I USO I ⁾ E OXOISOAPORFINAS Y SUS DERIVADOS COMO INHIBIDORES

SELECTIVOS DE LA MONOAMINO OXIDASA A

Sector de Ia técnica

La presente invención relaciona el campo de los inhibidores de la enzima monoamino oxidasa (de aquí en adelante MAO) con el uso de 2.3-dihidro- oxoisoaporfina. oxoisoaporfina. 2.3.8.9.10,1 1 -hexahidro-oxoisoaporfina e isoaporfina y sus derivados como inhibidores selectivos de la forma-A (de aquí en adelante MAO-A). La invención también se refiere a las formulaciones farmacéuticas conteniendo estos compuestos para el tratamiento de trastornos o desórdenes depresivos. Estado de la técnica

Los inhibidores de monoamino oxidasa (MAO; EC 1.4.3.4) han sido usados para el tratamiento de la depresión desde los años 50. pero el uso clínico de los inhibidores de MAO ha estado limitado por serios efectos colaterales, tales como reacción hipertensiva inducida por Ia tiramina contenida en los alimentos [White. K.: Simpson, G. J. Clin. Psychopharmacol. 5. 264 ( 1981 )] .

Las monoamino oxidasas humanas A y B (MAO-A y B) son una superfamilia heterogénea de enzimas que catalizan la desanimación de mono-, di- y poliaminas. A ello deben su importante papel fisiológico en el metabolismo de neurotransmisores tales como serotonina y dopamina [Shih, J. C; Chen. K.; Ridd, M. J. Annu. Rev. Neurosci. 22, 197 ( 1999)1.

Las isoíbrmas MAO-A y MAO-B se diferencian entre sí tanto por la especificidad de sustrato como por la existencia de inhibidores específicos [Bach. A. W. J..: Lan, N. C: Jonson, Iλ L.; Abell. C. W.; Bembenek, M. E.: Kwan. S. W.; Seeburg, P. H.: Shih, J. C. Proc. Nati. Acad. ScL U.S.A. 85, 4934 (1988): Abell. C. W.; Kwan. S.-W. Prog. Nucí. Acid Res. Mol. Biol. 65. 129 (2001 )]. Así. la MAO-A cataliza la desanimación ox ¡dativa de serotonina (5-HT), adrenalina (A). y noradrenalina (NA) y es inhibida selectivamente por Ia clorgilina (Cg) y la moclobemida (Mb). La MAO-B cataliza la desanimación oxidativa de Ia β-íeniletilamina y bencilamina y es selectivamente inhibida por la selegilina (Sg) y la rasagilina (Ra). Aún así. hay algunos inhibidores como la iproniazida (Ip). que fue el primer inhibidor de la monoamino

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oxidasa (IMAO) para el tratamiento de trastornos de la depresión, sin mayor selectividad por las isoformas A ó B.

Moclobemida (Mb) Rasagilina (Ra)

Selegilina (L-Deprenil) (Sg) Iproniazida (Ip)

Ambas isoformas desaminan dopamina (DA) in vitro y tiramina [Kalgutkar. A. S.: Dalvie. D. K.; Castagnoli, N.. Jr.: Taylor. T. J. Chem. Res. Toxicol. 14, 1 139 (2001)] pero la DA humana es preferentemente metabolizada por MAO-B. Tanto la MAO-A como la MAO-B tienen papeles esenciales en procesos fisiológicos vitales y están involucradas en la patogénesis de varias enfermedades humanas. Los inhibidores de MAO son usados para el tratamiento de estados depresivos y Ia enfermedad de Parkinson [Andrews, J. M.; Nemeroff, C. B. Am. J. Med Chem. 97. 24S (1994): Cesura. A. M.: Pletscher. A. Prog. Drug Res. 38. 171 (2002) ^' ]. Aunque las MAOs están ampliamente distribuidas en varios órganos, la mayoría de los estudios concernientes a sus propiedades funcionales involucran procesos patológicos relacionados con el sistema nervioso central. Estos estudios muestran que las MAO desempeñan un importante papel en la regulación de concentraciones cerebrales de aminas biogénicas. En la periferia. MAO-A y MAO-B están diferentemente expresadas en una variedad de órganos: MAO-A es predominante en corazón y tejido adiposo [Billet. E. E. Neurotoxicology 25. 139 (2004)]. Los inhibidores de MAO-A son usados como fármacos antidepresivos y ansiolíticos. y son utilizados para proteger las células neuronales contra la apoptosis [Youdim, M. B. H.; Finberg, J.

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P. M.: Tipton. K. F. Catecliolamines I. In Trendelenburg, U.. Weiner N., Eds.: Springer-

Verlag: Berlín, p. 513 (1998): Yamada, M.; Yasuhara. I I. Neuroloxicology 25. 215 (2004); Youdim. M. B.: Wcinstock, M. Neurotoxicology 25, 243 (2004)].

Aunque se han descrito innumerables diseños racionales de nuevos inhibidores utilizando como base la estructura cristalina de la MAO-A en rata [Ma, J.; Yoshimura, M.: Yamashita. K.: Nakagawa. A.: Ho, A.; Tsukihara. T. J. Mol. Biol. 338. 103 (2004)] y la ayuda de cálculos teóricos [Gnerre. C; Caito. M.: Leonetti, F.: Weber, P.; Carrupt, P.- A.: Ahornare. C: Carotti. A.: Testa. B. ./. Med. Chem. 43. 4743 (2000)]. estudios anteriores han descubierto algunos factores responsables para la selectividad de dichos compuestos sobre Ia isoforma de la MAO-A como la presencia de regiones aromáticas ricas en electrones |Vallejos, G.: Rezende. M. C; Cassels, B. K. J. Comput.-Aided Mol. Des. 16. 95 (2002)] y el papel que juegan algunos residuos de aminoácidos en los sitios activos como el Hc335 [Ma, J.: Yoshimura, M.: Yamashita, E.; Nakagawa. A.: Ito, A.; Tsukihara. T. J. Mol. Biol. 338, 103 (2004)]. Así. derivados de pirrolil-etanonaminas [Di Santo, R.; Costi, R.; Roux, A.: ártico, M.; Befani. O.; Mennino. T.; Agostinelli, E.: Palmegiani. P.: Turini. P.: Cirilli. R.: Ferretti. R.; Gallinilla. B.: La Torre. F. J. Med. Chem. 48, 4220 (2005)], pirrolil-oxazolidinonas [Mai, A.; ártico, M.: Esposito, M.; Ragno, R.; Sbardella, G.: Massa, S. // Fármaco. 58, 231 (2003)]. α-alquil feniletilaminas [Gallardo-Godoy. A.: Fierro, A.; Mc Lean. T. H.: Castillo. M.: Cassels, B. K.; Reyes-Parada. M.: Nichols, D. E. J. Med. Chem. 48, 2407 (2005)] y derivados de quinoxalinas [Hassan, S. Y.: Khattab, S. N.; Bekhit, A. A.: Amer. A. Bioorg. Med. Chem. LeIt. 16, 1753 (2006)] han mostrado su efectividad y alta selectividad como inhibidores de la MAO-A.

