技术领域

本发明属于化学领域。 具体地， 本发明涉及了一种厄他培南单钠盐的纯化 方法。 背景技术

厄他培南单钠盐（Ertapenem Sodium) 是由英国 AstraZeneca公司发明， 是 一种注射用广谱长效碳青霉烯类抗生素， 2002年在美国首次上市， 具有抗菌谱 广、 对肾脱氢肽酶 -1 ( DHP-1 ) 稳定、 药动学参数优良、 临床治疗效果好、 耐 受性好、 不良反应少、 半衰期长、 可一天给药一次等特点， 临床上用于治疗成 人中度至重度敏感菌引起的感染， 对社区获得性混合感染可获满意疗效。 厄他 培南单钠盐的结构式如

厄他培南单钠盐上市制剂商品名为怡万之， 临床通过静脉输注给药， 必须 在药物溶解 6小时内完成输注。 药物溶解的颜色为无色至淡黄色， 在此范围内 发生的颜色改变不会影响药品的疗效。 一旦原料厄他培南单钠盐的色度不合 格， 所制备的制剂溶解后就会迅速变色， 严重影响疗效甚至危及到患者的生命 安全。

专利文献 W02008062279中公开了两种无定型厄他培南单钠盐 制备方法， 这 两种结晶方案得到的无定型物质非常不稳定， 容易变色且纯度下降明显， 不适 用工业化生产。

专利文献 W003026572公开了厄他培南单钠盐 A型结晶及 B型结晶及其制备 方法。

专利文献 CN200610004335和 CN02818431公开了厄他培南单钠盐 C型结晶的 制备方法。

专利文献 W02009150630公开了厄他培南单钠盐 D型结晶及其制备方法。 专利文献 CN102558182公开了厄他培南单钠盐 E型结晶及其制备方法。 专利文献 W02012038979公开了另一种新的厄他培南单钠盐结 晶及其制备 方法。

然而， 厄他培南单钠盐八、 B、 C、 D各种晶型的制备方法都存在如下的缺点： 对厄他培南单钠盐进行结晶时， 均要求厄他培南单钠盐结晶溶液的浓度在 100 mg/ml以上， 由于厄他培南单钠盐容易降解和聚合等原因， 常规的浓缩和钠滤 等操作将造成产品的大量降解。 厄他培南单钠盐晶型 E的制备方法缺点在于晶 种获得困难。 而且， 上述公开文献中均未描述结晶所得产物的色度 情况， 并且 由于结晶时浓度过高， 所得的厄他培南单钠盐的色度都很难符合要求 。

因此， 有必要开发一种方法简单、 色度易控、 适合工业化生产的厄他培南 单钠盐的纯化方法， 以保证厄他培南单钠盐制剂的药物质量和临床 效果。 发明内容

本发明的目的是提供一种方法简单、 色度易控、 适合工业化生产的厄他培 南单钠盐的纯化方法。 该方法制得的厄他培南单钠盐色度低且稳定， 适用于制 剂以及后续的临床应用。 本发明第一方面提供了一种厄他培南单钠盐的 纯化方法， 包括步骤： a) 提供包含厄他培南单钠盐原料的水溶液， 所述的水溶液任选地含有含 钠无机碱；

b) 调节步骤 a)的水溶液的 pH至 4. 4〜6. 0后， 加入脱色剂进行脱色， 从而 得到经脱色的溶液；

c) 调节前述经脱色的溶液的 pH至 5. 0〜6. 0， 加入第一溶剂；

d) 在步骤 c)得到的溶液中加入第二溶剂， 搅拌， 析晶， 从而得到经结晶 的厄他培南单钠盐。

在另一优选例中， 在步骤 b)中， 调节步骤 a)的水溶液的 pH至 4. 6〜5. 8 (更 佳地 4. 6〜5. 0) ; 和 /或 在步骤 c)中， 调节前述经脱色的溶液的 pH至 5. 3〜5. 8。

