Login| Sign Up| Help| Contact|

Patent Searching and Data


Title:
CYSTEINYL LEUKOTRIENE RECEPTOR LIGANDS DIRECTED TOWARD THE TREATMENT OF INFLAMMATORY AND ONCOLOGICAL DISEASES
Document Type and Number:
WIPO Patent Application WO/2022/255900
Kind Code:
A1
Abstract:
The present invention relates to the field of organic chemistry and pharmaceutics, and more particularly to ligands of the cysteinyl leukotriene receptors CysLT1R and CysLT2R, having the given formulae, where R1, R2, R3 and R4 have the values given in the claims, and to pharmaceutically acceptable derivatives thereof, and further relates to pharmaceutical compositions of such compounds or their pharmaceutically acceptable derivatives, which can be used for treating inflammatory, cardiovascular and oncological diseases linked to the type I or type II cysteinyl leukotriene receptor, as well as oncological disorders and diseases linked to a mutant form of the type II cysteinyl leukotriene receptor containing the single nucleotide polymorphism L129Q, and still further relates to a method for treating said diseases using a therapeutically effective amount of one of the proposed compounds or its pharmaceutically acceptable derivative, or a therapeutically effective amount of a pharmaceutical composition containing one of the proposed compounds or its pharmaceutically acceptable derivative together with a pharmaceutically acceptable carrier, diluent, filler and/or other excipient. The technical results of the invention include: providing novel type I or type II cysteinyl leukotriene receptor ligands which are effective in the treatment of diseases linked to cysteinyl leukotriene receptors, and which have novel chemical structures and do not cause the undesirable effects on the gastrointestinal tract or the neuropsychiatric side effects characteristic of known cysteinyl leukotriene receptor ligands; providing cysteinyl leukotriene receptor ligands that are inverse agonists for a mutant L129Q form of the type II receptor, which can be used in medicine for treating cancer types, the pathogenesis of which involves a mutant from of the CysLT2R receptor containing the single nucleotide polymorphism L129Q; providing cysteinyl leukotriene receptor ligands which can be used in medicine for treating inflammatory, cardiovascular and oncological diseases, the pathogenesis of which involves cysteinyl leukotrienes; and providing type I and type II cysteinyl leukotriene receptor ligands that exhibit greater solubility by comparison with known ligands available on the market.

Inventors:
SADYBEKOV ARMAN ARMANOVICH (RU)
BROUILLETTE REBECCA L (CA)
MARIN EGOR VADIMOVICH (RU)
SADYBEKOVA ANASTASIIA VIKTOROVNA (RU)
LUGININA ALEKSANDRA PAVLOVNA (RU)
GUSACH ANASTASIIA YURIEVNA (RU)
MISHIN ALEXEY VIKTOROVICH (RU)
BESSERER-OFFROY ELIE (US)
LONGPRE JEAN-MICHEL (CA)
BORSHCHEVSKIY VALENTIN IVANOVICH (RU)
CHEREZOV VADIM (US)
SARRET PHILIPPE (CA)
KATRITCH VSEVOLOD (US)
Application Number:
PCT/RU2021/000239
Publication Date:
December 08, 2022
Filing Date:
June 02, 2021
Export Citation:
Click for automatic bibliography generation   Help
Assignee:
MOSCOW INSTITUTE OF PHYSICS AND TECH (RU)
UNIV SOUTHERN CALIFORNIA (US)
UNIV SHERBROOKE (CA)
International Classes:
A61K31/18; A61K31/03; A61K31/381; A61K31/435; A61P9/10; A61P11/06; A61P17/00; A61P35/00; C07D213/16; C07D271/06; C07D271/10; C07D333/04
Other References:
LUGININA A.P.: "Opredelenie prostranstvennoi struktury chelovecheskogo tsisteinilleikotrienovogo retseptora 1 klassa GPCR", DISSERTATSIIA NA SOISKANIE UCHENOI STEPENI KANDIDATA FIZIKO-MATEMATICHESKIKH NAUK, 2019, pages 1 - 137
GUSACH A.U.: "Strukturnye issledovaniia chelovecheskogo tsisteinil- leikotrienovogo retseptora vtorogo tipa dlia sozdaniia novykh lekarstvennykh preparatov", DISSERTATSIIA NA SOISKANIE UCHENOI STEPENI KANDIDATA FIZIKO-MATEMATICHESKIKH NAUK, 2020, pages 1 - 178
Attorney, Agent or Firm:
PATENT & LAW FIRM "YUS", LIMITED LIABILITY COMPANY (RU)
Download PDF:
Claims:
Формула изобретения

1. Лиганд цистеиниллейкотриеновых рецепторов I и II типов, отличающийся тем, что указанный лиганд выбран из группы соединений общей формулы (I) - (V) где, независимо в каждом случае, R1 выбран из группы, состоящей из (2- карбоксиэтил)(метил)амино, -NCH3CH2CH2CO2 и З-карбоксипиперидин-1-ила;

R2 выбран из группы, состоящей из циклопропилметокси, циклопентилокси, циклогексилокси, (оксолан-2-ил)метокси, бензилокси, (пиридин-3 -ил)метокси, (3- метилфенил)метокси и (З-фторфенил)метокси;

R3 выбран из группы, состоящей из Н и F; и R4 выбран из группы, состоящей из Н и СНз;

(И), где, независимо в каждом случае, R1 выбран из группы, состоящей из 1Н-пиразол- 1-ила, 1Н-имидазол-2-ила, Ш-пиразол-З-ила, 1Н-пиразол-4-ила, 1Н-имидазол-4-ила, 4Н-

1.2.4-триазол-З-ила, 1Н-1,2,4-триазол-1-ила, 2Н-1,2,3-триазол-2-ила, 1,3-оксазол-5-ила, 1,2- оксазол-3-ила, 1Н-1,2,3,4-тетразол-5-ила, 1,2,4-оксадиазол-З-ила, 1,3-тиазол -2-ила, 1,2,3- тиадиазол-4-ила, фенила, 1 -метил- 1Н-пиразол-4-ила, пиримидин-5 -ила, 1 -метил- 1Н- 1,2,4- триазол-3-ила, 3-метил-1Н-1,2,4-триазол-5-ила, 2-метил- 1,3-оксазол -4-ила, 5 -метил- 1Н-

1.2.4-триазол-1-ила, 2-метил-1,3-оксазол-5-ила, 5-метил- 1,2,4-оксадиазол-З-ила, 4-метил- 1,3-тиазол-2-ила, 2-метил- 1,3-тиазол-4-ила, 3,5-диметил-1Н-пиразол-1-ила, 4- метилпиримидин-2-ила, 4,5-диметил-1 ,3-оксазол-2-ила, 2 -циклопропил- 1 ,3-оксазол-5-ила, 1Н-индазол-1-ила, 1Н-1,3-бензодиазол-1-ила, 1Н-1,3-бензодиазол-2-ила, a R2 выбран из группы, состоящей из -О и -ОН;

(III), где, независимо в каждом случае,

R1 выбран из группы, состоящей из 1Н-пиррол-2-ила, пиридин-4-ила, пиридин-3 - ила, (тиофен-2-ил)метила, 5-хлоротиофен-2-ила, 3 -мети л фенила, 4-метилфенила, 2- метилфенила, бензила, (пиперидин- 1 -ил )метила, 4-фторфенила, 4-хлорфенила, 3- хлорфенила, 2-хлорфенила, 3-бромфенила, 2-бромфенила, 4-бромфенила, 2- фенилэтила, 2,4-диметилфенила, 2-циклогексилэтила, (2-фторфенил)метила, (3- фторфенил)метила, 3-фенилпропила, 2-фенилпропила, 1 -фенилпропила, 4-(пропан- 2-ил)фенила, 1Н-индол-3-ила, 1-бензофуран-2-ила, (4-метилфенокси)метила, 2- этоксифенила, (З-метилфенокси)метила, 2Н-1,3-бензодиоксол-5-ила, нафтален-2- ила, нафтален-1-ила, 1 -(2-фторфенокси)этила, (2,4-дихлофенокси)метила, 4- (диэтиламино)фенила,

(IV), где, независимо в каждом случае,

R1 выбран из группы, состоящей из 3 -хлор-5 -фторфенила, 6-метил- Ш-индол-2-ила, 3 -метил- 1 -бензофуран-2-ила, 2-метил- 1 ,3 -бензоксазол-5-ила, 5 -фтор- 1 -бензофуран- 2-ила, 1-этил-1Н-индол-2-ила, 5-фенил-1,2-оксазол-3-ила, 3 -фенил- 1,2-оксазол-5- ила, 6-метоксинафтален-2-ила, 1-метоксиизохинолин-З-ила, 6-этокси- 1Н-индол-2- ила,

где, независимо в каждом случае,

R1 выбран из группы, состоящей из (4-метилпиперидин-1-ил)метила, (2- оксопиперидин- 1 -ил)метила, 3 -метилпиперидин- 1 -карбонила, 4-метилпиперидин- 1 - карбонила, (2-оксазепан-1-ил)метила, (2-оксоазокан-1-ил)метила, 4- циклопентилморфолин-3 -ила, 1 -бензоилпирролидин-2-ила, (N, 1 - дифенилформамидо)метила,

 или их фармацевтически приемлемых солей, гидратов и сольватов.

2. Лиганд по пункту 1, отличающийся тем, что представляет собой соединение формулы где, независимо в каждом случае, R1 выбран из группы, состоящей из (2- карбоксиэтил)(метил)амино, -NCH3CH2CH2CO2 и З-карбоксипиперидин-1-ила;

R2 выбран из группы, состоящей из циклопропилметокси, циклопентилокси, циклогексилокси, (оксолан-2-ил)метокси, бензилокси, (пиридин-3 -ил )метокси, (3- метилфенил)метокси и (З-фторфенил)метокси;

R3 выбран из группы, состоящей из Н и F; и R4 выбран из группы, состоящей из Н и СНз, или его фармацевтически приемлемую соль, гидрат или сольват. 3. Лиганд по пункту 2, отличающийся тем, что представляет собой соединение, выбранное из группы, включающей соединения

 а также фармацевтически приемлемые соли, гидраты и сольваты данных соединений.

4. Лиганд по пункту 1, отличающийся тем, что представляет собой соединение формулы (II) или его фармацевтически приемлемую соль, гидрат или сольват.

5. Лиганд по пункту 4, отличающийся тем, что представляет собой соединение, выбранное из группы, включающей соединения

а также фармацевтически приемлемые соли, гидраты и сольваты данных соединений.

6. Лиганд по пункту 1, отличающийся тем, что представляет собой соединение формулы или его фармацевтически приемлемую соль, гидрат или сольват.

7. Лиганд по пункту 6, выбранный из группы, включающей соединения

5

5

а также фармацевтически приемлемые соли, гидраты и сольваты данных соединений.

8. Лиганд по пункту 1, отличающийся тем, что представляет собой соединение формулы (IV) или его фармацевтически приемлемую соль, гидрат или сольват.

9. Лиганд по пункту 8, выбранный из группы, включающей соединения

5

5

а также фармацевтически приемлемые соли, гидраты и сольваты данных соединений.

10. Лиганд по пункту 1, отличающийся тем, что представляет собой соединение формулы (V) или его фармацевтически приемлемую соль, гидрат или сольват.

11. Лиганд по пункту 10, выбранный из группы, включающей соединения

а также фармацевтически приемлемые соли, гидраты и сольваты данных соединений.

12. Лиганд по любому из пп. 1 — 11, отличающийся тем, что цистеиниллейкотриеновый рецептор представляет собой цистеиниллейкотриеновый рецептор I типа.

