用于肿瘤治疗的含氟水溶性铂配合物及其制备 方法 技术领域

本发明涉及一种水溶性铂配合物，特别涉及一 种用于肿瘤治疗的含氟水溶性铂配合物及 制备方法。 背景技术

铂类抗癌药是肿瘤治疗领域具有代表性的一类 药物。 其属于细胞周期非特异性药物， 对 肉瘤， 恶性上皮肿瘤， 淋巴瘤以及生殖细胞肿瘤都具有治疗功效。 目前世界上广泛应用于临 床治疗的具有代表性的铂类抗癌药主要有： 顺铂， 卡铂和奥沙利铂。

铂类抗癌药物的致命缺点是具有极强的毒副作 用以及固有的和后续形成的耐药性问题。 另外由于此类药物是金属有机化合物， 所有铂类上市药物普遍存在水溶性极低的特性 ， 下表 是上述三种上市临床药物的水溶性数据： 由于过低的水溶性不仅给药品制剂的稳定性和 临床应用带来了很多的不利影响， 比如很 难把它们顺利地配制成一种方便和具有合适浓 度的临床药剂。 不仅如此， 过低的药物水溶性 还直接影响到药物在身体内的积蓄和代谢， 含有金属原子的铂类化合物尤其在药物的排泄 等 方面受水溶性的影响更为显著， 积蓄在肾脏组织和血液里的铂类药物不能被身 体及时排出形 成了铂类药物普遍具有很强毒副作用的特点。 以下是各种具有新型化学结构的铂类抗肿瘤药 物由于水溶性不能得到改善以及由此导致的重 笃药物积蓄型毒副作用而被迫中止临床试验的 药品案例：

(参考文献： Status of platinum drugs in the cl inic and in cl inical trials, Dalton Transactions, 2010, 39， 8113-8127· )

综上所述， 解决铂类药物的水溶性问题是目前世界上铂类 抗癌药研发领域专注的最重要 课题之一 ( Galanski, Markus； Keppler, Bernhard K Searching for the Magic Bul let： Anticancer Platinum Drugs Which Can Be Accumulated or Activated in the Tumor Tissue. An ti -Cancer Agen ts in Medicinal Chemistry, ( 2007)， 7， 55- 73)。 增加铂类药物的水溶 性， 一方面可望增加药物在生物体内的稳定性， 降低药物针对各种人体脏器和组织以及细胞 中普遍存在的亲核基团的反应性， 降低毒副作用。 另一方面， 增加药物的水溶性可以帮助药 物在肾脏的有效排泄， 从而减少药物在体内的积蓄和对肾脏等组织器 官的毒副作用。 发明内容

本发明的目的是克服现有技术中的不足， 种能够实质性地改变铂类药物水溶性问 题的用于肿瘤治疗的含氟水溶性铂配合物。

本发明的第二个目的是提供制备用于肿瘤治疗 的含氟水溶性铂配合物的中间体 ₍ 本发明的第三个目的是提供用于肿瘤治疗的含 氟水溶性铂配合物的制备方法。

本发明的技术方案概述如下- 用于肿瘤治疗的含氟水溶性铂配合物， 是式 （I) 所示：

其中：

X和 Y是配位体， 所述 X和 Y相同或木同并且各自代表一个 NH ₃ 、 一个 d-C ₈ 链状垸基 伯胺、 一个 C ₃ -C ₈ 环状烷基伯胺、 一个芳香 、一个至少有一个 -C ₄ 垸基取代的芳香胺、 一 个分子式为 -ΝΗ- 的仲胺，其中 和 神同或者不同分别表示 d-C ₈ 链状垸基或 共同组成 C ₄ -C ₈ 的环状烷基仲胺、一个具有 氮芳香族杂环化合物或至少有一个 - 代的含氮芳香族杂环化合物、 一个具有含 芳香族杂环化合物或含硫非芳香族杂环化合物 ， 或 X和 Y—起用结构式 （VIII) 所示：

其中 D为 Co或 的亚焼基； B

n是 1-6; 优选 1-4; 最好是 2或

R选自下述单糖基， 单糖 1-位取代为 α或者 β或者两者的混合物:

Allose Altrose Gulose

替换页（细则笫 26条)

R优选下述单糖基， 单 1-位取代为 α或者 β或者两者的混合物：

Glucose

IS, 2S) -环己二胺， 顺式- 2-环己二胺或消旋顺式 -1， 2

中间体， 用式（III)所示：

其中：

M代表氢原子或者元素周期表第 IA族的金属原子； 或者两个 M共同代表一个第 ΠΑ族 的金属原子；

n是 1-6; 优选 1-4; 最好是 2或 3;

R选自下述单糖基， 单糖 1-位取代为 α或者 β或者两者的混合物：

替换页 (细则笫 2 6条)

Glucose Galactose

AUose Altrose Gulose

R优选下述单糖基， 单糖 1-位取代为 α或者 β或者两者的混合物：

Glucose Mannose Galactose 用于肿瘤治疗的含氟水溶性铂配合物 （I) 的制备方法， 包括如下步骤：

将式 （Π) 化合物与调节了 pH为 7-9的式 （III) 化合物的水溶液进行反应， 或将式 （II) 化合物与式 （III) 化合物在有无机碱的存在下的水中进行反应， 即制成用于肿瘤治疗的含氟 水溶性铂配合物 （I); 所述 （Π) 的结构式为：

式 （II) 中：

X和 Υ是配位体，所述 X和 Υ相同或不 (|]并且各自代表一个 ΝΗ ₃ 、一个 (：,-(： ₈ 链状垸基伯胺、 一个 C ₃ - C ₈ 环状垸基伯胺、 一个芳香胺、 一个至少有一个 - C ₄ 烷基取代的芳香胺、 一个分子式 为 -！^!- R ₂ 的仲胺，其中 R,和 R ₂ 相同或者不同分别表示 d-C ₈ 链状垸基或 R,-NH-R ₂ 共同组成(： ₄ -( ₈ 的环状垸基仲胺、 一个具有含氮芳香族杂环化合物或至少有一个 烷基取代的含氮芳香族 替换页（细则 26 ) 杂环化合物、 一个具有含硫芳香族杂环化合物或含硫非芳香 族杂环化合物， 或 X和 Y—起用 结构式 （VIII ) 所示-

其中 D为 C。或 的亚垸基； B为 C ₂ - C ₈ 的亚垸基；

本发明的 X和 Y所表示的最佳的例子包括但不限于：

X和 Y各为 NH ₃ ， 异丙胺， 环丙胺， 环丁胺， 环戊胺， 环己胺； 或者 X和 Y其中之一为 NH ₃ ， 另一个为异丙胺， 环丙胺， 环丁胺， 环戊胺， 环己胺， 2-甲基吡啶； 1， 2-乙二胺， 1， 3-丙 二胺， 2-甲基四亚甲基二胺， 1， 2-环丁二胺， 1， 2-环戊二胺， 1， 2-环己二胺， 1， 2-环庚 二胺， 1， 2-环辛二胺， 1-氨基 -2-氨甲基环己垸， 1， 1-二氨甲基环己垸， 5， 5-二氨甲基 -1， 3-二噁垸， 2-氨甲基-吡咯垸和 2-氨甲基吡啶； 当上述配体化合物中含有手性中心时， 可以是 其中任一光学异构体或者消旋体混合物；

和 相同或者不同， 各自代表羟基， 硝基， 高氯酸根， 或者 ^和 A共同代表硫酸根， 碳酸根；

( III ) 的结构式为-

式 （III ) 中：

M代表氢原子或者元素周期表第 IA族的金属原子； 或者两个 M共同代表一个第 ΠΑ族的 金属原子； M优选氢原子、钠原子、钾原子、锂原子或铯� �子； 或两个 M共同代表一个钡原子; n是 1-6; 优选 1-4; 最好是 2或 3;

R选自下述单糖基， 单糖 1-位取代为 α或者 β或者两者的混合物:

Glucose Mannose Galactose

Allose Altrose Gulose

ose Talose

R优选:

[annose

单糖 1-位取代为 α或者 β或者两者的混余物。

所述无机碱为氢氧化钠， 氢氧化钾， ^酸钠， 碳酸氢钠， 碳酸钾， 氢氧化锂， 氢氧化钡 或氢氧化铯。

优选的 X和 Υ—起为反式 - ( 1R 2R)，环己二胺， 反式 - ( 1S， 2S) -环己二胺，顺式 - ( 1R, 2S) -环己二胺， 顺式- ( 1S， 2R) -环己二胺， 消旋反式 -1， 2-环己二胺或消旋顺式 -1， 2-环己 二胺。 最好是： 反式- ( 1R, 2R) -环己二胺。

本发明的优点： 由于氟原子是电负性巋大的元素， 在本发明所提供的含氟原子铂配合物 中由氟原子取代所形成的诱导效应 （即因分子中原子或基团极性 （电负性） 不同而致使成键 电子云在原子链上向某一方向移动的效应） 可以大大增加铂配合物在水溶液中的极性， 即水 溶性。 试验证明本发明的铂配合物与临床药物奥沙利 铂相比其水溶性超过一百倍。 另外， 本 发明所取得的含氟怕配合物的稳定性与临床药 物奥沙利铂相比也得到了明显改善。 第三， 动 物模型药效实验证明， 含有氟原子的本发明所提供的含糖铂配合物在 长期抑制肿瘤的效果方 面亦优于奥沙利铂， 充分体现了本发明含氟铂配合物的肿瘤靶向效 果。 综上所述， 本发明所 提供的含氟铂类配合物， 不仅能够解决现存铂类药物因为缺乏水溶性而 存在的制剂稳定性差 的问题以及临床使用不方便的缺陷， 而且能够改善和提高现有临床药物在肿瘤治疗 效果方面 存在的不足。

替换页（细则笫 26条） 附图说明

图 1为实施例 1制备的配合物抗肿瘤药效 -1。

图 2为实施例 1制备的配合物抗肿瘤药效 -2。

图 3为实施例 5制备的配合物抗肿瘤药效 -1。

图 4为实施例 5制备的配合物抗肿瘤药效 -2。

图 5为实施例 9制备的配合物抗肿瘤药效 -1。

图 6为实施例 9制备的配合物抗肿瘤药效 -2。

图 7为实施例 10制备的配合物抗肿瘤药效 -1。

图 8为实施例 10制备的配合物抗肿瘤药效 -2。

图 9为实施例 3、 实施例 18制备的配合物在动物肿瘤模型中的抗肿瘤药� ��。 具体实施方式

本发明的实施例是为了使本领域的技术人员更 好地理解本发明， 但不以任何方式限制本 发明。

作为本发明所提供的由式 （I ) 所表示的用于肿瘤治疗的含氟水溶性铂配合物 （1 )， 其优 选化合物的代表性举例亦可以由下述表 1 列出， 但本发明所涵盖的含氟水溶性金属铂配合物 不限于以下的举例。

当式 （I ) 中的 R分别为 D-葡萄糖、 D-半乳糖或者 D-甘露糖取代基时； n和 X、 Y见 表 1：

表 1

n X Y

1-6 NH3 NH3

1-6 异丙胺 异丙胺

1-6 环丙胺 环丙胺

1-6 环丁胺 环丁胺

1-6 环戊胺 环戊胺

1-6 环己胺 环己胺

1-6 NH3 环丁胺

1-6 NH3 环戊胺

1-6 NH3 环己胺

1-6 NH3 2-甲基吡啶

1-6 1， 2-乙二胺

1-6 1， 3-丙二胺 1-6 1， 2-环丁二胺

1-6 1， 2-环戊二胺

1-6 1， 2-环己二胺

1-6 1， 2-环庚二胺

1-6 1， 1-二氨甲基环己垸

1-6 1， 2-二氨甲基环丁垸

1-6 2-氨甲基吡啶

表 1中的配体 1， 2-环己二胺可以是反式- ( 1R， 2R) -环己二胺， 反式- ( 1S， 2S) -环己 二胺， 顺式- ( R， S) -环己二胺或顺式- ( S， R) -环己二胺， 消旋反式 -1， 2-环己二胺， 消 旋顺式 -1， 2-环己二胺之中的任意一种。

本发明所提供的式 （I )所示的用于肿瘤治疗的含氟水溶性铂配合物� � 用下述的方法来完 成， 见反应式：

方法 A:

(ΠΙ) (II) (I) 方法 B:

(ΠΙ) (II) (I) 在方法 A中， 当 （III ) 中 M是氢原子时， 反应通过使用适当的无机碱， 例如氢氧化钠， 氢氧化钾， 碳酸钠， 碳酸氢钠， 碳酸钾， 氢氧化锂以及氢氧化铯等来调节反应水溶液的 pH维 持在 7-9之间来完成式（I )所示配合物的制备； 当 M为金属原子时， 例如： 钠原子、 钾原子、 锂原子、 钡原子或铯原子， 反应可在水溶液中顺利进行， 必要时使用少量的上述无机碱的水 溶液维持反应溶液的 pH在 7-9之间即可完成式 （I ) 所示配合物的合成。

在方法 B中， 当 M是氢原子时， 反应通过使用等当量的氢氧化钡作为无机碱， 在水溶液中 完成与式 （Π ) 所示的金属铂硫酸盐化合物的缩合反应来制备 式 （I ) 所示配合物。 由方法 B 制备本发明配合物时， 亦可以使用事先制得钡盐， 即两个 M共同代表一个钡原子， 与式 （II ) 所示的金属铂硫酸盐配合物在水溶液中进行反 应来完成配合物的制备过程。

