El presente documento trata de desarrollar una serie de productos novedosos como son una nueva serie de terpeno-qumonas, así como su procedimiento de obtención.

El avarol y su análogo quinónico, la avarona son mero-sesquiterpenoides aislados de una esponja, Dysidea

Avara, que mostraron una cierta actividad citotóxica y que pueden considerarse como modelo de una serie de análogos, descubiertos o preparados después, conteniendo distintas variantes de sustitución de la parte quinónica y/o de esqueleto en la parte sesquiterpérnica. Un buen número de estos compuestos que contienen un sistema serterpénico bicíclico, poseen actividad citotóxica con valores IC50 alrededor de 1 microgramo por mililitro. Otras sesquiterpeno-qumonas con restos terpénicos monocíclicos también presentan niveles similares de actividad.

Hasta la fecha, no se han publicado estudios en los que se investigue la relación estructura-actividad de estos compuestos en relación con el tamaño y tipo de los restos quinónico y terpénico de la molécula. Por ello, en este trabajo se ha planteado analizar el efecto del aumento, disminución y funcionalización del resto terpénico y el aumento de la unidad quinónica a naftaqumona.

Con el fin de realizar una exposición clara de los procesos de la invención se adjuntará a este texto las reacciones que a continuación se explicarán, escritas en sus fórmulas químicas, resultando dichas reacciones las genéricas de la invención .

HOJA SUSTITUIDA

Las moléculas objetivo de este trabajo contienen como sistema quinónico una naftoquinona simple o sustituida de tipo A, en la que R ¹ es un resto alquilo o alcoxilo y T corresponde a un resto alquílico o cicloalquílico, preferentemente de tipo isoprénico, monoterpénico, sesquiterpénico o de tamaño intermedio entre estos tipos.

AVARONA

Asimismo, se incluyen como objetivo los derivados de naftoquinona de tipos B y C y los correspondientes dihidroxinaftálenos análogos de tipos D y E,

La mayor parte de estos compuestos, se han sintetizado utilizando como reacción base la ciclocondensación de Diels-Alder entre la p-benzoquinona convenientemente sustituida y un compuesto conteniendo un sistema diénico conjugado, en presencia o no de catalizador. La equilibración, modificación química o manipulación posterior del producto directamente de la cicloadición (B) , puede conducir sucesivamente a los compuestos de tipo E,C,D y A, que se representan a continuación para dos tipos diferentes de sustitución del sistema diénico.

Este primer tipo de sustitución del sistema diénico se observa en su reacción como:

El segundo tipo de sustitución del sistema diénico referido anteriormente será:

Los compuestos de partida, utilizables en las cicloadiciones, tienen un sistema diénico conjugado sobre esqueletos carbonados de alcano lineal o ramificado: 2,6- dimetiloctano, 2 ,6, 10-trimetildodecano, 2,6,10,14- tetrametilhexanodecano, 2,6, 10,15,19,23-hexametιltetra- cosano o sobre cualquier otro de naturaleza cíclica relacionado biogenésica o artificialmente con estos.

Los nombres químicos de los tipos de compuestos referidos en dichas reacciones genéricas serán los siguientes, teniendo en cuenta que en los citados nombres aparecerán números y palabras entre paréntesis, significando respectivamente posiciones posibles de un sustituyente y la posibilidad de existencia de la mencionada función o modificación estructural, y que dependiendo de R ¹ y T se englobarán en subtipos:

COMPUESTO TIPO A.- R ¹ = Hidrógeno 5(6)-alquil(alquenil)-nafto-1,4-quinonas

5(6)-(poli)cicloalquil(cicloalquenil)-alquil-nafto-1,4- quinonas

5(6)-(poli)ciclo(poli)isoprenil-nafto-1,4-quinonas

R ¹ = Alquilo

2 ( 3 ) -alquil- 5 ( 6 ) ( 7 ) ( 8 ) -alquil ( alquenil ) -naf to- 1 , 4 -qumonas

