Die Erfindung betrifft Verbindungen der Formel

worin

Alkylen mit 1-6 C-Atomen oder 1 ,4-Piperidyl,

Y fehlt, O, CONH oder -C≡≡C- ,

R ¹ H, CN, N ₃ , NH ₂ , H ₂ N-C(=NH), H ₂ N-(C=NH)-NH, wobei die primären Aminogruppen auch mit konventionellen Amino- schutzgruppen versehen sein können,

R ² , R ³ jeweils unabhängig voneinander H, A, A-SO ₂ -, Ar-SO ₂ - , Campher-10-SO ₂ -, COOA oder eine konventionelle Amino- schutzgruppe,

A, R jeweils unabhängig voneinander H, Alkyl mit 1-10 C-Atomen oder Benzyl,

und

Ar unsubstituiertes oder einfach durch CH ₃ substituiertes Phenyl oder Benzyl,

bedeuten,

sowie deren physiologisch unbedenklichen Salze.

Ähnliche Verbindungen sind z. B. aus EP 0 478 363 und EP 0 478 328 bekannt.

Der Erfindung lag die Aufgabe zugrunde, neue Verbindungen mit wertvol- len Eigenschaften aufzufinden, insbesondere solche, die zur Herstellung von Arzneimitteln verwendet werden können.

Es wurde gefunden, daß die Verbindungen der Formel I und ihre Salze bei guter Verträglichkeit sehr wertvolle pharmakologische Eigenschaften be- sitzen. Vor allem wirken sie als Integrin-Inhibitoren, wobei sie insbe¬ sondere die Wechselwirkungen der α _v -lntegrin-Rezeptoren mit Liganden hemmen. Besondere Wirksamkeit zeigen die Verbindungen im Fall der Integrine α _v ß3 und α _v ßs. Ganz besonders wirksam sind die Verbindungen als Adhäsionsrezeptor-Antagonisten für den Vitronectin-Rezeptor α _v ß3 . Diese Wirkung kann z.B. nach der Methode nachgewiesen werden, die von J.W. Smith et al. in J. Biol. Chem. 265, 11008-11013 und 12267- 12271 (1990) beschrieben wird.

Die Inhibierung der Vitronectin-Bindung an Rezeptoren wurde für einige repräsentative Verbindungen der Formel I experimentell bewiesen. Die pharmakologischen Testdaten sind in Tabelle I zusammengefaßt.

B. Felding-Habermann und D.A. Cheresh beschreiben in Curr. Opin. Cell. Biol. 5, 864 (1993) die Bedeutungen der Integrine als Adhäsionsrezep¬ toren für die unterschiedlichsten Phänomene und Krankheitsbilder, speziell in Bezug auf den Vitronectinrezeptor α _v ß3.

Die Abhängigkeit der Entstehung von Angiogenese von der Wechsel¬ wirkung zwischen vaskutären Integrinen und extrazellulären Matrix¬ proteinen ist von P.C. Brooks, R.A. Clark und D.A. Cheresh in Science 264, 569-71 (1994) beschrieben.

Die Möglichkeit der Inhibierung dieser Wechselwirkung und damit zum Einleiten von Apoptose (programmierter Zelltod) angiogener vaskulärer Zellen durch ein cyclisches Peptid ist von P.C. Brooks, A.M. Montgomery, M. Rosenfeld, R.A. Reisfeld, T.-Hu, G. Klier und D.A. Cheresh in Cell 79,

1157-64 (1994) beschrieben.

Der experimentelle Nachweis, daß auch die erfindungsgemäßen Verbin¬ dungen die Anheftung von lebenden Zellen auf den entsprechenden Matrixproteinen verhindern und dementsprechend auch die Anheftung von Tumorzellen an Matrixproteine verhindern, wurde in einem Zelladhäsions- test erbracht, der analog der Methode von F. Mitjans et al., J. Cell Science 108, 2825-2838 (1995) durchgeführt wurde. Die pharmakologischen Daten sind in Tabelle II aufgeführt.

p.c. Brooks et al. beschreiben in J. Clin. Invest. 96, 1815-1822 (1995) σ. _v ß3 -Antagonisten zur Krebsbekämpfung und zur Behandlung tumor- iπduzierter angiogener Krankheiten.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen der Formel I können daher als Arzneimittelwirkstoffe insbesondere zur Behandlung von Tumorerkran- kungen, Osteoporosen, osteolytischen Erkrankungen sowie zur Unter¬ drückung der Angiogenese eingesetzt werden.

Gegenstand der Erfindung sind demgemäß Verbindungen der Formel I nach Anspruch 1 und/oder ihrer physiologisch unbedenklichen Salze zur Herstellung eines Arzneimittels zur Verwendung als αv-lntegrin-lnhibitor.

Die Verbindungen der Formel I können als Arzneimittelwirkstoffe in der Human- und Veterinärmedizin eingesetzt werden, zur Prophylaxe und/oder Therapie von Thrombose, myocardialem Infarkt, Arteriosklerose, Entzünd- ungen, Apoplexie, Angina pectoris, Tumorerkrankungen, osteolytischen

Krankheiten wie Osteoporose, pathologisch angiogenen Krankheiten wie z. B. Entzündungen, ophthalmologischen Krankheiten, diabetischer Retinopathie, makularer Degeneration, Myopia, okularer Histoplasmose, rheumatischer Arthritis, Osteoarthritis, rubeotischem Glaukom, ulcerativer Colitis, Morbus Crohn, Atherosklerose, Psoriasis, Restenose nach Angio- plastie, viraler Infektion, bakterieller Infektion, Pilzinfektion, bei akutem Nierenversagen und bei der Wundheilung zur Unterstützung der Heilungs¬ prozesse.

Die Verbindungen der Formel I können als antimikrobiell wirkende Substanzen bei Operationen eingesetzt werden, wo Biomaterialien, Implantate, Katheter oder Herzschrittmacher verwendet werden. Dabei wirken sie antiseptisch. Die Wirksamkeit der antimikrobiellen Aktivität kann durch das von P.Valentin-Weigund et al., in Infection and

Immunity, 2851 -2855 (1988) beschriebene Verfahren nachgewiesen werden.

Gegenstand der Erfindung ist ferner ein Verfahren zur Herstellung von Verbindungen der Formel I gemäß Anspruch 1 dadurch gekennzeichnet,

a) daß man zur Herstellung von Verbindungen der Formel I, worin

R ¹ N ₃ , R ² H,

R ³ A-SO ₂ - oder Ar-SO ₂ - ,

X Alkylen mit 1-6 C-Atomen,

Y fehlt, O oder -C≡C- und R ⁴ Alkyl mit 1-10 C-Atomen oder Benzyl bedeutet,

eine Verbindung, die an sich der Formel I entspricht, worin jedoch

R ¹ N ₃ ,

R ² H,

X Alkylen mit 1-6 C-Atomen,

Y fehlt, O oder -C≡C- ,

R ³ eine konventionelle Aminoschutzgruppe und R ⁴ Alkyl mit 1-10 C-Atomen oder Benzyl bedeutet,

zuerst mit einem solvolysierenden Mittel behandelt und danach mit einer Verbindung der Formel II

R -L

worin

R ³ A-SO ₂ - oder Ar-SO ₂ - und

L Cl, Br, I, OH oder eine reaktionsfähig veresterte OH-

Gruppe bedeutet,

umsetzt, oder

b) daß man einen Ester der Formel I verseift, oder

c) daß man einen Rest R ¹ und/oder R ² in einen anderen Rest R ¹ und/oder R ² umwandelt, indem man

i) eine Azidogruppe durch Reduktion in eine Aminogruppe umwandelt,

ii) eine Cyangruppe in eine Amidinogruppe umwandelt,

iii) eine Aminogruppe durch Umsetzung mit einem amidinierenden Mittel in eine Guanidinogruppe umwandelt,

iv) eine konventionelle Aminoschutzgruppe durch Behandeln mit einem solvolysierenden oder hydrogenolysierenden Mittel durch Wasserstoff ersetzt oder eine durch eine konventionelle Schutzgruppe geschützte

Aminogruppe in Freiheit setzt,

v) eine Amidinogruppe aus ihrem Oxadiazolderivat durch Hydrogenolyse freisetzt,

und/oder

d) daß man eine basische oder saure Verbindung der Formel I durch Behandeln mit einer Säure oder Base in eines ihrer Salze überführt.

