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Title:
PREPARATION METHOD OF TRIHYDROXYETHYL RUTOSIDE
Document Type and Number:
WIPO Patent Application WO/2014/187364
Kind Code:
A1
Abstract:
The present invention relates to a preparation method of trihydroxyethyl rutoside. In the method, rutin is firstly prepared into 7-monohydroxyethyl rutoside in a content of greater than or equal to 98% by weight, and then 7-monohydroxyethyl rutoside is hydroxyethylated continuously to obtain troxerutin having the impurity of non hydroxyethylated rutoside derivatives less than 2%. The content of 7,3',4'-trihydroxyethyl rutoside in the troxerutin is above 80% by weight. The product is further refined, and the 7,3',4'-trihydroxyethyl rutoside in a content of greater than or equal to 98% by weight could be obtained.

Inventors:
LI SI (CN)
LIANG XUTONG (CN)
LI DAPENG (CN)
Application Number:
PCT/CN2014/078322
Publication Date:
November 27, 2014
Filing Date:
May 23, 2014
Export Citation:
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Assignee:
JINAN XINLITE TECHNOLOGY CO LTD (CN)
International Classes:
C07H1/00; C07H17/07
Foreign References:
US3420815A1969-01-07
CN1331697A2002-01-16
US4153788A1979-05-08
CN1814613A2006-08-09
CN1554353A2004-12-15
CN102924546A2013-02-13
CN101891784A2010-11-24
BG62888B12000-10-31
CN1331697A2002-01-16
US6855697B12005-02-15
US3420815A1969-01-07
CN1554353A2004-12-15
CN1814613A2006-08-09
CN200810007927A2008-02-20
US4153788A1979-05-08
US3430815A1969-03-04
Other References:
See also references of EP 3000818A4
JUN LI ET AL.: "Separation of troxerutin as reference substance by preparative liquid chromatography", CHINESE JOURNAL OF PHARMACEUTICALS, vol. 35, no. 5, 2004, pages 285 - 287
Attorney, Agent or Firm:
BEIJING HUAKE UNION PATENT OFFICE(GENERAL PARTNERSHIP) (CN)
北京华科联合专利事务所(普通合伙) (CN)
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Claims:
权利要求书

1、 一种三羟乙基芦丁的制备方法, 其特征在于, 将芦丁羟乙基化 制成 7-单羟乙基芦丁,纯化后,再将 7-单羟乙基芦丁继续羟乙基化制 成三羟乙基芦丁。

2、 权利要求 1所述的制备方法, 其特征在于, 包括以下歩骤:

1 ) 将芦丁制备成 7-单羟乙基芦丁,

2) 对 7-单羟乙基芦丁进行纯化,

3 ) 用纯化后的 7-单羟乙基芦丁制备三羟乙基芦丁,

4) 对三羟乙基芦丁进行纯化。

3、 权利要求 1所述的制备方法, 其特征在于,

其中所述对 7-单羟乙基芦丁进行纯化, 是将其纯化到 95%以上的纯 度, 再进行投料。

4、 权利要求 1所述的制备方法, 其特征在于,

其中所述对 7-单羟乙基芦丁进行纯化, 是将其纯化到 98%以上的纯 度, 再进行投料。

5、 权利要求 1所述的制备方法, 其特征在于,

其中所述对 7-单羟乙基芦丁进行纯化, 是将其纯化到 99%以上的纯 度, 再进行投料。

6、 权利要求 1所述的制备方法, 其特征在于,

其中, 歩骤 1 ) 的 7-单羟乙基芦丁的制备, 制备过程中, 芦丁用 羟基保护试剂对羟基进行保护,然后加入羟乙基化试剂在溶剂中进行 反应, 其中, 羟基保护剂为硼砂, 羟乙基化试剂为环氧乙垸,反应溶剂 选自: 水、 甲醇、 乙醇, 反应温度为 30-50°C, 反应时间为 4-12小时; 其中, 歩骤 2) 的 7-单羟乙基芦丁纯化采用重结晶法, 重结晶溶 剂选自: 水、 甲醇、 乙醇、 异丙醇或它们的混合物, 重结晶的歩骤包 括: 溶解, 析晶, 过滤的过程;

其中, 歩骤 3 )用纯化的 7-单羟乙基芦丁制备三羟乙基芦丁, 制 备过程中, 7-单羟乙基芦丁分散或溶解于溶剂后, 加入羟乙基化试剂 进行反应, 其中, 羟乙基化试剂为环氧乙垸,反应溶剂选自: 水、 甲 醇、 乙醇、 吡啶或它们的混合物, 催化剂选用氢氧化钠、 氢氧化钾、 及氨水, 反应温度为 50-80°C, 反应时间为 3-8小时, 反应完成后, 分别过阳离子树脂和过阴离子树脂, 或用大孔树脂处理;

其中所述过阳离子树脂和过阴离子树脂, 阳离子树脂选自: 强酸 性苯乙烯系阳离子交换树脂, 如 007X7(732)、 001X12、 00lXl4、 001X16,阴离子树脂选自: 强碱性苯乙烯系阴离子交换树脂, 如 201X4 (711 )、 201X7 (717)。

