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Title:
COMPOSITION COMPRISING AT LEAST ONE PROBIOTIC, AT LEAST ONE ANTIOXIDANT AND POLYSACCHARIDES FROM ADAPTOGENIC PLANT(S)
Document Type and Number:
WIPO Patent Application WO/2022/144509
Kind Code:
A1
Abstract:
The invention relates to a composition comprising at least one probiotic, an antioxidant compound and polysaccharides from adaptogenic plants for reducing i) the release and/or production of inflammation mediators, in particular cytokines IL-6, TNF-alpha and IL-1beta and/or ii) immunological diseases and/or iii) dysbioses, responsible for disorders of the digestive tract, in particular leaky gut syndrome, which is involved in particular in higher susceptibility to viral and/or bacterial infections.

Inventors:
FREY MICHEL (FR)
Application Number:
PCT/FR2021/050557
Publication Date:
July 07, 2022
Filing Date:
March 30, 2021
Export Citation:
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Assignee:
IDEC THERAPEUTIC (FR)
International Classes:
A23L33/105; A23L33/125; A23L33/135; A61K31/352; A61K31/4415; A61K31/702; A61K31/7076; A61K31/714; A61K36/481; A61K36/489; A61K45/06; A61P1/00; A61P17/00; A61P31/14; A61P31/16
Domestic Patent References:
WO2012175519A12012-12-27
Foreign References:
CN104187710A2014-12-10
CN107136334B2020-03-20
FR2943248A12010-09-24
CN108553406B2020-12-01
CN111387388A2020-07-10
US20100015109A12010-01-21
US6368617B12002-04-09
Other References:
DATABASE GNPD [online] MINTEL; 17 October 2005 (2005-10-17), ANONYMOUS: "Optimized Superfood Meal Replacement", XP055626152, retrieved from https://www.gnpd.com/sinatra/recordpage/10237526/ Database accession no. 10237526
BAUD ET AL., FRONT.PUBLIC HEALTH, vol. 8, 2020, pages 186
KLEEREBEZEM ET AL., PNAS, vol. 100, 2003, pages 1990 - 1995
MAKAROVA K. ET AL., PNAS, vol. 42, 2006, pages 15611 - 15616
MAKAROVAKOONIN, J. BACTERIOL., vol. 4, 2007, pages 1199 - 1208
NAM SU ET AL., PLOSONE, vol. 13, 2018
REUTER, CURRENT ISSUES INTEST. MICROBIOL., vol. 2, 2001, pages 43 - 53
TURRONI ET AL., APPLY ENVIRONNEMENT MICROBIOL. 2009, vol. 75, 2009, pages 1534 - 1545
DAVID GROEGER ET AL., GUT MICROBES, vol. 4, 2013, pages 325 - 339
M.BARAIBAR ET AL., J.PROTEOMICS, 2013
Attorney, Agent or Firm:
BRANDON IP (FR)
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Claims:
REVENDICATIONS

1. Composition comprenant au moins un probiotique, un composé antioxydant et des polysaccharides de plante adaptogène.

2. Composition selon la revendication 1 , caractérisée en ce que le composé antioxydant est choisi seul ou en mélange, parmi : la quercétine et/ou d’un analogue de quercétine et/ou un extrait de plantes en contenant.

3. Composition selon la des revendication 1 , caractérisée en ce que le composé antioxydant est la S-Adénosyl-méthionine (SAM).

4. Composition selon l’une des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que le probiotique est préférentiellement sous forme de souches probiotiques, choisies parmi les souches probiotiques suivantes seules ou en mélange : Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus rhamnosus GG, Lactobacillus easel, Lactobacillus gasseri, Bifidobacterium longum, Lactobacillus plantarum, Bifidobacterium adolescentis, Lactobacillus reuteri, Bifidobacterium infantis.

5. Composition selon la revendication 4, caractérisée en ce qu’elle comprend au moins une souche probiotique de préférence vivante sous la forme suivante : lyophilisée, liquide en suspension, sous la forme d’extrait et/ou de sécrétome partiel ou complet et/ou de molécule extraite et/ou purifiée.

6. Composition selon les revendications 1 à 5, caractérisée en ce que la quercétine et/ou un analogue de quercétine est choisi notamment parmi isoquercetin (quercetin-3b-o-glucoside), quercetagetin, quercetin-3-gallate et/ou un extrait de plantes en contenant est choisi parmi les extraits de plantes suivantes : oseille (Rumex sp.), coriandre (Coriandrum sativum), oignons, asparagus (Asparagus officinalis), cresson (Nasturtium officinalis), okra (Abelmoschus esculentus), chou (Brassica oleracea), Sophora japonica.

7. Composition selon les revendications 1 à 6, caractérisée en ce les polysaccharides de plante adaptogène sont extraits ou purifiés à partir de plante sous les formes suivantes: feuille et/ou racine lyophilisée, extraits complets ou partiels.

8. Composition selon la revendication 7, caractérisée en ce que les polysaccharides sont extraits de plante adaptogène choisie parmi les genres Astragalus, Dioscorea, Schisandra, Panax, Eleuterococcus, Rosmarinus, Pfaffia, Morinda sp., Cordyceps or Lepidium genera, notamment sous forme d’extrait sec ou purifié.

9. Composition selon les revendications 1 à 8, dans laquelle la composition peut comprendre un galacto-oligosaccharide ou des fructo-oligosaccharides issus de plante adaptogène utilisés comme prébiotique.