上述反应的溶剂最好使用去离子水， 反应温度一般在室温或者根据需要加热到 60至 90°C 进行反应。

方法 A和 B中式 （II ) 所表示的化合物可以通过相应的顺 -二氯化铂与 X和 Y的配合物， 与硝酸银或硫酸银反应而制备， 例如： 顺-二氯- ( 1， 2-二氨基环己垸） 合铂与 2当量的硝酸 银或 1 当量的硫酸银反应而制备。 该反应在水溶液中进行， 使用的水最好是去离子水。 反应 温度在室温比较合适。

如此所得到的化合物 （Π ) 与事先制备好的化合物 （III ) 用蒸馏水或者去离子水作溶剂 进行反应。 每当量的化合物 （III ) 选用 0. 5 - 4当量的化合物 （11 )， 优选条件是 1至 2当 量。 反应条件是在 pH=7-9的条件下完成， 该条件可以通过使用适当的碱来维持反应介质 而达 到。 该碱的种类最好是无机碱， 例如氢氧化钠， 氢氧化钾， 氢氧化钡等， 碳酸钠， 碳酸钾， 碳酸氢钠。 最好是使用这些碱的大约 1 当量浓度 （1N) 的水溶液。 反应可以在一个比较宽的 温度范围内来进行， 例如选择在 0-100°C的温度范围来进行上述反应。 最好是从室温到 90°C， 并同时伴随搅拌为好。 根据不同的目标产物反应需要的时间变化范围 也很宽。 根据不同反应 物的性质， 一般需要 1小时到 30天来完成。 更多的情况下需要 10小时至 15天的时间。

很多方法可以被用来精制上述反应中得到的生 成物（1 )。例如反应完成后的混合物可以先 通过过滤除去可能生成的沉淀物， 然后通过减压蒸馏浓缩， 然后加入有机溶剂， 使所要的目 标化合物（I )沉淀析出。一般选择能够与水互溶的有机溶� �， 例如一种醇（例如甲醇， 乙醇， 丙醇， 丁醇， 异丙醇等）， 或者与水有一定互溶的一种醚 （例如二乙醚， 甲基叔丁基醚， 四氢 呋喃， 乙二醇二乙醚， 乙二醇二甲醚等）， 最后将得到的沉淀收集起来， 例如通过过滤， 就可 以得到所需要的式 （I ) 所表示的化合物。 提纯和精制上述反应中得到的生成物 （I ) 也可以 用色谱等的方法。 例如用离子交换树脂， 或者用制备液相色谱。 液相色谱分离精制一般使用 甲醇和水作为移动相来进行。

本发明化合物 （111 )， 可以由下述的反应式所给出的以葡萄糖为例的 方法 C， D或者方法 E，F中的任意一种来进行制备- 方法 C:

方法 D: 10

以葡萄糖为例， 在方法 C中， 作为与糖反应的含氟 2-位取代丙二酸酯衍生物， 可以通过使用 卤代垸基醇与氟代丙二酸酯化合物例如氟代丙 二酸二甲酯， 氟代丙二酸二乙酯， 氟代丙二酸 二苯甲酯， 氟代丙二酸环异内酯等按照文献已知的一般方 法 （例如： Journal of the American Chemical Society, 131 (8), 2786-2787; 2009 )来制备。得到的含氟丙二酸 _2_垸基醇衍生物与 D_葡萄 糖可以在路易斯酸存在下在溶剂中进行缩合反 应，从而得到 2-氟代 -2-垸基取代丙二酸酯的葡 萄糖苷化合物。 缩合反应的条件是针对葡萄糖化合物使用 0. 1-50当量的含氟丙二酸衍生物， 或者相反针对含氟丙二酸衍生物使用 0. 1-50当量的葡萄糖。使用的路易斯酸可以是 BF ₃ ，SnCl ₄ ， FeCl ₃ ， A1C1 ₃ ， 盐酸， 对甲苯磺酸， 樟脑磺酸等， 路易斯酸的量相对于葡萄糖可以是 0. 1-10 当量。 所使用的溶剂可以是四氢呋喃， 二氯甲垸， 甲苯， 乙二醇二甲醚， 乙二醇二乙醚等也 可以使用两种反应物中的任意一种当作溶剂来 进行该反应。 反应的温度可以从 o°c到 100°C， 一般可以在 60-80°C加热完成该反应。反应所需要的时间根� ��反应物的不同而不同， 一般 1小 时至 7天可以完成。 得到的反应产物可以通过一系列的提纯条件来 进行精制， 一般可以使用 硅胶层析分离法， 或者液相色谱柱分离法。 得到的该产物， 经过除去丙二酸的保护基就可以 最后得到所需要的式（III )所表示的化合物。脱保护的方法根据使用的� �护基的不同而不同， 如果使用氟代丙二酸二苯甲基酯， 可以使用加氢还原的方法进行脱保护， 如果使用氟代丙二 酸二乙酯或者氟代丙二酸环异内酯进行反应时 ， 脱保护反应可以使用无机碱在甲醇 -水， 或者 THF-水溶剂中来进行，有机溶剂与水的比例一� �为 1 : 1-4 : 1。所使用的无机碱可以是氢氧化钠， 氢氧化钾，氢氧化钡，氢氧化锂等。反应温度 一般为室温至 60°C，反应时间一般为 1-24小时。 脱保护生成的化合物的提纯可以使用硅胶层析 法或者离子交换树脂过滤法， 或者使用液相色 谱法来完成， 如果用蒸馏法直接除去反应溶剂， 所得到的生成物将会是相应的金属羧酸盐。

如方法 D所示， D-葡萄糖亦可以先转化成相应的乙酰化葡萄糖� �� 然后再实施与含氟 2-位 取代丙二酸酯衍生物的缩合反应， D-葡萄糖的乙酰化可以按照文献报道的方法实� ��， 例如在 吡啶中采用乙酸酐作为乙酰化试剂在室温或者 在 60°C加热 1-24小时即可完成。方法 D中除乙 酰化以外的各个步骤的反应条件与方法 C中所描述的相同。

方法 E和 F所示的制备方法是将卤代醇先与葡萄糖或者� �酰化葡萄糖在路易斯酸存在下 进行缩合， 然后进行与丙二酸酯衍生物的取代反应最后获 得化合物 （III ) 的制备路线。 所得 到的丙二酸酯的二位氟取代反应，可以使用代 表性的氟取代反应试剂 NFSI，或者 Selectfluor 来进行。 反应一般在 THF或者 DMF或者乙醚溶剂中将丙二酸酯用等当量或者过 量的碱处理后， 加入上述氟取代反应试剂来完成。 所使用的碱可以是氢化钠， 碳酸钾， 碳酸钠， 碳酸铯， 碳 酸氢钠等， 氟取代试剂的当量为丙二酸酯的 1-3倍， 反应温度一般在 0°C至 60°C， 最好在室 温条件下搅拌完成。 上述制备路线中涉及葡萄糖的乙酰化， 路易斯酸存在下的缩合反应， 丙 二酸酯的 2-位垸基化取代反应以及最后的脱保护反应， 其反应条件和实施方法与方法 C和方 法 D中所叙述的相同。

主要实验仪器： 核磁共振谱仪： BRUKER AVANCE III， 400MHz; 分析液相色谱仪： 北 京创新通恒 LC3000 型高效液相色谱仪， SPD-lOATvp 双波长紫外检测器， 7725i 手动进样器， CLASS- VP色谱工作站； 分析色谱柱： DaisoGel, C18, 4.6 250cm, 5μηι KNAUER德国； 半 制备液相色谱仪： 创新通恒 LC3000 半制备液相色谱， SPI001 ; 半制备色谱柱： DaisoGel 250x20mmID, C18, ΙΟμηΐ; 质谱仪： Agilent 6310 Ion Trap LC/MS; 令冻干燥机： FD-lc-50冻 干机 （北京博医康实验仪器有限公司）。

实施例 1 : ( 1 ) 1-0-D-葡萄糖苷 -2-溴 -乙垸 (IV-1 ) 制备：

(IV-1 )

1 ) 在室温条件下将葡萄糖 （2.7g) 加入到 2-溴乙醇 （10ml) ， 冷却到 0°C， 用氮气置换烧瓶 内空气， 在氮气保护下慢慢滴加 1ml三氟化硼-乙醚配合物；

2) 将反应液在 0°C搅拌 15分钟， 然后慢慢升温到室温并搅拌 30分钟， 然后将反应液加热到 80°C， 在 80°C反应 5小时； 反应完成后， 旋蒸除去溶剂， 使用硅胶柱色谱（二氯甲垸： 甲醇， 6： 1)对反应生成物实施简单纯化,得到粗产品 2.3g (IV-1 ) 。 质谱： MS， m/z: 287.23 [M+H]+ (2) l-O- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-葡萄糖苷） -2-溴 -乙焼 (V-1 ) 的制备：

在室温条件下， 将上一步反应得到的产品 1-0-D-葡萄糖苷 -2-溴 -乙垸 （IV-1 ) 2.3g溶解于 吡啶与乙酸酐 （7ml : 7ml) 中， 搅拌过夜， 用 TLC监测反应终点。 反应完成后， 加入 100ml 乙酸乙酯， 用体积浓度为 5%的盐酸水溶液（2x25ml)洗涤， 将水相用乙酸乙酯 （2><25ml)萃 取， 合并有机相。 将有机相依次用饱和氯化铵水溶液 （l x lOOml), 蒸馏水 （l >< 100ml)， 饱和 碳酸氢钠水溶液（l x lOOml), 饱和氯化钠水溶液（l x lOOml)洗涤， 用无水硫酸钠干燥。 用旋 转蒸发仪将溶剂蒸干， 得到微黄色粗产品。 得到的粗产品经硅胶柱色谱纯化 （石油醚： 乙酸 乙酯， 3 : 1 )， 得到无色油状目的产物 2.5g (V-l )。

核磁共振谱 （400 MHz ，CDC13 )，ppm: 5.45 ( lH，三重峰， J=9.6Hz); 5.15 ( 1H，双重峰, J=4Hz); 5.02 ( 1H， 三重峰， J=9.6Hz); 4.80-4.83 ( 1H， 多重峰）； 4.19-4.23 ( 1H， 多重峰）； 4.04-4.15

(2H， 多重峰）； 3.92-4.00 ( 1H， 多重峰）； 3.75-3.85 ( 1H， 多重峰）； 3.49 (2H， 三重峰, J=6Hz); 1.91-2.11 ( 12H， 多重峰）。 质谱： MS， m/z: 455.15 [M+H] ⁺

( 3 ) 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-葡萄糖苷） -丙垸 -3,3-二甲酸二乙酯 (VI-1 ) 的制备：

(VI-1)

将上一步反应得到的产品 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-葡萄糖苷） -2-溴 -乙焼 (V-1) (2.5g) 溶解于 5ml 干燥的 N， N-二甲基甲酰胺中，向反应液中加入碳酸钾（ 3g )，丙二酸二乙酯（ 1.76g )， 室温搅拌过夜。 用 TLC监测反应终点， 待反应完成后， 向反应液中加入 100ml乙酸乙酯， 然 后用饱和氯化铵水溶液（1x50ml)洗涤， 将水相用乙酸乙酯萃取（2x25ml)， 合并有机相。 将 有机相依次用饱和氯化铵水溶液（lxlOOml), 蒸馏水（lxlOOml),饱和氯化钠溶液（ 1x100ml) 洗涤， 然后用无水硫酸钠干燥， 用旋转蒸发仪将溶剂蒸干， 得到的淡黄色油状物用硅胶柱色 谱纯化 （石油醚： 乙酸乙酯， 3 : 1)， 得到无色透明油状目的产物 2.6g (VI-l)o

核磁共振谱 （400 MHz ， CDC13), ppm: 5.42 ( 1H， 三重峰， J=9.6Hz); 4.96-5.10 (2H， 多 重峰）； 4.78-4.90 (1H， 多重峰）； 4.03-4.33 (5H， 多重峰）； 3.92-4.02 ( 1H， 多重峰）； 3.71-3.87 (1Η， 多重峰）； 3.71-3.87 (1Η， 多重峰）； 3.55 ( 1H， 三重峰， J=8Hz); 3.40-3.50 ( 1H， 多重峰）； 2.13-2.28 (2H， 多重峰）； 1.94-2.14 (12H, 多重峰）； 1.15-1.35 (6H， 多重峰）。 质 谱： MS， m/z: 535.34 [M+H] ⁺

(4) 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-葡萄糖苷） -丙垸 -3-氟 -3,3-二甲酸二乙酯 (VII-1) 的制备：

、、、、、

(VII-1)

