LIU YANG (CN)
WANG YIQIANG (CN)
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| CN102286049A | 2011-12-21 | |||
| CN101891769A | 2010-11-24 |
天津市北洋有限责任专利代理事务所 (CN)
| 权 利 要 求 1. 用于肿瘤治疗的水溶性铂配合物， 其特征是式 （I ) 所示: X和 Υ是配位体， 所述 X和 Υ相同或不同并且各自代表一个 ΝΗ3、 一个（^-(8链状垸基 伯胺、 一个（ -( 8环状垸基伯胺、 一个芳香胺、 一个至少有一个 d-C4垸基取代的芳香胺、 一个分子式为 RfNH-R的仲胺，其中 和 相同或者不同分别表示 d-C8链状垸基或 RfNH-R 共同组成 C4-C8的环状垸基仲胺、 一个具有含氮芳香族杂环化合物或至少有一个 d-C4垸基 取代的含氮芳香族杂环化合物、 一个具有含硫芳香族杂环化合物或含硫非芳香族杂环化合 物， 或 X和 Y—起用结构式 （VIII 其中 D为 C。或 的亚垸基； B为 C2- C8的亚垸基； n是 1-6; R选自下述 -位 2. 根据权利要求 1所述的用于肿瘤治疗的水溶性铂配合物， 其特征是所述 n是 1-3。 3. 根据权利要求 1所述的用于肿瘤治疗的水溶性铂配合物， 其特征是所述 R选自下述单 糖基， 单糖 1-位取代为 α或者 β或者两者的混合物： 4. 根据权利要求 1所述的用于肿瘤治疗的水溶性铂配合物， 其特征是所述 X和 Y—起为 反式- ( 1R， 2R) -环己二胺， 反式- ( 1S， 2S) -环己二胺， 顺式- ( 1R， 2S) -环己二胺或 顺式- ( 1S， 2R) -环己二胺， 消旋反式 -1， 2-环己二胺或消旋顺式 -1， 2-环己二胺。 5. 制备权利要求 1-4之一的用于肿瘤治疗的水溶性铂配合物的中间体， 其特征是式（III ) 所示- Μ代表氢原子或者元素周期表第 ΙΑ族的金属原子；或者两个 Μ共同代表一个第 ΠΑ族 的金属原子； η是 1-6; R 1-位取代为 α或者 β或 、.、.z、 6. 权利要求 1-4之一的用于肿瘤治疗的水溶性铂配合物 （I) 的制备方法， 其特征是包括 如下步骤： 将式 （II) 化合物与调节了 ρΗ为 7-9的式 （III) 化合物的水溶液进行反应， 或将式 (II) 化合物与式 （III) 化合物在有无机碱的存在下的水中进行反应， 即制成用于肿瘤 治疗的水溶性铂配合物 （I); 所述 （Π) 的结构式为： 式 （II) 中： X和 Υ是配位体， 所述 X和 Υ相同或不同并且各自代表一个 ΝΗ3、 一个（^-(8链状垸基 伯胺、 一个（ -(8环状垸基伯胺、 一个芳香胺、 一个至少有一个 d-C4垸基取代的芳香胺、 一个分子式为 RfNH-R的仲胺，其中 和 相同或者不同分别表示 d-C8链状垸基或 RfNH-R 共同组成 C4-C8的环状垸基仲胺、 一个具有含氮芳香族杂环化合物或至少有一个 d-C4垸基 取代的含氮芳香族杂环化合物、 一个具有含硫芳香族杂环化合物或含硫非芳香族杂环化合 物， 或 X和 Y—起用结构式 （VIII) 所示- 其中 D为 C。或 的亚垸基； B为 C2- C8的亚垸基； 和 相同或者不同， 各自代表羟基，硝基， 高氯酸根， 或者 Α^ΡΑ2共同代表硫酸根， 碳酸根； 所述 （III) 的结构式为- 式 （III) 中: M代表氢原子或者元素周期表第 IA族的金属原子；或者两个 M共同代表一个第 ΠΑ族 的金属原子； n是 1-6; R选自下述单糖基， 单糖 1-位取代为 α或者 β或者两者的混合物： $ ,■、、、· ；ί: ϋ 「 ,Ά、 、 ，..'■ 、、、z、 : ！ 7. 根据权利要求 6所述的用于肿瘤治疗的水溶性铂配合物的制备方法，其特征是所述 M为 氢原子、 钠原子、 或两个 M共同代表一个钡原子， 所述 n是 1-3。 8. 根据权利要求 6所述的用于肿瘤治疗的水溶性铂配合物的制备方法， 其特征是所述 R选自下述单糖基， 单糖 1-位取代为 α或者 β或者两者的混合物： 、丫 Ζ . Η 丫 ' 9. 根据权利要求 6 所述的用于肿瘤治疗的水溶性铂配合物的制备方法， 其特征是所述无 机碱为氢氧化钠、 氢氧化钾、 碳酸钠、 碳酸氢钠、 碳酸钾、 氢氧化锂、 氢氧化钡或氢氧化 铯。 10. 根据权利要求 6所述的用于肿瘤治疗的含氯水溶性铂配合物的制备方法， 其特征是所 述 X和 Y—起为反式- ( 1R， 2R) -环己二胺， 反式- ( 1S， 2S) -环己二胺， 顺式- ( 1R， 2S) -环己二胺， 顺式- ( 1S， 2R) -环己二胺， 消旋反式 -1， 2-环己二胺或消旋顺式 -1， 2-环己二胺。 |
本发明涉及一种水溶性铂配合物，特别涉及一 种用于肿瘤治疗的水溶性铂配合物及制备 方法。 背景技术
铂类抗癌药是肿瘤治疗领域具有代表性的一类 药物。 其属于细胞周期非特异性药物， 对 肉瘤， 恶性上皮肿瘤， 淋巴瘤以及生殖细胞肿瘤都具有治疗功效。 目前世界上广泛应用于临 床治疗的具有代表性的铂类抗癌药主要有， 顺铂， 卡铂和奥沙利铂。
铂类抗癌药物的致命缺点是具有极强的毒副作 用以及固有的和后续形成的耐药性问题。 另外由于此类药物是金属有机化合物， 所有铂类上市药物普遍存在水溶性极低的特性 ， 下表 是上述三种上市临床药物的水溶性数据： 由于过低的水溶性不仅给药品制剂的稳定性和 临床应用带来了很多的不利影响， 比如很 难把它们顺利地配制成一种方便和具有合适浓 度的临床药剂。 不仅如此， 过低的药物水溶性 还直接影响到药物在身体内的积蓄和代谢， 含有金属原子的铂类化合物尤其在药物的排泄 等 方面受水溶性的影响更为显著， 积蓄在肾脏组织和血液里的铂类药物不能被身 体及时排出形 成了铂类药物普遍具有很强毒副作用的特点。 以下是各种具有新型化学结构的铂类抗肿瘤药 物由于水溶性不能得到改善以及由此导致的重 笃药物积 副作用而被迫中止临床试验的 药品案例：
(参考文献： Status of platinum drugs in the clinic and in clinical trials, Daiion. T'ransaciions, 2010, 39, 8113-8127. )
综上所述， 解决铂类药物的水溶性问题是目前世界上铂类 抗癌药研发领域专注的最重要 课题之一 ( Galanski, Markus； Keppler, Bernhard K Searching for the Magic Bul let： Anticancer Platinum Drugs Which Can Be Accumulated or Activated in the Tumor Tissue. An ti-Cancer Agen ts in Medicinal Chemistry, ( 2007 )， 7， 55-73)。 增加铂类药物的水溶 性， 一方面可望增加药物在生物体内的稳定性， 降低药物针对各种人体脏器和组织以及细胞 中普遍存在的亲核基团的反应性， 降低毒副作用。 另一方面， 增加药物的水溶性可以帮助药 物在肾脏的有效排泄， 从而减少药物在体内的积蓄和对肾脏等组织器 官的毒副作用。 发明内容
本发明的目的是克服现有技术中的不足， 提供一种能够实质性地改变铂类药物水溶性问 题的用于肿瘤治疗的水溶性铂配合物。
本发明的第二个目的是提供制备用于肿瘤治疗 的水溶性铂配合物的中间体。
本发明的第三个目的是提供用于肿瘤治疗的水 溶性铂配合物的制备方法。
本发明的技术方案概述如下：
用于肿瘤治疗的水溶性铂配合物， 是式 （I ) 所示：
X和 Y是配位体，所述 X和 Y相同或不同并且各自代表一个 NH 3 、一个 状垸基伯胺、 一个（ -( 8 环状垸基伯胺、 一个芳香胺、 一个至少有一个 d-C 4 垸基取代的芳香胺、 一个 分子式为 RfNH-R的仲胺，其中！^和 相同或者不同分别表示 d-C 8 链状垸基或 RfNH-R共同 组成 C 4 -C 8 的环状垸基仲胺、 一个具有含氮芳香族杂环化合物或至少有一个 d-C 4 垸基取代的 含氮芳香族杂环化合物、 一个具有含硫芳香族杂环化合物或含硫非芳香 族杂环化合物， 或 X 和 Y—起用结构式 （VIII ) 所示-
其中 D为 C。或 的亚垸基； B为 C 2 - C 8 的亚垸基；
n是 1-6; 优选 1-4; 最好是 2或 3;
R 1-位取代为 α或者 :
R优选下述单糖基， 单糖 1-位取代为 α或者 β或者两者的混合物:
优选的是 X和 Y—起为反式- (1R， 2R) -环己二胺， 反式- (1S， 2S) -环己二胺， 顺式- (1R， 2S) -环己二胺， 顺式- (1S， 2R) -环己二胺， 消旋反式 -1， 2-环己二胺或消旋顺式 -1， 2-环己二胺。 最好是： 反式- (1R， 2R) -环己二胺。
用于制备式 （I) 所示 ， 是式 （III) 所示：
Μ代表氢原子或者元素周期表第 IA族的金属原子； 或者两个 M共同代表一个第 ΠΑ族的 金属原子；
n是 1-6; 优选 1-4; 最好是 2或 3;
R选自下述单糖基， 单糖 1-位取代为 α或者 β或者两者的混合物：
o
HO' \、 Z
«、' ' Z、、 ，'
R优选下 1-位取代为 α或者 β或者两者
用于肿瘤治疗的水溶性铂配合物 （I) 的制备方法， 包括如下步骤：
将式（II)化合物与调节了 pH为 7-9的式（III)化合物的水溶液进行反应，或将 （II) 化合物与式（III)化合物在有无机碱的存在下 水中进行反应， 即制成用于肿瘤治疗的水溶 性铂配合物 （I); 所述 （Π) 的结构式为：
式 （II) 中：
X和 Y是配位体，所述 X和 Y相同或不同并且各自代表一个 NH 3 、一个 状垸基伯胺、 一个（ -( 8 环状垸基伯胺、 一个芳香胺、 一个至少有一个 d-c 4 垸基取代的芳香胺、 一个 分子式为 RfNH-R的仲胺，其中！^和 相同或者不同分别表示 d-C 8 链状垸基或 RfNH-R共同 组成 C 4 -C 8 的环状垸基仲胺、 一个具有含氮芳香族杂环化合物或至少有一个 d-C 4 垸基取代的 含氮芳香族杂环化合物、 一个具有含硫芳香族杂环化合物或含硫非芳香 族杂环化合物， 或 X 和 Y—起用结构式 （VIII) 所示： (VIII)
其中 D为 C。或 的亚垸基； B为 C 2 - C 8 的亚垸基；
本发明的 X和 Y所表示的最佳的例子包括但不限于：
X和 Y各为 NH 3 ， 异丙胺， 环丙胺， 环丁胺， 环戊胺， 环己胺； 或者 X和 Y其中之一为 NH 3 ， 另一个为异丙胺， 环丙胺， 环丁胺， 环戊胺， 环己胺， 2-甲基吡啶； 1， 2-乙二胺， 1， 3-丙 二胺， 2-甲基四亚甲基二胺， 1， 2-环丁二胺， 1， 2-环戊二胺， 1， 2-环己二胺， 1， 2-环庚 二胺， 1， 2-环辛二胺， 1-氨基 -2-氨甲基环己垸， 1， 1-二氨甲基环己垸， 5， 5-二氨甲基 -1， 3-二噁垸， 2-氨甲基-吡咯垸和 2-氨甲基吡啶； 当上述配体化合物中含有手性中心时， 可以 是其中任一光学异构体或者消旋体混合物； 和 相同或者不同， 各自代表羟基， 硝基， 高氯酸根， 或者 ^和 A共同代表硫酸根， 碳酸根；
( III ) 的结构式为-
式 （III ) 中：
M代表氢原子或者元素周期表第 IA族的金属原子； 或者两个 M共同代表一个第 ΠΑ族的 金属原子； M优选氢原子、 钠原子、 钾原子、 锂原子或铯原子； 或两个 M共同代表一个钡原 子；
n是 1-6; 优选 1-4; 最好是 2或 3;
R选自下述单糖基， 单糖 1-位取代为 α或者 β或者两者的混合物：
R优选:
单糖 1-位取代为 α或者 β或者两者的混合物。
所述无机碱为氢氧化钠， 氢氧化钾， 碳酸钠， 碳酸氢钠， 碳酸钾， 氢氧化锂， 氢氧化钡 或氢氧化铯。
优选的 X和 Υ—起为反式- ( 1R， 2R) -环己二胺， 反式- ( 1S， 2S) -环己二胺， 顺式- ( 1R， 2S) -环己二胺， 顺式- ( 1S， 2R) -环己二胺， 消旋反式 -1， 2-环己二胺或消旋顺式 -1， 2-环己二胺。 最好是： 反式- ( 1R， 2R) -环己二胺。
本发明通过在传统的丙二酸铂配合物结构中引 入水溶性糖分子取代基， 实现了迄今含金 属铂配合物所未有的高水溶性。 另外， 如下式所示， 丙二酸铂 2-位活泼氢的存在由于容易形 成烯醇互变异构现象， 从而导致传统的丙二酸铂类配合物出现稳定性 方面的问题， 尤其在作 为药物使用的生理 pH条件下，这种烯醇互变异构的发生会直接导 铂类配合物在体内的分解 (Kresge, A. J. Ingold lecture. Reactive intermediates： Carboxyl ic acid enols and other unstable species. Chem. Soc. Rev. 1996， 25， 275—280. )
