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Title:
ARYLUREA COMPOUND, INTERMEDIATE AND USE THEREOF
Document Type and Number:
WIPO Patent Application WO/2012/089137
Kind Code:
A1
Abstract:
Disclosed in the present invention is an arylurea compound represented by formula I, or a pharmaceutically acceptable salt, a polymorph, a solvate or a stereoisomer thereof, and an intermediate and use thereof. The arylurea compound I of the present invention has protein kinase inhibiting activity, and antitumor and anti-angiogenesis activity.

Inventors:
ZHANG QINGWEN (CN)
ZHOU HOUYUAN (CN)
Application Number:
CN2011/084887
Publication Date:
July 05, 2012
Filing Date:
December 29, 2011
Export Citation:
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Assignee:
SHANGHAI INST PHARM INDUSTRY (CN)
ZHANG QINGWEN (CN)
ZHOU HOUYUAN (CN)
International Classes:
C07D239/94; A61K31/517; A61K31/5377; A61P3/10; A61P9/10; A61P17/06; A61P25/28; A61P27/02; A61P35/00; A61P37/02; C07C273/18; C07C275/30; C07C275/40; C07D277/44; C07D295/13; C07D295/16; C07D401/12; C07D405/04; C07D417/12
Foreign References:
CN101857588A2010-10-13
CN101730700A2010-06-09
Other References:
MCLAUGHLIN, MAUREEN A. ET AL.: "A practical and selective reduction of nitroarenes using elemental sulfur and mild base.", TETRAHEDRON LETTERS, vol. 47, no. 51, 2006, pages 9095 - 9097
DATABASE REGISTRY CHEMICAL ABSTRACTS SERVICE.; 7 June 2009 (2009-06-07), accession no. STN Database accession no. 1153357-27-7
GAROFALO, ANTONIO ET AL.: "Quinazoline-urea, new protein kinase inhibitors in treatment of prostate cancer", JOURNAL OF ENZYME INHIBITION AND MEDICINAL CHEMISTRY, vol. 25, no. 2, April 2010 (2010-04-01), pages 158 - 171
GAROFALO, ANTONIO ET AL.: "[4-(6,7-Disubstituted quinazolin-4-ylamino)phenyl] carbamic acid esters: A novel series of dual EGFRNEGFR-2 tyrosine kinase inhibitors", MED. CHEM. COMM., vol. 2, no. 1, 14 December 2010 (2010-12-14), pages 65 - 72
YU, BING ET AL.: "Design, synthesis and antitumor activity of 4-aminoquinazoline derivatives targeting VEGFR-2 tyrosine kinase.", BIOORGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY LETTERS, vol. 22, no. 1, 23 November 2011 (2011-11-23), pages 110 - 114, XP028352284, DOI: doi:10.1016/j.bmcl.2011.11.061
DATABASE REGISTRY CHEMICAL ABSTRACTS SERVICE; 6 September 2011 (2011-09-06), accession no. STN Database accession no. 1329039-26-0
Attorney, Agent or Firm:
SHANGHAI ZHI XIN PATENT AGENT LTD. (CN)
上海智信专利代理有限公司 (CN)
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Claims:
权利要求

1、 一种如式 I所示的芳基脲类化合物、 其药学上可接受的盐、 多晶型物、 溶剂合物 或立体异构体;

其中, Rla为氢, 为取代或未取代的 〜¾烷基、 取代或未取代的 C3〜C9环烷基、 取代或未取代的 C6〜C14芳基、取代或未取代的 〜 3杂芳基; 所述的取代的烷基中的取 代基为 4〜9元饱和杂环基, 所述饱和杂环基的杂原子数为 1〜4个, 杂原子为氮、 氧或硫; 所述的取代的环烷基中的取代基为卤素、 〜¾烷基或 〜¾烷氧基; 所述的取代的芳基 或取代的杂芳基中的取代基为卤素、 氰基、 C3的卤代烷基、 C3烷基、 C3烷氧 基、 C2〜C3烯基和 C2〜C3块基中的一种或多种, 每种取代基的数目为 0、 1或多个, 取代 基的位置为芳基或杂芳基上可取代的任意位置, 当芳基为苯环时, 取代基的位置为脲侧 链的邻位、 间位或对位; 杂芳基中的杂原子为氮、 氧或硫, 杂原子数为 1〜5;

或者 R 、 Rla以及与 、 Rla相连的氮原子一起成环为取代或未取代的 4〜9元饱和杂 环, 所述饱和杂环可额外含有 1〜3个杂原子, 所述杂原子为氮、 氧或硫; 其中, 所述的 取代的 4〜9元饱和杂环中的取代基为卤素、 烷基或 烷氧基;

R2为氢、 取代氨基取代的 〜^烷氧基, 其中取代氨基上的取代基与氨基氮原子一 起环合形成 4〜9元取代或未取代的饱和杂环; 所述的饱和杂环中可额外包含 1〜2个杂原 子, 杂原子为氮、 氧或硫, 若额外包含氮原子, 则该氮原子上无取代、 或由 〜 烷基 取代; 所述的取代的饱和杂环中的取代基为 烷基、 烷氧基、 卤素、 氨基或羟 基;

或者, R2为 C^Cs烷氧基取代的 C^Cs烷氧基、 取代的 C6〜C1()芳基、 取代的 C3〜C9 杂芳基;其中,取代的芳基或取代的杂芳基中的取代基为(连接 烷基磺酰基的 烷基氨基) 取代的 CH^烷基、 卤素、 〜¾烷基、 〜¾烷氧基、 C2〜C3烯基和 C2〜C3 块基中的一种或多种, 杂芳基中的杂原子为氮、 氧或硫, 杂原子数为 1〜4;

R3为氢、 C^Cs烷氧基, 或者 C6烷氧基取代的 C6烷氧基;

或者 R3为氨基或取代氨基取代的 C^Ce烷氧基; 其中, 取代氨基上的取代基可与所 述氨基氮原子一起环合形成 4〜9元饱和杂环, 所述的饱和杂环中可额外包含 1〜2个杂原 子, 杂原子为氮、 氧或硫, 若额外包含氮原子, 则所述氮原子上无取代、 或由 〜^烷 基、或者(羟基取代的) C^Ce烷基取代; 或者所述取代氨基上的取代基为(羟基取代的) C^Cs烷基和 /或 C6烷基;

或者 R3为 4〜9元饱和杂环取代的 C^ 烷氧基, 其中饱和杂环以碳原子与 〜^烷 氧基连接, 所述的饱和杂环中包含 1〜3个杂原子, 杂原子为氮、 氧或硫, 若包含氮原子, 则所述氮原子上无取代、 或由 C^Ce烷基取代;

R4和 R5独立地为氢、 C3烷基、 C3烷氧基、 卤素、 胺基或氰基;

、 R7、 R8和 R9独立地为氢、 〜¾烷基、 CH^烷氧基、 卤素或氰基;

R10为氢、 C3烷基、 C^Cs烷氧基、 卤素、 胺基或氰基;

Ru为 基; 连接在 2'、 3'或 4'位。

2、 如权利要求 1 所述的芳基脲类化合物 I或其药学上可接受的盐、 多晶型物、 溶剂 合物或立体异构体, 其特征在于: 当 为4〜9元饱和杂环基取代的 C^Cs烷基时, 所述 4〜9元饱和杂环基为 4〜6元饱和杂环基。

3、 如权利要求 2所述的芳基脲类化合物 I或其药学上可接受的盐、 多晶型物、 溶剂 合物或立体异构体, 其特征在于: 当 为4〜6元饱和杂环基取代的 C^Cs烷基时, 所述 的 4〜6元饱和杂环基为吡咯烷 -1-基。

4、 如权利要求 1 所述的芳基脲类化合物 I或其药学上可接受的盐、 多晶型物、 溶剂 合物或立体异构体,其特征在于: 当!^为取代或未取代的 C6〜C14芳基时, 所述的 C6〜C14 芳基为 C6〜Cio芳基。 5、 如权利要求 1 所述的芳基脲类化合物 I或其药学上可接受的盐、 多晶型物、 溶剂 合物或立体异构体, 其特征在于: 当 为取代的 C6〜C14芳基或取代的 〜 3杂芳基, 芳基或杂芳基上的取代基为卤素时, 所述的卤素为氟、 氯、 溴或碘。

6、 如权利要求 1 所述的芳基脲类化合物 I或其药学上可接受的盐、 多晶型物、 溶剂 合物或立体异构体, 其特征在于: 当 为取代的 C6〜C14芳基或取代的 〜 3杂芳基, 芳基或杂芳基上的取代基为 的卤代烷基时, 所述的卤代烷基为三氟甲基。

7、 如权利要求 1 所述的芳基脲类化合物 I或其药学上可接受的盐、 多晶型物、 溶剂 合物或立体异构体, 其特征在于: 当 为取代或未取代的 C^Cs烷基时, 所述的 C^Cs 烷基为 烷基;当 为取代或未取代的 C3〜C9环烷基时,所述的 C3〜C9环烷基为 C3〜C8 环烷基; 当 ^为取代或未取代的 〜 3杂芳基时, 所述的 〜 3杂芳基为 C^Cg杂芳 基; 当 ^和 Rla以及与 、 Rla相连的氮原子一起成环为取代或未取代的 4〜9元饱和杂 环时, 所述的饱和杂环为 5〜7元饱和杂环; 所述的烷基、 环烷基、 芳基、 杂芳基和饱和 杂环上的取代基的定义如权利要求 1、 2、 3、 5或 6所述。

8、 如权利要求 7所述的芳基脲类化合物 I或其药学上可接受的盐、 多晶型物、 溶剂 合物或立体异构体, 其特征在于: 当 为取代或未取代的 C3〜C8环烷基时, 所述的环烷 基为环己基; 当 为取代或未取代的 C^Cg杂芳基时, 所述的 C^Cg杂芳基为 C3〜C9杂 芳基; 当 ^和!^以及与 、 Rla相连的氮原子一起成环为 5〜7元饱和杂环时, 所述的 5-7元饱和杂环为吗啉环。

9、 如权利要求 8所述的芳基脲类化合物 I或其药学上可接受的盐、 多晶型物、 溶剂 合物或立体异构体,其特征在于:当 为取代或未取代的 C3〜C9杂芳基时,所述的 C3〜C9 杂芳基为 C3〜C5杂芳基。

10、 如权利要求 9所述的芳基脲类化合物 I或其药学上可接受的盐、 多晶型物、 溶剂 合物或立体异构体,其特征在于:当!^为取代或未取代的 C3〜C5杂芳基时,所述的 C3〜C5 杂芳基选自噻唑 -2-基、 或者 5-甲基异恶唑 -3-基。

11、 如权利要求 1〜10任一项所述的芳基脲类化合物 I或其药学上可接受的盐、 多晶 型物、 溶剂合物或立体异构体, 其特征在于: 当所述的 R2为取代氨基取代的 〜 烷氧 基, 其中取代氨基上的取代基与氨基氮原子一起环合形成 4〜9元取代或未取代的饱和杂 环时, 所述的 C^Cs烷氧基为 烷氧基, 所述的饱和杂环为吗啉或哌嗪;

或者, 当 R2为 〜 烷氧基取代的 〜 烷氧基、 或取代的 C3〜C9杂芳基时; 所述 的 C^Ce烷氧基均为 C^ 烷氧基, 所述的取代的 C3〜C9杂芳基为取代的呋喃基; 取代 的呋喃基中的取代基为权利要求 1中 R2为取代的 C3〜C9杂芳基时的取代基。

12、 如权利要求 1〜10任一项所述的芳基脲类化合物 I或其药学上可接受的盐、 多晶 型物、 溶剂合物或立体异构体, 其特征在于: 当 R2为取代的 C6〜C1Q芳基或取代的 C3〜C9 杂芳基时, 取代的芳基或取代的杂芳基中的取代基为 (连接 烷基磺酰基的 烷基氨基) 取代的 烷基, 芳基或杂芳基的其余位置无取代或被卤素、 〜 烷基、 C广 C3烷氧基、 C2〜C3烯基和 C2〜C3块基中的一种或多种取代。

13、 如权利要求 1〜10任一项所述的芳基脲类化合物 I或其药学上可接受的盐、 多晶 型物、 溶剂合物或立体异构体, 其特征在于: 当 R3为 的烷氧基取代的 烷氧 基时, 所述的 C^Ce烷氧基均为 C^ 烷氧基;

或者当 R3为取代氨基取代的 〜 烷氧基时,所述的 烷氧基为 烷氧基, 其中, 取代氨基上的取代基与所述氨基氮原子一起环合形成 5〜6元饱和杂环, 当环中额 外包含氮原子时, 该氮原子上无取代, 或者由 C^ 烷基、 或者羟基取代的 C^ 烷基 取代; 或者取代氨基上的取代基为 (羟基取代的) 烷基和 /或 烷基;

或者当 R3为 4〜9元饱和杂环取代的 C^ 烷氧基, 其中饱和杂环以碳原子与 C^Ce 烷氧基连接时, 所述的 C^Ce烷氧基均为 C^ 烷氧基, 所述的 4〜9元饱和杂环为 5〜6 元饱和杂环, 所述的饱和杂环中包含 1〜2个杂原子, 当环中包含氮原子时, 则该氮原子 上无取代、 或由 C^Cs烷基取代。

14、 如权利要求 1〜10任一项所述的芳基脲类化合物 I或其药学上可接受的盐、 多晶 型物、 溶剂合物或立体异构体, 其特征在于: 所述的化合物 I为如下任一结构:

le

ig

其中, 和 Rla的定义如权利要求 1〜10任一项所述; 脲侧链连接在 3'或 4 '位; A为 羟乙基)哌嗪 -1-基、 乙基 羟乙基)胺基或 2-羟乙基胺基。

15、 如权利要求 1〜10任一项所述的芳基脲类化合物 I或其药学上可接受的盐、 多晶 型物、 溶剂合物或立体异构体, 其特征在于: 所述的化合物 I为如下任一结构:

//〇ϊϊοζ>Ι2Λν

16、如权利要求 1〜10任一项所述的芳基脲类化合物或其药学上可接受的盐、 多晶型 物、 溶剂合物或立体异构体, 其特征在于: 所述的芳基脲类化合物 I 的药学上可接受的 盐为芳基脲类化合物 I和无机酸或有机酸形成的盐,或者芳基脲类化合物 I和无机碱或有 机碱形成的盐; 所述的溶剂合物为水合物或化合物 I与有机溶剂形成的溶剂合物。

17、 如权利要求 16所述的芳基脲类化合物或其药学上可接受的盐、 多晶型物、 溶剂 合物或立体异构体, 其特征在于: 所述的无机酸为盐酸。

18、 制备权利要求 1所述的化合物 I的以下任一中间体化合物:

1- 3-氯 -4-氟苯基 )-3- H7-C3-氯丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲、

1-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基) -3-(3-(7-(3-氯丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲、

1-(3-(7-(3-氯丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基) -3-(3-氟苯基)脲、

1 - H7- 3-氯丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基) -3-(4- (吡咯烷 - 1 -基)丁基)脲、

1-(3-氯 -4-氟苯基 )-3-(3-(6-碘喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲盐酸盐、

1-(3-氯 -4-氟苯基 )-3-(3-(6-(5-甲酰基呋喃 -2-基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲、

1-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基) -3-(3-(6-碘喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲、 l-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基) -3-(3-(6-(5-甲酰基呋喃 -2-基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲、

1-(3,5-二 (三氟甲基)苯基 3-(3-(6-碘喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲盐酸盐、

1 -(3,5-二 (三氟甲基)苯基 3-(3-(6-(5-甲酰基呋喃 -2-基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲、

1-(2,5-二氟苯基) -3-(3-(6-碘喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲盐酸盐、

1-(2,5-二氟苯基) -3-(3-(6-(5-甲酰基呋喃 -2-基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲、

^2-甲基 -5-氟苯基 )-3-(3-(6-碘喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲盐酸盐、

甲基 -5-氟苯基 )-3-(3-(6-(5-甲酰基呋喃 -2-基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲、

1-(3-氨基苯基 )-3-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基)脲、

1-(4-氨基苯基) -3-P-氰基苯基)脲、

1-(3-氨基苯基) -3-P-氰基苯基)脲、

1- 3-氨基苯基 H3-氟苯基)脲、

N-(3-氨基苯基)吗啉 -4-甲酰胺、

1-(3-氨基苯基) -3-甲基苯基脲、

1-(3-氨基苯基) -3- (3,5-二 (三氟甲基)苯基)脲、

1- 3-氨基苯基) -3-(2,5-二氟苯基)脲、

1-(3-氨基苯基 3-(2-甲基 -5-氟苯基)脲、

1 -(4-氨基苯基) -3- (噻唑 -2-基)脲、

1 -(3-氨基苯基) -3- (噻唑 -2-基)脲、

1 -(4-氨基苯基) -3-(4- (吡咯烷- 1 -基)丁基)脲、

1 -(3-氨基苯基) -3-(4- (吡咯烷- 1 -基)丁基)脲、

1-异丁基 -3-(4-氨基苯基)脲、

1-异丁基 -3-(3-氨基苯基)脲、

1- 3-氯 -4-氟苯基 )-3- 3-硝基苯基)脲、

1-(3-硝基苯基) -3-P-氰基苯基)脲、

N-(3-硝基苯基)吗啉 -4-甲酰胺、

1-(3-硝基苯基 3-(2-甲基 -5-氟苯基)脲、

1 -(3-硝基苯基) -3- (噻唑 -2-基)脲、

1 -(3-硝基苯基) -3-(4- (吡咯烷- 1 -基)丁基)脲、

1-异丁基 -3-(3-硝基苯基)脲、

Ni-(7-甲氧基 -6-(3-吗啉基丙氧基) 喹唑啉 -4-基) 苯 -1,4-二胺、 l-(3-(7-(3-氯丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基) -3-(5-甲基异恶唑 -3-基)脲、

7- 3-氯丙氧基) -N- 3-硝基苯)喹唑啉 -4-胺、

或者 -(7-(3-氯丙氧基)喹唑啉 -4-基)苯 -1,3-二胺。

19、 一种权利要求 1所述的化合物 I的中间体化合物 II的制备方法, 其为下述方法 中的任意一种:

其中, 、 R6、 R7、 R8和 R9的定义如权利要求 1〜18任一项所述, Rla为氢, Y为 RUNH- 或硝基, Ru的定义如权利要求 1所述; 脲侧链连接在 2'、 3'或 4 '位;

方法一: 首先将化合物 V和三光气在叔胺存在下反应生成相应的异氰酸酯 IV, 然后 在一锅法条件下直接和化合物 VI或 VI'在叔胺存在下进行成脲反应,得到中间体化合物

II;

R,-NH2

l l (Y为 R NH)

方法二: 首先将化合物 VI和三光气在叔胺存在下反应生成相应的异氰酸酯 VII, 然 后在一锅法条件下 进行成脲反应, 得到中间体化合物 Π;

VI

1 1 (Y为硝基: 20、 如权利要求 19所述的制备方法, 其特征在于: 方法一中, 所述的生成异氰酸酯 IV的反应的温度为 -5°C到反应溶剂的回流温度; 所述的成脲反应的温度为 10°C到反应溶 剂的回流温度;

方法二中, 所述的生成异氰酸酯 VII的反应的温度为 -5°C到反应溶剂的回流温度; 所 述的成脲反应的温度为 10°C到反应溶剂的回流温度。

21、 如权利要求 20所述的制备方法, 其特征在于: 方法一中, 所述的生成异氰酸酯 IV的反应的温度为 0〜50°C ; 所述的成脲反应的温度为 15〜60°C ;

方法二中, 所述的生成异氰酸酯 VII的反应的温度为 0〜50°C ; 所述的成脲反应的温 度为 15〜60°C。

22、 如权利要求 21所述的制备方法, 其特征在于: 方法一中, 所述的生成异氰酸酯 IV的反应的温度为 20〜40°C; 所述的成脲反应的温度为 20〜50°C;

方法二中, 所述的生成异氰酸酯 VII的反应的温度为 20〜40°C ; 所述的成脲反应的温 度为 20〜50°C。

23、 如权利要求 19〜22任一项所述的制备方法, 其特征在于:

方法一中, 所述的方法包含下列步骤: 溶剂中, 首先在叔胺的存在下将化合物 V和 三光气反应生成相应的异氰酸酯 IV,然后在一锅法条件下直接和化合物 VI或 VI'在叔胺 存在下进行成脲反应, 得到中间体化合物 Π; 其中, 所述的溶剂为烃、 醚、 酮和酯中的 一种或多种; 所述的叔胺包括吡啶、 三乙胺、 二异丙基乙基胺、 N-甲基吗啉、 咪唑和二 甲基氨基吡啶中的一种或多种; 在生成异氰酸酯的反应中, 三光气和化合物 V的投料摩 尔比为 0.3〜2:1, 化合物 V与叔胺的投料摩尔比为 1 :1〜6; 在成脲反应中, 化合物 VI或 VI'与叔胺的投料摩尔比为 1 : 1-6;化合物 V与化合物 VI或 VI'的投料摩尔比为 1 : 0.6〜3; 方法二中, 所述的方法包含下列步骤: 溶剂中, 首先在叔胺的存在下, 将化合物 VI 和三光气反应生成相应的异氰酸酯 VII,然后直接和化合物 V在叔胺的存在下进行成脲反 应, 得到中间体化合物 Π; 其中, 所述的溶剂为烃、 醚、 酮和酯中的一种或多种; 所述 的叔胺包括吡啶、 三乙胺、 二异丙基乙基胺、 N-甲基吗啉、 咪唑和二甲基氨基吡啶中的 一种或多种; 在生成异氰酸酯的反应中, 三光气和化合物 VI的投料摩尔比为 0.3〜2:1, 化合物 VI与叔胺的投料摩尔比为 1 :1〜6; 在成脲反应中, 化合物 V与叔胺的投料摩尔比 为 1 : 1-6; 化合物 VI与化合物 V的投料摩尔比为 1 : 0.6-3

24、 如权利要求 23所述的制备方法, 其特征在于:

方法一中, 所述的烃为甲苯、 二甲苯、 二氯甲烷或氯苯, 醚为四氢呋喃、 2-甲基四 氢呋喃、 甲基叔丁基醚或二甲氧基乙烷, 酮为甲基乙基酮或甲基异丁基酮, 酯为乙酸乙 酯或乙酸异丁酯; 在生成异氰酸酯 IV的反应中, 三光气和化合物 V 的投料摩尔比为 0.33-1 :1 , 化合物 V与叔胺的投料摩尔比为 1 :1〜3; 在成脲反应中, 化合物 VI或 VI'与叔 胺的投料摩尔比为 1 : 1-3; 化合物 V与化合物 VI的投料摩尔比为 1 : 0.8-2;

方法二中, 所述的烃为甲苯、 二甲苯、 二氯甲烷或氯苯, 醚为四氢呋喃、 2-甲基四 氢呋喃、 甲基叔丁基醚或二甲氧基乙烷, 酮为甲基乙基酮或甲基异丁基酮, 酯为乙酸乙 酯或乙酸异丁酯; 在生成异氰酸酯 VII的反应中, 三光气和化合物 VI 的投料摩尔比为 0.33-1 :1 , 化合物 VI与叔胺的投料摩尔比为 1 :1〜3; 在成脲反应中, 化合物 V与叔胺的 投料摩尔比为 1 : 1-3; 化合物 VI与化合物 V的投料摩尔比为 1 : 0.8〜2。

25、 如权利要求 24所述的制备方法, 其特征在于:

方法一中, 所述的溶剂为 2-甲基四氢呋喃、 二氯甲烷和乙酸乙酯中的一种或多种; 在生成异氰酸酯 IV的反应中, 三光气和化合物 V的投料摩尔比为 0.35〜0.5:1, 化合物 V 与叔胺的投料摩尔比为 1 :1〜1.5; 在成脲反应中, 化合物 VI或 VI'与叔胺的投料摩尔比为 1: 1-1.5; 化合物 V与化合物 VI的投料摩尔比为 1 : 0.9-1.2;

方法二中, 所述的溶剂为 2-甲基四氢呋喃、 二氯甲烷和乙酸乙酯中的一种或多种; 在生成异氰酸酯 VII的反应中, 三光气和化合物 VI 的投料摩尔比为 0.35〜0.5:1, 化合物 VI与叔胺的投料摩尔比为 1 :1〜1.5;在成脲反应中,化合物 V与叔胺的投料摩尔比 1 : 1〜1.5; 化合物 VI与化合物 V的投料摩尔比为 1: 0.9〜1.2。