在另一优选例中， 所述的厄他培南单钠盐原料的纯度为 85 % -97 %； 和 /或 所述的经结晶的厄他培南单钠盐的纯度为 97 % -99. 99 %。

在另一优选例中， 所述的厄他培南单钠盐原料包括： 厄他培南单钠盐 A型 结晶、 厄他培南单钠盐 B型结晶、 厄他培南单钠盐 C型结晶、 厄他培南单钠盐 D 型结晶、 厄他培南单钠盐 E型结晶、 无定型厄他培南单钠盐、 或其组合； 和 /或 所述的含钠无机碱包括： 碳酸钠、 碳酸氢钠、 氢氧化钠、 或其组合。

在另一优选例中， 所述的含钠无机碱为碳酸氢钠或碳酸钠。

在另一优选例中， 在步骤 a ) 中， 所述的厄他培南单钠盐原料与所述的含 钠无机碱的摩尔比为 1 : 1〜1 : 4； 和 /或 所述的水与所述的厄他培南单钠盐原料 的质量之比为 6 :广 12 : 1。

在另一优选例中， 在步骤 a)中， 将所述的包含厄他培南单钠盐原料的水溶 液的温度控制在 -5〜20°C ; 和 /或 在步骤 b)中， 在调节步骤 a)的水溶液的 pH之 前， 还包括步骤： 将步骤 a)的水溶液的温度控制在 -2〜10 °C ; 和 /或 在步骤 c) 中， 在调节前述经脱色的溶液的 pH之前， 还包括步骤： 将经脱色的溶液的温度 控制在 -2〜10°C ; 和 /或 在步骤 d)中， 在加入第二溶剂之前， 还包括步骤： 将 步骤 c)得到的溶液的温度控制在 0〜- 40 °C (优选 -10〜- 25°C ) o

在另一优选例中， 在步骤 b)中， 采用酸性溶液调节步骤 a)的水溶液的 pH， 其中， 所述的酸性溶液选自下组： 甲酸或其^- ₄ 有机醇溶液、 乙酸或其(^ ₄ 有机 醇溶液、 丙酸或其(^- ₄ 有机醇溶液或盐酸或其(^- ₄ 有机醇溶液； 和 /或

在步骤 c)中， 采用碱性溶液调节前述经脱色的溶液的 pH， 其中， 所述的碱 性溶液选自下组：氢氧化钠的水溶液或 d- ₄ 有机醇溶液、碳酸氢钠的水溶液或 d- ₄ 有机醇溶液、 碳酸钠的水溶液或 d- ₄ 有机醇溶液、 2-乙基己酸钠的水溶液或 - ₄ 有机醇溶液。

在另一优选例中， 所述的酸性溶液为甲酸的甲醇溶液或乙酸的甲 醇溶液。 在另一优选例中， 所述的酸性溶液为 l〜25mol/L (优选为 3〜10mol/L)的甲 酸的 d— ₄ 有机醇溶液、 l〜25mol/L (优选为 3〜10mol/L)的乙酸的 d— ₄ 有机醇溶液、 l〜25mol/L (优选为 3〜10mol/L)的丙酸的 d— ₄ 有机醇溶液、 或 l〜25mol/L (优选 为 3〜10mol/L)的盐酸的 d— ₄ 有机醇溶液。

在另一优选例中， 所述的碱性溶液为氢氧化钠的水溶液。

在另一优选例中， 所述的碱性溶液的摩尔浓度为 l〜25mol/L; 较佳地， 为

3〜10mol/L; 更佳地， 为 3〜5mol/L。

在另一优选例中， 所述的脱色剂包括： 活性炭、 白土、 硅藻土、 二氧化硅、 离子交换树脂、 或吸附树脂； 和 /或

所述的第一溶剂包括： 甲醇、 乙醇、 正丙醇、 异丙醇或二氯甲垸； 和 /或 所述的第二溶剂包括： 甲醇、 乙醇、 正丙醇、 异丙醇或二氯甲垸。 在另一优选例中， 所述的脱色剂为活性炭或离子交换树脂。

在另一优选例中， 所述的第一溶剂为甲醇。

在另一优选例中， 所述的第二溶剂为正丙醇。

在另一优选例中， 在步骤 c)中， 第一溶剂与步骤 a)中所用水的体积之比为 0. 5 : 1〜3： 1； 和 /或 在步骤 d)中， 第二溶剂与步骤 a)中所用水的体积之比为 0. 5 : 1〜3： 1。