Die Verbindungen der Formel I besitzen mindestens ein chirales Zentrum und können daher in mehreren stereoisomeren Formen auftreten. Alle diese Formen (z. B. D- und L-Formen) und deren Gemische (z. B. die DL- Formen) sind in der Formel I eingeschlossen.

Die vor- und nachstehend aufgeführten Abkürzungen stehen für:

Ac Acetyl

BOC tert.-Butoxycarbonyl

CBZ oder Z Benzyloxycarbonyl

DCCI Dicyclohexylcarbodiimid

DMF Dimethylformamid

EDCI N-Ethyl-N, N'-(dimethylaminopropyl)-carbodiimid

Et Ethyl

Fmoc 9-Fluorenylmethoxycarbonyl

HOBt 1 -Hydroxybenzotriazol

Me Methyl

Mtr 4-Methoxy-2,3,6-trimethylphenyl-sulfonyl

HONSu N-Hydroxysuccinimid

OBut tert.-Butylester

Oct Octanoyl

OMe Methylester

OEt Ethylester

POA Phenoxyacetyl

TFA Trifluoressigsäure

Trt Trityl (Triphenylmethyl).

In den vorstehenden Formeln steht Alkyl vorzugsweise für Methyl, Ethyl, Propyl, Isopropyl, Butyl, Isobutyl, sek.-Butyl oder tert.-Butyl, ferner auch für Pentyl, 1-, 2- oder 3-Methylbutyl, 1,1- , 1,2- oder 2,2-Dimethylpropyl, 1 - Ethylpropyl, Hexyl, 1- , 2- , 3- oder 4-Methylpentyl, 1 ,1- , 1 ,2- , 1 ,3- , 2,2- , 2,3- oder 3,3-Dimethylbutyl, 1- oder 2-Ethylbutyl, 1-Ethyl-1-methylpropyl, 1-Ethyl-2-methytρropyl, 1,1 ,2-, 1 ,2,2-Trimethylproρyl, Heptyl, Octyl, Nonyl oder Decyl, ferner auch für den 3-Menthylrest.

Alkylen bedeutet bevorzugt Methylen, Ethylen, Propylen, Butylen, Pentylen, ferner auch Hexylen.

Aryl ist unsubstituiertes, vorzugsweise - wie angegeben - monosubsti- tuiertes Phenyl, im einzelnen bevorzugt Phenyl, o-, m- oder p-Methyl¬ phenyl oder Benzyl.

Aminoschutzgruppe bedeutet vorzugsweise Acetyl, Propionyl, Butyryl, Phenylacetyl, Benzoyl, Toluyl, POA, Methoxycarbonyl, Ethoxycarbonyl, 2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl, BOC, 2-lodethoxycarbonyl, CBZ ("Carbo- benzoxy"), 4-Methoxybenzyloxycarbonyl, FMOC, Mtr oder Benzyl.

Dementsprechend sind Gegenstand der Erfindung insbesondere diejeni¬ gen Verbindungen der Forme! I, in denen mindestens einer der genannten Reste eine der vorstehend angegebenen bevorzugten Bedeutungen hat. Einige bevorzugte Gruppen von Verbindungen können durch die folgen¬ den Teilformeln la bis le ausgedrückt werden, die der Formel I ent¬ sprechen und worin die nicht näher bezeichneten Reste die bei der Formel I angegebene Bedeutung haben, worin jedoch

in a) R ¹ NH ₂ ,

X Alkylen mit 1-6 C-Atomen,

Y O,

R ² H,

R ³ A-SO ₂ - und

R ⁴ H bedeuten;

in b) R ¹ H ₂ N-C(=NH) ,

X Alkylen mit 1-6 C-Atomen,

Y O,

R ² H,

R ³ A-SO ₂ - und

R ⁴ H bedeuten;

in c) R ¹ H ₂ N-(C=NH)-NH ,

X Alkylen mit 1-6 C-Atomen,

Y 0,

R ² H,

R ³ A-SO ₂ - und

R ⁴ H bedeuten;

in d) X Alkylen mit 1-6 C-Atomen,

Y fehlt,

R ² , R ⁴ H und

R ³ COOA bedeuten;

in e) R ¹ H ₂ N-(C=NH)-NH,

X Alkylen mit 1-6 C-Atomen,

Y CONH,

R ² , R ⁴ H und

R ³ A-SO ₂ - bedeuten;

Die Verbindungen der Formel I und auch die Ausgangsstoffe zu ihrer Her¬ stellung werden im übrigen nach an sich bekannten Methoden hergestellt, wie sie in der Literatur (z.B. in den Standardwerken wie Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie, Georg-Thieme-Verlag, Stuttgart;) beschrieben sind, und zwar unter Reaktionsbedingungen, die für die ge¬ nannten Umsetzungen bekannt und geeignet sind. Dabei kann man auch von an sich bekannten, hier nicht näher erwähnten Varianten Gebrauch machen.

Die Ausgangsstoffe können, falls erwünscht, auch in situ gebildet werden, so daß man sie aus dem Reaktionsgemisch nicht isoliert, sondern sofort weiter zu den Verbindungen der Formel I umsetzt.

Verbindungen der Formel I, worin

R ¹ N ₃ ,

R ² H,

R ³ A-SO ₂ - oder Ar-SO ₂ - ,

X Alkylen mit 1 -6 C-Atomen

Y fehlt, O oder -C≡C- , und

R ⁴ Alkyl mit 1-10 C-Atomen oder Benzyl bedeutet, können vorzugsweise erhalten werden, indem man Verbindungen der

Formel I

woπn

R ³ eine konventionelle Aminoschutzgruppe,

R ⁴ Alkyl mit 1-10 C-Atomen oder Benzyl,

X Alkylen mit 1-6 C-Atomen,

Y fehlt, O oder -C≡C- bedeutet,

zuerst mit einem solvolysierenden Mittel, insbesondere einem hydrolysierenden oder hydrogenolysierenden Mittel, behandelt und danach mit einer Verbindung der Formel II umsetzt.

Der Ausdruck "Aminoschutzgruppe" ist allgemein bekannt und bezieht sich auf Gruppen, die geeignet sind, eine Aminogruppe vor chemischen Um¬ setzungen zu schützen (zu blockieren), die aber leicht entfernbar sind, nachdem die gewünschte chemische Reaktion an anderen Stellen des Moleküls durchgeführt worden ist. Typisch für solche Gruppen sind ins- besondere unsubstituierte oder substituierte Acyl-, Aryl-, Aralkoxymethyl- oder Aralkylgruppen. Da die Aminoschutzgruppen nach der gewünschten Reaktion (oder Reaktionsfolge) entfernt werden, ist ihre Art und Größe im übrigen nicht kritisch; bevorzugt werden jedoch solche mit 1-20, insbe¬ sondere 1 -8 C-Atomen. Der Ausdruck "Acylgruppe" ist im Zusammenhang mit dem vorliegenden Verfahren in weitestem Sinne aufzufassen. Er um¬ schließt von aliphatischen, araliphatischen, aromatischen oder hetero¬ cyclischen Carbonsäuren oder Sulfonsäuren abgeleitete Acylgruppen sowie insbesondere Alkoxycarbonyl-, Aryloxycarbonyl- und vor allem Aralkoxycarbonylgruppen. Beispiele für derartige Acylgruppen sind Alkanoyl wie Acetyl, Propionyl, Butyryl; Aralkanoyl wie Phenylacetyl; Aroyl wie Benzoyl oder Toluyl; Aryloxyalkanoyl wie POA; Alkoxycarbonyl wie

Methoxycarbonyl, Ethoxycarbonyl, 2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl, BOC, 2- lodethoxycarbonyl; Aralkyloxycarbonyl wie CBZ ("Carbobenzoxy"), 4- Methoxybenzyloxycarbonyl, FMOC; Arylsulfonyl wie Mtr. Bevorzugte Aminoschutzgruppen sind BOC und Mtr, ferner CBZ, Fmoc, Benzyl und Acetyl.