26、 如权利要求 1所述的芳基脲类化合物 I或其药学上可接受的盐、 多晶型物、 溶剂 合物或立体异构体在制备治疗与蛋白激酶介导的信号转导通路失调, 或者异常血管新生 相关的疾病的药物中的应用。

27、 如权利要求 26所述的应用, 其特征在于: 所述的疾病为肿瘤、 糖尿病、 自身免 疫性疾病、 神经退行性疾病、 糖尿病性视网膜病、 老年性黄斑退化、 动脉硬化、 银屑病 或炎症。

28、 如权利要求 27所述的应用, 其特征在于: 所述的肿瘤为皮肤、 脑部、 肺部、 淋 巴细胞、 肾脏、 肝脏、 胃、 结肠、 直肠、 膀胱、 头部、 颈部、 乳腺、 甲状腺、 食管、 胰 腺、 前列腺、 或者妇产科的肿瘤, 或者恶性血液病。

29、 如权利要求 26所述的应用, 其特征在于: 所述的蛋白激酶包括酪氨酸激酶和丝 氨酸 /苏氨酸激酶, 以及前述激酶的各种突变型。

30、 如权利要求 29所述的应用, 其特征在于: 所述的酪氨酸激酶为 EGFR、 HER-2、 VEGFR-K VEGFR-2、 VEGFR-3 PDGFR a、 PDGFR β、 c-KIT、 CSF1R、 FLT-3、 c-MET、 TIE-2、 SRC、 LCK、 FYN或 HCK; 所述的丝氨酸 /苏氨酸激酶为 BRAF、 CRAF、 Aurora A或 Aurora B; 所述的突变型激酶为 BRAF V600E。

31、 如权利要求 1所述的芳基脲类化合物 I或其药学上可接受的盐、 多晶型物、 溶剂 合物或立体异构体在制备具有人肿瘤异种移植瘤抑制活性的药物中的应用。

32、 如权利要求 31所述的应用, 其特征在于: 所述的人肿瘤异种移植瘤为移植于裸 鼠的 A549人肺癌。

33、 如权利要求 1所述的芳基脲类化合物 I或其药学上可接受的盐、 多晶型物、 溶剂 合物或立体异构体在制备具有 A549人肺癌细胞、 HCT116人肠癌细胞、 CEM人白血病 细胞或 MCA-MB-435人黑色素瘤细胞抑制活性的药物中的应用。

34、 如权利要求 1所述的化合物 I或其药学上可接受的盐、 多晶型物、 溶剂合物或 立体异构体在制备具有人脐静脉内皮细胞抑制活性的药物中的应用。

35、 包含如权利要求 1所述的芳基脲类化合物 I或其药学上可接受的盐、 多晶型物、 溶剂合物或立体异构体的药物组合物。

Description:
一种芳基脲类化合物、 其中间体及其应用 技术领域

本发明具体地涉及一种芳基脲类化合物、 其中间体及其应用。 背景技术

细胞内部和细胞之间的信号转导 (signal transduction) 调控着细胞功能的方方面面。 细胞信号转导的异常是很多疾病复杂病因的分 子基础。 绝大多数信号转导通路由蛋白激 酶(protein kinase )介导。 人蛋白激酶催化丝氨酸、 苏氨酸或酪氨酸残基的磷酸化, 在细 胞的生长、 代谢、 分化和凋亡中发挥着重要作用。 蛋白激酶失调可导致包括肿瘤、 糖尿 病、 自身免疫性疾病、 神经退行性疾病和炎症在内的一系列疾病。 因此, 蛋白激酶抑制 剂成为治疗上述诸多人类重大疾病的一条重要 途径。

人类蛋 白 激酶组成员 超过 500 种 ( Manning G 等 . Science, 2002, 298(5600): 1912- 1934 ) , 包括酪氨酸激酶和丝氨酸 /苏氨酸激酶。一些重要的作为药物靶标 的蛋白激酶举例如下: HER激酶 (如 EGFR和 HER-2)、 VEGFR激酶 (如 VEGFR- 1、 VEGFR-2和 VEGFR-3 )、PDGFR激酶(如 PDGFR a、PDGFR β、C-KIT、CSF 1R和 FLT-3 )、 SRC激酶 (如 SRC、 LCK、 FYN和 HCK)、 ALK、 BCR-ABL、 c-MET、 TIE-2、 FGFR1、 RAF激酶 (如 BRAF和 CRAF )、 Aurora激酶(如 Aurora A和 Aurora B ), 以及上述激酶 的突变株 (如 BCR-ABL T315I和 BRAF V600E)。

血管新生 (angiogenesis ) 是指从已有血管新生全新血管。 正常的血管新生是一个受 到严密调控的正常生理过程, 发生于胚胎发育、 伤口愈合和月经周期。 血管新生一旦失 调可能引起糖尿病性视网膜病、 类风湿性关节炎、 老年性黄斑退化、 动脉硬化和肿瘤等 多种疾病。

血管新生是维系肿瘤生存和进展的生命线, 实体瘤高度依赖血管新生来持续获得营 养和氧气。 因此, 靶向血管新生的化合物成为抗肿瘤药物研究的 一大热点, 并预期其在 安全性和抗药性方面可能具有优势。 目前上市的多激酶抑制剂索拉非尼、 舒尼替尼和帕 佐帕尼均具有抗血管新生活性。

目前抗血管新生的靶标包括生长因子 (如血管内皮生长因子、 血小板衍生生长因子 受体、 成纤维细胞生长因子和表皮生长因子)、 受体酪氨酸激酶、 转录因子 (如缺氧诱导 因子 (hypoxia inducible factor) ) , 以及参与 MAPK和 PI3K信号转导通路的分子。 其中 蛋白激酶靶标主要包括 VEGFR、 FGFR、 PDGFR、 c-KIT、 FLT-3和 TIE-2等。

脲结构类型化合物作为蛋白激酶抑制剂近年来 受到了广泛而深入的研究。 (Dumas J 等. Current Opinion in Drug Discovery & Development, 2004, 7(5):600-616. )

1、 索拉非尼:

索拉非尼 (sorafenib ) 是第一个被美国 FDA批准上市的选择性多激酶抑制剂, 其化 学结构特征为二芳基脲(diaryl urea)。索拉非尼对 RAF/MEK/ERK信号转导通路中的 Raf-1 (IC 50 ,6 nM)、 野生型 BRAF (IC 50 , 22 nM)、 V599E 变异型 BRAF(IC 5Q , 38 nM)均具有显著 抑制活性。 此外, 索拉非尼还可强效抑制多种对血管新生具有重 要意义的受体酪氨酸激 酶(RTK) : VEGFR-2 (IC 5 。, 90nM)、鼠 VEGFR-2 (IC 5 。, 15nM)、鼠 VEGFR-3 (IC 5 。, 20 nM)、 鼠 PDGFR- β (IC 50 , 57 nM)、 c-KIT (IC 50 , 68 nM) 和 Flt3 (IC 50 , 58 nM)。 总之, 索拉非尼既 靶向 RAF/MEK/ERK信号转导通路阻滞肿瘤细胞增殖, 又靶向 VEGFR-2 /PDGFR-P信号 转导级联抑制肿瘤血 (Wilhelm SM等. Cancer Research, 2004, 64(19):7099-7109)。

2、 索拉非尼的结构类似物

Amgen公司的 Potashman等 ( Potashman MH等. Journal of Medicinal Chemistry, 2007

50:4351-4373. ) 将索拉非尼环合为相应的 2-氨基苯并咪唑, 通过进一步的结构改造, 得 到 2-氨基苯并恶唑化合物 2'。 化合物 2'为强效选择性的 VEGFR-2抑制剂(Ki 3nM), 对 HUVEC的 IC 5 。 为 15nM。

葛兰素史克的 Hasegawa等 ( Hasegawa M等. Journal of Medicinal Chemistry, 2007, 50:4453-4470. ) 报道了以化合物 3 '为代表的 TIE-2和 VEGFR-2双重酪氨酸激酶抑制剂 ( IC 50 分别为 4.9nM和 1.5nM), 在 PBS (磷酸盐缓冲盐水) 中溶解度约为 20(^g/mL。

诺华的 Ramurthy 等 ( Ramurthy S 等 . Journal of Medicinal Chemistry, 2008, 51(22):7049-7052. )报道通过将索拉非尼的脲片段与旁边的苯环 合得到一系列具有口服 活性的 2-芳基苯并咪唑类 RAF抑制剂, 从中筛选出 RAF265进入治疗黑色素瘤的临床试 验。

Niculescu-Duvaz等 ( Niculescu-Duvaz D等. Journal of Medicinal Chemistry, 2009

52(8):2255-2264. )采用双环吡啶并咪唑烷酮作为铰链区域结合 段, 得到强效 B-RAF抑 制剂 4' (IC

RAF265

3、 其他脲结构蛋白激酶抑制剂:

Tandutinib ( MLN-518 ) 处于急性髓细胞白血病 (AML ) 的11期临床。 它是受体激酶 FLT-3、 c-KIT和血小板衍生生长因子受体(PDGFR)强效抑 剂(IC 5Q 170〜220nM), 对 于 p38激酶、 VEGFR-2和 FGFR均有高度选择性 (IC 5Q >30μΜ)。 ( Dumas J等. Current Opinion in Drug Discovery & Development, 2004, 7(5):600-616. )

勃林格殷格翰曾开发二芳基脲化合物 BIRB796 进入治疗自身免疫性疾病的临床试 验。 BIRB796为 p38 a MAP激酶抑制剂。(Regan J等. Journal of Medicinal Chemistry, 2003, 46(22):4676-4686. )

辉瑞报道的异噻唑化合物 CP-547632为强效 VEGFR-2和 bFGF抑制剂, IC 5Q 分别为 11和 9nM, 相对于 EGFR、 PDGFR β和其他相关激酶显示出选择性。 CP-547632具有抑 制血管新生和肿瘤细胞增殖的双重活性: 在体内模型中强效抑制 VEGFR和 FGF诱导的 血管新生;在荷人异种移植瘤的无胸腺小鼠中 ,口服给药可抑制 85%的肿瘤生长。 (Beebe JS等. Cancer Research, 2003, 63(21):7301-7309. )

雅培 (Dai YJ等. Journal of Medicinal Chemistry, 2007, 50(7): 1584-1597. ) 为了寻找新 型多激酶受体酪氨酸激酶(RTK) 抑制剂, 通过在氨基吲唑系列化合物中的广泛构效关 系研究发现了 ABT-869, 正在进行临床试验。 ABT-869对 KDR、 FLT-3和 c-KIT的 IC 50 分别为 4、 5和 16nM。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供了一种与现 有技术完全不同的芳基脲类化合物或 其药学上可接受的盐、 多晶型物、 溶剂合物或立体异构体, 其中间体, 以及其应用。 本 发明的芳基脲类化合物在生物学测试中, 对于多种蛋白激酶具有不同程度的抑制活性, 并且在体外抗人肿瘤细胞系和人脐静脉内皮细 胞增殖活性试验中分别显示具有不同程度 的抗肿瘤细胞生长和抗血管新生活性。

因此本发明涉及一种如式 I所示的芳基脲类化合物或其药学上可接受的 、 多晶型 物、 溶剂合物或立体异构体

其中, R la 为氢, 为取代或未取代的 C^Cs烷基(所述 C^Cs烷基优选 烷基, 如正丙基、 异丙基、 异丁基、 叔丁基或正己基)、 取代或未取代的 C 3 〜C 9 环烷基 (所述 C 3 〜C 9 环烷基优选 C 3 〜C 8 环烷基, 如环己基)、 取代或未取代的 C 6 〜C 14 芳基(所述 C 6 〜C 14 芳基优选 C 6 〜C 1Q 芳基, 如苯基或萘基)、 取代或未取代的 C^CB杂芳基 (所述 C^Cu杂 芳基较佳的为 杂芳基, 优选 c 3 〜c 9 杂芳基, 进一步优选 c 3 〜c 5 杂芳基, 再进一步 优选噻唑基, 如噻唑 -2-基、或 5-甲基异恶唑 -3-基); 取代的烷基中的取代基为 4〜9元(优 选 4〜6元) 饱和杂环基, 所述饱和杂环基的杂原子数为 1〜4个, 杂原子为氮、 氧或硫, 如吡咯烷 -1-基; 取代的环烷基中的取代基为卤素、 CH 3 烷基或 CH 3 烷氧基; 取代的 芳基或取代的杂芳基中的取代基为卤素 (如氟、 氯、 溴或碘)、 氰基、 的卤代烷基 (如三氟甲基)、 〜¾烷基、 C^ 烷氧基、 C 2 〜C 3 烯基和 C 2 〜C 3 块基中的一种或多种, 每种取代基的数目为 0、 1或多个,取代基的位置可为芳基或杂芳基上 取代的任意位置, 当芳基为苯环时, 取代基的位置为脲侧链的邻位、 间位或对位; 杂芳基中的杂原子为氮、 氧或硫, 杂原子数为 1〜5;

或者 R 、 R la 以及与 、 R la 相连的氮原子一起成环为取代或未取代的 4〜9元(优选 5〜7元) 饱和杂环 (如吗啉环), 所述饱和杂环可额外含有 1〜3个杂原子, 所述杂原子为 氮、氧或硫;其中,所述的取代的 4〜9元饱和杂环中的取代基为卤素、 C^ 烷基或 C^ 烷氧基;

R 2 为氢、取代氨基取代的 (优选 烷氧基, 其中取代氨基上的取代基与 氨基氮原子一起环合形成 4〜9元取代或未取代的饱和杂环 (所述的饱和杂环可为吗啉或 哌嗪);所述的饱和杂环中可额外包含 1〜2个杂原子,杂原子为氮、氧或硫(优选氮 氧), 若额外包含氮原子, 则该氮原子上无取代、 或由 〜 (优选 烷基取代; 所述的 取代的饱和杂环中的取代基为 C^ 烷基、 C^ 烷氧基、 卤素、 氨基或羟基;

或者, R 2 为 CH^ (优选 CH^) 烷氧基取代的 C^Cs (优选 CH^) 烷氧基、 取代 的 C 6 〜C 1Q 芳基、 取代的 C 3 〜C 9 杂芳基(所述 C 3 〜C 9 杂芳基优选呋喃基); 其中, 取代的芳 基或取代的杂芳基中的取代基为 (连接 C^ 烷基磺酰基的 C^ 烷基氨基)取代的 C^ 烷基、 卤素、 〜 烷基、 C^Cs烷氧基、 C 2 〜C 3 烯基和 C 2 〜C 3 块基中的一种或多种, 杂 芳基中的杂原子为氮、 氧或硫, 杂原子数为 1〜4; 较佳的, 取代的芳基或取代的杂芳基 中的取代基为 (连接 C^ 烷基磺酰基的 C^ 烷基氨基) 取代的 C^ 烷基, 芳基或 杂芳基的其余位置无取代或被卤素、 〜 烷基、 烷氧基、 C 2 〜C 3 烯基和 C 2 〜C 3 块 基中的一种或多种取代;

R 3 为氢、 C^Cs烷氧基,或者 C^Cs (优选 C^C 烷氧基取代的 C^Cs (优选 〜〔 3 ) 烷氧基;

或者 R 3 为氨基或取代氨基取代的 C^Ce (优选 C^ ) 烷氧基; 其中, 取代氨基上 的取代基可与所述氨基氮原子一起环合形成 4〜9元 (优选 5〜6元) 饱和杂环, 所述的饱 和杂环中可额外包含 1〜2个杂原子, 杂原子为氮、 氧或硫(优选氮或氧), 若额外包含氮 原子, 则该氮原子上无取代, 或由 C^Cs (优选 C^ )烷基、 或者(羟基取代的) C^Ce (优选 烷基取代; 或者所述取代氨基上的取代基为 (羟基取代的) (优选 Ci~C 3 ) 烷基和 /或 C^Cs (优选 CH^) 烷基;

或者 为 4〜9元 (优选 5〜6元) 饱和杂环取代的 C^Cs (优选 烷氧基, 其 中饱和杂环以碳原子与 C^Cs (优选 烷氧基连接, 所述的饱和杂环中包含 1〜3个 杂原子 (优选 1〜2个), 杂原子为氮、 氧或硫 (优选氮或氧), 若包含氮原子, 则该氮原 子上无取代、 或由 C^Cs (优选 烷基取代;

R4和 R 5 独立地为氢、 C3烷基、 C3烷氧基、 卤素、 胺基或氰基;

、 R 7 、 R 8 和 R 9 独立地为氢、 CH^烷基、 CH^烷氧基、 卤素或氰基;

R 10 为氢、 〜¾烷基、 C^ 烷氧基、 卤素、 胺基或氰基;

Ru为 基; 连接在 2'、 3'或 4'位。

本发明中, 所述的化合物 I较佳的为如下任一结构:

本发明中, 所述的化合物 I最佳的为如下任一结构:

D2≤-

D83-

.εΐ680/ΖΪ0Ζ OAV

本发明中, 所述的芳基脲类化合物的药学上可接受的盐为 上述芳基脲类化合物和无 机酸 (如盐酸) 或有机酸形成的盐, 或者上述芳基脲类化合物和无机碱或有机碱形 成的 本发明中的式 I化合物的结晶形式可以为多晶型, 这些结晶形式被包含在本发明中。 此外, 本发明中的式 I化合物也可以和溶剂形成溶剂合物, 如和水形成水合物, 或者与 有机溶剂形成有机溶剂合物, 这些水合物和有机溶剂合物也被包含在本发明 中。

本发明的化合物可能含有不对称原子, 尤其是手性碳原子, 所有因此而产生的立体 异构体 (包括纯立体异构体, 或者由各种比例的立体异构体组成的混合物) 均被视为本 发明的一部分。

本发明中的化合物 I可按下述任一方法制备:

(一) 各基团定义同前述化合物 I中所述, 但 R 2 为氢, 取代氨基取代的 烷氧 基, 或者 C^Cs烷氧基取代的 C^Cs烷氧基; R 3 为氢、 C3的烷氧基, C^Cs的烷氧基 取代的 C^Ce烷氧基, 或者 R 3 为取代氨基取代的 C^Ce烷氧基, 且其中取代氨基上的取 代基不包含 (羟基取代的) C^Ce烷基; 将化合物 Q和化合物 II进行縮合反应即可, 力口 入酸性或者碱性催化剂可以加速反应进程;

Q

其中, X为卤素, 如 CI或 Br。 Y为 RuNH -, R u 的定义同前所述。 所述的縮合反应 的方法和条件均为此类反应的常规方法和条件 。 化合物 Q可市售得到或通过现有技术制

(二) 各基团定义同前述化合物 I中所述, 但 R 2 为氢, 取代氨基取代的 烷氧 基, 或者 C^Cs烷氧基取代的 C^Cs烷氧基; R 3 为氢、 C3的烷氧基, C6的烷氧基 取代的 C^Ce烷氧基, 或者 R 3 为取代氨基取代的 C^Ce烷氧基, 且其中取代氨基上的取 代基不包含 (羟基取代的) C^Ce烷基; 将化合物 Q'和化合物 R R la NH进行成脲反应即 可, 具体方法为异氰酸酯法或者氨基甲酸酯

Q'

化合物 Q'和化合物 R R la NH可市售得到或通过现有技术制得。

(三) 各基团定义同前述化合物 I中所述, 但 R 3 为氨基或取代氨基取代的 〜^烷 氧基, 其中取代氨基上的取代基与所述氨基氮一起环 合形成 4〜9元饱和杂环, 环中额外 包含氮原子, 该氮原子上由 (羟基取代的) C^Ce烷基取代; 或者所述取代氨基上的取代 基为 (羟基取代的) C^Cs烷基和 /或 C^Cs烷基; 将化合物 Π' 和氨或取代的氨进行亲 核取代反应, 即可;

其中, 所述的取代的氨中的取代基与前述化合物 I中 R 3 中取代的氨基中的取代基相 同, X, 为离去基团 (如氯), n为 1〜6, 表示括号内包含的碳原子数为 1〜6。 所述的亲核 取代反应的方法和条件均可为此类反应的常规 方法和条件。

化合物 Π'可通过下述合成路线制得:

ΙΓ"

(四) 各基团定义同前述化合物 I中所述, 但 R 2 为取代的 C 6 〜C 1Q 芳基或者取代的 C 3 〜C 9 杂芳基,取代基为(连接 烷基磺酰基的 烷基氨基)取代的 烷基; 将化合物 5和化合物 4进行铃木(Suzuki )偶联反应, 得到化合物 3, 再根据目标产物中 的不同 R 2 取代基, 将化合物 3和相应的连接 C^ 烷基磺酰基的 C^ 烷基氨进行还原 胺化反应, 即可; 或者, 将化合物 5和化合物 6进行铃木 (Suzuki) 偶联反应, 即可, 其中各基团定 义同前述化合物 I中所述, 但 为取代的 C 6 〜C 1Q 芳基或者取代的 C 3 〜C 9 杂芳基, 取代基 为除 (连接 烷基磺酰基的 烷基氨基) 取代的 烷基外的取代基。

其中, 所述的铃木 (Suzuki) 偶联反应和还原胺化反应的方法和条件均为本 领域这 两类反应的常规方法和条件。 化合物 4 中的。表示取代或未取代的芳基、 或取代或未 取代的杂芳基。 化合物 4、 5和 6可市售得到或通过现有技术制得。

根据本发明公开的上述制备方法, 本领域技术人员可采用与之相同的原理和方法 , 制得本发明的通式化合物 I中涉及的各具体化合物。

将本发明中的化合物 I的制备方法举例如下:

一、 Ia、 Ib、 Ic、 Id和 Ie系列化合物的合成

制备 Ia、 Ib、 Ic、 Id和 Ie系列化合物的最后一步反应为: 由表 1中所示的 5种喹唑 啉母核 Q与侧链脲 U (即通式化合物 Π, Υ为 R u NH-, R n 的定义同前所述) 进行縮合 反应, 制备目标化合物。 通过添加酸性或者碱性催化剂可以加速该縮合 反应。

注: Q可以是碱基或者盐酸盐

侧链脲 U (即通式化合物 Π, Y为 R u NH-, R u 的定义同前所述), 其分子结构特征 为含有芳香氨基的 Ν,Ν'-双

II

其中, Y为 RuNH -, R u 的定义同前所述; 、 R la 、 、 R 7 、 R 8 和 R 9 的定义同前; 脲侧链可以连接在 2'、 3'或 4'位。 表 2列举了侧链脲 U的一些实例化合物。

表 2 侧链脲 U举例

喹唑啉母核 Q的制备方法可如下所述:

Ql按照文献(GildayJP等. WO2004024703A1; 刁圆圆等. 中国医药工业杂志, 2008, 39(6):401-403) 制备。

Q2的制备: 3-吗啉基丙 -1-醇与 60%氢化钠作用成钠盐, 再与 7-氟喹唑啉 -4(3H)-酮 縮合得到 Q2T, 在 DMF催化下经氯化亚砜氯化得到 Q2盐酸盐。 3-吗啉基丙 -1-醇按照 文献制备 (?16? 等. /0^ /0/^^¾ / (/^^«^ ,2004,47(4):871-887) 。 7-氟喹唑啉 -4(3H-S由 2-氨基 -4-氟苯甲酸与甲酰胺环合得到。

反应条件: (a) HCONH 2 , 150°C; (b) 3-吗啉基丙 -1-醇, 60% NaH, DMF; (c) SOCl 2 , DME 回流.

Q3的制备: 3-(4-甲基哌嗪 -1-基)丙 -1-醇与 60%氢化钠作用成钠盐, 再与 7-氟喹唑 啉 -4(3H)-酮縮合得到 Q3T, 在 DMF催化下经氯化亚砜氯化得到 Q3盐酸盐。 3-(4-甲基哌 嗪 -1-基 -1-醇按照文献 (Herz T等. US2006142570A1 ) 制备。

反应条件: (a) 3-(4-甲基哌嗪 -1-基)丙 -1-醇, 60% NaH, DMF; (b) S0C1 2 , DMF, 回流. Q4的制备:(1-甲基哌啶 -4-基)甲醇与 60%氢化钠作用成钠盐,再与 7-氟喹唑啉 -4(3H)- 酮縮合得到 Q4T, 在 DMF催化下经氯化亚砜氯化得到 Q4盐酸盐。 (1-甲基哌啶 -4-基) 甲醇为市售。

反应条件: (a) (1-甲基哌啶 -4-基)甲醇, 60% NaH, DMF; (b) S0C1 2 , DMF, 回流.

