COMPOSES TRICYCLIQUES AYANT UNE ACTIVITE VIS-A-VIS DES INTEGRINES NOTAMMENT VIS-A-VIS DE L' INTEGRINE ALPHAvBETA3, LEUR PROCEDE DE PREPARATION ET LES INTERMEDIAIRES DE CE PROCEDE, LEUR APPLICATION A TITRE DE MEDICAMENTS ET LES COMPOSITIONS PHARMACEUTIQUES LES RENFERMANT.

La présente invention concerne de nouveaux composés tricycliques , leur procédé de préparation et les intermé¬ diaires de ce procédé, leur application à titre de médica¬ ments et les compositions pharmaceutiques les renfermant . La présente invention a pour objet les composés de formule générale (I) :

dans laquelle R-^ représente un groupement -C≈C- [A] - [B] -CORg, -CH≈CH- [A] - [B] -CORg, - (CH ₂ ) ₂ - [A] - [B] -CORg, -O- [A] - [B] -CORg, -CH ₂ C0- [A] - [B] -CORg, -[A]- représentant

- soit un radical hydrocarboné bivalent dérivé d'une struc¬ ture linéaire ou ramifiée, saturé ou insaturé, comportant de 1 à 12 atomes de carbone et de 1 à 6 hétéroatomes choisis parmi les atomes d'oxygène, d'azote ou de soufre, - soit un radical bivalent dérivé d'un hydrocarbure acycli- que, linéaire ou ramifié, saturé ou insaturé, comportant de 1 à 12 atomes de carbone,

[B] représentant un radical phényle, un radical CH(Z) , ou une simple liaison, Z représente un atome d'hydrogène, un groupement (D) ₀ . ₆ - RaRb, (D) ₀ .g-NH-S0 ₂ -Rc, (D) _O .g-NH-C0 ₂ -Rc, (D) ₀ _g-NH-CO-Rc, (D) ₀ .g-NH-SO ₂ -NH-Rc, (D) ₀ .g- H-CO-NH-Rc, (D) _Q . ₆ -C0 ₂ -RC, <D) ₀ _g-SO ₂ -Rc, (D) ₀ _g-CO-Rc ou (D) ₀ .g-Rc dans

lesquels (D)()-6 ^{est un ra} dical bivalent dérivé d'un hydro¬ carbure acyclique, linéaire ou ramifié, saturé ou insaturé, comportant de 0 à 6 atomes de carbone,

Ra, Rb et Rc représentent un atome d'hydrogène, un radical (CH ₂ ) ₀ _ ₃ -Ar dans lequel Ar représente un groupement aryle carbocyclique renfermant de 6 à 18 atomes de carbone, un radical (CH ₂ ) _Q _ ₃ -Het dans lequel Het représente un radical dérivé d'un hétérocycle aromatique ou non aromatique, saturé ou non saturé, comportant de 1 à 9 atomes de carbone et de 1 à 5 heteroatomes choisis parmi les atomes d'oxygène, d'azote ou de soufre, un radical (CH ₂ ) ₀ _ ₃ -Alk dans lequel Alk repré¬ sente un radical dérivé d'un hydrocarbure, non aromatique, linéaire, ramifié ou cyclique, saturé ou insaturé, et compor¬ tant de 1 à 12 atomes de carbone, les radicaux Het, Ar et Alk pouvant être non substitués ou substitués, ou encore, Ra et Rb représentent ensemble avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un hétérocycle azoté, aromatique ou non aromatique, saturé ou insaturé, renfermant éventuelle¬ ment un ou plusieurs heteroatomes choisis parmi les atomes d'oxygène, d'azote ou de soufre, ce radical pouvant être substitué ou non substitué,

- Rg représente un radical hydroxyle, un radical O-Alk, O-Ar, H ₂ , NH-Alk, N(Alk) ₂ ou le reste d'un amino acide L ou D, Alk et Ar étant tels que définis précédemment et pouvant être substitués ou non substitués,

- R ₂ et R ₃ identiques ou différents représentent ou bien un atome d'hydrogène, un radical hydroxyle, un radical O-Alk ou un radical 0- (CH ₂ ) ₀ _ ₃ -Ar, Alk et Ar étant tels que définis précédemment, ou bien R ₂ et R ₃ forment ensemble un cycle du type -O- (CRdRe) _n -0- , n étant un entier de 1 à 5, Rd et Re indépendamment l'un de l'autre représente un atome d'hydro¬ gène, un radical alkyle renfermant de 1 à 6 atomes de carbo¬ ne, ou un radical phényle,

- R ₄ représente un atome d'hydrogène, un atome d'halogène, un groupement hydroxyle, amino, nitro, cyano, CF ₃ , acyle ou acyloxy renfermant de 1 à 12 atomes de carbone alkyle, alké- nyle, alkynyle, alkylthio, alkoxy, alkylamino, dialkylamino, dialkylaminoalkyle, dialkylaminoalkyloxy, dans lesquels le

terme alkyle renferme de 1 à 6 atomes de carbone, - R ₅ représente un atome d'hydrogène, un radical hydroxyle, un atome d'halogène, un radical O-Alk ou un radical 0- (CH ) _0.3 -Ar, Alk et Ar étant tels que définis précédemment, - G représente, soit un radical de formule Gl

N—(Het')

I Rh

dans lequel Rh est un atome d'hydrogène ou un groupement (Alk) tel que défini précédemment et (Het') est un hétérocy¬ cle de formule générale :

C (H)

dans lequel (H) forme, avec le motif N=C-NH-, le reste d'un hétérocycle aromatique ou non aromatique, mono ou bicyclique, saturé ou non saturé, comportant de 1 à 9 atomes de carbone et de 2 à 5 heteroatomes choisis parmi les atomes d'oxygène, d'azote et de soufre, ce radical pouvant être substitué ou non substitué, - soit un radical NRaRb (radical G2) , Ra et Rb étant tels que définis plus haut,

- soit un radical (Het) (radical G3) tel que défini plus haut,

- soit un radical -NRh-C(=X) - HRc (radical G4) , dans lequel X est un atome de soufre, d'oxygène ou NH, Rh et Rc sont tels que définis précédemment,

- soit un radical -NRh-S0 ₂ Rc, (radical G5) , dans lequel Rh et Rc sont tels que définis précédemment, les traits en pointillés représentent une éventuelle seconde liaison, ainsi que les sels d'addition avec les acides et les bases et les esters,

Rη_, R ₂ et R ₃ peuvent être en position 8, 9 ou 10 du tricycle. Par composé de formule (I) on désigne tous les isomères

géométriques et les stéréoisomères possibles pris indivi¬ duellement ou en mélange.

Par groupe - [A] - représentant un radical bivalent dérivé d'une structure linéaire ou ramifiée, saturé ou insaturé, comportant de 1 à 12 atomes de carbone et de 1 à 6 heteroato¬ mes choisis parmi les atomes d'oxygène, d'azote et de soufre, on désigne notamment, les radicaux dérivés des alcanes dont certains carbones sont remplacés par des atomes d'oxygène, de soufre ou par des groupement C=0, SO, S0 ₂ , NH, N(Alk) , NH-CO, N(Al ) -C0, CO-NH, CO-N(Alk), S0 ₂ -NH, S0 ₂ -N(Alk), (Alk) étant tel que défini plus haut. Il peut alors s'agir des radicaux suivants -CH ₂ -CH ₂ -0-CH ₂ -CH ₂ - , -CH ₂ -CH ₂ -N(CH ₃ ) -CH ₂ -CH ₂ -, CH ₂ -CH ₂ -C(0) -CH ₂ -CH ₂ , CH ₂ -C(0) -C(Me) ₂ -CH ₂ .

Lorsque - [A] - représente un radical bivalent dérivé d'un hydrocarbure acyclique, linéaire ou ramifié, saturé ou insa¬ turé, comportant de 1 à 12 atomes de carbone, on désigne notamment les radicaux alkylènes de formule -(CH ₂ ) _n -, dans laquelle n représente un entier compris entre 1 et 12, tels que -CH ₂ -, -CH ₂ CH ₂ -, -CH ₂ CH ₂ CH ₂ - ou -CH ₂ CH ₂ CH ₂ CH ₂ - , ou bien les radicaux alkénylène ou alkynylene tels que -CH=CH-CH ₂ - ou

Lorsque ces radicaux bivalents sont ramifiés, il peut s'agir de radicaux tels que -CH(CH ₃ )-, -C(Me) ₂ , -CH ₂ -C(Me) ₂ - , -CH(Et)-, -CH(C≈CH)- OU -C(C-CH) (Et)-. Lorsque [B] représente un radical bivalent -Ph-, le groupement CORg peut être en position ortho, meta ou para. Il se trouve de préférence en position para.

Lorsque (D) ₀ .g est un radical bivalent dérivé d'un hydrocarbure acyclique, linéaire ou ramifié, saturé ou insa- turé, comportant de 0 à 6 atomes de carbone, (D) ₀ _ ₆ est choisi parmi les valeurs de [A] citées plus haut. On entend par (D) _Q l'absence de ce radical ce qui revient à avoir une simple liaison covalente. (D) sera de préférence une simple liaison ou un groupement (CH ₂ ) _n , n étant un entier choisi parmi 1, 2 ou 3.

Lorsque Ra, Rb et Rc représentent un groupement (CH ₂ ) ₀ _ ₃ -Ar, (CH ₂ ) ₀ _ ₃ -Het, (CH ₂ ) ₀ . ₃ -Alk, (CH ₂ ) ₀ _ ₃ représente soit une simple liaison dans le cas de (CH ₂ ) _Q , soit les

radicaux - CH ₂ - , - (CH ₂ ) - ou - (CH ₂ ) ₃ - .

Par le terme (Ar) représentant un groupement aryle carbocyclique renfermant de 6 à 18 atomes de carbone, on entend un radical dérivé d'un hydrocarbure cyclique aromati- que tel que le radical phényle, naphtyle, phénanthrènyl ou bien un radical dérivé d'un hydrocarbure bicyclique ou tricy- clique condensé comportant un cycle benzénique tel que inda- nyle, indényle, dihydronaphtyle, tétrahydronaphtyle ou fluo- rènyl. La jonction s'effectue au niveau du cycle benzénique. II s'agit de préférence du phényle.

Par le terme (Het) représentant un radical dérivé d'un hétérocycle aromatique ou non aromatique, saturé ou non saturé, comportant de 1 à 9 atomes de carbone et de 1 à 5 heteroatomes choisis parmi les atomes d'oxygène, d'azote et de soufre, on désigne notamment :

- les radicaux monocyclique hétérocycliques, par exemple les radicaux thiényle, furyle, pyrannyle, pyrrolyle, imidazolyle, pyrazolyle, pyridyle, pyrazinyle, pyrimidinyle, pyridazinyle, thiazolyle, oxazolyle, furazannyle, pyrrolinyle, imidazoli- nyle, pyrazolinyle, thiazolinyle, triazolyle, tétrazolyle,

- les cycles condensés hétérocycliques, par exemple le benzo- furannyle, le benzothiényle, le benzimidazolyle, le benzo- thiazolyle, le naphto[2,3-b]thiényle, le thianthrényle,

1'isobenzofurannyle, le chroményle, le xanthényle, le phé- noxathiinyle, 1'indolizinyle, 1'isoindolyle, le 3H-indolyle, l'indolyle, 1'indazolyle, le purinyle, le quinolizinyle, 1'isoquinolyle, le quinolyle, le phtalazinyle, le naphtyridi- nyle, le quinoxalinyle, le quinazolinyle, le cinnolinyle, le ptéridinyle, le carbazolyle, le béta-carbolinyle, l'acridi- nyle, le phénazinyle, le phénothiazinyle, le phenoxazinyle, 1'indolinyle, 1'isoindolinyle, 1'imidazopyridyle, l'i idazo- pyrimidinyle ou encore les systèmes polycycliques condensés constitués de monocycliques hétérocycliques tels que définis ci-dessus comme par exemple le furo[2,3-b]pyrrole ou le thiéno[2,3-b] furanne,

- ou les hétérocycles saturés tels que pyrrolidine, pipéridi- ne, morpholine.

Ce terme (Het) englobe par ailleurs les valeurs de

(Hef) telles que définies précédemment.

Par le terme (Alk) représentant un radical dérivé d'un hydrocarbure, non aromatique, linéaire, ramifié ou cyclique, saturé ou insaturé, on désigne dans le cas des hydrocarbures acycliques les radicaux alkyles tels que méthyle, éthyle, propyle, isopropyle, butyle, isobutyle, tert-butyle, n- pentyle, n-hexyle, 2-méthyl pentyle, 2,3-diméthyl butyle, n- heptyle, 2-méthylhexyle, 2,2-diméthylpentyle, 3,3-diméthyl pentyle, 3-éthylpentyle, n-octyle, 2,2-diméthylhexyle, 3,3- diméthylhexyle, 3-méthyl-3-éthylpentyle, nonyle, 2,4-dimé- thylheptyle ou n-décyle, les radicaux alkényles tels que vinyle, propényle, isopropényle, allyle, 2-méthylallyle, butényle ou isobutényle, ou les radicaux alkynyles tels que éthynyle, propynyle, propargyle, butynyle ou isobutynyle, et dans le cas des radicaux cycliques, les radicaux cycloal- kyles, tels que cyclopropyle, cyclobutyle, cyclopentyle, cyclohexyle ou adamantyle.

Lorsque Ra et Rb représentent ensemble avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un hétérocycle azoté, il s'agit notamment des heterocycles saturés suivants morpholine, pipé- ridine, pipérazine, pyrrolidine, ou des heterocycles insa¬ turés tels que pyrimidine, pyridine ou pyrazine.

Lorsque R ₂ , R ₃ , R ₄ et R ₅ représentent un radical 0- (Alk) renfermant de 1 à 12 atomes de carbone, il s'agit de préfé- rence des radicaux méthoxy, éthoxy, propyloxy, isopropyloxy, butyloxy, allenyloxy ou propargyloxy. Lorsque R ₂ , R ₃ , R ₄ et R ₅ représentent un radical 0- (CH ₂ ) ₀ . ₃ -Ar on entend de préfé¬ rence les radicaux phényléthoxy et phénylpropyloxy.

Lorsque R ₂ et R ₃ forment ensemble un cycle du type -0- (CRdRe) _n -0- , n étant un entier de 1 à 5, il s'agit notam¬ ment des radicaux -0-CH ₂ -0, 0-C(Me ₂ )-0, 0-C(Ph ₂ )-0. R ₂ et R ₃ sont impérativement en position ortho l'un de 1'autre.

Lorsque Rg représente un radical 0-Alk ou O-Ar, Alk et Ar étant substitués ou non substitués, il s'agit notamment des radicaux suivants : - alkoxy, (Cg-C ₁ ) aryloxy, (C ₁ -C ₈ ) alkylcarboxyloxy, (C-^-Cg) dialkylaminocarbonylméthoxy, (Cg-C ₁₄ ) aryl (C ₁ -C ₈ ) dialkyl-

aminocarbonylméthoxy.

Lorsque Rg représente un radical NH-alk, NH(alk) ₂ ou NH- Ar, il s'agit notamment des radicaux (C^ _^ -C ) alkylamino, di- (C^Cg) alkylamino, (Cg-C ₁₄ ) aryl (C ₂ -C ₈ ) alkylamino, Cg-C ₁₄ ) arylamino.

Lorsque Rg représente le reste d'un amino acide il peut s'agir d'amino acide L ou D.

Les amino acides L ou D peuvent être naturels ou non naturels. De préférence il s'agit des α-amino acides. Par exemple, ceux décrits dans Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie, Band XV/i et 2, Georg Thieme Verlag, Stuttgart, 1974 :

Aad, Abu, γAbu, Abz, 2ABz, eAca, Ach, Acp, Adpd, A b, Aib, 3Aib, Ala, jSAla, Δala, Alg, Ail, Ama, Amt, Ape, Apm, Apr, Arg, Asn, Asp, Asu, Aze, Azi, Bai, Bph, Can, Cit, Cys,

(Cys) ₂ , Cyta, Daad, Dab, Dadd, Dap, Dapm, Dasu, Djen, Dpa, Dtc, Fel, Gin, Glu, Gly, Guv, hAla, hArg, hCys, hGln, hGlu, His, hlle, hLeu, hLys, hMet, hPhe, hPro, hSer, hThr, hTrp, hTyr, Hyl, Hyp, 3Hyp, Ile, Ise, Iva, Kyn, Lant, Lcn, Leu, Lsg, Lys, /SLys, Δlys, Met, Mim, Min, nArg, Nie, Nva, Oly, Orn, Pan, Pec, Pen, Phe, Phg, Pic, Pro, Δpro, Pse, Pya, Pyr, Pza, Qin, Ros, Sar, Sec, Sem, Ser, Thi, βThi, Thr, Thy, Thx, Tia, Tle, Tly, Trp, Trta, Tyr, Val, tert-butylglycine (Tbg) , Neopentylglycine (Npg) , Cyclohexylglycine (Chg) , Cyclohexylalanine (Cha), 2-Thienylalanine (Thia), acide 2,2- diphénylaminoacétique, acide 2- (p-tolyl) 2-phénylamino acéti¬ que, acide 2- (p-chlorophényl) amino acétique, ou encore l'acide 2-pyrrolidine acétique, l'acide 1,2,3,4-tétrahydro- isoquinoline 3-acétique, l'acide décahydroisoquinoline 3- acétique, l'acide octahydroisoindol 2-acétique, l'acide déca- hydroquinoline 2-acétique, l'acide octahydrocyclopenta [b] pyrrol 2-carboxylique, l'acide 2-azabicyclo [2,2,2] octan-3- carboxylique, l'acide 2-azabicyclo [2,2,1] heptan-3-carboxy- lique, l'acide 2-azabicyclo [3,1,0] hexan-3-carboxylique, l'acide 2-azaspiro [4,4] nonan-3-carboxylique, l'acide 2- azaspiro [4,5] decan-3-carboxylique, l'acide spiro (bicyclo [2,2,1] heptan) -2,3-pyrrolidin-5-carboxylique, l'acide spiro

(bicyclo [2,2,2] octan-2,3-pyrrolidin-5-carboxylique, l'acide 2-azatricyclo [4,3,0,1 ^6,9 ] decan-3-carboxylique, l'acide decahydrocyclohepta [b] pyrrol-2-carboxylique, l'acide deca- hydrocycloocta [c] pyrrol-2-carboxylique, l'acide octahydro- cyclopenta [c] pyrrol-2-carboxylique, l'acide octahydro- isoindol-1-carboxylique, l'acide 2,3,3a,4,6a-hexahydrocyclo- penta [b] pyrrol-2-carboxylique, l'acide 2,3,3a,4,5,7a- hexahydroindol-2-carboxylique, l'acide tétrahydrothiazol-4- carboxylique, l'acide isoxazolidin-3-carboxylique, l'acide pyrazolidin-3-carboxylique, l'acide hydroxypyrrolidin-2- carboxylique, qui le cas échéant, peuvent être substitués (voir les formules suivantes) :

Les restes heterocycles tels que décrits plus haut sont connus par exemple dans les brevets ou demandes de brevets suivants :

US-A-4.344.949 ; US-A-4.374.847 ; US-A-4.350.704 ; EP-A- 29.488 ; EP-A-31.741 ; EP-A-46.953 ; EP-A-49.605 ; EP-A- 49.658 ; EP-A-50.800 ; EP-A-51.020 ; EP-A-52.870 ; EP-A- 79.022 ; EP-A-84.164 ; EP-A-89.637 ; EP-A-90.341 ; EP-A- 90.362 ; EP-A-105.102 ; EP-A-109.020 ; EP-A-111.873 ; EP-A- 271.865 et EP-A-344.682. De plus les amino acides peuvent être sous forme d'ester ou d'amide, comme par exemple, ester methylique, ester éthyli- que, ester isopropylique, ester isobutylique, ester tert- butylique, ester benzylique, ethylamide, semicarbazide ou ω- amino (C ₂ -C _Q ) -alkylamide. Enfin, les groupes fonctionnels de ces amino acides peuvent être protégés. Les groupements protecteurs appropriés tels que les groupements protecteurs des uréthannes, les groupements protecteurs des carboxyle ou les groupements protecteurs des chaînes latérales sont décrites par Hubbuch, Kontakte (Merck) 1979, n° 3, p. 14-23 et par Bûllesbach, Kontakte (Merck) 1980, n° 1, p. 23-35.

