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Title:
UREA COMPOUND, PREPARATION METHOD AND USE THEREOF
Document Type and Number:
WIPO Patent Application WO/2013/091285
Kind Code:
A1
Abstract:
Provided are a urea compound having a structure as represented by general formula I, preparation method thereof, pharmaceutical composition containing the compound, and uses thereof in the preparation of drugs for treating inflammatory response, immune hyperactivity and organ transplantation rejection, wherein R1-R7, X, Y and n in the general formula are as defined in the specification and the claims.

Inventors:
NAN FAJUN (CN)
ZUO JIANPING (CN)
LI JIA (CN)
ZHANG MEI (CN)
BLOM ANNA (CN)
TANG WEI (CN)
YANG XIAOYING (CN)
Application Number:
CN2012/001719
Publication Date:
June 27, 2013
Filing Date:
December 21, 2012
Export Citation:
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Assignee:
SHANGHAI INSTITUTE OF MATERIA MEDICA, CHINESE ACADEMY OF SCIENCES (555 Zuchongzhi Road, Zhangjiang Pudong District, Shanghai 3, 201203, CN)
International Classes:
C07C275/34; A61K31/17; A61K31/40; A61K31/44; A61K31/4406; A61K31/4409; A61P29/00; A61P37/06; C07C273/18; C07D207/16; C07D213/40; C07D213/75; C07D303/20
Foreign References:
CN1926098A2007-03-07
CN1080919A1994-01-19
CN1984892A2007-06-20
Attorney, Agent or Firm:
KINGSOUND & PARTNERS (11/F, Block BKingSound International Center,116 Zizhuyuan Road, Haidian District, Beijing 7, 100097, CN)
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Claims:
权 利 要 求

1、 - I所示的脲类化合物:

I

其中, 和 R2各自独立地为 H,取代或未取代的 C1~C8的烷基, 所述取代基为羟基、 卤素、 C1~C4烷氧基、 C3~C6 的环烷基、 或者 含有一个 N或 0原子 C3~C7的杂环基, C2~C8的链烯基, C2~C8 的链炔基;

R3和 R4各自独立地为 H、 C1~C4的烷基、 任选至少被一个羟基 或氨基取代的 C1~C4的烷基;

为11、 C1~C4的烷基;

或者 R4、 R5和与它们相连的碳原子、 氮原子一起形成 5-7元环;

R6~R7各自独立地选自如下基团中的一种: H、 卤素、 羟基、 氨 基、 羧基、 C1~C4的烷氧羰基、 C1~C4的烷氧基、 氰基、 三氟甲基、 脒基;

n为 0、 1、 2;

X为 CH或 N;

Y为 0或8。

2、 根据权利要求 1所述的脲类化合物,

其中, 和 R2中一个为甲基,另一个为 H,取代或未取代的 C1~C8 的烷基, 所述取代基为羟基、 卤素、 C1~C4烷氧基、 C3~C6 的环烷 基、 或者含有一个 N或 0原子 C3~C7的杂环基, C2~C8的链烯基, C2~C8的链炔基;

R3和 R4各自独立地为 H、 C1~C4的烷基、 任选至少被一个羟基 或氨基取代的 C1~C4的烷基; 为11、 C1~C4的烷基;

或者 R4、 R5和与它们相连的碳原子、 氮原子一起形成 5-7元环; R6~R7各自独立地选自如下基团中的一种: H、 卤素、

基、 羧基、 C1~C4的烷氧羰基、 C1~C4的烷氧基、 氰基、

n为 0、 1、 2;

X为 CH或 N;

Y为 0或8。 根据权利要求 2所述的脲类化合物, 其结构如通式 II所;

II 其中, 和 R2中一个为甲基,另一个为 H,取代或未取代的 C1~C8 的烷基, 所述取代基为羟基、 卤素、 C1~C4烷氧基、 C3~C6 的环烷 基、 或者含有一个 N或 0原子 C3~C7的杂环基, C2~C8的链烯基, C2~C8的链炔基;

R3和 R4各自独立地为 H、 C1~C4的烷基、 任选至少被一个羟基 或氨基取代的 C1~C4的烷基;

R5为 C1~C4的烷基;

或者 R4、 R5和与它们相连的碳原子、 氮原子一起形成 5-7元环; R6~R7各自独立地选自如下基团中的一种: H、 卤素、 羟基、 氨 基、 羧基、 C1~C4的烷氧羰基、 C1~C4的烷氧基、 氰基、 三氟甲基;

X为 CH或 N;

Y为 0或8。

4、 根据权利要求 2或 3所述的脲类化合物,

其中, 和 中一个为甲基, 另一个为 C4~C6的烷基、 C4~C6 的链烯基、 C4~C6的链炔基; R3为 H, 为11、 甲基、 羟基取代的 C 1~C3的烷基;

R5为甲基; 为11、 卤素或羟基, 1 7为11;

n为 0; X为 CH; Y为 0。

5、 根据权利要求 2或 3所述的脲类化合物,

其中, 和 中一个为甲基, 另一个为 C4~C6的烷基、 C4~C6 的链烯基;

R3为 H, R4为 H或甲基;

R5为甲基; R6和 R7为 H;

n为 0; X为 CH; Y为 0。

6、 根据权利要求 1所述的脲类化合物, 其中, 所述脲类化合物

一种来实现: 路线 A:

歩骤 Al : 将异香兰素 1用苄基保护后得到中间体 2, 所述苄基 保护用本领域中的常规方法进行; 骤 A3:将中间体 3经过一个改良的 Curtius重排后得到异氰酸

歩骤 A4: 将异氰酸酯 4 经缩合反应后得 到关键中间体 5, 所述缩合反应用本领域中的常规方法进行;

歩骤 A5: 将中间体 5脱去苄基保护后得到中间体 6;

歩骤 A6: 将中间体 6和不同取代的溴代物 -Br反应得到中间 体 7所示脲类化合物; 歩骤 A7: 将中间体 7在碱性条件下与 R3I反应即得到本发明所 的如通式 8所示的脲类化合物;

路线 A中 ~1 7与通式 I中的定义相同;

路线 B:

16 歩骤 B1 : 将香兰素 9用苄基保护后得到中间体 10, 所述苄基保 护用本领域中的常规方法进行;

歩骤 B2: 将中间体 10在氧化剂如 NaClO2/NaH2PO4/30%H2O2或 者 PCC或者 Na2Cr207作用下氧化得到中间体酸 11;

歩骤 B3 : 将中间体 11经过一个改良的 Curtius重排后得到异氰 酸酯 12; 歩骤 B4:将异氰酸酯 12与取代胺 χ\ 经缩合反应后得 到关键中间体 13, 所述缩合反应用本领域中的常规方法进行;

歩骤 Β5 : 将中间体 13脱去苄基保护后得到中间体 14;

歩骤 Β6: 将中间体 14和不同取代的溴代物 R2-Br反应得到中间 体 15所示脲类化合物;

歩骤 B7: 将中间体 15在碱性条件下与 R3I反应即得到本发明所 述的如通式 16所示的脲类化合物;

路线 B中 ~1 7与通式 I中的定义相同;

路线 C:

22

Cl : 将中间体 17与溴代物 RiBr反应得到中间体 18;

C2: 将中间体 18水解得到酸 19;

' C3 :将酸 19按照与路线 A相同的方法制备为异氰酸酯 20; 歩骤 C4:将异氰酸酯 20与取代胺 x R7经缩合反应后 得到中间体 21, 所述缩合反应用本领域中的常规方法进行; 歩骤 C5: 将中间体 21在碱性条件下与 R3I反应即得到本发明所 述的如通式 22所示的脲类化合物; 路线 C中 ~1 7与通式 I中的定义相同。

8、 根据权利要求 7所述的制备方法, 其中

在歩骤 A2和 B2中所述的氧化剂为 NaClO2/NaH2PO4/30%H2O2 或者 PCC或者 Na2Cr207 ;

在歩骤 A3和 B3中所述 Curtius重排反应的反应试剂为 DPPA和 重蒸三乙胺;

在歩骤 A7、B7和 C5中所述的碱性条件是通过加入 NaH得到的。

9、 一种用于治疗炎症反应、 免疫亢进或器官移植排斥的药物组 合物,其包含治疗有效量的一种或多种根据权利要求 1所述的脲类化 合物以及药学上可接受的载体、 助剂或辅料。

10、根据权利要求 1所述的脲类化合物在制备预防或治疗炎症反 应、 免疫亢进和器官移植排斥的药物中的用途。

Description:
一种脲类化合物、 制备方法及其用途 技术领域

本发明属于药物化学领域, 涉及一种脲类化合物、 其制备方法、 包含该类化合物的药物组合物及其用途,该类 化合物具有补体抑制活 性, 可应用于治疗炎症反应、 免疫亢进以及器官移植排斥等方面。 背景技术 补体系统是存在于人和脊椎动物血清、组织液 和细胞膜表面的一 组与免疫有关、 经活化后具有酶活性的蛋白质, 包括 20余种血清蛋 白 (作为补体的固有成分)和补体调节蛋白、 以及介导免疫系统的补 体活性片段或调节蛋白生物效应受体。

