ácido TTX- 11-carboxílico), los derivados de TTX de tipo lactona (p. ej. 6-epi-TTX (lactona), 11- desoxi-TTX (lactona), l l-m?r-TTX-6(S)-ol (lactona), l l-m?r-TTX-6(R)-ol (lactona), l l-nor-TTX-6,6-diol (lactona), 5-desoxi-TTX, 5,11-didesoxi-ΥΥX, 4-epi-5,\ \-didesoxi- TTX, l-hidroxi-5,l l-didesoxi-TTX, 5,6,11-tridesoxi-ΥΥX y 4-epi-5,6,\ \-tridesoxi- TTX) y los análogos de TTX de tipo 4,9-anhidro (p. ej. 4,9-anhidro-TTX, 4,9-anhidro- 6-epi-ΥΥX, 4,9-anhidro-l l-desoxi-ΥΥX, 8-0-hemisuccinato de 4,9-anhidro-TTX, 11- O-hemisuccinato de 4,9-anhidro-TTX). Los análogos típicos de TTX tienen solo 1/8 a 1/40 de la toxicidad de TTX en ratones, basado en bioensayo en ratones. Se ha observado que estos derivados producen una acción conjunta y no interaccionan de forma adversa. Además, Isobe ha descrito la síntesis de diferentes análogos no naturales de la tetrodotoxina siguiendo estrategias similares a las descritas para la tetrodotoxina. Concretamente, Isobe y col. han descrito la síntesis de la (-)-5,l l-didesoxitetrodotoxina (Isobe, M.; Asai, M.; Ohyabu, N.; Yamamoto, N.; Nishikawa, T., Angew. Chem. Int. Ed 1999, 38, 308 1-3084), (-)-8,l l-didesoxitetrodotoxina (Isobe, M.; Asai, M.; Iwabuchi, T.; Yoshida, K.; Urabe, D.; Nishikawa, T. Org. Lett. 2002, 16, 2679-2682;

Isobe, M.; Asai, M.; Iwabuchi, T.; Yoshida, K.; Urabe, D.; Nishikawa, T., Chem. Eur. J. 2004, 10, 452-462) y 11 -desoxitetrodotoxina (Isobe, M.; Asai, Nishikawa, T., J. Am. Chem. Soc. 2002, 124, 7847-7852). Sato y col. han descrito una síntesis total racémica de la tetrodotoxina a partir de mio- inositol con aproximadamente 0,14% de rendimiento global después de 40 etapas (Sato,

K.; Akai, S.; Sugita, N.; Ohsawa, T.; Kogure, T.; Shoji, H.; Yoshimura, J., J. Org.

Chem. 2005, 10, 7496-7504).

Finalmente, Sato y col. han descrito recientemente una síntesis total asimétrica de la tetrodotoxina a partir de D-glucosa con aproximadamente 0,13% de rendimiento global después de 40 etapas (Sato, K.; Akai, S.; Shoji, H.; Sugita, N.; Yoshimura, J., J. Org. Chem. 2008, 13, 1234-1242).

Además, se pueden revisar discusiones adicionales en relación con diferentes procedimientos sintéticos para la tetrodotoxina y sus análogos en Koert, U. T., Angew. Chem. Int. Ed. 2004, 43, 5572-55769.

En la solicitud internacional PCT/EP2008/051653 se describen derivados de 1- azaespiro[3.5]nonan-2-ona-5,7-carbolactona y 5,7-protegido-l-azaespiro[3.5] nonan-2- ona.

En la solicitud internacional PCT/EP2005/005149 se preparan las lactamas hidroxiladas que sirven como material de partida para los derivados de la presente invención. En vista de todo lo anterior es necesario proporcionar una síntesis alternativa barata y eficaz de la tetrodotoxina y análogos de la misma, que se puedan usar para la producción industrial de cantidades suficientes de estos compuestos. Además, mediante nuevas estrategias sintéticas estarán fácilmente disponibles análogos nuevos con propiedades biológicas y farmacológicas útiles.

RESUMEN DE LA INVENCIÓN En sus continuos esfuerzos por encontrar una síntesis industrialmente viable, los autores de la invención han encontrado que los intermedios de la invención son productos intermedios prometedores para la síntesis de TTX y análogos de la misma. Por lo tanto, un primer aspecto de la invención se dirige a un compuesto de fórmula (II), estereoisómeros, sales o solvatos del mismo,

(H)

La preparación de los compuestos de fórmula (II) permite funcionalizar de forma eficiente las posiciones 4a y 5 de la TTX, de acuerdo con la numeración de la TTX, al tiempo que introduce el carbono 4. Adicionalmente, abre la puerta a la síntesis de intermedios más avanzados en la síntesis de TTX, como son los compuestos de fórmula (III), (IV), (V), (VI), (VII), (VIII), (IX), (Xa), (XI), (XII), (XIII) y (XIV) cada uno de los cuales constituye un aspecto adicional de la invención.

Aspectos adicionales de la invención son los procedimientos de síntesis de dichos compuestos de fórmula (II), (III), (IV), (V), (VI), (VII), (VIII), (IX), (IX), (Xa), (XI), (XII), (XIII) y (XIV) así como su uso como intermedios en la síntesis de TTX y análogos de la misma. Estos compuestos, así como sus realizaciones más particulares, se denominan a lo largo de la presente invención "compuestos de la invención". Estos intermedios de la invención constituyen intermedios avanzados en la síntesis de TTX. Adicionalmente, la síntesis permite obtener también análogos de la TTX, mediante la modificación de las diferentes posiciones de una forma flexible. Métodos similares a los descritos en otros documentos citados más arriba (por ejemplo, en las publicaciones de Sato o Isobe) permiten construir el ortoéster y el anillo de guanidinio a partir de los compuestos de la invención.

DESCRIPICION DETALLADA DE LA INVENCIÓN Definiciones

Salvo en los ejemplos, la numeración seguida para designar las posiciones en los compuestos de la invención ha sido la siguiente:

Es decir, esta es la numeración a la que se hace referencia cuando se indica que el número de una determinada posición es "de acuerdo con la numeración de la TTX". En el presente documento los siguientes términos tienen los significados indicados: "Alquilo" se refiere a un radical de cadena hidro carbonada lineal o ramificada que consiste en átomos de carbono e hidrógeno, que no contiene saturación, que tiene 1-12, preferiblemente de uno a ocho, más preferiblemente de uno a seis átomos de carbono, y que está unido al resto de la molécula por un enlace sencillo, p. ej., metilo, etilo, n- propilo, i-propilo, n-butilo, t-butilo, n-pentilo, etc. "Alquenilo" se refiere a un radical de cadena hidro carbonada lineal o ramificada que consiste en átomos de carbono e hidrógeno, que contiene al menos una insaturación, que tiene 2-12, preferiblemente de dos a ocho, preferiblemente de dos a seis átomos de carbono, y que está unido al resto de la molécula por un enlace sencillo. "Alquiliden" se refiere a un radical de cadena hidrocarbonada lineal o ramificada que consiste en átomos de carbono e hidrógeno, que tiene 1-12, preferiblemente de uno a ocho, más preferiblemente de uno a seis átomos de carbono, y que está unido al resto de la molécula por un enlace doble, p. ej., metilen (=CH ₂ ) o etiliden (=CHCH ₃ ). "Alquinilo" se refiere a un radical de cadena hidrocarbonada lineal o ramificada que consiste en átomos de carbono e hidrógeno, que contiene al menos un triple enlace carbono-carbono, conjugado o no, que tiene de dos a doce, preferiblemente de dos a ocho, preferiblemente de dos a seis átomos de carbono, y que está unido al resto de la molécula por un enlace sencillo, tales como -CCH, -CH ₂ CCH, -CCCH ₃ , -CH ₂ CCCH ₃ . "Arilo" o "Ar" se refiere a un radical hidro carbonado aromático tal como fenilo, naftilo o antracilo. "Arilalquilo" se refiere a un grupo arilo unido al resto de la molécula a través de un grupo alquilo, tal como bencilo y fenetilo.

"Cicloalquilo" se refiere a un radical de cadena hidrocarbonada cíclico que consiste en átomos de carbono e hidrógeno, que no contiene saturación, que tiene de 3 a 8 átomos de carbono, unido al resto de la molécula por un enlace sencillo. "Alcoxilo" se refiere a un radical de fórmula -Oalquilo, p. ej. metoxi, etoxi, propoxi, etc.

"Ariloxilo" se refiere a un radical de fórmula -Oarilo.

"Heterociclilo" se refiere a un anillo estable de 3 a 15 miembros que consiste en átomos de carbono y de uno a cinco heteroátomos seleccionados del grupo constituido por nitrógeno, oxígeno y azufre, preferiblemente un anillo de 4 a 8 miembros con uno a más heteroátomos, más preferiblemente un anillo de 5 ó 6 miembros con uno o más heteroátomos. Para el propósito de esta invención, el heterociclo puede ser un sistema anular monocíclico, bicíclico o tricíclico, que puede incluir sistemas de anillos condensados; y los átomos de nitrógeno, carbono o azufre en el radical heterociclilo pueden estar opcionalmente oxidados; el átomo de nitrógeno puede estar opcionalmente cuaternizado; y el radical heterociclilo puede estar parcial o totalmente saturado o ser aromático. Los ejemplos de dichos heterociclos incluyen, pero no se limitan, azepinas, bencimidazol, benzotiazol, furano, isotiazol, imidazol, indol, piperidina, piperazina, purina, quinolina, tiadiazol, tetrahidro furano. "Amino" se refiere a un radical de fórmula -NH ₂ , -NHR", -NR"R'", en las que R" y R'" representan de forma independiente un grupo seleccionado del grupo constituido por alquilo sustituido o no sustituido, alquenilo sustituido o no sustituido, alquinilo sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido y arilalquilo sustituido o no sustituido. "Grupo protector de hidroxilo" se refiere a un grupo que bloquea la función OH para reacciones posteriores y que se puede eliminar en condiciones controladas. Los grupos protectores de hidroxilo son bien conocidos en la técnica y son grupos protectores representativos:

- éteres de sililo de fórmula -Si(R')3, tales como éter de trimetilsililo, éter de trietilsililo, éter de terc-butildimetilsililo, éter de terc-butildifenilsililo, éter de tri-isopropilsililo, éter de dietilisopropilsililo, éter de texildimetilsililo, éter de trifenilsililo, éter de di-terc- butilmetilsililo;

- éteres de alquilo y arilalquilo tales como éter de metilo, éter de tere-butilo, éter de bencilo, éter de p-metoxibencilo, éter de 3,4-dimetoxibencilo, éter de tritilo; éter de alilo;

- éteres de alcoximetilo y ariloxilo de fórmula -CH ₂ -O-R', tales como éter de metoximetilo, éter de 2-metoxietoximetilo, éter de benciloximetilo, éter de p- metoxibenciloximetilo, éter de 2-(trimetilsilil)etoximetilo; tetrahidropiranilo y éteres relacionados; éter de metiltio metilo;

- esteres de fórmula -C(=O)R', tales como éster acetato, éster benzoato, éster pivalato, éster metoxiacetato, éster cloroacetato, éster levulinato;

- Carbonates de fórmula -C(=O)-O-R', tales como carbonato de bencilo, carbonato de p-nitrobencilo, carbonato de tere-butilo, carbonato de 2,2,2-tricloroetilo, carbonato de

2-(trimetilsilil)etilo, carbonato de alilo; y

- sulfates tales como SCh.py.

En todas las fórmulas anteriores R' representa un grupo seleccionado del grupo constituido por alquilo sustituido o no sustituido, alquenilo sustituido o no sustituido, alquinilo sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido y arilalquilo sustituido o no sustituido. Se pueden encontrar ejemplos adicionales de grupos protectores de hidroxilo en libros de referencia tales como Greene and Wuts "Protective Groups in Organic Synthesis", John Wiley & Sons, Inc., New Jersey, 2007. "Grupo protector de amino" se refiere a un grupo que bloquea la función NH ₂ para reacciones posteriores y que se puede eliminar en condiciones controladas. Los grupos protectores de amino son bien conocidos en la técnica y son grupos protectores representativos los carbamatos, p. ej., carbamatos de fórmula -C(=O)OR'; amidas, p. ej. amidas de fórmula -C(=O)R', tales como acetatos sustituidos o no sustituidos; o restos sililo de fórmula -Si(R')3; en la que R' es tal y como se define anteriormente. También pueden servir como grupos protectores de amino restos alquilo diferentes. Dichos grupos alquilo pueden estar opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes tales como halógeno, hidroxilo, alcoxilo, éteres de alquiloximetilo, carboxilo, ciano, carbonilo, acilo, alcoxicarbonilo, amino, nitro, mercapto y alquiltio. Se pueden encontrar ejemplos adicionales de grupos protectores de amino en libros de referencia tales como Greene and Wuts "Protective Groups in Organic Synthesis", John Wiley &

Sons, Inc., New Jersey, 2007.

Las referencias en el presente documento a grupos sustituidos en los compuestos de la presente invención, se refieren al resto especificado que puede estar sustituido en una o más posiciones disponibles con uno o más grupos adecuados, p. ej., halógeno tal como flúor, cloro, bromo y yodo; ciano; hidroxilo; nitro; azido; alcanoilo tal como un alcanoilo Ci_6 tales como acilo y similares; carboxamido; grupos alquilo incluidos los grupos que tienen de 1 a 12 átomos de carbono o de 1 a 6 átomos de carbono y más preferiblemente 1-3 átomos de carbono; grupos alquenilo y alquinilo incluidos grupos que tienen uno o más enlaces insaturados y de 2 a 12 carbonos o de 2 a 6 átomos de carbono; grupos alcoxilo que tienen uno o más enlaces con oxígeno y de 1 a 12 átomos de carbono o de 1 a aproximadamente 6 átomos de carbono; ariloxilo tales como fenoxi; grupos alquiltio incluidos los restos que tienen uno o más enlaces tioéter y de 1 a 12 átomos de carbono o de 1 a 6 átomos de carbono; grupos alquilsulfinilo incluidos los restos que tienen uno o más enlaces sulfinilo y de 1 a 12 átomos de carbono o de 1 a 6 átomos de carbono; grupos alquilsulfonilo incluidos los restos que tienen uno o más enlaces sulfonilo y de 1 a 12 átomos de carbono o de 1 a 6 átomos de carbono; grupos aminoalquilo tales como los grupos que tienen uno o más átomos de N y de 1 a 12 átomos de carbono o de 1 a 6 átomos de carbono; arilo carbocíclico que tiene 6 o más carbonos, en particular fenilo o naftilo y arilalquilo tal como bencilo. Salvo que se indique lo contrario, un grupo opcionalmente sustituido puede tener un sustituyente en cada posición sustituible del grupo, y cada sustitución es independiente de la otra. Salvo que se exponga lo contrario, se entiende que los compuestos de la invención también incluyen compuestos que difieren sólo en la presencia de uno o más átomos enriquecidos en un isótopo. Por ejemplo, compuestos de fórmula (II), (III), (IV), (V), (VI), (VII), (VIII), (IX), (Xa), (XI), (XII), (XIII) o (XIV) en donde se ha producido la sustitución de un hidrógeno por un deuterio o tritio, y/o la sustitución de un carbono por carbono enriquecido en ¹³ C o ¹⁴ C, y/o nitrógeno enriquecido en ¹⁵ N y/o la sustitución de un oxígeno por ¹⁸ O, están dentro del alcance de esta invención.

Compuestos de la invención

Tal y como se indica anteriormente, aspectos de la presente invención son los compuestos de fórmula (II), (III), (IV), (V), (VI), (VII), (VIII), (IX), (Xa), (XI), (XII), (XIII) o (XIV), estereoisómeros, sales o solvatos de los mismos,

(XIII) (XIV) en las que

Ri se selecciona de hidrógeno, ciano, alquilo sustituido o no sustituido, alquenilo sustituido o no sustituido, alquinilo sustituido o no sustituido y NReRf, en el que Re y

Rf se selecciona cada uno de forma independiente de H, OH, OPr, alquilo sustituido o no sustituido, cicloalquilo sustituido o no sustituido, alquenilo sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, heterociclilo sustituido o no sustituido, alcoxilo sustituido o no sustituido, ariloxilo sustituido o no sustituido, amino sustituido o no sustituido y halógeno;

R ₂ se selecciona de hidrógeno, OH, u OPr; o Ri y R ₂ juntos forman un grupo seleccionado de =0, alquiliden y -CH ₂ -O-Pr-O-;

E se selecciona del grupo que consiste en flúor, cloro, bromo, yodo, -SeRn, -0-NR ₁₃ , -

SRi ₄ , PO(O-alquilo) ₂ y PO(O-arilo) ₂ , en donde

R13 se selecciona del grupo que consiste en arilo y alquilo;

Ri ₄ se selecciona del grupo que consiste en arilo, alquilo, -PO(O-alquilo) ₂ , PO(O-arilo) ₂ , -C(=O)O-alquilo y -C(=O)O-arilo;

R9 y Rio se selecciona cada uno de forma independiente de hidrógeno, OH, OPr y =0; o juntos forman un grupo -0-Pr-O-;

W se selecciona del grupo constituido por -H, alquilo sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, arilalquilo sustituido o no sustituido, heterociclilo sustituido o no sustituido y alquenilo sustituido o no sustituido; Ra y Rb se selecciona cada uno de forma independiente de H, OH, OPr, Se-arilo, alquilo sustituido o no sustituido, cicloalquilo sustituido o no sustituido, alquenilo sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, heterociclilo sustituido o no sustituido, alcoxilo sustituido o no sustituido, ariloxilo sustituido o no sustituido, amino sustituido o no sustituido y halógeno; Pr es un grupo protector de hidroxilo;

Z es -COOH o -CHR4R5, en donde R ₄ es hidrógeno, y R5 es OH o OPr; o R ₄ y R5 juntos forman =0; X es -CH(=0) o -CN; Y se selecciona del grupo que consiste en -OR ₆ , -SR ₆ , Se-arilo, -N(Re) ₂ , -+N(R ₆ ^ y - NHR ₇ , en donde R ₆ se selecciona del grupo que consiste en alquilo sustituido o no sustituido, cicloalquilo sustituido o no sustituido, alquenilo sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, arilalquilo sustituido o no sustituido y heterociclilo sustituido o no sustituido;

R ₇ se selecciona del grupo que consiste en alquilo sustituido o no sustituido, cicloalquilo sustituido o no sustituido, alquenilo sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, arilalquilo sustituido o no sustituido, heterociclilo sustituido o no sustituido, -O-alquilo, -O-arilo, -O-arilalquilo, O-(C=O)-alquilo, O-(C=O)-arilo y O- (C=O)- arilalquilo;

Xi se selecciona del grupo que consiste en -CN, -COORi ₆ , -CON(Ri ₆ ) ₂ , CHO, - CH ₂ OH, CH ₂ N(RIe) ₂ -Se-ArUo, -Se(=O)-arilo, dicho arilo pudiendo estar opcionalmente sustituido, -S-Ri ₆ , -CH(ORi ₆ ) ₂ , -CH(NHRi ₆ )CN y -CH(ORi ₆ )CN en donde Ri ₆ se selecciona en cada caso de forma independiente del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo y arilo; pudiendo dos grupos Rl 6 formar un grupo alquiliden, lineal o ramificado, opcionalmente sustituido por uno o más grupos carbonilo; y

Ri 5 es independientemente en cada caso -OH u -OPr.