On peut citer par exemple Aloc, Pyoc, F oc, Tcboc, Z, Boc, Ddz, Bpoc, Adoc, Msc, Moc, Z(N0 ₂ ), Z(Hal _n ), Bobz, Iboc, Adpoc, Mboc, Acm, tertbutyl, Obzl, Onbzl, Ombzl, Bzl, Mob, Pic, Trt.

Lorsque G est un radical de formule Gl

N—(Het')

I Rh

et (Het') est un hétérocycle de formule générale :

// C (H) N-^

dans lequel (H) forme, avec le motif N=C-NH- , un hétérocycle

aromatique ou non aromatique, mono ou bicyclique, saturé ou non saturé, comportant de 1 à 9 atomes de carbone et de 2 à 5 heteroatomes choisis parmi les atomes d'oxygène, d'azote et de soufre, ce radical pouvant être substitué ou non substi- tué, Gl représente notamment des heterocycles suivants :

dans lesquels p représente un entier de 1 à 4.

- Lorsque G est un radical -NRaRb (nommé G2) , Ra et Rb, peuvent être un atome d'hydrogène, un radical (CH ₂ ) _Q _ ₃ -Ar, (CH ₂ ) ₀ . ₃ -Het ou (CH ₂ ) _Q . ₃ -Alk. Les groupements Ar, Het et Alk pouvant également être substitués par les groupements tels que définis plus bas.

G2 peut être notamment un groupement NH ₂ , NH-Alk tel que NHMe, NHEt, N(Alk) ₂ tel que NMe ₂ , NEt ₂ , NMeEt, NH- (CH ₂ ) ₀ - _l " ^Ar tel que NHPh, NHCH ₂ Ph ou bien NHCH ₂ Het tel que NHCH ₂ -pyrrol- 2-yle. Lorsque Ra est un atome d'hydrogène ou un groupement (Alk) et lorsque Rb est un groupement (Het') on retrouve les valeurs de Gl.

Lorsque Ra et Rb forment ensemble avec l'atome d'azote

auquel ils sont liés un hétérocycle azoté, il s'agit notam¬ ment des groupements hétérocycliques tels que décrits plus haut, ceux-ci pouvant être substitués ou non substitués.

- Lorsque G est un radical (Het) (radical G3) ce radical pou- vant être substitué ou non substitué, il s'agit notamment des heterocycles listés plus haut et en particulier les hétéro- cycles de formule générale (Hef) telle que définie plus haut. Lorsque cet hétérocycle est relié au niveau de son atome d'azote, on retrouve les valeurs de G2 dans lesquelles Ra et Rb forment avec l'atome d'azote qui les porte un hété¬ rocycle.

- Lorsque G est un radical -NRh-C(≈X) -NHRc (radical G4) , ou NRhS0 ₂ Rc (radical G5) , dans lesquels X est un atome de sou¬ fre, d'oxygène ou NH, Rh et Rc sont tels que définis précé- demment. Il s'agit notamment des groupements -NH-C(=NH) -NH , - H-C(-O) -NH ₂ ou -NH-C(=S) -NH ₂ , -NH-C(- H) -NHCH ₂ -Ar tel que -NH-C(=NH) -NHCH ₂ Ph, -NH-C(=NH) -NHCH ₂ -Het, -NH-C(≈NH) -NHCH ₂ - Het', -NH-C(-NH) -NH-Alk tel que -NH-C(=NH) -NHCH ₃ , ou -NH- S0 ₂ Ph, les groupements Ar, Het, He ' ou Alk étant substitués ou non substitués.

Les substituants éventuels des radicaux (Alk) , (Ar) , (Het), (Hef) ou NRaRb formant un hétérocycle, sont de préfé¬ rence les radicaux suivants :

- halogène : fluor, chlore, brome, iode, - alkyle, alkényle, alkynyle renfermant de 1 à 12 atomes de carbone tel que méthyle, éthyle, propyle, isopropyle, butyle, isobutyle, tert-butyle, vinyl ou allenyl. Ces radicaux étant eux mêmes éventuellement substitués par un ou plusieurs atome d'halogène, par exemple le fluor tel que le trifluorométhyle. - oxo, cyano, nitro, for yl, carboxy et carboxyalkyl renfer¬ mant de l à 6 atomes de carbone, carboxamide,

- alkoxy renfermant de 1 à 12 atomes de carbone tel que méthoxy, éthoxy, propyloxy, isopropyloxy, butyloxy,

- alkylthio renfermant de 1 à 12 atomes de carbone tel que methylthio, ethylthio, propylthio, isopropylthio, butylthio,

- amino, alkylamino renfermant de 1 à 12 atomes de carbone tel que méthylamino ou éthylamino, dialkyla ino renfermant de 2 à 24 atomes de carbone tel que diméthylamino, diéthylamino,

méthyléthylamino, chacun de ces radicaux dialkylamino étant éventuellement sous forme oxydée,

- aminoalkyle renfermant de 1 à 12 atomes de carbone tel que aminométhyle ou aminoéthyle, - dialkylaminoalkyle renfermant de 3 à 25 atomes de carbone tel que diméthylamino méthyle ou éthyle,

- dialkylaminoalkyloxy renfermant de 3 à 25 atomes de carbone tel que diméthylaminoéthyloxy,

- hydroxyle éventuellement acylé renfermant de 1 à 12 atomes de carbone, par exemple acétoxy,

- acyle renfermant de 1 à 12 atomes de carbone tels que formyle, acétyle, propionyle, butyryle, isobutyryle, valéryle, isovaléryle, succinyle, pivaloyle benzoyle éven¬ tuellement substitué par exemple par un atome de chlore, d'iode ou de fluor. On peut citer les radicaux chloroacetyle, dichloroacétyle, trichloroacétyle, bromoacétyle ou trifluoroacétyle,

- aryle carbocyclique ou hétérocyclique tel que phényle, furyle, thiényle, pyridinyle ou aralkyle tel que benzyle, ces radicaux étant eux-mêmes éventuellement substitués par des radicaux halogène, alkyle, alkoxy, alkylthio, amino alkyle ou dialkylamino indiqués ci-dessus.

Bien entendu, un ou plusieurs substituants, identiques ou différents, peuvent être présents. Dans le cas de (Het) les substituants peuvent être au niveau du groupement NH ou de l'atome de carbone.

Ces substituants illustrent également la définition de R ₄ .

Il est bien entendu que lorsque R-^ R ₂ , R ₃ , R ₄ , R ₅ , Rg, R _a , R _b , R _c renferment un groupement alkyle, aryle ou hétéro¬ cycle tels que définis ci-dessus, ils peuvent être identiques ou différents indépendamment les uns des autres.

L'invention s'étend naturellement aux sels des composés de formule (I) , comme par exemple les sels formés, lorsque les composés de formule (I) comportent une fonction amino ou amino guanidine, avec les acides chlorhydrique, bromhydrique, nitrique, sulfurique, phosphorique, acétique, trifluoroacé- tique, formique, propionique, benzoique, maléique, fumarique,

succinique, tartrique, citrique, oxalique, glyoxylique, aspartique, alcanesulfoniques tels que les acides méthane ou éthanesulfonique, arènesulfoniques, tels que les acides benzène ou paratoluène sulfonique et arylcarboxylique, ou lorsque les composés de formule (I) comportent une fonction acide, avec les sels des métaux alcalins ou alcalino terreux ou d'ammonium éventuellement substitué.

L'invention s'étend également aux esters des composés de formule (I) . Dans un premier groupe préféré, l'invention a pour objet les composés de formule générale (I) telle que définie précé¬ demment, répondant à la formule générale (I') :

H

dans laquelle R'-^ représente un groupement -C _* C- [A ¹ ] - [B'] -COR'g, -CH=CH- [A'] - [B'] -COR'g, - (CH ₂ ) ₂ - [A'] - [B'] -COR'g, -0- [A'] - [B'] -COR'g,

-CH ₂ C0- [A'] - [B] -COR'g, -[A']- représentant un radical bivalent alkylene, alkénylène ou alkynylene renfermant de 1 à 6 atomes de carbone, [B'] représentant un radical CH(Z') ou une simple liaison, Z ¹ représente un atome d'hydrogène, un groupement

(CH ₂ ) ₀ _g-NRaRb, (CH ₂ ) ₀ .g-NH-SO ₂ -Rc, (CH ₂ ) _Q .g-NH-C0 ₂ -Rc, (CH ₂ ) ₀ .g-NH-CO-Rc, (CH ₂ ) ₀ .g-NH-SO ₂ -NH-Rc, (CH ₂ ) ₀ .g-NH-CO-NH-Rc, (CH ₂ ) ₀ .g-C0 ₂ -Rc, (CH ₂ )0-6" ^SO 2" ^Rc ' (CH ₂ ) _O _g-C0-Rc ou (CH ₂ ) ₀ .g-Rc, Ra, Rb et Rc étant tels que définis précédemment, R'g représente un radical OH, amino ou alkoxy renfermant de 1 à 8 atomes de carbone, éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux choisis parmi les radicaux hydroxy, amino, phényle, alkylamino ou dialkylamino,

R' ₂ et R' ₃ représentent un atome d'hydrogène ou un radical méthoxy, et G est tel que défini précédemment, les traits en pointillés représentent une éventuelle seconde liaison, ainsi que les sels d'addition avec les acides et les bases et les esters.

Dans un deuxième groupe préféré l'invention a pour objet les composés de formule générale (I) telle que définie précé¬ demment dans laquelle R représente un groupement -OH, -OCH ₃ , -OCH ₂ CH ₃ , -0- (CH ₂ ) ₂ -OH, -0-CH ₂ -CH-CH ₂ 0H, -0- (CH ₂ )2 ^_NH 2' I

OH -0- (CH ₂ ) ₂ -N- (CH ₃ ) ₂ , -NH ₂ ou -0- (CH ₂ ) -phényle, ainsi que les sels d'addition avec les acides et les bases et les esters. Dans un troisième groupe préféré, l'invention a pour objet les composés de formule générale (I) telle que définie précédemment dans laquelle R ₁ représente un groupement 0- (CH ₂ ) ₀ . ₆ CH(Z') -C00H ou - (CH ₂ ) ₀ . ₇ -CH(Z' ) -C00H, ainsi que les sels d'addition avec les acides et les bases et les esters. Dans un quatrième groupe préféré, l'invention a pour objet les composés de formule générale (I) telle que définie précédemment, dans laquelle (Z') est un atome d'hydrogène, ainsi que les sels d'addition avec les acides et les bases et les esters.

Dans un cinquième groupe préféré, l'invention a pour objet les composés de formule générale (I) telle que définie précédemment, dans laquelle (Z') est le groupement (CH ₂ ) ₀ _ ₆ -NH-CO ₂ -Rc ou (CH ₂ ) ₀ . ₆ -NHRb, Rb et Rc étant tels que définis à précédemment, ainsi que les sels d'addition avec les acides et les bases et les esters. Dans un sixième groupe préféré, l'invention a pour objet les composés de formule générale (I) telle que définie pré¬ cédemment, dans laquelle Rb et Rc représentent le groupement (CH ₂ ) ₀ _ ₃ -Ar, Ar étant tel que défini précédemment et pouvant être substitué ou non substitué, ainsi que les sels d'addi- tion avec les acides et les bases et les esters.

Dans un septième groupe préféré, l'invention a pour objet les composés de formule générale (I) telle que définie précédemment, dans laquelle G est un groupement G4 de formule

-NH-C(=NH) -NHRc, Rc étant tel que défini précédemment, ainsi que les sels d'addition avec les acides et les bases et les esters.

Dans un huitième groupe préféré, l'invention a pour objet les composés de formule générale (I) telle que définie précédemment, dans laquelle G est un groupement G4 de formule NH-C(=NH) -NH ₂ , ainsi que les sels d'addition avec les acides et les bases et les esters.

Dans un neuvième groupe préféré, l'invention a pour objet les composés de formule générale (I) telle que définie précédemment, dans laquelle G est un groupement -NH-(Het') tel que défini précédemment et notamment,

O

p étant un entier égal à 2, 3 ou 4, ces heterocycles étant substitués ou non substitués, ainsi que les sels d'addition avec les acides et les bases et les esters. Dans un dixième groupe préféré, l'invention a pour objet les composés de formule générale (I) telle que définie pré¬ cédemment, dans laquelle G est le groupement

p étant un entier égal à 2, 3 ou 4, ainsi que les sels d'ad¬ dition avec les acides et les bases et les esters.

Dans un onzième groupe préféré, l'invention a pour objet les composés de formule (I) telle que définie précédemment dont les noms suivent:

- Acide 4- ( (4- ( (a inoiminométhyl)hydrazono) -9,10-diméthoxy-l, 2,3,4,5,6-hexahydro-8-benz(e)azulèn-yl)oxy) -butanoique,

- Acide 5- ( (4- ( (aminoiminométhyl) ydrazono) -9,10-diméthoxy-l, 2,3,4,5,6-hexahydro-8-benz(e)azulèn-yDoxy) -pentanoique,

- Acide 5- ( (4- ( (aminoiminométhyl)hydrazono) -8,10-diméthoxy-1, 2,3,4,5,6-hexahydro-9-benz(e)azulèn-yl)oxy) -pentanoique,

- Acide 6- ( (4- ( (aminoiminométhyl)hydrazono) -9,10-diméthoxy-1, 2,3,4,5,6-hexahydro-8-benz(e)azulènyl)oxy) -hexanoique, - Acide 7- ( (4- ( (aminoiminométhyl)hydrazono) -9,10-diméthoxy-1, 2,3,4,5,6-hexahydro-8-benz(e)azulènyl)oxy) -heptanoique,

- Acide 5- ( (9,10-diméthoxy-l,2,3,4,5,6-hexahydro-4- ( (4,5- dihydro-lH-imidazol-2-yl) ydrazono) -8-benz(e)azulènyl)oxy) - pentanoique, - chlorhydrate de 5- ( (4- ( (aminoiminométhyl)hydrazono) -9,10- diméthoxy-1, 2,3,4,5,6-hexahydro-8-benz(e)azulènyl)oxy) - pentanoate d'éthyle,

- Acide 4- ( (4- ( (aminoiminométhyl)hydrazono) -8,9-diméthoxy-l, 2,3,4,5,6-hexahydro-10-benz(e)azulènyl)oxy) -butanoique, - Acide 5- ( (4- ( (aminoiminométhyl)hydrazono) -8,9-diméthoxy-l, 2,3,4,5,6-hexahydro-10-benz(e)azulènyl)oxy) -pentanoique,

- Acide 5- ( (4- ( ( (amino)carbonyl)hydrazono) -9,10-diméthoxy-l, 2,3,4,5,6-hexahydro-8-benz(e)azulènyl)oxy) -pentanoique,

- Acide 5- ( (4- (( (amino)thiocarbonyl)hydrazono) -9,10-dimé- thoxy-1,2,3,4,5,6-hexahydro-8-benz(e)azulènyl)oxy) -penta¬ noique,

- Acide 4- ( (4- ( (aminoiminométhyl)hydrazono) -8,10-diméthoxy-l, 2,3,4,5,6-hexahydro-9-benz(e)azulèn-yl)oxy) -butanoique,

- Acide 6- ( (4- ( (4,5-dihydro-lH-imidazol-2-yl)hydrazono) -9,10- dimêthoxy-1, 2,3,4,5,6-hexahydro-8-benz(e)azulènyl)oxy) - hexanoique,

- Acide 5- ( (4- ( (aminoiminométhyl)hydrazono) -9,10-diméthoxy-l, 2,3,4,5,6-hexahydro-8-benz(e)azulènyl)oxy) -3,3-diméthyl-4- oxo-pentanoique,