将 l-O- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-葡萄糖苷） -丙垸 -3,3-二甲酸二乙酯（VI-1) 2.6g溶解在 20mL 干燥的四氢呋喃中， 冷却到 0°C。 用氮气置换烧瓶内空气， 在氮气保护下缓慢加入 235mg氢 化钠固体 （60%)。 反应液升温至室温， 搅拌 12小时。 向反应液中加入 2g 1-氟甲基 -4-氟 -1,4- 二氮双环 [2.2.2.]辛垸双氟硼酸盐,反应液室温反应 24 小时， 旋蒸除去溶剂。 向反应液中加入 100ml乙酸乙酯，然后用饱和氯化铵水溶液（1x50 ml)洗涤，将水相用乙酸乙酯萃取（2><25ml)� �� 合并有机相。 将有机相依次用饱和氯化铵水溶液 （lxlOOml), 蒸馏水 （lxlOOml), 饱和氯化 钠水溶液 （1x100ml)洗涤， 然后用无水硫酸钠干燥， 用旋转蒸发仪将溶剂蒸干， 得到的淡黄 色油状物用硅胶柱色谱纯化 （石油醚： 乙酸乙酯， 3 : 1)， 得到无色透明油状目的产物 1.8g (VII-1 )。

核磁共振谱 （400 MHz ， CDC13), ppm: 5.39 ( 1H， 三重峰， J=9.6Hz); 4.95-5.10 (2H， 多 重峰）； 4.75-4.90 (1H， 多重峰）； 4.20-4.45 (5H， 多重峰）； 4.03-4.15 ( 1H， 多重峰）； 3.95-4.05 (1Η， 多重峰）； 3.85-3.95 (1Η， 多重峰）； 3.45-3.60 ( 1H， 多重峰）； 2.48-2.65 (2H， 双 三重峰， J=20Hz， 6Hz); 1.90-2.15 (12H， 多重峰）； 1.20-1.40 (6H， 多重峰）。 质谱： MS, m/z: 553.29 [M+H] ⁺

(5) l-O- (D-葡萄糖苷） -丙垸 -3-氟 -3,3-二甲酸 （III-1) 的制备-

(III— 1)

1) 将 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-葡萄糖苷） -丙垸 -3-氟 -3,3-二甲酸二乙酯 (VII-1) (1.8g， ) 溶解于 5mL甲醇中。 将氢氧化钠 （lg) 溶解于 10mL水中， 室温下加入到反应液中， 然后升 温至 60 V反应 24小时。 用 TLC监测反应终点。

2) 待反应完成后， 用旋转蒸发仪除去甲醇， 使用强酸性阳离子交换树脂处理产品。 用水洗脱 得到的水溶液用冷冻干燥机干燥后得到无色粘 稠状液体 lg (III-1)， 粗产品直接用于下步反 应。

质谱： MS， m/z: 329.31 [M+H] ⁺

(6) 顺-【反式- (1R， 2R) -二胺基环己垸】 铂 (II) (1-0-D-葡萄糖苷 -丙垸 -3-氟 -3， 3-二甲 酸酯） （1-1) 的制备-

1) 将1-0-0-葡萄糖苷-丙垸-3-氟-3，3-二甲酸粗产品 （111-1) ( lg) 溶解于 10mL水中， 用 氢氧化钡水溶液调节反应液 PH到 7， 室温搅拌 30分钟；

2) 在氮气保护下将反式- (1R， 2R) 环己二胺硫酸铂 （1.2g) 溶解于 2ml水中， 加入到 1) 的反应液中， 用氢氧化钡水溶液调节 pH到 7， 室温避光搅拌过夜；

3) 待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC分离并使用冷冻干燥 机冻干， 得到 1.2g最终产品 （1-1) ， 白色固体。

核磁共振谱 （400 MHz ， D20)， ppm: 4.86 (0.8H， 双重峰， J=3.6Hz， α—异构体）； 4.42 (0.2Η, 双重峰, J=7.2Hz， β—异构体）； 3.10-4.00 (10Η， 多重峰）； 2.20-2.45 (2Η， 多 重峰）； 1.96 (2Η， 两重峰， J=12Hz); 1.49 (2H， 两重峰， J=8Hz); 1.12-1.30 (2H， 单 峰）； 0.95-1.10 (2H， 多重峰）。 质谱： MS， m/z: 636.16 [M+H] ⁺

实施例 2: (1) 1-O-D-葡萄糖苷 -3-溴 -丙垸 （IV-2) 的制备：

(IV-2)

在室温条件下将葡萄糖 （1.8g)加入到 3-溴丙醇 （8mL)， 冷却到 0°C， 用氮气置换烧瓶内 空气， 在氮气保护下以慢慢滴入 0.7mL三氟化硼-乙醚配合物； 将反应液在 0°C搅拌 15分钟， 升至室温搅拌 30分钟， 然后加热到 80°C， 在 80°C反应 5小时。 反应完成后， 旋蒸除去溶剂， 使用硅胶柱色谱（二氯甲垸： 甲醇，体积比 6： 1)进行简单纯化后,得到粗产品 2g (IV-2)。 质 谱： MS， m/z: 301.23 [M+H] ⁺ (2) 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-葡萄糖苷） -3-溴 -丙垸 （V-2) 的制备:

(V-2)

在室温条件下， 将上一步反应得到的 1-0-D-葡萄糖苷 -3-溴 -丙垸（IV-2)粗产品 2g溶解于 吡啶与乙酸酐 （6ml : 6ml) 中， 搅拌过夜， 用 TLC监测反应终点。 反应完成后， 加入 100ml 乙酸乙酯， 用体积浓度为 5%的盐酸水溶液（2x25ml)洗涤， 将水相用乙酸乙酯 （2><25ml)萃 取， 合并有机相。 将有机相依次用饱和氯化铵水溶液 （lxlOOml), 蒸馏水 （lxlOOml), 饱和 碳酸氢钠水溶液（lxlOOml), 饱和氯化钠水溶液（lxlOOml)洗涤， 用无水硫酸钠干燥。 用旋 转蒸发仪将溶剂蒸干， 得到微黄色粗产品。 得到的粗产品经硅胶柱色谱纯化 （石油醚： 乙酸 乙酯， 3 : 1)， 得到无色油状目的产物 2.1g (V-2)。

核磁共振谱 （400 MHz， CDC13), ppm: 5.47 ( 1H， 三重峰， J=9.6Hz); 5.00-5.15 (2H， 多 重峰）； 4.85-4.95 (1Η， 多重峰）； 4.20-4.40 (1H， 多重峰）； 4.07-4.18 ( 1H， 多重峰） 4.00-4.07 (1H， 多重峰）； 3.80-3.95 ( 1H， 多重峰）； 3.40-3.70 (3H， 多重峰）； 1.90-2.30 (14H， 多重峰）。 质谱： MS， m/z: 469.15 [M+H] ⁺

(3) 1-0- (2,3,4,6-四乙 VI-2) 的制备：

将上一步反应得到的产品 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-葡萄糖苷） -3-溴 -丙垸（V-2) (2.1g) 溶解于 15ml 干燥的 N， N-二甲基甲酰胺中， 向反应液中加入碳酸钾 （2.5g)， 丙二酸二乙酯 (1.45g)， 在室温搅拌过夜。 用 TLC监测反应终点， 待反应完成后， 向反应液中加入 100ml 乙酸乙酯， 用饱和氯化铵水溶液（1x50ml)洗涤， 将水相用乙酸乙酯萃取（2x25ml)， 合并有 机相。 将有机相依次用饱和氯化铵水溶液 （lxlOOml), 蒸馏水 （lxlOOml), 饱和氯化钠溶液 (lxlOOml)洗涤， 然后用无水硫酸钠干燥， 用旋转蒸发仪将溶剂蒸干， 得到的淡黄色油状物 用硅胶柱色谱纯化 （石油醚： 乙酸乙酯， 3： 1)， 得到无色透明油状目的产物 2.2g (VI-2)o 核磁共振谱 (400 MHz， CD3C13), ppm: 5.45 ( 1H， 三重峰， J=9.6Hz); 4.95-5.15 (2H， 多 重峰）； 4.75-4.93 (1Η， 多重峰）； 4.13-4.35 (5H， 多重峰）； 4.03-4.11 ( 1H， 多重峰） 3.93-4.02 ( 1H, 多重峰）； 3.60-3.80 ( 1H, 多重峰）； 3.39-3.50 ( 1H, 多重峰）； 3.25-3.38 ( 1H, 三重峰， J=8Hz); 1.80-2.30 (14H， 多重峰）； 1.50-1.75 (2H， 多重峰）； 1.10-1.45 (6H， 多重 峰）。 质谱： MS， m/z: 549.50 [M+H] ⁺

(4) 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-葡萄糖苷） -丁垸 -4-氟 -4,4-二甲酸二乙酯 （VII-2) 的制备： (VII-2)

将 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-葡萄糖苷） -丁垸 -4,4-二甲酸二乙酯（VI-2) 2.2g溶解在 20mL 干燥的四氢呋喃中， 冷却到 0°C。 用氮气置换烧瓶内空气， 在氮气保护下缓慢加入 193mg氢 化钠固体（60%)。反应液升温至室温， 搅拌 12小时。 向反应液中加入 1.7g 1-氟甲基 -4-氟 -1,4- 二氮双环 [2.2.2.]辛垸双氟硼酸盐,反应液室温反应 24 小时， 旋蒸除去溶剂。 向反应液中加入 100ml乙酸乙酯，然后用饱和氯化铵水溶液（1 x50ml)洗涤，将水相用乙酸乙酯萃取（2><25m l)， 合并有机相。 将有机相依次用饱和氯化铵水溶液 （I x lOOml), 蒸馏水 （I x lOOml), 饱和氯化 钠水溶液 （I x lOOml)洗涤， 然后用无水硫酸钠干燥， 用旋转蒸发仪将溶剂蒸干， 得到的淡黄 色油状物用硅胶柱色谱纯化 （石油醚： 乙酸乙酯， 3 : 1 )， 得到无色透明油状目的产物 1.6g ( VII-2 )o

核磁共振谱 (400 MHz， CDC13 ), ppm: 5.49 ( 1H， 三重峰， J=6Hz); 5.05-5.20 (2H， 多重 峰）； 4.80-5.00 ( 1H， 多重峰）； 4.25-4.30 ( 5H， 多重峰）； 4.10-4.15 ( 1H， 多重峰）； 3.98-4.05

( 1Η， 多重峰）； 3.70-3.80 ( 1Η， 多重峰）； 3.45-3.55 ( 1H， 多重峰）； 2.25-2.45 (2H， 双三 重峰， J=20Hz， 6Hz); 1.90-2.15 ( 12H， 多重峰）； 1.65-1.85 (2H， 多重峰）； 1.15-1.35 (6H， 多重峰）。 质谱： MS， m/z: 567.29 [M+H] ⁺

( 5 ) 1-0-D-葡萄糖苷 -丁垸 -4-氟 -4,4-二甲酸 （ΠΙ-2) 的制备-

( III- 2)

1 ) 将 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-葡萄糖苷） -丁垸 -4-氟 -4,4-二甲酸二乙酯 (VII-2) ( 1.6g) 溶 解于 5mL甲醇中。 将氢氧化钠 （900mg) 溶解于 10mL水中， 在室温慢慢加入到反应液中， 然后升温至 60°C反应 24小时。 用 TLC监测反应终点。

2) 待反应完成后， 用旋转蒸发仪除去甲醇， 使用强酸性阳离子交换树脂处理产品。 用水洗脱 得到的水溶液用冷冻干燥机干燥后得到无色粘 稠状液体 950mg ( III-2) 。 粗产品直接用于下 一步反应。

质谱： MS， m/z: 343.19 [M+H] ⁺

(6) 顺-【反式- ( 1R， 2R) -二胺基环己垸】 铂 (II) ( 1-0-D-葡萄糖苷 -丁垸 -4-氟 -4， 4-二甲 酸酯） （1-2) 的制备-

1 ) 将 1-O-D-葡萄糖苷 -丁垸 -4-氟 -4， 4-二甲酸粗产品 ( III- 2) (900mg) 溶解于 10mL水中， 用氢氧化钡水溶液调节反应液 pH到 8， 在室温搅拌 30分钟。

2) 在氮气保护下将反式- ( 1R， 2R) 环己二胺硫酸铂 （lg) 溶解于 2ml水中， 加入到 1 ) 中 的反应液中， 用氢氧化钡水溶液调节 pH到 8， 室温避光搅拌过夜。

3 )待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC分离并使用冷冻干燥 机冻干， 得到 lg最终产品， 白色固体 （1-2)。

核磁共振谱 （400 MHz ， D20)， ppm: 4.88 ( 1H， 双重峰， J=3.6Hz， α—异构体）； 3.20-3.95 (9Η， 多重峰）； 2.80-3.10 ( 1Η， 多重峰）； 2.30-2.45 (2H， 多重峰）； 1.83-2.07 (2H， 多 重峰） 1.60-1.75 (2H， 多重峰）； 1.51 (2H， 两重峰， J=8Hz); 1.12-1.35 (2H， 多重峰）； 0.90-1.11 (2H， 多重峰）。 质谱： MS， m/z: 650.35 [M+H] ⁺

实施例 3 : 二氨基铂 （II -0-D-葡萄糖苷 -丙垸 -3-氟 -3， 3-二甲酸酯） （1_3) 的制备-

1 )将 lOOmg的 1-0-D-葡萄糖苷 -丙垸 -3-氟 -3， 3-二甲酸（III-1 )粗产品溶于 5ml的去离子水， 用氢氧化钡水溶液调节反应液 pH到 9， 室温搅拌 30分钟。

