La présente invention concerne de nouvelles amidines ayant une activité anti-hypertensive et qui peuvent être utilisées notamment dans le traitement des hypertensions oculaires telles que le glaucome. Les phénomènes d'hypertension oculaire sont liés principalement à un déséquilibre entre le débit de formation et le débit d'écoulement de l'humeur aqueuse.

L'humeur aqueuse est produite par le corps ciliaire; elle passe dans la chambre postérieure, tra- verse la pupille et arrive dans la chambre antérieure où elle gagne la périphérie pour atteindre l'angle iridocornéen. Le sommet de cet angle est occupé par un tissu conjonctif à larges mailles: le trabeculu . A ce niveau, l'humeur aqueuse s'infiltre entre les mailles de celui-ci, est collectée dans le canal de Schlemm, puis gagne par les veines aqueuses la circulation ^' vei¬ neuse épisclérale et enfin la circulation générale.

Chez les sujets atteints de glaucome, ^' le taux d'élimination de l'humeur aqueuse est réduit; il en ré- suite une accumulation d'humeur aqueuse et une hyper¬ tension oculaire.

En l'absence de traitement, cette pression éle¬ vée peut interférer avec la circulation sanguine au ni¬ veau des fibres nerveuses de la rétine et du nerf optique entraînant la destruction du nerf optique et la cécité. Parmi les substances couramment utilisées dans le traitement du glaucome, on peut citer à titre d'exemples :

- les cholinergiques , tels la pilocarpine; - les inhibiteurs de l'anhydrase carbonique, tels l'acétazolamide;

- les adrénergiques, tels l'adrénaline, agoniste α et β non sélectif et le timolol, svmpatholytique β non sélectif.

Différentes études ont montré que l'administra ^¬ tion par voie topique de substances stimulant les récep ^¬ teurs adrénergiques de type σ< -, ,telles la clonidine et l'c* -méthyl adrénaline,entraînait une diminution de la pres¬ sion intraoculaire (ALLEN R.C.,Invest. Ophthal ol.,15, (10) , 815, 1976 : KRIEGLSTEIN G.K. ,Invest. Ophthalmol.Vis. Sci. 1_7 (2) , 149, 1978 ; HODAPP E. ,Arch. Ophthalmol. ,9_9_ , 1208, 1981 ; LANGHAM M.E. Invest.Ophthalmol. is.Sci.ARVO suppl. ,22,230,1982) .

Par son action sur le système nerveux central la clonidine ^" présente des effets secondaires gênants à cô¬ té de son action sur la pression intraoculaire.

Par ailleurs,dans les BSM 8175 et 7689,on a décrit des amidines de type benzylidène amino guanidine pour le traitement général de l'hypertension artérielle.Ces com¬ posés présentent une composante sédative par leur action sur le système nerveux central.

La présente invention est basée sur la découverte de nouvelles amidines ayant une activité adrénergique oC stimulante et pratiquement dépourvues d'action sur le sys¬ tème nerveux central,qui peuvent être utilisées comme anti- hypertenseurs,notamment dans le domaine oculaire.

La présente invention a ainsi pour objet des com¬ posés de formule

dans la elle ^* :

R. _j et R ₂ représentent,indépendamment l'un de l'autre, un atome ^, d'hydrogène,- un groupe alkyle en C..-C,- ou un

I D groupe hydroxy,ou Lien R et R ₂ forment ensemble un radi- cal bivalent éthylène ou triméthylène ;

R-, représente un atome d'halogène,un groupe alkyle en ^c ι ^~C ' ^{u n} groupe a lcoxy

OM?ï

en C -C ₄ , un groupe alkyle en -C ₄ mono- ou polyhydro¬ xylé, un groupe amino, un groupe mono- ou di-alkyl (C ₁ -C _d ) amino, un groupe ac tamido ou sulfonamido;

R. représente un groupe hydroxy, un groupe al¬ kyle (C -C.) mono- oμ polyhydroxylé, un groupe amino,un groupe mono- ou di-alkyl (C..-C ) amino,un groupe acetamido ou suifona ido,R^ étant en position 3,4 ou 5 ; _. et

^• A représente un pont ayant de 1 à 3 chaînons ' • - , .

Rg désignant un atome d' ydroqène, un groupe alkyle en ^C l- ^C ₄ > ^un groupe hydroxy ou un groupe alkoxy en C.-C , ainsi que leurs sels d'addition avec des acides pharma¬ ceutiquement acceptables.