Los compuestos de la invención son productos intermedios especialmente interesantes para la síntesis de TTX, proporcionando una ruta flexible a sus distintos análogos. La invención también proporciona sales de los compuestos de la invención con ácidos inorgánicos y orgánicos biológica y farmacológicamente aceptables, de los cuales son ejemplos no limitantes los sulfatos; sales de halohidrato; fosfatos; sulfonatos de alcano inferior; arilsulfonatos; sales de ácidos mono, di o tribásicos C1-C20 alifáticos que pueden contener uno o más dobles enlaces, un núcleo de arilo u otros grupos funcionales tales como hidroxilo, amino o ceto; sales de ácidos aromáticos en las que el núcleo aromático puede estar o no sustituido con grupos tales como hidroxilo, alcoxilo inferior, amino, mono o di-(alquil inferior)-amino-sulfonamido. También están incluidos dentro del alcance de la invención las sales cuaternarias del átomo de nitrógeno terciario con haluros o sulfates de alquilo inferior, y derivados oxigenados del átomo de nitrógeno terciario, tales como N-óxidos. Cuando se preparan formulaciones de dosificación, los expertos en la técnica seleccionarán las sales farmacéuticamente aceptables. El término "solvato" de acuerdo con esta invención debe entenderse que significa cualquier forma del compuesto activo de acuerdo con la invención, que tiene otra molécula (lo más probable un disolvente polar) unido al mismo por un enlace no covalente. Los ejemplos de solvatos incluyen hidratos y alcoholatos, p. ej., metanolato. La presente invención también comprende los distintos estereoisómeros de los compuestos de la invención. Un "estereoisómero" en la presente solicitud de patente hace referencia a compuestos formados por los mismos átomos unidos por la misma secuencia de enlaces pero que tienen estructuras tridimensionales diferentes que no son intercambiables. Realizaciones particulares de los compuestos de la invención los constituyen los compuestos de fórmula (lia), (HIb), (HIc), estereoisómeros, sales o solvatos de los mismos

(HIb)

en las que E, Rg, Rio, Ra, Rb y W son tal y como se han definido anteriormente. De acuerdo con una realización particular W es arilalquilo, preferiblemente W es CRcRd-arilo, en el que Rc y Rd se selecciona cada uno de forma independiente de H, OH, OPr, alquilo sustituido o no sustituido, cicloalquilo sustituido o no sustituido, alquenilo sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, heterociclilo sustituido o no sustituido, alcoxilo sustituido o no sustituido, ariloxilo sustituido o no sustituido, amino sustituido o no sustituido y halógeno. En una realización particular Rc es distinto de hidrógeno y Rd es hidrógeno. De acuerdo con una realización adicional Rc y Rd son ambos hidrógeno. De acuerdo con una realización particular Ra es hidrógeno y Rb se selecciona del grupo que consiste en halógeno, preferiblemente bromo, OH, OPr y Se-arilo. En otra realización Ra y Rb son ambos hidrógeno.

De acuerdo con una realización particular, Y se selecciona de OH, alcoxilo, amonio y - NH(O-(C=O)-arilo). De acuerdo con una realización particular, E es bromo o yodo, preferiblemente bromo. De acuerdo con una realización particular, Rg y Rio juntos forman un grupo de fórmula -0-Si(Ri iRi2)-O-Si(RnRi2)-O-, en lo s que Rn y R12 se seleccionan de forma independiente del grupo constituido por hidrógeno, alquilo sustituido o no sustituido, cicloalquilo sustituido o no sustituido, alquenilo sustituido o no sustituido, alquinilo sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido y heterociclilo sustituido o no sustituido. De acuerdo con una realización particular, Rn y R12 son isopropilo, por ejemplo en los compuestos de fórmula (II), (III), (IV), (V), (VI), (VII), (VIII), (IX), (X), (Xa), (XI), (XII), (XIII) o (XIV). De acuerdo con una realización particular, Ri es alquilo-OPr. De acuerdo con otra realización particular, Ri y R ₂ juntos forman =0, alquiliden o -CH ₂ -O-Pr-O-. De acuerdo con una realización particular, Ri y R ₂ , por ejemplo en los compuestos de fórmula (X), (Xa), (XI), (XII), (XIII) o (XIV), juntos forman -CH ₂ -O-Pr-O-, en donde Pr es -[(Rn)C(Ri ₂ )]-, en donde Rn y Ri ₂ son tal y como se han definido anteriormente, preferiblemente metilo. En otra realización particular Ri es hidrógeno y R ₂ es OH o OPr.

En una realización particular, X es CN.

Síntesis de los compuestos de la invención

Un aspecto de la presente invención es un procedimiento para la síntesis de un compuesto de fórmula (II), estereoisómeros, sales o solvatos del mismo, que comprende una secuencia A que comprende (ai) reaccionar un compuesto de fórmula (I) en presencia de una fuente de ion cianuro, y (aii) reaccionar el intermedio obtenido en presencia de un electrófilo, o una secuencia B que comprende (bi) reaccionar un compuesto de fórmula (I) en presencia de electrófilo, y (bii) reaccionar el intermedio obtenido en presencia de una fuente de ion cianuro

(I) en la que R9, Rio, Ra, Rb y W son tal y como se han definido anteriormente. Los procedimientos para obtener los compuestos de fórmula (I), materiales de partida de la presente invención, se describen en las solicitudes de patente PCT/EP2005/005149 y PCT/EP2005/005146, de los mismos inventores.

En la secuencia A la etapa (ai) proporciona una adición de Michael sobre la posición 4a del anillo de ciclohexenona del compuesto de fórmula (I). Como resultado de dicho ataque, se produce el enolato intermedio de fórmula (Ia)

El electrófilo se puede añadir directamente sobre el medio de reacción tras la reacción con la fuente de ion cianuro, sin necesidad de aislar dicho enolato intermedio de fórmula (Ia). Alternativamente, dicho enolato puede atraparse y aislarse antes de su reacción con el electrófilo. En la secuencia B se añade primero el electrófilo, para proporcionar el correspondiente derivado de la posición 5 (Ib)

Después se produce la adición de Michael con el ion cianuro sobre dicho derivado. De acuerdo con una realización particular, el derivado de fórmula (Ib) se aisla y luego se somete a la reacción (bii) en presencia de una fuente de ion cianuro. De acuerdo con una realización particular, la reacción (bi) se realiza también en presencia de una base, por ejemplo, una base orgánica tal como una trialquilamina (p. ej. trietilamina).

Alternativamente, los compuestos de fórmula (I) se pueden hacer reaccionar en presencia de una fuente de ion cianuro y, en lugar de reaccionar el intermedio obtenido en presencia de un electrófilo, el enolato intermedio se puede hacer reaccionar con una fuente de protones. Como resultado se obtienen compuestos de fórmula (X), estereoisómeros, sales o solvatos del mismo

en la que R ₁ , R ₂ , R9, Rio, Ra, Rb y W son tal y como se definen anteriormente. Las distintas definiciones para los radicales Ri y R ₂ en los compuestos de fórmula (X) pueden obtenerse siguiendo los métodos descritos en la sección "Otras reacciones" más abajo.

De estos compuestos, los compuestos de fórmula (Xa) descritos anteriormente resultan un nuevo subgrupo especialmente útil para la síntesis de la TTX. Como se puede ver, estos compuestos de fórmula (Xa) permiten acceder en pocas etapas a compuestos de fórmula (XI), (XII), (XIII) o (XIV), todos ellos también nuevos intermedios avanzados para la síntesis de compuestos de TTX.

En otra realización, los compuestos de fórmula (X) pueden obtenerse mediante la secuencia A que da lugar a los compuestos de fórmula (II), seguida de tratamiento con base (por ejemplo, una trialquilamina tal como la trietilamina) que da lugar a la eliminación del grupo E. Por ejemplo, es posible tratar un compuesto de fórmula (Ia) con NBS para dar el consiguiente compuesto de fórmula (II) en donde E es bromo, el cual puede transformarse en un compuesto de fórmula (X) mediante tratamiento con trietilamina.

(X) De acuerdo con una realización particular, Pr en un compuesto de fórmula (Xa) es -O-

Si(Ri iRi2)-O-Si(RnRi2)-O-, en donde Rn y R12 son tal y como se han definido anteriormente, preferiblemente en donde Rn y Ri ₂ son isopropilo. Preferiblemente, en un compuesto de fórmula (Xa) al menos uno de Ra y Rb es hidrógeno.

La fuente de ion cianuro necesaria se puede obtener de diferentes fuentes que conoce el experto en la técnica. Por ejemplo, dichas fuentes se pueden seleccionar de los siguientes sistemas de reactivos: PhsP/azodicarboxilato de dietilo (DEAD)/alcohol/cianhidrina de acetona (Synth. Com. 1995, 25, 1545-1550; Synth. Com. 1993, 25, 2481-2484).

Otras fuentes del anión cianuro se basan en sistemas reactivos que comprenden NaCN. Las condiciones ya descritas en la técnica comprenden una mezcla de NaCN con uno de los siguientes sistemas de reacción: DMSO o nBu4NCN/DMF/calor (J. Med. Chem. 1991, 56, 3009-3016; J. Med. Chem. 1966, 31, 2933-2941), DMSO/calor (J. Med. Chem. 2001, 44, 94-104; Tetrahedron Asymmetry, 1996, 7, 1967-1972), Bu ₄ NCN/DMSO/calor (Bioorg. Med. Chem. Lett. 1999, 9, 841-846), DMF/calor (Tetrahedron Letters, 1998, 39, 3357-3358; J. MeJ. Chem. 1994, 57, 4195-4210), [(CHs) ₂ N] ₃ PO (J. Ozem. 5Oc. Ozem. Com. 1982, 7, 404-406) o condiciones en las que está presente el bicarbonato de sodio, tales como NaCN/NaHCθ3/H2θ/Et2θ/t.a., NaCN/NaHC0 ₃ /Et ₂ 0/t.a. o NaCN/NaHCO ₃ /THF/-H ₂ O (J. Med. Chem. 1992, 55, 2721- 2727; Carbohydrate Resarch 1991, 216, 399-411; J. Med. Chem. 1998, 41, 4636-4647; Carbohydrate Resarch 1991, 216, 399-411). También, NaCN en presencia de 1-metil- lH-pirrol proporciona el anión cianuro deseado.

En otra realización, la reacción se puede desarrollar en presencia de KCN (J. Am. Chem. Soc. 1958, 80, 4677-4680). Las condiciones ya descritas en la técnica comprenden una mezcla de KCN con uno de los siguientes sistemas de reacción: Et ₂ CVH ₂ O (Tetrahedron Letters, 2001, 42, 6259-6262), THF/t.a. {Carbohydrate Resarch 1994, 254, 133-140) o CH ₂ Cl ₂ /H ₂ O/t.a., con o sin NaHCO ₃ (J Chem. Soc. Perkin Trans 1. 1985, 1067-1072). En otra realización, la reacción se puede desarrollar en presencia de LiCN. Las condiciones ya descritas en la técnica comprenden una mezcla de LiCN con uno de los siguientes sistemas de reacción: Me ₃ SiCl/THF/t.a. (Synthesis, 1986, 12, 1054-1055), DMF/[(CH ₃ ) ₂ N] ₃ PO (Bioorg. Med. Chem. Lett. 1996, 6, 1897-1900), cianofosfonato de dietilo/THF/t.a. (Chem. Pharm. BuIl. 1986, 34, 4620-4628; Tetrahedron Letters, 1989, 30, 3681-3684) o DMF (Bioorg. Med. Chem. Lett. 2000, 10, 2417-2419). E l cianuro de cobre tamb ién e s una fuente de anión cianuro úti l (CuCN/HNaCO ₃ /H ₂ O/EtO ₂ ; Tetrahedron. 1988, 44, 4895-4904).

En otra realización, la reacción se puede desarrollar en presencia de HCN. Las condiciones ya descritas en la técnica comprenden una mezcla de HCN con uno de los siguientes sistemas de reacción: Piridina/t.a. (J Chem. Soc. Perkin Trans 1. 1994, 1067-1072), Et ₃ N/CH ₂ Cl ₂ /0°C (Carbohydrate Resarch 1986, 155, 236-246) o la generación in situ de HCN mezclando Zn(CN) ₂ y AlCl ₃ (Tetrahedron Asymmetry, 1990,

1, 187-198).

Por lo tanto, de acuerdo con una realización, el reactivo que proporciona un anión cianuro tiene una fórmula MCN, en la que M es litio, potasio, sodio o cobre.

Los cianuros de trialquilsililo también son fuentes de aniones cianuro muy extendidas (J Org. Chem. 2003, 3094-3103; J Am. Chem. Soc. 1973, 5822-5823; J Chem. Soc.

Perkin Trans 1. 1988, 2305-2307). Las condiciones ya descritas en la técnica comprenden una mezcla de cianuro de trialquilsililo con uno de los siguientes sistemas de reacción: TMSCN/DABCO o TMSCN/(DHQ) ₂ AQN (J Am. Chem. Soc. 2003, 125, 9900-9901), TMSCN/BF ₃ /CH ₂ Cl ₂ /t.a. o TMSCN/BF ₃ Et ₂ θ/CH ₂ Cl ₂ /t.a. (Tetrahedron Letters, 1990, 31, 71-74; Tetrahedron Letters, 1990, 31, 71-74; Tetrahedron Letters, 1990, 31, 71-74; Carbohydrate Resarch 1994, 258, 77-86), TMSCN/éter corona/KCN(cat)/tolueno/-30°C (J. ^m. Ozem. 5Oc. 1985, 107, 4577-4579; Tetrahedron Zeíters, 1994, 55, 7901-7904), TMSCN/amma/CH ₂ Cl ₂ /0 ^o C (Chemistry Letters, 1991, 725, 5 3 7-540), TMSCN/I ₂ /20-3 0 ° C (Tetrahedron 2000, 55, 6533-6540), TMSCN/ZnI ₂ /calor (Tetrahedron Asimmetry. 1994, 9, 805-816), TMSCN/CaO/Tolueno/-40°C (J. Chem. Soc. Chem. Com. 1991, 15, 1035-1036), TMSCN/Ph ₃ P(cat)/CH ₂ Cl ₂ (Tetrahedron Letters, 1986, 27, 2757-2760), TMSCN/ácido de Lewis (Tetrahedron Letters, 1983, 39, 967-974), TMSCN/catalizador (Tetrahedron 2001, 57, 7 7 1-779); TMSCN/ZnI ₂ (cat) (Tetrahedron 1994, 50, 2821-2830), TBDMSCN/ZnI ₂ /CH ₂ Cl ₂ (J. Org. Ozem. 1993, 55, 159-164; BuIl. Chem. Soc. Jpn. 2001, 74, 997-1008), (alquil) ₃ SiCN/LiCl(cat)/sin disolvente (J Og. Chem. 2005, 70, 6530-6532). De acuerdo con una realización adicional, los reactivos que proporcionan un anión cianuro son un cianuro de dialquilaluminio de fórmula (alquil) ₂ -Al-CN o un cianuro de trialquilsililo de fórmula (alquil) ₃ Si-CN, que están disponibles en el comercio. De acuerdo con una realización preferida, la reacción procede en presencia de TMSCN o Et ₂ AlCN. De acuerdo con una realización particular, electrófilos útiles para la preparación de los compuestos de fórmula (II) se seleccionan del grupo que consiste en Ri ₃ S-SRi ₃ , por ejemplo, Me-S-S-Me (Yadav, V. K.; Babu, K. G.; Parwez, M. J Org. Chem. 2004, 69, 3866-3874), o Ph-S-S-Ph (Morel, G.; Marchand, E.; Foucaud, A. Synthesis 1980, 11, 918-921); Ri ₃ -S-SO ₂ -Ri ₃ , por ejemplo, Ph-S-SO ₂ -Ph (Lythgoe, B.; Waterhouse, L; J Chem. Soc. P. T. 1 1979, 2429-2436); Cl-S-PO(O-alquilo) ₂ , por ejemplo, Cl-S-

PO(OEt) ₂ (Dybowski, P.; Skowronska, A. Tetrahedron Lett. 1991, 32, 4385-4388); Cl- S-C(=O)O-alquilo, por ejemplo, MeO-CO-S-Cl (Sanemitsu, Y.; Kawamura, S.; Tanade, Y. J Org. Chem. 1992, 57, 1053-1056); Cl-PO(O-alquilo) ₂ , por ejemplo, Cl-PO(OEt) ₂ (Kandil, A. A.; Porter, T. M.; Slessor, K. N. Synthesis 1987, 4, 411-413); ONRi ₃ , por ejemplo, Ph-NO (Momiyama, N.; Yamamoto, H.; Org. Lett. 2002, 21, 3579-3582);

BrSeRi ₃ , por ejemplo, BrSePh (Rollinson, S. W.; Amos, R. A.; Katzenellenbogen, J. A. J. Am. Chem. Soc. 1981, 103, 4114-4125), o BrSeMe (Aoki, L; Nishibayashi, U.; Sakae, U. BuIl. Chem. Soc. Japan 1995, 68, 337-340); Ri ₃ Se-SeR _n , por ejemplo, Ph-Se-Se-Ph (Wovkulich, P. M.; Baggiolim, E. G.; Hennessy, B. M.; Uskokovic, M. R. Heterocycles 1993, 55, 791-806). Las citas entre paréntesis indican una referencia en la que se describen posibles condiciones de reacción para la utilización de los reactivos. Otras condiciones pueden encontrarse en libros de referencia como "Advanced Organic Chemistry: reactions, mechanisms and structures" , March, J., fourth edition, Wiley- interscience.