Q5为市售。

二、 If系列化合物的制备

If系列化合物的制备采用如下所示合成路线。 7-氟喹唑啉 1,3-丙二醇在氢 化钠存在下 0-烷基化得到中间体 7, 再经 DMF催化的氯化亚砜氯化得到双氯化物 8, 再 在氯化氢的异丙醇溶液中与侧链脲 U回流縮合, 最后在 N-甲基吡咯烷酮(NMP)中与各 种含有羟基的胺 A分别縮合得到 If系列化合物。

反应条件: (a) 1,3-丙二醇, 60% NaH; (b) S0C1 2 , DMF; (c)侧链 U, HC1异丙醇溶液,回 流; (d)AH, NMP, 50°C .其中, A的定义同前所述。

因此, 本发明还涉及下述中间体化合物: 1-(3-氯 -4-氟苯基 )-3-(3-(7-(3-氯丙氧基)喹唑 啉 -4-基胺基)苯基)脲 (D52-l-0)、

1-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基) -3-(3-(7-(3-氯丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲(D52-3-0)、 1-(3-(7-(3-氯丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基) -3-(3-氟苯基)脲 (D52-9-0)、

1- (3-(7-(3-氯丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基) -3-(5-甲基异恶唑 -3-基)脲 (D52-20-0)、 或者 1- H7-C3-氯丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基) -3-(4- (吡咯烷 -1-基)丁基)脲

三、 Ig系列化合物的制备

Ig系列化合物的制备采用如下所示合成路线:

2-氨基 -5-碘苄腈与 N,N-二甲基甲酰胺二甲縮醛 (DMFOMA) 縮合后, 再与侧链脲 U进行 Dimroth重排得到化合物 III, 再与 5-甲酰基呋喃 -2-硼酸进行铃木 (Suzuki) 偶联 反应, 最后与 2- (甲砜基)乙胺进行还原胺化得到 Ig系列化合物目标化合物。 中间体 III也 可以由 -氯 -6-碘喹唑啉与侧链脲 U在氯化氢的异丙醇溶液中回流下縮合得到其 酸盐。

反应条件: (a) DMF DMA, 回流; 侧链 U, HOAc, 回流;(c) 侧链 U, HC1异丙醇溶 液, 回流;(d) 5-甲酰基呋喃 -2-硼酸, Pd/C, Et 3 N,DME-MeOH, 50 °C; (e) 2- (甲砜基)乙胺, 然 后 NaBH(OAc) 3 , THF, 室温。

因此, 本发明还涉及下列制备化合物 I的任一中间体化合物:

1-(3-氯 -4-氟苯基 )-3-(3-(6-碘喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲盐酸盐 (L-3-1 )、

1-(3-氯 -4-氟苯基 )-3-(3-(6-(5-甲酰基呋喃 -2-基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲 (L-4-l )、 1-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基) -3-(3-(6-碘喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲 (L-3-3 )、

1-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基) -3-(3-(6-(5-甲酰基呋喃 -2-基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲 (L-4-3 )

1-(3,5-二 (三氟甲基)苯基) -3-(3-(6-碘喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲盐酸盐 (L-3-14)、 l-(3,5-二(三氟甲基)苯基) -3-(3-(6-(5-甲酰基呋喃 -2-基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲 (L-4-14)、

1-(2,5-二氟苯基) -3-(3-(6-碘喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲盐酸盐 (L-3-15 )、

1-(2,5-二氟苯基) -3-(3-(6-(5-甲酰基呋喃 -2-基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲 (L-4-15 )、 ^2-甲基 -5-氟苯基 )-3-(3-(6-碘喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲盐酸盐 (L-3-16)、 或者 1-(2-甲基 -5-氟苯基 )-3-(3-(6-(5-甲酰基呋喃 -2-基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲 四、 侧链脲 U的制备

侧链脲 U (即通式化合物 Π, Y为 RuNH-, R u 的定义同前所述) 的分子结构特征为 含有芳香氨基的 Ν,Ν'-双取代脲。

因此, 本发明还涉及具

其中, Υ为 RuNH-或硝基, Ru的定义同前所述; 、 R la 、 、 R 7 、 R 8 和 R 9 的定 义同前; 脲侧链可以连接在 2'、 3'或 4'位。

较佳的, 通式 Π 化合物为如下结构: 1-(3-氨基苯基) -3-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基)脲 (J-3 )、 1-(4-氨基苯基) -3-(3-氰基苯基)脲(P-4)、 1-(3-氨基苯基) -3-(3-氰基苯基)脲(J-4)、 1- 3-氨基苯基 H3-氟苯基)脲(J-9)、 N-C3-氨基苯基)吗啉 -4-甲酰胺(J-12)、 1-(3-氨基苯 基) -3-甲基苯基脲 (J-13 )、 1-(3-氨基苯基) -3- (3,5-二 (三氟甲基)苯基)脲 (J-14)、 1-(3-氨 基苯基) -3-(2,5-二氟苯基)脲(J-15 )、 1-(3-氨基苯基) -3-(2-甲基 -5-氟苯基)脲(J-16)、 1-(4- 氨基苯基) -3- (噻唑 -2-基)脲 (P-17)、 1-(3-氨基苯基) -3- (噻唑 -2-基)脲 (J-17)、 1-(4-氨基苯 基) -3-(4- (;吡咯烷 -1-基)丁基)脲(P-18 )、 1-(3-氨基苯基) -3-(4- (;吡咯烷 -1-基)丁基)脲(J-18)、 1-异丁基 -3-(4-氨基苯基)脲 (P-19)、 1-异丁基 -3- 3-氨基苯基)脲 (J-19)、 1-(3-氯 -4-氟苯 基) -3-(3-硝基苯基)脲 (JX-1 )、 1-(3-硝基苯基) -3-(3-氰基苯基)脲 (JX-4)、 N-(3-硝基苯基) 吗啉—4-甲酰胺 (JX-12 )、 1-(3-硝基苯基) -3-(2-甲基 -5-氟苯基)脲 (JX-16 )、 1-(3-硝基苯 基) -3- (噻唑 -2-基)脲 (JX-17)、 1-(3-硝基苯基) -3-(4- (吡咯烷 -1-基)丁基)脲 (JX-18 )、 1-异 丁基—3-(3-硝基苯基)脲 (JX-19)。 制备化合物 π的方法可以分为异氰酸酯法和氨基甲酸酯法 类。

首先介绍采用异氰酸酯法制备化合物 π。

传统的异氰酸酯合成以光气法为主。光气为剧 毒气体, 难以贮藏和运输, 而且通光气 过程污染严重, 给环保和劳保都带来巨大压力。 本发明提供了一种使用碳酸双 (三氯甲 基) 酯 (以下简称三光气) 一锅法制备通式 Π (1^为11) 所示 Ν,Ν'-双取代脲的简便方 法。

因此本发明进一步涉及上述通式化合物 Π的制备方法,其为下述方法中的任意一种: 方法一: 首先将化合物 V和三光气在叔胺存在下反应生成相应的异氰 酯 IV, 然后 在一锅法条件下直接和化合物 VI或 VI'在叔胺存在下进行成脲反应, 得到中间体化合物

II; 其中, 各基团的定义同前所述, 但 R la 为 Η; 合成路线如

1 1 (Y为硝基:

l l (Y为 R NH)

方法二: 首先将化合物 VI和三光气在叔胺存在下反应生成相应的异氰 酯 VII, 然 后在一锅法条件下直接和化合物 V在叔胺存在下进行成脲反应, 得到中间体化合物 Π; 其中, 各基团的定 I!

VI VII I I (Y为硝基: 方法一中, 本发明特别优选下述方法和条件: 溶剂中, 首先在叔胺的存在下将化合 物 V和三光气反应生成相应的异氰酸酯 IV, 然后在一锅法条件下直接和化合物 VI或 VI' 在叔胺存在下进行成脲反应, 得到中间体化合物 II。 其中, 所述的溶剂较佳的为对异氰酸酯惰性的有机溶 剂, 可以是烃 (如甲苯、 二甲 苯、 二氯甲烷或氯苯等)、 醚 (如四氢呋喃、 2-甲基四氢呋喃、 甲基叔丁基醚或二甲氧基 乙烷等)、 酮 (如甲基乙基酮或甲基异丁基酮等)和酯 (如乙酸乙酯或乙酸异丁酯等) 中 的一种或多种, 优选 2-甲基四氢呋喃、 二氯甲烷和乙酸乙酯中的一种或多种。 所述的叔 胺为氨中氮上的三个氢全部被取代后形成的化 合物, 其中与氮相连的碳原子和氮可形成 单键或双键, 所述叔胺较佳的包括吡啶、 三乙胺、 二异丙基乙基胺、 N-甲基吗啉、 咪唑 和二甲基氨基吡啶中的一种或多种。 在所述的生成异氰酸酯的反应中, 三光气和化合物 V的投料摩尔比较佳的为 0.3〜2:1, 优选 0.33〜1 :1, 更优选 0.35〜0.5:1; 反应温度较佳的为 -5 °C到反应溶剂的回流温度, 优选 0〜50°C, 更优选 20〜40°C ; 化合物 V与叔胺的投料摩 尔比较佳的为 1 :1〜6, 优选 1 :1〜3, 更优选 1 :1〜1.5。 在所述的成脲反应中, 反应温度较佳 的为 10°C到反应溶剂的回流温度, 优选 15〜60°C, 更优选 20〜50°C ; 化合物 VI或 VI' 与 叔胺的投料摩尔比较佳的为 1 : 1〜6, 优选 1 : 1〜3, 更优选 1 : 1〜1.5。 化合物 V与化合 物 VI或 VI'的投料摩尔比较佳的为 1 : 0.6-3, 优选 1 : 0.8-2, 更优选 1 : 0.9〜1.2。

方法二中, 本发明特别优选下述方法和条件: 溶剂中, 首先在叔胺的存在下, 将化 合物 VI和三光气反应生成相应的异氰酸酯 VII, 然后在一锅法条件下直接和化合物 V在 叔胺的存在下进行成脲反应, 得到中间体化合物 II。

其中, 所述的溶剂较佳的为对异氰酸酯惰性的有机溶 剂, 可以是烃 (如甲苯、 二甲 苯、 二氯甲烷或氯苯等)、 醚 (如四氢呋喃、 2-甲基四氢呋喃、 甲基叔丁基醚或二甲氧基 乙烷等)、 酮 (如甲基乙基酮或甲基异丁基酮等)和酯 (如乙酸乙酯或乙酸异丁酯等) 中 的一种或多种, 优选 2-甲基四氢呋喃、 二氯甲烷和乙酸乙酯中的一种或多种。 所述的叔 胺为氨中氮上的三个氢全部被取代后形成的化 合物, 其中与氮相连的碳原子和氮可形成 单键或双键, 所述叔胺较佳的包括吡啶、 三乙胺、 二异丙基乙基胺、 N-甲基吗啉、 咪唑 和二甲基氨基吡啶中的一种或多种。 在所述的生成异氰酸酯的反应中, 三光气和化合物 VI的投料摩尔比较佳的为 0.3〜2:1, 优选 0.33〜1 :1, 更优选 0.35〜0.5:1; 反应温度较佳的 为 -5 °C到反应溶剂的回流温度, 优选 0〜50°C, 更优选 20〜40°C ; 化合物 VI与叔胺的投料 摩尔比较佳的为 1 :1〜6, 优选 1 :1〜3, 更优选 1 :1〜1.5。 在所述的成脲反应中, 反应温度较 佳的为 10°C到反应溶剂的回流温度, 优选 15〜60°C, 更优选 20〜50°C ; 化合物 V与叔胺 的投料摩尔比较佳的为 1 : 1〜6, 优选 1 : 1〜3, 更优选 1 : 1〜1.5。 化合物 VI与化合物 V 的投料摩尔比较佳的为 1 : 0.6-3, 优选 1 : 0.8-2, 更优选 1 : 0.9〜1.2。

上述方法一和方法二中, 化合物 Π (Y为硝基) 可以通过本领域常规的还原硝基的 方法得到化合物 Π (Υ为氨基)。

上述方法一和方法二可以进一步详细描述如下 :

本发明的制备方法分为两个阶段。 第一阶段: 首先将三光气溶于适宜的溶剂中, 然 后加入第一种胺 R r NH 2 (V) 与一种叔胺在一种适宜的溶剂中的溶液, 反应得到含有第 一种胺相应的异氰酸酯 (IV) 的溶液, 无需分离纯化; 第二阶段: 向第一阶段所得反应 液中, 加入第二种胺 VI (如 3-硝基苯胺、 4-硝基苯胺) 或者 VI' (如 1,4-对苯二胺) 与一 种叔胺在适宜的溶剂中的溶液, 得到 Ν,Ν'-双取代脲 Π。 II (Υ为硝基) 经还原得到 II (Υ 为氨基)。 合成路线见前。

在第一阶段中, 三光气和第一种胺 RrNH 2 ( V) 的投料摩尔比为 0.3〜2:1, 优选 0.33〜1 :1, 更优选 0.35〜0.5:1, 第一种胺 R r NH 2 (V)与叔胺的投料摩尔比可为 1 :1〜6, 优 选 1 :1〜3, 更优选 1 :1〜1.5。所述适宜的溶剂为对异氰酸酯惰性的 机溶剂, 可以是烃(甲 苯、 二甲苯、 二氯甲烷、 氯苯等)、 醚 (四氢呋喃、 2-甲基四氢呋喃、 甲基叔丁基醚、 二 甲氧基乙烷等)、 酮 (甲基乙基酮、 甲基异丁基酮等)、 酯 (乙酸乙酯、 乙酸异丁酯等), 或者其混合物。 优选 2-甲基四氢呋喃、 二氯甲烷、 乙酸乙酯, 或者其混合物。 所述叔胺, 包括吡啶、 三乙胺、 二异丙基乙基胺、 N-甲基吗啉、 咪唑、 二甲基氨基吡啶及其混合物。 反应温度可为 -5 °C到反应溶剂的回流温度, 优选 0〜50°C, 更优选 20〜40°C。

在第二阶段中, 所述适宜的溶剂和叔胺同第一阶段。 反应温度可为 10°C到反应溶剂 的回流温度, 优选 15〜60°C, 更优选 20〜50°C。 第一阶段第一种胺 (V) 与第二阶段第二 种胺 (VI或 VI' ) 的投料摩尔比可为 1 : 0.6-3, 优选 1 : 0.8-2, 更优选 1 : 0.9〜1.2。 第 二种胺 (VI或 VI' ) 与叔胺的投料摩尔比可为 1 : 1〜6, 优选 1 : 1〜3, 更优选 1 : 1〜1.5。

本发明的 Ν,Ν'-双取代脲 (Π) 制备方法也可以采用另外一种投料顺序。 第一阶段: 首先将三光气溶于适宜的溶剂中, 然后加入第二种胺 (如 3-硝基苯胺、 4-硝基苯胺) 与 一种叔胺在一种适宜的溶剂中的溶液, 反应得到含有第二种胺相应的异氰酸酯的溶液 , 无需分离纯化; 第二阶段: 向第一阶段所得反应液中, 加入第一种胺与一种叔胺在适宜 的溶剂中的溶液, 反应得到 Ν,Ν'-双取代脲 (11)。 合成路线见前。

本合成工艺操作简便, 反应时间短, 无需分离反应性中间体, 无需特殊设备和条件, 收率高。 所采用的三光气为结晶性的稳定的光气替代品 (熔点 80°C, 沸点 206°C ; 即便 在沸腾时也只有少量降解为光气),易于运输 和储藏,便于计量(Eckert H等. Angewandte Chemie-lnternational Edition in English, 1 987, 26(9) :894-895), 具有安全绿色易得的优 点。 所制备的 Ν,Ν'-双取代脲 (Π) (Υ为硝基), 可以通过还原硝基为氨基, 得到相应的 侧链脲 U (II, Υ为氨基)。 还原方法可以是任何适用方法, 包括催化氢化、 催化转移氢 化、 化学还原 (如铁粉 /氯化铵、 锌粉 /冰乙酸等) 等。

另外, 上述中间体化合物 II也可通过下述的氨基甲酸酯法制得。 该方法可举例如下:

首先, 使化合物 VI (如 3-硝基苯胺、 4-硝基苯胺) 酸酯类 (如氯甲酸 4-硝基 苯酯、 氯甲酸苯酯) 反应生成相应的胺基甲酸酯, 再与 ( R 、 R la 的定义同通式化 合物 I)縮合得到含有硝基的不对称脲, 最后还原硝基得到所需侧链脲 U (11, Y为氨基)。 以 -12的制备

本发明还涉及制备上述式 I化合物的中间体化合物 Ν 1 - (7-甲氧基 -6- (3-吗啉基丙氧 基) 喹唑啉—4-基) 苯 -1,4-二胺 (制备 D1-20 的中间体)、 7-(3-氯丙氧基) -Ν-(3-硝基苯)喹 唑啉 -4-胺 (制备 D52-20-4 的中间体)、 或者 Ν^ΟΟ氯丙氧基)喹唑啉 -4-基)苯 -1,3-二胺 (制备 D52-20-4的中间体)。

本发明还涉及上述式 I化合物或其药学上可接受的盐、 多晶型物、 溶剂合物或立体 异构体在制备治疗哺乳动物特别是人的与蛋白 激酶介导的信号转导通路失调, 或者异常 血管新生相关的疾病的药物中的应用。 所述的疾病包括但不限于肿瘤、 糖尿病、 自身免 疫性疾病、 神经退行性疾病、 糖尿病性视网膜病、 老年性黄斑退化、 动脉硬化、 银屑病 和炎症。 所述的肿瘤包括但不限于皮肤、 脑部、 肺部、 淋巴细胞、 肾脏、 肝脏、 胃、 结 肠、 直肠、 膀胱、 头部、 颈部、 乳腺、 甲状腺、 食管、 胰腺、 前列腺以及妇产科的肿瘤, 以及恶性血液病 (如白血病)。

所述的蛋白激酶包括酪氨酸激酶和丝氨酸 /苏氨酸激酶, 以及前述激酶的各种突变 型。其中,所述的酪氨酸激酶较佳的为 EGFR、 HER-2、 VEGFR-1、 VEGFR-2、 VEGFR-3 PDGFR a、 PDGFR β、 c-KIT、 CSF1R、 FLT-3、 c-MET、 TIE-2、 SRC、 LCK、 FYN 或 HCK; 所述的丝氨酸 /苏氨酸激酶较佳的为 BRAF、 CRAF、 Aurora A或 Aurora B; 所述 的突变型激酶较佳的为 BRAF V600E。 本发明涉及上述化合物 I或其药学上可接受的盐、 多晶型物、 溶剂合物或立体异构 体在制备具有人肿瘤异种移植瘤抑制活性的药 物中的应用。 其中, 所述的人肿瘤异种移 植瘤较佳的为移植于裸鼠的 A549人肺癌。

本发明还涉及上述化合物 I或其药学上可接受的盐、 多晶型物、 溶剂合物或立体异 构体在制备具有 A549 人肺癌细胞、 HCT116 人肠癌细胞、 CEM 人白血病细胞或 MCA-MB-435人黑色素瘤细胞抑制活性的药物中的 用。

本发明还涉及所述的化合物 I或其药学上可接受的盐、 多晶型物、 溶剂合物或立体 异构体在制备具有人脐静脉内皮细胞 (HUVEC) 抑制活性的药物中的应用。

本发明的芳基脲类式 I化合物或其药学上可接受的盐、 多晶型物、 溶剂合物或立体 异构体可与药学上可接受的载体制成各种形式 的药物组合物。 所述药学上可接受的载体 包括但不限于各种常用药用辅料 (如稀释剂、 润滑剂、 崩解剂、 粘合剂和赋形剂等)。 根 据治疗目的, 可将药物组合物制成各种类型的给药单位剂型 , 如片剂、 胶囊剂、 丸剂、 粉剂、 溶液剂、 悬浮液、 乳液剂、 乳膏剂、 糖浆剂、 颗粒剂、 栓剂和注射剂 (溶液及悬 浮液) 等。

为了使片剂形式的药物组合物成形,可使用本 领域任何已知的并广泛使用的赋形剂。 例如, 载体, 如乳糖、 白糖、 氯化钠、 葡萄糖、 尿素、 淀粉、 碳酸钙、 高岭土、 结晶纤 维素和硅酸等; 粘合剂, 如水、 乙醇、 丙醇、 普通糖浆、 葡萄糖溶液、 淀粉溶液、 明教 溶液, 羧甲基纤维素、 紫胶、 甲基纤维素和磷酸钾、 聚乙烯吡咯烷酮等; 崩解剂, 如干 淀粉、 藻酸钠、 琼脂粉和海带粉, 碳酸氢钠、 碳酸钙、 聚乙烯脱水山梨醇的脂肪酸酯、 十二烷基硫酸钠、 硬脂酸单甘酯、 淀粉和乳糖等; 崩解抑制剂, 如白糖、 甘油三硬脂酸 酯、 椰子油和氢化油; 吸附促进剂, 如季胺碱和十二烷基硫酸钠等; 润湿剂, 如甘油、 淀粉等; 吸附剂, 如淀粉、 乳糖、 高岭土、 膨润土和胶体硅酸等; 以及润滑剂, 如纯净 的滑石, 硬脂酸盐、 硼酸粉和聚乙二醇等。 如果需要的话, 还可以用通常的涂渍材料使 片剂作为糖衣片剂、 涂明胶膜片剂、 肠衣片剂、 涂膜片剂、 双层膜片剂及多层片剂。

为了使丸剂形式的药物组合物成形,可使用本 领域任何已知的并广泛使用的赋性剂, 例如, 载体, 如乳糖, 淀粉, 椰子油, 硬化植物油, 高岭土和滑石等; 粘合剂, 如阿拉 伯树胶粉, 黄著胶粉, 明胶和乙醇等; 崩解剂, 如琼脂和海带粉等。

为了使栓剂形式的药物组合物成形, 可使用本领域任何已知并广泛使用的赋性剂, 例如, 聚乙二醇, 椰子油, 高级醇, 高级醇的酯, 明胶和半合成的甘油酯等。

为了制备注射剂形式的药物组合物, 可将溶液和悬浮液消毒, 并最好加入适量的氯 化钠, 葡萄糖或甘油等, 制成与血液等渗压的针剂。 在制备针剂时, 也可使用本领域内 任何常用的载体。 例如, 水, 乙醇, 丙二醇, 乙氧基化的异硬脂醇, 聚氧基化的异硬脂 醇和聚乙烯脱水山梨醇的脂肪酸酯等。 此外, 还可加入通常的溶解剂、 缓冲剂和止痛剂 等。 根据需要, 在治疗精神分裂症期间, 也可加入着色剂、 防腐剂、 香料、 调味剂、 香 化剂和其它药物等。

本发明的如式 I所示的化合物及其药学上可接受的盐在药物 合物中的含量无特殊 限制, 可在很宽的范围内进行选择, 通常可为质量百分比 1〜70%, 较佳的为质量百分比 1〜30%。

本发明中, 所述的药物组合物的给药方法没有特殊限制。 可根据病人年龄、 性别和 其它条件及症状, 选择各种剂型的制剂给药。 例如, 片剂、 丸剂、 溶液、 悬浮液、 乳液、 颗粒剂和胶囊是口服给药; 栓剂为给药到直肠; 注射剂可以单独给药, 或者和注射用输 送液 (如生理盐水、 葡萄糖溶液及氨基酸溶液) 混合进行静脉注射, 如有必要可以单纯 用注射剂进行肌肉、 皮内、 皮下或腹内注射。

因此, 本发明还涉及包含上述芳基脲类化合物 I或其药学上可接受的盐、 多晶型物、 溶剂合物或立体异构体的药物组合物。

除非另有说明, 在本发明说明书和权利要求书中出现的以下术 语具有下述含义: 在此使用的 "烷基"意指包括具有指定碳原子数目的直链和 链的饱和脂族烃基。 例如, "d-do烷基"的定义为包括在直链或者支链结构中 具有 1、 2、 3、 4、 5、 6、 7、 8、 9或者 10个碳原子的基团。例如, "d-do烷基"具体包括甲基、 乙基、正丙基、异丙基、 正丁基、 异丁基、 仲丁基、 叔丁基、 正戊基、 2-甲基戊基、 正己基、 正庚基、 正辛基、 正壬基和正癸基等等。