在生理情况下,血清中大多数补体成分均以无 活性的酶前体形式 存在。 只有在某些活化物的作用下, 或在特定的固相表面上, 补体各 成分才依次被激活。每当前一组分被激活, 即具备了裂解下一组分的 活性, 由此形成一系列放大的连锁反应,最终导致溶 细胞效应。同时, 在补体活化过程中产生的多种水解片段, 它们具有不同的生物学效 应, 广泛参与机体的免疫调节与炎症反应。

补体通过经典途径和旁路途径的激活导致靶细 胞的溶解。补体系 统激活后可使各种血细胞、病毒感染细胞及病 原微生物等各种靶细胞 裂解。这种补体介导的溶菌、溶细胞作用是机 体抵抗病原微生物感染 的重要防御手段。但另一方面, 当补体系统过度活跃时, 也会导致一 些自身免疫性疾病。某些自身免疫病可引起自 身细胞的裂解, 从而导 致自身组织的损伤, 这些疾病也与补体的参与有关。 因此, 补体抑制 剂可能应用于治疗炎症反应、 免疫亢进以及器官移植排斥等方面。

溶血抑制试验 (经典途径) 的试验原理是绵羊红细胞 (SRBC ) 与相应抗体(溶血素)结合后,可激活待检血 清中的补体而导致 SRBC 溶血, 其溶血程度与血清中补体的含量和功能有关。 可通过溶血程度 (吸光度值) 反映化合物的补体抑制活性。 目前研究比较成熟的补体抑制剂是补体调节蛋 白, 比如 SCR1和 抗体, 毒性比较低, 但成本昂贵, 且只能静脉给药。 近年来, 陆续报 道了作用于不同环节的几个小分子补体抑制剂 , 主要有两类: 肽及其 类似物和各种类型的小分子化合物, 目前已有两个小分子 FUT-175 (Nafomostat)和 BCX-1470处于临床研究。

小分子补体抑制剂与传统的蛋白分子相比, 在给药方式、成本及 药动学方面有许多优点, 具有较好的应用前景, 因此有必要开发新型 的小分子补体抑制剂。

发明人设计合成了一种脲类化合物,经体外溶 血抑制试验发现该 类化合物具有补体抑制活性, 代表化合物的 IC 5Q 约为 20nM, 进一歩 的机制研究提示,该类化合物的作用靶点为补 体激活途径的末端通路 C9 o 发明内容 因此,本发明的目的在于提供一种新型具有补 体抑制活性的脲类 化合物;

本发明的另一目的在于提供该类具有补体抑制 活性的脲类化合 物的制备方法;

本发明的还一目的在于提供具有补体抑制活性 的药物组合物,该 组合物含有本发明脲类化合物作为活性成分。

本发明的再一目的在于提供该类脲类化合物及 其药物组合物在 制备治疗炎症反应、 免疫亢进以及器官移植排斥方面的药物中的用 本发 I 示的 物:

其中, 和 R 2 各自独立地为 H,取代或未取代的 C1~C8的烷基, 所述取代基为羟基、 卤素、 C1~C4烷氧基、 C3~C6 的环烷基、 或者 含有一个 N或 0原子 C3~C7的杂环基, C2~C8的链烯基, C2~C8 的链炔基; 优选 和 中一个为甲基, 另一个为 H, 取代或未取代 的 C1~C8的烷基, 所述取代基为羟基、 卤素、 C1~C4烷氧基、 C3~C6 的环烷基、 或者含有一个 N或 0原子 C3~C7的杂环基, C2~C8的链 烯基, C2~C8的链炔基;优选 为 C4~C6的烷基、 C4~C6的链烯基、 C4~C6的链炔基, R 2 为 C1~C4的烷基; 更优选 为 C4~C6的烷基、 C4~C6的链烯基、 C4~C6的链炔基, R 2 为甲基;

R 3 和 R 4 各自独立地为 H、 C1~C4的烷基、 任选至少被一个羟基 或氨基取代的 C1~C4的烷基;优选 1^为 H、甲基、羟基取代的 C1~C3 的烷基, 为 H, C1~C4的烷基; 更优选 1 4 为11、 甲基、 羟基取代 的 C2~C3的烷基, R 3 为 H;

为11、 C1~C4的烷基, 优选 R 5 为甲基;

或者 R 4 、 R 5 和与它们相连的碳原子、 氮原子一起形成 5-7元环; R 6 ~R 7 各自独立地选自如下基团中的一种: H、 卤素、 羟基、 氨 基、 羧基、 C1~C4的烷氧羰基、 C1~C4的烷氧基、 氰基、 三氟甲基、 脒基; 优选 R 6 为卤素、 羟基, R 7 为 H; 更优选 R 6 为 F, 羟基, R 7 为 H;

n为 0、 1、 2, 优选 n为 0;

X为 CH或 N, 并优选 X为 CH;

Y为 0或 S, 并优选 Y为 0。

本发明进一歩提供了一种结构如通式 II所示的脲类化合物,

II

其中, 和 R 2 中一个为甲基,另一个为 H,取代或未取代的 C1~C8 的烷基, 所述取代基为羟基、 卤素、 C1~C4烷氧基、 C3~C6 的环烷 基、 或者含有一个 N或 0原子 C3~C7的杂环基, C2~C8的链烯基, C2~C8的链炔基;

R 3 和 R 4 各自独立地为 H、 C1~C4的烷基、 任选至少被一个羟基 或氨基取代的 C1~C4的烷基;

R 5 为 C1~C4的烷基;

或者 R 4 、 R 5 和与它们相连的碳原子、 氮原子一起形成 5-7元环; R 6 ~R 7 各自独立地选自如下基团中的一种: H、 卤素、 羟基、 氨 基、 羧基、 C1~C4的烷氧羰基、 C1~C4的烷氧基、 氰基、 三氟甲基;

X为 CH或 N;

Y为 0或8。

在本发明中作如下定义, 所述的烷基包括直链或支链的烷基, 所 述的链烯基包括直链或支链的链烯基,所述的 链炔基包括直链或支链 的链炔基, 所述的卤素包括?、 Cl、 Br和 I。

本发明的具有补体抑制活性的脲类化合物最优 选选自如下化合

本发明中通式 所示的芳香氧基嘧啶甲酰胺或者芳香氧基吡啶 甲酰胺类化合物可以通过多种歩骤和合成路线 制备,代表性的歩骤和 合成方法如下, 但不限于下述方法:

对于上述本发明所述的该类化合物的制备方法 可以通过如下路

歩骤 A1 : 将异香兰素 1用苄基保护后得到中间体 2, 所述苄基 保护用本领域中的常规方法进行;

骤 A3:将中间体 3经过一个改良的 Curtius重排后得到异氰酸 骤 A4: 将异氰酸酯 4与取代胺 (除实施例给出 胺的制备,其余的胺均为市售获得)经缩合反 应后得到关键中间体 5, 所述缩合反应用本领域中的常规方法进行;

歩骤 A5: 将中间体 5脱去苄基保护后得到中间体 6;

歩骤 A6: 将中间体 6和不同取代的溴代物 R r Br (均通过市售商 品途径得到:)反应得到中间体 7所示脲类化合物;

歩骤 A7: 将中间体 7在碱性条件下 NaH下与 R 3 I反应即得到本 发明所述的如通式 8所示的脲类化合物;

路线 A中 ~1 7 与通式 I中的定义相同。

上述实验歩骤中的各个反应均是本领域技术人 员常规实验手段, 其中反应温度、 时间、气氛等反应条件可以由本领域普通技术 人员根 据相关反应确定。

路线 B:

^ Bl : 将香兰素 9用苄基保护后得到中间体 10, 所述苄基保 护用本领域中的常规方法进行;

歩骤 B2: 将中间体 10在氧化剂如 NaClO 2 /NaH 2 PO 4 /30%H 2 O 2 或 者 PCC或者 Na 2 Cr 2 0 7 作用下氧化得到中间体酸 11;

歩骤 B3 : 将中间体 11经过一个改良的 Curtius重排后得到异氰 酸酯 12;

B4:将异氰酸酯 12 (除实施例给出 胺的制备, 其余的胺均为市售获得) 经缩合反应后得到关键中间体 13, 所述缩合反应用本领域中的常规方法进行;

歩骤 B5 : 将中间体 13脱去苄基保护后得到中间体 14;

