[0001] Esta solicitud reivindica la prioridad de la solicitud de patente europea N° 19382061.0, presentada el 30 de enero de 2019, y de la solicitud de patente provisional de los Estados Unidos N° 62/913.259, presentada el 10 de octubre de 2019.

Campo de la invencion

[0002] La presente invencion se refiere al uso de fosfatos de inositol (IP), sus analogos y derivados para aumentar la perfusion y/u oxigenacion tisular. La presente invencion tambien se refiere a composiciones farmaceuticas que comprenden dichos IP, sus analogos y derivados y su uso en la salud animal y humana.

Estado de la tecnica

[0003] La enfermedad arterial periferica (EAP) es un trastorno comiin caracterizado por estenosis y/u obstruction de las arterias de las extremidades inferiores que da lugar a una diminution de la perfusion muscular y la oxigenacion. La EAP representa un importante problema de salud piiblica y supone un alto riesgo de sufrimiento a largo plazo. La EAP aumenta el riesgo de muerte tisular (gangrena), amputation y muerte prematura.

[0004] La EAP es el resultado de la isquemia en las extremidades inferiores. Su causa principal es la aterosclerosis. En su forma leve, la EAP puede limitarse a claudication intermitente y dolor en las extremidades inferiores. La EAP de las extremidades inferiores es una causa importante de discapacidad y perdida de movilidad en hombres y mujeres mayores y tiene un impacto decisivo en la calidad de vida.

[0005] La prevalencia de EAP es ~12 % en la poblacion adulta. Esta prevalencia aumenta a mas del 20% en el grupo de poblacion con mas de 70 anos de edad. La EAP ahora afecta a mas de ocho millones de hombres y mujeres solo en los Estados Unidos. Se estima que mas de 200 millones de personas sufren EAP en todo el mundo. Es probable que la prevalencia de la EAP aumente en el futuro cercano a medida que la poblacion general envejezca y aumente la incidencia de diabetes tipo 2 relacionada con la obesidad. Fumar tabaco tambien es otro factor de riesgo significative. Los pacientes con EAP tienen mayores tasas de morbilidad y mortalidad cardiovascular (CV), mayores tasas de deterioro funcional y mayores tasas de perdida de movilidad en comparacion con la poblacion general.

[0006] Los objetivos del protocolo para el tratamiento de pacientes con EAP incluyen reducir las tasas de eventos CV, mejorar el rendimiento funcional y prevenir el deterioro funcional y la perdida de movilidad. Restaurar o mejorar la perfusion sanguinea en las extremidades puede ayudar a lograr estos objetivos.

[0007] Si bien los procedimientos de revascularizacion endovascular y de las extremidades inferiores mejoran significativamente el rendimiento de deambulacion en pacientes con EAP, los procedimientos de revascularizacion no son opciones terapeuticas para muchos de ellos, ya sea por la presencia de enfermedades comorbidas o porque la ubicacion y el tipo de enfermedad aterosclerotica en las extremidades inferiores no es susceptible de revascularizacion. La revascularizacion es invasiva, costosa y esta asociada con riesgos, especialmente para pacientes mayores. Por estas razones, existe una demanda por parte de los medicos de terapias medicas que mejoren el funcionamiento de las extremidades inferiores en pacientes con EAP que sean efectivas, accesibles y bien toleradas.

[0008] En la actualidad, slo dos medicamentos han sido aprobados por la Administration Federal de Alimentos y Medicamentos (FDA) para mejorar el rendimiento de deambulacion en personas con EAP: la pentoxifilina (1984) y el cilostazol (1999). Desde entonces no se han aprobado nuevos medicamentos para tratar la claudicacion intermitente. Ademas, en estudios recientes en pacientes con EAP, la pentoxifilina no ha mejorado significativamente los sintomas de claudicacion intermitente o la distancia maxima de deambulacion mas que el placebo. Las guias de practica clinica recientemente publicadas recomiendan no recetar pentoxifilina para los sintomas de claudicacion intermitente, debido a la falta de beneficio terapeutico.

[0009] El cilostazol es un inhibidor de la fosfodiesterasa que proporciona una mejora de aproximadamente un 25 % a un 40 % en el rendimiento de deambulacion en cinta en personas con EAP sintomatica. El cilostazol es un inhibidor de la fosfodiesterasa tipo 3 que actiia aumentando la concentration intracelular de monofosfato de adenosina ciclico; en el proceso, el farmaco suprime la agregacion plaquetaria y sirve como vasodilatador arterial directo, mejorando la perfusion sanguinea. Sin embargo, el mecanismo por el cual el cilostazol mejora la capacidad de deambulacion en pacientes con EAP sigue sin estar claro.

[0010] Los efectos secundarios del cilostazol incluyen dolor de cabeza, diarrea, palpitaciones y aturdimiento. Hay un recuadro negro que advierte sobre la prescription de cilostazol a sujetos con antecedentes de enfermedades cardiovasculares. El cilostazol no debe administrarse a pacientes con EAP que tambien tienen insuficiencia cardiaca. El cilostazol interactiia con medicamentos recetados regularmente a pacientes con insuficiencia renal o enfermedades cardiovasculares, como cinacalcet, clopidogrel e ibandronato, lo que aumenta el riesgo de una reaction adversa para estos pacientes derivada del uso combinado de cilostazol con otros medicamentos.

[0011] En conclusion, las terapias medicas para el alivio sintomatico son limitadas, las intervenciones quimrgicas o endovasculares son litiles para algunas personas, pero los resultados a largo plazo a menudo son decepcionantes. Como resultado, existe la necesidad de desarrollar nuevas terapias mas efectivas y seguras para tratar la EAP.

Description general de la invencion

[0012] En un primer aspecto, la presente invencion se refiere a un compuesto de formula general I, o una de sus sales farmaceuticamente aceptables, para su uso en el aumento de la perfusion y/u oxigenacion tisular en un sujeto que lo necesite

[0013] donde Ri , R ₃ , Rs, R ₇ , R ₉ y Rn se seleccionan independientemente entre OH, un radical de formula II, III, IV y un resto heterologo:

II III IV

[0014] con la condition de que: [0015] al menos uno de Ri , R ₃ , Rs, R ₇ , R ₉ y Rn se seleccione entre un radical de formula II, III y IV, y

[0016] cero, uno, dos o tres de Ri , R ₃ , Rs, R ₇ , R ₉ y Rn sea un resto heterologo.

[0017] En otro aspecto, la presente invencion se refiere a un compuesto de formula general I, como se ha definido anteriormente, para su uso en el tratamiento o prevencion de la isquemia en un sujeto que lo necesite. En una version de este aspecto, la invencion se refiere a un compuesto de formula general I, como se describe anteriormente, para su uso en el tratamiento o prevencion de una enfermedad o afeccion relacionada con la isquemia en un sujeto que lo necesite.

[0018] En algunos aspectos, la presente invencion se refiere a un compuesto de formula general I, como se ha definido anteriormente, en el que el resto heterologo se selecciona entre un radical de formula V, un radical de formula VI y un radical de formula VII:

[0019] y en donde n es un ni mero entero en el intervalo de 2 a 200, y R13 se selecciona entre H, metilo o etilo.

[0020] En otro aspecto, la invencion tambien se refiere a un metodo para aumentar la perfusion y/u oxigenacion tisular que comprende administrar una cantidad terapeuticamente efectiva de un compuesto de formula I, como se ha definido anteriormente, junto con excipientes o vehiculos farmaceuticamente aceptables, a un sujeto que lo necesite. Este aspecto tambien puede formularse como el uso de un compuesto de formula I, como se ha definido anteriormente, para la fabricaton de un medicamento para aumentar la perfusion y/u oxigenacion tisular en un sujeto que lo necesite.

[0021] En otro aspecto, la invencion tambien se refiere a un metodo para tratar o prevenir la isquemia y/o una enfermedad o afeccion relacionada con la isquemia que comprende administrar una cantidad terapeuticamente efectiva de un compuesto de formula I, como se ha definido anteriormente, junto con excipientes o vehiculos farmaceuticamente aceptables, a un sujeto que lo necesite. Este aspecto tambien puede formularse como el uso de un compuesto de formula I, como se ha definido anteriormente, para la fabricacion de un medicamento para tratar o prevenir la isquemia y/o una enfermedad o afeccion relacionada con la isquemia en un sujeto que lo necesite.

[0022] En otro aspecto, la invencion se refiere a un metodo para tratar o prevenir la enfermedad arterial periferica que comprende administrar una cantidad terapeuticamente efectiva de un compuesto de formula I, como se ha definido anteriormente, junto con excipientes o vehiculos farmaceuticamente aceptables, a un sujeto que lo necesite. Este aspecto tambien puede formularse como el uso de un compuesto de formula I, como se ha definido anteriormente, para la fabricacion de un medicamento para tratar o prevenir la enfermedad arterial periferica en un sujeto que lo necesite.

[0023] Los compuestos de la presente invencion son particularmente litiles para aumentar la perfusion y/u oxigenacion tisular en las extremidades inferiores y, especialmente, para el tratamiento o prevention de la enfermedad arterial periferica (EAP) y afecciones estrechamente relacionadas tales como la isquemia critica de las extremidades (ICE). Estos compuestos tambien exhiben muchas propiedades ventajosas (por ejemplo, un mejor perfil de seguridad) en comparacion con el cilostazol, el farmaco de referenda actualmente indicado para el tratamiento de la EAP.

[0024] La invencion tambien proporciona una composicion farmaceutica que comprende al menos un compuesto de formula I, como se ha definido anteriormente, para su uso a fin de: (i) aumentar la perfusion y/u oxigenacion tisular, (ii) tratar o prevenir la isquemia y/o una enfermedad relacionada con la isquemia, y/o (iii) tratar o prevenir la EAP en un sujeto que lo necesite. Este aspecto tambien puede formularse como el uso de una composicion farmaceutica que comprende al menos un compuesto de formula I, como se ha definido anteriormente, para la fabricacion de un medicamento para: (i) aumentar la perfusion y/u oxigenacion tisular, (ii) tratar o prevenir la isquemia y/o una enfermedad relacionada con la isquemia, y/o (iii) tratar o prevenir la EAP en un sujeto que lo necesite. Breve descripcion de los dibujos

[0025] La Figura 1 muestra ejemplos representatives de analogos de fosfato de inositol en los que dos de seis X son OPSO ₂ ² y las X restantes son OSO ₃ . Se muestran dos formas especificas de 4,6-di-(0-tiofosfato)-inositol-1 ,2,3,5-tetra-0- sulfato.

[0026] La Figura 2 muestra analogos de fosfato de inositol y derivados de fosfato de inositol que pueden usarse para poner en practica los metodos de la presente invencion. Las moleculas que se muestran son mioinositol-pentaquisfosfato-2- PEG400, mioinositol hexaquissulfato (mioinositol hexasulfato) y scyllo-mioinositol hexaquissulfato (scyllo-inositol hexasulfato).

[0027] La Figura 3 muestra analogos de fosfato de inositol y derivados de fosfato de inositol que pueden usarse para poner en practica los metodos de la presente invencion. X representa independientemente grupos que contienen fosforo y/o azufre (por ejemplo, fosfato, sulfato o tiofosfato). Ri representa un resto heterologo (por ejemplo, PEG o PG).

[0028] La Figura 4 muestra ejemplos de analogos de fosfato de inositol y derivados de fosfato de inositol que pueden usarse para poner en practica los metodos de la presente invencion. Ri representa un resto heterologo (por ejemplo, PEG o PG). n puede estar entre 2 y 200.

[0029] La Figura 5 muestra ejemplos de analogos de fosfato de inositol y derivados de fosfato de inositol que pueden usarse para poner en practica los metodos de la presente invencion. n puede estar entre 2 y 200.

[0030] La Figura 6 muestra ejemplos de analogos de fosfato de inositol y derivados de fosfato de inositol que pueden usarse para poner en practica los metodos de la presente invencion. n puede estar entre 2 y 200.

[0031] La Figura 7 muestra el flujo sanguineo en las extremidades posteriores en un modelo de rata a DO medido por imagen con laser Doppler. El flujo sanguineo se muestra en unidades de perfusion normalizadas (UP). La normalizacion se obtiene al comparar los datos sin procesar con los datos del grupo 1 a DO.

[0032] La Figura 8 muestra el flujo sanguineo en las extremidades posteriores en un modelo de rata a D6 medido por imagen con laser Doppler. El flujo sanguineo se muestra en unidades de perfusion normalizadas (UP). La normalizacion se obtiene comparando los datos sin procesar con los datos del grupo 1 a D6. [0033] La Figure 9 muestra el flujo sanguineo en las extremidades posteriores en un modelo de rata a D12 medido por imagen con laser Doppler. El flujo sanguineo se muestra en unidades de perfusion normalizadas (UP). La normalizacion se obtiene comparando los datos sin procesar con los datos del grupo 1 a D12.

[0034] La Figure 10 muestra el porcentaje de inhibicion de la calcificacion de la aorta en un modelo de VitD en rata a D12. El nivel de calcio en el momento del sacrificio se midio por ICP-OES.

[0035] La Figure 11 muestra el flujo sanguineo en las extremidades posteriores en un modelo de rata a D12 y D18 (6 dias despues de la interrupcion del tratamiento) medido por imagen con laser Doppler. El flujo sanguineo se muestra en unidades de perfusion normalizadas (UP). La normalizacion se obtiene comparando los datos sin procesar con los datos del grupo 1 a D12 y D18.

[0036] La Figure 12 muestra (A) Distancia maxima de deambulacion (DMD) y (B) Tiempo maximo de deambulacion (TMD) en un modelo de rata a D10 medido con la prueba de cinta rodante. La distancia maxima de deambulacion se muestra en metros (m) y el tiempo maximo de deambulacion en minutos (min).

[0037] La Figure 13 muestra la Distancia maxima de deambulacion (DMD) en un modelo de rata a D17 (5 dias despues de la interrupcion del tratamiento) medido por la prueba en cinta rodante. La distancia maxima de deambulacion se muestra en metros (m) hasta 40 minutos de tiempo de deambulacion.

[0038] La Figure 14 muestra el porcentaje de inhibicion de la calcificacion de la aorta en un modelo de VitD en rata a D24 (12 dias despues de la interrupcion del tratamiento). El nivel de calcio en el momento del sacrificio se midio por ICP-OES.

[0039] La Figure 15 muestra el flujo sanguineo en las extremidades posteriores en un modelo de rata a DO, D5 y D13 (8 dias despues de comenzar el tratamiento) medido por imagen con laser Doppler. El flujo sanguineo se muestra en unidades de perfusion normalizadas (UP). La normalizacion se obtiene al comparar los datos sin procesar con los datos del grupo 1 a DO, D5 y D13.

[0040] La Figure 16 muestra (A) Distancia maxima de deambulacion (DMD) y (B) Tiempo maximo de deambulacion (TMD) en un modelo de rata a D11 (7 dias despues de comenzar el tratamiento) medido por la prueba en cinta rodante. La distancia maxima de deambulacion se muestra en metros (m) y el tiempo maximo de deambulacion en minutos (min).

[0041] La Figure 17 muestra el porcentaje de inhibicion de la calcificacion de las arterias femorales en un modelo de VitD en rata a D13 (9 dias despues de comenzar el tratamiento). El nivel de calcio en el momento del sacrificio se midio por ICP-OES.

Descripcion detallada de la invencion

[0042] La presente invencion proporciona compuestos, composiciones farmaceuticas, metodos y vias de administracion para su uso en el aumento de la perfusion y/u oxigenacion tisular. La invencion tambien proporciona compuestos, composiciones farmaceuticas, metodos y vias de administracion para su uso en el tratamiento o prevencion de la isquemia y enfermedades y afecciones relacionadas con la isquemia.

[0043] Los compuestos de la presente invencion son particularmente litiles para aumentar la perfusion y/u oxigenacion tisular en las extremidades inferiores y, especialmente, para el tratamiento o prevencion de la enfermedad arterial periferica (EAP) y afecciones relacionadas tales como isquemia critica de las extremidades (ICE).) Estos compuestos tambien exhiben muchas propiedades ventajosas en comparacion con otros medicamentos aprobados para el tratamiento de la EAP y la ICE.

7. Definiciones de terminos y expresiones generates

[0044] La presente invencion incluye realizaciones en las que exactamente esta presente, se emplea o es relevante un miembro del grupo para un producto o proceso dado. Tambien incluye realizaciones en las que estan presentes, se emplean o son relevantes mas de uno, o todos los miembros del grupo para un producto o proceso dado.

[0045] A menos que se defina de otra manera, todos los terminos tecnicos y cientificos utilizados en el presente documento tienen el mismo significado que el entendido comiinmente por un experto en la materia a la que se refiere esta descripcion. Por ejemplo, el Pei-Show J, Concise Dictionary of Biomedicine and Molecular Biology, 2 ^a Ed. (CRC Press, Boca Raton, FL, EE.UU. 2002); Lackie J, The Dictionary of Cell and Molecular Biology, 5 ^a Ed. (Academic Press, Cambridge, MA, EE.UU. 2013) y Cammack R, et al. , Oxford Dictionary of Biochemistry and Molecular Biology, 2 ^a Ed., (Oxford University Press, Oxford, GB, 2006) proporcionan a la persona experta un diccionario general de muchos de los terminos utilizados en esta descripcion. [0046] Las unidades, prefijos y simbolos se representan en su forma aceptada del Sistema Internacional de Unidades (SI). Los intervalos numericos incluyen los ndmeros que definen el intervalo. Cuando se recita un intervalo de valores, debe entenderse que tambien se describe especificamente cada valor entero que interviene, y cada fraccion del mismo, entre los limites superior e inferior recitados de ese intervalo, junto con cada subintervalo entre dichos valores. Los limites superior e inferior de cualquier intervalo se pueden incluir o excluir independientemente del intervalo, y dentro de la invencion tambien se incluye cada intervalo en el que se incluye uno, ninguno o ambos limites.

[0047] En el caso de que se recite un valor explicitamente, debe entenderse que los valores que tienen aproximadamente el mismo valor o cantidad que el valor recitado tambien estan dentro del alcance de la invencion. Cuando se describe una combinacion, tambien se describe especificamente cada subcombinacion de los elementos de esa combinacion y esta dentro del alcance de la invencion. A la inversa, cuando se describen individualmente diferentes elementos o grupos de elementos, tambien se describen combinaciones de los mismos. Cuando se describe que cualquier elemento de una invencion tiene una pluralidad de alternativas, tambien se describen ejemplos de esa invencion en los que cada alternativa se excluye individualmente o en cualquier combinacion con las otras alternativas; mas de un elemento de una invencion puede tener dichas exclusiones, y en el presente documento se describen todas las combinaciones de elementos que tienen dichas exclusiones.

[0048] El termino "y/o" (“y/u”), como se usa en el presente documento, debe tomarse como la invencion especifica de cada una de las dos caracteristicas o componentes especificados con o sin el otro. Por lo tanto, el termino "y/o" como se usa en una frase como "A y/o B" en el presente documento pretende incluir "A y B", "A o B", "A" (solo) y "B " (solo). Del mismo modo, el termino "y/o" tal como se usa en una frase como "A, B y/o C" pretende abarcar cada uno de los siguientes aspectos: A, B y C; A, B o C; A o C; A o B; B o C; A y C; A y B; B y C; A (solo); B (solo); y C (solo).

[0049] El termino "alrededor" como se usa en este documento y se aplica a uno o mas valores de interes, se refiere a un valor que es similar a un valor de referenda establecido. En ciertos aspectos, el termino "alrededor" se refiere a un intervalo de valores que se encuentran dentro del 10 %, 9 %, 8 %, 7 %, 6 %, 5 %, 4 %, 3 %, 2 %, 1 % o menos en cualquier direccion (mayor o menor respecto) del valor de referenda establecido a menos que se indique lo contrario o sea evidente por el contexto (excepto cuando dicho ni mero excedeha el 100% de un valor posible). [0050] Los terminos "isquemia critica de las extremidades" o "ICE", como se usan en el presente documento, se refieren a una obstruction severa de las arterias que reduce notablemente el flujo sanguineo a las extremidades y progresa hasta el punto de dolor intenso e incluso lilceras, llagas o gangrena en la piel. La isquemia critica de las extremidades es una afeccion muy grave de la enfermedad arterial periferica. En algunos aspectos, la administration del fosfato de inositol de la presente invencion (por ejemplo, hexafosfato de mioinositol) a un sujeto que lo necesite mejora su capacidad de deambulacion para caminar mas rapido y durante distancias mas largas en comparacion a cuando no se trata.