13. Лиганд по п. 12, отличающийся тем, что цистеиниллейкотриеновый рецептор представляет собой цистеиниллейкотриеновый рецептор I "дикого" типа.

14. Лиганд по п. 12, отличающийся тем, что цистеиниллейкотриеновый рецептор представляет собой мутантную форму цистеиниллейкотриенового рецептора I типа.

15. Лиганд по любому из пп. 1 - 11, отличающийся тем, что цистеиниллейкотриеновый рецептор представляет собой цистеиниллейкотриеновый рецептор II типа.

16. Лиганд по п. 15, отличающийся тем, что цистеиниллейкотриеновый рецептор представляет собой цистеиниллейкотриеновый рецептор II "дикого" типа.

17. Лиганд по п. 16, отличающийся тем, что цистеиниллейкотриеновый рецептор представляет собой мутантную форму цистеиниллейкотриенового рецептора II типа.

18. Лиганд по п. 17, отличающийся тем, что цистеиниллейкотриеновый рецептор представляет собой цистеиниллейкотриеновый рецептор II типа, содержащий мутацию L129Q.

19. Фармацевтическая композиция для лечения бронхиальной астмы, аллергического ринита, крапивницы, атопического дерматита, гиперсенсибилизации дыхательных путей, аспирин-провоцируемого респираторного заболевания, бронхоспазма, хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ), колита, артериальной гипертензии, дисфункции коронарной артерии, последствий инфаркта миокарда, аберрантной сосудистой проницаемости, инсульта, травматического повреждения головного мозга, колоректального рака, урологического рака, злокачественной астроцитомы, легочной карциномы, хронической лимфоцитарной лейкемии и глиобластомы, содержащая терапевтически эффективное количество лиганда, представляющего собой соединение общей формулы (I) - (V), охарактеризованное по любому из пп. 1 - 18, или фармацевтически приемлемой соли, гидрата или сольвата указанного лиганда совместно с фармацевтически приемлемым носителем, разбавителем или наполнителем.

20. Фармацевтическая композиция для лечения увеальной меланомы, менингеальных меланоцитарных опухолей, лептоменингеальных опухолей и меланоцитарных опухолей из голубых невусов, содержащая терапевтически эффективное количество лиганда, представляющего собой соединение общей формулы (III) или (IV), охарактеризованное по любому из пп. 1 - 18, или фармацевтически приемлемой соли, гидрата или сольвата указанного лиганда совместно с фармацевтически приемлемым носителем, разбавителем или наполнителем.

21. Способ лечения бронхиальной астмы, аллергического ринита, крапивницы, атопического дерматита, гиперсенсибилизации дыхательных путей, аспирин- провоцируемого респираторного заболевания, бронхоспазма, хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ), колита, артериальной гипертензии, дисфункции коронарной артерии, последствий инфаркта миокарда, аберрантной сосудистой проницаемости, инсульта, травматического повреждения головного мозга, колоректального рака, урологического рака, злокачественной астроцитомы, легочной карциномы, хронической лимфоцитарной лейкемии и глиобластомы, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, терапевтически эффективного количества лиганда, представляющего собой соединение общей формулы (I) - (V), охарактеризованное по любому из пп. 1 - 18 или фармацевтически приемлемой соли, гидрата или сольвата указанного лиганда или терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции по пункту 19.

22. Способ лечения увеальной меланомы, менингеальных меланоцитарных опухолей, лептоменингеальных опухолей и меланоцитарных опухолей из голубых невусов, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, терапевтически эффективного количества лиганда, представляющего собой соединение общей формулы (III) или (IV), охарактеризованное по любому из пп. 1 - 18, или фармацевтически приемлемой соли, гидрата или сольвата указанного лиганда или терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции по пункту

20.

Description:
ЛИГАНДЫ ЦИСТЕИНИЛ- ЛЕЙКОТРИЕНОВЫХ РЕЦЕПТОРОВ, НАПРАВЛЕННЫЕ НА ТЕРАПИЮ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ И ОНКОЛОГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ

Область техники

В настоящем изобретении предложены новые лиганды цистеинил-лейкотриеновых рецепторов, сопряженных с G-белком (GPCR), а также способы получения таких антагонистов и обратных агонистов, фармацевтические композиции, их содержащие, и способы лечения воспалительных, сердечно-сосудистых и онкологических заболеваний, в этиопатогенезе которых играют роль цистеинил- лейкотриены.

Изобретение обеспечивает расширение ассортимента биологически активных соединений - антагонистов и обратных агонистов цистеинил-лейкотриеновых рецепторов. Предлагаемые соединения могут быть применимы в лечении заболеваний, в патогенезе которых цистеинил-лейкотриены играют роль, в частности, бронхиальной астмы, аллергического ринита, крапивницы, атопического дерматита, гиперсенсибилизации дыхательных путей, аспирин-провоцируемого респираторного заболевания, бронхоспазма, хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ), колита, артериальной гипертензии, дисфункции коронарной артерии, последствий инфаркта миокарда, аберрантной сосудистой проницаемости, инсульта и травматического повреждения головного мозга, и онкологических заболеваний, в патогенезе которых цистеинил-лейкотриены играют роль, таких как колоректальный рак, урологический рак, злокачественная астроцитома, легочная карцинома, хроническая лимфоцитарная лейкемия и глиобластома, а также заболеваний, в которых играет роль мутантная форма L129Q цистеинил-лейкотриенового рецептора II типа, таких как увеальная меланома, менингеальные меланоцитарные опухоли, лептоменингеальные опухоли и меланоцитарные опухоли из голубых невусов.

Уровень техники

Цистеинил-лейкотриены (далее также указываются как CysLT) представляют собой липидоподобные соединения, in vivo образующиеся из арахидоновой кислоты через 5-липоксигеназный путь. Цистеинил-лейкотриены активируют два подтипа рецепторов, сопряженных с G-белком (GPCR), включая цистеинил-лейкотриеновые рецепторы I и II типов, далее соответственно обозначаемые как CysLTiR и CysLT2R, обладающие 38%-ной идентичностью последовательностей. Оба эти типа рецепторов, CysLTiR и CysLTiR, обладают субмикромолярной аффинностью к эндогенным цистеинил-лейкотриенам С4, D4 и Е4 (далее - LTC4, LTD4 и LTE4 соответственно), но CysLTiR имеет большую аффинность к LTD4, тогда как CysLT R - равную к LTC и LTD4 (Back М, Powell W.C., et al., Br J Pharmacol. 2014 Aug; 171(15): 3551 - 3574). Цистеинил-лейкотриеновый рецептор CysLTiR в основном экспрессируется гладкомышечными клетками бронхов, макрофагами и другими иммунными клетками, тогда как для рецептора CysLTiR характерен более широкий профиль экспрессии - его экспрессия также обнаружена в клетках мозга и сердца (Back М., Dahlen S.E., et al., Pharmacol. Rev 2011 Sep; 63(3): 539 - 584). Рецепторы CysLTR участвуют в воспалительных процессах и, как показано, они играют важную роль в патогенезе таких заболеваний, как, без ограничения, бронхиальная астма, аллергический ринит, крапивница, атопический дерматит, гиперсенсибилизация дыхательных путей, аспирин-провоцируемое респираторное заболевание, бронхоспазм, ХОБЛ, колит и аберрантная сосудистая проницаемость, а также сердечно-сосудистых заболеваний, например (без ограничения), артериальной гипертензии, дисфункции коронарной артерии, последствий инфаркта миокарда, инсульта и травматического повреждения головного мозга (Back М., Powell W.C., et al., Br J Pharmacol. 2014 Aug; 171(15): 3551 - 3574; Laidlaw T.M., Boyce J.A., Clin Exp Allergy 2012 Sep; 42(9): 1313-20; Ingelsson E. et al., J. Allergy Clin. Immunol. 2012; 129:702-707.e2; Burke L., Butler C.T., et al., Front. Cell Dev. Biol. 2016; 4:103), а также ряда онкологических заболеваний, например (без ограничения), колоректального рака (Magnusson С., Ehrastrom R., Olsen J., Sjolander A., Cancer Res. 2007 Oct 1; 67(19): 9190 - 9198), урологического рака (Matsuyama M., Funao K., et al., Urology 2009 Apr; 73(4): 916 - 921), злокачественной астроцитомы (Simmet T., Luck W., et al., Journal of Neurochemistry 1990, 54(6): 2091 - 2099), легочной карциномы (Tsai M.-J., Chang W.-A., et al., International Journal of Molecular Sciences 2017 Jun 24; 18(7): 1353), хронической лимфоцитарной лейкемии (Drost A.G., Seitz G., et al., Leukemia and Lymphoma, April 2012; 53(4): 665 - 673; Zovko A., Yektaei-Karin E., et al., Oncology Reports 2018, 40(2): 902 - 908) и глиобластомы (Piromkraipak P., Parakaw T., et al., Canadian Journal of Physiology and Pharmacology 2018, 96(8): 798 - 806).

Кроме того, в работах Thompson М. D. и Capra V. с соавторами было показано, что мутации (однонуклеотидные полиморфизмы) G300S рецептора CysLTiR и M201V рецептора CysLT2R ассоциированы с атопической бронхиальной астмой (Thompson М. D., Capra V., et al., Pharmacogenet. Genomics 17, 539-549 (2007); Thompson M. D., Capra V., et al., Front Pharmacol. 2016; 7: 299), а в работах Moore A.R. с соавторами, Kiisters-Vandevelde H.V.N. с соавторами, van de Nes J.A.P. с соавторами и Moller I. с соавторами была показана роль мутации (однонуклеотидного полиморфизма) L129Q рецептора CysLT2R как онкогенного драйвера увеальной меланомы (Moore A.R. et al., Nat. Genet. 2016 Jun; 48(6): 675 - 680, Nell et al. BMC Cancer, 21:164), меланомы из голубых невусов (Moller I. et al., Mod. Pathol. 2017 Mar, 30(3), 350 - 356) и, потенциально, некоторых других опухолей (Kusters-Vandevelde H.V.N. et al., Brain Tumor Pathol. 2018 Apr.; 35(2): 127 - 130; van de Nes J.A.P. et al., J. Invest. Dermatol. 2017 Sep.; 137(9): 2033 - 2035; Moller I. et al., Mod. Pathol. 2017 Mar, 30(3): 350 - 356). Дальнейшие исследования позволили предположить, что мутация L129Q вызывает конститутивную активацию рецептора CysLT2R со значительным преобладанием сигнального пути G q , который известные антагонисты цистеинил- лейкотриенов не способны эффективно ингибировать (Ceraudo, Е. et al., J. Biol. Chem. (2021) 296, 100-163).

Среди лигандов цистеинил-лейкотриеновых рецепторов, оказывающих эффект на белки класса GPCR, наиболее важное клиническое значение имеют такие селективные антагонисты рецептора CysLTiR, как монтелукаст, впервые описанный в работе Labelle М., Belley М. и соавт. (Labelle М., Belley М., et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., vol. 5, issue 3, 2 February 1995, pp. 283-288), зафирлукаст, впервые описанный в работе Matassa V.G. и соавт. (Victor G. Matassa, Thomas P. Maduskuie Jr., et al., J. Med. Chem., vol. 33, issue 6, June 1, 1990, pp. 1781-1790), и пранлукаст, впервые описанный в работе Nakai Н. и соавт. (Nakai Н., Konno М., et al., J. Med. Chem., vol. 31, issue 1, 1988, pp. 84-91). Указанные препараты одобрены для применения в качестве лекарственных средств для лечения сезонного аллергического ринита и бронхиальной астмы, от мягкой до умеренной, а также бронхоспазма, вызванного физической нагрузкой.