歩骤 B6: 将中间体 14和不同取代的溴代物 R 2 -Br (均通过市售商 品途径得到:)反应得到中间体 15所示脲类化合物; 歩骤 B7 :将中间体 15在碱性条件下 NaH下与 R 3 I反应即得到本 发明所述的如通式 16所示的脲类化合物; 路线 B中 ~1 7 与通式 I中的定义相同。 上述实验歩骤中的各个反应均是本领域技术人 员常规实验手段, 其中反应温度、 时间、气氛等反应条件可以由本领域普通技术 人员根 据相关反应确定

路线 C:

22

歩骤 CI : 将中间体 17(通过参考文献方法制备: Molecular Simulation, Vol. 33, No. 14, December 2007, 1109—1117)与溴代物 :¾ 反应得到中间体 18;

歩骤 C2: 将中间体 18水解得到酸 19;

歩骤 C3 :将酸 19按照与路线 A相同的方法制备为异氰酸酯 20;

歩骤 C4:将异氰酸酯 20 (除实施例给出 胺的制备, 其余的胺均为市售获得) 经缩合反应后得到中间体 21, 所述缩合反应用本领域中的常规方法进行; 歩骤 C5:将中间体 21在碱性条件下 NaH下与 R 3 I反应即得到本 发明所述的如通式 22所示的脲类化合物;

其中 ~1 7与通式 I中的定义相同。

上述实验歩骤中的各个反应均是本领域技术人 员常规实验手段, 其中反应温度、 时间、气氛等反应条件可以由本领域普通技术 人员根 据相关反应确定。

本发明提供的新型的补体 C9抑制剂, 体外对总补体溶血活性的 抑制实验发现该类化合物具有补体抑制活性, 可用于治疗补体相关的 炎症、 免疫亢进、 移植排斥等用途, 其包括给患者治疗有效量的选自 如通式 所示的脲类化合物中的一种或几种化合物。

本发明的另一目的是提供一种预防或治疗炎症 反应、免疫亢进和 器官移植排斥的方法,其包括给患者治疗有效 量的选自如通式 (I)所示 的脲类化合物中的一种或几种化合物。

本发明提供一种治疗补体相关的炎症、免疫亢 进、移植排斥等用 途药物组合物,该组合物包含治疗有效量的本 发明上述化合物中的一 种或多种作为活性成分, 并可进一歩包含药学上常规的辅剂, 例如分 散剂、 赋形剂、 崩解剂、 抗氧化剂、 甜味剂、 包衣剂等。 该组合物可 以按照药学领域常规的制备方法来制备, 并可制成各种常规的剂型, 例如片剂、 包衣片剂、 胶囊、 粉剂等。

本发明的另一目的是提供如通式①所示的脲类 化合物在制备预 防或治疗炎症反应、 免疫亢进和器官移植排斥的药物中的用途。 附图说明 图 1为经典途径 C4成分的化合物 11的 450 nm处的 OD值。 图 2为经典途径 C3成分的化合物 11的 450 nm处的 OD值。 图 3为经典途径 C9成分的化合物 11的 450 nm处的 OD值。 图 4为经典途径 C5b-9成分的化合物 11的 450 nm处的 OD值。 图 5为甘露糖途径 C4成分的化合物 11的 450 nm处的 OD值。 图 6为甘露糖途径 C3成分的化合物 11的 450 nm处的 OD值。 图 7为甘露糖途径 C9成分的化合物 11的 450 nm处的 OD值。 图 8为甘露糖途径 C5b-9成分的化合物 11的 450 nm处的 OD值。 图 9为旁路途径 C3成分的化合物 11的 450 nm处的 OD值。 图 10为旁路途径 C9成分的化合物 11的 450 nm处的 OD值。 图 11为旁路途径 C5b-9成分的化合物 11的 450 nm处的 OD值。 具体实施方式 下面结合具体实施例对本发明作进一歩阐述, 但本发明不局限于 这些实施例。 化合物制备实施例

在下述制备实施例中, NMR用 Varian 生产的 Mercury- Vx 300M 仪器测定, NMR定标: 5 H 7.26 ppm ( CDC1 3 ); 质谱用 Agilent 1200 Quadrupole LC/MS液质联用仪; 试剂主要由上海化学试剂公司提供;

TLC 薄层层析硅胶板由山东烟台会友硅胶开发有限 公司生产, 型号 HSGF 254; 化合物纯化使用的正相柱层析硅胶为山东青岛 海洋化工 厂分厂生产, 型号 zcx-l l, 200-300目。 制备实施例 1 中间体 (S)-l-(3-羟基 -4-甲氧基苯基) -3-(1-苯基- 乙基) -尿素的合成

( 1 ) 3-苄氧基 - -甲氧基-苯甲醛

取异香兰素 (3.04g, 20nmol) 至 100ml圆底烧瓶, 加入 50ml丙 酮, 加入苄溴 (3.42g, 20nmol) , 无水 K 2 C0 3 (11 g, 80nmol), 加热回 流 12小时, TLC检测反应完全, 浓缩后所得残余物用乙酸乙酯和水 分层, 有机相加水、 饱和食盐水洗涤, 干燥浓缩, 得 3-苄氧基 -4-甲 氧基-苯甲醛 4.7g, 收率 98%。

lH NMR (300 MHz, CDC1 3 ): δ 3.95 (s, 3H), 5.18 (s, 2H), 6.977-7.006 (d, J = 8.7Hz, 1H), 7.312-7.40 (m, 2H), 7.45-7.47 (m, 5H), 9.816(s, 1H)。

(2) 3-苄氧基 -4-甲氧基-苯甲酸 将 3-苄氧基 -4-甲氧基-苯甲醛(1.08g, 4.46mmol)和磷酸二氢钠 (0.16g, 0.134mmol)溶于 25ml乙腈 /5ml 水中,加入 30%¾O 2 (159mg, 4.69mmol),冰水浴冷却, 然后缓慢滴加亚氯酸钠(0.562g, 6.24mmol) /8ml水, 滴加温度不超过 10°C, 加完, 室温搅拌过夜。 TLC检测反 应完全, 加 10%NaS 2 O 3 溶液淬灭反应, 乙酸乙酯萃取, 有机相加水 洗涤。 有机相再加 10%NaHCO 3 溶液洗涤, 水相加 1N HC1酸化, 乙 酸乙酯萃取 3次, 合并有机相加水、 饱和食盐水洗涤, 干燥浓缩, 得 白色固体 3-苄氧基 -4-甲氧基-苯甲酸 0.78g, 收率 72%。

lR NMR (300 MHz, CDC1 3 ): δ 3.98 (s, 3Η), 5.22 (s, 2H), 6.99-7.0021 (d, J=9Hz, 1H), 7.332-7.45 (m, 2H), 7.45-7.47 (m, 5H)。

(3 ) 3-苄氧基 -4-甲氧基-苯基异氰酸酯

将 3-苄氧基 -4-甲氧基-苯甲酸 (0.78g, 3mmol) 悬浮于 10ml苯 中, 氩气保护下加入重蒸三乙胺 (323mg, 3.1mmol), 冰水浴冷却, 滴加 DPPA(831mg, 3mmol), 加完后在 0°C搅拌 2小时, 室温搅拌 2 小时, 加 10ml苯稀释, 用水、 饱和食盐水洗涤, 再用无水硫酸镁干 燥 1小时。

滤去干燥剂后, 苯溶液加热回流 2小时, TLC检测反应完全, 冷 却浓缩得 3-苄氧基 -4-甲氧基-苯基异氰酸酯, 中间体不稳定, 直接进 行下歩反应。

- 1 -(3-苄氧基 -4-甲氧基苯基) -3-( 1 -苯基-乙基) -尿素

将上歩所得的粗产物 3-苄氧基 -4-甲氧基 -苯基异氰酸酯溶于 5ml 二氯甲烷, 加入 (S)-a-苯乙胺 lg, 室温搅拌 10分钟, 出现白色固体, TLC检测反应完全, 加石油醚稀释, 过滤得到白色固体为 (S)-l-P-苄 氧基 -4-甲氧基苯基) -3-(1-苯基-乙基) -尿素 537mg, 两歩收率 48%。 NMR (300 MHz, CDC1 3 ): δ 1.416-1.44(d, J=7.2 Hz, 3H), 3.85 (s, 3H), 4.803-4.828(d, J=7.5 Hz, 1H ), 4.935-4.982 (m, 1H), 5.08 (s, 2H), 5.998 (s, 1H), 6.69-6.72 (m, 1H), 6.80-6.82 (d, J= 6Hz, 1H), 6.88-6.89 (d J= 2Hz, 1H), 7.24-7.419 (m, 10H)。