[0051] El termino "compuesto" como se usa en el presente documento pretende incluir todos los isomeros e isotopos de la estructura representada. Como se usa en el presente documento, el termino "isomero" significa cualquier isomero geometrico, tautomero, ion bipolar, estereoisomero, enantiomero o diastereomero de un compuesto. Los compuestos pueden incluir uno o mas centros quirales y/o dobles enlaces y, por lo tanto, pueden existir como estereoisomeros, como isomeros de doble enlace (es decir, isomeros geometricos E/Z) o diastereomeros (por ejemplo, enantiomeros (es decir, (+) o (-)) o isomeros cis/trans). La presente invencion abarca todos y cada uno de los isomeros de los compuestos descritos en el presente documento, incluidas las formas estereomericamente puras (por ejemplo, geometricamente puras, enantiomericamente puras o diastereomericamente puras) y mezclas enantiomericas y estereoisomericas, por ejemplo, racematos. Las mezclas enantiomericas y estereomericas de compuestos y los medios para resolverlos en sus enantiomeros o estereoisomeros componentes son bien conocidos. Un compuesto, sal o complejo de la presente invencion se puede preparar en combination con moleculas de disolvente o de agua para formar solvatos e hidratos por metodos de rutina.

[0052] El termino "cilostazol", como se usa en el presente documento, se refiere a 6- [4-(1-ciclohexil-1 H-tetrazol-5-il) butoxi]-3,4-dihidro-2(1 H)-quinolinona [CAS-73963-72- 1], un derivado de quinolinona que inhibe la fosfodiesterasa celular. La formula molecular y el peso del cilostazol son C20H27N5O2 y 369,46 g/mol, respectivamente. Su formula estructural es:

[0053] El termino "cantidad efectiva", y los terminos relacionados“dosis efectiva” y “dosificacion efectiva”, como se usan en el presente documento, en referenda a (i) un compuesto de una formula general I (por ejemplo, un fosfato de inositol, un analogo de fosfato de inositol, un derivado de fosfato de inositol, o una combination de los mismos), o (ii) una composition farmaceutica que comprende al menos uno de los compuestos del punto (i), es aquella cantidad suficiente para obtener resultados beneficiosos o deseados. En algunas realizaciones, los resultados beneficiosos o deseados son, por ejemplo, resultados clinicos y, como tal, una "cantidad efectiva" depende del contexto en el que se esta aplicando. En el contexto de la administration de un agente terapeutico que aumenta la perfusion y/u oxigenacion tisular, una cantidad efectiva de un agente terapeutico es, por ejemplo, una cantidad suficiente para (a) aumentar la perfusion y/u oxigenacion tisular en un area especifica, (b) detener, reducir, ralentizar la progresion o revertir la isquemia en un area especifica o (c) mejorar la movilidad o la capacidad de deambulacion (por ejemplo, velocidad, distancia) en un sujeto, en comparacion con los mismos parametros observados en el sujeto antes de la administracion del agente terapeutico, o en una poblacion de sujetos control sin administracion del agente terapeutico.

[0054] El termino "isquemia" como se usa en el presente documento se refiere a una restriccion en el suministro de sangre a los tejidos, causando una escasez de oxigeno que se requiere para mantener el metabolismo celular. La isquemia comprende no solo la insuficiencia de oxigeno, sino tambien la disponibilidad reducida de nutrientes y la eliminacion inadecuada de los desechos metabolicos. La isquemia puede ser parcial (mala perfusion) o total.

[0055] Los terminos "distancia maxima da deambulacion" o "DMD" tal como se usan en el presente documento se refieren a la distancia a la que un sujeto no puede continuar caminando sin ayuda debido al agotamiento o al dolor extremo. En el contexto de evaluar un aumento en la DMD, dicho incremento se evaliia comparando los valores de la DMD de un sujeto antes y despues del tratamiento con un agente terapeutico, o comparando los valores de la DMD del sujeto despues del tratamiento con una poblacion de sujetos de control no tratados con el agente terapeutico.

[0056] Los terminos "tiempo maximo de deambulacion" o "TMD", tal como se usan en el presente documento, se refieren al momento en que un sujeto no puede continuar caminando sin ayuda debido al agotamiento o al dolor extremo. En el contexto de evaluar un aumento en el TMD, dicho incremento se evaliia comparando los valores del TMD de un sujeto antes y despues del tratamiento con un agente terapeutico, o comparando los valores del TMD del sujeto despues del tratamiento con una poblacion de sujetos de control no tratados con el agente terapeutico.

[0057] Los terminos "administracion parenteral" y "administrado parenteralmente", tal como se usan en el presente documento, significa modos de administracion distintos de la administracion enteral y topica, generalmente mediante inyeccion, e incluyen, sin limitacion, inyeccion e infusion intravenosa, intramuscular, intraarterial, intratecal, intracapsular, intraorbital, intracardiaca, intradermica, intraperitoneal, transtraqueal, subcutanea, subcuticular, intraarticular, subcapsular, subaracnoidea, intraespinal, epidural e intraesternal (por ejemplo, infusion dialitica renal).

[0058] Los terminos "enfermedad arterial periferica" o "EAP" tal como se usan en el presente documento se refieren a un estrechamiento de las arterias perifericas de las piernas (mas comiinmente), estomago, brazos y cabeza. Los sintomas incluyen claudicacion intermitente (por ejemplo, dolor en las piernas al caminar que se resuelve con reposo), lilceras cutaneas, piel azulada, piel fha o crecimiento deficiente de unas y cabello.

[0059] Los terminos "previene", "prevenir" y "prevencion" tal como se usan en el presente documento se refieren a inhibir el inicio o disminuir la aparicion de una enfermedad o afeccion en un sujeto (por ejemplo, evitando el desarrollo de tejido isquemico en las extremidades).

[0060] El termino "SNF472", como se usa en el presente documento, se refiere a una formulacion intravenosa de hexafosfato hexasodico de mioinositol. El SNF472 se fabrica disolviendo hexafosfato hexasodico de mioinositol en solucion salina, seguido de ajuste de pH y filtracion aseptica. El SNF472 se prepara a tres concentraciones diferentes: (a) (i) 20 mg/ml y (ii) 90 mg/ml en viales de un solo uso de 5 ml, formulados en solucion salina, pH 5,8 a 6,2 y (b) 30 mg/I en viales de un solo uso de 10 ml, formulados en solution salina, a pH 5,6 a 6,4.

[0061] Los terminos "sujeto", "individuo", "animal" o "mamifero", como se usan en el presente documento, se refieren a cualquier sujeto, particularmente un sujeto mamifero, para el que se desea el diagnostico, pronostico o terapia. Los sujetos mamiferos incluyen, pero no se limitan a, seres humanos, animales domesticos, animales de granja, animales de zoologico, animales deportivos, animales de compania como perros, gatos, cobayas, conejos, ratas, ratones, caballos, ganado, vacas; primates como simios, monos, orangutanes y chimpances; canidos como perros y lobos; felinos como gatos, leones y tigres; equidos como caballos, burros y cebras; osos, animales de alimentation como vacas, cerdos y ovejas; ungulados como ciervos y jirafas; roedores como ratones, ratas, hamsteres y conejillos de indias; etc. En ciertos aspectos, el sujeto es un sujeto humano. En algunos aspectos, el sujeto es un paciente humano con una perfusion tisular y/u oxigenacion reducidas en los miisculos de las extremidades inferiores o en riesgo de desarrollar dicha afeccion. En algunos aspectos adicionales, el sujeto es un paciente humano con isquemia y/o una enfermedad o afeccion relacionada con la isquemia, o en riesgo de desarrollar dicha isquemia, enfermedad o afeccion relacionada con la isquemia.

[0062] El termino "sustancialmente", como se usa en el presente documento, se refiere a la condition cualitativa de exhibir la extension o grado total o casi total de una caractehstica o propiedad de interes. Una persona experta en materia biologica comprendera que los fenomenos quimicos rara vez, si es que alguna vez, llegan a completarse y/o proceden hasta completarse o logran o evitan un resultado absoluto. Por lo tanto, el termino "sustancialmente" se usa en el presente documento para capturar la posible falta de integridad inherente a muchos fenomenos biologicos y quimicos.

[0063] El termino "perfusion tisular" como se usa en el presente documento se refiere al flujo de sangre u otro perfusato a traves de los vasos de un tejido u organo especifico. "Aumento de la perfusion tisular" o "aumentar la perfusion tisular", como se usa en el presente documento, se refiere a un incremento en el flujo sanguineo en un area de tejido especifico en un sujeto despues de administrar un fosfato de inositol de la presente invention en comparacion con los mismos parametros observados en el sujeto antes la administration de dicho agente terapeutico, o en una poblacion de sujetos control sin administration de dicho agente terapeutico.

[0064] Los terminos "tratar" o "tratamiento" tal como se usan en el presente documento se refieren a la administration de un compuesto o composition farmaceutica de la presente invention para (i) ralentizar, (ii) inhibir la progresion, (iii) parar o (iv) revertir la progresion de una enfermedad o afeccion despues de que hayan aparecido sus signos clinicos. Se entiende que el control de la progresion de la enfermedad significa los resultados clinicos beneficiosos o deseados que incluyen, pero no se limitan a, reduccion de los sintomas, reduccion de la duration de la enfermedad, estabilizacion de estados patologicos (especificamente para evitar un deterioro adicional), retraso de la progresion de la enfermedad, mejora del estado patologico y remision (tanto parcial como total). El control de la progresion de la enfermedad tambien implica una extension de la supervivencia en comparacion con la supervivencia esperada si no se aplica el tratamiento. Dentro del contexto de la presente invencion, los terminos "tratar" y "tratamiento" se refieren especificamente a (a) aumentar la perfusion y/u oxigenacion tisular o (b) detener, reducir, ralentizar la progresion o revertir el desarrollo de tejido isquemico, especialmente en las extremidades inferiores, o (c) mejorar la movilidad o la capacidad de deambulacion (por ejemplo, velocidad, distancia, resistencia) en un sujeto administrado con los compuestos o las composiciones farmaceuticas de la presente invencion.

[0065] El termino "capacidad de deambulacion", como se usa en el presente documento, se refiere a la capacidad de un sujeto para moverse de forma autonoma sin ayuda. Los parametros DMD y TMD son indicativos de la capacidad de deambulacion de un sujeto.

2. Compuestos

[0066] Los compuestos para su uso en la presente invencion son fosfatos de inositol, como se define en el primer aspecto de la invencion, asi como analogos y derivados de los mismos. El termino "fosfato de inositol" como se usa en el presente documento se refiere a un compuesto con un anillo de inositol y uno, dos, tres, cuatro, cinco o seis grupos fosfato, o una combination de estos. El hexafosfato de mioinositol (IP6) es un ejemplo de fosfato de inositol de la presente invencion. En algunos aspectos, el fosfato de inositol es puro (por ejemplo, mas del 99 % de las especies de fosfato de inositol son de la misma especie, por ejemplo, IP6) o sustancialmente puro (por ejemplo, al menos el 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % o 99 % de las especies de fosfato de inositol son las mismas especies, por ejemplo, IP6). En algunos aspectos, el fosfato de inositol es una mezcla, por ejemplo, que comprende cantidades variables de IP1 , IP2, IP3, IP4, IP5 e IP6. En algunos aspectos, el fosfato de inositol es una mezcla racemica.

[0067] La invencion tambien contempla analogos de fosfato de inositol. "Analogo de fosfato de inositol", como se usa en el presente documento, se refiere a un compuesto que tiene un anillo con un niimero diferente de carbonos con respecto a un anillo de inositol (es decir, 5 o 7 carbonos), y/o tiene al menos un grupo sulfato o tiofosfato. Por ejemplo, un compuesto que comprende un anillo con 5, 6 o 7 carbonos y al menos un grupo fosfato, sulfato o tiofosfato se consideraria un analogo de fosfato de inositol.

[0068] El termino "derivado de fosfato de inositol", como se usa en el presente documento, se refiere a un fosfato de inositol o analogo de fosfato de inositol que contiene un resto heterologo (es decir, un grupo que no es un fosfato, un sulfato o un tiofosfato). Por ejemplo, un pentasulfato de inositol que comprende un resto heterologo de polietilenglicol, o un hexafosfato de mioinositol que comprende un resto heterologo de poliglicerol se considerahan derivados de fosfato de inositol.

[0069] El termino "resto heterologo" como se usa en el presente documento se refiere a un radical en el compuesto de formula I que no es un fosfato, un sulfato o un tiofosfato, y confiere una propiedad deseable a dicho compuesto. Por ejemplo, un resto heterologo (por ejemplo, un poliglicerol o un polietilenglicol) puede aumentar la solubilidad del compuesto. En algunos aspectos, un resto heterologo puede conferir mCiltiples propiedades deseables (por ejemplo, el poliglicerol y el polietilenglicol pueden aumentar la solubilidad de un compuesto y reducir la velocidad de eliminacion del compuesto).

[0070] Los terminos "fosfato de inositol de la invencion" y "fosfato de inositol de la presente invencion" como se usan en el presente documento es un termino generico que abarca "fosfato de inositol", "analogo de fosfato de inositol", "derivado de fosfato de inositol" y combinaciones de estos. En algunos aspectos, el termino "fosfato de inositol de la presente invencion" abarca composiciones que comprenden un "fosfato de inositol", un "analogo de fosfato de inositol", un "derivado de fosfato de inositol" o una combinacion de estos, y al menos un agente terapeutico adicional. En algunos aspectos, el agente terapeutico adicional comprende cilostazol, pentoxifilina o una combinacion de estos.

[0071] Los compuestos de la presente invencion que comprenden un anillo con 5, 6 o 7 carbonos y al menos un grupo sulfato o tiofosfato pero sin un grupo fosfato todavia se considerahan un "analogo de fosfato de inositol" o un "analogo de fosfato de inositol" en el contexto de la presente invencion. Por lo tanto, el termino "fosfato de inositol de la presente invencion" abarca no solo compuestos que contienen fosfato sino tambien compuestos sin grupos fosfato que comprenden un anillo con 5, 6 o 7 carbonos y al menos un grupo sulfato o tiofosfato. [0072] Se presentan fosfatos de inositol representatives de la presente invencion en las Figuras 1-6. La Figura 3 presenta numerosos ejemplos de fosfatos de inositol, todos ellos en la conformacion mio. Ademas del mioinositol, los otros estereoisomeros naturales del inositol son scyllo-, muco-, 1 D-quiro-, 1 L-quiro-, neo-inositol, alio-, epi-, y cis-inositol. Como indican sus nombres, el 1 L y 1 D-quiro inositol es el ύhίoo par de enantiomeros de inositol, pero son enantiomeros entre si, no del mioinositol. Debe entenderse que cualquier fosfato de inositol ejemplificado en la invencion no esta limitado a la conformacion representativa mostrada. Asi, por ejemplo, los ejemplos presentados en la Figura 3 tambien abarcarian los equivalentes correspondientes en conformaciones scyllo-, muco-, 1 D-quiro-, 1 L-quiro-, neo-inositol, alio-, epi- y cis- inositol. En su conformacion mas estable, el isomero de mioinositol asume la conformacion de silla, que mueve la cantidad maxima de hidroxilos a la posicion ecuatorial, donde estan mas separados entre si. En esta conformacion, el isomeromio natural tiene una estructura en la cual cinco de los seis hidroxilos (el primero, tercero, cuarto, quinto y sexto) son ecuatoriales, mientras que el segundo grupo hidroxilo es axial.

mio scyllo muco 1 D-quiro

2.1. Inositol fosfatos, analogos y derivados. [0073] En algunos aspectos, al menos uno de Ri, R3, Rs, R7, R9 y R1 1 del compuesto de formula general I representa independientemente H, -X, -OX, -NHX, -IMX ₂ , -SX, - OSO ₃ HX, -OSO ₃ X ₂ o un compuesto de formula II, formula III o formula IV, donde cada X representa independientemente H, alquilo C _1-30 , alquinilo C _2-30 o Cyi, donde cada alquilo C _1.30 , alquenilo C _2-30 y alquinilo C _2-30 estan de forma independiente opcionalmente sustituidos con uno o mas RM y donde Cyi esta opcionalmente sustituido con uno o mas R ₁₅ ; Cyi representa un anillo carbociclico o heterociclico de tres a 10 miembros, que puede ser saturado, parcialmente insaturado o ser aromatico, donde dicho heterociclo tiene entre uno y cuatro heteroatomos seleccionados entre O, S y N, donde dicho anillo puede unirse al resto de la molecula a traves de cualquier atomo de C disponible y donde Cyi esta opcionalmente condensado a entre uno y cuatro anillos de cinco o seis miembros, cada uno saturado, parcialmente insaturado o aromatico, carbociclico o heterociclico, y donde dicho heterociclo condensado puede contener uno o dos heteroatomos seleccionados entre O, N y S; cada R ₁₃ representa independientemente H, alquilo C1-30, -NH2, -NH-alquilo C1-30 o N(alquilo Ci-3o)2, donde cada alquilo C _1-30 esta de forma independiente opcionalmente sustituido con uno o mas grupos halogeno, -OH, -CN y -NO ₂ ; y cada RM y R15 representa independientemente -OH, alcoxi C _1-30 , alquitionilo C _1-30 , aciloxi C _1.30 , fosfato, halogeno, trihalo alquilo C _1-30 , nitrilo o azida.

[0074] En algunos aspectos posteriores, cada X representa independientemente H, alquilo C1 -30 o Cyi, donde el alquilo C1.30 esta opcionalmente sustituido con uno o mas Ri4 y donde Cyi esta opcionalmente sustituido con uno o mas R15; y cada R _M y R15 representa independientemente -OH, alcoxi C1 -30, alquitionilo C1.30, aciloxi C1.30, fosfato, halogeno, trihaloalquilo C1.30, nitrilo o azida. En algunos aspectos, cada X representa H, alquilo C1 -30 o Cyi. En algunos aspectos, cada X representa H.

[0075] En algunos aspectos adicionales, al menos uno de los radicales Ri , R3, Rs, R7, R9 y R1 1 representa independientemente un compuesto de formula II, formula III o formula IV, cada R13 representa independientemente H, alquilo C1 -30, -IMH2, -NH-alquilo C1 -30 o -N(alquilo Ci -3o)2, donde cada alquilo C1.30 esta de forma independiente opcionalmente sustituido con uno o mas grupos halogeno, -OH, -CN y -NO2; y R2, R4, Re, Rs, R10 y R12 representan independientemente H.

[0076] En otro aspecto, Ri , R3, Rs, R7, Rg y R1 1 representan independientemente un compuesto de formula II, formula III o formula IV, cada R13 representa independientemente H o alquilo C1 -30, donde cada alquilo C1 -30 esta de forma independiente opcionalmente sustituido con uno o mas grupos halogeno, -OH , -CN y -NO2; y R2, R4, Re, Rs, R10 y R12 representan independientemente H . [0077] En un aspecto adicional, al menos uno de Ri , R ₃ , Rs, R ₇ , R ₉ y Rn representa un compuesto de formula II, formula III o formula IV, y cada R ₁₃ representa independientemente H o alquilo C _1-30 . En otro aspecto, al menos uno de Ri , R ₃ , Rs, R ₇ , Rg y R ₁₁ representan un compuesto de formula II, formula III o formula IV, y cada R ₁₃ representa H.

[0078] En un aspecto particular, el compuesto es hexafosfato de inositol (IP6). En otros aspectos, el compuesto es monofosfato de inositol (IP1), difosfato de inositol (IP2), trifosfato de inositol (IP3), tetrafosfato de inositol (IP4) o pentafosfato de inositol (IP5). En algunos aspectos, el compuesto comprende una combination de IP1 , IP2, IP3, IP4, IP6 e IP6. En algunos aspectos, el IP6 puede formar otros fosfatos de inositol (IP5, IP4, IP3, IP2, IP1) por desfosforilacion in vivo. Se supone que inositol significa cualquier forma isomerica de la molecula, por ejemplo, mioinositol.

[0079] En algunos aspectos, los compuestos para su uso en la presente invencion son aquellos de formula I en la que:

[0080] R ₇ es OSO ₃ , y R ₉ , Rs, R ₃ , Ri y Rn se seleccionan independientemente entre OPO3 ² -, OPSO2 ² u OS0 ₃ ;

[0081] Rg, R ₅ y Ri son OPO3 ² y R7, R3 y Rn son OSO3 ;

[0082] Rg, R ₅ y Ri son OSO3 y R7, R3 y Rn son OPO3 ² ;

[0083] R ₃ , RI y R11 son OSO3 y Rg, R7 y Rs son OPO3 ² ;

[0084] R ₃ , RI y R11 son OPO3 ² y Rg, R7 y Rs son OSO3 ;

[0085] R ₇ y Ri son OPO3 ² y Rg, Rs, R3 y Rn son OPO3 ² ;

[0086] R ₇ y Ri son OSO3 y Rg, Rs, R3 y Rn son OPO3 ² ;

[0087] R ₇ y Rs son OPO3 ² y Rg, R3, Ri y Rn son OSO3 ; o,

[0088] R ₇ y Rs son OSO3 y Rg, R3, Ri y Rn son OPO3 ² .