Die Abspaltung der Aminoschutzgruppe gelingt - je nach der benutzten Schutzgruppe - z. B. mit starken Säuren, zweckmäßig mit TFA oder Per¬ chlorsäure, aber auch mit anderen starken anorganischen Säuren wie Salzsäure oder Schwefelsäure, starken organischen Carbonsäuren wie

Trichloressigsäure oder Sulfonsäuren wie Benzol- oder p-Toluolsutfon- säure. Die Anwesenheit eines zusätzlichen inerten Lösungsmittels ist möglich, aber nicht immer erforderlich. Als inerte Lösungsmittel eignen sich vorzugsweise organische, beispielsweise Carbonsäuren wie Essig- säure, Ether wie Tetrahydrofuran oder Dioxan, Amide wie DMF, haloge¬ nierte Kohlenwasserstoffe wie Dichlormethan, ferner auch Alkohole wie Methanol, Ethanol oder Isopropanol, sowie Wasser. Ferner kommen Gemische der vorgenannten Lösungsmittel in Frage. TFA wird vorzugs¬ weise im Überschuß ohne Zusatz eines weiteren Lösungsmittels verwen- det, Perchlorsäure in Form eines Gemisches aus Essigsäure und 70 %iger

Perchlorsäure im Verhältnis 9:1. Die Reaktionstemperaturen für die Spal¬ tung liegen zweckmäßig zwischen etwa 0 und etwa 50°, vorzugsweise arbeitet man zwischen 15 und 30° (Raumtemperatur).

Die Gruppen BOC, OBut und Mtr können z. B. bevorzugt mit TFA in Di¬ chlormethan oder mit etwa 3 bis 5n HCl in Dioxan bei 15-30° abgespalten werden, die FMOC-Gruppe mit einer etwa 5- bis 50 %igen Lösung von Dimethylamin, Diethylamin oder Piperidin in DMF bei 15-30°.

Hydrogenolytisch entfernbare Schutzgruppen (z. B. CBZ oder Benzyl) können z. B. durch Behandeln mit Wasserstoff in Gegenwart eines Kata¬ lysators (z. B. eines Edelmetallkatalysators wie Palladium, zweckmäßig auf einem Träger wie Kohle) abgespalten werden. Als Lösungsmittel eignen sich dabei die oben angegebenen, insbesondere z. B. Alkohole wie Methanol oder Ethanol oder Amide wie DMF. Die Hydrogenolyse wird in der Regel bei Temperaturen zwischen etwa 0 und 100° und Drucken

zwischen etwa 1 und 200 bar, bevorzugt bei 20-30° und 1-10 bar durch¬ geführt. Eine Hydrogenolyse der CBZ-Gruppe gelingt z. B. gut an 5 bis 10 %igem Pd/C in Methanol oder mit Ammomiumformiat (anstelle von Wasserstoff) an Pd/C in Methanol/DMF bei 20-30°.

Die Verbindungen der Formel II sind in der Regel bekannt. Sind sie nicht bekannt, so können sie nach an sich bekannten Methoden hergestellt werden.

Die Umsetzung der Verbindungen der Formel II erfolgt in der Regel in einem inerten Lösungsmittel, in Gegenwart eines säurebindenden Mittels vorzugsweise einer organischen Base wie Triethylamin, Dimethylanilin, Pyridin oder Chinoün. Auch der Zusatz eines Alkali- oder Erdalkalimetall-hydroxids, -carbonats oder -bicarbonats oder eines anderen Salzes einer schwachen Säure der

Alkali- oder Erdalkalimetalle, vorzugsweise des Kaliums, Natriums, Calciums oder Cäsiums kann günstig sein.

Die Reaktionszeit liegt je nach den angewendeten Bedingungen zwischen einigen Minuten und 14 Tagen, die Reaktionstemperatur zwischen etwa -30° und 140°, normalerweise zwischen -10° und 90°, insbesondere zwischen etwa 0° und etwa 70°.

Als inerte Lösungsmittel eignen sich z.B. Kohlenwasserstoffe wie Hexan, Petrolether, Benzol, Toluol oder Xylol; chlorierte Kohlenwasserstoffe wie Trichlorethylen, 1 ,2-Dichlorethan,Tetrachlorkohlenstoff, Chloroform oder

Dichlormethan; Alkohole wie Methanol, Ethanol, Isopropanol, n-Propanol, n-Butanol oder tert.-Butanol; Ether wie Diethylether, Diisopropylether, Tetrahydrofuran (THF) oder Dioxan; Glykolether wie Ethylenglykol- monomethyl- oder -monoethylether (Methylglykol oder Ethylglykol), Ethylenglykoldimethylether (Diglyme); Ketone wie Aceton oder Butanon;

Amide wie Acetamid, Dimethylacetamid oder Dimethylformamid (DMF); Nitrile wie Acetonitril; Sulfoxide wie Dimethylsulfoxid (DMSO); Schwefel¬ kohlenstoff; Carbonsäuren wie Ameisensäure oder Essigsäure; Nitrover- bindungen wie Nitromethan oder Nitrobenzol; Ester wie Ethylacetat, Wasser oder Gemische der genannten Lösungsmittel.

Weiterhin ist es möglich, einen Ester der Formel I zu verseifen. Zweckmäßig erfolgt dies durch Solvolyse oder Hydrogenolyse, wie oben angegeben, z.B. mit NaOH oder KOH in Dioxan-Wasser bei Temperaturen zwischen 0 und 60° C, vorzugsweise zwischen 10 und 40° C.

Ferner ist es möglich, daß man einen Rest R ¹ und/oder R ² in einen anderen Rest R ¹ und/oder R ² umwandelt.

Insbesondere kann man eine Azidogruppe z.B. durch Hydrogenolyse, wie oben angegeben, in eine Aminogruppe umwandeln oder eine Amino- gruppe durch Umsetzung mit einem amidinierenden Mittel, wie z.B.

Dimethylpyrazolformamidinium Nitrat, in eine Guanidinogruppe umwan¬ deln.

Die Umwandlung einer Cyangruppe in eine Amidinogruppe erfolgt durch Umsetzung mit z.B. Hydroxylamin und anschließender Reduktion des N- Hydroxyamidins mit Wasserstoff in Anwesenheit eines Katalysators wie z.B. Pd/C.

Ferner ist es möglich, eine konventionelle Aminoschutzgruppe durch Wasserstoff zu ersetzen, indem die Schutzgruppe, wie oben beschrieben, solvoiytisch oder hydrogenolytisch abgespalten wird oder daß man eine durch eine konventionelle Schutzgruppe geschützte Aminogruppe durch Solvolyse oder Hydrogenolyse in Freiheit setzt.

Eine Base der Formel I kann mit einer Säure in das zugehörige Saure¬ additionssalz übergeführt werden, beispielsweise durch Umsetzung äqui- valenter Mengen der Base und der Säure in einem inerten Lösungsmittel wie Ethanol und anschließendes Eindampfen. Für diese Umsetzung kommen insbesondere Säuren in Frage, die physiologisch unbedenkliche Salze liefern. So können anorganische Säuren verwendet werden, z.B. Schwefelsäure, Salpetersäure, Halogenwasserstoffsäuren wie Chlor- wasserstoffsäure oder Bromwasserstoffsäure, Phosphorsäuren wie Ortho- phosphorsäure, Surfaminsäure, ferner organische Säuren, insbesondere aliphatische, alicyclische, araliphatische, aromatische oder heterocyc- lische ein- oder mehrbasige Carbon-, Sulfon- oder Schwefelsäuren, z.B. Ameisensäure, Essigsäure, Propionsäure, Pivalinsäure, Diethylessig- säure, Malonsäure, Bernsteinsäure, Pimeünsäure, Fumarsaure, Malein¬ säure, Milchsäure, Weinsäure, Äpfelsäure, Citronensäure, Gluconsäure,

Ascorbinsäure, Nicotinsäure, Isonicotinsäure, Methan- oder Ethansulfon- säure, Ethandisulfonsäure, 2-Hydroxyethansulfonsäure, Benzolsulfon- säure, p-Toluolsulfonsäure, Naphthalin-mono- und Disulfonsäuren, Lauryl- schwefelsäure. Salze mit physiologisch nicht unbedenklichen Säuren, z.B. Pikrate, können zur Isolierung und /oder Aufreinigung der Verbindungen der Formel I verwendet werden.

