| WO/2003/106474 | GANGLIOSIDES WITH A MODIFIED ACYL FUNCTION |
| WO/1992/010212 | ANTHRACYCLINE-CONJUGATES |
| JP60178898 | NOVEL REDUCTION-MODIFIED COMPOUND OF GLYCYRRHIZIN AND PREPARATION THEREOF |
Llebaria Soldevilla, Amadeu (C/Gall, 30-36, Esplugues de Llobregat, E-08950, ES)
Lagunas Arnal, Carmen (C/Gall, 30-36, Esplugues de Llobregat, E-08950, ES)
Fernández García, Andrés (C/Gall, 30-36, Esplugues de Llobregat, E-08950, ES)
Pérez González, Juan Jésus (C/Jordi Girona 31, Barcelona, E-08034, ES)
Llebaria Soldevilla, Amadeu (C/Gall, 30-36, Esplugues de Llobregat, E-08950, ES)
Lagunas Arnal, Carmen (C/Gall, 30-36, Esplugues de Llobregat, E-08950, ES)
Fernández García, Andrés (C/Gall, 30-36, Esplugues de Llobregat, E-08950, ES)
| 1. | Uso de un compuesto de fórmula (I) o de sus enantiómeros o de las mezclas de éstos, o de las sales farmacéuticamente aceptables de cualquiera de los anteriores, o de los solvatos farmacéuticamente aceptables de cualquiera de los anteriores; donde n es un número entero entre 0 y 4; R1 es un radical seleccionado del grupo que consiste en H, CH3, CH2CH3, C(CH3)3, COOH, CONH2 y C≡CH; R2, R3, R4 y R5 son radicales independientemente seleccionados del grupo que consiste en H, F, Cl, Br, (CiC3)alcoxilo y (CiC4)alquilo; y R6 es un radical seleccionado del grupo que consiste en H, F, Cl, Br, (C|C3)alcox¡lo, (CiC4)alquilo, R7, CH=CHR7 y OCH2R7; donde R7 es fenilo o un fenilo mono o disustituido independientemente por F, Cl, Br, (CiC3)alcoxilo o (dC4)alquilo; para Ia obtención de un medicamento para el tratamiento profiláctico y/o curativo de una dermopatía inflamatoria y/o alérgica. (I) . |
| 2. | Uso según Ia reivindicación 1 , donde n es un número entero entre 0 y 2. |
| 3. | Uso según Ia reivindicación 2, donde R2, R3, R4 y R5 son radicales independientemente seleccionados del grupo que consiste en H, F, Cl, Br, metoxilo y metilo; y R6 es un radical seleccionado del grupo que consiste en H, F, Cl, Br, metoxilo, metilo, 2fenilvinilo y fenilo. |
| 4. | Uso según Ia reivindicación 3, donde el compuesto de fórmula (I) es 4 metoxibencil 6O(βDglucopiranosil)βDglucopiranosido. |
| 5. | Uso según Ia reivindicación 3, donde el compuesto de fórmula (I) es bencil 60(βDglucop¡ranosil)βDglucopiranósido. |
| 6. | Uso según Ia reivindicación 3, donde el compuesto de fórmula (I) es (IRS) 1fen¡letil60(βDglucop¡ranosil)βDglucopiranósido. |
| 7. | Uso según Ia reivindicación 3, donde el compuesto de fórmula (I) es (1 RS)I fenilpropil6O(βDglucopiranos¡l)βDglucopiranósido. |
| 8. | Uso según Ia reivindicación 3, donde el compuesto de fórmula (I) es (1 RS)I fenil2,2dimetilprop¡l6O(βDglucopiranosil)βDglucopiranós¡do. |
| 9. | Uso según Ia reivindicación 3, donde el compuesto de fórmula (I) es el ácido (2R) (60(βDglucopiranos¡l)βDglucopiranosiloxi)fenilacét¡co. |
| 10. | Uso según Ia reivindicación 3, donde el compuesto de fórmula (I) es (2R)2[(6O(βDglucopiranosil)βDglucopiranosiloxi]fenilacetamida. |
| 11. | Uso según Ia reivindicación 3, donde el compuesto de fórmula (I) es (1 RS)I fenil2propínil60(βDglucopiranosil)βDglucop¡ranós¡do. |
| 12. | Uso según Ia reivindicación 3, donde el compuesto de fórmula (I) es 2bromobencil60(βDglucopiranosil)βDglucopiranósido. |
| 13. | Uso según Ia reivindicación 3, donde el compuesto de fórmula (I) es 2clorobencil60(βDglucopiranosil)βDglucopiranósido. |
| 14. | Uso según Ia reivindicación 3, donde el compuesto de fórmula (I) es 2,4 dimetoxibencil 6O(βDglucopiranosil)βDglucopiranósido. |
| 15. | Uso según Ia reivindicación 3, donde el compuesto de fórmula (I) es 2(2cloro6fluorofenil)etil 6O(βDglucopiranosil)βDglucopiranósido. |
| 16. | Uso según Ia reivindicación 3, donde el compuesto de fórmula (I) es (Z)4estilbenometil [6O(βDglucopiranosil)Dglucopiranósido]. |
| 17. | Uso según Ia reivindicación 3, donde el compuesto de fórmula (I) es 4bifenilmetil 6O(βDglucopiranosil)βDglucopiranósido. |
| 18. | Uso según Ia reivindicación 3, donde el compuesto de fórmula (I) es 4etoxibencil 6O(βDglucopiranosil)βDglucopiranosido. |
| 19. | Uso según Ia reivindicación 3, donde el compuesto de fórmula (I) es 4fbutilbencil 6O(βDglucopiranosil)βDglucopiranósido. |
| 20. | Uso según Ia reivindicación 3, donde el compuesto de fórmula (I) es 2fen¡letil 6O(βDglucopiranosil)βDglucopiranósido. |
| 21. | Uso según cualquiera de las reivindicaciones 120, donde Ia dermopatía es Ia psoriasis. |
| 22. | Uso según cualquiera de las reivindicaciones 120, donde el tratamiento se realiza por vía oral, parenteral o tópica. |
La presente invención se incluye dentro del campo de Ia terapia y profilaxis de Ia psoriasis y otras dermopatías inflamatorias y/o alérgicas.
ESTADO DE LA TÉCNICA ANTERIOR
Las dermopatías inflamatorias o alérgicas suponen una fuente de problemas físicos y psicológicos para los seres humanos y otros animales. Algunas de ellas, como Ia psoriasis, todavía no tienen curación. La psoriasis es una enfermedad crónica y recurrente. Se desconoce Ia causa del acelerado crecimiento celular de Ia psoriasis, pero se cree que los mecanismos inmunes tienen un papel importante.