Así pues, los diferentes compuestos intermedios de la invención y los materiales de partida se pueden preparar usando un conjunto básico de reacciones sencillas que permiten la protección y funcionalización de las diferentes posiciones de una forma muy específica. Estos procedimientos se explicarán a continuación. A lo largo de toda la descripción y las reivindicaciones las configuraciones dadas son solamente configuraciones relativas.

Los derivados enantioméricamente puros de los compuestos de la invención se pueden preparar usando materiales de partida o reactivos (por ejemplo, dihidroxilación de Sharpless o epoxidación de un doble enlace) que tienen la rotación óptica opuesta. Además, las técnicas convencionales para separar diastereoisómeros y enantiómeros son conocidas en general por los expertos en la técnica.

Como se ha mencionado antes, los materiales de partida de la presente invención se pueden obtener por procedimientos descritos en los documentos PCT/EP2005/005149 y/o PCT/EP2005/005146. Los productos intermedios clave descritos en el documento PCT/EP2005/005146 son benzodienonas con la siguiente fórmula

en la que la sustitución en la posición Z puede crear un centro estereogénico. En el documento PCT/EP2005/005146 una realización preferida es aquella en la que Z es -CRaRb-, en el que Ra y Rb son diferentes y crean así un centro quiral. Así, de acuerdo con una realización preferida Ra y Rb en los compuestos de la invención son diferentes, y se crea así un centro quiral. Además, el documento PCT7EP2005/005146 describe como una realización preferida compuestos en los que el sustituyente W de las benzodienonas anteriores es un grupo arilalquilo, más preferiblemente en el que W es -CRaRb-Q, en el que Ra y Rb en el conector tienen esencialmente el mismo significado que en la presente solicitud, y el sustituyente Q tiene interacciones π (pi) con el resto de benzodienona. Así pues, surge otra fuente de quiralidad cuando Ra y Rb en dicho conector son diferentes, preferiblemente en el que W es -CHRa-Q (p. ej., (-)-(S)-l-(l-feniletoxi)-l- azaespiro[3.5]nona-5,8-dien-2,7-diona, que se describe como compuesto 5d en el documento PCT/EP2005/005 146) . Como se describe en el documento PCT/EP2005/005146 dichas configuraciones proporcionan un centro estereogénico que permite la selectividad o especificidad de cualquier otra reacción, distinguiendo los dos dobles enlaces de las benzodienonas mencionadas, que son productos intermedios en la síntesis de los compuestos de la invención. Esto abrirá el camino a la síntesis diastereoselectiva y/o enantioselectiva. Por lo tanto, usando los materiales quirales descritos en los documentos PCT/EP2005/005149 y/o PCT/EP2005/005146, se pueden obtener los estereoisómeros y enantiómeros específicos de los compuestos descritos en la presente invención.

Para obtener los distintos compuestos de fórmula (II) o de fórmula (X) o de fórmula (XI), éstos o sus precursores se pueden someter a una o más etapas que se seleccionan entre el grupo que consiste en: a) reducción de la cetona a grupo hidroxilo, opcionalmente seguido de protección y/o inversión de la configuración de dicho grupo hidroxilo; b) olefinación de la cetona para obtener un grupo alquiliden, opcionalmente seguida de dihidroxilación; c) olefinación de la cetona para obtener un grupo alquiliden, opcionalmente seguida de dihidroxilación, y posterior protección de al menos uno de los grupos hidroxilo formados; d) protección de la cetona; e) alquilación de la cetona; y f) aminación de la cetona.

Por ejemplo, se puede reducir la cetona de un compuesto de fórmula (lia) a hidroxilo y posteriormente protegerlo, o se puede someter a una reacción de Wittig para obtener el derivado metilen. También puede protegerse la cetona (ver esquema 2)

Esquema 2 Otro aspecto de la presente invención es un procedimiento para la síntesis de un compuesto de fórmula (III) u (XI), estereoisómeros, sales o solvatos del mismo, que comprende hacer reaccionar un compuesto de fórmula (II) o (X), respectivamente, en presencia de un hidruro. Mediante esta reacción se abre el anillo de espirolactama pudiendo obtenerse el carbono 10 (de acuerdo con la numeración de la TTX) como aldehido o alcohol en función de la naturaleza del hidruro y de las condiciones de reacción (por ejemplo, mediante la elección del disolvente o el número de equivalentes de hidruro). Opcionalmente, el hidroxilo resultante puede protegerse. Otra alternativa es la oxidación del aldehido o alcohol obtenido para obtener el correspondiente ácido carboxílico. La apertura del anillo de espirolactama se realiza en presencia de un hidruro, preferiblemente, en presencia de un hidruro derivado de aluminio o boro, por ejemplo, 9-BBN, NaBH ₄ , DIBALH or LiAlH ₄ (ver por ejemplo el capítulo 19 de "Advanced Organic Chemistry: reactions, mechanisms and structures" , March, J., 5th edition, Wiley-interscience). Otros hidruros y métodos no limitativos adecuados para la presente invención se describen en Handbook of Reagents for Organic Synthesis. Oxidizing and Reducing Agents. Eds; John Wiley & Sons: Baffins Lañe, Chichester, 1999: diborano (páginas 126-132), BH ₃ -SMe ₂ (páginas 48-51), BH ₃ -THF (páginas 52-57), ((CH ₃ ) ₂ - CH(CH ₃ )) ₂ BH (páginas 160-163) o diisopinicamfenilborano (páginas 146-149). Un aspecto adicional de la invención es un procedimiento para la síntesis de un compuesto de fórmula (IV), estereoisómeros, sales o solvatos del mismo, que comprende (a) la reacción de un compuesto de fórmula (Illa) en presencia de una base. o bien,

(b) cuando se quiere obtener el compuesto de fórmula (IV) en el que Ra es -Se-arilo, la reacción de un compuesto de fórmula (HIb) en presencia de halógeno-Se-arilo o arilo- Se-Se-arilo, y de una base, preferiblemente un amina cíclica, preferiblemente morfolina. Los procedimientos (a) y (b) para la obtención de compuestos de fórmula (IV) también pueden utilizarse para obtener los compuestos de fórmula (V), dependiendo de la base utilizada. Esto constituye también aspectos adicionales de presente invención. En algunos casos se obtienen exclusivamente los compuestos de fórmula (V) o exclusivamente los compuestos de fórmula (IV), y en otras ocasiones mezclas de ambos (ver ejemplos 7 y 8 más abajo).

Por ejemplo, los compuestos de fórmula (V) resultan formalmente de la eliminación de HBr de un compuesto de fórmula (IV). Por tanto, condiciones más vigorosas (mayor temperatura, bases más fuertes, exceso de bases, mayores tiempos de reacción, etc..) deberían favorecer la formación de compuestos de fórmula (V). Como se ve al comparar los ejemplos 7 y 8, una exposición más prolongada a la base (ejemplo 8) y/o el exceso de la misma favorece la eliminación y por tanto la formación de los compuestos de fórmula (V). Por otro lado, bases más débiles no pueden efectuar la eliminación y favorecen la formación de compuestos de fórmula (IV). Otras condiciones que pueden favorecer la formación de compuestos de fórmula (IV) son el uso de menor cantidad de base y menores tiempos de reacción.

Según una realización particular, la base selecciona del grupo que consiste en fosfacenos (Pl, P2, P3 y P4) y bases relacionadas como la base de Verkade; DBU; DABCO; aminas alifáticas cíclicas como la piridina, 4-dimetilaminopiridinapiperidina o la morfolina; trialquilaminas como la trietilamina o la diisopropilamina. De acuerdo con una realización particular, dichas aminas se soportan sobre soportes poliméricos. De acuerdo con una realización particular la base es DBU.

En una realización particular, el compuesto de fórmula (V) o de fórmula (IV) obtenido se hace reaccionar en medio ácido en presencia de un reactivo que se selecciona del grupo formado por HOR ₆ , HSR ₆ , Se-arilo, arilo-Se-Se-arilo, HN(Re) ₂ , N(Rs) ₃ y -NHR ₇ , en donde

Re se selecciona del grupo que consiste en alquilo sustituido o no sustituido, cicloalquilo sustituido o no sustituido, alquenilo sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, arilalquilo sustituido o no sustituido y heterociclilo sustituido o no sustituido; y

R ₇ se selecciona del grupo que consiste en alquilo sustituido o no sustituido, cicloalquilo sustituido o no sustituido, alquenilo sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, arilalquilo sustituido o no sustituido, heterociclilo sustituido o no sustituido, -O-alquilo, -O-arilo, -O-arilalquilo, O-(C=O)-alquilo, O-(C=O)-arilo y O- (C=O)- arilalquilo.

Esta realización permite el intercambio del grupo Y, para luego obtener distintos derivados. La naturaleza de dicho medio ácido no es de especial importancia, y cualquier sistema ácido es apropiado. Ejemplos no limitantes de sustancias que pueden dar lugar a un medio ácido son el ácido /?-toluensulfónico (/?-TsOH) o similares (por ejemplo, Ácido camforsulfónico), ácidos inorgánicos como el clorhídrico o el sulfúrico, o materiales ácidos como algunas zeolitas. Dichos ácidos pueden estar soportados en soportes poliméricos. Un aspecto adicional de la presente invención es un procedimiento para la obtención de un compuesto de fórmula (VI), estereoisómeros, sales o solvatos del mismo, que comprende hacer reaccionar un compuesto de fórmula (V) en medio ácido en presencia de un reactivo que se selecciona del grupo formado por HOR ₆ , HSR ₆ , Se-arilo, arilo-Se- Se-arilo, HN(Re) ₂ , N(Rβ) ₃ y -NHR ₇ , en donde R ₆ y R ₇ son tal y como se han definido arriba.

Esta reacción puede también producir compuestos de fórmula (IX), estereoisómeros, sales o solvatos del mismo, procedimiento que también constituye un aspecto de la invención. Ver ejemplo 11 más abajo. Otro aspecto de la presente invención es un procedimiento para la obtención de un compuesto de fórmula (VII), estereoisómeros, sales o solvatos del mismo, que comprende hacer reaccionar un compuesto de fórmula (V) con una base. Dicha reacción supone la eliminación del grupo Y, y será por lo tanto más efectiva cuanto mejor grupo saliente sea Y. En una realización particular, la reacción se realiza sobre un compuesto de fórmula (V) en donde Y es un grupo amonio, es decir, un grupo de fórmula -+N(Ri) ₃ . Un aspecto adicional de la presente invención es un procedimiento para la obtención de un compuesto de fórmula (VIII), estereoisómeros, sales o solvatos del mismo, que comprende hacer reaccionar un compuesto de fórmula (IV) en medio ácido en presencia de un reactivo que se selecciona del grupo formado por HOR ₆ , HSR ₆ , Se-arilo, arilo-Se- Se-arilo, HN(Re) ₂ , N(Re) ₃ y -NHR ₇ , en donde R¿ y R ₇ son tal y como se han definido arriba.

En una realización particular, los procedimientos descritos comprenden también la desprotección simultánea de R9 y Rio. En una realización particular, los procedimientos descritos comprenden la introducción de un grupo -Se-arilo, preferiblemente mediante el uso de bromuro de fenilselenio, en la posición 9, y opcionalmente su posterior reacción con un grupo de fórmula ORs, en donde Rs se selecciona del grupo formado por -(C=O)Re y -NHR ₆ , en donde R¿ es tal y como se ha definido arriba.

Un aspecto adicional de la invención lo constituye un procedimiento para la síntesis de un compuesto de fórmula (XII) que comprende la reacción de un compuesto de fórmula (XI) en presencia de una base. De acuerdo con una realización particular, y en analogía con la síntesis de los compuestos de fórmula (IV), la base puede seleccionarse del grupo que consiste en fosfacenos, DBU, DABCO, aminas alifáticas cíclicas y trialquilaminas, preferiblemente DBU.

Un aspecto adicional de la invención lo constituye un procedimiento para la síntesis de un compuesto de fórmula (XIII), que comprende desproteger los hidroxilos de las posiciones 8 y 10, de acuerdo con la numeración de la TTX, quitando el grupo Pr de un compuesto de fórmula (XII). Para los casos en los que Pr es un grupo protector basado en silicio, por ejemplo la desprotección puede llevarse a cabo con una fuente de fluoruro, u otro reactivo de acuerdo con lo descrito en libros de texto (e.g. Greene and Wuts "Protective Groups in Organic Synthesis", John Wiley & Sons, Inc., New Jersey, 2007). Un ejemplo de esta reacción lo constituye el ejemplo 27 más abajo.

Un aspecto adicional de la invención lo constituye un procedimiento para la síntesis de un compuesto de fórmula (XIV), que comprende hacer reaccionar un compuesto de fórmula (XII), en donde Xi es -Se-arilo o -SRi ₆ , en presencia de un peróxido, preferiblemente en presencia de hidróxido de peróxido. Bajo estas condiciones se forma el correspondiente derivado oxidado de selenio (-Se(=O)-arilo) o de sulfuro (-S(=O)-

Riβ) que da lugar a la transposición en la que participa el doble enlace entre las posiciones 4a y 5 (de acuerdo con la numeración de la TTX) y que tras hidrólisis proporciona el compuesto de fórmula (XIV). Las condiciones para realizar este tipo de transformaciones son conocidas en el estado de la técnica (ver por ejemplo Scianowski, J. Tetrahedron 2009, 65, 10162-10174; Toyofuku, M. Org. Let. 2008, 10, 3957-3960; Oshida, M. Chem. Pharm. BuIl. 2008, 56, 404-406, para el caso del Selenio, o Braveman, S. Rearragements Involving Sulfoxides The Chemistry of Sulphones and Sulphoxides, Chapter 14; Ed. John Wiley&Sons, 1988; p. 717-757, para el caso del azufre.

Por tanto, otro aspecto de la invención es un procedimiento para la síntesis de TTX que comprende la transformación de un compuesto de fórmula (XII) en un compuesto de fórmula (XIII) o de fórmula (XIV), de acuerdo con las condiciones descritas más arriba. En una realización preferida, dicho compuesto de fórmula (XII) se obtiene a partir de un compuesto de fórmula (XI) de acuerdo con las condiciones descritas más arriba. En otra realización particular, dicho compuesto de fórmula (XI) se obtiene a partir del compuesto de fórmula (X) de acuerdo con las condiciones descritas más arriba.

Otras Reacciones

Los compuestos de la invención pueden comprender distintos grupos hidroxilo, cuya configuración puede invertirse mediante una reacción de Mitsonobu. Por ejemplo ver (Mitsunobu, 0.; Synthesis, 1, 1981)

En los compuestos de formula (II), (III), (VI), (VIII), (IX), (Xa), (XI), (XII), (XIII) o (XIV) se pueden dar distintas combinaciones para los grupos Ri y R ₂ , todas las cuales se pueden obtener mediante la secuencia de reacciones descritas en PCT/EP2005/005146 and PCT/EP2005/005149, cuyo contenido se incorpora por referencia. Por ejemplo, ver esquema 3.

juntos forman un grupo =0

1. Apertura anillo

2. Protección

Esquema 3

La presencia de grupos hidroxilo vecinales permite la protección simultánea de dos o más hidroxilos. Esto puede conseguirse mediante el uso de acétales, tales como los acétales del isopropilideno, ciclohexileno, ciclopentenilo, arilmetileno, difenilmetileno, 1 ,2-diacetales tales como diespirocetales, ciclohexano-l,2-diacetales, butano-2,3- diacetales, sililenos, 1,1,3,3-tetraisopropildisiloxanilidenos o N,O-acetales. Ejemplos adicionales de grupos protectores de dioles pueden encontrase en libros de referencia como Greene and Wuts' "Protective Groups in Organic Synthesis", John Wiley & Sons, Inc., New York, 1999. También pueden formarse borolanos sobre dos grupos hidroxilo vecinales, por ejemplo utilizando ácido fenil borónico.