Молекулярный механизм взаимодействия рецепторов CysLTiR с такими лигандами, как зафирлукаст или пранлукаст, а также кристаллическая структура комплекса "рецептор CysLTiR - лиганд" для таких лигандов были подробно изучены в работах авторов настоящего изобретения (Luginina A., Gusach A., et al., Sci. Adv. 2019; 5 :eaax2518; Gusach A., Luginina A., et al., Nat. Commun. 2019; 10:1-9). В литературе, однако, было показано, что у значительной части пациентов с аллергическим ринитом и/или бронхиальной астмой эффективность монтелукаста, зафирлукаста и пранлукаста ограничена (Miligkos М., Bannuru R.R., et al., Ann Intern Med. 2015 Nov 17; 163(10):756-67). Применение монтелукаста, зафирлукаста и пранлукаста для лечения онкологических заболеваний на настоящий момент не одобрено.

Опубликованная международная заявка WO 2019/109147 Al "Methods of treating cancer with leukotriene receptor antagonists" (заявитель - O'MARA, Stephen Kenneth (AU)), дата публикации: 13.06.2019, описывает лечение рака у субъекта терапевтически эффективным количеством антагониста лейкотриеновых рецепторов монтелукаста или терапевтически эффективным количеством фармацевтически приемлемой соли такого антагониста. Также WO 2019/109147 А1 упоминает использование с этими целями таких антагонистов лейкотриеновых рецепторов, как зафирлукаст и пранлукаст.

Согласно WO 2019/109147 А1, терапевтически эффективное количество монтелукаста или фармацевтически приемлемой соли монтелукаста может использоваться для лечения различных видов рака, таких как миелома (множественная миелома), лейкемия, включая острую миелоидную лейкемию и хроническую лимфоцитарную лейкемию, лимфома, включая неходжкинскую лимфому, и синдром Рихтера. Также, согласно WO 2019/109147 А1, терапевтически эффективное количество монтелукаста или фармацевтически приемлемой соли монтелукаста может использоваться для лечения рака простаты, рака молочной железы, рака толстой кишки, рака легкого, гастроинтестинального рака, рака поджелудочной железы, рака почки, рака кости, рака яичника, рака яичка, рака кишечника, рака желудка, рака головы и шеи, опухоли мозга, острой миелоидной лейкемии, острой лимфобластной лейкемии, саркомы, такой как остеосаркома или саркома Юинга, неходжкинской лимфомы, хронической лимфоцитарной лейкемии, болезни Ходжкина, или миелопролиферативного нарушения, такого как эссенциальная тромбоцитемия, истинная (первичная) полицитемия или миелофиброз.

Однако по-прежнему сохраняет свою актуальность задача расширения арсенала средств - лигандов цистеинил-лейкотриеновых рецепторов, которые могли бы использоваться в лечении онкологических заболеваний, тем более важная, что WO 2019/109147 А 1 не раскрывает лиганды цистеинил-лейкотриеновых рецепторов, активные в отношении мутантной формы CysLTaR L129Q, играющей важную роль в патогенезе увеальной меланомы, менингеальных меланоцитарных опухолей, лептоменингеальных опухолей и меланоцитарных опухолей из голубых невусов. Активность монтелукаста или других упомянутых в данном документе антагонистов цистеинил-лейкотриеновых рецепторов в отношении мутантной формы рецептора CysLTiR, содержащей однонуклеотидный полиморфизм L129Q, в WO 2019/109147 А1 также не продемонстрирована. Не упоминает WO 2019/109147 А 1 и лечение увеальной меланомы, меланомы из голубых невусов и других опухолей, в патогенезе которых мутантная форма рецептора CysLT2R (однонуклеотидный полиморфизм L129Q) играет роль.

Также необходимо учитывать, что в литературе сообщалось о нежелательных эффектах со стороны желудочно-кишечного тракта и о нейропсихиатрических побочных эффектах у пациентов, связанных с применением монтелукаста, зафирлукаста, пранлукаста и других лигандов цистеинил-лейкотриеновых рецепторов (Law S.W.Y., Wong A.Y.S., et al., DrugSaf. 2018; 41:253-265; Shimbo J., Onodera O., et al., Clin. Rheumatol. 2005; 24:661-662). В частности, показано, что у пациентов, длительно применяющих монтелукаст, он способен вызывать склонность к суициду (U.S. Food and Drug Administration. Early communication about an ongoing safety review of montelukast (Singulair), March 2008). Было также обнаружено, что зафирлукаст характеризуется микросомальным связыванием в печени, приводящим ее повреждению.

В связи с этим, сохраняет свою актуальность задача создания новых лигандов цистеинил-лейкотриеновых рецепторов, эффективных в лечении бронхиальной астмы, аллергического ринита, крапивницы, атопического дерматита, гиперсенсибилизации дыхательных путей, аспирин-провоцируемого респираторного заболевания, бронхоспазма, ХОБЛ, колита и аберрантной сосудистой проницаемости, артериальной гипертензии, дисфункции коронарной артерии и последствий инфаркта миокарда, а также онкологических заболеваний, в патогенезе которых играют роль рецепторы CysLTiR или CysLTaR, - колоректального рака, урологического рака, злокачественной астроцитомы, легочной карциномы, хронической лимфоцитарной лейкемии и глиобластомы.

Наконец, с учетом показанной в работах Moore A.R., Kiisters-Vandevelde H.V.N. и других авторов роли мутации (однонуклеотидного полиморфизма) L129Q рецептора CysLT2R в онкогенезе увеальной меланомы, меланомы из голубых невусов и других видов опухолей, сохраняет свою актуальность задача создания новых лигандов цистеинил- лейкотриеновых рецепторов, эффективных в лечении таких опухолей. Актуальность задачи обусловлена тем, что мутация L129Q рецептора CysLTiR встречается у 1/16 пациентов с меланомой из голубых невусов и у 1/60 пациентов с увеальной меланомой. Последняя, в свою очередь, диагностируется у десятков тысяч людей ежегодно и в 50% случаев приводит к метастазам (Rogier J. Nell, et al., BMC Cancer, vol. 21, issue 1, Feb 15, 2021, p. 164). Следовательно, онкологические заболевания у пациентов с полиморфизмом L129Q относятся к орфанным, и лечение специфическими обратными агонистами для этого варианта CysLTiR является востребованной задачей для прогрессивной в современном мире персонализованной медицины.

Указанная задача была решена в настоящем изобретении методами компьютерного молекулярного моделирования (in silicd), играющими в данной области техники важнейшую роль на начальных этапах разработки новых лекарственных средств, в т.ч., новых лекарственных средств для лечения аллергического ринита, бронхиальной астмы, гиперсенсибилизации дыхательных путей, бронхоспазма, крапивницы, атопического дерматита и хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ), онкологических заболеваний, таких как, без ограничения, колоректальный рак, урологический рак, злокачественная астроцитома, легочная карцинома, хроническая лимфоцитарная лейкемия и глиобластома, а также онкологические заболевания, сопряженные с однонуклеотидным полиморфизмом L129Q рецептора CysLTiR. Результаты, полученные в рамках настоящего изобретения in silico, подтверждены в рамках настоящего изобретения методами in vitro.

На начальных этапах разработки лекарственного средства, активного в отношении рецептора, такого как цистеинил-лейкотриеновый рецептор, осуществляемых in silico, важно обеспечить избирательное связывание молекулы лиганда с определенным местом (активным центром) макромолекулы-мишени (в данном случае, с активным центром цистеинил-лейкотриенового рецептора, такого как CysLTiR и CysLTiR), что позволит воздействовать на развитие заболевания или состояния, в патогенезе которых данная макромолекула-мишень играет роль.

Компьютерное молекулярное моделирование лекарственных средств основывается на информации о структуре молекулы-мишени (представляющей собой, как правило, белковую молекулу), которая аккумулируется в специализированных базах данных, таких как Protein Data Bank (Berman H.M., Westbrook J., Feng Z., Gilliland G., Bhat T.N., Weissig FL, et al., Nucleic Acids Research 2000; 28: 235^-2).

Среди таких методов молекулярного моделирования, применяемых на начальных этапах разработки лекарственных средств, необходимо отметить докинг и скоринг.

Докинг представляет собой метод, позволяющий исследователю, основываясь на трехмерной структуре молекулы-мишени (как правило, белковой молекулы, например, такой как цистеинил-лейкотриеновый рецептор), осуществить позиционирование в ней лиганда и дать оценку энергии связывания лиганда с белком, определяющей биологическую активность лиганда (Gupta М., Sharma R., Kumar A., Comput Biol Chem 2018; 76: 210-17). Технически докинг осуществляется исследователями при помощи различных средств программного обеспечения, число которых с каждым годом все растет (Pagadala N.S., Syed К., Tuszynski J., Biophys Rev 2017; 9: 91-102). В настоящем изобретении докинг осуществляли при помощи программного обеспечения "ICM-Pro" (версия 3.8-7а), разработанного компанией "Molsoft LLC".

Другим важным методом, используемым на начальных этапах разработки лекарственных средств, является скоринг. Скоринг (скоринг-функция) представляет собой энергетическую функцию, выражаемую в ккал/моль, дающую хорошую аппроксимацию свободной энергии связывания лиганда с рецептором (таким как цистеинил- лейкотриеновый рецептор) и характеризующую, таким образом, аффинность (сродство) лиганда по отношению к сайту связывания в молекуле-мишени (например, такой как цистеинил-лейкотриеновый рецептор). В настоящем изобретении скоринг-функцию вычисляли на основании данных об электростатической энергии, энергии гидрофобных взаимодействий, внутренней энергии лиганда, энергии водородных связей между белком и лигандом, а также энергии десольватации в соответствии с методикой, предложенной Totrov М. и Abagyan R. (Totrov М., Abagyan R. Derivation of Sensitive Discrimination Potential for Virtual Ligand Screening. ACM Press; Lyon, France: 1999, pp. 312 - 317; далее - Totrov M., Abagyan R., 1999).

В ряде опубликованных работ скоринг-функция, предложенная в работе Totrov М., Abagyan R., 1999, была адаптирована для мишеней, представляющих собой белки GPCR, такие как мелатониновые рецепторы, допаминовые рецепторы и каппа-опиоидные рецепторы (см. работы Patel N., Huang X.P., Grandner J.M., et al., eLife 2020; 9: e53779, Zheng Z., Huang X.P., Mangano T.J., et al., Med. Chem. 2017 Apr. 13; 60(7): 3070 - 3081 и Lane J.R., Chubukov P., Liu W., et al., Mol. Pharmacol. 2013 Dec.; 84(6): 794 - 807 соответственно), но не для цистеинил-лейкотриеновых рецепторов.

Предлагаемые в настоящем изобретении лиганды цистеинил-лейкотриеновых рецепторов были найдены авторами настоящего изобретения путем докинга предположительно обладающих биологической активностью соединений из виртуальной библиотеки соединений "Enamine" (Enamine LTD.) и соединений, отобранных по тем же критериям, что и соединения из виртуальной библиотеки "Enamine", в кристаллическую структуру цистеинил-лейкотриеновых рецепторов CysLT2R (PDB ID: 6RZ6, ко- кристаллизуемый лиганд: ONO-2570366) и CysLTiR (PDB ID: 6RZ4, комплекс Ci- пранлукаст). Иными словами, предлагаемые в настоящем изобретении лиганды цистеинил- лейкотриеновых рецепторов были отобраны путем минимизации прогнозируемой энергии связывания, оцененной в результате скоринга согласно методике, предложенной в работе Totrov М. и Abagyan R., 1999.