El péptido T es un octapéptido de secuencia ASTTTNYT, correspondiente a un segmento de Ia secuencia de Ia proteína gp120 del virus de inmunodeficiencia humana. El análisis de su perfil farmacológico refleja que el péptido T resulta eficaz en el tratamiento de Ia psoriasis (cfr. E. M. Faber et al., Proa Nati. Acad. Sci. 1991 , vol. 25, p. 658; T. Taime et al., Proa Nati. Acad. Sci. 1995, vol. 287, p. 553). Sin embargo, su baja absorción, su inestabilidad metabólica y sus efectos immunogénicos hacen desaconsejable su utilización como fármaco. Dado que Ia psoriasis todavía no tiene un tratamiento totalmente satisfactorio, resulta interesante disponer de nuevos fármacos antipsoriais.
A partir de estudios estructura-actividad basados en las propiedades quimiotácticas de análogos del péptido T (cfr. M. Marastoni et al., Int. J. Pept. Proetin Res. 1993, vol. 41 , pp. 441-454), se ha propuesto un modelo de conformación bioactiva de dicho péptido (cfr. N. B. Centeno et al., J. Comp.- Aided Mol. Design 1998, vol. 12, p. 7-14). Además, este estudio ha conducido a definir un farmacóforo, así como sus posiciones necesarias para una buena actividad quemotáctica de monocitos (cfr. O. Llorens et al., Lett. Pept. Sci. 1998, vol. 5, pp. 179-182). Este farmacóforo se ha usado después para ensayos in silico de diferentes bases de datos de compuestos, conduciendo al producto natural amigdalina (VII) como peptidominético del péptido T. Estudios subsiguientes de quimiotaxis han demostrado que Ia amigdalina
(VII) exhibe un perfil quimiotáctico similar al del péptido T y, consecuentemente, una presumible actividad antipsoriásica similar (cf. O. Llorens et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 1998, vol. 8, pp. 781-786). Pero Ia amigdalina (VII) es un producto natural con un perfil tóxico. Se sabe que su toxicidad se debe a Ia liberación de iones cianuro in vivo.
amigdalina (VII)
EXPLICACIÓN DE LA INVENCIÓN
Los inventores han encontrado que un grupo de compuestos análogos estructurales de Ia amigdalina tienen un perfil quimiotáctico similar a Ia amigdalina, Io que los convierte en potencialmente útiles para el tratamiento profiláctico y/o curativo de dermopatías inflamatorias y/o alérgicas y, en particular, para el tratamiento de Ia psoriasis. Nada en el estado de Ia técnica sugiere que los compuestos de fórmula (I) posean Ia actividad asociada a Ia presente invención.
Un aspecto de Ia presente invención se refiere al uso de un compuesto de fórmula (I) o de sus enantiómeros o de las mezclas de estos, o de las sales farmacéuticamente aceptables de cualquiera de los anteriores, o de los solvatos farmacéuticamente aceptables de cualquiera de los anteriores; donde π es un número entero entre O y 4; R1 es un radical seleccionado del grupo que consiste en H, CH 3 , CH 2 -CH 3 , C(CH 3 ) 3 , COOH, CONH 2 y C≡CH; R2, R3, R4 y R5 son radicales independientemente seleccionados del grupo que consiste en H, F, Cl, Br, (Ci-C 3 )-alcoxilo y (Ci-C 4 )-alquilo; y R6 es un radical seleccionado del grupo que consiste en H, F, Cl, Br, (Ci-C 3 )-alcoxilo, (d-C 4 )-alquilo, R7, CH=CH-R7 y O-CH 2 -R7; donde R7 es fenilo o un fenilo
mono- o di-sustituido independientemente por F, Cl, Br, (Ci-C3)-alcoxilo o (Cr C 4 )-alquilo; para Ia obtención de un medicamento para el tratamiento profiláctico y/o curativo de una dermopatía inflamatoria y/o alérgica, en particular de Ia psoriasis. Así pues, Ia presente invención está relacionada con un método de tratamiento profiláctico y/o curativo de un paciente que sufre una dermopatía inflamatoria y/o alérgica, particularmente Ia psoriasis, comprendiendo este método Ia aplicación (en particular por vía oral, parenteral o tópica) de una cantidad farmacéuticamente efectiva de un compuesto de fórmula (I) o de sus enantiómeros o de las mezclas de éstos, o de las sales farmacéuticamente aceptables de cualquiera de los anteriores, o de los solvatos farmacéuticamente aceptables de cualquiera de los anteriores, junto con excipientes o portadores farmacéuticamente aceptables. Los compuestos de fórmula (I) tienen Ia ventaja respecto a Ia amigdalina de poseer una toxicidad mucho menor.
(i)
En una realización preferida n es un número entero entre O y 2. También es preferido el uso de los compuestos (I) donde R2, R3, R4 y R5 son radicales independientemente seleccionados del grupo que consiste en H, F, Cl, Br, metoxilo y metilo; y R6 es un radical seleccionado del grupo que consiste en H, F, Cl, Br, metoxilo, metilo, 2-fenilvinilo y fenilo. Y resulta especialmente preferido el uso de los siguientes compuestos particulares, cuya preparación se describe en los ejemplos adjuntos:
- 4-metoxibencil 6-0-(β-D-glucopiranosil)-β-D-glucopiranosido;
- bencil-6-O-(β-D-glucopiranosil)-β-D-glucopiranósido;
- (1 RS)-I -feniletil-6-O-(β-D-glucopiranosil)-β-D-glucopiranósido;
- (1 RS)-I -fenilpropil-6-O-(β-D-glucopiranosil)-β-D-glucopiranósido ;
- (1 RS)-I -fen¡l-2,2-dimetilprop¡l-6-O-(β-D-glucop¡ranosil)-β-D-g lucopiranósido;
- ácido (2R)-(6-O-(β-D-glucopiranos¡l)-β-D-glucopiranosiloxi)feni lacético; - (2R)-2-[(6-O-(β-D-glucop¡ranosil)-β-D-glucopiranosilox¡] fenilacetam¡da;
- (1 RS)-I -fenil-2-propinil-6-O-(β-D-glucop¡ranosil)-β-D-glucopiran ósido;
- 2-bromobencil-6-0-(β-D-glucopiranos¡l)-β-D-glucopiranósi do;
- 2-clorobenc¡l 6-0-(β-D-glucopiranosil)-β-D-glucopiranós¡do;
- 2,4-dimetoxibencil 6-O-(β-D-giucop¡ranos¡l)-β-D-glucopiranósido; - 2-(2-cloro-6-fluorofenil)etil 6-O-(β-D-glucop¡ranos¡l)-β-D-glucopiranós¡do;
- (Z)-4-estilbenomet¡l [6-0-(β-D-glucopiranos¡l)-D-glucopiranósido];
- 4-bifenilmetil 6-0-(β-D-glucopiranosil)-β-D-glucopiranós¡do;
- 4-etoxibenc¡l 6-0-(β-D-glucopiranosil)-β-D-glucopiranosido;
- 4-í-butilbencil 6-0-(β-D-glucopiranosil)-β-D-glucopiranósido; y - 2-fen¡let¡l-6-0-(β-D-glucopiranos¡l)-β-D-glucopiranósi do.