La présente invention a également pour objet des compositions thérapeutiques contenant à titre de prin¬ cipe actif un composé de formule I ou l'un de ses sels d'addition avec des acides pharmaceutiquement acceptables. Dans la définition ci-dessus, on désigne par "sels d'addition avec des acides pharmaceutiquement acceptables", les sels qui possèdent les propriétés biologiques des bases libres, sans avoir d'effet indé- sirable. Ces sels peuvent être notamment ceux formés avec des acides minéraux tels que l'acide chlorhydrique, l'acide bromhydrique, l'acide sulfurique, l'acide ni¬ trique, l'acide phosphorique, des sels métalliques acides, tels que 1Orthophosphate disodique et le sul- fate monopotassique et des acides organiques, tels que l'acide for ique, l'acide acétique, l'acide propionique, l'acide glycolique, l'acide oxalique, l'acide fumarique, l'acide citrique, l'acide alique, l'acide tartrique et l'acide pamoïque. Le terme "halogène" désigne le chlore, le brome ou l'iode.

Le pont A, qui a essentiellement une fonction de liaison peut être notamment choisi parmi les groupes suivants :

a - un groupe de formule

- C = N - NH- I

^R 5 dans laquelle R,- a la signification donnée ci-dessus b - un groupe de formule -C H- - avec n de 1 à

3, tels que les groupes méthylène, thylène, triméthy- lène, éthylidène, c - un groupe de formule -0--C H, - avec n = 1 ou 2, d - le groupe -Ç-O-CH,-

Ô e - un groupe de formule -C H-, -NH- avec n de O à 2, f - le groupe -CH ₂ -NH-NH- g - un groupe de formule -(C H_ .OH}- avec n de

1 à 3, tels les groupes hydroxy-méthylène et hydroxy- éthylène, h - le groupe thio -S- i - un groupe de formule -(CH ) -CH = N- avec n = O ou 1 , j - un groupe de formule -(CH-) -NH-CH-- avec n = O ou 1 , k - un groupe de formule -CH ) -C-NH- avec n = O ou 1 , O 1 ^" - le groupe -CH _^ -O-CH--

Une classe préférée de composés de formule I est formée par les composés de formule

dans laquelle . et R„ représentent chacun un atome d'hydrogène

OMET

ou forment ensemble un radical bivalent ethylène,

R_ représente un atome d'halogène, un groupe méthy le, un gro up e méthoxy, un groupe amino, un groupe acetamido ou un groupe sulfonamido, R, représente un groupe hydroxy,

* ^• un groupe amino, un groupe acetamido ou un groupe sulfonamido, et

Rr représente un atome d'hydrogène ou un groupe méthyle, ainsi que leurs sels d'addition avec des acides pharma¬ ceutiquement acceptables.

Les composés de formule I peuvent être préparés, d'une manière générale par réaction d'un composé ben- zénique de formule

avec une amidine ^" de formule

z ₂ - C (IV)

^NH-R ₂

R. , R ₂ , R.. et R. ayant la signification donnée précé¬ demment et Z. et Z_ étant des groupes donnant par réac- tion un groupe A, ou bien par transformation d'un com¬ posé de formule

R-, et . ayant la signification donnée précédemment et Z étant un groupe transformable en un groupe -C _. en un composé de formule I.

Ainsi pour préparer les composés de formule I, dans laquelle A est un groupe -C=N-NH- on peut faire réagir

*5

6 . un aldéhyde ou une cétone de formule

dans laquelle R ₃ , R . et R ont les significations don¬ nées ci-dessus, avec un composé de formule

dans laquelle R. et R_ ont les significations données ci-dessus, ou l'un de ses sels.

En particulier, dans le cas où R.. et ₉ ne for¬ ment pas cycle, la réaction peut être effectuée en solution dans du n-butanol en présence d'un acide con¬ centré tel que l'acide chlorhydri ue, l'eau du sous- produit étant éliminée par voie azéotropique.

On' peut également faire réagir un composé de for¬ mule VII sur la cétone ou 1'aldéhyde de formule VI par chauffage dans la pyridine.

Dans_le cas où R.. et R„ forment un cycle, les réactions connues par l'homme de l'art pour la synthèse des hydrazones peuvent être utilisées. Ainsi, on peut faire réagir l'aldéhyde ou la cétone de formule VI avec un. composé cyclique de formule VIIen portant à reflux des quantités équimolaires des composés en solution alcoolique, en présence d'un catalyseur acide tel que l'acide acétique ou l'acide chlorhydrique. On peut éga¬ lement faire réagir dans les mêmes conditions un sel de composé cyclique de formule VII, tel que le bromhydrate ou le chlorhydrate.