本发明中所提供的铂配合物结构中由于在丙二 酸 2-位引入氯原子， 不仅能够有效地避免 上述烯醇互变异构的发生， 而且由于在生物体内存在高浓度的氯负离子， 含有氯原子取代的 铂配合物作为药物使用时能够大大提高药物在 生物体内的稳定性。
试验证明本发明的铂配合物、 与临床药物奥沙利铂相比其水溶性的增加可以 达到超过一 百倍。 另外， 本发明所取得的氯原子取代铂配合物的稳定性 与临床药物奥沙利铂相比也得到 了明显改善。 第三， 动物模型药效实验证明， 含有氯原子的本发明所提供的含糖铂配合物在 长期抑制肿瘤的效果方面亦优于奥沙利铂， 充分体现了本发明水溶性铂配合物的肿瘤靶向 效 果。 综上所述， 本发明所提供的用于肿瘤治疗的水溶性铂类配 合物， 不仅能够解决现存铂类 药物因为缺乏水溶性而存在的制剂稳定性差的 问题以及临床使用不方便的缺陷， 而且能够改 善和提高现有临床药物在肿瘤治疗效果方面存 在的不足。 附图说明
图 1为实施例 1制备的配合物抗肿瘤药效 -1。
图 2为实施例 1制备的配合物抗肿瘤药效 -2。
图 3为实施例 5制备的配合物抗肿瘤药效 -1。
图 4为实施例 5制备的配合物抗肿瘤药效 -2。
图 5为实施例 9制备的配合物抗肿瘤药效 -1。
图 6为实施例 9制备的配合物抗肿瘤药效 -2。
图 7为实施例 10制备的配合物抗肿瘤药效 -1。
图 8为实施例 10制备的配合物抗肿瘤药效 -2。
图 9为实施例 6、 实施例 18和实施例 25制备的配合物在动物肿瘤模型中的抗肿瘤药 。 具体实施方式
本发明的实施例是为了使本领域的技术人员更 好地理解本发明， 但不以任何方式限制本 发明。
作为本发明所提供的由式（I)所表示的用于肿 治疗的水溶性铂配合物， 其优选化合物 的代表性举例亦可以由下述表 1列出， 但本发明所涵盖用于肿瘤治疗的水溶性铂配合 物不限 于以下的举例。
当式（I) 中的 R分别为 D-葡萄糖、 D-半乳糖或者 D-甘露糖取代基时； n和 X、 Y见表 1: 表 1 :
表 1 中的配体 1， 2-环己二胺可以是反式- (1R， 2R) -环己二胺， 反式- (1S， 2S) -环 己二胺， 顺式- (R， S) -环己二胺或顺式- (S， R) -环己二胺， 消旋反式 -1， 2-环己二胺， 消旋顺式 -1， 2-环己二胺之中的任意一种。
本发明所提供的式 （I) 所示的用于肿瘤治疗的水溶性铂配合物， 用下述的方法来完成， 见反应式：
方法 A:
方法 B:
(π)
在方法 A中， 当 （III ) 中 M是氢原子时， 反应可以通过使用适当的无机碱， 例如氢氧化 钠， 氢氧化钾， 碳酸钠， 碳酸氢钠， 碳酸钾， 氢氧化锂以及氢氧化铯等来调节反应水溶液的 pH维持在 7-9之间来完成式 （I ) 所示配合物的制备； 当 M为所述金属原子时， 例如钠原子、 钾原子、 钡原子或铯原子， 反应可在水溶液中顺利进行， 必要时使用少量的上述无机碱的水 溶液维持反应溶液的 pH在 7-9之间即可完成式 （I ) 所示配合物的合成。
在方法 B中， 当 M是氢原子时， 反应可以通过使用等当量的氢氧化钡作为无机 碱， 在水 溶液中完成与式 （Π ) 所示的金属铂硫酸盐化合物的缩合反应来制备 式 （I ) 所示的配合物。 由方法 B制备本发明配合物时， 亦可以使用事先制得的钡盐， 即两个 M共同代表一个钡原子， 与式 （II ) 所示的金属铂硫酸盐配合物在水溶液中进行反 应来完成配合物的制备过程。
上述反应的溶剂最好使用去离子水， 反应温度一般在室温或者根据需要加热到 60-90°C 进行反应。
方法 A和 B中式 （II ) 所表示的化合物可以通过相应的顺 -二氯化铂与 X和 Y的配合物， 与硝酸银或硫酸银反应而制备， 例如： 顺 -二氯 _ ( 1， 2-二氨基环己垸）合铂与 2当量的硝酸 银或 1当量的硫酸银反应而制备。 该反应最好在水溶液中进行， 使用的水最好是去离子水。 反应温度在室温比较合适。
如此所得到的化合物（Π )与事先制备好的化合物（III )用蒸馏水或者去离子水作溶剂 进行反应。 每当量的化合物 （III ) 选用 0. 5 - 4当量的化合物 （11 )， 优选条件是 1至 2当 量。反应条件是在 pH在 7-9的条件下完成， 该条件可以通过使用适当的碱来维持反应介质 而 达到。 该碱的种类最好是无机碱， 例如氢氧化钠， 氢氧化钾， 氢氧化钡， 碳酸钠， 碳酸钾， 碳酸氢钠。 最好是使用这些碱的大约当量浓度 （1N) 的水溶液。 反应可以在一个比较宽的温 度范围内来进行， 例如选择在 0-100°C的温度范围来进行上述反应。 最好是从室温到 90°C， 并同时伴随搅拌为好。 根据不同的目标产物反应需要的时间变化范围 也很宽。 根据不同反应 物的性质， 一般需要 1小时到 30天来完成。 更多的情况下需要 10小时至 15天的时间。
很多方法可以被用来精制上述反应中得到的生 成物 （1 )。 例如反应完成后的混合物可以 先通过过滤除去可能生成的沉淀物， 然后通过减压蒸馏浓缩， 然后加入有机溶剂， 使所要的 目标 （I )沉淀析出。 一般选择能够与水互溶的有机溶剂， 例如一种醇 （例如甲醇， 乙醇， 丙 醇， 丁醇， 异丙醇等）， 或者与水有一定互溶的一种醚（例如二乙醚， 甲基叔丁基醚， 四氢呋 喃， 乙二醇二乙醚， 乙二醇二甲醚等）， 最后将得到的沉淀收集起来， 例如通过过滤， 就可以 得到所需要的式 （I ) 所表示的配合物。 提纯和精制上述反应中得到的生成物 （I ) 也可以用 色谱等的方法。 例如用离子交换树脂， 或者用制备液相色谱。 液相色谱分离精制一般使用甲 醇和水作为移动相来进行。
本发明化合物 （Π Ι ) 可以由下述的反应式所给出的以葡萄糖为例的 方法 C， D或者方法 E，F中的任意一种来进行制备- 方法 C:
方法 E:
以葡萄糖为例， 在方法 C中， 作为与糖反应的含氯 2-位取代丙二酸酯衍生物， 可以通过使 用卤代垸基醇与氯代丙二酸酯化合物例如氯代 丙二酸二甲酯， 氯代丙二酸二乙酯， 氯代丙二 酸二苯甲酯， 氯代丙二酸环异内酯等按照文献已知的一般方 法 （例如： Journal of the American Chemical Society, 131 (8), 2786-2787; 2009 )来制备。得到的含氯丙二酸 -2-垸基醇衍生物与 D_葡萄 糖可以在路易斯酸存在下在溶剂中进行缩合反 应，从而得到 2-氯代 -2-垸基取代丙二酸酯的葡 萄糖苷化合物。 缩合反应的条件是针对葡萄糖化合物使用 0. 1-50当量的含氯丙二酸衍生物， 或者相反针对含氯丙二酸衍生物使用 0. 1-50当量的葡萄糖。使用的路易斯酸可以是 BF 3 ， SnCl 4 ， FeCl 3 ， A1C1 3 ， 盐酸， 对甲苯磺酸， 樟脑磺酸等， 路易斯酸的量相对于葡萄糖可以是 0. 1_10 当量。 所使用的溶剂可以是四氢呋喃， 二氯甲垸， 甲苯， 乙二醇二甲醚， 乙二醇二乙醚等也 可以使用两种反应物中的任意一种当作溶剂来 进行该反应。 反应的温度可以从零 °0到100°〇， —般可以在 60-80°C加热完成该反应。 反应所需要的时间根据反应物的不同而不同， 一般 1小 时至 7天可以完成。得到的反应产物可以通过一系 的提纯条件来进行精制，一般可以使用硅 胶层析分离法， 或者液相色谱柱分离法。 得到的该产物， 经过除去丙二酸的保护基就可以最 后得到所需要的式 （III ) 所表示的化合物。 脱保护的方法根据使用的保护基的不同而不同 ， 如果使用氯代苯甲基丙二酸化合物， 可以使用加氢还原的方法进行脱保护， 如果使用氯代丙 二酸二乙酯或者氯代丙二酸环异内酯进行反应 时， 脱保护反应可以使用无机碱在甲醇 -水， 或 者 THF-水溶剂中来进行， 有机溶剂与水的比例一般为 1 : 1-4 : 1。所使用的无机碱可以是氢氧化 钠， 氢氧化钾， 氢氧化钡， 氢氧化锂等。 反应温度一般为室温至 60°C， 反应时间一般为 1-24 小时。 脱保护生成的化合物的提纯可以使用硅胶层析 法或者离子交换树脂过滤法， 或者使用 液相色谱法来完成， 如果用蒸馏法直接除去反应溶剂， 所得到的生成物将会是相应的金属羧 酸盐。
如方法 D所示， D-葡萄糖亦可以先转化成相应的乙酰化葡萄糖 然后再实施与含氯 2-位 取代丙二酸酯衍生物的缩合反应， D-葡萄糖的乙酰化可以按照文献报道的方法实 ， 例如在 吡啶中采用乙酸酐作为乙酰化试剂在室温或者 在 60°C加热 1-24小时即可完成。 方法 D中除 乙酰化以外的各个步骤的反应条件与方法 C中所描述的相同。
方法 E和 F所示的制备方法是将卤代醇先与葡萄糖或者 酰化葡萄糖在路易斯酸存在下 进行缩合， 然后进行与丙二酸酯衍生物的取代反应最后获 得化合物（III ) 的制备路线。 所得 到的丙二酸酯的二位氯取代反应， 可以使用代表性的氯取代反应试剂 NCS来进行。 反应一般 在 THF或者 DMF或者乙醚溶剂中将丙二酸酯用等当量或者过 量的碱处理后， 加入上述氯取代 反应试剂来完成。 所使用的碱可以是氢化钠， 碳酸钾， 碳酸钠， 碳酸铯， 碳酸氢钠等， 氯取 代试剂的当量为丙二酸酯的 1-3倍， 反应温度一般在零 °0至60°0， 最好在室温条件下搅拌完 成。 上述制备路线中涉及葡萄糖的乙酰化， 路易斯酸存在下的缩合反应， 丙二酸酯的 2-位垸 基化取代反应以及最后的脱保护反应， 其反应条件和实施方法与方法 C和方法 D中所叙述的 相同。
主要实验仪器：
核磁共振谱仪： BRUKER AVANCE III， 400MHz ; 分析液相色谱仪： 北京创新通恒 LC3000 型 高效液相色谱仪， SPD-lOATvp 双波长紫外检测器， 7725i 手动进样器， CLASS-VP 色谱工作 站； 分析色谱柱： DaisoGel, C18, 4. 6 X 250cm, 5 y m KNAUER德国； 半制备液相色谱仪： 创新通恒 LC3000 半制备液相色谱， SPI001 ; 半制备色谱柱： DaisoGel 250 X 20mmID, C18, ΙΟ μ πΐ; 质谱仪： Agilent 6310 Ion Trap LC/MS; 冷冻干燥机： FD-lc-50冻干机 （北京博医 康实验仪器有限公司）。
实施例 1 :
( 1 ) 1-0-D-葡萄糖苷 -2-溴 -乙垸 (IV-1 ) 制备：
1) 在室温条件下将葡萄糖 （2.7g) 加入到 2-溴乙醇 （10ml) ， 冷却到 0°C， 用氮气 置换烧瓶内空气， 在氮气保护下慢慢滴加 1ml三氟化硼-乙醚配合物；
2) 将反应液在 0°C搅拌 15分钟， 然后慢慢升温到室温并搅拌 30分钟， 然后将反应 液加热到 80°C， 在 80°C反应 5小时； 反应完成后， 旋蒸除去溶剂， 使用硅胶柱色谱（二氯甲 垸： 甲醇， 6 : 1) 对反应生成物实施简单纯化,得到粗产品 2.3g (IV-1) 。 质谱： MS， m/z: 287.23 [M+H] +
(2) 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-葡萄糖苷） -2-溴 -乙焼 (V-1) 的制备：
在室温条件下， 将上一步反应得到的产品 1-0-D-葡萄糖苷 -2-溴 -乙垸（IV-1) 2.3g溶解于 吡啶与乙酸酐 （7ml : 7ml) 中， 搅拌过夜， 用 TLC监测反应终点。 反应完成后， 加入 100ml 乙酸乙酯， 用体积浓度为 5%的盐酸水溶液 （2x25ml) 洗涤， 将水相用乙酸乙酯 （2><25ml) 萃取， 合并有机相。 将有机相依次用饱和氯化铵水溶液 （IxlOOml), 蒸馏水 （IxlOOml), 饱 和碳酸氢钠水溶液 （IxlOOml), 饱和氯化钠水溶液 （IxlOOml) 洗涤， 用无水硫酸钠干燥。 用旋转蒸发仪将溶剂蒸干， 得到微黄色粗产品。 得到的粗产品经硅胶柱色谱纯化 （石油醚： 乙酸乙酯， 3 : 1)， 得到无色油状目的产物 2.5g (V-l)。
核磁共振谱 （400 MHz， CDC13), ppm: 5.45 ( 1H， 三重峰， J=9.6Hz); 5.15 ( 1H， 双重峰, J=4Hz); 5.02 (1Η， 三重峰， J=9.6Hz); 4.80-4.83 ( 1H， 多重峰）； 4.19-4.23 ( 1H， 多重峰）； 4.04-4.15 (2H， 多重峰）； 3.92-4.00 ( 1H， 多重峰）； 3.75-3.85 ( 1H， 多重峰）； 3.49 (2H， 三重峰， J=6Hz); 1.91-2.11 (12H， 多重峰）。 质谱： MS， m/z: 455.15 [M+H] + (3) 1-0- (2， 3， 4， 6-四乙 -D-葡萄糖苷) -丙垸 _3， 3-二甲酸二乙酯 (VI-1) 的制备：