在另一优选例中， 在步骤 d)中， 在析晶后， 还包括步骤： 过滤， 以及用有 机溶剂洗涤滤饼。

在另一优选例中， 所述的有机溶剂选自下组： 丙酮、 甲基乙基酮、 乙酸甲 酯、 乙酸乙酯、 乙酸异丙酯、 四氢呋喃、 乙醚、 甲基叔丁基醚、 二氯甲垸、 甲 醇、 乙醇、 正丙醇、 异丙醇、 或其组合； 较佳地为甲醇、 乙醇、 丙酮、 二氯甲 垸、 四氢呋喃。 应理解， 在本发明范围内中， 本发明的上述各技术特征和在下文（如实施 例）中具体描述的各技术特征之间都可以互相 组合， 从而构成新的或优选的技 术方案。 限于篇幅， 在此不再一一累述。 具体实施方式

本发明人通过长期而深入的研究， 意外地发现一种厄他培南单钠盐纯化方 法， 该方法在较低的第一 pH范围内对厄他培南原料进行脱色， 然后在较高的第 二 pH范围内进行结晶， 得到了色度低且稳定的、 符合注射用药物要求的厄他培 南单钠盐产品， 为这类药物的进一步临床应用开阔了前景。 在此基础上， 发明 人完成了本发明。 本发明提供了一种厄他培南单钠盐的纯化方法 ， 该方法可制得低色度且色 度稳定的厄他培南单钠盐。

现对发明的厄他培南单钠盐的优选纯化方法进 行如下说明， 可其包括以下 步骤：

a) 在一定温度（如 -5〜20°C， 优选 0〜5°C )下， 将厄他培南单钠盐原料溶 于水中， 从而提供包含厄他培南单钠盐原料的水溶液， 所述水溶液任选地含有 含钠无机碱； 其中， 所述的厄他培南单钠盐原料为纯度较低的厄他 培南单钠盐， 例如纯 度为 85 % -97 % (较佳地为 90 % -95 % )的厄他培南单钠盐。 所述的厄他培南单钠 盐原料现有的任意形态的厄他培南单钠盐， 例如无定型厄他培南单钠盐、 任意 一种或多种的厄他培南单钠盐的已知晶型、 或者是两者的组合。 所述的厄他培 南的已知晶型包括： 厄他培南单钠盐 A型结晶、 厄他培南单钠盐 B型结晶、 厄他 培南单钠盐 C型结晶、 厄他培南单钠盐 D型结晶、 厄他培南单钠盐 E型结晶等。 所述的包含厄他培南单钠盐原料的水溶也可以 是带有保护基的厄他培南脱保 护反应后的含厄他培南单钠盐的水溶液。 例如文献 J. Org. Chem， 2005, 70, 7489〜7487中所述的厄他培南脱保护反应后的水� ��液。

所述的含钠无机碱包括： 碳酸钠、 碳酸氢钠、 氢氧化钠等； 优选为碳酸氢 钠或碳酸钠。 b) 将步骤 a)的水溶液的温度控制在一定温度（如 -2〜10°C )， 然后用酸性 溶液将步骤 a)的水溶液的 pH调节至第一 pH (如 pH为 4. 4〜6. 0； 优选地， pH为 4. 6〜5. 8或4. 6〜5. 0)后， 加入脱色剂进行脱色， 从而得到经脱色的溶液； 所述的第一 pH不宜太低， 否则易导致产品收率降低； 所述的第一 pH不宜太 高， 否则易导致产品脱色效果不佳。 其中， 所述的酸性溶液选自下组： 甲酸或 其(^ ₄ 有机醇溶液、 乙酸或其(^ ₄ 有机醇溶液、 丙酸或其(^ ₄ 有机醇溶液或盐酸或 其^- ₄ 有机醇溶液。 在另一优选例中， 所述的酸性溶液为甲酸的甲醇溶液或乙酸 的甲醇溶液。 在另一优选例中， 所述的酸性溶液为 l〜25mol/L (优选为 3〜 10mol/L)的甲酸的 d— ₄ 有机醇溶液、 l〜25mol/L (优选为 3〜10mol/L)的乙酸的 d— ₄ 有机醇溶液、 l〜25mol/L (优选为 3〜10mol/L)的丙酸的 d— ₄ 有机醇溶液、 或 l〜25mol/L (优选为 3〜10mol/L)的盐酸的 d— ₄ 有机醇溶液。