术语"环烷基 "是指饱和或者部分不饱和单环、多环或者桥 碳环取代基。具有 3-20 个碳原子的环可以表示为 C 3 -C 2 。环烷基;具有 5-15个碳原子的环可以表示为 C 5 -C 15 环烷 基;具有 3-8个碳原子的环可以表示为 C 3 -C 8 环烷基,等等。该术语包括但不限于环丙 基、 环丁基、 环戊基、 环己基、 环庚基、 环辛基、 1H-茚基、 2,3-二氢化茚基、 1,2,3,4-四氢- 萘基、 5,6,7,8-四氢-萘基、 8,9-二氢 -7H-苯并环庚烯 -6-基、 6,7,8,9-四氢 -5H-苯并环庚烯基、 5,6,7,8,9,10-六氢-苯并环辛烯基、 芴基、 二环 [2.2.1]庚基、 二环 [2.2.1]庚烯基、 二环 [2.2.2] 辛基、 二环 [3.1.1]庚基、 二环 [3.2.1]辛基、 二环 [2.2.2]辛烯基、 二环 [3.2.1]辛烯基、 金刚烷 基、 八氢 -4,7-亚甲基 -1H-茚基和八氢 -2,5-亚甲基-并环戊二烯基等等。 环烷基取代基可以 经任何适宜的碳原子连接在中心分子上, 并且当允许时可以对其进行进一步取代。 术语 "烷氧基"表示通过氧桥连接的具有所述碳原子 目的环状或者非环状烷基。 由此, "烷氧基"包含以上烷基和环烷基的定义。

术语 "烯基"是指含有指定数目碳原子和至少一个碳 双键的直链、 支链或者环状 非芳香烃基。 优选存在一个碳碳双键, 并且可以存在高达四个非芳香碳碳双键。 由此,

"C 2 -C 1Q 烯基"是指具有 2-10个碳原子的烯基。 "C 2 -C 6 烯基"是指具有 2-6个碳原子的 烯基, 包括乙烯基、 丙烯基、 丁烯基、 2-甲基丁烯基和环己烯基。 烯基的直链、 支链或 者环部分可以含有双键, 并且如果表明为取代烯基, 那么可以被取代。

术语 "块基"是指含有指定数目碳原子和至少一个碳 三键的直链、 支链或者环状 烃基。其中可以存在高达三个碳碳三键。 由此, "C 2 -C 1() 块基"是指具有 2-10个碳原子的 块基。 "C 2 -C 6 块基"是指具有 2-6个碳原子的块基, 包括乙块基、 丙块基、 丁块基和 3- 甲基丁块基等等。

在此使用的 "芳基"是指任何稳定的在各环中可包含高达 7个原子的单环、 双环或 者三环碳环, 其中至少一个环是芳香环。 上述芳基单元的实例包括苯基、 萘基、 四氢萘 基、 2,3-二氢化茚基、 联苯基、 菲基、 蒽基或者苊基 (a Cena phthyl)。 可以理解, 在芳基 取代基是二环取代基, 且其中一个环是非芳香环的情况中, 连接是通过芳环进行的。

在此使用的术语 "杂芳基"表示各环中可高达 7个原子的稳定单环、 双环或者三环, 其中至少一个环是芳香环并且含有 1-4个选自 0、 N、 和 S的杂原子。在此定义范围内的 杂芳基包括但不限于: 吖啶基、 咔唑基、 噌啉基、 喹喔啉基、 吡唑基、 吲哚基、 苯并三 唑基、 呋喃基、 噻吩基、 苯并噻吩基、 苯并呋喃基、 喹啉基、 异喹啉基、 噁唑基、 异噁 唑基、 吲哚基、 吡嗪基、 哒嗪基、 吡啶基、 嘧啶基、 吡咯基、 四氢喹啉。 正如以下杂环 的定义一样, "杂芳基"还应当理解为包括任何含氮杂芳基的 N-氧化物衍生物。 在其中 杂芳基取代基是二环取代基并且一个环是非芳 香环或者不包含杂原子的情况下, 可以理 解, 连接分别通过芳环或者通过包含环的杂原子进 行。

在此使用的术语 "杂环"或者 "杂环基"表示含有 1-4个选自 0、 N和 S的杂原子 的 5-10元芳香或者非芳香杂环, 并且包括二环基团。 因此, "杂环基"包括上述杂芳基 以及其二氢或者四氢类似物。 "杂环基"的其它实例包括但不限于以下: 苯并咪唑基、 苯 并呋喃基、 苯并呋咱基、 苯并吡唑基、 苯并三唑基、 苯并噻吩基、 苯并噁唑基、 咔唑基、 咔啉基、 噌啉基、 呋喃基、 咪唑基、 二氢吲哚基、 吲哚基、 吲唑基、 异苯并呋喃基、 异 氮杂茚基、 异喹啉基、 异噻唑基、 异噁唑基、 萘嘧啶基、 噁二唑基、 噁唑基、 噁唑啉、 异噁唑啉、 氧环丁基、 吡喃基、 吡嗪基、 吡唑基、 哒嗪基、 吡啶并吡啶基、 哒嗪基、 吡 啶基、 嘧啶基、 吡咯基、 喹唑啉基、 喹啉基、 喹喔啉基、 四氢吡喃基、 四唑基、 四唑并 吡啶基、 噻二唑基、 噻唑基、 噻吩基、 三唑基、 氮杂环丁烷基、 1,4-二噁烷基、 六氢氮杂 草基、 哌嗪基、 哌啶基、 吡咯烷基、 吗啉基、 硫代吗啉基、 二氢苯并咪唑基、 二氢苯并 呋喃基、 二氢苯并噻吩基、 二氢苯并噁唑基、 二氢呋喃基、 二氢咪唑基、 二氢吲哚基、 二氢异噁唑基、 二氢异噻唑基、 二氢噁二唑基、 二氢噁唑基、 二氢吡嗪基、 二氢吡唑基、 二氢吡啶基、 二氢嘧啶基、 二氢吡咯基、 二氢喹啉基、 二氢四唑基、 二氢噻二唑基、 二 氢噻唑基、 二氢噻吩基、 二氢三唑基、 二氢氮杂环丁烷基、 亚甲基二氧基苯甲酰基、 四 氢呋喃基和四氢噻吩基及其 N-氧化物。杂环基取代基可以经碳原子或者杂 子进行连接。

术语 "卤素"表示氟、 氯、 溴、 碘、 砹。

术语 "卤代烷基"表示卤素任意位置取代的烷基。 由此, "卤代烷基"包含以上卤素 和烷基的定义。

术语 "饱和杂环基" 表示含有 1-4个选自 0、 N或 S杂原子的 4-9元非芳香杂环基, 并且包括二环基团, 其中不包含不饱和双键, 饱和杂环基取代基可以经碳原子或者杂原 子进行连接。 其中的氮、 硫杂原子可以被任意氧化, 氮杂原子还可以被任意季胺化。 例 如, 四氢吡咯基、 哌嗪基、 吗啉基、 哌啶基、 四氢呋喃基、 四氢吡喃基、 硫代吗啉基、 四氢咪唑基、 四氢噻唑基、 氧化哌嗪基、 氧化哌啶基、 噻吗啉亚砜、 或噻吗啉砜等等。

本发明中, 在不违背本领域常识的基础上, 上述各优选技术特征可任意组合, 即得 本发明的各较佳实例。

除特殊说明外, 本发明涉及的原料和试剂均市售可得。

本发明的积极进步效果在于: 本发明发现了一类如式 I所示的全新的芳基脲类化合 物, 其具备较强的抗肿瘤细胞生长和抗血管新生活 性, 其对于与多种疾病相关的蛋白激 酶具有较强的抑制活性。 具体实施方式

下面用实施例来进一步说明本发明, 但本发明并不受其限制。

第一部分 化学实施例

核磁共振仪为 Varian公司 INOVA-400, 在 400MHz下测定氢谱; 质谱仪为 Waters 公司 Micromass Q-Tof micro, 电喷雾电离 (ESI)。 元素分析仪为 Thermo SCIENTIFIC FLASH 2000 Organic Elemental Analyzer。

中间体化合物 Π的合成 异氰酸酯法: J系列侧链脲的制备

实施例 1 1-(3-氯 -4-氟苯基 )-3-(3-硝基苯基)脲 (JX-1 )

将三光气(4.40g, 14.8mmol)溶于无水二氯甲烷(80mL)中,在氮气保 和 31〜34°C 下, 滴加 3-氯 -4-氟苯胺 (5.82g, 40mmol) 禾 B DIEA (6.20g, 48mmol) 的无水二氯甲烷 (40mL)溶液,搅拌 0.5h。然后加入 3-硝基苯胺(5.52g, 40mmol)、 DIEA (6.20g, 48mmol) 和无水二氯甲烷(70mL)的混合液, 室温搅拌 lh。所得反应液依次用 10%硫酸氢钾水溶 液、 5%碳酸氢钠水溶液和饱和食盐水洗涤后, 无水硫酸钠干燥, 减压浓縮, 经乙酸乙酯 -石油醚 ( 1: 4) 打浆得到 JX-1 , 为桔黄色固体 ( 10.46g, 84%): 1H-NMR (DMSO-d 6 ) 5 9.24 (s, 1H), 8.98 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 7.73-7.84 (m, 3H), 7.57 (t, J=2.0Hz, 1H), 7.33-7.35 (m,2H)。

实施例 2 l-(3-氯 -4-氟苯基 )-3-(3-氨基苯基)脲 (J-l )

将 JX-1 ( 10.22g, 33mmol)、 经 lmol/L盐酸活化的还原铁粉 (11.06g, 198mmol)、 氯化铵 (1.77g, 33mmol) 投入由 95%乙醇 (450mL)、 THF ( 150mL) 和水 (60mL) 组 成的混合溶剂中搅拌回流 1.5h。 通过硅藻土趁热过滤, 减压浓縮滤液, 加水和乙酸乙酯 溶解所得残留物, 用氨水碱化至 pH为 9。 分取有机层, 水层再用乙酸乙酯提取, 合并有 机相, 无水硫酸钠干燥, 减压浓縮得到近白色结晶性固体 J-l (7.65g, 83%): 1H-NMR

(DMSO-de) δ 8.68 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.78 (dd, J=2.0, 6.8Hz,1H), 7.28 (m, 2H), 6.90 (t, J=8.0Hz, 1H), 6.76 (s, 1H), 6.56 (d, J= 7.6Hz , 1H), 6.22 (d, J= 7.6Hz, 1H), 4.95 (s, 2H)

实施例 3 l-(3-硝基苯基) -3-(3- (三氟甲基) -4-氯苯基)脲 (JX-3 )

将三光气 (2.20g, 7.4mmol)溶于二氯甲烷 (40mL) 中, 在氮气保护和 30〜35°C下, 滴加 3-硝基苯胺 (2.76g, 20mmol) 和 DIEA (3.10g, 24mmol) 在二氯甲烷 (84mL) 中 的混悬液, 滴完后再搅拌 0.5h。 然后加入 3- (三氟甲基) -4-氯苯胺 (3.91g, 20mmol) 和 DIEA (3.10g, 24mmol) 的二氯甲烷 (20mL)溶液, 室温搅拌 lh。 将所得反应液减压浓 縮, 所得残留物用乙酸乙酯溶解后, 依次用 10%硫酸氢钾水溶液、 5%碳酸氢钠水溶液和 饱和食盐水洗涤后, 无水硫酸钠干燥, 减压浓縮, 所得残留物经乙酸乙酯-石油醚(1 : 4) 打浆得到 JX-3, 为黄色固体(6.20g, 86%): 1H-NMR (DMSO-d 6 ) 5 9.33 (s, 1H), 9.27

(s, 1H), 8.51 (t, J=2.0Hz,lH), 8.09 (d, J=2.4Hz, 1H), 7.85-7.86 (m, 1H), 7.83-7.84

(m, 1H), 7.67-7.70 (m, 1H), 7.56-7.63 (m,2H)。

实施例 4 l-(3-氨基苯基 3-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基)脲 (J-3 ) 以 JX-3代替 JX- 1,采用类似于 J- 1的方法制备 J-3,得浅黄色结晶(收率 94% ): 1H-NMR (DMSO-d 6 ) δ 8.97 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.11 (s,1H), 7.58 (d, J=1.6Hz, 2H), 6.90 (t, J=8.0Hz, 1H), 6.80 (t, J=2.0Hz , 1H), 6.54-6.56 (m, 1H), 6.22-6.24 (m, 1H), 4.97 (s, 2H

实施例 5 l-P-硝基苯基) -3-P-氰基苯基)脲 (JX-4)

以 3-氰基苯胺代替 3-氯 -4-氟苯胺, 采用类似于 JX-1的方法制备 JX-4, 得黄色固体 (收率 84%) : 1H-NMR (DMSO-d 6 ) 5 9.32 (s, 1H), 9.12 (s, 1H), 8.53 (m, 1H), 7.96-7.98 (m, 1H), 7.83-7.86 (m, 1H), 7.71-7.76 (m, 2H), 7.56-7.60 (m, 1H), 7.50-7.53 (m, 1H), 7.43-7.46 (m,lH)。

实施例 6 l-P-氨基苯基) -3-P-氰基苯基)脲 (J-4)

以 JX-4代替 JX-1,采用类似于 J-1的方法制备 J-4,得浅黄色固体(收率 62%): 1H-NMR (DMSO-de) 5 8.84 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 7.94 (m, 1H), 7.61-7.64 (m, 1H), 7.44-7.49 (m, 1H), 7.38 (d, J=7.6Hz, 1H), 6.88-6.92 (m, 1H), 6.75 (m, 1H), 6.55-6.57 (m, 1H), 6.22-6.24 (m, 1H), 4.95 (br s, 2H)。

实施例 7 l-(3-硝基苯基) -3-(3-氟苯基)脲 (JX-9)

以 3-氟苯胺代替 3- (三氟甲基) -4-氯苯胺, 采用类似于 JX-3的方法制备 JX-9,得浅黄 色固体 (收率 92%) : 1H-NMR (DMSO-de) 5 9.23 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 8.54 (m, 1H), 7.83-7.86 (m, 1H), 7.73-7.75 (m, 1H), 7.58 (t, J=8.0Hz, 1H), 7.49 (dt, J=2.4, 12Hz,lH), 7.33 (dd, J=7.6, 14.4Hz, 1H), 7.18 (dd, J=1.2, 8.0Hz, 1H), 6.82 (dt, J=2.0, 8.4Hz, lH

实施例 8 l-(3-氨基苯基) -3-(3-氟苯基)脲 (J-9)

以 JX-9代替 JX-1,采用类似于 J-1的方法制备 J-9,得浅黄色固体(收率 95%): 1H-NMR (DMSO-de) 5 8.72 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.46 (dt, J=2.4, 12Hz,1H), 7.24-7.30 (m, 1H), 7.06-7.08 (m, 1H), 6.89 (t, J=8.0Hz, 1H), 6.72-6.77 (m, 1H), 6.54 (ddd, J=0.8, 2.0, 8.0Hz, 1H), 6.19-6.22 (m, 1H), 4.96 (s, 2H)。

实施例 9 1-环己基 -3-(3-硝基苯基)脲 (JX-11 )

以环己胺代替 3-氯 -4-氟苯胺, 采用类似于 JX-1的方法制备 JX-11 , 得浅黄色固体: 1H-NMR (DMSO-dg) δ 8.79 (s, 1H), 8.48-8.49 (m, 1H), 7.71-7.74 (m, 1H), 7.58-7.61 (m, 1H), 7.49 (t, J=8.0Hz, 1H), 4.73 (d, J=7.6Hz, 1H) , 3.46-3.53 (m, 1H), 1.80-1.84 (m, 2H), 1.64-1.69 (m, 2H), 1.52-1.56 (m, 1H), 1.15-1.37 (m, 5H)。 实施例 10 1-环己基 -3-(3-氨基苯基)脲 (J-11 )

以 JX-11代替 JX-1 , 采用类似于 J-1的方法制备 J-11 , 得近白色固体 (收率 86%) : 1H-NMR (DMSO-de) 5 7.91 (s, 1H), 6.82 (t, J=8.0Hz, 1H), 6.66 (t, J=2.0Hz, 1H), 6.48-6.50 (m, 1H), 6.10-6.12 (m, 1H), 5.90 (d, J=7.6Hz, 1H), 4.83 (s, 2H), 3.39-3.44 (m, 1H), 1.77-1.81 (m, 2H), 1.63-1.67 (m, 2H), 1.50-1.54 (m, 1H), 1.10-1.35 (m, 5H)。

实施例 11 l-(3-硝基苯基) -3-甲基苯基脲 (JX-13 )

以 3-甲基苯胺代替 3-氯 -4-氟苯胺, 采用类似于 JX-1的方法制备 JX-13 , 得黄色固体 (收率 87%) : 1H-NMR (DMSO-de) 5 9.18 (s, 1H), 8.72 (s, 1H), 8.55 (m, 1H), 7.80-7.82 (m, 1H), 7.69-7.72 (m, 1H), 7.56 (t, J=8.4Hz, 1H), 7.15-7.32 (m, 3H), 6.83 (d, J=7.2Hz, 1H), 2.29 (s, 3H)。

实施例 12 l-(3-氨基苯基) -3-甲基苯基脲 (J-13 )

以 JX-13 ( 1.71g, 6.3mmol) 代替 JX-1, 采用类似于 J-1的方法制备 J-13, 得近白色 固体(收率 85%): 1H-NMR (DMSO-d 6 ) 5 8.41 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.12-7.22 (m, 2H), 6.89 (t, J=8.0Hz, 1H), 6.77 (t, J=2.0Hz, 2H), 6.55 ( dd, J=1.2, 7.6Hz, 1H), 6.20 (dd, J=1.2, 8.0Hz, 1H), 4.94 (s, 2H), 2.28 (s, 3H)。

实施例 13 l-(3-硝基苯基) -3- (3,5-二 (三氟甲基)苯基)脲 (JX-14)

以 3,5-二 (三氟甲基)苯胺代替 3- (三氟甲基) -4-氯苯胺, 采用类似于 JX-3的方法制备 JX-14, 得杏黄色固体 (收率 83%) : 1H-NMR (DMSO-d 6 ) δ 9.50 (s, 1H), 9.46 (s, 1H), 8.53 (t, J=2.0Hz,lH), 8.16 (s, 2H), 7.86-7.88 (m, 1H), 7.79-7.82 (m,lH), 7.66 (s, 1H), 7.59 (t, J=8.0Hz,lH)。

实施例 14 l-(3-氨基苯基) -3- (3,5-二 (三氟甲基)苯基)脲 (J-14)

以 JX-14代替 JX-1 , 采用类似于 J-1的方法制备 J-14, 得近白色固体 (收率 74%) : 1H-NMR (DMSO-de) δ 9.20 ( s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.10 ( s, 2H), 7.59 (s, 1H), 6.92 (t, J=8.0Hz,lH), 6.83 (m,lH), 6.55-6.57 (m, 1H), 6.23-6.26 (m, 1H), 4.99 (s, 2H) o

实施例 15 l-(3-硝基苯基) -3-( 2 5 -二氟苯基)脲 (JX-1 5 )

以 2,5-二氟苯胺代替 3- (三氟甲基) -4-氯苯胺, 采用类似于 JX-3的方法制备 JX-15, 得亮黄色固体 (收率 86%): 1H-NMR (DMSO-de) 5 9.57 (s, 1H), 8.81 (s, 1H), 8.54 (t, J=2.0Hz,lH), 8.00 (m, 1H), 7.85 (dt, J=1.2,8.0Hz, 1H), 7.67-7.69 (m, 1H), 7.59 (t, J=8.0Hz,lH), 7.26-7.33 (m,lH), 6.85 (m,lH)。

实施例 16 l-(3-氨基苯基) -3-(2,5-二氟苯基)脲 (J-15)

以 JX-15代替 JX-1, 采用类似于 J-1的方法制备 J-15, 得近白色固体 (收率 93%) : 1H-NMR (DMSO-de) 58.82 (s, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.04 (m,lH), 7.25 (m, 1H),

6.86- 6.93 (m, 1H), 6.75-6.80 (m, 2H), 6.55 (t, J=6.8Hz, 1H), 6.21 (ddd, J=1.6, 7.6, 19.6Hz , 1H), 4.98 (brs, 2H)。

实施例 17 l-(3-硝基苯基) -3-(2-甲基 -5-氟苯基)脲 (JX-16)

以 5-氟 -2-甲基苯胺代替 3- (三氟甲基) -4-氯苯胺,采用类似于 JX-3的方法制备 JX-16, 得杏黄色固体(收率 94%): 1H-NMR (DMSO-de) 59.16 (s, 1H), 8.87 (s, 1H), 8.52 (t, J=2.0Hz , 1H), 7.81-7.83 (m, 1H), 7.71-7.73 (m, 1H), 7.56 (t, J=8.0Hz, 1H), 7.41 (dd, J=2.0, 12.4Hz, 1H), 7.18 (t, J=8.8Hz, 1H), 7.07 (dd, J=2.0, 8.4Hz, 1H), 2.17 (s,3H)

实施例 18 l-(3-氨基苯基) -3-(2-甲基 -5-氟苯基)脲 (J-16)

以 JX-16代替 JX-1, 采用类似于 J-1的方法制备 J-16, 得近白色固体 (收率 95%) : 1H-NMR (DMSO-de) 58.59 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.40 (dd, J=1.6, 12.8Hz,1H), 7.13 (t, J=8.8Hz, lH), 6.98 (dd, J=2.0, 8.0Hz, 1H), 6.89 (t, J=8.0Hz, 1H), 6.76 (m, 1H), 6.54 (dd, J=1.2, 8.0Hz, 1H), 6.20 (dd, J=0.8, 8.0Hz, 1H), 4.98 (br s, 2H), 2.15 (s, 3H)o

实施例 19 l-(3-硝基苯基) -3- (噻唑 -2-基)脲 (JX-17)

以 2-氨基噻唑代替 3-氯 -4-氟苯胺, 采用类似于 JX-1的方法制备 JX-17, 得黄色固体 (收率 70%): 1H-NMR (DMSO-de) δ 10.78 (brs, 1H), 9.44 (s, 1H), 8.57 (m, 1H),

7.87- 7.90 (m, 1H), 7.79-7.81 (m, 1H), 7.61 (t, J=8.4Hz, 1H), 7.40 (d, J=3.6Hz, 1H), 7.13 (d, J=3.6Hz, 1H)。

实施例 20 l-(3-氨基苯基) -3- (噻唑 -2-基)脲 (J-17)

以 JX-17代替 JX-1, 采用类似于 J-1的方法制备 J-17, 得浅黄色结晶性粉末 (收率 100%) : MS-ESI m/z 235 (M+H) +。

实施例 211-(3-硝基苯基) -3-(4- (吡咯烷 -1-基)丁基)脲 (JX-18)

以 4- (吡咯烷 -1-基)丁烷 -1-胺代替 3- (三氟甲基) -4-氯苯胺, 采用类似于 JX-3的方法制 备 JX-18, 得杏黄色固体 (收率 90%) : 1H-NMR (DMSO-de) 59.50 (s, 1H), 8.50 (t, J=2.0Hz,lH), 7.72 (ddd, J=0.8, 2.4, 8.4Hz, 1H), 7.66 (ddd, J=0.8, 2.0, 8.0Hz, 1H), 7.48 (t, J=8.4Hz,lH), 6.70 (t, J=6.0 Hz, 1H), 3.29 (m, 2H), 3.11 (m, 6H), 1.93 (m, 4H), 1.66-1.74 (m, 2H), 1.49-1.54 (m, 2H)。

实施例 22 l-(3-氨基苯基) -3-(4- (吡咯烷 -1-基)丁基)脲 (J-18)

以 JX-18代替 JX-1 , 采用类似于 J-1的方法制备 J-18, 得近白色固体 (收率 54%) : 1H-NMR (DMSO-de) 5 8.02 (s, 1H), 6.82 (t, J=8.0Hz, 1H), 6.68 (s, 1H), 6.48 (d, J=8.4Hz,lH), 6.11 (d, J=9.2Hz,1H), 5.99 (t, J=5.6Hz, 1H), 4.88 (s,2H), 3.06 (m, 2H), 2.39 (m,6H), 1.66 (m,4H), 1.43 (m,4H)。

实施例 23 1-异丁基 -3-(3-硝基苯基)脲 (JX-19)