Andererseits kann eine Säure der Formel I durch Umsetzung mit einer Base in eines ihrer physiologisch unbedenklichen Metall- oder Ammonium- salze übergeführt werden. Als Salze kommen dabei insbesondere die Natrium-, Kalium-, Magnesium-, Calcium- und Ammoniumsalze in Betracht, ferner substituierte Ammoniumsalze, z. B. die Dimethyl-, Diethyl- oder Diisopropyl-ammoniumsalze, Monoethanol-, Diethanol- oder Diiso- propylammoniumsalze, Cyclohexyl-, Dicyclohexylammoniumsalze, Di- benzylethylendiammoniumsalze, weiterhin z. B. Salze mit Arginin oder Lysin.

Die Verbindungen der Formel I enthalten ein oder mehrere chirale Zentren und können daher in racemischer oder in optisch-aktiver Form vorliegen. Erhaltene Racemate können nach an sich bekannten Methoden mecha¬ nisch oder chemisch in die Enantiomeren getrennt werden. Vorzugsweise werden aus dem racemischen Gemisch durch Umsetzung mit einem optisch aktiven Trennmittel Diastereomere gebildet. Als Trennmittel eignen sich z.B. optisch aktive Säuren, wie die D- und L-Formen von Weinsäure, Diacetylweinsäure, Dibenzoylweinsäure, Mandelsäure, Äpfelsäure, Milch¬ säure oder die verschiedenen optisch aktiven Camphersulfonsäuren wie ß-Camphersurfonsäure. Vorteilhaft ist auch eine Enantiomerentrennung mit Hilfe einer mit einem optisch aktiven Trennmittel (z.B. Dinitrobenzoyl- phenylglycin) gefüllten Säule; als Laufmittel eignet sich z.B. ein Gemisch Hexan/Isopropanol/Acetonitril, z.B. im Volumenverhältnis 82:15:3.

Natürlich ist es auch möglich, optisch aktive Verbindungen der Formel I nach den oben beschriebenen Methoden zu erhalten, indem man Aus- gangsstoffe verwendet, die bereits optisch aktiv sind.

Die Testergebnisse der α _v ß ₃ - und α _v ß ₅ -lnhibιerung durch einige repräsentative Verbindungen der Formel I sind in der nachfolgenden Tabelle I zusammengefaßt. Für die Vitronectin-Bindungstests sind die IC ₅ o- Werte angegeben, d.h. die Konzentrationen in nMol/Liter, die 50 % der Vitronectm-Bindung an den entsprechenden isolierten Rezeptor inhibieren.

Tabelle I

ICso-Werte (Konzentrationen in nMol/Liter, die 50 % der Vitronectin- Bindung an den isolierten Rezeptor inhibieren) repräsentativer Verbin¬ dungen der Formel I, die analog der Methode von Smith et al., J. Biol. Chem. 265. 12267-71 (1990) erhalten wurden, sowie die gemessenen FAB-Werte der Substanzen.

(1 ) = H ₂ N-C(=NH)-NH- ; (2) = H ₂ N-C(=NH)- ;

= Racemat ; * = 2-(R)-lsomer

Die pharmakologischen Daten beweisen die antagonistische Aktivität der erfindungsgemäßen Verbindungen der Formel I für die Vitronectin- Rezeptoren α _v ßs und α _v ßs.

Die Ergebnisse des Zelladhäsionstest für einige repräsentative Verbind¬ ungen der Formel I sind in der nachfolgenden Tabelle II zusammengefaßt. Angegeben sind die IC ₅₀ -Werte, d.h. die Konzentrationen, bei der 50 % der Bindung erreicht wird, verglichen mit der Kontrolle ohne die Substanzen.

Tabelle II

IC ₅₀ -Werte (Konzentrationen in μMol/Liter) repräsentativer Verbindungen der Formel I, die analog der Methode von F. Mitjans et al., J. Cell Science 108, 2825-2838 (1995) erhalten wurden, sowie die gemessenen FAB- Werte der Substanzen. Als Vergleichsmatrixprotein diente Vitronectin.

(1) = H ₂ N-C(=NH)-NH-

Die pharmakologischen Daten beweisen die antagonistische Aktivität der erfindungsgemäßen Verbindungen der Formel I für die Adhäsion von Tumorzellen an Gewebe.

Gegenstand der Erfindung ist ferner die Verwendung der Verbindungen der Formel I und/oder ihrer physiologisch unbedenklichen Salze zur Her¬ stellung pharmazeutischer Zubereitungen, insbesondere auf nicht-chemi¬ schem Wege. Hierbei können sie zusammen mit mindestens einem festen, flüssigen und/oder halbflüssigen Träger- oder Hirfsstoff und gegebenen¬ falls in Kombination mit einem oder mehreren weiteren Wirkstoffen in eine geeignete Dosierungsform gebracht werden.

Gegenstand der Erfindung sind ferner pharmazeutische Zubereitungen, enthaltend mindestens eine Verbindung der Formel I und/oder eines ihrer physiologisch unbedenklichen Salze.

Diese Zubereitungen können als Arzneimittel in der Human- oder Veteri¬ närmedizin verwendet werden. Als Trägerstoffe kommen organische oder anorganische Substanzen in Frage, die sich für die enterale (z.B. orale), parenterale, topische Applikation oder für eine Applikation in Form eines Inhalation-Sprays eignen und mit den neuen Verbindungen nicht reagier- en, beispielsweise Wasser, pflanzliche Öle, Benzylalkohole, Alkylengly- kole, Polyethylenglykole, Glycerintriacetat, Gelatine, Kohlehydrate wie Lactose oder Stärke, Magnesiumstearat, Talk, Vaseline. Zur oralen An¬ wendung dienen insbesondere Tabletten, Pillen, Dragees, Kapseln, Pul¬ ver, Granulate, Sirupe, Säfte oder Tropfen, zur rektalen Anwendung Sup- positorien, zur parenteralen Anwendung Lösungen, vorzugsweise ölige oder wässrige Lösungen, ferner Suspensionen, Emulsionen oder Implan¬ tate, für die topische Anwendung Salben, Cremes oder Puder. Die neuen Verbindungen können auch lyophilisiert und die erhaltenen Lyophilisate z.B. zur Herstellung von Injektionspräparaten verwendet werden. Die an- gegebenen Zubereitungen können sterilisiert sein und/oder Hilfsstoffe wie Gleit-, Konservierungs-, Stabilisierungs- und/oder Netzmittel, Emulgator¬ en, Salze zur Beeinflussung des osmotischen Druckes, Puffersubstanzen, Färb-, Geschmacks- und /oder mehrere weitere Wirkstoffe enthalten, z. B. ein oder mehrere Vitamine. Für die Applikation als Inhalationsspray können Sprays verwendet wer¬ den, die den Wirkstoff entweder gelöst oder suspendiert in einem Treibgas oder Treibgasgemisch (z. B. CO ₂ oder Fluorchlorkohlenwasserstoffen) ent¬ halten. Zweckmäßig verwendet man den Wirkstoff dabei in mikronisierter Form, wobei ein oder mehrere zusätzliche physiologisch verträgliche Lösungsmittel zugegen sein können, z. B. Ethanol. Inhalationslösungen können mit Hilfe üblicher Inhalatoren verabreicht werden.

Die Verbindungen der Formel I und ihre physiologisch unbedenklichen Salze können als Integrininhibitoren bei der Bekämpfung von Krankheiten, insbesondere von pathologisch angiogenen Erkrankungen, Thrombosen,

Herzinfarkt, koronaren Herzerkrankungen, Arteriosklerose, Tumoren, Osteoporose, Entzündungen und Infektionen verwendet werden.