Pour préparer les composés de formule I, dans laquelle —A est un group^e -CnH_2n- , -O-CnH2_n- ou -Cn-0-CH-2-

tels que définis en b , c et d ci-dessus , on peut faire réagir l ' éthanol sur un nitrile de formule

pour former un composé de formule

puis ^' on fait réagir sur le composé IX 1'éthylènediamine, la triméthylène diamine ou une a iné de formule NH_ ₂ ou l'un de ses sels, par exemple un chlorure.

En outre, pour préparer des composés de formule I, dans laquelle A est un groupe -OCH ₂ ~ , on peut faire réagir sur un phénol de formule

dans laquelle , et R. ont les significations données ci-dessus, un dérivé chloré de formule

_/ N -_5R„ Cl - CH- - C (XI) NH - ₁

dans laquelle R ₁ et R~ ont les significations données ci-dessus.

Pour préparer des composés de formule I dans laquelle A est un groupe -C H„ -NH- ou le groupe -CH ₂ ~NH-NH- tels que défini en e et f ci-dessus, on peut faire réagir un composé de formule

dans laquelle R-, et , ont les significations données ci-dessus avec une S-alkyl-isothiourée de formule

/* ^' * ^*

R - S - C^ (XIII)

NH - R ₂

dans laquelle R ₁ et R- ont les significations données ci-dessus et R représente un groupe alkyle en C. ou C_,

Pour préparer des composés de formule I dans laquelle A est un groupe -(C H_ _ ₁ ~OH) tel que défini en g ci-dessus, on peut faire réagir sur un composé de formule

^(C n ^H 2n- ^0H) - ^C00H (XIV)

dans laquelle R.. et R. ont les significations données ci-dessus avec 1'ethylène diamine ou la triméthylène diamine. Pour préparer des composés de formule I dans laquelle A est un groupe -S- on peut effectuer un cou¬ plage oxydâtif d'un composé de formule

dans laquelle R-, et R. ont les significations données ci-dessus avec une thiourée de formule

NH- _Rl S = C . (XVI)

'NH-R,

dans laquelle R ₁ et R- ont les significations données ci-dessus .

Pour préparer les composés de formule I dans laquelle A est un groupe -(CH-) -CH = N- tel que défini en i. ci-dessus, on peut faire réagir sur un aldéhyde de formule

dans laquelle R- et R ont les significations données

•3 A ci-dessus et n = 0 ou 1 , avec un composé de formule

N - ,

H ₂ N - C (XVIII) H - ,

dans laquelle ₁ et R_ ont les significations données ci-dessus.

Pour préparer des composés de formule I dans laquelle A est un groupe -(CH-) -NH-CH ₂ ~ tel que défini en j_ ci-dessus, on peut faire réagir un composé de formule

^R 3

(CH ₂ ) _n -NH ₂ (XIX)

dans laquelle R., et R. 'ont les significations données ci-dessus et n = O ou 1,avec un dérivé chloré de for¬ mule XI tel que défini précédemment.

Pour préparer des composés de formule I dans laquelle A est un groupe -(CH-) _n -CO-NH-,tel que défini en k ci-dessus, on peut faire réagir sur un composé de formule

dans laquelle R, et R ₄ ont les significations données ci-dessus et n ≈ O ou 1 , 1'ethylène diamine,la triméthylè- nediamine ou une aminé de formule KN„R_.

Le composé de formule XX peut être obtenu à partir d'un chlorure d'acide

par réaction avec 1'isothiocyanate d'ammonium, puis méthylation.

Pour préparer les composés de formule I dans laquelle A est le groupe -CH--0-CH ₂ ~ , on peut faire réagir un chlorure de benzyle de formule

dans laquelle ^ et R. ont les significations données ci-dessus avec un composé de formule

- HO - CH ₂ - C ^* - ^R - . (XXIII)

NH - R-

dans laquelle et R ₂ ont les significations données ci-dessus.

Les sels d'addition avec des acides pharmaceu¬ tiquement acceptables peuvent être préparés de manière classique par réaction des bases libres avec un acide ou un sel, notamment en solution dans un alcool.