2(3)-alquil-5(6)(7) (8)-(poli)cicloalquil(cicloalquenil)- alquil-nafto-1,4-quinonas

2(3)-alquil-5(6)(7)(8)-(poli)ciclo(poli)isoprenil-nafto- 1,4-quinonas

R ¹ = Alcoxilo

2(3)-alcoxil-5(6) (7)(8)-alquil(alquenil)-nafto-1 ,4-quinonas 2 (3)-alcoxil-5(6) (7) (8)-(poli)cicloalquil(cicloalquenil)- alquil-nafto-1,4-quinonas

2(3) -alcoxil-5 (6) (7) (8)-(poli)ciclo(poli) isoprenil-naf to- 1 , -quinonas

R ¹ = (di )Alquilamino 2(3)-(di)Alquilamino-5(6) (7) ( 8 ) -alquil ( alquenil ) -naf to-1 , 4- quinonas

2 ( 3 ) - ( d i ) A l q u i l a m i n o - 5 ( 6 ) ( 7 ) ( 8 ) - ( pol i) cicloalquil (cilcolalquenil) -al quil-nafto-1, 4- quinonas . 2(3)-(di)Alquilamino-5(6) (7) ( 8 )-(poli)ciclo( poli ) isoprenil- naf to-1 , 4-quinonas .

COMPUESTO TIPO B.-

R' = Hidrógeno 5(6)-alquil(alquenil)-4a,5,8,8a-t trahidro-naftaleno-1,4- dionas

5(6)-(poli)cicloalquil( cicloalquenil ) -alquil -4a, 5 , 8 , 8a- tetrahidro-naf taleno-1 , 4-dionas

5(6)-(poli)ciclo(poli)isoprenil-4a,5,8, 8a-tetrahidro- naftaleno-1 ,4-dionas.

R ¹ = Alquilo

2(3)-alquil-5( 6) (7) (8)-alquil(alquenil)-4a,5,8,8a- tetrahidro-naftaleno-1, -dionas. 2(3)-alquil-5(6)(7) (8)-(poli)cicloalquil(cicloalquenil)- alquil-4a,5,8,8a-tetrahidro-naftaleno-l,4-dionas. 2(3)-alquil-5(6) (7) (8)-(poli)ciclo(poli)isoprenil- 4a,5,8,8a-tetrahidro-naftaleno-l,4-dionas.

R ¹ = Alcoxilo

2(3)-alcoxil-5(6) (7) (8) -alquil (alquenil )-4a,5,8,8a- tetrahidro-naftaleno-1,4-dionas.

2 (3)-alcoxil-5(6) (7) (8)-(poli)cicloalquil(cicloalquenil )- alquil-4a,5,8,8a-tetrahidro-naftaleno-1,4-dionas. 2(3)-alcoxil-5(6) (7) (8)-(poli)ciclo(poli)isoprenil-

4a, 5 , 8 , 8a-tetrahidro-naftaleno-1 , 4-dionas .

R ¹ = (di )Alquilamino

2(3 )-(di)Alquilamino-5( 6 ) ( 7 ) ( 8 ) -alquil ( alquenil ) -4a , 5 , 8 , 8a- tetrahidro-naftaleno-1 ,4-dionas .

2 ( 3 ) - ( d i ) A l q u í l a m i n o - 5 ( 6 ) ( 7 ) ( 8 ) - (poli)cicloalquil (cicloalquenil) -alquil-4a, 5,8, 8a-tetrahi¬ dro-naftaleno-1 , -dionas .

2(3)-(di)Alquilamino-5(6) (7) ( 8 ) - (poli ) ciclo (poli ) isoprenil- 4a, 5 , 8 , 8a-tetrahidro-naftaleno-1 , 4-dionas .