Dabei können die erfindungsgemäßen Substanzen in der Regel in Ana- logie zu anderen bekannten, im Handel befindlichen Peptiden, insbeson¬ dere aber in Analogie zu den in der US-A-4 472 305 beschriebenen Ver¬ bindungen verabreicht werden, vorzugsweise in Dosierungen zwischen etwa 0,05 und 500 mg, insbesondere zwischen 0,5 und 100 mg pro Dosierungseinheit verabreicht. Die tägliche Dosierung liegt vorzugsweise zwischen etwa 0,01 und 2 mg/kg Körpergewicht. Die spezielle Dosis für jeden Patienten hängt jedoch von den verschiedensten Faktoren ab, bei¬ spielsweise von der Wirksamkeit der eingesetzten speziellen Verbindung, vom Alter, Körpergewicht, allgemeinen Gesundheitszustand, Geschlecht, von der Kost, vom Verabreichungszeitpunkt und -weg, von der Ausschei- dungsgeschwindigkeit, Arzneistoffkombination und Schwere der jeweiligen

Erkrankung, welcher die Therapie gilt. Die parenterale Applikation ist bevorzugt.

Vor- und nachstehend sind alle Temperaturen in °C angegeben. In den nachfolgenden Beispielen bedeutet "übliche Aufarbeitung": Man gibt, falls erforderlich, Wasser hinzu, stellt, falls erforderlich, je nach Konstitution des Endprodukts auf pH-Werte zwischen 2 und 10 ein, extrahiert mit Ethyl¬ acetat oder Dichlormethan, trennt ab, trocknet die organische Phase über Natriumsulfat, dampft ein und reinigt durch Chromatographie an Kieselgel und /oder durch Kristallisation.

Massenspektrometrie (MS): El (Elektronenstoß-Ionisation) M ⁺

FAB (Fast Atom Bombardment) (M+H) ⁺

Beispiel 1

Eine Lösung aus 2,5 g (S)-3-[4-(4-Brombutoxy)phenyl}-2-N-tert.-butoxy- carbonytamino-propionsäurebenzylester [erhältlich durch Umsetzung von 2 g BOC-L-Tyrosin-benzylester mit 1 ,9 ml 1 ,4-Dibrombutan in Gegenwart von 5 g Kaliumcarbonat, 0,1 g 18-Krone-6 in 20 ml Toluol bei 80 °] in 20 ml DMF und 1 ,6 g Natriumazid wird 12 Stunden gerührt. Nach üblicher

Aufarbeitung erhält man (S)-3-[4-(4-Azidobutoxy)phenyl]-2-N-tert.-butoxy- carbonylamino-propionsäurebenzylester als farblosen Sirup; FAB 469.

Analog erhält man durch Umsetzung mit Natriumazid aus

(R)-3-[4-(4-Brombutoxy)phenyl]-2-N-tert.-butoxycarbonylam ino- propionsäurebenzylester,

(S)-3-[4-(5-Brompentyloxy)phenyl]-2-N-tert.-butoxycarbony lamino- propionsäurebenzylester,

(R,S)-3-[4-(5-Brompentyloxy)phenyl]-2-N-tert.-butoxycarbo nylamino- propionsäurebenzylester,

(S)-3-[4-(3-Brompropoxy)phenyl]-2-N-tert.-butoxycarbonyla mino- propionsäurebenzylester und

(S)-3-[4-(6-Bromhexyloxy)phenyl]-2-N-tert.-butoxycarbonyl amino- propionsäurebenzylester

die nachstehenden Verbindungen

(R)-3-[4-(4-Azidobutoxy)phenyl]-2-N-tert.-butoxycarbonyla mino- propionsäurebenzylester,

(S)-3-[4-(5-Azidopentyloxy)phenyl]-2-N-tert.-butoxycarbon ylamino- propionsäurebenzylester,

(R,S)-3-[4-(5-Azidopentyloxy)phenyl]-2-N-tert.-butoxycarb onylamino- propionsäurebenzylester,

(S)-3-[4-(3-Azidopropoxy)phenyl]-2-N-tert.-butoxycarbonyl amino- propionsäurebenzylester und

(S)-3-[4-(6-Azidohexyloxy)phenyI]-2-N-tert.-butoxycarbony lamino- propionsäurebenzylester.

Beispiel 2

Eine Lösung aus 2,0 g (S)-3-[4-(4-Azidobutoxy)phenyl]-2-N-tert.-butoxy- carbonylamino-propionsäurebenzylester und 2 ml Trifluoressigsäure wird bei Raumtemperatur 3 Stunden gerührt. Nach Entfernen der TFA erhält man (S)-2-Amino-3-[4-(4-azidobutoxy)phenyl]-propionsäurebenzyle ster ("A") als farblosen Sirup.

Analog erhält man durch Abspaltung der BOC-Gruppe mit TFA aus

(R)-3-[4-(4-Azidobutoxy)phenyl]-2-N-tert.-butoxycarbonyla mino- propionsäurebenzylester,

(S)-3-[4-(5-Azidopentyloxy)phenyl]-2-N-tert.-butoxycarbon ylamino- propionsäurebenzylester,

(R,S)-3-[4-(5-Azidopentyloxy)phenyl]-2-N-tert.-butoxycarb onylamino- propionsäurebenzylester,

(S)-3-[4-(3-Azidopropoxy)phenyl]-2-N-tert.-butoxycarbonyl amino- propionsäurebenzylester und

(S)-3-[4-(6-Azidohexyloxy)phenyl]-2-N-tert.-butoxycarbony lamino- propionsäurebenzylester

die nachstehenden Verbindungen

(R)-2-Amino-3-[4-(4-azidobutoxy)phenyl]-2-propionsäurebe nzylester,

(S)-2-Amino-3-[4-(5-azidopentyloxy)phenyl]-propionsäureb enzyl- ester,

(R,S)-2-Amino-3-[4-(5-azidopentyloxy)phenyl]-propionsäur ebenzyl- ester.

(S)-2-Amino-3-[4-(3-azidopropoxy)phenyl]-propionsäurebenzyl ester und

(S)-2-Amino-3-[4-(6-azidohexyloxy)phenyl]-propionsäurebe nzylester.

Beispiel 3

Eine Lösung aus 1 ,6 g "A" in 20 ml Dichlormethan wird mit 0,84 ml Butyl- sutfonylchlorid und 1 ,2 ml Triethylamin versetzt und 12 Stunden bei Raum¬ temperatur gerührt. Nach üblicher Aufarbeitung erhält man 1 ,4 g (S)-2- Butylsulfonamido-3-[4-(4-azidobutoxy)phenyl]-propionsäurebe nzylester als farblosen Sirup; FAB 489.

Analog erhält man durch Umsetzung von "A" mit

Propylsulfonylchlorid,

Benzylsurfonylchlorid,

Pentylsulfoπylchlorid,

4-Tolylsulfonylchlorid und

Campher-10-sulfonylchlorid

die nachstehenden Verbindungen

(S)-2-Propylsulfonamido-3-[4-(4-azidobutoxy)phenyl]-propi onsäure- benzylester,

(S)-2-Benzylsulfonamido-3-[4-(4-azidobutoxy)phenyl]-propi onsäure- benzylester,

(S)-2-Pentylsulfonamido-3-[4-(4-azidobutoxy)phenyl]-propi onsäure- benzylester,

(S)-2-(4-Tolylsulfonamido)-3-[4-(4-azidobutoxy)phenyl]-propi onsäure- benzylester und

(S)-2-(Campher-10-sulfonamido)-3-[4-(4-azidobutoxy)phenyl ]- propionsäurebenzylester.