Таким образом, в настоящем изобретении результаты скоринга, выполненного согласно Totrov М. и Abagyan R., 1999, использовали как величину, позволяющую надежно и достоверно предсказать связывание того или иного предлагаемого в настоящем изобретении лиганда с цистеинил-лейкотриеновым рецептором.

Технические результаты, достигаемые настоящим изобретением, включают: создание новых, характеризующихся отличными от ранее используемых химическими структурами и лишенных как нежелательных эффектов со стороны желудочно-кишечного тракта, так и нейропсихиатрических побочных эффектов, присущих известным лигандам цистеинил-лейкотриеновых рецепторов, лигандов цистеинил- лейкотриеновых рецепторов CysLTiR и CysLT2R, которые могут быть эффективны для лечения заболеваний, связанных с цистеинил-лейкотриенами, без ограничения, таких как бронхиальная астма, аллергический ринит, крапивница, атопический дерматит, гиперсенсибилизация дыхательных путей, аспирин-провоцируемое респираторное заболевание, бронхоспазм, ХОБЛ, колит, аберрантная сосудистая проницаемость, артериальная гипертензия, дисфункция коронарной артерии, последствия инфаркта миокарда, а также онкологических заболеваний, в патогенезе которых играют роль рецепторы CysLT iR или CysLT R, в том числе, колоректального рака, урологического рака, злокачественной астроцитомы, легочной карциномы, хронической лимфоцитарной лейкемии и глиобластомы, а также онкологических заболеваний, в этиопатогенезе которых играют роль мутантные формы цистеинил-лейкотриеновых рецепторов, - увеальной меланомы, менингеальных меланоцитарных опухолей, лептоменингеальных опухолей и меланоцитарных опухолей из голубых невусов; создание лигандов, являющихся обратными агонистами для мутантной формы L129Q рецептора CysLT2R, что должно дать специалистам новые средства лечения онкологических заболеваний, в патогенезе которых играет роль такая мутантная форма CysLT2R; создание лигандов цистеинил-лейкотриеновых рецепторов, пригодных для лечения увеальной меланомы, меланомы из голубых невусов и других видов рака, в патогенезе которых играет роль мутантная форма рецептора CysLT2R, содержащая однонуклеотидный полиморфизм L129Q;

- создание лигандов цистеинил-лейкотриеновых рецепторов, характеризующихся более высокой растворимостью по сравнению с известными лигандами CysLT2R, доступными на рынке. Краткое описание фигур

Фигура 1 - данные ядерно-магнитного резонанса (Ή ЯМР) для 3- {метил [({4-[(3- метилфенил)метокси]фенил}метил)с ульфамоил]амино}пропаноата (соединение (I) по примеру 1)

Фигура 2 - данные жидкостной хроматографии - хроматомасс-спектрометрии (LC-MS) для 3-{метил[({4-[(3- метилфенил)метокси] фенил } метил)сульфамои л] амино } пропаноата

Фигура 3 - данные 'Н ЯМР для 2-(3 -{ [4-(1 -метил- 1Н- 1,3 -бензодиазол-2- ил)фенил]карбамоил}фенокси)ацета та (соединение (II) по примеру 11) Фигура 4 - данные LC-MS для 2-(3 -{[4-(1 -метил- 1Н- 1,3 -бензодиазол-2- ил)фенил]карбамоил}фенокси)ацета та

Фигура 5 - данные 'Н ЯМР для 2-(2-{[5-(1Н-индол-3-ил)-1,3,4-оксадиазол- 2- ил]сульфанил}ацетамидо)тиофен-3-к арбоксамида (соединение (III) по примеру 50) Фигура 6 - данные LC-MS для 2-(2-{[5-(1Н-индол-3-ил)-1,3,4-оксадиазол- 2- ил]сульфанил}ацетамидо)тиофен-3-к арбоксамида

Фигура 7 - данные 'Н ЯМР для 1 -[4-(2-карбамоилфенокси)фенил]-2- (трифторметил)имидазо[1,2-а]пириди н-6-карбоксамида (соединение (IV) по примеру 90)

Фигура 8 - данные LC-MS для М-[4-(2-карбамоилфенокси)фенил]-2- (трифторметил)имидазо[1 ,2-а]пиридин-6-карбоксамида

Фигура 9 - данные ! Н ЯМР для 5-(5-{[бензил(фенил)амино]метил}-1,2,4- оксадиазол-3-ил)пиридин-3-сульфон мида (соединение (V) по примеру 127)

Фигура 10 - данные LC-MS для 5-(5-{[бензил(фенил)амино]метил}-1,2,4- оксадиазол-3 -ил)пиридин-3 -сульфонамида Фигура 11 - Действие соединений по примерам 1, 11, 50, 90 и 127 на цистеинил- лейкотриеновые рецепторы "дикого" типа, активированные лейкотриеном LTD4 (CysLTiR- WT и CysLT2R-WT); данные теста с продукцией инозитола монофосфата (IRi)

Фигура 12 - Действие соединений по примерам 11, 50 и 90 на цистеинил- лейкотриеновые рецепторы "дикого" типа, активированные лейкотриеном LTC4 (CysLTiR- WT и CysLTiR-WT; данные теста с продукцией IP1)

Фигура 13 - рА2-определение ингибирования продукции IRi, индуцированной лейкотриеном LTD4, под действием соединения по примеру 50

Фигура 14 - Действие соединений по примерам 11, 50 и 90 на цистеинил- лейкотриеновые рецепторы CysLT2R, содержащие мутацию L129Q. Описание настоящего изобретения

Вышеуказанная задача решается, а технические результаты - достигаются в настоящем изобретении, в рамках которого предложены новые лиганды цистеинил- лейкотриеновых рецепторов, активные в отношении цистеинил-лейкотриеновых рецепторов I и II "дикого" типа, а также мутантной формы рецептора II типа (CysLTiR), содержащего мутацию L129Q, выбранные из соединений (I) - (V):

(I), где, независимо в каждом случае, R 1 выбран из группы, состоящей из (2- карбоксиэтил)(метил)амино, -NCH3CH2CH2CO2 и З-карбоксипиперидин-1-ила;

R 2 выбран из группы, состоящей из циклопропилметокси, циклопентилокси, циклогексилокси, (оксолан-2-ил)метокси, бензилокси, (пиридин-3 -ил )метокси, (3- метилфенил)метокси и (З-фторфенил)метокси;

R 3 выбран из группы, состоящей из Н и F; и R 4 выбран из группы, состоящей из Н и СНз;

(И), где, независимо в каждом случае, R 1 выбран из группы, состоящей из Ш-пиразол- 1-ила, 1Н-имидазол-2-ила, Ш-пиразол-З-ила, 1Н-пиразол-4-ила, 1Н-имидазол -4-ила, 4Н-

1.2.4-триазол-З-ила, 1Н-1,2,4-триазол-1-ила, 2Н-1,2,3-триазол-2-ила, 1,3-оксазол-5-ила, 1,2- оксазол-3-ила, 1Н-1,2,3,4-тетразол-5-ила, 1,2,4-оксадиазол-З-ила, 1,3-тиазол-2-ила, 1,2,3- тиадиазол-4-ила, фенила, 1 -метил- 1Н-пиразол-4-ила, пиримидин-5 -ила, 1 -метил- 1Н- 1,2,4- триазол-3-ила, 3-метил-1Н-1,2,4-триазол-5-ила, 2-метил- 1,3-оксазол-4-ила, 5-метил-1Н-

1.2.4-триазол-1-ила, 2-метил- 1,3-оксазол-5-ила, 5-метил- 1,2,4-оксадиазол-З-ила, 4-метил- 1,3-тиазол-2-ила, 2-метил- 1,3-тиазол-4-ила, 3,5-диметил-1Н-пиразол-1-ила, 4- метилпиримидин-2-ила, 4 ,5 -диметил- 1 , 3 -оксазол-2-ил а, 2-циклопропил- 1,3-оксазол-5 -ила, 1Н-индазол-1-ила, 1Н-1,3-бензодиазол-1-ила, 1Н-1,3-бензодиазол-2-ила, a R 2 выбран из группы, состоящей из -О и -ОН;

(III), где, независимо в каждом случае,

R 1 выбран из группы, состоящей из 1Н-пиррол-2-ила, пиридин-4-ила, пиридин-3- ила, (тиофен-2-ил)метила, 5-хлоротиофен-2-ила, 3-метилфенила, 4-метилфенила, 2- метилфенила, бензила, (пиперидин- 1 -ил )метила, 4-фторфенила, 4-хлорфенила, 3- хлорфенила, 2-хлорфенила, 3-бромфенила, 2-бромфенила, 4-бромфенила, 2- фенилэтила, 2,4-диметилфенила, 2-циклогексилэтила, (2-фторфенил)метила, (3- фторфенил)метила, 3-фенилпропила, 2-фенилпропила, 1-фенилпропила, 4-(пропан- 2-ил)фенила, 1Н-индол-3-ила, 1 -бензофуран-2-ила, (4-метилфенокси)метила, 2- этоксифенила, (З-метилфенокси)метила, 2Н-1,3-бензодиоксол-5-ила, нафтален-2- ила, нафтален-1-ила, 1-(2-фторфенокси)этила, (2,4-дихлофенокси)метила, 4- (диэтиламино)фенила,

(IV), где, независимо в каждом случае,

R 1 выбран из группы, состоящей из 3 -хлор-5 -фторфенила, 6-метил- 1Н-индол-2-ила, 3 -метил- 1 -бензофуран-2-ила, 2-метил- 1 ,3 -бензоксазол-5-ила, 5 -фтор- 1 -бензофуран- 2-ила, 1-этил-1Н-индол-2-ила, 5-фенил-1,2-оксазол-3-ила, 3-фенил- 1,2-оксазол-5- ила, 6-метоксинафтален-2-ила, 1-метоксиизохинолин-З-ила, 6-этокси- 1Н-индол-2- ила, где, независимо в каждом случае,

R 1 выбран из группы, состоящей из (4-метилпиперидин-1-ил)метила, (2- оксопиперидин- 1 -ил)метила, 3 -метилпиперидин- 1 -карбонила, 4-метилпиперидин- 1 - карбонила, (2-оксазепан-1-ил)метила, (2-оксоазокан-1-ил)метила, 4- циклопентилморфолин-3 -ила, 1 -бензоилпирролидин-2-ила, (N, 1 - дифенилформамидо)метила,

 или фармацевтически приемлемых солей, гидратов, сольватов, полиморфов, стереоизомеров, пролекарств, активных метаболитов и иных фармацевтически приемлемых производных соединений (I) - (V), которые специалист в данной области может получить, опираясь на свои теоретические знания и практические навыки.

Используемый в настоящем описании термин "терапевтически эффективное количество" относится к такому количеству соединения (I) - (V) или его фармацевтически приемлемого производного, например, фармацевтически приемлемой соли, гидрата, сольвата, полиморфа, стереоизомера, пролекарства или активного метаболита, которое, при введении его нуждающемуся в нем пациенту, страдающему соответствующим заболеванием или заболеваниями, на которые соединения (I) - (V) и их фармацевтически приемлемые производные оказывают действие, обеспечивает положительный терапевтический эффект в лечении данного заболевания или данных заболеваний.