所述的脱色剂包括： 活性炭、 白土、 硅藻土、 二氧化硅、 离子交换树脂、 或吸附树脂。 较佳地， 所述的脱色剂为活性炭或离子交换树脂。

应理解， 所述的脱色步骤之后包括过滤步骤， 收集的滤液即为经脱色的溶 液。 c) 将经脱色的溶液的温度控制在一定温度（如 -2〜10°C )， 然后用碱性溶 液将前述经脱色的溶液的 pH调节至第二 pH (如 pH为 5. 0〜6. 0 ; 优选地， pH为

5. 3〜5. 8)， 然后加入第一溶剂； 所述的第二 pH不宜太高或太低， 否则导致析晶收率降低或得到的晶体纯度 不够。 其中， 所述的碱性溶液选自下组： 任意浓度的氢氧化钠的水溶液或 d- ₄ 有机醇溶液、 任意浓度的碳酸氢钠的水溶液或 d- ₄ 有机醇溶液、 任意浓度的碳酸 钠的水溶液或 d- ₄ 有机醇溶液、 任意浓度的 2-乙基己酸钠的水溶液或(^ ₄ 有机醇 溶液。 在另一优选例中， 所述的碱性溶液为氢氧化钠的水溶液。 在另一优选例 中， 所述的碱性溶液的摩尔浓度为 l〜25mol/L; 较佳地， 为 3〜10mol/L; 更佳 地， 为 3〜5mol/L。

所述的第一溶剂包括： 甲醇、 乙醇、 正丙醇、 异丙醇、 二氯甲垸等； 优选 为甲醇。

所述的第一溶剂与步骤 a)所用水的体积之比为 0. 5 : 1〜3： 1。 d) 将前述步骤得到的溶液温度控制在一定温度 （如 0〜- 40°C ; 优选 -10〜 -25°C ) , 然后加入第二溶剂， 搅拌， 析晶， 从而得到经结晶的厄他培南单钠盐。

其中， 所述的第二溶剂包括： 甲醇、 乙醇、 正丙醇、 异丙醇、 二氯甲垸等。 优选为正丙醇。

所述的第二溶剂与步骤 a)所用水的体积之比为 0. 5 : 1〜3： 1。

在步骤 d)中， 在析晶后， 还包括步骤： 过滤， 以及用有机溶剂洗涤滤饼。 其中， 所述的有机溶剂选自下组： 丙酮、 甲基乙基酮、 乙酸甲酯、 乙酸乙酯、 乙酸异丙酯、 四氢呋喃、 乙醚、 甲基叔丁基醚、 二氯甲垸、 甲醇、 乙醇、 正丙 醇、 异丙醇、 或其组合； 较佳地为甲醇、 乙醇、 丙酮、 二氯甲垸、 四氢呋喃。 与现有技术相比， 本发明的主要优点在于：

本发明提供了一种厄他培南单钠盐的纯化方法 。 所述方法结合了脱色和结 晶等步骤， 制得了色度符合药用要求的厄他培南单钠盐产 物， 将该产物或其制 剂配制成溶液后， 在较长时间 （至少 6小时） 内， 其色度仍然符合药用要求， 从而保证了药物的质量以及安全性， 适合临床应用。 下面结合具体实施， 进一步阐述本发明。 应理解， 这些实施例仅用于说明 本发明而不用于限制本发明的范围。 下列实施例中未注明具体条件的实验方 法， 通常按照常规条件， 或按照制造厂商所建议的条件。 除非另外说明， 否则 百分比和份数按重量计算。 厄他培南原料根据文献 [张义凤. 碳青霉烯类抗生素厄他培南的合成 [J] . 中国药科大学学报， 2007， 38 (4) : 305-310]报道的方法制备得到。