COMPUESTO TIPO C- R = Hidrógeno

5(6) -alquil ( alquenil ) -5 , 8-dihidro-nafto-1 , 4-quinonas 5(6 )- (poli) cicloalquil (cicloalquenil ) -alquil-5 , 8-dihidro- nafto-1 , 4-quinonas

5(6 )- (poli )ciclo( poli ) isoprenil-5 ,8-dihidro-nafto-l,4- quinonas

R ¹ = Alquilo

2 (3 )-alquil-5 ( 6 ) ( 7 ) ( 8 ) -alquil (alquenil ) -5 , 8-dihidro-nafto-

1,4-quinonas

2(3)-alquil-5(6)(7) ( 8 )- (poli)cicloalquil (cicloalquenil ) - alquil-5 , 8-dihidro-nafto-1 , 4-quinonas . 2(3)-alquil-5(6) (7) (8)-(poli)ciclo(poli) isoprenil-5 , 8- dihidro-nafto-1 , 4-quinonas .

R ¹ = Alcoxilo

2(3)-alcoxil-5(6) (7 ) (8)-alquil ( alquenil ) -5 , 8-dihidro-nafto- 1,4-quinonas

2 (3)-alcoxil-5(6) (7 ) ( 8 )- (poli)cicloalquil ( cicloalquenil ) - alquil-5 , 8-dihidro-nafto-1 , 4-quinonas .

2(3 )-alcoxil-5(6) ( 7 ) ( 8 ) - ( poli ) ciclo(poli ) isoprenil-5 , 8- dihidro-nafto-1 , -quinonas .

R ¹ = (di)Alquilamino

2(3)-(di)Alquilamino-5(6) (7) ( 8 ) -alquil ( alquenil ) -5 , 8- dihidro-nafto-1,4-qumonas.

2 ( 3 ) - ( d i ) A l q u i l a m i n o - 5 ( 6 ) ( 7 ) ( 8 ) - (poli)cicloalquil(cicloalquenil)-alquil-5,8-dihidro-nafto- 1,4-quinonas.

2(3)-(di)Alquilamino-5(6) (7 ) (8)-(poli)ciclo(poli)isoprenil- 5,8-dihidro-nafto-1, -quinonaε.

COMPUESTO TIPO D.-

R ¹ = Hidrógeno

5 ( 6 ) -alquil ( alquenil ) -naftaleno-1 , 4-dioles y sus diacetatos(diésteres) .

5(6)-(poli)cicloalquil(ciclalquenil)-alquil-naftaleño-1 , - dioles y sus diacetatos(diésteres) .

5(6)-(poli)ciclo(poli)isoprenil-naftaleño-1,4-dioles y sus diacetatos(diésteres) .

R ¹ = Alquilo 2(3)-alquil-5(6) (7) (8)-alquil-naftaleno-1, -dioles y sus diacetatos(diésteres) .

2(3)-alquil-5(6)(7) (8)-(poli)cicloalquil(cicloalquenil)- alquil-naftaleno-1,4-dioles y sus diacetatos(diéεteres) .

2(3)-alquil-5(6) (7) (8)-(poli)ciclo(poli)isoprenil- naftaleno-1,4-dioles y sus diacetatos(diésteres) .

R ¹ = Alcoxilo

2(3)-alcoxil-5(6) (7 ) ( 8 ) -alquil(alquenil)-naftaleno-1,4- dioleε y sus diacetatos(diésteres) . 2 (3)-alcoxil-5(6) (7) (8)-(poli)cicloalquil(cicloalquenil)- alquil-naftaleno-1,4-dioles y sus diacetatos(diésteres) . 2(3)-alcoxil-5(6) (7) (8)-(poli)ciclo(poli)isoprenil- naftaleno-1,4-dioles y sus diacetatos(diésteres) .

R ¹ = (di)Alquilamino

2(3)-(di)Alquilamino-5(6 ) (7 ) ( 8 )-alquil ( alquenil ) -naftaleno- 1,4-dioles y sus diacetatos(diésteres ) .

2 ( 3 ) - ( d i ) A l q u í l a m Í n o - 5 ( 6 ) ( 7 ) ( 8 ) - (poli )cicloalquil (cicloalquenil) -alquil-naftaleno-1, 4- dioles y sus diacetatos (diésteres) .