Los compuestos de fórmula (I) pueden obtenerse desprotegiendo los respectivos intermedios heptaacetilados (II), p.ej. mediante hidrólisis, preferiblemente mediante tratamiento con metóxido sódico en metanol a temperatura de reflujo.
Intermedio heptaacetilado (II)
Los intermedios hepacetilados (II) pueden obtenerse por glicosidación de los respectivos alcoholes de fórmula (III) con el intermedio tricloroacetimidato (IV), p.ej. en diclorometano a temperatura baja y con una cantidad catalítica de BF 3 OEt 2 .
Intermedio alcohol (III)
Intermedio tricloroacetimidato (IV)
El intermedio acetimídato (IV), puede obtenerse a partir del intermedio alcohol (V), p.ej. mediante reacción con tricloroacetonitrilo, como se ilustra en los ejemplos.
Intermedio alcohol (V)
El intermedio alcohol (V), ya conocido en Ia literatura química, puede obtenerse por hidrogenación catalítica, preferiblemente con Pd(OH) 2 como catalizador, de Ia heptaacetilamigdalina (Vl). Ésta, ya conocida en Ia
literatura, se puede obtener por acetilacíón de Ia amigdalina (VII), como se ilustra en los ejemplos.
heptaacetilamigdalina (Vl)
Como se ilustra mediante el estudio de quimiotaxis de los ejemplos, los compuestos de fórmula (I) tienen un perfil similar a Ia amigdalina y, por Io tanto, una potencial actividad contra dermopatías como Ia psoriasis.
También es objeto de Ia presente invención el proporcionar nuevos compuestos de fórmula (I), sus enantiómeros o las mezclas de éstos, o sales farmacéuticamente aceptables de cualquiera de los anteriores, o solvatos farmacéuticamente aceptables de cualquiera de los anteriores; donde n es un número entero entre O y 4; R1 es un radical seleccionado del grupo que consiste en H, CH 3 , CH 2 -CH 3 , C(CH 3 ) 3 , COOH, CONH 2 y C≡CH; R2, R3, R4 y R5 son radicales independientemente seleccionados del grupo que consiste en H, F, Cl, Br, (C-i-C 3 )-alcoxilo y (Ci-C 4 )-alquilo; y R6 es un radical seleccionado del grupo que consiste en H, F, Cl, Br, (Ci-C 3 )-alcox¡lo, (C 1 -C 4 )- alquilo, R7, CH=CH-R7 y 0-CH 2 -RT; donde R7 es fenilo o un fenilo mono- o di-sustituido independientemente por F, Cl, Br, (Ci-C 3 )-alcoxilo o (Ci-C 4 )- alquilo; con Ia condición de que el compuesto de fórmula (I) no es ninguno de los siguientes: bencil 6-O-(β-D-glucopiranosil)-β-D-glucopiranós¡do; 1-feniletil- 6-O-(β-D-glucopiranosil)-β-D-glucopiranósido; ácido (6-O-(β-D-glucopiranosil)- β-D-glucopiranosiloxi)fen¡lacético; y 2-[(6-0-(β-D-glucopiranosil)-β-D- glucopiranosiloxijfenilacetamida.
Para los expertos en Ia materia, otros objetos, ventajas y características de Ia invención se desprenderán en parte de Ia descripción y en parte de Ia práctica de Ia invención. Los siguientes ejemplos y dibujos se proporcionan a
modo de ilustración, y no se pretende que sean limitativos de Ia presente invención.
EXPOSICIÓN DETALLADA DE MODOS DE REALIZACIÓN
Obtención de Ia heptacetilamigdalina (Vl) ó (R)-α-í(2,3,4.6-tetra-Q-acetil-β-D- glucopiranosil (1→6)-2,3,4-tri-O-acetil-β-D-glucopiranosil)oxi]fenilacet onítrilo
Este producto está descrito en C. Bliard et al., Tetrahedron Lett. 1993, 32, 5083-5084; H. Gross et al., Ztschr. Chem., 1978, 201 ; I. Farkas et al.,
Liebigs Ann. Chem., 1976, 440. Sobre una disolución de amigdalina (9,15 g, 20,0 mmol) en diclorometano (200 mL) se añade una cantidad catalítica (0,2 g) de 4-dimetilaminopiridina manteniendo Ia mezcla en agitación a 0 0 C. A continuación se añade lentamente anhídrido acético (35 mL, 375 mmol) manteniendo Ia temperatura a 0 0 C. Se deja que Ia mezcla de reacción alcance Ia temperatura ambiente y se agita a esta temperatura durante 12 h. Se evapora el disolvente y el residuo resultante se disuelve en AcOEt (150 mL) y Ia fase orgánica se lava sucesivamente con tres volúmenes de agua, tres volúmenes de disolución acuosa saturada de CuSO 4 y tres volúmenes de disolución acuosa saturada de NaCI. La disolución se seca sobre sulfato de sodio anhidro, se filtra y se evapora rindiendo el producto del título, como sólido blanco (14,8 g, 98%). 1 H-RMN (300 MHz, CDCI 3 ) δ(ppm): 7,43 (1 H, s), 5,52 (1H 1 s), 5,25 (1 H, t, J=9.3), 5,10-4,96 (4H, m), 4,87 (1 H, t, J=9,3), 4,64 (1 H, d, J=7,8 ), 4,38 (1 H, d, J=7,8), 4,25 (1 H, dd, J=4,8, J=12,4), 4,08 (1 H, dd, J=2,1 , J=12,4), 3,82 (1 H, m), 3,71 (1 H, m), 3,60 (2H, m), 2.10-1 ,90 (21 H, m); 13 C-RMN (75 MHz 1 CDCI 3 ) δ(ppm): 170,05, 170,06, 170,02, 169,51 , 169,47, 169.42, 168,93, 132,09, 130,38, 129,24, 127,63 , 117,12 , 100,41 , 97,78 , 73,64 , 72,48 , 72,35 , 71 ,83 , 71 ,28 , 70,80 , 68,62 , 68,09 , 67,83, 67,67 , 61 ,68, 20,90-20,60 (7C).