所述的大孔树脂, 选自弱苯乙烯类非性大孔树脂, 如 D101、 上 试 101、 上试 102及弱极性大孔树脂如 DA、 DAB-8、 D301。

其中, 歩骤 4 ) 所述纯化采用重结晶法, 重结晶溶剂选自: 水、 甲醇、 乙醇、 异丙醇或它们的混合物, 重结晶的歩骤包括: 溶解, 析 晶, 过滤的过程。

7、 权利要求 6所述的制备方法, 其特征在于,

其中, 歩骤 1 ) 的 7-单羟乙基芦丁的制备, 其中, 羟基保护剂为 硼砂, 羟乙基化试剂为环氧乙垸, 反应溶剂选自: 水、 甲醇、 乙醇, 反应温度为 30-50°C, 反应时间为 4-12小时;

其中, 歩骤 2) 的 7-单羟乙基芦丁纯化采用重结晶法, 重结晶溶 剂选自: 水、 甲醇、 乙醇或它们的混合物;

其中, 歩骤 3 )用纯化的 7-单羟乙基芦丁制备三羟乙基芦丁, 其 中, 羟乙基化试剂为环氧乙垸, 反应溶剂选自: 水、 甲醇、 乙醇或它 们的混合物, 反应温度为 50-80°C, 反应时间为 3-13小时, 反应完成 后, 分别过阳离子树脂和过阴离子树脂脱盐, 或经过大孔树脂除杂; 其中, 歩骤 4) 所述纯化采用重结晶法, 重结晶溶剂选自: 水、 甲醇、 乙醇或它们的混合物。

8、 权利要求 1所述的制备方法, 其特征在于, 在芦丁的羟乙基化 产物中, 非芦丁羟乙基化衍生物含量小于 2%。

9、 权利要求 1所述的制备方法, 其特征在于, 最终产物三羟乙基 芦丁中, 杂质含量小于 2%。

10、 权利要求 1所述的制备方法, 其特征在于, 最终产物三羟乙基 芦丁中, 杂质含量小于 1%。

Description:
三羟乙基芦丁的制备方法

技术领域

本发明涉及一种药物化合物的制备方法,特别 涉及一种三羟乙基 芦丁的制备方法。

背景技术

曲克芦丁 (Troxemtin) 也称: 维脑路通, 其主要成分的化学名 称为 7,3',4'-三羟乙基芦丁(简称三羟乙基芦丁), 分子式 C 33 2 0 19 , CAS NO. 7085-55-4, 分子量: 742.69, 结构式如下:

曲克芦丁是一种抗凝血药及溶栓药,其制备通 常以芦丁与环氧乙 垸为原料, 以甲醇与水为介质, 在碱催化剂存在下合成曲克芦丁。 目 前市场上有现成的曲克芦丁原料药出售,其含 量包括 60%, 80%, 88% 的不同含量规格。

曲克芦丁中三羟乙基芦丁是其活性成分,其含 量越高,质量越好, 但现有技术在制备纯度高的曲克芦丁方面, 技术手段不理想。

目前上市的曲克芦丁产品包括, 曲克芦丁注射剂, 曲克芦丁口服 溶液, 曲克芦丁胶囊。 其中特别是注射制剂, 由于现有技术制备的曲 克芦丁纯度不理想, 存在的杂质给临床用药带来较大的安全隐患, 事 实上, 注射用药时副反应高发, 通常以过敏反应为主, 因此提高曲克 芦丁纯度, 特别是得到纯度高的主要有效成分三羟乙基芦 丁, 一直是 众多研究者努力的方向。

目前曲克芦丁的制备工艺都是一歩反应法,即 将芦丁直接进行羟 乙基化完成反应, 根据羟乙基化工艺的不同, 如羟乙基化试剂、 反应 溶剂、 催化剂、 反应条件控制等因素的变化, 形成了多种工艺, 如:

1、 专利 BG2888B1中, 采用水做溶剂, 氨水做催化剂, 环氧 乙垸做羟乙基化试剂,得到纯度为 85.8%的三羟乙基芦丁。

2、 专利 CN1331697 (US6855697 ) 中, 采用水做溶剂, 金属 碱做催化剂, 环氧乙垸做羟乙基化试剂, 通过控制结晶条 件, 得到了纯度 92%的三羟乙基芦丁。

3、 专利 US3420815中, 采用氢氧化钠作催化剂, 得到曲克芦 丁的色谱纯度为 87.4%, 含量 85.3%, 熔点为 181-183°C,。

4、 专利 CN1554353中, 采用有机溶剂(甲醇、 乙醇)做溶剂, 吡啶作催化剂, 得到了含量 90%的三羟乙基芦丁。

5、 专利 CN1814613中, 采用树脂控制反应液 pH值, 得到了 含量 85%的三羟乙基芦丁。

难以得到单体三羟乙基芦丁的原因之一是芦丁 有四个活性羟基, 都会被羟乙基化, 所得反应产物是一个混合物。另一个重要原因 是天 然来源的芦丁与其杂质在结构上极为相似, 造成芦丁的纯化困难, 常 规方法很难得到高纯度的芦丁, 在专利 CN200810007927.2公开一种 芦丁的纯化方法, 采用复杂的逆流色谱法, 才得到了克量级的, 纯度