2 (3)-(di)Alquilamino-5(6 ) ( 7 ) ( 8 ) - (poli )ciclo(poli ) isoprenil- naftaleno-1 , 4-dioles y sus diacetatos(diésteres) .

COMPUESTO TIPO E.- R ¹ = Hidrógeno

5 ( 6 )-alquil( alquenil ) -5 , 8-dihidro-naftaleno-1 ,4-dioles y sus diacetatos(diésteres)

5(6)- (poli)cicloalquil (cicloalquenil ) -alquil-5 , 8-dihidro- naftaleno-l,4-dioles y sus diacetatos(diésteres) . 5(6)-(poli)ciclo(poli) isoprenil-5 , 8-dihidro-naftaleno-l ,4- dioles y sus diacetatos(diésteres) .

R ¹ = Alquilo

2(3)-alquil-5(6) (7) (8)-alquil ( alquenil ) -5 , 8-dihidro- naf taleno-1 ,4-dioles y sus diacetatos (diésteres) .

2(3)-alquil-5(6)(7) ( 8 )- (poli ) cicloalquil ( cicloalquenil ) - alquil-5 , 8 -dihidro-naf taleno- 1 , 4 -dioles y sus diacetatos (diésteres) .

2(3)-alquil-5(6) (7 ) ( 8 ) - ( pol i ) ciclo ( poli ) isoprenil -5 , 8- dihidro-naf taleno-1 ,4-dioles y sus diacetatos (diésteres) .

R ¹ = Alcoxilo

2(3)-alcoxil-5(6) (7) ( 8 ) -alquil ( alquenil ) -5 , 8 -dihidro- naf taleno-1 , 4-dioles y sus diacetatos ( diésteres ) . 2 (3)-alcoxil-5(6) (7) ( 8) - (poli ) cicloalquil (cicloalquenil ) - alquil-5 , 8 -dihidro-naf taleno- 1 , 4-dioles y sus diacetatos(diesteres) .

2(3)-alcoxil-5(6) (7) (8)- ( poli ) ciclo (poli ) isoprenil- 5 , 8- dihidro-naftaleno-1 , 4-dioles y sus diacetatos(diésteres) .

R ^: = (di)Alquilamino

2(3) -(di)Alquilamino-5(6 ) (7) (8)-alquil(alqueniH-5,8- dihidro-naftaleno-1, -dioles y sus diacetatos(diéεteres) .

2 ( 3 ) - ( d i ) A l q u i l a m Í n o - 5 ( 6 ) ( 7 ) ( 8 ) -

(poli ) cicloalquil (cicloalquenil) -alquil-5 , 8-dihidro- naf taleno-1 , 4-dioleε y sus diacetatos (diéεteres ) .

2( 3)-(di)Alquilamino-5(6 ) (7 ) (8)-(poli )ciclo(poli) isoprenil -

5, 8-dihidro-naftaleno-l ,4-dioles y sus diacetatoε

(diéεtereε) .

Con esta lista se concreta con mayor preciεión los tipos de compuestos, que resultan el objetivo del trabajo recogido en este documento de patente de invención, adaptándoεe por tipoε y εubtipoε εegún la explicación, for ulaε y reacciones anteriormente mencionadas.

Con dichaε reacciones y compuestos genéricos se pueden determinar ciertos ejemplos de realización práctica desrrolladoε en laboratorio, habiéndoεe seguido las siguientes pautas para obtener los compuestoε concretos que a continuación iremoε citando.