Descripción detallada de la invención Los compuestos de la presente invención mostraron un sorprendente alto grado de selectividad y electividad en ensayos //; vifro, inhibiendo solamente la isoforma MAO-A y no la MAO-B. Dichos compuestos, isómeros de las oxoaporfinas que están ampliamente distribuidas en la naturaleza como una oxidación natural de los alcaloides denominados "aporfinas" [Para mayor información sobre aporfinas. ver: Shamma, M.; Slusarchyk, W. A. Chem. Rev. 64. 59 (1964); Manske, R. I I. F.. en "The Alkaloids ^"" . VoI. 4, p. 1 19. Academic Press, New York (1964): Shamma, M. en ^" The Alkaloids ^" .

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VoI. 9, p. 1. Academic Press, New York (1954); Cava, M. P.: Venkateswarlu. A. Annu. Rep. Med. Chem., 331 ( 1969)], han sido poco estudiados en torno a sus propiedades farmacológicas y. por lo tanto, la presente invención es el primer ejemplo de alcaloides isoquinolínicos para los que se ha demostrado un efecto inhibidor selectivo de la MAO- A humana claramente superior a los inhibidores de referencia en estudios in vitro.

Así. el uso de 2,3-dihidro-oxoisoaporfina, oxoisoaporfina. 2.3,8.9.10,1 1- hexahidro-oxoisoaporfina e isoaporfina y sus derivados para preparar un medicamento destinado a ser inhibidor selectivo de la monoamino oxidasa (MAO) del tipo A. poseen las siguientes estructuras generales: (1) 2,3-dihidro-7H-dibenzo[ífe,/?]quinolin-7-ona: (2) 7H-dibcnzo[ _< ií?,/?|qu¡nolin-7-ona; (3) 6//-dibenzo[c/e,/7]quinolin-6-ona; (4) 2.3.8.9.10,1 1- hexahidro-7//-dibenzo[í/c,λ]quinolin-7-ona y (5) 7//-dibenzo[í/e,/?]quinolin-7-ol y sus derivados.

Los inhibidores presentan la siguiente fórmula general:

(4) (5)

En que:

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- R ¹ . R ² . R ³ . R ^"1 . R ⁵ , R ⁶ . R ⁷ , R ⁸ y R ⁹ son iguales o diferentes, y representan un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo, alquenilo, alquinil. aril, flúor, cloro, bromo, yodo, hidroxi. alquiloxi, alqucniloxi. aciloxi. ariloxi. amino, alquilamino. dialquilamino, arilamino. tio. alquiltio. arillio, ciano. nitro, alquilnitro, acil. amida, alquilamida. alquilazido, alquilfosfato. alquilcarboxi. alquílico con cadenas de C l -ClO o un grupo benciloxi o arilo en el que el anillo aromático puede estar sustituido por uno o varios radicales, idénticos o diferentes, elegidos entre grupos halógeno, alquilo polihalogenados, nitro, azido. amino. fosfato, carboxi, ciano. amida, tiol, tiocster. guanidinio, tioéter. alcohol, alcoxi o alquilo con cadenas de C l -ClO. Los radicales pueden ser alquílico lineal o ramificado de 1 -10 átomos de carbono, alquenilo de 2 a 10 átomos de carbono, alquinilo de 3 a 10 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, cicloalquenilo de 4 a 6 átomos de carbono, o bicicloalquílico de 7 a 10 átomos de carbono: estando sustituidos eventualmcnte estos radicales por uno o varios sustituyentes, idénticos o diferentes, elegidos entre los átomos de halógeno y los radicales hidroxi. amino. tiol. azido. nitro, fosfato, alcoxi que contienen de 1 a 4 átomos de carbono, piperidinilo. morfolinilo, indol, furano. piperazinilo-1 (eventual mente sustituido en -4 por un radical alquilo de 1 a 4 átomos de carbono o por un radical fenilalquilo, cuya parte alquilo contiene de 1 a 4 átomos de carbono), cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, cicloalquenilo de 4 a 6 átomos de carbono, fenilo. ciano. nitro, carboxi. alcoxicarbonilo. halógeno, amino o amida, cuya parte alquilo contiene de 1 a 4 átomos de carbono, o un radical fenilo. eventualmente sustituido por uno o varios radicales, idénticos o distintos, elegidos entre los radicales alquilo de 1 a 4 átomos de carbono halogenados o no, o alcoxi de 1 a 4 átomos de carbono, o grupos halógenos, nitro, azido. fosfato, amino. ciano. carboxi. amida, tiol, tioester, guanidinio. tioéter. alcohol, un radical heterocíclico nitrogenado saturado o insaturado que contiene de 1 a 4 átomos de carbono, un radical heterocíclico nitrogenado saturado o insaturado que contiene 5 ó 6 miembros, eventualmcnte sustituidos por uno o varios radicales alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, entendiéndose que los radicales cicloalquilo, cicloalquenilo o bicicloalquilo pueden estar eventualmente sustituidos por uno o varios radicales alquílicos que contienen de 1 a 4 átomos de carbono.

R ¹ con R ² , R ³ con R ⁴ y, dependiendo de la estructura, R ⁴ con R ³ pueden juntos con

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los átomos de carbono a los cuales ellos están adicionados formar anillos aromáticos y no-aromáticos de 3-. 4-, 5- y 6 miembros conteniendo 0. 1 o 2 heteroátomos seleccionados de nitrógeno, oxígeno o azufre tales como furano. tiofeno. pirrol. oxazol, oxazina, oxazinona, tiazol, imidazol. pirazol, isoxazol. isotiazol. dioxano, 1 ,2.3- oxadiazol. 1.2,3-triazol, 1,3.4-tiadiazol. piridina. piridazina, pirimidina o anillos de pirazina,

R ⁶ con R ⁷ , R ⁷ con R ⁸ y R ⁸ con R ⁹ pueden juntos con los átomos de carbono a los cuales ellos están adicionados formar anillos aromáticos y no-aromáticos de 3-, 4-. 5- y 6 miembros conteniendo 0, 1 o 2 heteroátomos seleccionados de nitrógeno, oxígeno o azufre tales como furano, tiofeno. pirro!, oxazol, oxazina, oxazinona, tiazol, imidazol. pirazol, isoxazol. isotiazol, dioxano, 1,2.3-oxadiazol, 1,2,3-triazol. 1.3,4-tiadiazol. piridina. piridazina, pirimidina o anillos de pirazina.