[0089] Los fosfatos de inositol de la presente invencion tambien abarcan compuestos que se producen como metabolitos durante la desfosforilacion fisiologica (o desulfuration o destiosulfuracion en el caso de compuestos que comprenden grupos sulfato o tiofosfato).

[0090] En algunos aspectos, el compuesto administrado en una dosificacion de acuerdo con los metodos descritos en este documento es un profarmaco que, despues de someterse a hidrolisis u otro procesamiento intracelular o extracelular, produce un fosfato de inositol de la presente invencion. [0091] Los fosfatos de inositol de la presente invencion tambien abarcan cualquier combinacion de fosfato de inositol, analogos de fosfato de inositol y derivados de los mismos descritos en el presente documento.

[0092] Todos los compuestos de formula I contienen radicales con enlaces C-O-P o C-O-S, que proporcionan a los compuestos una afinidad por los cristales que contienen calcio y un enlace suficientemente labil para hidrolizarse in vivo, evitando asi la union irreversible a los cristales que contienen calcio, como la hidroxiapatita (HAP) en los huesos, lo que tendria un impacto negativo en la remodelacion osea, como es el caso de los bisfosfonatos cuando se administran a largo plazo, ya que dichos compuestos contienen enlaces P-C-P que no pueden hidrolizarse por el cuerpo. En el otro extremo estan los compuestos fosforilados que no contienen dichos enlaces C-O-P, como los pirofosfatos, cuyos enlaces P-O-P suponen que se hidrolizan con demasiada facilidad en el intestino, lo que significa que solo es posible la administracion parenteral. Los compuestos de la presente invencion, con enlaces C- O-P, enlaces C-O-S, y combinaciones de los mismos representan un punto medio adecuado debido a la eficacia de los mismos y al hecho de que el cuerpo presenta mecanismos para eliminar dichos compuestos, reduciendo asi el riesgo de efectos secundarios (por ejemplo, los compuestos con enlaces P-C-P pueden presentar semividas de varios meses in vivo, lo que afecta, por ejemplo, a la remodelacion osea).

[0093] El termino "alquilo" o "grupo alquilo" en el contexto de la presente invencion se refiere a un resto hidrocarbonado saturado, que puede ser lineal, ramificado, ciclico o ciclico con cadenas laterales lineales o ramificadas. El termino alquilo incluye hidrocarburos parcialmente insaturados tales como propenilo. Ejemplos son metilo, etilo, n- o iso-butilo, n- o ciclo-hexilo. El termino alquilo puede extenderse a grupos alquilo unidos o con puentes de heteroatomos. Los heteroatomos en el contexto de la presente invencion son nitrogeno (N), azufre (S) y oxigeno (O).

[0094] Una "funcion amina" o "grupo amina" es una funcion NR'R", con R' y R" seleccionados independientemente entre hidrogeno y alquilo C1-C5. En algunos aspectos, R' y R" se seleccionan entre hidrogeno y alquilo C1-C ₃ . Una "funcion hidroxilo" o "grupo hidroxilo" es OH.

[0095] Una "funcion tiol" o "grupo tiol" es SH. Una "funcion de acido carboxilico" o "grupo de acido carboxilico" es COOH o su anion, COO-. Una "amida carboxilica" es CONR'R", con R' y R" que independientemente tienen los significados indicados anteriormente. Un "acido sulfonico" es SO ₃ H. Una "amida de acido sulfonico" es S02NR'R", con R' y R" que independientemente tienen los significados indicados anteriormente. [0096] Un "alquilo C1-C3" en el contexto de la presente invencion se refiere a un hidrocarburo saturado lineal o ramificado que tiene 1 , 2 o 3 atomos de carbono, en el que un enlace carbono-carbono puede ser insaturado y un resto CH2 se puede intercambiar por oxigeno (puente de eter). Ejemplos no limitantes para un alquilo Ci- C3 son metilo, etilo, propilo, prop-2-enilo y prop-2-inilo.

[0097] Un "alquilo C1-C5" en el contexto de la presente invencion se refiere a un hidrocarburo saturado lineal o ramificado que tiene 1 , 2, 3, 4 o 5 atomos de carbono, en el que uno o dos enlaces carbono-carbono pueden ser insaturados y un resto CH2 se puede intercambiar por oxigeno (puente de eter). Los ejemplos no limitantes para un alquilo C1-C5 incluyen los ejemplos dados para el alquilo C1-C3 anterior, y adicionalmente n-butilo, 2-metilpropilo, terc-butilo, 3-metilbut-2-enilo, 2-metilbut-3- enilo, 3-metilbut-3-enilo, n-pentilo, 2-metilbutilo, 3-metilbutilo, 1 , 1 -dimetilpropilo, 1 ,2- dimetilpropilo, 1 ,2-dimetilpropilo, but-3-enilo, but-3-inilo y pent-4-inilo. Un "alquilo C3- C10" en el contexto de la presente invencion se refiere a un hidrocarburo saturado lineal o ramificado que tiene 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 o 10 atomos de carbono, en el que 1 , 2 o 3 enlaces carbono-carbono pueden ser insaturados y un resto CH2 se puede intercambiar por oxigeno (puente de eter).

[0098] El termino "alquilo C1-30" como grupo o parte de un grupo, se refiere a un grupo alquilo de cadena lineal o ramificada que contiene entre 1 y 30 atomos de carbono que incluye, entre otros, metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, grupos isobutilo, sec-butilo, terc-butilo, pentilo, hexilo, decilo y dodecilo.

[0099] El termino "alquenilo C2-30" se refiere a una cadena de alquilo lineal o ramificada que contiene entre 2 y 30 atomos de carbono y tambien contiene uno o mas dobles enlaces. Los ejemplos incluyen, entre otros, etenilo, 1-propenilo, 2- propenilo, isopropenilo 1-butenilo, 2-butenilo, 3-butenilo y 1 ,3-butadienilo.

[0100] El termino "alquinilo C2-30" se refiere a una cadena de alquilo lineal o ramificada que contiene entre 2 y 30 atomos de carbono y tambien contiene uno o mas enlaces triples. Los ejemplos incluyen, entre otros, etinilo, 1 -propinilo, 2-propinilo, 1 -butinilo, 2-butinilo, 3-butinilo y 1 ,3-butadiinilo.

[0101] Un "grupo Cyi" se refiere a un anillo carbociclico o heterociclico de tres a 10 miembros que puede estar saturado, parcialmente insaturado o ser aromatico y que esta unido al resto de la molecula a traves de cualquier atomo de C disponible. Cuando es heterociclico, Cyi contiene entre uno y cuatro heteroatomos seleccionados entre N, O y S. Ademas, Cyi puede fusionarse opcionalmente con hasta cuatro anillos carbociclicos o heterociclicos de cinco o seis miembros, que pueden estar saturados, parcialmente insaturados o ser aromaticos. Si el anillo condensado es un heterociclo, dicho anillo contiene uno o dos heteroatomos seleccionados entre N, O y S. Los ejemplos de Cyi incluyen, entre otros, fenilo, naftilo, tienilo, furilo, pirrolilo, tiazolilo, isotiazolilo, imidazolilo, pirazolilo, 1 ,2,3-triazolilo, 1 ,2,4-triazolilo, tetrazolilo, 1 ,3,4- tiadiazolilo, 1 ,2,4-tiadiazolilo, piridilo, pirazinilo, pirimidinilo, piridazinilo, bencimidazolilo, benzofuranilo, isobenzofuranilo, indolilo, isoindolilo, benzotiofenilo, benzotiazolilo, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo, azetidinilo y aziridinilo.

[0102] Un "grupo alcoxi C1 -30" como grupo o parte de un grupo se refiere a un grupo -O-alquilo C1 -30, donde la parte alquilo C1 -30 tiene el mismo significado que mas arriba. Los ejemplos incluyen metoxi, etoxi, propoxi, isopropoxi, butoxi, isobutoxi, sec-butoxi y terc-butoxi.

[0103] Un "grupo tionilalquilo C1 -30" como grupo o parte de un grupo se refiere a un grupo -SO-alquilo C1 -30, donde la parte alquilo C1 -30 tiene el mismo significado que mas arriba. Los ejemplos incluyen metiltionilo, etiltionilo, propiltionilo, isopropiltionilo, butiltionilo, isobutiltionilo, sec-butiltionilo y terc-butiltionilo.

[0104] Un "grupo aciloxi C1-30" como grupo o parte de un grupo se refiere a un grupo -CO-alquilo C1-30, donde la parte alquilo C1 -30 tiene el mismo significado que mas arriba. Los ejemplos incluyen acetilo, etanoilo, propanoilo y 2,2-diisopropilpentanoilo.

[0105] Un "radical halogeno" o su abreviatura halo se refiere a flijor, cloro, bromo y yodo.

[0106] Un "grupo trihalo alquilo C1 -30" se refiere a un grupo resultante de la sustitucion de tres atomos de hidrogeno de un grupo alquilo C1 -30 por tres radicales halogeno como se ha definido anteriormente. Los ejemplos incluyen, entre otros, trifluorometilo, tribromometilo, triclorometilo, triyodometilo, trifluoroetilo, tribromoetilo, tricloroetilo, triyodoetilo, tribromopropilo, tricloropropilo y triyodopropilo.

[0107] Un "grupo -NH-alquilo C1 -30" se refiere a un grupo resultante de la sustitucion de un atomo de hidrogeno de un grupo -NH2 por un grupo alquilo C1 -30 como se ha definido anteriormente. Los ejemplos incluyen, entre otros, metilamina, etilamina, propilamina, butilamina y pentilamina.

[0108] Un "grupo -N(alquilo Ci-3o)2 ^M se refiere a un grupo resultante de la sustitucion de dos atomos de hidrogeno de un grupo -IMH2 por un grupo alquilo C1 -30 como se ha definido anteriormente. Los ejemplos incluyen, entre otros, dimetilamina, dietilamina, diisopropilamina, dibutilamina y diisobutilamina. [0109] La expresion "opcionalmente sustituido por uno o mas" significa la posibilidad de que un grupo pueda estar sustituido por uno o mas sustituyentes (por ejemplo, por 1 , 2, 3 o 4). En algunos aspectos, un grupo puede estar sustituido por 1 , 2 o 3 sustituyentes e incluso por 1 o 2 sustituyentes, siempre que el grupo tenga suficientes posiciones que puedan estar disponibles para sustituir. Si estan presentes, los sustituyentes pueden ser iguales o diferentes y pueden ubicarse en cualquier position disponible.

[0110] En algunos aspectos, los fosfatos de inositol de la presente invencion comprenden los compuestos descritos en los documentos WO2017098033 y WO2017098047, y US US9358243. En algunos aspectos, los fosfatos de inositol de la presente invencion utilizados comprenden los compuestos descritos en las Figuras 1-

6.

[0111] En algunos aspectos, los fosfatos de inositol, analogos de fosfato de inositol y derivados de los mismos, comprenden compuestos de formula (VIII), formula (IX) o formula (XI):

[01 12] en donde cada X se selecciona independientemente entre OPO ₃ ² , OPSO ₂ ² u OSO ₃ ; Z es una cadena de alquilo que comprende de 1 a 3 atomos de carbono y/o heteroatomos, que comprende opcionalmente un grupo X, en el que X tambien se selecciona entre OPO ₃ ² , OPSO ₂ ² u OSO ₃ y, Ri es un resto heterologo opcional (vease la section 2.2. a continuation). En algunos aspectos, la molecula comprende mas de un resto heterologo, en cuyo caso los restos heterologos pueden ser iguales o diferentes.

[0113] En algunos aspectos, Z, como se usa en la formula (VIII)

CXR ¹ , CM ₂ — CH ₂ , CM ₂ — CHX, CHX— CHX, CHR ¹ — CHX, CXR ¹

CXR ¹ — CH ₂ , CHR ¹ — CHOH, GHz— GHz— CH ₂ , GHz— O— CH ₂ ,

CHOH— CHOH— CHR ¹ , CHOH— CHR ¹ — CHOH, CHX— CH ₂ CH ₂ , CHX— CHX— CH ₂ , CHX— CH ₂ — CHX O CHX— CHR ¹ — CHX, en donde X se selecciona independientemente entre OPO3 ² , 0PS0 ₂ ^2- , y OSO3-.

[01 14] En algunos aspectos, Z, como se usa en la formula (VIII), es (CHX) _p CHX(CHX) _q ; en donde p y q cada uno independientemente del otro tiene un valor de 0 a 2, con la condition de que (p + q) tenga un valor de 0, 1 o 2; uno o dos o tres X pueden ser un resto heterologo (por ejemplo, PEG) y las X restantes se seleccionan independientemente entre OPO ₃ ^2~ , 0PS0 ₂ ² y OSO ₃ En algunos aspectos, no todas las X de Z son OPO ₃ ² . En algunos aspectos, no todas las X de Z son OSO3 .

[01 15] En algunos aspectos, uno, dos o tres de las X en los compuestos de formula

(VIII), formula (IX) o formula (X) pueden ser restos heterologos y las X restantes pueden seleccionarse independientemente de OPO3 ² , 0PS0 ₂ ^2- u OSO3 .

[01 16] La formula (VII) anterior describe un anillo alquilo de cinco miembros, seis miembros o siete miembros, y el resto o restos heterologos opcionales estan unidos a uno de los atomos de carbono que forman el anillo.

[01 17] En algunos aspectos, los fosfatos de inositol, los analogos de fosfato de inositol y sus derivados utilizados, por ejemplo, en los metodos y composiciones descritos en el presente documento, comprenden compuestos de formula (XI) o formula (XII):

(XI) (XII)

[01 18] en las que:

[01 19] X ² es OSO3 , y X ¹ , X ³ , X ⁴ , X ⁵ y X ⁶ se seleccionan independientemente entre OPO3 ² -, 0PS0 ₂ ^2- u OS0 ₃ ;

[0120] X ¹ , X ³ y X ⁵ son OP0 ₃ ^2_ y X ² , X ⁴ y X ⁶ son OS0 ₃

[0121] X ¹ , X ³ y X ⁵ son OS0 ₃ ^_ y X ² , X ⁴ y X ⁶ son 0P0 ₃ ^2- ;

[0122] X ⁴ , X ⁵ y X ⁶ son OS0 ₃ y X ¹ , X ² y X ³ son OP0 ₃ ^2_ ;

[0123] X ⁴ , X ⁵ y X ⁶ son OPO3 ^2_ y X ¹ , X ² y X ³ son OSO3 [0124] X ² y X ⁵ son OP0 ₃ ² y X ¹ , X ³ , X ⁴ y X ⁶ son OP0 ₃ ^2_ ;

[0125] X ² y X ⁵ son OS0 ₃ y X ¹ , X ³ , X ⁴ y X ⁶ son OP0 ₃ ² ;

[0126] X ² y X ³ son OP0 ₃ ² y X ¹ , X ⁴ , X ⁵ y X ⁶ son OS0 ₃ o,

[0127] X ² y X ³ son OS0 ₃ y X ¹ , X ⁴ , X ⁵ y X ⁶ son OP0 ₃ ² .

[0128] En algunos aspectos, los fosfatos de inositol de la presente invencion o sus metabolitos se pueden detectar y/o cuantificar usando los metodos descritos en el documento US9612250. Veanse tambien los documentos US8377909, US8778912, y US20070066574.

[0129] Los compuestos descritos en este documento pueden estar presentes en cualquier forma corrmnmente utilizada en tecnologia farmaceutica. Los aspectos particulares incluyen, pero no se limitan a, la sal de sodio, la sal de magnesio, la sal de potasio, la sal de amonio, el acido libre o una mezcla de las formas anteriores. El experto en la materia conoce otras sales farmaceuticamente aceptables y pueden obtenerse facilmente. En un aspecto particular, el compuesto para usar como se define en el primer aspecto de la invencion es una sal de sodio, por ejemplo, hexafosfato de inositol hexasodico.

[0130] La presente invention tambien contempla sales de sodio de monofosfato de inositol, difosfato de inositol, trifosfato de inositol, tetrafosfato de inositol y pentafosfato de inositol en cualquiera de las formas isomericas de inositol, en particular, mioinositol. Un ejemplo particular de los compuestos para su uso en la presente invencion es la sal de hexasodio de hexafosfato de mioinositol. Las sales de sodio proporcionan varias ventajas en terminos de fabricacion y el nivel de impurezas de las formulaciones de IP6 resultantes.

2.2. Fraccion hetemloga

[0131] En algunos aspectos, la presente invencion se refiere a un compuesto de formula general I, como se ha definido anteriormente, en el que el resto heterologo se selecciona entre un radical de formula V, un radical de formula VI y un radical de formula VII:

VI

[0132] y en las que n es un niimero entero en el intervalo de 2 a 200, y R se selecciona entre H, metilo o etilo.

[0133] En algunos aspectos, los compuestos para su uso en la presente invencion, por ejemplo, los derivados de fosfato de inositol de la presente invencion, pueden comprender uno o dos radicales seleccionados entre los radicales de las formulas V, VI y VII. Estos radicales son restos heterologos que confieren una propiedad ventajosa con respecto a una molecula correspondiente que carece de dicho resto o restos heterologos. Los ejemplos de dichas propiedades ventajosas que pueden conferirse mediante un resto heterologo o una combination de los mismos a un analogo de fosfato de inositol o analogos de fosfato de inositol incluyen, pero no se limitan a (a) un aumento en la solubilidad, (b) una disminucion en la velocidad de degradation o metabolizacion, (c) un aumento en la semivida plasmatica, (d) una disminucion en la tasa de metabolizacion del higado, (e) una disminucion en la tasa de aclaramiento, (f) una disminucion de la toxicidad, (g) una disminucion de la irritabilidad y (h) una reduction de efectos secundarios, entre otros. Estas propiedades ventajosas pueden evaluarse o cuantificarse utilizando metodos conocidos en la tecnica sin experimentation excesiva.

[0134] En algunos aspectos, el resto heterologo es, por ejemplo, un polietilenglicol

(PEG) o un poliglicerol (PG). Por lo tanto, en ciertos aspectos, el compuesto para su uso en la invencion es cualquiera de los compuestos definidos en los aspectos desvelados anteriormente que comprende un resto heterologo, es decir, uno de los radicales de formula I se selecciona entre los radicales de formulas V, VI y VII. En algunos aspectos, el resto heterologo comprende un polietilenglicol (PEG). En ciertos aspectos, el resto heterologo consiste en polietilenglicol, es decir, al menos uno de Ri, R ₃ , R ₅ , R ₇ , R ₉ y R ₁₁ del compuesto de formula I segiin el primer aspecto de la invencion es un radical de formula V. Alternativamente, el resto heterologo comprende un poliglicerol. En ciertos aspectos, el resto heterologo consiste en poliglicerol, es decir, al menos uno de Ri , R ₃ , Rs, R ₇ , R ₉ y Rn del compuesto de formula I segiin el primer aspecto de la invencion se selecciona entre un radical de formula VI o VII. En otros aspectos, el compuesto de formula I segiin el primer aspecto de la invencion contiene uno, dos o tres radicales seleccionados entre un radical de formula VI o VII, por ejemplo, dos PEG (radicales de formula V), tres PEG, dos poligliceroles (radical de formula VI), tres PG o cualquiera de sus combinaciones, por ejemplo, un PEG y un PG, o dos PEG y un poliglicerol. En ciertos aspectos, todos los radicales restantes de formula I (es decir, aquellos que no son un radical seleccionado entre V, VI y VII) son un radical seleccionado entre II, III y IV. En algunos aspectos, el compuesto de formula I segiin el primer aspecto de la invencion contiene dos radicales seleccionados entre un radical de formula VI o VII, por ejemplo, dos PEG (radical de formula V) o dos poligliceroles (radical de formula VI) o uno PEG y un poliglicerol y los radicales restantes son todos radicales de formula II. En algunos aspectos, R ₃ y R ₇ del compuesto de formula I se seleccionan entre un radical de formula V, VI y VII. En algunos aspectos, R ₃ y R ₇ del compuesto de formula I son radicales de formula V, y Ri , R ₅ , Rg y R ₁₁ del compuesto de formula I son radicales de formula II.