10. Composition selon les revendications 1 à 9, comprenant une quantité de probiotique(s) pour réduire la libération et/ou la production des médiateurs de l’inflammation notamment les cytokines IL-6, TNF-alpha et ILI béta.

11. Composition selon les revendications 1 à 9, comprenant une quantité de probiotique(s) pour réduire les désordres immunologiques, en particulier pour réduire les dysbioses.

12. Composition selon les revendications 1 à 9, comprenant une quantité de probiotique(s) pour réduire i) la libération et/ou la production des médiateurs de l’inflammation notamment les cytokines IL6, TNF-alpha et ILI béta et/ou ii) les désordres immunologiques et/ou iii) les dysbioses, responsables d’une plus grande susceptibilité aux infections virales et/ou bactériennes.

13. Composition selon les revendications 1 à 9, comprenant une quantité efficace de probiotique(s) pour réduire et/ou prévenir les troubles (pathologiques ou sub-cliniques) issus notamment d’une dysbiose du tube digestif subclinique qu’elle soit d’origine endogène ou exogène due à une infection, la pollution, le stress.

14. Complément nutritionnel solide ou liquide caractérisé en ce qu’il contient une composition selon les revendications 1 à 9.

15. Utilisation non-thérapeutique d’un complément nutritionnel, selon la revendication 14.

16. Utilisation non-thérapeutique de la composition selon les revendications 1 à 9, pour corriger une dysbiose cutanée et/ou les désordres subcliniques ou cliniques (i.e. dermatologiques) associés à ces dysbioses.

REVENDICATIONS MODIFIÉES reçues par le Bureau international le 4 mai 2022

1. Composition comprenant au moins un probiotique, un composé antioxydant et des polysaccharides de plante adaptogène, caractérisée en ce que le composé antioxydant est choisi seul ou en mélange, parmi : la quercétine et/ou d’un analogue de quercétine et/ou un extrait de plantes en contenant la S-Adénosyl-méthionine (SAM).

2. Composition selon la revendication 1 , caractérisée en ce que le probiotique est préférentiellement sous forme de souches probiotiques, choisies parmi les souches probiotiques suivantes seules ou en mélange : Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus rhamnosus GG, Lactobacillus casei, Lactobacillus gasseri, Bifidobacterium longum, Lactobacillus plantarum, Bifidobacterium adolescentis, Lactobacillus reuteri, Bifidobacterium infantis.

3. Composition selon la revendication 2, caractérisée en ce qu’elle comprend au moins une souche probiotique de préférence vivante sous la forme suivante : lyophilisée, liquide en suspension, sous la forme d’extrait et/ou de sécrétome partiel ou complet et/ou de molécule extraite et/ou purifiée.

4. Composition selon les revendications 1 à 3, caractérisée en ce que la quercétine et/ou un analogue de quercétine est choisi notamment parmi isoquercetin (quercetin-3b-o-glucoside), quercetagetin, quercetin-3-gallate et/ou un extrait de plantes en contenant est choisi parmi les extraits de plantes suivantes : oseille (Rumex sp.), coriandre (Coriandrum sativum), oignons, asparagus (Asparagus officinalis), cresson (Nasturtium officinalis), okra (Abelmoschus esculentus), chou (Brassica oleracea), Sophora japonica.

5. Composition selon les revendications 1 à 4, caractérisée en ce les polysaccharides de plante adaptogène sont extraits ou purifiés à partir de plante sous les formes suivantes: feuille et/ou racine lyophilisée, extraits complets ou partiels.

6. Composition selon la revendication 5, caractérisée en ce que les polysaccharides sont extraits de plante adaptogène choisie parmi les genres Astragalus, Dioscorea, Schisandra, Panax, Eleuterococcus, Rosmarinus, Pfaffia, Morinda sp., Cordyceps or Lepidium genera, notamment sous forme d’extrait sec ou purifié.

7. Composition selon les revendications 1 à 6, dans laquelle la composition peut comprendre un galacto-oligosaccharide ou des fructo-oligosaccharides issus de plante adaptogène utilisés comme prébiotique.

FEUILLE MODIFIEE (ARTICLE 19)

8. Composition selon les revendications 1 à 7, comprenant une quantité de probiotique(s) destinée à être utilisée pour réduire la libération et/ou la production des médiateurs de l’inflammation notamment les cytokines IL-6, TNF-alpha et ILI béta.

9. Composition selon les revendications 1 à 8, comprenant une quantité de probiotique(s) destinée à être utilisée pour réduire les désordres immunologiques, en particulier pour réduire les dysbioses.

10. Composition selon les revendications 1 à 8, comprenant une quantité de probiotique(s) destinée à être utilisée pour réduire i) la libération et/ou la production des médiateurs de l’inflammation notamment les cytokines IL6, TNF-alpha et ILI béta et/ou ii) les désordres immunologiques et/ou iii) les dysbioses, responsables d’une plus grande susceptibilité aux infections virales et/ou bactériennes.

11. Composition selon les revendications 1 à 8, comprenant une quantité efficace de probiotique(s) destinée à être utilisée pour réduire et/ou prévenir les troubles (pathologiques ou sub-cliniques) issus notamment d’une dysbiose du tube digestif subclinique qu’elle soit d’origine endogène ou exogène due à une infection, la pollution, le stress.

12. Complément nutritionnel solide ou liquide caractérisé en ce qu’il contient une composition selon les revendications 1 à 7.

