2-ALCOXY-SAS-TRIHYDROXY-ALKYLAMIDE-BENZAZEPINE. LEUR PREPARATION, COMPOSITIONS LES CONTENANT ET UTILISATION

La présente invention concerne notamment des 2-alcoxy-3,4,5-trihydroxy- alkylamide-benzazépines, leur préparation, des compositions les contenant, et leur utilisation comme médicament.

Plus particulièrement, et selon un premier aspect, l'invention concerne des 2- alcoxy-3,4,5-trihydroxy-alkylamide-benzazépines utiles comme agents anticancéreux.

Des 2-méthoxy-3,4,5-trihydroxy-alkylamides ont été décrits dans US 6239127, US 20010044433 A1 , WO 01/85697, WO 00/29382, US 4831135, EP 687673, et US 2002128474 A1. Ces documents divulguent essentiellement des analogues et dérivés de bengamide, un produit naturel isolé d'une éponge marine, Jaspis coriacea.

Ces mêmes produits ont été décrits dans la littérature : J. Org. Chem. (1986), 51 (23), 4494-7 ; J. Org. Chem. (2001), 66(5), 1733-41 ; J. Med. Chem. 2001 , 44, 3692-9.

Le problème que se propose de résoudre la présente invention est d'obtenir de nouveaux produits présentant une activité anticancéreuse. En plus du maintien d'une activité anticancéreuse, certains de ces nouveaux produits peuvent également présenter des propriétés avantageuses en relation avec leur activité pharmacologique, telle que leur pharmacocinétique, biodisponibilité, solubilité, stabilité, toxicité, absorption ou métabolisme.

La présente invention a pour objet les produits répondant à la formule générale (I) suivante :

dans laquelle :

a) Ri est indépendamment sélectionné dans le groupe constitué par (C1 - C12)alkyle, (C2-C12)alcényle, (C2-C12)alcynyle, cycloalkyle, hétérocyclyle, aryle, hétéroaryle, cycloalkyl(C1 -C12)alkyle, cycloalkyl(C2- C12)alcényle, cycloalkyl(C2-C12)alcynyle, hétérocyclyl(C1-C12)alkyle, hétérocydyl(C2-C12)alcényle, hétérocyclyl(C2-C12)alcynyle, aryl(C1 - C12)alkyle, aryl(C2-C12)alcényle, aryl(C2-C12)alcynyle, hétéroaryl(C1 - C12)alkyle, hétéroaryl(C2-C12)alcényle, hétéroaryl(C2-C12)alcynyle, le groupe aryle de chaque Ri étant éventuellement substitué par un ou plusieurs halogènes ;

b) R ₂ est sélectionné dans le groupe constitué par (C1-C6)alkyle, aryl(C1- C6)alkyle, hétéroaryl(C1-C6)alkyle, aryle, hétéroaryle, (C1- C6)alkylthio(C1 -C6)alkyle, di(C1 -C6)alkylamino(C1 -C6)alkyle, aryloxy(C1 - C6)alkyle, (C1-C6)alkoxy(C1 -C6)alkyle ;

c) R ₃ est sélectionné dans le groupe constitué par H, COO(Rs), CONH(R ₅ ), CO(R ₅ ), 0(R ₅ ), R ₅ ;

d) R ₄ est indépendamment sélectionné dans le groupe constitué par F, Cl, Br, N(R ₅ ) ₂ , NO ₂ , CN, COO(R ₅ ), CON(Rs) ₂ , NHCO(R ₅ ), NHCOO(R ₅ ), OCONH(R ₅ ), 0(R ₅ ), R ₅ ou bien, deux substituants R ₄ , liés à 2 carbones adjacents du phényle, forment ensemble un cycle choisi parmi cycloalkyle, hétérocyclyle, aryle ou hétéroaryle, éventuellement substitué par un ou plusieurs R ₄ ;

e) m a pour valeur 0, 1 , 2, 3, ou 4 ;

f) R ₅ est indépendamment choisi parmi doublet d'électrons non liant, H, (C1- C12)alkyle, (C2-C12)alcényle, (C2-C12)alcynyle, halogéno(C1 -C12)alkyle, aryl(C1 -C12)alkyle, hétéroaryl(C1-C12)alkyle, hétéroarylaryl(C1 - C12)alkyle, aryle, hétéroaryle, cycloalkyle, dans lequel chaque R ₅ est éventuellement substitué par au moins un substituant choisi parmi OH,

halogène, (C1-C4)alkyle, (C1-C4)alkoxy, aryl(C1-C4)alkyle, aryle, hétéroaryl(C1-C4)alkyl, hétéroaryle, -N(CH ₃ ) ₂ , -NH ₂ , CONH ₂ ,

chacun des Rz est indépendamment sélectionné dans le groupe constitué par H, COO(R ₅ ), CONH(R ₅ ), CON(R ₅ ) ₂ , CO(R ₅ ), R ₅ , dans lequel chaque

R ₅ est indépendamment choisi parmi (C1-C4)alkyle, halogéno(C1 -

C4)alkyle, aryl(C1-C4)alkyle, hétéroaryl(C1 -C4)alkyle, dans lequel chaque

R ₅ est éventuellement substitué par un substituant choisi parmi OH, halogène, (C1 -C4)alkyle, (C1-C4)alkoxy, aryl(C1-C4)alkyle, aryle, hétéroaryl(C1 -C4)alkyle, hétéroaryle ;

à la condition que lorsque Ri est (E) -CH=CH-C(CH ₃ ) ₃ , R ₂ est méthyle et R ₃ est H, alors m est différent de O.

La présente invention a pour objet les produits de formule générale (I) ci- dessus dans laquelle R ₁ est indépendamment sélectionné dans le groupe constitué par (C1 -C12)alkyle, (C2-C12)alcényle, (C2-C12)alcynyle, cycloalkyle, hétérocyclyle, aryle, hétéroaryle, aryl(C1 -C12)alkyle, aryl(C2- C12)alcényle, aryl(C2-C12)alcynyle, hétéroaryl(C1 -C12)alkyle ₎ hétéroaryl(C2- C12)alcényle, hétéroaryl(C2-C12)a!cynyle. La présente invention a pour objet les produits de formule générale (I) ci- dessus dans laquelle R ₂ est sélectionné dans le groupe constitué par (C1- C6)alkyle, aryl(C1-C6)alkyle, hétéroaryl(C1 -C6)alkyle, aryle, hétéroaryle, (C2- C12)alcénylaryle, (C2-C12)alcénylhétéroaryle, (C1 -C6)alkylthio(C1 -C6)alkyle, di(C1 -C6)alkylamino(C1 -C6)alkyle, aryloxy(C1 -C6)alkyle.

Selon l'invention, Ri est préférentiellement choisi parmi -C(Re)=C(R ₇ )(R ₈ ) dans lequel R ₆ , R ₇ , et R ₈ sont indépendamment sélectionnés parmi H, (C1 - C6)alkyle, cycloalkyle, hétérocyclyle, aryle, hétéroaryle. Plus préférentiellement, R ₁ est choisi parmi (E) -CH=CH-CH(CH ₃ )(C ₂ H ₅ ), (E) - CH=CH-CH(CHs) ₂ , (E) -CH=CH-C(CHg) ₃ , ou encore parmi (E) -C(CH ₃ )=CH- CH(CH ₃ )(C ₂ H ₅ ), (E) -C(CH ₃ )=CH-CH(CH ₃ ) ₂ , et (E) -C(CH ₃ )=CH-C(CH ₃ ) ₃ .

Plus préférentiellement, R1 est choisi parmi (E) -CH=CH-C ₅ H ₉ .

Selon l'invention, R2 est préférentiellement méthyle.

Parmi les objets de la présente invention, un premier groupe est caractérisé en ce que R ₃ est indépendamment choisi parmi : un groupe méthyle ou un groupe (3,5-difluoro-phényl)-méthyle. Un second groupe est caractérisé en ce que R ₃ est H.

Parmi les objets de la présente invention, un troisième groupe est caractérisé en ce que R ₄ est indépendamment choisi parmi : F, Cl, Br, phényle, pyridinyle. Un quatrième groupe est caractérisé en ce que m est 0.

De manière préférée, l'invention concerne les produits exemplifiés dans le tableau 1.

Selon un autre aspect, l'invention concerne les procédés de préparation des produits de formule générale (I) ou (I'). Les produits de formule générale (I') sont des précurseurs, éventuellement actifs, des produits de formule générale (I). Les produits de formule générale (I) sont obtenus à partir des produits de formule générale (I') par des procédés décrits ou par une ou plusieurs réactions classiques pour l'homme du métier telle que par exemple une cyclopropanation, une oxydation ou une séparation chirale.

Les produits de formule générale (I) ou (I') peuvent être obtenus par hydrolyse d'un produit de formule générale (II) :

, dans lequel R ₁ , R ₂ , R ₃ , R ₄ et m sont tels que définis précédemment,.

Les produits de formule générale (II) peuvent être obtenus par réaction d'un produit de formule générale (III) :

, dans lequel R ₃ , R ₄ et m sont tels que définis précédemment, avec un produit de formule générale (IV) :

, dans lequel Ri, R ₂ sont tels que définis précédemment.

Les produits de formule générale (I) ou (P) peuvent également être obtenus par réaction d'un produit de formule générale (III) tel que défini précédemment, avec un produit de formule générale (V) :

, dans lequel R ₁ , R ₂ sont tels que définis précédemment.

Les produits de formule générale (V) peuvent être obtenus par hydrolyse d'un produit de formule générale (IV) :

, dans lequel R ₁ , R ₂ sont tels que définis précédemment. Des produits de formule générale (V) pour lesquels R ₁ représente -CH=CH-R^ peuvent encore être obtenus par hydrolyse d'un produit de formule générale (VII) :

, dans lequel R ₂ est tel que défini précédemment, afin d'obtenir un produit de formule générale (Vl) :

, dans lequel R ₂ est tel que défini précédemment, qui subit une métathèse afin d'obtenir un produit de formule générale (V) :

représente un groupe (C1-C6)alkyle, cycloalkyle, hétérocyclyle, aryle ou hétéroaryle.

Les produits de formule générale (VII) peuvent être obtenus par double déshydratation d'un produit de formule générale (VIII) :

, dans lequel R ₂ est tel que défini précédemment.