-l-(3-羟基 -4-甲氧基苯基) -3-(l-苯基-乙基) -尿素

向 (S)-l-(3-苄氧基 -4-甲氧基苯基) -3-(1-苯基-乙基) -尿素 (389mg, 1.03mmol), 5%Pd/C(40mg)中加入 lOmlDMF (Ν,Ν-二甲基甲酰胺), 在 latm的 ¾, 室温搅拌下过夜, TLC检测反应完全, 滤去催化剂, 加水, 乙酸乙酯萃取 3次, 合并有机相加水、 饱和食盐水洗涤, 干燥 浓缩, 得白色固体 (S)-l-(3-羟基 -4-甲氧基苯基 )-3-(1-苯基-乙基) -尿素 0.25g, 收率 85%。

Ά NMR (300 MHz, CDC1 3 ): δ 1.395-1.418(d, J=6.9 Hz, 3H), 3.824(s, 3H), 4.911-4.959 (m, 1H), 5.265-5.290(d, J=7.5 Hz, 1H ), 5.863 (s, 1H), 6.70-6.77(m, 3H), 7.24-7.30(m, 5H)。 制备实施例 2 (S)-l-(3-丁氧基 -4-甲氧基苯基) -3-(l-苯基-乙基) - 尿

将 (S)-l-(3-羟基 -4-甲氧基苯基) -3-(1-苯基-乙基) -尿素 (20mg, 0.07mmol),正丁基溴烷 0.1ml,无水碳酸钾 80mg,催化量的 18-冠 -6, 2ml DMF混合, 室温搅拌过夜。 TLC检测反应完全。 加水、 乙酸乙 酯分层, 水相加乙酸乙酯萃取 3次, 合并有机相加水、饱和食盐水洗 涤, 干燥浓缩, 得白色固体 (S)-l-(3-丁氧基 -4-甲氧基苯基) -3-(1-苯基- 乙基) -尿素 23mg, 收率 96%。

^NMR (300 MHz, CDC13): δ 0.904-0.95 (t, 3H) ,1.388-1.406(d, J=5.4 Hz, 3H), 1.40-1.49 l(m,2H), 1.709-1.805(m,2H), 3.79(s, 3H), 3.901-3.923(t,2H), 4.926-4.973 (m, IH), 5.397-5.423(d, J=7.8Hz, IH ), 6.578-6.612 (dd, IH), 6.709-6.737 (d, J = 8.4Hz, IH), 6.81(s,lH), 6.983-6.989 (d, J =1.8Hz, IH), 7.24-7.3 l(m, 5H)。 制备实施例 3 (S)-l-(3-戊氧基 -4-甲氧基苯基) -3-(l-苯基-乙基) - 尿素

除了以相应摩尔数的正戊基溴烷代替正丁基溴 垸以外,按照与制 备实施例 2相同的方法制得 (S)-l-(3-戊氧基 -4-甲氧基苯基) -3-(1-苯基- 乙基:) -尿素。

lU NMR (CDC13, 300 MHz): δΙ.38-1.41 (t, 3H) ,1.388-1.406(d, J=5.4 Hz, 3H), 1.40-1.49 l(m,2H), 1.709-1.805(m,2H), 3.79(s, 3H), 3.901-3.923(t,2H), 4.926-4.973 (m, IH), 5.397-5.423(d Hz, J=7.8, IH ), 6.578-6.612 (dd, IH), 6.709-6.737 (d, J = 8.4Hz, IH), 6.81(s,lH), 6.983-6.989 (d, J =1.8Hz, IH), 7.24-7.3 l(m, 5H)。 制备实施例 4 (S)-l-(3-己氧基 -4-甲氧基苯基) -3-(l-苯基-乙基) - 尿素

除了以相应摩尔数的正己基溴烷代替正丁基溴 烷以外,按照与制 备实施例 2相同的方法制得 (S)-l-(3-己氧基 -4-甲氧基苯基) -3-(1-苯基- 乙基:) -尿素。 Ή NMR (CDC13, 300 MHz): δ 0.84-0.88(t,3H), 1.26-1.32(m,6H), 1.33-1.36 (d,J=7.2Hz,3H), 1.72-1.77 (m,2H), 3.77(s,3H), 3.84-3.88(t,2H), 4.89-4.94(m,lH), 5.63-5.66 (d,lH),

6.55-6.58(dd,Jl=2.1Hz,J2=8.4Hz,lH), 6.67-6.70(d, J=8.4Hz,lH), 7.02-7.03 (d,J=2.1Hz, 1H), 7.11(s,lH), 7.21-7.28(m,5H)。 制备实施例 5 (S)-l-(3- (戊 -4-錄基氧基) -4-甲氧基苯基) -3-(l-苯 基-

化合物 5

除了以相应摩尔数的 5-溴戊 -1-烯代替正丁基溴烷以外, 按照与 制备实施例 2 相同的方法制得 (S)-l-(3- (戊 -4-烯基氧基 )-4-甲氧基苯 基 )- 3 - (1 -苯基-乙基) -尿素。

^ NMR (CDC13, 300 MHz): δ 1.36-1.38(d,J=6.6Hz,3H), 1.83-1.88 (m,2H), 2.15-2.17(m,2H), 3.78(s,3H), 3.87-3.91(t,2H),

4.93-4.97(m,3H), 5.46(s,lH), 5.79-5.82 (m,lH),

6.60-6.63(dd,Jl=2.1Hz,J2=8.4Hz,lH), 6.69-6.72 (d,J=8.4Hz,lH), 6.99-7.00 (d,J=2.1Hz, 1H), 7.19-7.26(m,5H)。 制备实施例 6 (S)-l-(3- (丁 -3-錄基氧基) -4-甲氧基苯基) -3-(l-苯 基-

化合物 6

除了以相应摩尔数的 4-溴丁 -1-烯代替正丁基溴烷以外, 按照与 制备实施例 2 相同的方法制得 (S)-l-(3- (丁 -3-烯基氧基: )-4-甲氧基苯 基 )- 3 - (1 -苯基-乙基) -尿素。

^ NMR (CDC13, 300 MHz): δ 1.42-1.44(d,J=6.6Hz,3H), 1.70-1.72 (m,2H), 3.81(s,3H), 3.92-4.00(t,2H), 4.94-4.99(m,lH), 5.07-5.17(m,2H), 5.785-5.92 (m, lH), 6.43-6.46 (m,lH), 6.61-6.64(m,lH) 6.74-6.77 (d,J=8.4 Hz, 1H), 6.93-6.95(dd,Jl=2.1Hz,J2=8.4Hz,lH), 7.19-7.33(m,5H)。 制备实施例 7 (S)-l-(3- (戊 -2-炔基氧基) -4-甲氧基苯基) -3-(1-苯 基-

除了以相应摩尔数的 1-溴戊 -2-炔代替正丁基溴烷以外, 按照与 制备实施例 2 相同的方法制得 (S)-l-(3- (戊 -2-炔基氧基 )-4-甲氧基苯 基 )- 3 - (1 -苯基-乙基) -尿素。

¾ NMR (CDC13, 300 MHz) : δ 1.06-1.11 (t,3H), 1.43-1.45(d,J=6.6Hz,3H), 2.13-2.21(m,2H), 3.83(s,3H), 4.66(s,2H), 4.95-5.05(m,2H), 6.23(s,lH), 6.78(s,2H), 6.97(s,lH), 7.28-7.34(m, 5H)。 制备实施例 8 (S)-l-(3-异戊基氧基 -4-甲氧基苯基) -3-(l-苯基- 乙基 -尿素的合成

除了以相应摩尔数的异戊基溴烷代替正丁基溴 烷以外,按照与制 备实施例 2相同的方法制得 (S)-l-(3-异戊基氧基 -4-甲氧基苯基 )-3-(1- 苯基-乙基) -尿素。

^ NMR (CDC13, 300 MHz): δ 0.91 -0.93 (d,J=6Hz,6H), 1.39-1.41(d, J=6.6Hz, 3H), 1.65-1.80 (m,3H), 3.80(s,3H), 3.91-3.96 (t,2H), 4.93-4.98(m,lH), 5.30-5.33(d,lH), 6.58-6.62 (dd,

Jl=2.1Hz,J2=8.4Hz,lH), 6.66 (s,lH), 6.75-6.72 (d,J=8.4 Hz, 1H), 6.97-6.98(d,J=2.1Hz,lH), 7.22-7.31 (m,5H)。 制备实施例 9 (S)-l-(3- (环己基甲氧基 )-4-甲氧基苯基) -3-(l-苯 基- -尿素的合成

除了以相应摩尔数的溴甲基环己烷代替正丁基 溴烷以外,按照与 制备实施例 2 相同的方法制得 (S)-l-(3- (环己基甲氧基:) -4-甲氧基苯 基 )- 3 - (1 -苯基-乙基) -尿素。