13. Utilisation non-thérapeutique d’un complément nutritionnel, selon la revendication 12.

14. Utilisation non-thérapeutique de la composition selon les revendications 1 à 7, pour corriger une dysbiose cutanée et/ou les désordres subcliniques ou cliniques (i.e. dermatologiques) associés à ces dysbioses.

FEUILLE MODIFIEE (ARTICLE 19)

Description:
COMPOSITION COMPRENANT AU MOINS UN PROBIOTIQUE, AU MOINS UN ANTIOXYDANT ET DES POLYSACCHARIDES DE PLANTE(S) ADAPTOGENE(S).

DOMAINE TECHNIQUE DE L’INVENTION

[0001] L’invention se rapporte au domaine des compositions destinées à la santé humaine. Une telle composition comprenant au moins un probiotique, un composé anti-oxydant et des polysaccharides de plante(s) adaptogène(s) peut être utilisée pour la prévention et/ou le traitement des maladies infectieuses d’origine bactériennes ou virales et /ou tout désordre lié à un déséquilibre du microbiote intestinal (dysbiose) tels que les inconforts et troubles digestifs fonctionnels et le syndrome de l’intestin poreux (leaky gut) et plus généralement les désordres nerveux, métaboliques, hépatiques, rénaux, cutanés et/ou pulmonaires. La composition peut se présenter sous la forme d’un complément alimentaire.

ETAT DE L’ART ANTERIEUR

[0002] Les maladies infectieuses sont des troubles causés par des micro-organismes tels que des bactéries, des virus, des champignons ou des parasites. De nombreux organismes vivent dans et sur notre corps. Ils sont pour certains d’entre eux inoffensifs ou même utiles, on désigne alors sous le terme de formes commensales. Mais dans d’autre cas, ce sont également des microorganismes qui provoquent des maladies. Certaines maladies infectieuses peuvent être transmises de personne à personne ou transmises par des insectes ou d'autres animaux ou par la consommation d'aliments ou d'eau contaminés ou encore par l'exposition à des organismes présents dans l'environnement. Les signes et symptômes varient en fonction de l'organisme responsable de l'infection, mais comprennent souvent de la fièvre et de la fatigue. Des infections légères peuvent répondre au repos et aux remèdes maison tandis que certaines infections potentiellement mortelles peuvent nécessiter une hospitalisation.

[0003] De nombreuses maladies infectieuses, comme la grippe, peuvent être limitées dans leur propagation par des vaccins. Un lavage fréquent et complet des mains aide également à se protéger d’un grand nombre de maladies infectieuses. Chaque maladie infectieuse a ses propres signes et symptômes spécifiques. Les signes et symptômes généraux communs à un certain nombre de maladies infectieuses comprennent : la fièvre, la fatigue, les diarrhées, les douleurs musculaires, la toux, les maux de tête.

[0004] La COVID19 récente est l'une des maladies infectieuses concernées par la présente invention. L'infection par le SARS-CoV-2 est transmise par des microgouttelettes produites lors de la toux et des éternuements chez les patients symptomatiques, mais peut également survenir chez des personnes asymptomatiques et avant l'apparition des symptômes. Des études ont montré des charges virales plus élevées dans la cavité nasale que dans la gorge, sans différence de charge virale entre les personnes symptomatiques et asymptomatiques. Les patients peuvent être contagieux aussi longtemps que durent les symptômes et même lors de la guérison clinique. Certaines personnes peuvent jouer le rôle de super contaminateur : un citoyen britannique qui a assisté à une conférence à Singapour a infecté 11 autres personnes alors qu'il séjournait dans une station des Alpes françaises et à son retour au Royaume-Uni. Les microgouttelettes infectées peuvent se propager de 1 à 3 m (voir plus) et se déposer sur les surfaces. Le virus peut rester viable sur des surfaces pendant des jours dans des conditions atmosphériques favorables, mais est détruit en moins d'une minute par des désinfectants courants comme l'hypochlorite de sodium, le peroxyde d'hydrogène, etc. L'infection est contractée soit par inhalation de ces gouttelettes, soit par contact avec des surfaces contaminées par celles-ci, puis en touchant le nez, la bouche et les yeux, soit par voie orale. Le virus est également présent dans les selles et la contamination de l'approvisionnement en eau et la transmission ultérieure par aérosolisation / voie féco-orale est également émise.

[0005] La période d'incubation varie de 2 à 14 jours [médiane à 5 jours]. Des études ont identifié l'angiotensine 2 (ACE2) comme le récepteur par lequel le virus pénètre dans les muqueuses. Tous les patients atteints de pneumonie causée par le SRAS-CoV-2 qui développent une insuffisance respiratoire sévère (SRF) présentent des réponses hyper-inflammatoires avec des caractéristiques de dérégulation immunitaire et de syndrome d'activation des macrophages (MAS). Les formes graves de la maladie sont également souvent accompagnées d’un désordre du tube digestif caractéristiques du syndrome de l’intestin poreux (leaky gut). Ce dernier élément permet de relier un déséquilibre du microbiote digestif à la gravité de la maladie. Pour les inventeurs, il est ainsi, logique de concevoir le bénéfice d’un microbiote équilibré dans la prévention des formes graves de la COVID19.