- Acide 5- { (4- ( (4,5-dihydro-lH-imidazol-2-yl)hydrazono) -9,10- diméthoxy-l, 2,3,4,5,6-hexahydro-8-benz(e)azulènyl)oxy) -3,3- diméthyl-4-oxo-pentanoique, - Chlorhydrate de l'acide 5- ( (4- ( (aminoiminométhyl)hydrazo¬ no) -9,10-diméthoxy-1, 2,3,4,5,6-hexahydro-8-benz(e)azu- lènyl)oxy) -pentanoique,

- Acide 4- ( (4- ( (4,5-dihydro-lH-imidazol-2-yl)hydrazono) -9,10- diméthoxy-1, 2,3,4,5,6-hexahydro-8-benz(e)azulènyl)oxy) - butanoique,

- Acide 5- ( (8 ( (aminoiminométhyl)hydrazono) -6,7,8,9,10,11- hexahydro-azulèno(5,6-d) -1,3-benzodioxol-4-yl)oxy) -pentanoi¬ que,

- Acide 5- ( (8 ( (aminoiminométhyl)hydrazono) -2,2-diphényl- 6,7,8,9,10,ll-hexahydro-azulèno(4,5-e) - (1,3) -benzodioxol-4- yl)oxy) -pentanoique,

- Acide 4- ( (9,10-diméthoxy-4- ( (1,4,5,6-tétrahydro-2-pyrimi- dinyl)hydrazono) -1,2,3,4,5,6-hexahydro-8-benz(e)azulènyl) oxy) -butanoique, - Acide 2- ( (4- ( (4,5-dihydro-lH-imidazol-2-yl)hydrazono) -9,10- diméthoxy-1,2,3,4,5,6-hexahydro-8-benz(e)azulènyl)oxy) -étha- noique,

- Acide 3- ( (4- ( (4,5-dihydro-lH-imidazol-2-yl)hydrazono) -9,10- diméthoxy-1,2,3,4,5,6-hexahydro-8-benz(e)azulènyl)oxy) -pro- panoique,

- Acide 4- ( (4- ( (4,5-dihydro-lH-imidazol-2-yl)hydrazono) - 1,2,3,4,5,6-hexahydro-8-benz(e)azulènyl)oxy) -butanoique,

- Acide 4- ( (4- { (4,5-dihydro-lH-imidazol-2-yl)hydrazono) - 1,2,3,4,5,6-hexahydro-8-benz (e)azulènyl)oxy) -butanoique, - 0- [4 [ (4,5-dihydro-lH-imidazol-2-yl)hydrazono] -9,10-dimé- thoxy-1,2,3,4,5,6-hexahydro-8-benz[e]azulènyl] -N- [ (phényl- méthoxy)carbonyl] -DL-homoserine,

- 0- [4 [(4,5-dihydro-lH-imidazol-2-yl)hydrazono] -1,2,3,4,5,6-

hexahydro-8-benz[e]azulènyl] -N- [ (phénylméthoxy)carbonyl] -DL- homoserine,

- 0- [4- [ (1,2,3,4-tétrahydro 6-pyrimidinyl) hydrazono] 9,10- diméthoxy 1,2,3,4,5,6-hexahydro 8-benz[e]azulènyl] N- [(phénylméthoxy) carbonyl] DL-homoserine,

- ester (2,3-dihydroxypropylique) de 0- (9,10-diméthoxy 1,2,3,4,5,6, -hexahydro 4- [(1,4,5,6-tétrahydro 2-pyrimidiny1) hydrazono] -8-benz(e)azulènyl] N- [ (phénylméthoxy) carbonyl] DL-homoserine, - 0- [4- [ (4,5-dihydro lH-imidazol-2-yl) hydrazono] 9,10-dimé- thoxy 1,2,3,4,5,6-hexahydro 8- enz(e)azulènyl] N-[(8-quino- léinyl) sulfonyl] DL-homoserine,

- monochlorhydrate de 0- [4- [ (4,5-dihydro lH-imidazol-2-yl) hydrazono] 9,10-diméthoxy 1,2,3,4,5,6-hexahydro 8-benz(e)- azulènyl] N- [ [3- [4- (3-pyridinyl) lH-imidazol-l-yl] propoxy] carbonyl] DL-homoserine,

- Acide 5- [ [4- [ (4,5-dihydro 4-oxo lH-imidazol-2-yl) hydra¬ zono] 9,10-diméthoxy 1,2,3,4,5,6-hexahydro 8-benz(e)azulènyl] oxy] pentanoique, - 0- [9,10-diméthoxy 1,2,3, ,5,6-hexahydro 4- [ (4,5,6,7-tétra- hydro 1H-1,3-diazépin-2-yl) hydrazono] 8-benz(e) -azulènyl] N- [ (phénylméthoxy) carbonyl] DL-homoserine,

- O- [9,10-diméthoxy 1,2,3,4,5,6-hexahydro 4- [ (3a,4,5,6,7,7a- hexahydro lH-benzimidazol-2-yl) hydrazono] 8-benz(e)azulènyl] N- [ (phénylméthoxy) carbonyl] DL-homoserine.

L'invention a également pour objet un procédé de préparation des composés de formule générale (I) caractérisé en ce que l'on soumet un composé de formule (II) :

dans laquelle R ₂ , R ₃ , R ₄ et R ₅ sont tels que décrits précé¬ demment à l'exception de la valeur hydroxyle,

soit à l'action d'un composé de formule (FI) en présence d'une base,

Hal- [A] - [B] -CORg (FI)

ou d'un composé de formule (F^) en présence d'une phosphine et d'azodicarboxylate de diéthyle :

HO- [A] - [B] -CORg (F',)

dans lesquelles Hal est un atome d'halogène, [A] , [B] et Rg sont tels que décrits précédemment, [B] pouvant également représenter le groupement -CH- , P étant un groupement

I NH-P protecteur de la fonction aminé, afin d'obtenir un composé de formule (Illa) :

R _e

soit à l'action d'un groupement activant puis d'un composé de formule (F2) en présence d'un catalyseur :

H •C≈C- [A] - [B] - C-R ₆ (F2 )

afin d' obtenir un composé de formule (Illb)

(Illb)

composés de formule (Illa) ou (Illb) que l'on soumet à l'action d'un composé de formule (F3) :

H ₂ N-G (F3)

dans laquelle G est tel que décrit précédemment, afin d'ob¬ tenir les composés de formule (IVa) et (IVb) correspondant à certains produits de formule (I) :

que l'on soumet le cas échéant, dans un ordre approprié,

- à l'action d'une base ou d'un acide afin de cliver l'ester et d'obtenir l'acide correspondant,

- à l'action d'un agent réducteur apte à réduire partielle- ment ou totalement les insaturations,

- à l'action d'un agent d'hydratation de la triple liaison,

- à l'action d'un agent de déalkylation,

- à l'action d'un agent de déprotection de la fonction NH-P en bêta de CO-Rg lorsque [B] représente le groupe CH-NHP, - à la formation du groupement NH-S0 R _c , NH-C0 ₂ R _c , NHCOR _c , NH-S0 ₂ -NH-R _c , NH-CO-NHR _c à partir de l'aminé correspondante en bêta de CORg, pour obtenir les composés de formule (I) correspondant que l'on soumet le cas échéant à l'action d'un acide ou d'une base afin d'obtenir les sels correspondants ou à l'action d'un agent d'estérification afin d'obtenir les esters correspondants.

L'action du composé de formule Hal- [A] - [B] -CORg (Fl) est effectuée de préférence en présence d'une base minérale telle que le carbonate de potassium ou le carbonate de sodium en présence d'un solvant dipolaire aprotique tel que le diméthylformamide. Hal est de préférence un atome de chlore ou de brome.

L'action du composé de formule HO- [A] - [B] -CORg (F^) est effectuée en présence d'une phosphine telle que la triphényl- phosphine et d'un agent tel que le diéthyl azodicarboxylate (DEAD) dans un solvant aprotique tel que le chlorure de méthylène.

L'action du composé de formule [A] - [B] -CORg (F2) est précédée par celle d'un groupement activant tel que l'anhydride triflique de formule (CF ₃ S0 ₂ ) 0 en présence d'une base telle que la pyridine afin de former le triflate correspondant de formule (0S0 CF ₃ ) puis effectuée en présence d'un dérivé du palladium (Pd°) tel que le Pd(PPh ₃ ) ₄ .

L'action de NH ₂ -G (F3) s'effectue, soit sans solvant, soit dans un solvant alcoolique tel que l'éthanol ou le butanol. Le synthon NH -G est éventuellement utilisé sous la forme d'un sel tel que le chlorhydrate ou le bromhydrate. La réaction de saponification de la fonction ester

s'effectue par exemple par action d'une base alcaline telle que la soude ou la potasse dans le tétrahydrofuranne ou un alcool inférieur tel que le méthanol ou l'éthanol. On peut également cliver l'ester en milieu acide selon les méthodes connues de l'homme du métier.

La réduction des insaturations peut s'effectuer soit de manière totale par action d'hydrogène en présence d'un cata¬ lyseur tel que le palladium sur charbon ou un catalyseur au rhodium tel que le réactif de ilkinson soit de manière partielle (alkynylene devient alkénylène) par action d'un catalyseur empoisonné tel que le palladium sur sulfate de baryum empoisonné par la pyridine ou la triéthylamine.

La réaction d'hydratation permettant d'accéder à un groupement -CH ₂ C0- [A] - [B] -CORg à partir de -O≡C- [A] - [B] -CORg s'effectue de préférence par action d'eau en présence de sulfate de mercure.

La réaction de déalkylation permettant d'accéder aux produits de formule (I) avec R ₂ , R ₃ , R ₄ ou R ₅ représentant des hydroxyles s'effectue en présence de chlorure d'aluminium ou de tribromure de bore.

La fonctionnalisation de NH ₂ en alpha de CORg, [B] représentant CH-NH ₂ ou CH-NH ₂ , Hcl, s'effectue selon les méthodes classiques connues en chimie organique.

La formation de NHS0 ₂ R _c à partir de l'aminé correspon- dante s'effectue de préférence par action de R _c S0 ₂ Hal en présence d'une base par exemple la triéthylamine.

La formation de NHC0 ₂ R _c à partir de l'aminé correspondante s'effectue de préférence par action de R _c OH selon la méthode décrite dans J. Org. Chem. , 6_1, 3929-3934 après avoir fait agir au préalable le triphosgene en présence de bicarbonate de sodium afin d'obtenir intermédiairement l'isocyanate.

Les réactions de salification peuvent être effectuées dans des conditions usuelles. On opère par exemple, pour salifier le groupement terminal C0 ₂ H de R^ en présence d'un sel de sodium tel que le carbonate de sodium ou le carbonate acide de sodium ou de potassium.

De même, la salification de l'aminé ou de 1'amino-

guanidine que peuvent représenter G, par un acide, est réali¬ sée dans les conditions usuelles. On opère par exemple avec l'acide chlorhydrique, par exemple en solution éthérée.

L'estérification éventuelle des produits est effectuée dans les conditions classiques connues de l'homme du métier.

On opère en général en faisant réagir l'acide de formule (I) ou un dérivé fonctionnel avec un réactif capable d'intro¬ duire le groupe ester dont une liste non exhaustive figure ci-dessus dans la définition de Rg. Les produits de formule générale (Fl) , (F'I), (F2) , (F3) , sont connus ou préparés selon les méthodes connues de l'homme du métier.

On peut également inverser l'ordre de greffage des différents réactifs, à savoir on soumet le composé de formule (II) à l'action d'un composé de formule F3 afin d'obtenir intermédiairement le produit de formule (IIIc) :

que l'on soumet à l'action d'un composé de formule (Fl) , (F'I) ou (F2) afin d'obtenir les produits de formules (IVa) et (IVb) co respondants. Dans ce cas, il faudra le cas échéant, prévoir une protection du groupement G du produit de formule (IIIc) puis, après introduction de (Fl) , (F'I) ou de (F2) , une déprotec¬ tion selon les méthodes connues de l'homme du métier (T.W. GREENE Protective Groups in Organic Synthesis. John Wiley and Sons Inc. 1991) .

La réaction de déprotection du groupement NH-P en bêta de CO-Rg, [B] représentant le groupe CH-NHP, s'effectue éga¬ lement selon les méthodes connues de l'homme du métier,

notamment lorsque P représente le groupe C0 ₂ tBu, par une réaction de décarboxylation telle que par exemple par action de l'acide chlorhydrique.

L'os est constamment soumis à un processus dynamique qui inclut la résorption osseuse et la formation osseuse. Ces processus sont médiés via des cellules spécialisées. La formation osseuse est le résultat du dépôt d'une matrice minérale par les osteoblastes et la résorption osseuse est le résultat de la dissolution de cette matrice osseuse par les osteoclastes. L'osteoporose est caractérisée par une perte sèche de cette matrice osseuse. Un ostéoclaste mature activé résorbe l'os après adhésion à la matrice osseuse via la sécrétion d'enzymes protéolytiques, et de protons à l'inté¬ rieur de la zone d'adhésion, aboutissant à des dépressions ou des creusements de la surface de l'os qui apparaissent au moment où 1Ostéoclaste se détache de l'os.

Les composés de formule (I) ainsi que leurs sels d'addi¬ tion pharmaceutiquement acceptables présentent d'intéressan¬ tes propriétés pharmacologiques. Ces composés inhibent la résorption osseuse qui est médiée via les osteoclastes.

Les composés de l'invention sont ainsi utiles dans le traitement de maladies provoquées par la perte de la matrice osseuse, notamment, l'osteoporose, l'hypercalcémie de mali¬ gnité, l'ostéopénie due aux métastases osseuses, les paro- dontites, 1'hyperparathyroidisme, les érosions periarticu- laires dans l'arthrite rhumatoïde, la maladie de paget, l'ostéopénie induite par l'immobilisation, les traitements par les glucocorticoides ou les déficiences d'hormones sexuelles mâles ou femelles. Ils peuvent également être utilisés pour le traitement des désordres inflammatoires, cancéreux et cardiovasculaires incluant l'athérosclérose, la resténose.

Ils peuvent enfin être utilisés comme inhibiteurs de 1'angiogenèse et donc dans le traitement des tumeurs, par inhibition de leur néovascularisation, des rétinopathies diabétiques et des néphropathies.

Des études récentes ont montré que la fixation de 1'ostéoclaste à l'os est édié par des récepteurs : les

intégrines.

Les intégrines sont une superfamille de récepteurs médiant les processus d'adhésion cellule/cellule et plus particulièrement cellule/matrice, incluant notamment α2b33 comme récepteur des plaquettes sanguines (fibrinogène) et orv33 comme récepteur de la vitronectine, des sialoprotéines osseuses comme 1'ostéopontine et la thrombospondine.

Ces récepteurs qui sont des hétérodimères protéiques composés de deux sous unités or et β , possèdent des sites de fixation d'ions divalents comme le Ca ²⁺ notamment et un site de reconnaissance de leur ligand prédéfini par la qualité de leurs sous unités.

Le récepteur orv33 est une glycoprotéine transmembranaire qui est exprimée dans un grand nombre de cellules incluant les cellules endothéliales, les cellules du muscle lisse, 1'ostéoclaste et des cellules cancéreuses ce qui entraîne ainsi une pluripotentialité des composés selon l'invention. Les récepteurs αvj33 exprimés au niveau de la membrane des osteoclastes sont à la base du processus d'adhésion/résorption, contribuent à l'organisation du cyto- squelette cellulaire, et sont impliqués dans l'osteoporose (Ross et al., J. Biol. Chem. , 1987, 262, 7703).

Les récepteurs QΓV|!?3 exprimés au niveau des cellules du muscle lisse de l'aorte, stimulent leur migration vers la neointima, ce qui entraîne la formation de l'athérosclérose et la survenue de resténose post-angioplastique (Brown et al, cardiovascular Res. (1994), 28, 1815).

Les cellules endothéliales sécrètent des facteurs de croissance qui sont mitogènes pour l'endothélium et peuvent contribuer à la formation de nouveaux vaisseaux sanguins

(Angiogenèse) . La stimulation angiogénique provoque la forma¬ tion de nouveaux vaisseaux sanguins.

Les antagonistes de l'intégrine orv33 peuvent ainsi entraîner une régression des tumeurs cancéreuses en induisant l'apoptose des vaisseaux sanguins angiogeniques. (Brook et al. Cell (1994) 79, 1157).

Les ligands naturels de l'intégrine orvj83 contiennent tous le motif RGD (Arg-Gly-Asp) . Les peptides contenant ce

motif RGD ainsi que des anticorps anti ocvβ3 sont connus pour leur capacité d'inhibition de la résorption de la dentine, d'empêchement de l'adhésion des osteoclastes sur les matrices minéralisées (Horton et al. Exp. Cell. Res. (1991), 195, 368) .

Le peptide Echistatine isolé du venin de serpent conte¬ nant également un motif RGD est décrit comme inhibiteur de l'adhésion des osteoclastes à l'os, et est donc un puissant inhibiteur de la résorption osseuse dans les tissus en cul- ture in vitro (Sato et al. J. Cell. Biol. (1990), 111, 1713) et in vivo chez le rat (Fisher et al. Endocrinology (1993), 132, 1441) .

Les composés de formule (I) ainsi que leurs sels d'addi¬ tion et leurs esters pharmaceutiquement acceptables peuvent posséder notamment une affinité vis-à-vis du récepteur de la vitronectine αv/33 ou vis-à-vis d'autres intégrines ayant pour ligand la vitronectine (αv/3l, orv/35, c-2b33) en inhibant la liaison à leur ligand naturel.

Cette propriété rend ainsi les composés de l'invention utilisables pour la prévention ou le traitement de maladies dont la pathologie sous-jacente est provoquée par les ligands ou les cellules qui interagissent avec le récepteur de la vitronectine.

Ces composés peuvent posséder également une activité vis-à-vis d'autres intégrines qui interagissent avec leur ligand via la séquence tripeptidique RGD, leur conférant des propriétés pharmacologiques utilisables pour traiter les pathologies associées à ces récepteurs.