Les produits de formule générale (I') et (II) tels que définis précédemment, à l'exception de ceux pour lesquels Ri est (E) -CH=CH-C(CH ₃ ) ₃ , R ₂ est méthyle et R ₃ est H et m est 0, sont un objet de la présente invention.

Les produits de formule générale (III) pour lesquels R ₃ est H, méthyle ou (3,5-difluorophényI)-méthyle et R ₄ est un atome de brome, phényle ou bien m a pour valeur 0, à l'exception de ceux pour lesquels R ₃ est H et m a pour valeur 0, sont un objet de la présente invention.

Les produits de formule générale (IV) et (V) pour lesquels R ₂ est méthyle et R1 est -(E) -CH=CH-C ₅ Hg sont un objet de la présente invention.

Les produits de formule générale (Vl) pour lesquels R ₂ est méthyle sont un objet de la présente invention. Les produits de formule générale (VII) pour lesquels R ₂ est méthyle sont un objet de la présente invention.

Les produits selon la présente invention peuvent exister à l'état de bases, de sels d'additions avec des acides, de solvats, d'hydrates ou de prodrogues.

Les produits selon l'invention peuvent être sous forme non chirale, ou racémique, ou enrichie en un stéréo-isomère, ou enrichie en un énantiomère ; et peuvent éventuellement être salifiés. Les produits pour lesquels le carbone lié à l'aminé exocyclique est de configuration (S) sont préférés.

Un produit conforme à l'invention pourra être utilisé pour la fabrication d'un médicament utile pour prévenir ou traiter un état pathologique, en particulier un cancer.

Les produits de la présente invention peuvent également être utilisés pour la fabrication d'un médicament utile pour prévenir ou traiter un état pathologique dans lequel une néovascularisation ou angiogenèse se fait de façon inappropriée c'est-à-dire dans les cancers en général et dans des cancers particuliers tels que Ie sarcome de Kaposi ou l'hémoangiome infantile, mais aussi dans l'arthrite rhumatoïde, l'osthéoarthrite et/ou ses douleurs associées, les maladies inflammatoires de l'intestin telle que la recto-colite hémorragique ou la maladie de Crohn's, les pathologies de l'œil telle que la dégénérescence maculaire liée à l'âge, les rétinopathies diabétiques, l'inflammation chronique, le psoriasis. L'angiogenèse est un processus de génération de nouveaux vaisseaux capillaires à partir des vaisseaux pré-existants. L'angiogenèse tumorale (formation de néovaisseaux sanguins), indispensable à la croissance tumorale, est également un des facteurs essentiels de la dissémination métastatique (Oncogene. 2003 May 19;22(20):3172-9 ; Nat Med. 1995 Jan;1 (1):27-31.).

La présente invention concerne aussi les compositions thérapeutiques contenant un composé selon l'invention, en association avec un excipient pharmaceutiquement acceptable selon le mode d'administration choisi. La composition pharmaceutique peut se présenter sous forme solide, liquide ou de liposomes.

Parmi les compositions solides on peut citer les poudres, les gélules, les comprimés. Parmi les formes orales on peut aussi inclure les formes solides protégées vis-à-vis du milieu acide de l'estomac. Les supports utilisés pour les formes solides sont constitués notamment de supports minéraux comme les phosphates, les carbonates ou de supports organiques comme le lactose, les celluloses, l'amidon ou les polymères. Les formes liquides sont constituées de solutions de suspensions ou de dispersions. Elles contiennent comme support dispersif soit l'eau, soit un solvant organique (éthanol, NMP ou autres) ou de mélanges d'agents tensioactifs et de solvants ou d'agents complexants et de solvants.

Les formes liquides seront de préférence injectables et, de ce fait, auront une formulation acceptable pour une telle utilisation.

Des voies d'administration par injection acceptables incluent les voies intraveineuse, intra-péritonéale, intramusculaire, et sous cutanée, là voie intraveineuse étant préférée.

La dose administrée des composés de l'invention sera adaptée par le praticien en fonction de la voie d'administration du patient et de l'état de ce dernier.

Les composés de la présente invention peuvent être administrés seuls ou en mélange avec d'autres anticancéreux. Parmi les associations possibles on peut citer :

• les agents alkylants et notamment le cyclophosphamide, le melphalan, l'ifosfamide, le chlorambucil, le busulfan, le thiotepa, la prednimustine, la

carmustine, la lomustine, la semustine, la steptozotocine, la decarbazine, la témozolomidθ, la procarbazine et rhexaméthylmélaminθ

• les dérivés du platine comme notamment le cisplatine, le carboplatine ou Poxaliplatine

• les agents antibiotiques comme notamment la bléomycine, la mitomycine, la dactinomycine

• les agents antimicrotubules comme notamment la vinblastine, la vincristine, la vindésine, la vinorelbine, les taxoides (paclitaxel et docétaxel)

• les anthracyclines comme notamment la doxorubicine, la daunorubicine, l'idarubicine, l'épirubicine, la mitoxantrone, la losoxantrone

• les topoisomérases des groupes I et II telles que l'étoposide, le teniposide, l'amsacrine, l'irinotecan, le topotecan et le tomudex

• les fluoropyrimidines telles que le 5-fluorouracile, l'UFT, la floxuridine

• les analogues de cytidine telles que la 5-azacytidine, la cytarabine, la gemcitabine, la 6-mercaptopurine, la 6-thioguanine

• les analogues d'adénosine telles que la pentostatine, la cytarabine ou le phosphate de fludarabine

• le méthotrexate et l'acide folinique

• les enzymes et composés divers tels que la L-asparaginase, l'hydroxyurée, l'acide trans-rétinoique, la suramine, la dexrazoxane, l'amifostine, l'herceptin ainsi que les hormones oestrogéniques, androgéniques

• les agents antivasculaires tels que les dérivés de la combretastatine, par exemple la CA4P, des chalcones ou de la colchicine, par exemple le ZD6126, et leurs prodrogues. • Les inhibiteurs de kinases tels que l'ertonilib ou l'imatinib.

• Les agents biothérapeutiques comme les anticorps tels que Ie rituximab, Ie bevacizumab, Ie cetuximab, le trastuzumab ou l'alemtuzumab.

• Les inhibiteurs du protéasome tel que le bortesomib.

Il est également possible d'associer aux composés de la présente invention un traitement par des radiations. Ces traitements peuvent être administrés simultanément, séparément, séquentiellement. Le traitement sera adapté par le praticien en fonction du malade à traiter.

Définitions

Le terme « halogène » fait référence à un élément choisi parmi F, Cl, Br, et I.

Le terme « alkyle » fait référence à un substituant hydrocarboné saturé, linéaire ou ramifié, ayant de 1 à 12 atomes de carbone. Les substituants méthyle, éthyle, propyle, 1-méthyléthyl, butyle, 1-méthylpropyl, 2-méthylpropyle, 1 ,1 -diméthyléthyle, pentyle, 1 -méthylbutyle, 2-méthyIbutyle, 3-méthylbutyle, 1 ,1-diméthylpropyIe, 1 ,2-diméthylpropyle, 2,2-diméthyl- propyle, 1 -éthylpropyle, hexyle, 1 -méthylpentyle, 2-méthylpentyle, 1 -éthyl- butyle, 2-éthylbutyle, 3,3-diméthylbutyle, heptyle, 1 -éthylpentyle, octyle, nonyle, décyle, undécyle, et dodécyle sont des exemples de substituant alkyle.

Le terme « alcényle » fait référence à un substituant hydrocarboné linéaire ou ramifié ayant une ou plusieurs insaturations, ayant de 2 à 12 atomes de carbone. Les substituants éthylènyle, 1 -méthyléthylènyle, prop-1 -ènyle, prop-

2-ènyle, Z-1-méthylprop-1 -ènyle, E-1-méthylprop-1 -ènyle, Z-1 ,2-diméthyl- prop-1 -ènyle, E-1 ,2-diméthylprop-1 -ènyle, but-1 ,3-diényle, 1 -méthylidènyl- prop-2-ènyle, Z-2-méthyIbut-1 ,3-diényle, E-2-méthylbut-1 ,3-diényle, 2-méthyl- 1 -méthylidènyIprop-2-ènyle, undéc-1 -ènyle et undéc-10-ènyle sont des exemples de substituant alkylène.

Le terme « alcynyle » fait référence à un substituant hydrocarboné linéaire ou ramifié ayant au moins deux insaturations portées par une paire d'atomes de carbone vicinaux, ayant de 2 à 12 atomes de carbone. Les substituants éthynyle; prop-1-ynyle; prop-2-ynyle; et but-1-ynyle sont des exemples de substituant alkynyle.

Le terme « aryle » fait référence à un substituant aromatique mono- ou polycyclique ayant de 6 à 14 atomes de carbone. Les substituants phényle, napht-1 -yle ; napht-2-yle ; anthracen-9-yl ; 1 ,2,3,4-tétrahydronapht-5-yle ; et 1 ,2,3,4-tétrahydronapht-6-yle sont des exemples de substituant aryle.

Le terme « hétéroaryle » fait référence à un substituant hétéroaromatique mono- ou polycyclique ayant de 1 à 13 atomes de carbone et de 1 à 4 hétéroatomes. Les substituants pyrrol-1 -yle ; pyrrol2-yle ; pyrrol3-yle ; furyle ; thienyle ; imidazolyle ; oxazolyle ; thiazolyle ; isoxazolyle ; isothiazolyle ; 1 ,2,4-triazolyle ; oxadiazolyle ; thiadiazolyle ; tétrazolyle ; pyridyle ; pyrimidyle ; pyrazinyle ; 1 ,3,5-triazinyle ; indolyle ; benzo[b]furyle ; benzo[b]thiényle ; indazolyle ; benzimidazolyle ; azaindolyle ; quinoléyle ; isoquinoléyle ; carbazolyle ; et acridyle sont des exemples de substituant hétéroaryle.

Le terme « hétéroatome » fait référence ici à un atome au moins divalent, différent du carbone. N; O; S; et Se sont des exemples d'hétéroatome.