[0006] Les formes graves de l’infection SARS-CoV-2 sont caractérisés par un orage de cytokines pro-inflammatoires (cytokine storm) composé notamment par un excès d'I L6 , de TNF-a et d’IL-10. Cette surproduction de cytokines est l’une des caractéristiques clés du déséquilibre immunitaire associé aux formes sévères avec la surproduction de cytokines pro-inflammatoires par les monocytes et la diminution de la population de lymphocytes caractérisée par une lymphopénie CD4+ et probablement CD8+. En parallèle, le nombre de cellules tueuses (NK, natural killer) est amoindri, probablement en raison de la propagation rapide du virus. Pour résumer, la signature unique de la dérégulation immunitaire chez les patients atteints des formes graves du SRAS-CoV- 2, se caractérise d'une part par une forte capacité de production de cytokines et de leurs formes circulantes (en particulier IL-6) et d'autre part par des défauts de la fonction lymphoïde associée notamment, à une diminution médiée par IL-6 de l'expression de HLA-DR sur les cellules monocytes-CD14.Dans la prévention de la COVID19, ou de toute autre infection virale et/ou bactérienne il existe donc le besoin de prévenir une dérégulation immunitaire, notamment au moyen d’une composition permettant de rétablir le déséquilibre du microbiote intestinal (dysbiose) sans utilisation de médicaments. La présente invention permet de remédier à ce problème en rééquilibrant le microbiote intestinal par l’administration d’une composition selon l’invention. En effet, la présente invention se rapporte à une composition comprenant au moins un probiotique, de préférence sous forme de souche vivante ou de fragments désactivés, au moins un composé antioxydant et des polysaccharides notamment, issus d’une plante adaptogène. Si cette plante a également un rôle prébiotique, il vient en complément des effets liés aux probiotiques.

[0007] Les probiotiques sont décrits pour réduire la gravité de certaines infections virales et envisagées pour avoir un effet sur d'autres souches de coronavirus (Baud et al., Front. Public Health 2020, vol. 8 :186).

[0008] Le dysfonctionnement immunitaire et la tempête de cytokines (cytokine storm) sont des mécanismes complexes. La présente invention cible à différents niveaux ces désordres et fourni un traitement prophylactique plus efficace pour l’humain ou les animaux.

EXPOSE DE L’INVENTION

[0009] Dans un mode de réalisation, l’invention se rapporte à une composition comprenant au moins un probiotique, au moins un composé antioxydant et des polysaccharides issus des plantes adaptogènes à titre notamment, de prebiotique ; le probiotique étant préférentiellement sous forme de souches probiotiques. Ces souches probiotiques étant choisies parmi les souches probiotiques suivantes, seul ou en mélange : Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus easel, Lactobacillus paracasei, Lactobacillus gasseri, Bifidobacterium longum, Lactobacillus plantarum, Bifidobacterium adolescentis, Lactobacillus reuteri, Bifidobacterium infantis. Dans le cadre de l’invention, l'utilisation des probiotiques pour lutter contre les infections respiratoires notamment virales est liée à i) une symptomatologie digestive avec une multiplication virale digestive de l'infection comme dans le cas de la COVID-19, ii) le lien entre le tube digestif et le poumon (axe intestin-poumon) et iii) le rôle de certaines souches probiotiques spécifiques sur l'équilibre entre les cytokines pro et anti-inflammatoires (c'est-à-dire le rapport entre les cytokines de type 1 et de type 2) respectivement, IL6 i IL12 i IL1 , TNF-alpha et IL-10 i TGF-b).

[00010] Les probiotiques sont des « micro-organismes vivants » qui, lorsqu'ils sont administrés en quantités adéquates, confèrent un avantage à l'hôte (FAO i OMS, 2001 ). Les produits vendus contenant des probiotiques comprennent des aliments (comme certains yaourts, les laits fermentés type kéfir ...), des compléments alimentaires et quelques produits qui ne sont pas utilisés par voie orale, comme des crèmes pour la peau. Les probiotiques sont connus comme étant extrêmement bénéfiques pour la santé via un rééquilibrage du microbiome intestinal et le contrôle de souches pathogènes.

[00011] Lactobacillus plantarum est une bactérie polyvalente trouvée dans une variété de niches écologiques, allant des fermentations végétales au tractus gastro-intestinal humain. Les Lactobacillus plantarum ont une forme de bâtonnet avec des extrémités arrondies, droites, généralement de 0,9 à 1 ,2 pm de large et de 3 à 8 pm de long, se présentant individuellement, par paires ou en courtes chaînes. Le génome de la première bactérie isolée d’un tube digestif humain L. plantarum souche WCFS1 a été séquencé (Kleerebezem et al., PNAS 2003, vol.100 tome 4 ; 1990-1995) et sa taille de 3,3 Mb est parmi les plus importantes connues pour les bactéries vivant dans le tube digestif (Makarova K. et al., PNAS 2006, 103 vol.42 ; 15611-15616) ; Makarova et Koonin, J. Bacteriol.2007, tome189 vol.4 1199- 1208). On pense qu'une telle longueur de génome est liée à la diversité des niches environnementales dans lesquelles L. plantarum est rencontré.

[00012] Lactobacillus reuteri est une bactérie symbiotique intestinale typique qui joue un rôle important dans le maintien de la stabilité de la flore intestinale et de la santé de l'hôte. Dans un article récent, des auteurs ont publié que Lactobacillus reuteri pourrait activer les macrophages et que les macrophages traités avec Lactobacillus reuteri ont une capacité accrue de phagocytose et d’élimination de Salmonella typhimurium intracellulaire.