Cette activité vis-à-vis des intégrines rend ainsi les composés de l'invention utilisable dans le traitement de nombreuses maladies telles que celles mentionnées plus haut ou dans la revue de Dermot Cox DN&P 8(4) Mai 1995, 197-205 dont le contenu est intégré dans la présente demande.

L'invention a donc pour objet les composés de formule (I) à titre de médicaments, ainsi que leurs sels d'addition ou leurs esters pharmaceutiquement acceptables.

Parmi les médicaments de l'invention, on peut citer particulièrement les composés décrits dans la partie

expérimentale.

Parmi ces produits, l'invention a plus particulièrement pour objet, à titre de médicaments, les composés de formule (I) listés précédemment. La posologie varie en fonction de l'affection à traiter et de la voie d'administration : elle peut varier par exemple de 1 mg à 1000 mg par jour chez l'adulte par voie orale.

L'invention s'étend aux compositions pharmaceutiques renfermant comme principe actif au moins un médicament tel que défini ci-dessus.

Les composés de formule (I) sont utilisés par voie digestive, parentérale ou locale, par exemple par voie percutanée. Ils peuvent être prescrits sous forme de compri¬ més simples ou dragéifiés, de gélules, de granulés, de suppositoires, d'ovules, de préparations injectables, de pommades, de crèmes, de gels, de microsphères, de nanosphè- res, d'implants, de patchs, lesquels sont préparés selon les méthodes usuelles.

Le ou les principes actifs peuvent y être incorporés à des excipients habituellement employés dans ces compositions pharmaceutiques, tels que le talc, la gomme arabique, le lactose, l'amidon, le stéarate de magnésium, le beurre de cacao, les véhicules aqueux ou non, les corps gras d'origine animale ou végétale, les dérivés paraffiniques, les glycols, les divers agents mouillants, dispersants ou émulsifiants, les conservateurs.

Les produits de formule (II) , dans laquelle le radical hydroxy est en position 10, R ₂ en position 8 et R ₃ en posi¬ tion 9, représentent un groupement 0- (Alk) ou 0- (CH ₂ ) ₀ . ₃ -Ar, R ₄ et R ₅ sont des atomes d'hydrogène, sont préparés selon la méthode décrite dans la demande de brevet européen n° 0729933 et dans la partie expérimentale ci-après (préparation 2) .

Les deux autres isomères de position peuvent être prépa¬ rés de la manière suivante : On soumet un composé de formule (IIA) :

à l'action d'un réactif de déalkylation, afin d'obtenir le composé de formule (IIB) :

composé de formule (IIB) que l'on soumet : soit à l'action d'un réactif de protection des diols en milieu basique, afin d'obtenir sélectivement le produit de formule (IIC) :

dans laquelle P représente le reste d'un réactif de protec¬ tion des diols, que l'on soumet successivement à l'action d'un réactif de protection du phénol, d'un réactif de déprotection des diols, d'un agent d'alkylation puis d'un agent de déprotection du phénol afin d'obtenir le composé de formule (IID) correspon¬ dant au produit de formule (II) trisubstitué avec OH en position 8 :

soit à l'action successivement d'un agent de protection du phénol, d'un agent d'alkylation puis d'un agent de déprotec- tion afin d'obtenir le composé de formule (IIE) correspondant au produit de formule (II) trisubstitué avec OH en position 9

Par réactif de déalkylation, on entend de préférence des agents tels que le tribromure de bore ou le chlorure d'alumi¬ nium.

Le réactif de protection des diols que l'on fait réagir sur les produits de formule (IIB) peut être un dérivé du bore tel que l'acide borique, un borate de trialkyle, par exemple de triméthyle ou de triéthyle, ou encore le borax.

Par agent de protection du phénol, on entend notamment un halogénure tel que le chlorure ou le bromure de mésyle ou de tosyle ou encore un dérivé benzylé tel que le tosylate ou le mésylate de benzyle.

Par réactif de déprotection des diols, on entend notam¬ ment un acide fort tel que l'acide chlorhydrique, l'acide sulfurique ou bien l'acide paratoluène sulfonique ou encore un oxydant, par exemple l'eau oxygénée, dans le cas d'une protection par un dérivé du bore.

Par agent d'alkylation, on entend tout agent classique connu de l'homme du métier pour alkyler les phénols. On peut citer, par exemple un halogénure d'alkyle tel que le chlorure

de méthyle ou d'éthyle, un sulfate d'alkyle tel que le sul¬ fate de méthyle ou d'éthyle, ou encore le diazométhane.

Par agent de déprotection, on entend une base telle que la soude, la potasse ou encore le carbonate de sodium ou de potassium.

Les produits de formule (II) monosubstitués, dans lesquels R , R ₃ , R et R ₅ représentent un atome d'hydrogène, sont préparés selon une méthode analogue à celle décrite dans la demande de brevet européen n° 0729933 : (i) On soumet un composé de formule (a) :

dans laquelle O- (Alk) est en position meta ou para du groupement alkylcarboxylique, (Alk) étant tel que défini précédemment, à l'action d'un agent d'halogenation pour obte¬ nir l'halogénure d'acyle correspondant, (ii) que l'on soumet à l'action d'un réactif de formule (b) :

dans laquelle R(I) et R(II) , identiques ou différents repré¬ sentent un groupement alkyle renfermant de 1 à 6 atomes de carbone, ou R(I) et R(II) ensemble avec l'atome d'azote auquel ils sont liés, représentent un hétérocycle à 5 ou 6 chaînons, saturé ou insaturé, renfermant éventuellement un autre hétéroatome choisi parmi O et N, pour obtenir un composé de formule (c) :

(iii) que l'on soumet à l'action d'un agent d'halogenation pour obtenir un composé de formule (d) :

dans laquelle Ha^ représente un atome d'halogène, (iv) que l'on soumet à l'action d'un acide de Lewis, pour obtenir un composé de formule (e) :

(v) que l'on soumet à un réactif de déalkylation afin d'obte¬ nir le produit de formule (IIF) correspondant au produit de formule (II) monosubstitué attendu :

Les produits de formule (II) disubstitués, dans laquelle R ₂ représente O- (Alk) ou 0- (CH ₂ ) _Q _ ₃ -Ar, R ₃ , ₄ et ₅ sont des

atomes d'hydrogène et OH et R ₂ étant en position 8, 9 ou 10, sont préparés selon la méthode telle que décrite ci-dessus à partir du composé de formule (a') :

dans laquelle O- (Alk) et R ₂ sont en position meta ou para de la chaîne alkyle carboxylique, R ₂ étant un groupement O- (Alk) ou - (CH ₂ ) _Q . ₃ -Ar, successivement aux réactions (i) , (ii) , (iii) , (iv) et (v) et on obtient les produits de formule (IIG) correspondant aux produits de formule (II) bisubstitues attendus :

L'agent d'halogenation que l'on fait agir sur le composé de formule (a) ou (a ¹ ) est par exemple le chlorure de thionyle, le chlorure d'oxalyle ou tout autre agent connu de l'homme du métier pour préparer un halogénure d'acide.

Le réactif de formule (b) est préparé au départ de la cyclopentanone et d'une aminé secondaire, par exemple la diéthylamine, la pipéridine, la pipérazine ou, de préférence, la morpholine. On opère en présence d'un catalyseur acide fort, par exemple l'acide paratoluène sulfonique.

L'action de l'éna ine de formule (b) sur l'halogénure d'acide est réalisée de préférence en présence d'une a iné tertiaire telle que la triéthylamine ou la pyridine.

L'agent d'halogenation que l'on fait réagir sur le

composé de formule (c) , ou son équivalent disubstitué de formule (c'), peut être par exemple le chlorure de thionyle, le phosgène, 1'oxychlorure de phosphore ou, de préférence, le chlorure d'oxalyle. L'acide de Lewis utilisé pour cycliser le composé de formule (d) , ou son équivalent disubstitué de formule (d') est par exemple le chlorure d'aluminium, le tétrachlorure de titane, ou de préférence le chlorure ferrique, ou le tétra¬ chlorure d'étain. La réaction, comme celles qui précèdent, peut être conduite, par exemple, dans un solvant halogène tel que le chlorure de méthylène, le chloroforme ou le dichloro- êthane.

Le réactif de déalkylation du composé de formule (e) , ou son équivalent disubstitué de formule (e') afin d'obtenir les phénols correspondant est de préférence le chlorure d'alumi¬ nium ou le tribromure de bore.

Les produits de formule (II) dans laquelle R ₄ est diffé¬ rent de l'atome d'hydrogène, sont préparés par des méthodes classiques de substitution électrophile et nucléophiles aromatiques connues de l'homme du métier.

Les produits de formule (II) dans laquelle R ₅ est diffé¬ rent de l'atome d'hydrogène sont préparés selon les méthodes connues de l'homme du métier et notamment selon la méthode décrite dans la demande de brevet européen n° 0729933, c'est- à-dire par halogénation puis action de l'eau ou d'un alcool approprié.

Les produits de formule (II) dans laquelle R ₅ est un atome d'hydrogène et dans laquelle il y a une double liaison en position 1-2 sont préparés selon les méthodes connues de l'homme du métier et notamment selon la méthode décrite dans la demande de brevet européen n° 0729933, c'est-à-dire par déshydratation ou désalcoxylation en milieu acide anhydre.

Les produits de formule (II) dans laquelle la jonction entre le cycle à 5 et le cycle à 7 est saturée sont préparés selon les méthodes classiques d'hydrogénation notamment en présence de palladium sur charbon de la double liaison correspondante.

L'introduction de R ₄ , R ₅ ainsi que la réaction d'hydro-

génation s'effectue de préférence sur les composés de formule (IIA) , (IID), (IIE), (IIF) OU (IIG).

Les produits de formule (II) dans lesquels R ₂ et R ₃ , en position ortho l'un de l'autre forment un cycle du type -0- (CRdRe) _n -0 tel que défini précédemment, sont également pré¬ parés selon les méthodes connues de l'homme du métier et notamment selon la méthode décrite ci-après dans la partie expérimentale.

L'invention a également pour objet, à titre de produits intermédiaires, les produits de formule (Illa) , (Illb) , (IIIc) et (II) étant entendu que les composés de formule (Ile) et les composés suivants :

- 2,3,5,6-tétrahydro-9,10-diméthoxy-8-hydroxy-benz[e]azulèn - 4(1H) -one, et 2,3,5,6-tétrahydro-8,9-diméthoxy-10-hydroxy-benz[e]azulèn - 4(1H) -one, sont exclus. La préparation de ces 2 composés figure ci-après dans la partie expérimentale.

Les exemples suivants illustrent l'invention sans toutefois la limiter.

PREPARATION 1 : 2,3,5,6-tétrahydro-8,9,10-trihydroxy-benzle] azulen- (1H) -one

Stade A : Acide-3,4,5-triméthoxy-benzènepropanoïque

On ajoute 6,8 g de carbonate de potassium à une solution de 21,44 g d'acide 3,4,5-triméthoxyphénylepropénoique et 45 ml d'eau puis on hydrogène pendant une heure sous une pression de 1200-1300 mbar en présence de 1,8 g de charbon actif à 10 % de palladium, on absorbe ainsi 2,1 1 d'hydro¬ gène. On filtre, lave à l'eau et acidifie avec 50 ml d'acide chlorhydrique (2N) . On essore, lave à l'eau et sèche sous pression réduite à température ambiante. On obtient ainsi 19,8 g du produit attendu (P.F. = 102-103°C) . Spectre I.R. (CHC1 ₃ ) Carbonyle : {1712 cm ^"1 (max) aromatique: {1592 cm ^*1 {1740 cm ^"1 (ép) {1510 cm ^"1

Spectre R.M.N. (CDC1 ₃ ) „

2,69(t)} =C-CH ₂ -CH ₂ - ^C0 3,83 (s)} 3 H3CO-C- 2,91(t)} | 3,85(s)}

6,43 (s) 2H aromatiques

10,50(m) 1H mobile

Stade B : Chlorure de 3,4,5-triméthoxy-benzenepropanoyle

On sèche avec 1,5 g de sulfate de magnésium une solution de 6 g du produit obtenu au stade A dans 21 ml de chlorure de méthylène, après filtration on refroidit à 5°C et ajoute 2,2 ml de chlorure de thionyle puis agite la solution 20 heures à température ambiante. On évapore à sec sous pression réduite en procédant à deux entraînements avec du cyclohexane on recueille ainsi 6,46 g du produit recherché. (P.F. = 60°C) Stade C : 2- [3- (3,4,5-triméthoxyphényl) -1-oxopropyl] -cyclo- pentanone

A une solution refroidie à 5°C de 2,4 ml de 1- (N-mor- pholinyl)cyclopentène obtenu comme décrit ci-après, 2,31 ml de triéthylamine et 15 ml de chlorure de méthylène on ajoute en 1 heure 30 à +5°C une solution de 4,27 g du produit obtenu au stade B dans 15 ml de chlorure de méthylène. On agite 1 heure à +5°C puis en laissant la température remonter on ajoute 10 ml d'acide chlorhydrique 2 N, agite 1 heure à température ambiante, décante, lave à l'eau puis avec une solution saturée de bicarbonate de sodium, sèche, filtre et évapore à sec sous pression réduite. On obtient 5 g du pro¬ duit attendu. On purifie le produit brut par dissolution dans 10 volumes d'acétate d'éthyle, extrait avec une solution de soude N, lave la phase alcaline avec de l'acétate d'éthyle, on acidifie à pH 1 avec de l'acide chlorhydrique concentré, extrait avec du chlorure de méthylène, sèche et évapore à sec sous pression réduite. On recueille 2,75 g de produit purifié. Spectre I.R. (CHC1 ₃ ) :

Carbonyle: {1741 cm ^"1 aromatique: {1592 cm ^"1

{1709 cm ^"1 {1509 cm ^"1

Carbonyle: {1658 cm ^"1 + C=C {-1610 cm ^"1 avec OH sous forme chélatée Spectre R.M.N. (CDC1 ₃ )

6,41(s) 2H arom. (base d'intégration)

3,81(s) 3,82 (s)} 9H en tout

3,83 (s) 3, 85(s)} 4 types de CH ₃ 0-C=

1,86(m) CH ₂ -CH ₂ -CH ₂ ~1,5H

1,95 à 2,95(m) ~7,5H en tout dont =C-CH ₂ de plusieurs types

3,26 (t) -0,4H CO-CH-CH ₂ I

CO

11,2(m large) H mobile

Préparation de 1- (N-morpholinyl) -cyclopentène utilisé au stade C : On agite pendant 4 heures 30 au reflux, en éliminant l'eau formée, une solution de 100 ml de cyclohexane, 20 ml de cyclopentanone, 50 ml de morpholine et 100 mg d'acide parato- luène sulfonique. Après évaporation du solvant sous pression réduite, on distille sous 12 - 13 mbar de pression et recueille 27,44 g de produit recherché (Eb. ≈ 83°C) .

Stade D : 1- (2-chloro-l-cyclopenten-l-yl) -3- (3,4,5-trimé- thoxyphényl) -propan-1-one

A une solution de 23 g de produit obtenu au stade C et

230 ml de chloroforme, on ajoute à température ambiante 13 ml de chlorure d'oxalyle. On agite trois heures à température ambiante, on concentre à pression réduite en procédant à deux entraînements au cyclohexane. On obtient 28 g de produit brut que l'on recristallise dans un mélange de 50 ml de cyclo¬ hexane et 50 ml d'éther diisopropylique après concentration partielle. On essore, lave avec de l'éther diisopropylique et sèche sous pression réduite. On obtient 16,24 g du produit attendu. (P.F. = 93°C)

Spectre I.R. (CHC1 ₃ ) :

1659 cm ^"1 : Carbonyle 1599 cm ^"1

1586 cm ^"1 : C≈C + aromatique

1508 cm ^"1

Spectre R.M.N. CDC1 ₃

1,93 (m) : CH ₂ central 2,69 (m) -2,81(m) : C-CH ₂ -C= du cyclopentène

2,85(t,j=7,5) - 3,08(t,j-7,5) : les autres =C-CH ₂ -C

2,44 : CH ₃ -C=

3,68 - 3,81 : les OCH ₃

6,59-6,68(d,j=2) : les CH= aromatiques couplés meta 7,31-7, 80 (d,j=8) : les aromatiques.

Stade E : 2,3,5,6-tétrahydro-8,9,10-triméthoxy-benz[e]azulèn- 4(1H) -one On agite 20 heures à température ambiante 900 mg du pro¬ duit obtenu au stade D, 9 ml de 1,2-dichloroéthane et 0,9 ml de chlorure stannique. On ajoute ensuite 9 ml d'eau et glace et décante, lave à l'eau, réextrait une fois avec du chlorure de méthylène, sèche sur sulfate de magnésium, filtre et éva- pore à sec sous pression réduite, pour obtenir 1 g du produit attendu (brut) que l'on purifie par chromatographie sur silice en éluant avec du cyclohexane à 10 % d'acétate d'éthyle, puis à 25 % d'acétate d'éthyle. Après concentration on recueille 700 mg de produit que l'on cristallise dans 5 ml de n-hexane, puis refroidit à 0°C, essore, lave avec le minimum de n-hexane, sèche sous pression réduite à tempéra¬ ture ambiante pour obtenir 630 mg de produit attendu. (P. F. = 101-102°C) . Spectre RMN (CDC1 ₃ ) 1,86 (m) le CH ₂ central

2,65(dd) 2H } 3,84}

2,72 (t) 2H } les autres CH ₂ 3,86} Les OMe

2,84(dd) 2H } 3,90}

3,06 2H } 6,59 (s) H aromatique

Stade F : 2,3,5, 6-tétrahydro-8,9,10-trihydroxy-benz[e]azulèn- 4(1H) -one

En opérant comme au stade B de la préparation Ibis, on obtient le produit déméthylé attendu. PREPARATION Ibis : 2,3,5,6-tétrahydro-8,9,10-trihydroxy- benz[e]azulen-4 (1H) -one

Stade A : 2,3,5,6-tétrahydro-8,9,10-triméthoxy-benz[e]azulèn- 4(1H) -one

On agite pendant 2 heures 30 à 20°C, 60 g du produit obtenu à la préparation 2, 600 ml de 1,2-dichloroéthane,

342 ml de soude 2N, 1,2 g de bromure de tétrabutylammonium et 33 ml du sulfate diméthylique. On introduit alors, 39 ml de triéthylamine afin de détruire l'excès de sulfate diméthyli-

que et agite une heure à 20°C ± 2°C. On ajoute 342 ml d'eau déminéralisée, agite 15 minutes à 20°C ± 2°C, décante, réextrait la phase aqueuse deux fois avec à chaque fois 120 ml de 1,2-dichloroéthane. Les phases 1,2-dichloroéthane 5 sont réunies et lavées par 4 x 240 ml d'eau déminéralisée, puis par l x 300 ml d'acide chlorhydrique N, puis par 3 x 240 ml d'eau déminéralisée (jusqu'à la neutralité) . Les phases organiques réunies sont séchées sur sulfate de sodium, filtrées et concentrées à pression ordinaire à 83°C jusqu'à

10 un volume résiduel de 480 ml.