以异丁胺代替 3-氯 -4-氟苯胺,采用类似于 JX-1的方法制备 JX-19,得浅黄色固体(收 率 42%): 1H-NMR (DMSO-de) 5 8.88 (s, 1H), 8.48 (t, J=2.0Hz, 1H), 7.71-7.73 (m, 1H), 7.60-7.62 (m, 1H), 7.48 (t, J=8.0Hz, 1H), 6.30 (br s, 1H), 2.94 (t, J=6.4Hz , 1H), 1.71 (m, 1H), 0.88 (s, 3H), 0.86 (s, 3H)。

实施例 24 1-异丁基 -3-(3-氨基苯基)脲 (J-19)

以 JX-19代替 JX-1, 采用类似于 J-1的方法制备 J-18, 得浅黄色固体 (收率 93%) : MS-ESI m/z 208 (M+H) +。 异氰酸酯法: P系列侧链脲的制备

实施例 25 1-(3-氯 -4-氟苯基 )-3-(4-氨基苯基)脲 (P-1 )

将三光气 (0.72g, 2.4mmol) 溶于二氯甲烷 (10mL) 中。 在氮气保护和冰水浴冷却 下, 滴加 3-氯 -4-氟苯胺(0.87g, 6mmol)和 DIEA (0.93g, 7.2mmol)的二氯甲烷(20mL) 溶液, 搅拌 0.5h。 加入对苯二胺 (0.66g, 6mmol)、 DIEA ( 0.93g, 7.2mmol) 的二氯甲 烷 (20mL) 溶液, 室温搅拌 24h, 减压浓縮反应液。 用乙酸乙酯 (60mL)溶解所得油状 残留物, 依次用 10%硫酸氢钾水溶液、 5%碳酸氢钠水溶液和半饱和的食盐水洗涤, 无水 硫酸镁干燥, 减压浓縮得到浅黄色固体。 经柱层析纯化 (碱性氧化铝, 乙酸乙酯: 石油 醚 3: 5-3: 0)得到白色固体 P-1 (收率 39%): 1H-NMR (DMSO-d 6 ) δ: 8.62 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.76-7.78 (m, 1H), 7.25-7.28 (m, 2H), 7.06 (d, J=8.8Hz, 2H), 6.52 (d, J=8.8Hz, 2H), 4.73 (s, 2H)。

实施例 26 l-(4-氨基苯基) -3-( 3- (三氟甲基) -4-氯苯基)脲 (P-3 )

以 3- (三氟甲基) -4-氯苯胺代替 3-氯 -4-氟苯胺,采用类似于 P-1的方法制备 P-3,得近 白色固体: 1H-NMR (DMSO-de) δ 8.91 ( s, 1H), 8.23 ( s, 1H), 8.07 (d, J=2.4Hz, 1H), 7.55-7.61 (m, 2H), 7.07 (d, J=8.8Hz, 2H), 6.53 (d, J=8.8Hz, 2H), 4.76 (s, 2H

实施例 27 l-(4-氨基苯基) -3-(3-氰基苯基)脲 (P-4)

以 3-氰基苯胺代替 3-氯 -4-氟苯胺, 采用类似于 P-1 的方法制备 P-4, 得黄色固体: 1H-NMR (DMSO-de) δ 8.79 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.92 (m, 1H), 7.60-7.63 (m, 1H), 7.45 (m, 1H), 7.35 (m, 1H), 7.06 (d, J=8.8Hz, 2H), 6.52 (d, J=8.8Hz, 2H), 4.73 (brs, 2H)。

实施例 281-环己基 -3-(4-氨基苯基)脲 (P-ll)

以环己胺代替 3-氯 -4-氟苯胺, 采用类似于 P-1 的方法制备 P-4, 得浅粉色固体: 1H-NMR (DMSO-de) 57.69 (s, 1H), 6.98 (d, J=8.4Hz, 2H), 6.46 (d, J=8.8Hz, 2H), 5.75 (d, J=8.0Hz, 1H), 4.58 (br s, 1H), 3.41-3.43 (m, 1H), 1.76-1.80 (m, 2H), 1.63-1.66 (m, 2H), 1.51-1.54 (m, 1H), 1.25-1.34 (m, 2H), 1.08-1.21 (m, 3H)。

实施例 29 l-(4-氨基苯基) -3-甲基苯基脲 (P-13)

以 3-甲基苯胺代替 3-氯 -4-氟苯胺, 采用类似于 P-1的方法制备 P-4, 得浅粉色固体: 1H-NMR (DMSO-de) δ 8.32 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.19 (d, J=8.4Hz,1H), 7.12 (t, J=8.0Hz,1H), 7.06 (d, J=8.8Hz,2H), 6.75 (d, J=7.2Hz, 1H), 6.52 (d, J=8.8Hz ,2H),4.69 (s, 2H), 2.26 (s, 3H)。

实施例 30 l-(4-氨基苯基) -3-(4- (吡咯烷 -1-基)丁基)脲 (P-18)

以 4- (吡咯烷 -1-基)丁烷小胺代替 3-氯 -4-氟苯胺, 采用类似于 P-1的方法制备 P-18, 得浅灰色固体: 1H-NMR (DMSO-d 6 ) δ 7.80 (s, 1H), 6.99 (d, J = 8.4Hz, 2H), 6.46 (d, J=8.8Hz, 2H), 5.86 (t, J=5.2Hz, 1H), 4.63 (s, 2H), 3.04 (d, 2H, J=5.6Hz), 2.39 (m, 6H), 1.67 (m, 4H), 1.43 (m, 4H); MS-ESI m/z 208 (M+H) +。

实施例 311-异丁基 -3-(4-氨基苯基)脲 (P-19)

以异丁胺代替 3-氯 -4-氟苯胺, 采用类似于 P-1 的方法制备 P-19, 得近白色固体: 1H-NMR (DMS0 57.81 (s, 1H), 7.00 (d, 2H, J=8.4Hz), 6.47 (d, 2H, J = 8.4Hz), 5.90 (t, J=5.6Hz, 1H), 4.63 (s, 2H), 2.88 (t, J=6.4Hz, 2H), 1.66 (m, 1H), 0.86 (s, 3H), 0.85 (s, 3H

实施例 32 N-(4-硝基苯基)吗啉 -4-甲酰胺 (PX-12)

将三光气 (1.63g, 10.5mmol) 溶于乙腈 (12mL) 中。 在氮气保护和冰水浴冷却下, 滴加 4-硝基苯胺 (1.07g, llmmol) 的乙腈 (20mL) 溶液。 室温搅拌 lh, 回流 18h, 冷 却后减压浓縮得黄色固体。 加入吗啉 (l .Olg, l lmmol) 的乙腈 (10mL) 溶液, 室温搅 拌 5h, 减压浓縮, 加二氯甲烷打浆, 得到 PX-12, 为黄色固体(1.55g, 56%): 1H-NMR

(DMSO-de) δ 9.26 ( s, 1H), 8.14 ( d, J=9.2Hz, 2H), 7.75 ( d, J=9.2Hz, 2H), 3.62

(m, 4H), 3.48 (m, 4H)。

实施例 33 N-(4-氨基苯基)吗啉 -4-甲酰胺 (P-12)

将上述产物 PX-12 ( 1.55g, 6mmol), 加入至乙醇: 水 (2: 1 ) ( 54mL) 中, 加入冰 乙酸(1.64g, 27.3mmol), 回流下加入活化的还原铁粉( 1.38g, 24.7mmol), 继续回流 lh。 冷却至 35 °C, 用浓氨水调节 pH至 9-10, 抽滤。 将滤液减压浓縮, 所得残留物加乙酸乙 酯打浆得到浅粉色固体 P-12 ( 0.57g, 42%): 1H-NMR (DMSO-d 6 ) 5 8.03 ( s, 1H), 7.03

( d, J=8.4Hz, 2H), 6.48 ( d, J=8.8Hz, 2H), 4.68 (br s, 2H), 3.59 (m, 4H), 3.36

(m, 4H)。

实施例 34 l-(4-硝基苯基) -3- (噻唑 -2-基)脲 (PX-17)

以 2-氨基噻唑代替吗啉, 采用类似于 PX-12的方法制备 PX-17, 得黄色固体 (收率 99%): 1H-NMR (DMSO-d 6 ) 5 9.99 ( s, 1H), 8.21 ( d, J=9.2Hz, 1H), 7.75 ( d, J=9.2Hz, 1H), 7.40 ( d, J=3.6Hz, 1H), 7.14 ( d, J=4.0Hz, 1H)。

实施例 35 l-(4-氨基苯基) -3- (噻唑 -2-基)脲 (P-17)

以 PX-17代替 PX-12,采用类似于 P-12的方法制备 P-17,得浅灰色固体(收率 100%): 1H-NMR (DMSO-de) 6 9.06 ( s, 1H), 7.31(d, J=3.6Hz, 1H), 7.10-7.12 (m, 2H), 7.01(d, J=3.6Hz, 1H), 6.51-6.54(m, 2H), 4.78 (br s, 2H)。 氨基甲酸酯法:

实施例 36 N-O硝基苯基)吗啉 -4-甲酰胺 (JX-12)

将氯甲酸对硝基苯酯 (1.02g, 5.5mmol) 溶于 THF (20mL) 中, 在氮气保护下 0°C 滴加 3-硝基苯胺(0.68g, 5mmol)的 THF ( 5mL)溶液,然后加入三乙胺(0.55g, 5.5mmol), 再搅拌 0.5h。 加入吗啉 (0.44g, 5.5mmol) 和三乙胺 (0.55g, 5.5mmol), 回流 4h。 减压 浓縮反应物, 加二氯甲烷提取残留物, 依次用水、 lmol/L盐酸、 饱和碳酸氢钠水溶液和 5%氯化钠洗涤, 无水硫酸钠干燥, 减压浓縮得到黄色固体。 硅胶柱层析 (乙酸乙酯: 石 油醚: 二氯甲烷 4: 5: 3 )纯化后经异丙醇重结晶得到黄色晶体(0.35g, 28%): 1H-NMR (DMSO-de) 5 8.97 ( s, 1H), 8.47 (m, 1H), 7.88-7.90 (m, 1H), 7.77-7.80 (m, 1H), 7.52 (t, J=8.0Hz, 1H), 3.62 (m, 4H), 3.46 (m, 4H)。 实施例 37 N-(3-氨基苯基)吗啉 -4-甲酰胺 (J-12)

以 JX-12代替 JX-1 , 采用类似于 J-1的方法制备 J-12, 得浅灰色固体 (收率 99%) : 1H-NMR (DMSO-de) δ 8.16 (s, 1H), 6.84 (t, J=8.0Hz, 1H), 6.76 (t, J=2.0Hz, 1H), 6.56-6.59 (m, 1H), 6.16-6.19 (m, 1H), 3.57 (m, 4H), 3.40 (m, 4H)。

Ia、 Ib、 Ic、 Id和 Ie系列化合物的合成

实施例 38 4-(3-(4-氯 -7-甲氧基喹唑啉 -6-基氧)丙基)吗啉盐酸盐 (Q1 )

将 7-甲氧基 -6-(3-吗啉基丙氧基)喹唑啉 -4-醇 (3.19g, lOmmol) 、 氯化亚砜 (50mL) 和无水 DMF ( ImL) 回流搅拌 2h, 冷至室温, 加入甲苯旋蒸带尽残留氯化亚砜, 得黄色 固体残留物。加入异丙醇( 15mL)室温打浆 2h,抽滤、真空干燥得浅黄色固体 Ql (3.36g, 90%) 。

实施例 39 1-(3-氟苯基 3-(3-(7-甲氧基 -6- 3-吗啉基丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲 (D2-9)

取 Ql (0.15g, 0.4mmol) 和 J-9 (O.lg, 0.4mmol) 、 异丙醇 (4mL) 和氯化氢异丙 醇饱和溶液 (ImL) 回流搅拌 3h。 冷至室温, 加入水 (10mL) 、 二氯甲烷 (50mL) 禾口 甲醇 (10mL) 溶解所得反应物, 用 lmol/L氢氧化钠水溶液调 pH至 7.5, 再用二氯甲烷 提取。 合并有机层, 经盐水洗涤、 无水硫酸钠干燥、 旋蒸得粗品。 所得粗品硅胶柱层析, 用乙酸乙酯: 乙醇: 三乙胺 (300:100:1 ) 洗脱, 最后经甲醇重结晶、 真空干燥 (50°C, 5h)得浅黄色固体(收率 14%) : 1 腿 MR ( DMS0- ) δ 9.43 (s, 1H), 8.84 (s, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.97 (t, J=2.0Hz, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.43-7.52 (m, 2H), 7.27-7.34 (m, 2H), 7.19 (m, 2H), 7.13 (m, 1H), 6.76-6.80 (m, 1H) ,4.21 (t, J=6.4Hz, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.58 (m, 4H), 2.41-2.54 (m, 6H), 1.99 (m, 2H); MS-ESI m/z 547 (M+H) +。

实施例 40 l-O氯 -4-氟苯基 )-3-(4-(7-甲氧基 -6-0吗啉基丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯 基)脲 (D1-1 )

以 P-1代替 J-9,采用类似于 D2-9的方法制备 D1-1 ,得白色固体(收率 27%): ^MR (DMSO-de) δ 9.37 (s, 1H), 8.80 (s, 1H), 8.68 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 7.80-7.83 (m, 2H), 7.67 (dd, J=2, 6.8Hz, 2H) , 7.46 (dd, J=2, 6.8Hz, 2H), 7.31-7.33 (m, 2H), 7.17 (s,lH) , 4.19 (t, J=6.4Hz, 2H), 3.93 (s, 3H), 3.59 (t, J=4.4Hz, 4H), 2.47 (m, 2H), 2.40 (t, J=6.4Hz, 4H), 1.99 (m, 2H); MS-ESI m/z 581 (M+H) +。 实施例 41 l-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基) -3-(4-(7-甲氧基 -6-(3-吗啉基丙氧基)喹唑啉 -4-基 胺基)苯基)脲 (D1-3 ) 及其盐酸盐的制备

(a)以 P-3代替 J-9,采用类似于 D2-9的方法制备 D1-3,得近白色固体(收率 18%) : 1HNMR (DMSO-de) 5 9.39 (s, 1H), 9.10 (s, 1H), 8.77 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.11

(d, J=2Hz, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.61-7.68 (m, 4H), 7.47 (m, 2H), 7.16 (s,lH) 4.19 (m, 2H), 3.92 (s, 3H), 3.57-3.59 (m, 4H), 2.46 (m, 2H), 2.40 (m, 4H), 1.99 (m, 2H); MS-ESI m/z 631 (M+H) +。

(b) 成盐酸盐

取 Dl-3 (0.15g, 0.24mmol)在甲醇(8ml)中回流 0.5h, 加入 O.lmol/L盐酸(2.6ml, 0.26mmol) o将所得溶液搅拌 lh, 再冷却析晶 2h。抽滤, 真空干燥 ( 110°C, 4h), 得 Dl-3 盐酸盐, 为黄色固体 (0.08g, 48%): 元素分析 (C 30 H 30 ClF 3 N 6 O 4 HC1 2H 2 O) C、 H、 N, 计算值 51.22、 5.01、 11.95, 测定值 51.12、 4.69、 11.80。

实施例 42 1-(3-氰基苯基) -3-(4-(7-甲氧基 -6-(3-吗啉基丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基) 脲 (D1-4)

以 P-4代替 J-9,采用类似于 D2-9的方法制备 D1-4,得近白色固体(收率 9%): ^MR (DMSO-de) δ 10.21 (s, 1H), 9.77 (s, 1H), 9.48 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.01 (s,lH), 7.91 (s, 1H), 7.67-7.70 (m, 3H), 7.48 (t, J=8.4Hz, 3H), 7.36 (d, J=7.6Hz, 1H), 7.15 (s, 1H), 4.21 (t, J=6.4Hz, 2H), 3.93 (s, 3H), 3.58 (t, J=4.4Hz, 4H), 2.47 (m, 2H), 2.39 (t, J=4.4Hz, 4H), 1.98 (m, 2H); MS-ESI m/z 554 (M+H) +。

实施例 43 1-环己基 -3-(4-(7-甲氧基 -6-(3-吗啉基丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲 (D1-11 )

以 P-11代替 J-9, 采用类似于 D2-9的方法制备 D1-11 , 得近白色固体(收率 27%): iHNMR ( DMS0- ) 5 9.31 (s, 1H), 8.37 ( s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.57

(d, J=8.8Hz, 2H), 7.38 (d, J=8.8Hz, 2H), 7.15 (s, 1H),6.00 (d, J=7.6Hz, 1H), 4.18 (t, J=6.4Hz, 2H), 3.93 (s, 3H), 3.59 (t, J=4.4Hz, 4H), 3.48 (m, 1H), 2.50

(m, 2H), 2.41 (m, 4H), 1.99 (m, 2H), 1.80-1.83 (m, 2H), 1.65-1.69 (m, 2H), 1.53-1.56 (m, 1H), 1.28-1.34 (m, 2H), 1.14-1.24 (m, 2H); MS-ESI m/z 535 (M+H) 实施例 44 N-(4-(7-甲氧基 -6-(3-吗啉基丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基)吗啉 -4-甲酰胺 (D1-12) 以 P-12代替 J-9, 采用类似于 D2-9的方法制备 Dl-12, 得白色固体 (收率 49%) : iHNMR (DMSO-d 6 ) δ 9.41 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.47 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.69 (dd, J=2.0,6.8Hz, 2H) ,7.55 (dd, J=2.0,6.8Hz, 2H), 7.24 (s, 1H), 4.27 (t, J=6.4Hz, 2H), 4.01 (s, 3H), 3.65-3.70 (m, 8H), 3.52 (m, 4H), 2.55 (m, 2H), 2.48 (m, 4H), 2.07 (m, 2H); MS-ESI m/z 523 (M+H) +。

实施例 45 1-间甲苯基 -3-(4-(7-甲氧基 -6-(3-吗啉基丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲 (D1-13)

以 P-13代替 J-9, 采用类似于 D2-9的方法制备 D1-13, 得浅黄色固体(收率 14%): iHNMR (DMSO-de) 59.37 (s, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.66 (dd, J=2, 6.8Hz, 2H), 7.46 (dd, J=2, 6.8Hz, 2H), 7.31 (m, 1H), 7.24 (d, J=8.8Hz, 1H), 7.14-7.18 (m, 2H), 6.79 (d, J=8.0Hz, 1H), 4.20 (t, J=6.4Hz, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.60 (m, 4H), 2.52 (m, 2H), 2.43 (m, 4H), 2.29 (s, 3H), 2.01 (m, 2H); MS-ESI m/z 543 (M+H) +。

实施例 461- (噻唑 -2-基) -3-(4-(7-甲氧基 -6-(3-吗啉基丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲 (D1-17)

以 P-17代替 J-9, 采用类似于 D2-9的方法制备 D1-17, 得近白色固体(收率 86%): iHNMR (DMSO-de) δ 10.78 (brs, 1H), 9.71 (s, 1H), 9.49 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.72 (d, J=8.8Hz, 2H), 7.49 (d, J=8.8Hz, 2H), 7.35 (d, J=3.2Hz, 2H), 7.16 (s, 1H), 7.07 (d, J=3.2Hz, 2H), 4.21 (m, 2H), 3.93 (s, 3H), 3.58 (t, J=4.4Hz, 4H), 2.47 (m, 2H), 2.39 (m, 4H), 1.98 (m, 2H); MS-ESI m/z 536 (M+H) 实施例 47 l-(4-(7-甲氧基 -6-0吗啉基丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基) -3-(4- (;吡咯烷 -1- 基)丁基)脲 (D1-18)

以 P-18代替 J-9, 采用类似于 D2-9的方法制备 D1-18, 得浅黄色固体(收率 35%): iHNMR (DMSO-de) δ 9.33 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.59 (d, 2H, J=9.2Hz), 7.41 (d, 2H, J=8.8Hz), 7.15 (s, 1H), 6.12 (m, 1H), 4.17 (t, 2H, J=6.4Hz), 3.92 (s, 3H), 3.57 (m, 4H), 3.11 (m, 2H), 2.39-2.49 (m, 12H), 1.95-2.00 (m, 2H), 1.65 (m, 4H), 1.46 (m, 4H); MS-ESI m/z 578 (M+H) +。

实施例 48 1-异丁基 -3-(4-(7-甲氧基 -6-(3-吗啉基丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲 (D1-19) 以 P-19代替 J-9, 采用类似于 D2-9的方法制备 Dl-19, 得白色固体 (收率 51%) : 1HNMR (DMSO-d 6 ) 59.36 (s, 1H), 9.07 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.83 (s, H), 7.54 (dd, 2H, J=2, 9.2Hz ), 7.43 (dd, 2H, J=2, 6.8Hz), 7.14 (s, H), 6.86 (m, 1H ), 4.18 (t, 2H, J=6.4Hz), 3.92 (s, 3H), 3.58 (t, 4H, J=4.8Hz), 2.91 (t, 2H, J=6.4Hz), 2.39 (t, 4H, J=4.8Hz), 1.98 (m, 2H), 1.70 (m, 1H), 1.64 (s, 2H), 0.89 (s,3H), 0.88 (s,3H), MS-ESI m/z 509 (M+H) +。

实施例 49 l-(4-(7-甲氧基 -6-(3-吗啉基丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基) -3-(5-甲基异恶 唑 -3-基)脲 (D1-20) 及其盐酸盐的制备

(a) N 1 - (7-甲氧基 -6- (3-吗啉基丙氧基) 喹唑啉 -4-基) 苯 -1,4-二胺

将 7-甲氧基 -6-(3-吗啉基丙氧基) -N-(4-硝基苯)喹唑啉 -4-胺(7.09g, 16.14mmol)溶于 甲醇 (100ml), 加入 10%钯炭 (0.72g), 在 1.40MPa氢压、 50°C下搅拌 5h。 放冷, 滤除 钯炭, 滤液蒸干。 用丙酮重结晶所得残留物, 真空干燥 (40°C, 2h), 得 N 1 - (7-甲氧基 -6- (3-吗啉基丙氧基) 喹唑啉 -4-基) 苯 -1,4-二胺, 淡黄色固体 (5.56g, 84%)。

(b) 1-(4-(7-甲氧基 -6-(3-吗啉基丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基) -3-(5-甲基异恶唑 -3- 基)脲 (D1-20)

将 3-氨基 -5-甲基异恶唑 (0.34g, 3.46mmol)溶于二氯甲烷(10ml), 0°C滴加氯甲酸 苯酯 (0.54g, 3.46mmol) 的二氯甲烷 (2ml) 溶液。 室温搅拌 2h, 有白色固体析出。 加 入三乙胺 (0.35g, 3.46mmol), 溶液澄清。 依次加入 -(7-甲氧基 -6-(3-吗啉基丙氧基) 喹唑啉—4-基) 苯—1,4-二胺 (0.89g, 2.18mmol)、 三乙胺 (1.40g, 17.70mmol), 回流 3h, 有固体析出。趁热过滤, 滤饼真空干燥(35°C, 2h), 得乳白色固体 Dl-20 (0.33g, 28%): mp218-221°C; 1H-NMR(DMSO-d 6 ) δ 9.38 (s, 1H), 9.36 (s, 1H), 8.78 (s, 1H), 8.40

(s, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.68 (d, J=8.8Hz, 2H), 7.46 (d, J=8.8Hz, 2H), 7.17 (s, 1H), 6.53 (s, 1H), 4.19 (t, J=8.8Hz, 2H), 3.93 (s, 3H), 3.59 (t, J=4.4Hz, 4H), 2.47 (m, 2H), 2.40 (t, J=4.4Hz, 4H), 2.37 (s, 3H), 1.99 (m, 2H); MS-ESI m/z 534

(M+H) +。

(c) 成盐酸盐

取 Dl-20(0.24g, 0.45mmol)溶于甲醇(20ml),回流 0.5h,加入 O.lmol/L盐酸(5.0ml, 0.5mmol)。将所得溶液搅拌 lh,再冷却析晶 2h,过滤,得 D1-20盐酸盐,为黄色固体(0.1g, 37%): 元素分析 (C 27 H 31 N 7 0 5 HCH.5H 2 0) C、 H、 N, 计算值 54.32、 5.91、 16.42, 测 定值 54.12、 5.77、 16.27ο

实施例 50 1-(3-氯 -4-氟苯基 )-3-(3-(7-甲氧基 -6-(3-吗啉基丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯 基)脲 (D2-1)