Le terme « cycloalkyle » fait référence à un substituant hydrocarboné cyclique saturé ou partiellement insaturé ayant de 3 à 12 atomes de carbone. Les substituants cyclopropyle; cyclobutyle; cyclopentyle; cyclopentènyle; cyclopentadiényle; cyclohexyle; cyclohexènyle; cycloheptyle; bicyclo[2.2.1]heptyle ; cyclooctyle; bicyclo[2.2.2]octyle ; adamantyle ; et perhydronapthyle sont des exemples de substituant cycloalkyle.

Le terme « hétérocyclyle » fait référence à un substituant hydrocarboné cyclique saturé ou partiellement insaturé ayant de 1 à 13 atomes de carbone et de 1 à 4 hétéroatomes. De préférence, le substituant hydrocarboné cyclique saturé ou partiellement insaturé sera monocyclique et comportera 4 ou 5 atomes de carbone et 1 à 3 hétéroatomes.

Concernant le phényle fusionné, lorsque m a pour valeur zéro on entend qu'il s'agit d'un phényle non substitué (ou substitué par 4 atomes d'hydrogène), et lorsque m a pour valeur 1 , 2, 3 ou 4, on entend qu'1 , 2, 3 ou 4 atomes d'hydrogènes sont substitués par un substituant R ₄ .

Les avantages de l'invention seront plus particulièrement illustrés par les exemples suivants :

Abréviations :

Ac acétate ; Bn benzyle ; ⁰ C degré Celsius ; cat. catalyseur ; CCM chromatographie sur couche mince ; CCP chromatographie sur colonne préparative ; cm centimètre ; δ déplacement chimique ; d doublet ; dd doublet de doublets ; DMF diméthylformamide ; DMSO-d ⁶ diméthylsulfoxyde deutéré ; dt doublet de triplets ; éq. équivalent ; ES+/- electrospray (modes positif / négatif) ; Et éthyle ; g gramme ; h heure ; Hz hertz ; IC _5O constante d'inhibition à 50% d'activité ; îPr isopropyle ; j. jour ; J constante de couplage ; LCMS chromatographie liquide couplée à une spectrométrie de masse; m multiplet ; Me méthyle ; mg milligramme ; MHz mégahertz ; mL millilitre ; μL microlitre ; mm millimètre ; μm micromètre ; mmol millimole ; mn minute ; N mol. L ^'1 ; PF point de fusion ; Ph phényle ; ppm parties par million ; q quadruplet ; Rdt rendement ; Rf rapport frontal ; RMN ¹ H résonance magnétique nucléaire du proton ; s singulet ; si singulet large ; t triplet ; TA température ambiante ; tBu tertiobutyle ; TFA acide trifluoroacétique ; THF tétrahydrofuranne ; t _R temps de rétention ; U.V. ultraviolet ; V volt.

Ex1 : N-[1 -(3,5-difluoro-benzyl)-2-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-1 -benzazépin-3- yl]- ((E)-(2R,3R,4S,5R)-3,4 _I 5-trihydroxy-2-méthoxy-8,8-diméthyl-non-6- énamide

Etape 1 : Préparation du (2-oxo-2,3,4,5-tetrahydro~1 H-1-benzazépin-3~yl)- carbamate de tert-butyle (2)

Dans un ballon de 250 mL contenant 2,0 g de I (11 ,4 mmol) (3-amino- 1 , 3,4,5, -tetrahydo-2H-1-benzazépin-2-one, commercial chez Interchim), 1 ,15 mL de TEA (11 ,4 mmol) et 50 mL de CHCI ₃ , on additionne à 0°C une solution

de 2,48 g de tBoc ₂ O (11 ,4 mmol) dans le 50 mL de CHCI ₃ . On agite le milieu pendant 2h à O ⁰ C sous argon. On lave le milieu rationnel avec 10 mL de HCI (1 N) et 100 mL d'eau. La phase organique est séchée sur MgSO4, filtrée et évaporée à sec, on obtient 3,75 g d'un solide crème qui est trituré dans 20 mL d'éther isopropylique. Après essorage, on obtient 2,3 g de 2 (solide blanc cassé).

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 1 ,33 (s, 9H) ; 2,06 (m, 1 H) ; 2,18 (m, 1 H) ; de 2,60 à 2,70 (m, 2H) ; 3,87 (m, 1H) ; 6,92 (d, J = 8,0 Hz, 1 H) ; 7,00 (d, J = 7,5 Hz, 1 H) ; 7,11 (t large, J =7,5 Hz, 1 H) ; de 7,21 à 7,29 (m, 2H) ; 9,68 (s, 1 H) .

Etape 2: Préparation du [1 -(3,5-difluoro-benzyl)-2-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-1 H- 1 -benzazépin-3-yl]-carbamate de tert-butyle (3)

Dans un ballon de 100 mL, sous agitation et atmosphère d'argon, contenant 20 mL de THF et 0,5 g de 2 (1 ,81 mmol), on introduit à TA 72 mg d'hydrure de sodium en suspension à 60% dans l'huile (1 ,81 mmol). On agite le milieu pendant 1 h, puis ajoute 0,75 g (3,62 mmol) de bromure de 3,5- difluorobenzyle. On laisse le milieu sous agitation à TA pendant une nuit. On ajoute 50 mL d'AcOEt, lave la phase organique avec 50 mL d'eau. La phase organique est séchée sur MgSO ₄ , filtrée puis évaporée à sec. On obtient 1 g d'un solide blanc. Après trituration avec 20 mL d'éther isopropylique et essorage, on obtient 0,62 g de produit 3 (solide blanc).

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 1 ,35 (s, 9H) ; 2,10 (m, 2H) ; 2,52 (m partiellement masqué, 1 H) ; 2,61 (m, 1 H) ; 3,94 (m, 1 H) ; 4,92 (d, J = 16,0 Hz, 1H) ; 5,10 (d, J = 16,0 Hz, 1H) ; 6,96 (m, 2H) ; 7,09 (tt, J = 2,5 et 9,5 Hz,

1 H) ; de 7,17 à 7,22 (m, 3H) ; de 7,25 à 7,34 (m, 2H).

Etape 3: Préparation du chlorhydrate de 3-amino-1-(3,5-difluoro-benzyl)- 1 ,3,4,5-tetrahydro-1 -benzazépin-2-one (4)

On reprend 0,62 g de 3 (1 ,54 mmol) dans un ballon de 25 ml_ et on ajoute 10 ml_ d'une solution d'acide chlorhydrique dans le dioxane (4M). On agite le milieu pendant 5h à TA sous argon. Après évaporation du solvant, on obtient 0,46 g d'aminé 4 sous forme de chlorhydrate qui est utilisé directement pour l'étape suivante.

RMN ¹ H (300 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 2,16 (m, 1 H) ; 2,43 (m, 1 H) ; 2,57 (m, 1 H) ; 2,70 (m, 1 H) ; 3,76 (dd, J = 7,5 et 11 ,5 Hz, 1 H) ; 5,04 (d, J = 15,5 Hz, 1 H) ; 5,12 (d, J = 15,5 Hz, 1 H) ; 6,99 (m, 2H) ; 7,14 (tt, J = 2,5 et 9,5 Hz, 1 H) ; de 7,22 à 7,40 (m, 4H) ; 8,31 (s large, 3H) .

Etape 4 : Préparation de N-[1 -(3,5-difluoro-benzyl)-2-oxo-2,3,4,5-tetrahydro- 1 H-1 -benzazépin-3-yl]-2-[(4R,5S,6R)-6-((E)-3,3-diméthyl-but-1 -ényl)-5- hydroxy-2,2-diméthyl-1 ,3-dioxinan-4-yl]-2-méthoxy-acétamide (6)

4 i

On introduit successivement dans un tube Wheaton, sous agitation et sous atmosphère d'argon, 100 mg de 5 (352 μmol) (qui peut être préparé selon les modes opératoire décrites dans Org. Process Res. Dev. 2003, 7(6), 856-865), 239 mg de 4 (0,70 mmol), 146 mg de 2-éthylhexanoate de sodium (0,77 mmol) dans 2 mL de THF. On maintient l'agitation à TA pendant 24 h. On ajoute 3 mL d'acétate d'éthyle au milieu réactionnel. On lave successivement avec 3 mL d'une solution de HCI (1 N), puis 3 mL d'une solution saturée de NaHCOe et 3 mL d'eau. La phase organique est séchée sur sulfate de magnésium anhydre, filtrée puis évaporée à sec. On obtient 450 mg d'une huile incolore, qui est chromatographié sur une cartouche de silice (20g, éluant CH ₂ CI ₂ /MeOH- en gradient MeOH 1 à 10%). On recueille 122 mg de produit attendu 6.

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-Cl ₆ ), δ(ppm): (un mélange 50% - 50% d'isomères) 0,98 (s, 4,5H) ; 0,99 (s, 4,5H) ; 1 ,20 (s, 1 ,5H) ; 1 ,21 (s, 1 ,5H) ; 1 ,26 (s, 1 ,5H) ; 1 ,27 (s, 1 ,5H) ; 2,15 (m, 2H) ; 2,53 (m partiellement masqué, 1 H) ; 2,63 (m, 1 H) ; 3,23 (s, 1 ,5H) ; 3,25 (m masqué, 1 H) ; 3,26 (s, 1 ,5H) ; 3,75 (d, J = 8,5 Hz, 0,5H) ; 3,80 (d, J = 8,5 Hz, 0,5H) ; 3,91 (d large, J = 8,5 Hz, 0,5H) ; 3,96 (d large, J = 8,5 Hz, 0,5H) ; de 4,20 à 4,42 (m, 3H) ; de 4,95 à 5,11 (m, 2H) ; 5,44 (dd dédoublé, J = 7,0 et 16,0 Hz, 1 H) ; 5,67 (d dédoublé, J = 16,0 Hz, 1 H) ; 6,94 (m, 2H) ; 7,10 (m, 1 H) ; de 7,18 à 7,37 (m, 4H) ; 8,26 (d, J = 8,0 Hz, 0,5H) ; 8,35 (d, J = 7,0 Hz, 0,5H).