Una vez obtenidos los compuestos de fórmula (VI), (VIII) o (IX) en los que X es -CN, es fácil obtener el correspondiente aldehido por reducción, por ejemplo con DIBAL (ver ejemplo 13). De la misma forma, -CN (posición 4 de acuerdo con la numeración de la TTX ) en los compuestos de fórmula (XII) o (XIII) puede transformarse en distintos grupos funcionales como -COORi ₆ , -CON(Ri ₆ ) ₂ , CHO, -CH ₂ OH, CH ₂ N(Ri ₆ ) ₂ , -Se-Arilo, - Se(=O)-arilo, dicho arilo pudiendo estar opcionalmente sustituido, -S-Ri ₆ , -S(=O)Ri ₆ , - CH(ORi ₆ ) ₂ , -CH(NHRi ₆ ) CN y -CH(ORi ₆ )CN. Las condiciones para dichas transformaciones son conocidas por el experto en la materia. Por ejemplo, se puede obtener el aldehido (-CH(=O)) por reducción con DIBAL del grupo nitrilo, tal y como se menciona en el párrafo anterior. Alternativamente, puede obtenerse el grupo -CH ₂ OH por reducción del aldehido en presencia de un reductor, bien a partir del aldehido a bien a partir del nitrilo directamente. Por otro lado, pueden obtenerse el ácido (-COOH) por oxidación del nitrilo, el aldehido o el grupo -CH ₂ OH, el cual a su vez puede transformarse en distintos derivados de ácido como los esteres (-COORi ₆ ), las amidas (- CONRi ₆ ). Los correspondientes grupos -CH ₂ OH pueden también transformarse en aminas o tioles, o los aldehidos ser protegidos. Las condiciones para llevar a cabo todas estas reducciones son conocidas por el experto en la materia y se describen en libros de referencia como, por ejemplo, el capítulo 19 de "Advanced Organic Chemistry: reactions, mechanisms and structures" , March, J., 5th edition, Wiley-interscience. La obtención de un grupo -Se-arilo o -SRi ₆ a partir del correspondiente arilo también puede realizarse siguiendo métodos conocidos. Por ejemplo, la reacción del correspondiente hidroxilo con un compuesto de fórmula L-Se-arilo en presencia de una base. El grupo L es un grupo saliente, por ejemplo, nitrilo o isoindole-l,3-diona. Las bases pueden ser aminas o trialquilfósforo, por ejemplo, n-Bu3P. Más condiciones que pueden dar lugar a esta transformación se pueden encontrar por ejemplo en Swamy, K.C.K.; Kumar, N.N.B.; Balaraman, E.; Kumar, K.V.P.P. Chem. Rev. 2009, 109, 2551- 2651; Brian, A.; Sivaramakrishhnan, A.; Naka, T.; Koide, K. J. Am. Chem. Soc. 2006, 128, 2792-2793; Brian, A.; Sivaramakrishhnan, A.; Naka, T.; Koide, K. J. Am. Chem. Soc. 2007, 129, 2648-2659; Bourland, T.C.; Cárter, R.G.; Yokochi, A.F.T. Org. Biomol. Chem. 2004, 2, 1315-1329. La introduction del grupo -SRl 6 también se puede de acuerdo con las condiciones que se describen en Umezawa, T.; Hayashi, T.; Sakai, H.; Teramoto, H.; Yoshikawa, T.; Izumida, M.; Tamatani, Y.; Hirose, T.; Ohfune, Y.; Shinada, T. Org. Lett. 2006, 8, 4971-4974; o en Tsay, S.-C; Lin, L.C.; Furth, P.A.;

Shum, CC; King, D.B. Synthesis 1993, 329-334; o en Karikubo, T.; Ogasawara, K. J. Chem. Soc. Chem. Commun. 1995, 1951-1952.

La invención se ilustrará con más detalle mediante los ejemplos, que no deben interpretarse como limitantes del alcance de las reivindicaciones. EJEMPLOS

Abreviaturas y Acrónimos (obtenido de Guía para Autores; Abreviaturas y Acrónimos J. Org. Chem. 2008, 78, 10A) Ac: acetilo M ⁺ : pico molecular

Bn: bencilo Me: metilo

Bu: butilo mg: miligramo cat.: catalítico mi: mililitro

¹³ C-RMN resonancia magnética mmol: milimol nuclear de carbono m/z: relación masa/carga d: doblete P.f.: punto de fusión

DBU: 1,8- ppm: partes por millón diazabiciclo[5 .4.0]undec-7-eno Ph: fenilo dd: doblete de dobletes Pyr: piridina ddd: doblete de doblete de Rto.: rendimiento dobletes s: singlete

DMF: Λ/,Λ/-dimetilformamida sat.: disolución acuosa saturada

DMSO: dimetilsulfóxido t: triplete dt: doblete de tripletes t.a.: temperatura ambiente

Et: etilo TBAF: fluoruro de g: gramo tetrabutilamonio

Hz: hertzio TBDMS: terc-butildimetilsililo

IR: espectroscopia de infrarojo TfO: trifluorometanosulfonato

/: constante de acoplamiento THF: tetrahidro furano

LRMS: espectroscopia de masas de TMS: trimetilsililo baja resolución Ts: /?-toluensulfonilo (Tosilo) m: multiplete /J-TsOH: ácido /?-toluensulfónico

M: molaridad mM: milimolar

Nomenclatura y Numeración

Las estructuras de tipo ciclohexano se nombrarán en los ejemplos que se muestran a continuación como derivados de 2,3-dihidroxi-l-aminociclohexano y se numerarán de acuerdo a la numeración que se indica a continuación, con independencia del resto de sustituyentes que presente la molécula en cualquier posición.

2,3-dihidroxi-l- aminociclohexano rac-(lR,2S,3S,4S,5S,6R>

5-bromo-2,3,4-trihidroxi-

2,3-0-(l,l _? 3 _? 3-tetraisopropildisiloxano-l,3-diil)- l-(2-oxoetil)-l-(benciloxiamino)ciclohexano-6-carbonitrilo

Las estructuras bicíclicas no espiránicas sintetizadas, se nombrarán y numerarán como se indica a continuación, que no coincide con las reglas establecidas por la IUPAC

9-oxabiciclo[3.2.2]nonano 9-oxabiciclo[3.2.2]non-5-eno

9

9-oxabiciclo[3.3.1]non-5-eno 9-oxabiciclo[4.3.0]non-5-eno

rac-(25,35,8/f)-l-(benciloxiamino)-2,3,8-trihidroxi-2,3-0-(l ,l,3,3-tetraisopropildisiloxan-l,3- diil)-9-oxabiciclo[3.2.2]non-5-eno-6-carbonitrilo

Mientras no se indique lo contrario, los productos quirales sintetizados son racémicos (rae) y se representarán gráficamente mediante la figura de uno de sus enantiómeros. Materiales y Métodos

Todas las reacciones fueron realizadas bajo atmósfera de argón, excepto las indicadas en cada caso. Los reactivos y disolventes utilizados provienen de las casas comerciales Aldrich, Fluka, Merck, Sigma, Acros, Lancaster, SDS o Scharlau, y fueron purificados por procedimientos habituales (ver Armarego, W. L.; Perrin, D. D. Purification of Laboratory Chemicals; Butterworth-Heinemann: Oxford, 1996.) cuando fue necesario. Los disolventes empleados fueron destilados y secados bajo atmósfera de argón como se indica a continuación: CH ₂ Cl ₂ , tolueno, benceno, DMSO y DMF sobre CaH ₂ (posteriormente se utilizó benceno y DMF secos comercializados por Aldrich y Fluka, respectivamente); THF (presecado con KOH) y Et ₂ O sobre Na/benzofenona; CH ₃ CN, EtOH y MeOH sobre tamiz molecular de 4Á de diámetro de poro (previamente activado a 150 ⁰ C). El CCl ₄ comercializado por Merck se utilizó sin destilar. El dioxano se desgasificó pasando una corriente de argón antes de ser utilizado. La Et ₃ N, /-Pr ₂ EtN, /-Pr ₂ NH y piridina fueron destiladas bajo atmósfera de argón sobre CaH ₂ . Se utilizó el n-BuLi comercializado por Aldrich como una disolución 1.6M en hexanos. El m-CPBA comercializado al 57-80% en peso por Aldrich se utilizó considerando que su pureza era del 57%. El NaH (al 60% en aceite mineral) fue lavado dos veces con hexano bajo atmófera de argón inmediatamente antes de ser utilizado. La Celita utilizada fue Celita-545 comercializada por SDS. Se utilizó DBU-polimer bound comercializada por Aldrich, con referencia 595128.

La purificación de los productos de reacción se realizó por cromatografía en columna bajo presión (cromatografía flash), utilizando como fase estacionaria gel de sílice 60 Merck (con un tamaño de partícula 230-400 mesh) y como fase móvil disolventes previamente destilados. El eluyente empleado se indica en cada caso y las proporciones de la mezcla de disolventes utilizadas son siempre volumen/volumen.

El seguimiento de las reacciones se realizó por cromatografía en placa fina (TLC), empleando cromatofolios de gel de sílice 60 F254 comercializados por Merck. El revelado de las placas se realizó empleando vapores de yodo, disolución de 2,4- dinitrofenilhidracina al 2% en EtOH (con un 0.04% en volumen de H ₂ SO ₄ 97%), disolución de ácido fosfomolíbdico al 10% en EtOH y visor de luz UV (254 y 366 nm).

Los espectros de resonancia magnética nuclear de ¹ H y ¹³ C (completamente desacoplados) se realizaron a temperatura ambiente en el disolvente indicado en cada caso (CDCl ₃ , CD ₃ OD y DMSO-¿4) empleando los siguientes aparatos: Varían Gemini- 200 (200 MHz), Varían INOVA-300 (300 MHz), Bruker Avance-300 (300 MHz) y Varían INOVA-400 (400 MHz). Los valores de los desplazamientos químicos se expresan en partes por millón (δ, ppm), utilizando como referencia interna la señal residual del disolvente: CDCl ₃ , 7.26 ppm ( ¹ H-RMN) y 77.0 ppm ( ¹³ C-RMN); CD ₃ OD, 3.31 ppm ( ¹ H-RMN) y 49.0 ppm ( ¹³ C-RMN).

Los espectros ¹ H-RMN se describen indicando el número de protones y la multiplicidad aparente de cada señal. Las constantes de acoplamiento (J) son las aparentes y se expresan en Hz. Se han empleado las siguientes abreviaturas: s (singlete), d (doblete), t (triplete), c (cuadruplete), q (quintuplete) y m (multiplete). La asignación de las señales de RMN están apoyadas en técnicas de doble resonancia y experimentos bidimensio nales: DEPT (Distorsionless Enhancement by Polarization Transfer), HMBC (Heteronuclear Multiple-Bond Connectivities), HSQC (Heteronuclear Single Quantum Correlation) y nOesy {nuclear Overhauser effect spectroscopy). Los puntos de fusión (P. f.) se midieron en un microscopio Kofler marca Reichert.

Los espectros de infrarrojo (IR) se registraron en los espectrofotómetros Perkin-Elmer modelos 681 y FT-IR Spectrum One, y las frecuencias (v) de los máximos de absorción se expresan en cm ¹ . Las muestras se analizaron como películas entre cristales de NaCl o en pastillas de KBr. Los espectros de masas de baja resolución (LRMS) se registraron: (1) por inyección directa de la muestra en un espectro fotómetro Hewlett Packard 5973 MSD usando la técnica de ionización por impacto electrónico (EI) con una energía de ionización de 70 eV; o (2) en un espectrofotómetro Hewlett Packard LCMS 1100 MSD (analizador cuadrupolar acoplado a un HPLC) usando la técnica de ionización química por electroespray (API-ES) en modos positivo o negativo, aplicando un voltaje capilar de 4000 V, una temperatura de secado de 330 ⁰ C y usando como portador una mezcla [1 :1] H ₂ OZMeOH con 1% AcOH. Los datos obtenidos están expresados en unidades de masa (m/z) y los valores entre paréntesis corresponden a las intensidades relativas respecto al pico base (100%). El pico molecular se especifica como M ⁺ .

Ejemplo 1

Preparación de rac-(4/f,5S,6S)-l-benciloxi-8-bromo-5,6-dihidroxi-5,6-0-(l, 1,3,3- tetraisopropildixiloxano-l,3-diil)-l-azaespiro[3.5]non-8-eno -2,7-diona.

Sobre una disolución de rαc-(4i?,55',65)-l-benciloxi-5,6-dihidroxi-5,6-O-(l,l,3,3- tetraisopropildixiloxano-l,3-diil)-l-azaespiro[3.5]non-8-eno -2,7-diona (200 mg, 0.376 mmol, 1.0 eq) en CH ₂ Cl ₂ (1 mi) se adicionó a 0 ⁰ C una disolución de Br ₂ (64.9 mg, 0.40 mmol, 1.08 eq.) en CH ₂ Cl ₂ (1 mi). La mezcla resultante se agitó a 0 ⁰ C durante 10 minutos. Pasado ese tiempo, se adicionó gota a gota Et ₃ N (57.08 mg, 0.564 mmol, 1.5 eq). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 10 minutos. A continuación, se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se trituró con Et ₂ O, se filtró a través de Celita y se eliminó el disolvente a presión reducida. El producto se purificó mediante cromatografía en columna (Hexano/AcOEt; 6: 1), obteniéndose (210 mg; rto.: 92%) rαc-(4i?,55',65)-l-benciloxi-8-bromo-5,6-dihidroxi-5,6-O-(l ,l,3,3-tetraisopropil dixiloxano-l,3-diil)-l-azaespiro[3.5]non-8-eno-2,7-diona como un aceite marrón. 1H-RMN (δ): 7.37 (5H, m, Ar-H); 6.40 (IH, s); 4.96 (IH, m); 4.84 (IH, d, J = 3.0 Hz); 4.41 (IH, d, J = 3.0 Hz); 3.21 (IH, d, J = 14.2 Hz); 2.61 (IH, d, J = 14.2 Hz); 1.04 (28H, m).

LRMS (API-ES ⁺ ): m/z 609 (M-H) ⁺ , 611 (M+H) ⁺ , 612 (M+2H) ⁺ , 628 (M+H ₂ 0) ⁺ , 629 (M+H ₂ O+H) ⁺ .

Ejemplo 2

Preparación de rac-(4/f,5S,6S,8/f,9S)-l-benciloxi-8-bromo-9-ciano-5,6-dihid roxi- 5,6-0-(l,l,3,3-tetraisopropildixiloxano-l,3-diil)-l-azaespir o[3.5]nonano-2,7-diona

Sobre una disolución de rαc-(4i?,55',65)-l-benciloxi-5,6-dihidroxi-5,6-O-(l,l,3,3- tetraisopropildixiloxano-l,3-diil)-l-azaespiro[3.5]non-8-eno -2,7-diona (2 g, 3.76 mmol, 1.0 eq) en THF (30 mi) se adicionó a 0 ⁰ C Et ₂ AlCN (501.48 mg, 4.512 mmol, 1.2 eq.). La mezcla se calentó a 80 ⁰ C durante 3 horas. Pasado ese tiempo, la mezcla se enfrió a 0 ⁰ C y se adicionó NBS (1.003 g, 5.64 mmol, 1.5 eq.), en porciones. La disolución resultante se agitó a t.a. durante 15 minutos. Pasado ese tiempo, se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se trituró con Et ₂ O, se filtró a través de Celita y se eliminó el disolvente a presión reducida. El producto, rac-(4R,5S,6S,$R,9S)-l- benciloxi-8-bromo-9-ciano-5,6-dihidroxi-5,6-O-(l , 1 ,3,3-tetraisopropildixiloxano-l ,3- diil)-l-azaespiro[3.5]nonano-2,7-diona, se empleó en la siguiente reacción sin purificar (el rendimiento se ha considerado cuantitativo).

¹ H-RMN (δ): 7.46 (5H, m, Ar-H); 5.30 (IH, d, J= 11.1 Hz); 5.19 (IH, d, J= 11.1 Hz); 5.07 (IH, dd, J= 1.1, 2.3 Hz); 4.34 (IH, d, J= 2.3 Hz); 4.22 (IH, dd, J= 1.1, 12.6 Hz); 3.88 (IH, d, J = 12.6 Hz); 3.06 (IH, d, J = 14.5 Hz); 2.85 (IH, d, J = 14.5 Hz); 1.25- 0.82 (28H, m).

LRMS (API-ES ⁺ ): m/z 581 (M-Br+Na) ⁺ , 661 (M+Na+H) ⁺ .

Ejemplo 3

Preparación de rac-(lR,2S,3S,4R,5S,6R)-5-bromo-l-(2-oxoetil)-2,3,4-trihidro xi-2,3- O-íl^^^-tetraisopropildisiloxan-l^-diilí-l-íbenciloxiamin oJciclohexano-ó- carbonitrilo.

DIBAL

Sobre una disolución de rαc-(4i?,55',65',8i?,95)-l-benciloxi-8-bromo-9-ciano-5,6- dihidroxi-5,6-O-(l,l,3,3-tetraisopropildixiloxano-l,3-diil)- l-azaespiro[3.5]nonan-2,7- diona (2.39 g, 3.76 mmol, 1 eq.) en THF (50 mi) se adicionó, a 0 ⁰ C, DIBAL (2.169 g, 15.04 mmol, 4 eq.). La mezcla se agitó a 0 ⁰ C durante 3 minutos. Pasado ese tiempo, se adicionó AcOEt (30 mi). La mezcla resultante se agitó a 0 ⁰ C durante 10 minutos. A continuación se añadió H ₂ O (30 mi). Se separaron las fases, y la fase acuosa se extrajo con AcOEt (4 x 20 mi). La fase orgánica se secó con Na ₂ SO ₄ anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El producto se purificó mediante cromatografía en columna (Hexano/AcOEt, 9: 1), obteniéndose (866 mg, rto.: 32%) rac-(lR,2S,3S,4R,5S,6R)-5-bvomo-l-(2-oxoQÚΪ)-2,3,4-tñhidv oxi-2,3-O-(l,l,3,3- tetraisopropildisiloxan-l,3-diil)-l-(benciloxiamino)ciclohex ano-6-carbonitrilo como un sólido blanco.

Pf : 103-104 ⁰ C.

¹ H-RMN (δ): 9.74 (IH, s); 7.36 (5H, m, Ar-H); 6.07 (IH, s); 4.77 (IH, d, J= 11.7 Hz);

4.68 (IH, d, J = 11.7 Hz); 4.49 (IH, m); 4.35 (IH, dd, J = 2.5, 11.8 Hz); 4.16 (IH, m); 4.15 (IH, m); 3.54 (IH, d, J= 11.8 Hz); 3.50 (IH, d, J= 18.5 Hz); 2.91 (IH, d, J= 4.6

Hz); 2.87 (IH, d, J= 18.5 Hz); 1.047 (28H, m).

¹³ C-RMN (^): 199.3, 136.2, 128.8, 128.5, 128.3, 118.3, 76.7, 73.1, 72.5, 71.3, 66.1,

47.6, 43.7, 36.3, 17.6, 17.4, 17.4, 17.2, 17.1, 17.1, 17.0, 17.0, 13.9, 13.4, 13.0, 12.5.

LRMS (API-ES ⁺ ): m/z 641 (M+H) ⁺ , 1304 (2M+Na+H) ⁺ . IR (KBr): v 3523, 2946, 2867, 2246, 1720, 1464, 1388, 1248, 1162, 1014, 885, 754, 698 cm ^"1 .