以 J-1代替 J-9, 采用类似于 D2-9的方法制备 D2-1, 得近白色固体 (收率 11%) : ^MR (DMSO-de) δ 9.44 (s, 1H), 8.82 (s, 1H), 8.77 (s, 1H), 8.47 (s, 1H), 7.82-7.98 (m, 3H), 7.21-7.47 (m, 6H), 4.23 (m, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.61 (m, 4H), 2.52 (m, 2H), 2.43 (m, 4H), 2.02 (m, 2H); MS-ESIm/z581 (M+H) +。

实施例 51 l-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基) -3-(3-(7-甲氧基 -6-(3-吗啉基丙氧基)喹唑啉 -4-基 胺基)苯基)脲 (D2-3)

以 J-3代替 J-9, 采用类似于 D2-9的方法制备 D2-3, 得浅黄色固体 (收率 61%) : iHNMR (DMSO-de) δ 9.48 (s, 1H), 9.19 (s, 1H), 8.91 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.17 (d, J=2.0Hz, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.63-7.66 (m, 2H), 7.52 (d, J=8.4Hz, 1H), 7.33 (t, J=7.6H, 1H), 7.23-7.24 (m, 2H), 4.26 (t, J=6.4H, 2H), 3.98 (s, 3H), 3.65 (m, 4H), 2.53 (m, 2H), 2.48 (m, 4H), 2.06 (m, 2H); MS-ESIm/z631 (M+H) 实施例 52 l-(3-氰基苯基) -3- H7-甲氧基 -6-(3-吗啉基丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基) 脲 (D2-4)

以 J-4代替 J-9, 采用类似于 D2-9的方法制备 D2-4, 得近白色固体 (收率 14%) : 1 腿 MR(DMSO-d 6 ) δ9.42 (s, 1H), 8.97 (s, 1H), 8.84 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 7.96-7.98

(m, 2H), 7.86 (m, 1H) , 7.66-7.68 (m, 1H), 7.47-7.51 (m, 1H), 7.39-7.45 (m, 2H), 7.29 (t, J=8.0Hz, 1H), 7.20-7.22 (m, 1H), 7.18 (s, 1H), 4.20 (t, J=6.4Hz, 2H), 3.93 (s, 3H), 3.58 (t, J=4.8Hz, 4H), 2.47 (m, 2H), 2.40 (m, 4H), 1.99 (m, 2H); MS-ESI m/z 552 (M-H) ―。

实施例 53 1-环己基 -3- H7-甲氧基 -6-(3-吗啉基丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲 (D2-11)

以 J-11代替 J-9, 采用类似于 D2-9的方法制备 D2-11, 得浅黄色固体(收率 18%) : 1HNMR (DMSO-de) 59.39 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 7.87 (d, J=7.6Hz, 2H), 7.32 (d, J=8.0Hz, 1H), 7.18-7.22 (m, 2H), 7.11 (d, J=8.0Hz, 1H), 6.06 (d, J=8Hz, 1H), 4.21 (m, 2H), 3.93 (s, 3H), 3.63 (m, 4H), 3.48 (m, 1H), 2.57 (m, 6H), 2.05 (m, 2H), 1.13-1.82 (m, 10H); MS-ESI m/z 535 (M+H) +。 实施例 54 N-(3-(7-甲氧基 -6-(3-吗啉基丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基)吗啉 -4-甲酰胺 (D2-12)

以 J-12代替 J-9, 采用类似于 D2-9的方法制备 D2-12, 得浅黄色固体(收率 15%) : iHNMR (DMSO-de) δ 9.40 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.41 (d, J=8.0Hz, 1H), 7.18-7.26 (m, 3H), 4.21 (t, J=5.6Hz, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.62 (m, 8H), 3.44 (m, 4H), 2.57 (m, 6H), 2.02 (m, 2H); MS-ESI m/z 523 (M+H) +。

实施例 55 1-间甲苯基 -3-(3-(7-甲氧基 -6-(3-吗啉基丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲 (D2-13)

以 J-13代替 J-9, 采用类似于 D2-9的方法制备 D2-13, 得浅黄色固体(收率 38%) : 1HNMR (DMSO-de) δ 9.42 (s, 1H), 8.66 (s, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.45 (m, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.43 (d, J=7.6Hz, 1H), 7.14-7.30 (m, 6H), 6.79 (d, J=7.2Hz, 1H) ,4.22 (t, J=6.4Hz, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.60 (m, 4H), 2.41 (m, 6H), 2.28 (s, 3H) 2.02 (m, 2H); MS-ESI m/z 543 (M+H) +。

实施例 561- (噻唑 -2-基) -3-(3-(7-甲氧基 -6-(3-吗啉基丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲 (D2-17)

以 J-17代替 J-9, 采用类似于 D2-9的方法制备 D2-17, 得近白色固体(收率 36%) : 1 丽 MR (DMSO-de) δ 10.44 (brs, 1H), 9.46 (s, 1H), 9.01 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.55 (d, J=8.8Hz, 1H), 7.30-7.38 (m, 2H), 7.19 (m, 2H), 7.10 (d, J=3.2Hz, 1H) ,4.21 (t, J=6.4Hz, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.59 (m, 4H), 2.48 (m, 2H), 2.41 (m, 4H), 2.00 (m, 2H); MS-ESI m/z 536 (M+H) +。

实施例 57 l-(3-(7-甲氧基 -6-0吗啉基丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基) -3-(4- (;吡咯烷 -1- 基)丁基)脲 (D2-18)

以 J-18代替 J-9, 采用类似于 D2-9的方法制备 D2-18, 得白色固体 (收率 30%) : iHNMR ( DMS0- ) δ 9.36 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.85 (s, 2H), 7.32 (d, 1H, J=8.4Hz), 7.14-7.23 (m, 3H), 6.11 (m, 1H ), 4.20 (t, 2H, J=6.4Hz), 3.93 (s, 3H), 3.57 (m, 6H), 3.10 (d, 2H, J=5.2Hz), 2.40 (m, 10H), 1.99 (m, 2H), 1.66 (m, 4H), 1.46 (m, 4H); MS-ESI m/z 578 (M+H) +。

实施例 58 1-异丁基 -3- H7-甲氧基 -6-(3-吗啉基丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲 (D2-19) 以 J-19代替 J-9, 采用类似于 D2-9的方法制备 D2-19, 得土黄色固体(收率 19%) : 1HNMR (DMSO-d 6 ) δ 9.33 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.86 (m, 2H), 7.33 (d, J=8.0Hz, 1H), 7.13-7.23 (m, 3H), 6.12 (m, 1H), 4.21 (t, 2H, J=6.4Hz), 3.94 (s, 3H), 3.59 (t, 4H, J=4.4Hz), 2.92-2.96 (m, 2H), 2.42 (m, 6H), 1.98-2.01 (m, 2H), 1.72 (m, 1H), 0.90 (s, 3H), 0.88 (s, 3H); MS-ESI m/z 509 (M+H) +。

实施例 597-氟喹唑啉 -4(3H)-酮

在氮气保护下, 向反应瓶中加入 2-氨基 -4-氟苯甲酸 (30g, 190mmol) 和甲酰胺 (240mL) , 升至 150°C保温搅拌 6h。 将所得反应物冷至约 100°C, 倾入搅拌下的冰水混 合物(2L),搅拌 lh后过滤。滤饼水洗后,真空干燥(50°C, 9h)得黄褐色固体 52 (24.5g, 77%) : 1 丽 MR (DMSO-d6) δ 12.27 (brs, 1H), 8.19 (dd, J=8.8, 6.4Hz,1H), 8.11 (s,lH), 7.43 (dd, J=10.4, 2.4Hz, 1H), 7.38 (td, J=8.8, 3.2Hz,1H)。

实施例 607-(3-吗啉基丙氧基)喹唑啉 -4(3H)-酮 (Q2T)

(a) 3-吗啉基丙小醇

将 3-溴丙醇 (70g, 0.5mol) 溶于甲苯 GOOmL) , 在室温滴加吗啉 (87g, lmol) 。 滴完后升至 80°C保温搅拌 4h。 冷至室温, 过滤所得悬浊液, 滤饼用甲苯洗涤。 合并滤洗 液旋蒸,减压蒸馏所得残留物,收集 bp 96〜98°C/5mmHg馏分,得无色液体(61.7g, 85%)。

(b) 7-(3-吗啉基丙氧基)喹唑啉 -4(3H)-酮 (Q2T)

将 3-吗啉基丙 -1-醇 (14.52g, lOOmmol) 溶于无水 DMF (20mL) , 冷至 0°C分批投 入 60%氢化钠(4g, lOOmmol),然后分批加入 7-氟喹唑啉 -4(3H)-酮(51 ) (2.74g, 17mmol), 升至 60°C、 90°C各保温搅拌 30min、 lOOmin, 再升至 110°C保温搅拌 3h。 将所得反应物 冷至室温, 倾入搅拌下的冰水混合物, 用浓盐酸调 pH至 6后, 用二氯甲烷提取。合并提 取液, 经水洗、 无水硫酸钠干燥后旋蒸。 向所得残留物中加入乙醚打浆, 抽滤, 用乙醚 洗涤滤饼,真空干燥(50°C, 4h)得玉色沙性固体 Q2T (2.8g, 57%): ^MR (DMSO-d 6 ) δ 11.99 (brs, 1H), 8.02 (s, 1H), 8.00 (d, J=5.2Hz, 1H), 7.06-7.09 (m, 2H), 4.16 (t, J=6.4Hz,2H), 3.57 (t, J=4.8Hz,4H), 2.43 (t, J=6.8Hz, 2H), 2.37 (t, J=4.8Hz , 4H), 1.91 (m, 2H); MS-ESI m/z 289 (M+H) +。

实施例 614-(3-(4-氯喹唑啉 -7-基氧)丙基)吗啉盐酸盐 (Q2)

将 Q2T (1.4g, 4.8mmol) 、 氯化亚砜 (22mL) 和无水 DMF (0.35g, 4.8mmol) 回 流搅拌 2h, 冷至室温, 加入甲苯旋蒸带尽残留氯化亚砜。 所得残留物用异丙醇 (10mL) 打浆 2h, 抽滤、 真空干燥得黄色固体 Q2 (1.51g, 92%) 。 实施例 62 l-(3-氯 -4-氟苯基 )-3-(3-(7-(3-吗啉基丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲 (D4-1 )

将 Q2 (0.34g, lmmol) 、 J-l (0.35g, 1.25mmol) 、 异丙醇 (8mL) 和氯化氢异丙 醇饱和溶液 (2mL) 回流搅拌 4h, 冷至室温, 旋蒸。 向所得残留物中加水 (10mL) , 用 lmol/L氢氧化钠水溶液调 pH至 9〜10., 用二氯甲烷 -甲醇(v/v, 3:1 )提取。合并提取液, 经水洗、 无水硫酸钠干燥后旋蒸。 将所得残留物硅胶柱层析两次, 用乙酸乙酯: 乙醇: 三乙胺 (90:10:0.5 ) 洗脱得黄色固体 D4-1 (0.06g, 11%) : 1HNMR (DMSO-d 6 ) δ 9.60 (s, 1H), 8.80 (s, 1H), 8.74 ( s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.49 (d, J=9.2Hz, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.81-7.82 (m, 1H), 7.49 (d, J=8.0Hz, 1H), 7.22-7.33 (m, 5H), 7.17 (d, J=2.4Hz, 1H) ,4.20 (t, J=6.4Hz, 2H), 3.59 (m, 4H), 2.46-2.47 (m, 2H), 2.40 (t, J=4.4Hz, 4H), 1.95 (m, 2H); MS-ESI m/z 601 (M+H) +。

实施例 63 l-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基) -3-(3-(7-(3-吗啉基丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基) 脲 (D4-3 )

以 J-3代替 J-l, 采用类似于 D4-1的方法制备 D4-3, 得浅黄色结晶 (收率 13%) : iHNMR (DMSO-de) δ 9.61 (s, 1H), 9.12 ( s, 1H), 8.85 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.48 (d, J=9.6Hz, 1H), 8.13 (d, J=2.0Hz, 1H), 8.01 (m, 1H), 7.61-7.62 (m, 2H), 7.53 (d, J=8.0Hz, 1H) , 7.28 (t, J=8.0Hz, 1H), 7.21-7.24 (m, 2H), 7.17 (d, J=2.4Hz, 1H) ,4.20 (t, J=6.4Hz, 2H), 3.60 (m, 4H), 2.49 (m, 2H), 2.42 (m, 4H), 1.95-1.98 (m, 2H); MS-ESI m/z 601 (M+H) +。

实施例 64 l-(4-(7-(3-吗啉基丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基) -3-(4- (吡咯烷 -1-基)丁基) 脲 (D3-18 )

以 P-18代替 J-1 , 采用类似于 D4-1的方法制备 D3-18, 得近白色固体(收率 11%): 1HNMR (DMSO-de) 5 9.48 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.40 (d, J=9.2Hz, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.61 (d, J=8.8Hz, 2H) , 7.37 (d, J=8.8Hz, 2H) , 7.19 (dd, J=2.4, 9.2Hz, 1H), 7.12 (d, J=2.4Hz, 1H) , 6.06 (m, 1H), 4.18 (t, J=6.4Hz, 2H), 3.58 (t, J=4.8Hz, 4H), 3.09 (m, 2H) , 2.39 (m, 12H), 1.94 (m, 2H), 1.66 (m, 4H), 1.46 (m, 4H); MS-ESI m/z 548 (M+H) +。

实施例 65 1-0(7-0吗啉基丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基) -3-(4- (;吡咯烷 -1-基)丁基) 脲 (D4-18 )

以 J-18代替 J-l, 采用类似于 D4-1的方法制备 D4-18, 得浅黄色固体 (收率 7%) : 1HNMR (DMSO-dg) δ 9.54 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.47 (d, J=8.8Hz, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.37 (d, J=7.6Hz, 1H) , 7.16-7.23 (m, 4H), 6.10 (m, 1H), 4.20 (t, J=6.4Hz, 2H), 3.59 (m, 4H), 3.09 (m, 2H), 2.40 (m, 12H), 1.95 (m, 2H), 1.67 (m, 4H), 1.47 (m, 4H); MS-ESI m/z 548 (M+H) +。

实施例 66 7-(3-(4-甲基哌嗪 -1-基)丙氧基)喹唑啉 -4(3H)-酮 (Q3T)

(a) 3-(4-甲基哌嗪 -1-基)丙 -1-醇

在氮气下, 将甲基哌嗪 (31.6g, 0.32mol)溶于甲苯 (150mL) , 在室温滴加 3-溴丙 醇 (20.8g, 0.15mol) 。 滴完后升至 80°C保温搅拌 2h。 冷至室温, 过滤所得悬浊液, 滤 饼用甲苯洗涤。 合并滤洗液旋蒸, 减压蒸馏所得残留物, 收集 bpl00°C/lmmHg馏分, 得 浅黄色油 ( 18.27g, 77%) : 1H-NMR (DMSO-d 6 ) δ 4.80 (br s, 1H), 3.75 (t, J=5.6Hz , 2H), 2.57 (td, J=6.0,2.4Hz,2H), 2.53 (m,4H), 2.42 (m,4H), 2.25 (s, 3H), 1.66-1.71 (m, 2H) o

(b) 7-(3-(4-甲基哌嗪 -1-基)丙氧基)喹唑啉 -4(3H)-酮 (Q3T)

以 3-(4-甲基哌嗪 -1-基)丙 -1-醇代替 3-吗啉基丙 -1-醇, 采用类似于 Q2T 的方法制备 Q3T,得浅黄色结晶(1.78g, 40%): 1H-NMR (DMSO-d 6 ) δ 11.99 (br s, 1H), 8.00-8.02 (m, 2H), 7.07-7.10 (m, 2H), 4.14 (t, J=6.4Hz,2H), 2.43 (t, J=6.8Hz,2H), 2.38 (m,4H), 2.31 (m,4H), 2.15 (s, 3H), 1.36 (m, 2H)。

实施例 67 4-氯-7-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙氧基)喹唑啉盐酸 (Q3 )

以 Q3T代替 Q2T, 采用类似于 Q2的方法制备 Q3, 得土黄色固体 (收率 100%) 。 实施例 68 1-(3-氯 -4-氟苯基 )-3-(3-(7-(3-(4-甲基哌嗪 -1-基)丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基) 苯基)脲 (D8-1 )

以 Q3代替 Q2, 采用类似于 D4-1的方法制备 D8-1 , 得近白色固体 (收率 11%) : 1H-NMR (DMSO-de) δ 9.59 (s, 1H), 8.82 (s, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.46-8.51 (m, 2H), 7.98 (s, 1H), 7.81 (d, J=7.2Hz, 1H), 7.48 (d, J=7.2Hz, 1H), 7.15-7.32 (m, 6H), 4.18 (m, 2H), 2.39 (m, 10H), 2.18 (s, 3H), 1.92-1.97 (m, 2H); MS-ESI m/z 564

(M+H) +。

实施例 69 l-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基) -3-(3-(7-(3-(4-甲基哌嗪 -1-基)丙氧基)喹唑啉 -4- 基胺基)苯基)脲 (D8-3 )

以 Q3代替 Q2, 以 J-3代替 J-l, 采用类似于 D4-1的方法制备 D8-3, 得浅灰色固体 (收率 8%): 1H-NMR (DMSO-de) δ 9.62 (s, 1H), 9.31 (s, 1H), 8.98 (s, 1H), 8.48-8.51 (m, 2H), 8.14 (m, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.53-7.62 (m, 3H) ,7.15-7.30(m, 4H), 4.19 (t, J=6.4Hz, 2H), 2.40 (m, 10H), 2.19 (s, 3H), 1.92-1.96 (m, 2H); MS-ESI m/z 614 (M+H) +

实施例 70 1-(3-(7-0(4-甲基哌嗪 -1-基)丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基) -3-(4- (;吡咯烷 -1-基)丁基)脲 (D8-18)

以 Q3代替 Q2, 以 J-18代替 J-l, 采用类似于 D4-1的方法制备 D8-18, 得近白色固 体 (收率 10%) : 1H-NMR (DMSO-d 6 ) 59.76 (s, 1H), 8.70 (s, 1H), 8.45-8.56 (m, 3H), 7.86 (m, 2H), 7.54 (d, J=9.6Hz, 1H) ,7.14-7.34(m, 5H), 6.43 (m, 1H), 4.32 (t, J=6.0Hz, 2H), 2.40 (m, 14H), 2.32 (m, 4H), 2.14 (s, 3H), 1.95 (m, 2H), 1.66 (m, 3H), 1.59 (m, 2H), 1.46 (m, 3H); MS-ESI m/z 561 (M+H) +。

实施例 71 7-((l-甲基哌啶 -4-基)甲氧基)喹唑啉 -4(3H)-酮 (Q4T)

以 (1-甲基哌啶 -4-基)甲醇)代替 3-吗啉基丙 -1-醇,采用类似于 Q2T的方法制备 Q4T, 得近白色结晶 (收率 40%) : 1H-NMR (DMSO-d 6 ) δ 12.00 (brs, 1H), 7.99-8.02 (m, 2H), 7.07-7.09 (m, 2H), 3.97 (d, J=5.6Hz,2H), 2.81 (d, J=11.6Hz, 2H), 2.19 (s, 3H), 1.93 (t, J=11.6Hz, 2H), 1.74-1.76 (m, 3H), 1.36 (m, 2H); MS-ESI: m/z 274 (M+H) +。

实施例 72 4-氯 -7-((l-甲基哌啶 -4-基)甲氧基)喹唑啉盐酸盐 (Q4)

以 Q4T代替 Q2T, 采用类似于 Q2的方法制备 Q4, 得土黄色固体 (收率 100%) 。 实施例 73 1-(3-氯 -4-氟苯基 )-3-(3-(7-((1-甲基哌啶 -4-基)甲氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯 基)脲 (D10-1)

以 Q4代替 Q2, 采用类似于 D4-1的方法制备 D10-1, 得近白色固体 (收率 7%) : 1H-NMR (DMSO-de) δ 9.59 (s, 1H), 8.80 (s, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.48 (d, J=8.8Hz,lH), 7.98 (s, 1H), 7.81 (d, J=6.8Hz,lH), 7.48 (d, J=7.2Hz , 1H), 7.22-7.32 (m, 5H), 7.15 (s, 1H), 4.01 (d, J=5.2Hz,2H), 2.79 (d, J=10.4Hz, 2H), 2.16 (s, 3H), 1.89 (t, J=11.2Hz , 2H), 1.76-1.78 (m,3H), 1.37 (m,2H); MS-ESI: m/z 535 (M+H) +。

实施例 74 l-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基) -3-(3-(7-((l-甲基哌啶 -4-基)甲氧基)喹唑啉 -4- 基胺基)苯基)脲 (D10-3)

以 Q4代替 Q2, 以 J-3代替 J-l, 采用类似于 D4-1的方法制备 D10-3, 得近白色固体 (收率 14%) : 1H-NMR (DMSO-de) δ 9.61 (s, 1H), 9.09 (s, 1H), 8.83 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.48 (d, J=9.6Hz, 1H), 8.13 (d, J=1.2Hz, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.61 (m,2H), 7.53 (d, J=7.6Hz, 1H), 7.28 (t, J=8.0Hz, 1H), 7.22-7.25 (m,2H), 7.16 (d, J=2.4Hz,lH), 4.01 (d, J=5.6Hz,2H), 2.80 (d, J=11.2Hz, 2H), 2.17 (s, 3H),

1.89 (t, J=11.2Hz , 2H), 1.76-1.79 (m,3H), 1.38 (m,2H); MS-ESI: m/z 585 (M+H) 实施例 75 l-(3-氟苯基 3-CH7-((l-甲基哌啶 -4-基)甲氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲 (D10-9)

以 Q4代替 Q2, 以 J-9代替 J-l, 采用类似于 D4-1的方法制备 D10-9, 得近白色固体 (收率 7%): 1H-NMR (DMSO-de) δ 9.68 (s, 1H), 9.21 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 8.52-8.54 (m,2H), 7.98 (s, 1H), 7.49-7.53 (m,2H), 7.12-7.33 (m, 6H), 6.77-6.79 (m,lH), 4.10 (m,2H), 2.99 (m,2H), 2.75 (s, 3H), 2.11 (m,2H), 2.00 (m,3H), 1.65 (m, 2H); MS-ESI m/z 501 (M+H) +。

实施例 76 l-(3-(6,7-二 (2-甲氧基乙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基) -3-(3-氯 -4-氟苯基)脲 (D6-1 )

将 Q5 (0.31g, lmmol) 、 J-1 (0.35g, 1.25mmol) 、 异丙醇 ( 5mL) 和氯化氢异丙 醇饱和溶液 (3mL) 回流搅拌 4h。 旋蒸所得反应物, 向所得残留物中加水 (10mL) , 用 lmol/L氢氧化钠水溶液调 pH至 9〜10., 用二氯甲烷 -甲醇(v/v, 3:1 )提取。合并提取液, 经水洗、 无水硫酸钠干燥后旋蒸。 将所得残留物硅胶柱层析, 用乙酸乙酯: 乙醇: 三乙 胺 (v/v, 200:10:0-70:10:1 ) 梯度洗脱, 最后用乙酸乙酯: 石油醚 (v/v, 1 :8) 打浆, 过 滤干燥得浅黄色固体 D6-1 (0.25g, 45%) : 1HNMR (DMSO-d 6 ) δ 9.41 (s, 1H), 8.81 (s, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.80-7.82 (m, 1H), 7.44 (d, J=8.4Hz, 1H) , 7.27-7.33 (m, 3H), 7.20-7.22 (m, 2H), 4.28-4.32 (m, 4H), 3.75-3.80 (m, 4H), 3.38 (s, 3H), 3.36 (s, 3H); MS-ESI m/z 556 (M+H) +。

实施例 77 l-(3-(6,7-二 (2-甲氧基乙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基) -3-(4-氯 -3- (三氟甲基) 苯基)脲 (D6-3 )

以 J-3代替 J-1 , 采用类似于 D6-1的方法制备 D6-3, 得近白色固体 (收率 31%) : 1H-NMR (DMSO-de) 5 9.41 (br s, 1H), 9.08 (s, 1H), 8.83 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.13 (d, J=2.0Hz, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.59-7.63 (m, 2H), 7.47 (d, J=8.0Hz, 1H) , 7.30 (t, J=8.4Hz, 1H), 7.21 (m, 2H), 4.28-4.32 (m, 4H), 3.75-3.80 (m, 4H), 3.39 (s, 3H), 3.38 (s, 3H); MS-ESI m/z 606 (M+H) +。 实施例 78 l-(3-(6,7-二 (2-甲氧基乙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基) -3-(3-氟苯基)脲 (D6-9)

