〔細胞保護剤のスクリーニング方法〕
 本発明は、(1)被験物質とHsp90との結合性を� �定する工程、(2)被験物質のヒートショック� �白質発現誘導活性を測定する工程、および(3 )被験物質のHsp90クライアント蛋白質分解誘導 活性を測定する工程、を含む細胞保護剤のス クリーニング方法を提供する。被験物質に対 して上記の工程(1)~(3)を実施することにより� �優れた細胞保護剤を選抜することができる� �

 工程(1)では、Hsp90結合活性を有する被験� �質の選抜を目的として、被験物質とHsp90との 結合性を測定する。

 工程(1)としては、例えば、Hsp90とイミダ� �チアジン誘導体との結合性に対する被験物� �の阻害活性を測定する工程を含むものが挙� �られる。Hsp90とイミダゾチアジン誘導体との 結合に対する被験物質の阻害活性は、例えば 、(i)被験物質非存在下における固相化イミダ ゾチアジン誘導体とHsp90との結合量と、(ii)被 験物質存在下における固相化イミダゾチアジ ン誘導体とHsp90との結合量を測定し、比較す� ��ことにより測定することができる。また、( i)被験物質非存在下における固相化Hsp90とラ� �ル化イミダゾチアジン誘導体の結合量と、(i i)被験物質存在下における固相化Hsp90とラベ� �化イミダゾチアジン誘導体の結合量とを測� �し、比較することによっても測定できる。

 Hsp90は、熱ショック蛋白質90(heat shock prot ein 90)を意味し、後述するイミダゾチアジン� ��導体との結合性を有するものであれば特に� ��定されない。本発明のHsp90には、Hsp90蛋白質 の塩、修飾されたHsp90蛋白質、担体と結合可� ��となるようにアミノ酸配列の一部が修飾さ� ��たHsp90蛋白質、担体と結合させた固相化Hsp90 蛋白質も含まれる。Hsp90蛋白質と結合させる� ��めの担体としては、例えば、アガロース、� ��キストラン、セルロースなどの不溶性多糖� ��、ポリスチレン、ポリアクリルアミド、シ� ��コン等の合成樹脂、あるいはガラス等が挙� ��られる。Hsp90と担体との結合は、公知の方� �に従って行うことができる。

 Hsp90としては、各種動物、特にヒト由来� �ものが使用できる。ヒトHsp90としては、ヒト Hsp90α(GENBANK Accession No. P07900)、ヒトHsp90β(GEN BANK Accession No. P08238)が好ましく、特にN末端 にヒスチジンタグを付加したヒトHsp90α(例え� ��、His-hHsp90α、His2-hHsp90αなど)が好ましい。Hi s-hHsp90αは、例えば、国際公開番号WO2004/069999� ��公報 57~58頁〔実施例2(2)〕記載の方法に準� �、以下のようにして調製することができる� �

 まず、ヒトの骨格筋の相補的DNA(cDNA)ライ� ��ラリーに含まれるHsp90αをコードする領域を ポリメラーゼ連鎖反応(PCR)法により増幅する� ��増幅されたヒトHsp90α領域をプラスミドベク ターのクローニングサイトに挿入し、His-hHsp9 0α発現ベクターを構築する。該発現ベクター を大腸菌に形質転換した後、形質転換体を培 養し、His-hHsp90α蛋白質の発現を誘導する。培 養終了後、回収した大腸菌の菌体をバッファ ー(20 mM Tris-HCl(pH7.9)/500 mM NaCl/5 mM Imidazole)� ��懸濁して超音波破砕し、得られた菌体破砕� ��を、遠心分離し、その上清を回収する。こ� ��上清より、ニッケルカラムを用いてHis-hHsp90 α蛋白質を得る。

 イミダゾチアジン誘導体は、イミダゾチ� ��ジン骨格を持つ化合物であって、Hsp90との� �合性を有するものであれば特に限定されな� �。本発明のイミダゾチアジン誘導体には、� �体と結合可能となるように末端が修飾され� �イミダゾチアジン誘導体、担体と結合させ� �固相化イミダゾチアジン誘導体、ラベル化� �ミダゾチアジン誘導体も含まれる。イミダ� �チアジン誘導体と結合させるための担体と� �ては、例えば、アガロース、デキストラン� �セルロースなどの不溶性多糖類、ポリスチ� �ン、ポリアクリルアミド、シリコン等の合� �樹脂、あるいはガラス等が挙げられる。イ� �ダゾチアジン誘導体と担体との結合は、公� �の方法に従って行うことができる。