Используемый в настоящем описании термин "фармацевтически приемлемая соль" относится к соли соединения (I) - (V), которая является нетоксичной, безопасной и подходит для введения субъекту, предпочтительно (но без ограничения), млекопитающему, более предпочтительно (но также без ограничения), человеку. В частности, фармацевтически приемлемая соль соединения (I) - (V) может представлять собой фармацевтически приемлемую органическую соль или фармацевтически приемлемую неорганическую соль. Конкретные иллюстративные (неограничивающие) примеры фармацевтически приемлемых солей соединений (I) - (V) включают в себя, без ограничения ими, соли серной, лимонной, уксусной, щавелевой, хлороводородной, бромистоводородной, йодистоводородной, азотной кислот, гидросульфат, фосфорной кислоты, кислой соли фосфорной кислоты, соль изоникотиновой кислоты, молочной, соль салициловой кислоты, лимонной кислоты, винной, олеиновой, соль дубильной кислоты, пантотеновой, винной, аскорбиновой, янтарной, малеиновой, гентизинатной, фумаровой, глюконовой, соль глюкуроновой кислоты, сахарной, муравьиной, бензойной, глутаминовой, метансульфоната, этансульфоната, бензолсульфоната, п-толуолсульфоната и эмбоната (т. е. 1-1-метилен-бис-(2-гидрокси-3-нафтоа та)). Другими иллюстративными (неограничивающими) примерами фармацевтически приемлемых солей являются соли соединений (I) - (V) с различными аминокислотами, а также соли соединений (I) - (V) с щелочными и щелочноземельными металлами, например (без ограничения), соль алюминия, соль кальция, соль лития, соль магния, соль калия, соль натрия, соль цинка, соль висмута и другие. Специалисту в данной области, руководствующемуся общим уровнем знаний и перечнем фармацевтически приемлемых солей, известных в данной области и раскрытых, например, в руководстве Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use (P. Heinrich Stahl and Camille G. Wermuth, ed., Wiley-VCH, 2002), включенном в настоящее описание посредством ссылки, будет понятно, что вышеуказанный перечень фармацевтически приемлемых солей соединений (I) - (V) не является исчерпывающим, что могут быть получены и иные фармацевтически приемлемые органические соли и фармацевтически приемлемые неорганические соли соединений (I) - (V), и что такие фармацевтически приемлемые соли также будут являться частью настоящего изобретения.

Используемый в настоящем описании термин "сольват" относится к кристаллической форме соединения (I) - (V), а также к кристаллической форме фармацевтически приемлемой соли такого соединения, полиморфа, стереоизомера, изотопного соединения, метаболита или пролекарства, которые дополнительно имеют один или более одного вида(-ов) молекулы(-кул) растворителя, включенных в кристаллическую структуру. Сольват может включать стехиометрическое количество или нестехиометрическое количество растворителя, и молекула растворителя в растворе может существовать в упорядоченной или неупорядоченной структуре. Сольват, содержащий нестехиометрическое количество молекул растворителя, может быть образован путем потери по меньшей мере одной молекулы растворителя (но не всех) из сольвата. В определенном варианте осуществления сольват соединения (I) - (V) относится к гидрату указанного соединения, что означает, что кристалл соединения (I) - (V) дополнительно включает молекулу воды, и воду используют в качестве растворителя.

Используемый в настоящем описании термин "пролекарство" относится к нетоксичному и безопасному производному соединения (I) - (V), содержащему биологически реакционноспособную функциональную группу, при этом указанная биологически реакционноспособная функциональная группа может быть отщеплена из соединения или реагировать иначе, таким образом, с получением в биологических условиях (in vivo или in vitro ) соединения (I) - (V). Как правило, но не ограничиваясь данными случаями, пролекарство соединения (I) - (V) является неактивным или, по меньшей мере, имеет более низкую активность, чем само соединение (I) - (V), что обеспечивает соединению способность проявлять активность до тех пор, пока оно не будет отщеплено от биологически реакционноспособной функциональной группы. Без ограничения данными случаями, биологически реакционноспособная функциональная группа может быть гидролизована или окислена в биологических условиях с получением соединения. В отдельных неограничивающих вариантах осуществления изобретения, пролекарство соединения (I) - (V) может содержать биологически гидролизуемую группу, например (без ограничения), биологически гидролизуемый фосфат, биологически гидролизуемый сложный эфир, биологически гидролизуемый амид, биологически гидролизуемый сложный эфир угольной кислоты, биологически гидролизуемый карбамат или биологически гидролизуемый уреид. Обзор, касающийся пролекарств, ссылается, например, на J. Rautio et al., Nature Reviews Drug Discovery (2008) 7, 255-270 и Prodrugs: Challenges Rewards (V. Stella et al. ed., Springer, 2007). Специалисту понятно, что перечень пролекарств, приведенных в данных работах, не является исчерпывающим, что могут быть получены и иные фармацевтически приемлемые пролекарства соединений (I) - (V), и что такие фармацевтически приемлемые пролекарства также будут являться частью настоящего изобретения.

Используемый в настоящем описании термин "полиморф" (синоним: "полиморфная модификация") относится к нетоксичным и безопасным кристаллическим модификациям соединений (I) - (V). При этом, поскольку от кристаллической модификации биологически активного соединения зависят такие его важные свойства, как стабильность и растворимость, а, следовательно, и фармакокинетическая активность и эффективность данного соединения (Ажгихин И.С. Технология лекарств (2-е издание, переработанное и дополненное) - М., "Медицина", 1980, с. 15), специалист в данной области, в зависимости от стоящих перед ним задач, сможет методом проб и ошибок выбрать фармацевтически приемлемые полиморфы соединений (I) - (V), обладающие оптимальной стабильностью, и/или оптимальной растворимостью, и/или оптимальной фармакокинетической активностью.

Используемый в настоящем описании термин "стереоизомер" относится ко всем стереоизомерам, в том числе энантиомеру, диастереоизомеру, эпимеру, эндо-экзо изомеру, атропоизомеру, региоизомеру, цис- и транс-изомеру (в случаях, когда специалисту в данной области понятно, что у конкретного соединения такие стереоизомеры существуют). Кроме того, в настоящем описании выражение "стереоизомер" включает также "чистый стереоизомер" и "обогащенный стереоизомер" или "рацемический изомер" различных вышеупомянутых стереоизомеров. Термин "чистый стереоизомер" в настоящем описании означает, что массовая доля стереоизомера соединения (I) - (V) составляет не менее 95% по сравнению с другими стереоизомерами данного соединения; термин "обогащенный стереоизомер" в настоящем описании означает, что массовая доля стереоизомера соединения (I) - (V) составляет не менее 50% по сравнению с другими стереоизомерами данного соединения; термин "рацемический изомер" в настоящем описании означает, что массовая доля стереоизомера соединения (I) - (V) равна массовой доле других стереоизомеров данного соединения.

Такие стереоизомеры могут быть получены хорошо известными специалисту в данной области способами асимметрического синтеза, или разделены, очищены и обогащены способом хирального разделения (включая, без ограничения, тонкослойную хроматографию, противоточную хроматографию, колоночную хроматографию, газовую хроматографию, жидкостную хроматографию высокого давления и т. д.). Также стереоизомеры соединений (I) - (V) могут быть получены посредством хирального разделения с помощью связывания (химическое связывание и т. д.), образования соли (физическое связывание и т. д.) с другим(-и) хиральным(-и) соединением(-ями) или иными методами, известными специалисту в данной области.

Также предлагаемое изобретение относится к фармацевтическим композициям, предназначенным для лечения расстройств и заболеваний, связанных с цистеинил- лейкотриеновыми рецепторами, таких как бронхиальная астма, аллергический ринит, крапивница, атопический дерматит, гиперсенсибилизация дыхательных путей, аспирин- провоцируемое респираторное заболевание, бронхоспазм, ХОБЛ, колит, артериальная гипертензия, дисфункция коронарной артерии, последствия инфаркта миокарда, аберрантная сосудистая проницаемость, инсульт, травматическое повреждение головного мозга и онкологические заболевания, без ограничения, представленные колоректальным раком, урологическим раком, злокачественной астроцитомой, легочной карциномой, хронической лимфоцитарной лейкемией и глиобластомой, а также онкологические заболевания, связанные с полиморфизмом L129Q рецептора CysLT R - без ограничения, такие как увеальная меланома, менингеальные меланоцитарные опухоли, лептоменингеальные опухоли и меланоцитарные опухоли из голубых невусов, содержащим терапевтически эффективные количества соединений (I) - (V) или их фармацевтически приемлемых производных, которые специалист в данной области может получить, опираясь на свои теоретические знания и практические навыки, совместно с фармацевтически приемлемыми носителями, разбавителями, наполнителями и/или иными фармацевтически приемлемыми эксципиентами, используемыми в данной области.

Без ограничения, фармацевтические композиции соединений (I) - (V) по настоящему изобретению могут быть выполнены с использованием принятых в данной области техники технологий и стандартов производства в виде различных лекарственных форм, известных в данной области техники, включая, без ограничения, пероральные лекарственные формы, инъекционные формы, формы для введения через слизистую оболочку, ингаляционные формы, формы для глазного введения, формы для ректального введения, формы для местного или формы для парентерального введения, в том числе (без ограничения ими), формы для инфузионного введения, формы для инъекционного введения, имплантации, формы для подкожного введения, формы для внутривенного введения, формы для артериального введения, формы для внутримышечного введения, а также имплантируемые в организм пациента лекарственные формы.

Указанные фармацевтически приемлемые носители, разбавители, наполнители и иные фармацевтически приемлемые эксципиенты, применяемые для создания фармацевтических композиций соединений (I) - (V) по настоящему изобретению, представляют собой нетоксичные физиологически приемлемые вспомогательные вещества, традиционно используемые в данной области, для получения безопасных, стабильных и функционализированных фармацевтических композиций. В отдельных частных (неограничивающих) вариантах осуществления настоящего изобретения фармацевтически приемлемые носители, разбавители, наполнители и иные фармацевтически приемлемые эксципиенты, входящие в состав композиции, могут обеспечивать, без ограничения, необходимую стабильность активного вещества композиции (соединения (I) - (V) или его фармацевтически приемлемого производного), и/или его необходимую растворимость, и/или его высвобождение из фармацевтической композиции за определенный период времени и/или с определенной скоростью, и/или необходимую скорость и/или степень всасывания активного вещества композиции, и/или высвобождение или всасывание активного вещества композиции в определенном отделе желудочно-кишечного тракта, и так далее.

Наконец, предлагаемое изобретение относится также к способам лечения состояний, расстройств и заболеваний, связанных с цистеинил-лейкотриеновыми рецепторами, включая, без ограничения, бронхиальную астму, аллергический ринит, крапивницу, атопический дерматит, гиперсенсибилизация дыхательных путей, аспирин-провоцируемое респираторное заболевание, бронхоспазм, ХОБЛ, колит, артериальную гипертензию, дисфункцию коронарной артерии, последствия инфаркта миокарда, аберрантную сосудистую проницаемость, инсульт, травматическое повреждение головного мозга и онкологические заболевания, без ограничения, представленные колоректальным раком, урологическим раком, злокачественной астроцитомой, легочной карциномой, хронической лимфоцитарной лейкемией и глиобластомой (соединения (I) - (V)), а также онкологические заболевания, связанные с полиморфизмом L129Q рецептора CysLT2R - без ограничения, такие как увеальная меланома, менингеальные меланоцитарные опухоли, лептоменингеальные опухоли и меланоцитарные опухоли из голубых невусов (соединения (III) и (IV)), причем указанные способы включают введение пациенту, страдающему каким-либо из указанных заболеваний и нуждающемуся в лечении антагонистами и обратными агонистами цистеинил-лейкотриеновых рецепторов, терапевтически эффективного количества одного из соединений (I) - (V) или фармацевтически приемлемой соли, гидрата, сольвата или иного фармацевтически приемлемого производного такого соединения, или терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции, содержащей одно из соединений (I) - (V) или фармацевтически приемлемую соль, гидрат, сольват или иное фармацевтически приемлемое производное такого соединения совместно с фармацевтически приемлемым носителем, разбавителем, наполнителем и/или иным эксципиентом.