Lactobacillus rhamnosus et notamment Lactobacillus rhamnosus GG (souche ATCC53103) est une souche probiotique extrêmement bien étudiée. Il a été découvert en 1985 et de nombreuses études ont prouvé plus de 40 avantages pour la santé. Lactobacillus rhamnosus GG, a une très bonne adhérence à la paroi intestinale et est donc considéré comme un bon probiotique. Ce probiotique stimule le système immunitaire, combat les allergies et apporte un bénéfice digestif sur le Syndrome du Côlon irritable (SCI) et la constipation. Les avantages de Lactobacillus rhamnosus GG sont nombreux : gestion du diabète, effets stimulants de l’immunité : combat les infections bactériennes, inhibe les ulcères induit par H. pylori, stimule l'immunité générale, améliore l'immunité chez les patients atteints du VIH / sida, diminue les symptômes du VIH / sida. Le potentiel antiinflammatoire de Lactobacillus rhamnosus souche 4B15 et Lactobacillus gasseri souche 4M13 isolés à partir de matières fécales infantiles a été également récemment décrit (Nam Su et al., PloSone, 2018 vol.13, tome 2).

[00013] Les bifidobactéries sont des habitants naturels du tractus gastro-intestinal possédant des adaptations génétiques qui permettent la colonisation de cet habitat difficile et complexe. Les bifidobactéries interagissent avec des éléments clés du fonctionnement intestinal et contribuent ainsi au maintien de l'homéostasie.

[00014] Des progrès scientifiques récents ont démontré que les bifidobactéries, grâce à des interactions avec l'hôte, peuvent réduire la charge antigénique mucosale en améliorant la barrière intestinale et en privilégiant la régulation des réponses immunitaires locales et systémiques. En raison de leurs bienfaits reconnus pour la santé humaine, les bifidobactéries sont utilisées comme probiotiques.

[00015] Une douzaine de souches de Bifidobacterium aux effets cliniquement documentés sont disponibles dans le commerce. La moitié d'entre elles sont des Bifidobacterium animalis subsp. lactis et les autres sont Bifidobacterium longum subsp. longum, B. longum subsp. infantis ou souches de Bifidobacterium breve. Bifidobacterium adolescentis qui a été pour la 1 ère fois isolée dans l'intestin d'un adulte (Reuter, Current Issues Intest. Microbiol. 2001 ; vol.2 T. 2 ;43-53). Des souches de B. adolescentis sont fréquemment détectées dans le tractus intestinal humain adulte en bonne santé (healthy gut) (Turroni et al., 2009 Apply Environnement Microbiol. 2009, vol.75 tome 6, pp 1534-1545).

[00016] David Groeger et al, (Gut Microbes, 2013 ; vol.4 ; 325-339) montrent que l'administration orale de B. infantis souche 35624 module le milieu des cytokines à la fois gastro-intestinales et non gastro-intestinales dans les troubles inflammatoires et chez les sujets sains. L'administration orale de B. infantis 35624 était suffisante pour réduire les biomarqueurs inflammatoires systémiques à la fois gastro-intestinaux et extra-intestinaux dans les troubles inflammatoires.

[00017] Dans le cadre de l’invention, la composition telle que décrite précédemment comprend au moins une souche probiotique de préférence vivante sous la forme suivante: lyophilisée, liquide en suspension, ou sous la forme d’extrait et/ou de sécrétome partiel ou complet, de molécule extraite et/ou purifiée.

[00018] D’une manière générale, les quantités des différents ingrédients dans les compositions selon l’invention, sont des quantités efficaces ou substantielles. Par quantité efficace ou substantielle, il est entendu une quantité pour un ou plusieurs ingrédients donnés, suffisante pour permettre de constater un effet pour un état à un temps précis par comparaison avec un état initial, c’est-à-dire sans prise du ou des ingrédients visés.

[00019] Dans le contexte de l’invention, les antioxydants utilisés sont de nature exogène ou endogène. A titre d’exemple on peut citer la vitamine E, la lutéine, la vitamine G, le béta- carotène, le Resveratrol, les flavonoïdes, et bioflavonoïdes et le lycopène.

[00020] Dans un mode de réalisation particulier, l’invention se rapporte à une composition dans laquelle le composé antioxydant est choisi parmi la quercétine et/ou un analogue de la quercétine et/ou d’un extrait de plante(s) la contenant, seul ou en mélange. La quercétine est un flavonoïde aux propriétés antioxydantes. On prétend que la capacité de la quercétine exerce de nombreux effets bénéfiques sur la santé, y compris la protection contre diverses maladies telles que l'ostéoporose, le cancer du poumon et les maladies cardiovasculaires. La quercétine (3,3',4',5,7-pentahydroxyflavone) est de couleur jaune et est peu soluble dans l'eau chaude, assez soluble dans l'alcool et les lipides et est insoluble dans l'eau froide. On dit que la quercétine est l'un des bioflavonoïdes les plus largement utilisés pour le traitement des troubles métaboliques et inflammatoires.

[00021] De plus, la quercétine et ses analogues sont connus pour présenter des effets antibactériens contre presque toutes les souches de bactéries, affectant en particulier le système gastro-intestinal, respiratoire, urinaire et cutané. Leur capacité anti-infectieuse et anti-replicatifs contribue éventuellement à leurs caractéristiques antivirales. Les virus qui répondent généralement aux flavonoïdes sont l'adénovirus, le virus de l'herpès simplex, le virus de l'encéphalite japonaise et le virus respiratoire syncytial. La quercétine est l'un des flavonoïdes alimentaires les plus abondants trouvés dans les fruits (principalement les agrumes) et les baies comme les myrtilles. Les concentrations les plus élevées de quercétine ont été trouvées dans des légumes tels que l’oseille (Rumex sp), la coriandre (Coriandrum sativum), les oignons, les asperges (Asparagus officinalis), le cresson (Capucine officinalis), le chou (Brassica oleracea), les pommes, les cerises et les baies.