98%的芦丁, 实际上目前制备曲克芦丁都是用纯度较低的市 售芦丁作 为原料, 这些原料所含的杂质也会参加羟乙基化反应, 在最终产物中 与三羟乙基芦丁性质同样极为相似, 难以清除。 实际上, 高纯度三羟 乙基芦丁的制备十分困难, 除制备色谱法【李军等, 曲克芦丁对照品 的制备液相色谱法分离, 中国医药工业杂质, 2004,35 (5 ), 285-7】 得到过 99%的三羟乙基芦丁对照品外,采用常规方法制 备 98%以上的 三羟乙基芦丁单体未见报道, 即使市场上有售宣称含有 99%的产品, 但其制备方法也未公开, 也无产品供应, 采用现有技术即使多次溶剂 重结晶制备的三羟乙基芦丁对照品, 其色谱纯度也仅为 96— 97%。

为解决现有技术中存在的问题,本发明提供一 种杂质含量低的曲 克芦丁的制备方法, 具体是指除芦丁羟乙基化产物外, 非芦丁衍生物 杂质重量含量杂质小于 2%的曲克芦丁以及含量大于 98%的三羟乙基 芦丁单体的制备方法。本发明的关键在于采用 两歩合成法制备三羟乙 基芦丁, 通过对反应中间体的精制, 从而得到高纯度的最终产物。 发明内容

本发明提供一种新的曲克芦丁的制备方法, 本发明的方法, 包括 以下歩骤:

1 ) 将芦丁制备成 7-单羟乙基芦丁,

2) 对 7-单羟乙基芦丁进行纯化,

3 ) 用纯化后的 7-单羟乙基芦丁制备三羟乙基芦丁,

4) 对三羟乙基芦丁进行纯化。 本发明意外的发现, 作为芦丁制备曲克芦丁的反应过程中间体, 7-单 羟乙基芦丁与反应物中的其他成分, 包括原料所含杂质性质差异明 显,可以利用 7-单羟乙基芦丁与杂质的性质差异,对 7-单羟乙基芦丁 进行纯化, 可以得到高纯度的 7-羟乙基芦丁 (含量大于 98% ) , 从而 将和终产物三羟乙基芦丁性质差异小的杂质在 此阶段去除,然后用纯 化后的 7-单羟乙基芦丁继续羟乙基化,再通过对反应 物的进一歩分 离纯化, 可以得到纯度大于 98%的三羟乙基芦丁。 和现有技术相比, 本发明可以采用常规的纯化方法, 特别是采用重结晶方法, 无需特殊 设备以及价格昂贵的分离色谱柱, :节约了生产成本, 使单体 乙基芦丁的工业化批量生产成为可能。而采用 现有技术的方法, 由于 杂质和终产物性质差异小, 即使用重结晶方法对终产物反复重结晶, 也无法获得高纯度的三羟乙基芦丁。

本发明的反应过程如下:

在本发明的制备方法中,

其中, 歩骤 1 ) 的 7-单羟乙基芦丁的制备, 其制备方法为现有技 术, 可以采用美国专利 US4153788中的技术, 如采用硼砂对芦丁的 5 位及 3'、 4'位羟基进行保护, 由芦丁得到 7-单羟乙基芦丁, 也可采用 美国专利 US3420815中的技术, 直接在有机溶剂中合成。

制备过程中, 芦丁用羟基保护试剂对羟基进行保护, 然后加入羟 乙基化试剂在溶剂中进行反应, 其中, 芦丁可以从市场上购买, 羟基 保护剂为硼砂, 羟乙基化试剂为环氧乙垸,反应溶剂选自: 水、 甲醇、 乙醇, 反应温度为 30-50°C, 反应时间为 4-12小时, 反应完全后, 反 应液静置或低温静置, 必要时可以调节溶液的 pH值到酸性, 所得沉 淀经过滤即可进行下一歩操作。

歩骤 2)的 7-单羟乙基芦丁纯化可以采用任何一种适合工 应用 的方法, 如重结晶法。其中所述对 7-单羟乙基芦丁进行纯化, 是将其 纯化到 95%以上的纯度, 再进行投料, 优选 98%以上, 最优选 99% 以上。

重结晶法采用的溶剂选自: 水、 甲醇、 乙醇、 异丙醇或它们的混 合物, 重结晶的歩骤包括: 溶解, 析晶, 过滤的过程。

歩骤 3 )用纯化的 7-单羟乙基芦丁制备三羟乙基芦丁可以采用常 规的羟乙基化工艺,如采用环氧乙垸等羟乙基 化试剂对 7-单羟乙基芦 丁进一歩的进行羟乙基化;反应完成后得到的 反应液分别过阳离子树 脂、 阴离子树脂脱盐, 或经过大孔树脂除杂, 然后进行歩骤 4) 的操 作。

在此过程中, 7-单羟乙基芦丁用溶剂溶解或混悬, 加入羟乙基化 试剂进行反应, 其中, 羟乙基化试剂为环氧乙垸,反应溶剂选自: 水、 甲醇、 乙醇、 吡啶, 或他们的混合物, 反应温度为 50-80°C, 反应时 间为 3-8小时, 反应完全后, 反应液静置或低温静置, 必要时可以调 节溶液的 pH值到酸性, 所得反应液直接可用于下一歩操作。