On donnera ci-après dans le Tableau I des exem¬ ples de composés selon la présente invention. Ces compo¬ sés ont été préparés selon les modes opératoires sui- vants :

Mode opératoire A -

Des quantités équimolaires d'aldéhyde ou de cétone VI et de bromhydrate d'hydrazino-2 imidazoline sont portées à reflux dans du methanol en présence d'une quan¬ tité catalytique d'acide acétique pendant une durée qui peut varier de 15 minutes à 2 heures.Après refroidisse¬ ment,!'hydrazone formée est isolée après barbotage d'am¬ moniac dans la solution méthanolique,suivi de 1' vapora- tion sous vide du methanol.Le produit brut est transfor¬ mé en chlorhydrate par barbotage d'acide chlorhydrique ^' gazeux dans une solution alcoolique de la base.Le sel brut est recristallisé dans un mélange méthanol-éther diéthylique. Mode opératoire B - 0,1 mole d'aldéhyde ou de cétone VI,0,1 mole de bicarbonate d'aminoguanidine, 10 ml d'acide chlorhydri¬ que concentré et 50 ml de n-butanol sont portés à reflux dans un ballon surmonté d'un piège Dean Stark pendant 3 heures.Après évaporation sous vide du solvant,le résidu est trituré dans une solution d'éther éthylique saturée en acide chlorhydrique gazeux.Les cristaux bruts obtenus sont recristallisés dans un mélange méthanol-éther diéthylique.

TABLEAU I

COMPOSES DE FORMULE II

O PI

TABLEAU I (Suite)

I | Eusion

! Mode ! Rende- l (°C)

Composé

^R 1 ^R 2 ^R 3 R _^ opéra- ment

^R i ^du i toire (%) ;chlorhy-

! i drate

H H CH- OH H 51 205-7

H H CH_ NH,. H 62 254-256

H H OCH- OH H B 45 21 9-221

10 H H CH. OH CH- B 50 168-70

1 1 H H CCH. OH H. B 55 1 93-1 95

Les exemples suivants illustrent également la pré¬ sente invention .

- Préparation du chlorhydrate de 2 -méth 1-4 -hydroxy— anilino- 2-imidazoline (Composé 1 2 )

Des quantités équimolaires de 4-amino- m-crésol et d'iodhydrate de 2-thioéthyl—2-imidazoline sont chauffées à re¬ flux dans l'éthanol pendant 96 heures. Après refroidissement, la solution éthanolique est basifiée par addition d'ammoniac. Après evaporation sous vide du solvant, le résidu huileux est lavé avec de l'éther diéthylique, puis dissous dans l'acétone. Le chlorhydrate obtenu par addition d'une solution éthérée saturée d'acide chlorhydrique gazeux est recristallisé dans un mélange acétone-acétate d'éthyle. F = 202-204°C.

- Préparation du chlorhydrate de 2-méthyl-4-hydroxy-anilino- méthyl-2-imidazoline (Composé 13)

Deux moles de 4-__rr_ύr>m-crésol et 1 mole de chlorhy- 5 drate de 2-chlorméthyl—2-imidazoline sont portées à reflux dans l'éthanol absolu pendant 3 heures. Après refroidisse¬ ment, on essore la fraction insoluble et on évapore sous vide la solution éthanolique. Le résidu d'evaporation est recristallisé dans un mélange méthanol-éther diéthylique. û F = 205-207°C.

On donnera ci-après des résultats des études biochimiques, pharmacologiques et toxicologiques mettant en évidence les propriétés des composés de formule I.

1. Affinité pour le récepteur adrénergique _? 5 plaguettaire

Les composés de formule I ont été testés sur le récepteur adrénergique plaquettaire de lapin qui est exclusivement de type α ^' (MICHEL T., Nature, 288, (5792) 709, 1980) . 0 L'affinité de ces composés pour le récepteur _ est déterminée en mesurant 1'inhibition de la liaison spécifique de la dihydroergocryptine (DHΞ) tritiée par les composés testés.

Les lapins utilisés sont des lapins albinos 5 mâles Néo-Zélandais.

On prélève en intracardiaque du sang sur ACD (anticoagulant constitué par une solution aqueuse con¬ tenant 0,27 g d'acide citrique, 0,5 g de citrate tri- sodique et 0,02 g de glucose pour 20 ml d'eau) à raison de 1 volume d'ACD pour 6 volumes de sang.

Le sang est centrifugé 10 minutes à 280g et le surnageant (PRP) est collecté. Le PRP est centrifugé 15 minutes à 2000g.

OMPI

Le culot plaquettaire est lavé deux fois dans le tampon I (Tris 50 mM, NaCl 150 mM, EDTA 20 mM, pH 7,5) puis remis en suspension dans le tampon II (Tris 50 mM, EDTA 5 M, pH 7,5). Cette suspension est congelée à -40°C, puis décongelée; le processus est répété deux fois. La sus¬ pension est ensuite homogénéisée, puis centrifugée 10 minutes à 40.000g, à 4°C.