将上一步反应得到的产品 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-葡萄糖苷） -2-溴 -乙垸（V-1) (2.5g) 溶解于 5ml 干燥的 N， N-二甲基甲酰胺中， 向反应液中加入碳酸钾 （3g)， 丙二酸二乙酯 (1.76g)， 室温搅拌过夜。 用 TLC监测反应终点， 待反应完成后， 向反应液中加入 100ml乙 酸乙酯， 然后用饱和氯化铵水溶液 （1x50ml) 洗涤， 将水相用乙酸乙酯萃取 （2x25ml)， 合 并有机相。 将有机相依次用饱和氯化铵水溶液 （IxlOOml), 蒸馏水 （IxlOOml), 饱和氯化钠 溶液（IxlOOml)洗涤， 然后用无水硫酸钠干燥， 用旋转蒸发仪将溶剂蒸干， 得到的淡黄色油 状物用硅胶柱色谱纯化（石油醚： 乙酸乙酯， 3 : 1)，得到无色透明油状目的产物 2.6g(VI-l)。 核磁共振谱 (400 MHz ， CDC13), ppm: 5.42 ( 1H， 三重峰， J=9.6Hz); 4.96-5.10 (2H， 多重峰）； 4.78-4.90 (1Η， 多重峰）； 4.03-4.33 (5H， 多重峰）； 3.92-4.02 ( 1H， 多重峰）； 3.71-3.87 (1H， 多重峰）； 3.71-3.87 ( 1H， 多重峰）； 3.55 (1H， 三重峰， J=8Hz); 3.40-3.50 (1Η， 多重峰）； 2.13-2.28 (2H， 多重峰）； 1.94-2.14 (12H, 多重峰）； 1.15-1.35 (6H， 多重 峰）。 质谱： MS， m/z: 535.34 [M+H] +
(4) 1-0- (2， 3， 4， 6-四乙酰基 -D-葡萄糖苷) -丙垸 _3_氯 -3， 3-二甲酸二乙酯 (VII-1) 的制备
将 1-0- (2， 3， 4， 6-四乙酰基 -D-葡萄糖苷） -丙垸 _3， 3-二甲酸二乙酯 2.6g溶解在 20mL 干燥的四氢呋喃中， 冷却到 0°C。 用氮气置换烧瓶内空气， 在氮气保护下缓慢加入 235mg氢化 钠固体 （60%)。 反应液升温至室温， 搅拌 1小时。 加入 780mgN-氯代丁二酰亚胺，反应液室温 反应 2小时， 旋蒸除去溶剂。 向反应液中加入 100ml乙酸乙酯， 然后用饱和氯化铵水溶液（1 X50ml) 洗涤， 将水相用乙酸乙酯萃取 （2X25ml)， 合并有机相。 将有机相依次用饱和氯化 铵水溶液 （lXlOOml), 蒸馏水 （lXlOOml), 饱和氯化钠水溶液 （IX 100ml) 洗涤， 然后用 无水硫酸钠干燥， 用旋转蒸发仪将溶剂蒸干， 得到的淡黄色油状物用硅胶柱色谱纯化 （石油 醚： 乙酸乙酯， 3 : 1)， 得到无色透明油状目的产物 2.6g (VII-1 )。
核磁共振谱 （400 MHz ， CDC13), ppm: 5.29 ( 1H， 三重峰， J=9.6Hz); 4.90-5.00 (2H， 多重峰）； 4.67-4.78 (1H， 多重峰）； 4.15-4.35 (5H， 多重峰）； 3.97-4.05 (2H， 多重峰） 3.85-3.95 ( 1H，多重峰）； 3.45-3.55 ( 1H，多重峰）； 2.48-2.65 (2H，多重峰）； 1.85-2.05
(12H， 多重峰）； 1.10-1.30 (6H， 多重峰）。 质谱： MS, m/z: 569.19 [M+H] +
(5) 1-0- (D-葡萄糖 -丙垸 -3-氯 -3， 3-二甲酸 （III-1) 的制备
1) 将 1_0-(2， 3， 4， 6-四乙酰基 -D-葡萄糖苷） -丙垸 -3-氯 -3， 3-二甲酸二乙酯（2.6g， ) 溶解于 5mL甲醇中。 将氢氧化钠 （1.5g)溶解于 10mL水中， 室温下加入到反应液中， 然后升 温至 60°C反应 24小时。 用 TLC监测反应终点。
2) 待反应完成后， 用旋转蒸发仪除去甲醇， 使用强酸性阳离子交换树脂处理产品。 用水洗脱得到的水溶液用冷冻干燥机干燥后得 到无色粘稠状液体 1.5g， 粗产品直接用于下步 反应。 质谱： MS， m/z: 345.11 [M+H]+
(6) 顺-【反式- (1R， 2R) -二胺基环己垸】铂 （II) ( l-O-D-葡萄糖苷 -丙垸 -3-氯 -3，
3-二甲酸酯） （1-1) 的制备-
(I— 1)
1) 将 1-0-D-葡萄糖苷 -丙垸 -3-氯 -3， 3-二甲酸粗产品 （1.5g) 溶解于 15mL水中， 用氢 氧化钡水溶液调节反应液 pH到 7， 室温搅拌 30分钟；
2) 在氮气保护下将反式- (1R， 2R) 环己二胺硫酸铂 （1.7g) 溶解于 2ml水中， 加入到 1) 的反应液中， 用氢氧化钡水溶液调节 pH到 7， 室温避光搅拌过夜。
3) 待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC分离并使用冷冻 干燥机冻干， 得到 1.5g最终产品 （1-1) ， 白色固体。
核磁共振谱 （400 MHz ， D20) ， ppm : 5.76 ( 1H， 单峰） ； 5.67 ( 1H， 单峰） ； 5.15 (1H， 单峰）； 4.96 (1H， 单峰）； 4.84 (0.8H， 双重峰， J=3.6Ηζ， α-异构体)； 4.40 (0.2Η， 双重峰， J=7.2Ηζ， β-异构体）； 3.20-4.00 (風 多重峰）； 2.20-2.45 (2Η， 单峰）； 1.95 (2Η， 两重峰， J=12Hz)； 1.48 (2H， 两重峰， J=8Hz)； 1.12-1.30 (2H， 单峰）； 0.95-1· 10 (2H， 多重峰） 。 质谱： MS, m/z: 652.36 [M+H]+
实施例 2:
(1) 1-0-D-葡萄糖苷 -3-溴 -丙垸 （IV-2) 的制备-
(IV-2)
在室温条件下将葡萄糖 （1.8g) 加入到 3-溴丙醇 （8mL)， 冷却到 0°C， 用氮气置换烧瓶 内空气， 在氮气保护下以慢慢滴入 0.7mL三氟化硼-乙醚配合物； 将反应液在 0°C搅拌 15分 钟， 升至室温搅拌 30分钟， 然后加热到 80°C， 在 80°C反应 5小时。 反应完成后， 旋蒸除去 溶剂，使用硅胶柱色谱（二氯甲垸： 甲醇，体积比 6： 1)进行简单纯化后,得到粗产品 2g(IV-2)。 质谱： MS， m/z: 301.23 [M+H] +
(2) 1-0- (2， 3， 4， 6-四乙酰基 -D-葡萄糖苷） -3-溴 -丙垸 （V-2) 的制备：
(V-2)
在室温条件下， 将上一步反应得到的 1-0-D-葡萄糖苷 -3-溴 -丙垸 （IV-2) 粗产品 2g溶解 于吡啶与乙酸酐（6ml： 6ml)中，搅拌过夜， 用 TLC监测反应终点。反应完成后，加入 100ml 乙酸乙酯， 用体积浓度为 5%的盐酸水溶液 （2x25ml) 洗涤， 将水相用乙酸乙酯 （2><25ml) 萃取， 合并有机相。 将有机相依次用饱和氯化铵水溶液 （lxlOOml), 蒸馏水 （lxlOOml), 饱 和碳酸氢钠水溶液 （lxlOOml), 饱和氯化钠水溶液 （lxlOOml) 洗涤， 用无水硫酸钠干燥。 用旋转蒸发仪将溶剂蒸干， 得到微黄色粗产品。 得到的粗产品经硅胶柱色谱纯化 （石油醚： 乙酸乙酯， 3 : 1)， 得到无色油状目的产物 2.1g (V-2)。
核磁共振谱 （400 MHz ， CDC13), ppm : 5.47 (1H， 三重峰， J=9.6Hz) ; 5.00-5.15 (2H， 多重峰）； 4.85-4.95 (1H， 多重峰）； 4.20-4.40 ( 1H， 多重峰）； 4.07-4.18 ( 1H， 多重峰）； 4.00-4.07 (1H， 多重峰）； 3.80-3.95 (1H， 多重峰）； 3.40-3.70 (3H， 多重峰）； 1.90-2.30 (14H， 多重峰）。 质谱： MS, m/z: 469.15 [M+H] +
(3) 1-0- (2， 3， 4， 6- -D-葡萄糖苷） -丁垸 _4， 4-二甲酸二乙酯 （VI-2) 的制备：
将上一步反应得到的产品 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-葡萄糖苷） -3-溴 -丙垸（V-2) (2.1g) 溶解于 15ml 干燥的 N， N-二甲基甲酰胺中， 向反应液中加入碳酸钾 （2.5g)， 丙二酸二乙酯 (1.45g)， 在室温搅拌过夜。 用 TLC监测反应终点， 待反应完成后， 向反应液中加入 100ml 乙酸乙酯， 用饱和氯化铵水溶液 （1x50ml) 洗涤， 将水相用乙酸乙酯萃取 （2x25ml)， 合并 有机相。 将有机相依次用饱和氯化铵水溶液 （IxlOOml), 蒸馏水 （IxlOOml), 饱和氯化钠溶 液（IxlOOml)洗涤， 然后用无水硫酸钠干燥， 用旋转蒸发仪将溶剂蒸干， 得到的淡黄色油状 物用硅胶柱色谱纯化（石油醚： 乙酸乙酯， 3： 1)， 得到无色透明油状目的产物 2.2g (VI-2)o 核磁共振谱 （400 MHz ， CD3C13), ppm : 5.45 ( 1H， 三重峰， J=9.6Hz); 4.95-5.15 (2H， 多重峰）； 4.75-4.93 (1H， 多重峰）； 4.13-4.35 (5H， 多重峰）； 4.03-4.11 ( 1H， 多重峰）； 3.93-4.02 (1H， 多重峰）； 3.60-3.80 ( 1H， 多重峰）； 3.39-3.50 ( 1H， 多重峰）； 3.25-3.38 (1H， 三重峰， J=8Hz) ; 1.80-2.30 (14H， 多重峰）； 1.50-1.75 (2H， 多重峰）； 1.10-1.45 (6H， 多重峰）。 质谱： MS, m/z: 549.50 [M+H] +
(4) 1-0- (2， 3， 4， 6- -D-葡萄糖苷） -丁垸 -4-氯 -4， 4-二甲酸二乙酯 （VII-2)
将 1-0- (2， 3， 4， 6-四乙酰基 -D-葡萄糖苷) -丁垸 -4， 4-二甲酸二乙酯 2.2g溶解在 20mL 干燥的四氢呋喃中， 冷却到 0°C。 用氮气置换烧瓶内空气， 在氮气保护下缓慢加入 193mg氢化 钠固体 （60%)。 反应液升温至室温， 搅拌 1小时。 加入 643mgN-氯代丁二酰亚胺，反应液室温 反应 2小时， 旋蒸除去溶剂。 向反应液中加入 100ml乙酸乙酯， 然后用饱和氯化铵水溶液（1 X50ml) 洗涤， 将水相用乙酸乙酯萃取 （2X25ml)， 合并有机相。 将有机相依次用饱和氯化 铵水溶液 （lXlOOml), 蒸馏水 （lXlOOml), 饱和氯化钠水溶液 （IX 100ml) 洗涤， 然后用 无水硫酸钠干燥， 用旋转蒸发仪将溶剂蒸干， 得到的淡黄色油状物用硅胶柱色谱纯化 （石油 醚： 乙酸乙酯， 3 : 1)， 得到无色透明油状目的产物 2.2g ( VII-2 )o
核磁共振谱 （400 MHz ， CDC13), ppm : 5.44 ( 1H， 三重峰， J=6Hz); 5.00-5.10 (2H， 多重峰）； 4.80-4.88 (1H， 多重峰）； 4.20-4.25 (5H， 多重峰）； 4.05-4.10 ( 1H， 多重峰）； 3.95-4.03 (1H， 多重峰）； 3.68-3.78 ( 1H， 多重峰）； 3.40-3.50 ( 1H， 多重峰）； 2.20-2.40 (2H， 多重峰）； 1.90-2.15 (12H， 多重峰）； 1.60-1.80 (2H， 多重峰）； 1.23-1.35 (6H， 多 重峰）。 质谱： MS， m/z: 583.19 [M+H] +
(5) 1_0-0-葡萄糖苷-丁垸-4-氯-4，4-二甲酸 （ΠΙ-2) 的制备-
(III— 2)
1) 1-0- (2， 3， 4， 6-四乙酰基 -D-葡萄糖苷） -丁垸 -4-氯 -4， 4-二甲酸二乙酯 （2.2g)溶解 于 5mL甲醇中。 将氢氧化钠 （1.2g) 溶解于 10mL水中， 在室温慢慢加入到反应液中， 然后 升温至 60°C反应 24小时。 用 TLC监测反应终点。
2) 待反应完成后， 用旋转蒸发仪除去甲醇， 使用强酸性阳离子交换树脂处理产品。 将 得到的水溶液使用冷冻干燥机干燥， 得到 1.3g无色粘稠状液体 （ΠΙ-2) 。 粗产品直接用于 下一步反应。 质谱： MS， m/z: 359.15 [M+H]+
(6) 顺-【反式- (1R， 2R) -二氨基环己垸】铂 (II) (1-0-D-葡萄糖苷 -丁垸 -4-氯 -4， 4-二甲酸酯) (1-2) -