Etape 5: Préparation du N-[1~(3,5-difluoro-benzyl)-2-oxo-2,3,4,5-tetrahydro- 1 H-1 -benzazépin-3-yl]- ((E)-(2R,3R,4S,5R)-3,4,5-trihydroxy-2-méthoxy-8,8- diméthyl-non-6-énamide (Ex1)

Dans un ballon de 10 mL, on mélange 92 mg de 6 (157 μmol) dans 0,8 mL de THF et 1 ,57 mL d'acide chlorhydrique 1 N (1 ,57 mmol), sous agitation et sous argon. L'agitation est maintenue 5 h à TA. Il se forme un précipité, qui est essoré sur un verre fritte. Après lavage avec 0,5 ml THF puis 2 mL d'éther isopropylique et séchage sous vide, on obtient 70 mg de Ex1 (solide blanc). ES : m/z = 569 MNa ⁺ .

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): (un mélange 50% - 50% d'isomères) 0,94 (s, 4,5H) ; 0,95 (s, 4,5H) ; 2,18 (m, 2H) ; 2,53 (m partiellement masqué, 1 H) ; 2,63 (m, 1 H) ; 3,22 (s, 1 ,5H) ; 3,24 (s, 1 ,5H) ; de 3,26 à 3,33 (m masqué, 1 H) ; 3,52 (m, 1 H) ; 3,68 (d, J = 8,0 Hz, 1 H) ; 3,94 (m, 1 H) ; de 4,18 à 4,36 (m, 3H) ; 4,54 (d large, J = 4,5 Hz, 1 H) ; de 4,98 à 5,10 (m, 2H) ; 5,28 (dd dédoublé, J = 7,0 et 16,0 Hz, 1 H) ; 5,61 (d, J = 16,0 Hz, 1 H) ; 6,95 (m, 2H) ; 7,10 (tt, J = 2,5 et 10,0 Hz, 1 H) ; de 7,17 à 7,36 (m, 4H) ; 8,16 (d, J = 8,0 Hz, 0,5H) ; 8,24 (d, J = 7,0 Hz, 0,5H).

Ex2: N-[1 -méthyl-2-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-1 -benzazépin-3-yl]-((E)-

(2R,3R,4S,5R)-3,4,5-trihydroxy-2-méthoxy-8,8-climéthyl- non-6-énamide

Etape 1 : Préparation du [1-méthyl-2-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-1-benzazépin-

3-yl]-carbamate de tert-butyle (7)

Dans un ballon de 100 mL, sous agitation et atmosphère d'argon, contenant 50 mL de THF et 1 ,2 g de 2 (4,34 mmol), on introduit à TA 174 mg d'hydrure de sodium en suspension à 60% dans l'huile (4,34 mmol). On agite le milieu pendant 1 h, et puis ajoute 1 ,23 g (8,69 mmol) d'iodure de méthyle. On laisse le milieu sous agitation pendant une nuit, on ajoute 50 mL d'AcOEt, lave la phase organique avec 100 mL d'eau. La phase organique est séchée sur MgSO ₄ , filtrée puis évaporée à sec. On obtient 1 ,3 g d'un solide blanc. Après chromatographie sur une cartouche de silice (40 g) (éluant CH ₂ CVMeOH- en gradient MeOH 1 à 10%). On obtient 0,66 g de produit 7 (solide blanc).

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 1 ,33 (s, 9H) ; 2,05 (m, 2H) ; 2,62 (m, 2H) ; 3,26 (s, 3H) ; 3,86 (m, 1 H) ; 7,00 (d, J = 8,5 Hz ₁ 1 H) ; 7,21 (m, 1 H) ; 7,28 (m, 1 H) ; 7,36 (m, 2H).

Etape 2: Préparation du chlorhydrate de 3-amino-1 -méthyl-1 ,3,4,5-tetrahydro- 1-benzazépin-2-one (8)

On reprend 0,66 g de 7 (2,27 mmol) dans un ballon de 50 mL et on ajoute 15 mL d'une solution d'acide chlorhydrique dans le dioxane (4M). On agite pendant 5h à TA sous argon. Après évaporation du solvant, on obtient 0,53 g

d'aminé 8 sous forme de chlorhydrate qui est utilisé directement pour l'étape suivante.

RMN ¹ H (300 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm):: 2,12 (m, 1 H) ; 2,45 (m partiellement masqué, 1 H) ; de 2,68 à 2,79 (m, 2H) ; 3,34 (s, 3H) ; 3,59 (dd, J = 7,5 et 11 ,5 Hz, 1 H) ; 7,25 (m, 1 H) ; 7,35 (d large, J = 7,5 Hz, 1 H) ; 7,40 (m, 2H) ; 8,38 (s large, 3H).

Etape 3: Préparation du (3R,4R,5S)-4-Hydroxy-5-((E)-(R)-1 -hydroxy-4,4- diméthyl-pent-2-ényl)-3-méthoxy-dihydro-furan-2-one (9)

Dans un ballon de 250 mL contenant 40 mL d'eau et 3,6 g de 3 en suspension, on ajoute 17 mL de TFA dans 10 mL d'eau. On agite le milieu pendant 1 ,5 h à TA. On dilue le milieu avec 290 mL d'eau, congèle puis lyophilise. On obtient 4 g d'une huile qui est cristallisé dans 20 mL d'éther isopropylique à TA. Après essorage, lavage à l'éther isopropylique, et séchage sous vide à 40 ⁰ C, on obtient 2,46 g de produit attendu 7 (cristaux blanc). PF : 123°C. IC : m/z = 262 MNH ₄ ⁺ . RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 1 ,00 (s, 9H) ; 3,41 (s, 3H) ; 3,93 (dd, J = 2,5 et 9,0 Hz, 1 H) ; de 4,22 à 4,31 (m, 3H) ; 5,19 (d, J = 5,0 Hz, 1 H) ; 5,42 (dd, J = 5,0 et 16,0 Hz, 1 H) ; 5,43 (d, J = 4,5 Hz, 1 H) ; 5,87 (d, J = 16,0 Hz, 1 H) . IR (KBr): 3239; 2964; 2914; 1701 ; 1499; 1312; 1253; 1047 & 751 cm- ¹ .

Etape 4: Préparation du N~[1-méthyl-2-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-1- benzazépin-3-yl]-((E)-(2R,3R,4S,5R)-3,4,5-trihydroxy-2-mét hoxy-8,8- diméthyl-non-6-énamide (Ex2)

On introduit successivement dans un tube Wheaton, sous agitation et sous atmosphère d'argon, 36 mg de 9 (147 μmol), 66,8 mg de 8 (0,30 mmol), 61 mg de 2-éthylhexanoate de sodium (0,37 mmol) dans 1 ,0 ml_ de THF. On maintient l'agitation à TA pendant 24 h. On évapore directement le milieu réactionnel à sec. Le brut est chromatographié sur une cartouche de silice (5g, éluant CH ₂ CVMeOH - en gradient MeOH 1 à 10%). On recueille 39 mg de produit attendu Ex2 . ES : m/z = 457 MNa ⁺ ; m/z = 435 MH ⁺ . RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): (un mélange 50% - 50% d'isomères) 0,95 (s, 4,5H) ; 0,96 (s, 4,5H) ; 2,06 (m, 1 H) ; 2,21 (m, 1 H) ; de 2,60 à 2,75 (m, 2H) ; 3,21 (s, 3H) ; de 3,25 à 3,35 (m masqué, 1 H) ; 3,29 (s large, 3H) ; 3,51 (m large, 1 H) ; 3,66 (d, J = 7,5 Hz, 0,5H) ; 3,67 (d, J = 7,5 Hz, 0,5H) ; 3,93 (m, 1 H) ; 4,21 (m, 1 H) ; de 4,28 à 4,60 (m large, 3H) ; 5,28 (dd, J = 7,0 et 16,0 Hz, 0,5H) ; 5,30 (dd, J = 7,0 et 16,0 Hz, 0,5H) ; 5,61 (d, J = 16,0 Hz, 0,5H) ; 5,63 (d, J = 16,0 Hz, 0,5H) ; 7,22 (m, 1 H) ; 7,31 (m, 1 H) ; de 7,37 (m, 2H) ; 8,03 (d, J = 8,0 Hz, 0,5H) ; 8,05 (d, J = 7,0 Hz, 0,5H).

Ex3: N-(7-bromo-2-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-1 -benzazépin-3-yl)-(E)-

(2R,3R,4S,5R)-3,4,5-trihydroxy-2-méthoxy-8,8-diméthyl-n on-6-énamide et Ex3a & Ex3b

Etape 1 : Préparation du (7-bromo-2-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-1 -benzazépin-

3-yl)-carbamate de tert-butyle (10)

Dans un ballon de 100 ml_, sous agitation et atmosphère d'argon, contenant 40 mL d'AcOEt et 0,5 g de 2 (1 ,8 mmol); on introduit à TA 472 mg de N- bromosuccinimide (2,65 mmol). On laisse le milieu sous agitation pendant une nuit, lave avec 40 mL de HCI (1 N), 40 mL d'eau saturée en NaHCO ₃ et 40 mL d'eau. La phase organique est séchée sur MgSO ₄ , filtrée puis évaporée à sec. On obtient 1 ,3 g d'une huile, qui cristallise dans 10 mL d'éther isopropylique. Après essorage, on obtient 450 mg de produit 10 (solide blanc).

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 1 ,34 (s, 9H) ; 2,05 (m, 1 H) ; 2,21 (m, 1 H) ; de 2,58 à 2,72 (m, 2H) ; 3,86 (m, 1 H) ; 6,95 (d, J = 8,5 Hz, 1 H) ; 6,98 (d, J = 8,5 Hz, 1 H) ; 7,44 (dd, J = 2,0 et 8,5 Hz, 1 H) ; 7,50 (d, J = 2,0 Hz, 1 H) ; 9,7 (s, 1 H).

Etape 2: Préparation du chlorhydrate de 3-amino-7-bromo-1 ,3,4,5-tetrahydro- 1 -benzazépin-2-one (H)

On reprend 0,45 g de 10 (1 ,27 mmol) dans un ballon de 25 mL et on ajoute

10 mL d'une solution d'acide chlorhydrique dans le dioxane (4M). On agite le milieu pendant 5 h à TA sous argon. Un précipité s'est formé, qui est filtré sur un verre fritte, lavé avec 5 mL de dioxane puis 5 mL d'éther isopropylique. On obtient 0,38 g d'aminé H sous forme de chlorhydrate.