Obtención del Intermedio (V) ó 2.3.4, 6-tetra-O-acetil-β-D-glucopiranosil (1->6V-2. 3. 4-tri-O-acetil-β-D-qlucoDiranósido
Este producto está descrito en M. Bergmann et al, Chem. Ber. 1929, 62, 2783. Siguiendo una adaptación del procedimiento descrito para Ia transformación de Ia hepta-O-benzoilamigdalina en hepta-O-benzoil-D- gentiobiosa (cf. T. Ziegler et al, Carbohydr. Chem. 1991 , 10, 813-831), una
suspensión de Ia heptaacetilamigdalina (Vl) obtenida en el paso anterior (9,0 g, 12 mmol) y Pd(0H) 2 al 20% sobre carbón (3,6 g) en una mezcla de tolueno-acetona (3:2 v:v, 500 mL) se somete a hidrogenación a temperatura ambiente a una presión de 1 ,0 bares hasta que el control por cromatografía en capa fina indica Ia completa conversión de Ia amigdalina en un nuevo producto con menor movilidad (3-5 h). La mezcla se filtra y se evapora el filtrado. El residuo obtenido se disuelve en acetato de etilo (200 mL) y se lava sucesivamente con un volumen de ácido clorhídrico 1N y una disolución acuosa saturada de cloruro de sodio. La fase orgánica se seca sobre sulfato de sodio anhidro, se filtra y se evapora a sequedad el filtrado. El residuo resultante se recristaliza de etanol para dar 6,80 g (86%) del producto del título, como sólido blanco. 1 H-RMN (300 MHz, CDCI 3 ) δ(ppm): 5,50 (1 H, dd, J=9,6, J=10,2), 5,19 (1 H, t, J=9,6), 5,07 (1 H, t, ,/=9,6), 4,94 (1 H, dd, J=8,1 , J=9,6), 4,88-4,81 (2H, m), 4,55 (1 H, d, J=8,0), 4,26-4,12 (2H, m), 3,85-3,80 (1 H, m), 3,72-3,65 (1 H, m), 3,63-3,56 (2H). 13 C-RMN (75 MHz, CDCI 3 ) δ(ppm): 170,27, 170,17, 170,09, 169,70, 169,39, 169,36, 169,21 , 101 ,05, 89,95, 72,55, 71 ,96, 71 ,18, 71 ,00, 69,85, 69,13, 68,76, 68,07, 67,96, 62,51 , 61 ,60, 20,50-20.30 (7 C)
Obtención del Intermedio tricloroacetoimidato (IV) ó O-(2,3,4,6-tetra-O-acetil- β-D-glucopiranosil (1→6)-2, 3, 4-tri-O-acetil-β-D- glucopiranosiDtricloroacetimidato.
Se añade una cantidad catalítica de NaH al 60 % en aceite mineral (aprox. 0,025 mmol) sobre una disolución del Intermedio (V) (500 mg, 0,8 mmol) y tricloroacetonitrilo (0,5 mL, 5,0 mmol) en diclorometano (20 mL) y Ia mezcla se agita a temperatura ambiente hasta que por cromatografía de capa fina se observa Ia completa desaparición del producto de partida en Ia mezcla de reacción y su conversión en un nuevo producto con mayor movilidad en cromatografía de capa fina (habitualmente se deja entre 15 y 30 min). Se evapora a sequedad y el residuo resultante (constituido esencialmente por el tricloroacetimidato crudo) que se usa inmediatamente en Ia siguiente reacción de glicosilación sin purificar.
Los compuestos de los Ejemplos de compuestos (I) descritos a continuación se prepararon utilizando el Intermedio tricloroacetimidato (IV) y los
respectivos alcoholes (III), para dar los respectivos intermedios heptaacetilados (II), que por hidrólisis rindieron dichos compuestos (I).
Ejemplo 1 de referencia: Obtención del compuesto (1-1) ó 4-metoxibencil 6-0- (β-D-glucopiranosil)-β-D-glucopiranósido (n = 0; R1 = R2 = R3 = R4 = R5 = H; R6 = OCH 3 )
a) Obtención del intermedio heptaacetilado (11-1) ó O-4-metoxibenzil-6-O-(β- D-glucopiranosil)-β-D-glucopiranósido
Bajo una atmósfera de nitrógeno seco, se añade lentamente una disolución de alcohol 4-metoxibencílico (111-1) (323,1 mg, 2.34 mmol) en 15 mL de diclorometano sobre una disolución del Intermedio tricloroacetimidato (IV) (500 mg) en 10 mL de diclorometano anhidro manteniendo Ia temperatura por debajo de -50 0 C. Se añade una cantidad catalítica de BF 3 .OEt 2 (0,12 mol-eq) y se agita a esta temperatura durante 15 min. A continuación se retira el baño frigorífico, dejando subir lentamente Ia temperatura de Ia mezcla de reacción hasta alcanzar Ia ambiente y se deja tres horas en agitación. La reacción se detiene añadiendo 20 mL de una disolución acuosa saturada de NH 4 CI y se extrae con tres porciones de 20 mL de AcOEt. Los extractos orgánicos combinados se lavan con disolución saturada de NaCI, se secan sobre Na 2 SO 4 , se filtran y el filtrado se evapora a sequedad produciendo un residuo sólido marrón, que se purifica por cromatografía "flash" (hexano/AcOEt 9:1) para dar, por combinación y evaporación de las fracciones de interés, 119,5 mg (0,16 mmol, 20% de rendimiento calculado a partir de hepta-O- acetilgentiobiosa) del producto del título.