Le culot est lavé dans le tampon II puis remis en suspension dans ce même tampon de telle sorte que la concentration finale en protéines soit de l'ordre de 1,5 mg/ml.

Les essais d'inhibition sont effectués dans un volume final de 0,2 ml de tampon II contenant la DHE tritiée (7 nM) et des concentrations variables de com¬ posé testé.

La réaction est initiée en ajoutant 0,2 mg de protéines et poursuivie pendant 30 minutes à 25"C.

L'incubation est arrêtée en ajoutant 2 ml de tampon II et en filtrant rapidement ce mélange sous vide sur filtres hatman GF/C. Les filtres sont lavés rapi¬ dement par du tampon II et la radioactivité liée au filtre est mesurée en scintillation liquide.

La dose nécessaire pour inhiber 50 pour cent de la liaison de la DHE tritiée (EC _5Q ) est calculée pour chacun des composés testés.

Les résultats sont donnés dans le Tableau sui¬ vant.

. TABLEAU II

2. Activité hypotensive chez le lapin après administration topique

Les expérimentations ont été faites sur des lapins mâles Néo-Zélandais de 2 kg, nourris et abreuvés "ad libitum".

Les animaux sont habitués quelques jours à l'a¬ nimalerie, conditionnés à la stabulation en boîte à con¬ tention et à la prise de mesure de pression intraoculaire, afin d'éviter des écarts de tension dus au stress de la manipulation.

La pression intraoculaire est mesurée "à l'aide d'un pneumatonographe à aplanation ALCON, calibré à l'ai¬ de d'une cornée de lapin isolée, sous pression d'eau.

Les composés ont été testés en solution aqueuse, isotonique et à pH 7. 25μl d'une solution à 0,5 % sont instillés dans un oeil et la pression intraoculaire mesu¬ rée au cours du temps.

Le Tableau ci-après donne l'abaissement maximum de la pression intraoculaire (Δ max) par rapport à la valeur de base au temps zéro (moment de l'instillation) , le temps correspondant à cet effet maximum (t) , ainsi que la durée totale de l'effet.

TABLEAU III

Dans les mêmes conditions expérimentales , la clonidine (2 ,6-dichloro-anilino-2-imidazoline) ainsi que la (2, 6-dichloro-benzilidène-hydrazino) -2-imidazoline (composé de l'exemple 1 du BSM 8175) provoquent une hypertension dans l'oeil traité et un abaissement concomitant de la pression dans l'oeil contralatéral, ce dernier effet met¬ tant en évidence une action au niveau du système nerveux central. Ce phénomène est absent avec les composés de formule I.

3. Toxicité aiguë

Les souris utilisées sont des souris mâles de souche Swiss (NMRI-Han) , d'un poids moyen de 25 g.

L'étude de la toxicité aiguë a été réalisée par- voie intrapéritonéale.

Les composés ont été injectés en solution aqueuse à trois doses : 50, 100 et 200 g/kg.

Le tableau ci-après donne les résultats obtenus avec les composés de formule I, après un délai d'obser¬ vation de 48 heures.

Ces résultats .sont exprimés en nombre d'animaux morts sur le nombre total d'animaux traités.

TABLEAU IV

Les compositions thérapeutiques selon l'invention peuvent être administrées à l'homme ou aux animaux par voie topique, orale ou parentérale.

Elle peuvent être sous la forme de préparations solides, semi-solides ou liquides. Comme exemples, on peut citer les comprimés, les gélules, les suppositoires, les solutions ou suspensions injectables, les pommades, les collyres huileux ou aqueux, les collutoires, les solutions nasales et otologiques, ainsi que les formes retard. Une forme préférée est constituée par les col¬ lyres et les implants ophtalmiques.

O H

Dans ces compositions, le principe actif est gé¬ néralement mélangé avec un ou plusieurs excipients phar¬ maceutiquement acceptables habituels bien connus de 1'homme de 1'art. Les compositions thérapeutiques administrables par voie topique peuvent contenir notamment de 0,1 à 5 % en poids de principe actif.

Les compositions thérapeutiques "administrables par voie orale ou parenterale peuvent contenir notamment de 1 à 60 % en poids de principe actif.

La quantité de principe actif administrée dépend évidemment du patient qui est traité, de la voie d'ad¬ ministration et de la sévérité de la maladie. Cependant, pour l'administration par.voie orale ou parenterale, on peut administrer environ de 0,1 à 10 mg/kg/jour, soit chez un homme de 100 kg de 10 mg à 1 g/jour.