¾ NMR (CDC13, 300 MHz): δ 0.97- 1.01 ( m,2H), 1.22-1.30(m, 5H) : 1.43-1.45 ( d, J=6.6 Hz, 3H ) , 1.71-1.76(m,2H), 1.85-1.88 (m,2H), 3.71-3.73(d, J=6.2 Hz, 2H), 3.82(s, 3H), 4.98-5.00 (m,2H), 6.21(s,lH), 6.63-6.65 (dd,Jl=8.7Hz, J2=2.1Hz, IH), 6.75-6.78 (d, J=8.7Hz, IH), 6.90-6.9 l(d,J=2.1Hz, IH), 7.28-7.32(m, 5H)。 制备实施例 10 (S)-l-(3- (氧杂环丙烷 -2-基甲氧基) -4-甲氧基苯 基) -3 合成

除了以相应摩尔数的 2- (溴甲基)氧杂环丙烷代替正丁基溴烷以 外,按照与制备实施例 2相同的方法制得 (S)-l-(3- (氧杂环丙烷 -2-基甲 氧基) -4-甲氧基苯基) -3-(1 -苯基-乙基) -尿素。

¾ NMR (CDC13, 300 MHz): δ 1.38-1.41 (d, J=6.6 Hz, 3H) , 2.63-2.67(m,lH), 2.80-2.83(m,lH), 3.29-3.32(m,lH), 3.79(s, 3H), 3.83-3.90(m,lH), 4.14-4.21 (dt, IH), 4.91-4.96 (m,lH), 5.40-5.42(d,J=7.2Hz,lH), 6.64-6.78 (m,2H), 7.00-7.02(m,lH), 7.20-7.3 l(m, 5H)。 制备实施例 11 (S)-l-(4-甲氧基 -3- (4-甲基戊氧基) -苯基 )-3-(1- 苯基-乙基) -尿素的合成

( 1 ) 3- (4-甲基戊氧基) -4-甲氧基-苯甲醛

取异香兰素(3.04g, 20nmol)至 100ml圆底烧瓶,加入 15mlDMF, 加入 4-甲基 -1-溴戊烷 (3.465g, 21nmol) , 无水 K 2 C0 3 (l lg, 80nmol), 。·[¾、「/ ΐ薪士翁邈 W z M oO '(i '§6-e)vdcia 'WW ¾ om n ' ιας·ζ) ¾(2三蘩軍 Υΰ 丄 t^^ 霄 '^WO£-i (i '^ οτ)纖 - (¾¾¾ϊ¾ώ ) -e#

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6l.l00/ZT0ZN3/X3d S8ZT60/C10Z OAV 反应完全, 冷却 中间体不稳定,

化合物 11 将上歩所得的粗产物 3- (4-甲基戊氧基) -4-甲氧基 -苯基异氰酸 酯溶于 50ml二氯甲烷,加入 (S)-a-苯乙胺 3g,室温搅拌 10分钟, TLC 检测反应完全, 反应液减压除去大部分溶剂, 加入石油醚 /乙酸乙酯 =5/1溶剂 20ml, 室温搅拌 1小时, 析出 3g白色固体, 为 (S)-l-(3- (4- 甲基戊氧基) -4-甲氧基苯基 )-3-(1-苯基-乙基) -尿素。 两歩收率 67%。

¾ NMR (300 MHz, CDC13): δ 0.898-0.929 (d, J=6.6 Hz, 6H) , 1.265-1.341(m,2H), 1.457-1.481(d, J=7.2 Hz, 3H), 1.539-1.617(m, IH), 1.805-1.857(m,2H), 3.842(s, 3H), 3.872-3.945(t,2H), 4.825-4.850 (d,J=7.5 Hz, IH), 4.974-4.996(m, IH ), 5.98 (s, IH), 6.635-6.672 (dd, J=8.7 Hz, 2.4 Hz, IH), 6.775-6.804(d,J=8.7 Hz, IH), 6.877-6.885(d,J=2.4 Hz, IH), 7.267-7.365(m, 5H)。 制备实施例 12 (S)-l-(3-羟基丙基) -3-[4-甲氧基 -3-(4-甲基戊氧 基) -苯基】-1-(1-苯基-乙基) -尿素

-3- ( 1-苯基 -乙基氨基) -丙烷 -1-醇

向(S)-a-苯乙胺 ( 2.5g, 20.6mmol ) 和 3-氯 -1-丙醇 (0.973mg, 10.3mmol) 中加入 lml水, 加热至 100°C 6小时, 停止加热, 加苯稀 释, 加水、 饱和食盐水洗涤, 干燥浓缩, 硅胶柱层析 (二氯甲烷 /甲 醇 =10/1 洗脱) 得一油状物 (S)-3- ( 1-苯基 -乙基氨基) -丙烷 -1-醇, 500mg, 收率 27%。

lR NMR (300 MHz, CDC13): δ 1.358-1.380 (d, J=6.6 Hz, 6H) , 1.609-1.728(m, 2H), 2.611-2.676(m, 1H), 2.6190-2.782(m, 1H), 3.701-3.713 (m,2H), 3.715-3.783(m,lH), 7.26-7.36(m, 5H)。

( 2 ) (S)-l-(3-羟基丙基 )-3-[4-甲氧基 -3-(4-甲基戊氧基) -苯 基] -1-(1-苯基-乙基) -尿素

化合物 12 按照上述制备实施例 11 (3 )相同的方法, 以 3- (4-甲基戊氧基) -4-甲氧基-苯甲酸 (150mg) 为原料制备得 3- (4-甲基戊氧基) -4-甲 氧基-苯基异氰酸酯, 该异氰酸酯溶于 10ml二氯甲烷, 加入 (S)-3- ( l- 苯基 -乙基氨基) -丙烷 -1-醇, 室温搅拌 10分钟, TLC检测反应完全, 减压浓缩反应液。 硅胶柱层析 (石油醚 /乙酸乙酯 =5/1 洗脱) 得白色 固体 (S)-l-(3-羟基丙基) -3-[4-甲氧基 -3-(4-甲基戊氧基) -苯基 ]-1-(1-苯 基-乙基)-尿素, 150mg, 收率 59%。

! H NMR (300 MHz, CDC13): δ 0.88-0.902 (d, J=6.6 Hz, 6H) , 1.246-1.33(m,2H), 1.454-1.505(m, 3H), 1.569-1.593(d, J=7.2 Hz, 3H), 1.754-1.830(m,2H), 3.301-3.358(m,2H), 3.573-3.588(m,2H), 3.78(s, 3H), 3.922-3.968(t,2H), 5.542-5.567(m, 1H ), 6.68-6.695 (m, 2H), 7.26-7.35(m, 6H)。 制备实施例 13 (S)-l-(3-氨基丙基) -3-[4-甲氧基 -3-(4-甲基戊氧 基) - 尿素

除了以相应摩尔数的 3-氯丙烷 -1-胺代替制备实施例 12 ( 1 )中的 3-氯 -1-丙醇以外,按照与制备实施例 12相同的方法制得 (S)-l-(3-氨基 丙基) -3-[4-甲氧基 -3-(4-甲基戊氧基) -苯基 ]小(1-苯基-乙基) -尿素。

¾ NMR (CDC13, 300 MHz) : δ 0.89-0.91(d,J=6.6Hz,6H), 1.25-1.35(m,2H), 1.57-1.59(d,J=7.2Hz,3H), 1.55-1.64(m,lH), 1.78-1.88(m,2H), 2.22-2.24(m,2H), 3.25-3.32 (m,2H), 3.80(s,3H), 3.96-4.0 l(t,2H), 5.71-5.74 (m,lH), 6.72-6.80 (m,2H), 7.23-7.25 (m,lH), 7.27-7.37(m,5H), 9.09(s,lH)。 制备实施例 14 (S)-l-(2-羟基乙基) -3-[4-甲氧基 -3-(4-甲基戊氧 基) - -1-(1-苯基-乙基) -尿素 除了以相应摩尔数的 2-氯 -1-乙醇代替制备实施例 12 ( 1 ) 中的 3-氯 -1-丙醇以外,按照与制备实施例 12相同的方法制得 (S)-l-P-羟基 乙基) -3-[4-甲氧基 -3-(4-甲基戊氧基) -苯基 ]小(1-苯基-乙基) -尿素。

lR NMR (CDC13, 300 MHz) : δ 0.88-0.90(d,J=6.6Hz,6H), 1.25-1.34(m,2H), 1.54-1.56(d,J=7.2Hz,3H), 1.55-1.63(m,lH), 1.77-1.86(m,2H), 3.26-3.38(m,4H), 3.79(s,3H), 3.93-3.98(t,2H), 5.63-5.65(m,lH), 6.65-6.71 (m,2H), 7.15(s,lH), 7.23-7.37(m,5H), 8.14-8.18(d,lH)。 制备实施例 15 (S)-l-(3-丁氧基 -5-甲氧基苯基) -3-(l-苯基-乙基) - 尿素 除了以相应摩尔数的 3-羟基 -5-甲氧基苯甲醛代替制备实施例 11 中的异香兰素, 并以 1-溴丁烷代替 4-甲基 -1-溴戊烷以外, 按照与制 备实施例 11相同的方法制得 (S)-l-(3-丁氧基 -5-甲氧基苯基: )-3-(1-苯基 -乙基:) -尿素。