b) Obtención del compuesto (1-1) por desprotección del intermedio heptacetilado (11-1)
El derivado heptaacetil-O-4-metoxibenzil-6-0-(β-D-glucopiranosil)-β-D- glucopiranósido obtenido (119,5mg, 0,16 mmoles) se disuelve en 5 mL de MeOH y se añaden 25 μL de una disolución 0,1 M de NaOMe en MeOH recién preparada. La mezcla se calienta a reflujo con agitación hasta Ia desaparición del producto de partida, se enfría y se evapora a sequedad para dar 68,5 mg (0,15 mmoles, 94 %) del producto del título como un sólido incoloro, higroscópico, de pureza superior al 95% por HPLC. 1 H-RMN (300
MHz, CD 3 OD) δ(ppm): 7,34 (2H, d, J= 9,0 Hz), 6,89 (2H 1 d, J= 9,0 Hz), 4,88 (1 H, d, J= 11 ,8 Hz), 4,59 (1 H, d, J= 11 ,8 Hz), 4,42 (1 H, d, J=7,5), 4,34 (1 H, d), 4,18 (1 H, dd, J=1 ,5, J=11 ,4, ), 3,91-3,80 (2H, m), 3,78 (3H, s) 3,65-3,58 (1 H 1 m, ), 3,45-3,22 (7H, m). 13 C-RMN (75 MHz, CD 3 OD) δ(ppm): 160,90, 130,99,
130,90, 114,64, 104,87, 103,07, 78,02, 77,93, 77,13, 75,11 , 75,03, 71 ,70, 6 699,,7744,, 6622,,7722,, 5555,,66(6(2C). IR (KBr), v ma χ (cm "1 ): 3500-3100, 2970-2940, 1635, 1620, 1545, 1525.
Ejemplo 2: Obtención del compuesto (I-2) ó bencil 6-Q-(β-D-glucopiranosil)-β- D-glucopíranósido (n = 0; R1 = R2 = R3 = R4 = R5 = R6 = H)
Partiendo del Intermedio tricloroacetimidato (IV) y haciéndolo reaccionar con el correspondiente alcohol, de forma análoga a Ia del Ejemplo 1 , se obtuvo el producto del título con un rendimiento del 22%. 1 H-RMN (300 MHz, CD 3 OD), δ(ppm): 7,45-7,26 (5H, m), 4,93 (1 H, d, J=12,0), 4,66 (1 H, d, J=12,0), 4,42 (1 H, d, J=7,8), 4,37 (1 H, d, J=7,5), 4.18 (1 H, dd, J=1.8, J=11.7 ), 3,90-3,75 (2H, m, ), 3,67 (1 H, dd, J=5,4, J=11 ,9), 3,48-3,21 (8H, m). 13 C-RMN (75 MHz, CD 3 OD) δ(ppm): 139,01 , 129,27, 129,20, 128,68, 104,89, 103,40, 78,04, 78,00, 79,96, 77,16, 75,10, 75,10, 71 ,95, 71 ,57, 71 ,55, 69,76, 62,72. IR (film evaporado), v ma χ (cm "1 ): 3600-3100, 2970-2940, 1645, 1550, 1505.
Ejemplo 3: Obtención del compuesto (I-3) ó (1f?S)-1-feniletil-6-O-(β-D- qlucopiranosil)-β-D-glucopiranósido (n = 0; R1 = CH 3 ; R2 = R3 = R4 = R5 = R6 = H )
Partiendo del Intermedio tricloroacetimidato (IV) y haciéndolo reaccionar con el correspondiente alcohol, de forma análoga a Ia del Ejemplo 1 , se obtuvo el producto del título con un rendimiento del 33%. 1 H-RMN (300 MHz, CD 3 OD), δ(ppm): 7,45-7,22 (5H, m), 5,05-4,95(1 H, m), 4,49-4,32 (2H, m), 4,16-4,02 (2H, m), 3,90-3,60 (2H, m), 3,20-3,05 (8H, m) 2,60-2,70(3H 1 m). 13 C-RMN (75 MHz, CD 3 OD) δ(ppm): 145,09, 144,08, 129,39, 129,10, 128,58, 128,23, 127,95, 127,44, 104,81 , 104,79, 102,35, 78,04 (2C) 1 77,85, 77,85, 77,28, 77,27, 77,01 , 76,18, 75,15 (2C), 75,10(2C) 1 71 ,50, 71 ,49, 69,62 (2C), 62,65 (2C), 24,72, 22,20. IR (film evaporado), v max (cm "1 ): 3600-3100, 2970-2940, 1645, 1550, 1505.
Ejemplo 4: Obtención del compuesto (1-4) ó (1f?S)-1-fenilpropil 6-0-(β-D- qlucopiranosiD-β-D-glucopiranósido (n = 0; R1 = CH 2 -CH 3 ; R2 = R3 = R4 = R5 = R6 = H )
Partiendo del Intermedio tricloroacetimidato (IV) y haciéndolo reaccionar con el correspondiente alcohol, de forma análoga a Ia del Ejemplo 1 , se obtuvo el producto del título con un rendimiento del 63%. 1 H-RMN (300 MHz, CD 3 OD), δ(ppm): 7,45-7,22 (5H 1 m), 5,05-4,95(1 H, m), 4,51-4,32 (2H, m), 4,16-4,02 (2H, m), 3,90-3,60 (2H, m), 3,20-3,05 (8H, m) 2,60-2,70(2H, m), 1 ,04 (t, 3H). 13 C-RMN (75 MHz, CD 3 OD) δ(ppm): 144,97, 144,21 , 129,39, 129,12, 128,43, 128,32, 128,11 , 127,44, 104,81 , 104,79, 102,35, 78,14, 78,11 , 78,08, 77,95, 77,48, 77,33, 77,11 , 76,38, 75,13 (2C), 75,10(2C), 71 ,50, 71 ,49, 69,62 (2C), 62,65 (2C), 24,72, 22,40, 14,34. IR (film evaporado), v max (crn '1 ): 3600-3100, 2970-2940, 1645, 1550, 1510.
Ejemplo 5: Obtención del compuesto (I-5) ó (1RS) 1-fenil-2,2-dimetilpropil-6- Q-(β-D-glucopiranos¡l)-β-D-qlucopiranósido (n = 0; R1 = C(CH 3 ) 3 ; R2 = R3 = R4 = R5 = R6 = H )
Partiendo del Intermedio tricloroacetimidato (IV) y haciéndolo reaccionar con el correspondiente alcohol, de forma análoga a Ia del Ejemplo 1 , se obtuvo el producto del título con un rendimiento del 60%, como mezcla de epímeros 3:2 en el carbono bencílico por RMN. 1 H-RMN (300 MHz, CD 3 OD), δ(ppm): 7,42-7,19 (5H, m), 4,66 (1 H, s), 4,57 (1 H, d, J=7,8), 4,39-4,34 (2H, m), 4,11- 3,99 (4H, m), 3,90-3,76 (4H), 3,70-3,56 (2H, m), 3,31-3,26 (6H,m), 0,96 (9H, s). 13 C-RMN (75 MHz, CD 3 OD) δ(ppm): 142,04, 140,12, 130,41 , 129,66, 128,27, 127,99, 127,87, 105,46, 104,94, 104,52, 100,97, 91 ,11 , 86,63, 78,06, 77,91, 77,59, 77,46, 77,33, 75,96, 75,15, 71 ,95, 71 ,56, 71 ,40, 69,71 , 69,54, 62,68, 62,50, 37,07, 35,99, 26,93, 26,71. IR (film evaporado), v max (cm "1 ): 3600-3100, 2970-2940, 1645, 1510.