2) 在氮气保护下将二氨硫酸铂 （lOOmg) 溶解于 2ml水中， 加入到 1 ) 中的反应液中， 用氢 氧化钡水溶液调节 pH到 9， 室温避光搅拌过夜。

3 )待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC精制分离并使用冷冻 干燥机冻干， 得到 95mg最终产品 （1-3)， 白色固体。

核磁共振谱 (400 MHz ， D20)， ppm: 4.88 (0.8H，双重峰， J=3.6Hz， α—异构体）； 4.44 (0.2Η， 双重峰, J=7.2Hz， β—异构体）； 3.20-4.00 ( 10Η， 多重峰）。 质谱： MS， m/z: 556.33 [M+H] ⁺ 实施例 4: 二氨基铂 (I -0-D-葡萄糖苷 -丁垸 -4-氟 -4， 4-二甲酸酯) ( 1—4) 的制备-

1) 将 lOOmg的 1-0-D-葡萄糖苷 -丁垸 -4-氟 -4， 4-二甲酸（ ΠΙ-2)粗产品溶于 5 ml的去离子水， 用氢氧化钡水溶液调节反应液 pH到 9， 室温搅拌 30分钟。

2)在氮气保护下将二氨硫酸铂 （90mg) 溶解于 2ml水中， 加入到 1 ) 中的反应液中， 用氢氧 化钡水溶液调节 pH到 9， 室温避光搅拌过夜。

3)待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC精制分离并使用冷冻 干燥机冻干， 得到 85mg最终产品 （1-4)， 白色固体。

核磁共振谱 （400 MHz ， D20)， ppm: 4.87 ( 1H， 双重峰， J=3.6Hz， α—异构体）； 3.36-4.00

(9Η， 多重峰）； 2.80-3.15 ( 1Η， 多重峰）； 1.55-1.75 (2Η， 多重峰）。 质谱： MS, m/z: 570.36 [M+H] ⁺

实施例 5: (1) 1-O-D-半乳糖苷 -2-溴 -乙垸 (IV-5) 制备：

(IV-5)

1) 在室温条件下将半乳糖 （2.7g， 15mmol)加入到 2-溴乙醇 （10ml) ， 冷却到 0°C， 用氮气 置换烧瓶内空气， 在氮气保护下慢慢滴加 lml三氟化硼-乙醚配合物。

2) 将反应液在 0°C搅拌 15分钟， 然后慢慢升温到室温并搅拌 30分钟， 然后将反应液加热到 80°C， 在 80°C反应 5小时。 反应完成后， 旋蒸除去溶剂， 使用硅胶柱色谱（二氯甲垸： 甲醇， 6： 1)对反应生成物实施简单纯化,得到粗产品 2.4g (IV-5) 。 质谱： MS， m/z: 287.03 [M+H]+

(2) 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-半乳糖苷） -2-溴 -乙焼 (V-5) 的制备：

(V-5)

在室温条件下， 将上一步反应得到的产品 1-0-D-半乳糖苷 -2-溴 -乙垸 （IV-5) 2.4g溶解于 吡啶与乙酸酐 （7ml： 7ml) 中， 搅拌过夜， 用 TLC监测反应终点。 反应完成后， 加入 50ml 乙酸乙酯， 用体积浓度为 5%的盐酸水溶液（2x25ml)洗涤， 将水相用乙酸乙酯 （2><25ml)萃 取， 合并有机相。 将有机相依次用饱和氯化铵水溶液 （lxlOOml), 蒸馏水 （lxlOOml), 饱和 碳酸氢钠水溶液（lxlOOml), 饱和氯化钠水溶液（lxlOOml)洗涤， 用无水硫酸钠干燥。 用旋 转蒸发仪将溶剂蒸干， 得到微黄色粗产品。 得到的粗产品经硅胶柱色谱纯化 （石油醚： 乙酸 乙酯， 3 : 1)， 得到白色固体目的产物 2.6g (V-5)。

核磁共振谱 （400 MHz ， CDC13), ppm: 5.46 ( 1H， 两重峰， J=4Hz); 5.33-5.45 ( 1H， 多重 峰）； 5.19 (1Η， 两重峰， J=4Hz); 5.07-5.15 ( 1H， 多重峰）； 4.33 ( 1H， 三重峰， J=6Hz) 4.06-4.13 (2H， 多重峰）； 3.95-4.05 ( 1H， 多重峰）； 3.77-3.88 ( 1H， 多重峰）； 3.51 (2H， 三重峰， J=4Hz); 1.95-2.20 (12H， 多重峰）。 质谱： MS， m/z: 455.16 [M+H] ⁺

(3) 1-0- (2,3,4,6-四乙酰 酸二乙酯 (VI-5) 的制备：

(VI-5) 将上一步反应得到的产品 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-半乳糖苷） -2-溴 -乙焼 (V-5) (2.6g) 溶解于 15ml 干燥的 N， N-二甲基甲酰胺中， 向反应液中加入碳酸钾 （3g， 22mmol)， 丙二酸 二乙酯（1.8g)，室温搅拌过夜。用 TLC监测反应终点，待反应完成后， 向反应液中加入 100ml 乙酸乙酯， 然后用饱和氯化铵水溶液（1x50ml)洗涤， 将水相用乙酸乙酯萃取（2x25ml)， 合 并有机相。 将有机相依次用饱和氯化铵水溶液 （IxlOOml), 蒸馏水 （IxlOOml), 饱和氯化钠 溶液 （IxlOOml)洗涤， 然后用无水硫酸钠干燥， 用旋转蒸发仪将溶剂蒸干， 得到的淡黄色油 状物用硅胶柱色谱纯化 （石油醚： 乙酸乙酯， 3： 1)， 得到白色固体目的产物 2.8g (VI-5)o 核磁共振谱 （400 MHz ， CDC13), ppm: 5.40 ( 1H， 两重峰， J=4Hz); 5.23-5.33 ( 1H， 多重 峰）； 5.00-5.15 (2H， 多重峰）； 4.20-4.40 (5H， 多重峰）； 3.90-4.10 (2H， 多重峰）； 3.73-3.90

(1Η， 多重峰）； 3.53-3.65 (1Η， 多重峰）； 3.49 ( 1H， 三重峰， J=4Hz); 1.90-2.20 (14H， 多重峰）； 1.20-1.40 (6H， 多重峰）。 质谱： MS， m/z: 535.26 [M+H] ⁺

(4) 1-0- (2,3,4,6-四乙 3-二甲酸二乙酯 (VII-5) 的制备：

(VII-5)

将 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-半乳糖苷） -丙垸 -3,3-二甲酸二乙酯（VI-5) 2.8g溶解在 20mL 干燥的四氢呋喃中， 冷却到 0°C。 用氮气置换烧瓶内空气， 在氮气保护下缓慢加入 250mg氢 化钠固体（60%)。反应液升温至室温， 搅拌 12小时。 向反应液中加入 2.2g 1-氟甲基 -4-氟 -1,4- 二氮双环 [2.2.2.]辛垸双氟硼酸盐,反应液室温反应 24 小时， 旋蒸除去溶剂。 向反应液中加入 100ml乙酸乙酯，然后用饱和氯化铵水溶液（1x50 ml)洗涤，将水相用乙酸乙酯萃取（2><25ml)� �� 合并有机相。 将有机相依次用饱和氯化铵水溶液 （IxlOOml), 蒸馏水 （IxlOOml), 饱和氯化 钠水溶液 （IxlOOml)洗涤， 然后用无水硫酸钠干燥， 用旋转蒸发仪将溶剂蒸干， 得到的淡黄 色油状物用硅胶柱色谱纯化（石油醚： 乙酸乙酯， 3 : 1)， 得到白色固体目的产物 2g ( VII-5 )o 核磁共振谱 （400 MHz ， CDC13), ppm: 5.42 (1H，单峰）； 5.23-5.35 ( 1H,多重峰）； 5.00-5.13 (2H， 多重峰）； 4.18-4.40 (5H， 多重峰）； 4.00-4.15 (2H， 多重峰）； 3.80-3.95 ( 1H， 多 重峰）； 3.45-3.55 (1Η， 多重峰）； 2.45-2.63 (2H， 双三重峰， J=20Hz， 6Hz); 1.90-2.18 (12H， 多重峰）； 1.25-1.35 (6H， 多重峰）。 质谱： MS， m/z: 553.12 [M+H] ⁺

(5) 1-0-D-半乳糖苷 -丙 -3-氟 -3,3-二甲酸 （ΠΙ-5) 的制备：

(III— 5)

1) 将 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-半乳糖苷） -丙垸 -3-氟 -3,3-二甲酸二乙酯 (VII-5) (2g) 溶解 于 5mL甲醇中。 将氢氧化钠 （1.4g) 溶解于 10mL水中， 室温下加入到反应液中， 然后升温 至 60 V反应 24小时。 用 TLC监测反应终点。

2) 待反应完成后， 用旋转蒸发仪除去甲醇， 使用强酸性阳离子交换树脂处理产品。 用水洗脱 得到的水溶液用冷冻干燥机干燥后得到无色粘 稠状液体 l.lg (ΙΠ-5) ， 粗产品直接用于下步 反应。

质谱： MS， m/z: 329.22 [M+H] ⁺

(6) 顺-【反式- ( 1R， 2R) -二胺基环己垸】 铂 (II) ( 1-0-D-半乳糖苷 -丙垸 -3-氟 -3， 3-二甲 酸酯） （1-5) 的制备-

( 1-5)

1 ) 将 1-0-D-半乳糖苷 -丙垸 -3-氟 -3,3-二甲酸 （ΠΙ-5) 粗产品 （l. lg) 溶解于 15mL水中， 用 氢氧化钡水溶液调节反应液 pH到 7， 室温搅拌 30分钟。

2) 在氮气保护下将反式- ( 1R， 2R) -环己二胺硫酸铂 （1.3g) 溶解于 5ml水中， 加入到 1 ) 的反应液中， 用氢氧化钡水溶液调节 pH到 7， 室温避光搅拌过夜。

3 ) 待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备高压液相色谱分离， 使用冷 冻干燥机冻干得到 1.2g最终产品 （1-5) 。

核磁共振谱 (400 MHz ， D20)， ppm: 4.90 ( 1H， 两重峰， J=3.6Hz); 4.10-4.35 ( 1H， 多 重峰）； 3.40-4.10 ( 8H, 多重峰）； 2.80-3.20 ( 1H, 多重峰）； 2.20-2.50 (2H, 多重峰）； 1.80-2.10

(2H， 多重峰）； 1.40-1.60 (2H， 双重峰， J=8Hz); 0.90-1.30 (4H， 多重峰）。 质谱： MS, m/z: 636.13 [M+H] ⁺

实施例 6: ( 1 ) 1-O-D-半乳糖苷 -3-溴 -丙垸 （IV-6) 的制备：

采用实施例 2中与制备 1-0-D-葡萄糖苷 -3-溴-丙垸相同的操作方法， 用半乳糖取代反应条 件中的葡萄糖，从 1.8g半乳糖最后制得 2.05g目的粗产物 (IV-6)。质谱: MS， m/z: 301.03 [M+H] ⁺ (2) 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-半乳糖苷） -3-溴 -丙垸 （V-6) 的制备：

采用实施例 2中与制备 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-葡萄糖苷） -3-溴-丙垸相同的操作方法， 用 1-0-D-半乳糖苷 -3-溴 -丙垸 （IV-6) 取代反应条件中的 1-0-D-葡萄糖苷 -3-溴 -丙垸 （IV-2)， 从 2.05gl-O-D-半乳糖苷 -3-溴-丙垸最后制得 2.2g白色固体目的产物（V-6)。 质谱： MS， m/z: 469.25 [M+H] ⁺

(3 ) 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-半乳糖苷） -丁垸 -4,4-二甲酸二乙酯 （VI-6) 的制备： (VI-6)

采用实施例 2中与制备 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-葡萄糖苷） -丁垸 -4,4-二甲酸二乙酯相同 的操作方法， 用 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-半乳糖苷） -3-溴 -丙垸 （V-6) 取代反应条件中的 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-葡萄糖苷） -3-溴 -丙垸 （V-2)， 从 2.2gl-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-半 乳糖苷） -3-溴-丙垸最后制得 2.3g白色固体目的产物（VI-6)。质谱： MS， m/z: 549.33 [M+H] ⁺ (4) 1-0- (2,3,4,6-四乙 -二甲酸二乙酯 （VII-6) 的制备：

(VII-6)

采用实施例 2中与制备 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-葡萄糖苷） -丁垸 -4-氟 -4,4-二甲酸二乙酯 相同的操作方法， 用 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-半乳糖苷） -丁垸 -4,4-二甲酸二乙酯 （VI-6)取 代反应条件中的 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-葡萄糖苷） -丁垸 -4,4-二甲酸二乙酯 （VI-2)， 从 2.3gl-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-半乳糖苷） -丁垸 -4,4-二甲酸二乙酯最后制得 1.7g白色固体目的 产物 （VII-6)。 质谱： MS， m/z: 567.36 [M+H] ⁺

( 5 ) 1-0- (D-半乳糖苷) -丁垸 -4-氟 -4,4-二甲酸 ( III- 6) 的制备：

( III- 6)