Analog erhält man durch Umsetzung

von (S)-2-Amino-3-[4-(5-azidopentyloxy)phenyl]-propionsäurebenz ylester mit Butylsulfonylchlorid

(S)-2-Butylsulfonamido-3-[4-(5-azidopentyloxy)phenyl]-pro pionsäure- benzylester,

von (R,S)-2-Amino-3-[4-(5-azidopentyloxy)phenyl]-propionsäurebe nzyl- ester mit Butylsulfonylchlorid

(R,S)-2-Butylsulfonamido-3-[4-(5-azidopentyloxy)phenyl]-p ropion- säurebenzylester,

von (S)-2-Amino-3-[4-(3-azidopropoxy)phenyl]-propionsäurebenzyl ester mit Butylsulfonylchlorid

(S)-2-Butylsulfonamido-3-[4-(3-azidopropoxy)phenyl]-propi onsäure- benzylester,

von (R)-2-Amino-3-[4-(4-azidobutoxy)phenyl]-propionsäurebenzyle ster mit Butylsulfonylchlorid

(R)-2-Butylsulfonamido-3-[4-(4-azidobutoxy)phenyl]-propio nsäure- benzylester und

von (S)-2-Amino-3-[4-(6-azidohexyloxy)phenyl]-propionsäurebenzy lester mit Butylsulfonylchlorid

(S)-2-Butylsurfonamido-3-[4-(6-azidohexyloxy)phenyl]-prop ionsäure- benzylester,

Beispiel 4

Eine Lösung aus 1 ,3 g (S)-2-Butylsulfonamido-3-[4-(4-azidobutoxy)- phenylj-propionsäurebenzylester in 30 ml Essigester/Methanol/Wasser im Verhältnis 5:3:1, 0,2 ml TFA und 0,1 g Palladium auf Aktivkohle wird 3 Stunden bei Raumtemperatur und Normaldruck hydriert. Nach Abfiltrieren des Katalysators und Entfernen der Lösungsmittel erhält man nach Gefriertrockung aus Acetonitril/Wasser 1,0 g (S)-2-Butylsulfonamido-3-[4- (4-aminobutoxy)phenyl]-propionsäure als amorphes Pulver; FAB 373.

Analog erhält man durch Hydrierung aus

(S)-2-Propylsulfonamido-3-[4-(4-azidobutoxy)phenyl]-propi onsäure- benzylester,

(S)-2-Benzylsulfonamido-3-[4-(4-azidobutoxy)phenyl]-propi onsäure- benzylester,

(S)-2-Pentylsulfonamido-3-[4-(4-azidobutoxy)phenyl]-propi onsäure- benzylester,

(R,S)-2-Pentylsulfonamido-3-[4-(4-azidobutoxy)phenyl]-pro pion- säurebenzylester,

(S)-2-(4-Tolylsulfonamido)-3-[4-(4-azidobutoxy)phenyl]-pr opionsäure- benzylester,

(S)-2-Butylsurfonamido-3-[4-(5-azidopentyloxy)phenyl]-pro pionsäure- benzylester,

(S)-2-Butylsulfonamido-3-[4-(3-azidopropoxy)phenyl]-propi onsäure- benzylester,

(R)-2-Butylsulfonamido-3-[4-(4-azidobutoxy)phenyl]-propio nsäure- benzylester,

(S)-2-Butylsulfonamido-3-[4-(6-azidohexyloxy)pheny!]-prop ionsäure- benzylester und

(S)-2-(Campher-10-surfonamido)-3-[4-(4-azidobutoxy)phenyl]- propionsäurebenzylester

die nachstehenden Verbindungen

(S)-2-Propylsulfonamido-3-[4-(4-aminobutoxy)phenyl]-propi onsäure,

(S)-2-Benzylsurfonamido-3-[4-(4-aminobutoxy)phenyl]-propi onsäure,

(S)-2-Pentylsurfonamido-3-[4-(4-aminobutoxy)phenyl]-propi onsäure,

(R,S)-2-Pentylsulfonamido-3-[4-(4-aminobutoxy)phenyl]-pro pion- säure,

(S)-2-(4-Tolylsurfonamido)-3-[4-(4-aminobutoxy)phenyl]-pr opion- säure,

(S)-2-Butylsulfonamido-3-[4-(5-aminopentyloxy)phenyl]-pro pion- säure,

(S)-2-Butylsulfonamido-3-[4-(3-aminopropoxy)phenyl]-propi onsäure,

(R)-2-Butylsurfonamido-3-[4-(4-aminobutoxy)phenyl]-propio nsäure,

(S)-2-Butylsurfonamido-3-[4-(6-aminohexyloxy)phenyl]-prop ionsäure, FAB 387 und

(S)-2-(Campher-10-surfonamido)-3-[4-(4-aminobutoxy)phenyl ]- propionsäure.

Beispiel 5

200 mg (S)-2-Butylsurfonamido-3-[4-(4-aminobutoxy)phenyl]-propions� �ure und 170 mg 3,5-Dimethylpyrazol-1-formamidinium-nitrat (DPFN) werden mit 150 μl Triethylamin 12 Stunden bei 60° gerührt. Die Lösung wird an-

schließend eingeengt und der Rückstand durch HPLC gereinigt (Lichrocart RP-18, Gradient Acetonitril/Wasser + 0,3 % TFA, 99:1 bis 1 :99 in 1 Stunde). Nach Entfernen der Lösungsmittel erhält man 50 mg (S)-2-Butyl- sulfonamido-3-[4-(4-guanidinobutoxy)phenyl]-propionsäure als amorphes Pulver; F. 70°; FAB 415.

Analog erhält man durch Umsetzung von DPFN mit

(S)-2-Propylsulfonamido-3-[4-(4-aminobutoxy)phenyl]-propi onsäure,

(S)-2-Benzylsurfonamido-3-[4-(4-aminobutoxy)phenyl]-propi onsäure,

(S)-2-Pentylsulfonamido-3-[4-(4-aminobutoxy)phenyl]-propi onsäure,

(S)-2-(4-Tolylsulfonamido)-3-[4-(4-aminobutoxy)phenyl]-pr opion- säure,

(S)-2-Butylsulfonamido-3-[4-(5-aminopentyloxy)phenyl]-pro pion- säure,

(S)-2-Butylsurfonamido-3-[4-(3-aminopropoxy)phenyl]-propi onsäure und

(S)-2-(Campher-10-sulfonamido)-3-[4-(4-aminobutoxy)phenyl ]- propionsäure

die nachstehenden Verbindungen

(S)-2-Propylsurfonamido-3-[4-(4-guanidinobutoxy)phenyl]-p ropion- säure, FAB 401

(S)-2-Benzylsulfonamido-3-[4-(4-guanidinobutoxy)phenyl]-p ropion- säure, FAB 449

(S)-2-Pentylsurfonamido-3-[4-(4-guanidinobutoxy)phenyl]-p ropion- säure, FAB 429

(S)-2-(4-Tolylsulfonamido)-3-[4-(4-guanidinobutoxy)phenyl]-p ropion- säure, FAB 449

(S)-2-Butylsulfonamido-3-[4-(5-guanidinopentyloxy)phenyl] -propion- säure, FAB 429

(S)-2-Butylsulfonamido-3-[4-(3-guanidinopropoxy)phenyl]-p ropion- säure, FAB 401 und

(S)-2-(Campher-10-surfonamido)-3-[4-(4-guanidinobutoxy)ph enyl]- propionsäure, FAB 509.

Beispiel 6

Analog Beispiel 4 erhält man durch Hydrierung von 0,5 g (S)-3-[4-(4- Azidobutoxy)phenyl]-2-N-tert.-butoxycarbonylamino-propionsä urebenzyl- ester 370 mg (S)-3-[4-(4-Aminobutoxy)phenyl]-2-N-tert.-butoxycarbonyl- amino-propionsäure ("B"); FAB 353. Durch Umsetzung von 105 mg "B" mit DPFN analog Beispiel 5 erhält man

160 mg (S)-3-[4-(4-Guanidinobutoxy)phenyl]-2-N-tert.-butoxycarbonyl - amino-propionsäure; FAB 395.

Durch Abspaltung der BOC-Gruppe analog Beispiel 2 erhält man (S)-2- Amino-3-[4-(4-guanidinobutoxy)phenylJ-propionsäure, FAB 295.

Beispiel 7

Eine Lösung von 0,4 g (S)-3-(4-Aminophenyl)-2-butylsulfonamido-propion- säureethylester, FAB 329 [erhältlich durch Umsetzung von (S)-3-(4-Nitro- phenyl)-2-tert.-butyloxycarbonylamino-propionsäureethyleste r mit TFA zu (S)-3-(4-Nitrophenyl)-2-amino-propionsäureethylester, anschliessender Umsetzung mit Butylsulfonylchlorid zu (S)-3-(4-Nitrophenyl)-2-butylsulfon- amido-propionsäureethylester, FAB 359, und Reduktion analog Beispiel 4], 0,268 g 4-BOC-Aminobuttersäure, 0,5 g O-(Benzotriazol-1-yl)-N, N, N', N'.-tetramethyluroniumtetrafluoroborat (TBTU), 0,05 g HOBT, 260 μl N-

Methylmorpholin in 10 ml DMF wird 12 Stunden bei Raumtemperatur

gerührt. Man arbeitet wie üblich auf und erhält 0,62 g (S)-3-[4-(4-tert- Butyloxycarbonylamino-butyramido)phenyl]-2-butylsulfonamido- propion- säureethylester; FAB 514.