- R ¹ . R ² . R ³ , R ⁴ , R ⁵ , R ⁶ , R ⁷ , R ⁸ y R ⁹ pueden ellos mismos tener sustituyentes adicionales seleccionados de hidrógeno, alquil, alquenil, alquinil, aril, flúor, cloro, bromo, yodo, hidroxi. alquiloxi. aminoalquiloxi, morfolin-4-il-alcoxi-piperidin-l -il-alquiloxi. alqueniloxi. ariloxi. aciloxi. amino. alquilamino. dialquilamino. arilamino. tio. alquiltio, ariltio. ciano, oxo. nitro, acil. amida, alquilamida o dialquilamida, y tautómeros. estereoisómeros y sus N-óxidos.

Aunque existen en la naturaleza una gran variedad de alcaloides aporfínicos. los más abundantes y mejor estudiados hasta la fecha son las aporfinas (IH- dibenzo[£fe,g]quinolinas) [Para mayor información sobre aporfinas. ver: Shamma. M.: Slusarchyk. W. A. Chem. Rev. 64, 59 (1964); Manske, R. H. F.. en 'The Alkaloids' ^" . VoI. 4. p. 119. Acadcmic Press. New York ( 1964); Shamma. M. en "The Alkaloids". VoI. 9. p. 1. Academic Press. New York (1954): Cava. M. P.. Venkateswarlu, A. Anmi. Rep. Med. Chem.. 331 (1969)] y sus análogos oxidados, las oxoaporfinas (IH- dibcnzo[t/e,g]quinol¡n-7-ona) [Para ejemplos de oxoaporfinas ver: Preininger. V.: Hrbek Jr. J.: Samek. Z., Santavy. F. Arch. Pharm. (Weinheim) 302. 808 (1969); Ribas, L: Sueiras, J., Castedo. L. Teírahedron Lett. 3093 (1971 ): Phan, B. H.: Seguin. E.: Tillequin, F., Koch, M. Phytυchemistry 35, 1363 (1994)]. Sin embargo, existe un pequeño grupo de alcaloides isoquinolínicos que ha sido poco investigado y cuya principal fuente natural radica hasta la fecha en las enredaderas del Menispermum

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dauricum DC. (Menispeπnaceae) recolectados en Kyoto, Japón y posteriormente en

China [Okamoto, Y.: Tanaka. S.: Kítayama. K.; Isomoto. M.: Masaishi, M.: Yanagawa,

H.. Kunitomo. .1. Yakugaku Zasshi 91. 684, (1971 )]. Así. variados informes del aislamiento de siete nuevos alcaloides isoquinolínicos de color amarillo han sido publicados y que, según convincentes estudios espectrales y de síntesis, poseen un esqueleto de 7//-dibenzo[c/e,λJquinolin-7-ona sin precedentes en la naturaleza. Debido a su semejanza estructural con las oxoaporfinas, 7//-dibenzo[cfe,£]quinolin-7-ona, dichos compuestos fueron denominados "oxoisoaporfínas". Estos novedosos heterociclos nitrogenados que están presentes en los rizomas de estas plantas, ampliamente usados en la medicina popular china [Cuiying. H., Hong, X. Yaoxue Xnebao 20 (2), 1 12 (1985);

Cuiying, H.. Hong, X. Yaoxue Xuebao 19(6). 471 (1984)] son: menisporfina (1). dauriporfina (2), bianfugecina (3), bianfugedina (4), dauriporfinolina (5), 2.3-dihidro- menisporfina (6) y Ia 6-O-desmetilmenisporfina (7) [véase Kunitomo. J.: Satoh, M.

Chem. Pharm. BuU. 30, 2659 (1982): Takani, M.; Takasu. Y.: Takahashi. K. Chem. Pharm. BuIl. 31. 3091 ( 1983): Kunitomo. .1.; Satoh, M.: Shingu, T. Tetrahedron 39.

3261 (1983); Hu. S.-M.; Xu, S.-X.: Yao. X.-S.: Cui. C-B.: Tezuka. T.: Kikuchi. K.

Chem. Pharm. BuU. 41 , 1866 (1993): Kunilomo, J., Kaede. S.: Satoh, M. Chem. Pharm.

BuIl. 33. 2778 ( 1985): Sugimoto. Y.: Babiker. H.A.A.: Inanaga, S.: Kato. M.: Isogai. A.

Phytochemistry 52. 143 1 ( 1999): Kunitomo, J.-L: Miyala. Y. Heterocycles 24. 437 (1986): Zhao. S.: Ye, W.; Tan. N.: Zhao, H.: Xia, Z. Zhongguo Yaoke Daxue Xuebao 20,

312 (1989)].

Sin embargo, posteriores trabajos reportaron el aislamiento de la 2,3-dihidro- dauriporfina (8) y de cuatro oxoisoaporfinas unidas en C-6 a grupos amino (9-12). siendo estas finalmente denominadas en su conjunto ''daurioxoisoaporfinas ^' [Yu. B. -W; Meng, L. -H: Chen. J.- Y; Zhou. T.-X: Cheng. K.-F; Ding, J.: Qin. G.-W. J. Nat.

Proa ¹ ., 64 (7), 968 (2001 )| a la que se agrega la lakshminina (13). de una nueva fuente natural, la Sciadotenia tυxifera [Killmer. L.: Vogt. F. G.: Freyer. A. J.: Menachery. M.

D.: Adclman. C. M. J. Nal. Prod. 66. 1 15. (2003)]. perteneciente también a la familia de las Menispermáceas.

HOJA DE SUSTITUCIóN (REGLA 26)

(6); R ⁴ = H (8); R ⁴ = OMe

R 9 ^y _ = OMe

R 9 ^y _ = OMe

Existen variados antecedentes que ilustran ampliamente la obtención de la estructura base de las oxoisoaporflnas. Como se mencionó anteriormente, el aislamiento de algunas oxoisoaporfinas de plantas del Menispermum danricum DC, estuvo acompañado de la confirmación de sus respectivas estructuras a través de la síntesis de algunos de ellos. De esta forma, el grupo de Kuiiitomo publicó la síntesis total de la menisporfma a través de una serie de pasos, generando el producto deseado más un isómero con la formación de un esqueleto 4.5.7.9-tetrametoxi-6//- dibenzo[(jfe,/z|quinolin-6-ona (14).