^ NMR (CDC13, 300 MHz): δ 0.86-0.90(t,3H), 1.34-1.1.37(m,2H), 1.42-1.44 (d,J=6.6Hz,3H), 1.63-1.73(m,2H), 3.70(s,lH), 3.82-3.86(t,2H), 4.92-4.94(m,lH), 5.35-5.37 (d,lH), 6.15-6.16(m, lH), 6.42-6.47(dd,2H), 6.64(s,lH), 7.27-7.30(m,5H) o 制备实施例 16 (S)-3-(3-丁氧基 -4-甲氧基 -苯基 )-1-甲基 -1-(1-苯 基-乙基) -尿素

化合物 16

按照上述制备实施例 3 (3 )相同的方法, 以 3-丁氧基 -4-甲氧基- 苯甲酸(50mg) 为原料制备得 3-丁氧基 -4-甲氧基-苯基异氰酸酯, 该 异氰酸酯溶于 5ml二氯甲烷, 加入 (S)-N-甲基 -1-苯乙胺 (50mg), 室 温搅拌 10分钟, TLC检测反应完全, 减压浓缩反应液。 硅胶柱层析 (石油醚 /乙酸乙酯 =5/1洗脱)得一白色固体 (S)-3-(3-丁氧基 -4-甲氧基 -苯基 )小甲基 -1-(1-苯基-乙基) -尿素, 41mg, 收率 55%。

¾ NMR (300 MHz, CDC13): 50.94-0.99(t,3H), 1.44-1.52(m,2H), 1.54-1.56(d,J=6.6Hz,3H), 1.77-1.85(m,2H), 2.73(s,3H), 3.82(s,3H), 3.99-4.03(t,2H), 5.72-5.75 (m,lH), 6.27(s,lH), 6.68-6.7 l(dd, Jl=8.4Hz, J2=2.1Hz, 1H), 6.75-6.78 (d, J = 8.4Hz, 1H), 7.26-7.27(d, J=2.1Hz, 1H), 7.26-7.30(m,5H) 制备实施例 17 l-(3-丁氧基 -4-甲氧基 -苯基 )-3-(l-苯基-丙基) -尿 素

除了以相应摩尔数的 1-苯基丙烷 -1-胺代替制备实施例 16 中的 (S)-N-甲基 -1-苯乙胺以外,按照与制备实施例 16相同的方法制得 1-(3- 丁氧基—4-甲氧基 -苯基 )-3-(1-苯基-丙基)-尿素。

¾ NMR (CDC13, 300 MHz): δ 0.86-0.91(t,3H), 0.94-0.99(t,3H), 1.43-1.53 (m,2H), 1.72-1.83(m,4H), 3.84(s,3H), 3.92-3.96 (t,2H), 4.73-4.75(m, 1H), 4.84-4.86( d,lH), 5.98(s,lH), 6.65-6.66 (dd,Jl=8.7Hz, J2=2.1Hz, 1H), 6.757-6.80 (d, J=8.7Hz, 1H), 6.88-6.89 (d,J=2.1Hz, 1H), 7.26-7.33(m, 5H)。 制备实施例 18 l-(3-丁氧基 -4-甲氧基 -苯基 )-3-(l- (吡啶 -4-基)乙 基) -

除了以相应摩尔数的 1- (吡啶 -4-基)乙胺代替制备实施例 16中的 (S)-N-甲基 -1-苯乙胺以外,按照与制备实施例 16相同的方法制得 1-(3- 丁氧基 -4-甲氧基 -苯基 )-3-(1- (吡啶 -4-基)乙基) -尿素。

¾ NMR (CDC13, 300 MHz) : δ 0.88-0.93(t,3H), 1.30-1.33(d,J=6.6Hz,3H), 1.45-1.53 (m,2H), 1.77-1.84(m,2H), 3.78(s,3H) : 3.91-3.93(m,2H), 4.89-4.93(m,lH), 5.65-5.67(m,lH),

6.55-6.59(d,J=8.4Hz, 1H), 6.70-6.74 (dd, J 1 =2.1 Hz, J2=8.4Hz, 1 H), 7.03-7.04 (d,J=2.1Hz,lH), 7.13-7.15(d,J=4.2Hz, 2H), 8.45-8.46 (d,

制备实施例 19 l-(3-丁氧基 -4-甲氧基 -苯基 )-3-(l- (吡啶 -3-基)乙 基) -

除了以相应摩尔数的 1- (吡啶 -3-基)乙胺代替制备实施例 16中的 (S)-N-甲基 -1-苯乙胺以外,按照与制备实施例 16相同的方法制得 1-(3- 丁氧基—4-甲氧基 -苯基 )-3-(1- (吡啶 -3-基)乙基) -尿素。 Ή NMR (CDC13, 300 MHz) : δ 0.90-0.97(t,3H), 1.38-1.40(d,J=6.6Hz,3H), 1.45-1.50(m,2H), 1.72-1.82(m,2H), 3.80(s,3H), 3.93-3.95(t,2H), 4.99-5.04(m,lH), 5.55-5.58 (m,lH),

6.60-6.64(dd,Jl=8.4Hz, J2=2.1Hz, IH), 6.72-6.75(d,J=8.4Hz, IH), 7.05-7.06(d, J=2.1Hz, IH), 7.18-7.27(m, 2H), 7.56-7.59(d, J=7.8Hz, 2H), 8.44-8.46 (d, J=6Hz, IH), 8.53(s,lH)。 制备实施例 20 (S)-l-(3-丁氧基 -4-甲氧基 -苯基 )-3-(l-对甲苯基- 乙基 -尿素

除了以相应摩尔数的 (S)-l-对甲苯基乙胺代替制备实施例 16中的 (S)-N-甲基 -1-苯乙胺以外, 按照与制备实施例 16 相同的方法制得 (S)-l-(3-丁氧基 -4-甲氧基 -苯基 )-3-(1-对甲苯基-乙基) -尿素。

¾ NMR (CDC13, 300 MHz) : δ 0.93-0.98(t,3H), 1.42-1.44(d,J=6.6Hz,3H), 1.43-1.50 (m,2H), 1.74-1.82(m,2H), 2.31(s,3H) : 3.82(s,3H), 3.93-3.95(t,2H), 4.93-4.96(m,lH), 5.00-5.03 (m, lH), 6.26(s,lH), 6.59-6.63 (dd,Jl=8.4Hz, J2=2.1Hz, IH), 6.75-6.77 (d, J=8.4Hz, IH), 6.92-6.93(d, J=2.1Hz, IH), 7.10-7.13(d, J=7.8Hz,2H), 7.17-7.20(d, J=7.8Hz, 2H)。 制备实施例 21 N-(3-丁氧基 -4-甲氧基苯基) -2-苯基吡咯烷 -1-酰 胺

除了以相应摩尔数的 2-苯基吡咯烷代替制备实施例 16 中的 (S)-N-甲基 -1-苯乙胺以外, 按照与制备实施例 16 相同的方法制得 N-(3-丁氧基 -4-甲氧基苯基) -2-苯基吡咯烷 -1-酰胺。 Ή NMR (CDC13, 300 MHz): δ 0.94-0.98(t,3H), 1.42-1.44(m,2H), 1.73-1.82 (m,2H), 1.82-1.98(m,4H), 2.41(m,lH), 3.23-3.28(m,lH), 3.77(s,3H), 3.94-3.96(t,2H), 4.85-4.95(m,lH), 5.91(s,lH), 6.29-6.33 (dd,Jl=8.4Hz, J2=2.1Hz, IH), 6.67-6.70 (d, J=8.4Hz, IH), 7.12-7.13(d, J=2.1Hz, IH), 7.27-7.41(m, 5H)。 制备实施例 22 (S)-l-(3-丁氧基 -4-甲氧基 -苯基 )-1-甲基 -3-(l-苯 基國 -尿素

化合物 22 以 (S)-l-(3-丁氧基 -4-甲氧基苯基) -3-(1-苯基-乙基) -尿素 (lOOmg) 为原料,加入 3ml无水 DMF,冷却至 0°C加入 NaH(24mg, 0.6mmol), 此温度保持 15分钟,升至室温半小时,加入碘甲烷(85mg, 0.6mmol), 室温搅拌半小时, TLC检测原料消失完全, 加 1M HC1猝灭反应, 加 30ml乙酸乙酯萃取, 用水 (1次:)、 饱和食盐水洗涤, 干燥浓缩, 硅胶 柱层析(石油醚 /乙酸乙酯 =8/1洗脱)得一白色固体 (S)-l-(3-丁氧基 -4- 甲氧基 -苯基 )-1-甲基 -3-(1-苯基-乙基) -尿素, 15mg, 收率 14%。