[0135] Los radicales de las formulas V, VI y VII tienen R ₁₃ = H, metilo o etilo y n es un niimero entero de 2 a 200. En algunos aspectos, R ₁₃ = H. En aspectos particulars, n es 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 1 1 , 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21 , 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31 , 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41 , 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48,

49, 50, 51 , 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61 , 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71 ,

72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81 , 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91 , 92, 93, 94,

95, 96, 97, 98, 99, 100, 101 , 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 1 1 1 , 1 12, 1 13, 1 14, 115, 116, 1 17, 1 18, 1 19, 120, 121 , 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131 , 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141 , 142, 143, 144, 145, 146,

147, 148, 149, 150, 151 , 152, 153, 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 161 , 162, 163,

164, 165, 166, 167, 168, 169, 170, 171 , 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 189,

181 , 182, 183, 184, 185, 186, 187, 188, 189, 19 0, 191 , 192, 193, 194, 195, 196, 197,

198, 199 o 200.

[0136] En algunos aspectos, n esta entre 2 y 10, entre 10 y 20, entre 20 y 30, entre

30 y 40, entre 40 y 50, entre 50 y 60, entre 60 y 70, entre 70 y 80, entre 80 y 90, entre 90 y 100, entre 100 y 110, entre 110 y 120, entre 120 y 130, entre 130 y 140, entre 140 y 150, entre 150 y 160, entre 160 y 170, entre 170 y 180, entre 180 y 190, o entre 190 y 200.

[0137] En algunos aspectos especificos, n tiene un valor de 2 a 200, de 2 a 20, de

10 a 30, o de 9 a 45. [0138] En algunos aspectos, el PEG es un PEG ramificado. Los PEG ramificados tienen de tres a diez cadenas de PEG que emanan de un grupo nuclear central.

[0139] En ciertos aspectos, el resto de PEG es un polietilenglicol monodisperso. En el contexto de la presente invention, un polietilenglicol monodisperso (mdPEG) es un PEG que tiene una longitud de cadena linica y un peso molecular definidos. Los mdPEG se generan habitualmente por separation de la mezcla de polimerizacion por cromatografia. En ciertas formulas, a un resto de PEG monodisperso se le asigna la abreviatura mdPEG. En algunos aspectos, el PEG es un PEG en estrella. Los PEG en estrella tienen de 10 a 100 cadenas de PEG que emanan de un grupo nuclear central.

[0140] En algunos aspectos, el PEG es un PEG de peine. Los PEG de peine tienen mCiltiples cadenas de PEG normalmente injertadas en un esqueleto de polimero.

[0141] En ciertos aspectos, el PEG tiene una masa molar entre 100 g/mol y 3000 g/mol, particularmente entre 100 g/mol y 2500 g/mol, mas en particular de aprox. 100 g/mol a 2000 g/mol. En ciertos aspectos, el PEG tiene una masa molar entre 200 g/mol y 3000 g/mol, particularmente entre 300 g/mol y 2500 g/mol, mas en particular de aprox. 400 g/mol a 2000 g/mol.

[0142] En algunos aspectos, el PEG es PEG100, PEG200, PEG300, PEG400, PEG500, PEG600, PEG700, PEGeoo, PEG900, PEG1000, PEG1100, PEG1200, PEG1300, PEGMOO, PEG1500, PEG1600, PEG1700, PEG1800, PEG1900, PEG2000, PEG2100, PEG2200, PEG2300,

PEG2400, PEG2500, PEG1600, PEG1700, PEG1800, PEG1900, PEG2000, PEG2100, PEG2200,

PEG2300, PEG2400, PEG2500, PEG2600, PEG2700, PEG2800, PEG2900, o PEG3000· En un aspecto particular, el PEG es PEG ₄₀₀ . En otro aspecto particular, el PEG es PEG ₂₀₀₀ .

[0143] En otros aspectos particulares, R3 y/o R7 del compuesto de formula I es un radical de formula V donde R13 es H y n es un ni mero entero de 9 a 45. En otros aspectos particulares R3 y R7 del compuesto de formula I es un radical de formula V donde R13 es H y n es un ni mero entero de 9 a 45 y Ri , R5, Rg y Rn son todos radicales de formula II. En otros aspectos particulares, el compuesto de formula I es una sal de sodio con R3 y R7 = radical de formula V donde R13 es H y n es un ni mero entero de 9 a 45, y Ri , R5, Rg y R1 1 son todos un radical de formula II

[0144] En algunos otros aspectos, el resto heterologo es un poliglicerol (PG) descrito por la formula ((R ₃ — O— (CH ₂ — CHOH— CH ₂ 0) _n — ) con R ₃ que es hidrogeno, metilo o etilo, y n que tiene un valor de 3 a 200. En algunos aspectos, n tiene un valor de 3 a 20. En algunos aspectos, n tiene un valor de 10 a 30. En algunas alternativas de estos aspectos, n tiene un valor de 9 a 45. En algunos aspectos, el resto heterologo es un poliglicerol ramificado descrito por la formula (R ₃ — O— (CH ₂ — CHOR ₅ — CH ₂ — 0) _n — ) con R5 que es hidrogeno o una cadena de glicerol lineal descrita por la formula (R3— O— (CH2— CHOH— CH2— 0) _n — ) y R3 que es hidrogeno, metilo o etilo. En algunos aspectos, el resto heterologo es un poliglicerol hiperramificado descrito por la formula (R3— O— (CH2— CHOR5— CH2— 0) _n — ) con R5 que es hidrogeno o una cadena de glicerol descrita por la formula (R3— O— (CH2— CHOR6— CH2— 0) _n — ), con R ₆ que es hidrogeno o una cadena de glicerol descrita por la formula (R3— O— (CH2— CHOR7— CH2— 0) _n — ), con R7 que es hidrogeno o una cadena lineal de glicerol descrita por la formula (R3— O— (CH2— CHOH— CH2— 0) _n — ) y R3 que es hidrogeno, metilo o etilo. El glicerol hiperramificado y los metodos para su sintesis son conocidos en la tecnica. Vease Oudshorn M, et al. , Biomaterials 2006; 27:5471-5479, Wilms D, et al. , Acc Chem Res 2010; 43:129-141 y referencias citadas alii.

[0145] En ciertos aspectos, el PG tiene una masa molar entre 100 g/mol y 3000 g/mol, particularmente entre 100 g/mol y 2500 g/mol, mas en particular de aprox. 100 g/mol a 2000 g/mol. En ciertos aspectos, el PEG tiene una masa molar entre 200 g/mol y 3000 g/mol, particularmente entre 300 g/mol y 2500 g/mol, mas en particular de aprox. 400 g/mol a 2000 g/mol.

[0146] En algunos aspectos, el PEG es PEG100, PEG200, PEG300, PEG400, PEG500, PEG600, PEG700, PEGeoo, PEG900, PEG1000, PEG1100, PEG1200, PEG1300, PEGMOO, PEG1500, PEG1600, PEG1700, PEG1800, PEG1900, PEG2000, PEG2100, PEG2200, PEG2300,

PEG2400, PEG2500, PEG1600, PEG1700, PEG1800, PEG1900, PEG2000, PEG2100, PEG2200,

PEG2300, PEG2400, PEG2500, PEG2600, PEG2700, PEG2800, PEG2900, o PEG3000· En un aspecto particular, el PEG es PEG ₄₀₀ . En otro aspecto particular, el PEG es PEG ₂₀₀₀ .

[0147] En otros aspectos particulares R3 y/o R7 del compuesto de formula I es un radical de formula VI donde R13 es H y n es un ni mero entero de 9 a 45. En otros aspectos particulares R3 y R7 del compuesto de formula I es un radical de formula VI donde R ₁₃ es H y n es un ni mero entero de 9 a 45 y Ri , R ₅ , Rg y Rn son todos radicales de formula II. En otros aspectos particulares, el compuesto de formula I es una sal de sodio con R ₃ y R ₇ = radical de formula VI donde R ₁₃ es H y n es un ni mero entero de 9 a 45, y Ri , R ₅ , Rg y R ₁₁ son todos un radical de formula II.

3. Composiciones farmaceuticas

[0148] En otro aspecto, la presente invention tambien se refiere a composiciones farmaceuticas que comprenden un compuesto, como se define en cualquiera de los aspectos desvelados anteriormente. En algunos aspectos, la composition farmaceutica comprende un compuesto, como se define en cualquiera de los aspectos desvelados anteriormente, junto con uno o mas excipientes o vehiculos farmaceuticamente aceptables. Estas composiciones farmaceuticas se usan para aumentar la perfusion y/u oxigenacion tisular en un sujeto que lo necesite. En algunos aspectos, estas composiciones farmaceuticas son para su uso en el tratamiento o prevencion de la isquemia y/o una enfermedad o afeccion relacionada con la isquemia. En algunos aspectos, las composiciones farmaceuticas de la presente invencion se usan para el tratamiento o prevencion de EAP o ICE.

[0149] El termino "excipiente" como se usa en el presente documento se refiere a una sustancia que ayuda a la absorcion de los elementos de la composicion farmaceutica, estabiliza dichos elementos, activa o ayuda a la preparation de la composicion. Por lo tanto, los ejemplos de excipientes utilizados en formulaciones parenterales incluyen, entre otros, agentes antimicrobianos (por ejemplo, cloruro de benzalconio, metacresol, timerosal), codisolventes (por ejemplo, etanol), tampones y factores de ajuste del pH (por ejemplo, soluciones de carbonato, citrato, o fosfato).

[0150] Como en el caso del excipiente, el "vehiculo farmaceuticamente aceptable" es una sustancia utilizada en la composicion para diluir cualquiera de los componentes contenidos en la misma a un volumen o peso determinado. El vehiculo farmaceuticamente aceptable es una sustancia inerte o una sustancia con una action analoga a cualquiera de los elementos que comprenden la composicion farmaceutica de la presente invencion. El papel de dicho vehiculo es permitir la incorporation de otros elementos, permitir una mejor dosificacion y administration o proporcionar consistencia y forma a la composicion.

[0151] Las composiciones farmaceuticas pueden comprender de aproximadamente el 1 % a aproximadamente el 95 % del compuesto como se define en cualquiera de los aspectos desvelados anteriormente. En algunos aspectos, las composiciones farmaceuticas de la presente invencion pueden comprender, por ejemplo, de aproximadamente el 20 % a aproximadamente el 90 %, o del 20 % al 80 %, o del 20 % al 70 %, o del 20 % al 60 %, o del 20 % al 50 %, o del 30 % al 90 %, o del 40 % al 90 %, o del 50 % al 90 %, o del 60 % al 90 %, o del 30 % al 70 % del compuesto como se define en cualquiera de los aspectos desvelados anteriormente.

[0152] En algunos aspectos, la concentracion de fosfato de inositol de la presente invencion (por ejemplo, hexafosfato de mioinositol) o un analogo o derivado del mismo, o una combination de los mismos en cada dosis de la composicion farmaceutica esta entre aproximadamente 12,5 mM y aproximadamente 135 mM. En algunas versiones de este aspecto, la concentracion de fosfato de inositol de la presente invencion (por ejemplo, hexafosfato de mioinositol o un analogo o derivado del mismo, o una combination de los mismos) en cada dosis de la composicion farmaceutica es de aproximadamente 25 mM, aproximadamente 39 mM o aproximadamente 1 14 mM.

[0153] Las formulaciones de una composicion farmaceutica adecuada para administracion parenteral comprenden un compuesto como se define en cualquiera de los aspectos desvelados anteriormente mezclado con un vehiculo farmaceuticamente aceptable (por ejemplo, como agua esteril o solucion salina isotonica esteril). Dichas formulaciones pueden prepararse, envasarse o venderse en una forma adecuada para administracion en bolo o para administracion continua. Las formulaciones inyectables se pueden preparar, envasar o vender en forma de dosificacion unitaria, como ampollas o en envases multidosis que contienen un conservante. Las formulaciones para administracion parenteral incluyen, entre otras, suspensiones, soluciones, emulsiones en vehiculos oleosos o acuosos, pastas y formulaciones implantables de liberation sostenida o biodegradables. Dichas formulaciones pueden comprender ademas uno o mas ingredientes adicionales que incluyen, pero no se limitan a, agentes de suspension, estabilizantes o dispersantes.

[0154] En algunos aspectos, en una formulation para administracion parenteral, el agente activo (por ejemplo, un compuesto como se define en cualquiera de los aspectos desvelados anteriormente) se proporciona en forma seca (es decir, en polvo o granular) para su reconstitution con un vehiculo adecuado (por ejemplo, agua esteril libre de pirogenos) antes de la administracion parenteral de la composicion reconstituida.

[0155] Las composiciones farmaceuticas pueden prepararse, envasarse o venderse en forma de una suspension o solucion acuosa o aceitosa inyectable esteril. Esta suspension o solucion puede formularse de acuerdo con la tecnica conocida, y puede comprender, ademas del agente activo (por ejemplo, el compuesto como se define en cualquiera de los aspectos desvelados anteriormente), ingredientes adicionales tales como agentes dispersantes, agentes humectantes o agentes de suspension descritos en este documento. Dichas formulaciones inyectables esteriles se pueden preparar usando un diluyente o disolvente parenteralmente aceptable no toxico, como agua o 1 ,3-butanodiol, por ejemplo. Otros diluyentes y disolventes aceptables incluyen, pero no se limitan a, solucion de Ringer, solucion isotonica de cloruro de sodio y aceites fijos tales como mono o digliceridos sinteticos.

[0156] Otras formulaciones administrables por via parenteral que son litiles incluyen aquellas que comprenden el agente activo (por ejemplo, un compuesto como se define en cualquiera de los aspectos desvelados anteriormente) en forma microcristalina, en una preparation liposomal o como un componente de un sistema polimerico biodegradable.

[0157] Las composiciones para liberacion sostenida o implantacion pueden comprender materiales polimericos o hidrofobos farmaceuticamente aceptables tales como una emulsion, una resina de intercambio ionico, un polimero escasamente soluble o una sal escasamente soluble.

[0158] Las formulaciones de liberacion controlada o sostenida de una composicion farmaceutica de la presente invencion pueden prepararse usando tecnologia convencional. En algunos casos, las formas de dosificacion a usar pueden proporcionarse como liberacion lenta o controlada de uno o mas agentes activos en el mismo usando, por ejemplo, hidropropilmetilcelulosa, otras matrices de polimeros, geles, membranas permeables, sistemas osmoticos, recubrimientos multicapa, microparticulas, liposomas o microesferas o una combinacion de los mismos para proporcionar el perfil de liberacion deseado en proporciones variables. Las formulaciones de liberacion controlada adecuadas conocidas en la tecnica, incluidas las descritas en el presente documento, se pueden seleccionar facilmente para usar con las composiciones farmaceuticas de la invencion. Por lo tanto, las formas de dosificacion unitarias adecuadas para administracion parenteral o topica, tales como soluciones inyectables, geles, cremas y unguentos, que estan adaptadas para la liberacion controlada estan abarcadas por la presente invencion.

[0159] La mayoria de los productos farmaceuticos de liberacion controlada tienen un objetivo comiin de mejorar la terapia sobre la alcanzada por sus contrapartes no controladas. Idealmente, el uso de una preparation de liberacion controlada de diseno optimo en el tratamiento medico se caracteriza por un minimo de agente terapeutico que se emplea para curar o controlar la afeccion en un tiempo minimo. Las ventajas de las formulaciones de liberacion controlada incluyen una actividad prolongada del agente terapeutico, una frecuencia de dosificacion reducida y un mayor cumplimiento por parte del paciente. Ademas, las formulaciones de liberacion controlada pueden usarse para afectar el tiempo de inicio de action u otras caracteristicas, como el nivel en sangre del agente terapeutico, y por lo tanto pueden afectar la aparicion de efectos secundarios.

[0160] La mayoria de las formulaciones de liberacion controlada estan disenadas para liberar inicialmente una cantidad de agente terapeutico que produce rapidamente el efecto terapeutico deseado, y liberar gradual y continuamente otras cantidades de agente terapeutico para mantener este nivel de efecto terapeutico durante un periodo prolongado de tiempo. Para mantener este nivel constante de agente terapeutico en el cuerpo, el agente terapeutico debe liberarse de la forma de dosificacion a una velocidad que reemplace la cantidad de agente terapeutico que se metaboliza y excreta del cuerpo.

[0161] La liberacion controlada de un agente activo se puede estimular por varios inductores, por ejemplo, el pH, la temperatura, enzimas, agua u otras condiciones o compuestos fisiologicos. El termino "componente de liberacion controlada" en el contexto de la presente invencion se define en el presente documento como un compuesto o compuestos, que incluyen, pero no se limitan a, polimeros, matrices de polimeros, geles, membranas permeables, liposomas o microesferas o una combinacion de los mismos que facilita la liberacion controlada del agente activo.

[0162] En ciertos aspectos, las formulaciones de la presente invencion pueden ser, pero no estan limitadas a, liberacion a corto plazo, liberacion rapida, asi como liberacion controlada, por ejemplo, formulaciones de liberacion sostenida, liberacion retardada y liberacion pulsatil.

[0163] El termino liberacion sostenida se usa en su sentido convencional para referirse a la formulacion del agente terapeutico (por ejemplo, compuesto como se define en cualquiera de los aspectos desvelados anteriormente) que proporciona la liberacion gradual de un agente terapeutico activo durante un periodo prolongado de tiempo, y eso puede dar como resultado, aunque no necesariamente, niveles sanguineos sustancialmente constantes de un agente terapeutico durante un periodo de tiempo prolongado. El periodo de tiempo puede ser de hasta un mes o mas y debe ser una liberacion que sea mas prolongada que la misma cantidad de agente administrado en forma de bolo.

[0164] Para la liberacion sostenida, los compuestos pueden formularse con un polimero o material hidrofobo adecuado que proporcione propiedades de liberacion sostenida a los compuestos. Como tal, los compuestos para usar el metodo de la presente invencion pueden administrarse en forma de microparticulas, por ejemplo, por inyeccion o en forma de obleas o discos por implantation. En ciertos aspectos, los compuestos de la invencion se administran a un paciente, solo o en combinacion con otro agente farmaceutico, usando una formulacion de liberacion sostenida.

[0165] El termino liberacion retardada se usa en el presente documento en su sentido convencional para referirse a una formulacion de agente terapeutico que proporciona una liberacion inicial del agente terapeutico despues de cierto retraso tras la administration del agente terapeutico. El retraso puede ser de aproximadamente 10 minutos hasta aproximadamente 12 horas. El termino liberacion pulsatil se usa en el presente documento en su sentido convencional para referirse a una formulacion de agente terapeutico que proporciona la liberation del agente terapeutico de tal manera que produzca perfiles de plasma pulsado del agente terapeutico despues de la administration. El termino liberation inmediata se usa en su sentido conventional para referirse a una formulation de agente terapeutico que proporciona la liberation del agente terapeutico inmediatamente despues de la administration.

[0166] Las formulaciones y formas de dosificacion adicionales de las composiciones de la presente invention incluyen formas de dosificacion como se describen en los documentos US6340475, US6488962, US6451808, US5972389, US5582837, y US5007790; US20030147952, 20030104062, 20030104053, 20030044466,

20030039688, y 20020051820; WO 2003035041 , W02003035040, W02003035029, WO200335177, W02003035039, W02002096404, W02002032416,

WO2001097783, WO2001056544, W02001032217, W01998055107,

W01998011879, W01997047285, W01993018755, y W0199001 1757.

[0167] Los medicamentos de acuerdo con la invention se fabrican por metodos conocidos en la tecnica, especialmente por mezcla, recubrimiento, granulation, disolucion o liofilizacion convencionales.

[0168] La presente invention tambien proporciona un compuesto, una combination de compuestos o una formulation farmaceutica como se define en cualquiera de los aspectos anteriores de la invention, en la definition mas amplia dada, o como se especifica en cualquiera de los aspectos presentados anteriormente, para su uso como medicamento.

4. Metodos y vias de administracion

[0169] En algunos aspectos, el compuesto, composition farmaceutica o preparation combinada como se define en cualquiera de los aspectos desvelados anteriormente se administra de forma conjunta, concurrente o secuencial con otro agente terapeutico. En algunas versiones de este aspecto, el agente terapeutico adicional comprende cilostazol, pentoxifilina o una combinacion de los mismos.

[0170] En algunos aspectos, se proporciona la administracion de una cantidad efectiva de compuesto, composicion farmaceutica o preparacion combinada como se define en cualquiera de los aspectos anteriores. Dicho compuesto, composicion farmaceutica o preparacion combinada puede administrarse por via parenteral tal como, por ejemplo, por via intravenosa, intraperitoneal, intramuscular, intraarterial, intradermica, intratecal, epidural o espinal o subcutanea. La administracion parenteral puede ser por inyeccion en bolo o por infusion intravenosa. [0171] En un aspecto particular de la presente invencion, el hexafosfato de mioinositol (o una formulacion que comprende hexafosfato de mioinositol tal como SNF472) se administra por infusion intravenosa. En otro aspecto particular de la presente invencion, el hexafosfato de mioinositol se administra por via subcutanea. En otro aspecto, un derivado de inositol o derivado de hexafosfato de mioinositol, por ejemplo, un compuesto de formula I con R3 y R7 = radical de formula V donde R13 es H y n es un ni mero entero de 2 a 200, y Ri , R5, Rg y Rn son todos un radical de formula II (o una sal de sodio del mismo) se administra por infusion intravenosa. En otro aspecto, un derivado de inositol o derivado de hexafosfato de mioinositol, por ejemplo, un compuesto de formula I con R3 y R7 = radical de formula V donde R13 es H y n es un ni mero entero de 2 a 200, y Ri , R5, Rg y Rn son todos un radical de formula II (o una sal de sodio del mismo) se administra por via subcutanea.