Другие, не названные выше заболевания, состояния и расстройства, в этиопатогенезе которых в настоящее время установлена или будет установлена впоследствии роль цистеинил-лейкотриеновых рецепторов CysLTiR или CysLTiR, а также способы лечения таких заболеваний, состояний и расстройств, использующие соединения (I) - (V) или их фармацевтически приемлемые производные, также являются или будут являться предметом настоящего изобретения постольку, поскольку предлагаемые соединения будут эффективны в лечении таких заболеваний, состояний и расстройств. При этом, как хорошо понятно специалисту в данной области, терапевтически эффективное количество соединения (I) - (V), необходимое для лечения таких состояний, расстройств и заболеваний, может варьировать в зависимости как от вида и тяжести самого состояния, расстройства или заболевания, подлежащего лечению, так и в зависимости от характеристик самого пациента: его возраста, состояния здоровья и т.д., и в каждом конкретном случае необходимое конкретному пациенту терапевтически эффективное количество соединения (I) - (V) или фармацевтически приемлемого производного такого соединения может быть подобрано специалистом в данной области с учетом вышеуказанных факторов. В рамках настоящего изобретения неожиданно было обнаружено, что предлагаемые в настоящем изобретения соединения и

(IV), как и их фармацевтически приемлемые производные (включающие, без ограничения, фармацевтически приемлемые соли, фармацевтически приемлемые гидраты, фармацевтически приемлемые сольваты и иные фармацевтически приемлемые производные данных соединений), обладают активностью обратных агонистов мутантной формы цистеинил-лейкотриенового рецептора II типа (CysLT2R), содержащей мутацию (однонуклеотидный полиморфизм) L129Q, далее обозначаемой как CysLT 2 R-L129Q.

В соответствии с существующей в данной области техники терминологией, обратные агонисты представляют собой химические соединения, которые, связываясь с тем же самым клеточным рецептором, что и агонист, производят физиологические эффекты, в целом противоположные физиологическим эффектам агониста, при этом от нейтрального антагониста обратный агонист отличается тем, что нейтральный антагонист сам по себе не оказывает влияния на активность рецептора в отсутствие агонистов или обратных агонистов, то есть не меняет базальную активность рецептора, не изменяя вероятности его различных конформационных состояний, однако блокирует воздействие на рецептор и агонистов, и обратных агонистов, тогда как обратный агонист, воздействуя на рецептор, сам по себе имеющий ненулевой базальный уровень активности в отсутствие связывания с ним лигандов, понижает активность рецепторной системы ниже базального уровня, стабилизируя рецептор в «неактивном» состоянии, делая, таким образом, переход рецептора в активированное состояние менее энергетически выгодным и менее вероятным - см.: Kenakin Т., Trends Pharmacol Sci, 2004 Apr; vol. 25, N°4, pp. 186 — 192. В случае патологий, связанных с излишней базальной активностью рецепторов, таких как увеальная меланома, вызванная мутацией L129Q CysLT2R, необходим именно такой тип блокирования работы белка.

Предлагаемые в настоящем изобретении лиганды цистеинил-лейкотриеновых рецепторов могут быть синтезированы, без ограничения, с использованием одной из схем синтеза, раскрытых ниже в настоящем описании.

Схема 1. Синтез соединения (I)

Диизопропи i

Реагент л-

Реагент 1 ! этиламин \ o =s=o

1 2 R2 TMAH=

Гидроксид o=s=o тетраметил- G =S=0

Реагент 1 и триэтиламин (Et3N; также в настоящем описании указывается как TEA), взятые в молярном соотношении 1:3,4, смешивали в сухом диметилформамиде, содержащем примерно 1 мл воды на 100 мг продукта. Реагент 2 добавляли к полученной смеси по каплям в течение 5 минут при перемешивании, затем реакционную смесь закупоривали и нагревали при 80°С в течение 16 часов, после чего смесь остужали и выпаривали при пониженном давлении. Осадок растворяли в диметилсульфоксиде (ДМСО) из расчета примерно 0,5 мл ДМСО на 100 мг продукта, затем добавляли в виде единой порции гидроксид тетраметиламмония (5 экв. стокового водного раствора, примерно 0,05 мл на 100 мг продукта). Смесь нагревали при 50°С в течение 6 часов, затем охлаждали до комнатной температуры и добавляли по каплям трифторуксусную кислоту вплоть до достижения нейтрального pH. После этого смесь выпаривали при пониженном давлении; осадок растворяли в ДМСО (примерно 1 мл ДМСО на количество продукта, не превышающее 300 мг). Полученный раствор соединения (I) подвергали фильтрации и анализу с помощью жидкостной хроматомасс-спектрометрии, а затем передавали для очистки при помощи высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).

Схема 2. Синтез соединения (II)

Реагент 1 Реагент 2 Каждую лунку микротитрационного планшета заполняли растворами реагента 1

(0,28 ммоль/л, 0,1 экв.), реагента 2 (1,1 экв.), 1-[3-(диметиламино)пропил]-2-этилди зена (EDC) (1,21 экв.) и триэтиламина (Et3N) (2 экв.), перемешивали в сухом диметилформамиде (примерно 0,7 мл на 100 мг продукта). Реакционную смесь закупоривали и оставляли при комнатной температуре на 16 часов. Затем добавляли в виде единой порции отщепляющий раствор (СС), состоящий из трифторуксусной кислоты, триизопропилсилана и воды в соотношении 93:5:2 об./об., в количестве примерно 1 мл на 100 мг продукта. Смесь перемешивали в течение 6 часов при комнатной температуре, затем выпаривали растворитель при пониженном давлении, а осадок растворяли в ДМСО (примерно 1 мл ДМСО на количество продукта, не превышающее 300 мг). Полученный раствор соединения (II) в ДМСО подвергали фильтрации и анализу с помощью жидкостной хроматомасс- спектрометрии, а затем передавали для очистки при помощи ВЭЖХ.

Схема 3. Синтез соединения (III)

Диизопропил-

R1 этиламин

+ -

N

I

N Диметил- формам ид s

1 2

Реагент 1 (5-Ш-1,3,4-оксадиазол-2-тиол, 1 экв.) и N,N-диизопропилэтиламин (DIPEA, 1,2 экв.) перемешивали в сухом диметилформамиде (примерно 1 мл на 100 мг продукта). 2-(2-хлорацетамидо)тиофен-3-карбок амид (1 экв.) (реагент 2) добавляли к смеси. Реакционную смесь закупоривали и нагревали, перемешивая, в течение 12 часов при 80°С. Растворитель выпаривали при пониженном давлении при перемешивании, а осадок растворяли в ДМСО (примерно 1 мл ДМСО на количество продукта, не превышающее 300 мг). Полученный раствор соединения (III) в ДМСО подвергали фильтрации и анализу с помощью жидкостной хроматомасс-спектрометрии, а затем передавали для очистки при помощи ВЭЖХ. Схема 4. Синтез соединения (IV)

Реагент 1 Реагент 2

1,1 ммоль реагента 2 и раствор N-гидроксибензотриазола (HOBt) в ДМСО (100 г/л, 2 мл, 1,5 мМ) помещали во флакон и добавляли 1 ммоль реагента 1 (2-(4- аминофенокси)бензамида). Если амин использовали в виде гидрохлорида, добавляли также 1 ммоль триэтиламина (Et3N). Реакционную смесь перемешивали в течение 30 минут с помощью шейкера и добавляли 1,41 ммоль 1-[3-(диметиламино)пропил]-2-этилди зена (EDC). После добавления всех реагентов флакон закупоривали и встряхивали с помощью шейкера в течение 1 часа. Если получали прозрачный раствор, флакон оставляли при комнатной температуре на 24 часа. В противном случае реакционную смесь выдерживали в ультразвуковой бане в течение 24 часов, избегая сильного нагревания. Если наблюдали столь сильное уплотнение реакционной смеси, что перемешивание было неэффективным, добавляли в виде единой порции 0,2 мл ДМСО. Сырую реакционную смесь анализировали с помощью жидкостной хроматомасс-спектрометрии, а затем передавали на ВЭЖХ.

Схема 5. Синтез соединения (V)

5-цианопиридин-З-сульфонамид (1 экв.) и гидроксиламин гидрохлорид (1,5 экв.) помещали во флакон и растворяли в этаноле (1 мл). К раствору добавляли по каплям 2 экв. триэтиламина (TEA, Et3N). Реакционную смесь выдерживали в течение ночи при комнатной температуре и затем кипятили в сосуде с обратным холодильником при перемешивании в течение 16 часов. После остывания до комнатной температуры растворитель выпаривали. К осадку добавляли 1,5 экв. 1-[3-(диметиламино)пропил]-2-этилди зена (EDC) и 1 экв. реагента 2 и растворяли в сухом ДМСО (1 мл). Реакционную смесь выдерживали в течение ночи при комнатной температуре. Добавляли 3 экв. TEA, затем реакционную смесь оставляли до утра при комнатной температуре. После этого реакционную смесь закупоривали и нагревали до 100°С при перемешивании в течение 3 часов. После остывания до температуры окружающей среды растворитель выпаривали, а осадок растворяли в ДМСО и подвергали очистке при помощи ВЭЖХ.

Ниже приводятся иллюстративные (неограничивающие) примеры синтеза индивидуальных соединений, соответствующих структурным формулам (I) - (V), с использованием вышеприведенных схем синтеза (схемы 1 - 5). Пример 1. Синтез 3-{метил[({4-[(3- метилфенил)метокси] фенил} метил )сульфамоил]амино}пропаноата согласно Схеме 1.

Гидрохлорид {4-[(3-метилфенил)метокси]фенил}мет анамина(1 экв.) и триэтиламин (Et3N) (3,4 экв.) смешивали в сухом диметилформамиде, содержащем примерно 1 мл воды на 100 мг продукта. Метил-3 [(хлоросульфонил)(метил)амино]про паноат (1 экв.) добавляли к полученной смеси по каплям в течение 5 минут при перемешивании, затем реакционную смесь закупоривали и нагревали при 80°С в течение 16 часов, после чего смесь остужали и выпаривали при пониженном давлении. Осадок растворяли в диметилсульфоксиде (ДМСО) из расчета примерно 0,5 мл ДМСО на 100 мг продукта, затем добавляли в виде единой порции гидроксид тетраметиламмония (5 экв. стокового водного раствора, примерно 0,05 мл на 100 мг продукта). Смесь нагревали при 50°С в течение 6 часов, затем охлаждали до комнатной температуры и добавляли по каплям трифторуксусную кислоту вплоть до достижения нейтрального pH. После этого смесь выпаривали при пониженном давлении; осадок растворяли в ДМСО (примерно 1 мл ДМСО на количество продукта, не превышающее 300 мг). Полученный раствор 3-{метил[({4-[(3- метил фенил )метокси] фенил } метил)сульфамоил] амино } пропаноата подвергали фильтрации и анализу с помощью жидкостной хроматомасс-спектрометрии, а затем передавали для очистки при помощи ВЭЖХ и анализировали очищенное соединение методом жидкостной хроматомасс-спектрометрии при следующих параметрах:

LCMS (время: 1,237 мин.): 100 % (MH + : вычисленное: 392,47, измеренное: 392,16).