 イミダゾチアジン誘導体のラベル化は、� ��えば、放射性同位元素、蛍光色素、発光物� ��を用いて行うことができる。

 イミダゾチアジン誘導体の例としては、以� ��の化合物(I)またはその塩が挙げられる。
〔式中、R ¹ は、-(S) _n -R ² または-NR ³ R ⁴ を、nは0~2の整数を、R ² は水素原子、置換されていてもよい炭化水素 基または置換されていてもよい複素環基を、 R ³ およびR ⁴ は同一または異なって水素原子、置換されて いてもよい炭化水素基、置換されていてもよ い複素環基またはそれらが結合している窒素 原子と一緒に形成する含窒素複素環を、R ⁵ は水素原子、置換されていてもよい炭化水素 基、シアノ基、アシル基、エステル化もしく はアミド化されていてもよいカルボキシル基 または置換されていてもよい複素環基を、
を、R ⁶ は、水素原子、置換されていてもよい炭化水 素基、シアノ基、アシル基、エステル化もし くはアミド化されていてもよいカルボキシル 基または置換されていてもよい複素環基を、 R ⁷ は置換されていてもよい水酸基を、R ⁸ およびR ⁹ はそれぞれ水素原子または置換されていても よい炭化水素基を(R ⁵ とR ⁶ 、R ⁵ とR ⁸ またはR ⁸ とR ⁹ はそれぞれ一緒になって置換されていてもよ い環状炭化水素または複素環を形成してもよ い)、
を、R ¹⁰ は、水素原子、-ZR ¹⁵ (Zは-SO ₂ -、-SO-、-CONR ¹⁸ SO ₂ -(R ¹⁸ はC _1-6 アルキルを示す)、-CONR ¹⁹ -(R ¹⁹ はC _1-6 アルキルを示す)または-CO-を、R ¹⁵ は、置換されていてもよい炭化水素基または 置換されていてもよい複素環基を示す)また� �-P(O)R ¹⁶ R ¹⁷ (R ¹⁶ およびR ¹⁷ はそれぞれ置換されていてもよい炭化水素基 、置換されていてもよい水酸基または置換さ れていてもよいアミノ基を示す)を、R ¹¹ は水素原子または置換されていてもよい炭化 水素基を(R ¹⁰ とR ¹¹ は一緒になって置換されていてもよい含窒素 複素環を形成してもよい)、R ¹² およびR ¹³ はそれぞれ水素原子または置換されていても よい炭化水素基、あるいはそれらが結合して いる窒素原子と一緒になって含窒素複素環を 、R ¹⁴ は、水素原子、置換されていてもよい炭化水 素基または-ZR ¹⁵ (ZおよびR ¹⁵ は、前記と同意義を示す)を示す。但し、R ⁵ が水素原子、
を示すとき、R ¹⁴ は置換されていてもよい炭化水素基または-ZR ¹⁵ (Z、R ¹⁵ は、前記と同意義を示す)を示す。〕

 上記式において、R ¹ は、-(S) _n -R ² または-NR ³ R ⁴ を、nは0~2の整数を、R ² は水素原子、置換されていてもよい炭化水素 基または置換されていてもよい複素環基を、 R ³ およびR ⁴ は同一または異なって水素原子、置換されて いてもよい炭化水素基、置換されていてもよ い複素環基またはそれらが結合している窒素 原子と一緒に形成する含窒素複素環を示す。

 R ² で表される置換されていてもよい炭化水素基 の「炭化水素基」としては、アルキル基、ア ルケニル基、アルキニル基、アリール基、ア ラルキル基、シクロアルキル基、シクロアル ケニル基、などが挙げられる。