其中所述过阳离子树脂和过阴离子树脂, 阳离子树脂选自: 强酸 性苯乙烯系阳离子交换树脂, 如 007X7(732)、 001X12、 00lXl4、 001X16,阴离子树脂选自: 强碱性苯乙烯系阴离子交换树脂, 如 201X4 (711 )、 201X7 (717), 过树脂的方法可以采用以下方法: 反 应液分别通过树脂柱或将树脂分别加入反应液 中搅拌,分离后得到三 羟乙基芦丁粗品溶液。

所述的大孔树脂, 选自 D101、 D20 DAB-8、 D301可按常规方 法进行精制处理, 即将反应物水溶液过滤后直接过树脂柱, 然后用纯 化水冲洗, 再用不同浓度的有机溶剂梯度法冲洗, 有机溶剂为乙醇, 得到的产物为三羟乙基芦丁粗品溶液,粗品溶 液浓缩干燥后可进行下 一歩重结晶操作。

歩骤 4) 的纯化采用重结晶方法即可得到三羟乙基芦丁 纯品, 所 述重结晶采用的溶剂选自:水、 甲醇、 乙醇、异丙醇或它们的混合物, 重结晶的歩骤包括: 溶解, 析晶, 过滤的过程。

除另有说明外, 所有比例份数和百分数都是为质量百分数, 色谱 纯度指按欧洲药典 7.0版曲克芦丁项下组分检査方法所得检査结果 , 具体的制备实例见本发明实施例。

本发明的优点如下:

在已有的报道中,含量大于 98%的高纯度三羟乙基芦丁仅限于实验室 采用制备色谱法才能够得到, 成本昂贵, 仅限于实验研究, 不可能大 量生产和广泛应用, 采用本发明的方法, 应用较简单的工艺即得到高 纯度的三羟乙基芦丁, 成本低廉, 实用性好。

和现有技术相比, 本发明的生产成本大大降低, 特别是三羟乙基 芦丁的纯化采用常规的纯化方法, 大大节约了生产成本, 有关的实验 数据如下:

文献 US3420815的方法: 根据该方法, 无法获得 98%的三羟乙 基芦丁, 所得产物经检测色谱纯度为 87.4%, 含量为 84.2%, 产物颜 色为: 深黄色,熔点为: 178-182°C, 成本为 400-500元 /千克。 经过制 备色谱分离, 可以获得 99%的三羟乙基芦丁, 但成本大大增加, 约为 5000-10000元 /克。

另外根据文献方法制备工艺的比较数据如下 :

文献 US6855697的方法: 根据该方法, 无法获得 98%的三羟乙 基芦丁, 所得产物经检色谱纯度为 92.1%, 含量为 90.3%, 产物颜色 为: 黄色, 熔点为: 179-183 °C, 成本为 500-800元 /千克。 经过制备 色谱分离, 可以获得 99%的三羟乙基芦丁, 但成本大大增加, 约为 5000-10000元 /克。

本发明获得 98%的三羟乙基芦丁, 产物颜色为: 浅黄色,熔点为:

185- 187 °C , 成本为, 2000-3000元 /千克。

本发明获得 99%的三羟乙基芦丁, 产物颜色为: 浅黄色,熔点为:

186- 188°C , 成本为, 3000-5000元 /千克。

本发明对歩骤 1反应完成后的反应产物及精制后的成分进行 检测, 检测结果如下: 成分 精制前 HPLC% 精制后 HPLC % 结果比较

7-单羟乙基芦丁 91.35 98.72 7.37† 杂质 1 RA5 2.01 未检出 2.01| 杂质 2 R f 0.9 0.67 未检出 0.671 杂质 3 R f 1.1 2.35 0.73 1.981 杂质 4 R f 1.2 1.64 0.21 1.431 杂质 5 R f 1.3 1.09 0.23 0.861 杂质 6 R f 1.7 0.45 0.11 0.341 杂质 7 R f 1.8 0.26 未检出 0.261 注: R f 为杂质峰相对于主峰的保留时间。

从上表可以看出, 7-单羟乙基芦丁与反应物中的杂质 1〜7 的理化性 质差异较大, 精制后纯化效果明显.

为证明本发明的优越性,本发明还和与本发 明最接近的现有技术作了 比较:

采用 US6855697方法, 制备三羟乙基芦丁, 反应结束后, 反应液中 三羟乙基芦丁的分离纯化方法如下:

含三羟乙基芦丁反应液分别通过 732阳离子树脂柱、 71 7阴离子 树脂柱脱盐, 然后减压浓缩, 喷雾干燥, 加入甲醇 SOOOrrl, 加热溶 解, 加入针用活性炭, 回流 30分钟, 趁热抽滤, 滤液室温自然析晶 6小时,抽滤,固体 40- 50 °C干燥,得三羟乙基芦丁,经检测含量 88. 2% 所得固体同法再用 20倍量甲醇重结晶精制并干燥, 三羟乙基芦丁含 含三羟乙基芦丁反应液分别通过 732阳离子树脂柱、 711 阴离子 树脂柱脱盐,然后减压浓缩,喷雾干燥,加入 甲醇-水(37:3) 7000ΓΤ1, 加热溶解, 加入针用活性炭, 回流 30分钟, 趁热抽滤, 滤液室温自 然析晶 6小时, 抽滤, 固体 40-5CTC干燥, 得三羟乙基芦丁, 经检测 含量 90.1% 所得固体同法再用 20倍量甲醇-水 (37:3) 重结晶精制 并干燥, 三羟乙基芦丁含量为 91.60%