Данные ядерно-магнитного резонанса ( ] Н ЯМР) для 3 -{метил [({4- [(3- метилфенил)метокси]фенил}метил)с ульфамоил]амино} пропаноата (ДМСО + ССЦ, 399,9755 МГц) представлены на фигуре 1. Данные LC-MS (жидкостной хроматографии с хроматомасс-спектрометрией) представлены на фигуре 2.

Примеры 2 - 10.

Используя Схему 1, аналогично примеру 1 синтезировали другие индивидуальные соединения, соответствующие структурной формуле (I), представленные ниже в таблице 1 : Таблица 1. Пример 11. Синтез 2-(3 -{[4-(1 -метил- 1Н- 1,3 -бензодиазол-2- ил)фенил]карбамоил}фенокси)ацета та согласно Схеме 2.

Каждую лунку микротитрационного планшета заполняли растворами 4-(1-метил- 2, 3-дигидро- 1Н-1,3-бензодиазол-2-илиден)циклоге кса-2, 5-диен- 1-имина (0,28 ммоль/л, 0,1 экв.), 3-[2-(терт-бутокси)-2-оксоэтокси] бензойной кислоты (1,1 экв.), 1-[3-

(диметиламино)пропил]-2-этилдиа ена (EDC) (1,21 экв.) и триэтиламина (Et3N) (2 экв.), перемешивали в сухом диметилформамиде (DMF, примерно 0,7 мл на 100 мг продукта). Реакционную смесь закупоривали и оставляли при комнатной температуре на 16 часов. Затем добавляли в виде единой порции отщепляющий раствор (СС) (трифторуксусная кислота, триизопропилсилан и вода в соотношении 93:5:2 об./об., в количестве примерно 1 мл на 100 мг продукта). Смесь перемешивали в течение 6 часов при комнатной температуре, затем возгоняли растворитель при пониженном давлении, а осадок растворяли в ДМСО (примерно 1 мл на количество продукта, не превышающее 300 мг). Полученный раствор в ДМСО подвергали фильтрации и анализу с помощью жидкостной хроматомасс- спектрометрии, а затем передавали для очистки при помощи ВЭЖХ и анализировали очищенное соединение методом жидкостной хроматомасс-спектрометрии:

LCMS (время: 0,972 мин.): 92,88 % (МН + : вычисленное 401,42, измеренное 401,15).

Данные 'H ЯМР для 2-(3-{[4-(1-метил-1Н-1,3-бензодиазол-2- ил)фенил]карбамоил}фенокси)ацета та (ДМСО + ССЦ, 399,9755 МГц) представлены на фигуре 3. Данные LC-MS представлены на фигуре 4.

Примеры 12 - 49.

Используя Схему 2, аналогично примеру 11 синтезировали другие индивидуальные соединения, соответствующие структурной формуле (II), представленные ниже в таблице 2:

Таблица 2.

Пример 50. Синтез 2-(2-{[5-(1Н-индол-3-ил)-1,3,4-оксадиазол- 2- ил]сульфанил}ацетамидо)тиофен-3-к арбоксамида согласно Схеме 3.

5-(1Н-индол-3-ил)-1,3,4-оксадиазол-2-т иол (i Э кв.) и N,N-диизопропилэтиламин (DIPEA) (1,2 экв.) смешивали в сухом диметилформамиде, содержащем примерно 1 мл воды на 100 мг продукта. Во флакон добавляли 1 экв. 2-(2-хлороацетамидо)тиофен-3- карбоксамида. Реакционную смесь закупоривали и нагревали, перемешивая, в течение 12 часов при 80°С. Растворитель возгоняли при пониженном давлении после перемешивания, осадок растворяли в ДМСО (примерно 1 мл на количество продукта, не превышающее 300 мг). Полученный раствор в ДМСО подвергали фильтрации и анализу с помощью жидкостной хроматомасс-спектрометрии, а затем передавали для очистки при помощи ВЭЖХ и анализировали очищенное соединение методом жидкостной хроматомасс- спектрометрии :

LCMS (время: 0,629 мин.): 94,52 % (МН + : вычисленное: 399,45, измеренное:

401,0).

Данные ЯМР для 2-(2-{[5-(1Н-индол-3-ил)-1,3,4-оксадиазол- 2- ил]сульфанил}ацетамидо)тиофен-3-к арбоксамида представлены на фигуре 5. Данные LC- MS представлены на фигуре 6. Примеры 51 - 89. Используя Схему 3, аналогично примеру 50 синтезировали другие индивидуальные соединения, соответствующие структурной формуле (III), представленные ниже в Таблице 3.

Таблица 3.

Пример 90. Синтез М-[4-(2-карбамоилфенокси)фенил]-2-

(трифторметил)имидазо[1,2-а]пири ин-6-карбоксамида согласно Схеме 4.

2-(трифторметил)имидазо[1,2-а]пир дин-6-карбоновую кислоту (1,1 ммоль) и раствор N-гидроксибензотриазола (HOBt) в ДМСО (100 г/л, 2 мл, 1,5 ммоль) помещали во флакон и добавляли 1 ммоль 2-(4-аминофенокси)бензамида. Если амин использовали в виде гидрохлорида, добавляли также 1 ммоль триэтиламина (Et3N). Реакционную смесь перемешивали в течение 30 минут на шейкере и добавляли 1,41 ммоль 1-[3- (диметиламино)пропил]-2-этилдиазе на. После загрузки всех реагентов флакон закупоривали и встряхивали (перемешивали) на шейкере в течение 1 часа. Если образовывался прозрачный раствор, флакон оставляли при комнатной температуре на 24 часа. В противном случае реакционную смесь оставляли на 24 часа в ультразвуковой бане, избегая сильного нагревания. Если наблюдалось столь существенное уплотнение реакционной смеси, что дальнейшее перемешивание было неэффективным, добавляли 0,2 мл ДМСО в виде единой порции. Сырую реакционную смесь анализировали с помощью с помощью жидкостной хроматомасс-спектрометрии, а затем передавали для очистки при помощи ВЭЖХ и анализировали очищенное соединение методом жидкостной хроматомасс-спектрометрии :

LCMS (время: 1,258 мин.): 100% (МН + : вычисленное: 440,38, измеренное: 440,12). Данные 'Н ЯМР для 1М-[4-(2-карбамоилфенокси)фенил]-2-

(трифторметил)имидазо[1,2-а]пири ин-6-карбоксамида представлены на фигуре 7. Данные LC-MS представлены на фигуре 8. Примеры 91 - 126. Используя Схему 4, аналогично примеру 90 синтезировали другие индивидуальные соединения, соответствующие структурной формуле (IV), представленные ниже в Таблице 4.

Таблица 4.

Пример 127. Синтез 5-(5-{[бензил(фенил)амино]метил}-1,2,4- оксадиазол-3- ил)пиридин-3-сульфонамида согласно Схеме 5.

1 экв. 5-цианопиридин-З-сульфонамида и 1,5 экв. гидроксиламина гидрохлорида помещали в колбу и растворяли в 1 мл этилового спирта (ЕЮН). К раствору добавляли по каплям 2 экв. триэтиламина (TEA). Реакционную смесь оставляли на ночь при комнатной температуре, а затем нагревали в колбе с обратным холодильником в течение 16 часов. После остывания до комнатной температуры растворитель испаряли. К остатку добавляли 1,5 экв. 1-[3-(диметиламино)пропил]-2-этилди зена (EDC) и 1 экв. 2- [бензил(фенил)амино] уксусной кислоты и растворяли в сухом ДМСО (1 мл). Реакционную смесь оставляли на ночь при комнатной температуре. Добавляли 3 экв. TEA, а затем реакционную смесь вновь оставляли на ночь при комнатной температуре. После этого реакционную смесь закупоривали и нагревали при перемешивании при 100 °С в течение 3 часов. После остывания до комнатной температуры растворитель испаряли, осадок растворяли в ДМСО, а затем передавали для очистки при помощи ВЭЖХ.

Данные 'Н ЯМР для 5-(5-{[бензил(фенил)амино]метил}-1,2,4- оксадиазол-3- ил)пиридин-3-сульфонамида представлены на фигуре 9. Данные LC-MS представлены на фигуре 10. Примеры 128 - 151. Используя Схему 5, аналогично примеру 127 синтезировали другие индивидуальные соединения, соответствующие структурной формуле (V), представленные ниже в Таблице 5.

Таблица 5.

Пример 152. Растворимость соединений

Растворимость предлагаемых в настоящем изобретении лигандов цистеинил- лейкотриеновых рецепторов - соединений (I) - (V) - определяли, вычисляя cLogP - логарифмический коэффициент распределения вещества в двухфазной системе «вода - н- октанол», отражающий, насколько гидрофобным является вещество, и вычисляемый по методике фрагментов, предложенной Hansch и Leo (A. Leo, в: "Comprehensive Medicinal Chemistry", Vol.4, C. Hansch, P.G. Sammens, J.B. Taylor and C.A. Ransden, Editors, p. 295, "Pergamon Press", 1990), как логарифм отношения концентраций вещества в двух фазах в смеси двух несмешиваемых растворителей (воды и n-октанола) в состоянии равновесия. Также для предлагаемых лигандов цистеинил-лейкотриеновых рецепторов вычисляли cLogS - десятичный логарифм растворимости вещества в воде при 25°С.

Значения cLogP и cLogS для соединений по примерам 1 - 151 представлены в Таблице 6.

Таблица 6. Значения cLogP и cLogS для соединений по примерам 1 - 151

Пример 153. Биологическая активность соединений

Способность соединений, предлагаемых в настоящем изобретении, модулировать активность цистеинил-лейкотриеновых рецепторов CysLTiR и CysLTiR оценивали в тесте с использованием клеточной линии НЕК293, полученной из клетки надпочечника эмбриона человека (Graham F. L., Smiley J., Russell W. C., Naim R., Journal of General Virology , 1977 July, vol. 36, no. 1, pp. 59-74). Выбор клеточной линии обусловлен тем, что, по данным IUPHAR/BPS Guide to Pharmacology (Back M., Dahlen S.-E., et al., Leukotriene receptors: CysLT2 receptor. Last modified on 27/03/2019. Accessed on 18/06/2019. IUPHAR/BPS Guide to PHARMACOLOGY), предпочтительным для рецепторов CysLTiR и CysLTiR является кальциевый сигналинг посредством Gq пути, при активации которого генерируется инозитол-1,4,5-трифосфат (1Рз) (Garbison К.Е., Heinz В.А., Lajiness М.Е. IP-3/IP-1 Assays. / Assay Guidance Manual, 01.05.2012; URL: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK92004/). Для функциональных тестов измеряли содержание инозитол-1 -фосфата (IRi) — более стабильного метаболита 1Рз.