 該「アルキル基」の例としては、C _1-20 アルキル基(例えばメチル、エチル、プロピ� �、イソプロピル、ブチル、イソブチル、sec-� ��チル、tert-ブチル、ペンチル、イソペンチ� �、ネオペンチル、tert-ペンチル、1-メチルブ� ��ル、2-メチルブチル、1,2-ジメチルプロピル� ��1-エチルプロピル、ヘキシル、イソヘキシ� �、1-メチルペンチル、2-メチルペンチル、3-� �チルペンチル、1,1-ジメチルブチル、1,2-ジメ チルブチル、2,2-ジメチルブチル、3,3-ジメチ� ��ブチル、1,3-ジメチルブチル、2,3-ジメチル� �チル、1-エチルブチル、2-エチルブチル、1,1, 2-トリメチルプロピル、1,2,2-トリメチルプロ� ��ル、1-エチル-1-メチルプロピル、1-エチル-2- メチルプロピル、ヘプチル、イソヘプチル、 1-メチルヘキシル、2-メチルヘキシル、3-メチ ルヘキシル、4-メチルヘキシル、1-エチルペ� �チル、2-エチルペンチル、3-エチルペンチル� ��1-プロピルブチル、1,1-ジメチルペンチル、1 ,2-ジメチルペンチル、1,3-ジメチルペンチル� �1,4-ジメチルペンチル、2,2-ジメチルペンチル 、2,3-ジメチルペンチル、2,4-ジメチルペンチ� ��、3,3-ジメチルペンチル、3,4-ジメチルペン� �ル、4,4-ジメチルペンチル、1,1,2-トリメチル� ��チル、1,1,3-トリメチルブチル、1,2,2-トリメ� ��ルブチル、1,2,3-トリメチルブチル、1,3,3-ト� ��メチルブチル、2,2,3-トリメチルブチル、2,3, 3-トリメチルブチル、1-エチル-1-メチルブチ� �、1-エチル-2-メチルブチル、1-エチル-3-メチ� ��ブチル、2-エチル-1-メチルブチル、2-エチル -2-メチルブチル、2-エチル-3-メチルブチル、� ��クチル、イソオクチル、1-メチルヘプチル� �2-メチルヘプチル、3-メチルヘプチル、4-メ� �ルヘプチル、5-メチルヘプチル、1-エチルヘ� ��シル、2-エチルヘキシル、3-エチルヘキシル 、4-エチルヘキシル、1-プロピルペンチル、2- プロピルペンチル、1,1-ジメチルヘキシル、2, 2-ジメチルヘキシル、3,3-ジメチルヘキシル、 4,4-ジメチルヘキシル、5,5-ジメチルヘキシル� ��3-エチル-3-メチルペンチル、1,1-ジエチルブ� ��ル、2,2-ジエチルブチル、1,1,2,2-テトラメチ� ��ブチル、1,1,3,3-テトラメチルブチル、2,2,3,3- テトラメチルブチル、1,1-ジメチル-2-エチル� �チル、ノニル、イソノニル、1-イソブチル-3- メチルブチル、デシル、イソデシル、ウンデ シル、イソウンデシル、ドデシル、イソドデ シル、トリデシル、イソトリデシル、テトラ デシル、イソテトラデシル、ペンタデシル、 イソペンタデシル、ヘキサデシル、イソヘキ サデシル、ヘプタデシル、イソヘプタデシル 、オクタデシル、イソオクタデシル、ノナデ シル、イソノナデシルなど)が挙げられ、好� �しくはC _1-10 アルキル基(例えば、メチル、エチル、プロ� �ル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、se c-ブチル、tert-ブチル、ペンチル、イソペン� �ル、2-メチルブチル、ヘキシル、イソヘキシ ル、2-エチルブチル、1,1-ジメチルブチル、2,2 -ジメチルブチル、3,3-ジメチルブチル、ヘプ� ��ル、イソヘプチル、1-メチルヘキシル、1-エ チルペンチル、3-エチルペンチル、1-プロピ� �ブチル、オクチル、イソオクチル、2-プロピ ルペンチル、ノニル、イソノニル、1-イソブ� ��ル-3-メチルブチル、デシル、イソデシルな� ��)が挙げられる。