1)将 1-0-D-葡萄糖苷 -丁垸 -4-氯 -4， 4-二甲酸粗产品 （1.3g) 溶解于 15mL水中， 用氢 氧化钡水溶液调节反应液 pH到 8， 在室温搅拌 30分钟。
2) 在氮气保护下将反式- (1R， 2R) 环己二胺硫酸铂 （1.4g) 溶解于 2ml水中， 加入到 1) 中的反应液中， 用氢氧化钡溶液调节 pH到 8， 室温避光搅拌过夜。
3)待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC分离并使用冷冻 干燥机冻干， 得到 1.4g最终产品， 白色固体 （1-2)。
核磁共振谱 （400 MHz ， D20)， ppm : 4.88 ( 1H，双重峰， J=3.6Ηζ， α-异构体）； 3.65-3.85
(5Η， 多重峰）； 3.55-3.63 ( 1Η， 多重峰）； 3.45-3.53 ( 1Η， 多重峰）； 3.25-3.40 (2Η， 多重峰）； 2.80-3.00 (1H, 多重峰）； 2.25-2.45 (2Η， 多重峰）； 1.85-2.05 (2Η， 多重峰）； 1.56-1.73 (2Η， 多重峰）； 1.49 (2Η，两重峰， J=8Hz); 1.13-1· 33 (2H，多重峰）； 0.92-1· 11 (2H， 多重峰）。 质谱： MS, m/z: 666.65 [M+H] +
实施例 3: 二氨基铂（II) (1-0-D-葡萄糖苷 -丙垸 -3-氯 -3， 3-二甲酸酯）（1-3) 的制备：
(1-3)
1) 将 lOOmg的 1-0-D-葡萄糖苷 -丙垸 -3-氯 -3， 3-二甲酸粗产品溶于 5ml的去离子水， 用氢氧化钡水溶液调节反应液 pH到 9， 室温搅拌 30分钟。
2) 在氮气保护下将二氨基硫酸铂 （llOmg) 溶解于 2ml水中， 加入到 1) 中反应液中， 用氢氧化钡溶液调节 pH到 8， 室温避光搅拌过夜。
3)待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC精制分离并使用 冷冻干燥机冻干， 得到 lOOmg最终产品 （1-3)， 白色固体。
核磁共振谱 （400 MHz ， D20)， ppm : 4.88 (0· 8H， 双重峰， J=3.6Ηζ， α-异构体） 4.42 (0·2Η， 双重峰， J=7.2Ηζ， β—异构体） 3.15-3.95 (10Η， 多重峰）。 质谱： MS, m/z: 572.11 [M+H] +
实施例 4: 二氨基铂 II) (1-0-D-葡萄糖苷 -丁垸 -4-氯 -4， 4-二甲酸酯) (1-4):
1) 将 lOOmg的 1-0-D-葡萄糖苷 -丁垸 -4-氯 -4， 4-二甲酸粗产品溶于 5 ml的去离子水， 用氢氧化钡水溶液调节反应液 pH到 9， 室温搅拌 30分钟。
2) 在氮气保护下将二氨基硫酸铂 （120mg) 溶解于 2ml水中， 加入到 1) 中反应液中， 用氢氧化钡溶液调节 pH到 9， 室温避光搅拌过夜。
3)待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC精制分离并使用 冷冻干燥机冻干， 得到 llOmg最终产品 （1-4)， 白色固体。
核磁共振谱 (400 MHz ， D20)， ppm : 4.87 ( 1H，双重峰， J=3.6Ηζ， α-异构体）; 3.64-3.83 (5Η， 多重峰）； 3.55-3.63 ( 1Η， 多重峰）； 3.43-3.53 ( 1Η， 多重峰）； 3.26-3.40 (2Η， 多重峰）； 2.80-2.98(1Η， 多重峰）； 1.60-1.75 (2Η， 多重峰）。质谱： MS， m/z: 586.56 [Μ+Η] + 实施例 5:
(1) 1-0-D-半乳糖苷 -2-溴 -乙垸 （IV-5) 制备：
(IV-5)
1) 在室温条件下将半乳糖 （2.7g， 15mmol) 加入到 2-溴乙醇 （10ml) ， 冷却到 0°C， 用氮气置换烧瓶内空气， 在氮气保护下慢慢滴加 1ml三氟化硼-乙醚配合物。
2) 将反应液在 0°C搅拌 15分钟， 然后慢慢升温到室温并搅拌 30分钟， 然后将反应液加 热到 80°C， 在 80°C反应 5小时。 反应完成后， 旋蒸除去溶剂， 使用硅胶柱色谱（二氯甲垸： 甲醇， 6： 1)对反应生成物实施简单纯化,得到粗产品 2.4g (IV-5) 。 质谱： MS， m/z: 287.03 [M+H]+
(2) 1-0- (2， 3， 4， 6-四乙酰基 -D-半乳糖苷） -2-溴 -乙垸 （V-5) 的制备：
在室温条件下，将上一步反应得到的产品 1-0-D-半乳糖苷 -2-溴 -乙垸 2.4g溶解于吡啶与 乙酸酐 （7ml : 7ml) 中， 搅拌过夜， 用 TLC监测反应终点。 反应完成后， 加入 50ml乙酸乙 酯， 用体积浓度为 5%的盐酸水溶液 （2X25ml) 洗涤， 将水相用乙酸乙酯 （2X25ml) 萃取， 合并有机相。 将有机相依次用饱和氯化铵水溶液 （lXlOOml), 蒸馏水 （lXlOOml), 饱和碳 酸氢钠水溶液（lXlOOml), 饱和氯化钠水溶液（IX 100ml)洗涤， 用无水硫酸钠干燥。 用旋 转蒸发仪将溶剂蒸干， 得到微黄色粗产品。 得到的粗产品经硅胶柱色谱纯化 （石油醚： 乙酸 乙酯， 3 : 1)， 得到白色固体目的产物 2.6g (V-5)。
核磁共振谱 （400 MHz ， CDC13), ppm : 5.46 ( 1H， 两重峰， J=4Hz); 5.33-5.45 ( 1H， 多重峰）； 5.19 (1H，两重峰， J=4Hz) ; 5.07-5.15 ( 1H， 多重峰）； 4.33 ( 1H， 三重峰， J=6Hz);
4.06-4.13 (2H， 多重峰）； 3.95-4.05 ( 1H， 多重峰）； 3.77-3.88 ( 1H， 多重峰）； 3.51 (2H， 三重峰， J=4Hz); 1.95-2.20 (12H， 多重峰）。 质谱： MS， m/z: 455.16 [M+H] +
(3) 1-0- (2， 3， 4， 6-四 -D-半乳糖苷) -丙垸 _3， 3-二甲酸二乙酯 (VI-5) 的制备:
(VI-5)
将上一步反应得到的产品 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-半乳糖苷） -2-溴 -乙垸（V-5) (2.6g) 溶解于 15ml 干燥的 N， N-二甲基甲酰胺中， 向反应液中加入碳酸钾 （3g， 22mmol)， 丙二 酸二乙酯 （1.8g)， 室温搅拌过夜。 用 TLC 监测反应终点， 待反应完成后， 向反应液中加入 100ml乙酸乙酯，然后用饱和氯化铵水溶液（1x50 ml)洗涤，将水相用乙酸乙酯萃取（2><25ml) 合并有机相。 将有机相依次用饱和氯化铵水溶液 （IxlOOml), 蒸馏水 （IxlOOml), 饱和氯化 钠溶液（IxlOOml)洗涤， 然后用无水硫酸钠干燥， 用旋转蒸发仪将溶剂蒸干， 得到的淡黄色 油状物用硅胶柱色谱纯化（石油醚： 乙酸乙酯， 3 : 1)， 得到白色固体目的产物 2.8g (VI-5)o 核磁共振谱 （400 MHz ， CDC13), ppm: 5.40 ( 1H， 两重峰， J=4Hz); 5.23-5.33 ( 1H， 多重峰）； 5.00-5.15 (2H， 多重峰）； 4.20-4.40 (5H， 多重峰）； 3.90-4.10 (2H， 多重峰）； 3.73-3.90 (1H， 多重峰）； 3.53-3.65 ( 1H， 多重峰）； 3.49 (1H， 三重峰， J=4Hz); 1.90-2.20 (14H， 多重峰）； 1.20-1.40 (6H， 多重峰）。 质谱： MS， m/z: 535.26 [M+H] +
(4) 1-0- (2， 3， 4， 6-四乙酰基 -D-半乳糖苷) -丙垸 _3_氯 -3， 3-二甲酸二乙酯 (VII-5)
将 1-0- (2， 3， 4， 6-四乙酰基 -D-半乳糖苷) -丙垸 -3， 3-二甲酸二乙酯 2.8g溶解在 20mL 干燥的四氢呋喃中， 冷却到 0°C。 用氮气置换烧瓶内空气， 在氮气保护下缓慢加入 250mg氢化 钠固体 （60%)。 反应液升温至室温， 搅拌 1小时。 加入 700mgN-氯代丁二酰亚胺，反应液室温 反应 2小时， 旋蒸除去溶剂。 向反应液中加入 100ml乙酸乙酯， 然后用饱和氯化铵水溶液（1 X50ml) 洗涤， 将水相用乙酸乙酯萃取 （2X25ml)， 合并有机相。 将有机相依次用饱和氯化 铵水溶液 （lXlOOml), 蒸馏水 （lXlOOml), 饱和氯化钠水溶液 （IX 100ml) 洗涤， 然后用 无水硫酸钠干燥， 用旋转蒸发仪将溶剂蒸干， 得到的淡黄色油状物用硅胶柱色谱纯化 （石油 醚： 乙酸乙酯， 3 : 1)， 得到白色固体目的产物 2.7g ( VII-5 )o
核磁共振谱 （400 MHz ， CDC13), ppm : 5.42 ( 1H， 单峰）； 5.25-5.33 ( 1H， 多重峰）； 5.03-5.10 (2H， 多重峰）； 4.18-4· 40 (5H， 多重峰）； 4.00-4· 15 (2H， 多重峰）； 3.83-3· 95
(1H， 多重峰）； 3.45-3.58 (1H， 多重峰）； 2.52-2.60 ( 1H， 多重峰）； 2.45- 2.50 ( 1H， 多重峰）； 1.90-2.20 (12H，多重峰）； 1.25-1· 35 (6H，多重峰）。质谱： MS, m/z: 569.26 [M+H] + (5) 1_0-0-半乳糖苷- -3-氯-3，3-二甲酸 （ΠΙ-5)
(III— 5)
1) 将 1-0- (2， 3， 4， 6-四乙酰基 -D-半乳糖苷) -丙垸 -3-氯 -3， 3-二甲酸二乙酯 (2.7g) 溶解于 5mL甲醇中。 将氢氧化钠 （1.5g) 溶解于 10mL水中， 室温下加入到反应液中， 然后 升温至 60°C反应 24小时。 用 TLC监测反应终点。
2) 待反应完成后， 用旋转蒸发仪除去甲醇， 使用强酸性阳离子交换树脂处理产品。 将 过滤得到的水溶液用冷冻干燥机干燥后得到无 色粘稠状液体 1.7g (III-5) ， 粗产品直接用于 下步反应。 质谱： MS， m/z: 345.25 [M+H]+
(6) 顺-【反式- (1R， 2R) -二氨基环己垸】铂 (II) (1-0-D-半乳糖苷 -丙垸 -3-氯 -3， 3-二甲酸酯） （1-5) 的制备-
1) 将 1-0-D-半乳糖苷 -丙垸 -3-氯 -3， 3-二甲酸粗产品 （1.6g) 溶解于 15mL水中用氢氧 化钡水溶液调节反应液 pH到 7， 室温搅拌 30分钟。
2) 在氮气保护下将反式- (1R， 2R) -环己二胺硫酸铂 （1.8g) 溶解于 5ml水中， 加入到 1) 的反应液中， 用氢氧化钡溶液调节 pH到 7， 室温避光搅拌过夜。
3)待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备高压液相色谱分离， 使 用冷冻干燥机冻干得到 1.7g最终产品 （1-5) 。
核磁共振谱 （400 MHz, D20) , ppm : 4.90 (1H， 两重峰， J=3.6Hz) ； 4.10-4.30 ( 1H，多 重峰） ； 3.50-4.00 (8H，多重峰) ； 2.80-3.40 ( 1H， 多重峰） ； 2.28-2.45 (2H，多重峰) ； 1.90-2.00 (2H，多重峰) ； 1.40-1.60 (2H， 多重峰） ； 1.16-1.30 (2H， 宽峰） ； 1.00-1.15 (2H， 多重峰） 。 质谱： MS, m/z: 652.33 [M+H]+
实施例 6:
(1) 1-0-D-半乳糖苷 -3-溴 -丙垸 （IV-6) 的制备：
采用实施例 2中与制备 1-0-D-葡萄糖苷 -3-溴-丙垸相同的操作方法， 用半乳糖取代反应 条件中的葡萄糖，从 1.8g半乳糖最后制得 2.05g目的粗产物。质谱： MS, m/z: 301.03 [M+H] + (2) 1-0- (2， 3， 4， 6-四乙酰基 -D-半乳糖苷） -3-溴 -丙垸 （V-6) 的制备：
(V-6)
采用实施例 2 中与制备 1-0- (2， 3， 4， 6-四乙酰基 -D-葡萄糖苷） _3_溴-丙垸相同的操作 方法， 用 1-0-D-半乳糖苷 -3-溴-丙垸取代反应条件中的 1-0-D-葡萄糖苷 -3-溴-丙垸， 从 2.05gl-0-D-半乳糖苷 -3-溴-丙垸最后制得 2.2g白色固体目的产物 （V-6)。 质谱： MS， m/z: 469.25 [M+H] +