采用实施例 2中与制备 l-0- (D-葡萄糖苷） -丁垸 -4-氟 -4,4-二甲酸相同的操作方法，用 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-半乳糖苷） -丁垸 -4-氟 -4,4-二甲酸二乙酯取代反应条件中的 1-0- (2,3,4,6- 四乙酰基 -D-葡萄糖苷） -丁垸 -4-氟 -4,4-二甲酸二乙酯， 从 1.7gl-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-半乳 糖苷） -丁垸 -4-氟 -4,4-二甲酸二乙酯最后制得 lg无色粘稠状液体目的产物 （111-6)。 质谱-

MS, m/z: 343.46 [M+H] ⁺

(6) 顺-【反式- ( 1R， 2R) -二胺基环己垸】 铂 (II) ( 1-0-D-半乳糖苷 -丁垸 -4-氟 -4， 4-二甲 酸酯） ( 1-6) 的制备-

1 )将 1-O-D-半乳糖苷 -丁垸 -4-氟 -4， 4-二甲酸粗产品 （ΠΙ-6) ( lg)溶解于 10mL水中， 用氢 氧化钡水溶液调节反应液 pH到 8， 在室温搅拌 30分钟。

2) 在氮气保护下将反式- ( 1R， 2R) -环己二胺硫酸铂 （1.2g) 溶解于 2ml水中， 加入到 1 ) 中的反应液中， 用氢氧化钡水溶液调节 pH到 8， 室温避光搅拌过夜。

3 )待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC分离并使用冷冻干燥 机冻干， 得到 l. lg最终产品 （1-6)， 白色固体。

核磁共振谱 （400 MHz ， D20)， ppm: 4.92 ( 1H， 双重峰， J=4Hz); 3.40-4.10 ( 8H， 多重 峰）； 2.70-3.30 (2H， 多重峰）； 2.25-2.40 (2H， 多重峰）； 1.80-2.10 (2H， 多重峰）； 1.60-1.70 (2H， 多重峰）； 1.49 (2H， 两重峰， J=6Hz); 1.18-1.30 (2H， 宽峰）； 1.00-1.16 (2H， 多 重峰）。 质谱： MS， m/z: 650.10 [M+H] ⁺

实施例 7: 二氨基铂 （II -二甲酸酯） （1_7) 的制备-

1 ) 将 lOOmg的 1-0-D-半乳糖苷 -丙垸 -3-氟 -3， 3-二甲酸粗产品溶于 5 ml的去离子水， 用氢氧 化钡水溶液调节反应液 pH到 9， 室温搅拌 30分钟。

2)在氮气保护下将二氨硫酸铂 （90mg) 溶解于 2ml水中， 加入到 1 ) 中反应液中， 用氢氧化 钡水溶液调节 pH到 9， 室温避光搅拌过夜。

3 )待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC精制分离并使用冷冻 干燥机冻干， 得到 105mg最终产品 （1-7)， 白色固体。

核磁共振谱 （400 MHz ， D20)， ppm: 4.90 ( 1H， 两重峰， J=3.6Hz) ;4.02-4.20 ( 1H， 多重 峰） ；3.40-4.00 ( 8H， 多重峰） ；2.95-3.30 ( 1H， 多重峰） ；质谱： MS， m/z: 556.08 [M+H] ⁺ 实施例 8: 二氨基铂 (II) ( 1-0-D-半乳糖苷 -丁垸 -4-氟 -4， 4-二甲酸酯) ( 1—8) 的制备：

1) 将 lOOmg的 1-0-D-半乳糖苷 -丁垸 -4-氟 -4， 4-二甲酸粗产品溶于 5 ml的去离子水， 用氢氧 化钡水溶液调节反应液 pH到 9， 室温搅拌 30分钟。

2)在氮气保护下将二氨硫酸铂 （95mg) 溶解于 2ml水中， 加入到 1 ) 中反应液中， 用氢氧化 钡水溶液调节 pH到 9， 室温避光搅拌过夜。

3 )待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC精制分离并使用冷冻 干燥机冻干， 得到 75mg最终产品 （1-8)， 白色固体。

核磁共振谱 （400 MHz， D20)， ppm: 4.91 ( 1H， 双重峰， J=4Hz) ;3.45-4.00 ( 8H， 多重 峰） ；2.68-3.30 (2H， 多重峰） ；1.60-1.75 (2H， 多重峰） ；质谱： MS， m/z: 570.23 [M+H] ⁺ 实施例 9:

( 1 ) 1-O-D-甘露糖苷 -2-溴 -乙垸 (IV-9) 制备：

1 ) 在室温条件下将甘露糖 （1.8g， 15mmol) 加入到 2-溴乙醇 （8ml) ， 冷却到 0°C， 用氮气 置换烧瓶内空气， 在氮气保护下慢慢滴加 1ml三氟化硼-乙醚配合物。

2) 将反应液在 0°C搅拌 15分钟， 然后慢慢升温到室温并搅拌 30分钟， 然后将反应液加热到 80°C， 在 80°C反应 5小时。

3 )反应完成后， 旋蒸除去溶剂， 使用硅胶柱色谱 （二氯甲垸： 甲醇， 体积比 6： 1 )对反应生 成物实施简单纯化,得到粗产品 2.1g (IV-9)。 质谱： MS， m/z: 287.05 [M+H] ⁺

(2) 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-甘露糖苷） -2-溴 -乙焼 (V-9) 的制备：

(V-9)

在室温条件下， 将上一步反应得到的产品 1-0-D-甘露糖苷 -2-溴 -乙垸 （IV-9) 2.1g溶解于 吡啶与乙酸酐 （7ml : 7ml) 中， 搅拌过夜， 用 TLC监测反应终点。 反应完成后， 加入 100ml 乙酸乙酯， 用体积浓度为 5%的盐酸水溶液（2x50ml)洗涤， 将水相用乙酸乙酯 （2><25ml)萃 取， 合并有机相。 将有机相依次用饱和氯化铵水溶液 （l x lOOml), 蒸馏水 （l x lOOml), 饱和 碳酸氢钠水溶液（l x lOOml), 饱和氯化钠水溶液（l x lOOml)洗涤， 用无水硫酸钠干燥。 用旋 转蒸发仪将溶剂蒸干， 得到微黄色粗产品。 得到的粗产品经硅胶柱色谱纯化 （石油醚： 乙酸 乙酯， 3 : 1 )， 得到白色固体 2g (V-9)。

核磁共振谱 （400 MHz， CDC13 ), ppm: 5.18-5.40 (3H，多重峰）； 4.90 ( 1H，单峰）； 4.20-4.40 ( 1H， 多重峰）； 4.08-4.18 (2H， 多重峰）； 3.95-4.05 ( 1H， 多重峰）； 3.80-3.94 ( 1H， 多 重峰）； 3.53 (2H， 三重峰， J=6Hz); 1.95-2.20 ( 12H,多重峰）；质谱： MS， m/z: 455.09 [M+H] ⁺ (3 ) 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-甘露糖苷） -丙垸 -3,3-二甲酸二乙酯 (VI-9) 的制备：

(VI-9)

将上一步反应得到的产品 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-甘露糖苷） -2-溴 -乙垸 （2g) 溶解于 15ml 干燥的 N， N-二甲基甲酰胺中， 向反应液中加入碳酸钾 （2.4g)， 丙二酸二乙酯 （1.4g)， 室温搅拌过夜。 用 TLC监测反应终点， 待反应完成后， 向反应液中加入 100ml乙酸乙酯， 然 后用饱和氯化铵水溶液（1x50ml)洗涤， 将水相用乙酸乙酯萃取（2x25ml)， 合并有机相。 将 有机相依次用饱和氯化铵水溶液（lxlOOml), 蒸馏水（lxlOOml),饱和氯化钠溶液（ 1x100ml) 洗涤， 然后用无水硫酸钠干燥， 用旋转蒸发仪将溶剂蒸干， 得到的淡黄色油状物用硅胶柱色 谱纯化（石油醚： 乙酸乙酯， 3 : 1)， 得到白色固体目的产物 2.1g (VI-9)o 核磁共振谱 （400 MHz， CDC13), ppm: 5.28 (2H,两重峰， J=4Hz); 5.20-5.25 ( 1H， 多重峰）； 4.79 ( 1H， 单 峰）； 4.15-4.35 (5H， 多重峰）； 4.05-4.13 ( 1H， 多重峰）； 3.90-4.03 ( 1H， 多重峰）； 3.70-3.85

(1Η， 多重峰）； 3.40-3.58 (2H， 多重峰）； 2.17-2.35 (2H， 多重峰）； 1.95-2.15 (12H, 多 重峰）； 1.20-1.35 (6H， 多重峰）。 质谱： MS， m/z: 535.18 [M+H] ⁺

(4) 1-0- (2,3,4,6-四乙 3-二甲酸二乙酯 (VII-9) 的制备：

(VII-9)

将 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-甘露糖苷） -丙垸 -3,3-二甲酸二乙酯（VI-9) 2.1g溶解在 20mL 干燥的四氢呋喃中， 冷却到 0°C。 用氮气置换烧瓶内空气， 在氮气保护下缓慢加入 188mg氢 化钠固体 (60%)。反应液升温至室温，搅拌 12小时。加入 1.7g 1-氟甲基 -4-氟 -1,4-二氮双环 [2.2.2.] 辛垸双氟硼酸盐,反应液室温反应 24小时， 旋蒸除去溶剂。 向反应液中加入 100ml乙酸乙酯， 然后用饱和氯化铵水溶液 （1x50ml) 洗涤， 将水相用乙酸乙酯萃取 （2x25ml)， 合并有机相。 将有机相依次用饱和氯化铵水溶液 （lxlOOml), 蒸馏水 （lxlOOml), 饱和氯化钠水溶液

(lxlOOml)洗涤， 然后用无水硫酸钠干燥， 用旋转蒸发仪将溶剂蒸干， 得到的淡黄色油状物 用硅胶柱色谱纯化 （石油醚： 乙酸乙酯， 3： 1)， 得到白色固体目的产物 1.5g ( VII-9 )o 核磁共振谱 （400 MHz， CDC13), ppm: 5.28 ( 1H， 三重峰， J=8Hz); 5.12-5.25 (2H， 多重 峰）； 4.75 (1H， 单峰）； 4.20-4.40 (5H， 多重峰）； 4.00-4.15 (3H， 多重峰）； 3.50-3.65 ( 1H， 多重峰）； 2.50-2.75 (2H， 双三重峰， J=20Hz， 6Hz); 1.93-2.20 ( 12H， 多重峰）； 1.20-1.35

(6H， 多重峰）。 质谱： MS, m/z: 553.25 [M+H] ⁺

(5) 1-0-D-甘露糖苷 - - 9) 的制备-

(III— 9) 1) 将 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-甘露糖苷) -丙垸 -3-氟 -3,3-二甲酸二乙酯 (VII-9) (1.5g， ) 溶解于 5mL甲醇中。 将氢氧化钠 （850mg) 溶解于 10mL水中， 室温下加入到反应液中， 然 后升温至 60°C反应 24小时。 用 TLC监测反应终点。

2) 待反应完成后， 用旋转蒸发仪除去甲醇， 使用强酸性阳离子交换树脂处理产品。 将用水洗 脱得到的水溶液用冷冻干燥机干燥后得到无色 粘稠状液体 890mg (III-9) ， 粗产品直接用于 下步反应。 质谱： MS， m/z: 329.39 [M+H] ⁺

(6) 顺-【反式- (1R， 2R) -二氨基环己垸】 铂 (II) (1-0-D-甘露糖苷 -丙垸 -3-氟 -3， 3-二甲 酸酯） (1-9) 的制备-

1) 将 1-0-D-甘露糖苷 -丙垸 -3-氟 -3,3-二甲酸 (III- 9) 粗产品 (890mg) 溶解于 10mL水中， 用氢氧化钡水溶液调节反应液 pH到 7， 室温搅拌 30分钟。

2) 在氮气保护下将反式- (1R， 2R) -环己二胺硫酸铂 （950mg) 溶解于 5ml水中， 加入到 1) 的反应液中， 用氢氧化钡水溶液调节 pH到 7， 室温避光搅拌过夜。

3) 待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备高效液相色谱分离并使用冷 冻干燥机冻干， 得到 900mg最终产品 （1-9) ， 白色固体。

核磁共振谱 (400 MHz , D20), ppm: 4.90 ( 1H，单峰）； 3.30-4.00 (9H， 多重峰）； 2.90-3.20 (1Η， 多重峰）； 2.20-2.50 (2H， 多重峰）； 1.90-2.10 (2H， 多重峰）； 1.52 (2H， 两重峰， J=8Hz); 0.90-1.40 (4H， 多重峰）。 质谱： MS， m/z: 636.19 [M+H] ⁺

实施例 10:

(1) 1-0-D-甘露糖苷 -3-溴 -丙垸 （IV-10) 的制备：

(IV-10)

在室温条件下将甘露糖 （1.8g) 加入到 3-溴丙醇 （10mL)， 冷却到 0°C， 用氮气置换烧瓶 内空气， 在氮气保护下以慢慢滴入 lmL三氟化硼-乙醚配合物。 将反应液在 0°C搅拌 15分钟， 升至室温搅拌 30分钟， 然后加热到 80°C， 在 80°C反应 5小时。 反应完成后， 旋蒸除去溶剂， 使用硅胶柱色谱 （二氯甲垸： 甲醇， 体积比 6： 1) 进行简单纯化后,得到粗产品 2g (IV-lO)o 质谱： MS， m/z: 301.11 [M+H] ⁺