Ejemplo 4

Preparación de rac-(4R,5S,6S,9S)-l-benciloxi-9-ciano-5,6,7-trihidroxi-5,6-0 - (l,l,3,3-tetraisopropildixiloxano-l,3-diil)-l-azaespiro[3.5] nonan-2-ona.

Sobre una disolución de rαc-(4i?,55',65',8i?,95)-l-benciloxi-8-bromo-9-ciano-5,6- dihidroxi-5,6-O-(l,l,3,3-tetraisopropildixiloxano-l,3-diil)- l-azaespiro[3.5]nonan-2,7- diona (239 mg, 0.376 mmol, 1.0 eq) en EtOH (10 mi) se adicionó, a 0 ⁰ C, NaBH ₄ (15.65 mg, 0.41 mmol, 1.1 eq.). La mezcla se agitó a 0 ⁰ C durante 30 minutos. Pasado ese tiempo, se adicionó a 0 ⁰ C H ₂ O (20 mi). Se separaron las fases, y la fase acuosa se extrajo con AcOEt (3 x 10 mi). La fase orgánica se secó con Na ₂ SO ₄ anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El producto se purificó mediante cromatografía en columna (Hexano/AcOEt, 9:1), obteniéndose (44 mg, rto.: 21%) rac- (4i?,55',65',95)-l-benciloxi-9-ciano-5,6,7-trihidroxi-5,6-O- (l,l,3,3-tetraisopropil dixiloxano-l,3-diil)-l-azaespiro[3.5]nonan-2-ona como un sólido blanco. 1H-RMN (δ): 7.41 (5H, m, Ar-H); 5.04 (IH, d, J = 12.0 Hz); 4.87 (IH, d, J = 12.0 Hz); 4.46 (IH, m); 4.09 (IH, d, J = 3.1 Hz); 3.90 (IH, d, J = 3.1 Hz); 3.32 (IH, m); 3.10 (IH, d, J= 14.1 Hz); 2.66 (IH, d, J= 14.1 Hz); 1.69 (2H, m); 1.05 (28H, m). LRMS (API-ES ⁺ ): m/z 561 (M+H) ⁺ , 583 (M+Na) ⁺ , 1144 (2M+Na+H) ⁺ .

Ejemplo 5 Preparación de rac-(lR,2S,3S,4R,5S,6R)-5-bromo-l-(2-hidroxietil)-2,3,4-trih idroxi- l^-O-íl^^^-tetraisopropildisiloxan-l^-diilí-l-íbenciloxia minoJciclohexano-ó- carbonitrilo.

NaBIL

Sobre una disolución de rαc-(li?,25',35',4i?,55',6i?)-5-bromo-l-(2-oxoetil)-2,3,4- trihidroxi-2,3-O-( 1 , 1 ,3 ,3-tetraisopropildisiloxan- 1 ,3-diil)- 1 -(benciloxiamino)- ciclohexano-6-carbonitrilo (0.4 g, 0.625 mmol, 1 eq.) en EtOH (16 mi), a 0 ⁰ C, se adicionó NaBH ₄ (26.0 mg, 0.687 mmol, 1.1 eq.). La mezcla resultante se agitó a 0 ⁰ C durante 5 minutos. Pasado ese tiempo, se adicionó una disolución acuosa de NaHPO ₄ 0.1M (8 mi) y AcOEt (10 mi). Se separaron las fases, y la fase acuosa se extrajo con AcOEt (3 x 5 mi). La fase orgánica se secó con Na ₂ SO ₄ anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El producto se purificó mediante cromatografía en columna (Hexano/AcOEt, 8 : 1 ), obteniéndose (330 mg, rto . : 82%) rac- (li?,2 _ι S,3 _ι S,4i?,5 _ι S,6i?)-5-bromo-l-(2-hidroxietil)-2,3,4-trihidroxi-2,3- O-(l, 1,3,3- tetraisopropildisiloxan- 1 ,3-diil)- 1 -(benciloxiamino)ciclohexano-6-carbonitrilo como un aceite incoloro.

¹ H-RMN (δ): 7.36 (5H, m, Ar-H); 5.93 (IH, s); 4.72 (2H, s, -OCH ₂ Ph); 4.46 (IH, d, J = 2.4 Hz); 4.45 (IH, dd, J= 2.7, 11.7 Hz); 4.33 (IH, m); 4.19 (IH, m); 3.89 (IH, m); 3.50 (IH, d, J = 11.7 Hz); 3.15 (IH, d, J = 5.6 Hz); 2.34 (IH, m); 2.26 (IH, m); 2.13 (IH, m); 1.06 (28H, m). ¹³ C-RMN (δ): 135.8, 128.7, 128.6, 128.5, 118.6, 77.0, 73.6, 73.4, 71.3, 66.3, 58.1, 49.1, 37.9, 36.3, 17.7, 17.4, 17.4, 17.3, 17.2, 17.2, 17.1, 17.1, 14.1, 13.5, 13.2. LRMS (API-ES ⁺ ): m/z 643 (M+H) ⁺ , 644 (M+2H) ⁺ , 645 (M+3H) ⁺ , 665 (M+Na+H) ⁺ , 1308 (2M+Na+H) ⁺ . IR (KBr): v 3468,3027, 2945, 2890, 2867, 2247, 1464, 1386, 1160, 1013, 885, 697 cm ^"1 .

Ejemplo 6

Preparación de rac-(lR,2S,3S,4R,5S,6R)-5-bromo-l-(2-ím>butildimetilsili loxietil)- 2,3,4-trihidroxi-2,3-0-(l,l,3,3-tetraisopropildisiloxan-l,3- diil)-l- (benciloxiamino)ciclohexano-6-carbonitrilo.

TBDMSCl imidazo?

Sobre una disolución de rαc-(li?,25',35',4i?,55',6i?)-5-bromo-l-(2-hidroxietil)-2,3 ,4- trihidroxi-2,3-O-( 1 , 1 ,3 ,3-tetraisopropildisiloxan- 1 ,3-diil)- 1 - (benciloxiamino)ciclohexano-6-carbonitrilo (330 mg, 0.514 mmol, 1 eq.) e imidazol (115 mg, 1.697 mmol, 3.3 eq.) en DMF (12 mi) se adicionó a 0 ⁰ C una disolución de TBDMSCl (303 mg, 1.697 mmol, 3.3 eq.) en DMF (5 mi). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. Pasado ese tiempo, se adicionó H ₂ O (15 mi) y AcOEt (15 mi). Se separaron las fases, y la fase acuosa se extrajo con AcOEt (4 x 7 mi). La fase orgánica se lavó con una disolución acuosa de CuSO ₄ sat. (3 x 15 mi) y Brine (4 x 7 mi), se secó con Na ₂ SO ₄ anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El producto se purificó mediante cromatografía en columna (Hexano/AcOEt, 30: 1), obteniéndose (264 mg, rto.: 68%) rαc-(li?,25',35',4i?,55',6i?)-5-bromo-l-(2-terc- butildimetilsililoxietil)-2,3,4-trihidroxi-2,3-O-(l,l,3,3-te traisopropildisiloxan-l,3-diil)- l-(benciloxiamino)ciclohexano-6-carbonitrilo como un aceite incoloro. 1H-RMN (δ): 7.36 (5H, m, Ar-H); 6.00 (IH, s); 4.67 (IH, d, J= 15.0 Hz); 4.65 (IH, d, J = 15.0 Hz); 4.43 (IH, s _anch o); 4.37 (2H, m); 4.15 (IH, m); 3.92 (2H, m); 3.52 (IH, d, J = 11.9 Hz); 3.21 (IH, d, J= 5.6 Hz); 2.32 (IH, dt, J= 7.4, 13.6 Hz); 2.04 (IH, dt, J= 6.7, 7.4 Hz); 1.06 (28H, m); 0.86 (9H, s); 0.03 (6H, s). 1 ³ C-RMN (δ): 136.4, 128.6, 128.5, 128.3, 118.7, 77.2, 76.7, 74.3, 73.7, 71.3, 66.1, 59.3, 49.2, 37.5, 37.4, 36.1, 25.8, 18.1, 17.8, 17.4, 17.3, 17.3, 17.2, 17.1, 17.0, 14.2, 13.4,

13.2, 13.1, -5.5.

LRMS (API-ES ⁺ ): m/z 760 (M+2H) ⁺ , 782 (M+Na+H) ⁺ , 1540 (2M+Na+H) ⁺ .

> Ejemplo 7

Reacción de rac-(lR,2S,3S,4R,5S,6R)-5-bromo-l-(2-oxoetil)-2,3,4-trihidro xi-2,3-0- (1,1 ,3,3-tetraisopropildisiloxan- 1 ,3-diil)- l-(benciloxiamino)ciclohexano-6- carbonitrilo con DBU.

Sobre una disolución de rac-(lR,2S,3S,4R,5S,6R)-5-bromo-l-(2-oxoetil)-2,3,4- trihidroxi-2,3-O-( 1 , 1 ,3 ,3-tetraisopropildisiloxan- 1 ,3-diil)- 1 -

(benciloxiamino)ciclohexano-6-carbonitrilo (100 mg, 0.156 mmol, 1 eq.) en CH ₂ Cl ₂ (2 mi) a 0 ⁰ C se adicionó DBU (24 mg, 0.156 mmol, 1 eq.). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. Pasado ese tiempo, se adicionó CH ₂ Cl ₂ (10 mi) y la mezcla se lavó con una disolución acuosa saturada de CuSO ₄ (1 x 5 mi) y Brine (I x 5 mi), se secó con Na ₂ SO ₄ anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El producto se purificó mediante cromatografía en columna (Hexano/AcOEt, 8 : 1), obteniéndose (36 mg, rto. : 36%) rαc-(25',35',55',6i?,8i?)-l-(benciloxiamino)-5- bromo-2,3,8-trihidroxi-2,3-O-(l , 1 ,3,3-tetraisopropildisiloxan-l ,3-diil)-9- oxabiciclo[3.2.2]nonano-6-carbonitrilo, como un aceite incoloro, y (34 mg, rto.: 39%) rαc-(2 _ι S',35',8i?)-l-(benciloxiamino)-2,3,8-trihidroxi-2,3-O- (l, 1,3,3- tetraisopropildisiloxan-l,3-diil)-9-oxabiciclo[3.2.2]non-5-e no-6-carbonitrilo, como un sólido blanco.

rac-(2S,3S,5S,6R,8R)-l-(Benciloxiamino)-5-bromo-2,3,8-tri hidroxi-2,3-0-(l,l,3,3- tetraisopropildisiloxan-l,3-diil)-9-oxabiciclo[3.2.2]nonano- 6-carbonitrilo.

¹ H-RMN (δ): 7.35 (5H, m, Ar-H); 5.87 (IH, s _anc ho); 5.47 (IH, m); 4.76 (IH, d, J= 17.3 Hz); 4.72 (IH, d, J= 17.3 Hz); 4.61 (IH, dd, J= 2.5, 11.7 Hz); 4.39 (2H, m); 4.04 (IH, m); 3.60 (IH, d, J = 11.7 Hz); 2.66 (IH, m); 2.31 (IH, dd, J = 5.7, 14.1 Hz); 2.03 (IH, m); 1.03 (28H, m).

LRMS (API-ES ⁺ ): m/z 623 (M-H ₂ O) ⁺ ,624 (M-H ₂ (HH) ⁺ , 625 (M-H ₂ O+2H) ⁺ , 665 (M+Na+H) ⁺ .

(2S,3S,8R)-l-(benciloxiamino)-2,3,8-trihidroxi-2,3-0-(l,l ,3,3- tetraisopropildisiloxan-l,3-diil)-9-oxabiciclo[3.2.2]non-5-e no-6-carbonitrilo.

Pf.: 148-149 ⁰ C.

¹ H-RMN (δ): 7.33 (5H, m, Ar-H); 6.53 (IH, dd, J= 1.8, 3.6 Hz); 5.87 (IH, s); 5.48 (IH, dd, J = 5.3, 9.3 Hz); 4.79 (IH, d, J = 11.7 Hz, -OCH ₂ Ph); 4.73 (IH, d, J = 11.7 Hz, - OCH ₂ Ph); 4.65 (2H, m); 4.43 (IH, dd, J = 2.1, 4.9 Hz); 3.68 (IH, d, J = 8.0 Hz); 2.47

(IH, dd, J= 5.3, 13.3 Hz); 1.81 (IH, d, J= 13.3 Hz); 1.06 (28H, m).

¹³ C-RMN (^): 148.6, 136.5, 128.6, 128.4, 128.3, 116.2, 113.5, 99.3, 79.1, 77.4, 73.4,

72.2, 67.4, 42.4, 17.4, 17.4, 17.2, 17.2, 17.0, 17.0, 17.0, 14.0, 13.6, 12.9, 12.4.

LRMS (API-ES ⁺ ): m/z 543 (M-H ₂ O+H) ⁺ , 544 (M-H ₂ O+2H) ⁺ , 545 (M-H ₂ O+3H) ⁺ , 583 (M+Na) ⁺ .

IR (KBr): v 3448, 3275, 2946, 2867, 2233, 1639, 1462, 1363, 1246, 1189, 1141, 1070,

1011, 884, 803, 695, 619 Cm ^"1 .

Ejemplo 8 Procedimientos optimizados para la preparación de rac-(2S,3S,8/f)-l- (benciloxiamino)-2,3,8-trihidroxi-2,3-0-(l,l,3,3-tetraisopro pildisiloxan-l,3-diil)-9- oxabiciclo[3.2.2]non-5-eno-6-carbonitrilo.

-Procedimiento 1.

Sobre una disolución de rac-(lR,2S,3S,4R,5S,6R)-5-bvomo-l-(2-oxoQÚl)-2,3,4- trihidroxi-2,3-0-( 1 , 1 ,3 ,3-tetraisopropildisiloxan- 1 ,3-diil)- 1 - (benciloxiamino)ciclohexano-6-carbonitrilo (214 mg, 0.333 mmol, 1 eq.) en CH ₂ Cl ₂ (4 mi) a 0 ⁰ C se adicionó DBU (67 mg, 0.434 mmol, 1.3 eq.). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. Pasado ese tiempo, se adicionó CH ₂ Cl ₂ (10 mi) y la mezcla se lavó con una disolución acuosa saturada de ácido cítrico (2 x 5 mi), se secó con Na ₂ SO ₄ anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El producto se purificó mediante cromatografía en columna (Hexano/AcOEt, 8:1), obteniéndose (108 mg, rto.: 58%) rαc-(25',35',8i?)-l-(benciloxiamino)-2,3,8-trihidroxi- 2,3-O-(l,l,3,3-tetraisopropildisiloxan-l,3-diil)-9-oxabicicl o[3.2.2]non-5-eno-6- carbonitrilo como un sólido blanco.

-Procedimiento 2.

Sobre una mezcla de rαc-(li?,25',35',4i?,55',6i?)-5-bromo-l-(2-oxoetil)-2,3,4-t rihidroxi- 2,3-O-(l , 1 ,3,3-tetraisopropildisiloxan- 1 ,3-diil)- 1 -(benciloxiamino)ciclohexano-6- carbonitrilo (553 mg, 0.862 mmol, 1 eq.) y DBU-polymer bound (1.5g, 1.724 mmol, 2.0 eq.) a 0 ⁰ C se adicionó CH ₂ Cl ₂ (11 mi). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 11 horas. Pasado ese tiempo, la mezcla se filtró en un büschner con AcOEt, y se eliminó el disolvente a presión reducida. El producto se purificó mediante cromatografía en columna (Hexano/AcOEt, 8: 1), obteniéndose (256 mg, rto.: 53%) rac-(25,3iS ^r ,8i?)-l-(benciloxiaπώio)-2,3,8-trihidiOxi-2,3-O-(l, 1,3,3- tetraisopropildisiloxan-l,3-diil)-9-oxabiciclo[3.2.2]non-5-e no-6-carbonitrilo como un sólido blanco.

Ejemplo 9

Preparación de rac-(2S,3S,5S,6/?,8/?)-l-(benciloxiamino)-5-bromo-2,3,8-trih idroxi- 9-oxabiciclo [3.2.2] nonano-6-carbonitrilo.

Sobre una disolución de rαc-(25',35',55',6i?,8i?)-l-(benciloxiamino)-5-bromo-2,3,8- trihidroxi-2,3-O-(l,l,3,3-tetraisopropildisiloxan-l,3-diil)- 9-oxabiciclo[3.2.2]nonano-6- carbonitrilo (31 mg, 0.054 mmol, 1 eq.) en MeOH (3 mi) se adicionó 3HF-Et ₃ N (310 mg, 1.928 mmol, 36 eq.). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 24 horas. Pasado ese tiempo, se adicionó una disolución acuosa de Na ₂ HPO ₄ (0.1M, 3 mi) y AcOEt (6 mi). Se separaron las fases, y la fase acuosa se extrajo con AcOEt (3 x 5 mi). La fase orgánica se secó con Na ₂ SO ₄ anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El producto se purificó mediante cromatografía en columna (Hexano/AcOEt, 1 :8), obteniéndose (8 mg, rto. : 37%) rac-(2S,3S,5S,6R$R)-l- (benciloxiamino)-5-bromo-2,3,8-trihidroxi-9-oxabiciclo[3.2.2 ]nonano-6-carbonitrilo. ¹ H-RMN (δ): 7.34 (5H, m); 5.94 (IH, s _anc ho); 5.56 (IH, m); 4.71 (2H, m); 4.63 (IH, m); 4.49 (IH, m); 4.21 (2H, m); 3.82 (IH, m); 3.53 (IH, m); 3.44 (IH, d, J= 11.9 Hz); 3.24 (IH, m); 2.26 (IH, m); 2.04 (IH, m). LRMS (API-ES ⁺ ) : m/z 381 (M-H ₂ O) ⁺ , 421 (M+Na) ⁺ .

Ejemplo 10

Preparación de rac-(2S,3S,8/?)-l-(benciloxiamino)-2,3,8-trihidroxi-9- oxabiciclo [3.2.2] non-5-eno-6-carbonitrilo.