Beispiel 8

Eine Lösung von 0,62 g (S)-3-[4-(4-tert.-Butyloxycarbonylamino-butyr- amido)phenyl]-2-butylsulfonamido-propionsäureethylester in 5 ml Dioxan wird mit 2,4 ml 1N NaOH 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Die Lösung wird anschließend mit TFA neutralisiert, eingeengt und der Rück¬ stand in 2 ml TFA aufgenommen. Nach 2 Stunden Rühren bei Raumtem¬ peratur wird wie üblich aufgearbeitet. Man erhält (S)-3-[4-(4-Amino-butyr- amido)phenyl]-2-butylsulfonamido-propionsäure nach Gefriertrocknung aus Acetonitril/Wasser als weißes amorphes Pulver; FAB 386.

Beispiel 9

Analog Beispiel 5 erhält man durch Umsetzung von 0,155 g (S)-3-[4-(4- Amino-butyramido)phenyl]-2-butylsulfonamido-propionsäure mit 0,121 g DPFN nach Gefriertrocknung als weißes amorphes Pulver 0,160 g (S)- 2-

Butylsulfonamido 3-[4-(4-guanidino-butyramido)phenyl3-propionsäure; F. 215-217°; FAB 428.

Beispiel 10

Eine Lösung von 2,65 g 3-[4-(5-(4-Methylphenylsuffonyloxy)-pentin-1 -yl)- phenyl]-2-butylsurfonamido-propionsäurebenzylester, FAB 612 [erhältlich durch Abspaltung der BOC-Gruppe aus BOC-4-lodphenylalanin-benzyl- ester mit TFA und anschließender Umsetzung mit Butylsulfonylchlorid zu 3-(4-lodphenyl)-2-butylsulfonamido-propionsäurebenzylester, darauffol¬ gender Reaktion mit Pentin-5-ol, 1-Bis-(triphenylphosphin)-palladium-(ll)- chlorid und Kupfer-(l)-iodid in Diethylamin zu 3-[4-(5-Hydroxypentin-1-yl)- phenyl]-2-butylsulfonamido-propionsäurebenzylester, FAB 458, und Umsetzung mit Toluolsulfonylchlorid in Pyridin] und 1,4 g Natriumazid in 25 ml DMF wird 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Nach der übli-

chen Aufarbeitung erhält man 1, 5 g 3-[4-(5-Azido-pentin-1-yl)-phenyl]-2- butylsulfonamido-propionsäurebenzylester als farblosen Sirup; FAB 483.

Beispiel 11

Eine Lösung von 0,2 g 3-[4-(5-Azido-pentin-1-yl)-phenyl]-2-butylsulfon- amido-propionsäurebenzylester in 10 ml Pyridin/Wasser 4:1 wird 30 Minuten mit Schwefelwasserstoff gesättigt. Nach Entfernen der Lösungs¬ mittel wird der Rückstand in 10 ml Dioxan gelöst und mit 0,8 ml 1 N NaOH versetzt. Nach Reinigung des Rückstandes durch HPLC analog Beispiel 5 erhält man 0,066 g 3-[4-(5-Amino-pentin-1-yl)-phenyl]-2-butylsulfonamido- propionsäure; FAB 367.

Analog Beispiel 5 erhält man durch Umsetzung von 0,05 g 3-[4-(5-Amino- pentin-1 -yl)-phenyl]-2-butylsurfonamido-propionsäure mit 0,038 g DPFN

0,044 g 2-Butylsulfonamido-3-[4-(5-guanidino-pentin-1 -yl)-phenyl]- propionsäure; F. 147-150°; FAB 409.

Beispiel 12

Analog Beispiel 4 erhält man aus 0,5 g 3-[4-(5-Azido-pentin-1-yl)-phenyl]- 2-butylsurfonamido-propionsäurebenzylester nach üblicher Aufarbeitung 0, 165 g 3-[4-(5-Amino-pent-1 -yl)-phenyl]-2-butylsulfonamido-propionsäure; FAB 371.

Analog Beispiel 5 erhält man durch Umsetzung von 0,11 g 3-[4-(5-Amino- pent-1-yl)-phenyl]-2-butylsulfonamido-propionsäure mit 0,088 g DPFN

0,06 g 2-Butylsulfonamido-3-[4-(5-guanidino-pent-1-yl)-phenyl]- propionsäure als hygroskopische, zerfließende Masse; FAB 413.

Beispiel 13

Eine Lösung von (S)-2-Butylsurfonamido-3-[4-(4-azidobutoxy)phenyl]- propionsäurebenzylester und 1,1 Moläquivalent NaH in THF wird 1 Stunde unter Inertgasatmosphäre bei Raumtemperatur gerührt. Anschließend gibt man 2 Moläquivalente Methyliodid dazu, arbeitet nach 1 Stunde wie üblich

auf und erhält (S)-2-(N-Methyl-butylsulfonamido)-3-[4-(4-azidobutoxy)- phenylj-propionsäurebenzylester.

Analog Beispiel 4 erhält man durch Reduktion (S)-2-(N-Methyl-butylsulfon- amido)-3-[4-(4-aminobutoxy)phenyl]-propionsäure und durch Umsetzung mit DPFN analog Beispiel 5 (S)-2-(N-Methyl-butylsulfonamido)-3-[4-(4- guanidinobutoxy)phenyl]-propionsäure, FAB 429.

Beispiel 14

Analog Beispiel 1 erhält man ausgehend von Menthyloxycarbonylamino- propionsäurebenzylester durch Umsetzung mit 1 ,4-Dibrombutan (S)-3-[4- (4-Brombutoxy)phenyl]-2-N-menthyloxycarbonylamino-propionsä ure- benzylester. Durch Umsetzung mit NaN ₃ und anschließender Reduktion analog Beispiel 4 erhält man (S)-3-[4-(4-Aminobutoxy)phenyl]-2-N-men- thyloxycarbonylamino-propionsäure, die mit DPFN analog Beispiel 5 in

(S)-2-N-Menthyloxycarbonylamino-3-[4-(4-guanidinobutoxy)p henyl]- propionsäure überführt wird, FAB 477.

Beispiel 15

Eine Lösung von 2,3 g (S)-3-[4-(5-Brompentyloxy)phenyl]-2-N-tert.-butyl- oxycarbonyl-propionsäurebenzylester, El 520 [erhältlich duch Umsetzung von 2,0 g BOC-L-Tyrosin-benzylester mit 2,2, ml 1,5-Dibrompentan, 0,815 g Kaliumcarbonat und 0,132 g 18-Krone-6 in 50 ml Toluol], 1,6 g KCN und 0,580 g 18-Krone-6 in 30 ml Acetonitril wird 12 Stunden unter Rückfluß gekocht. Nach üblicher Aufarbeitung erhält man 1 ,97 g (S)-3-[4-(5-Cyan- pentyloxy)phenyl]-2-N-tert.-butyloxycarbonyl-propionsäurebe nzylester, FAB 467, als öligen Sirup.

Analog erhält man aus (S)-3-[4-(4-Brombutoxy)phenyl]-2-N-tert.-butyl- oxycarbonyl-propionsäurebenzylester

(S)-3-[4-(4-Cyanbutoxy)phenyl]-2-N-tert.-butyloxycarbonyl - propionsäurebenzylester.

Beispiel 16

Analog Beispiel 2 und Beispiel 3 erhält man aus 1 ,97 g (S)-3-[4-(5- Cyanpentyloxy)phenyl]-2-N-tert.-butyloxycarbonyl-propionsäu rebenzyl- ester durch Behandeln mit TFA and anschließender Umsetzung mit Butylsulfonylchlorid 1 ,5 g (S)-2-Butylsulfonamido-3-[4-(5-Cyanpentyl- oxy)phenyl]-propionsäurebenzylester, FAB 487.