Ejemplo 6: Obtención del compuesto (I-6) ó ácido (2f?) (6-O-(β-D- αlucopiranosil)-β-D-glucopiranosiloxi)-fenilacético (n = 0; R1 = COOH ; R2 = R 3 = R4 = R5 = R6 = H )
Partiendo del Intermedio tricloroacetimidato (IV) y haciéndolo reaccionar con el correspondiente alcohol, de forma análoga a Ia del Ejemplo 1 , se obtuvo el
producto del título con un rendimiento del 34%. 1 H-RMN (300 MHz, CD 3 OD), δ(ppm): 7,60-7,25 (5H, m), 5,29 (1H, s), 4,50 (1H, d, J=7.5), 4,33 (1H, d, J-7.5), 4,20-4,08 (2H, m), 3,91-3,65 (4H, m), 3,35-3,16 (6H, m), 13 C-RMN (75 MHz, CD 3 OD) δ(ppm): 173,53, 137,80, 129,63, 129,44, 128,99, 128,57, 104,94, 103,11 , 101 ,23, 79,04, 77,93, 77,74, 77,32, 77,36, 75,15, 71 ,49, 71 ,37, 69,87, 62,65.
Ejemplo 7: Obtención del compuesto (I-7) ó (2R) 2-r(6-Q-(β-D-glucopiranosiO- β-D-glucopiranosiloxflfenil-acetamida (n = 0; R1 = CONH 2 ; R2 = R3 = R4 = R5 = R6 = H )
Partiendo del Intermedio tricloroacetimidato (IV) y haciéndolo reaccionar con el correspondiente alcohol, de forma análoga a Ia del Ejemplo 1 , se obtuvo el producto del título con un rendimiento del 22%. 1 H-RMN (300 MHz, CD 3 OD), δ(ppm): 7,60-7,25 (5H, m), 5,54 (1 H, s), 4,45 (1 H, d, J=7.8), 4,38 (1 H, d,
J=7.6), 4,20-4,08 (1 H, m), 3,91-3,65 (4H, m), 3,35-3,04 (6H, m), 13 C-RMN (75 MHz, CD 3 OD) δ(ppm): 176,53, 138,76, 129,31 , 128,58, 104,95, 103,40, 81 ,23, 77,84, 77,41 , 75,11 , 74,99, 71 ,38, 69,92, 62,58.
Ejemplo 8: Obtención del compuesto (I-8) ó (1KS) 1-fenil-2-propinil-6-O-(β-D- qlucopiranosil)-β-D-glucopira-nósido (n = 0; R1 = C≡CH ; R2 = R3 = R4 = R5 = R6 = H )
Partiendo del Intermedio tricloroacetimidato (IV) y haciéndolo reaccionar con el correspondiente alcohol, de forma análoga a Ia del Ejemplo 1 , se obtuvo el producto del título con un rendimiento del 55%. Obtenido como mezcla de epímeros 1 :1 en el carbono bencílico. 1 H-RMN (300 MHz, CD 3 OD), δ(ppm): 7,60-7,57 (2H, m), 7,40-7,31 (3H, m), 5,75 (0,5H 1 bs), 5,67 (0,5H 1 bs), 4,80 (1 H, d, J=7,8), 4,51 (0,5 H, d, J=7,8), 4,42 (0,5 H, d, J=I β), 4,23-4,14 (2H, m), 3,91-3,65 (4H 1 m), 3,35-3,26 (6H, m), 3,13 (0,5 H, d, J-2,4), 3,08 (0,5 H, d, J=1 ,6). 13 C-RMN (75 MHz, CD 3 OD) δ(ppm): 139,47, 139,27, 129,64, 129,52, 129,41 , 129,27, 129,07, 128,76, 104,91 , 104,80, 101 ,23, 101 ,10, 83,56, 81 ,95, 77,93, 77,81 , 77,77, 77,36, 77,18, 76,44, 75,15, 75,03, 74,90, 74,74, 71 ,55, 71 ,44, 70,10, 69,75, 69,55, 62,67. IR (film evaporado), v max (cm "1 ): 3600-3100, 3080, 2970-2940, 2100, 1645, 1550, 1505.
Ejemplo 9: Obtención del compuesto (1-9) ó 2-bromobencil-6-O-(β-D- qlucopiranosil)-β-D-αlucopiranósido (n = 0; R1 = H ; R2 = Br ; R3 = R4 = R5 = R6 = H )
Partiendo del Intermedio tricloroacetimidato (IV) y haciéndolo reaccionar con el correspondiente alcohol, de forma análoga a Ia del Ejemplo 1 , se obtuvo el producto del título con un rendimiento del 83%. 1 H-RMN (300 MHz, CD 3 OD), δ(ppm): 7,68 (1 H, dd, J=7,5, 1 ,2 Hz , 7,55 (1 H, d, J=7,5), 7,35 (1 H, t, J=7,5), 7,19 (1 H, td, J=7,5, 1 ,5 Hz), 4,95 (1 H, d, J=13,2), 4,76 (1H, d, J=13,2), 4,45- 4,39 (2H, m), 4,17 (1 H, dd, J=, 1 ,8, J=11 ,6), 3,89-3,80 (2H, m), 3,69-3,64 (1 H, m), 3,56-3,44 (1 H, m), 3,42-3,20 (7H, m). 13 C-RMN (75 MHz, CD 3 OD) δ(ppm): 138,55, 133,41 , 130,64, 130,17, 128,55, 123,38, 104,79, 103,92, 77,98 (2C), 77,88, 77,23, 75,11 (2C), 71 ,54, 71 ,40, 71 ,32 , 69,65, 62,70. IR (film evaporado), v max (cm '1 ): 3600-3100, 2970-2940, 1645, 1550, 1505.