¾ NMR (CDC13, 300 MHz) : δ 0.95-1.00(t,3H), 1.33-1.35(d,J=6.6Hz,3H), 1.42-1.53 (m,2H), 1.77-1.84(m,2H), 3.12(s,3H) : 3.88(s,3H), 3.91-3.97(t,2H), 4.56-4.58(m,lH), 4.97-5.02(m,lH), 6.71-6.72(d, J=2.1Hz, IH), 6.76-6.80 (dd,Jl=8.4Hz, J2=2.1Hz, IH), 6.85-6.88 (d,J=8.4Hz, IH), 7.19-7.30(m,5H) 制备实施例 23 (S)-l-[l-(3-羟基-苯基) -乙基】-3-[4-甲氧基 -3-(4- 甲基-戊氧基) -苯基】 -尿素

按照上述制备实施例 11 (3 )相同的方法, 以 3- (4-甲基戊氧基) -4-甲氧基-苯甲酸 (50mg) 为原料制备得 3- (4-甲基戊氧基) -4-甲氧 基-苯基异氰酸酯,该异氰酸酯溶于 10ml二氯甲烷,加入 3-羟基 -(S)-a- 苯乙胺, 室温搅拌 10分钟, TLC检测反应完全, 减压浓缩反应液。 硅胶柱层析(石油醚 /乙酸乙酯 =2/1洗脱)得一白色固体 (S)-l-(3-羟基 苯基 )- 3 -[4-甲氧基 -3-(4-甲基戊氧基) -苯基 ]-1-(1-苯基-乙基) -尿素, 40mg, 收率 52%。

lR NMR (300 MHz, CDC13): δ 0.86-0.88 ( d, J=6.6 Hz, 6H) , 1.24-1.33(m,2H), 1.43-1.46(d, J=7.2 Hz, 3H), 1.56-1.61(m, 1H), 1.75-1.78(m,2H), 3.78(s, 3H), 3.84-3.89(t,2H), 4.82-4.871(m,lH), 5.17-5.19(m, 1H ), 6.56-6.60(m,2H), 6.69-6.75 (m, 2H), 6.98-6 HN.99(m, 1H), 7.12-7.24(m, 2H)。 HN 制备实施例 24 l-(l-(2-氟苯基) -乙基 )-3-[4-甲氧基 -3-(4-甲基-戊 氧基 -苯基】 -尿素

化合物 24

除了以相应摩尔数的 1-(2-氟苯基)乙胺代替制备实施例 11(4)中 的 (S)-a-苯乙胺以外, 按照与制备实施例 11相同的方法制得 1-(1-(2- 氟苯基) -乙基 )-3-[4-甲氧基 -3-(4-甲基-戊氧基) -苯基] -尿素。

! H NMR (CDC13, 300 MHz) : δ 0.88-0.90(d,J=6.6Hz,6H), 1.24-1.32(m,2H), 1.43-1.45(d,J=6.9Hz,3H), 1.53-1.60(m,lH), 1.76-1.86(m,2H), 3.83(s,3H), 3.89-3.94(t,2H), 5.14-5.19(m,lH), 5.38-5.41(d,lH), 6.51(s,lH), 6.63-6.67(dd,Jl=2.1Hz,J2=8.4Hz,lH) 6.76-6.79(d,J=8.4Hz,lH), 6.97-6.97(d, J=2.1Hz,lH), 6.99-7.08(m,2H) 7.17-7.28(m,2H)。 制备实施例 25 (S)-l-(l-(4-氟苯基) -乙基 )-3-[4-甲氧基 -3-(4-甲基 -戊

除了以相应摩尔数的 (S)-l-(4-氟苯基:)乙胺代替制备实施例 11(4) 中的 (S)-a-苯乙胺以外, 按照与制备实施例 11 相同的方法制得 (S)-l-(l-(4-氟苯基)-乙基) -3-[4-甲氧基 -3-(4-甲基-戊氧基) -苯基]-尿素。

¾ NMR (CDC13, 300 MHz): δ 0.89-0.92(d,J=6.6Hz,6H),

1.23- 1.34(m,2H), l.42-1.44(d,J=6.6Hz,3H), 1.53-1.60(m,lH), 1.77-1.87(m,2H), 3.84(s,3H), 3.89-3.94(t,2H), 4.85-4.88(d,2H), 4.96-5.00(m,lH), 6.10(s,lH), 6.63-6.67(dd,Jl=2.1Hz,J2=8.4Hz,lH), 6.77-6.80(d,J=8.4Hz,lH), 6.88-6.89(d,J=2.1Hz,lH), 6.96-7.02(m,2H),

7.24- 7.29(m,2H)。 制备实施例 26 l-(l-(3,5-二氟苯基) -乙基 )-3-[4-甲氧基 -3-(4-甲基 -戊

除了以相应摩尔数的 1-(3,5-二氟苯基:)乙胺代替制备实施例 11(4) 中的 (S)-a-苯乙胺以外, 按照与制备实施例 11 相同的方法制得 1-(1-(3,5-二氟苯基) -乙基 )-3-[4-甲氧基 -3-(4-甲基-戊氧基) -苯基] -尿 素。

lR NMR (CDC13, 300 MHz): δ 0.90-0.88(d,J=8.1Hz,6H), 1.25-1.36(m,2H), 1.36-1.38(d,J=7.2Hz,3H), 1.56-1.63(m,lH), 1.77-1.85(m,2H), 3.84(s,3H), 3.90-3.95(t,2H), 4.93-4.98(m,lH), 5.11-5.13(d,lH), 6.49(s,lH)

6.64-6.67(m,lH),6.77-6.80(m,3H),6.95-6.96(d,lH)。 制备实施例 27 (S)-l-(l-(4-羟基苯基) -乙基 )-3-[4-甲氧基 -3-(4-甲 基- -苯基】 -尿素

除了以相应摩尔数的 (S)-4-(l-氨基乙基)苯酚代替制备实施例 11(4)中的 (S)-a-苯乙胺以外, 按照与制备实施例 11 相同的方法制得 (S)-l-(l-(4-羟基苯基) -乙基 )-3-[4-甲氧基 -3-(4-甲基-戊氧基) -苯基] -尿 素。

lR NMR (CDC13, 300 MHz): δ 0.84-0.88 (d, J=6.6 Hz, 6H) , 1.21-1.26(m,2H), 1.33-1.35(d, J=7.2 Hz, 3H), 1.56-1.63(m, 1H), 1.79-1.85(m,2H), 3.76(s, 3H), 3.82-3.87(t,2H), 4.81-4.83(m,lH), 5.31-5.34(m, 1H ), 6.56-6.69(m,3H), 6.94-7.01 (m, 3H), 7.25-7.28(m,lH)。 制备实施例 28 (S)-l-(l-(4-甲氧基羰基苯基) -乙基 )-3-[4-甲氧基 _ 3 _ (4

除了以相应摩尔数的 (S)-l-(4-甲氧基羰基苯基:)乙胺代替制备实 施例 11(4)中的 (S)-a-苯乙胺以外, 按照与制备实施例 11相同的方法 制得 (S)-l-(l-(4-甲氧基羰基苯基) -乙基 )-3-[4-甲氧基 -3-(4-甲基 -戊氧 基:) -苯基] -尿素。

! H NMR (CDC13, 300 MHz): δ 0.85-0.89 (d, J=6.6 Hz, 6H) , 1.23-1.27(m,2H), 1.36-1.38(d, J=7.2 Hz, 3H), 1.51-1.58(m, 1H), 1.74-1.8 l(m,2H), 3.78(s, 3H), 3.88(s, 3H), 3.86-3.91(t,2H), 4.97-5.02(m, lH), 5.33-5.36(m, 1H ), 6.56-6.60(m, lH), 6.72-6.75 (m, 2H) 6.98 (s, 1H), 7.25-7.32(d, J=7.8 Hz, 2H), 7.92-7.95(d, J=7.8 Hz, 2H)。 制备实施例 29 (S)-l-[6-甲氧基 -5-(4-甲基-戊氧基 )-3-吡啶 基】 -3-(1-苯基-乙基) -尿素

( 1 ) 6-甲 基 -5-(4-甲基-戊氧基) -烟酸甲酯

参考文據 Molecular Simulation, Vol. 33, No. 14, December 2007, 1109-1117合成方法, 得到中间体 6-甲氧基 -5羟基 -3-烟酸甲酯。