[0172] Alternativamente, el compuesto, la composicion farmaceutica o la preparacion combinada se pueden administrar como un componente de una solution o sistema de hemodialisis, hemofiltration o dialisis peritoneal.

[0173] En el caso particular de pacientes tratados con dialisis, un metodo de administracion muy apropiado consiste en una administracion (por ejemplo, una administracion de tipo no en bolo) de un fosfato de inositol de la presente invencion a traves del aparato de dialisis (antes o despues del filtro) en lugar de inyectar directamente el fosfato de inositol de la presente invencion en el paciente por via intravenosa. Por lo tanto, la sangre puede tratarse con el fosfato de inositol de la presente invencion (por ejemplo, hexafosfato de mioinositol) a medida que sale del paciente y circula a traves del circuito de dialisis y, cuando la sangre que contiene el fosfato de inositol de la presente invencion vuelve al cuerpo.

[0174] Por lo tanto, en algunos aspectos, el compuesto, la composicion farmaceutica o la preparacion combinada, como se define en cualquiera de los aspectos desvelados anteriormente, se administra a un paciente durante la hemodialisis. En algunos aspectos, el compuesto, la composicion farmaceutica o la preparacion combinada, como se define en cualquiera de los aspectos desvelados anteriormente, se administra a la sangre extraida del paciente durante la hemodialisis, preferiblemente antes de que se filtre (es decir, el agente terapeutico se administra a la sangre no filtrada del paciente en el circuito de dialisis). En algunos aspectos, el compuesto es hexafosfato de inositol, en particular la sal de sodio de hexafosfato de mioinositol o un derivado de la misma, en concreto, un compuesto de formula I con R3 y R7 = radical de formula V donde R13 es H y n es un ni mero entero de 2 a 200, y Ri , R5, Rg y Rn son todos un radical de formula II (o una sal de sodio del mismo). [0175] En el caso de pacientes en dialisis, la administracion de un fosfato de inositol de la presente invencion (por ejemplo, hexafosfato de mioinositol) a traves del aparato de dialisis permite que la sangre se equilibre con el fluido de dialisis antes de regresar al cuerpo; por lo tanto, aunque el fosfato de inositol de la presente invencion (por ejemplo, el hexafosfato de mioinositol) puede secuestrar calcio ionico, este hecho se compensa cuando la sangre pasa a traves del filtro de dialisis, eliminando asi dicho efecto secundario y mejorando significativamente el perfil de seguridad. Ademas, la administracion del fosfato de inositol de la presente invencion (por ejemplo, hexafosfato de mioinositol) concomitante con la hemodialisis, en particular cuando se administra a la sangre no filtrada extraida del paciente durante la hemodialisis, permite reducir la dosis del compuesto con las consiguientes ventajas en terminos de toxicidad reducida y minimizando los efectos secundarios adversos.

[0176] En algunos aspectos, el compuesto, composition farmaceutica o preparacion combinada como se define en cualquiera de los aspectos desvelados anteriormente se administra a un paciente que esta siendo tratado con hemodialisis antes del tratamiento de dialisis o despues del tratamiento de dialisis.

[0177] En general, una dosis efectiva de un fosfato de inositol de la presente invencion (por ejemplo, hexafosfato de mioinositol) administrada de acuerdo con los metodos descritos aqui dependera, por ejemplo, de la eficacia relativa del compuesto en cuestion, la gravedad del trastorno tratado, y la especie y el peso del sujeto. En algunos aspectos, la dosis efectiva de un fosfato de inositol de la presente invencion para un sujeto de una determinada especie (por ejemplo, humano) puede calcularse en funcion de los datos experimentales disponibles para una especie diferente o de referencia (por ejemplo, rata).

[0178] Asi, por ejemplo, una dosificacion de hexafosfato de mioinositol administrada como parte de un regimen que comprende la administracion de una dosis de 20 mg/kg a un sujeto rata seria equivalente a administrar el mismo agente activo en una dosis de 4,2 mg / kg a un sujeto humano (es decir, una dosis total de 300 mg de hexafosfato de mioinositol a un sujeto humano que pese aproximadamente 70 kg). Del mismo modo, una dosis de 40 mg/kg administrado a un sujeto rata seria equivalente a administrar hexafosfato de mioinositol en una dosis de 8,4 mg/kg a un sujeto humano tal y como se definio anteriormente. Las dosis pueden ajustarse en funcion de la edad, las especies, el peso, la superficie corporal, la funcion renal, el sexo, el estado patologico, la via de administracion, la administracion concurrente de uno o mas farmacos y una amplia variedad factores fisiologicos y psicologicos conocidos en la tecnica (Pan S., et al., Patient Prefer Adherence 2016; 10:549-560; Pai M, Pharmacotherapy 2012; 32:856-868; Hacker M., et al. , Eds, “Pharmacology:

Principles and Practice” (Academic Press; Burlington , MA, USA, 2009). El termino “mg/kg” como se usa en el presente documento se refiere a miligramos de un fosfato de inositol de la presente invencion por kilogramo de la masa corporal (peso corporal) de un sujeto.

[0179] En algunos aspectos, una dosis de fosfato de inositol de la presente invencion (por ejemplo, hexafosfato de mioinositol) comprende desde alrededor 0,001 mg/kg a alrededor 60 mg/kg de un fosfato de inositol o un analogo o derivado del mismo, o una combination de estos, segiin la presente invencion. En algunos aspectos ulteriores, la dosis de fosfato de inositol de la presente invencion (por ejemplo, hexafosfato de mioinositol) es de entre alrededor 0,001 mg/kg y alrededor 20,0 mg/kg, entre alrededor 20,0 mg/kg y alrededor 40,0 mg/kg, o entre alrededor 40,0 mg/kg y alrededor 60,0 mg/kg.

[0180] En algunos aspectos, la dosis de fosfato de inositol de la presente invencion (por ejemplo, hexafosfato de mioinositol) es de entre alrededor 0,001 mg/kg y alrededor 1 ,0 mg/kg, entre alrededor 1 ,0 mg/kg y alrededor 10,0 mg/kg, entre alrededor 10,0 mg/kg y alrededor 20,0 mg/kg, entre alrededor 20,0 mg/kg y alrededor 30,0 mg/kg, entre alrededor 30,0 mg/kg y alrededor 40,0 mg/kg, entre alrededor 40,0 mg/kg y alrededor 50,0 mg/kg, o entre alrededor 50,0 mg/kg y alrededor 60,0 mg/kg.

[0181] En algunos aspectos, la dosis de fosfato de inositol de la presente invencion (por ejemplo, hexafosfato de mioinositol) es de entre alrededor 0,001 mg/kg y alrededor 0,5 mg/kg, entre alrededor 0,5 mg/kg y alrededor 1 ,0 mg/kg, entre alrededor 1 ,0 mg/kg y alrededor 5,0 mg/kg, entre alrededor 5,0 mg/kg y alrededor 10,0 mg/kg, entre alrededor 10,0 mg/kg y alrededor 15,0 mg/kg, entre alrededor 15,0 mg/kg y alrededor 20,0 mg/kg, entre alrededor 20,0 mg/kg y alrededor 25,0 mg/kg, entre alrededor 25,0 mg/kg y alrededor 30,0 mg/kg, entre alrededor 30,0 mg/kg y alrededor 35,0 mg/kg, entre alrededor 35,0 mg/kg y alrededor 40,0 mg/kg, entre alrededor 40,0 mg/kg y alrededor 45,0 mg/kg, o entre alrededor 45,0 mg/kg y alrededor 50,0 mg/kg.

[0182] En algunos aspectos, la dosis de fosfato de inositol de la presente invencion (por ejemplo, hexafosfato de mioinositol) es de entre alrededor 0,001 mg/kg y alrededor 0,25 mg/kg, entre alrededor 0,25 mg/kg y alrededor 0,5 mg/kg, entre alrededor 0,5 mg/kg y alrededor 0,75 mg/kg, entre alrededor 0,75 mg/kg y alrededor 1 ,0 mg/kg, entre alrededor 1 ,0 mg/kg y alrededor 2,50 mg/kg, entre alrededor 2,50 mg/kg y alrededor 5,0 mg/kg, entre alrededor 5,0 mg/kg y alrededor 7,5 mg/kg, entre alrededor 7,5 mg/kg y alrededor 10,0 mg/kg, entre alrededor 10,0 mg/kg y alrededor 12.5 mg/kg, entre alrededor 12,5 mg/kg y alrededor 15,0 mg/kg, entre alrededor 15,0 mg/kg y alrededor 17,5 mg/kg, entre alrededor 17,5 mg/kg y alrededor 20,0 mg/kg, entre alrededor 20,0 mg/kg y alrededor 22,5 mg/kg, entre alrededor 22,5 mg/kg y alrededor 25,0 mg/kg, entre alrededor 25,0 mg/kg y alrededor 27,5 mg/kg, entre alrededor 27,5 mg/kg y alrededor 30,0 mg/kg, entre alrededor 30,0 mg/kg y alrededor

32.5 mg/kg, entre alrededor 32,5 mg/kg y alrededor 35,0 mg/kg, entre alrededor 35,0 mg/kg y alrededor 37,5 mg/kg, entre alrededor 37,5 mg/kg y alrededor 40,0 mg/kg, entre alrededor 40,0 mg/kg y alrededor 42,5 mg/kg, entre alrededor 42,5 mg/kg y alrededor 45,0 mg/kg, entre alrededor 45,0 mg/kg y alrededor 47,5 mg/kg, entre alrededor 47,5 mg/kg y alrededor 50,0 mg/kg, entre alrededor 50,0 mg/kg y alrededor

52.5 mg/kg, entre alrededor 52,5 mg/kg y alrededor 55,0 mg/kg, entre alrededor 55,0 mg/kg y alrededor 57,5 mg/kg, o entre alrededor 57,5 mg/kg y alrededor 60,0 mg/kg.

[0183] En algunos aspectos, la dosis de fosfato de inositol de la presente invencion (por ejemplo, hexafosfato de mioinositol) es de entre alrededor 0,25 mg/kg y alrededor 60,0 mg/kg, entre alrededor 0,5 mg/kg y alrededor 60,0 mg/kg, entre alrededor 0,75 mg/kg y alrededor 60,0 mg/kg, entre alrededor 1 ,0 mg/kg y alrededor 60,0 mg/kg, entre alrededor 2,50 mg/kg y alrededor 60,0 mg/kg, entre alrededor 5,0 mg/kg y alrededor 60,0 mg/kg, entre alrededor 7,5 mg/kg y alrededor 60,0 mg/kg, entre alrededor 10,0 mg/kg y alrededor 60,0 mg/kg, entre alrededor 12,5 mg/kg y alrededor 60,0 mg/kg, entre alrededor 15,0 mg/kg y alrededor 60,0 mg/kg, entre alrededor 17,5 mg/kg y alrededor 60,0 mg/kg, entre alrededor 20,0 mg/kg y alrededor 60,0 mg/kg, entre alrededor 22,5 mg/kg y alrededor 60,0 mg/kg, entre alrededor 25,0 mg/kg y alrededor 60,0 mg/kg, entre alrededor 27,5 mg/kg y alrededor 60,0 mg/kg, entre alrededor 30,0 mg/kg y alrededor 60,0 mg/kg, entre alrededor 32,5 mg/kg y alrededor 60,0 mg/kg, entre alrededor 35,0 mg/kg y alrededor 60,0 mg/kg, entre alrededor 37,5 mg/kg y alrededor 60,0 mg/kg, entre alrededor 40,0 mg/kg y alrededor 60,0 mg/kg, entre alrededor 42,5 mg/kg y alrededor 60,0 mg/kg, entre alrededor 45,0 mg/kg y alrededor 60,0 mg/kg, entre alrededor 47,5 mg/kg y alrededor 60,0 mg/kg, entre alrededor 50,0 mg/kg y alrededor 60,0 mg/kg, entre alrededor 52,5 mg/kg y alrededor 60,0 mg/kg, entre alrededor 55,0 mg/kg y alrededor 60,0 mg/kg, o entre alrededor 57,5 mg/kg y alrededor 60,0 mg/kg.

[0184] En algunos aspectos, la dosis de fosfato de inositol de la presente invencion (por ejemplo, hexafosfato de mioinositol) es de entre alrededor 0,001 mg/kg y alrededor 57,5 mg/kg, entre alrededor 0,001 mg/kg y alrededor 55,0 mg/kg, entre alrededor 0,001 mg/kg y alrededor 52,5 mg/kg, entre alrededor 0,001 mg/kg y alrededor 50,0 mg/kg, entre alrededor 0,001 mg/kg y alrededor 47,5 mg/kg, entre alrededor 0,001 mg/kg y alrededor 45,0 mg/kg, entre alrededor 0,001 mg/kg y alrededor 42,5 mg/kg, entre alrededor 0,001 mg/kg y alrededor 40,0 mg/kg, entre alrededor 0,001 mg/kg y alrededor 37,5 mg/kg, entre alrededor 0,001 mg/kg y alrededor 35,0 mg/kg, entre alrededor 0,001 mg/kg y alrededor 32,5 mg/kg, entre alrededor 0,001 mg/kg y alrededor 30,0 mg/kg, entre alrededor 0,001 mg/kg y alrededor 27,5 mg/kg, entre alrededor 0,001 mg/kg y alrededor 25,0 mg/kg, entre alrededor 0,001 mg/kg y alrededor 22,5 mg/kg, entre alrededor 0,001 mg/kg y alrededor 20,0 mg/kg, entre alrededor 0,001 mg/kg y alrededor 27,5 mg/kg, entre alrededor 0,001 mg/kg y alrededor 25,0 mg/kg, entre alrededor 0,001 mg/kg y alrededor 22,5 mg/kg, entre alrededor 0,001 mg/kg y alrededor 20,0 mg/kg, entre alrededor 0,001 mg/kg y alrededor 17,5 mg/kg, entre alrededor 0,001 mg/kg y alrededor 15,0 mg/kg, entre alrededor 0,001 mg/kg y alrededor 12,5 mg/kg, entre alrededor 0,001 mg/kg y alrededor 10,0 mg/kg, entre alrededor 0,001 mg/kg y alrededor 7,5 mg/kg, entre alrededor 0,001 mg/kg y alrededor 5,0 mg/kg, o entre alrededor 0,001 mg/kg y alrededor 2,5 mg/kg.

5. Indicaciones

[0185] Los compuestos, composiciones farmaceuticas, preparaciones combinadas, metodos y vias de administration, como se definen en cualquiera de los aspectos desvelados anteriormente, pueden usarse para aumentar la perfusion y/u oxigenacion tisular en un sujeto que lo necesite.

[0186] Los terminos "enfermedad o afeccion relacionada con la isquemia" tal co o se usan en el presente documento se refieren a cualquier enfermedad o afeccion relacionada o que surge de un evento o lesion isquemica. Los ejemplos de enfermedades o afecciones relacionadas con la isquemia incluyen, entre otros, enfermedades o afecciones cerebrovasculares (por ejemplo, accidente cerebrovascular, ataque isquemico transitorio (AIT), hemorragia subaracnoidea, demencia vascular), cardiovasculares (por ejemplo, infarto de miocardio, angina de pecho), gastrointestinales (por ejemplo, colitis), perifericas (por ejemplo, isquemia aguda de las extremidades) y cutaneas (por ejemplo, cianosis, gangrena).

[0187] En algunos aspectos, los compuestos, composiciones farmaceuticas, preparaciones combinadas, metodos y vias de administracion de la presente invencion pueden usarse para el tratamiento o prevencion de la isquemia y/o una enfermedad o afeccion relacionada con la isquemia en un sujeto que lo necesite. [0188] El termino "insuficiencia renal", como se usa en el presente documento, se refiere a una enfermedad que causa una perdida progresiva de la funcion renal, con una disminucion concomitante en la tasa o indice de filtracion glomerular (TFG). La insuficiencia renal tambien se conoce co o fallo renal o enfermedad renal. La enfermedad renal se puede clasificar como (i) lesion renal aguda (LRA), una perdida progresiva de la funcion renal, que generalmente causa oliguria y un desequilibrio de liquidos y electrolitos y (ii) enfermedad renal cronica (ERC), una perdida mucho mas lenta de la funcion renal durante un periodo de meses o anos. Dependiendo del grado de funcion renal, se definen cinco etapas de la ERC en funcion de la TFG: (a) etapa 1 , TFG normal o alta (>90 ml/min), (b) etapa 2: ERC leve, TFG = 60-89 ml/min, (c) etapa 3, ERC moderada, TFG = 30-59 ml/min, (d) etapa 4, ERC grave, TFG = 15-29 ml/min y (e) etapa 5, terminal ERC, TFG <15 ml/min. En la etapa 5, se requiere dialisis o un trasplante de rinon para mantener el estado de salud. La LRA y la ERC pueden ocurrir concomitantemente, lo que se conoce como insuficiencia renal aguda sobre cronica.

[0189] En algunos aspectos, los compuestos, composiciones farmaceuticas, preparaciones combinadas, metodos y vias de administracion de la presente invencion pueden usarse para aumentar la perfusion y/u oxigenacion tisular en un sujeto con enfermedad renal. La enfermedad renal en el sujeto puede ser aguda, cronica o ambas. En algunos aspectos, el sujeto se somete a dialisis (por ejemplo, peritoneal, hemodialisis). En otra forma de este aspecto, el sujeto se somete a hemodialisis. En algunos otros aspectos, el sujeto no se somete a dialisis (por ejemplo, un sujeto con ERC en las etapas 1 a 4). En una version de este aspecto, se le administra un fosfato de inositol de la presente invencion (por ejemplo, hexafosfato de mioinositol) al sujeto en una dosis efectiva de alrededor 0,001 mg/kg a alrededor 60 mg/kg.

[0190] En algunos aspectos, los compuestos, composiciones farmaceuticas, preparaciones combinadas, metodos y vias de administracion de la presente invencion pueden usarse para tratar o prevenir la isquemia y/o una enfermedad o afeccion relacionada con la isquemia en un sujeto con enfermedad renal. La enfermedad renal en el sujeto puede ser aguda, cronica o ambas. En una version de este aspecto, el sujeto se somete a dialisis (por ejemplo, peritoneal, hemodialisis). En otra forma de esta version, el sujeto se somete a hemodialisis. En otra version de este aspecto, el sujeto no se somete a dialisis (por ejemplo, un sujeto con ERC en las etapas 1 a 4). En una version de este aspecto, se le administra un fosfato de inositol de la presente invencion (por ejemplo, hexafosfato de mioinositol) al sujeto en una dosis efectiva de alrededor 0,001 mg/kg a alrededor 60 mg/kg. [0191] En algunos aspectos, los compuestos, composiciones farmaceuticas, preparaciones combinadas, metodos y vias de administration de la presente invention pueden usarse para mejorar la capacidad de deambulacion de un sujeto que lo necesite. En algunos aspectos, los compuestos, las composiciones farmaceuticas, los metodos y las vias de administracion de la presente invencion se pueden usar para aumentar la Distancia maxima de deambulacion (DMD), el Tiempo maximo de deambulacion (TMD) o ambos en un sujeto que lo necesite. En algunos aspectos, el sujeto se ve afectado con enfermedad renal. La enfermedad renal en el sujeto puede ser aguda, cronica o ambas. En una version de este aspecto, el sujeto se somete a dialisis (por ejemplo, peritoneal, hemodialisis). En otra forma de esta version, el sujeto se somete a hemodialisis. En otra version de este aspecto, el sujeto no se somete a dialisis (por ejemplo, un sujeto con ERC en las etapas 1 a 4). En una version de este aspecto, se le administra un fosfato de inositol de la presente invencion (por ejemplo, hexafosfato de mioinositol) al sujeto en una dosis efectiva de alrededor 0,001 mg/kg a alrededor 60 mg/kg.