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 2,12 (m, 1 H) ; 2,51 (m partiellement masqué, 1 H) ; de 2,65 à 2,84 (m, 2H) ; 3,72 (dd, J = 8,0 et 11 ,5 Hz, 1 H) ; 6,99 (d, J = 8,5 Hz, 1 H) ; 7,48 (dd, J = 2,5 et 8,5 Hz, 1 H) ; 7,58 (d, J = 2,5 Hz, 1 H) ; 8,25 (s, 3H) ; 10,35 (s, 1 H) .

Etape 3 : Préparation du (R)-N-(7-bromo-2-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-1- benzazépin-3-yl)-2-[(4R,5S,6R)-6-((E)-3,3-diméthyl-but-1 -ényl)-5-hydroxy-2,2- diméthyl-1 ,3-dioxinan-4-yl]-2-méthoxy-acétamide (12)

On introduit successivement dans un tube Wheaton, sous agitation et sous atmosphère d'argon, 100 mg de 5 (352 μmol), 205 mg de H (0,70 mmol), 146 mg de 2-éthylhexanoate de sodium (0,77 mmol) dans 2 mL de THF. On maintient l'agitation à TA pendant 24 h. On évapore à sec puis purifie par chromatographie sur une cartouche de silice (20g) avec un éluant CH ₂ CI ₂ ZMeOH (en gradient MeOH 1 à 10%). On recueille 160 mg de produit attendu 12.

RMN ¹ H (300 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): (un mélange 70% - 30% d'isomères) 0,99 (s, 9H) ; 1 ,23 (s, 0,9H) ; 1 ,25 (s, 2,1 H) ; 1 ,28 (s, 0,9H) ; 1 ,29 (s, 2,1 H) ; 2,08 (m, 1 H) ; 2,27 (m, 1 H) ; de 2,65 à 2,76 (m, 2H) ; de 3,21 à 3,34 (m masqué, 1 H) ; 3,24 (s, 2,1 H) ; 3,26 (s, 0,9H) ; 3,73 (d, J = 8,5 Hz, 0,7H) ; 3,78 (d, J = 8,5 Hz, 0,3H) ; 3,90 (d large, J = 8,5 Hz, 0,3H) ; 3,96 (d large, J = 8,5 Hz, 0,7H) ; de 4,12 à 4,43 (m, 3H) ; 5,43 (dd, J = 7,0 et 16,0 Hz, 0,3H) ; 5,44 (dd, J = 7,0 et 16,0 Hz, 0,7H) ; 5,68 (d large, J = 16,0 Hz, 1 H) ; 6,97 (d, J = 8,5 Hz, 1 H) ; 7,46 (dd, J = 2,5 et 8,5 Hz, 1 H) ; 7,54 (d, J = 2,5 Hz, 1 H) ; 8,08 (d, J = 8,0 Hz, 0,7H) ; 8,15 (d, J = 7,5 Hz, 0,3H) ; 9,85 (s, 0,3H) ; 9,89 (s, 0,7H).

Etape 4: Préparation du N-(7-bromo-2-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-1 H~1 - benzazépin-3-yl)-(E)-(2R,3R,4S,5R)-3,4,5-trihydroxy-2-méth oxy-8,8-diméthyl- non-6-énamide (Ex3) et Ex3a & Ex3b

Dans un ballon de 25 mL, on introduit 150 mg de 12 (258 μmol) dans 1 ,4 mL de THF et 2,78 mL d'acide chlorhydrique 1 N, sous agitation et sous argon. L'agitation est maintenue 4,5 h à TA. On neutralise le milieu avec NaOH (1 N) jusqu'à pH 7, et extrait avec 2 fois 3 mL d'AcOEt. Les phases organiques

réunies sont séchées sur MgSO ₄ , filtrées et évaporées à sec. Le brut est chromatographié sur une cartouche de silice (10 g) en éluant avec CH ₂ CVMeOH (en gradient MeOH 1 à 10%). On recueille 65 mg de produit attendu Ex3. 40 mg d'Ex3 est séparé par HPLC chiral préparative (Chirapad AD-H 5 μm 250 x 4.6 mm, débit 1 ml/min, phase mobile : Heptane 50%-EtOH 50%, TEA 0,1 %), pour donner 9 mg d'Ex3a (tr = 7,48 min) et 20 mg d'Ex3b (tr = 9,71 min). ES : m/z = 497 (M-H) ^" . Ex3: RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): (un mélange 70% - 30% d'isomères) 0,95 (s, 6,3 H) ; 0,96 (s, 2,7H) ; 2,09 (m, 1 H) ; 2,31 (m, 1 H) ; de 2,65 à 2,73 (m, 2H) ; de 3,19 à 3,33 (m masqué, 1 H) ; 3,22 (s, 2,1 H) ; 3,29 (s, 0,9H) ; 3,52 (m, 1 H) ; 3,66 (d, J = 8,0 Hz, 0,3H) ; 3,68 (d, J = 7,5 Hz, 0,7H) ; 3,94 (m, 1 H) ; de 4,16 à 4,41 (m, 3H) ; 4,55 (d, J = 4,5 Hz, 1 H) ; 5,28 (dd, J = 7,0 et 16,0 Hz, 0,3H) ; 5,30 (dd, J = 7,0 et 16,0 Hz, 0,7H) ; 5,61 (d J = 16,0 Hz, 0,3H) ; 5,63 (d, J = 16,0 Hz, 0,7H) ; 6,97 (d, J = 8,5 Hz, 1 H) ; 7,46 (dd, J = 2,5 et 8,5 Hz, 1 H) ; 7,54 (d, J ≈ 2,5 Hz, 1 H) ; 8,04 (d, J = 7,5 Hz, 1 H) ; 9,91 (s, 0,3H) ; 9,95 (s, 0,7H) .

Ex3a: RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 0,96 (s, 9H) ; 2,07 (m, 1 H) ; 2,30 (m, 1 H) ; 2,70 (m, 2H) ; 3,22 (s, 3H) ; de 3,27 à 3,35 (m masqué, 1 H) ; 3,51 (m, 1 H) ; 3,67 (d, J = 7,5 Hz, 1 H) ; 3,91 (m, 1 H) ; 4,19 (m, 1 H) ; 4,29 (m, 2H) ; 4,54 (d, J = 4,5 Hz, 1 H) ; 5,29 (dd, J = 7,0 et 16,0 Hz, 1 H) ; 5,62 (d, J = 16,0 Hz, 1 H) ; 6,97 (d, J = 8,5 Hz, 1 H) ; 7,45 (dd, J = 2,5 et 8,5 Hz, 1 H) ; 7,54 (d, J = 2,5 Hz, 1 H) ; 8,02 (d, J = 7,5 Hz, 1 H) ; 9,90 (s, 1 H).

Ex4: N-(7-phenyl-2-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-1 H- 1 -benzazépin-3-yl)-(E)- (2R,3R,4S,5R)-3,4,5-trihydroxy-2-méthoxy-8,8-diméthyl-non- 6-énamide et Ex4a & Ex4b

Etape 1 : Préparation du (7-phenyl-2-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-1 -benzazépin- 3-yl)-carbamate de tert-butyle (13)

Dans un ballon de 100 mL, sous agitation et atmosphère d'argon, contenant 22 mL d'eau, 6,5 mL de dioxane et 1 ,08 g de 10 (3,04 mmol), on introduit 371 mg d'acide phenylboronique (3,04 mmol), 62 mg de chlorure de 1 ,1 '- bis(diphenylphosphino)ferrocene palladium (C35H30CI4FeP2Pd, PM 816,65, 0,025 mmol) et 3,96 g de carbonate de Césium (12,16 mmol). On chauffe à 100 ⁰ C le milieu sous agitation pendant 1 h. On filtre le milieu sur célite, lave avec 10 mL de dioxane, 10 mL de CHI ₂ CI ₂ et 10 mL de MeOH. Le filtrat est concentré sous vide. On ajoute ensuite 25 ml d'AcOEt et lave avec 2 fois 25 mL d'eau. La phase organique est séchée sur MgSO4, filtrée et évaporé à sec. Le brut est chromatographié sur une cartouche de silice (50 g) en éluant avec CH ₂ CI ₂ /MeOH {en gradient MeOH : 1 à 10%). On recueille 350 mg de produit attendu 13 (solide blanc).

RMN ¹ H (300 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 1 ,34 (s, 9H) ; 2,09 (m, 1 H) ; 2,25 (m, 1 H) ; de 2,63 à 2,79 (m, 2H) ; 3,94 (m, 1 H) ; 6,97 (d, J = 8,5 Hz, 1 H) ; 7,09 (d, J = 8,5 Hz, 1 H) ; 7,34 (t, J =7,5 Hz, 1 H) ; 7,46 (t, J = 7,5 Hz, 2H) ; 7,56 (dd, J = 2,0 et 8,5 Hz, 1 H) ; 7,58 (s large, 1 H) ; 7,66 (d, J =7,5 Hz, 2H) ; 9,77 (s, 1 H) .

Etape 2: Préparation du chlorhydrate de 3-amino-7-phenyl-1 ,3,4,5-tetrahydro- 1 -benzazapin-2-one (14)

On reprend 0,35 g de 13 (0,99 mmol) dans un ballon de 20 mL et on ajoute 5 mL d'une solution d'acide chlorhydrique dans le dioxane (4M). On agite le milieu pendant 5h à TA sous argon. Il se forme un précipité que l'on essore et

lave avec 5 mL de dioxane puis 5 mL d'éther isopropylique. Après séchage, on obtient 0,23 g d'aminé 14 sous forme de chlorhydrate. RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm):: 2,18 (m, 1 H) ; 2,55 (m partiellement masqué, 1 H) ; de 2,74 à 2,90 (m, 2H) ; 3,76 (dd, J = 8,5 et 12,0 Hz, 1 H) ; 7,12 (d, J = 8,0 Hz, 1 H) ; 7,36 (t, J = 7,5 Hz, 1 H) ; 7,47 (t, J = 7,5 Hz, 2H) ; 7,60 (dd, J = 2,0 et 8,0 Hz, 1 H) ; de 7,64 à 7,69 (m, 3H) ; 8,19 (s large, 3H) ; 10,35 (s, 1 H) .