Для измерения клеточной сигнализации CysLTiR использовали IPOne набор ("Cisbio", Франция) согласно инструкциям фирмы-производителя и согласно методике Besserer-Offroy Е., Brouillette R. et al. (Besserer-Offroy E., Brouillette R., et al., BIO PROTOC. 2020; 10:e3715). Клетки HEK293 высаживали на покрытые поли-Е-лизином 384-луночные плашки (Sigma, США), по 20000 клеток на ячейку, и трансфецировали 40 нг ДНК с использованием реагента для трансфекции X-treme-Gene HP (Roche, Швейцария). Через 48 часов после трансфекции среду с клетками удаляли, и клетки промывали свежим HBSS (Раствор Хэнкса). Клетки стимулировали либо лейкотриеном D4 (LTD4) в концентрациях 10 12 -10 6 М, приготовленным в IP 1 -стимулирующем буфере, либо исследуемыми соединениями в концентрациях 10 п -10 5 М при одновременном добавлении лейкотриена в значении, равном ЕС80 (концентрация лейкотриена, вызывающая ответ рецептора, составляющий 80% от максимального при выходе на насыщение). После установления равновесия в течение 30 минут при 37°С клетки лизировали с инозитолом монофосфатом (IRi), меченым флуоресцентным красителем D2 (IP1-D2) и с антителом против инозитола монофосфата, конъюгированным с флуоресцентным донором - криптатом тербия (АЬ- Crypt) (согласно Liu D.X., Zhao В., et al., Set. China, Ser. B: Chem. 2009, 52, 1198 - 1209) в лизирующем буфере и инкубировали в течение часа на комнатной температуре. Затем плашку считывали на планшетном ридере Tecan GENios Pro (МТХ Lab Systems, США) с использованием установки фильтров HTRF (homogeneous time-resolved fluorescence, однородная флуоресценция с разрешением по времени: длина волны возбуждающего света (l B036. ) - 320 нм, длины волн поглощения (l POpi. ) - 620 нм и 655 нм). Графики строили при помощи трехпараметрической EC50/IC50 аппроксимации в программе GraphPad Prism 7 (graphpad.com/scientific-software/prism/), где EC50 - полумаксимальная эффективная концентрация, a IC50 - концентрация полумаксимального ингибирования.

Для измерения поверхностной экспрессии белка методом твердофазного иммуносорбентного анализа (ELISA) клетки НЕК293 высевали в 24-луночный планшет, покрытый поли-Ь-лизином (Sigma, США), по 100 000 клеток на лунку, и трансфецировали 375 нг плазмиды. Через 48 часов клетки фиксировали 3,7% по объему формальдегидом в ТБС буфере в течение 5 минут при комнатной температуре. Клетки 3 раза промывали ТБС буфером, затем инкубировали в течение часа в ТБС буфере с 3 мас./об. % сухим обезжиренным молоком (ТБСМ) для блокирования неспецифических сайтов связывания. Коммерчески доступные биотинилированные мышиные моноклональные антитела к метке гемагглютинина (далее - НА), конъюгированные с пероксидазой хрена (Roche, Швейцария), добавляли в соотношении 1:1000 в ТБСМ буфере и инкубировали 3 часа при комнатной температуре. Затем клетки промывали 2 раза ТБС буфером, после чего к ним добавляли 250 мкл 3,3’,5,5’-тетраметилбензидина (Sigma, США). Плашки инкубировали 15 минут при комнатной температуре, реакцию останавливали добавлением 250 мкл 2N НС1, после чего 200 мкл смеси помещали в 96-луночный планшет, и поглощение при длине волны 450 нм считывали на планшетном ридере Тесал GENios Pro (МТХ Lab Systems, США). Для подсчета фоновой флуоресценции использовали клетки, протрансфецированные пустым вектором pcDNA3.1(+). Данные анализировали с помощью программы GraphPad Prism 7 (http://graphpad.com/scientific-software/prism/ ' ). откуда, используя уравнение Ченга-Прусова (согласно Cheng Y., Prusoff W.H., Biochem Pharmacol. 1973 Dec 1; 22(23):3099-108)

Kj = IC50 x ([A]/EC50 + l) 1 , где [A] - используемая заданная концентрация агониста рецепторов LTD4 и LTC4, IC50 - концентрация полумаксимального ингибирования, т.е. концентрация данного агониста, необходимая для ингибирования рецептора на 50%, ЕС50 - концентрация данного агониста, вызывающая ответ рецептора, составляющий половину максимального ответа, а Ki - константа ингибирования, измеряемая в мМ и отражающая активность связывания ингибитора с реакционным субстратом, вычисляли достоверные значения Ki (среднее значение ± стандартное отклонение (SEM)). Результаты приведены в Таблице 8 и на Фигуре 11: Таблица 8.

Из представленных в таблице 8 и на фигуре 11 данных можно видеть, что соединения по примерам 1, 11 и 127 демонстрировали антагонизм к цистеинил- лейкотриеновым рецепторам CysLTiR "дикого" типа (CysLTiR-WT): значения Ki для них находились в диапазоне от 0,2 до 0,7 мкМ. В случае рецептора CysLTiR "дикого" типа (CysLT2R-WT) только соединение по примеру 50 полностью ингибировало LTD4- индуцированный ответ рецептора (Ki = 6,46 ± 0,43 мкМ), тогда как соединение по примеру 90 лишь частично ингибировало рецептор (54 ± 6%) при концентрации, составляющей 100 мкМ.

Пример 153.

Учитывая, что еще одним, помимо LTD4, эндогенным лейкотриеном, способным активировать как CysLTiR, так и CysLT2R, является лейкотриен С4 (LTC4), авторы настоящего изобретения исследовали в тесте на продукцию инозитола монофосфата (IRi) соединения, показавшие в примере 152 наиболее выдающиеся результаты, т.е. соединения по примерам 11, 50 и 90, используя при этом в качестве агониста цистеинил- лейкотриеновых рецепторов лейкотриен С4 (LTC4). Результаты приведены на фигуре 12, откуда видно, что в случае CysLTiR соединения по примерам 11, 50 и 90 демонстрировали профили, сходные с профилями, получаемыми при использовании LTD4 в качестве агониста цистеинил-лейкотриеновых рецепторов, с даже несколько более выраженным эффектом в диапазоне субмикромолярных концентраций (как для соединения по примеру 50, так и для соединения по примеру 90 значение Ki составляло 0,7 ± 0,2 мкМ).

Однако при ингибировании ЬТС4-индуцированного ответа рецептора CysLTaR (при концентрации, равной ECso) соединения по примерам 50 и 90 были менее эффективны; значения Ki в этих случаях невозможно было вычислить.

Пример 154. Оценка зависимости "доза - эффект" для соединения по примеру 50

Учитывая, что чувствительность вышеприведенных тестов зависит от концентрации агониста, использованного для проведения теста, авторы настоящего изобретения исследовали соединение по примеру 50 более детально, чтобы установить значения рА2 в анализе Шилдса - более достоверный показатель (более достоверную оценку) функциональной активности соединения. В данном эксперименте клетки НЕК293 стимулировали фиксированными концентрациями соединения по примеру 50, а затем обрабатывали лейкотриеном D4 (LTD4) в различных концентрациях, в диапазоне от 10 12 М до 10 6 М. Как показано на Фигуре 13, соединение по примеру 50 ингибировало сигнальный путь, опосредованный LTD4, в зависимости от концентрации соединения. Анализ Шилдса для исследуемого соединения дает значения рА2 для рецепторов CysLTiR и CysLT2R, составляющие 6,5 ± 0,1 и 4,0 ± 0,2 соответственно (при значениях Кв, равных 0,34 ± 0,09 мкМ и 105 ± 37 мкМ соответственно).

Значения ЕС50 и Еш ах для LTD4 для исследуемого соединения приведены в таблице 7 в виде: среднее значение ± стандартное отклонение (SEM).

Таблица 7. Ингибирование 1ЛТ)4-индуцированной продукции IP1 2-(2-{[5-(1Н- индол-3 -ил)- 1 ,3 ,4-оксадиазол-2-ил]сульфанил } ацетамидо)тиофен-3 -карбоксамидом

(соединением по примеру 50)

Пример 155. Ингибирование конститутивно активного мутанта рецептора Cys LT2R L129Q, играющего роль в этиопатогенезе увеальной меланомы

Учитывая продемонстрированный выше антагонизм соединений по примерам 11, 50 и 90, авторы настоящего изобретения предположили, что указанные соединения способны также ингибировать сигнальный путь рецептора в конститутивно активных мутантах Cys LT2R и, таким образом, действовать в качестве обратных агонистов цистеиниллейкотриеновых рецепторов. Важность такого эффекта обусловлена тем, что, как показано в литературе и как отмечено выше в настоящем описании, конститутивно активные мутанты рецептора Cys LT2R, содержащие мутацию L129Q, играют роль в этиопатогенезе увеальной меланомы (Moore, A.R., Ceraudo, Е. et al. Nat. Genet. 2016, 48, 675-680; Moller, L, Murali, R. et al., Mod. Pathol. 2017, 30, 350-356; Goto, K.; Pissaloux, D., Am. J. Surg. Pathol. 2019, 43, 1368-1376; Knappe, U.J., Tischoff, I. et al., Neuropathology 2018, 38, 288-292). Соединения по примерам 11, 50 и 90 исследовали в функциональном тесте с продукцией инозитола монофосфата (IRi), используя клетки НЕК293, транзиентно экспрессирующие мутант L129Q рецептора Cys LT2R, непосредственно стимулируя указанные клетки соединением по примеру 11, или соединением по примеру 50, или соединением по примеру 90 в диапазоне концентраций от 1 ,6 мкМ до 100 мкМ, определяя для каждого из соединений концентрацию полумаксимального ингибирования (IC50) и процент максимального ингибирования. Результаты представлены на фигуре 14 и в таблице 8 в виде: среднее значение ± стандартное отклонение (SEM).

Таблица 8.

Как можно видеть из фигуры 14 и из таблицы 8, накопление IRi при активации сигнального пути, задействующего конститутивно активный мутант L129Q Cys LT2R, уменьшалось при обработке клеток соединениями по примерам 50 и 90 в зависимости от их концентрации. При этом соединения по примерам 11 и 90 дозозависимым образом ингибировали накопление IRi с концентрацией полумаксимального ингибирования (IC50), находящейся в диапазоне от 30 до 40 мкМ, а для соединения по примеру 50 было показано практически полное ингибирование продукции IRi при концентрации соединения, равной

100 мкМ.

Пример 156.

Для оценки аффинности (сродства) лигандов по примерам 2 - 10, 12 - 49, 51 - 89, 91 - 126 и 128 - 151 к цистеинил-лейкотриеновым рецепторам CysLTiR и CysLTiR вычисляли скоринг-функцию согласно Totrov М., Abagyan R., 1999. Значения скоринг- функции, вычисленной согласно Totrov М., Abagyan R., 1999, для лигандов по примерам 2 - 10, 12 -49, 51 - 89, 91 - 126 и 128 - 151 для рецепторов CysLTiR и CysLTiR представлены в Таблицах 9 и 10 соответственно (приводятся минимальное значение, среднее значение и стандартное отклонение). Приводимые в таблицах значения функции скоринга, рассчитанной для лигандов по примерам 2 - 10, 12 - 49, 51 - 89, 91 - 126 и 128 - 151 , дают специалисту в данной области надежный характеристический параметр для оценки связывания предлагаемых в настоящем изобретении лигандов с цистеинил-лейкотриеновыми рецепторами CysLTiR и CysLTiR.

Таблица 9. ПО

Таблица 10.

Приведенные выше примеры индивидуальных соединений (I) - (V), равно как и примеры их синтеза и примеры, подтверждающие биологическую активность указанных соединений в отношении цистеинил-лейкотриеновых рецепторов "дикого" типа и в отношении цистеинил-лейкотриеновых рецепторов, содержащих мутацию L129Q, предназначены лишь для иллюстрации настоящего изобретения и ни в коей мере не могут рассматриваться как исчерпывающие варианты осуществления настоящего изобретения. Специалисту в данной области будет понятно, что возможны и иные частные варианты осуществления настоящего изобретения, явным образом не упомянутые в настоящем описании изобретения, однако также охватываемые настоящим изобретением и являющиеся его частью.