Sobre una disolución de rαc-(25',35',8i?)-l-(benciloxiamino)-2,3,8-trihidroxi-2,3-O - (l,l,3,3-tetraisopropildisiloxan-l,3-diil)-9-oxabiciclo[3.2. 2]non-5-eno-6-carbonitrilo (50 mg, 0.089 mmol, 1 eq.) en MeOH (5 mi) se adicionó 3HF-Et ₃ N (517 mg, 3.209 mmol, 36 eq.). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 24 horas. Pasado ese tiempo, se adicionó una disolución acuosa de Na ₂ HPO ₄ (0.1M, 5 mi) y AcOEt (10 mi). Se separaron las fases, y la fase acuosa se extrajo con AcOEt (3 x 4 mi). La fase orgánica se secó con Na ₂ SO ₄ anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El producto se purificó mediante cromatografía en columna (Hexano/AcOEt, 1 : 8), obteniéndose (26 mg, rto. : 93%) rac-(25,3iS ^r ,8i?)-l-(be-iciloxiamino)-2,3,8- trihidroxi-9-oxabiciclo[3.2.2]non-5-eno-6-carbonitrilo.

¹ H-RMN (δ): 7.31 (5H, m); 6.64 (IH, s _anc ho); 5.54 (IH, d, J = 5.1 Hz); 4.71 (3H, m); 4.33 (IH, m); 4.17 (IH, m); 2.58 (IH, s _anc ho); 2.31 (IH, dd, J= 5.1, 13.8 Hz); 1.93 (IH, d, J= 13.8 Hz); LRMS (API-ES ⁺ ): m/z 301 (M-H ₂ O) ⁺ , 319 (M+H) ⁺ , 341 (M+Na) ⁺ .

Ejemplo 11

Preparación de rac-(2S,3/f,4S,8/f)-l-(benciloxiamino)-2,4-dihidroxi-8-metox i-9- oxabiciclo[3.3.1]non-5-eno-6-carbonitrilo. -Procedimiento 1.

Sobre una disolución de rαc-(25',35',8i?)-l-(benciloxiamino)-2,3,8-trihidroxi-2,3-O - (l,l,3,3-tetraisopropildisiloxan-l,3-diil)-9-oxabiciclo[3.2. 2]non-5-eno-6-carbonitrilo (102 mg, 0.182 mmol, 1 eq.) en MeOH (7 mi) a temperatura ambiente se adicionó p- TsOH (cat.). La mezcla resultante se agitó a 55-60 ⁰ C durante 36 horas. Pasado ese tiempo, se adicionó Ceuta y se eliminó el disolvente a presión reducida. El producto se purificó mediante cromatografía en columna (Hexano/AcOEt, 1 :2), obteniéndose (51 mg, rto.: 84%) rαc-(2 _ι S',3i?,4 _ι S',8i?)-l-(benciloxiamino)-2,4-dihidroxi-8-metoxi-9- oxabiciclo[3.3.1]non-5-eno-6-carbonitrilo y (3 mg, rto.: 5%) rac-(2S,3R,4S,SS)-l- (benciloxiamino)-2,4-dihidroxi-8-metoxi-9-oxabiciclo[4.3.0]n on-5-eno-6-carbonitrilo, ambos como un aceite incoloro.

-Procedimiento 2

Sobre una disolución de rαc-(25',35',8i?)-l-(benciloxiamino)-2,3,8-trihidroxi-9- oxabiciclo[3.2.2]non-5-eno-6-carbonitrilo (82 mg, 0.257 mmol, 1 eq.) en MeOH (55 mi) a temperatura ambiente se adicionó p-TsOH (cat.). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 36 horas. Pasado ese tiempo, se adicionó Celita y se eliminó el disolvente a presión reducida. El producto se purificó mediante cromatografía en columna (H exano/ AcOEt, 1 :2), obteniéndose (70 mg, rto.: 82%) rac- (2S,3R,4S,$R)- 1 -(benciloxiamino)-2,4-dihidroxi-8-metoxi-9-oxabiciclo[3.3.1 ]non-5- eno-6-carbonitrilo y (4 mg, rto.: 5%) rαc-(25',3i?,45',85)-l-(benciloxiamino)-2,4- dihidroxi-8-metoxi-9-oxabiciclo[4.3.0]non-5-eno-6-carbonitri lo, ambos como un aceite incoloro.

rac-(2S,3R,4S,8R)-l-(benciloxiamino)-2,4-dihidroxi-8-meto xi-9- oxabiciclo[3.3.1]non-5-eno-6-carbonitrilo.

¹ H-RMN (δ): 7.34 (5H, m, Ar-H); 6.66 (IH, dd, J= 0.9, 2.7 Hz); 6.23 (IH, s); 5.10 (IH, dd, J= 0.7, 5.2 Hz); 4.70 (2H, s); 4.66 (IH, d, J= 3.4 Hz); 4.30 (IH, m); 4.18 (IH, m); 3.36 (3H, s); 2.70 (IH, d, J = 10.7 Hz); 2.52 (IH, d, J = 3.9 Hz); 2.26 (IH, dd, J = 5.2, 13.9 Hz); 2.01 (IH, d, J= 13.9 Hz). ¹³ C-RMN (^): 146.6, 136.8, 128.6, 128.4, 128.1, 116.7, 116.5, 104.5, 80.1, 77.4, 69.8, 67.1, 67.0, 55.2, 41.8, 29.6, 29.5.

LRMS (API-ES ⁺ ): m/z 301 (M-OMe) ⁺ , 333 (M+H) ⁺ , 355 (M+Na) ⁺ . IR (KBr): v 3437,3030,2930, 2225, 1639, 1458, 1365, 1122, 1095, 1034, 924, 753 cm ^"1 .

rac-(2S,3R,4S,8S)-l-(benciloxiamino)-2,4-dihidroxi-8-meto xi-9- oxabiciclo [4.3.0] non-5-eno-6-carbonitrilo.

¹ H-RMN (δ): 7.32 (5H, m); 6.66 (IH, dd, J = 1.0, 2.6 Hz); 5.16 (IH, t, J = 4.9 Hz); 4.72 (2H, m); 4.50 (IH, d, J= 2.8 Hz); 4.31 (IH, m); 4.11 (IH, m); 3.91 (IH, m); 3.45 (3H, s); 2.15 (2H, d, J= 4.9 Hz).

¹³ C-RMN (^): 147.3, 136.7, 128.5, 128.4, 128.2, 116.4, 115.6, 106.1, 81.9, 77.2, 69.5,

67.7, 67.5, 56.5, 41.8.

LRMS (API-ES ⁺ ): m/z 301 (M-OMe) ⁺ , 333 (M+H) ⁺ , 355 (M+Na) ⁺ . IR(KBr): v 3419, 3236, 2925, 2851, 2224, 1454, 1367, 1032, 891, 753 cm ^"1 .

Ejemplo 12

Preparación de rac-(2S,3R,4S,8R)-l-(benciloxiamino)-4-fófr-butildimetilsil iloxi-2- hidroxi-8-metoxi-9-oxabiciclo[3.3.1]non-5-eno-6-carbonitrilo .

TBDMSCl imidazol

Sobre una disolución de rαc-(25',3i?,45',8i?)-l-(benciloxiamino)-2,4-dihidroxi-8-me toxi-

9-oxabiciclo[3.3.1]non-5-eno-6-carbonitrilo (42 mg, 0.126 mmol, 1 eq.) e imidazol (25.8 mg, 0.379 mmol, 3.0 eq.) en DMF (3 mi) se adicionó a 0 ⁰ C una disolución de TBDMSCl (57.15 mg, 0.379 mmol, 3.0 eq.) en DMF (2 mi). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. Pasado ese tiempo, se adicionó H ₂ O (15 mi) y AcOEt (15 mi). Se separaron las fases, y la fase acuosa se extrajo con AcOEt (4 x 7 mi). La fase orgánica se lavó con una disolución acuosa de CuSO ₄ sat. (2 x 15 mi) y Brine (1 x 7 mi), se secó con Na ₂ SO ₄ anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El producto se purificó mediante cromatografía en columna (Hexano/AcOEt, 4 : 1 ), obteniéndose (39 mg, rto. : 70%) rac-(25,3R,45,8R)-l- (benciloxiamino)-4-terc-butildimetilsililoxi-2-hidroxi-8-met oxi-9-oxabiciclo[3.3.1 ]non- 5-eno-6-carbonitrilo como un aceite incoloro.

¹ H-RMN (δ): 7.31 (5H, m); 6.41 (IH, m); 6.39 (IH, s _anc ho); 5.14 (IH, d, J = 5.2 Hz); 4.73 (2H, s); 4.70 (IH, d, J = 3.5 Hz); 4.36 (IH, m); 4.05 (IH, m); 3.35 (3H, s); 2.36 (IH, dd, J = 5.4, 13.5 Hz); 1.97 (IH, d, J = 13.5 Hz); 0.90 (9H, s); 0.11 (3H, s); 0.09 (3H, s). 1 ³ C-RMN (δ): 147.2, 137.3, 128.8, 128.7, 128.3, 117.1, 116.6, 105.6, 79.3, 77.6, 71.9, 69.2, 67.1, 55.5, 41.4, 25.9, 18.3, -4.6, -4.7. LRMS (API-ES ⁺ ): m/z 415 (M-OMe) ⁺ , 469 (M+Na) ⁺ .

IR (KBr): v 3487, 3261, 2953, 2929, 2857, 2224, 1725, 1471, 1362, 1255, 1124, 1062, 1044, 895, 839 Cm ^"1 .

Ejemplo 13

Preparación de rac-(2S,3R,4S,8R)-l-(benciloxiamino)-4-fófr-butildimetilsil iloxi-2- hidroxi-8-metoxi-9-oxabiciclo[3.3.1]non-5-eno-6-carbaldehido .

Sobre una disolución de rαc-(25',3i?,45',8i?)-l-(benciloxiamino)-4-terc- butildimetilsililoxi-2-hidroxi-8-metoxi-9-oxabiciclo[3.3.1]n on-5-eno-6-carbonitrilo (33 mg, 0.074 mmol, 1 eq.) en THF (2 mi) se adicionó a 0 ⁰ C DIBAL (21.3 mg, 0.148 mmol, 2.0 eq.). La mezcla resultante se agitó a 0 ⁰ C durante 2 horas. Pasado ese tiempo, se adicionó a 0 ⁰ C AcOEt (2 mi), y la mezcla se agitó a 0 ⁰ C durante 5 minutos. A continuación se adicionó NaCl sat. (8 mi). Se separaron las fases, y la fase acuosa se extrajo con AcOEt (3 x 5 mi). La fase orgánica se secó con Na ₂ SO ₄ anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El producto se purificó mediante cromatografía en columna (Hexano/AcOEt, 3:1), obteniéndose (8 mg, rto.: 32%) rαc- (25',3i?,45',8i?)-l-(benciloxiamino)-4-terc-butildimetilsili loxi-2-hidroxi-8-metoxi-9- oxabiciclo[3.3.1 ]non-5-eno-6-carbaldehido, y se recuperó producto de partida (8 mg). ¹ H-RMN (δ): 9.44 (IH, s); 7.34-7.20 (5H, m); 6.51 (IH, dd, J= 1.6, 3.3 Hz); 6.44 (IH, Sancho); 5.18 (IH, d, J = 5.4 Hz); 4.63 (IH, d, J = 11.1 Hz); 4.63 (IH, d, J = 3.46 Hz); 4.52 (IH, d, J= 11.1 Hz); 4.51 (IH, m); 4.09 (IH, m); 3.40 (3H, s); 2.32 (IH, m); 2.27 (IH, d, J = 14.1 Hz); 2.16 (IH, dd, J = 5.4, 14.1 Hz); 0.92 (9H, s); 0.13 (3H, s); 0.12 (3H, s).

LRMS (API-ES ⁺ ): m/z 418 (M-OMe) ⁺ , 450 (M+H) ⁺ , 473 (M+H+Na) ⁺ , 880 (2M-H ₂ O) ⁺ .

Ejemplo 14

Preparación de rac-(2S,3S,8/f)-l-(benciloxiamino)-8-(benzoiloxi(metil)amino )- 2,3,8-trihidroxi-2,3-0-(l,l,3,3-tetraisopropildisiloxan-l,3- diil)-9- oxabiciclo [3.2.2] non-5-eno-6-carbonitrilo

Sobre una disolución del rαc-(25',35',8i?)-l-(benciloxiamino)-2,3,8-trihidroxi-2,3-O - (l,l,3,3-tetraisopropildisiloxan-l,3-diil)-9-oxabiciclo[3.2. 2]non-5-eno-6-carbonitrilo (70 mg, 0.124 mmol, 1 eq.) en DMSO (1.5 mi) se adicionó el clorhidrato de la JV-metil- O-benzoilhidroxilamina (46.8 mg, 0.249 mmol, 2 eq.). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 48 horas. Pasado ese tiempo, se adicionó AcOEt (10 mi), se lavó con Brine (2 x 3 mi). La fase orgánica se secó con Na ₂ SO ₄ anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El producto se purificó mediante cromatografía en columna (Hexano/AcOEt, 9: 1), obteniéndose (41 mg, rto.: 47%) rαc-(25',35',8i?)-l- (benciloxiamino)-8-(benzoiloxi(metil)amino)-2,3,8-trihidroxi -2,3-O-(l , 1 ,3,3- tetraisopropildisiloxan-l,3-diil)-9-oxabiciclo[3.2.2]non-5-e no-6-carbonitrilo como un sólido blanco. 1H-RMN (δ): 8.01 (2H, m); 7.57 (IH, m); 7.42 (2H, m); 7.27 (5H, m); 6.64 (IH, s _anc ho); 5.50 (IH, dd, J= 1.7, 3.4 Hz); 5.06 (IH, m); 4.72 (IH, m); 4.64 (2H, m); 4.49 (IH, m); 2.88 (3H, s); 2.50 (IH, dd, J = 7.8, 14.2 Hz); 1.96 (IH, dd, J = 2.4, 14.2 Hz); 1.01 (28H, m). 1 ³ C-RMN (¿): 164.8, 148.1, 137.2, 133.4, 129.6, 128.8, 128.5, 128.3, 127.9, 116.9, 114.9, 96.5, 79.4, 77.2, 74.7, 72.2, 67.3, 41.7, 38.4, 17.5, 17.4, 17.2, 17.1, 17.0, 14.0,

13.6, 13.0, 12.6.

LRMS (API-ES ⁺ ): m/z 694 (M+H) ⁺ , 695 (M+2H) ⁺ , 716 (M+Na) ⁺ .

IR (KBr): v 3218, 2945,2867, 2225, 1747, 1464, 1365, 1257, 1156, 1062, 1010, 886, 755, 707 Cm ^"1 .

Ejemplo 15

Preparación de rac-(2S,3S,8R)-l-(benciloxiamino)-2,3-dihidroxi-2,3-0-(l, 1,3,3- tetraisopropildisiloxan-l,3-diil)-7-fenilselenil-8-metoxi-9- oxabiciclo[3.2.2]non-5- eno-6-carbonitrilo.

Sobre una disolución de bromuro de fenilselenio (36.7 mg, 0.156 mmol, 1 eq.) en CH ₂ Cl ₂ (2 mi) se adicionó a temperatura ambiente morfolina (27.15 mg, 0.312 mmol, 2 eq.). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos. A continuación, se adicionó una disolución de rac-(\R,2S,3S,4R,5S,6R) 5-bromo-l-(2- oxoetil)-2,3,4-trihidroxi-2,3-O-(l , 1 ,3,3-tetraisopropildisiloxan- 1 ,3-diil)- 1 - (benciloxiamino)ciclohexano-6-carbonitrilo (100 mg, 0.156 mmol, 1 eq.) en CH ₂ Cl ₂ (2 mi). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 24 horas. Se va formando una suspensión, que se filtra a través de silica gel, empleando CH ₂ Cl ₂ como eluyente, y se elimina el disolvente a presión reducida. El producto se purifica mediante cromatografía en columna (Hexano/AcOEt, 15:1), obteniéndose (71 mg, rto.: 53%) rac- (2535,55,6R,8R)-l-(benciloxiamino)-5-bromo-2,3-dihidroxi-2,3 -0-(l, 1,3,3- tetraisopropildisiloxan- 1 ,3-diil)-7-fenilselenil-8-morfolino-9-oxabiciclo[3.2.2]nonan o- 6-carbonitrilo como un aceite incoloro.

Sobre una disolución de rαc-(25',35',55',6i?,8i?)-l-(benciloxiamino)-5-bromo-2,3- dihidroxi-2,3-O-(l,l,3,3-tetraisopropildisiloxan-l,3-diil)-7 -fenilselenil-8-morfolino-9- oxabiciclo[3.2.2]nonano-6-carbonitrilo (141 mg, 0.162 mmol, 1 eq.) en CH ₂ Cl ₂ (4.5 mi) a 0 ⁰ C se adicionó DBU (25.11 mg, 0.162 mmol, 1 eq.). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. Pasado ese tiempo, se adicionó Celita y se eliminó el disolvente a presión reducida. El producto se purificó mediante cromatografía en columna (Hexano/AcOEt, 8:1), obteniéndose (82 mg, rto.: 65%) rac- (2S,3S,SR)- 1 -(benciloxiamino)-2,3-dihidroxi-2,3-0-(l , 1 ,3,3-tetraisopropildisiloxan- 1,3- diil)-7-fenilselenil-8-morfolino-9-oxabiciclo[3.2.2]non-5-en o-6-carbonitrilo como un aceite.

Sobre una disolución de rαc-(25',35',8i?)-l-(benciloxiamino)-2,3-dihidroxi-2,3-O- (1,1 ,3,3-tetraisopropildisiloxan- 1 ,3-diil)-7-fenilselenil-8-morfolino-9- oxabiciclo[3.2.2]non-5-eno-6-carbonitrilo (122 mg, 0.155 mmol, 1 eq.) en MeOH (6 mi) a temperatura ambiente se adicionó p-ΥsOH (cat.). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 36 horas. Pasado ese tiempo, se adicionó Celita y se eliminó el disolvente a presión reducida. El producto se purificó mediante cromatografía en columna (Hexano/AcOEt, 6: 1), obteniéndose (42 mg, rto.: 37%) rac- (2S,3S,SR)- 1 -(benciloxiamino)-2,3-dihidroxi-2,3-O-(l , 1 ,3,3-tetraisopropildisiloxan- 1,3- diil)-7-fenilselenil-8-metoxi-9-oxabiciclo[3.2.2]non-5-eno-6 -carbonitrilo como un aceite marrón.