[0192] Los compuestos, composiciones farmaceuticas, preparaciones combinadas, metodos y vias de administracion de la presente invencion son particularmente litiles para aumentar la perfusion y/u oxigenacion tisular en las extremidades inferiores y, especialmente, para el tratamiento y prevencion de la enfermedad arterial periferica. Una condicion adicional que puede beneficiarse del uso de los fosfatos de inositol de la presente invencion es la isquemia critica de las extremidades. En aspectos particulars, los compuestos, composiciones farmaceuticas, preparaciones combinadas, metodos y vias de administracion tal como se definen en cualquiera de los aspectos desvelados anteriormente son para su uso en el aumento de la perfusion y/u oxigenacion tisular, especialmente en las extremidades inferiores y, especialmente, para el tratamiento y prevencion de la EAP y/o la ICE. En algunos aspectos, el sujeto se somete a dialisis (por ejemplo, peritoneal, hemodialisis). En algunos aspectos adicionales, el sujeto se somete a hemodialisis. En algunos otros aspectos, el sujeto no se somete a dialisis (por ejemplo, un sujeto con ERC en las etapas 1 a 4). En una version de este aspecto, se le administra un fosfato de inositol de la presente invencion (por ejemplo, hexafosfato de mioinositol) al sujeto en una dosis efectiva de alrededor 0,001 mg/kg a alrededor 60 mg/kg.

[0193] Las siguientes realizaciones ilustran adicionalmente el alcance de la invencion:

[0194] Realizacion 1. Un compuesto de formula general I, o una de sus sales farmaceuticamente aceptables, para su uso en el aumento de la perfusion y/u oxigenacion tisular en un sujeto que lo necesite

[0195] donde Ri, R ₃ , Rs, R7, R ₉ y R11 se seleccionan independientemente entre OH, un radical de formula II, III, IV, V, VI y VII:

[0196] en las que: n es un niimero entero en el intervalo de 2 a 200, y R13 se selecciona entre H, metilo, etilo y alquilo C ₃ -C1 ₀ ;

[0197] con la condition de que:

[0198] al menos uno de Ri , R ₃ , Rs, R7, R ₉ y Rn se seleccione entre un radical de formula II, III y IV, y [0199] cero, uno, dos o tres de Ri , R ₃ , Rs, R ₇ , R ₉ y Ri ₁ se seleccionen entre un radical de formula V, VI y VII.

[0200] Realizacion 2. El compuesto para el uso de acuerdo con la realizacion 1 , que sirve para el tratamiento o prevencion de la enfermedad arterial periferica.

[0201] Realizacion 3. El compuesto para el uso de acuerdo con cualquiera de las realizaciones anteriores, que sirve para el tratamiento o prevencion de la isquemia critica de extremidades.

[0202] Realizacion 4. El compuesto para el uso de acuerdo con cualquiera de las realizaciones anteriores, que sirve para tratar a un sujeto que esta siendo sometido a dialisis, preferiblemente hemodialisis.

[0203] Realizacion 5. El compuesto para el uso de acuerdo con cualquiera de las realizaciones anteriores, que es una sal de sodio.

[0204] Realizacion 6: El compuesto para el uso de acuerdo con cualquiera de las realizaciones anteriores, en el que al menos dos, al menos tres, al menos cuatro, al menos cinco o al menos 6 de Ri, R ₃ , Rs, R ₇ , R ₉ y Rn se seleccionan entre los radicales de las formulas V, VI y VII.

[0205] Realizacion 7. El compuesto para el uso de acuerdo con la realizacion anterior, en el que al menos dos, al menos tres, al menos cuatro, al menos cinco o al menos seis de Ri, R ₃ , Rs, R ₇ , R ₉ y Rn son un radical de formula V.

[0206] Realizacion 8. El compuesto para el uso de acuerdo con la realizacion anterior, en el que el compuesto de formula I es hexafosfato de inositol.

[0207] Realizacion 9. El compuesto para el uso de acuerdo con la realizacion anterior, que es una sal de hexasodio.

[0208] Realizacion 10. El compuesto para el uso de acuerdo con la realizacion 7, en el que:

[0209] R ₇ es OSO ₃ , y Ri , R ₃ , Rs, R ₉ y Rn se seleccionan independientemente entre

OPO3 ² -, OPSO ₂ ² - U OSO ₃ -.

[0210] Rg, Rs y Ri son OPO3 ² y R7, R3 y Rn son OSO3 ;

[0211] Rg, R ₅ y Ri son OSO3 y R7, R3 y Rn son OPO3 ² ;

[0212] R ₃ , RI y Rn son OSO3, y Rg, R7 y Rs son OPO3 ² ;

[0213] R ₃ , RI y Rn son OPO3 ² y Rg, R7 y Rs son OSO3 ;

[0214] R ₇ y Ri son OPO3 ² y Rg, Rs, R3 y Rn son OPO3 ; [0215] Ry y Ri son OSO3 y Rg, Rs, R3 y Rn son OPO3 ² ;

[0216] Ry y Rs son OPO3 ² y Rg, R3, Ri y Rn son OSO3 ; o,

[0217] R ₇ y R ₅ son OSO3 y Rg, R3, Ri y Rn son OPO3 ² .

[0218] Realizacion 1 1. El compuesto para el uso de acuerdo con cualquiera de las realizaciones anteriores, en el que el compuesto de formula I tiene conformation de mioinositol.

[0219] Realizacion 12. El compuesto para el uso de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones 1-6, en el que uno, dos o tres de Ri , R ₃ , Rs, R ₇ , Rg y Rn se seleccionan entre un radical de formula V, VI y VII.

[0220] Realizacion 13. El compuesto para el uso de acuerdo con la realizacion anterior, en el que cuatro de Ri , R ₃ , Rs, R ₇ , Rg y Rn son un radical de formula II y dos de Ri , R ₃ , Rs, R ₇ , Rg y Rn se seleccionan entre un radical de formulas V, VI y VII.

[0221] Realizacion 14. El compuesto para el uso de acuerdo con la realizacion anterior, en el que cuatro de Ri , R ₃ , Rs, R ₇ , Rg y Rn son un radical de formula II y dos de Ri , R ₃ , Rs, R ₇ , Rg y Rn son un radical de formula V.

[0222] Realizacion 15. El compuesto para el uso de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones 12-14, en el que:

(i) Ri , Rs, Rg y Rn son un radical de formula II y R ₃ y R ₇ se seleccionan entre un radical de formulas V, VI y VII,

(ii) Ri , R ₃ , Rg y Rn son un radical de formula II y Rs y R ₇ se seleccionan entre un radical de formulas V, VI y VII.

[0223] Realizacion 16. El compuesto para el uso de acuerdo con la realizacion anterior, en el que el radical seleccionado entre V, VI y VII es el radical de formula V.

[0224] Realizacion 17. El compuesto para el uso de acuerdo con cualquiera de las realizaciones 12-16, en el que el radical de formula V, VI o VI tiene n en el intervalo de 2 a 200.

[0225] Realizacion 18. El compuesto para el uso de acuerdo con la realizacion anterior, en el que n se encuentra en el intervalo de 9 a 30.

[0226] Realizacion 19. El compuesto para el uso de acuerdo con la realizacion anterior, en el que n se encuentra en el intervalo de 15 a 30.

[0227] Realizacion 20. El compuesto para el uso de acuerdo con la realizacion 17, en el que n se encuentra en el intervalo de 3 a 9. [0228] Realization 21. El compuesto para el uso de acuerdo con cualquiera de las realizaciones 12-20, en el que R es H.

[0229] Realization 22. El compuesto para el uso de acuerdo con la realization 21 , en el que Ri , Rs, Rg y Rn son un radical de formula II y R ₃ y R ₇ son un radical de formula V.

[0230] Realization 23. Una composition farmaceutica para el uso como se define en cualquiera de las realizaciones 1-4 que comprende el compuesto como se define en cualquiera de las realizaciones anteriores junto con excipientes y vehiculos farmaceuticamente aceptables.

[0231] Realization 24. La composition farmaceutica de acuerdo con la realization anterior, en la que el compuesto esta presente del 20 al 90 % (p/p) de la composition total.

[0232] Realization 25. La composition farmaceutica de acuerdo con la realization anterior, en el que el compuesto esta presente del 30 al 80 % (p/p) de la composition total.

[0233] Realization 26. La composition farmaceutica de acuerdo con la realization anterior, en el que el compuesto esta presente del 40 al 70 % (p/p) de la composition total.

[0234] Realization 27. La composition farmaceutica de acuerdo con cualquiera de las realizaciones 23-26, en la que la composition esta en forma seca para la reconstitution con un vehiculo adecuado.

[0235] Realization 28. La composition farmaceutica de acuerdo con cualquiera de las realizaciones 23-26, en la que la composition esta en solution, preferiblemente solution salina isotonica.

[0236] Realization 29. La composition farmaceutica de acuerdo con cualquiera de las realizaciones 23-27, que forma parte de una solution de hemodialisis, hemofiltration o dialisis peritoneal.

[0237] Realization 30. La composition farmaceutica de acuerdo con cualquiera de las realizaciones 23-29, en la que la composition es para liberation controlada.

[0238] Realization 31. El compuesto para el uso de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones 1-22 o la composition farmaceutica para el uso de acuerdo con cualquiera de las realizaciones 23-30, que se administra a un paciente que esta siendo sometido a dialisis. [0239] Realization 32. El compuesto para el uso de acuerdo con la realization anterior, en el que la dialisis es hemodialisis.

[0240] Realization 33. El compuesto o composition farmaceutica para el uso de acuerdo con cualquiera de las realizaciones 31-32, que se administra antes de la dialisis.

[0241] Realization 34. El compuesto o composition farmaceutica para el uso de acuerdo con cualquiera de las realizaciones 31-32, que se administra durante la dialisis.

[0242] Realization 35. El compuesto o composition farmaceutica para el uso de acuerdo con cualquiera de las realizaciones 31-32, que se administra despues de la dialisis.

[0243] Realizacion 36. El compuesto o composicion farmaceutica para el uso de acuerdo con cualquiera de las realizaciones 31-35, que se administra por via parenteral.

[0244] Realizacion 37. El compuesto o composicion farmaceutica para el uso de acuerdo con la realizacion anterior en la que la administracion parenteral es intravenosa, subcutanea o intramuscular.

[0245] Realizacion 38. El compuesto o composicion farmaceutica para el uso de acuerdo con la realizacion anterior, en el que la administracion intravenosa es mediante inyeccion en bolo o mediante infusion intravenosa.

[0246] Realizacion 39. El compuesto o composicion farmaceutica para el uso de acuerdo con la realizacion 34, que se administra a la sangre no filtrada extraida del paciente.

[0247] Realizacion 40. El compuesto o composicion farmaceutica para el uso de acuerdo con cualquiera de las realizaciones anteriores, en la cual el compuesto se administra al sujeto en una dosis terapeuticamente efectiva de alrededor 0,001 mg/kg a alrededor 60 mg/kg.

[0248] Realizacion 41. El compuesto o composicion farmaceutica para el uso de acuerdo con la realizacion 40, en la cual el compuesto se administra al sujeto en una dosis terapeuticamente efectiva de alrededor 15 mg/kg a alrededor 45 mg/kg.

[0249] Realizacion 42. Una preparation combinada que comprende: (i) (a) al menos un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones 1-22 o (b) al menos una composicion farmaceutica de acuerdo con cualquiera de las realizaciones 23-30, y (ii) al menos un agente terapeutico adicional para su uso en salud humana. [0250] Realization 43. La preparation combinada de acuerdo con la realization anterior en la que el agente terapeutico adicional es cilostazol, pentoxifilina o una combination de los mismos.

[0251] Realization 44. Un metodo para aumentar la perfusion y/u oxigenacion tisular en un sujeto que lo necesite que comprende administrar una cantidad terapeuticamente efectiva del compuesto o composition farmaceutica de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones 1-41 o la preparation combinada de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones 42-43 al sujeto.

[0252] Realization 45. Un metodo para tratar o prevenir la isquemia y/o una enfermedad o afeccion relacionada con la isquemia en un sujeto que lo necesite que comprende administrar una cantidad terapeuticamente efectiva del compuesto o composicion farmaceutica de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones 1-41 o la preparacion combinada de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones 42-43 al sujeto.

[0253] Realizacion 46. Un metodo para mejorar la capacidad de deambulacion en un sujeto que lo necesite que comprende administrar una cantidad terapeuticamente efectiva del compuesto o composicion farmaceutica de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones 1-41 o la preparacion combinada de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones 42-43 al sujeto.

[0254] Realizacion 47. Un metodo para aumentar la Distancia maxima de deambulacion (DMD), el Tiempo maximo de deambulacion (TMD) o ambos en un sujeto que lo necesite que comprende administrar una cantidad terapeuticamente efectiva del compuesto o composicion farmaceutica de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones 1-41 o la preparacion combinada de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones 42-43 al sujeto.

[0255] Realizacion 48. Un metodo para tratar o prevenir la enfermedad arterial periferica en un sujeto que lo necesite que comprende administrar una cantidad terapeuticamente efectiva del compuesto o composicion farmaceutica de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones 1-41 o la preparacion combinada de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones 42-43 al sujeto.

[0256] Realizacion 49. Los metodos de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones 44-48 en los que la preparacion combinada se administra de forma conjunta, concurrente o secuencial al sujeto.

[0257] Esta invencion se ilustra adicionalmente mediante los siguientes ejemplos que no deben interpretarse como limitantes. El contenido de todos los documentos citados a lo largo de esta solicitud se incorpora en el presente documento en su totalidad por referenda.

Ejemplos

Procedimientos generates

1. Perfusion sanguines de las extremidades

[0258] Se evaliia la position de la perfusion sanguinea de la extremidad y el estado de isquemia (es decir, perfusion sanguinea que incluye unidad de perfusion, diferencia de perfusion y relacion de perfusion) mediante imagenes de perfusion con laser Doppler usando un generador de imagenes PeriCam PSI NR (Perimed AB, Jarfalla, SE). Los sujetos se anestesian usando isoflurano al 3 % administrado en oxigeno al 100 % a una velocidad de flujo de 1 l/min antes de medir. La diferencia entre la perfusion y la relacion de perfusion se calculan comparando la linea basal y cualquier lectura intermedia o final indicada para cada grupo. El flujo sanguineo se evaliia alrededor de la C _max de los agentes activos probados (es decir, 15 minutos despues del tratamiento con SNF472, 20 minutos despues del tratamiento con IP4-BIS- PEG100 y de 3 a 4 horas despues del tratamiento con cilostazol).

2. Pruebas de capacidad de deambulacion

[0259] La cuantificacion de la capacidad de deambulacion (tiempo maximo de deambulacion (TMD) y distancia maxima de deambulacion (DMD)) se mide mediante una prueba de camera en cinta rodante incremental forzada. Se emplea una cinta rodante para roedores de dos carriles (LE8709TS; PanLab/Harvard Apparatus, Holliston, MA, EE.UU.). La cinta rodante se mantiene con una inclination del 15 % a una velocidad de 15 m/min (25 cm/s) durante los primeros 5 min, a continuacion a 33 cm/s durante los siguientes 5 min y, finalmente, a una velocidad de 40 cm/s durante un maximo de 30 minutos adicionales.

[0260] La funcion de la extremidad se evaliia alrededor de la C _max de los agentes activos probados (es decir, 15 minutos despues del tratamiento con SNF472 y de 3 a 4 horas despues del tratamiento con cilostazol). Los sujetos se ejercitan en la cinta rodante para aclimatarse de acuerdo con un protocolo establecido antes de la prueba. Los sujetos que no cumplan con el protocolo se excluyen de la prueba.

[0261] Los sujetos se mantienen corriendo durante hasta 40 minutos o hasta que se agotan (es decir, permanecen en la rejilla de choque durante cinco segundos seguidos) durante la prueba. La DMD y la TMD se calculan para cada animal.

3. Recoieccion de tejidos y sangre, ensayos de calcificacion

[0262] Los sujetos se anestesian por inhalacion de isoflurano. La sangre se obtiene por desangrado mediante puncion cardiaca. A continuacion, se sacrifican los sujetos y se recogen sus tejidos (por ejemplo, arterias femorales derecha e izquierda, aorta). La sangre y los tejidos se procesan y analizan para determinar su contenido de calcio.

[0263] El contenido de calcio en la muestra de tejido se cuantifica mediante espectrometria de emision optica de plasma acoplado inductivamente (ICP-OES) usando un espectrometro Optima 7300 DV ICP-OES System (PerkinElmer, Inc., Waltham, MA, EE.UU.) Segiin el fabricante instrucciones. Los niveles de hexafosfato de mioinositol en plasma se cuantifican por los metodos cromatograficos LC-MS/MS descritos en la tecnica. Vease WO2013050603.

Ejemplo 1

Prevencion de isquemia en las extremidades

Impacto en la perfusion sanguinea

[0264] Los efectos preventives de SNF472, la sal de sodio de IP4-4,6-bisPEG100 y el cilostazol sobre la perfusion sanguinea se probaron usando un modelo de rata durante 12 dias. La isquemia de las extremidades en los sujetos se indujo a partir de D1 , excepto para el grupo control, al que no se le indujo isquemia. Los sujetos inducidos a isquemia fueron tratados con placebo y formulaciones de agente activo de D1 a D12 para evaluar su impacto en la prevencion de la isquemia de las extremidades. Se tomaron observaciones en varios puntos durante el tratamiento de D1 a D12. Todos los sujetos se pesaron todos los dias antes del tratamiento.

1. Induccion de isquemia en las extremidades

[0265] Se usaron cincuenta y cuatro ratas macho Sprague Dawley (SD) (Envigo Corp., Huntingdon, GB) que pesaban aproximadamente 250-275 g. Los sujetos fueron alimentados con una dieta A04 (Scientific Animal Food & Engineering; Carpe Bio, Amersfoort, NL). Los sujetos se dividieron en 5 grupos, de 8 a 10 ratas por grupo, de la siguiente manera:

[0266] Grupo 1— Control (simulacion) [0267] Grupo 2a Placebo— Solucion salina fisiologica

[0268] Grupo 2b Placebo— Solucion de sal de sodio de carboximetilcelulosa al 5 % (CMC)

[0269] Grupo 3— SNF472 (Na ₆ IP ₆ )

[0270] Grupo 4— Sal de sodio de IP4-4,6-bisPEG100

[0271] Grupo 5— Cilostazol (C ₂₀ H ₂₇ N ₅ O ₂ )

[0272] Se indujo isquemia en las extremidades en los sujetos de los grupos 2a-5 por administracion subcutanea de 120.000 Ul/kg de vitamina D3 (colecalciferol, Duphafral D3 1000; Zoetis Inc., Parsippany, NJ, EE.UU.) en solucion salina fisiologica (2 ml/kg) todos los dias durante D1 a D3. A los sujetos control del grupo 1 se les administro solucion salina fisiologica (2 ml/kg) por via subcutanea todos los dias durante D1 a D3 sin vitamina D ₃ .

[0273] A los sujetos en los grupos 1 y 2a se les administro solucion salina fisiologica (2 ml/kg) por via subcutanea todos los dias durante D1 a D12. A los sujetos del grupo 2b se les administro una solucion de sal de sodio de CMC al 5 % en agua (5 ml/kg) por via oral todos los dias durante D1 a D12.

[0274] La administracion de vitamina D3 indujo isquemia en las extremidades posteriores de los sujetos en los grupos 2a, 2b y 3-5 se sometieron a ensayo mediante imagenes de perfusion con laser Doppler.

2. Rescate de la isquemia y efectos sobre la perfusion sanguinea de las extremidades: Ensayo de imagen con laser Doppler

[0275] Se indujo perfusion sanguinea de las extremidades en los sujetos de los grupos 3 y 4 mediante la administracion subcutanea de 20 mg/kg de SNF472 (NqbIRb; base libre: 600 g/mol) y sal de sodio de IP4-4,6-bisPEG100 (base libre 696,27 g/mol), respectivamente, en solucion salina fisiologica (2 ml/kg) todos los dias durante D1 a D12. La perfusion sanguinea de las extremidades se indujo en los sujetos del grupo 5 mediante la administracion oral de 20 mg/kg de cilostazol (C20H27N5O2, base libre 369,46 g/mol; lote n.° LRAB9590, Sigma-Aldrich Corp., St. Louis, MO, EE.UU.) en una solucion de sal de sodio de CMC al 5 % en agua (5 ml/kg) todos los dias durante D1 a D12.

[0276] El estado de isquemia de las extremidades se evaluo en los dias DO (linea basal), D6 y D12 en todas las ratas mediante imagen de perfusion con laser Doppler. Se calcularon la diferencia de perfusion y la relacion de perfusion comparando la linea basal DO y las lecturas D6 y D12 para cada grupo. En particular, se calcularon la diferencia de perfusion y la relacion de perfusion comparando lecturas del grupo 1 (control) y (a) los grupos 2a y 2b placebo (es decir, solucion salina fisiologica, solucion de sal de sodio de CMC al 5 % en agua), (b) grupo 3 (SNF472), (c) grupo 4 (sal de sodio de IP4-4,6-bisPEG100) y (d) grupo 5 (cilostazol).