(3) 1-0- (2， 3， 4， 6-四乙酰基 -D-半乳糖苷） -丁垸 _4， 4-二甲酸二乙酯 （VI-6) 的制备：
(VI-6)
采用实施例 2 中与制备 1-0- (2， 3， 4， 6-四乙酰基 -D-葡萄糖苷） -丁垸 _4， 4-二甲酸二乙 酯相同的操作方法， 用 1-0- (2， 3， 4， 6-四乙酰基 -D-半乳糖苷） -3-溴-丙垸取代反应条件中 的 1-0- (2， 3， 4， 6-四乙酰基 -D-葡萄糖苷) -3-溴-丙垸， 从 2.2gl- 0- (2， 3， 4， 6-四乙酰基 _D_ 半乳糖苷） -3-溴-丙垸最后制得 2.3g白色固体目的产物（VI-6)。质谱： MS，m/z:549.33 [M+H] +
(4) 1-0- (2， 3， 4， 6-四乙酰基 -D-半乳糖苷) -丁垸 _4_氯 -4， 4-二甲酸二乙酯 (VII-6) 的制备-
采用实施例 2中与制备 1-0- (2， 3， 4， 6-四乙酰基 -D-葡萄糖苷） -丁垸 _4_氯 -4， 4-二甲酸 二乙酯相同的操作方法， 用 1-0- (2， 3， 4， 6-四乙酰基 -D-半乳糖苷） -丁垸 -4， 4-二甲酸二乙 酯取代反应条件中的 1-0- (2， 3， 4， 6-四乙酰基 -D-葡萄糖苷） -丁垸 -4， 4-二甲酸二乙酯， 从 2.3gl-0- (2， 3， 4， 6-四乙酰基 -D-半乳糖苷） -丁垸 _4， 4-二甲酸二乙酯最后制得 2.2g白色固 体目的产物 (VII-6)o 质谱： MS, m/z: 583.26 [M+H] +
(5) 1-0- (D-半乳糖苷) -丁 -4-氯 -4， 4-二甲酸 (III- 6) 的制备：
采用实施例 2中与制备 1-0- (2， 3， 4， 6-四乙酰基 -D-葡萄糖苷） -丁垸 _4_氯 -4， 4-二甲酸 相同的操作方法， 用 1-0- (2， 3， 4， 6-四乙酰基 -D-半乳糖苷） -丁垸 _4_氯 -4， 4-二甲酸二乙酯 取代反应条件中的 1-0- (2， 3， 4， 6-四乙酰基 -D-葡萄糖苷） -丁垸 -4-氯 -4， 4-二甲酸二乙酯， 从 2.2gl-0- (2， 3， 4， 6-四乙酰基 -D-半乳糖苷） -丁垸 _4_氯 -4， 4-二甲酸二乙酯最后制得 1.3g 无色粘稠状液体目的产物 (111-6)。 质谱： MS, m/z: 359.26 [M+H] +
(6) 顺-【反式- (1R， 2R) -二氨基环己垸】铂 (II) (1-0-D-半乳糖苷 -丁垸 -4-氯 -4， 4-二甲酸酯) (1-6)
(1-6)
1)将 1-0-D-半乳糖苷 -丁垸 -4-氯 -4， 4-二甲酸粗产品 (III- 6) (1.3g) 溶解于 15mL水 中， 用氢氧化钡水溶液调节反应液 pH到 8， 在室温搅拌 30分钟。
2) 在氮气保护下将反式- (1R， 2R) -环己二胺硫酸铂 （1.4g) 溶解于 2ml水中， 加入到 1) 中的反应液中， 用氢氧化钡溶液调节 pH到 8， 室温避光搅拌过夜。
3)待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC分离并使用冷冻 干燥机冻干， 得到 1.4g最终产品 （1-6)， 白色固体。
核磁共振谱 （400 MHz ， D20)， ppm : 4.90 (1H， 双重峰， J=4Hz); 3.62-4.00 (7H， 多 重峰）； 3.50-3.60 (1H, 多重峰）； 2.70-3.00 (2H， 多重峰）； 2.20-2.40 (2H， 多重峰）； 1.90-2.10 (2H， 多重峰）； 1.60-1.70 (2H， 多重峰）； 1.50 (2H，两重峰， J=6Hz); 1.18-1.30 (2H， 多重峰）； 1.00-1.16 (2H， 多重峰）。 质谱： MS, m/z: 666.20 [M+H] + 实施例 7: 二氨基铂 3， 3-二甲酸酯）（1-7) 的制备:
(1-7)
1) 将 lOOmg的 1-0-D-半乳糖苷 -丙垸 -3-氯 -3， 3-二甲酸粗产品溶于 5 ml的去离子水， 用氢氧化钡水溶液调节反应液 pH到 9， 室温搅拌 30分钟。
2) 在氮气保护下将二氨基硫酸铂 （lOOmg) 溶解于 2ml水中， 加入到 1) 中反应液中， 用氢氧化钡溶液调节 pH到 9， 室温避光搅拌过夜。
3)待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC精制分离并使用 冷冻干燥机冻干， 得到 102mg最终产品 （1-7)， 白色固体。
核磁共振谱 （400 MHz ， D20)， ppm : 4.89 ( 1H， 两重峰， J=3.6Hz); 3.50-4.20 (9H， 多重峰）； 2.80-3.40 (1H， 多重峰）。 质谱： MS, m/z: 572.21 [M+H] +
实施例 8: 二氨基铂 -0-D-半乳糖苷 -丁垸 -4-氯 -4， 4-二甲酸酯) (1—8):
1) 将 lOOmg的 1-0-D-半乳糖苷 -丁垸 -4-氯 -4， 4-二甲酸粗产品溶于 5 ml的去离子水用 氢氧化钡水溶液调节反应液 pH到 9， 室温搅拌 30分钟。
2)在氮气保护下将二氨基硫酸铂 （95mg)溶解于 2ml水中， 加入到 1) 中反应液中， 用 氢氧化钡溶液调节 pH到 9， 室温避光搅拌过夜。
3)待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC精制分离并使用 冷冻干燥机冻干， 得到 89mg最终产品 （1-8)， 白色固体。
核磁共振谱 （400 MHz ， D20)， ppm : 4.90 (1H， 双重峰， J=4Hz); 3.50-4.00 (8H， 多 重峰）； 2.68-3.10 (2H， 多重峰）； 1.55-1.75 (2H， 多重峰）。质谱： MS， m/z: 586.19 [M+H] + 实施例 9:
(1) 1-0-D-甘露糖苷 -2-溴-乙垸制备 （IV-9) 制备：
(IV-9)
1) 在室温条件下将甘露糖 （1.8g， 15mmol) 加入到 2-溴乙醇 （8ml) ， 冷却到 0°C， 用 氮气置换烧瓶内空气， 在氮气保护下慢慢滴加 1ml三氟化硼-乙醚配合物。
2) 将反应液在 0°C搅拌 15分钟， 然后慢慢升温到室温并搅拌 30分钟， 然后将反应液加 热到 80 °C， 在 80 V反应 5小时。
3) 反应完成后， 旋蒸除去溶剂， 使用硅胶柱色谱 （二氯甲垸： 甲醇， 体积比 6： 1) 对 反应生成物实施简单纯化，得到粗产品 2. lg。 质谱： MS， m/z: 287.05 [M+H] (2) 1-0- (2， 3， 4， 6-四乙 -D-甘露糖苷） -2-溴 -乙垸 （V-9) 的制备：
在室温条件下， 将上一步反应得到的产品 1-0-D-甘露糖苷 -2-溴 -乙垸 （IV-9) 2.1g溶解 于吡啶与乙酸酐（7ml： 7ml)中，搅拌过夜， 用 TLC监测反应终点。反应完成后，加入 100ml 乙酸乙酯， 用体积浓度为 5%的盐酸水溶液 （2X50ml) 洗涤， 将水相用乙酸乙酯 （2X25ml) 萃取， 合并有机相。 将有机相依次用饱和氯化铵水溶液 （lXlOOml), 蒸馏水 （lXlOOml), 饱和碳酸氢钠水溶液（lXlOOml),饱和氯化钠水溶 液（IX 100ml)洗涤， 用无水硫酸钠干燥。 用旋转蒸发仪将溶剂蒸干， 得到微黄色粗产品。 得到的粗产品经硅胶柱色谱纯化 （石油醚： 乙酸乙酯， 3 : 1)， 得到白色固体 2g (V-9)。
核磁共振谱 （400 MHz ， CDC13), ppm : 5.18-5.40 (3H， 多重峰）； 4.90 ( 1H， 单峰）； 4.20-4.40 (1H, 多重峰）； 4.08-4.18 (2H， 多重峰）； 3.95-4.05 ( 1H， 多重峰）； 3.80-3.94 (1H， 多重峰）； 3.53 (2H， 三重峰， J=6Hz); 1.95-2.20 (12H， 多重峰）
质谱： MS， m/z: 455.09 [M+H] +
(3) 1-0- (2， 3， 4， 6-四 ， 3-二甲酸二乙酯 （VI-9) 的制备：
(VI-9)
将上一步反应得到的产品 1-0- (2， 3， 4， 6-四乙酰基 -D-甘露糖苷） -2-溴 -乙垸 （2g) 溶 解于 15ml 干燥的 N，N-二甲基甲酰胺中，向反应液中加入碳酸钾 （2.4g)，丙二酸二乙酯（1.4g)， 室温搅拌过夜。 用 TLC监测反应终点， 待反应完成后， 向反应液中加入 100ml乙酸乙酯， 然 后用饱和氯化铵水溶液 （lX50ml) 洗涤， 将水相用乙酸乙酯萃取 （2X25ml)， 合并有机相。 将有机相依次用饱和氯化铵水溶液 （lXlOOml), 蒸馏水 （lXlOOml), 饱和氯化钠溶液 （1 X 100ml)洗涤， 然后用无水硫酸钠干燥， 用旋转蒸发仪将溶剂蒸干， 得到的淡黄色油状物用 硅胶柱色谱纯化 （石油醚： 乙酸乙酯， 3 : 1)， 得到白色固体目的产物 2.1g (VI-9)o
核磁共振谱 （400 MHz ， CDC13), ppm : 5.28 (2H，两重峰， J=4Hz); 5.20-5.25 ( 1H， 多重峰）； 4.79 (1H，单峰）； 4.15-4· 35 (5H， 多重峰）； 4.05-4· 13 ( 1H， 多重峰）； 3.90-4· 03 (1H， 多重峰）； 3.70-3.85 ( 1H， 多重峰）； 3.40-3.58 (2H， 多重峰）； 2.17-2.35 (2H， 多重峰）； 1.95-2.15(12H， 多重峰）； 1.20-1.35(6H，多重峰）。质谱： MS， m/z: 535.18 [M+H] +
(4) 1-0- (2， 3， 4， 6-四乙酰基 -D-甘露糖苷) -丙垸 _3_氯 -3， 3-二甲酸二乙酯 (VII-9) 的制备-
(VII-9)
将 1-0- (2， 3， 4， 6-四乙酰基 -D-甘露糖苷) -丙垸 -3， 3-二甲酸二乙酯 (VI-9) 2. lg溶解 在 20mL干燥的四氢呋喃中，冷却到 0°C。用氮气置换烧瓶内空气，在氮气保护下 慢加入 188mg 氢化钠固体 （60%)。 反应液升温至室温， 搅拌 1小时。 加入 630mgN-氯代丁二酰亚胺，反应液 室温反应 2小时， 旋蒸除去溶剂。 向反应液中加入 100ml乙酸乙酯， 然后用饱和氯化铵水溶 液（lX50ml)洗涤， 将水相用乙酸乙酯萃取（2X25ml)， 合并有机相。 将有机相依次用饱和 氯化铵水溶液 （lXlOOml), 蒸馏水 （lXlOOml), 饱和氯化钠水溶液 （IX 100ml) 洗涤， 然 后用无水硫酸钠干燥，用旋转蒸发仪将溶剂蒸 干，得到的淡黄色油状物用硅胶柱色谱纯化（ 石 油醚： 乙酸乙酯， 3 : 1)， 得到白色固体目的产物 2.1g ( VII-9
核磁共振谱 （400 MHz ， CDC13), ppm : 5.26 ( 1H， 三重峰， J=8Hz); 5.10-5.23 (2H， 多重峰）； 4.73 (1H， 单峰）； 4.25-4.40 (5H， 多重峰）； 4.00-4· 15 (3H，多重峰）； 3.55-3.65 (1H， 多重峰）； 2.63-2.75 ( 1H， 多重峰）； 2.50-2.60 ( 1H， 多重峰）； 1.90-2.20 (12H， 多 重峰）； 1.25-1.35 (6H， 多重峰）。 质谱： MS, m/z: 569.20 [M+H] +
(5) 1_0-0-甘露糖苷
1) 将 1-0- (2， 3， 4， 6-四乙酰基 -D-甘露糖苷） -丙垸 -3-氯 -3， 3-二甲酸二乙酯（VII-9) (2.1g， ) 溶解于 5mL甲醇中。 将氢氧化钠 （1.2g) 溶解于 10mL水中， 室温下加入到反应液 中， 然后升温至 60 °C反应 24小时。 用 TLC监测反应终点。
2)待反应完成后， 用旋转蒸发仪除去甲醇， 使用强酸性阳离子交换树脂处理产品。 将用 水洗脱得到的水溶液用冷冻干燥机干燥后得到 无色粘稠状液体 l.lg (ΙΠ-9) ， 粗产品直接用 于下步反应。 质谱： MS， m/z: 345.19 [M+H]+
(6) 顺-【反式- (1R， 2R) -二氨基环己垸】铂 (II) (1-0-D-甘露糖苷 -丙垸 -3-氯 -3， 3-二甲酸酯) (1-9) 的
(1-9)
1) 将 1-0-D-甘露糖苷 -丙垸 -3-氯 -3， 3-二甲酸粗产品（ΠΙ-9) (l.lg)溶解于 15mL 水中， 用氢氧化钡水溶液调节反应液 pH到 7， 室温搅拌 30分钟。