¹ H-RMN (δ): 7.54 (1OH, m); 5.70 (IH, d, J = 7.2 Hz); 5.60 (IH, d, J = 6.9 Hz); 5.18 (IH, d, J= 7.3 Hz); 5.10 (IH, d, J= 2.5 Hz); 5.03 (2H, m); 4.95 (2H, m); 4.70 (IH, m); 4.57 (IH, m); 4.51 (IH, m); 4.46 (IH, m); 4.37 (IH, m); 4.06 (IH, m); 3.98 (IH, m); 3.67 (3H, s); 3.63 (3H, s); 3.56 (3H, s); 3.51 (3H, s); 3.34 (IH, m); 2.35 (IH, m); 1.07 (28H, m).

LRMS [API-ES ⁺ ): m/z 729 (M-H) ⁺ , 731 (M+H) ⁺ , 732 (M+2H) ⁺ , 733 (M+3H) ⁺ , 753 (M+Na) ⁺ .

Ejemplo 16

Preparación de rac-(4/f,5S,6S)-l-benciloxi-9-ciano-5,6-dihidroxi-5,6-0-(l, 1,3,3- tetraisopropildixiloxano-l,3-diil)-l-azaespiro[3.5]non-8-eno -2,7-diona (2) reflujo - t.a.

Sobre una disolución de 1 (1.65 g, 3.09 mmol) en 32 mi de THF se adicionó a 0 ⁰ C Et ₂ AlCN (413mg, 3.71 mmol). La disolución resultante se calentó a 80 ⁰ C durante 3 horas. Pasado ese tiempo la mezcla se enfrió a 0 ⁰ C y se adicionó NBS (827 mg, 4.64 mmol). La disolución resultante se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos. Pasado ese tiempo, se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se trituró con Et ₂ O, se filtró en placa filtrante n° 3 a través de Celite ^® con Et ₂ O y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se disolvió en 39 mi de CH ₂ Cl ₂ . A la disolución se adicionó a 0 ⁰ C Et ₃ N (351 mg, 3.47 mmol). La disolución se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos. Pasado ese tiempo, al crudo de reacción se le añadió Celite ^® y se eliminó el disolvente a presión reducida. El producto 2 se aisló tras separación cromatográfica en columna (Hexano/AcOEt, 10:1), obteniéndose como un sólido amarillo. P.f: 115-118 ⁰ C.

¹ H-RMN: ¿ 7.37 (5H, m); 6.19 (IH, s); 5.09 (IH, parte A sist. AB, J = 11.7 Hz); 4.92 (IH, parte B sist. AB, J = 11.7 Hz); 4.89 (IH, d, J = 2.3 Hz); 4.50 (IH, d, J = 2.3 Hz); 3.14 (IH, parte A sist. AB, J = 14.8 Hz); 3.05 (IH, parte B sist. AB, J = 14.8 Hz); 1.06 (22H, m); 0.94 (3H, d, J= 3.5 Hz); 0.90 (3H, d, J= 2.0 Hz). 1 ³ C-RMN: δ 192.0, 164.3, 138.1, 134.7, 129.7, 129.5, 129.1, 127.6, 114.4, 79.9, 77.2, 74.8, 65.2, 42.6, 17.4, 17.3, 17.2, 17.0, 16.8, 16.6, 14.0, 13.5, 13.3, 12.4. LRMS (API-ES ⁺ ): m/z 589 (M+H) ⁺ , 611 (M+Na) ⁺ , 1200 (2M+Na) ⁺ . IR (KBr): v 3436, 2946, 2890, 2868, 2075, 1799, 1697, 1462, 1372, 1262, 1160, 1105, 1053, 1009, 994, 968, 932, 886, 841, 790, 753, 699 cm ^"1 . HRMS (ESI ⁺ ): calculado para C ₂₈ H ₄ IN ₂ O ₆ Si ₂ (M+H) ⁺ 557.2503; encontrado 557.2498 (|Δ| = 1.69). Ejemplo 17

Preparación de rac-(4R,5S,6S)-l-benciloxi-9-ciano-5,6-dihidroxi-7-metiliden -5,6-0-

(l,l,3,3-tetraisopropildixiloxano-l,3-diil)-l-azaespiro[3 .5]non-8-en-2-ona (3)

Sobre una suspensión de bromuro de trifenilfosfonio (499 mg, 1.40 mmol) en 20 mi de THF se adicionó a -78 ⁰ C y gota a gota, n-BuLi (93 mg, 1.45 mmol). La suspensión se agitó a -78 ⁰ C durante 15 minutos. Pasado ese tiempo, se adicionó 2 (622 mg, 1.12 mmol) disuelto en 13 mi de THF a -78 ⁰ C y gota a gota. La suspensión se agitó a -78 ⁰ C durante 1 hora y a continuación a 0 ⁰ C durante 18 horas. Pasado ese tiempo, se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se trituró con Et ₂ O (el proceso se repite 3 veces). Al crudo de reacción se le añadió Celite ^® y se eliminó el disolvente a presión reducida. El producto 3 se filtró sobre sílice 60 Merck con Et ₂ O obteniéndose un sólido marrón (Cuando el producto 3 se aisló tras separación cromato gráfica en columna (Hexano/AcOEt, 20: 1) se obtuvo como un sólido blanco). El crudo de reacción se utilizó en la reacción de dihidroxilación del doble enlace exocíclico. 1H-RMN: δ 7.36 (5H, m); 6.74 (IH, s); 5.63 (IH, s); 5.50 (IH, m); 5.07 (IH, parte A sist. AB, J= 11.4 Hz); 4.94 (IH, parte B sist. AB, J = 11.4 Hz); 4.86 (IH, dt, J= 2.6, 1.4 Hz); 4.36 (IH, d, J = 2.6 Hz); 3.22 (IH, parte A sist. AB, J= 14.3 Hz); 2.83 (IH, parte B sist. AB, J= 14.3 Hz); 1.07 (28H, m).

¹³ C-RMN: δ 164.8, 143.7, 140.4, 135.2, 129.1, 128.8, 128.7, 125.2, 116.4, 79.3, 72.4, 65.1, 41.0, 17.5, 17.4, 17.3, 17.2, 17.0, 16.9, 14.0, 13.7, 13.4, 13.0. LRMS (API-ES ⁺ ): m/z 513 (M-'Pr+H) ⁺ , 555 (M+H) ⁺ , 577 (M+Na) ⁺ , 1131 (2M+Na) ⁺ . IR (film): v 3436, 3033, 2945, 2890, 2868, 2220, 1787, 1770, 1629, 1464, 1385, 1250,

1156, 1060, 1013, 967, 912, 886, 843, 792, 747, 698 cπf -i

Ejemplo 18 Preparación de rac-(4/f,5S,6S,7/?)-l-benciloxi-9-ciano-5,6,7-trihidroxi-7-

(hidroximetil)-5,6-0-(l,l,3,3-tetraisopropildixiloxano-l, 3-diil)-l-azaespiro[3.5]non- 8-en-2-ona (4)

Sobre una disolución de 3 (624 mg, 1.125 mmol) en 16 mi de acetona y 3.2 mi de H ₂ O se adicionó a temperatura ambiente NMO (290 mg, 2.47 mmol) y OsO ₄ (0.85 mi disol. al 2.5% en peso en 'BuOH, 0.07 mmol). La disolución se agitó a temperatura ambiente durante 17 horas. Pasado ese tiempo, se adicionó a temperatura ambiente Na ₂ S ₂ O ₃ (10%, 3.4 mi) y se agitó durante 5 minutos. Se separaron las fases en un embudo de extracción. La fase acuosa se extrajo con AcOEt (7 x 15 mi). Los extractos orgánicos combinados se secaron con Na ₂ SO ₄ anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. Al crudo de reacción se le añadió Celite ^® y AcOEt y se eliminó el disolvente a presión reducida. El producto 4 se filtró sobre sílice 60 Merck (Hexano/ AcOEt, 1 : 1) obteniéndose un aceite marrón (Cuando el producto 4 se aisló tras separación cromatográfica en columna (Hexano/ AcOEt, 3:1) se obtuvo como un sólido blanco). El crudo de reacción se utilizó en la reacción de protección del diol generado. P.f: 128-131 ⁰ C. 1H-RMN: δ 7.45 (2H, m); 7.37 (3H, m); 6.38 (IH, d, J= 1.4 Hz); 5.11 (IH, parte A sist. AB, J = 12.1 Hz), 4.96 (IH, parte B sist. AB, J = 12.1 Hz); 4.65 (IH, d, J = 2.4 Hz); 4.31 (IH, dd, J= 2.4, 1.4 Hz); 3.68 (IH, parte A sist. AB, J= 10.9 Hz); 3.63 (IH, parte B sist. AB, J = 10.9 Hz), 3.24 (IH, parte A sist. AB, J = 14.2 Hz); 2.65 (IH, parte B sist. AB, J= 14.2 Hz), 2.26 (IH, s _anch o, OH); 2.04 (IH, s _anch o, OH); 1.05 (28H, m). 1 ³ C-RMN: δ 165.0, 143.2, 136.0, 129.3, 128.8, 128.6, 118.6, 115.4, 79.0, 74.9, 72.2, 67.8, 65.4, 64.9, 40.2, 17.6, 17.5, 17.1, 17.0, 16.9, 14.4, 14.0, 13.3, 13.2. LRMS (API-ES ⁺ ): m/z 571 (M-H ₂ O+H) ⁺ , 589 (M+H) ⁺ , 611 (M+Na) ⁺ , 1199 (2M+Na) ⁺ . IR (KBr): v 3438, 2947, 2869, 2231, 1778, 1633, 1466, 1389, 1369, 1249, 1214, 1153, 1094, 1006, 971, 929, 885, 840, 790, 745, 697 cnT ¹ .

HRMS (ESI ⁺ ) : calculado para C ₂₉ H ₄₈ N ₃ O ₇ Si ₂ (M+NH ₄ ) ⁺ 606.3031; encontrado 606.3040 (|Δ| = 2.41).

Ejemplo 19

Preparación de rac-(4/f,5S,6S,7/?)-l-benciloxi-9-ciano-5,6,7-trihidroxi-7-

(hidroximetil)-7, 1 O-O(propano-2,2-diil)-5,6-0-(l , 1 ,3,3-tetraisopropildixiloxano- l,3-diil)-l-azaespiro[3.5]non-8-en-2-ona (5)

Sobre una disolución de 4 (585 mg, 0.99 mmol) en 40 mi de acetona se adicionó a 0 ⁰ C

2,2-dimetoxipropano (310 mg, 2.98 mmol) y una cantidad catalítica de ácido p- toluensulfónico. La disolución se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. Pasado ese tiempo, al crudo de reacción se le añadió Celite ^® y se eliminó el disolvente a presión reducida. El producto 5 se aisló tras separación cromatográfica en columna

(Hexano/AcOEt, 6:1), obteniéndose como un sólido blanco.

P.f.: 159-162 ⁰ C. 1H-RMN: ¿ 7.41 (3H, m); 7.35 (2H, m); 6.31 (IH, d, J= 1.4 Hz); 5.08 (IH, parte A sist.

AB, J = 11.5 Hz); 5.01 (IH, parte B sist. AB, J = 11.5 Hz); 4.68 (IH, d, J = 2.3 Hz); 4.33 (IH, dd, J= 2.3, 1.4 Hz); 4.25 (IH, parte A sist. AB, J = 9.7 Hz); 3.84 (IH, parte B sist. AB, J = 9.7 Hz); 3.21 (IH, parte A sist. AB, J = 14.0 Hz); 2.64 (IH, parte B sist. AB, J= 14.0 Hz); 1.44 (3H, s); 1.43 (3H, s); 1.06 (28H, m).

¹³ C-RMN: δ 164.6, 144.5, 135.3, 128.8, 128.6, 128.5, 117.9, 115.2, 111.5, 79.3, 79.0, 74.8, 70.6, 68.5, 64.3, 40.4, 26.9, 26.4, 17.7, 17.6, 17.5, 17.1, 17.0, 16.9, 14.3, 14.0, 13.3.

LRMS (API-ES ⁺ ): m/z 629 (M+H) ⁺ , 651 (M+Na) ⁺ , 674 (M+2Na) ⁺ , 1279 (2M+Na) ⁺ . IR (KBr): v 3436, 3063, 2947, 2896, 2869, 2225, 1785, 1641, 1466, 1373, 1259, 1219, 1182, 1151, 1125, 1097, 1064, 999, 946, 926, 886, 845, 798, 759, 745, 697, 663, 607, 517 Cm ^"1 .

HRMS (ESI ⁺ ): calculado para C ₃₂ H ₄₉ N ₂ O ₇ Si ₂ (M+H) ⁺ 629.3078; encontrado 629.3100 (|Δ| = 1.66).

Ejemplo 20 Preparación de rac-(l/f,2S,3S,4/f)-l-(benciloxiamino)-2,3,4-trihidroxi-4-

(hidroximetil)-4,7-0- (propano-2,2-diil)-2,3-0-(l , 1 ,3,3-tetraisopropildixiloxano- 1 ,3- diil)-l-(2-oxoetil)ciclohex-5-en-6-carbonitrilo (6)

Sobre una disolución de 5 (462 mg, 0.74 mmol) en 26 mi de THF se adicionó a 0 ⁰ C DIBAL-H (318 mg, 2.20 mmol). La disolución se agitó a 0 ⁰ C durante 1 hora. Pasado ese tiempo, se adicionó a 0 ⁰ C 26 mi de AcOEt y se agitó a 0 ⁰ C durante 5 minutos. A continuación, se adicionó a 0 ⁰ C NaCl sat. (15 mi). Se separaron las fases en un embudo de extracción. La fase acuosa se extrajo con AcOEt (6 x 15 mi). Los extractos orgánicos combinados se secaron con Na ₂ SO ₄ anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. Al crudo de reacción se le añadió Celite ^® y AcOEt y se eliminó el disolvente a presión reducida. El producto 6 se aisló tras separación cromatográfica en columna (Hexano/AcOEt, 10:1), obteniéndose como un aceite incoloro. ¹ H-RMN: δ 9.82 (IH, t, J = 2.5 Hz); 7.33 (5H, m); 6.59 (IH, s); 5.84 (IH, s _anch o, NH);

4.84 (IH, parte A sist. AB, J = 11.9 Hz); 4.79 (IH, parte B sist. AB, J = 11.9 Hz); 4.75 (IH, d, J = 2.9 Hz); 4.53 (IH, d, J = 2.9 Hz); 4.36 (IH, parte A sist. AB, J = 9.4 Hz);

3.85 (IH, parte B sist. AB, J= 9.4 Hz); 2.84 (IH, dd, J= 16.8, 2.5 Hz); 2.74 (IH, dd, J = 16.8, 2.5 Hz); 1.47 (3H, s); 1.43 (3H, s); 1.07 (28H, m).

¹³ C-RMN: δ 198.8, 147.3, 136.9, 128.4, 128.2, 128.0, 116.9, 116.7, 110.7, 80.3, 76.8, 74.0, 71.1, 69.6, 64.0, 46.3, 27.3, 26.3, 17.8, 17.6, 17.5, 17.4, 17.1, 17.0, 13.9, 13.8, 13.7.

LRMS (API-ES ⁺ ): m/z 631 (M+H) ⁺ , 653 (M+Na) ⁺ , 1283 (2M+Na) ⁺ . IR (film): v 3421, 2947, 2890, 2869, 2226, 1722, 1465, 1383, 1372, 1256, 1217, 1116, 1060, 1008, 886, 853, 757, 698 cm ^"1 .

Ejemplo 21 Preparación de rac-(lR,2S,3S,4R,8R)-l-(benciloxiamino)-2,4,8-trihidroxi-4- (hidroximetil)-4, 1 O-0-(propano-2,2-diil)-2,8-0-(l , 1 ,3,3-tetraisopropildixiloxano- l,3-diil)-9-oxabiciclo[3.3.1]non-5-eno-6-carbonitrilo (7)

Sobre una mezcla de 6 (469 mg, 0.74 mmol) y DBU soportada (969 mg con carga 1.15mmol/g, 1.12 mmol) se adicionó a temperatura ambiente 27 mi de tolueno. La suspensión se calentó a 120 ⁰ C durante 18 horas. Pasado ese tiempo, la suspensión se filtró en un embudo Büchner a vacío. El sólido se lavó alternativamente con CH ₂ Cl ₂ y MeOH. A continuación se eliminó el disolvente a presión reducida. Al crudo de reacción se le añadió Celite ^® y AcOEt y se eliminó el disolvente a presión reducida. El producto 7 se aisló tras separación cromatográfica en columna (Hexano/ AcOEt, 20:1), obteniéndose como un aceite incoloro. ¹ H-RMN: δ 7.34 (5H, m); 6.55 (IH, s); 5.61 (IH, d, J = 5.0 Hz); 5.51 (IH, s _anch o, NH); 4.82 (IH, parte A sist. AB, J = 2.9 Hz); 4.81 (IH, parte B sist. AB, J = 2.9 Hz); 4.72 (2H, s); 4.53 (IH, parte A sist. AB, J= 9.4 Hz); 3.69 (IH, parte B sist. AB, J= 9.4 Hz); 2.38 (IH, dd, J= 14.4, 5.0 Hz); 1.84 (IH, dd, J= 14.4, 0.7 Hz); 1.50 (3H, s); 1.44 (3H, s); 1.07 (28H, m).

¹³ C-RMN: δ 150.5, 136.9, 128.8, 128.4, 128.0, 116.5, 114.6, 109.9, 96.3, 81.2, 80.4, 77.0, 70.7, 69.1, 68.1, 45.2, 27.5, 26.0, 17.8, 17.7, 17.5, 17.3, 17.2, 17.1, 17.0, 16.9, 14.2, 13.7, 13.2, 12.7.