Etape 3: Préparation du (R)-N-(7-phenyl-2-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-1 - benzazépin-3-yl)-2-[(4R,5S,6R)-6-((E)-3,3-diméthyl-but-1 -ényl)-5-hydroxy-2,2- diméthyl-1 ,3-dioxinan-4-yl]-2-méthoxy~acétamide (15)

On introduit successivement dans un tube Wheaton, sous agitation et sous atmosphère d'argon, 100 mg de 5 (352 μmol), 203 mg de 14 (0,70 mmol), 146 mg de 2-éthylhexanoate de sodium (0,77 mmol) dans 2 mL de THF. On maintient l'agitation à TA pendant 24 h. On évapore à sec puis purifie par chromatographie sur une cartouche de silice (20g) en éluant avec CH ₂ CI ₂ /MeOH (en gradient MeOH : 1 à 10%). On recueille 150 mg de produit attendu 15.

RMN ¹ H (300 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): (un mélange 60% - 40% d'isomères): 0,99 (s, 9H) ; 1 ,23 (s, 1 ,2H) ; 1 ,25 (s, 1 ,8H) ; 1 ,28 (s, 1 ,2H) ; 1 ,30 (s, 1 ,8H) ; 2,11 (m, 1 H) ; 2,32 (m, 1 H) ; 2,78 (m, 2H) ; de 3,22 à 3,35 (m masqué, 1 H) ; 3,25 (s, 1 ,8H) ; 3,27 (s, 1 ,2H) ; 3,74 (d, J = 8,5 Hz, 0,6H) ; 3,77 (d, J = 8,5 Hz, 0,4H) ; 3,91 (d large, J = 8,5 Hz, 0,4H) ; 3,96 (d large, J = 8,5 Hz, 0,6H) ; de 4,20 à 4,44 (m, 3H) ; 5,44 (dd, J = 7,0 et 16,0 Hz, 1 H) ; 5,68 (d, J = 16,0 Hz, 1 H) ; 7,10 (d, J = 8,5 Hz, 1 H) ; 7,35 (t, J = 7,5 Hz, 1 H) ; 7,46 (t, J = 7,5 Hz, 2H) ; 7,57 (d large, J = 8,5 Hz, 1 H) ; 7,62 (s large, 1 H) ; 7,67 (d, J = 7,5 Hz, 2H) ; 8,09 (d, J = 7,5 Hz, 0,6H) ; 8,15 (d, J = 7,5 Hz ₁ 0,4H) ; 9,87 (s, 0,4H) ; 9,92 (s, 0,6H).

Etape 4: Préparation du N-(7-phenyl-2-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-1- benzazépin-3-yl)-(E)-(2R,3R,4S,5R)-3,4,5-trihydroxy-2-méth oxy-8,8-diméthyl- non-6-énamide (Ex4) et Ex4a & Ex4b

Dans un ballon de 2OmL, on introduit 150 mg de 15 (280 μmol) dans 1 ,4 ml_ de THF et 2,78 ml_ d'acide chlorhydrique 1 N, sous agitation et sous argon. L'agitation est maintenue 4 h à TA. On neutralise le milieu avec NaOH (1 N) jusqu'à pH 7, et extrait avec 2 fois 5 mL d'AcOEt. Les phases organiques réunies sont séchées sur MgSO ₄ , filtrées et évaporées à sec. Le brut est chromatographié sur une cartouche de silice (10 g) avec un éluant CH ₂ CVMeOH (en gradient MeOH 1 à 10%). On recueille 85 mg de produit attendu Ex4. 58 mg d'Ex4 est séparé par HPLC chiral préparative (Chirapad AD-H 5 μm 250 x 4.6 mm, débit 1 ml/min, phase mobile : Heptane 70%-EtOH 30%, TEA 0,1 %), pour donner 16 mg d'Ex4a (tr = 13,42 min) et 40 mg d'Ex4b (tr = 18,96 min). ES : 497 MH ⁺ .

Ex4: RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): (un mélange 70% - 30% d'isomères) 0,95 (s, 2,7H) ; 0,99 (s, 6,3H) ; 2,11 (m, 1 H) ; 2,35 (m, 1 H) ; 2,79 (m, 2H) ; 3,23 (s, 3H) ; de 3,25 à 3,35 (m masqué, 1 H) ; 3,53 (m, 1 H) ; 3,68 (d, J = 8,5 Hz, 0,3H) ; 3,70 (d, J = 8,5 Hz, 0,7H) ; 3,95 (m, 1 H) ; de 4,22 à 4,33 (m, 2,3H) ; 4,41 (d, J = 6,0 Hz, 0,7H) ; 4,55 (m, 1 H) ; 5,30 (m, 1 H) ; 5,61 (d, J = 16,0 Hz, 0,3H) ; 5,63 (d, J = 16,0 Hz, 0,7H) ; 7,10 (d, J = 8,5 Hz, 1 H) ; 7,35 (t, J = 7,5 Hz, 1 H) ; 7,46 (t, J = 8,0 Hz, 2H) ; 7,57 (dd, J = 2,5et 8,5 Hz, 1 H) ; 762 (s large, 1 H) ; 7,67 (d, J = 8,0 Hz, 2H) ; 8,04 (d, J = 7,5 Hz, 1 H) ; 9,93 (s, 03H) ; 9,99 (s, 0,7H) .

Ex4a : RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 0,95 (s, 9H) ; 2,10 (m, 1 H) ; 2,37 (m, 1 H) ; 2,79 (m, 2H) ; 3,24 (s, 3H) ; de 3,27 à 3,33 (m masqué, 1 H) ; 3,51 (m, 1 H) ; 3,68 (d, J = 7,5 Hz, 1 H) ; 3,93 (m, 1 H) ; de 4,22 à 4,32 (m,

3H) ; 4,54 (d, J = 4,5 Hz, 1 H) ; 5,29 (dd, J = 7,0 et 16,0 Hz, 1 H) ; 5,61 (d, J = 16,0 Hz, 1 H) ; 7,10 (d, J = 8,0 Hz, 1 H) ; 7,35 (t, J = 7,5 Hz, 1 H) ; 7,46 (t, J = 7,5 Hz, 2H) ; 7,56 (dd, J = 2,0 et 8,0 Hz, 1 H) ; 7,62 (d, J = 2,0 Hz, 1 H) ; 7,67 (m, 2H) ; 8,02 (d, J = 7,5 Hz, 1 H) ; 9,93 (s, 1 H) .

Ex4a: (2fî,3fî,4S,5f?,6£)-3,4,5-trihydroxy-2-méthoxy-8,8-dimé thyl-λ/-[(3S)-2- oxo-7-phényl-2,3,4,5-tétrahydro-1 H-1-benzazépin-3-yl]non-6-énamide

Etape 1 : Préparation du [(3S)-2-oxo-2,3,4,5-tétrahydro~1 H-1-benzazépin-3- yl]carbamate de te/1-butyle (2a)

Dans un ballon de 2 L contenant 20,0 g de Ia (113,5 mmol) ((s)-3-amino- 1 , 3,4,5, -tetrahydo-2H-1 -benzazépin-2-one, préparé selon les modes opératoires décrites dans J. Org. Chem. 1997, 62, 8271 ), et 500 mL de CHCI ₃ , on additionne à 0 ⁰ C, 16 mL de TEA (113,5 mmol), une solution de 24,77g de tBoc ₂ O (113,5 mmol) dans le 500 mL de CHCI ₃ . On agite le milieu pendant 1 nuit. On lave le milieu rationnel avec 500 mL de HCI (0.5N) et 500 mL d'eau. La phase organique est séchée sur MgSO4, filtrée et évaporée à sec, on délite les solides avec 200 mL d'éther isopropylique. Après essorage, on obtient 30.02 g de 2a (solide blanc cassé). [α] _D : -229,0 +/- 2,5 (c=1 ,852 mg/0,5 mL MeOH)

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 1 ,33 (s, 9H) ; de 1 ,98 à 2,25 (m, 2H) ; de 2,59 à 2,71 (m, 2H) ; 3,89 (m, 1 H) ; 6,90 (d, J = 8,0 Hz, 1 H) ; 7,00 (d, J = 7,5 Hz, 1 H) ; 7,11 (d, J = 7,5 Hz, 1 H) ; de 7,20 à 7,30 (m, 2H) ; 9,68 (s, 1 H).

Etape 2: Préparation du [(3S)-7-bromo-2-oxo~2,3,4,5-tétrahydro-1 H-1- benzazépin-3-yl]carbamate de te/t-butyle (10a)

Dans un tricol de 2 L, sous agitation et atmosphère d'argon, contenant 1 ,5 L d'AcOEt et 8,47 g de 2a (103,0 mmol), on introduit à TA 23,5 g de N- bromosuccinimide (136 mmol) en 4 fois pendant 3 jours. On laisse le milieu sous agitation une nuit supplémentaire, lave avec 500 mL de HCI (0,5N), 500 ml_ d'eau saturée en NaHCO ₃ et 500 mL d'eau. La phase organique est séchée sur MgSO ₄ , filtrée puis évaporée à sec. On obtient 38 g de meringue marron. On purifie par chromatographie sur une cartouche de silice (600g) en éluant avec Heptane/AcOEt (70/30). On recueille 20,46 g de produit attendu 10a (solide blanc).

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 1 ,34 (s, 9H) ; 2,05 (m, 1 H) ; 2,20 (m, 1 H) ; de 2,56 à 2,73 (m, 2H) ; 3,87 (m, 1 H) ; 6,97 (m, 2H) ; 7,45 (dd, J = 2,0 et 8,0 Hz, 1 H) ; 7,51 (d, J = 2,0 Hz, 1 H) ; 9,75 (s, 1 H).