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menisporfina

Otra vía de obtención del esqueleto 7//-dibenzo|£/e,λ]quinolin-7-ona es a través de la reacción de derivados de 1 -acetilénicos de anlraquinona con hidracina. Así, la reacción de antraquinonilacetilenos (15a-c) con NI I ₂ NH ₂ genera las diazepinas esperadas (16a-c) junto con las oxoisoaporfinas (17a-c) en variable rendimiento [Shvartsberg. M. S.: Ivanchikova, I. D.: Vasilevsky, S. F. Tetrahedron Lβtí. 35, 2077 (1994)]. Variaciones del mismo proceso han introducido sustituyentes voluminosos en la posición 2 de la l -etinil-9,10-antraquinona, los cuales previenen la formación del heterociclo de siete miembros y favorecen la formación de la oxoisoaporfina [Shvartsberg. M. S.: Ivanchikova. I. D.: Vasilevsky, S. F. Rtiss. Chem. BuIl. 47. 1971 (1998): Ivanchikova. I. D.. Myasnikova, R. N.: Shvartsberg. M. S. Russ. Chem. BuIl. 47. 1975 (1998)].

HOJA DE SUSTITUCIóN (REGLA 26)

NHoNH-,

R = Bu (a), Ph (b), CH ₂ OPh (c)

Otros procedimientos para generar derivados de oxoisoaporfínas con estructuras carbonadas rígidas han sido descritos pero con rendimientos pobres, involucrando la formación de espiras fusionados al esqueleto de Ia oxoisoaporfina por el uso de metales como el manganeso (III) [Bremncr. .1. B.: Jaturonrusmee, W.; Engelhardt, L. M.: White. A. H. Tetrahedron Leu. 30 (24). 3213 (1989); Bremner, J. B.; Jaturonrusmee, W. Aust. J. Chem. 43. 1461 (1990)].

Hace más de tres decadas, se informó de un estudio de delación entreβ- feniletilaminas con ácido ftalaldehídico (AF) [Wheeler. D. D.: Young. D. C: Erley, D. S. J. Org. Chem. 22, 547 (1957)], cuyas ftalidas generadas (18a-c) fueron tratadas sin purificación ulterior con ácido polifosfórico (λPF) para dar, en moderados rendimientos, dos 2,3-dihidro-oxoisoaporfinas (19d) y (19e). Sin embargo, cuando la amina fue la 3.4- metilendioxi-fenilisopropilamina o MDA se obtuvo la 2-metil-5,6-metilendioxi-2.3- dihidro-oxoisoaporllna (19f) como único producto final [Walker. G. N.: Kempton. R. J. J. Org. Chem. 36 (10). 1413 (1971 )]. No obstante. 18a generó con buen rendimiento y bajo las mismas condiciones de trabajo 5.6.8,12b-tetrahidro-8-isoindolo[7, 2- «]isoquinolona (20).

Este procedimiento experimental usado para la presente invención, a diferencia de los anteriores, informa la síntesis de algunos derivados de 2.3-dihidro-oxoisoaporfinas en dos etapas y en rendimientos apreciables. constituyendo una interesante vía de síntesis de otros helerociclos relacionados verificando al mismo tiempo la reactividad de

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estos compuestos en variadas condiciones, ya sea de reducción o de sustitución aromática electroíTlica. nucleofílica y fotoquímica.

Si bien es cierto que este tipo de compuestos nitrogenados han sido descubiertos como productos naturales en su forma oxidada, sus análogos reducidos no han sido aislados ni siquiera informados hasta la actualidad con la excepción de los análogos 2.3- dihidro. Aún así, las oxoisoaporfinas poseen una historia mucho más extendida y que data de cuatro décadas atrás. En este sentido, dichos heterociclos denominados I- azabenzantronas han sido sintetizados por sus variadas propiedades.

En el pasado, muchos de estos compuestos fueron sintetizados como prototipos de fotoconductores o semi-conductores orgánicos [Para mayor información sobre síntesis. propiedades como colorantes y ácido-base, ver: a) Picri, G.; María Carlini, F.: Paffoni. C: Boffa. G. U. S. Pυtent N°4,031.096 (1977). b) BoITa. G.: Crotti. A.: Pieri. G.:

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Mangini. A.: Tundo. A. U. S. Patent é ⁰ 3.678.053 (1972). c) Ribaldonc. G.; Borsotti.

G.; Gonzali. F. U. S. Palcnt N ⁰ 3,960,866 (1976). d) Ribaldonc. G. U. S. Patenl N° 3,943, 136 ( 1976). e) Iwashima. S.: Ueda, T.; Honda, I L; Tsujika. T.: Ohno. M.; Aoki, J.: Kan. T. J. CIiCiIi. Sυc. Perkin Trans. / 2177 (1984). f) King, J.: Ramagc. G.R. J. Chem. Snc. 936 (1954). g) Wick, A.K. HeIv. Chim. Acia 49 (6), 1748 (1966). h) idem. 49 (6) 1755 ( 1966). i) Boffa, G.: Chiusoli U. S. Patent N ⁰ 3,912,739 (1975)].

Algunos ejemplos de tinturas constituidas por unidades de oxoisoaporfinas están descritos en la síntesis de l-aza-2-hidroxibenzantronas (21 ), 3-bromo-2- metoxiazabenzantrona (22) y estructuras muchos más complejas consistentes en la unión de dos unidades de 1 -azabenzantronas por un puente sulfuro (23). Debido a la versatilidad en la formación de derivados sustituidos en la posición 3 (24) del esqueleto isoquinolínico, se han podido sintetizar una gran variedad de tinturas fluorescentes a granel de policstireno, polimetacrilato de metilo o aceites minerales para diferentes usos en Ia industria, e hidrocarburos azapolicíclicos con propiedades fotoconductoras. pigmentos fluorescentes, ácido-base y electrónicas [véase Iwashira. S.: Honda. H. Phys. ScL Eng. 21 . 31 (1985); BoíTa. G.; Mazzaferro, N.; Paffoni. C. Ann. CMmL 65, 369 (1975); Mikhailova. T. A.: Zaitsev. B. E.; Shcban, G. V.; Gorelik. M. V. Chem. Heterocycl. Compd. (Engl. Transí.) 17. 594 (1981 ); Mikhailova. T. A.; Zaitsev. B. E.: Gorelik, M. V. Z/mr. Organ. KMm. 17. 803 (1981); Carlini, F. M.: Paffoni, C: Boffa, G. Dyes Pigm. 3. 59 (1982); Zee-Cheng, R. K.-Y.: Podrebarac. E. G.; Menon. C. S.: Cheng, C. C. J. J. Med Chem. 22, 501 (1979): Valkanas. G.: Hopff. H. J. Org. Chem.. 27. 3680 (1962); Solodar, W. E.: Simón. M. S. J. Org. Chem. 27. 689 (1962): Krapcho, A. P.: Petry- M. E. J. Heterocycl. Chem. 26. 1509 (1989); Tabatskaya. A. A.: Kutasheva. E. F.: Vlasov. V. M. Mendeleev Commun. 163 (1993): Krapcho, A. P.: Shaw, K. J. J. Org. Chem. 48. 3341 (1983)].