[00022] Dans un mode de réalisation particulier de l’invention, la composition selon l’invention comprend de la quercétine et/ou un analogue de quercétine. Les analogues de la quercétine sont définis comme des flavonoïdes naturels qui présentent un large éventail d'activités biologiques comme l'isoquercétine (quercétine-3b-o-glucoside), la quercétagétine, la quercétine-3-gallate. Ainsi, l’analogue de la quercétine est notamment choisi parmi l’isoquercétin (quercetin-3b-o-glucoside), la quercétagetin, la quercétin-3- gallate. La quercétine peut également être un extrait de plantes en contenant est choisi parmi les extraits de plantes suivantes : oseille (Rumex sp), coriandre (Coriandrum sativum), oignons, asperges (Asparagus officinalis), cresson (Nasturtium officinalis), okra (Abelmoschus esculentus), le chou (Brassica oleracea). La quercétine est également présente dans des extraits d’arbre des pagodes (Sophora japonica).

[00023]Selon un autre de mode de réalisation de l’invention, l’antioxydant est la S-Adénosyl- méthionine (SAMe) qui est impliqué dans l'activité de l’ADN méthyltransférase ou des histones méthyltransférases. Une supplémentation en SAMe régule la méthylation de l’ADN et intervient ainsi sur différents désordres cardio-vasculaires, hépatiques ou la dépression et le vieillissement, et dans le développement des cancers à travers différents mécanismes.

[00024] L’invention se rapporte dans un mode particulier de réalisation à une composition telle que décrite précédemment et comprenant des polysaccharides de plante(s) adaptogène(s). Ces polysaccharides sont extraits ou purifiés à partir de plante se présentant sous les formes suivantes : feuilles et/ou racines lyophilisées, extraits complets ou partiels. Dans un mode préféré, les polysaccharides sont extraits de plante adaptogène choisie parmi les genres Astragalus, Dioscorea, Schisandra, Panax, Eleuterococcus, Rosmarinus , Pfaffia , Morinda, Cordyceps ou Lepidium genera, notamment sous forme d’extrait sec ou purifié. Ils peuvent jouer un rôle de prébiotiques c’est à dire de substrat favorisant la survie des souches probiotiques.

[00025] Les adaptogènes sont des plantes non toxiques commercialisées pour aider le corps à résister aux facteurs de stress de toutes sortes, qu'ils soient physiques, chimiques ou biologiques. Ces herbes et racines sont utilisées depuis des siècles dans les traditions de guérison chinoises et ayurvédiques, mais elles connaissent une renaissance aujourd'hui. Les adaptogènes agissent pour contrer les effets du stress. Le stress provoque des changements physiques très réels dans le corps, y compris des dommages aux systèmes neurologique, endocrinien et immunitaire. Les adaptogènes ont des propriétés stimulantes qui aident à contrer ces effets nocifs. Les adaptogènes ont été développés et vraiment étudiés pour la première fois, pendant la Seconde Guerre mondiale. Les scientifiques cherchaient un moyen d'aider les pilotes en bonne santé à travailler à des niveaux encore plus élevés. Fondamentalement, ils recherchaient une pilule de « super-héros » qui permettrait aux pilotes de mieux voler, plus vite et plus longtemps.

[00026] Le groupe des plantes adaptogène comprend notamment les plantes appartenant aux genres suivants : Astragalus, Dioscorea, Withania, Ginkgo, Schisandra, Panax, Eleuterococcus, Rhodiola, Schisandra, Lepidium, Rosmarinus, Pfaffia, Morinda, Cordyceps.

[00027] Pour la réalisation de l'invention on choisira, de préférence, des extraits polysaccharidiques issus de plantes appartenant au genre Astragalus et/ou, Dioscorea et/ou Lepidium. De telles plantes, en particulier Astragalus membranaceus (Astragale) ou Dioscorea villosa ou opposita ou encore Lepidium meyenii (ou Maca) ont pour effet de restaurer et normaliser les différents organes et fonctions de notre organisme, notamment par l'augmentation du nombre de cellules souches dans la moelle osseuse et le tissu lymphatique. Ces plantes réactivent les cellules immunitaires au repos, en stimulant les macrophages et favorisent la régénération des lymphocytes T et NK ; inhibent la peroxydation lipidique en particulier dans le myocarde ; stimulent la télomérase rallongeant ainsi les télomères les plus courts et protègent l'ADN du vieillissement cellulaire.

[00028]Selon un mode de réalisation de l’invention, les compositions selon celle-ci comprennent des vitamines. Par « une vitamine », on entend toutes les vitamines : A, B1 , B2, B3, B5, B6, B8, B9, B12, C, D, E K1 , K2, leurs précurseurs respectifs, ou un mélange de vitamines et/ou de précurseurs respectifs. Avantageusement, ladite vitamine est une vitamine du groupe B, en particulier B6, B9, B12, la vitamine C, la vitamine D ou un mélange de celles-ci. En effet, la vitamine B6 favorise notamment l'absorption du magnésium et la synthèse de la sérotonine (un neurotransmetteur essentiel). La vitamine B9 ou acide folique possède la propriété d'agir également sur le métabolisme des acides aminés et la synthèse des protéines ; elle participe au renouvellement des cellules de l'immunité, à la formation des globules rouges et à l'apport en oxygène dont l'organisme a besoin. La vitamine B12 est essentielle au bon fonctionnement du système nerveux central et périphérique. La vitamine D est connue pour son rôle sur la réponse immunitaire et son activité antiinflammatoire sur les cytokines du groupe 1 , c’est-à-dire IL-1 b, IL-6, TNF-alpha, notamment.