(2) 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-甘露糖苷） -3-溴 -丙垸 （V-10) 的制备：

在室温条件下， 将上一步反应得到的 1-0-D-甘露糖苷 -3-溴 -丙垸 （IV-10) 粗产品 2g溶解 于吡啶与乙酸酐（6ml： 6ml)中， 搅拌过夜， 用 TLC监测反应终点。反应完成后， 加入 100ml 乙酸乙酯， 用体积浓度为 5%的盐酸水溶液（2x50ml)洗涤， 将水相用乙酸乙酯 （2><25ml)萃 取， 合并有机相。 将有机相依次用饱和氯化铵水溶液 （lxlOOml), 蒸馏水 （lxlOOml), 饱和 碳酸氢钠水溶液（lxlOOml), 饱和氯化钠水溶液（lxlOOml)洗涤， 用无水硫酸钠干燥。 用旋 转蒸发仪将溶剂蒸干， 得到微黄色粗产品。 的到得粗产品经硅胶柱色谱纯化 （石油醚： 乙酸 乙酯， 3 : 1)， 得到白色固体目的产物 2.3g (V-10)o

核磁共振谱 （400 MHz， CDC13), ppm: 5.30-5.55 (3H， 多重峰）； 4.93 ( 1H， 单峰） 4.20-4.38 (1H， 多重峰）； 4.05-4.18 ( 1H， 多重峰）； 4.00-4.04 ( 1H， 多重峰）； 3.81-3.95

(1Η， 多重峰）； 3.45-3.70 (3H， 多重峰）； 1.90-2.30 (14H， 多重峰）。 质谱： MS, m/z: 469.16 [M+H] ⁺

(3) 1-0- (2,3,4,6-四乙 二乙酯 (VI-10) 的制备：

(VI-10)

将 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-甘露糖苷） -3-溴 -丙垸（V-10) (2.3g)溶解于 15ml 干燥的 N， N-二甲基甲酰胺中， 向反应液中加入碳酸钾（2.7g)， 丙二酸二乙酯（1.5g)， 在室温搅拌过夜。 用 TLC监测反应终点， 待反应完成后， 向反应液中加入 100ml乙酸乙酯， 用饱和氯化铵水溶 液（1x50ml)洗涤， 将水相用乙酸乙酯萃取（2x25ml)， 合并有机相。 将有机相依次用饱和氯 化铵水溶液（lxlOOml), 蒸馏水（lxlOOml), 饱和氯化钠溶液（lxlOOml)洗涤， 然后用无水 硫酸钠干燥， 用旋转蒸发仪将溶剂蒸干， 得到的淡黄色油状物用硅胶柱色谱纯化 （石油醚： 乙酸乙酯， 3 : 1)， 得到白色固体目的产物 2.4g (VI-10)。

核磁共振谱 (400 MHz， CDC13), ppm: 5.15-5.40 (3H，多重峰）； 4.78 (1H，单峰）； 4.25-4.36 (1H， 多重峰）； 4.15-4.19 (4H， 多重峰）； 4.05-4.13 ( 1H， 多重峰）； 3.90-4.03 ( 1H， 多 重峰）； 3.65-3.80 (1H, 多重峰）； 3.43-3.58 ( 1H, 多重峰）； 3.36(1H,三重峰， J=6Hz); 1.88-2.20 (14H， 多重峰）； 1.60-1.75 (2H， 多重峰）； 1.10-1.35 (6H， 多重峰）。质谱： MS, m/z: 549.23 [M+H] ⁺

(4) 1-0- (2,3,4,6-四乙 酯 （VII-10) 的制备：

采用实施例 2中与制备 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-葡萄糖苷） -丁垸 -4-氟 -4,4-二甲酸二乙酯 相同的操作方法， 用 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-甘露糖苷） -丁垸 -4,4-二甲酸二乙酯 (VI-10) 取代反应条件中的 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-葡萄糖苷） -丁垸 -4,4-二甲酸二乙酯 （VI-2)， 从 2.3gl-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-甘露糖苷） -丁垸 -4,4-二甲酸二乙酯最后制得 1.8g白色固体目的 产物 （VII-10)。

质谱： MS， m/z: 567.39 [M+H] ⁺ (5) 1-O-D-甘露糖苷 -丁垸 -4-氟 -4， 4-二甲酸 (111—10) 的制备：

采用实施例 2中与制备 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-葡萄糖苷） -丁垸 -4-氟 -4,4-二甲酸相同的 操作方法， 用 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-甘露糖苷） -丁垸 -4-氟 -4,4-二甲酸二乙酯 （VII-10)取 代反应条件中的 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-葡萄糖苷） -丁垸 -4-氟 -4,4-二甲酸二乙酯 （VII-2)， 从 1.8gl-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-甘露糖苷） -丁垸 -4-氟 -4,4-二甲酸二乙酯最后制得 l.lg无色 粘稠状液体目的产物 （111-10)。 质谱： MS， m/z: 343.19 [M+H] ⁺

(6) 顺-【反式- (1R， 2R) -二氨基环己垸】 铂 (II) (1-0-D-甘露糖苷 -丁垸 -4-氟 -4， 4-二甲 酸酯） (1-10) 的制

1) 将 1-O-D-甘露糖苷 -丁垸 -4-氟 -4， 4-二甲酸粗产品 （l.lg) 溶解于 15mL水中， 用氢氧化钡 水溶液调节反应液 pH到 8， 在室温搅拌 30分钟。

2) 在氮气保护下将反式- (1R， 2R) -环己二胺硫酸铂 （1.3g) 溶解于 5ml水中， 加入到 1) 中的反应液中， 用氢氧化钡水溶液调节 pH到 8， 室温避光搅拌过夜。

3)待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC分离并使用冷冻干燥 机冻干， 得到 lg最终产品 （ι-ιο)， 白色固体。

核磁共振谱 (400 MHz , D20), ppm: 4.86 ( 1H，单峰）； 3.30-3.96 (9H， 多重峰）； 2.80-3.20 (1Η， 多重峰）； 2.20-2.40 (2H， 多重峰）； 1.95 (2H， 两重峰， J=12Hz); 1.58-1.75 (2H， 多重峰）； 1.49 (2H，两重峰， J=6Hz); 0.90-1.30 (2H,多重峰）；质谱： MS， m/z: 650.39 [M+H] ⁺ 实施例 11: 二氨基铂 ( 3-二甲酸酯) (1-11) 的制备-

(1-11)

1) 将 lOOmg的 1-O-D-甘露糖苷 -丙垸 -3-氟 -3， 3-二甲酸粗产品溶于 5 ml的去离子水， 用氢氧 化钡水溶液调节反应液 pH到 9， 室温搅拌 30分钟。

2) 在氮气保护下将二氨硫酸铂 （lOOmg) 溶解于 2ml水中， 加入到 1) 中反应液中， 用氢氧 化钡水溶液调节 pH到 9， 室温避光搅拌过夜。 3 )待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC精制分离并使用冷冻 干燥机冻干， 得到 85mg最终产品 （1-11 )， 白色固体。

核磁共振谱 (400 MHz , D20), ppm: 4.85 ( 1H，单峰）； 3.40-4.10 (9H， 多重峰）； 2.95-3.20

( 1H， 多重峰）； 质谱： MS， m/z: 556.28 [M+H] ⁺

实施例 12: 二氨基铂 (II) ( 1-0-D-甘露糖苷 -丁垸 -4-氟 -4， 4-二甲酸酯) ( 1-12) 的制备-

( 1-12)

1) 将 lOOmg的 1-0-D-甘露糖苷 -丁垸 -4-氟 -4， 4-二甲酸粗产品溶于 5 ml的去离子水， 用氢氧 化钡水溶液调节反应液 pH到 9， 室温搅拌 30分钟。

2)在氮气保护下将二氨硫酸铂 （85mg) 溶解于 2ml水中， 加入到 1 ) 中反应液中， 用氢氧化 钡水溶液调节 pH到 9， 室温避光搅拌过夜。

3 )待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC精制分离并使用冷冻 干燥机冻干， 得到 75mg最终产品 （1-12)， 白色固体。

核磁共振谱 (400 MHz , D20), ppm: 4.90 ( 1H，单峰）； 3.30-3.96 (9H， 多重峰）； 2.80-3.20

( 1H， 多重峰）； 1.60-1.73 (2H， 多重峰）。 质谱： MS， m/z: 570.18 [M+H] ⁺

实施例 13 : 二异丙 -0-D-葡萄糖苷 -丙垸 -3-氟 -3， 3-二甲酸酯） 的制备-

1 ) 将 lOOmg的 1-0-D-葡萄糖苷 -丙垸 -3-氟 -3， 3-二甲酸粗产品溶于 5 ml的去离子水， 用氢氧 化钡水溶液调节反应液 pH到 9， 室温搅拌 30分钟。

2) 在氮气保护下将二异丙胺硫酸铂 （150mg) 溶解于 2ml水中， 加入到 1 ) 中反应液中， 用 氢氧化钡水溶液调节 pH到 9， 室温避光搅拌过夜。

3 )待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC精制分离并使用冷冻 干燥机冻干， 得到 95mg最终产品 （1-13 )， 白色固体。

核磁共振谱 (400 MHz ， D20)， ppm: 4.86 (0.8H， 双重峰， J=3.6Hz); 4.82 (4H， 宽峰）； 4.42 (0.2H, 双重峰, J=7.2Hz); 3.10-4.00 ( 10H， 多重峰）； 2.42 (2H， 七重峰）； 1.15-1.30

( 12H, 多重峰）； 质谱： MS， m/z: 640.23 [M+H] +

实施例 14 氨基， 异丙胺基铂 （II) ( 1-0-D-葡萄糖苷 -丙垸 -3-氟 -3， 3-二甲酸酯） 的制备：

1 ) 将 lOOmg的 1-O-D-葡萄糖苷 -丙垸 -3-氟 -3， 3-二甲酸粗产品溶于 5 ml的去离子水， 用氢氧 化钡水溶液调节反应液 pH到 9， 室温搅拌 30分钟。

2)在氮气保护下将氨基， 异丙胺硫酸铂 （130mg) 溶解于 2ml水中， 加入到 1 ) 中反应液中， 用氢氧化钡水溶液调节 pH到 9， 室温避光搅拌过夜。

3 )待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC精制分离并使用冷冻 干燥机冻干， 得到 90mg最终产品 （1-14)， 白色固体。

核磁共振谱 （400 MHz， D20)， ppm: 4.87 (0.8H， 双重峰， J=3.6Hz); 4.42 (0.2H， 双重 峰, J=7.2Hz); 3.15-4.05 ( 10H， 多重峰）； 2.40-2.45 ( 1H， 七重峰）； 1.15-1.30 (6H， 多重 峰）； 质谱： MS， m/z: 598.23 [M+H] +

实施例 15: 二甲 -0-D-葡萄糖苷 -丙垸 -3-氟 -3， 3-二甲酸酯） 的制备-

1 ) 将 lOOmg的 1-O-D-葡萄糖苷 -丙垸 -3-氟 -3， 3-二甲酸粗产品溶于 5 ml的去离子水， 用氢氧 化钡水溶液调节反应液 pH到 9， 室温搅拌 30分钟。

2) 在氮气保护下将二甲胺硫酸铂 （150mg) 溶解于 2ml水中， 加入到 1 ) 中反应液中， 用氢 氧化钡水溶液调节 pH到 9， 室温避光搅拌过夜。

3 )待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC精制分离并使用冷冻 干燥机冻干， 得到 90mg最终产品 （1-15 )， 白色固体。

核磁共振谱 （400 MHz， D20)， ppm:

4.87 (0.8H， 双重峰， J=3.6Hz); 4.42 (0.2H， 双重峰, J=7.2Hz); 3.10-4.00 ( 10H， 多重峰）; 2.47 (6H， 单峰）； 质谱： MS， m/z: 584.25 [M+H] +

实施例 16: 二辛 的制备：

1 ) 将 lOOmg的 1-O-D-葡萄糖苷 -丙垸 -3-氟 -3， 3-二甲酸粗产品溶于 5 ml的去离子水， 用氢氧 化钡水溶液调节反应液 pH到 9， 室温搅拌 30分钟。 2) 在氮气保护下将二辛胺硫酸铂 （lOOmg) 溶解于 2ml水中， 加入到 1 ) 中反应液中， 用氢 氧化钡水溶液调节 pH到 9， 室温避光搅拌过夜。

3 )待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC精制分离并使用冷冻 干燥机冻干， 得到 130mg最终产品 （1-16)， 白色固体。

核磁共振谱 （400 MHz ， D20)， ppm:

4.87 (0.8H， 双重峰， J=3.6Hz); 4.42 (0.2H， 双重峰, J=7.2Hz); 3.10-4.00 ( 10H， 多重峰）； 2.40-2.47 (4H， 多重峰）； 1.50-1.55 (4H， 多重峰）； 1.10-1.40 (20H, 多重峰）； 0.85-0.88