含三羟乙基芦丁反应液分别通过 001X14阳离子树脂柱、 717阴 离子树脂柱脱盐,然后减压浓缩,喷雾干燥, 加入甲醇-异丙醇(95: 5) 9000ΓΠ, 加热溶解, 加入针用活性炭, 回流 30分钟, 趁热抽滤, 滤 液室温自然析晶 6小时,抽滤, 固体 40-5CTC干燥, 得三羟乙基芦丁, 经检测含量 91.7。/。所得固体同法再用 20倍量甲醇-异丙醇 (95:5) 重结晶精制并干燥, 三羟乙基芦丁含量为 92.4%

采用本发明的的方法, 制备三羟乙基芦丁, 反应结束后, 反应液 中三羟乙基芦丁的分离纯化方法如下:

含三羟乙基芦丁反应液分别通过 732阳离子树脂柱、 717阴离子 树脂柱脱盐, 然后减压浓缩, 喷雾干燥, 加入甲醇 SOOOrrl, 加热溶 解, 加入针用活性炭, 回流 30分钟, 趁热抽滤, 滤液室温自然析晶 6小时,抽滤,固体 40- 50 °C干燥,得三羟乙基芦丁,经检测含量 92.4% 所得固体同法再用 20倍量甲醇重结晶精制并干燥, 三羟乙基芦丁含 量为 98.2%

含三羟乙基芦丁反应液分别通过 732阳离子树脂柱、 711 阴离子 树脂柱脱盐,然后减压浓缩,喷雾干燥,加入 甲醇-水(37:3) 7000ΓΤ1, 加热溶解, 加入针用活性炭, 回流 30分钟, 趁热抽滤, 滤液室温自 然析晶 6小时, 抽滤, 固体 40- 5CTC干燥, 得三羟乙基芦丁, 经检测 含量 93. 5% 所得固体同法再用 20倍量甲醇-水 (37: 3 ) 重结晶精制 并干燥, 三羟乙基芦丁含量为 98. 3%

含三羟乙基芦丁反应液分别通过 001X14阳离子树脂柱、 71 7阴 离子树脂柱脱盐,然后减压浓缩,喷雾干燥, 加入甲醇-异丙醇(95: 5 ) 9000ΓΠ, 加热溶解, 加入针用活性炭, 回流 30分钟, 趁热抽滤, 滤 液室温自然析晶 6小时,抽滤, 固体 40- 5CTC干燥, 得三羟乙基芦丁, 经检测含量 95. 8%所得固体同法再用 20倍量甲醇-异丙醇 (95: 5 ) 重结晶精制并干燥, 三羟乙基芦丁含量为 98. 6%

从以上对比可以看出, 经同样方法进行纯化, 本发明制备过程纯 化效果更好。

将采用现有技术, 如 US6855697文献技术制备的纯度为 91.3% 的三羟乙基芦丁, 继续用 20- 25倍量甲醇-异丙醇(95: 5 )混合溶剂, 经过多次反复重结晶纯化后仍无法得到纯品, 结果如下:

附图说明

图 1 : 本发明 7-单羟乙基芦丁反应溶液 HPLC色谱图

图 2: 本发明 7-单羟乙基芦丁精制后 HPLC色谱图

图 3: 本发明终产物三羟乙基芦丁 (98% ) HPLC色谱图

图 4: 本发明终产物三羟乙基芦丁 (99% ) HPLC色谱图 图 5: 文献 6855697的方法终产物三羟乙基芦丁 HPLC色谱图 图 6 : 市售三羟乙基芦丁对照品 (96% ) HPLC 色谱图 (中检所

100416-200503 )

具体实施方式

以下为本专利的实施例, 但不作为对本专利的限制,

实施例 1 :

1、 328克, 0.86摩尔硼砂 (Na 2 B 4 O 7 -10H 2 O) 加入 2500ml去离子 水中, 搅拌溶解, 再加入 605克, 0.82摩尔的芦丁, 40-45°C搅拌至 溶解, 过滤, 得到澄清的芦丁-硼砂复合物水溶液。 该溶液保持 40-45 °C , 搅拌状态下, 将 88克, 2摩尔的环氧乙垸逐歩通入反应液, 反应时间约 6小时, HPLC检测反应至完全, 反应液用 5N盐酸调节 pH至 2.0, 3-5 °C条件下放置 12小时, 抽滤, 得到固体滤饼, 含 7- 单羟乙基芦丁 504克, 收率 95%。

2、 取 1所得 7-单羟乙基芦丁含水固体 1460克, 加入去离子水 4750ml, 搅拌状态下加热至 60°C, 全部溶解, 过滤, 滤液 3-5°C放置 过夜, 抽滤, 所得固体 40-50°C干燥 12小时, 得 7-单羟乙基芦丁 450 克, 按无水物计含量 98.3%, 色谱纯度 98.6%, 收率 89.3%, 总收率 84.8%

3、 取 2所得 0.7摩尔, 490克的 7-单羟乙基芦丁及 5.6克氢氧化 钠, 加入到 1880ml去离子水中, 搅拌, 加热并保持 75-80°C, 环氧乙 垸 92克 (2.1摩尔) 逐歩通入反应液中, 保持反应 5-6小时, HPLC 检测三羟乙基芦丁比例达到 75-78%时, 停加环氧乙垸, 同时通入氮 气及反应液迅速降温, 反应液将至 40°C以下时, 加入 3N盐酸调节 pH值至 5.0±0.2, 反应液分别通过 732阳离子树脂柱、 717阴离子树 脂柱脱盐, 然后减压浓缩, 喷雾干燥, 得到固体粉末 520克, 三羟乙 基芦丁含量 92.3%, 熔点 180-183°C, 收率 98%, 总收率 83.1%.