Stade B : 2,3,5,6-tétrahydro-8,9,10-trihydroxy-benz[e]azulèn- 4(1H) -one

On chauffe au reflux, pendant une heure, 480 ml de la solution obtenue en (A) avec 102,3 g de chlorure d'aluminium

15 anhydre. On refroidit le milieu à 0°C ± 2°C puis ajoute en deux heures un mélange de 600 ml d'eau déminéralisée et 192 ml d'acide sulf rique pur (concentré) préalablement refroidi vers 0°C en maintenant la température du milieu réactionnel inférieure à 20°C. On introduit, en 5 minutes à

20 20°C ± 2°C, 300 ml d'eau déminéralisée et agite 16 heures à 20°C ± 2°C, essore, lave deux fois avec à chaque fois 60 ml de 1,2-dichloroéthane, puis à l'eau déminéralisée, sèche sous pression réduite et obtient 52,2 g du produit recherché. PREPARATION 2 : 8,9-diméthoxy-10-hydroxy-2,3,5,6-tétrahydro-

25 benz[e]azulen-4(1H) -one

Stade A : Acide 3,4-diméthoxy 5- [ [ (4-méthylphényl) -sulfo- nyl]oxy] -benzenepropanoique

On opère comme au stade A de la préparation 1 en utili¬ sant 29,76 g de l'acide 3,4-diméthoxy-5- [ [ [ (4-méthylphényl) -

30 sulfonyl]oxy]phényl] -cinnamique dont la préparation est donnée ci-après, 43,5 g de carbonate de potassium, 60 ml de méthanol et 1,48 g de charbon actif palladié à 10 %. On obtient ainsi 28,23 g du produit recherché sous forme de cristaux incolores (P. F. = 148-149°C) .

35 Spectre U.V. (EtOH) Pour M = 380,4 max 226nm ε≈ 22100 infl 263nm e= 2000

infl 269nm e= 2400 max 274nm ε= 2800 infl 279nm ε= 2500 infl 307nm ε= 450 Spectre R.M.N. (CDC1 ₃ )

2,45(8) CH ₃ -

2,61(m) ≈C-CH ₂ -CH ₂ -C= 3,68 (s) 2 CH ₃ 0-C=

2, 86 (m) 3,81(s)

6,61(d,j=2) 7,32(dl) H ₃ H ₅ 6,65(d,j=2) H ₄ Hg 7,80(dl) H ₂ Hg

Stade B : Chlorure de 3,4-diméthoxy 5- [ [ (4-méthylphényl) - sulfonyl] oxy] -benzènepropanoyle

On opère comme au stade B de la préparation 1 en utilisant 1,9 g du produit obtenu au stade A, 9,5 ml de chlorure de méthylène et 0,7 ml de chlorure de thionyle. On obtient 2,24 g du produit recherché utilisé tel quel pour le stade suivant.

Stade C : 2- [3- [3,4-diméthoxy-5- [ [ (4-méthylphényl) - sulfonyl] oxy] -phényl] -1-oxopropyl] -cyclopentanone On opère comme au stade C de la préparation 1 à partir de 2,24 g du chlorure d'acide obtenu au stade B et en utili¬ sant 770 mg de 1- (N-morpholinyl) -cyclopentène (préparé au stade C de la préparation 1) , 6 ml de chlorure de méthylène et 0,77 ml de triéthylamine. Après recristallisation dans l'éther diisopropylique on obtient 1,27 g du produit recherché

(P. F. = 84°C) .

Spectre I.R. (CHC1 ₃ )

Carbonyle : {1742 cm ^"1 0-S0 ₂ {1374 cm ^"1 {1709 cm ^"1 1178 cm ^"1 1658 cm ^"1

C=C + aromatique {1608 cm ^"1 1599 cm ^"1 1586 cm ^"1 1508 cm ^"1

Spectre R.M.N (CDC1 ₃ )

3, 67 (s) } 2 OCH ₃ 3,79(s) 3,81(8) }

6,59 à 6, 65 (m) 2H arom. en ortho des 0.

7,32 (dl) H ₃ H ₅

7,89(dl) H ₂ Hg

13,58 (m large) OH forme énol

1,8 à 3,4 (m) 10 à 11 H autres protons

Spectre U.V.

1 - EtOH (+ dioxane) pour M = 446,52 max 225nm e= 23000 max 282nm e= 7900 infl 270, 277, 290, 300, 313 nm

2 - EtOH (NaOH 0,1N) max 310 nm e≈ 21600 infl 268, 272, 276 nm

Stade D : 1- (2-chloro-1-cyclopenten-l-yl) -3- [3,4-diméthoxy-5- [ [ (4-méthylphényl)sulfonyl]oxy] -phényl] -propan-1-one

On opère comme au stade D de la préparation 1 en utili¬ sant 8,7 g du produit obtenu au stade C, 70 ml de chloroforme et 3,5 ml de chlorure d'oxalyle. Après cristallisation dans l'éther diisopropylique on obtient 7,75 g du produit recher¬ ché (P. F. = 73°C) . Ce produit est utilisé tel quel pour le stade suivant.

Un échantillon analytique a été obtenu par recristalli- sation dans 2,5 volumes de chlorure de méthylène et 5 volumes d'éther diisopropylique suivie par concentration à 3 volumes, essorage, lavage à l'éther diisopropylique et séchage sous pression réduite à température ambiante (P.F. = 77 - 78°C) . Spectre I.R. (CHC1 ₃ ) Carbonyle : {1659 cm ^"1

C=C aromatique : {1599 cm ^"1 - 1586 cm ^"1 - 1508 cm ^"1 Spectre U.V. (EtOH) max 227nm e= 26100 infl 248nm €= 12800 infl 272nm e= 5300 infl 280nm e= 3200 infl 320nm

Spectre R.M.N. (CDC1 ₃ ) 1,93 (m) -C-CH ₂ -C- central } 2,69 (m)} les C-CH ₂ -C= } 2,81(m}} }

2,85(t,j=7,5) } les autres =C-CH ₂ -C 3,08(t,j-7,5) }

2,44 CH ₃ -C= 3,68} les OCH ₃ 3,81}

6,59 (d,j≈2) les CH aromatiques 6,68 (d,j≈2) couplés meta 7,31 (d,j≈8)} 7,80 (d,j-8)}

Stade E : 8,9-diméthoxy-10- [ [ (4-méthylphényl)sulfonyl]oxy] - 2,3,5,6-tétrahydro-benz[e]azulèn-4(1H) -one A une solution de 2,32 g du produit obtenu au stade C dans 50 ml de 1,2-dichloroéthane on ajoute à température ambiante 1,65 g de chlorure ferrique à 98 %. On agite 48 heures à température ambiante puis coule sur un mélange d'eau et glace, agite énergiquement pendant 15 mn et extrait avec du chlorure de méthylène, lave à l'eau, puis avec une solu¬ tion aqueuse saturée de chlorure de sodium. Après séchage et évaporation à sec sous pression réduite on obtient 2,15 g du produit brut que 1'on chromatographie en éluant avec du cyclohexane à 50 % d'acétate d'éthyle, on recueille 1,8 g de produit que l'on chromatographie à nouveau et recristallise dans le mélange chloroforme/éther diisopropylique pour obte¬ nir 720 mg du produit recherché (P.F. = 138°C) . Spectre I.R. (CHC1 ₃ ) Carbonyle : {1650 cm ^"1 {1599 cm ^"1

C=C + {1556 cm ^"1 aromatique {1512 cm ^"1 - 1498 cm ^"1 Spectre U.V. (EtOH) max 230nm e= 25300 infl 254nm e= 9400 max 323nm e= 10300 Spectre R.M.N. (CDC1 ₃ ) ~l,61 (m) (2H) CH ₂ central -2,41 Ph-CH ₃ -2,50 à 2,80 CH ₂ -C=

I

3,88 (s) } les 0CH ₃

3,90(s) }

6 , 74 H4

7 , 21 (d) } C- Ph- S0 ₂

7 , 64 (d) }

Stade F : 8,9-diméthoxy-10-hydroxy-2,3,5,6-tétrahydro-benz [e]azulèn-4 (1H) -one

On chauffe au reflux pendant 2 heures un mélange de 350 g du produit obtenu au stade E ci-dessus, 1750 ml de méthanol, 350 ml d'eau déminéralisée et 350 ml de lessive de soude pure (concentrée) . On refroidit le milieu réactionnel vers 2°C ± 2°C et introduit en 45 minutes 467 ml d'acide chlorhydrique concentré en maintenant la température à 2°C ± 2°C. On ajoute alors 1645 ml d'eau déminéralisée en 10 mn et en maintenant la température à 2°C ± 2°C, puis le milieu réactionnel est agité 30 minutes toujours à 2°C ± 2°C. On essore les cristaux formés, lave par clairçages à 5 repri¬ ses avec à chaque fois 700 ml d'eau déminéralisée à 20°C puis sèche à 40°C sous pression réduite pour obtenir 199,1 g du produit recherché. Préparation de l'Acide 3.4-diméthoxy 5- [ [(4-méthylphényl) - suifonyl]oxy] -cinnami ue utilisé au départ de la prépara¬ tion 2.

Stade A : 3,4-diméthoxy-5- [[ (4-méthylphényl) -sulfonyl]oxy] - benzoate de méthyle.

On ajoute en 10 minutes à température ambiante 303 ml de triéthylamine à un mélange agité de 200 g de gallate de méthyle et 2 litres de chlorure de méthylène. Après dissolu¬ tion on refroidit à 0-5°C puis ajoute en 1 heure à cette température 130 ml de dichlorodiméthylsilane, agite encore 30 minutes à cette température. En maintenant la température à 0-5°C on ajoute en 25 minutes 303,2 ml de triéthylamine puis en 15 minutes 227,6 g de chlorure de tosyle. On agite encore une heure à 0-5°C, et ajoute en 10 minutes sous agitation et en laissant évoluer la température jusqu'à 20-22°C, 200 ml d'acide acétique, puis 500 ml d'eau déminéralisée, on agite encore 15 minutes à 20°C. On distille le chlorure de méthy¬ lène à volume constant (3,3 1) sous pression réduite en remplaçant par de l'eau déminéralisée, on agite 2 heures à 20°C, essore, lave avec de l'eau déminéralisée pour obtenir

523 g (poids humide) de 3,4-dihydroxy-5- [ [ (4-méthylphényl) - sulfonyl] oxy] -benzoate de méthyle (3-tosylgallate de méthyle) . Le produit humide obtenu est repris par 2,17 1 de soude (2N) et 2,17 1 de chlorure de méthylène. On agite à 20°C jusqu'à dissolution puis ajoute à 20°C, 18 g de bromure de tétrabutylammonium puis, en 15 minutes à 20°C, 237 ml de sulfate diméthylique. Le milieu réactionnel est agité 1,5 heure à 20-22°C. On ajoute, à 20-22°C, 78 ml de triéthyl¬ amine et agite une nuit à 20-22°C, puis décante et lave avec 400 ml d'eau déminéralisée et ajoute 20 ml d'acide acétique pur à la phase organique agite 15 minutes, ajoute 400 ml d'eau déminéralisée, puis décante. On concentre à sec les phases organiques réunies, d'abord à pression atmosphérique puis sous pression réduite à 40 mm Hg et 60°C extérieur. On entraîne avec 400 ml de méthanol puis, reprend l'extrait sec obtenu avec 600 ml de méthanol chauffe au reflux jusqu'à dissolution totale du produit, puis refroidit à 0-5°C agite une heure à cette température. On essore et lave par deux fois avec 200 ml de méthanol à -10°C et sèche à 40°C sous pression réduite on recueille ainsi 330,4 g de : 3,4-dimé- thoxy-5- [ [ (4-méthylphényl) -sulfonyl]oxy] -benzoate de méthyle. Le produit brut est purifié par recristallisation dans 330 ml de toluène. Après 2 heures d'agitation à -10°C on essore, lave par deux fois 82 ml de toluène refroidi à -15°C et sèche sous pression réduite à 40°C pour obtenir 230,3 g du produit purifié recherché.

Stade B : acide 3,4-diméthoxy 5- [ [ (4-méthylphényl) - sulfonyl]oxy] -cinnamique a) On refroidit à 0°C, 600 ml de toluène et ajoute 202 ml d'une solution de Vitride a 70 % dans le toluène a 0°C et ajoute en une heure 67,6 ml de morpholine à 0-2°C, on laisse remonter la température jusqu'à 18°C. On utilise la solution ainsi obtenue immédiatement pour l'étape suivante. b) On agite 10 minutes à 20-22°C, 200 g de 3,4-diméthoxy-5- [[ (4-méthylphényl) -sulfonyl]oxy] -benzoate de méthyle obtenu au stade A et 1400 ml de toluène jusqu'à dissolution totale. On ajoute en une heure à 10°C la solution du réactif obtenue ci-dessus. On agite encore une heure en laissant la tempéra-

ture remonter à 18°C.

On introduit en une heure, à 10°C, une solution refroidie à 10°C de 200 ml d'acide sulfurique concentré et 1000 ml d'eau déminéralisée. On agite 16 heures à 20°C puis décante la phase organique, lave par 5 x 200 ml d'eau déminéralisée, sèche, filtre et lave par 3 x 100 ml de chlorure de méthy¬ lène. La solution d'aldéhyde intermédiaire ainsi obtenue est utilisée telle quelle à l'étape suivante. c) On chauffe 16 heures à 70°C ± 2°C (en éliminant, à pres- sion ordinaire, le chlorure de méthylène) la solution d'aldé¬ hyde intermédiaire obtenue ci-dessus, 200 ml de 2-picoline, 120 g d'acide malonique et 20 ml de pipéridine. On refroidit à 20-22°C, et en maintenant cette température on ajoute en 15 minutes une solution de 200 ml d'acide chlorhy- drique concentré et 400 ml d'eau déminéralisée. On agite 2 heures à 20-22°C, puis refroidit à 0°C, essore les cristaux formés, lave à l'eau déminéralisée, sèche sous pression réduite à 40°C pour obtenir 171,7 g de l'acide 3,4-diméthoxy 5- [ [ (4-méthylphényl) -sulfonyl]oxy}phényl] -cinnamique attendu. PREPARATION 3 : 9,10-diméthoxy-8-hydroxy-2,3,5,6- étrahydro- benz[e] zulen-4(1H) -one

Stade A : 9,10-dihydroxy-8- [ [ (4-méthylphényl) sulfonyl]oxy] - 2,3,5, 6-tétrahydro-benz [e]azulèn-4 (1H) -one

On agite pendant 1 heure 30 à 20°C ± 2°C, 30 g de 2,3,5,6-tétrahydro-8,9,10-trihydroxy-benz[e]azulèn-4 (1H) -one obtenu selon la préparation 1 ou Ibis, 300 ml de tétrahydro- furanne, 60 ml de triéthylamine et 12,9 ml de triméthylbo- rate. On ajoute 30 g de chlorure de tosyle et agite 16 heures à 20°C ± 2°C puis en 10 minutes à 20°C ± 2°C verse le milieu réactionnel sur un mélange agité de 900 ml d'eau déminéra¬ lisée et 150 ml d'acide chlorhydrique concentré, puis on ajoute 90 ml de tétrahydrofuranne et 60 ml de chlorure de méthylène. On agite la solution obtenue une heure à 20°C, puis introduit 150 ml de chlorure de méthylène et agite encore 15 minutes, décante et réextrait par 2 x 75 ml de chlorure de méthylène. Les phases organiques réunies sont lavées avec 4 x 150 ml d'eau déminéralisée et réextraites par 75 ml de chlorure de méthylène, après concentration sous

pression réduite de 20 mbars jusqu'à refus de distillation à 50°C pour obtenir 47,6 g du produit recherché. Stade B : 9,10-diméthoxy-8- [[ (4-méthylphényl)sulfonyl]oxy] - 2,3,5,6-tétrahydro-benz[e]azulèn-4(1H) -one On agite 16 heures à 20°C, 47,6 g du produit obtenu ci- dessus, 300 ml de chlorure de méthylène, 300 ml de soude (2N) , 0,6 g du bromure de tétrabutylammonium et 30 ml de sulfate diméthylique. On introduit alors 30 ml de triéthyl¬ amine afin de détruire l'excès de sulfate diméthylique, le milieu réactionnel est agité encore une heure à 20°C ± 2°C, puis ajoute 150 ml d'eau déminéralisée agite encore 15 minutes puis décante. La phase aqueuse était réextraite avec 2 x 75 ml de chlorure de méthylène et les phases organi¬ ques réunies sont lavées par 3 x 120 ml d'eau déminéralisée puis 120 ml d'acide chlorhydrique N et 3 x 120 ml d'eau déminéralisée, les phases organiques sont réunies et séchées sur sulfate de sodium, puis on ajoute en 1 heure 120 g de gel de silice (60 Mesh) à 20°C ± 2°C sous agitation et agite encore une heure à 20°C, filtre, lave avec du chlorure de méthylène et concentre à sec sous pression réduite à 50°C pour obtenir 47,4 g du produit recherché.