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En el mismo contexto de buscar nuevos compuestos derivados de la misma estructura química, a finales de Ia década de los 80. derivados de 7H- dibenzof£/é?,A]quinolin-7-ona fueron sintetizados por medio de una nueva ruta que involucraba variadas etapas a partir de iV-feniletilftalimidas (25) [Fabre. J. -L; Farge, D.; James, C. U.S. Patent N° 4,128,650 (1978)]. generando con ácido sulfúrico fumante 3.4- dihidro-oxoisoaporfina (3,4-dihidro-l -a7.abenzantrona) (26), cuya versatilidad y buen rendimiento fue usado como un segundo procedimiento experimental para generar los derivados usados de la presente invención.

(26)

A partir de estos antecedentes, se ha estudiado la síntesis y reactividad de estos heterociclos a través de la utilización de análogos de dihidro- y oxoisoaporfmas [Sobarco-Sánchez, E., De la Fuente. J., Castedo, L. Magn. Reson. Chem. 43. 1080 (2005)] por medio de agentes oxidantes y la utilización de metales e hidrogenación catalítica, generando inesperadamente algunos análogos interesantes para la presente

HOJA DE SUSTITUCIóN (REGLA 26)

invención con la reducción parcial o total de los anillos aromáticos, pérdida de sustituycntcs y una concomitante enolización del sistema quinolínico (Requema 1) [Sobarzo-Sánchez. H. Cassels, B. K.: Castedo, L. Synlett. 1 1 , 1647 (2003)]. Además, se ha podido comprobar la gran reactividad que tienen estos compuestos bajo un comportamiento electroquímico que nos entrega una valiosa información de la capacidad como posibles antioxidantes y anticancerígenos respecto a ciertas estructuras análogas como las imino-quinonas [véase Sobarzo-Sánchez. E.. Olea-Azar. C. Alarcón. J.. Opazo. L, Cassels. B. K. J. CM. Chem. Soc. 48(2). 79 (2003): Clark, G. R.; Robinson, K.: Denny. W. A.: Lee. H. H. Acta Crystallogr., Sect. B, 49. 342 (1993): Molinski. T. S. Chem. Rev. 93, 1825 (1993); Fukuzumi, S.: Itoh. S.: Komori. T.: Suenobu. T.: Ishida. A.: Fujitsuka. M.: Ito. O. J. Am. Chem. Soc. 122. 8435 (2000): Chen, W.: Koenigs. L. L.: Thompson. S. J.: Peter, R. M.: Rettie. A. E.: Trager. W. F.: Nelson. S. D. Chem. Res. Toxicol. 1 1. 295 (1998)].

Esquema 1

La fotoiτeducciύn de estos derivados de dihidro- y oxoisoaporfinas han llevado a estudiar la posibilidad de utilizarlos como acumuladores de energía en sistemas supramolcculares debido a su capacidad de transferencia de electrones [véase De la Fuente, .1. R., .lullian, C, Saitz. C. Sobarzo-Sánchez, H., Ncira, V., González. C, López. R., Pcssoa-Vlahana, I I. Phυtυchem. Photobio/. Sci. 3, 194 (2004): De la Fuente, J. R.,

HOJA DE SUSTITUCIóN (REGLA 26)

Neira, V.. Saitz. C. Jullian, C, Sobarzo-Sánchez. E. J. Phys. Chem. A 109, 5897 (2005);

De la Fuente. J. R., Jullian. C. Saitz, C. Neira, V.. Poblete, O.. Sobarzo-Sánchez. E. J. Org. Chem. 70. 8712 (2005)], siendo posible la utilización de estos alcaloides como quimiosensores en la detección de especies cargadas a nivel biológico. Así. la presente invención concita nuestro interés en estudiar el uso farmacológico de los derivados de 2,3-dihidro-oxoisoaporfina, oxoisoaporfina. 2.3.8.9, 10.11 -hexahidro-υxoisoapυrfina e isoaporfína para el tratamiento de deficiencias relacionadas con desórdenes de la monoamino oxidasa (MAO) del tipo A, a través de los procedimientos mencionados para este fin. SALES FARMACéUTICAMENTE ACEPTABLES

Las sales farmacéuticamente aceptables pueden ser obtenidas de procedimientos estándares conocidos, por ejemplo a través de la mezcla de los compuestos de fórmula general (1). (2), (3). (4) y (5) de la presente invención con un ácido disponible, por ejemplo un ácido inorgánico como ácido clorhídrico, o con un ácido orgánico. PREPARACIONES FARMACéUTICAS

Los compuestos de fórmula general (1 ), (2), (3). (4) y (5) usados para la presente invención pueden estar contenidos en formas farmacéuticas adecuadas para la administración por medio de procesos usuales usando sustancias auxiliares tales como materiales líquidos o sólidos. Las composiciones farmacéuticas de la invención pueden ser administradas oral o parenteralmente (intramuscular, subcutánea o intravenosa). Ellas pueden ser administradas en la forma de soluciones, polvos, tabletas, comprimidos, cápsulas (incluyendo microcápsulas). etc. Excipientes convenientes para tales formul aciones son los líquidos farmacéuticamente usados o sólidos de relleno y diluyentes. solventes, lubricantes, emulsionantes, condimentos, sustancias colorantes y/o reguladoras del pl l. Sustancias auxiliares frecuentemente usadas que pueden ser mencionadas son carbonato o estearato de magnesio, dioxido de titanio, polivinilpirrolidona. lactosa, manitol y otros azúcares o alcoholes derivados de azúcares, talco, lactoproteinas, gelatinas, almidón, celulosa y sus derivados, aceites vegetales y animales tales como aceite de hígados de pescado, girasol, aceites de nuez o sésamo, polietilen glicol y solventes tales como, por ejemplo, agua destilada y alcoholes mono- o polihídricos tales como el glicerol.