Etape 3: Préparation du [(3S)-2-oxo-7-phényl-2,3,4,5-tétrahydro-1H-1- benzazépin-3-yI]carbamate de fe/f-butyle (13a)

Dans un ballon de 500 mL, sous agitation et atmosphère d'argon, contenant 142 mL d'eau, 42 mL de dioxane et 7,0 g de 10a (19,71 mmol), on introduit 2,643 g d'acide phenylboronique (21 ,68 mmol), 402 mg de chlorure de 1 ,1 '- bis(diphenylphosphino)ferrocene palladium (C35H30CI4FeP2Pd, PM 816,65, 0,493 mmol) et 25,69 g de carbonate de césium (78,84 mmol). On chauffe à 100 ⁰ C le milieu sous agitation pendant 4 h. On concentre sous vide , le dioxane, ajoute 100 mL d'eau distillée, puis extrait par 2x200 mL d'AcOEt. La phase organique est séchée sur MgSO4, filtrée et évaporé à sec. On obtient 7 g d'un solide marron qui est cristallisé dans 55 mL de toluène à chaud. Après avoir laissé reposer pendant 1 nuit à TA, on essore les aiguilles, et lave

avec 5 ml_ de toluène, et 5 mL d'éther isopropylique. On obtient après séchage sous vide 5,63 g de produit attendu 13a. PF= 198,6 + /- 1 °C

[α] _D : -157,0 +/- 2,1 (c=2,332 mg/0.5 mL MeOH) MS : m/z = 353 [M+H] ⁺

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 1 ,34 (s, 9H) ; 2,09 (m, 1 H) ; 2,25 (m, 1 H) ; de 2,65 à 2,80 (m, 2H) ; 3,94 (m, 1 H) ; 6,95 (d, J = 8,0 Hz, 1 H) ; 7,09 (d, J = 8,5 Hz, 1 H) ; 7,35 (t, J = 7,5 Hz, 1 H) ; 7,46 (t, J = 7,5 Hz, 2H) ; 7,54 (dd, J = 2,0 et 8,5 Hz, 1 H) ; 7,59 (d, J = 2,0 Hz, 1 H) ; 7,67 (d, J = 7,5 Hz, 2H) ; 9,76 (s, 1 H).

Etape 3 Préparation du (3S)-3-amino-7-phényl-1 ,3,4,5-tétrahydro-2H-1- benzazépin-2-one chlorhydrate (14a)

On reprend 5,63 g de 13a (15,97 mmol) dans un ballon de 250 mL et on ajoute 140 mL d'une solution d'acide chlorhydrique dans le dioxane (4M). On agite le milieu pendant 4h à TA sous argon. Il se forme un précipité que l'on essore et lave avec 5 mL de dioxane puis 5 mL d'éther isopropylique. Après séchage, on obtient 5,7 g d'aminé 14a sous forme de chlorhydrate. PF=198,6 + /- 1°C [α] _D : -292,0 +/- 3,2 (c=1 ,894 mg/0.5 mL MeOH)

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 2,19 (m, 1 H) ; 2,57 (m, 1 H) ; de 2,72 à 2,91 (m, 2H) ; 3,78 (m, 1 H) ; 7,13 (d, J ≈ 8,5 Hz, 1 H) ; 7,38 (t, J = 7,5 Hz, 1 H) ; 7,48 (t, J = 7,5 Hz, 2H) ; 7,60 (dd, J = 2,0 et 8,5 Hz, 1 H) ; 7,69 (m, 3H) ; 8,29 (s large, 3H) ; 10,35 (s, 1 H).

Etape 4: Préparation du (2f?,3ft,4S,5R,6E)-3,4,5-trihydroxy-2-méthoxy-8,8- diméthyl-λ/-[(3S)-2-oxo-7-phényl-2,3,4,5-tétrahydro-1 H-1-benzazépin-3- yl]non-6-énamide (Ex4a )

On introduit successivement dans un ballon de 150 mL, sous agitation et sous atmosphère d'argon, 2,3 g de 9 (9,42 mmol), 2,72 g de 14a (9,42 mmol), 3,63 g de 2-éthylhexanoate de sodium (21 ,84 mmol) dans 50,0 mL de THF. On maintient l'agitation à TA pendant 48 h. On évapore directement le milieu réactionnel à sec. Le brut est chromatographié sur une cartouche de silice (300g, éluant AcOEt), on obtient 3,7 g d'un solide blanc qui est repurifié sur une cartouche de silice (240g, éluant CH ₂ CI ₂ /MeOH - en gradient MeOH : 1 à 5%). On recueille 3,23 g de produit attendu Ex4a (solide blanc). [α] _D : -54,6 +/- 0,9 (c=2,989 mg/0.5 mL MeOH) MS : m/z = 497 [M+H] ⁺

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 0,95 (s, 9H) ; 2,11 (m, 1 H) ; 2,38 (m, 1 H) ; 2,79 (m, 2H) ; 3,24 (s, 3H) ; 3,30 (m masqué, 1 H) ; 3,52 (m, 1 H) ; 3,69 (d, J = 8,0 Hz, 1 H) ; 3,93 (m, 1 H) ; de 4,20 à 4,32 (m, 3H) ; 4,53 (d, J = 5,5 Hz, 1 H) ; 5,30 (dd, J = 7,5 et 16,0 Hz, 1 H) ; 5,62 (d, J = 16,0 Hz, 1 H) ; 7,10 (d, J = 8,5 Hz, 1 H) ; 7,35 (t, J = 7,5 Hz, 1 H) ; 7,45 (t, J = 7,5 Hz, 2H) ; 7,57 (dd, J = 2,0 et 8,5 Hz, 1 H) ; 7,62 (d, J = 2,0 Hz, 1 H) ; 7,68 (d, J = 7,5 Hz, 2H) ; 8,02 (d, J = 8,0 Hz, 1 H) ; 9,92 (s, 1 H).

Ex5: (2fî,3fî,4S,5R,6ê)-7-cyclopentyI-3,4,5-trihydroxy-2-méth oxy-λ/-[(3S)-2- oxo-7-phényl-2,3,4,5-tétrahydro-1 H- 1 -benzazépin-3-yl]hept-6-énamide

Etape 1 : Préparation du (4fî,4aS,7fî,7afî)-7-méthoxy-2,2-diméthyl-4- vinyltétrahydro-6H-furo[3,2-d][1 ,3]dioxin-6-one (17)

Dans un ballon de 4000 mL, équipé d'une agitation mécanique, on charge sous azote 178,2 g de PPh ₃ (0,679 mol), 84,1 g d'imidazole (1 ,235 mol), et 2430 mL de THF anhydre, On additionne avec précaution 156,8 g d'Iode bisublimé (0,618 mol) en maintenant la température du mélange réactionnel à 30 ⁰ C. On porte ce milieu au reflux (66°C) durant 1 h, puis on ajoute progressivement 81 g de 16 (0,309 mol) (qui peut être préparé selon les modes opératoires décrits dans Org. Process Res. Dev. 2003, 7(6), 856-865) à 66°C +/- 2°C. Le milieu homogène ainsi obtenu est chauffé au reflux pendant 3 h. On laisse revenir à 20 ⁰ C +/- 5°C, puis on coule 1000 mL d'une solution de NaHCO ₃ à 10% (effervescence, athermique) (pH 8,0-8,5). Ensuite on additionne 185,5 g de Na ₂ SaO ₃ jusqu'à la décoloration quasi totale (apparition d'un précipité minéral). Après agitation à 20 ⁰ C +/- 5°C pendant 30 minutes, on filtre et rince avec du THF le solide. Le filtrat THF/H ₂ O est concentré partiellement à l'évaporateur rotatif à une température inférieure à 35°C. Le concentrât aqueux est saturé avec NaCI et extrait avec 1500ml de CH ₂ CI ₂ . La phase organique est séchée sur MgSO ₄ , filtrée et évaporée à sec. Le résidu est repris dans 2000 mL d'un mélange H ₂ O/Acétone (75/25), les insolubles sont filtrés, et rincés avec le mélange H ₂ O/Acétone (75/25). Les filtrats sont concentrés à l'évaporateur rotatif à 50 ⁰ C et 20 mbars, et filtrés de nouveau sur un verre fritte (porosité N°4). La phase aqueuse est saturée avec NaCI, est extraite 3 fois avec CH ₂ CI ₂ (1000 mL, 500 mL, et 250 mL). Les phases organiques sont réunies, séchées sur MgSO ₄ , filtrées et évaporées à sec pour donner 60 g de produit brut, qui est dissout dans 250 mL de CH ₂ CI ₂ . On ajoute ensuite dans la solution 30 g de silice. Après agitation pendant 15 min, on filtre la silice, rince 2 fois avec de CH ₂ CI ₂ (250 mL et 100 mL). Le filtrat est concentré à sec et séché sous 1 mbar à 20 ⁰ C pour donner 54,8 g de produit attendu 17 (solide blanc)

RMN ¹ H (300 MHz, DMSO-Cl ₆ ), δ(ppm): 5.85 (m, 1 H) ; 5.35 (d, 1 H) ; 5.25 (d, 1 H) ; 4.80 (m, 1 H) ; 4.69 (m, 1 H) ; 4.43 (d, 1 H) ; 4.22 (m, 1 H) ; 3.40 (s, 3 H) ; 1.49 (s, 3 H) ; 1.30 (s, 3 H).

Etape 2: Préparation du (3fî,4fî,5S)-4-hydroxy-5-[(1 / ^: ?)-1-hydroxyprop-2-én-1- yl]-3-méthoxydihydrofuran-2(3H)-one (18)

Dans un ballon de 100 ml_ contenant 1 ,0 g de 17 (4,38 mmol), 10 mL d'eau et 14 mL de THF, on ajoute à 0°C goutte à goutte 10 mL de TFA. On laisse le milieu revenir à TA et agite pendant 1 nuit. On concentre ensuite le milieu à pression réduite à TA et ajoute 50 mL d'eau, congèle et lyophilise. Le lyophilisât est empâté dans de l'heptane en présence d'un minimum de méthanol, après évaporation des solvants, on obtient 778 mg de 18 attendu (solide blanc). MS : m/z = 211 [M+Na] ⁺ , 189 [M+H] ⁺ RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 3,42 (s, 3H) ; 3,98 (dd, J = 2,5 et 9,0 Hz, 1 H) ; de 4,25 à 4,34 (m, 3H) ; 5,22 (dm, J = 10,5 Hz, 1 H) ; 5,29 (d, J = 5,0 Hz, 1 H) ; 5,44 (d partiellement masqué, J = 16,5 Hz, 1 H); 5,46 (m, 1 H) ; 5,97 (m, 1 H).