[00029] Dans un mode particulier de l’invention, la composition décrite précédemment comprend des polysaccharides d’Astragale notamment choisi parmi un galacto- oligosaccharides ou des fructo-oligosaccharides pour leur capacité à jouer le rôle de prébiotique.

[00030]Selon un mode avantageux de l’invention, la composition décrite comprend une quantité de probiotique(s) pour réduire : i. la libération et/ou la production des médiateurs de l’inflammation notamment les cytokines IL6, TNF-a et I L1 b, en particulier une libération et/ou une production excessive des médiateurs de l’inflammation. Au sens de la présente invention, une libération et/ou une production des médiateurs de l’inflammation est considérée comme excessive, lorsque la libération et/ou la production de ceux-ci est au- dessus de 2 fois la quantité normalement constatée chez un sujet sans dysfonctionnement; et/ou il. les désordres immunologiques responsables d’une plus grande susceptibilité aux infections virales et/ou bactériennes et/ou ill. les dysbioses, responsables d’une plus grande susceptibilité aux infections virales et/ou bactériennes.

En particulier, la composition comprend une quantité de souche(s) probiotique(s) pour réduire et/ou prévenir les troubles pathologiques ou les affections sub-cliniques issus notamment d’une dysbiose du tube digestif qu’elle soit d’origine endogène ou exogène due à une infection, la pollution, le stress notamment.

[00031] Dans un mode préféré de l’invention, la composition décrite se présente sous la forme d’un complément nutritionnel solide ou liquide. Ce dernier étant utilisé pour une application non-thérapeutique. L’invention se rapporte également à une utilisation non-thérapeutique de la composition selon l’invention, décrite précédemment, pour corriger une dysbiose cutanée et/ou les désordres subcliniques ou cliniques (i.e. dermatologiques) associés à ces dysbioses.

[00032] COMMENTAIRES SOMMAIRES DES FIGURES

La figure 1 illustre l’incubation dans les différents groupes expérimentaux, contenant 6 réplicons par groupe (n = 6) de l’exemple 2. Les groupes expérimentaux ont été incubés pendant 24 heures avec la composition de l’exemple 1 , en présence d'IL-6 (8 ng/ml).

Le groupe « Stress » a reçu uniquement le traitement avec IL-6 (8 ng/ml) afin de mimer un « orage cytokinique », tandis que le groupe « Contrôle » a été non traité. La dexaméthasone (1 pM) a été utilisé comme référence.

La figure 2 montre les taux de carbonylation obtenus pour 2 concentrations différentes de la composition selon l’exemple 1 et leur effet protecteur selon le protocole décrit dans l’exemple 2.

Les exemples ci-dessous illustrent l’invention sans pour autant limiter son champ d’application.

EXEMPLES

[00033] Exemple 1 : formulation sous forme de complément alimentaire

La composition suivante est un mode de réalisation de l’invention de type complément alimentaire sous la forme d’une gélule végétale gastro-résistante :

- Bifidobacterium adolescentis : 5 Milliard de CFU

- Lactobacillus rhamnosus GG : 5 Milliard de CFU

- Extrait de racine d’Astragale (Astragalus membranaceus) à 20% de polysaccharides, (plante issue de la pharmacopée chinoise et utilisée dans la composition pour une activité prébiotique) : 200mg

- Quercétine (extrait à 95% de Sophora japonica) : 180 mg

- Vitamine B6 : 2.1 mg (750% des AR)

- Vitamine B12 : 5 g (200% des AR)

(EPS 1 600 mg) Enveloppe : gélule végétale HPMC

[00034] Exemple 2 : Evaluation in vitro des effets protecteurs de la composition de l’exemple 1 , selon l’invention, dans un modèle cellulaire stressé : Le but de cette étude est d’évaluer dans un modèle in vitro de fibroblastes humains issus du derme, l’effet protecteur d’une formule selon l’invention (à 2 concentrations différentes) pour prévenir les effets délétères de la réponse hyper-inflammatoire liées au COVID-19 (« orage cytokinique » ou « cytokine Storm »).

En effet, Les protéines sont impliquées dans les fonctions cellulaires clés et notre santé dépend du niveau d'oxydation cellulaire.

La carbonylation des protéines est l'une des modifications oxydatives des protéines irréversibles les plus nocives. Elle est considérée comme une caractéristique majeure des troubles liés au stress oxydatif et elle est souvent quantifiée pour évaluer ces troubles. Dans une forme aigüe, cette carbonylation, si elle est massive, peut conduire à une destruction cellulaire. L'accumulation de protéines endommagées par oxydation est également, une caractéristique de processus délétères tels que l'inflammation chronique, l'étape inflammatoire infectieuse, le vieillissement et de nombreux troubles liés à l'âge.

Il apparait essentiel pour déterminer si ces protéines modifiées ont un impact sur ces troubles et comment elles agissent. Aussi pour évaluer cet impact, il est nécessaire d’avoir recours aux principales méthodes de détection, de quantification et d'identification des protéines oxydées associées aux études protéomiques visant à surveiller l'étendue de la carbonylation des protéines et à identifier les protéines ciblées.