Ejemplo 10: Obtención del compuesto (1-10) ó 2-clorobencil 6-O-(β-D- qlucopiranosil)-β-D-glucopiranósido (n = 0; R1 = H ; R2 = Cl ; R3 = R4 = R5 = R6 = H )
Partiendo del Intermedio tricloroacetimidato (IV) y haciéndolo reaccionar con el correspondiente alcohol, de forma análoga a Ia del Ejemplo 1 , se obtuvo el producto del título con un rendimiento del 77%. 1 H-RMN (300 MHz, CD 3 OD), δ(ppm): 7,65-7,62 (1H, m), 7,34-7,20 (3H, m), 4,95 (1 H, d, J=13,5), 4,74 (1 H, d, J=13,5), 4,43 (1 H, d, J=7,3), 4,40 (1 H, d, J=7,3), 4,16 (1 H, dd, J=1 ,9, 11 ,5), 3,90-3,79 (2H, m), 3,68-3,63 (2H, m), 3,54-3,20 (7H, m). 13 C-RMN (75 MHz, CD 3 OD) δ(ppm): 136,91 , 133,79, 130,64, 130,12, 129,98, 127,98, 104,81 , 103,944, 77,98(2C), 77,90, 77,20, 75,10(2C), 71 ,53, 71 ,40, 69,70, 62,07. IR (film evaporado), v max (cm '1 ): 3600-3100, 2970-2950, 1645, 1540, 1510.
Ejemplo 11 : Obtención del compuesto (1-11) ó 2.4-dimetoxibencil 6-Q-(B-D- qlucopiranosil)-β-D-qlucopira-nós¡do (n = 0; R1 = H ; R2 = OCH 3 ; R3 = R4 = R5 = H ; R6 = OCH 3 )
Partiendo del Intermedio tricloroacetimidato (IV) y haciéndolo reaccionar con el correspondiente alcohol, de forma análoga a Ia del Ejemplo 1 , se obtuvo el producto del título con un rendimiento del 13%. 1 H-RMN (300 MHz, CD 3 OD), δ(ppm): 6,88 (1 H, d, J=2,0), 6,75 (2H, m), 4,78 (1 H, d, J= 11 ,9 Hz), 4,69 (1 H,
d, J= 11 ,9 Hz), 4,44 (1 H, d, J=7,5), 4,37 (1H, d, J=7,4), 4,18 (1H, dd, J=1 ,5, 11 ,4), 3,91-3,80 (2H, m), 3,78 (3H 1 s), 3,72 (3H, s), 3,65-3,58 (1 H, m), 3,45- 3,20 (8H, m). 13 C-RMN (75 MHz, CD 3 OD) δ(ppm): 160,90, 158,35, 130,39, 130,10, 114,63, 104,81 , 104,03, 78,22, 77,53, 77,13, 75,11 , 75,03, 71 ,70, 69,74, 66,42, 62,72, 55,13. IR (KBr), v max (cιτf 1 ): 3500-3100, 2970-2940, 1635, 1620, 1545, 1525.
Ejemplo 12: Obtención del compuesto (1-12) ó 2-(2-cloro-6-fluorofenil)etil 6-0- (β-D-qlucopiranosil)-β-D-qlucop¡ranósido (n = 1 ; R1 = H ; R2 = F ; R3 = H ; R4 = CI ; R5 = R6 = H )
Partiendo del Intermedio tricloroacetimidato (IV) y haciéndolo reaccionar con el correspondiente alcohol, de forma análoga a Ia del Ejemplo 1 , se obtuvo el producto del título con un rendimiento del 33%. 1 H-RMN (300 MHz, CD 3 OD), δ(ρpm): 7,26-7,23 (2H, m), 7,06-7,04 (1 H, m), 4,35 (1 H, d, J= 7,6), 4,31 (1 H, d, J= 7,9)), 4,13 (1 H, dd, J=2,1 , J=11 ,7), 4,02-3,94 (1 H, m), 3,88-3,73 (3H, m), 3,68-3,55 (3H, m), 3,48-3,26 (6H, m), 3,21-3,15 (2H, m). IR (film evaporado), v ma χ (cm "1 ): 3600-3100, 2970-2940, 1650, 1550, 1510.
Ejemplo 13: Obtención del compuesto (1-13) ó (Z)-4-estilbenometil f6-O-(β-D- qlucopiranosil)-D-qlucopira-nósido1 (n = 0; R1 = R2 = R3 = R4 = R5 = H ; R6 = 2-fenilvinilo)
Partiendo del Intermedio tricloroacetimidato (IV) y haciéndolo reaccionar con el correspondiente alcohol, de forma análoga a Ia del Ejemplo 1 , se obtuvo el producto del título con un rendimiento del 93 %. 1 H-NMR (300 MHz, CD 3 OD), δ(ppm): 7,56-7,17 (11 H, m), 4,91 (1H, d, J=12,3), 4,68 (1 H 1 d, J-U 1 Z), 4,44- 4,38 (2H, m), 4,21 (1H, dd, J= 8,7, 2,1), 3,91-3,81 (3H 1 m), 3,50-3,30 (8H 1 m). 13 C-NMR (75 MHz, CD 3 OD) δ(ppm): 142,00, 137,05, 135,48, 128,49, 128,27, 127,80, 127,33, 126,80, 126,23, 126,13, 104,58 , 103,77, 77,38, 77,34, 75,25, 72,01 , 71 ,60, 71 ,62, 69,46, 62,67.
Ejemplo 14: Obtención del compuesto (1-14) ó 4-bifenilmetil 6-0-(B-D- glucopiranosilV6-D-qlucop¡ranósido (n = 0; R1 = R2 = R3 = R4 = R5 = H ; R6 = fenilo)
Partiendo del Intermedio tricloroacetimidato (IV) y haciéndolo reaccionar con el correspondiente alcohol, de forma análoga a Ia del Ejemplo 1 , se obtuvo el producto del título con un rendimiento del 73%. 1 H-RMN (300 MHz, CD 3 OD), δ(ppm): 7,63-7,28 (9H, m), 4,97 (1 H, d, J AB =12,0), 4,72 (1 H, d, J AB =12,0), 4,43 (1 H, d, J A B=7,8 ), 4,40 (1 H, d, J AB =7,60 ),4,19 (1 H, dd, J=2.10,11 ,60), 3,90-3,80 (2H, m), 3,80-3,47 (3H, m), 3,39-3,25 (6H). 13 C-RMN (75 MHz, CD 3 OD) δ(ppm): 142,19, 141 ,89, 138,17, 129,85, 129,76, 128,77, 127,94, 127,88 , 104,91 , 103,35, 78,03, 78,01 , 77,22, 75,12 (2C), 72,03, 71 ,58 (2C), 71 ,52, 69,79, 62,74.