On purifie le produit brut par recristallisation dans 390 ml d'éthanol après distillation de 90 ml d'éthanol, on agite 3 heures à 0°C ± 2°C. On essore, lave avec 30 ml d'éthanol à 0°C, puis sèche sous pression réduite à 40°C pour obtenir 41,1 g du produit recherché (P.F. = 129°C) .

Stade C : 9,10-diméthoxy 8-hydroxy 2,3,5,6-tétrahydrobenz[e] - azulèn-4(1H) -one

On ajoute 4,5 g de potasse puis 10 ml de triéthylamine dans une suspension comprenant 10 g de 9,10-diméthoxy 8-(((4- méthylphényl) sulfonyl) oxy) 2,3,5,6-tétrahydro-benz[e]azu- lèn-4 (1H) -one obtenu comme au stade B et 100 ml de méthanol. On chauffe 1 heure au reflux, acidifie par addition de 20 ml d'acide acétique puis ajoute 20 ml d'eau. On extrait au dichlorométhane, lave à l'eau, évapore le solvant à 40°C sous pression réduite et recueille 5,7 g de produit attendu. PREPARATION 4 s 2,3,5,6-tétrahydro-8-hydroxy-9-méthoxy- benz[e]azulen-4(1H) -one et

2 , 3 , 5 , 6 - tétrahydro- 9 -hydroxy- 8 -méthoxy-benz [e] azulen-4 (1H) - one

On opère de manière équivalente à la préparation 2 stades B, C, D, E et F mais à partir d'acide 3-(3,4-dimé- thoxy-phény1) propionique, et on obtient 1,08 g de produit brut renfermant un mélange de produit monohydroxylé (8-OH/9- OMe et 9-OH/8-OMe) que l'on sépare par chromatographie sur silice en utilisant comme mélange éluant le mélange cyclo- hexane/acétate d'éthyle 7/3. On obtient ainsi les deux régioisomères suivants :

8-OH/9-OMe 0,494 g Rf (cyclohexane/acétate d'éthyle 6/4)=0,42 8-OMe/9-OH 0,041 g Rf (cyclohexane/acétate d'éthyle 6/4)=0,33 PREPARATION 5 : 2,3,5,6-tétrahydro-8-hydroxy-10-méthoxy- benz[e]azulen-4(1H) -one et 2,3,5,6-tétrahydro-10-hydroxy-8- méthoxy-benz[e]azulen-4(1H) -one

On opère de manière équivalente à la préparation 2 stades B, C, D, E et F mais à partir d'acide 3-(3,5-dimé- thoxy-phényl) propionique, et on obtient 1,428 g d'un produit renfermant un mélange des produits monohydroxylés (8-OH/10- OMe et 10-OH/8-OMe) et dihydroxylés (8-OH/10-OH) , que l'on sépare par chromatographie sur silice en utilisant comme mélange éluant le mélange cyclohexane/acétate d'éthyle 7/3. PREPARATION 6 : 2,3,5,6-tétrahydro-9-hydroxy-benz[e]azulen- 4(1H) -one On opère de manière équivalente à la préparation 2 stades B, C, D, E et F mais à partir de l'acide 3- (4-méthoxy- phényl) propionique. La demethylation s'est opérée avec du tribromure de bore. (Rf ≈ 0,15 cyclohexane/acétate d'éthyle 7/3). PREPARATION 7 : 2,3,5,6-tétrahydro-8-hydroxy-benz[e]azulen- 4(lH)-one

On opère de manière équivalente à la préparation 2 stades B, C, D, E et F mais à partir de 10,0 g d'acide 3- (3- méthoxyphényl) propionique, et on obtient 2,9 g de produit attendu. La demethylation s'est opérée avec du tribromure de bore.

(Rf = 0,15 dichlorométhane/acétate d'éthyle 95/5). PREPARATION 8 : Ester methylique de l'acide (D ) -4-bromo 2-

(phënylméthoxycarbonylamino) butanoique.

On agite 18 heures à 120°C dans une enceinte close 25 g de bromhydrate de 2-amino 4-butyrolactone dans 200 ml d'acide acétique à 24% d'acide bromhydrique gazeux. On refroidit à température ambiante, ramène à pression atmosphérique, concentre sous pression réduite, reprend le résidu dans 200 ml de méthanol puis fait barboter un courant d'acide chlorhy¬ drique pendant 2 heures en maintenant la température infé¬ rieure à 35°C. On évapore le solvant sous pression réduite et obtient l'ester methylique de l'acide 2-amino 4-bromo buta¬ noique que l'on reprend dans 250 ml d'acétone et 100 ml d'eau, neutralise à l'aide de soude 2N puis ajoute lentement 35 ml de chloroformiate de benzyle. On agite pendant 48 heures, filtre, extrait à l'acétate d'éthyle, évapore le solvant, chromatographie le résidu sur silice (éluant : cyclohexane- acétate d'éthyle 7-3) et récupère 27,9 g de produit attendu. F = 90°C.

PREPARATION 9 : Ester methylique de l'acide 4-bromo 2- (terbu- toxycarbonylamino) butanoique. On agite pendant 48 heures à température ambiante 5,7 g de l'ester methylique de l'acide 2-amino 4-bromo Butanoique préparé comme à la préparation 8 dans 120 ml de méthanol avec 24 ml de triéthylamine et 9 g de diterbutyl dicarbonate. On évapore les solvants, reprend le résidu à l'eau et au dichlo- rométhane, filtre, extrait au dichloro éthane, évapore les solvants, chromatographie le résidu sur silice (éluant : cyclohexane-ACOEt-TEA 7-3-0,5) et obtient 1,575 g de produit attendu de rf = 0,52. PREPARATION 10 : 4- (3-pyrimidinyl) lH-imidazol 1-propanol. On mélange 505 mg d'éthylate de sodium dans 12,5 ml de diméthylformamide, ajoute 1 g de 3- (lH-imidazol-4-yl) pyridine puis 0,64 ml de chloropropanol et agite 16 heures à 55°C. On évapore le solvant sous pression réduite, chromato¬ graphie le résidu (éluant : CH ₂ Cl ₂ -MeOH 98-2) et récupère 1,015 g de produit attendu. Spectre IR (CHC1 ₃ )

OH 3626 cm ^"1 + associé hétérocycle 1601, 1578, 1551, 1499 cm ^"1

PREPARATION 11 : Hydrazone de hexahydro-2H-1,3-diazepin-2- one.

On chauffe à 65°-70°C pendant 1 heure une suspension comprenant 3,3 g de nitroguanidine, 7 ml d'eau, 3,47 g de potasse et 5 g de dichlorhydrate de diamine; On ajoute 10,5 g de zinc, agite 30 minutes à température ambiante, puis ajoute

2 ml d'acide acétique, chauffe 1 heure à 40°C, filtre, ajoute

3 g de chlorure d'ammonium puis 4 g de bicarbonate de sodium. On extrait au dichlorométhane, évapore le solvant sous pres- sion réduite, chromatographie le résidu sur silice (éluant : CH ₂ Cl ₂ -MeOH-NH ₄ OH 8-4-2) et récupère 1,650 g de produit attendu.

PREPARATION 12 : Monobromhydrate de 3a,4,5, 6,7,7a-hexahydro 2- (propylthio) lH-benzimidazole. On chauffe au reflux jusqu'à complète dissolution 1 g de octahydro 2H-benzimidazol-2-thione et 1,3 ml de bromopropane dans 20 ml d'éthanol. On évapore le solvant sous pression réduite, reprend le résidu dans un minimum de dichloro- méthane, ajoute de l'éther isopropylique, évapore les solvants sous pression réduite, recristallise dans l'éther isopropy¬ lique, essore et sèche le produit attendu avec un rendement de 95%. F = 136°C.

EXEMPLE 1 : Acide 7- ( (4- ( ( (amino) iminométhyl)hydrazono) -9,10- dimëthoxy-1,2,3,4,5, 6-hexahydrobenz (e)azulen-8-yl)oxy) -hepta- noique

Stade A : Ester methylique de l'acide 7- (4-oxo) -9, 10-dimé- thoxy-1,2,3,4,5, 6-hexahydrobenz (e) azulen-8-yl)oxy) -hepta- noique

On agite à 40°C pendant 4 heures une suspension renfer- mant 0,684 g de 2, 3, 5, 6-tétrahydro-8-hydroxy-9, 10-diméthoxy- benz [e]azulen-4 (1H) -one (préparation 3), 12 ml de diméthyl- formamide (DMF) , 12 ml de tétrahydrofuranne (THF), 0,7 g de carbonate de potassium et 0,835 g de 7-bromo oenanthate de méthyl . Après évaporation sous pression réduite le produit brut est chromatographie sur silice en éluant avec un mélange chlorure de méthylène (CH ₂ C1 ₂ ) /acétone 95/5. On obtient ainsi 1,000 g de produit purifié sous la forme d'une huile jaune. Rf CH ₂ Cl ₂ /acétone 95/5 : 0,5

IR (CHC1 ₃ ) C=0 1732 cm ^"1 OMe 1438 cm ^"1 cétone conjuguée 1641 cm ^"1 C=C 1592 cm ^"1 , 1557 cm ^"1 , 1492 cm ^"1 + aromatique

Stade B : Ester methylique de l'acide 7- ( (4- ( ( (amino)imino- méthyl)hydrazono) -9,10-diméthoxy-1,2,3,4,5,6-hexahydro- benz(e)azulen-θ-yl)oxy) -heptanoique On agite 48 heures à température ambiante une suspension de 0,5 g du produit du stade A précédent, 5 ml d'éthanol et 0,330 g de chlorhydrate d'amino guanidine, évapore le solvant sous pression réduite, et purifie le produit brut par chroma¬ tographie sur silice en éluant avec un mélange CH ₂ C1 ₂ /méthanol (MeOH)/ammoniaque 80/20/4. On obtient ainsi 0,466 g de produit purifié sous la forme d'une mousse blanche.

Rf CH ₂ Cl ₂ /méthanol (MeOH) /ammoniaque 80/20/4 : 0,8 IR (Nujol) NH/NH ₂ 3495 cm ^"1 , 3155 cm ^"1 + associés C=0 1731 cm ^"1 C=N 1674 cm ^"1 C=C 1625 cm ^"1 aromatique 1595 cm ^"1 (F) NH/NH ₂ 1534 cm ^"1 , 1491 cm ^"1

Stade C : Acide 7- { (4- (( (amino)iminométhyl)hydrazono) -9,10- diméthoxy-1,2,3,4,5,6-hexahydrobenz(e)azulen-8-yl)oxy) -hepta¬ noique

On agite pendant 3 heures à température ambiante la solution renfermant 0,44 g du produit obtenu au stade précé¬ dent, 5 ml d'éthanol et 2 ml de soude IN, puis on neutralise avec 2 ml d'acide chlorhydrique IN. Après évaporâtion sous pression réduite, on purifie le produit brut par chromatogra¬ phie sur silice en éluant avec un mélange CH ₂ Cl ₂ /méthanol (MeOH) /ammoniaque 80/20/4. On obtient ainsi 0,192 g de produit purifié recristallisé dans le méthanol. Rf CH ₂ C1 ₂ /méthanol (MeOH)/ammoniaque 80/20/4 : 0,17 RMN (D ₂ 0 + 1 goutte de soude IN)

3,92 tl 2H CH ₂ -0 2,17 t 2H CH ₂ -COOH 1,34 m 4H

1,55 m 2H CH ₂ centraux + CH ₂ -C= 1,70 m 4H

2,50 à 2,90 m 8H

6,62 s IH H ₇ aromatique

3,64 s 3H 0CH ₃

3,73 s 3H OCH ₃ Hicroanalyse

% calculé C 62,86 H 7,47 N 12,21 % trouvé C 62,9 H 7,5 N 12,1

En opérant de manière équivalente à l'exemple 1 stades A, B et C, à partir de 2,3,5,6-tétrahydro-8-hydroxy-9,10- diméthoxy-benz[e]azulen-4(IH) -one (préparation 3), mais avec des groupements alkylants et des groupements G-NH ₂ diffé¬ rents, on a préparé les produits de formule (I) suivants : EXEMPLE 2 : Acide 4- ((4- ( ((amino)iminométhyl)hydrazono) -9,10- diméthoxy-1,2,3,4,5,6-hexahydrobenz(e)azulen-8-yl)oxy) -buta- noi ue

EXEMPLE 3 : Acide 4- ( (4- ( ((amino)iminométhyl)hydrazono) -9,10- diméthoxy-1,2,3,4,5,6-hexahydrobenz(e)azulen-8-yl)oxy) -penta¬ noique EXEMPLE 4 : Acide 5- ( (4- ( ((amino)carbonyl)hydrazono) -9,10- diméthoxy-1,2,3,4,5,6-hexahydro-8-benz(e)azulènyl)oxy) -penta¬ noique

EXEMPLE 5 : Acide 6- ( (4- ( ( (amino)iminométhyl)hydrazono) -9,10- diméthoxy-1,2,3,4,5,6-hexahydro-8-benz(e)azulènyl)oxy) -hexa- noique EXEMPLE 6 : Acide 5- (9,10-diméthoxy-1,2,3,4,5,6-hexahydro-4- (4,5-dihydro-lH-imidazol-2-yl)hydrazono) -8-benz(e)azulènyl) oxy) -pentanoique

EXEMPLE 7 : Acide 5- ( (4- ( ((amino)thiocarbonyl)hydrazono) - 9,10-diméthoxy-1,2,3,4,5,6-hexahydro-8-benz(e)azulènyl)oxy ) - pentanoique

EXEMPLE 8 : Acide 6- (4( (4,5-dihydro-lH-imidazol-2-yl) hydrazono) -9,10-diméthoxy-1,2,3,4,5,6-hexahydro-8-benz(e) azulènyl)oxy) -hexanoique

EXEMPLE 9 t Acide 5- ( (4- (((amino)iminométhyl)hydrazono) -9,10- diméthoxy-1,2,3,4,5,6-hexahydro-8-benz(e)azulènyl)oxy) -3,3- diméthyl-4-oxo-pentanoique

EXEMPLE 10 : Acide 5- (4((4,5-dihydro-lH-imidazol-2-yl) hydrazono) -9,10-diméthoxy-l,2,3,4,5,6-hexahydro-8-benz(e) azulènyl)oxy) -3,3-diméthyl-4-oxo-pentanoique EXEMPLE 11 : Acide 4- (4 ( (4,5-dihydro-lH-imidazol-2-yl) hydrazono) -9,10-diméthoxy-1,2,3,4,5,6-hexahydro-8-benz(e) azulènyl)oxy) -butanoique EXEMPLE 12 : Acide 4- ( (9,10-diméthoxy-4- ( (1,4,5,6-tétrahydro- 2-pyri idinyl)hydrazono)-1,2,3,4,5,6-hexahydro-8-benz(e) azulènyl)oxy) -butanoique

EXEMPLE 13 : Acide 2- (4((4,5-dihydro-lH-imidazol-2-yl) hydrazono) -9,10-diméthoxy- ,2,3,4,5,6-hexahydro-8-benz(e) azulènyl)oxy) -éthanoique

EXEMPLE 14 : Acide 3- (4((4,5-dihydro-lH-imidazol-2-yl) hydrazono) -9,10-diméthoxy-1,2,3,4,5,6-hexahydro-8-benz(e) azulènyl)oxy) -propanoique

(D dichlorométhane/méthanol/ammoniaque 80/20/4

EXEMPLE 15 : Chlorhydrate de l'acide 5- ((4- (((amino)imino¬ méthyl)hydrazono) -9,10-diméthoxy-1,2,3,4,5,6-hexahydrobenz (e)azulen-8-yl)oxy) -pentanoique

On mélange 86 mg du produit de l'exemple 3 avec 2 ml d'eau et 4 1 d'acide chlorhydrique 0,1N puis après quelques minutes, lyophilise le milieu. On obtient 91 mg de sel attendu.

EXEMPLE 16 : Acide 4- ( (4- ( ( (amino)iminométhyl)hydrazono) -8,9 diméthoxy-1,2,3,4,5,6-hexahydro-10-benz(e) zulènyl)oxy) - butanoique

EXEMPLE 17 : Acide 5- ( (4- ( ((amino)iminométhyl)hydrazono) -8,9- diméthoxy-1,2,3,4,5,6-hexahydro-10-benz(e)azulènyl)oxy) - pentanoique

On opère comme à l'exemple 1 stades A, B et C, mais à partir de 2,3,5,6-tétrahydro-10-hydroxy-8,9-diméthoxy-benz [e]azulen-4 (IH) -one (préparation 2).

EXEMPLE 18 t Acide 4- ((4- (( (amino)iminométhyl)hydrazono) - 8,10-diméthoxy-1,2,3,4,5,6-hexahydro-9-benz(e) zulènyl)oxy) butanoique

EXEMPLE 19 : Acide 5- ( (4- (( (amino)iminométhyl)hydrazono) - 8,10-diméthoxy-1,2,3,4,5,6-hexahydro-9-benz(e) zulènyl)oxy) pentanoique

On opère comme à l'exemple l stades A, B et C, mais à partir de 2,3,5,6-tétrahydro-9-hydroxy-8,10-diméthoxy-benz [e]azulen-4 (IH) -one.