4、 3得到的固体粉末 500克, 加入甲醇 10000ml, 加热溶解, 力口 入针用活性炭 1.0克, 回流 30分钟, 趁热抽滤, 滤液室温自然析晶 6 小时,抽滤,固体 40-50°C干燥,得三羟乙基芦丁 410克,含量 96.8%, 收率 82%, 总收率 68.1%。

5、 4得到的固体粉末 410克, 加入甲醇 9500ml, 加热溶解, 回 流 30分钟,趁热抽滤,滤液室温自然析晶 6小时,抽滤,固体 40-50°C 真空干燥, 得三羟乙基芦丁 338克, 含量 98.2%, 色谱纯度 98.4%, 熔点 184-186°C, 收率 82.5%, 总收率 56%。

实施例 2

1、 164克, 0.43摩尔硼砂 (Na 2 B 4 O 7 -10H 2 O); 12克, 0.3摩尔氢 氧化钠 (NaOH) 加入 2000ml去离子水中, 搅拌溶解, 再加入 605 克, 0.82摩尔的芦丁, 加热至并保持在 40-45°C, 搅拌状态下, 将 88 克, 2摩尔的环氧乙垸逐歩通入反应液, 反应时间约 12小时, HPLC 检测反应至完全, 反应液用 5N盐酸调节 pH至 2.0,3-5 °C条件下放置 12小时,抽滤,得到固体滤饼,含 7-单羟乙基芦丁 510克,收率 96%。。

2、 取 1所得 7-单羟乙基芦丁 510克(总重 1450, 含水 940克), 加入去离子水 2000ml, 搅拌状态下加热至 40°C, 滴加碳酸氢钠饱和 水溶液,至固体全部溶解,过滤,滤液用 0.1摩尔盐酸调节 pH至 4.0, 3-5°C放置过夜, 抽滤, 所得固体 40-50°C干燥 12小时, 得 7-单羟乙 基芦丁 433克(总重 470克),按无水物计含量 98.6%,色谱纯度 98.8%, 收率 85%, 总收率 81.6%

3、 取 2所得 0.67摩尔, 433克的 7-单羟乙基芦丁及 5.6克氨水, 加入到 1880ml去离子水中, 搅拌, 加热并保持 75-80°C, 环氧乙垸 92克 (2.1摩尔) 逐歩通入反应液中, 保持反应 5-6小时, HPLC检 测三羟乙基芦丁比例达到 75-78%时, 停加环氧乙垸, 同时通入氮气 及反应液迅速降温, 反应液将至 40°C以下时, 反应液直接上预先处 理好的 D101大孔树脂进行纯化, 树脂用量 20公斤,上样完成后, 先 用去离子水冲洗, 至冲洗液近中性, 硝酸银试液检査氯离子呈阴性, 60%乙醇冲洗至液体无色, 收集冲洗液, 减压浓缩至 2500ml, 喷雾干 燥, 得到固体粉末 465克, 三羟乙基芦丁含量 92%, 收率 86%, 总收 率 70.2%.

4、 3得到的固体粉末 465克, 加入甲醇 8000ml, 加热溶解, 力口 入针用活性炭 1.0克, 回流 30分钟, 趁热抽滤, 滤液室温自然析晶 6 小时,抽滤,固体 40-50°C干燥,得三羟乙基芦丁 381克,含量 97.2%, 收率 82%, 总收率 57.6%。

5、 4得到的固体粉末 381克, 加入甲醇 10500ml, 加热溶解, 回 流 30分钟,趁热抽滤,滤液室温自然析晶 6小时,抽滤,固体 40-50°C 真空干燥, 得三羟乙基芦丁 314克, 含量 98.3%, 色谱纯度 98.3%, 熔点 184-186°C, 收率 82.5%, 总收率 47.5%。

实施例 3、 1、 328克, 0.86摩尔硼砂 (Na 2 B 4 O 7 -10H 2 O) 加入 2000ml去离 子水中, 搅拌溶解, 再加入 605克, 0.82摩尔的芦丁, 40-45°C搅拌 至溶解, 过滤, 得到澄清的芦丁-硼砂复合物水溶液。 该溶液保持 40-45 °C , 搅拌状态下, 将 88克, 2摩尔的环氧乙垸逐歩通入反应液, 反应时间约 6小时, HPLC检测反应至完全, 反应液直接用按常规方 法预处理好的 D101大孔树脂分离纯化, 树脂用量 25公斤, 上样完 成后, 用去离子水冲洗至流出液 pH近中性, 先用 10%乙醇 2000ml 冲洗, 然后用 60%乙醇 10000ml冲洗, 然后用 90%乙醇冲洗至完全, 收集 60%乙醇流出液,真空浓缩至无醇味,加水至 12000ml,溶液 3-5°C 放置过夜, 抽滤, 滤饼用冰水淋洗, 得 7-单羟乙基芦丁 473克(总重 1440克), 按无水物计含量 99.3%, 色谱纯度 99.3%, 收率 89.3%。

