技术领域：

本发明属于畜禽养殖领域，具体涉及恩诺沙星 盐在制备猪用口服制剂中的应 用。 背景技术：

恩诺沙星是第一个动物专用喹诺酮类抗生素品 种， 具有广谱杀菌作用， 对静 止期和生长期的细菌均有效。对多种革兰氏阴 性杆菌和球菌有良好抗菌作用， 对 绝大多数敏感菌菌株的 MIC均低于 ^g/ml。 恩诺沙星在治疗动物细菌性感染方 面得到了广泛应用。 目前商业化产品中恩诺沙星的形式有恩诺沙星 碱、恩诺沙星 钠盐和恩诺沙星盐酸盐。可能是由于猪特殊的 生理基础， 生产实践中发现上述三 种形式的恩诺沙星盐对猪的食口性均很差，无 法口服给药或通过拌料给药。因此， 长期以来恩诺沙星在养猪业的应用仅限于注射 剂。 发明内容：

本发明的目的是提供一种恩诺沙星盐在制备猪 用口服制剂中的应用。

本发明人在试验过程中发现恩诺沙星与部分一 价 （Ag ⁺ 等） 或二价 （Zn ²⁺ 或 Cu ²⁺ 等）的金属离子形成的盐能显著改善恩诺 沙星的适口性， 可以开发成经消化 道给药途径的制剂用于养猪生产而不影响猪的 正常采食。此外， 药物代谢动力学 和人工发病治疗试验均证明恩诺沙星与金属离 子形成的盐不影响其生物利用度。

因此，本发明提供了恩诺沙星盐在制备猪用口 服制剂中的应用， 所述的恩诺 沙星盐为恩诺沙星与金属离子形成的盐中的至 少一种，所述的金属离子为锌、铜、 钙、 镁、 铁、 钴、 锰、 铬、 银或镍。

所述的恩诺沙星盐进一步优选为恩诺沙星锌、 恩诺沙星铜或恩诺沙星银。 优选，所述的恩诺沙星锌和恩诺沙星铜为恩诺 沙星分别与锌和铜离子按摩尔 比 2: 1形成的配合物，恩诺沙星银为恩诺沙星与银� �子按摩尔比 1 : 1形成的盐。

所述的口服制剂包括经口灌服、经伺料或饮水 给药的口服制剂， 如包括粉散 剂、 颗粒剂、 混悬剂、 乳剂、 片剂和丸剂等。

一种猪用口服制剂， 其特征在于， 其含有作为活性成分的恩诺沙星盐， 所述 的恩诺沙星盐为恩诺沙星与金属离子形成的盐 中的至少一种，所述的金属离子为 锌、 铜、 钙、 镁、 铁、 钴、 锰、 铬、 银或镍。

所述的恩诺沙星盐进一步优选为恩诺沙星锌、 恩诺沙星铜或恩诺沙星银。 优选，所述的恩诺沙星锌和恩诺沙星铜为恩诺 沙星分别与锌和铜离子按摩尔 比 2: 1形成的配合物，恩诺沙星银为恩诺沙星与银� �子按摩尔比 1 : 1形成的盐。

所述的口服制剂包括经口灌服、经伺料或饮水 给药的口服制剂， 如包括粉散 剂、 颗粒剂、 混悬剂、 乳剂、 片剂和丸剂等。

本发明的恩诺沙星与金属离子形成的恩诺沙星 盐能显著改善猪对恩诺沙星 的适口性，再经药物代谢动力学和人工发病治 疗试验均证明本发明的恩诺沙星与 金属离子形成的恩诺沙星盐不影响其生物利用 度，因此可以开发成经消化道给药 途径的口服制剂， 用于养猪生产而不影响猪的正常采食。 具体实施方式：

以下实施例是对本发明的进一步说明， 而不是对本发明的限制。

实施例 1、 恩诺沙星盐的制备

1、 恩诺沙星锌的制备

制备恩诺沙星锌的通式如下。 100.0克恩诺沙星钠用水溶解后定容至 1000ml, 另取 40.0克七水硫酸锌用水溶解后定容至 1000ml。 在室温条件下将硫酸锌溶液 缓慢滴加入恩诺沙星钠溶液中搅拌反应， 滴加结束后继续搅拌反应 1小时， 让其 反应充分。 反应液抽滤， 滤饼用 3000ml水抽滤洗涤后， 滤渣在 80°C条件下烘干 至恒重即得恩诺沙星锌， 试验收样品 99.30克， 反应收率为 96.9%。