Etape 3: Préparation du (3fî,4fî,5S)-5-[(1 fî,2E)-3-cyclopentyl-1 -hydroxyprop- 2-én-1-yl]-4-hydroxy-3-méthoxydihydrofuran-2(3^-one (19)

iS. 19

Dans un vial de 5 mL, introduire 100 mg (0,53 mmol) de 18, 4 mL de CH ₂ CI ₂ ,

726 μL (5,3 mmol) de vinylcyclopentane puis 90,2 mg (106 μmol) de catalyseur de Grubbs de seconde génération. Chauffer la solution 10 min à 60 ⁰ C au micro-ondes. Le solvant est ensuite évaporé à sec sous pression

réduite puis le résidu est purifié sur colonne de silice Biotage 12-M (éluant : Hept/AcOEt 40/60). Le produit 19 (76,3 mg, Rf = 0.35 dans les conditions d'élution utilisées) est obtenu sous forme d'un solide marron. MS : m/z = 279 [M+Na] ⁺ , 257 [M+H] ⁺ RMN ¹ H (300 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 5.82 (dd, 1 H, J=8 Hz et 16 Hz,), 5.50 (dd, 1 H, J=6 Hz et 16 Hz), 5.39 (d, 1 H, J=4.5 Hz), 5.15 (d, 1 H, J=6 Hz), 4.27 (m, 3H), 3.95 (dd, 1 H, J=3 Hz et 8 Hz), 3.41 (s, 3H), 2.43 (m, 1 H) ₁ 1.73 (m, 2H), 1.56 (m, 4H), 1.26 (m, 2H)

Etape 4: Préparation du (2R,3R,4S,5R6E)-7-cyclopentyl-3,4,5-trihydroxy-2- méthoxy-λ/-[(3S)-2-oxo-7-phényl-2,3,4,5-tétrahydro-1H-1- benzazépin-3- yl]hept-6-énamide (Ex5)

On introduit successivement dans un tube Wheaton, sous agitation et sous atmosphère d'argon, 100 mg de 19 (0,39 mmol), 112,6 mg de 14a (0,39 mmol), 162 mg de 2-éthylhexanoate de sodium (0,98 mmol) dans 2,0 mL de THF. On maintient l'agitation à TA pendant 24 h. On évapore directement le milieu réactionnel à sec. Le brut est chromatographié sur une cartouche de silice (12g, éluant AcOEt), on obtient 92 mg de produit attendu Ex5 (solide blanc). ES: m/z = 531 MNa ⁺ = m/z = 509 MH ⁺ .

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): De 1 ,13 à 1 ,73 (m, 8H) ; 2,11 (m, 1 H) ; de 2,29 à 2,45 (m, 2H) ; de 2,70 à 2,85 (m, 2H) ; 3,23 (s, 3H) ; 3,30 (m masqué, 1 H) ; 3,50 (m, 1 H) ; 3,69 (d, J = 8,0 Hz, 1 H) ; 3,92 (m, 1 H) ; de 4,19 à 4,38 (m, 3H) ; 4,52 (s large, 1 H) ; 5,36 (dd, J = 7,5 et 16,0 Hz, 1 H) ; 5,58 (dd, J = 8,0 et 16,0 Hz, 1 H) ; 7,10 (d, J = 8,5 Hz, 1 H) ; 7,36 (t, J = 7,5 Hz, 1 H) ; 7,46 (t, J = 7,5 Hz, 2H) ; 7,58 (d large, J = 8,5 Hz, 1 H) ; 7,62 (s large, 1 H) ; 7,69 (d, J = 7,5 Hz, 2H) ; 8,02 (d, J = 8,0 Hz, 1 H) ; 9,92 (s, 1 H).

Ex6: (2R,3f? ₎ 4S,5R _l 6£)-7-cyclopentyl-3,4,5-trihydroxy-2-méthoxy-λ/-[(3S-1- méthyl-2-oxo-2,3,4,5-tétrahydro-1/-/-1-benzazépin-3-yl]he pt-6-énamide

Etape 1 : Préparation du [(3S)-1-méthyl-2-oxo-2,3,4,5-tétrahydro-1 H-1 - benzazépin-3-yl]carbamate de te/t-butyle (7a)

Dans un ballon de 500 mL, sous agitation et atmosphère d'argon, contenant 260 mL de THF et 6,2 g de 2a (22,44 mmol), on introduit à TA 0,898 mg d'hydrure de sodium en suspension à 60% dans l'huile (22,44 mmol). On agite le milieu pendant 1 h, et puis ajoute 3,823 g (26,94 mmol) d'iodure de méthyle. On laisse le milieu sous agitation pendant une nuit, on ajoute 500 mL d'AcOEt, lave 2 fois la phase organique avec 500 mL d'eau. La phase organique est séchée sur MgSO ₄ , filtrée puis évaporée à sec. On obtient 6,85 g de produit brut. Après chromatographie sur une cartouche de silice (250 g, éluant Heptane/AcOEt- en gradient AcOEt : 10 à 50%). On obtient 4,47 g de produit 7_a (solide blanc). PF= 133,2 +/- 1 °C [α] _D : -204,8 +/- 2,2 (c=2,484 mg/0.5 mL MeOH)

Etape 2: Préparation du (3S)-3-amino-1-méthyl-1 ,3,4,5-tétrahydro-2H-1- benzazépin-2-one chlorhydrate (8a)

On reprend 4,36 g de 7a (15,01 mmol) dans un ballon de 250 mL et on ajoute

110 mL d'une solution d'acide chlorhydrique dans le dioxane (4M). On agite pendant 4h à TA sous argon. Après évaporation du solvant, on délite le solide avec 25 mL d'éther isopropylique, et essore sur frite. On obtient après

séchage 3,1 g d'aminé 8a sous forme de chlorhydrate qui est utilisé directement pour l'étape suivante.

PF= 221 ,7 +/- 1 ⁰ C

[α] _D : -257,1 +/- 2,8 (c=2,696 mg/0.5 mL MeOH)

Etape 3: Préparation du (2fî,3/ ^: ? ₎ 4S,5fî _J 6£)-7-cyclopentyl-3,4 ₎ 5-trihydroxy-2- méthoxy-λ/-[(3S)-1 -méthyl-2-oxo-2,3,4,5-tétrahydro-1 H- 1 -benzazépin-3- yl]hept-6-énamide (Ex6)

On introduit successivement dans un tube Wheaton, sous agitation et sous atmosphère d'argon, 100 mg de 19 (0,39 mmol), 88,42 mg de 8a (0,39 mmol), 162 mg de 2-éthylhexanoate de sodium (0,98 mmol) dans 2,0 mL de THF. On maintient l'agitation à TA pendant 24 h. On évapore directement le milieu réactionnel à sec. Le brut est chromatographié sur une cartouche de silice (12g, éluant AcOEt), on obtient 60 mg de produit attendu Ex6 (solide blanc).

ES : m/z = 447 MH ⁺ .

RMN ¹ H (500 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 1,21 (m, 2H) ; de 1 ,41 à 1,73 (m, 6H) ; 2,03 (m, .1 H) ; 2,20 (m, 1 H) ; 2,37 (m, 1 H) ; de 2,60 à 2,75 (m, 2H) ; 3,21 (s, 3H) ; de 3,25 à 3,35 (m masqué, 1 H) ; 3,30 (s, 3H) ; 3,48 (m, 1 H) ; 3,66 (d, J = 8,0 Hz, 1 H) ; 3,91 (m, 1 H) ; 4,20 (m, 1 H) ; 4,29 (m, 2H) ; 4,53 (d, J = 4,0 Hz, 1 H) ; 5,35 (dd, J = 7,5 et 16,0 Hz, 1 H) ; 5,57 (dd, J = 8,5 et 16,0 Hz, 1 H) ; 7,23 (m, 1 H) ; 7,31 (d, J = 7,5 Hz, 1 H) ; 7,39 (m, 2H) ; 8,04 (d, J = 8,0 Hz, 1 H).

Activité biologique des produits préparés:

Au jour du dépôt de la demande, il a été mesuré que le Caco2-TC7 du produit de l'exemple 4a (Papp single point = 48.10 ^"7 cm. sec ^"1 ) est meilleur que celui du produit de l'exemple 22a (Papp single point = 6.10 ^"7 cm.sec ^'1 ) décrit dans la demande de brevet WO2006/056696.

L'activité antiproliférative des produits des exemples du tableau 1 a été déterminée par mesure de l'inhibition de la prolifération cellulaire de cellules HCT116. Les cellules sont ensemencées dans un milieu de culture cellulaire à une concentration de 10 000 cellules par puits, dans 0.17 mL de milieu, et 20 μL de produit à tester, à différentes concentrations, et 10 μL de Thymidine [methyl-14C] (100 μCi/ml - activité spécifique 47.90 mCi/mmol; NEN Technologies référence NEC568 batch 3550-001) sont ajoutés, puis les cellules sont incubées à 37°C et 5% de CO ₂ .

Milieu utilisé pour la culture de cellules HCT116 : milieu DMEM 2 mM L- glutamine, 200 Ul/ml pénicilline, 200 μg/ml streptomycine and 10% (WV) Sérum de veau fœtal (Life Technologies).

Après 96 heures, l'incorporation de ¹⁴ C-thymidine est comptée dans un compteur à scintillation liquide 1450 Microbeta Wallac Trilux. Les résultats R sont exprimés en cpm (coups par minute) et convertis en pourcentage d'inhibition de croissance Gl% en faisant premièrement la soustraction de la moyenne du nombre de cpm des puits sans cellules B et en divisant ensuite par le nombre de cpm des puits des cellules non traitées C comprenant 20μL de milieu de dilution du produit contentant 1% d'éthanol. (Gl % = (R - B) x 100 / C %).

Les valeurs d'IC50 sont calculées à l'aide de l'équation 205 du logiciel XLFit (IDBS company, UK) par analyse de régression non linéaire utilisant l'algorithme Marquardt (Donald W. MARQUARDT, J.Soc.industry.appI, vol 11 , No. 2, June, 1963). Les produits du tableau 1 présentent une IC50 sur les cellules HCT116 généralement inférieure à 30μM et de préférence inférieure à 10OnM. Par exemple, le produit de l'exemple 1 a une IC50 de 14 nM et le produit de l'exemple 3 a une IC50 de 58 nM. Le produit de l'exemple 2 a une IC50 de 15 nM, le produit de l'exemple 3a a une IC50 de 32 nM, le produit de l'exemple 4 a une IC50 de 75 nM et le produit de l'exemple 4a a une IC50 de 14 nM.

- Tableau 1 -