标准比色液参见中国药典 2005版二部附录 IX A 第一法。 实施例 1 制备低色度厄他培南单钠盐样品 1

将 1. 86g NaHC0 ₃ 溶于 60ml蒸馏水中； 冷却至 0〜5°C， 加入厄他培南单钠盐 原料 10. 0g (纯度 95%)，溶清。 0〜5°C用 3mol/L的乙酸-甲醇溶液调节 pH约 4. 8 (记 第一 pH)， 加入 2g活性炭脱色 30min， 在氩气保护及冰水浴下滤除活性炭， 用 3mol/L的氢氧化钠水溶液调节 pH约 5. 3 (记第二 pH)。 加入 100ml甲醇， 冷却至 -20〜- 15°C， 滴加 50ml正丙醇， 慢速搅拌 40min， 再滴加 100ml正丙醇， 滴毕搅 拌析晶 30min， 过滤， 用少量甲醇洗涤滤饼， 抽干溶剂， 收集固体， 得厄他培 南单钠盐样品 1 (7. 4g，白色固体）， HPLC纯度 99. 2%。

取本品 lg， 加 0. 9%NaCl溶液 10ml溶解后， 与黄色 1号或黄绿色 1号标准比色 液比较。 结果表明： 样品 1的色度浅于黄绿色 1号。 实施例 2 制备低色度厄他培南单钠盐样品 2

将 1. 41g N¾C0 ₃ 溶于 90ml蒸馏水中， 冷却至 0〜5°C， 加入厄他培南单钠盐 原料 10. 0g (纯度 95%)，溶清。 0〜5°C用 5mol/L的乙酸-甲醇溶液调节 pH约 4. 6 (记 第一 pH) ; 加入 2g树脂 （型号 HP-20 ) 搅拌 20min， 在氩气保护及冰水浴下过滤， 用 5mol/L的氢氧化钠水溶液调节 pH约 5. 6 (记第二 pH)。 加入 200ml甲醇， 冷却至 -20〜- 15°C， 滴加 90ml正丙醇， 慢速搅拌 80min， 再滴加 250ml正丙醇， 滴毕搅 拌析晶 90min， 过滤， 用少量丙酮洗涤滤饼， 抽干溶剂， 收集固体， 得厄他培 南单钠盐样品 2 (7. 0g， 白色固体）， HPLC纯度 98. 7%。

取本品 lg， 加 0. 9%NaCl溶液 10ml溶解后， 与黄色 1号或黄绿色 1号标准比色 液比较。 结果表明： 样品 2的色度浅于黄绿色 1号。 实施例 3 制备低色度厄他培南单钠盐样品 3

将 1. 76g NaHC0 ₃ 溶于 120ml蒸馏水中； 冷却至 0〜5°C， 加入厄他培南单钠盐 原料 10. 0g (纯度 95%)，溶清。 0〜5°C用 7mol/L的乙酸-甲醇溶液调节 pH约 5. 0 (记 第一 pH)， 加入 2g活性炭脱色 20min， 在氩气保护及冰水浴下滤除活性炭， 用 lOmol/L的碳酸氢钠水溶液调节 pH约 5. 4 (记第二 pH)。 加入 70ml甲醇， 冷却至 -10〜- 15 °C， 滴加 50ml正丙醇， 慢速搅拌 70min， 再滴加 30ml正丙醇， 滴毕搅 拌析晶 lOmin ; 过滤， 用少量二氯甲垸洗涤滤饼， 抽干溶剂， 收集固体， 得厄 他培南单钠盐样品 3 (6. 5g， 白色固体）， HPLC纯度 98. 4%。

取本品 lg， 加 0. 9%NaCl溶液 10ml溶解后， 与黄色 1号或黄绿色 1号标准比色 液比较。 结果表明： 样品 3的色度浅于黄绿色 1号。 实施例 4 制备低色度厄他培南单钠盐样品 4

将厄他培南单钠盐原料 10. 0g (纯度 95% ) 溶于 80ml蒸馏水中， 冷却至 5〜 10°C， 用 10mol/L的乙酸-甲醇溶液调节 pH约 4. 6 (记第一 pH)， 加入 5g树脂 （型 号 HP-20 ) 脱色 5min， 在氩气保护及冰水浴下过滤， 用 5mol/L的碳酸钠水溶液 调节 pH约 5. 4 (记第二 pH)。 加入 90ml甲醇， 冷却至 -20〜- 15 °C， 滴加 50ml正丙 醇， 慢速搅拌 40min， 再滴加 50ml正丙醇， 滴毕过滤， 用少量四氢呋喃洗涤滤 饼， 抽干溶剂， 收集固体， 得厄他培南单钠盐样品 4 (6. lg， 白色固体）， HPLC 纯度 98. 9%。