以 J-9代替 J-1 , 采用类似于 D6-1的方法制备 D6-9, 得近白色固体 (收率 31%) : 1H-NMR ( DMSO-de) δ 9.41 ( s, 1H), 8.84 ( s, 1H), 8.74 ( s, 1H), 8.45 ( s, 1H), 7.97 ( s, 1H), 7.90 ( s, 1H), 7.43-7.51 (m, 2H), 7.27-7.33 (m, 2H) , 7.20-7.21 (m, 2H) , 7.13 ( d, J=7.6Hz, 1H), 6.78 ( dt, J=2.4,8.8Hz, 1H), 4.28 (m, 4H), 3.76 (m, 4H), 3.38 ( s, 3H), 3.36 ( s, 3H); MS-ESI : m/z 522 (M+H) +。

实施例 79 l-(4-(6,7-二 (2-甲氧基乙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基) -3-(4- (吡咯烷 -1-基)丁 基)脲 (D5-18 )

以 P-18代替 J-1 , 采用类似于 D6-1的方法制备 D5-18, 得近白色固体(收率 24%): 1H-NMR ( DMSO-de) δ 9.29 ( s, 1H), 8.38 ( s, 1H), 8.31 ( s, 1H), 7.85 ( s, 1H), 7.58 ( d, J=8.8Hz, 2H), 7.39 ( d, J=8.8Hz, 2H), 7.18 ( s, 1H), 6.07 (t, J=5.6Hz, 1H), 4.28 (t, J=4.8Hz, 4H), 3.74-3.79 (m, 4H), 3.37 ( s, 3H), 3.36 ( s, 3H), 3.10 (m, 2H), 2.41 (m, 6H), 1.66 (m, 4H), 1.46 (m, 4H); MS-ESI m/z 553 (M+H) +。

实施例 80 l-(3-(6,7-二 (2-甲氧基乙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基) -3-(4- (吡咯烷 -1-基)丁 基)脲 (D6-18 )

以 J-18代替 J-l, 采用类似于 D6-1的方法制备 D6-18, 得黄色固体 (收率 27%) : 1H-NMR (DMSO-de) 5 9.34 ( s, 1H), 8.43 ( s, 1H), 8.37 ( s, 1H), 7.85-7.89 (m, 2H), 7.31-7.34 (m, 1H), 7.18-7.23 (m, 2H), 7.13-7.15 (m, 1H), 6.09 (t, J=5.6Hz, 1H), 4.27-4.31 (m, 4H), 3.74-3.79 (m, 4H), 3.37 ( s, 3H), 3.36 ( s, 3H), 3.10 (m, 2H), 2.40 (m, 6H), 1.67 (m, 4H), 1.47 (m, 4H); MS-ESI m/z 553 (M+H) +。

If系列化合物的合成

实施例 81 7-(3-羟基丙氧基)喹唑啉 -4(3H 酮 (7)

向 lOOmL三颈瓶中将 1,3-丙二醇(13.9g, 183mmol)溶于 DMF (20mL) , 冷至 0°C 分批投入 60%氢化钠 (7.3g, 183mmol) , 然后分批加入 7-氟喹唑啉 -4C3H)-酮 (5g, 30.5mmol) , 升至 50°C和 90°C各保温搅拌 lh, 再升至 120°C保温搅拌 3h。 将所得反应 物冷至 25 °C, 倾入搅拌下的冰水混合物(280mL) , 用浓盐酸调 pH至 6, 滤集析出的固 体。 滤饼依次用水和乙醚洗涤, 真空干燥 (50°C, 6h) 得浅褐色固体 7 ( 6.27g, 93%) : 1H-NMR (DMSO-de) δ 11.94 (br s, 1H), 7.96 (m,2H), 7.04 ( dd, J=2.4, 6.0Hz, 2H), 4.48 (t, J=5.2Hz,lH), 4.13 (t, J=6.4Hz,2H), 3.53 (dd, J=6.0, 11.2Hz, 2H), 1.86 (m,2H)。

实施例 82 4-氯 -7-(3-氯丙氧基)喹唑啉 (8)

将 7-(3-羟基丙氧基)喹唑啉 -4(3H)-酮 (7) (6g, 27mmol) 、 氯化亚砜 (60mL) 禾口 DMF (0.57g, 7.8mmol) 回流搅拌 2h。 冷至室温, 用甲苯旋蒸带尽氯化亚砜。 用二氯甲 烷 (80mL) 溶解所得残留物, 用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤, 再用二氯甲烷反提。 合并有 机层, 加入无水硫酸钠和活性炭搅拌, 滤过后旋蒸。 向所得残留物中加入乙醚, 滤除析 出的固体,旋蒸至近干,加入石油醚后过滤, 真空干燥(50°C, 2.5h)得黄褐色固体 8 (4.49g, 64%) : 1 腿 MR (DMSO-de) δ 8.97 (s, 1H), 8.18 (d, J=8.8Hz,lH), 7.48-7.51 (m, 2H), 4.36 (t, J=6.0Hz,2H), 3.83 (t, J=6.4Hz,2H), 2.27 (m,2H)。

实施例 83 l-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基) -3-(3-(7-(3-氯丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲 (D52-3-0)

将 4-氯 -7-(3-氯丙氧基)喹唑啉 ( 8) (0.55g, 2mmol) 、 J-3 (0.66g, 2mmol) 、 异丙 醇 (9mL) 和氯化氢异丙醇饱和溶液 (2mL) 回流搅拌 3h。 冷至室温, 用 lmol/L氢氧化 钠水溶液调 pH至 6〜7。 用甲醇: 二氯甲烷 (3:1 ) 和二氯甲烷依次提取, 合并有机层, 经盐水洗涤、无水硫酸钠干燥后旋蒸。在甲醇 中结晶所得残留物,过滤,真空干燥(50°C, 6h) 得近白色鳞片状结晶 (0.83g, 75%) : 1 腿 MR (DMSO-d 6 ) δ 10.87 (br s, 1H),

9.49 (s, 1H), 9.20 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.65 (d, J=9.2Hz, 1H), 8.14 (d, J=1.6Hz,1H), 7.96 (s,lH), 7.62 (m, 2H), 7.44 (dd, J=2.4, 9.2Hz, 2H), 7.36 (t, J=8.0Hz,lH), 7.25-7.30 (m, 2H), 4.33 (t, J=6.4Hz,2H), 3.85 (t, J=6.4Hz, 2H), 2.29 (dd, J=6.4, 12.4Hz, 2H); MS-ESI m/z 550 (M+H) +。

实施例 84 l-(3-氯 -4-氟苯基 )-3-(3-(7-(3-氯丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲(D52-1-0) 以 J-1代替 J-3,采用类似于 D52-3-0的方法制备 D52-1-0,得近白色固体(收率 60%): 1 丽 MR (DMSO-de) 5 9.70 (br s, 1H), 8.84 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.55 (s,lH), 8.52 (d, J=9.2Hz,lH), 8.00 (s,lH), 7.81-7.83 (m, 1H), 7.49 (d, J=8.0Hz, 1H), 7.20-7.36 (m,6H), 4.30 (m,2H), 3.87 (t, J=6.8Hz, 2H), 2.27 (m, 2H); MS-ESI m/z 500 (M+H) +。

实施例 85 l-(3-(7-(3-氯丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基) -3-(3-氟苯基)脲 (D52-9-0) 以 J-9代替 J-3,采用类似于 D52-3-0的方法制备 D52-9-0,得近白色固体(收率 48%): 1 丽 MR (DMSO-de) δ 11.22 (br s, 1H), 9.28 (s, 1H), 9.21 (s, 1H), 8.85 (s,lH), 8.71 (d, J=9.6Hz, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.48-7.52 (m, 2H), 7.27-7.41 (m, 4H), 7.11-7.14 (m, 1H), 6.77 (dt, J=2.4,8.8Hz , 1H), 4.34 (m,2H), 3.85 (t, J=6.4Hz, 2H), 2.22 (m,

2H); MS-ESI m/z 466 (M+H) +。

实施例 86 l- H7-(3-氯丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基) -3-(4- (吡咯烷 -1-基)丁基)脲 (D52-18-0)

以 J-18代替 J-3,采用类似于 D52-3-0的方法制备 D52-18-0,得无色针晶(收率 16%): 1HNMR (DMSO-d 6 ) S 9.60 (s, 1H), 8.64 (s, 1H), 8.49 (m , 2H), 7.87 (s, 1H), 7.34-7.37

(m, lH), 7.18-7.25 (m, 4H), 6.37 (t, J=5.6Hz, 1H), 4.28 (t, J=5.6Hz, 2H), 3.83

(t, J=6.4Hz,2H), 3.12 (m,8H), 2.23-2.28 (m,2H), 1.93 (m, 4H), 1.65-1.71 (m, 2H), 1.48-1.53 (m,2H); MS-ESI m/z 519 (M+H) +。

实施例 87 l-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基) -3-(3-(7-(3-(4-(2-羟乙基)哌嗪 -1-基)丙氧基)喹唑 啉 -4-基胺基)苯基)脲 (D52-3-1 )

将 D52-3-0 (0.15g, 0.28mmol) 、 碘化钾 (0.09g, 0.56mmol) 、 2- (哌嗪 -1-基)乙醇

(0.15g, 1.12mmol)和 N-甲基吡咯烷酮(NMP) (2mL) 50°C遮光搅拌 32h。冷至室温, 将所得反应物直接上样硅胶柱层析, 用乙酸乙酯: 乙醇: 三乙胺梯度洗脱

(300:100:1.5-100:100:1.5 ) , 最后经甲醇: 乙酸乙酯 (6:1 ) 重结晶、 真空干燥 (50°C, 6h)得浅黄色固体 (0.07g, 39%) : 1 腿 MR (DMSO-d 6 ) δ 11.40 (br s, 1H), 9.81 (s, 1H), 9.54 (s, 1H), 8.86 (s, 1H), 8.74 (d, J=8.8Hz, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.60 (dd, J=8.8,22.4Hz , 2H), 7.49 (d, J=9.2Hz , 1H), 7.33-7.41 (m, 4H), 4.34 (m,2H), 3.66-3.81 (m, 10H), 3.40 (m, 2H), 3.33 (m, 2H), 2.30 (m, 2H); MS-ESI m/z 644

(M+H) +。

实施例 88 l-(3-氯 -4-氟苯基 )-3-(3-(7-(3-(4-(2-羟乙基)哌嗪 -1-基)丙氧基)喹唑啉 -4-基胺 基)苯基)脲 (D52-1-1 )

以 D52-1-0代替 D52-3-0, 采用类似于 D52-3-1的方法制备 D52-1-1, 得土黄色固体 (收率 41%) : 1H-NMR (DMSO-d 6 ) δ 9.69 (s, 1H), 9.18 (s, 1H), 9.00 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.51 (d, J=10.0Hz, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.80-7.82 (m, 1H), 7.51 (d, J=8.0Hz,lH), 7.19-7.33 (m, 6H), 4.23 (m,2H), 3.55-3.71 (m,10H), 3.31 (m, 2H), 3.22 (m,2H), 1.99 (m, 2H); MS-ESI m/z 594 (M+H) +。

实施例 89 l-(3-氟苯基 )-3-(3-(7-(3-(4-(2-羟乙基)哌嗪 -1-基)丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基) 苯基)脲 (D52-9-1 ) 以 D52-9-0代替 D52-3-0,采用类似于 D52-3-1的方法制备 D52-9-1,得黄色结晶(收 率 19%): 1H-NMR (DMSO-d 6 ) δ 10.59 (br s, 1H), 9.34 (s, 1H), 9.20 (s, 1H), 8.71

(s, 1H), 8.65 (d, J=9.2Hz , 1H), 7.94 (s, 1H), 7.27-7.51 (m, 7H), 7.13 (d, J=8.0Hz , 1H), 6.78 (t, J=8.4Hz,lH), 5.09 (br s, 1H), 4.27 (t, J=6.4Hz,2H), 3.73 (m,2H), 3.31 (m, 8H), 3.18 (t, J=5.2Hz,2H), 2.91 (m, 2H), 2.10 (m, 2H); MS-ESI m/z 560

(M+H) +。

实施例 90 l-(3-(7-(3-(4-(2-羟乙基)哌嗪 -1-基)丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基) -3-(4- (口比 咯烷 -1-基)丁基)脲 (D52-18-1 )

以 D52-18-0代替 D52-3-0, 采用类似于 D52-3-1的方法制备 D52-18-1, 得浅黄色固 体(收率 12%): 1H-NMR (DMSO-d 6 ) δ: 9.66 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 8.54 ( d , J=9.2Hz, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.39 (d, J=6.4Hz, 1H), 7.13-7.18 (m, 4H), 6.74 (m, 1H), 4.47 (br s, 1H), 4.18 (t, J=6.0Hz,2H), 3.93 (m,2H), 3.63 (m,8H), 3.33-3.53 (m,6H), 2.98-3.14 (m,6H), 1.81-1.95 (m,6H), 1.63 (m,2H), 1.46 (m, 2H); MS-ESI m/z 519 (M+H) +。

实施例 91 l-(3-(7-(3- (乙基 (2-羟乙基)胺基)丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基) -3-(3-氟苯 基)脲 (D52-9-4)

将 D52-9-0 (0.13g, 0.28mmol)、碘化钾(0.09g, 0.56mmol)、 2- (乙胺基)乙醇 (O.lg, 1.12mmol) 和 NMP ( ImL) 50°C遮光搅拌 30h。 冷至室温, 旋蒸。 将所得残留物上样硅 胶柱层析, 用乙酸乙酯: 乙醇: 三乙胺梯度洗脱 (900 : 100 : 1〜300 : 100:1 ) , 最后经无水乙 醇: 乙酸乙酯重结晶、 真空干燥得浅黄色固体(0.05g, 34%) : 1H-NMR (DMSO-d 6 ) δ 9.66 (s, 1H), 8.92 (s, 1H), 8.79 (s, 1H), 8.50-8.53 (m,2H), 8.01 (s, 1H), 7.50

(dd, J=0.8,9.6Hz,2H), 7.11-7.33 (m,6H), 6.78 (dt, J=2.4, 8.4Hz, 1H), 5.30 (br s, 1H), 4.27 (t, J=5.6Hz,2H), 3.76 (m,2H), 3.18-3.30 (m,6H), 2.21 (m, 2H), 1.25

(t , J=6.8Hz , 3H); MS-ESI m/z 519 (M+H) +。

实施例 92 l-(3-氯 -4-氟苯基 )-3-(3-(7-(3- (乙基 (2-羟乙基)胺基)丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基) 苯基)脲 (D52-1-4)

以 D52-1-0代替 D52-9-0,采用类似于 D52-9-4的方法制备 D52-1-4,得白色固体(收 率 20%): 1H-NMR (DMSO-de) δ 9.65 (s, 1H), 8.91 (s, 1H), 8.82 (s, 1H), 8.50-8.53 (m,2H), 8.00 (s, 1H), 7.80-7.82 (m,lH), 7.50 (d, J=8.4Hz, 1H), 7.19-7.35 (m, 6H), 5.30 (br s, 1H), 4.27 (t, J=5.6Hz,2H), 3.76 (m,2H), 3.20-3.29 (m,6H), 2.20 (m, 2H), 1.25 (t, J=6.8Hz, 3H); MS-ESI m/z 553 (M+H) +。

实施例 93 l-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基) -3-(3-(7-(3- (乙基 (2-羟乙基)胺基)丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲 (D52-3-4)

以 D52-3-0代替 D52-9-0, 采用类似于 D52-9-4的方法制备 D52-3-4, 得浅黄色粉末 (收率 82%): 1H-NMR (DMSO-de) δ: 9.73 (s, 1H), 9.20 (s, 1H), 8.91 (s, 1H), 8.55 (s,lH), 8.53 (d, J=9.2Hz,lH), 8.14 (s,lH), 8.02 (s, 1H), 7.61 (m, 2H), 7.53 (d, J=8.4Hz,lH), 7.19-7.32 (m, 4H), 5.32 (br s, 1H), 4.27 (t, J=6.4Hz,2H), 3.77 (m, 2H), 3.30 (m, 2H), 3.21 (m, 4H), 2.21 (t, J=7.2Hz , 2H), 1.26 (t, J=7.2Hz, 3H); MS-ESI m/z 603 (M+H) +。

实施例 94 l-(3-(7-(3- (乙基 (2-羟乙基)胺基)丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基) -3-(4- (吡咯 烷 -1-基)丁基)脲 (D52-18-4)

以 D52-18-0代替 D52-9-0, 采用类似于 D52-9-4的方法制备 D52-18-4, 得浅黄色油 状物(收率 60%) : 1H-NMR (DMSO-d 6 ) δ 9.66 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 8.54 (d , J=9.2Hz, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.39 (d, J=6.4Hz, 1H), 7.13-7.18 (m, 4H), 6.74 (m, 1H), 4.47 (br s, 1H), 4.18 (t, J=6.0Hz,2H), 3.93 (m,2H), 3.63 (m,8H), 3.33-3.53 (m,6H), 2.98-3.14 (m,6H), 1.81-1.95 (m,6H), 1.63 (m,2H), 1.46 (m, 2H); MS-ESI m/z 519 (M+H) +。

实施例 95 l-(3-氟苯基 )-3-(3-(7-(3-(2-羟乙基胺基)丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲 (D52-9-5 )

将 D52-9-0 (0.13g, 0.28mmol)、碘化钾(0.09g, 0.56mmol)、乙醇胺(0.07g, 1.12mmol) 和 N-甲基吡咯烷酮 (NMP) ( lmL) 50°C遮光搅拌 32h。 旋蒸反应物, 向所得残留物中 加入水, 用二氯甲烷: 甲醇 (3:1 ) 提取。 合并提取液, 旋蒸。 所得残留物经制备硅胶薄 层层析(乙酸乙酯: 乙醇: 三乙胺, 300:100:1 )纯化, 真空干燥得近白色结晶性固体(收 率 29%) : 1H-NMR (DMSO-de) 5 9.72 (br s, 1H), 9.67 (s, 1H), 9.41 (br s, 1H), 8.50-8.53 (m,2H), 7.92 (s, 1H), 7.49-7.55 (m,2H), 7.12-7.31 (m,6H), 6.75 (t, J=8.4Hz, 1H), 4.44 (br s, 1H), 4.21 (t, J=6.4Hz, 2H), 3.48 (m, 2H), 2.73 (t, J=6.8Hz, 2H), 2.62 (t, J=5.6Hz,2H), 1.93 (m,2H); MS-ESI m/z 491 (M+H) +。

实施例 96 l-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基) -3-(3-(7-(3-(2-羟乙基胺基)丙氧基)喹唑啉 -4-基胺 基)苯基)脲 (D52-3-5 )

以 D52-3-0代替 D52-9-0, 采用类似于 D52-9-5的方法制备 D52-3-5, 得近白色固体 (收率 38%) : 1H-NMR (DMSO-d 6 ) δ 10.14 (br s, 2Η), 9.66 (br s, 1Η), 9.56 (br s, 1Η), 8.50 (m, 2Η), 8.14 ( d, J=2.0Hz , 1H), 7.94 ( s, 1H), 7.56-7.66 (m, 3H), 7.15-7.28

(m, 4H), 4.21 (t, J=6.4Hz,2H), 3.46 (m, 2H), 2.71 (m, 2H), 2.60 (m, 2H), 1.91 (m, 2H), 1.65 (br s, 1H); MS-ESI m/z 575 ( M+H) +。

实施例 97 1- H7-CH乙基 (2-羟乙基)胺基)丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基) -3-(5-甲基 异恶唑 -3-基)脲 (D52-20-4) 的制备

( a) Ν^ΟΟ氯丙氧基)喹唑啉 -4-基)苯 -1,3-二胺

将 4-氯 -7-0氯丙氧基)喹唑啉(8 ) ( 3.00g, 11.7mmol)、间硝基苯胺(1.61g, l l Jmmol) 和 DMF (25ml) 在 70°C搅拌 2h。 放冷, 用氨水调 pH至 9, 加水 (80ml)后搅拌 30min。 过滤, 真空干燥 (75 °C, 2.5h), 得 7-(3-氯丙氧基) -N-(3-硝基苯)喹唑啉 -4-胺, 为黄色固 体 (4.00g, 收率 95%)。

将 7-(3-氯丙氧基) -N-(3-硝基苯)喹唑啉 -4-胺 ( l. OOg, 2. 79mmol ) 溶于乙醇 ( 10ml ), 加热至 50°C, 滴加 SnCl 2 .2H 2 0 (2.20g, lOmmol )的 6mol/L盐酸溶液(6.6ml), 回流 1.5h。 放冷, 用 50%氢氧化钠水溶液调节 pH至 8, 加水 (150ml)稀释, 用乙酸乙酯萃取 3次。 合并有机层, 依次用水、 饱和氯化钠水溶液洗涤, 经无水硫酸钠干燥后减压浓縮。 所得 残留物经真空干燥 (50°C, 2h), 得 -(7-(3-氯丙氧基)喹唑啉 -4-基)苯 -1,3-二胺, 为淡黄 色固体 (0.86g, 收率 94%)。

(b) 1-(3-(7-(3- (乙基 (2-羟乙基)胺基)丙氧基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基) -3-(5-甲基异恶 唑 -3-基)脲 (D52-20-4)

将 3-氨基 -5-甲基异恶唑 (0.47g, 4.8mmol)溶于无水二氯甲烷(8ml), 0°C下滴加入 氯甲酸苯酯 (0.76g, 4.8mmol) 的无水二氯甲烷(2ml)溶液中。 室温搅拌 2h, 有白色固 体析出。 加入三乙胺(0.49g, 4.8mmol), 溶液澄清。 依次加入 Ν^ -Ρ-氯丙氧基)喹唑啉 -4-基)苯 -1,3-二胺 (1.00g, 3.0mmol)、 三乙胺 (1.46g, 14.4mmol), 回流 3h。 冷却至室 温, 搅拌下加入水 (7ml)、 lmol/L氢氧化钠水溶液 (lml)。 分取有机层, 用饱和氯化钠 水溶液洗涤, 然后在冰浴中搅拌 3h。 过滤, 真空干燥 (40°C, 2h), 得 1-(3-(7-(3-氯丙氧 基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基) -3-(5-甲基异恶唑 -3-基)脲 (D52-20-0), 为乳白色固体 (0.74g, 收率 54%)。

将 D52-20-0 ( 0.40g, 0.88mmol)、 碘化钾 (0.29g, 1.7mmol)、 2-乙胺基乙醇(0.31g, 3.5mmol) 溶于 N-甲基吡咯烷酮 (NMP) ( 5ml), 80°C下避光搅拌 8h。 冷却至室温, 力口 入水 (50ml) 和乙酸乙酯 (30ml), 70°C下打浆 0.5h。 趁热过滤, 滤饼真空干燥 (80°C, 4h), 得淡黄色固体 (0.20g, 收率 45%): mp 144-146°C ; 1H-NMR(DMSO-d 6 ) δ 9.63 (s, 1Η), 9.37 (s, 1Η), 8.86 (s, 1Η), 8.51 (s, 1Η), 8.46 (d, J=9.2Hz, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.52 (d, J=8.0Hz, 1H), 7.30 (t, J=8.0Hz, 1H), 7.21-7.24 (m, 2H), 7.16 (d, J=2.0Hz, 1H), 6.52 (s, 1H), 4.35 (br s, 1H), 4.19 (t, J=6.4Hz, 2H), 3.43 (t, J=6.4Hz, 2H), 2.63 (t, J=6.4Hz, 2H), 2.55 (m, 4H), 2.36 (s, 3H), 1.90 (m, 2H), 0.97 (t, J=7.2Hz, 3H) o

Ig系列化合物的合成

实施例 98 1-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基) -3-(3-(6-(5-((2- (甲磺酰基)乙胺基)甲基)呋喃 -2- 基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲 (L-3 ) 的制备