2、 取 1所得 7-单羟乙基芦丁含水固体 1440克, 加入去离子水 4750ml, 搅拌状态下加热至 60°C, 全部溶解, 过滤, 滤液用 3N盐酸 调节 pH2.0,3-5°C放置过夜, 抽滤, 所得固体 40-50°C干燥 12小时, 得 7-单羟乙基芦丁 463克(含水 8%), 按无水物计含量 99.5%, 色谱 纯度 99.5%, 收率 90.1%, 总收率 80.5%

3、 取 2所得 0.71摩尔, 463克的 7-单羟乙基芦丁及 5.6克氢氧 化钠, 加入到 1880ml去离子水中, 搅拌, 加热并保持 75-80°C, 环氧 乙垸 92克(2.1摩尔)逐歩通入反应液中, 保持反应 5-6小时, HPLC 检测三羟乙基芦丁比例达到 75-78%时, 停加环氧乙垸, 同时通入氮 气及反应液迅速降温, 反应液将至 40°C以下时, 加入 3N盐酸调节 pH值至 5.0±0.2, 反应液分别通过 732阳离子树脂柱、 717阴离子树 脂柱脱盐, 然后减压浓缩, 喷雾干燥, 得到固体粉末 531克, 三羟乙 基芦丁含量 85%, 熔点 180-183°C, 收率 85%, 总收率 68.4%.

4、 3得到的固体粉末 531克, 加入甲醇 8000ml, 加热溶解, 加 入针用活性炭 1.0克, 回流 30分钟, 趁热抽滤, 滤液室温自然析晶 6 小时,抽滤,固体 40-50°C干燥,得三羟乙基芦丁 435克,含量 95.8%, 收率 82%, 总收率 56%。

5、 4得到的固体粉末 435克, 加入甲醇 10500ml, 加热溶解, 回 流 30分钟,趁热抽滤,滤液室温自然析晶 6小时,抽滤,固体 40-50°C 真空干燥, 得三羟乙基芦丁 354克, 含量 98.4%, 色谱纯度 98.4%, 熔点 184-186°C, 收率 81.5%, 总收率 45.6%。

实施例 4

1、 7-单羟乙基芦丁制备同实施例 1。

2、 取 1所得 0.71摩尔, 510克的 7-单羟乙基芦丁及 5.6克氢氧化 钠, 加入到 1000ml去离子水及 800ml乙醇的混合溶液中, 搅拌, 力口 热并保持 70-75°C, 加入环氧乙垸 92克 (2.1摩尔) 逐歩通入反应液 中,保持反应 10-13小时, HPLC检测三羟乙基芦丁比例达到 75-78% 时, 停加环氧乙垸, 同时通入氮气及反应液迅速降温, 反应液将至 40°C以下时, 加入 3N盐酸调节 pH值至 5.0±0.2, 减压回收乙醇, 反 应液分别通过 732阳离子树脂柱、 717阴离子树脂柱脱盐,喷雾干燥, 得到固体粉末 480克, 三羟乙基芦丁含量 93.4%, 熔点 181-184°C, 收率 85%。

3、所得固体按实施例 1方法用甲醇重结晶 2次, 得到三羟乙基芦 丁 323克, 色谱纯度 98.6%, 含量 98.5%, 熔点 185-186°C, 总收率 53.5%。

实施例 5、

1、 7-单羟乙基芦丁制备同实施例 1。

2、 取 1所得 0.71摩尔, 510克的 7-单羟乙基芦丁及 5.6克氢氧化 钠, 加入到 1000ml去离子水及 800ml甲醇的混合溶液中, 搅拌, 力口 热并保持 60-70°C, 加入环氧乙垸 92克 (2.1摩尔) 逐歩通入反应液 中,保持反应 10-13小时, HPLC检测三羟乙基芦丁比例达到 75-78% 时, 停加环氧乙垸, 同时通入氮气及反应液迅速降温, 反应液将至 40°C以下时, 加入 3N盐酸调节 pH值至 5.0±0.2, 反应液再分别通过 732阳离子树脂柱、 717阴离子树脂柱脱盐, 减压回收甲醇, 喷雾干 燥,得到固体粉末 474克,三羟乙基芦丁含量 94.5%,熔点 181-184 °C, 收率 84%。

3、取所得固体按实施例 2方法用 1方法用甲醇重结晶 2次, 得到 三羟乙基芦丁 317克,色谱纯度 98.7%,熔点 185-186°C,总收率 52.5%。 实施例 6、

1、 7-单羟乙基芦丁制备同实施例 1。

2、 在 5000ml高压釜中, 加入 1所得 0.71摩尔, 510克的 7-单羟 乙基芦丁及 10ml三乙胺, 2000ml甲醇、最后加入环氧乙垸 132克(3.0 摩尔), 立即密封, 搅拌升温, 加热并保持 75-80°C, 保持反应 2-3小 时, 降温至 40°C以下时, 泄压, 反应液过滤, 再分别通过 732阳离 子树脂柱、 717阴离子树脂柱, 然后用 5N盐酸调节 pH值至 5.0±0.2, 室温放置 6-8小时, 滤出结晶, 得到 380克滤饼。