LRMS (API-ES ⁺ ): m/z 631 (M+H) ⁺ , 653 (M+Na) ⁺ . IR (film): v 3249, 2946, 2868, 2225, 1630, 1497, 1464, 1382, 1370, 1320, 1306, 1287, 1254, 1215, 1142, 1105, 1080, 1050, 992, 961, 887, 866, 833, 756, 698 cnT ¹ . HRMS (ESI ⁺ ): calculado para C ₃₂ H ₅ IN ₂ O ₇ Si ₂ (M+H) ⁺ 631.3235; encontrado 631.3229 (|Δ| = 1.39).

Ejemplo 22

Preparación de rac-(lR,2S,3S,4R,8R)-l-(benciloxiamino)-2,4,8-trihidroxi-4- (hidroximetil)-4, 1 O-0-(propano-2,2-diil)-2,8-0-(l , 1 ,3,3-tetraisopropildixiloxano- l,3-diil)-9-oxabiciclo[3.3.1]non-5-eno-6-carbaldehído (8)

Sobre una disolución de 7 (185 mg, 0.29 mmol) en 15 mi de THF se adicionó a 0 ⁰ C DIBAL-H (169 mg, 1.17 mmol). La disolución se agitó a 0 ⁰ C durante 2 horas y a temperatura ambiente durante 2 horas. Pasado ese tiempo se adicionó a 0 ⁰ C 15 mi de AcOEt y se agitó a 0 ⁰ C durante 5 minutos. A continuación, se adicionó a 0 ⁰ C NaCl sat. (8 mi). Se separaron las fases en un embudo de extracción. La fase acuosa se extrajo con AcOEt (5 x 10 mi). Los extractos orgánicos combinados se secaron COn Na ₂ SO ₄ anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. Al crudo de reacción se le añadió Celite ^® y AcOEt y se eliminó el disolvente a presión reducida. El producto 8 se aisló tras separación cromatográfica en columna (Hexano/AcOEt, 15: 1), obteniéndose como un aceite incoloro. 1H-RMN: δ 9.36 (IH, s); 7.21 (5H, m); 6.58 (IH, s); 6.15 (IH, s, NH); 5.48 (IH, d, J = 5.0 Hz); 4.78 (IH, parte A sist. AB, J = 2.8 Hz); 4.73 (IH, parte B sist. AB, J = 2.8 Hz); 4.65 (IH, parte A sist. AB, J = 12.1 Hz); 4.56 (IH, parte A sist. AB, J = 9.3 Hz); 4.53 (IH, parte B sist. AB, J = 12.1 Hz); 3.67 (IH, parte B sist. AB, J = 9.3 Hz); 2.21 (IH, dd, J = 14.2, 5.0 Hz); 2.00 (IH, d, J = 14.2 Hz); 1.47 (3H, s), 1.42 (3H, s); 1.03 (28H, m).

¹³ C-RMN: δ 193.9, 156.2, 137.7, 137.3, 128.4, 127.9, 127.8, 109.8, 96.8, 82.0, 81.4, 76.1, 71.3, 69.4, 66.4, 44.9, 27.7, 26.1, 17.9, 17.8, 17.6, 17.4, 17.3, 17.0, 16.8, 14.6, 13.8, 13.2, 12.7. LRMS (API-ES ⁺ ): m/z 634 (M+H) ⁺ , 656 (M+Na) ⁺ . IR (film): v 3436, 2945, 2868, 1677, 1634, 1464, 1370, 1255, 1205, 1130, 1090, 1052, 1004, 920, 885, 838, 747, 701, 605 cm ^"1 .

HRMS (ESI ⁺ ): calculado para C ₃₂ H ₅₂ NO ₈ Si ₂ (M+H) ⁺ 634.3231; encontrado 634.3246 (|Δ| = 3.04).

Ejemplo 23

Preparación de rac-(l/f,2S,3S,4/f,8/f)-l-(benciloxiamino)-2,4,8-trihidroxi- 4,6-bis- (hidroximetil)-4, 10-O(propano-2,2-diil)-2,8-0-(l , 1 ,3,3-tetraisopropildixiloxano- l,3-diil)-9-oxabiciclo[3.3.1]non-5-eno (9)

MÉTODO A

Sobre una suspensión de 8 (141 mg, 0.22 mmol) en 3.3 mi de MeOH se adicionó a 0 ⁰ C NaBH ₄ (9 mg, 0.25 mmol). La disolución se agitó a 0 ⁰ C durante 45 minutos. Pasado ese tiempo, se adicionó a 0 ⁰ C Na ₂ HPO ₄ (0.1M, 1 ImI). Se separaron las fases en un embudo de extracción. La fase acuosa se extrajo con AcOEt (6 x 4 mi). Los extractos orgánicos combinados se secaron con Na ₂ SO ₄ anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. Al crudo de reacción se le añadió Celite ^® y AcOEt y se eliminó el disolvente a presión reducida. El producto 9 se aisló tras separación cromatográfica en columna (Hexano/ AcOEt, 4:1), obteniéndose como un sólido blanco. MÉTODO B

Sobre una disolución de 8 (49 mg, 0.08 mmol) en 2 mi de THF se adicionó a 0 ⁰ C BHs(CHs) ₂ S (29 mg, 0.39 mmol). La disolución se agitó a 0 ⁰ C durante 15 minutos. Pasado ese tiempo, se adicionó a 0 ⁰ C H ₂ O ₂ (33%, ImI) y NaHCO ₃ sat. (1 mi) y se agitó a 0 ⁰ C durante 5 minutos. Se separaron las fases en un embudo de extracción. La fase acuosa se extrajo con AcOEt (4 x 2 mi). Los extractos orgánicos combinados se secaron con Na ₂ SO ₄ anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. Al crudo de reacción se le añadió Celite ^® y AcOEt y se eliminó el disolvente a presión reducida. El producto 9 se aisló tras separación cromatográfica en columna (Hexano/AcOEt, 4:1), obteniéndose como un sólido blanco. 1H-RMN: ¿ 7.31 (5H, m); 5.75 (IH, t, J= 1.1 Hz); 5.59 (IH, s _anc ho, NH); 5.57 (IH, d, J = 5.1 Hz); 4.84 (IH, d, J= 3.0 Hz); 4.72 (IH, d, J= 3.0 Hz); 4.71 (IH, parte A sist. AB, J = 13.1 Hz); 4.67 (IH, parte B sist. AB, J = 13.1 Hz); 4.50 (IH, parte A sist. AB, J = 8.9 Hz); 4.25 (IH, dd, J = 13.2, 1.1 Hz); 4.07 (IH, d, J = 13.2 Hz); 3.60 (IH, parte B sist. AB, J= 8.9 Hz); 2.73 (IH, s _anch o, OH); 2.36 (IH, dd, J= 14.1, 5.1 Hz); 1.88 (IH, d, J= 14.1Hz); 1.48 (3H, s); 1.44 (3H, s); 1.09 (2OH, m); 1.00 (8H, m).

¹³ C-RMN: δ 137.3, 134.9, 134.2, 128.7, 128.6, 128.3, 109.1, 96.8, 82.8, 80.7, 76.8, 71.9, 69.8, 69.2, 63.9, 43.8, 27.8, 26.5, 18.1, 18.0, 17.8, 17.6, 17.5, 17.4, 17.3, 17.1, 14.5, 14.0, 13.5, 12.9. LRMS (API-ES ⁺ ): m/z 636 (M+H) ⁺ , 658 (M+Na) ⁺ . IR (film): v 3415, 3060, 3027, 2945, 2896, 2868, 1651, 1497, 1464, 1368, 1253, 1213,

1121, 1090, 1048, 992, 885, 834, 747, 698 cπf -i ¹ . HHRRMMSS ((EESSII ⁺⁺ )) :: ccaallculado para C ₃₂ H ₅₄ NO ₈ Si ₂ (M+H) ⁺ 636.3388; encontrado 636.3375(|Δ| = 1.01). Ejemplo 24

Preparación de rac-(lR,2S,3S,4R,8R)-l-(benciloxiamino)-6-[(fenilselanil)met il]- 2,4,8-trihidroxi-4-(hidroximetil)-4,10-O-(propano-2,2-diil)- 2,8-O-(l,l,3,3- tetraisopropildixiloxano-l,3-diil)-9-oxabiciclo[3.3.1]non-5- eno (10)

10

Sobre una disolución de 9 (61 mg, 0.10 mmol) en 1 mi de CH ₂ Cl ₂ se adicionó a -78 ⁰ C JV-(fenilselanil)ftalimida (38 mg, 0.13 mmol) y /7-BU ₃ P (27 mg, 0.13 mmol). La suspensión se agitó a 0 ⁰ C durante 2 horas y a temperatura ambiente durante 2 horas. A continuación, se adicionó a 0 ⁰ C N-( fenilselanil)ftalimida (74 mg, 0.25 mmol) y n- BU3P (54 mg, 0.26 mmol). La suspensión se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. Pasado ese tiempo, la suspensión se filtro en placa filtrante n° 3 a vacío con CH ₂ Cl ₂ , y se eliminó el disolvente a presión reducida. Al crudo de reacción se le añadió Celite ^® y AcOEt y se eliminó el disolvente a presión reducida. El producto 10 se aisló tras separación cromatográfica en columna (Hexano/AcOEt, 20:1), obteniéndose como un sólido blanco.

¹ H-RMN: δ 7.50 (2H, m); 7.31 (8H, m); 5.56 (IH, s); 5.52 (IH, d, J = 5.2 Hz); 5.42 (IH, Sancho, NH); 4.76 (IH, parte A sist. AB, J = 2.9 Hz); 4.67 (IH, parte B sist. AB, J = 2.9 Hz); 4.66 (IH, parte A sist. AB, J = 12.0 Hz); 4.60 (IH, parte B sist. AB, J = 12.0 Hz); 4.44 (IH, parte A sist. AB, J = 8.9 Hz); 3.54 (IH, parte A sist. AB, J = 12.2 Hz); 3.48 (IH, parte B sist. AB, J = 12.2 Hz); 3.44 (IH, parte B sist. AB, J = 8.9 Hz); 2.62 (IH, dd, J = 14.0, 5.2 Hz); 1.72 (IH, d, J = 14.0 Hz); 1.41 (3H, s); 1.36 (3H, s), 1.05 (28H, m). LRMS (API-ES ⁺ ): m/z 776 (M+H) ⁺ , 798 (M+Na) ⁺ , 1576 (2M+Na+3H) ⁺ . Ejemplo 25

Preparación de rac-(lS,2S,3S,4R,8R)-l-(benciloxiamino)-2,4,8-trihidroxi-4- (hidroximetil)-6-{[(2-nitrofenil)selanil]metil}-4,10-O-(prop ano-2,2-diil)-2,8-O- (l,l,3,3-tetraisopropildixiloxano-l,3-diil)-9-oxabiciclo[3.3 .1]non-5-eno (11)

11

Sobre una disolución de 9 (84 mg, 0.13 mmol) enl mi de THF se adicionó a temperatura ambiente selenocianato de 2-nitrofenilo (36 mg, 0.16 mmol) y /7-BU3P (32 mg, 0.16 mmol). La disolución se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas. A continuación, se adicionó a temperatura ambiente selenocianato de 2-nitrofenilo (72 mg, 0.32 mmol) y /7-BU ₃ P (64 mg, 0.32 mmol). La suspensión se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. Pasado ese tiempo, se eliminó el disolvente a presión reducida. Al crudo de reacción se le añadió Celite ^® y AcOEt y se eliminó el disolvente a presión reducida. El producto 11 se aisló tras separación cromatográfica en columna (Hexano/ AcOEt, 10:1), obteniéndose como un aceite amarillo.

¹ H-RMN: δ 8.31 (IH, dm, J = 8.5 Hz); 7.47 (3H, m); 7.31 (5H, m); 5.93 (IH, s); 5.60 (IH, d, J= 5.2 Hz); 5.44 (IH, s, NH); 4.82 (IH, parte A sist. AB, J= 3.0 Hz); 4.76 (IH, parte B sist. AB, J = 3.0 Hz); 4.70 (2H, s); 4.52 (IH, parte A sist. AB, J = 9.2 Hz); 3.63 (IH, parte B sist. AB, J = 9.2 Hz); 3.48 (2H, s); 2.50 (IH, dd, J = 14.2, 5.2 Hz); 1.74 (IH, d, J= 14.2 Hz); 1.44 (6H, s); 1.08 (28H, m). LRMS (API-ES ⁺ ): m/z 821 (M+H) ⁺ , 843 (M+Na) ⁺ . Ejemplo 26

Preparación de rac-(lR,2S,3S,4R,5R,8R)-2,4,5,8-tetrahidroxi-4,6-(hidroximet il)-6- metiliden-l-nitro-4,lO-0-(propano-2,2-diil)-2,8-0-(l,l,3,3-t etraisopropildixiloxano- l,3-diil)-9-oxabiciclo[3.3.1]nonano (12) MÉTODO A

10

Sobre una disolución de 10 (60 mg, 0.08 mmol) en 1.5 mi de CH ₂ Cl ₂ se adicionó a temperatura ambiente piridina (12 mg, 0.16 mmol) y H ₂ O ₂ (18 mg, 0.54 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 40 minutos. Pasado ese tiempo, se adicionó a temperatura ambiente Na ₂ HPO ₄ (0.1 M, 2 mi). Se separaron las fases en un embudo de extracción. La fase acuosa se extrajo con AcOEt (4 x 2 mi). Los extractos orgánicos combinados se secaron con Na ₂ SO ₄ anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. Al crudo de reacción se le añadió Celite ^® y AcOEt y se eliminó el disolvente a presión reducida. El producto 12 se aisló tras separación cromatográfica en columna (Hexano/ AcOEt, 7: 1), obteniéndose como un aceite incoloro. MÉTODO B

11

Sobre una disolución de 11 (74 mg, 0.09 mmol) en 1.5 mi de CH ₂ Cl ₂ se adicionó a temperatura ambiente piridina (14 mg, 0.18 mmol) y H ₂ O ₂ (21 mg, 0.63 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 40 minutos. Pasado ese tiempo, se adicionó a temperatura ambiente Na ₂ HPO ₄ (0.1 M, 2 mi). Se separaron las fases en un embudo de extracción. La fase acuosa se extrajo con AcOEt (4 x 2 mi). Los extractos orgánicos combinados se secaron con Na ₂ SO ₄ anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. Al crudo de reacción se le añadió Celite ^® y AcOEt y se eliminó el disolvente a presión reducida. El producto 12 se aisló tras separación cromatográfica en columna (Hexano/ AcOEt, 7:1), obteniéndose como un aceite incoloro. ¹ H-RMN: δ 5.85 (IH, s); 5.75 (IH, s); 5.53 (IH, dd, J = 5.2, 1.9 Hz); 5.36 (IH, d, J = 3.8 Hz); 4.99 (IH, d, J= 3.8 Hz); 4.24 (IH, s); 4.17 (IH, parte A sist. AB, J = 9.6 Hz); 3.51 (IH, parte B sist. AB, J= 9.6 Hz); 3.20 (IH, dd, J = 14.1, 5.2 Hz); 2.36 (IH, dd, J = 14.1, 1.9 Hz); 1.48 (3H, s); 1.42 (3H, s); 1.05 (28H, m).

LRMS (API-ES ⁺ ): m/z 513 (M-N0 ₂ ) ⁺ , 560 (M+H) ⁺ , 582 (M+Na) ⁺ 1141 (2M+Na) ⁺ .

Ejemplo 27

Preparación de rac-(lR,2S,3S,4R, 8R*)-l-(benciloxiamino)-2,4,8-trihidroxi-4 - (hidroximetil)-6-(fenilselanilmetil)-4,10-O-(propano-2,2-dii l) -9- oxabiciclo[3.3.1]non-5-eno (13)

Sobre una suspensión de 10 (54 mg, 0.07 mmol) en 4 mi de MeOH se adicionó a temperatura ambiente Et ₃ N(HF) _S (404 mg, 2.51 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. Pasado ese tiempo, se adicionó a temperatura ambiente Et ₃ N(HF) ₃ (404 mg, 2.51 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 días. A continuación, se adicionó a temperatura ambiente Na ₂ HPO ₄ (0.1 M, 4 mi). Se separaron las fases en un embudo de extracción. La fase acuosa se extrajo con AcOEt (5 x 4 mi). Los extractos orgánicos combinados se secaron con Na ₂ SO ₄ anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. Al crudo de reacción se le añadió Celite ^® y AcOEt y se eliminó el disolvente a presión reducida. Tras separación cromatográfica en columna (Hexano/AcOEt, 1 :3) se obtuvo un aceite transparente. Sobre una disolución de este aceite (30 mg, 0.04 mmol) en 2 mi de MeOH se adicionó a temperatura ambiente Et ₃ N(HF) _S (224 mg, 1.39 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. Pasado ese tiempo, se eliminó el disolvente a presión reducida. Al crudo de reacción se le añadió Celite ^® y AcOEt y se eliminó el disolvente a presión reducida. El producto 13 se aisló tras separación cromatográfica en columna (Hexano/AcOEt, 1 :3), obteniéndose como un sólido blanco. 1H-RMN: ¿ 7.51 (2H, m); 7.31 (5H, m); 7.21 (3H, m); 5.70 (IH, t, J = 1.2 Hz); 5.36 (IH, d, J= 3.3 Hz); 4.70 (2H, s); 4.55 (IH, s _ancho )4.54 (IH, d, J= 3.5 Hz); 4.11 (IH, d, J = 11.7 Hz); 3.59 (IH, dd, J= 3.5, 1.2 Hz); 3.06 (IH, dd, J= 11.7, 1.2 Hz); 2.47 (IH, d, J= 12.2 Hz); 1.89 (IH, dd, J = 12.2, 3.3 Hz). LRMS (API-ES ⁺ ): m/z 476 (M-H ₂ 0+H) ⁺ , 498 (M-H ₂ O+Na) ⁺ , 973 (2M-H ₂ O +Na) ⁺ .