(a) 1-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基) -3-(3-(6-碘喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲 (L-3-3 ) 在氮气保护下, 将 2-氨基 -5-碘苯甲腈(lg, 4mmol)和 DMF-DMA ( 1.93g, 16mmol) 在甲苯 (10mL) 中搅拌回流 lh, 冷至室温后旋蒸得油状物。 加入 J-3 ( 1.32g, 4mmol) 和冰乙酸(10mL)搅拌回流 lh, 旋蒸得棕黑色油状物。 加入乙酸乙酯和饱和碳酸氢钠水 溶液, 过滤后分取有机层, 经无水硫酸钠干燥、 旋蒸得粗品, 经硅胶柱层析和无水乙醇 打浆得褐色固体 L-3-3 (0.53g, 23%): 1 腿 MR (DMSO-d 6 ) 5 9.83 (s, 1H), 9.09 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 8.84 (s, 1H), 8.60 (s,lH), 8.09-8.13 (m,2H), 8.02 (s,lH), 7.52-7.64 (m,4H), 7.30 (t,J=8.0Hz, 1H), 7.23 (d, J=8.0Hz, 1H); MS-ESI m/z 584 (M+H) +。

(b) l-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基) -3-(3-(6-(5-甲酰基呋喃 -2-基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基) 脲 (L-4-3 )

向反应瓶中投入 L-3-3 (0.58g, lmmol)、 5-甲酰基呋喃 -2-硼酸(0.21g, 1.5mmol)、 7%钯炭 (干粉, O.lg) 、 1,2-二甲氧基乙烷 (DME) ( lOmL) 、 甲醇 (5mL) 和三乙胺

(0.3g, 3mmol) 。 升温至 50°C保温搅拌 16h。 通过硅藻土趁热抽滤所得反应物, 旋蒸滤 液。 向所得残留物中加入乙酸乙酯 (90 mL) 和饱和碳酸氢钠水溶液 (lO mL) , 搅拌后 分取有机层。 有机层经饱和盐水洗涤、 无水硫酸钠干燥后, 旋蒸, 真空干燥得桔黄色固 体 L-4-3 (0.47g, 85%): 1 腿 MR (DMSO-d 6 ) δ 10.09 (s, 1H), 9.69 (s, 1H), 9.11 (s, 1H), 9.06 (s, 1H), 8.88 (s, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.31 (dd, J=1.2, 8.8Hz, 1H), 8.14

(d,J=2.0Hz, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.88 (d,J=8.8Hz, 1H), 7.74 (d,J=4.0Hz, 1H), 7.60-7.66 (m,2H), 7.55 (d,J=8.4Hz, 1H), 7.42 (d,J=4.0Hz, 1H), 7.34 (t, J=8.0Hz, 1H), 7.25 (d,J=8.0Hz, 1H); MS-ESI m/z 552 (M+H) +。

( c M- ( 4-氯 -3- (三氟甲基)苯基) -3-(3-(6-(5-((2- (甲磺酰基)乙胺基)甲基)呋喃 -2-基)喹唑 啉 -4-基胺基)苯基)脲 (L-3 )

将 L-4-3 (0.28g, 0.5mmol) 溶于无水四氢呋喃 (4.4 mL) 中, 加入二异丙基乙基胺

(DIEA) (0.13g, lmmol)、 盐酸 2- (甲砜基)乙胺 (0.13g, 0.84mmol)和异丙醇(0.08g), 在氮气保护下, 室温搅拌 3h。 加入无水四氢呋喃 (4.3mL) 稀释所得反应物后, 分次加 入三乙酰氧基硼氢化钠 (0.2g, 0.95mmol), 然后室温搅拌 2h。 向所得反应物中小心滴加 5mol/L氢氧化钠水溶液( 1.25 mL),再搅拌 lOmin后过滤。向滤液中加入乙酸乙酯(60 mL) 和水(10 mL), 搅拌 15min后分取有机层。 有机层经饱和盐水洗涤、无水硫酸钠干燥后, 旋蒸, 真空干燥得黄色 L-3粗品, 经硅胶柱层析 (乙酸乙酯: 无水乙醇 100: 5洗脱) 纯 化得米黄色固体 L-3 (收率 24%): 1H-NMR (DMSO-d 6 ) δ 9.88 (s, 1H), 9.11 (s, 1H), 8.86 (s, 1H), 8.80 (s, 1H), 8.56 (m, 1H), 8.14-8.17 (m,2H), 8.04 (m,lH), 7.81

(d,J=8.8Hz, 1H), 7.60-7.66 (m , 2H), 7.54 (d , J=7.6Hz, 1H), 7.33 (t,J=8.0Hz, 1H), 7.26 (d,J=8.0Hz, 1H), 7.06 (d, J=3.6Hz, 1H), 6.50 (d , J=3.2Hz, 1H), 3.86 (s, 2H), 3.26 (t, J=6.8Hz,2H), 3.26 (m,lH), 3.02 (s, 3H), 3.02 (t, J=6.8Hz,2H); MS-ESI m/z 659 (M+H) +。

实施例 99 l-(3-氯 -4-氟苯基 )-3-(3-(6-(5-((2- (甲磺酰基)乙胺基)甲基)呋喃 -2-基)喹唑 啉 -4-基胺基)苯基)脲 (L-1 ) 的制备

(a) 1-(3-氯 -4-氟苯基 )-3-(3-(6-碘喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲盐酸盐 (L-3-1 ) 以 J-1代替 J-3, 采用类似于 L-3-3的方法制备 L-3-1 , 得浅黄色结晶 (收率 37%) : 1HNMR (DMSO-de) 5 9.83 (s, 1H), 9.03 (m, 1H), 8.81 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.61 (s,lH), 8.11 (dd, J=2.0, 8.8Hz, 1H), 8.01 (t, J=2.0Hz, 1H), 7.80-7.82 (m,lH), 7.56 (d,J=8.4Hz, 1H), 7.50 (d, J=8.8Hz, 1H), 7.23-7.33 (m,4H)。

(b) l-(3-氯 -4-氟苯基 )-3-(3-(6-(5-甲酰基呋喃 -2-基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲 (L-4-1 )

以 L-3-1代替 L-3-3,采用类似于 L-4-3的方法制备 L-4-1,得桔红色结晶(收率 71%): 1 丽 MR (DMSO-de) δ 10.10 (br s, 1H), 9.69 (s, 1H), 9.22 (br s, 1H), 9.17 (br s, 1H), 9.05 (s, lH), 8.59 (s, 1H), 8.30 (dd, J=0.9, 8.8Hz, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.87 (d, J=8.8Hz, 1H), 7.83 (dd , J=2.4, 6.8Hz, 1H), 7.74 (d , J=4.0Hz, 1H), 7.48 (d , J=7.6Hz, 1H), 7.42 (d,J=4.0Hz, 1H), 7.26-7.36 (m, 4H); MS-ESI m/z 552 (M+H) +。

(c) l-(3-氯 -4-氟苯基 )-3-(3-(6-(5-((2- (甲磺酰基)乙胺基)甲基)呋喃 -2-基)喹唑啉 -4- 基胺基)苯基)脲 (L-1)

以 L-4-1代替 L-4-3,采用类似于 L-3的方法制备 L-l,得浅桔黄色固体(收率 13%): 1HNMR (DMSO-de) 59.87 (s, 1H), 8.83 (s, 1H), 8.79 (m, 2H), 8.55 (s,lH), 8.16 (dd, J=2.0, 8.8Hz, 1H), 8.01 (m,lH), 7.80-7.82 (m, 2H), 7.50 (d,J=7.6Hz, 1H), 7.25-7.33 (m, 4H), 7.06 (d, J=3.2Hz, 1H), 6.49 (d, J=3.2Hz, 1H), 3.85 (s, 2H), 3.26 (t, J=6.8Hz,2H), 3.26 (m, 1H), 3.02 (m,2H), 3.02 (s, 3H); MS-ESI m/z 609 (M+H) 实施例 100 l-(3,5-二 (三氟甲基)苯基) -3-(3-(6-(5-甲酰基呋喃 -2-基)喹唑啉 -4-基胺基) 苯基)脲 (L-14) 的制备

(a) 4-氯 -6-碘喹唑啉

向反应瓶中投入 6-碘喹唑啉 -4-酮 (5.44g, 20mmol) 、 氧氯化磷 (3.68g, 24mmol) 和无水甲苯(16mL)。在氮气保护下, 滴加三乙胺(2.43g, 24mmol)。滴完后升至 77°C 保温搅拌 2.5h。将所得反应物冷至 2°C搅拌 lh后,抽滤。滤饼用丙酮洗涤后,再在 lmol/L 氢氧化钠水溶液 (26 mL) 中室温打浆 30min。 抽滤, 依次用水和丙酮洗涤后, 真空干燥 得灰褐色结晶性固体(5.1 lg, 88%): 1HNMR(CDCl 3 )S9.08 (s, 1H), 8.68 (d, J=1.6Hz, 1H), 8.23 (dd, J=2.0,8.8Hz, 1H), 7.82 (d, J=8.8Hz, 1H)。

(b) l-(3,5-二 (三氟甲基)苯基) -3-(3-(6-碘喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲盐酸盐(L-3-14) 在氮气保护下, 将 4-氯 -6-碘喹唑啉 (0.58g, 2mmol) 和 J-14 (0.73g, 2mmol) 在异 丙醇(15mL) 中搅拌回流 2h, 缓慢冷至室温后过滤, 异丙醇洗涤得到黄褐色固体 L-3-14 (0.94g, 76%): 1 丽 MR (DMSO-de) δ 11.36 (brs), 10.11 (s, 1H), 9.58 (s, 1H), 9.23 (d, J=3.6Hz, 1H), 8.92 (m,lH), 8.36 (dd, J=1.2,8.8Hz, 1H), 8.14 (s,2H), 7.97 (s, 1H), 7.69 (d, J=8.4Hz, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.35-7.45 (m,3H)。

(c) l-(3,5-二 (三氟甲基)苯基) -3-(3-(6-(5-甲酰基呋喃 -2-基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基) 脲 (L-4-14)

以 L-3-14代替 L-3-3, 采用类似于 L-4-3的方法制备 L-4-14, 得桔黄色固体 (收率 78%): 1 丽 MR (DMSO-de) δ 10.10 (s, 1H), 9.69 (s, 1H), 9.36 (s, 1H), 9.06 (d, J=1.6Hz, 1H), 9.03 (s, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.31 (dd, J=2.0, 8.8Hz, 1H), 8.15 (s, 2H), 8.05 (s,lH), 7.88 (d,J=9.2Hz, 1H), 7.74 (d,J=3.6Hz, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.58 (d,J=8.0Hz, 1H), 7.42 (d,J=3.6Hz, 1H), 7.35 (t, J=8.4Hz, 1H), 7.27 (d,J=8.4Hz, 1H)。

(d) l-(3,5-二 (三氟甲基)苯基) -3-(3-(6-(5-((2- (甲磺酰基)乙胺基)甲基)呋喃 -2-基)喹唑 啉 -4-基胺基)苯基)脲 (L-14)

以 L-4-14代替 L-4-3, 采用类似于 L-3的方法制备 L-14, 得黄色固体 (收率 23%): 1H-NMR (DMSO-de) δ 9.88 ( s, 1H), 9.40 (s, 1H), 9.05 ( s, 1H), 8.79 (s, 1H),

8.55 (s, 1H), 8.15-8.16 (m,3H), 8.05 (s , 1H), 7.80 (d, J=8.8Hz, 1H), 7.62 (s , 1H),

7.56 (d, J=8.0Hz, 1H), 7.33 (t,J=8.0Hz, 1H), 7.25-7.27 (m, 1H), 7.06 (d , J=3.2Hz, 1H), 6.49 (d , J=3.2Hz, 1H), 3.85 (s, 2H), 3.26 (t, J=6.8Hz, 2H), 3.26 (m, lH), 3.01 (s, 3H), 2.99-3.02 (m,2H); MS-ESI m/z 693 (M+H) +。

实施例 101 l-(2,5-二氟苯基) -3-(3-(6-(5-((2- (甲磺酰基)乙胺基)甲基)呋喃 -2-基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲 (L-15 ) 的制备

(a) 1-(2,5-二氟苯基) -3-(3-(6-碘喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲盐酸盐 (L-3-15 ) 以 J-15代替 J-14,采用类似于 L-3-14的方法制备 L-3-15,得黄色固体(收率 84%): 1 丽 MR (DMSO-de) δ 11.23 (br s), 9.68 (s, 1H), 9.51 (m, 1H), 9.23 (d, J=1.2Hz, 1H), 8.96 (s,lH), 8.89 (m,lH), 8.33 (d, J=8.8Hz, 1H), 7.92-8.06 (m,2H), 7.70 (d,J=8.8Hz, 1H), 7.25-7.44 (m,4H), 6.79-6.84 (m, 1H)。

(b) l-(2,5-二氟苯基) -3-(3-(6-(5-甲酰基呋喃 -2-基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲

(L-4-15 )

以 L-3-15代替 L-3-3, 采用类似于 L-4-3的方法制备 L-4-15, 得桔黄色固体 (收率 77%): 1HNMR (DMSO-de) δ 10.10 (s, 1H), 9.70 (m, 1H), 9.22 (s, 1H), 9.07 (d, J=1.6Hz, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.62 (m, 1H), 8.31 (dd, J=1.6, 8.8Hz, 1H), 8.03-8.09 (m,2H), 7.89 (d,J=8.4Hz, 1H), 7.74 (d,J=4.0Hz, 1H), 7.54 (d,J=8.0Hz, 1H), 7.43 (d, J=3.6Hz, 1H), 7.26-7.41 (m, 3H), 6.82 (m, 1H)。

(c) l-(2,5-二氟苯基) -3-(3-(6-(5-((2- (甲磺酰基)乙胺基)甲基)呋喃 -2-基)喹唑啉 -4-基 胺基)苯基)脲 (L-15 )

以 L-4-15代替 L-4-3, 采用类似于 L-3的方法制备 L-15 , 得黄色固体(收率 23%) : iHNMR (DMSO-de) δ 9.89 (s, 1H), 9.26 ( s, 1H), 8.80 (s, 1H), 8.80 (s, 1H), 8.57

(s, 1H), 8.17 (dd, J=1.6,8.8Hz, 1H), 8.04-8.09 (m,2H), 7.82 (d,J=8.4Hz, 1H), 7.53 (d, J=8.0Hz, 1H), 7.34 (t,J=8.0Hz, 1H), 7.26-7.31 (m, 2H), 7.07 (d , J=3.6Hz, 1H), 6.83 (m, 1H), 6.50 (d , J=3.2Hz, 1H), 3.86 (s, 2H), 3.28 (t, J=6.8Hz, 2H), 3.28 (s,lH), 3.02 (s, 3H), 3.00-3.04 (m,2H); MS-ESI m/z 593 (M+H)

实施例 102 l-(2-甲基 -5-氟苯基 )-3-(3-(6-(5-((2- (甲磺酰基)乙胺基)甲基)呋喃 -2-基)喹 唑啉—4-基胺基)苯基)脲 (L-16) 的制备

(a) 1-(2-甲基 -5-氟苯基 )-3-(3-(6-碘喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲盐酸盐 (L-3-16) 以 J-16替 J-14,采用类似于 L-3-14的方法制备 L-3-16,得黄褐色固体(收率 93%): 1 丽 MR (DMSO-d 6 ) δ 11.42 (br s), 9.68 (s, 2H), 9.25 (m, 1H), 9.23 (d, J=1.2Hz, 1H), 8.92 (m,lH), 8.36 (dd, J=2.0, 8.8Hz, 1H), 7.92 (m,lH), 7.71 (d,J=8.8Hz, 1H), 7.35-7.45 (m, 3H), 7.15 (t,J=8.8Hz, 1H), 7.03 (dd, J=2.0, 8.4Hz, 1H), 2.16 (s, 3H) o

(b) l-(2-甲基 -5-氟苯基 )-3-(3-(6-(5-甲酰基呋喃 -2-基)喹唑啉 -4-基胺基)苯基)脲 (L-4-16)

以 L-3-16代替 L-3-3, 采用类似于 L-4-3的方法制备 L-4-16, 得浅黄色结晶 (收率 49%) : 1HNMR (DMSO-d 6 ) δ 10.09 (s, 1H), 9.69 (s, 1H), 9.06 (s, 1H), 8.74 (s, 2H), 8.60 (s , 1H), 8.31 (dd, J=1.6, 8.8Hz, 1H), 8.00 (s , 1H), 7.87 (d , J=8.4Hz, 1H), 7.73 (d , J=3.6Hz, 1H), 7.49 (d,J=8.4Hz, 1H), 7.42-7.45 (m,2H), 7.32 (t,J=8.0Hz, 1H), 7.25 (d,J=8.0Hz, 1H), 7.16 (t,J=8.8Hz, 1H), 7.03 (dd, J=2.0, 8.4Hz, 1H), 2.17 (s, 3H) o

(c) l-(2-甲基 -5-氟苯基 )-3-(3-(6-(5-((2- (甲磺酰基)乙胺基)甲基)呋喃 -2-基)喹唑啉 -4- 基胺基)苯基)脲 (L-16)

以 L-4-16代替 L-4-3,采用类似于 L-3的方法制备 L-16,得浅黄色固体(收率 14%): iHNMR (DMSO-de) δ 9.87 (s, 1H), 8.80 ( s, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.16 (dd, J=1.6, 8.8Hz, 1H), 8.01 (s, 2H), 7.81 (d,J=8.8Hz, 1H), 7.50 (d, J=8.0Hz, 1H), 7.44 (dd, J=1.6, 12.4Hz, 1H), 7.32(t, J=8.0Hz, 1H), 7.25 (d, J=8.4Hz, 1H), 7.17 (t, J=8.8Hz, 1H), 7.03-7.07 (m, 2H), 6.50 (d , J=3.2Hz, 1H), 3.86 (s, 2H), 3.30 (t, J=6.8Hz,2H), 3.30 (s,lH), 3.02 (s, 3H), 3.00-3.04 (m,2H), 2.18 (s, 3H); MS-ESI: m/z 589 (M+H) +。 第二部分 生物学实施例

实施例 103 体外抗人肿瘤细胞系和人脐静脉内皮细胞增殖 活性试验 1.1 材料与方法

样品配制: 用 DMSO (Merck)溶解后, 加入 PBS (-)配成 100(^g/ml的溶液或均匀的 混悬液, 然后用含 DMSO的 PBS (-)稀释。

细胞株: A549 (人肺癌细胞)、 HCT116 (人肠癌细胞)、 CEM (人白血病细胞) 和 MCA-MB-435 (人黑色素瘤细胞) 和 HUVEC (人脐静脉内皮细胞)。 以上细胞株均由上 海医药工业研究院药理活性测试中心冻存和传 代。

培养液: HUVEC为 DMEM+10〜15%FBS+双抗; 其余为 DMEM+10%NBS+双抗、 DMEM+ 10%FBS+双抗。

全自动酶标仪: 型号: WellscanMK-2, 生产厂商: Labsystems。

试验方法: MTT法。 96孔培养板每孔加入浓度为 l x 10 5 个 /ml 的 HUVEC或者浓度 为 4-5X 10 4 个 /ml的其他细胞悬液 100μ1, 置 37°C, 5% C0 2 培养箱内。 24h后, 加入样品 液, ΙΟμΙ/孔, 设双复孔, 37°C, 5% C0 2 作用 72h。 每孔加入 5mg/ml的 MTT溶液 20μ1, 作用 4h后加入溶解液, ΙΟΟμΙ/孔, 置培养箱内, 溶解后用 WellscanMK-2全自动酶标仪测 570nm OD值。

MTT法。 96孔板每孔加入浓度为 l x lO 5 个 /ml的细胞悬液 100μ1, 置 37°C, 5% C0 2 培养箱内。 24h后, 加入样品液, ΙΟμΙ/孔, 设双复孔, 37°C, 5% C0 2 作用 48h。 每孔加 入 5mg/ml的 MTT溶液 20μ1, 作用 4h后加入溶解液, ΙΟΟμΙ/孔, 置培养箱内, 溶解后用 ΜΚ-2全自动酶标仪测 570nm OD值。

1.2 试验结果

试验结果见表 1。

表 1 具体的式 I化合物对人肿瘤细胞的体外增殖抑制作用

/s/u O /-sionosld68oiAV

L-3 94.04 93.93 94.16 100 100

L-14 92.90 95.04 93.85 100 100

L-15 0 1 1.81 0 22.37 34.51

L-16 25.93 77.44 70.98 52.34 100 实施例 104 体外蛋白激酶抑制试验

米用 Caliper mobility shift assay (参见 Card A等. Journal of Biomolecular Screening, 2009, 14(l):31-42. )进行蛋白激酶抑制试验。 检测的阳性对照为不加样品的空白组, 阴性 对照为 EDTA组, 参考化合物为 Staurosporine。 检测项目是 20个式 I化合物在 10、 1和 Ο. Ι μΜ等 3个浓度下, 在 ATP Km浓度下对于 ALK、 Aurora A、 EGFR、 FGFR1、 FLT-3、

VEGFR-2、 c-KIT、 c-MET、 PDGFR β和 TIE-2等 10个激酶的抑制百分率。 所用仪器为

Caliper EZ Reader II。 激酶反应条件和试验结果分别见表 2、 表 3和表 4。

表 2 激酶反应条件

表 3 20个式 I化合物对蛋白激酶的百分抑制率

0.1 8 21 48 30 27

10 43 26 104 -71 80

D2-13 1 22 3 105 -65 53

0.1 3 0 65 -9 10

10 54 76 93 -8 96

D4-1 1 33 74 88 -12 92

0.1 4 7 32 -15 44

10 103 93 104 92 100

DlO-9 1 86 61 73 0 99

0.1 15 -9 22 -3 73

10 102 98 103 103 98

D52-1-4 1 98 68 91 25 92

0.1 27 10 37 19 85

10 101 89 103 49 99

D52-3-1 1 63 67 102 0 93

0.1 3 -8 45 -5 51

10 104 95 105 104 99

D52-3-4 1 101 62 90 8 98

0.1 18 -14 19 4 67 表 4 20个式 I化合物对蛋白激酶的百分抑制率 (续) (%

0.1 46 50 84 87 25

10 99 87 101 97 -179

D52-3-1 1 87 89 101 97 -69

0.1 55 62 55 99 -6

10 99 96 102 99 90

D52-3-4 1 101 99 100 99 15

0.1 62 59 76 100 0 实施例 105 体内抗肿瘤活性试验

选择 7个式 I化合物,以索拉非尼为阳性对照,采用移植 裸鼠的 A549人肺癌模型, 均以 25mg/kg剂量经口灌胃给药 12天, 以基于相对肿瘤体积(RTV) 的肿瘤抑制率为主 要指标考察其体内抗肿瘤作用, 并通过观察受试裸鼠的体重变化初步考察其毒 性反应。 体内试验结果见表 5。

肿瘤体积计算公式为: TV = ab 2 /2, 其中 a为肿瘤长径 (mm), b为相垂直的肿瘤短径 (mm)。 相对肿瘤体积计算公式为: RTV = Vt/Vo, Vo为分笼时 (即 d0) 测量所得肿瘤体 积, Vt为每一次测量时 (即 d4、 d8、 dl2、 dl6) 的肿瘤体积。

空白对照组平均 RTV—给药组平均 RTV

肿瘤抑制率 l 00%

空白对照组平均 RTV

表 5 7个式 I化合物对移植于裸鼠的 A549人非小细胞肺癌的抑瘤作用

与空白对照组比较 (t检验): *P<0.05, **P<0.01。 实施例 106 体内抗肿瘤活性试验

选择 2个式 I化合物 (100mg/kg剂量), 以索拉非尼 (50mg/kg剂量) 为阳性对照, 采用移植于裸鼠的 A549人肺癌模型,均经口灌胃给药 14天,以基于相对肿瘤体积 (RTV) 的肿瘤抑制率为主要指标考察其体内抗肿瘤作 用, 并通过观察受试裸鼠的体重变化初步 考察其毒性反应。体内试验结果见表 6。相对肿瘤体积、肿瘤抑制率%计算方法同 施例 105。

表 6 2个式 I化合物对移植于裸鼠的 A549人非小细胞肺癌的抑瘤作用

与空白对照组比较 (t检验): *P<0.05, **P<0.01。 本发明式 I化合物体外对人肿瘤细胞系和人脐静脉内皮 胞 (HUVEC) 具有生长抑 制活性。所述人肿瘤细胞系包括但不限于 A549人肺癌细胞、 HCT116人肠癌细胞、 CEM 人白血病细胞和 MCA-MB-435人黑色素瘤细胞。

本发明式 I化合物体内对人肿瘤异种移植瘤具有生长抑 活性。 所述人肿瘤异种移 植瘤包括但不限于移植于裸鼠的 A549人肺癌。