2) 在氮气保护下将反式- (1R， 2R) -环己二胺硫酸铂 （1.2g) 溶解于 5ml 水中， 加 入到 1) 的反应液中， 用氢氧化钡溶液调节 pH到 7， 室温避光搅拌过夜。 3) 待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备高效液相色谱分离 并使用冷冻干燥机冻干， 得到 1.3g最终产品 （1-9) ， 白色固体。
核磁共振谱 （400 MHz ， D20)， ppm : 4.89 ( 1H， 单峰） ； 3.30-4.00 (9H， 多重峰） ； 2.90-3.20 (1H， 多重峰） ； 2.20-2.45 (2H， 多重峰） ； 1.90-2.05 (2H， 多重峰） ； 1.50 (2H， 两重峰， J=8Hz) ； 1.16-1.30 (2H， 多重峰） ； 1.00-1.15 (2H， 多重峰） 。 质谱： MS, m/z: 652.16 [M+H] +
实施例 10:
(1) 1-0-D-甘露糖苷 -3-溴 -丙垸 （IV-10) 的制备：
(IV-10)
在室温条件下将甘露糖 （1.8g)加入到 3-溴丙醇 （10mL)， 冷却到 0°C， 用氮气置换烧瓶 内空气， 在氮气保护下以慢慢滴入三氯化硼的乙醚溶液 （98%， lmL)。 将反应液在 0°C搅拌 15分钟， 升至室温搅拌 30分钟， 然后加热到 80°C， 在 80°C反应 5小时。 反应完成后， 旋蒸 除去溶剂， 使用硅胶柱色谱 （二氯甲垸： 甲醇， 体积比 6： 1) 进行简单纯化后,得到粗产品 2g (IV-lO)o 质谱： MS, m/z: 301.11 [M+H] +
(2) 1-0- (2， 3， 4， 6-四乙酰基 -D-甘露糖苷） -3-溴 -丙垸 （V-10) 的制备：
在室温条件下， 将上一步反应得到的 1-0-D-甘露糖苷 -3-溴 -丙垸（IV-10)粗产品 2g溶解 于吡啶与乙酸酐（6ml： 6ml)中，搅拌过夜， 用 TLC监测反应终点。反应完成后，加入 100ml 乙酸乙酯， 用体积浓度为 5%的盐酸水溶液 （2x50ml) 洗涤， 将水相用乙酸乙酯 （2><25ml) 萃取， 合并有机相。 将有机相依次用饱和氯化铵水溶液 （lxlOOml), 蒸馏水 （lxlOOml), 饱 和碳酸氢钠水溶液 （lxlOOml), 饱和氯化钠水溶液 （lxlOOml) 洗涤， 用无水硫酸钠干燥。 用旋转蒸发仪将溶剂蒸干， 得到微黄色粗产品。 的到得粗产品经硅胶柱色谱纯化 （石油醚： 乙酸乙酯， 3 : 1)， 得到白色固体目的产物 2.3g (V-10)o
核磁共振谱 （400 MHz ， CDC13), ppm: 5.30-5.55 (3H， 多重峰）； 4.93 ( 1H， 单峰） 4.20-4.38 ( 1H, 多重峰）； 4.05-4.18 ( 1H， 多重峰）； 4.00-4.04 (1H， 多重峰）； 3.81-3.95
(1Η， 多重峰）； 3.45-3.70 (3H， 多重峰）； 1.90-2.30 (14H， 多重峰）。 质谱： MS, m/z: 469.16 [M+H] +
(3) 1-0- (2， 3， 4， 6-四乙酰基 -D-甘露糖苷) -丁垸 _4， 4-二甲酸二乙酯 (VI-10)的制备：
将 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-甘露糖苷） -3-溴 -丙垸 (V-10) (2.3g) 溶解于 15ml 干燥的 N, N-二甲基甲酰胺中， 向反应液中加入碳酸钾 （2.7g)， 丙二酸二乙酯 （1.5g)， 在室温搅拌 过夜。 用 TLC监测反应终点， 待反应完成后， 向反应液中加入 100ml乙酸乙酯， 用饱和氯化 铵水溶液 （1x50ml) 洗涤， 将水相用乙酸乙酯萃取 （2x25ml)， 合并有机相。 将有机相依次 用饱和氯化铵水溶液 （lxlOOml), 蒸馏水 （lxlOOml), 饱和氯化钠溶液 （1x100ml) 洗涤， 然后用无水硫酸钠干燥， 用旋转蒸发仪将溶剂蒸干， 得到的淡黄色油状物用硅胶柱色谱纯化 (石油醚： 乙酸乙酯， 3 : 1)， 得到白色固体目的产物 2.4g (VI-10)。
核磁共振谱 (400 MHz， CDC13), ppm: 5.15-5.40 (3H， 多重峰）； 4.78 ( 1H， 单峰）； 4.25-4.36 ( 1H， 多重峰）； 4.15-4.19 (4H， 多重峰）； 4.05-4.13 ( 1H， 多重峰）； 3.90-4.03 (1Η， 多重峰）； 3.65-3.80 (1Η， 多重峰）； 3.43-3.58 ( 1H， 多重峰）； 3.36(1H,三重峰， J=6Hz); 1.88-2.20 (14H， 多重峰）； 1.60-1.75 (2H， 多重峰）； 1.10-1.35 (6H， 多重峰）。 质 谱： MS， m/z: 549.23 [M+H] +
(4) 1-0- (2， 3， 4， 6-四乙酰基 -D-甘露糖苷) -丁垸 _4_氯 -4， 4-二甲酸二乙酯 (VII-10) 的制备-
将 1-0- (2， 3， 4， 6-四乙酰基 -D-甘露糖苷) -丙垸 -3， 3-二甲酸二乙酯 2.4g溶解在 20mL 干燥的四氢呋喃中， 冷却到 0°C。 用氮气置换烧瓶内空气， 在氮气保护下缓慢加入 210mg氢化 钠固体 （60%)。 反应液升温至室温， 搅拌 1小时。 加入 700mgN-氯代丁二酰亚胺，反应液室温 反应 2小时， 旋蒸除去溶剂。 向反应液中加入 100ml乙酸乙酯， 然后用饱和氯化铵水溶液（1 X50ml) 洗涤， 将水相用乙酸乙酯萃取 （2X25ml)， 合并有机相。 将有机相依次用饱和氯化 铵水溶液 （lXlOOml), 蒸馏水 （lXlOOml), 饱和氯化钠水溶液 （IX 100ml) 洗涤， 然后用 无水硫酸钠干燥， 用旋转蒸发仪将溶剂蒸干， 得到的淡黄色油状物用硅胶柱色谱纯化 （石油 醚： 乙酸乙酯， 3 : 1)， 得到白色固体目的产物 2.3g (VII-lO
核磁共振谱 （400 MHz ， CDC13), ppm: 5.20-5.40 (3H， 多重峰）； 4.83 ( 1H， 单峰）；
4.20-4.40 (5H, 多重峰）； 4.05-4.15 ( 1H， 多重峰）； 3.93-4.03 ( 1H， 多重峰）； 3.65-3.80 (1H， 多重峰）； 3.45-3.58 (1H， 多重峰）； 2.27-2.38 (2H， 多重峰）； 1.95-2.20 ( 12H， 多重峰）
1.65-1.85 (2H， 多重峰）； 1.25-1.40 (6H， 多重峰）。 质谱： MS, m/z: 583.23 [M+H] + (5) 1-0-D-甘露糖苷 -丁垸 -4-氯 -4， 4-二甲酸 （111-10) 的制备：
1) 1-0- (2， 3， 4， 6-四乙酰基 -D-甘露糖苷） -丁垸 -4-氯 -4， 4-二甲酸二乙酯 （2.3g) 溶解 于 5mL甲醇中。 将氢氧化钠 （1.2g) 溶解于 10mL水中， 在室温慢慢加入到反应液中， 然后 升温至 60°C反应 24小时。 用 TLC监测反应终点。
2) 待反应完成后， 用旋转蒸发仪除去甲醇， 使用强酸性阳离子交换树脂处理产品。将得 到的水溶液使用冷冻干燥机干燥， 得到 1.3g无色粘稠状液体。 粗产品直接用于下一步反应。 质谱： MS， m/z: 359.13 [M+H]+
(6) 顺-【反式- (1R， 2R) -二氨基环己垸】铂 (II) (1-0-D-甘露糖苷 -丁垸 -4-氯 -4， 4-二甲酸酯) (1-10) 的制备-
(1-10)
1)将 1-0-D-甘露糖苷 -丁垸 -4-氯 -4， 4-二甲酸粗产品 （1.3g) 溶解于 15mL水中， 用氢 氧化钡水溶液调节反应液 pH到 8， 在室温搅拌 30分钟。
2) 在氮气保护下将反式- (1R， 2R) -环己二氨基硫酸铂 （1.5g) 溶解于 5ml水中， 加入 到 1) 中的反应液中， 用氢氧化钡溶液调节 pH到 8， 室温避光搅拌过夜。
3)待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC分离并使用冷冻 干燥机冻干， 得到 1.4g最终产品， 白色固体。
核磁共振谱 （400 MHz ， D20)， ppm : 4.86 ( 1H， 单峰）； 3.50-3.96 (8H， 多重峰）； 2.80-3.20 (2H， 多重峰）； 2.20-2· 45 (2H， 多重峰）； 1.96 (2H， 两重峰， J=12Hz); 1.61-1· 75 (2H， 多重峰）； 1.51 (2H， 两重峰， J=6Hz) ; 1.13-1.30 (2H， 多重峰）； 0.95-1.12 (2H， 多重峰）。 质谱： MS， m/z: 666.18 [M+H] +
实施例 11: 二氨基铂 (ID (1-0-D-甘露糖苷 -丙垸 -3-氯 -3， 3-二甲酸酯) (1-11) 的制 备-
(1-11)
1) 将 lOOmg的 1-0-D-甘露糖苷 -丙垸 -3-氯 -3， 3-二甲酸粗产品溶于 5 ml的去离子水， 用氢氧化钡水溶液调节反应液 pH到 9， 室温搅拌 30分钟。
2) 在氮气保护下将二氨基硫酸铂 （lOOmg) 溶解于 2ml水中， 加入到 1) 中反应液中， 用氢氧化钡溶液调节 pH到 9， 室温避光搅拌过夜。
3)待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC精制分离并使用 冷冻干燥机冻干， 得到 90mg最终产品 （1-11)， 白色固体。
核磁共振谱 （400 MHz ， D20)， ppm : 4.85 ( 1H， 单峰）； 3.50-3.95 (9H， 多重峰）； 2.80-3.20 (1H， 多重峰）。 质谱： MS, m/z: 572.21 [M+H] +
实施例 12: 二氨基铂 （II) (1-0-D-甘露糖苷 -丁垸 -4-氯 -4， 4-二甲酸酯） （1-12) 的制
(1-12)
1) 将 lOOmg的 1-0-D-甘露糖苷 -丁垸 -4-氯 -4， 4-二甲酸粗产品溶于 5 ml的去离子水， 用氢氧化钡水溶液调节反应液 pH到 9， 室温搅拌 30分钟。
2)在氮气保护下将二氨基硫酸铂 （90mg)溶解于 2ml水中， 加入到 1) 中反应液中， 用 氢氧化钡溶液调节 pH到 9， 室温避光搅拌过夜。
3)待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC精制分离并使用 冷冻干燥机冻干， 得到 80mg最终产品 （1-12)， 白色固体。
核磁共振谱 （400 MHz ， D20)， ppm : 4.90 ( 1H， 单峰）； 3.50-4.00 (8H， 多重峰）； 2.80-3.20 (2H， 多重峰）； 1.60-1.73 (2H， 多重峰）。 质谱： MS, m/z: 586.17 [M+H] + 实施例 13:
二异丙胺基铂 （Π 3) 的制备-
1)将 lOOmg的 1-0-D-甘露糖苷 -丙垸 -3-氯 -3， 3-二甲酸粗产品溶于 5 ml的去离子水， 用 氢氧化钡水溶液调节反应液 pH到 9， 室温搅拌 30分钟。
2)在氮气保护下将二异丙胺硫酸铂 （140mg)溶解于 2ml水中， 加入到 1) 中反应液中， 用氢氧化钡溶液调节 pH到 9， 室温避光搅拌过夜。
3)待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC精制分离并使用 冷冻干燥机冻干， 得到 90mg最终产品 （1-13)， 白色固体。
核磁共振谱 （400 MHz ， D20)， ppm: 4.85 ( 1H， 单峰）； 3.40-4.10 (9H， 多重峰）； 2.95-3.20 (1H， 多重峰）。 质谱： MS， m/z: 656.21 [M+H] +
实施例 14:
二异丙胺基铂 (II) (1-0-D-葡萄糖苷 -丁垸 -4-氯 -4， 4-二甲酸酯) (1-14) 的制备-
1 )将 lOOmg的 1-O-D-甘露糖苷 -丙垸 -3-氯 -3， 3-二甲酸粗产品溶于 5 ml的去离子水， 用 氢氧化钡水溶液调节反应液 pH到 9， 室温搅拌 30分钟。
2)在氮气保护下将二异丙胺硫酸铂 （150mg)溶解于 2ml水中， 加入到 1 ) 中反应液中， 用氢氧化钡溶液调节 pH到 9， 室温避光搅拌过夜。
3 )待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC精制分离并使用 冷冻干燥机冻干， 得到 112mg最终产品 （1-14)， 白色固体。