HOJA DE SUSTITUCIóN (REGLA 26)

Los compuestos de fórmula general (1), (2), (3), (4) y (5) usados para la presente invención pueden ser administrados como composiciones farmacéuticas las cuales son importantes y novedosas representaciones de la invención debido a la presencia de los compuestos que resultan ser altamente selectivos para la MAO-A. Tipos de composiciones farmacéuticas que pueden ser usadas e incluidas pero no limitadas son tabletas, tabletas masticables, cápsulas, soluciones, soluciones parenterales. suspensiones y otros tipos contenidas en esta invención. En la presentación de la invención, un envase o contendedor farmacéutico se describe conteniendo uno o más recipientes rellenos con uno o más de los ingredientes de una composición farmacéutica de la invención. Asociado con tales recipientes pueden ser escritos varios conceptos tales como instrucciones para su uso o una nota en la forma prescrita por una agencia de gobierno que regule su manufactura, uso o venta de los productos farmacéuticos, que además refleje la aprobación por la agencia de manufactura, uso o venta para humanos o administración veterinaria. MéTODOS FARMACOLóGICOS

DETERMINACIóN DE LA ACTIVIDAD DE LAS ISOFORMAS DE LA MAO

Los potenciales efectos de nuestros compuestos sobre la actividad de la MAO se determinaron midiendo la producción de peróxido de hidrógeno H ₂ O ₂ (y consecuentemente de resorufina) a partir de /j-tiramina, utilizando Amplex Red (Molecular Probes, Eugene, Oregon, EE.UU.) e isoformas de la MAO presentes en la fracción microsomal preparada a partir de células de insectos (BTI-TN-5B1-4) infectadas con baculovirus recombinantes que contienen insertos de ADNc de MAO-A o MAO-B humana (Sigma-Aldrich Química S.A.. Alcobeπdas. España)

La producción de H ₂ O; catalizada por las isoformas de Ia MAO se puede detectar al utilizar 10-acet\ϊ-3.7-dihydroxyphenoxazine (reactivo Amplex ^® Red), un reactivo no fluorescente, altamente sensible y estable, que reacciona con el H ₂ O ₂ en presencia de la peroxidasa del rábano picante para producir un producto fluorescente, la resorufina.

En nuestros experimentos, la actividad de la MAO fue evaluada con el método mencionado anteriormente, siguiendo el procedimiento general previamente descrito

HOJA DE SUSTITUCIóN (REGLA 26)

[Yánez, M.; Fraiz, N.; Cano, E.: Orallo. F. Biochem. Biophys. Res. Comm. 344. 688

(2006)] con algunas modificaciones.

En primer lugar, se incubaron 0,1 mL de lampón fosfato sódico (0,05 M, pH 7.4) conteniendo distintas concentraciones de los nuevos compuestos en estudio (o los inhibidores de referencia) y Ia cantidad de MAO-λ o MAO-B requerida para oxidar (en ausencia de fármacos) 165 pmol de /?-tiramina por minuto (MAO-A: 1.1 μg.: actividad específica: 150 nmol de p-tiramina oxidadas a p-hidroxifenilacetaldehido por minuto por mg de proteína: MAO-B: 7.5 μg,; actividad específica: 22 nmol de /?-tiramina transformados por minuto por mg de proteína) durante 15 minutos a 37 ⁰ C en placas de 96 pocilios (BD. Franklin Lakes. NJ. USA) ya colocadas en la cámara oscura del fluoπ'metro. Después del período de incubación, la reacción se inició añadiendo (concentraciones finales) 200 μM de reactivo Amplex ^® Red. 1 U/mL de peroxidasa de rábano picante y 1 mM de /?-tiramina como sustrato tanto para los estudios realizados con MAO-A como para los realizados con MAO-B. Ea producción de H ₂ O ₂ y, por consiguiente, de resorufina fue cuantificada a 37 ⁰ C en un lector de fluorescencia de placa (FLX800 ^{I M} . Bio-Tek ^® Instruments. Inc.. Winooski, VT, USA) determinando la fluorescencia generada (excitación 545 nm. emisión 590 nm) durante 15 minutos, un período en el cual el incremento de la fluorescencia fue lineal desde el principio. Simultáneamente se llevaron a cabo experimentos control sustituyendo los fármacos (nuestros compuestos o los inhibidores de referencia) con cantidades apropiadas de los vehículos. Además, se evaluó la posibilidad de que los fármacos arriba mencionados reaccionaran directamente con el reactivo Amplex ^" Red. para Io cual se añadieron estos fármacos a soluciones que contenían solamente el reactivo Amplex ^® Red en tampύn fosfato sódico, cuantificándose el cambio de fluorescencia tal y como se ha indicado anteriormente.

Ea emisión de fluorescencia específica (utilizada para obtener los resultados finales) se calculó después de sustraer la actividad de fondo, determinada en viales en los que las soluciones con las isoformas de la MAO se sustituyeron por solución de tampón fosfato sódico.

HOJA DE SUSTITUCIóN (REGLA 26)

PRESENTACIóN DE LOS DATOS Y ANáLISIS ESTADíSTICO

Salvo indicación contraria, los resultados mostrados en el texto y las tablas están expresados como Ia media ± error estándar de la media (e.e.m.). La significación estadística de la diferencia entre dos medias (p<0,05 o p<0,01 ) fue determinada por análisis de varianza de una vía (ANOVA) seguida del test de comparación múltiple de

Dunnctt.

Para estudiar los posibles efectos de nuestros compuestos y de los inhibidores de referencia en Ia actividad enzimática de las ¡soformas de la MAO. se evaluó la variación de fluorescencia (cuantificada como unidades arbitrarias de fluorescencia) por unidad de tiempo y. por consiguiente, los pmol/min de resorufina producida en la reacción entre el

H ₂ O ₂ y el reactivo Amplex Red. lo cual representa la medida indirecta de la producción de H ₂ O ₂ . Para ello, se prepararon varias concentraciones de resorufina para hacer una curva estándar con X=pmol de resorufina e Y=unidades arbirarias de fluorescencia. Los pmol de resorufina producidos son equivalentes a los pinol de p-tiramina oxidados. puesto que Ia estequiometría de la reacción es 1 : 1.