EXEMPLE 20 : Acide 4- ( (4 ( (4,5-dihydro-lH-imidazol-2- yl)hydrazono) -1,2,3,4,5,6-hexahydro-9-benz (e)azulènyl)oxy) - butanoique

Stade A : Ester éthylique de l'acide 4- (4-oxo) -1,2, 3,4,5, 6- hexahydrobenz (e)azulen-9-yl) oxy) -butanoique

On agite à température ambiante pendant une nuit une suspension renfermant 0,6 g de 2, 3, 5, 6-tétrahydro-9-hydroxy- benz [e] azulen-4 (IH) -one (préparation 6), 12 ml de diméthyl- formamide (DMF) , 12 ml de tétrahydrofuranne (THF) , 0,7 g de carbonate de potassium et 0,7 ml de bromobutyrate d'éthyle. Après évaporation sous pression réduite le produit brut est chromatographie sur silice en éluant avec un mélange chlorure de méthylène (dichlorométhane/acétone 95/5) . On obtient ainsi 0,608 mg de produit purifié sous la forme d'une huile jaune. IR (CHC1 ₃ ) C=0 1728cm ^"1 cétone conj . 1641 cm ^"1

C=C aromatiques 1610 cm ^"1 , 1590 cm ^"1 , 1569 cm ^"1 , 1499 cm ^"1 Stade B : Ester éthylique de l'acide 4- ( (4- ( (4, 5-dihydro-lH- imidazolin-2-yl)hydrazono) -1,2,3,4,5, 6-hexahydrobenz (e) azulen-9-yl)oxy) -butanoique

On agite 24 heures au reflux 608 mg du produit du stade A précédent, 10 ml de butanol et 600 mg de bromhydrate d'amino guanidine cyclique suivant : le (4, 5-dihydro-lH- imidazolin-2-yl) -hydrazine, évapore le solvant sous pression réduite, et purifie le produit brut par chromatographie sur silice en éluant avec un mélange CH ₂ C1 ₂ /méthanol (MeOH) /ammo¬ niaque 80/20/4. On obtient ainsi 0,604 g de produit attendu.

C≈O 1728 cm ^" - ¹ (ester)

C=N + C=C + aromatiques : 1627 cm ^'1 (F) , 1568 cm ^"1 , 1548 cm ^"1 , 1497 cm ^"1 , 1488 cm ^"1

Stade C : Acide 7- ( (4,5-dihydro-lH-imidazol-2-yl)hydrazono) - 1,2,3,4,5, 6-hexahydrobenz (e)azulen-9-yl) oxy) -butanoique. On agite pendant 4 heures à température ambiante la solution renfermant 0,604 g du produit obtenu au stade précé¬ dent, 8 ml d'éthanol, 5 ml de tétrahydrofuranne et 2 ml de soude 2N, puis on neutralise avec 2 ml d'acide chlorhydrique. Après évaporâtion sous pression réduite, on purifie le pro- duit brut par chromatographie sur silice en éluant avec un mélange dichlorométhane (CH ₂ C1 ₂ ) /méthanol (MeOH) /ammoniaque 80/20/4. On obtient ainsi 0,298 g de produit purifié recris¬ tallisé dans le méthanol. Rf (dichlorométhane/méthanol/ammoniaque 80/20/4) : 0,2 RMN (D ₂ 0 + 1 goutte de soude IN)

1,71 (1) 2H 0-CH ₂ -Cl ₂ -CH ₂ -CO

1,96 (m) 2H CH ₂ en 2 (cyclopentène)

2,30 (t) 2H CH ₂ -C0

2,50 à 2,75 8H 3,45 (si) 4H 3,89 (tl) 2H 6,70 (m) 2H 7,00 (d, J-8) EXEMPLE 21 : Acide 4- (4 ( (4,5-dihydro-lH-imidazol-2-yl) hydrazono) -1,2,3,4,5,6-hexahydro-8-benz(e)azulènyl)oxy) -buta¬ noique

On opère comme à l'exemple 20 mais à partir de 0,856 g de 2,3,5, 6-tétrahydro-8-hydroxy-benz [e]azulen-4 (IH) -one (préparation 7) et on obtient 0,299 g de produit attendu. Rf (dichlorométhane/méthanol/ammoniaque 80/20/4) : 0,27 EXEMPLE 22 : Acide 5- ( (8- ( ( (amino) iminométhyl)hydrazono) - 6,7,8,9,10,ll-hexahydro-azuleno(5, 6-d) -l,3-benzodioxol-4- yDoxy) -pentanoique Stade A : Ester éthylique de l'acide 5- (( (4-oxo) -9,10- dihydroxy-1,2,3,4,5,6-hexahydrobenz (e)azulen-9-yl)oxy) -penta¬ noique 1) protection

A une solution, sous atmosphère inerte, de 10 g de

2,3,5,6-tétrahydro-8,9,10-trihydroxy-benz[e]azulen-4(IH) -one (préparation 1) dans 100 ml de tétrahydrofuranne, on ajoute 4,42 ml de triméthoxyborate et 20,4 ml de triéthylamine en maintenant la température entre 37 et 39°C, puis agite à température ambiante pendant 3 heures. 2) alkylation et déprotection

On ajoute ensuite 9,7 ml de bromo-5valérate d'éthyle, 100 ml de diméthylformamide et 8,4 g de carbonate de potas¬ sium et agite 2 jours à 60°C. Le mélange réactionnel est ensuite traité avec 120 ml d'eau et 50 ml d'acide chlorhydri¬ que concentré 36N, on agite pendant 1 heure rajoute de l'acé¬ tate d'éthyle, sépare les phases organiques et aqueuses. La phase organique est ensuite lavée, séchée et évaporée sous pression réduite. On obtient un produit brut que l'on purifie par chromatographie sur silice en éluant avec le mélange cyclohexane/acétate d'éthyle 70/30. On obtient 5,2 g de produit pur attendu.

Rf (dichlorométhane/méthanol 95/5) = 0,82 Rf (cyclohexane/acétate d'éthyle 70/30) = 0,23 Stade B : Ester éthylique de l'acide 5-(((8-oxo)-

6,7,8,9,10,11-hexahydro-azuleno(5,6-d) -1,3-benzodioxol-4- yl)oxy) ) -pentanoique

On mélange, sous atmosphère inerte, à 60°C pendant 1 heure, 2,5 g du produit obtenu au stade précédent, 17 ml de diméthylformamide, 3,6 g de CsF et 1,4 ml de dibromomethane. Après filtration et rinçage au méthanol, on évapore sous pression réduite et purifie le produit brut par chromatogra¬ phie sur silice en éluant avec le mélange cyclohexane/acétate d'éthyle 85/15. On obtient 1,73 g de produit pur attendu. (F= 118°C)

Rf (cyclohexane/acétate d'éthyle 80/20) = 0,25 Stade C : Ester éthylique de l'acide 5- ( (8- (( (amino) imino¬ méthyl)hydrazono) -6,7,8,9,10,11-hexahydro-azuleno(5,6-d) -1,3- benzodioxol-4-yl)oxy) -pentanoique On mélange 1 nuit à 120°C 551 mg du produit obtenu au stade précédent et 467 mg de chlorhydrate d'aminoguanidine, puis on purifie par chromatographie en éluant avec un mélange dichloromëthane/méthanol/ammoniaque 80/20/4. On obtient

174 mg du produit attendu.

Rf (dichlorométhane/mêthanol/ammoniaque 80/20/4) 0,98 Stade D : Acide 5- ( (8- ( ( (amino) iminométhyl)hydrazono) - 6,7,8,9,10,ll-hexahydro-azuleno(5,6-d) -1,3-benzodioxol-4- yl)oxy) -pentanoique

On mélange à température ambiante pendant 1 heure 30, 274 mg du produit obtenu au stade précédent et 1,86 ml de soude IN, neutralise ensuite par une solution d'acide chlo¬ rhydrique IN, et évapore sous pression réduite. Le produit brut est purifié par chromatographie en éluant avec le mélange dichlorométhane/méthanol/ammoniaque 80/20/4. On obtient 141 mg du produit attendu.

Rf (dichlorométhane/méthanol/ammoniaque 80/20/4) 0,23 RMN (DMSO) 1,55 à 1,9 (m) 4H 0-CH ₂ -CH. ₂ -CH ₂ -CH ₂ -CO

1,55 à 1,9 (m) 2H CH ₂ en 2 (cyclopentène)

2,26 (t) 2H CH ₂ -CO

2,65 à 3,00 (m) 8H 4,07 (t) 2H 5,95 (S) 2H 6,61 (m) IH H mobiles (m, large) NH-C(≈NH) -NH ₂

EXEMPLE 23 : Acide 5- ((8- ( ( (amino)iminométhyl)hydrazono) -2,2- diphényl-6,7,8,9,10,11-hexahydro-azuleno(4,5-e) -1,3-benzo- dioxol-4-yl)oxy) -pentanoique

On opère comme à l'exemple précédent, à partir de 374 mg du produit obtenu au stade A de 1'exemple précédent et 0,19 ml de diphényldichlorométhane. On obtient 198 mg de produit attendu. Rf (dichlorométhane/méthanol/ammoniaque 80/20/4)= 0,17

EXEMPLE 24 : O- [4- [(4,5-dihydro-lH-imidazol-2-yl)hydrazono) - 9,10-diméthoxy-1,2,3,4,5,6-hexahydro-8-benz(e)azulènyl] -N- [(phénylméthoxy)carbonyl] -DL-homoserine. Stade A : Ester methylique de la 0- [ (4-oxo) -9,10-diméthoxy- 1,2,3,4,5,6-hexahydro-8-benz(e) zulènyl] -N- [(phénylméthoxy) - carbonyl] -DL-homoserine.

On agite 1 nuit à température ambiante 0,6 g de 2,3,5,6- tétrahydro-8-hydroxy-9,10-diméthoxy-benz[e]azulen-4 (IH) -one

(préparation 3) , 10 ml de diméthylformamide, 10 ml de tétrahydrofuranne, 1 g de carbonate de potassium et 0,867 g d'ester methylique de l'acide (DL) -4-bromo-2- (phénylméthoxy- carbonylamino) butanoique préparé comme à la préparation 8. Après evaporation sous pression réduite le produit brut est chromatographie sur silice en éluant avec un mélange chlorure de méthylène (CH C1 ₂ )/acétone 95/5. On obtient ainsi 1,166 g de produit purifié sous la forme d'une huile jaune. IR (CHC1 ₃ ) C=0 1740 cm ^"1 (ép.), 1721 cm ^"1 cétone conj . 1642 cm ^"1

C=C aromatiques 1593 cm ^"1 , 1559 cm ^"1 , 1508 cm ^"1 , 1493 cm ^"1 Stade B : Ester methylique de la O- [4- [ (4,5-dihydro-lH- imidazol-2-yl) ydrazono) -9,10-diméthoxy-1,2,3,4,5,6- hexahydro-8-benz(e)azulènyl] -N- [ (phénylméthoxy)carbonyl] -DL- homoserine.

On agite 24 heures à 120°C, 539 mg du produit du stade A précédent, 15 ml de butanol et 600 mg de bromhydrate d'amino guanidine cyclique suivant : le (4,5-dihydro-lH-imidazol-2- yl) -hydrazine, évapore le solvant sous pression réduite, et purifie le produit brut par chromatographie sur silice en éluant avec un mélange CH ₂ Cl ₂ /méthanol (MeOH) /ammoniaque 80/20/4. On obtient ainsi 0,641 g de produit attendu. IR (CHCI ₃ ) ≈C-NH- 3451 cm ^"1 + associés

C≈O 1740 cm ^"1 (ép.), 1720 cm ^"1 (max)

C≈N + C=C + aromatiques + amide II :1667 cm ^"1 (F),

1606 cm ^"1 , 1508 cm ^"1 , 1490 cm ^"1 .

Stade C : O- [4- [ (4,5-dihydro-lH-imidazol-2-yl)hydrazono) - 9,10-diméthoxy-1,2,3,4,5,6-hexahydro-8-benz(e)azulènyl] -N- [ (phénylméthoxy)carbonyl] -DL-homoserine.

On agite pendant 2 heures à température ambiante la solution renfermant 0,6 g du produit obtenu au stade précé¬ dent, 10 ml d'éthanol et 2 ml de soude 2N, puis on neutralise avec 2 ml d'acide chlorhydrique. Après evaporation sous pression réduite, on purifie le produit brut par chromatographie sur silice en éluant avec un mélange CH ₂ C1 ₂ /méthanol (MeOH) /ammoniaque 80/20/4. On obtient ainsi

0,349 g de produit purifié recristallisé dans le méthanol. Rf CH ₂ C1 ₂ /méthanol (MeOH) /ammoniaque 80/20/4 : 0,37 EXEMPLE 25 : O- [4- [(4,5-dihydro-lH-imidazol-2-yl) ydrazono) - 1,2,3,4,5,6-hexahydro-8-benz(e)azulènyl] -N- [ (phénylméthoxy) - carbonyl] -DL-homoserine.

On opère de manière équivalente à l'exemple 24 mais à partir de 0,428 g de 2,3,5,6-tétrahydro-9-hydroxy-benz[e]azu- len-4(IH) -one (Préparation 7). On obtient 245 mg de produit attendu. Rf CH ₂ Cl ₂ /méthanol (MeOH)/ammoniaque 80/20/4 : 0,5

EXEMPLE 26 : O- [4- [(1,2,3,4-tétrahydro 6-pyrimidinyl) hydra¬ zono] 9,10-diméthoxy 1,2,3,4,5,6-hexahydro 8-benz[e]azulènyl] N- t(phénylméthoxy) carbonyl] DL-homoserine. Stade A : monobromhydrate de l'ester methylique de 0-[9,10- diméthoxy 1,2,3,4,5,6-hexahydro 4- [ (1,4,5,6-tétrahydro 2- pyrimidinyl) hydrazono] 8-benz(e)azulènyl] N- [ (phénylméthoxy) carbonyl] DL-homoserine.

On opère comme à l'exemple 24 stade B en utilisant au départ 200 mg du produit obtenu comme à l'exemple 24 stade A dans 2 ml de butanol et 74,5 mg du monobromhydrate de l'hydra- zone de tétrahydro-2 (IH) -pyrimidinone et chauffe au reflux pendant 16 heures. On laisse revenir à température ambiante, extrait au dichlorométhane, sèche, évapore le solvant sous pression réduite et obtient 152 mg de produit atendu. Stade B : O- [4- [ (1,2,3,4-tétrahydro 6-pyrimidinyl) hydrazono] 9,10-diméthoxy 1,2,3,4,5,6-hexahydro 8-benz[e]azulènyl] N- [ (phénylméthoxy) carbonyl] DL-homoserine.

On opère comme à l'exemple 24 stade C en utilisant 131 mg de produit obtenu au stade A ci-dessus en solution dans 1,3 ml d'éthanol et 0,43 ml de soude N. On neutralise par addition d'acide chlorhydrique N, évapore le solvant, filtre, sèche 78 mg de produit attendu. F = 172°C. Spectre RMN (CDC1 ₃ )

3,77 (s) 3,78 (S) (9H) les =C-OMe

4,01 (m) (IH) 4,17 -0-CH ₂

4,67 (p) =C-CH-N-C=

5,14 (Si) COO-CH ₂ -Φ 6,13 (d) =C-NH-CH

6,49 (si) H ₄

«7,36 (m) (5H) Φ-C

EXEMPLE 27 : Ester (2,3-dihydroxypropylique) de 0-(9,10- diméthoxy 1,2,3,4,5,6, -hexahydro 4- [(1,4,5,6- étrahydro 2- pyrlmidinyl) hydrazono] -8-benz(e)azulènyl] N- [(phénylméthoxy) carbonyl] DL-homoserine.

Stade A :Ester [ (2,2-diméthyl 1,3-dioxolan-4-yl) methylique] de 0- [9,10-diméthoxy 1,2,3,4,5,6-hexahydro 4- [ (1,4,5,6-tetra- hydro-2-pyrimidinyl) hydrazono] 8-benz(e)azulènyl] N- [(phénylméthoxy) carbonyl] DL-homoserine.

On refroidit à 0°C 0,3 g de produit préparé comme à l'exemple 26 dans l ml de diméthylformamide et l ml de dichlorométhane, 96 mg de 1- (3-diméthylaminopropyl) 3-éthyl- carbodiimide chlorhydrate et 68 mg de 1-hydroxy benzotriazole hydrate. On agite 30 minutes à température ambiante, intro¬ duit 0,06 ml de solketal et poursuit l'agitation pendant 3 heures et demie. On dilue le milieu réactionnel par de l'eau, extrait au dichlorométhane et récupère 0,6 g de produit brut que l'on purifie par chromatographie sur silice (éluant : CHCl ₂ -MeOH 90-10). On obtient 0,352 g de produit attendu. Spectre IR (CHC1 ₃ )

NH 3400 cm ^"1

C=0 1745 (ep) , 1719 cm ^"1

C=N, C=C } aromatique, amide II } 1672 (F), 1645,1597, 1565 (f) ,

1507, 1492 cm ^"1 Stade B : Ester (2,3-dihydroxypropylique) de 0- (9,10-dimé- thoxy 1,2,3,4,5,6, -hexahydro 4- t(1,4,5,6-tétrahydro 2-pyrimi- dinyl) hydrazono] -8-benz(e)azulènyl] N- [ (phénylméthoxy) carbonyl] DL-homoserine.

On agite 6 heures à température ambiante 0,320 g de produit obtenu au stade A dans 3 ml d'éthanol et 1 ml d'acide chlorhydrique 2N. Après evaporation des solvants et chromato-

graphie sur silice (éluant : CH ₂ Cl ₂ -MeOH-NH ₄ OH 80-20-4) , on obtient 0,112 g de produit attendu. Spectre RMN (CDC1 ₃ )

2t CH ₂ en 9

EXEMPLE 28 s O- [4- [(4,5-dihydro lH-imidazol-2-yl) hydrazono] 9,10-diméthoxy 1,2,3, ,5,6-hexahydro 8-benz(e)azulènyl] N- [(8-quinoléinyl) sulfonyl] DL-homoserine.

Stade A : Ester methylique de O- (9,10-diméthoxy 1,2,3,4,5,6- hexahydro 4-oxo 8-benz(e)azulènyl) N- [ (1,1-diméthyléthoxy) carbonyl] DL-homoserine.

On agite à température ambiante pendant 65 heures, 4,1 g de produit préparé comme à la préparation 3 et 5 g de l'ester préparé comme à la préparation 9 dans 50 ml de diméthyl¬ formamide et 50 ml de tétrahydrofuranne en présence de 5 g de carbonate de potasium et de diméthylaminopyridine. On évapore le solvant sous pression réduite, purifie le résidu par chromatographie sur silice (éluant : CH ₂ C1 ₂ -acétone 95-5) et récupère 7,3 g de produit attendu.