2C ₁₉ H ₂₁ FN ₃ 0 ₃ Na+ZnS0 ₄ 7H ₂ 0=(C ₁₉ H ₂₁ FN ₃ 0 ₃ ) ₂ Zn+Na ₂ S0 ₄ +7H ₂ 0

2、 恩诺沙星铜的制备

制备恩诺沙星铜的通式如下。 100.0克恩诺沙星钠用水溶解后定容至 1000ml, 另取 40.0克五水硫酸铜用水溶解后定容至 1000ml。 在室温条件下将硫酸铜溶液 缓慢滴加入恩诺沙星钠溶液中搅拌反应， 滴加结束后继续搅拌反应 1小时， 让其 反应充分。 反应液抽滤， 滤饼用 3000ml水抽滤洗涤后， 滤渣在 80°C条件下烘干 至恒重即得恩诺沙星铜， 试验收样品 98.2克， 反应收率为 95.93%。

2C ₁₉ H ₂₁ FN ₃ 0 ₃ Na+CuS0 ₄ 5H ₂ 0=(C ₁₉ H ₂₁ FN ₃ 0 ₃ ) ₂ Cu+Na ₂ S0 ₄ +5H ₂ 0

3、 恩诺沙星银的制备 制备恩诺沙星银的通式如下。 100.0克恩诺沙星钠用水溶解后定容至 1000ml, 另取 50.0克硝酸银用水溶解后定容至 1000ml。 在室温条件下将硝酸银溶液缓慢 滴加入恩诺沙星钠溶液中搅拌反应， 滴加结束后继续搅拌反应 1小时， 让其反应 充分。 反应液抽滤， 滤饼用 3000ml水抽滤洗涤后， 滤渣在 80°C条件下烘干至恒 重即得恩诺沙星银， 试验收样品 126.6克， 反应收率为 96.89%。

C ₁₉ H ₂₁ FN ₃ 0 ₃ Na+AgN03=C ₁₉ H ₂₁ FN ₃ 0 ₃ Ag+NaN0 ₃ 实施例 2、 恩诺沙星碱、 钠盐和盐酸盐对猪词料适口性的影响

100头 105日龄体重相近的杜长大三元杂健康肉猪如表 1分成 10个试验组， 每组 10头猪。每组在伺料中分别添加恩诺沙星碱、� ��诺沙星钠或盐酸恩诺沙星。 所有试验猪试验前 12h同步禁食， 12h后各组试验猪分别自由采食含有不同形式 恩诺沙星的伺料， 观察 30-60分钟， 直至试验猪不再采食时， 统计不同试验组的 伺料消耗量，评价在伺料中添加不同形式恩诺 沙星对猪采食量的影响。 以未添加 恩诺沙星或其盐， 单纯的伺料作为对照。

表 1 : 恩诺沙星碱、 恩诺沙星钠或盐酸恩诺沙星对猪词料食口性的 影响的试验分组

*: 所有试验剂量以恩诺沙星计。

在伺料中添加恩诺沙星碱、恩诺沙星钠或盐酸 恩诺沙星后， 试验猪的采食量 均显著降低， 其中分别添加 5ppm的恩诺沙星碱、 恩诺沙星钠或盐酸恩诺沙星试 验组的采食量与空白对照组相比分别下降 47.2% 、 50.8%和 49.5%， 而添加 1 OOppm不同形式的恩诺沙星试验猪均表现出拒食 （表 2 )。

表 2： 恩诺沙星及其盐对猪词料食口性影响的试验结 果

实施例 3、 恩诺沙星锌等盐对猪饲料适口性的影响

150头 110日龄体重相近的杜长大三元杂健康肉猪如表 3分成 5个试验组， 每组三个重复。每组在伺料中添加不同剂量的 恩诺沙星或其盐。所有试验猪试验 前 12h同步禁食， 12h后各组试验猪分别自由采食含有恩诺沙星或 其盐的伺料， 观察 30-60分钟， 直至试验猪不再采食时， 统计不同试验组的伺料消耗量， 评价 伺料不同恩诺沙星对猪伺料食口性的影响。 以未添加恩诺沙星或其盐， 单纯的伺 料作为对照。