(6H， 多重峰）； 质谱： MS, m/z: 780.42 [M+H] +

实施例 17: 二环 -0-D-葡萄糖苷 -丙垸 -3-氟 -3， 3-二甲酸酯） 的制备-

1 ) 将 lOOmg的 1-O-D-葡萄糖苷 -丙垸 -3-氟 -3， 3-二甲酸粗产品溶于 5 ml的去离子水， 用氢氧 化钡水溶液调节反应液 pH到 9， 室温搅拌 30分钟。

2) 在氮气保护下将二环丙胺硫酸铂 （lOOmg) 溶解于 2ml水中， 加入到 1 ) 中反应液中， 用 氢氧化钡水溶液调节 pH到 9， 室温避光搅拌过夜。

3 )待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC精制分离并使用冷冻 干燥机冻干， 得到 80mg最终产品 （1-17)， 白色固体。

核磁共振谱 （400 MHz ， D20)， ppm:

4.87 (0.8H， 双重峰， J=3.6Hz); 4.83 (4H， 宽峰）； 4.42 (0.2H, 双重峰, J=7.2Hz); 3.10-4.00 ( 10H， 多重峰）； 2.68-2.79 (2H， 多重峰）； 0.75-0.95 ( 8H， 多重峰）； 质谱： MS， m/z: 636.35 [M+H] +

实施例 18: 二异丙 -0-D-葡萄糖苷 -丁垸 -4-氟 -4， 4-二甲酸酯) ( 1—18) 的制备:

1 ) 将 lOOmg的 1-0-D-葡萄糖苷 -丙垸 -4-氟 -4， 4-二甲酸粗产品溶于 5 ml的去离子水， 用氢氧 化钡水溶液调节反应液 pH到 9， 室温搅拌 30分钟。

2) 在氮气保护下将二异丙胺硫酸铂 （143mg) 溶解于 2ml水中， 加入到 1 ) 中反应液中， 用 氢氧化钡水溶液调节 pH到 9， 室温避光搅拌过夜。

3 )待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC精制分离并使用冷冻 干燥机冻干， 得到 llOmg最终产品 （1-18)， 白色固体。

核磁共振谱 （400 MHz ， D20)， ppm:

4.89 ( 1Η， 双重峰， J=3.6Hz); 4.82 (4H， 宽峰）； 3.20-3.95 (9H， 多重峰）； 2.80-3.10 ( 1H， 多重峰）； 1.60-1.75 (2H， 多重峰）； 2.40 (2H， 七重峰）； 1.15-1.30 ( 12H, 多重峰）； 质 谱： MS， m/z: 654.25 [M+H] +

实施例 19: 二异丙 -0-D-半乳糖苷 -丙垸 -3-氟 -3， 3-二甲酸酯） 的制备-

1 ) 将 lOOmg的 1-0-D-半乳糖苷 -丙垸 -3-氟 -3， 3-二甲酸粗产品溶于 5 ml的去离子水， 用氢氧 化钡水溶液调节反应液 pH到 9， 室温搅拌 30分钟。

2) 在氮气保护下将二异丙胺硫酸铂 （150mg) 溶解于 2ml水中， 加入到 1 ) 中反应液中， 用 氢氧化钡水溶液调节 pH到 9， 室温避光搅拌过夜。

3 )待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC精制分离并使用冷冻 干燥机冻干， 得到 96mg最终产品 （1-19)， 白色固体。

核磁共振谱 （400 MHz ， D20)， ppm: 4.90 ( 1H， 两重峰， J=3.6Hz); 4.81 (4H， 宽峰）； 4.10-4.35 ( 1H， 多重峰）； 3.40-4.10 ( 8H， 多重峰）； 2.80-3.20 ( 1H， 多重峰）； 2.40 (2H， 七 重峰）； 1.15-1.30 ( 12H, 多重峰）； 质谱： MS, m/z: 640.25 [M+H] +

实施例 20: 二异丙 基铂 （II) ( 1-0-D-半乳糖苷 -丁垸 -4-氟 -4， 4-二甲酸酯） 的制备-

1 ) 将 lOOmg的 1-0-D-半乳糖苷 -丙垸 -4-氟 -4， 4-二甲酸粗产品溶于 5 ml的去离子水， 用氢氧 化钡水溶液调节反应液 pH到 9， 室温搅拌 30分钟。

2) 在氮气保护下将二异丙胺硫酸铂 （140mg) 溶解于 2ml水中， 加入到 1 ) 中反应液中， 用 氢氧化钡水溶液调节 pH到 9， 室温避光搅拌过夜。

3 )待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC精制分离并使用冷冻 干燥机冻干， 得到 115mg最终产品 （1-20)， 白色固体。

核磁共振谱 （400 MHz ， D20)， ppm: 4.90 ( 1H， 双重峰， J=4Hz); 4.81 (4H， 宽峰）； 3.40-4.10 ( 8H， 多重峰）； 2.70-3.30 (2H， 多重峰）； 1.60-1.70 (2H， 多重峰）； 2.42 (2H， 七重峰）； 1.15-1.30 ( 12H, 多重峰）； 质谱： MS, m/z: 654.23 [M+H] +

实施例 21 : 二异丙胺基铂 （II) ( 1-0-D-甘露糖苷 -丙垸 -3-氟 -3， 3-二甲酸酯） 的制备-

1 ) 将 lOOmg的 1-O-D-甘露糖苷 -丙垸 -3-氟 -3， 3-二甲酸粗产品溶于 5 ml的去离子水， 用氢氧 化钡水溶液调节反应液 pH到 9， 室温搅拌 30分钟。

2) 在氮气保护下将二异丙胺硫酸铂 （150mg) 溶解于 2ml水中， 加入到 1 ) 中反应液中， 用 氢氧化钡水溶液调节 pH到 9， 室温避光搅拌过夜。

3 )待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC精制分离并使用冷冻 干燥机冻干， 得到 91mg最终产品 （1-21 )， 白色固体。

核磁共振谱 （400 MHz， D20)， ppm: 4.90 ( 1H， 单峰）； 4.82 (4H， 宽峰）； 3.30-4.00 (9H， 多重峰）； 2.90-3.20 ( 1H， 多重峰）； 2.40 (2H， 七重峰）； 1.15-1.30 ( 12H, 多重 峰）； 质谱： MS， m/z: 640.25 [M+H] +

实施例 22: 二异丙 酯） 的制备-

1 ) 将 lOOmg的 1-0-D-甘露糖苷 -丙垸 -4-氟 -4， 4-二甲酸粗产品溶于 5 ml的去离子水， 用氢氧 化钡水溶液调节反应液 pH到 9， 室温搅拌 30分钟。

2) 在氮气保护下将二异丙胺硫酸铂 （140mg) 溶解于 2ml水中， 加入到 1 ) 中反应液中， 用 氢氧化钡水溶液调节 pH到 9， 室温避光搅拌过夜。

3 )待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC精制分离并使用冷冻 干燥机冻干， 得到 115mg最终产品 （1-22)， 白色固体。

核磁共振谱 （400 MHz， D20)， ppm: 4.87 ( 1H， 单峰）； 4.83 (4H， 宽峰）； 3.30-3.96 (9H， 多重峰）； 2.80-3.20 ( 1H， 多重峰）； 1.58-1.75 (2H， 多重峰）； 2.41 (2H， 七重峰）； 1.15-1.30 ( 12H, 多重峰）； 质谱： MS， m/z: 654.23 [M+H] +

实施例 23 : ( 1 ) 1-0- (2 -四乙酰基 -D-葡萄糖苷） -乙垸 -2,2-二甲酸二乙酯的制备：

在室温条件下将葡萄糖（2.7g)加入到 1-羟基 -乙垸 -2,2-二甲酸二乙酯（依据文献 Kogyo Kagaku Zasshi, 1954, vol.57, p.l40制备而得）（5ml)， 冷却到 0°C， 用氮气置换烧瓶内空气， 在氮气保 护下慢慢滴加 1ml三氟化硼-乙醚配合物。

将反应液在 0°C搅拌 15分钟，然后慢慢升温到室温并搅拌 30分钟，然后将反应液加热到 60°C， 在 60°C反应 5小时。 反应完成后， 旋蒸除去溶剂， 使用硅胶柱色谱（二氯甲垸： 甲醇， 6 : 1) 对反应生成物实施简单纯化，得到粗产品 3.3g (VI-23)。

质谱： MS， m/z: 521.25 [M+H] +

(2) 1-0- (2,3,4,6-四乙 酯的制备

将 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-葡萄糖苷） -乙垸 -2,2-二甲酸二乙酯 3.0g溶解在 20mL干燥的四 氢呋喃中， 冷却到 0oC。 用氮气置换烧瓶内空气， 在氮气保护下缓慢加入 235mg氢化钠固体

(60%)。 反应液升温至室温， 搅拌 12小时。 向反应液中加入 2g 1-氟甲基 -4-氟 -1,4-二氮双环 [2.2.2.]辛垸双氟硼酸盐,反应液室温反应 24小时， 旋蒸除去溶剂。 向反应液中加入 100ml乙酸 乙酯， 然后用饱和氯化铵水溶液 （lX50ml)洗涤， 将水相用乙酸乙酯萃取 （2X25ml)， 合并 有机相。 将有机相依次用饱和氯化铵水溶液 （lXlOOml), 蒸馏水 （lXlOOml), 饱和氯化钠 水溶液 （IX 100ml) 洗涤， 然后用无水硫酸钠干燥， 用旋转蒸发仪将溶剂蒸干， 得到的淡黄 色油状物用硅胶柱色谱纯化 （石油醚： 乙酸乙酯， 3 : 1)， 得到无色透明油状目的产物 2.3g

(VII-23)o 质谱： MS， m/z: 539.20 [M+H] +

(3) 1-0- (D-葡萄糖

将 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-葡萄糖苷） -乙垸 -2-氟 -2,2-二甲酸二乙酯 （1.5g， )溶解于 5mL甲 醇中。 将氢氧化钠 （lg) 溶解于 10mL水中， 室温下加入到反应液中， 然后升温至 60°C反应 24小时。 用 TLC监测反应终点。

待反应完成后， 用旋转蒸发仪除去甲醇， 使用强酸性阳离子交换树脂处理产品。 将过滤得到 的水溶液用冷冻干燥机干燥后得到无色粘稠状 液体 1.3g (111-23)， 粗产品直接用于下步反应。 质谱： MS， m/z: 315.11 [M+H] +

(4) 顺-【反式- (1R， 2R) -二氨基环己垸】 铂 (II) (1-0-D-葡萄糖苷 -乙垸 -2-氟 -2， 2-二甲 酸酯） 的制备-

将 1-O-D-葡萄糖苷 -乙垸 -2-氟 -2,2-二甲酸粗产品 （lg) 溶解于 10mL水中， 用氢氧化钠水溶液 调节反应液 pH到 7， 室温搅拌 30分钟。

在氮气保护下将反式- ( 1R， 2R) -环己二胺二硝酸铂 （1.3g) 溶解于 2ml水中， 加入到 1 ) 的 反应液中， 用氢氧化钠水溶液调节 pH到 7， 室温避光搅拌过夜。

待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 使用冷冻干燥机冻干， 用半制备高压液 相色谱分离得到 l.Og最终产品 （1-23 )， 白色固体。

核磁共振谱 （400 MHz ， D20)， ppm: 4.87 (0.8H， 双重峰， J=3.6Hz); 4.43 (0.2H， 双重 峰, J=7.2Hz); 3.10-4.30 ( 8H， 多重峰）； 2.20-2.45 (2H， 多重峰）； 1.96 (2H， 两重峰， J=12Hz); 1.49 (2H， 两重峰， J=8Hz); 1.12-1.30 (2H， 单峰）； 0.95-1.10 (2H， 多重峰）； 质谱： MS, m/z: 622.16 [M+H] +

实施例 24: 二氨基铂 （II -0-D-葡萄糖苷 -乙垸 -2-氟 -2， 2-二甲酸酯） 的制备-

1 ) 将 lOOmg的 1-0- (D-葡萄糖苷） -乙垸 -2-氟 -2,2-二甲酸溶于 5ml的去离子水， 用氢氧化钠 水溶液调节反应液 pH到 9， 室温搅拌 30分钟。

2) 在氮气保护下将二氨基二硝酸铂 （140mg) 溶解于 2ml水中， 加入到 1 ) 中反应液中， 用 氢氧化钠水溶液调节 pH到 9， 室温避光搅拌过夜。

3 )待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC精制分离并使用冷冻 干燥机冻干， 得到 90mg最终产品 （1-24)， 白色固体。

核磁共振谱 （400 MHz ， D20)， ppm:

4.88 (0.8H， 双重峰， J=3.6Hz); 4.45 (0.2H， 双重峰, J=7.2Hz); 3.20-4.30 ( 8H， 多重峰） 质谱： MS， m/z: 542.17 [M+H] + 。

实施例 25: 二氨基铂 （II) ( 1-0-D-葡萄糖苷 -乙垸 -2-氟 -2， 2-二甲酸酯） 的制备-

1 ) 将 lOOmg的 1-0- (D-葡萄糖苷） -乙垸 -2-氟 -2,2-二甲酸溶于 5ml的去离子水， 用氢氧化钡 水溶液调节反应液 pH到 9， 室温搅拌 30分钟。