En estos experimentos, los valores de Cl $0 para los fármacos evaluados (nuestros compuestos y los inhibidores de referencia) fueron calculados por regresión lineal siendo X= log de Ia concentración molar del compuesto estudiado e Y= porcentaje de inhibición de la actividad MAO conseguida con las correspondientes concentraciones respecto al control. Además, se calculó el cociente [C I ₅ 0 (MAO-B)]/[C7jo (MAO-A)] como indicador de la selectividad en la inhibición mostrada sobre ambas isoformas. FáRMACOS Y COMPUESTOS QUíMICOS

Los fármacos utilizados en los experimentos fueron los nuevos compuestos, la moclobemida (gentilmente suministrada por los laboratorios Hoffman-La Roche, Basilea, Suiza), el hidrocloruro de R-(-)-deprenilo y el fosfato de iproniazida (adquiridos en Sigma-Aldrich. España), la sal sódica de resorufina, el hidrocloruro de clorgilina. el hidrocloruro de /Miramina. y la peroxidasa de rábano picante (contenidos en el kit para el ensayo de la MAO Amplex* Red de Molecular Probes).

Las diluciones apropiadas de los fármacos se prepararon, en agua MiIIiQ, cada día antes de su uso a partir de las siguientes concentraciones stock mantenidas a -20 ⁰ C:

HOJA DE SUSTITUCIóN (REGLA 26)

los nuevos compuestos (0.1 M) en DMSO; el R-(-)-deprenilo. la moclobemida, la iproniazida, Ia rcsorufina. Ia clorgilina, la />tiramina y la peroxidasa de rábano picante (0.1 M) en agua MiIIiQ.

Debido a Ia fotosensibilidad de algunas sustancias utilizadas (por ejemplo el reactivo Amplex Red), todos los experimentos fueron realizados en la oscuridad. En ninguno de los experimentos, ni el agua MiIIiQ ni el vehículo usado (DMSO) tuvieron un efecto farmacológico significativo.

Los materiales específicos utilizados en los diferentes experimentos fueron suministrados por las empresas indicadas en las secciones correspondientes. El resto de los compuestos químicos, incluyendo los reactivos utilizados en la preparación de las distintas soluciones fisiológicas y tampones. fueron de la mejor calidad disponible comercialmente (grado analítico).

COMPUESTOS EVALUADOS

Los compuestos usados para la presente invención están basados en las siguientes fórmulas generales:

• 2,3-DIHIDRO-OXOISOAPORFINA, Fórmula general (1 ):

En que: a) en que si: - R ¹ , R ² . R ³ . R ⁴ . R ⁵ R ⁶ , R ⁷ , R ⁸ y R ⁹ es hidrógeno, se trata del compuesto 2,3-dihidiO-7//-dibenzo[¿/e,λ]qu¡nolin-7-ona. llamado de aquí en

HOJA DE SUSTITUCIóN (REGLA 26)

adelante OXO l; b) en que si: - R ¹ , R ² . R ³ . R ⁵ , R ⁶ , R ⁷ . R ⁸ y R ⁹ es hidrógeno y R ⁴ representa un metoxilo, se trata de 5-metoxi-2,3-dihidro-7//-dibenzo[¿/e _t λ]quinolin-7-ona, llamado de aquí en adelante OXO 2; y c) en que si:- R ¹ , R ² , R ³ , R ⁶ . R ⁷ . R ⁸ y R ⁹ es hidrógeno, R ⁴ representa un metoxilo y

R ^" representa un hidroxilo; se trata de 5-metoxi-6-hidroxi-2,3-dihidro-7//- dibenzo[t/t;,/?]qu¡noIin-7-ona. llamado de aquí en adelante OXO 3.

• 7-OXOIS OAPORFINA, Fórmula general (2):

ue: a) en que si: - R ¹ , R ² , R ³ , R ⁴ . R ⁵ . R ⁶ , R ⁷ , R ^s y R ⁹ es hidrógeno, se trata del compuesto 7//-dibenzo[¿/e,λ]quinolin-7-ona. llamado de aquí en adelante OXO 4: b) en que si: - R'. R ² . R ³ . R ⁵ . R ⁶ . R ⁷ . R ⁸ y R ⁹ es hidrógeno y R ⁴ representa un metoxilo. se trata del compuesto 5-metoxi-7//-dibenzo[¿/e,/?]quinolin-7-ona. llamado de aquí en adelante OXO 5; c) en que si: - R ¹ , R ² , R ³ , R ⁶ . R ⁷ . R ^s y R ⁹ es hidrógeno. R ⁴ representa un metoxilo y

R ^D representa un hidroxilo, se trata del compuesto 5-metoxi-6-hidroxi-7H- dibenzo[í/e,λ]quinolin-7-ona. llamado de aquí en adelante OXO 6; y d) en que si: - R ¹ . R ² . R ³ , R ⁵ . R ⁶ . R ⁷ , R ⁸ y R ⁹ es hidrógeno. R ⁴ representa un

HOJA DE SUSTITUCIóN (REGLA 26)

hidroxilo. se trata del compuesto 5-hidroxi-7H-dibenzo[í/e,λ]quinolin-7-ona. llamado de aquí en adelante OXO 7. • 6-OXüISüAPüRFINA. Fórmula general (3):

En que: a) en que si: - R ¹ , R ² . R ³ , R ⁵ . R ⁶ . R ⁷ . R ⁸ y R ⁹ es hidrógeno y R ⁴ representa un metoxilo, se trata del compuesto 5-ιneloxi-6//-dibenzo[c/e,λ]quinolin-6-ona. llamado de aquí en adelante OXO 8.

• 2,3.8,9,10.1 1 -HEXAHIDRO-OXOISOAPORFINA, Fórmula general (4):

HOJA DE SUSTITUCIóN (REGLA 26)

En que:

(a) en que si: - R ¹ , R ² . R ³ , R ⁵ . R ⁶ . R ⁷ . R ⁸ y R ⁹ es hidrógeno y R ⁴ representa un metoxilo, se traía del compuesto 5-mctox¡-2.3,8.9.10.1 1 -hexahidro-7//- dibcn/o|í/fJ;Jquinolin-7-ona. llamado de aquí en adelante OXO 9.

ISOAPORFINA. Fórmula general (5):

En que:

(a) en que si: - R ¹ . R ² . R ³ . R ⁵ . R ⁶ . R ⁷ . R ⁸ y R ⁹ es hidrógeno y R ⁴ representa un metoxilo, se traía del compuesto 5-metoxi-7-hidroxi-1.2.3.1 l b-tetrahidro-7H- dibenzo[í/e,//]quinolina, llamado de aquí en adelante OXO 10.