表 3： 恩诺沙星及其盐对猪词料食口性的影响的试验 分组设计

*: 所有试验剂量以恩诺沙星计。

在伺料中添加恩诺沙星或其盐后， 恩诺沙星钠基本完全抑制了猪的采食行 为， 而恩诺沙星与锌、 铜和银形成的盐均对试验猪的采食量没明影响 （表 4)。 表 4： 恩诺沙星及其盐对猪词料食口性影响的试验结 果

注： 同列数据肩标不同大写字母表示差异显著 （P< 0.05 )

实施例 4、 恩诺沙星锌对猪饲料适口性影响的剂量研究

120头 110日龄体重相近的杜长大三元杂健康肉猪，如 表 5分成 4个试验组， 每个试验组 3个重复， 每个重复 10头猪。 每组在伺料中分别添加不同剂量的恩 诺沙星锌。 所有试验猪试验前 12h同步禁食， 12h后各组试验猪分别自由采食含 有不同形式恩诺沙星锌的伺料， 观察 30-60分钟， 直至试验猪不再采食时， 统计 不同试验组的伺料消耗量， 评价伺料不同剂量恩诺沙星锌对猪伺料食口性 的影 响。 以未添加恩诺沙星或其盐， 单纯的伺料作为对照。

*: 所有试验剂量以恩诺沙星计。

在伺料中添加不同剂量恩诺沙星锌后，试验猪 的采食量与对照组（未添加恩 诺沙星或其盐， 单纯的伺料） 没有显著差异 （表 6)。 表 6： 恩诺沙星及其盐对猪词料食口性影响的试验结 果

注： *同列数据肩标不同大写字母表示差异显著 （P< 0.05 )

实施例 5、 恩诺沙星铜对猪饲料适口性影响的剂量研究

120头 115日龄体重相近的杜长大三元杂健康肉猪，如 表 7分成 4个试验组， 每个试验组 3个重复， 每个重复 10头猪。 每组在伺料中分别添加不同剂量的恩 诺沙星铜。 所有试验猪试验前 12h同步禁食， 12h后各组试验猪分别自由采食含 有不同形式恩诺沙星铜的伺料， 观察 30-60分钟， 直至试验猪不再采食时， 统计 不同试验组的伺料消耗量， 评价伺料不同剂量恩诺沙星铜对猪伺料食口性 的影 响。 以未添加恩诺沙星或其盐， 单纯的伺料作为对照。

表 7 : 恩诺沙星铜对猪词料食口性的影响的剂量研究 的试验分组

*: 所有试验剂量以恩诺沙星计。

在伺料中添加不同剂量恩诺沙星铜后，试验猪 的采食量与对照组没有显著差 异 （表 8)。

表 8 : 恩诺沙星铜对猪词料食口性影响的试验结果

注： *同列数据肩标不同大写字母表示差异显著 （P< 0.05 ) 实施例 6、 恩诺沙星银对猪饲料适口性影响的剂量研究

120头 120日龄体重相近的杜长大三元杂健康肉猪，如 表 9分成 4个试验组， 每个试验组 3个重复， 每个重复 10头猪。 每组在伺料中分别添加不同剂量的恩 诺沙星银。 所有试验猪试验前 12h同步禁食， 12h后各组试验猪分别自由采食含 有不同形式恩诺沙星银的伺料， 观察 30-60分钟， 直至试验猪不再采食时， 统计 不同试验组的伺料消耗量， 评价伺料不同剂量恩诺沙星银对猪伺料食口性 的影 响。 以未添加恩诺沙星或其盐， 单纯的伺料作为对照。