核磁共振谱 （400 MHz， D20)， ppm: 4.85 ( 1H， 单峰）； 3.40-4.10 (9H， 多重峰）； 2.95-3.20 ( 1H， 多重峰）。 质谱： MS， m/z: 670.28 [M+H] +
实施例 15:
二异丙胺基铂 （Π) -15) 的制备-
1 ) 将 lOOmg的 1-0-D-甘露糖苷 -丙垸 -3-氯 -3， 3-二甲酸粗产品溶于 5 ml的去离子水，， 用氢氧化钡水溶液调节反应液 pH到 9， 室温搅拌 30分钟。
2)在氮气保护下将二异丙胺硫酸铂 （140mg)溶解于 2ml水中， 加入到 1 ) 中反应液中， 用氢氧化钡溶液调节 pH到 9， 室温避光搅拌过夜。
3 )待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC精制分离并使用 冷冻干燥机冻干， 得到 91mg最终产品 （1-15)， 白色固体。
核磁共振谱 （400 MHz， D20)， ppm: 4.85 ( 1H， 单峰）； 3.40-4.10 (9H， 多重峰）； 2.95-3.20 ( 1H， 多重峰）。 质谱： MS， m/z: 656.23 [M+H] +
实施例 16:
二异丙胺基铂 (ID -0-D-半乳糖苷 -丁垸 -4-氯 -4， 4-二甲酸酯) ( 1-16) 的制备-
1 )将 lOOmg的 1-0-D-甘露糖苷 -丙垸 -3-氯 -3， 3-二甲酸粗产品溶于 5 ml的去离子水， 用 氢氧化钡水溶液调节反应液 pH到 9， 室温搅拌 30分钟。
2)在氮气保护下将二异丙胺硫酸铂 （150mg)溶解于 2ml水中， 加入到 1 ) 中反应液中， 用氢氧化钡溶液调节 pH到 9， 室温避光搅拌过夜。
3 )待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC精制分离并使用 冷冻干燥机冻干， 得到 113mg最终产品， 白色固体。
核磁共振谱 （400 MHz ， D20)， ppm: 4.85 ( 1H， 单峰）； 3.40-4.10 (9H， 多重峰）； 2.95-3.20 ( 1H， 多重峰）。 质谱： MS， m/z: 670.21 [M+H] +
实施例 17:
二异丙胺基铂 （Π 17) 的制备-
1 )将 lOOmg的 1-0-D-甘露糖苷 -丙垸 -3-氯 -3， 3-二甲酸粗产品溶于 5 ml的去离子水， 用 氢氧化钡水溶液调节反应液 pH到 9， 室温搅拌 30分钟。
2)在氮气保护下将二异丙胺硫酸铂 （140mg)溶解于 2ml水中， 加入到 1 ) 中反应液中， 用氢氧化钡溶液调节 pH到 9， 室温避光搅拌过夜。
3 )待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC精制分离并使用 冷冻干燥机冻干， 得到 97mg最终产品， 白色固体。
核磁共振谱 （400 MHz ， D20)， ppm: 4.85 ( 1H， 单峰）； 3.40-4.10 (9H， 多重峰）； 2.95-3.20 ( 1H， 多重峰）。 质谱： MS， m/z: 656.21 [M+H] +
实施例 18:
二异丙胺基铂 （Π) -18) 的制备-
1 )将 lOOmg的 1-0-D-甘露糖苷 -丙垸 -3-氯 -3， 3-二甲酸粗产品溶于 5 ml的去离子水， 用 氢氧化钡水溶液调节反应液 pH到 9， 室温搅拌 30分钟。
2)在氮气保护下将二异丙胺硫酸铂 （150mg)溶解于 2ml水中， 加入到 1 ) 中反应液中， 用氢氧化钡溶液调节 pH到 9， 室温避光搅拌过夜。
3 )待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC精制分离并使用 冷冻干燥机冻干， 得到 116mg最终产品 （1-18 )， 白色固体。
核磁共振谱 （400 MHz ， D20)， ppm: 4.85 ( 1H， 单峰）； 3.40-4.10 (9H， 多重峰）； 2.95-3.20 ( 1H， 多重峰）。 质谱： MS， m/z: 670.28 [M+H] +
实施例 19:
( 1 ) 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-葡萄糖苷） -乙垸 -2,2-二甲酸二乙酯（VI-19) 的制备： Ac0 、、、、 Y
(VI-19)
1) 在室温条件下将葡萄糖 （2.7g)加入到 1-羟基 -乙垸 -2,2-二甲酸二乙酯 （依据文献 KogyoKagakuZasshi, 1954,vol.57, p.l40制备而得） (5ml) ， 冷却到 0°C， 用氮气置换烧瓶内 空气， 在氮气保护下慢慢滴加 1ml三氯化硼-乙醚配合物。
2) 将反应液在 0°C搅拌 15分钟， 然后慢慢升温到室温并搅拌 30分钟， 然后将反应 液加热到 60°C， 在 60°C反应 5小时。 反应完成后， 旋蒸除去溶剂， 使用硅胶柱色谱（二氯甲 垸： 甲醇， 6 : 1) 对反应生成物实施简单纯化，得到粗产品 3.3g (VI-19) 。 质谱： MS， m/z: 521.25 [M+H]+
(2) 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-葡萄糖苷） -乙垸 -2-氯 -2,2-二甲酸二乙酯（VII-19) 的制备
将 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-葡萄糖苷） -乙垸 -2,2-二甲酸二乙酯 3.0g溶解在 20mL干燥 的四氢呋喃中， 冷却到 0°C。 用氮气置换烧瓶内空气， 在氮气保护下缓慢加入 235mg氢化钠 固体 （60%)。 反应液升温至室温， 搅拌 12小时。 向反应液中加入 1.5当量的 N-氯代丁二酰 亚胺，反应液室温反应 4小时， 旋蒸除去溶剂。 向反应液中加入 100ml乙酸乙酯， 然后用饱和 氯化铵水溶液 （1x50ml) 洗涤， 将水相用乙酸乙酯萃取 （2x25ml)， 合并有机相。 将有机相 依次用饱和氯化铵水溶液 （lxlOOml), 蒸馏水 （lxlOOml), 饱和氯化钠水溶液 （1x100ml) 洗涤， 然后用无水硫酸钠干燥， 用旋转蒸发仪将溶剂蒸干， 得到的淡黄色油状物用硅胶柱色 谱纯化 （石油醚： 乙酸乙酯， 3 : 1)， 得到无色透明油状目的产物 2.6g (VII-19 )o 质谱： MS， m/z: 555.203 [M+H] +
(3) l-O- (D-葡萄糖 -乙烧 -2-氯 -2,2-二甲酸 (111-19) 的制备
1) 将 1-0- (2,3,4,6-四乙酰基 -D-葡萄糖苷） -乙垸 -2-氯 -2,2-二甲酸二乙酯 （1.3g， ) 溶解 于 5mL甲醇中。 将氢氧化钠 （lg) 溶解于 10mL水中， 室温下加入到反应液中， 然后升温至 60 V反应 24小时。 用 TLC监测反应终点。
2)待反应完成后， 用旋转蒸发仪除去甲醇， 使用强酸性阳离子交换树脂处理产品。 将过 滤得到的水溶液用冷冻干燥机干燥后得到无色 粘稠状液体 1.2g (111-19) ， 粗产品直接用于下 步反应。 质谱： MS， m/z: 331.12 [M+H]+
(4) 顺-【反式- (1R， 2R) -二氨基环己垸】 铂 (II) (1-0-D-葡萄糖苷 -乙垸 -2-氯 -2， 2- 二甲酸酯）（1-19) 的制
1) 将 1-0-D-葡萄糖苷 -乙垸 -2-氯 -2,2-二甲酸粗产品 （lg) 溶解于 10mL水中， 用氢 氧化钠水溶液调节反应液 pH到 7， 室温搅拌 30分钟。
2) 在氮气保护下将反式- (1R， 2R) -环己二胺二硝酸铂 （1.3g) 溶解于 2ml水中， 加入到 1) 的反应液中， 用氢氧化钠水溶液调节 pH到 7， 室温避光搅拌过夜。
3) 待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 使用冷冻干燥机冻干， 用半 制备高压液相色谱分离得到 l.Og最终产品 （1-19) ， 白色固体。
核磁共振谱 (400 MHz， D20), ppm: 4.87 (0肌 双重峰， J=3.6Hz); 4.43 (0.2H, 双重峰, J=7.2Hz); 3.00-4.50 (8H， 多重峰）； 2.20-2.45 (2H， 多重峰）； 1.96 (2H， 两重 峰， J=12Hz); 1.49 (2H， 两重峰， J=8Hz); 1.12-1.30 (2H， 单峰）； 0.95-1.10 (2H， 多重 峰）。 质谱： MS， m/z: 638.16 [M+H] +
实施例 20:
二氨基铂 (II) (1-0- -20) 的制备-
1) 将 lOOmg的 1-0- (D-葡萄糖苷） -乙垸 -2-氯 -2,2-二甲酸溶于 5ml的去离子水， 用氢氧化 钠水溶液调节反应液 pH到 9， 室温搅拌 30分钟。
2) 在氮气保护下将二氨基二硝酸铂 （120mg) 溶解于 2ml水中， 加入到 1) 中反应液中， 用氢氧化钠水溶液调节 pH到 9， 室温避光搅拌过夜。
3) 待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC精制分离并使用 冷冻干燥机冻干， 得到 97mg最终产品 （1-20)， 白色固体。
核磁共振谱 （400 MHz， D20), ppm: 4.88 (0.8H， 双重峰， J=3.6Hz); 4.45 (0.2H, 双重峰, J=7.2Hz); 3.00-4.50 (8H， 多重峰）。 质谱： MS, m/z: 558.13 [M+H] +
实施例 21:
二氨基铂 (II) (1-0-D-葡萄糖苷 -乙垸 -2-氯 -2， 2-二甲酸酯) (1-21) 的制备-
1 ) 将 lOOmg的 1-0- (D-葡萄糖苷） -乙垸 -2-氯 -2,2-二甲酸溶于 5ml的去离子水， 用氢氧化 钡水溶液调节反应液 pH到 9， 室温搅拌 30分钟。
2) 在氮气保护下将二异丙胺硫酸铂 （140mg) 溶解于 2ml水中， 加入到 1 ) 中反应液中， 用氢氧化钡水溶液调节 pH到 9， 室温避光搅拌过夜。
3 ) 待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC精制分离并使用 冷冻干燥机冻干， 得到 llOmg最终产品 （1-21 )， 白色固体。
核磁共振谱 (400 MHz， D20), ppm: 4.88 (0肌 双重峰， J=3.6Hz); 4.83 (4H， 宽 峰） 4.44 (0.2H，双重峰, J=7.2Hz); 3.00-4.30 (8H， 多重峰）； 2.41 (2H， 七重峰）； 1.15-1.30 ( 12H， 多重峰）。 质谱： MS， m/z: 642.21 [M+H] +
实施例 22
氨基， 异丙胺基铂 （ ）（1-22) 的制备-
1 ) 将 lOOmg的 1-0-D-葡萄糖苷 -丙垸 -3-氯 -3， 3-二甲酸粗产品溶于 5 ml的去离子水， 用氢 氧化钡水溶液调节反应液 pH到 9， 室温搅拌 30分钟。
2) 在氮气保护下将氨基， 异丙胺硫酸铂 （llOmg) 溶解于 2ml水中， 加入到 1 ) 中反应液 中， 用氢氧化钡水溶液调节 pH到 9， 室温避光搅拌过夜。
3 ) 待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC精制分离并使用 冷冻干燥机冻干， 得到 llOmg最终产品 （1-22)， 白色固体。
核磁共振谱 （400 MHz， D20), ppm: 4.87 (0.8H， 双重峰， J=3.6Hz); 4.42 (0.2H, 双重峰, J=7.2Hz); 3.00-4.10 ( 10H， 多重峰）； 2.40-2.45 ( 1H， 七重峰）； 1.15-1.30 (6H， 多 重峰）。 质谱： MS， m/z: 614.23 [M+H] +
实施例 23 :
二甲胺基铂 (II) ( 1- -23) 的制备-
1 ) 将 lOOmg的 1-0-D-葡萄糖苷 -丙垸 -3-氯 -3， 3-二甲酸粗产品溶于 5 ml的去离子水， 用氢 氧化钡水溶液调节反应液 pH到 9， 室温搅拌 30分钟。
2) 在氮气保护下将二甲胺硫酸铂 （120mg) 溶解于 2ml水中， 加入到 1 ) 中反应液中， 用 氢氧化钡水溶液调节 pH到 9， 室温避光搅拌过夜。
3 ) 待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC精制分离并使用 冷冻干燥机冻干， 得到 115mg最终产品 （1-23 )， 白色固体。