Dans ce contexte, la technique d’électrophorèse sur gel 2D à base de fluorescence et des méthodes de spectrométrie de masse, pour surveiller au niveau du protéome, l'étendue de la carbonylation des protéines dans un modèle cellulaire stressé par le mix dit de « cytokines Storm » ont été utilisées. L'effet du mélange selon la composition revendiquée, est évalué dans ce modèle. Cette méthode est publiée dans J. Proteomics, M.Baraibar et al, 2013 et WO2012/175519 et inclus par référence quant à la mise en oeuvre de cette méthode qui est une méthode de marquage sélectif, de détection et de quantification des protéines carbonylées dans un échantillon contenant des protéines.

La composition selon l’exemple 1 est évaluée dans le modèle décrit ci-dessus à 2 concentrations différentes.

Protocole expérimental :

La composition selon l’exemple 1 , a été directement solubilisé dans le milieu de culture à 2 concentrations différentes (50 pg/ml; 200 pg/ml). Il a été stocké à 4°C dans l'obscurité jusqu'à l'utilisation.

Des fibroblastes dermiques humains ont été cultivés dans un milieu DMEM exempt de calcium, avec 2 % de SVF, à 37°C et une atmosphère humide avec 5 % de CO2. Des cellules ont été placées (20000 cellules/puits) au jour 0 (DO) dans des plaques 96 puits contenant un milieu de culture et distribuées dans plusieurs groupes expérimentaux, contenant 6 réplicons par groupe (n = 6), tels que représentés dans la figure 1. Les groupes expérimentaux ont été incubés pendant 24 heures avec la composition selon l’exemple 1 , en présence d'IL-6 (8 ng/ml). Le groupe « Stress » a reçu uniquement le traitement avec IL-6 (8 ng/mL), tandis que le groupe contrôle a été non traité. La dexaméthasone (1 pM) a été utilisé comme référence.

Après 24 heures, les cellules ont été fixées et les protéines carbonylées ont été marquées in situ avec une sonde fluorescente spécifique.

L'émission de fluorescence a été détectée et enregistrée à l'aide d'un lecteur de plaque à fluorescence (Varioskan, Thermo Scientific).

La gestion des données et les analyses statistiques ont été réalisées à l'aide du logiciel GraphPad (La Jolla, Californie, USA -Statistics : ANOVA- Dunnett’s post-hoc multi comparisons test ** p<0.01 ; *** p<0.001)

Résultats :

Dans cette étude, une augmentation significative des protéines carbonylées (oxydées) a été observée après le traitement par IL-6 des fibroblastes dermiques humains.

La composition selon l’exemple 1 a montré un effet protecteur contre l'oxydation des protéines induite par l'IL-6 de :

• 89% de protection lorsqu'il est appliqué sur des cellules à 200 pg / ml

• d’au moins 100% de protection lorsqu'il est appliqué sur les cellules à 50 pg / ml

Les résultats sont représentés dans le tableau 1 ci-dessous :

Tableau 1 :

Cette étude vise à évaluer l'efficacité protectrice in vitro de la composition selon l’exemple 1 , formulée à différentes concentrations contre l'inflammation aiguë induisant des dommages aux protéines.

Des fibroblastes dermiques humains ont été incubés (ou non) avec le produit pendant 24h en présence d'un inducteur d'inflammation (cytokine inflammatoire IL-6). Un niveau de carbonylation (dommage aux protéines) a été obtenu pour chaque échantillon après marquage in situ de protéines carbonylées avec une sonde fluorescente spécifique. L'émission de fluorescence a été détectée et enregistrée à l'aide d'un lecteur de plaque à fluorescence (Varioskan, Thermo Scientific).

Une augmentation significative des dommages oxydatifs des protéines a été observée lors du traitement cellulaire avec une cytokine inflammatoire (I L-6).

Dans les conditions expérimentales utilisées dans cette étude, cette augmentation a été inhibée de 89% et de plus de 100% en présence de la composition selon l’exemple 1 (200 et 50 pg /ml respectivement).

Conclusion :

Ainsi, l'analyse des résultats obtenus dans un modèle cellulaire stressé induit par le mix dit de « cytokine Storm » (traduit par le terme de tempête inflammatoire impliquée dans certaines formes critiques de troubles infectieux) a montré un effet protecteur de la composition décrite et revendiquée, notamment lorsqu’elle est administrée à une dose entre 50pg/ml et 200 pg/ml. Cet effet protecteur à l’oxydation peut aussi expliquer une protection des tissus et organes contre les méfaits structuraux et tissulaire du cytokine Storm, décrits dans les formes graves de la COVID-19

[00035] Exemple 3 : questionnaire de suivi de traitement de la formulation selon l’exemple 1

Le traitement est proposé aux volontaires sains dans le cadre de la prévention des rhinovirus (grippe, covid-19...). Il est orienté vers la réorganisation du microbiote afin d’éviter les complications pathologiques liées à son déséquilibre notamment en cas d’invasion par un rhinovirus. Ce test est proposé aux volontaires acceptant une formule de compléments alimentaires utilisant des souches probiotiques ainsi que des prébiotiques. Le protocole repose sur la prise de 2 gélules du complément alimentaire dont la composition est décrite dans l’exemple 1 par jour pendant les deux mois d’hiver. Le questionnaire ci-dessous est remis aux volontaires qui ont bénéficié du complément alimentaire en fin de traitement. Ce questionnaire est orienté essentiellement sur la prise en compte des inconforts intestinaux (gastrite, gastroentérite, sensibilité digestives et pulmonaires) et des conséquences d’une dysbiose intestinale.

Tableau 2 :