表 9 : 恩诺沙星银对猪词料食口性的影响的剂量研究 的试验分组

*: 所有试验剂量以恩诺沙星计。

在伺料中添加不同剂量恩诺沙星银后，试验猪 的采食量与对照组没有显著差 异 （表 10)。

表 10 : 恩诺沙星银对猪词料食口性影响的剂量研究的 试验结果

注： *同列数据肩标不同大写字母表示差异显著 （P< 0.05 ) 实施例 7、恩诺沙星锌、恩诺沙星铜和恩诺沙星银等� �期应用对猪采食量的 影响

120头 120日龄体重相近的杜长大三元杂健康肉猪， 如表 11分成 4个试验 组， 每组三个重复。 每组在伺料中分别按 lOOppm添加恩诺沙星锌、 恩诺沙星铜 或恩诺沙星银， 连续统计 7天试验猪的采食量， 并计算平均日采食量， 评价恩诺 沙星锌等正常应用对猪的采食量是否有影响。 以未添加恩诺沙星或其盐， 单纯的 伺料作为对照。 表 11 : 恩诺沙星锌等对试验猪采食量的影响的试验分 组设计

*: 所有试验剂量以恩诺沙星计。

连续 7天的试验统计结果显示，在伺料中添加恩诺� �星锌等后， 与不添加药 物的对照组相比，试验猪的采食行为和采食量 均正常， 采食量统计学上差异不显 著 （表 12)。

表 12 : 恩诺沙星锌等对试验猪采食量影响的试验结果

注： 同列数据肩标不同大写字母表示差异显著 （P< 0.05 )

实施例 8、 恩诺沙星锌等在猪体内的药物代谢动力学研究

20头 40日龄小猪如表 13分成 4组，每组 5头， 并分别按 10mg/公斤体重一 次胃管伺喂不同形式的恩诺沙星。 投药后 30min、 lh、 2h、 4h、 8h、 12h、 24h 颈静脉采血， 分离血浆， 用高效液相色谱的方法测定不同试验猪给药后 血浆中恩 诺沙星的浓度，统计分析各试组给药后血浆中 恩诺沙星浓度差异是否显著以及血 液中恩诺沙星的消除规律是否一致。

表 13 : 恩诺沙星锌等在猪体内的药物代谢动力学研究 的试验分组

给药后各试验组试验猪血浆中恩诺沙星和环丙 沙星的浓度及消除规律见表

14， 结果显示各试验组的血药浓度的峰值相近， 且消除规律一致， 说明恩诺沙星 与锌、 铜和银等金属离子形成盐不影响恩诺沙星在体 内的吸收和代谢过程 （表 14)。

表 14: 恩诺沙星锌等在猪体内的血药浓度变化规律 （单位： g/ml)

注： 同列数据肩标不同大写字母表示差异显著（P&l t;0.05 ) ; 表中血药浓度的数值是恩诺 沙星和环丙沙星的总量。 实施例 9、 恩诺沙星锌等对大肠杆菌人工感染的治疗试验 效果

60头 30日龄断奶仔猪如表 15分成 6组， 每组 10头， 并分别在伺料中添加 不同形式的恩诺沙星， 自由采食， 33 日龄经肌肉注致病性大肠杆菌， 观察试验 猪的腹泻及死亡情况， 连续观察一周， 统计发病和死亡情况， 比较不同形式恩诺 沙星对致病性大肠杆菌人工感染性保护效果。 以不添加任何形式的恩诺沙星， 单 纯给伺料的作为对照组，其中对照组中一部分 肌肉注致病性大肠杆菌， 将其作为 不给药攻毒对照组 （第 5组）， 另外一部分肌肉不注致病性大肠杆菌， 将其作为 不给药不攻毒对照组 （第 6组）。 表 15 : 不同形式恩诺沙星对大肠杆菌攻击感染的保护 效果的试验分组

注： *所有试验剂量是以恩诺沙星计； #恩诺沙星碱试验组的组药方式是根据试验猪� �采食量 按 lOOppm, 每天分早晚两次胃管投喂。

人工感染致病性大肠杆菌 SGD株后， 不给药攻毒对照组 （第 5组） 的所有 试验猪均表现腹泻， 其中有 6头在试验期间死亡， 而不给药不攻毒对照组 （第 6 组）的所有试验猪表生长正常， 无腹泻和死亡情况。所有给药组均对大肠杆菌 人 工感染具有完全的保护效果 （表 16)。

表 16: 不同形式恩诺沙星对大肠杆菌攻击感染的保护 效果