[0277] En los dias en que se realizaron pruebas de perfusion sanguinea que implicaban el uso de agentes activos (es decir, D6, D12), las dosis se administraron de la siguiente manera:

[0278] Grupo 3— SNF472 (NqbIRb): 15 minutos antes de la lectura

[0279] Grupo 4— Sal de sodio de IP4-4,6-bisPEG100: 20 minutos antes de la lectura

[0280] Grupo 5— Cilostazol (C20H27N5O2) : 3 a 4 horas antes de la lectura

[0281] Segiin el esquema anterior, los agentes activos estarian en su concentration serica maxima (Cmax) en el momento en que se tomaron las lecturas de prueba.

[0282] Los sujetos del grupo 1 no mostraron ningiin cambio significative en sus parametros de perfusion.

[0283] La administration de SNF472 y la sal de sodio de IP4-4,6-bisPEG100 atenuo la caida de la perfusion sanguinea en las extremidades de los sujetos de los grupos 3-5 (es decir, tratados con vitamina D3) en comparacion con placebo y cilostazol. Estos resultados sugieren que SNF472 e IP4-4,6-bisPEG100 son mas efectivos que el cilostazol para aumentar la perfusion sanguinea en las extremidades posteriores de los sujetos tratados. Veanse las Figs. 7, 8 y 9.

3. Contenido de calcio y calcificacion— ICP-OES

[0284] El SNF472 demostro ser efectivo contra la calcificacion vascular, ya que

SNF472 inhibio la calcificacion de la aorta (31 ± 16 %) despues de una dosis subcutanea diaria de 20 mg/kg en comparacion con el placebo. El cilostazol no fue activo contra la calcificacion a la misma dosis. Vease la Fig. 10.

4. Farmacocinetica

[0285] Los sujetos de los grupos 1 , 2, 3 y 5 fueron sacrificados despues del desangrado. A continuation, se realizaron sus necropsias y se recogieron sus aortas. Los tejidos se liofilizaron durante 24 h y se pesaron. Los tejidos liofilizados se digirieron a continuation usando una mezcla 1 : 1 de HN0 ₃ :HCIC> ₄ en una incubadora de bano seco durante 2-4 h a 180 °C. Los tejidos digeridos se diluyeron posteriormente usando agua Milli-Q ultrapura (MilliporeSigma (Merck KGaA), Burlington, MA, EE.UU.) hasta un volumen final de 10 ml. El contenido de calcio en la muestra de la aorta se cuantifico mediante ICP-OES.

[0286] Los sujetos de los grupos 1 , 2, 3, 4 y 5 fueron anestesiados y su sangre se obtuvo el D12. Se tomaron alrededor de 8-10 ml de sangre total por sujeto y se dividieron en tubos de recoleccion para pruebas de plasma (K3EDTA, aproximadamente 6 ml de sangre) y suero (aproximadamente 2-3 ml de sangre). El plasma se almaceno en una alicuota de 600 pi y en varias otras alicuotas de 500 mI. El suero se dividio en dos partes alicuotas.

[0287] Los niveles de hexafosfato de mioinositol en el plasma de los sujetos del grupo 3 (es decir, tornados a aproximadamente Cmax, 15 minutos despues de la l ltima dosis de SNF472) se cuantificaron mediante metodos cromatograficos LC-MS/MS descritos en la tecnica. Vease el documento WO2013050603.

[0288] Todos los sujetos en el grupo 3 estuvieron bien expuestos al producto SNF472. El nivel plasmatico 15 minutos despues de la l ltima dosis subcutanea a D12 fue de 15587 ± ng/ml (24 ± 12 mM). Los niveles plasmaticos en ratas despues de una dosis diaria de 20 mg/kg fueron comparables a los niveles encontrados en pacientes de hemodialisis tratados con SNF472 a una dosis de 4,2 mg/kg por via intravenosa.

Ejemplo 2

Prevention de isquemia en las extremidades

Impacto en los tiempos de deambulacion maxima (TMD) y distancia (MDT)

[0289] Los efectos preventives de SNF472 y cilostazol sobre la perfusion sanguinea, la capacidad de deambulacion y la calcification de tejidos se probaron usando un modelo de rata durante una duration de 24 dias. Ademas, tambien se analizaron los efectos de un tratamiento combinado de SNF472 y cilostazol sobre la perfusion sanguinea. La isquemia de las extremidades en los sujetos se indujo de D1 a D3, excepto para el grupo control, al que no se le indujo isquemia. Los sujetos inducidos a isquemia fueron tratados con placebo y formulaciones de agente activo de D1 a D12 para evaluar su impacto en la prevention de (a) isquemia de las extremidades y calcification de los tejidos y (b) el deterioro de la capacidad de deambulacion. El tratamiento en todos los sujetos se interrumpio de D13 a D24. Se tomaron observaciones en varios puntos durante las fases de tratamiento y postratamiento de D1 a D24. Todos los sujetos se pesaron todos los dias antes del tratamiento.

7. Induccion de isquemia en las extremidades

[0290] Se usaron cincuenta y cuatro ratas macho Sprague Dawley (SD) (Envigo

Corp., Huntingdon, GB) que pesaban aproximadamente 250-275 g. Los sujetos fueron alimentados con una dieta A04 (Scientific Animal Food & Engineering; Carpe Bio, Amersfoort, NL). Los sujetos se dividieron en 5 grupos, de 8 a 10 animales por grupo, de la siguiente manera:

[0291] Grupo 1— Control (simulacion)

[0292] Grupo 2a Placebo— Solucion salina fisiologica

[0293] Grupo 2b Placebo— Solucion de sal de sodio de CMC al 5 %

[0294] Grupo 3— SNF472 (Na ₆ IP ₆ )

[0295] Grupo 4— Cilostazol (C ₂₀ H ₂₇ N ₅ O ₂ )

[0296] Grupo 5— Cilostazol + SNF472

[0297] Se indujo isquemia en las extremidades en los sujetos de los grupos 2a-5 por administration subcutanea de 120.000 Ul/kg de vitamina D ₃ (colecalciferol, Duphafral D3 1000; Zoetis Inc., Parsippany, NJ, EE.UU.) en solucion salina fisiologica (2 ml/kg) todos los dias durante D1 a D3. A los sujetos control del grupo 1 se les administro solucion salina fisiologica (2 ml/kg) por via subcutanea todos los dias de D1 a D3 sin vitamina D ₃ .

[0298] A los sujetos en los grupos 1 y 2a se les administro solucion salina fisiologica (2 ml/kg) por via subcutanea todos los dias durante D1 a D12. A los sujetos del grupo 2b se les administro una solucion de sal de sodio de CMC al 5 % en agua (5 ml/kg) por via oral todos los dias durante D1 a D12.

2. Rescate de la isquemia y sus efectos sobre la perfusion sanguinea: Ensayo de imagenes con laser Doppler

[0299] A los sujetos en los grupos 1 y 2a se les administraron 2 ml/kg de solucion salina fisiologica diariamente de D1 a D12 por via subcutanea. A los sujetos del grupo 2b se les administraron 5 ml/kg por via oral de una solucion de sal de sodio de CMC al 5 % en agua diariamente de D1 a D12. Ademas, los sujetos en el grupo 3 recibieron 20 mg/kg de SNF472 (NqbIR _d , base libre: 600 g/mol) de sal de sodio (base libre 696,27 g/mol) en solucion salina fisiologica (2 ml/kg) todos los dias desde D1 a D12 por via subcutanea. Los sujetos en el grupo 4 recibieron 20 mg/kg de cilostazol por via oral (C20H27N5O2, base libre 369,46 g/mol; lote n.° LRAB9590, Sigma-Aldrich Corp., St. Louis, MO, EE.UU.) en una solucion de sal de sodio de CMC al 5 % en agua (5 l/kg) diariamente de D1 a D12. A los sujetos del grupo 5 se les administro (i) 20 g/kg de cilostazol (C20H27N5O2, base libre 369,46 g/mol; lote n.° LRAB9590, Sigma-Aldrich Corp., St. Louis, MO, EE.UU.) en una solucion de sal de sodio de CMC al 5 % en agua (5 ml/kg) por via oral, seguido de (ii) 20 mg/kg de SNF472 (NqbIR _d , base libre: 600 g/mol) en solucion salina fisiologica (2 ml/kg) por via subcutanea. Las administraciones se realizaron diariamente de D1 a D12.

[0300] En los dias en que se realizaron pruebas de perfusion sanguinea que implicaban el uso de agentes activos (es decir, D6, D12 y D18), las dosis se administraron de la siguiente manera:

[0301] Grupo 3— SNF472 (NqbIRb): 15 minutos antes de la lectura

[0302] Grupo 4— Cilostazol (C20H27N5O2) : 3 a 4 horas antes de la lectura

[0303] Grupo 5— Cilostazol + SNF472: 15 minutos para SNF472 y 3 a 4 horas para cilostazol antes de la lectura

[0304] Segiin el esquema anterior, los agentes activos estahan en su concentration plasmatica maxima (Cmax) en el momento en que se tomaron las lecturas de prueba.

[0305] El estado de isquemia de las extremidades se evaluo durante el tratamiento y despues de que se interrumpiese el tratamiento (es decir, DO, D6, D12, D18) en todas las ratas mediante imagenes de perfusion con laser Doppler. Se calcularon la diferencia de perfusion y la relacion de perfusion comparando la linea basal y cualquiera de las lecturas D6, D12 y D18 para cada grupo. En particular, se calcularon la diferencia de perfusion y la relacion de perfusion comparando las lecturas del grupo 1 (control) y (a) los grupos 2a y 2b placebo (solucion salina fisiologica, solucion de sal de sodio de CMC al 5 %), (b) grupo 3 (SNF472), (c) grupo 4 (cilostazol) y (d) grupo 5 (combinacion cilostazol/SNF472).

[0306] El SNF472 por si mismo o en combinacion con cilostazol ateniia la isquemia de las extremidades de la rata. El tratamiento con cilostazol solo no fue efectivo en este modelo. Los efectos de SNF472 sobre la perfusion sanguinea se mantuvieron incluso 6 dias despues de interrumpir el tratamiento. Vease la Fig. 11. 3. Efectos sobre la capacidad de deambulacion: Prueba de carrera en cinta rodante

[0307] El tiempo maximo de deambulacion (TMD) y la distancia maxima de deambulacion (DMD) se evaluaron en los grupos 1-4 mediante la prueba de carrera en cinta rodante (8 a 10 animales por grupo y punto de tiempo) a DO, D5, D10 y D17.

[0308] Los sujetos se aclimataron a la cinta durante dos dias antes de realizar la prueba. El primer dia, los sujetos se ejercitaron durante 5 a 10 minutos con una velocidad de la cinta rodante que variaba progresivamente de 15 m/min a 24 m/min. El segundo dia, los sujetos se ejercitaron inicialmente a una velocidad de 15 m/min durante los 5 minutos. A continuacion, se ejercitaron a 19,8 m/min (33 cm/s) durante 5 minutos adicionales. Finalmente, los sujetos se ejercitaron a 24 m/min (40 cm/s) durante un maximo de 30 minutos adicionales. Se obtuvieron registros preoperatorios de tiempo y distancia de deambulacion. Los animales que no cumplieron con el protocolo fueron excluidos de la prueba.

[0309] La funcion de las extremidades (TMD y DMD) se evaluo en los grupos 1 , 2 y 3 usando la prueba de carrera en cinta rodante 15 minutos despues de la administration diaria correspondiente. La funcion de las extremidades en los grupos 4 se evaluo de 3 a 4 horas despues del tratamiento.

[0310] Segiin el esquema anterior, los agentes activos estarian a su concentration plasmatica maxima (Cmax) en el momento en que se tomaron las lecturas de la prueba de carrera.

[031 1] Los sujetos se mantuvieron corriendo durante 40 minutos o hasta que se agotaron (es decir, permanecen en la rejilla de choque durante cinco segundos seguidos). Se calcularon la DMD y la TMD para cada animal.

[0312] El SNF472 y el cilostazol mejoraron la capacidad de deambulacion en ratas en comparacion con el vehiculo (+54 % DMD y +46 % TMD). Vease la Fig. 13. Ademas, el efecto de SNF472 sobre la mejora de la capacidad de deambulacion se mantuvo incluso 5 dias despues de interrumpir el tratamiento (D17). Por el contrario, el cilostazol perdio sus efectos beneficiosos inmediatamente despues de suspender el tratamiento. Vease la Fig. 13.

4. Contenido de calcio y calcificacion ICP-OES

[0313] Los sujetos fueron anestesiados y su sangre se obtuvo a D24. Los sujetos fueron sacrificados despues del desangrado. A continuacion, se realizaron sus necropsias y se recogieron sus aortas. Los tejidos se liofilizaron durante 24 h y se pesaron. Los tejidos liofilizados se digirieron a continuacion usando una mezcla 1 : 1 de HN0 ₃ :HCIC> ₄ en una incubadora de bano seco durante 2-4 h a 180 °C. Los tejidos digeridos se diluyeron posteriormente usando agua Milli-Q ultrapura (MilliporeSigma (Merck KGaA), Burlington, MA, EE.UU.) hasta un volumen final de 10 ml. El contenido de calcio en las muestras de tejido se cuantifico a traves de ICP-OES.

[0314] El SNF472 demostro ser efectivo contra la calcificacion vascular, ya que SNF472 inhibio la calcificacion de la aorta (41 ± 9 %) despues de la dosificacion subcutanea diaria a 20 g/kg en comparacion con el placebo. El cilostazol no fue activo contra la calcificacion a la misma dosis. Vease la Fig. 14.

Ejemplo 3

Tratamiento de isquemia en las extremidades

[0315] Los efectos de SNF472 y cilostazol sobre la perfusion sanguinea, la capacidad de deambulacion y la calcificacion de los tejidos despues del inicio de la isquemia de las extremidades se probaron usando un modelo de rata durante 13 dias. Se indujo isquemia en las extremidades a todos los grupos desde D1 a D3, excepto para el grupo control, al que no se le indujo isquemia. A los sujetos inducidos a isquemia se les administraron placebo y formulaciones de agente activo a partir de D5 para permitir el desarrollo de isquemia antes de comenzar el tratamiento. De D5 a D13, los sujetos fueron tratados para evaluar el impacto del tratamiento sobre la isquemia de las extremidades, la capacidad de deambulacion y la calcificacion de los tejidos. Se tomaron observaciones en varios puntos durante el tratamiento de D1 a D13. Todos los sujetos se pesaron todos los dias antes del tratamiento.

1. Induccion de isquemia en las extremidades

[0316] Se usaron sesenta y seis ratas macho Sprague Dawley (SD) (Envigo Corp., Huntingdon, GB) que pesaban aproximadamente 250-275 g. Los sujetos fueron alimentados con una dieta A04 (Scientific Animal Food & Engineering; Carpe Bio, Amersfoort, NL). Los sujetos se dividieron en 5 grupos, de 8 a 14 animales por grupo, de la siguiente manera:

[0317] Grupo 1— Control (simulacion)

[0318] Grupo 2— D5 linea basal de Ca [0319] Grupo 3a Placebo— Solucion salina fisiologica

[0320] Grupo 3b Placebo— Solucion de sal de sodio de CMC al 5 %

[0321] Grupo 4— SNF472 (Na ₆ IP ₆ )

[0322] Grupo 5— Cilostazol (C ₂₀ H ₂₇ N ₅ O ₂ )

[0323] Se indujo isquemia en las extremidades en los sujetos de los grupos 2-5 por administration subcutanea de 120.000 Ul/kg de vitamina D3 (colecalciferol, Duphafral D3 1000; Zoetis Inc., Parsippany, NJ, EE.UU.) en solucion salina fisiologica (2 ml/kg) todos los dias durante D1 a D3. A los sujetos del grupo 1 se les administro solucion salina fisiologica (2 ml/kg) por via subcutanea todos los dias de D1 a D3 sin vitamina

D ₃ .

2. Rescate de la isquemia y sus efectos sobre la perfusion sanguinea: Ensayo de imagenes con laser Doppler

[0324] A los sujetos en el grupo 1 se les administro 2 ml/kg de solucion salina fisiologica diariamente de D1 a D13 por via subcutanea. A los sujetos del grupo 2 se les administro 2 ml/kg de solucion salina fisiologica diariamente de D1 a D5 por via subcutanea. El D5, cuatro sujetos del grupo 1 y todos los sujetos del grupo 2 fueron sacrificados para determinar sus valores basales de Ca.

[0325] A los sujetos en los grupos 3a placebo se les administro 2 ml/kg de solucion salina fisiologica diariamente de D5 a D13 por via subcutanea. Los sujetos en el grupo

3b placebo recibieron 5 ml/kg por via oral de una solucion de sal de sodio de CMC al 5 % en agua diariamente de D5 a D13. Ademas, a los sujetos en los grupos 4 se les administro 40 mg/kg de SNF472 (NqbIR _d , base libre: 600 g/mol) en solucion salina fisiologica (2 ml/kg), todos los dias de D5 a D13 por via subcutanea.

[0326] A los sujetos en el grupo 5 se administro por via oral 40 mg/kg de cilostazol

(C ₂₀ H ₂₇ N ₅ O ₂ , base libre 369,46 g/mol; lote n.° LRAB9590, Sigma-Aldrich Corp., St. Louis, MO, EE.UU.) en una solucion de sal de sodio de CMC al 5 % en agua (5 ml/kg) diariamente de D5 a D13. Una dosis de 40 mg/kg de cilostazol en ratas es comparable a una dosis terapeutica de 8,4 mg/kg en pacientes con EAP.

[0327] En los dias en que se realizaron pruebas de perfusion sanguinea que implicaban el uso de agentes activos (es decir, D5, D13), las dosis se administraron de la siguiente manera:

[0328] Grupo 4— SNF472 (NqbIRb): 15 minutos antes de la lectura [0329] Grupo 5— Cilostazol (C20H27N5O2) : 3 a 4 horas antes de la lectura

[0330] Segiin el esquema anterior, los agentes activos estarian en su concentration plasmatica maxima (Cmax) en el momento en que se tomaron las lecturas de prueba.

[0331] El estado funcional de la extremidad y el estado de isquemia se evaluaron mediante imagenes de perfusion con laser Doppler en todos los grupos a DO y D5, y en los grupos 1 , 3a, 3b, 4 y 5 a D13. Se calcularon la diferencia de perfusion y la relacion de perfusion comparando las lecturas basales y las lecturas D5 y D13 para cada grupo. En particular, se calcularon la diferencia de perfusion y la relacion de perfusion comparando las lecturas del grupo 1 (control) y: (a) los grupos 3a y 3b placebo (solucion salina fisiologica, solucion de sal de sodio de CMC al 5 %), (b) el grupo 4 (SNF472), y (c) grupo 5 (cilostazol).

[0332] La administracion de VitD3 indujo una caida en la perfusion sanguinea en las extremidades posteriores en los grupos 3a, 3b, 4 y 5 (medicion el D5 justo antes de la administracion del tratamiento). El D13, solo los animales tratados con SNF472 mostraron una mejora significativa de la perfusion sanguinea de las extremidades en comparacion con D5 antes del tratamiento. No se informaron mejoras ni rescates de isquemia en animales tratados con placebo o cilostazol a D13 en comparacion con D5. Vease la Fig. 16.

3. Efectos sobre la capacidad de deambulacion: Prueba de carrera en cinta rodante

[0333] El tiempo maximo de deambulacion (TMD) y la distancia maxima de deambulacion (DMD) se evaluaron en todos los grupos a DO y en los grupos 1 , 3a, 3b, 4 y 5 a D6 y D11 mediante la prueba de carrera en cinta rodante (8 a 12 animales por grupo y punto de tiempo). Los sujetos se aclimataron a la cinta durante dos dias antes de realizar la prueba. El primer dia, los sujetos se ejercitaron durante 5 a 10 minutos con una velocidad de la cinta rodante que variaba progresivamente de 15 m/min a 24 m/min. El segundo dia, los sujetos se ejercitaron inicialmente a una velocidad de 15 m/min durante 5 minutos. A continuation, se ejercitaron a 19,8 m/min (33 cm/s) durante 5 minutos adicionales. Finalmente, los sujetos se ejercitaron a 24 m/min (40 cm/s) durante un maximo de 30 minutos adicionales. Se obtuvieron registros preoperatorios de tiempo y distancia de deambulacion. Los animales que no cumplieron con el protocolo fueron excluidos de la prueba.

[0334] La funcion de las extremidades (TMD y DMD) se evaluo en los grupos 1 , 3a, 3b y 4 utilizando la prueba de carrera en cinta rodante 15 minutos despues de la administration diaria correspondiente. La funcion de las extremidades en los grupos 5 se evaluo de 3 a 4 horas despues del tratamiento.