Ejemplo 15: Obtención del compuesto (1-15) ó 4-etoxibencil 6-Q-(β-D- qlucopiranosiO-β-D-glucopiranosido (n = 0; R1 = R2 = R3 = R4 = R5 = H ; R6 = OCH 2 CH 3 )
Partiendo del Intermedio tricloroacetimidato (IV) y haciéndolo reaccionar con el correspondiente alcohol, de forma análoga a Ia del Ejemplo 1 , se obtuvo el producto del título con un rendimiento del 77%. 1 H-RMN (300 MHz, CD 3 OD), δ(ppm): 7,28 (2H, d, J= 9,2), 6,82 (2H, d, J= 9,2), 4,80 (1 H, d, J AB =11 ,4), 4,54 (1 H, d, 4,31 (1 H, d, J=7,8), 4,14 (1 H, dd, J-1 , 8, 11 ,7), 3,98 (2H, q, «7=6,9), 3,87-3,75 (2H, m), 3,68-3,60 (1 H, m), 3,34-3,18 (6H, m), 1 ,33 (3H, t, J=6,9). 13 C-RMN (75 MHz, CD 3 OD) δ(ppm): 160,10, 130,96, 130,79, 115,21 , 104,85, 103,05, 77,98, 77,92, 77,09, 75,09, 75,02, 71 ,69, 71 ,49, 69,73, 64,41 , 62,70, 58,12, 15,16. IR (film evaporado), v max (cm "1 ): 3600-3100, 2970-2940, 1650, 1530, 1515.
Ejemplo 16: Obtención del compuesto (1-16) 6 4-f-butilbencil 6-O-(β-D- glucopiranosin-β-D-glucopiranósido (n = 0; R1 = R2 = R3 = R4 = R5 = H ; R6 = C(CHs) 3 )
Partiendo del Intermedio tricloroacetimidato (IV) y haciéndolo reaccionar con el correspondiente alcohol, de forma análoga a Ia del Ejemplo 1 , se obtuvo el producto del título con un rendimiento del 93 %. 1 H-RMN (200 MHz, CD 3 OD), δ(ppm): 7,37-7,32 (2H, m), 7,24-7,18 (2H, m), 5,01 (1 H, d, J AB =12,2), 4,65 (1H, d, J A B=12,2), 4,40-4,35 (2H, m), 3,90-3,75 (2H, m), 3,65 (1 H, dd, J=5.5, J= 11 ,9), 3,38-3,22 (6H, m), 1 ,35 (9H, s). 13 C-RMN (75 MHz, CD 3 OD) δ(ppm): 126,97, 133,54, 127,41 , 125,39, 104,48, 103,5, 78,02, 77,08, 75,05, 71 ,51 , 71 ,63, 71 ,43, 69,74, 64,77, 62,70, 31 ,29.
Ejemplo 17: Obtención del compuesto (1-17) ó 2-feniletil 6-0-(β-D- qlucopiranosil)-β-D-glucopiranósido (n = 1 ; R1 = R2 = R3 = R4 = R5 = R6 = H)
Partiendo del Intermedio tricloroacetimidato (IV) y haciéndolo reaccionar con el correspondiente alcohol, de forma análoga a Ia del Ejemplo 1 , se obtuvo el producto del título con un rendimiento del 88%. 1 H-RMN (300 MHz, CD 3 OD), δ(ppm): 7,29-7,25 (5H, m), 4,36 (1H, d, J= 7,8), 4,31 (1H, d, J= 7,8), 4,17-4,03 (2H, m), 3,90-3,60 (4H, m), 3,48-3,16 (8H, m), 2,93 (2H, t, J= 8,2). 13 C-RMN (75 MHz, CD 3 OD) δ(ppm): 140,03, 130,03, 129,36, 127,20, 104,82, 104,41 , 77,98, 77,96, 77,01 , 75,04, 75,02, 71 ,88, 71 ,54, 71 ,34, 69,73, 62,71 , 37,21.
Actividad de los compuestos (I) en ensayos de quimiotaxis de monocitos
Se aislaron células mononucleares de sangre heparinizada de voluntarios human mediante sedimentación sobre placas Ficoll. Se llevó a cabo Ia quimiotaxis en una cámara de Boyden modificada, usando un filtro Millipore de 8 mm que separaba los compartimentos superior e inferior. Se colocaron células mononucleares (0.5 x 10 6 ) en un tampón fosfato de Krebs-Ringer
(Krebs-Ringer phosphate ó KRP), en los pocilios superiores. Los compuestos (I) se disolvieron en DMSO a 10 "2 mol/L, se diluyeron antes de usarse con KRP conteniendo 1 mg/mL de albúmina de suero bovino y se ensayaron en el compartimento inferior a una concentración final de entre 10 "12 y 10 ~7 mol/L. Para obtener una comparación precisa, los resultados de los diferentes análogos se han expresados en términos del índice quimiotáctico, que es Ia razón entre Ia migración hacia el atrayente ensayado y Ia migración hacia el tampón. La migración en presencia del tampón solo fue de 35 ± 2 mm (media ± error estándar de Ia media). La migración máxima para CHO-Met- Leu-Phe-OH (FMLP) se dio a 10 "8 mol/L y fue de 68 mm ± 3 en estos experimentos (índice quimiotáctico 1.94 ± 0.03). Para confirmar que los análogos se unían al receptor CD4, sus efectos quimiotácticos se bloquearon mediante concentraciones bajas (0.1-0.2 mg/mL) de OKT4, un anticuerpo monoclonal específico para las moléculas CD4. En este ensayo Ia migración a Ia respuesta no se afectó por el OKT4. Los resultados se muestran en Ia Tabla adjunta.
Tabla: Valores máximos del índice quimiotáctico y valores de las correspondientes concentraciones [A], para varios compuestos (I)
5 compuesto (I) índice quimiotáctico -log[A]
Péptido T 1.09 11 amigdalina 0.63 10
(1-1) 0.87 10
10 ( (II--22)) 0 0..7766 8
(I-3) 0.77 8
(I-4) 0.75 6
(I-5) 0.84 9
(I-6) 0.85 9
15 ( (II--77)) 0 0..8844 7
(I-8) 0.79 6
(1-10) 0.94 10
(1-11) 0.84 10
(1-17) 0.70 9
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