取本品 lg， 加 0. 9%NaCl溶液 10ml溶解后， 与黄色 1号或黄绿色 1号标准比色 液比较。 结果表明： 样品 4的色度浅于黄绿色 1号。 实施例 5 制备低色度厄他培南单钠盐样品 5

按照文献 J. Org. Chem， 2005， 70， 7489〜7487公开的方法， 将保护的厄他 培南氢化后处理得到的厄他培南单钠盐的水溶 液 （浓度为 140g/L、 lOOmL ) ， 冷却至 5〜10°C， 用 20mol/L的乙酸-甲醇溶液调节 pH约 4. 9 (记第一 pH)。 加入 5g 活性炭脱色 10min， 在氩气保护及冰水浴下过滤， 用 20mol/L的碳酸氢钠水溶液 调节 pH约 5. 5 (记第二 pH)。 加入 120ml甲醇， 冷却至 -20〜- 15°C， 滴加 90ml正丙 醇， 慢速搅拌 40min， 再滴加 120ml正丙醇， 滴毕过滤， 用少量乙醇洗涤滤饼， 抽干溶剂， 收集固体， 得厄他培南单钠盐样品 5 ( 7. 7g , 白色固体） ， HPLC纯 度 98. 0%。

取本品 lg， 加 0. 9%NaCl溶液 10ml溶解后， 与黄色标准比色液或黄绿色标准 比色液比较。 结果表明： 样品 5的色度浅于黄绿色 1号。 对比例 1 制备方法可参照 CN02818431的实施例 1， 制得厄他培南单钠盐对照品 1 (85 克）， 取本品 lg， 力 P0. 9%NaCl溶液 10ml溶解后， 与黄色标准比色液或黄绿色标 准比色液比较。 结果表明： 对照品 1的色度约为黄色 6号。 对比例 2

制备方法可参照 CN200510030660的实施例 1， 制得厄他培南单钠盐对照品 2 (0. 30g, 收率 60%)， 取本品 lg， 力 P0. 9%NaCl溶液 10ml溶解后， 与黄色标准比色 液或黄绿色标准比色液比较。 结果表明： 对照品 1的色度约为黄色 7号。 对比例 3-4

制备方法同实施例 1， 不同点在于采用表 1所述的第一 pH:

表 1

结果表明： 脱色时 pH值太高时， 产品色度很差（远超过黄绿色 1号）， 不符 合药用要求； 脱色时 pH值太低则导致产品收率低， 不符合产业化要求。 对比例 5

第一组： 操作同实施例 1， 重复 10次， 所得产品依次记为批次 1-批次 10。 第二组： 进行如下操作， 重复 10次， 所得产品依次记为批次 11-批次 20: 将 1. 86g NaHC0 ₃ 溶于 60ml蒸馏水中； 冷却至 0〜5°C， 加入厄他培南单钠盐 原料 lO. Og (纯度 95%) ， 溶清。 0〜5°C用 3mol/L的乙酸-甲醇溶液调节 pH约 5. 5， 加入 2g活性炭脱色 30min，在氩气保护及冰水浴下滤除活性炭。加� �� 100ml甲醇， 冷却至 -20〜- 15°C， 滴加 50ml正丙醇， 慢速搅拌 40min， 再滴加 100ml正丙醇， 滴毕搅拌析晶 30min， 过滤， 用少量甲醇洗涤滤饼， 抽干溶剂， 收集固体， 得 厄他培南单钠盐。

取批次 1-20的产品 lg， 力 P0. 9%NaCl溶液 10ml溶解后， 与黄色 1号或黄绿色 1 号标准比色液比较。

结果如表 2所示。 表 2

结果表明： 采用本发明的方法处理厄他培南单钠盐原料后 ， 所得的厄他培 南单钠盐色度低、 且制得的每个批次的产品色度稳定， 均符合药用质量标准。 综上所述表明： 本发明的厄他培南纯化方法， 在第一 pH范围内进行脱色， 在第二范围内进行析晶， 可得到色度低且稳定的厄他培南单钠盐产品， 更适用 于临床。 在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作 为参考， 就如同每一篇文献 被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅 读了本发明的上述讲授内容之后， 本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修 改， 这些等价形式同样落于本申 请所附权利要求书所限定的范围。