[0335] Segiin el esquema anterior, los agentes activos estarian a su concentration plasmatica maxima (Cmax) en el momento en que se tomaron las lecturas de prueba.

[0336] Los sujetos se mantuvieron corriendo durante 40 minutos o hasta que se agotaron (es decir, permanecen en la rejilla de choque durante cinco segundos seguidos). Se calcularon la DMD y la TMD para cada animal.

[0337] El SNF472 mejoro la capacidad de deambulacion en ratas en comparacion con el vehiculo (+49 % DMD) a pesar de que el tratamiento comenzo 5 dias despues de la induction de isquemia, mientras que el cilostazol no es eficaz en las mismas condiciones y a la dosis terapeutica (40 mg/kg/dia). Vease la Fig. 16.

4. Contenido de calcio y calcificacion— ICP-OES

[0338] Cuatro sujetos del grupo 1 y todos los sujetos del grupo 2 fueron sacrificados a D5 para determinar sus valores de referenda de Ca. Los sujetos restantes del grupo 1 y todos los sujetos de los grupos 3a, 3b, 4, 5 y 6 se sacrificaron a D13.

[0339] Los sujetos fueron sacrificados despues del desangrado. A continuacion, se realizaron sus necropsias y se recogieron sus arterias femorales derecha e izquierda. Los tejidos se liofilizaron durante 24 h y se pesaron. Los tejidos liofilizados se digirieron a continuacion usando una mezcla 1 :1 de HN0 ₃ :HCIC> ₄ en una incubadora de bano seco durante 2-4 h a 180 °C. Los tejidos digeridos se diluyeron posteriormente usando agua Milli-Q ultrapura (MilliporeSigma (Merck KGaA), Burlington, MA, EE.UU.) hasta un volumen final de 10 ml. El contenido de calcio en las muestras de tejido se cuantifico a traves de ICP-OES.

[0340] El SNF472 demostro ser efectivo contra la calcificacion vascular a D13. En comparacion con el placebo, SNF472 inhibio la calcificacion en las arterias femorales en aproximadamente (30 %) despues de una dosis subcutanea diaria de 40 mg/kg. Vease la Figura 17.

5. Farmacocinetica

[0341] Los sujetos de los grupos 1 , 3a, 3b, 4 y 5 fueron anestesiados y se obtuvo su sangre a D13. Se tomaron alrededor de 8-10 ml de sangre total por sujeto y se dividieron en tubos de recoleccion para pruebas de plasma (K3EDTA, aproximadamente 6 ml de sangre) y suero (aproximadamente 2-3 ml de sangre). El plasma se almaceno en una alicuota de 600 pi y varias otras alicuotas de 500 mI. El suero se dividio en dos alicuotas.

[0342] Los niveles de hexafosfato de mioinositol en el plasma de los sujetos del grupo 4 (es decir, tornados a aproximadamente Cmax, 15 minutos despues de la l ltima dosis de SNF472) se cuantificaron mediante metodos cromatograficos LC-MS/MS descritos en la tecnica. Vease el documento WO2013050603.

[0343] Todos los sujetos en el grupo 4 estuvieron bien expuestos al producto SNF472. El nivel plasmatico 15 minutos despues de la l ltima dosis subcutanea a D13 fue de 40078 ± 15024 ng/ml (60,7 ± 22,8 mM). Los niveles plasmaticos en ratas despues de una dosis diaria de 20 mg/kg fueron comparables a los niveles encontrados en pacientes de hemodialisis tratados con SNF472 a una dosis de 8,4 mg/kg por via intravenosa.

Ejemplo 4

Interacciones farmacologicas de SN472

[0344] Se analizo la compatibilidad de SNF472 con otros farmacos prescritos regularmente a sujetos con insuficiencia renal.

[0345] Ratas Wistar (Charles River Labs, Inc., Wilmington, MA, EE.UU.) fueron tratadas con: (i) SNF472 administrado por via subcutanea (s.c.), (ii) SNF472 + sevelamer (oral), (iii) SNF472 (s.c.) + cinacalcet (oral), (iv) SNF472 (s.c.) + Vit D (s.c.), (v) SNF472 (s.c.) + tiosulfato de sodio (s.c.) y SNF472 (s.c.) + ibandronato (s.c.). No se observaron diferencias significativas entre la administration de SNF472 solo o conjuntamente con cualquier otro de los farmacos analizados.

Ejemplo 5

Prevencion de isquemia en las extremidades

Impacto de dosis-respuesta de SNF472 sobre los tiempos maximos de deambulacion (TMD) y distancia (MDT)

[0346] Los efectos preventives de varias dosis diferentes de SNF472 y la dosis de cilostazol mas alta tolerada en la perfusion sanguinea, la capacidad de deambulacion y la calcification del tejido se probaron durante 12 dias usando un modelo de rata. Se indujo isquemia en las extremidades en los sujetos de D1 a D3, con exception del grupo control. Los animales inducidos a isquemia fueron tratados con placebo y formulaciones de agente activo de D1 a D12 para evaluar su impacto en la prevention de (a) la isquemia de las extremidades y calcification de los tejidos y (b) el deterioro de la capacidad de deambulacion. Se tomaron observaciones en varios puntos durante la fase de tratamiento de D1 a D12. Todos los sujetos se pesaron todos los dias antes del tratamiento.

7. Induction de isquemia en las extremidades

[0347] Se utilizaron ciento dos ratas macho Sprague Dawley (SD) (Envigo Corp., Huntingdon, GB) que pesaban aproximadamente 250-275 g. Los sujetos fueron alimentados con una dieta A04 (Scientific Animal Food & Engineering; Carpe Bio, Amersfoort, NL). Los sujetos se dividieron en 5 grupos, de 8 a 12 animales por grupo, de la siguiente manera:

[0348] Grupo 1— Control (simulacion)

[0349] Grupo 2a Placebo— Solucion salina fisiologica, subcutanea

[0350] Grupo 2b Placebo— Solucion de sal de sodio de CMC al 5 %, oral

[0351] Grupo 3— SNF472 (NqbIRb) a 1 mg/kg, subcutaneo

[0352] Grupo 4— SNF472 (NqbIRb) a 7,5 mg/kg, subcutaneo

[0353] Grupo 5— SNF472 (NqbIRb) a 15 mg/kg, subcutaneo

[0354] Grupo 6— SNF472 (NqbIRb) a 30 mg/kg, subcutaneo

[0355] Grupo 7— SNF472 (NqbIRb) a 45 mg/kg, subcutaneo

[0356] Grupo 8— Cilostazol (C ₂₀ H ₂₇ N ₅ O ₂ ) a 45 mg/kg, oral

[0357] Se indujo isquemia en las extremidades en los sujetos de los grupos 2-8 por administration subcutanea de 120.000 Ul/kg de vitamina D ₃ (colecalciferol, Duphafral D3 1000; Zoetis Inc., Parsippany, NJ, EE.UU.) en solucion salina fisiologica (2 ml/kg) todos los dias durante D1 a D3. A los sujetos control del grupo 1 se les administro solucion salina fisiologica (2 ml/kg) por via subcutanea todos los dias de D1 a D3 sin vitamina D ₃ .

[0358] A los sujetos en los grupos 1 y 2a se les administro solucion salina fisiologica (2 ml/kg) por via subcutanea todos los dias durante D1 a D12. A los sujetos del grupo

2b se les administro una solucion de sal de sodio de CMC al 5 % en agua (5 ml/kg) por via oral todos los dias durante D1 a D12. 2. Rescate de la isquemia y sus efectos sobre la perfusion sanguinea: Ensayo de imagenes con laser Doppler

[0359] A los sujetos en los grupos 1 y 2a se les administraron 2 ml/kg de solution salina fisiologica diariamente de D1 a D12 por via subcutanea. A los sujetos del grupo 2b se les administraron por via oral 5 l/kg de una solution de sal de sodio de CMC al 5 % en agua todos los dias de D1 a D12. Ademas, los sujetos en los grupos 3, 4, 5, 6 y 7 recibieron 1 g/kg, 7,5 g/kg, 15 g/kg, 30 g/kg y 45 g/kg de SNF472 (NqbIR _d , base libre: 600 g/mol) de sal de sodio (base libre 696,27 g/mol), respectivamente. El SNF472 se administro en solution salina fisiologica (2 l/kg) todos los dias desde D1 a D12 por via subcutanea. Los sujetos en el grupo 8 recibieron 45 g/kg de cilostazol por via oral (C20H27N5O2, base libre 369,46 g/mol; lote n.° LRAB9590, Sigma-Aldrich Corp., St. Louis, MO, EE.UU.) en una solution de sal de sodio de CMC al 5 % en agua (5 ml/kg) diariamente de D1 a D12.

[0360] En los dias en que se realizaron pruebas de perfusion sanguinea que implicaban el uso de agentes activos (es decir, D6 y D12), las dosis se administraron de la siguiente manera:

[0361] Grupos 3, 4, 5, 6 y 7— SNF472 (NqbIRb): 15 minutos antes de la lectura [0362] Grupo 8— Cilostazol (C20H27N5O2): 3 a 4 horas antes de la lectura

[0363] Segiin el esquema anterior, los agentes activos estarian en su concentration plasmatica maxima (Cmax) en el momento en que se tomaron las lecturas de prueba.

[0364] El estado de isquemia de las extremidades se evaluo durante el periodo de tratamiento (es decir, DO, D6 y D12) mediante imagenes de perfusion con laser Doppler en todas las ratas. Se calcularon la diferencia de perfusion y la relation de perfusion comparando la linea basal y cualquiera de las lecturas D6 y D12 para cada grupo. En particular, se calcularon la diferencia de perfusion y la relation de perfusion comparando las lecturas del grupo 1 (control) y (a) grupos 2a y 2b placebo (solution salina fisiologica, solution de sal de sodio de CMC al 5 %), (b) grupos 3, 4, 5, 6 y 7 (SNF472) y (c) grupo 8 (cilostazol).

[0365] El SNF472 ateniia la isquemia de las extremidades de la rata de una manera dependiente de la dosis. El tratamiento con cilostazol solo no fue efectivo en este modelo.

3. Efectos sobre la capacidad de deambulacion: Prueba de carrera en cinta rodante

[0366] El tiempo maximo de deambulacion (TMD) y la distancia maxima de deambulacion (DMD) se evaluaron en los grupos 1-8 mediante la prueba de camera en cinta rodante (8 a 12 animales por grupo y punto de tiempo) a DO, D5 y D10.

[0367] Los sujetos se aclimataron a la cinta durante dos dias antes de realizar la prueba. El primer dia, los sujetos se ejercitaron durante 5 a 10 minutos con una velocidad de la cinta rodante que variaba progresivamente de 15 m/min a 24 m/min. El segundo dia, los sujetos se ejercitaron inicialmente a una velocidad de 15 m/min durante los 5 minutos. A continuacion, se ejercitaron a 19,8 m/min (33 cm/s) durante 5 minutos adicionales. Finalmente, los sujetos se ejercitaron a 24 m/min (40 cm/s) durante un maximo de 30 minutos adicionales. Se obtuvieron registros preoperatorios de tiempo y distancia de deambulacion. Los animales que no cumplieron con el protocolo fueron excluidos de la prueba.

[0368] La funcion de las extremidades (TMD y DMD) se evaluo en los grupos 1 , 2, 3, 4, 5, 6 y 7 utilizando la prueba de camera en cinta rodante 15 minutos despues de la administration diaria correspondiente. La funcion de las extremidades en el grupo 8 se evaluo de 3 a 4 horas despues del tratamiento.

[0369] Segiin el esquema anterior, los agentes activos estarian a su concentration plasmatica maxima (Cmax) en el momento en que se tomaron las lecturas de la prueba de camera.

[0370] Los sujetos se mantuvieron corriendo durante 40 minutos o hasta que se agotaron (es decir, permanecen en la rejilla de choque durante cinco segundos seguidos). Se calcularon la DMD y la TMD para cada animal.

[0371] El SNF472 y el cilostazol mejoraron la capacidad de deambulacion en ratas en comparacion con el vehiculo. Ademas, el efecto de SNF472 sobre la mejora de la capacidad de deambulacion fue dosis-respuesta dependiente.

4. Contenido de calcio y calcificacion ICP-OES

[0372] Los sujetos fueron anestesiados y su sangre se obtuvo a D12. Los sujetos fueron sacrificados despues del desangrado. A continuacion, se realizaron sus necropsias y se recogieron las arterias de su corazon y la aorta. Los tejidos se liofilizaron durante 24 h y se pesaron. Los tejidos liofilizados se digirieron a continuacion usando una mezcla 1 :1 de HN0 ₃ :HCIC> ₄ en una incubadora de bano seco durante 2-4 h a 180 °C. Los tejidos digeridos se diluyeron posteriormente usando agua Milli-Q ultrapura (MilliporeSigma (Merck KGaA), Burlington, MA, EE.UU.) hasta un volumen final de 10 ml. El contenido de calcio en las muestras de tejido se cuantifico a traves de ICP-OES.

[0373] El SNF472 demostro ser eficaz contra la calcificacion cardiaca y vascular, tal como, por ejemplo, la calcificacion de las arterias del corazon y de la aorta, de una manera dependiente de la dosis. El cilostazol no fue activo contra la calcificacion a la misma dosis.

Ejemplo 6

Prevencion de la isquemia en las extremidades en un modelo de rata uremica inducida por adenina

Impacto de SNF472 en la perfusion sanguinea de las extremidades

[0374] Los efectos preventives de las dosis de SNF472 y cilostazol sobre la perfusion sanguinea y la calcificacion de tejidos se probaron usando un modelo relevante de rata con enfermedad renal cronica durante una duration de 21 dias.

[0375] La uremia y la isquemia de las extremidades en los animales se indujeron de D1 a D21 , excepto para el grupo control, al que no se le indujeron ni uremia ni isquemia. Los animales inducidos a isquemia fueron tratados con placebo y formulaciones de agente activo de D1 a D21 para evaluar su impacto en la prevencion de (a) isquemia de las extremidades y (b) calcificacion del tejido. Se tomaron observaciones en varios puntos durante la fase de tratamiento de D1 a D21. Todos los sujetos se pesaron todos los dias antes del tratamiento.

1. Induccion de uremia e isquemia en las extremidades

[0376] Se utilizaron sesenta y ocho ratas macho Sprague Dawley (SD) (Envigo Corp., Huntingdon, GB) que pesaban aproximadamente 250-275 g alimentadas con una dieta de pienso con alto contenido de fosforo (SM R, granulos de 10 mm, 1 ,06 % de Ca, 1 ,03 % de P) (SSNIFF Spezialdiaeten, Soest, DE) a voluntad. Los sujetos se dividieron en 6 grupos, de 8 a 12 animales por grupo, de la siguiente manera:

[0377] Grupo 1— Control (simulation)

[0378] Grupo 2a Placebo— Solucion salina fisiologica subcutanea, una vez al dia

[0379] Grupo 2b Placebo— Solucion salina fisiologica, subcutanea, bomba Alzet durante 4 semanas [0380] Grupo 3— SNF472 (NqbIRb) a 30 mg/kg, subcutaneo, una vez al dia

[0381] Grupo 4— SNF472 (NqbIRb) a 45 mg/kg, subcutaneo, una vez al dia

[0382] Grupo 5— SNF472 (NqbIRb) a una dosis total de 400 mg/4 semanas (100 mg/semana), subcutanea, se implanto una bomba Alzet durante 4 semanas a D1 antes de la administration de adenina

[0383] Grupo 6— Cilostazol (C ₂₀ H ₂₇ N ₅ O ₂ ) a 45 mg/kg/dia, oral, una vez al dia

[0384] La uremia y la isquemia de las extremidades se indujeron en los grupos 2-6 mediante una dosis diaria de adenina (500 mg/kg, suspendida en carboximetilcelulosa al 1 %, administrada por via oral) durante los primeros 10 dias, y a continuacion con una dosis de a-calcidol (100 ng/kg en aceite de oliva, administrado por via oral) tres veces por semana de D11 a D19, para acelerar y homogeneizar el desarrollo de la calcification cardiovascular y la isquemia.

[0385] El dia 21 , se sacrificaron los animales y se recogieron muestras de sangre y tejido. Los niveles de creatinina (Ref. n.° OSR6178) y urea (Ref. n.° OSR6134) en suero se determinaron usando el kit de ensayo Beckman Coulter correspondiente (Beckman Coulter, Inc., Brea, CA, EE.UU.).

[0386] A los animales control del grupo 1 se les administro una solucion de carboximetilcelulosa al 1 % (5 ml/kg) por via oral todos los dias de D1 a D10 y a continuacion se les administro aceite de oliva por via oral tres veces por semana de D11 a D19. En el grupo control no se indujo ni uremia ni isquemia.

2. Rescate de la isquemia y sus efectos sobre la perfusion sanguinea: Ensayo de imagenes con laser Doppler

[0387] Los sujetos en los grupos 2a recibieron solucion salina fisiologica (2 ml/kg) por via subcutanea dos veces al dia durante 21 dias. A los sujetos del grupo 2b se les administro solucion salina fisiologica por via subcutanea durante 4 semanas utilizando una bomba Alzet.

[0388] Ademas, a los animales en los grupos 3 y 4 se les administro por via subcutanea dos veces al dia 30 mg/kg y 45 mg/kg de SNF472 (NqbIRb, base libre: 600 g/mol) de sal de sodio (base libre 696,27 g/mol), respectivamente. El SNF472 se administro en solucion salina fisiologica (2 ml/kg) dos veces al dia desde D1 a D21 por via subcutanea. A los animales del grupo 5 se les administro SNF472 a una solucion salina fisiologica disuelta de 400 mg/4 semanas mediante una bomba Alzet subcutanea durante 4 semanas. [0389] A los animales en el grupo 6 se les administro oralmente 45 g/kg de cilostazol (C20H27N5O2, base libre 369,46 g/mol; lote n.° LRAB9590, Sigma-Aldrich Corp., St. Louis, MO, EE.UU.) en una solution de sal de sodio de CMC al 5 % en agua (5 ml/kg) diariamente de D1 a D21.

[0390] En los dias en que se realizaron pruebas de perfusion sanguinea que implicaban el uso de agentes activos (es decir, D10, D17 y D21), las dosis se administraron de la siguiente manera:

[0391] Grupos 3 y 4— SNF472 (NqbIRb): 15 minutos antes de la lectura

[0392] Grupo 6— Cilostazol (C20H27N5O2) : 3 a 4 horas antes de la lectura

[0393] Segiin el esquema anterior, los agentes activos estarian en su concentration plasmatica maxima (Cmax) en el momento en que se tomaron las lecturas de prueba.

[0394] El estado de isquemia de las extremidades se evaluo durante el tratamiento (es decir, DO, D10 y D17 y D21) en todas las ratas mediante imagenes de perfusion con laser Doppler. Se calcularon la diferencia de perfusion y la relacion de perfusion comparando la linea basal y las lecturas D10, D17 y D21 para cada grupo. En particular, se calcularon la diferencia de perfusion y la relacion de perfusion comparando las lecturas del grupo 1 (control) y (a) grupos 2a y 2b placebo, (b) grupos 3, 4 y 5 (SNF472) y (c) grupo 6 (cilostazol).

[0395] El SNF472 atenuo la isquemia en la extremidad de la rata en ratas uremicas de una manera dependiente de la dosis. El tratamiento con cilostazol solo no fue efectivo en este modelo.

3. Contenido de calcio y calcificacion ICP-OES

[0396] Los sujetos fueron anestesiados y su sangre se obtuvo a D21. Los sujetos fueron sacrificados despues del desangrado. A continuacion, se realizaron sus necropsias y se recogieron las arterias de su corazon y la aorta. Los tejidos se liofilizaron durante 24 h y se pesaron. Los tejidos liofilizados se digirieron a continuacion usando una mezcla 1 :1 de HN0 ₃ :HCIC> ₄ en una incubadora de bano seco durante 2-4 h a 180 °C. Los tejidos digeridos se diluyeron posteriormente usando agua Milli-Q ultrapura (MilliporeSigma (Merck KGaA), Burlington, MA, EE.UU.) hasta un volumen final de 10 ml. El contenido de calcio en las muestras de tejido se cuantifico a traves de ICP-OES.

[0397] El SNF472 demostro ser eficaz contra la calcificacion cardiaca y vascular en ratas uremicas, como, por ejemplo, en la calcificacion de las arterias del corazon y la aorta, de una manera dependiente de la dosis despues de la dosificacion subcutanea diaria y/o administrada por la bomba Alzet en comparacion con el placebo. El cilostazol no fue activo contra la calcification a la misma dosis.