Primer ejemplo.-

A una disolución de mirceoco unato de metilo o compuesto 1, de 733 miligramos o 2' 32 milimoles, en éter anhidro se le añaden bajo agitación en atmófera inerte, otra disolución en éter seco de p-benzoquinona de 251 miligramos o 2 '32 milimoles y una cantidad catalítica de BF, eterato. La mezcla se mantiene a temperatura ambiente durante 24 horaε. Se añade agua y se lava haεta neutralidad. Se seca (Na,Sθ , filtra y destila y εe obtiene un residuo se isólido pardo que se somete a cromatografía sobre gel de sílice, obteniéndose finalmente 127 miligramos

(13%) de 6-f14-metoxι-14-oxo-drιm-8( 12)-en-ll-ιl-metιl 1- nafto-1 ,4-quιnona o compuesto número 2 y 560 miligramos (57%)de5,8-dιhιdro-f 14-metoxι-14-oxo-drιm-8( 12)-en-ll-ιl- metil]-naftaleno-1 ,4-dιol o compuesto número 3. La acetilación del número 3 en condiciones estándar conduce a un compuesto adicional 3a denominado diacetato de 5,8- dihidro-[14-metoxι-14-oxo-drιm-8(12^-en-ll-ιl-metιl]- naftaleno-1 ,4-d ol .

Segundo ejemplo,

A partir de 450 miligramos o 1'42 milimoles de mirceocomunato de metilo o compuesto 1, y 175 miligramos o 1'42 mili oles de 2-metιl-p-benzoquιnona, en presencia del mismo catalizador, en las mismas condiciones durante 28 horas, después de cro atograflar, se obtienen 40 miligramos (6,5%) del producto reordenado 4 o 2(3)-metιl-6-[ 14-metoxι- 14-oxo-drιm-8(12)-en-11-ιl-metil]-nafto-1 ,4-qumonaaceite

amarillento, 170 miligramos de 5 , 8-dihidro-2(3)-metil-6- fl4-metoxi-14-oxo-drim-8(12)-en-11-il-metil1-nafto-1 ,4- quinona o compuesto 5, aceite rojizo además de 298 miligramos (48%) de 5,8-dihidro-2(3) -metil-6-[14-metoxi- 14-oxo-drim-8(12)-en-11-il-metil]-naftal no-1 ,4-diol o compuesto 6, εolido pardo de punto de fusión 97 grados centígrados. La acetilación del compuesto 6 en condiciones estándar conducirá al compuesto 6a o diacetato de 5,8- dihidro-2(3)-metil-6-f14-metoxi-14-oxo-drim-8( 12 )-en-11-il- metil ]-naftaleno-1,4-diol.

R = COOH, COOMc. CH ₂ OH. CH ₇ 0Ac. CH,

Tercer ejemplo -

A partir de 200 miligramos o 0,63 milimoles de trans-comunato de metilo o compueεto reactivo 7 y 68 miligramos o 0,63 mili oles de p-benzoqumona , con el mismo catalizador, condiciones y operaciones que en el primer ejemplo, después de cromatograflar se recupera gran parte del producto sin reaccionar y se obtienen 95 miligramos (23%) de compuesto 8 o 4a, 5 , 8, 8a-tetrahιdro-6-metιl-5- f 14- metoxι-14-oxo-drιm-8( 12 ) -en-11-ιl-metιl] -naftaleno-1 , 4- qumona, producto oleoso amarillento, y trazas de compuesto 9 que εe acetiló al compueεto 9a.

Cuarto ejemplo. -

A partir de 1 gramo o 7,35 milimoleε de irceno o compueεto 10 en 150 militroε de éter anhidro y 0,78 gramoε o 7,35 mili oleε de p-benzoqumona, en presencia de una pequeña cantidad de BF,-eterato, manteniendo la reacción en las mismas condiciones anteriores, durante 36 horas y operando como se ha descrito en el primer ejemplo, se obtienen 1,65 gramoε de un reεiduo viεcoso rojizo del cual por cromatografía sobre gel de sílice se aislan 150 miligramos (8,5%) de compuesto 11, o 6- (4-metιlpent-3-