取 6-甲氧基 -5羟基 -3-烟酸甲酯 (45mg,0.24mmol) 至 10ml圆底 烧瓶, 加入 2mlDMF, 加入 4-甲基 -1-溴戊烷(31mg, 0.269mmol), 无 水 K 2 C0 3 (138g, lmmol), 室温搅拌过夜, TLC检测反应完全, 加乙酸 乙酯和水分层, 乙酸乙酯萃取 2次, 合并有机相加水、饱和食盐水洗 涤, 干燥浓缩。 硅胶柱层析 (石油醚 /乙酸乙酯 =10/1洗脱)得 6-甲氧 基 - 5 -(4-甲基-戊氧基) -烟酸甲酯 61mg, 收率 94%。

U NMR (300 MHz, CDC13): δ 0.880-0.902 ( d, J=6.6 Hz, 6H) , 1.291-1.344(m,2H), 1.503-1.650(m, 1H), 1.806-1.860(m,2H), 3.876(s, 3H), 3.966-4.026(t, 2H), 4.031(s,3H), 7.538 (s, 1H), 8.37(s, 1H)。

-甲氧基 -5-(4-甲基-戊氧基) -烟酸 将 6-甲氧基 -5-(4-甲基-戊氧基) -烟酸甲酯 (60mg, 0.22mmol) 溶 于 4ml甲醇 /lml水中, 加入 50mg氢氧化锂, 室温搅拌过夜, TLC检 测反应完全, 浓缩, 加压除去大部分甲醇, 加 1N HC1中和至酸性, 乙酸乙酯萃取 2次, 合并有机相加水、 饱和食盐水洗涤, 干燥浓缩, 得 52mg 6-甲氧基 -5-(4-甲基-戊氧基) -烟酸, 收率 93%。 Ή NMR (300 MHz, CDC13): δ 0.837-0.859 (d, J=6.6 Hz, 6H) 1.18-1.249(m,2H), 1.450-1.601(m, 1H), 1.719-1.860(m,2H) 3.831-3.921(t, 2H), 3.961(s, 3H), 7.432 (s, 1H), 8.333(s, 1H)。

( 3 ) 5-异 酸 -2-甲氧基 -3-(4-甲基-戊氧基) -吡啶 将 6-甲氧基 -5-(4-甲基-戊氧基) -烟酸 (50mg, 0.2mmol) 悬浮于 5ml苯中, 氩气保护下加入重蒸三乙胺 (0.1ml) , 冰水浴冷却, 滴加 DPPA(0.05ml), 加完 0°C搅拌 2小时, 室温搅拌 2小时, 加 5ml苯稀 释, 用水 (3次:)、 饱和食盐水洗涤, 无水硫酸镁干燥 1小时。

滤去干燥剂, 苯溶液加热回流 3.5小时, TLC检测反应完全, 冷 却浓缩得 5-异氰酸 -2-甲氧基 -3-(4-甲基 -戊氧基) -吡啶,中间体不稳定, 直接进行下歩反应。

将上歩所得的粗产物 5-异氰酸 -2-甲氧基 -3-(4-甲基 -戊氧基) -吡啶 溶于 5ml二氯甲烷,加入 (S)-a-苯乙胺 50mg,室温搅拌 10分钟, TLC 检测反应完全, 减压浓缩得一粗产物。 硅胶柱层析 (石油醚 /乙酸乙 酯 =2/1 洗脱) 得 (S)-l-[6-甲氧基 -5-(4-甲基-戊氧基 )-3-吡啶基 ]-3-(1-苯 基-乙基) -尿素 36mg, 两歩收率 49%。

¾ NMR (300 MHz, CDC13): δ 0.896-0.918 (d, J=6.6 Hz, 6H) , 1.237-1.336(m,2H), 1.476-1.498(d, J=6.6 Hz, 3H), 1.550-1.637(m, 1H), 1.784-1.885(m,2H), 3.909-3.965(t,2H), 3.964(s, 3H), 4.885-4.987 (m, 2H ), 6.151(s,lH), 7.267-7.399(m, 6H)。 实验实施例 1 化合物对总补体溶血活性的抑制实验

1、 检测目的:

检测化合物对经典途径总补体溶血活性的抑制 作用。

2、 实验原理:

补体是一组血浆蛋白质, 自然条件下以无活性的酶原形式存在。 特异性抗体与红细胞结合后通过经典途径激活 补体,导致红细胞表面 形成攻膜复合物, 其内径为 l lnm, 可让水和电解质通过却不能让大 分子穿行。大量攻膜复合物的形成造成水分因 渗透压的巨大差异而进 入胞内, 引起红细胞肿胀发生溶血。 绵羊红细胞购自上海嘉宸生物技术有限公司; 正常人血清,自提; 溶血素 (抗绵羊红细胞抗体), sigma公司产品

4、 实验方法:

取绵羊红细胞悬液, 用巴比妥缓冲液 DGVB++清洗并稀释, 1 :3000加入溶血素, 37°C lOOcpm孵育 20分钟使绵羊红细胞致敏。 用 DGVB++缓冲液清洗并稀释致敏后的绵羊红细胞, 加入正常人血 清及不同浓度的受试样品, 37°C 240cpm孵育 1小时后离心, 取上清 液, 405nm波长下检测 OD值, 以 50%溶血状态为对照, 检测样品孔 的溶血程度。

5、 实验结果:

表 1 化合物对经典途径总补体溶血活性的抑制作用

化合物 8 61.7 化合物 24 158

化合物 9 471 化合物 25 309

化合物 10 277 化合物 26 502

化合物 11 26 化合物 27 139

化合物 12 221 化合物 28 535

化合物 14 321 化合物 29 277

化合物 15 279 BCX1470 <152

19.6

阳性对照 2-噻吩甲酸 2-脉基苯并噻玢 -6-酯甲磺酸盐(BCX1470) 的结果表明本测试方法和试验结果是可靠的。 根据上述对经典途径总 补体溶血活性的抑制作用的测试作用结果,本 发明所得化合物对经典 途径补体溶血活性有很好的抑制作用,其最好 化合物的活性 IC 5Q 可以 达到 20ΉΜ。 实验实施例 2 补体成分沉淀实验

1、 检测目的

对于具有总补体溶血活性抑制作用的化合物, 检测其作用靶点。

2、 实验原理

分别用三种补体系统活化物包被酶标板, 加入正常人血清 37°C 孵育后, 血清中的补体成分被活化物激活并发生级联反 应, 后加入特 异性抗补体成分蛋白的抗体, 再与 HRP (辣根过氧化物酶)偶联的抗体 结合,形成抗体 -抗原 -酶标抗体复合物, 经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。 ΤΜΒ(3,3',5,5'-四甲基联苯胺:)在 HRP酶的催化下转化成蓝色, 并在酸的作用下转化成最终的黄色,颜色的深 浅和补体成分蛋白的含 量呈正相关。 兔抗人 C3d抗体, 兔抗人 C4c抗体及 HRP偶联的羊抗兔抗体, 均购于 DAKO

鼠抗人 C9抗体及鼠抗人 C5b-9抗体, 购于 abeam

HRP偶联的羊抗鼠抗体及 IgM, 购于北京博奥森

Mannan及 zymosan, 贝勾于 sigma 4、 实验方法

实验前一天用 lOug/mL IgM (经典途径)、 lOOug/mL mannan (甘 露糖途径) 或 20ug/mL zymosan (旁路途径) 包被酶标板, 4°C过夜。 实验当天用含 10%血清的 PBS进行封闭, 然后加入正常人血清及不 同浓度的受试样品, 37°C孵育 1小时。 分别加入抗补体 C3成分、 C4 成分或 C9成分的一抗及偶联 HRP的二抗, TMB显色 30分钟, 450nm 波长下测定 OD值。

5、 实验结果

实验结果如图 1至图 11所示,其中, 图 1为经典途径 C4成分的 化合物 11的 450 nm处的 OD值; 图 2为经典途径 C3成分的化合物 11的 450 nm处的 OD值;图 3为经典途径 C9成分的化合物 11的 450 nm处的 OD值; 图 4为经典途径 C5b-9成分的化合物 11的 450 nm 处的 OD值; 图 5为甘露糖途径 C4成分的化合物 11的 450 nm处的 OD值; 图 6为甘露糖途径 C3成分的化合物 11的 450 nm处的 OD 值; 图 7为甘露糖途径 C9成分的化合物 11的 450 nm处的 OD值; 图 8为甘露糖途径 C5b-9成分的化合物 11的 450 nm处的 OD值; 图 9为旁路途径 C3成分的化合物 11的 450 nm处的 OD值; 图 10为旁 路途径 C9成分的化合物 11的 450 nm处的 OD值;图 11为旁路途径 C5b-9成分的化合物 11的 450 nm处的 OD值。 从图中可以看出, 该 类化合物对不论何种途径激活 C4/C3抑制作用都不大,但对 3条激活 途径末端通路均具有抑制作用, 表明该化合物的靶点为 C9, 可以制 备出具有新的靶点治疗炎症反应、免疫亢进以 及器官移植排斥等方面 的药物。