Spectre IR (CHC1 ₃ )

=C-NH 3430 cm ^"1 _{=0 1744 cm} -l (ester methylique) ¹⁷¹ ° ^cm -l (NH-BOC)

1648 cm ^"1 (cétone conjuguée) aromatique + amide II 1593, 1559, 1493 cm ^"1 Stade B : Monochlorhydrate de l'ester methylique de O-(9,10-

diméthoxy 1,2,3,4,5,6-hexahydro 4-oxo 8-benz(e)azulènyl) DL- homoserine.

On ajoute à 3 reprises 10 ml d'acide chlorhydrique dans l'acétate d'éthyle à 6 g de produit préparé au stade A dans 10 ml d'acétate d'éthyle puis agite 16 heures à température ambiante. On évapore le solvant sous pression réduite et obtient 0,656 g de produit attendu que l'on utilise tel quel au stade suivant. Stade C : O- (9,10-diméthoxy 1,2,3,4,5,6-hexahydro 4-oxo 8- benz(e)azulènyl) N- [ (8-quinoléinyl) sulfonyl] DL-homoserine. On reprend 0,656 g du produit obtenu ci-dessus dans 5 ml de dichlorométhane, ajoute 1 ml de triéthylamine et 0,638 g de 8-chlorosulfonyl quinoléine et agite 2 heures à tempéra¬ ture ambiante. Après evaporation des solvants sous pression réduite et chromatographie sur silice (éluant : CHCl ₂ -MeOH 95-5), on récupère 0,956 g de produit attendu. Stade D : ester methylique de O- [4- t (4,5-dihydro lH-imidazol- 2-yl) hydrazono] 9,10-diméthoxy 1,2,3,4,5,6-hexahydro 8- benz (e)azulènyl] N- [ (8-quinoléinyl) sulfonyl] DL-homoserine. On agite 16 heures à 120°C, 0,9 g du produit du stade A précédent, 5 ml de butanol et 0,6 g de bromhydrate d'amino- guanidine cyclique suivant : le (4,5-dihydro lH-imidazol-2- yl) hydrazine, évapore le solvant sous pression réduite et obtient 0,786 g de produit attendu utilisé tel quel pour le stade suivant.

Stade E : O- [4- [ (4,5-dihydro lH-imidazol-2-yl) hydrazono] 9,10-diméthoxy 1,2,3,4,5,6-hexahydro 8-benz(e)azulènyl] N- [ (8-quinoléinyl) sulfonyl] DL-homoserine.

On agite pendant 2 heures à température ambiante la solution renfermant 0,786 g du produit obtenu au stade pré¬ cédent, 5 ml de méthanol et 2 ml de soude 2N, puis on neutra¬ lise avec 2 ml d'acide chlorhydrique 2N et agite pendant 10 minutes. Après evaporation sous pression réduite, on purifie le produit brut par chromatographie sur silice en éluant avec un mélange CH ₂ C1 ₂ -méthanol-ammoniaque 80-20-4. On obtient 0,438 g de produit attendu après recristallisation dans le méthanol. Rf = 0,40 (CHCl ₂ -MeOH-NH ₄ OH 80-20-4).

EXEMPLE 29 : Monochlorhydrate de O- [4- [(4,5-dihydro lH-imida- zol-2-yl) hydrazono] 9,10-diméthoxy 1,2,3,4,5,6-hexahydro 8- benz(e) zulènyl] N- [[3- [4- (3-pyridinyl) lH-imidazol-1-yl] propoxy] carbonyl] DL-homoserine. Stade A : 4- [[9,10-diméthoxy 1,2,3,4,5,6-hexahydro 4-oxo 8- benz(e)azylényl] oxy] 2-isocyanato butanoate de méthyle.

On agite 10 minutes à 0°C 450 mg de l'aminé obtenue au stade B de l'exemple 28 dans 10,2 ml d'une solution aqueuse saturée en bicarbonate de sodium et 10,2 ml de dichloromé- thane. On ajoute dans la phase organique du milieu réactionnel 204 mg de triphosgene en solution dans 2 ml de dichloromethane, agite 10 minutes, extrait au dichloro¬ methane, sèche, évapore le solvant sous pression réduite et obtient 430 mg de produit attendu que l'on utilise tel quel au stade suivant.

Stade B : 0- [9,10-diméthoxy 1,2,3,4,5,6-hexahydro 4-oxo 8- benz(e)azulènyl] N- [ [3- [4- (3-pyridinyl) lH-imidazol-1-yl] propoxy] carbonyl] DL-homoserine.

On refroidit à 0°C 430 mg du produit obtenu au stade A dans 20 ml de dichloromethane et ajoute 414 mg de l'alcool préparé comme à la préparation 10 dans 10 ml de dichloro¬ methane. On laisse revenir à température ambiante, maintient sous agitation pendant 48 heures, évapore le solvant sous

pression réduite, chromatographie le résidu sur alumine (éluant : CH ₂ Cl ₂ -MeOH) et récupère 298 mg de produit attendu. Stade C : monobromhydrate de 0- [4 [ (4,5-dihydro lH-imidazol-2- yl) hydrazono] 9,10-diméthoxy 1,2,3,4,5,6-hexahydro 8-benz- (e)azulényl] N- [ [3- [4- (3-pyridinyl) lH-imidazol-1-yl] propoxy] carbonyl] DL-homoserine.

On opère comme à l'exemple 24 stade B en utilisant au départ 277 mg du produit obtenu au stade B ci-dessus et 164 mg du bromhydrate d'aminoguanidine cyclique dans 13 ml de butanol. Après chromatographie sur alumine (éluant : CH ₂ C1 ₂ - MeOH 95-5) , on obtient 289 mg de produit attendu. Spectre IR (CHC1 ₃ )

C=0 1746 (ep) 1723 (max) cm ^"1 syst. conjugué } + aromatique } 1668, 1625(F) ,1599 (ep) ,1551,1509,1489 cm ^"1 + amide II } OH 3618 cm ^"1

Stade D : Monochlorhydrate de O- [4- [ (4,5-dihydro lH-imidazol- 2-yl) hydrazono] 9,10-diméthoxy 1,2,3,4,5,6-hexahydro 8- benz(e)azulènyl] N- [ [3- [4- (3-pyridinyl) lH-imidazol-1-yl] propoxy] carbonyl] DL-homoserine.

On ajoute 0,3 ml de soude N à 277 mg de produit obtenu au stade C ci-dessus dans 10 ml d'éthanol, agite 30 minutes, ajoute 10 ml d'eau, acidifie le milieu réactionnel jusqu'à pH = 2,5 à l'aide d'acide chlorhydrique N, évapore les sol¬ vants sous pression réduite, chromatographie le résidu sur silice (éluant : CH ₂ Cl ₂ -MeOH-NH ₄ OH 40-10-2) , évapore le filtrat sous pression réduite, reprend le résidu dans l'éther isopropylique, filtre le précipité, le sèche et recueille 126 mg de produit attendu. Spectre RMN (DMSO)

7 , 20 (d, large ) CO-NH- CH-

7 , 35 (dd) H' ₅

8 , 04 (d) H' ₄

8 , 37 (dl ) H' ₆ 8 , 94 ( si ) H' ₂

7,72 (s), 7,80 (s) CH≈imidazole.

EXEMPLE 30 : Acide 5- [[4- [(4,5-dihydro 4-oxo lH-imidazol-2- yl) hydrazono] 9,10-diméthoxy 1,2,3,4,5,6-hexahydro 8- benz(e)azulènyl] oxy] pentanoique. On mélange à température ambiante 300 mg du produit préparé au stade A de l'exemple 3 dans 6 ml d'éthanol avec

61 mg de bicarbonate de soude et 0,7 ml de bromoacétate d'éthyle. On évapore les solvants, chromatographie le résidu sur silice (éluant : CH ₂ Cl ₂ -MeOH 95-5) et obtient 139 mg de l'ester éthylique intermédiaire. On mélange pendant 2 heures à température ambiante 110 mg de cet ester dans 1 ml d'éthanol en présence de 0,5 ml de soude 2N. Après neutralisation du milieu réactionnel à l'aide d'acide chlorhydrique 2N, on filtre le précipité formé, le sèche et récupère 44 mg de produit attendu.

Spectre RMN (DMSO)

- 1,73 (m) (6H)

2,30 (t) (2H)

2,30 à 3,20 3,73 (S) , 3,75 (s)

3,83 (si)

4,02 (t)

6,76 (s)

7,20 (si) (IH) }

8,28 (si) (IH) } H mobiles 12,04 (IH) }

EXEMPLE 31 : O- [9,10-diméthoxy 1,2,3,4,5,6-hexahydro 4- [(4,5,6,7-tétrahydro lH-l,3-diazëpin-2-yl) hydrazono] 8- benz(e) -azulènyl] N- [(phénylméthoxy) carbonyl] DL-homoserine, On mélange pendant 16 heures à 130°C 1 g du composé préparé à l'exemple 24 stade A dans 5 ml de butanol et 0,9 g d'aminoguanidine cyclique préparé comme à la préparation 11.

On évapore le solvant sous pression réduite, chromatographie le résidu sur silice (éluant : CH ₂ Cl ₂ -MeOH 90-10) et obtient 0,8 g d'ester intermédiaire que l'on agite à température ambiante pendant l heure et demie dans 3 ml de méthanol avec 2 ml de soude 2N. Après neutralisation du milieu réactionnel à l'aide d'acide chlorhydrique 2N et evaporation des solvants sous pression réduite, on chromatographie le résidu sur silice (éluant : CH ₂ Cl ₂ - eOH-NH ₄ OH 90-15-2) et récupère 0,22 g de produit attendu. EXEMPLE 32 : O- [9,10-diméthoxy 1,2,3,4,5,6-hexahydro 4-

[(3a,4,5,6,7,7a-hexahydro lH-benzimidazol-2-yl) hydrazono] 8- benz(e)azulènyl] N- [(phénylméthoxy) carbonyl] DL-homoserine.

On opère comme aux stades B et C de l'exemple 24 en utilisant au départ 200 mg du composé préparé à l'exemple 24 stade A et 176 mg d'amino guanidine cyclique préparé comme à la préparation 12. On récupère 102 mg de l'ester intermédiaire dont on utilise 100 mg pour la réaction de saponification. On obtient 59 mg de produit attendu. Rf = 0,24 (CH ₂ Cl ₂ -MeOH-NH ₄ OH 85-15-3). Compositions pharmaceutiques

On a préparé des comprimés répondant à la formule suivante :

- produit de l'exemple 1 50 mg

- Excipient (talc, amidon, stéarate de magnésium) QS pour un comprimé terminé à 120 mg

Etude pharmacoloqiσue des produits de l'invention

1 - Etude par les produits de l'invention du déplacement de la liaison : Vitronectine/récepteur Vitronectine

Protocole :

Des plaques 96 puits MaxiSorp sont coatées une nuit à 4°C, avec 100 μl de Vitronectine humaine (cf Yatohgo et al. Cell., Structure and fraction 13 : 281-292 (1988)) à 2 μg/ml, (Dilution en tampon de coating) .

Le lendemain, les puits sont vidés et les ligands (Vitronectine) sont ensuite fixés (voir tampon de fixation) pendant IH à température ambiante sous agitation douce.

Les puits sont lavés six fois (voir tampon de lavage) , puis on ajoute par puits et dans cet ordre :

- 40 μl de tampon d'incubation,

- 10 μl de la dilution du produit à tester, (les produits sont dilués dans un mélange 50/50 de DMSO-H ₂ 0)

- 50 μl de récepteur humain (cf Pytela et al. Methods Enzymol (1987) 144:475) (dilution en tampon d'incubation, à adapter suivant le lot de récepteur et selon le ligand) .

Le ligand, le récepteur ct^/^ humain et les produits à étudier sont incubés pendant 3 heures à température ambiante sous agitation douce.

Les puits sont à nouveau lavés six fois, puis incubés pendant 2 heures à température ambiante sous agitation douce, en présence de 100 μl d'anticorps 4B12-HRP, anti-récepteur couplé à une peroxydase (l'anticorps 4B12-HRP est dilué en tampon d'incubation. La dilution est à adapter suivant le lot de récepteur) .

Les puits sont ensuite lavés six fois avant la mesure de liaison ligand-récepteur faite par l'intermédiaire d'un kit révélateur de peroxydase (TMB Microwell Peroxidase Substrate System Kirkegaard : Réf. cat. 50-76-00).

Ce kit contient un flacon A de substrat (3,3',5,5'- tétraméthylbenzidine à 0,4 g/1) et un flacon B (H ₂ 0 ₂ à 0,02 % en tampon Citrate/Acide citrique) . Extemporanément, un volume de A est mélangé à un volume de B, puis le mélange réaction¬ nel est distribué à raison de 100 μl/puits. La réaction enzymatique se développe en 12' pour Vitronectine/o- _y jS- _j , puis son évolution est stoppée par l'addition de 100 μl d'acide phosphorique 1M. La densité optique est mesurée à 450 nm. Tampons :

- tampon de coating : Carbonate 0,05 M, NaOH pH 9,6

- tampon de fixation : PBS contenant 0,5 % de BSA (pH 7,4)

- tampon de lavage : PBS contenant 0,05 % de Tween 20 (pH 7,4)

- tampon d'incubation : . 50 mM TRIS pH 7,4

. 0,5 % BSA

. 0,05 % Tween 20

. 1 M MnCl ₂

. 50 μM CaCl ₂

. 50 μM MgCl ₂ . 100 mM NaCl.

Expression des résultats :

On trace la courbe suivante : le pourcentage de liaison de la vitronectine humaine en fonction du logarithme de la concentration de chaque produit testé. Pour chaque produit on détermine l'IC ₅₀ suivant la formule suivante :

IC ₅₀ = (BO + Bmin)/2

BO = Maximum de liaison en l'absence de tout produit

Bmin = Minimum de liaison en présence de la concentration la plus élevée de produit.

2 - Test du calvarium de souris

Principe

Injection d'une dose traceuse de ⁴⁵ Ca (CaCl ₂ ) à des souris femelles en gestation afin d'étudier la résorption osseuse en mesurant la libération de ⁴⁵ Ca à partir des calottes crâniennes des nouveaux-nés.

Détermination de l'activité d'une molécule sur la résorption osseuse, étude ex-vivo. Produits

1) Produit à tester : Véhicule : DMSO, H20/BSA (0,1 %)

Dose : Variables (10 μM en screening) .

2) Produits de référence : Echistatine (réf. H-9010-BACHEM) Véhicule : H20/BSA Dose : 10 μM.

3) Traceur radioactif : ⁵ Ca sous forme de solution aqueuse de CaCl ₂ -réf. CES3 AMERSHAM ou NEZ-013 NEN.

Véhicule : Sérum physiologique Dose : 25 μCi/souris/0,4 ml Milieu de culture

CMRL 1066 avec rouge de phénol (réf. 041-01535 M/GIBCO) supplémenté par 0,1 % BSA et de la pénicilline/streptomycine. Méthode

1) Injection de ⁴⁵ Ca aux souris gestantes (OF1, souche : Swiss) a) Préparation de la solution marquée :

190 μl de la solution mère de calcium à 2 mci/ml est ajoutée à 6 ml de sérum physiologique. b) Injection : Au 17ème jour de gestation les souris reçoivent 400 μl de cette solution par voie intraveineuse soit 25 μCi/souris.

2) Prélèvement du tissu (calotte crânienne (calvarium) )

Six jours après leur naissance les nouveaux-nés sont décapités, puis la tête est récupérée, et la peau incisée de la nuque au front. La calotte crânienne est prélevée par découpage aux ciseaux et à l'aide d'un emporte-pièce, deux demi-calvaria exactement identiques (un à gauche et un à droite) sont sectionnés dans les os pariétaux. L'un servira de témoin, l'autre sera utilisé pour tester le produit à étu- dier.

3) Phase de "rinçage"

Chaque demi calvarium est déposé dans un puits d'une plaque 24 puits, contenant l ml de milieu, sur un support de polyethylene et nylex 100 μm, afin d'éviter tout contact avec le fond du puits.

Après 24 heures, les supports polyethylene portant les calva¬ ria sont transférés dans des nouvelles plaques 24 puits contenant 1 ml de milieu frais et les produits à tester ou leurs solvants. 200 μl de milieu des premières plaques sont prélevés dans chaque puits et un premier comptage de la radioactivité est effectué (valeur A) .

Ce changement de milieu permet d'éliminer tout le stress mécanique lié au prélèvement.

4) Phase de "résorption" 48 heures après la mise en contact des tissus avec les produits étudiés, 200 μl de milieu sont prélevés dans chaque puits et comptés (valeur B) , de façon à déterminer la quan¬ tité de ⁴⁵ Ca libérée dans le milieu pendant la phase dite de

résorption.

Le calvarium est alors totalement déminéralisé dans 1 ml d'acide trichloracetique 5 % et après digestion, 200 μl sont également prélevés et comptés de façon à déterminer la quan- tité de calcium restant dans l'os (valeur C) . Expression des résultats

On calcul un % de résorption osseuse pour chaque demi- calvariu (chaque puits) de la façon suivante :

% résorption osseuse = dpm B/dpm (A+B+C) x 100

La somme des dpm A+B+C représente la quantité de ⁴⁵ Ca incorporé dans chaque pièce osseuse le jour du prélèvement.

Pour mesurer l'effet d'un produit on fait pour chaque point le rapport du pourcentage de résorption osseuse du puits traité et du puits témoin correspondant. La valeur trouvée appelée indice de résorption est comprise entre 0 et 1 si le produit inhibe la résorption osseuse et est >1 si le produit la potentialise. On fait alors la moyenne des 6 indices (puisqu'il y a 6 points/groupe) de chaque produit ce qui donne un indice/produit. Si on retranche cet indice de la valeur 1, on obtient le pouvoir d'inhibition du produit, que 1'on peut exprimer en pourcentage.

Par ailleurs un test statistique (Student T-test) est effectué en comparant point/point les indices de résorption individuels.

RESULTATS :