enil ) -nafto-1 ,4-quinona,producto oleoso de color amarillo- anaranjado, 300 miligramoε (17%) de compueεto 12 o 5,8- dihidro-6- (4-metilpent-3-enil ) -nafto-1 , 4-quinonadeεimilar conεititución y aεpecto y 825 miligramoε (46%) de compuesto 13o5 , 8-dihidroτ6- ( 4-metilpent-3-enil ) -naftaleño-1 ,4-diol , sólido pardo rojizo de punto de fusión 120 grados centígra¬ dos. La acetilación del compuesto 13 conduce en condiciones eεtandar al compueεto 13a o diacetato de 5 , 8-dihidro-6- (4- metilpent-3-enil)-naftaleno-1 ,4-diol con un rendimiento del 75% deεpués de purificar. Seguidamente se procederá a disolver 198 miligramos o 0,6 milimoles de compuesto 13a en 50 mililitros de diclorometano y se añaden 110 miligramos o 0,6 milimoles de ácido metacloroperbenzoico (mcpba) y 150 miligramos o 2 milimoles de hidrocarbonato sódico. La mezcla εe mantiene bajo atmóεfera εeca y en agitación durante 30 minutoε . La reacción εe detiene mediante lavadoε de la faεe orgánica con disolución de Na ₂ S _: 0, -i agua hasta reducción completa del exceso de oxidante, se lava posteriormente con agua hasta neutralidad, se seca, filtra y destila, dando lugar a 153 miligramoε de un residuo oleoso incoloro, que una vez cromatografiado da lugar a 120 miligramos (58%) de compuesto 14 o diacetato de 5,8- dihidro-6-(3,4-epoxi-4-metilpentil ) -naftaleno-1 ,4-diol .

ACTIVIDAD BIOLÓGICA

La actividad citotóxica de las terpeno-qu onas obtenidas se ha determinado mediante un procedimiento sencillo de screening usando una forma adaptada del método descrito por Bergeron et al. (1984) frente a cultivos celulares P-388 (cultivo en suεpensión de neoplasma lmfoide de ratón DBA/2), A-549 (cultivo en monocapa de carcinoma de pulmón humano), HT-19 (cultivo en monocapa de carcinoma de colon humano) y MEL-28 (cultivo en monocapa de melanoma humano) . Los valores de IC _5C en microM. , observadoε para los compuestos representativos que se mencionan en este trabajo, aparecen recogidos en la siguiente tabla, en la que se incluyen también los valores hallados para avarona, como elemento de comparación.

Las células P-388 se siembran en pocilios de 16 milímetros a 1x10.000 células por pocilio en alícuotas de

1 mililitro de MEM 5FCS que contiene la concentración de la droga indicada. Por separado, se siembra un lote de cultivos sin droga como control de crecimiento para

asegurar que las células se mantienen en una fase logarítmica de crecimiento. Todas las determinaciones se realizan en duplicado. Después de tres días de incubación a 37 grados centígrados, 10% de C02 en atmósfera a 98% de humedad, se determina el IC _5C aproximado comparando el crecimiento en los pocilios con droga y el crecimiento en los pocilios control.

Las células A-549, HT-29 y MEL-28 se siembran en pocilios de 16 milímetros a 2x10.000 células por pocilio en alícuotas de 1 mililitro de MEM 10FCS que contiene la concentración de la droga indicada. Por separado, se siembra un lote de cultivos sin droga como control de crecimiento para asegurar que las células se mantienen en una fase logarítmica de crecimiento. Todas las determinaciones se realizan en duplicado. Después de tres días de incubación a 37 grados centígrados, 10% de C02 en atmósfera a 98% de humedad, se tiñen los pocilios con

Cristal Violeta al 0,1%. Se determinan el IC _S0 aproximado comparando el crecimiento en los pocilios con droga y el crecimiento en los pocilios control.

Una vez descrita suficientemente la naturaleza del procedimiento de la invención y obtención de los productos indicadoε en la presente memoria, solo nos queda por añadir que dicho procedimiento puede ser variado en parte, sin que ello suponga una alteración sustancial de las caracteristicaε que εe reivindican a continuación.