Analog erhält man aus (S)-3-[4-(4-Cyanbutoxy)phenyf]-2-N-tert.-butyl- oxycarbonyl-propionsäurebenzylester

(S)-2-Butylsutfonamido-3-[4-(4-Cyanbutoxy)phenyl]-propion säure- benzylester.

Beispiel 17

Eine Lösung von 1 ,5 g (S)-2-Butylsutfonamido-3-[4-(5-Cyaπpentyloxy)- phenylj-propionsäurebenzylester, 0,646 g Hydroxylamin-hydrochlorid und

0,780 Natriumhydrogencarbonat in 50 ml Isopropanol/Wasser 6:1 wird 12 Stunden unter Rückfluß erhitzt. Nach üblicher Aufarbeitung erhält man 1 ,6 g (S)-2-Butylsulfonamido-3-[4-(6-Amino-6-N-hydroxylimino-hexyl oxy)- phenyl]-propionsäurebenzylester, FAB 520, als farblosen Sirup.

Analog erhält man aus (S)-2-Butylsulfonamido-3-[4-(4-Cyanbtιtoxy)phenyl]-propions äure- benzy lester

(S)-2-Butylsulfonamido-3-[4-(5-Amino-5-N-hydroxylimino- pentyloxy)phenyl]-propionsäurebenzylester und

aus (S)-3-[4-(4-Cyanbutoxy)phenyl]-2-N-tert.-butyloxycarbonyl-pr opion- säurebenzylester

(S)-3-[4-(5-Amino-5-N-hydroxylimino-pentyloxy)phenyl]-2-N -tert - butyloxycarbonyl-propionsäurebenzylester.

Beispiel 18

Eine Lösung von 1 ,6 g (S)-2-Butylsulfonamido-3-[4-(6-Amino-6-N- hydroxylimino-hexyloxy)phenyl]-propionsäurebenzylester in 30 ml Essigsäure und 1 ml Essigsäureanhydrid wird mit 50 mg Palladium-

Katalysator (10 % auf Aktivkohle) 2 Stunden bei Raumtemperatur und Normaldruck hydriert. Nach Abtrennen des Katalysators, üblicher Aufarbeitung und Reinigung durch präparative HPLC analog Beispiel 5 erhält man 0,24 g (S)-2-Butylsulfonamido-3-[4-(5-Amidinopentyloxy)- phenylj-propionsäure, FAB 414.

Analog erhält man aus (S)-2-Butylsulfonamido-3-[4-(5-Amino-5-N-hydroxylimino-penty loxy)- phenylj-propionsäurebeπzylester (S)-2-Butylsulfonamido-3-[4-(4-Amidinobutoxy)phenyl]- propionsäure, FAB 400 und

aus (S)-3-[4-(5-Amino-5-N-hydroxylimino-pentyloxy)phenyl]-2-N-te rt.-butyl- oxycarbonyl-propionsäurebenzylester (S)-3-[4-(4-Amidinobutoxy)phenyl]-2-N-tert.-butyloxycarbonyl - propionsäure, FAB 380.

Beispiel 19

Analog Beispiel 7 erhält man durch Umsetzung von 0,4 g (S)-3-(4-Amϊno- phenyO-2-butylsulfonamido-propionsäureethylester, 0,3 g N-BOC-piperi- din-4-carbonsäure, 0,05 g HOBt und 264 μl N-Methylmorpholin in 10 ml DMF nach üblicher Aufarbeitung 0,428 g (S)-2-Butylsurfonamido-3-[4-(1- tert.-butyloxycarbonyl-piperidin-4-carboxamido)phenyl]-propi onsäureethyl- ester, FAB 540.

Beispiel 20

Analog Beispiel 8 erhält aus 0,42 g (S)-2-Butylsulfonamido-3-[4-(1-tert.- butyloxycarbonyl-piperidin-4-carboxamido)phenyl]-propionsäu reethylester durch Esterhydrolyse mit NaOH und Abspaltung der BOC-Gruppe mit TFA 0,225 g (S)-2-Butylsulfonamido-3-[4-(piperidin-4-yl-carboxamido)phen yl]- propionsäure, FAB 412.

Analog Beispiel 5 erhält man durch Umsetzung von 0,16 g (S)-2-Butyl- sulfonamido-3-[4-(piperidin-4-yl-carboxamido)phenyl]-propion säure mit

0, 115 g DPFN, 105 μl Triethylamin in 5 ml DMF 0,085 g (S)-2-Butylsulfon- amido-3-[4-(1-amidinopiperidin-4-carboxamido)phenyl]-propion säure, FAB 454.

Beispiel 21

(S)-2-Butylsulfonamido-3-[4-(5-(5-phenyl-1,2,4-oxadiazol) pentyloxy)- phenylj-propionsäure [erhältlich durch Umsetzung von (S)-2-Butyl- sulfonamido-3-[4-(6-Amino-6-N-hydroxylimino-hexyloxy)phenyl] -propion- säure mit 1 ,1 Äquivalenten Benzoylchlorid und Triethylamin] wird analog

Beispiel 18 hydriert. Nach Abtrennung des Katalysators und üblicher Aufarbeitung erhält man (S)-2-Butylsulfonamido-3-[4-(5-Amidinopentyl- oxy)phenyl]-propionsäure, FAB 414.

Die nachfolgenden Beispiele betreffen pharmazeutische Zubereitungen:

Beispiel A: Injektionsgläser

Eine Lösung von 100 g eines Wirkstoffes der Formel I und 5 g Dinatrium- hydrogenphosphat werden in 3 I zweifach destilliertem Wasser mit 2 n Salzsäure auf pH 6,5 eingestellt, steril filtriert, in Injektionsgläser abge¬ füllt, unter sterilen Bedingungen lyophilisiert und steril verschlossen. Jedes Injektionsglas enthält 5 mg Wirkstoff.

Beispiel B: Suppositorien

Man schmilzt ein Gemisch von 20 g eines Wirkstoffes der Formel I mit 100 g Sojalecithin und 1400 g Kakaobutter, gießt in Formen und läßt erkalten. Jedes Suppositorium enthält 20 mg Wirkstoff.

Beispiel C: Lösung

Man bereitet eine Lösung aus 1 g eines Wirkstoffes der Formel I, 9,38 g NaH ₂ PO ₄ • 2 H ₂ O, 28,48 g Na ₂ HPO ₄ • 12 H ₂ O und 0,1 g Benzalkonium- chlorid in 940 ml zweifach destilliertem Wasser. Man stellt auf pH 6,8 ein,

füllt auf 1 I auf und sterilisiert durch Bestrahlung. Diese Lösung kann in Form von Augentropfen verwendet werden.

Beispiel D: Salbe

Man mischt 500 mg eines Wirkstoffes der Formel I mit 99,5 g Vaseline unter aseptischen Bedingungen.

Beispiel E: Tabletten

Ein Gemisch von 1 kg Wirkstoff der Formel I, 4 kg Lactose, 1 ,2 kg Kar¬ toffelstärke, 0,2 kg Talk und 0,1 kg Magnesiumstearat wird in üblicher Weise zu Tabletten verpreßt, derart, daß jede Tablette 10 mg Wirkstoff enthält.

Beispiel F: Dragees

Analog Beispiel E werden Tabletten gepreßt, die anschließend in üblicher Weise mit einem Überzug aus Saccharose, Kartoffelstärke, Talk, Tragant und Farbstoff überzogen werden.

Beispiel G: Kapseln

2 kg Wirkstoff der Formel I werden in üblicher Weise in Hartgelatine- kapseln gefüllt, so daß jede Kapsel 20 mg des Wirkstoffs enthält.

Beispiel H: Ampullen

Eine Lösung von 1 kg Wirkstoff der Formel I in 60 I zweifach destilliertem Wasser wird steril filtriert, in Ampullen abgefüllt, unter sterilen Bedingun¬ gen lyophilisiert und steril verschlossen. Jede Ampulle enthält 10 mg Wirkstoff.

Beispiel I: Inhalations-Spray

Man löst 14 g Wirkstoff der Formel I in 10 I isotonischer NaCI-Lösung und füllt die Lösung in handelsübliche Sprühgefäße mit Pump-Mechanismus. Die Lösung kann in Mund oder Nase gesprüht werden. Ein Sprühstoß (etwa 0,1 ml) entspricht einer Dosis von etwa 0,14 mg.