RESULTADOS FARMACOLóGICOS Y FORMULACIóN DEL COMPUESTO

Los compuestos usados para la presente invención son inhibidores selectivos de la MAO-A. Los valores de CI ₅ 0 de los compuestos de fórmula general (1 ). (2). (3). (4). y (5) detallados anteriormente son mostrados en la siguiente Tabla 1 : Tabla 1. Relación de selectividad para la MA0-λ [CI ₅₀ (MAO-B)/C/ _j0 (MAO-A)] y valores de CI ₅ 0 del efecto inhibidor de los fármacos estudiados (incluyendo inhibidores de referencia) sobre Ia actividad enzimálica de las i so formas de la MAO recombinante humana.

HOJA DE SUSTITUCIóN (REGLA 26)

COMPUESTO MAO-A (CI ₅₀ ) MAO-B (CJ ₅ *) Razón

OXO 27.32 ± 1.18 μM ^a ** >3.66 ^b

0X0 2 13.65 ± 0.34 nM ^a ** >7.326.00 ^b

OXO 3 44.37 ± 2.25 nM ^a *# >2.253.77 ^fi

OXO 4 723.48 ± 52.36 uM ^a ** >0.14 ^D

0X0 5 835.75 ± 49.75 pM ^; ** >1 19.653.01'

0X0 6 .23 ± 0.08 μM ^d ** >81.30 ^D

0X0 7 34.75 ± 1.28 nM ^a ** >2877.70 ^b

OXO 8 13.36 ± 0.54 nM ^a ** >7.485.03 ^b

0X0 9 2.12 ± 0.07 μM ^a *** >23.58 ^b

OXO 10 9.81 ± 0.26 μM ^a *** >5.10 ^b

Clorgilina 3.97 ± 0.75 nM ^a 63.41 ± 1 .20 μM 15.972.29

Deprcnilo 68.73 ± 4.21 μ.M ^a 17.32 ± 1 .96 nM 0.00025

Iproniazida 6.56 ± 0.76 μM 7.54 ± 0.36 μM 1.15

Moclobcmϊda 361.38 ± 19.37 μM ^a **** >2.77 ^b

HOJA DE SUSTITUCIóN (REGLA 26)

Los resultados son Ia media ± e.e.m. de, al menos, cinco experimentos. Nivel de significación estadística: ¹ P < 0.01 versus el valor correspondiente de C7 _$ o obtenido frente a la MAO-B, determinado por el test ANOVA/Dunnett s. ** Inactivo a 100 μM (mayor concentración estudiada). *** Inactivo a 50 μM (mayor concentración estudiada). **** Inactivo a 1 mM (mayor concentración estudiada). h Valor calculado considerando como CI ₅ 0 (MAO-B) la concentración más alta estudiada (**. *** o **** según los casos).

Los resultados muestran que los compuestos denominados OXO 5 y OXO 8 poseen valores de CI ₅ 0, en el rango pM y nM respectivamente, mucho menores que los inhibidores de referencia de la MAO-A. lo que puede ser apreciado en las curvas de concentración-respuesta para cada compuesto (Figuras 1 y 2). En la Figura 1 se representa la curva "concentración-respuesta" representativa de los efectos inhibidores producidos por el compuesto OXO 5 (CI ₅₀ 835.75 ± 49.75 pM) sobre la actividad enzimática de la MAO-A recombinante humana. En la Figura 2 se representa la curva "concentración-respuesta" representativa de los efectos inhibidores producidos por el compuesto OXO 8 (Cl ₅ 0 13.36 ± 0.54 nM) sobre la actividad enzimática de la MAO-A recombinante humana. Cada punto de ambas figuras representa la media ± e.e.m (indicado por líneas verticales) de, al menos, cinco experimentos. Los demás compuestos estudiados también poseen valores de CI ¡o dentro del rango del nM a μM, lo que los hace ser ampliamente efectivos y selectivos como inhibidores de la isoforma MAO-A para la administración de los compuestos por vía oral o parenteral en el tratamiento de la depresión.

En otro aspecto, la presente invención proporciona posibles formulaciones farmacéuticas para la preparación de un medicamento, basadas sobre los compuestos presentados aquí, para el tratamiento de trastornos relacionados con la depresión.

Las dosis en las cuales el compuesto podría ser administrado varían dentro de un amplio rango, ajustándose a los requerimientos de cada caso en particular. En general, la dosis efectiva para Ia administración oral o parenteral podría estar comprendida entre 15

HOJA DE SUSTITUCIóN (REGLA 26)

nanogramos/kg/día y 150 milígramos^kg/día, con una dosis preferida entre 150 nanogramos/kg/día y 15 milígramos/kg/día para todas las indicaciones descritas. La dosis diaria para un adulto humano con peso de 70 kg podría variar entre 1.05 nanogramos y 10,500 miligramos por día. preferiblemente entre 10.5 microgramos/día y 1.05 miligramos/día.

Las diferentes composiciones farmacéuticas de la invención pueden ser administradas por vía oral o parenteral de acuerdo a las diferentes formulaciones farmacéuticas descritas en las Tablas 2-5:

EJEMPLO A Tableta Tabla 2. Formulación farmacéutica y peso del ingrediente activo más los excipientes de una tableta.

Componente mg/Tableta

Ingrediente activo 0.05

Lactosa en polvo 195

Almidón 30

Polivinilpirrolidona 20

Carbonato de magnesio 4.95

Peso de la Tableta 250

EJEMPLO B Tableta

Tabla 3. Formulación farmacéutica y peso del ingrediente activo más los excipientes de una tableta.

Componente mg/Tableta

Ingrediente activo 0.1

Lactosa en polvo 400

Almidón 50

Polivinilpirrolidona 40

Carbonato de magnesio 9.9

Peso de la Tableta 500

HOJA DE SUSTITUCIóN (REGLA 26)

EJEMPLO C Cápsula

Tabla 4. Formulación farmacéutica y peso del ingrediente activo más los excipientes de una cápsula.

Componente mg/CápsuIa

Ingrediente activo 0.01

Lactosa cristalina 70

Microcristales de celulosa 15

Talco 10

Carbonato de magnesio 4.99

Peso de la Cápsula 100

EJEMPLO D Solución inyectable

Tabla 5. Formulación farmacéutica y cantidad del ingrediente activo más los excipientes de una solución inyectable.

Componente Cantidad

Ingrediente activo l O mg

IM HCl 20 μl

NaCl 8 mg

Fenol l O mg

I M NaOH c.s.p. pH 5

H ₂ O c.s.p. 1 mi

HOJA DE SUSTITUCIóN (REGLA 26)