核磁共振谱 （400 MHz ， D20), ppm: 4.87 (0.8H， 双重峰， J=3.6Hz); 4.42 (0.2H, 双重峰, J=7.2Hz); 3.00-4.10 ( 10H， 多重峰）； 2.47 (6H， 单峰）。 质谱： MS, m/z: 599.21 [M+H] +
实施例 24:
二辛胺基铂 (II) -0-D-葡萄糖苷 -丙垸 -3-氯 -3， 3-二甲酸酯) ( 1-24) 的制备-
1 ) 将 lOOmg的 1-O-D-葡萄糖苷 -丙垸 -3-氯 -3， 3-二甲酸粗产品溶于 5 ml的去离子水， 用氢 氧化钡水溶液调节反应液 pH到 9， 室温搅拌 30分钟。
2) 在氮气保护下将二辛胺硫酸铂 （120mg) 溶解于 2ml水中， 加入到 1 ) 中反应液中， 用 氢氧化钡水溶液调节 pH到 9， 室温避光搅拌过夜。
3 ) 待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC精制分离并使用 冷冻干燥机冻干， 得到 160mg最终产品 （1-24)， 白色固体。
核磁共振谱 (400 MHz ， D20), ppm: 4.87 (0肌 双重峰， J=3.6Hz); 4.42 (0.2H, 双重峰, J=7.2Hz); 3.00-4.15 ( 10H， 多重峰）； 2.40-2.47 (4H， 多重峰）； 1.50-1.55 (4H， 多 重峰）； 1.10-1.40 (20H, 多重峰）； 0.85-0.88 (6H， 多重峰）。质谱： MS, m/z: 796.41 [M+H] + 实施例 25:
二环丙胺铂 （Π) ( 1- -D-葡萄糖苷 -丙垸 -3-氯 -3， 3-二甲酸酯） （1-25 ) 的制备-
1 ) 将 lOOmg的 1-0-D-葡萄糖苷 -丙垸 -3-氯 -3， 3-二甲酸粗产品溶于 5 ml的去离子水， 用氢 氧化钡水溶液调节反应液 pH到 9， 室温搅拌 30分钟。
2) 在氮气保护下将二环丙胺硫酸铂 （llOmg) 溶解于 2ml水中， 加入到 1 ) 中反应液中， 用氢氧化钡水溶液调节 pH到 9， 室温避光搅拌过夜。
3 ) 待反应完成后， 使用离心机除去沉淀， 收集上清液， 用半制备 HPLC精制分离并使用 冷冻干燥机冻干， 得到 90mg最终产品 （1-25 )， 白色固体。
核磁共振谱 (400 MHz ， D20), ppm: 4.87 (0.8H， 双重峰， J=3.6Hz); 4.83 (4H， 宽 峰）； 4.42 ( 0.2H， 双重峰, J=7.2Hz); 3.00-4.15 ( 10H， 多重峰）； 2.68-2.79 (2H， 多重峰）； 0.75-0.95 ( 8H， 多重峰）。 质谱： MS, m/z: 652.31 [M+H] +
实验例 1
为了比较本发明铂配合物与上市药物顺铂， 卡铂以及奥沙利铂在水溶性方面的不同， 在 下述试验中， 分别针对本发明代表性的铂配合物以及三种上 市药物进行了室温下 lg水中各种 药物的饱和溶液溶质质量测定，表 2列举了本发明抗肿瘤金属铂配合物在水中的 解度以及与 铂类抗肿瘤临床药物顺铂， 卡铂以及奥沙利铂的差别。 表 2:
上述实验结果显示， 本发明中所提供的用于肿瘤治疗的铂配合物的 水溶性与临床药物顺 铂相比每毫升水中的溶解度可提高 400至 900倍， 与临床药物奥沙利铂相比药物在水中的溶解 度提高了 70至 160倍。
实验表明在传统的丙二酸铂配合物结构中引入 水溶性糖分子取代基， 实现了迄今同类含 金属铂配合物所未有的高水溶性。
实验例 2
在下述试验中， 使用 8-9周龄的雌性 CDF1种鼠， 动物体重平均为 20-25克。 用 L1210肿瘤 细胞 （约 10 5 个细胞每只老鼠） 在腹膜内进行接种。 针对制作的肿瘤动物模型， 使用本发明水 溶性金属铂配合物实施治疗， 并与临床使用的铂类抗肿瘤药物进行比较， 验证本发明用于肿 瘤治疗的水溶性铂配合物对肿瘤动物的治疗效 果以及本发明用于肿瘤治疗的水溶性铂配合物 对实验动物的毒副作用。 对于本发明的水溶性铂配合物和卡铂， 使用质量百分比为 5%甘露糖 醇水溶液， 对于顺铂则使用质量百分比为 5%甘露糖醇生理盐水溶液制备相应的注射液。 在肿 瘤细胞移植后第 1， 4天经由腹腔内注射药物， 每组实验动物数目为 6。
上述实验动物购自北京维通利华实验动物技术 有限公司， 肿瘤细胞 L1210 -小鼠白血病 细胞购自上海安妍商贸有限公司。
动物寿命延长 （ILS ) 的计算方法如下：
ILS % = [ ( St/Su) - 1] X 100%
其中， St =接受治疗的动物存活日的加权中间数； Su = 未接受治疗的动物存活日的加 权中间数
实验结果列于表 -3中- 表 3:
注 * 第 1天到第 7天的体重变化
实验例 3 : 本发明水溶性铂配合物有效成分对癌细胞的增 殖抑制作用
本发明的用于肿瘤治疗的含氯水溶性铂配合物 对肿瘤细胞的抑制和杀伤作用是通过本发 明药物产生的垸化结合物作用于肿瘤细胞的 DNA， 形成链内和链间交联， 从而抑制肿瘤细胞 DNA的合成及复制而实现的。
以下实验针对本发明方法中水溶性铂配合物有 效成分对不同种类的人肿瘤细胞的增殖抑 制效果进行了实验验证。
( 1 ) 试验方法：
细胞培养液：
使用含有 10%牛胎仔血清（fetal bovine serum), ImM丙酮酸钠， 2mML-谷氨酰胺， 50U/ml 盘尼西林， 5(^ g/ml链霉素 （streptomycin) 的细胞培养液。
主要实验仪器： MCO-15A型二氧化碳培养箱 （日本 SANYO公司） 、 倒置相差显微镜 (Olympus, 日本)、 全自动酶标仪（美国 BioTEK ELX808 ) 、 低温冰箱（日本 MDF-V5410) 、 超净工作台（苏州医疗器械厂）、微量移液器 (法国 GILSON)、自动纯水蒸馏器（上海 1810B)。
实验试剂：
MTS:CellTiter96 Aqueous MTS Reagent Powder, Promega公司
PMS: Phenazine methosulfate(PMS), Sigma- Aldrich公司
DPBS: Sigma- Aldrich公司
肿瘤细胞：
以下活性测试实验中所使用的人肿瘤细胞： dul45 -人前列腺癌； MCF-7 -人乳腺癌； SKOV3 -人卵巢癌； HT-29 -人结肠癌； A549 -人非小细胞肺癌 （腺癌） ； H460 -人非 小细胞肺癌（大细胞癌）， 以及动物肿瘤细胞： L1210 -小鼠白血病细胞均购自上海安妍商贸 有限公司。
细胞毒性测试: 细胞毒性实验采用 MTS测试方法。 收集对数期肿瘤细胞， 调整细胞悬液浓度， 每孔加入 10( ，铺板使待测细胞调密度至 1000-10000/孔，（边缘孔用无菌 PBS填充）。 在 5%C02， 37°C 孵育， 至细胞单层铺满孔底 （96孔平底板）， 加入不同浓度梯度的药物， 每孔 Ιθθμΐ, 设 5个复 孑 L。 在 5% C02， 37°C条件下孵育 96小时， 倒置显微镜下观察。 向 2ml MTS(2mg/ml, DPBS配 制)溶液中加入 100 y l PMS(lmg/ml,DPBS配制)，混匀， 制成 MTS工作液。 上述细胞培养板离心 后弃去培养液， 小心用 PBS冲 2-3遍后， 在检测吸光度前， 向 96孔板中每孔加入 100 μ ΐ培养基， 再加入 20 lMTS工作液， 在 37°C， 5%C02条件下孵育 2h后， 在 490nm处检测 OD值 （光密度 值）。
对照组： 在上述同样条件下不添加被测活性成分， 最后取得肿瘤细胞在 490nm处检测 OD 值。
药物对肿瘤细胞的抑制活性 IC50:
细胞抑制率计算： 按下列公式计算药物对肿瘤细胞生长的抑制率 ：
1 ) 细胞存活率 （％) =治疗组 OD值 /对照组 OD值 X 100%
2)求出各药物浓度下的细胞存活率， 用此对药物浓度作图。 在所得的曲线上， 细胞存活率为 50%时所对应的浓度就是 IC50值。
上述每个药物浓度的实验重复 5组， 取平均 0D值计算细胞存活率。
(2) 实验结果- 图中各种符号代表的肿瘤细胞名称如下： dul45 - 人前列腺癌； MCF-7 - 人乳腺癌； SKOV3 - 人卵巢癌； HT-29 - 人结肠癌； A549 - 人非小细胞肺癌（腺癌）； H460 -人非 小细胞肺癌 （大细胞癌）
实施例 1制备的铂配合物的抗肿瘤药效见图 1和图 2; 实施例 5制备的铂配合物的抗肿 瘤药效见图 3和图 4; 实施例 9制备的铂配合物的抗肿瘤药效见图 5和图 6; 实施例 10制备 的铂配合物的抗肿瘤药效见图 7和图 8。 为了更清晰地显示配合物的药效趋势， 所有图中的 曲线均省略了平均标准误差标记。
实验例 4: 本发明水溶性铂配合物有效成分在动物肿瘤模 型中的抗肿瘤药效
( 1 )试验方法： 使用 5-6周 Nu/nu雄性裸小鼠， 实验动物购自北京维通利华实验动物技 术有限公司。动物饲养于 SPF级环境下 IVC系统中。所有实验动物自由摄食、饮水，室 温 20〜 25°C， 湿度 40%〜70%， 昼夜明暗交替时间 12 h/12 h。
收集人结直肠肿瘤 DLD-1细胞， 每只裸鼠腋部皮下注入细胞悬液， 建立荷瘤小鼠模型。 待肿瘤长到 150〜300 mm 3 时， 根据肿瘤体积和体重将小鼠均衡分成 5组， 生理盐水组、实施 例 6制备的配合物组， 实施例 18制备的配合物组， 实施例 25制备的配合物组， 奥沙利铂组， 每组 10只。 间隔一周腹腔注射给药 1次， 给药体积 10 mL/kg, 连续四周给药后停止给药观 察肿瘤在停止给药后的增长情况， 停止给药后动物正常饲养， 采用隔日测量瘤径的方法， 动 态观察动物肿瘤的回长趋势和受试药的抗肿瘤 作用。 实验观察至分组后第 61天。
肿瘤体积 （tumor volume, TV) 的计算公式为： V = l/2xaxb 2 。 其中 a和 b分别表示肿瘤 长和宽， 根据测量结果计算出肿瘤体积。 相对肿瘤体积增长百分比 （％) =(Vt- Vo) / V 0 X100o Vo为分笼给药时 （即 d Q ) 测量所得肿瘤体积， Vt为每一次测量时的肿瘤体积 。
(2)投药剂量： 根据预先针对同类裸鼠进行的最大耐药剂量实 验结果， 取各种药物最大 耐药剂量的 70%作为药效实验的投药量。 其中奥沙利铂临床药物的投药量为 7.5毫克每千克 体重， 实施例 6化合物为 45毫克每千克体重， 实施例 18化合物为 28毫克每千克体重， 实施 例 25化合物为 20毫克每千克体重。 药物在使用前溶解于灭菌蒸馏水中， 使用超声波将药物 充分溶解后注射给药。
(3 )实验结果： 实验结果显示， 本发明所提供的水溶性铂配合物与临床对比药 物奥沙利 铂相比具有更优越的肿瘤抑制效果。 尤其表现在能够在停止给药后长时间抑制肿瘤 的回长， 充分显示了本发明铂配合物在肿瘤细胞及肿瘤 组织内的选择性积蓄和肿瘤靶向性的提高。（ 见 图 9) 。 为了更清晰地显示配合物的药效趋势， 所有图中的曲均省略了平均标准误差标记。
利用本发明的金属铂配合物， 可以制备预防和治疗肿瘤的药物。 这些药物的制备通常使 用一种或者几种有效剂量的本发明所提供的金 属铂配合物， 配合药学可接受的载体或稀释剂 而完成。 这些药学上可接受的药用辅料例如淀粉， 葡萄糖、 糊精、 果糖和麦芽糖， 乳糖， 明 胶， 蔗糖， 羟基纤维素， 羟丙基甲基纤维素， 二氧化硅， 硬脂酸羟基乙酸淀粉钠， 水， 乙醇， 氯化钠等可根据不同的剂型需要加以选择。 另外， 根据药物制备上的需要， 这些药用辅料还 可以包括少量的酸碱调节剂， 稳定剂等。
实验证明： 本发明提供的铂配合物具有良好的抗肿瘤活性 。 本发明所提供的含氯水溶性 铂配合物在针对包括肠癌， 乳腺癌， 前列腺癌， 肺癌等的抗肿瘤药效试验， 以及针对荷瘤裸 鼠动物模型所进行的抗肿瘤试验中， 其抗肿瘤活性可以与目前被广泛应用的顺铂， 卡铂或奥 沙利铂相媲美， 其活性甚至高于这些现存的铂类抗癌药物。 另外， 本发明所提供的配合物针 对顺铂的抗癌作用能够形成强烈抗药性的鼠 L eU kemi a -L1210 肿瘤细胞具有更有效的杀伤作 用。 这是因为本发明所提供的配合物在水溶性方面 与现有铂类抗肿瘤药品相比， 都具有几十 倍至上百倍的提高， 这种高水溶性特点在理论上能够增加和提高药 物在肾脏的排泄， 减轻铂 类药物一般存在的高肾毒副作用， 同时这种高水溶性特性使这些化合物容易制剂 化和在临床 上的应用更方便。
本发明的配合物， 由于具备极高的水溶性其给药途径没有特别的 限制， 其剂量不仅取决 于病人的年龄， 体重以及病情， 还取决于肿瘤的种类， 性质和严重程度。 但一般来说， 对于 成年病人， 最好每天使用的量为 10毫克至 1克之间。 一般为每一至三周一次或几次用药。