2) 在氮气保护下将二异丙胺硫酸铂 （160mg) 溶解于 2ml水中， 加入到 1 ) 中反应液中， 用 氢氧化钡水溶液调节 pH到 9， 室温避光搅拌过夜。

3 )待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC精制分离并使用冷冻 干燥机冻干， 得到 103mg最终产品 （1-25 )， 白色固体。

核磁共振谱 (400 MHz ， D20)， ppm: 4.88 ( 0.8H， 双重峰， J=3.6Hz); 4.83 (4H， 宽峰）； 4.44 ( 0.2H, 双重峰, J=7.2Hz); 3.20-4.30 ( 8H， 多重峰）； 2.41 (2H， 七重峰）； 1.15-1.30 ( 12H, 多重峰）； 质谱： MS， m/z: 626.17 [M+H] +

实验例 1

为了比较本发明铂配合物与上市药物顺铂， 卡铂以及奥沙利铂在水溶性方面的不同， 在下 述试验中， 分别针对本发明代表性的铂配合物以及三种上 市药物进行了室温下 lg水中各种药 物的饱和溶液溶质质量测定， 表 2列举了本发明用于肿瘤治疗的含氟水溶性铂� �合物在水中 的溶解度以及与铂类抗肿瘤临床药物顺铂， 卡铂以及奥沙利铂的差别：

表 2:

上述实验结果显示，本发明中所提供的含氟原 子铂配合物的水溶性与临床药物顺铂相比每 毫升水中的溶解度可提高 500至 900倍， 与临床药物奥沙利铂相比药物在水中的溶解度 提高 了 70至 150倍。

在本发明所提供的含氟原子铂配合物中， 在含有亲水性糖分子结构的同时由于氟原子取 代所形成的诱导效应 （即因分子中原子或基团极性 （电负性） 不同而致使成键电子云在原子 链上向某一方向移动的效应）， 可以大大增加铂配合物在水溶液中的极性， 即水溶性。

实验例 2

为了比较本发明铂配合物与上市药物奥沙利铂 在稳定性方面的不同， 在下述试验中， 分别 针对本发明代表性的铂配合物以及临床药物奥 沙利铂进行了室温下 pH为 7. 0的磷酸盐缓冲溶 液（PBS) 中各种药物的半衰期 （即在水溶液中的稳定性）测定， 表 -3列举了本发明用于肿瘤 治疗的含氟水溶性铂配合物在 PBS中的半衰期与铂类抗肿瘤临床药物奥沙利铂 的差别： 表 3: 化合物 奥 实施例 实施例 3 实施例 9 实施例 实施例 实施例 24 实施例 25 沙 1 制备 制备的 制备的 17 制备 23制备 制备的铂 制备的铂 利 的铂配 铂配合 铂配合 的铂配 的铂配 配合物 配合物 铂 合物 物 物 合物 合物

半衰期（小时） 24 44 52 48 62 89 73 96

上述实验结果显示，本发明中所提供的含氟水 溶性铂配合物的稳定性与临床药物奥沙利铂 相比室温下药物在 pH为 7. 0的磷酸盐缓冲溶液 （PBS) 中的半衰期可提高 2至 4倍。

实验例 3

在下述试验中， 使用 8-9周龄的雌性 CDF1种鼠， 动物体重平均为 20-25克， 实验动物购 自北京维通利华实验动物技术有限公司。 用 L1210肿瘤细胞（约 10 ⁵ 个细胞每只老鼠）在腹膜 内进行接种。 针对制作的肿瘤动物模型， 使用本发明抗肿瘤金属铂配合物实施治疗， 并与临 床使用的铂类抗肿瘤药物进行比较， 验证本发明抗肿瘤含氟水溶性铂配合物对肿瘤 动物的治 疗效果以及本发明用于肿瘤治疗的含氟水溶性 铂配合物对实验动物的毒副作用。 对于本发明 的含氟水溶性铂配合物和卡铂， 使用质量百分比为 5%甘露糖醇水溶液， 对于顺铂则使用质量 百分比为 5%甘露糖醇生理盐水溶液制备相应的注射液。� ��肿瘤细胞移植后第 1， 4天经由腹腔 内注射药物， 每组实验动物数目为 6。

动物寿命延长 （ILS) 的计算方法如下：

ILS % = [ ( St/Su) - 1] X 100%

其中， St =接受治疗的动物存活日的加权中间数； Su = 未接受治疗的动物存活日的加权中 间数， 实验结果列于表 4中- 表 4:

注 * 第 1天到第 7天的体重变化

实验例 4: 本发明含氟水溶性铂配合物有效成分对癌细胞 的增殖抑制作用

本发明的用于肿瘤治疗的含氟水溶性铂配合物 对肿瘤细胞的抑制和杀伤作用是通过本发 明药物产生的垸化结合物作用于肿瘤细胞的 DNA， 形成链内和链间交联， 从而抑制肿瘤细胞

DNA的合成及复制而实现的。 以下实验针对本发明的用于肿瘤治疗的含氟水 溶性铂配合物对不同种类的人肿瘤细胞的 增殖抑制效果进行了实验验证。

(1)试验方法：

细胞培养液：

使用含有 10%牛胎仔血清（fetal bovine serum), ImM丙酮酸钠， 2mML_谷氨酰胺， 50U/ml 盘尼西林， 50μ /πι1链霉素 （str印 tomycin) 的细胞培养液。

主要实验仪器： MCO-15A型二氧化碳培养箱 （日本 SANYO公司） 、 倒置相差显微 镜 (Olympus,日本)、全自动酶标仪（美国 BioTEK ELX808)、低温冰箱（日本 MDF-V5410)、 超净工作台 （苏州医疗器械厂） 、 微量移液器 （法国 GILSON) 、 自动纯水蒸馏器 （上 海 1810B) 。

实验试剂：

MTS : CellTiter96 Aqueous MTS Reagent Powder, Pr omega公司

PMS : Phenazine methosulfate (PMS) , Sigma- Aldrich公司

DPBS : Sigma-Aldrich公司

肿瘤细胞：

以下活性测试实验中所使用的人肿瘤细胞： dul45 - 人前列腺癌； MCF-7 - 人乳腺癌； SKOV3 -人卵巢癌； HT-29 -人结肠癌； A549 -人非小细胞肺癌 （腺癌） ； H460 -人非小 细胞肺癌 （大细胞癌） ， 以及动物肿瘤细胞： L1210 -小鼠白血病细胞均购自上海安妍商贸有 限公司。

细胞毒性测试：

细胞毒性实验采用 MTS 测试方法。 收集对数期肿瘤细胞， 调整细胞悬液浓度， 每孔加入 100μ1， 铺板使待测细胞调密度至 1000-10000个 /孔， （边缘孔用无菌 PBS填充）。 在 5%C02， 37°C孵育， 至细胞单层铺满孔底 （96孔平底板）， 加入不同浓度梯度的药物， 每孔 100μ1， 设 5个复孔。 在 5% C02， 37°C条件下孵育 96小时，倒置显微镜下观察。向 2ml MTS (2mg/ml, DPBS 配制）溶液中加入 100 μ 1 PMS (lmg/ml, DPBS配制），混匀， 制成 MTS工作液。 上述细胞培养板 离心后弃去培养液， 小心用 PBS冲 2-3遍后， 在检测吸光度前， 向 96孔板中每孔加入 100 μ 1 培养基， 再加入 20 μ 1MTS工作液， 在 37°C， 5%C02条件下孵育 2h后， 在 490nm处检测 0D值 (光密度值）。

对照组：在上述同样条件下不添加被测活性成 分，最后取得肿瘤细胞在 490nm处检测 0D值。 药物对肿瘤细胞的抑制活性 IC50:

细胞抑制率计算： 按下列公式计算药物对肿瘤细胞生长的抑制率 ：

1 ) 细胞存活率 （％ ) = (治疗组 0D值 / 对照组 0D值） X 100

2)求出各药物浓度下的细胞存活率， 用此对药物浓度作图。 以此判断不同药物浓度对肿瘤细 胞增殖抑制的药效。

上述每个药物浓度的实验重复 5组， 取平均 0D值计算细胞存活率。

(2)实验结果- 图中各种符号代表的肿瘤细胞名称如下： dul45 - 人前列腺癌； MCF-7 - 人乳腺癌； SK0V3 - 人卵巢癌； HT-29 - 人结肠癌； A549 - 人非小细胞肺癌 （腺癌）； H460 -人非小细胞 肺癌 （大细胞癌）

实施例 1制备的铂配合物的抗肿瘤药效见图 1和图 2;实施例 5制备的铂配合物的抗肿瘤 药效见图 3和图 4; 实施例 9制备的铂配合物的抗肿瘤药效见图 5和图 6; 实施例 10制备的 铂配合物的抗肿瘤药效见图 7和图 8。为了更清晰地显示配合物的药效趋势， 所有图中的曲均 省略了平均标准误差标记。

实验例 5: 本发明含氟水溶性铂配合物有效成分在动物肿 瘤模型中的抗肿瘤药效

( 1 ) 试验方法： 使用 5-6周 Nu/nu雄性裸小鼠， 实验动物购自北京维通利华实验动物技 术有限公司。 动物饲养于 SPF级环境下 IVC系统中。

所有实验动物自由摄食、饮水， 室温 20〜25°C， 湿度 40%〜70%， 昼夜明暗交替 12 h/12 h。 收集人结直肠肿瘤 DLD-1细胞， 每只裸鼠腋部皮下注入细胞悬液， 建立荷瘤小鼠模型。待 肿瘤长到 150〜300 mm3时， 根据肿瘤体积和体重将小鼠均衡分成 4组， 生理盐水组、 实施例 3配合物组， 实施例 18配合物组， 奥沙利铂组， 每组 10只。 间隔一周腹腔注射给药 1次， 给 药体积 10 mL/kg, 连续四周给药后停止给药观察肿瘤在停止给药 后的增长情况， 停止给药后 动物正常饲养， 采用隔日测量瘤径的方法， 动态观察动物肿瘤的回长趋势和受试药的抗肿 瘤 作用。 实验观察至分组后第 61天。

肿瘤体积 （tumor volume, TV) 的计算公式为： V = l/2 X a X b2 。 其中 a和 b分别表示肿 瘤长和宽，根据测量结果计算出肿瘤体积。相 对肿瘤体积增长百分比（％)= ( (Vt- V0) / V0) X100 o vo为分笼给药时 （即 do) 测量所得肿瘤体积， vt为每一次测量时的肿瘤体积 。

( 2 )投药剂量： 根据预先针对同类裸鼠进行的最大耐药剂量实 验结果， 取各种药物最大 耐药剂量的 70%作为药效实验的投药量。其中奥沙利铂临床 药物的投药量为 7. 5毫克每千克体 重， 实施例 3配合物为 35毫克每千克体重， 实施例 18配合物为 42毫克每千克体重。 药物在 使用前溶解于灭菌蒸馏水中， 使用超声波将药物充分溶解后注射给药。

( 3 )实验结果： 实验结果显示， 本发明所提供的含氟水溶性铂配合物与临床对 比药物奥 沙利铂相比具有更优越的肿瘤抑制效果。 尤其表现在能够在停止给药后长时间抑制肿瘤 的回 长， 充分显示了本发明铂配合物在肿瘤细胞及肿瘤 组织内的选择性积蓄和肿瘤靶向性的提高

(见图 9 )。为了更清晰地显示配合物的药效趋势，所� �图中的曲均省略了平均标准误差标记。

利用本发明的金属铂配合物， 可以制备预防和治疗肿瘤的药物。 这些药物的制备通常使 用一种或者几种有效剂量的本发明所提供的金 属铂配合物， 配合药学可接受的载体或稀释剂 而完成。 这些药学上可接受的药用辅料例如淀粉， 葡萄糖、 糊精、 果糖和麦芽糖， 乳糖， 明 胶， 蔗糖， 羟基纤维素， 羟丙基甲基纤维素， 二氧化硅， 硬脂酸羟基乙酸淀粉钠， 水， 乙醇， 氯化钠等可根据不同的剂型需要加以选择。 另外， 根据药物制备上的需要， 这些药用辅料还 可以包括少量的酸碱调节剂， 稳定剂等。

实验证明： 本发明提供的配合物具有良好的抗肿瘤活性。 这种抗肿瘤活性可以与目前被 广泛应用的顺铂， 卡铂或奥沙利铂相媲美， 其活性甚至高于这些现存的铂类抗癌药物。 另外， 本发明所提供的配合物针对顺铂的抗癌作用能 够形成强烈抗药性的鼠 Le _U kemi _a -L1210肿瘤细 胞具有更有效的杀伤作用。 这是因为本发明所提供的配合物在水溶性方面 与现有铂类抗肿瘤 药品相比， 都具有几十倍以上的提高， 这种高水溶性特点在理论上能够增加和提高药 物在肾 脏的排泄， 减轻铂类药物一般存在的高肾毒副作用， 同时这种高水溶性特性使这些化合物容 易制剂化和在临床上的应用更方便。

本发明的抗肿瘤药物， 其给药途径没有特别的限制， 其剂量不仅取决于病人的年龄， 体 重以及病情， 还取决于肿瘤的种类， 性质和严重程度。 但一般来说， 对于成年病人， 最好每 天使用的量为 10毫克至 1克之间。 一般为每一至三周一次或几次用药。