3、 滤饼再用 20倍量甲醇加热溶解, 回流 30分钟, 过滤, 滤液室 温放置 6-8小时, 滤出结晶, 40-50°C真空干燥, 得 304克固体粉末, 三羟乙基芦丁含量 98.1%, 熔点 184-186°C, 收率 58%。

实施例 7、

1、 7-单羟乙基芦丁制备同实施例 1。

2、 在 5000ml高压釜中, 加入 1所得 0.71摩尔, 510克的 7-单羟 乙基芦丁及 12ml二乙胺, 2000ml甲醇、最后加入环氧乙垸 132克(3.0 摩尔), 立即密封, 搅拌升温, 加热并保持 75-80°C, 保持反应 2-3小 时, 降温至 40°C以下时, 泄压, 反应液过滤, 反应液再分别通过 732 阳离子树脂柱、 717 阴离子树脂柱, 然后用 5N 盐酸调节 pH值至 5.0±0.2, 室温放置 6-8小时, 滤出结晶, 得到 375克滤饼。

3、滤饼再用 20倍量甲醇-异丙醇(37:3 )加热溶解, 回流 30分钟, 过滤, 滤液室温放置 6-8小时, 滤出结晶, 40-50°C真空干燥, 得 302 克固体粉末, 三羟乙基芦丁含量 98.3%, 熔点 184-186°C, 收率 57%。 实施例 8、

1、 7-单羟乙基芦丁制备同实施例 1。

2、 在 5000ml高压釜中, 加入 1所得 0.71摩尔, 510克的 7-单羟 乙基芦丁及 30ml氨水, 2000ml甲醇中、环氧乙垸 154克(3.5摩尔), 立即密封, 搅拌升温, 加热并保持 75-80°C, 保持反应 2-3小时, 降 温至 40°C以下时, 泄压, 反应液过滤, 反应液再分别通过 732阳离 子树脂柱、 717阴离子树脂柱, 然后用 5N盐酸调节 pH值至 5.0±0.2, 室温放置 6-8小时, 滤出结晶, 得到 360克滤饼。

3、 滤饼再用 20倍量甲醇加热溶解, 回流 30分钟, 过滤, 滤液室 温放置 6-8小时, 滤出结晶, 40-50°C真空干燥, 得 290克固体粉末, 三羟乙基芦丁含量 98.2%, 熔点 184-186°C, 收率 55%。

实施例 9、

1、 7-单羟乙基芦丁制备同实施例 1。

2、 在 5000ml高压釜中, 加入 1所得 0.71摩尔, 510克的 7-单羟 乙基芦丁及 10ml吡啶, 1600ml甲醇中、 400ml乙醇, 最后加入环氧 乙垸 154克(3.5摩尔), 立即密封, 搅拌升温, 加热并保持 77-82°C, 保持反应 2-3小时, 降温至 40°C以下时, 泄压, 过滤, 反应液过 717 阴离子树脂柱, 然后用 5N盐酸调节 pH值至 5.0±0.2, 室温放置 6-8 小时, 滤出结晶, 得到 420克滤饼。

3、 滤饼再用 20倍量甲醇 -乙醇 (95:5 ) 加热溶解, 回流 30分钟, 过滤, 滤液室温放置 6-8小时, 滤出结晶, 40-50°C真空干燥, 得 336 克固体粉末, 三羟乙基芦丁含量 98.2%, 熔点 184-186°C, 收率 64%。 实施例 10、

1、 7-单羟乙基芦丁制备同实施例 1。

2、 在 5000ml高压釜中, 加入 1所得 0.71摩尔, 510克的 7-单羟 乙基芦丁及 10ml吡啶, 2000ml甲醇、 最后加入环氧乙垸 154克(3.5 摩尔), 立即密封, 搅拌升温, 加热并保持 75-80°C, 保持反应 2-3小 时,降温至 40 °C以下时,泄压,反应液用 5N盐酸调节 pH值至 5.0±0.2, 室温放置 6-8小时, 滤出结晶, 得到 410克滤饼。 3、 滤饼再用 20倍量甲醇加热溶解, 回流 30分钟, 过滤, 滤液室 温放置 6-8小时, 滤出结晶, 40-50°C真空干燥, 得 310克固体粉末, 三羟乙基芦丁含量 98.3%, 熔点 184-186°C, 收率 61%。

实施例 11、

1、 取实施例 5所得 98.7%的三羟乙基芦丁 100克, 加入甲醇-乙 醇 (50:50) 3000ml, 加热回流 30分钟, 趁热抽滤, 滤液室温自然析 晶 6小时, 抽滤, 固体 40-50°C真空干燥, 得三羟乙基芦丁 80.2克, 色谱纯度 98.8%, 含量 98.8%, 熔点 186-188°C。

2、取 1所得 98.8%的三羟乙基芦丁 80克,加入甲醇-异丙醇 (95:5 ) 2400ml, 加热回流 30分钟, 趁热抽滤, 滤液室温自然析晶 6小时, 抽滤, 固体 40-50°C真空干燥, 得三羟乙基芦丁 64.3 克, 色谱纯度 99.2%, 含量 99.2%, 熔点 187-189°C。