 該「アルケニル基」としては、C _2-20 アルケニル基(例えばビニル、アリル、イソ� �ロペニル、1-プロペニル、1-ブテニル、2-ブ� �ニル、3-ブテニル、1,3-ブタジエニル、1-メチ ル-1-プロペニル、1-メチル-2-プロペニル、2-� �チル-1-プロペニル、2-メチル-2-プロペニル、 1-ペンテニル、2-ペンテニル、3-ペンテニル、 4-ペンテニル、1,3-ペンタジエニル、2,4-ペン� �ジエニル、1,4-ペンタジエニル、1-メチル-1-� �テニル、2-メチル-1-ブテニル、3-メチル-1-ブ� ��ニル、1-メチル-2-ブテニル、2-メチル-2-ブテ ニル、3-メチル-2-ブテニル、1-メチル-3-ブテ� �ル、2-メチル-3-ブテニル、3-メチル-3-ブテニ� ��、1-エチル-1-プロペニル、1-エチル-2-プロペ ニル、1-ヘキセニル、2-ヘキセニル、3-ヘキセ ニル、4-ヘキセニル、5-ヘキセニル、1,3-ヘキ� ��ジエニル、1,4-ヘキサジエニル、1,5-ヘキサ� �エニル、2,4-ヘキサジエニル、2,5-ヘキサジエ ニル、1-メチル-1-ペンテニル、2-メチル-1-ペ� �テニル、3-メチル-1-ペンテニル、4-メチル-1-� ��ンテニル、1-メチル-2-ペンテニル、2-メチル -2-ペンテニル、3-メチル-2-ペンテニル、4-メ� �ル-2-ペンテニル、1-メチル-3-ペンテニル、2-� ��チル-3-ペンテニル、3-メチル-3-ペンテニル� �4-メチル-3-ペンテニル、1-メチル-4-ペンテニ� ��、2-メチル-4-ペンテニル、3-メチル-4-ペンテ ニル、4-メチル-4-ペンテニル、1-エチル-1-ブ� �ニル、2-エチル-1-ブテニル、1-エチル-2-ブテ� ��ル、2-エチル-2-ブテニル、1-エチル-3-ブテニ ル、2-エチル-3-ブテニル、1-ヘプテニル、2-ヘ プテニル、3-ヘプテニル、4-ヘプテニル、5-ヘ プテニル、6-ヘプテニル、1,3-ヘプタジエニル 、1,4-ヘプタジエニル、1,5-ヘプタジエニル、1 ,6-ヘプタジエニル、2,4-ヘプタジエニル、2,5-� ��プタジエニル、2,6-ヘプタジエニル、3,5-ヘ� �タジエニル、3,6-ヘプタジエニル、4,6-ヘプタ ジエニル、1-メチル-1-ヘキセニル、1-メチル-2 -ヘキセニル、1-メチル-3-ヘキセニル、1-メチ� ��-4-ヘキセニル、1-メチル-5-ヘキセニル、2-メ チル-1-ヘキセニル、2-メチル-2-ヘキセニル、2 -メチル-3-ヘキセニル、2-メチル-4-ヘキセニル 、2-メチル-5-ヘキセニル、3-メチル-1-ヘキセ� �ル、3-メチル-2-ヘキセニル、3-メチル-3-ヘキ� ��ニル、3-メチル-4-ヘキセニル、3-メチル-5-ヘ キセニル、4-メチル-1-ヘキセニル、4-メチル-2 -ヘキセニル、4-メチル-3-ヘキセニル、4-メチ� ��-4-ヘキセニル、4-メチル-5-ヘキセニル、5-メ チル-1-ヘキセニル、5-メチル-2-ヘキセニル、5 -メチル-3-ヘキセニル、5-メチル-4-ヘキセニル 、5-メチル-5-ヘキセニル、1-メチル-2,4-ヘキサ ジエニル、2-メチル-2,4-ヘキサジエニル、3-メ チル-2,4-ヘキサジエニル、4-メチル-2,4-ヘキサ ジエニル、5-メチル-2,4-ヘキサジエニル、5-メ チル-2,5-ヘキサジエニル、1-エチル-1-ペンテ� �ル、2-エチル-1-ペンテニル、3-エチル-1-ペン� ��ニル、1-エチル-2-ペンテニル、2-エチル-2-ペ ンテニル、3-エチル-2-ペンテニル、1-エチル-3 -ペンテニル、2-エチル-3-ペンテニル、3-エチ� ��-3-ペンテニル、1-エチル-4-ペンテニル、2-エ チル-4-ペンテニル、3-エチル-4-ペンテニル、1 -プロピル-1-ブテニル、1-プロピル-2-ブテニル 、1-プロピル-3-ブテニル、2-オクテニル、3-オ クテニル、4-オクテニル、5-オクテニル、6-オ クテニル、7-オクテニル、1-メチル-2-ヘプテ� �ル、1-メチル-3-ヘプテニル、1-メチル-4-ヘプ� ��ニル、1-メチル-5-ヘプテニル、1-メチル-6-ヘ プテニル、6-メチル-2-ヘプテニル、6-メチル-3 -ヘプテニル、6-メチル-4-ヘプテニル、6-メチ� ��-5-ヘプテニル、6-メチル-6-ヘプテニル、6-メ チル-3,5-ヘプタジエニル、6-メチル-2,5-ヘプタ ジエニル、4-エチル-2-ヘキセニル、4-エチル-3 -ヘキセニル、2-ノネニル、8-ノネニル、7-メ� �ル-1-オクテニル、7-メチル-2-オクテニル、7-� ��チル-3-オクテニル、7-メチル-4-オクテニル� �7-メチル-5-オクテニル、7-メチル-6-オクテニ� ��、7-メチル-7-オクテニル、1-エチル-2-ヘプテ ニル、1-エチル-3-ヘプテニル、1-エチル-4-ヘ� �テニル、1-エチル-5-ヘプテニル、1-エチル-6-� ��プテニル、5-エチル-2-ヘプテニル、5-エチル -3-ヘプテニル、5-エチル-4-ヘプテニル、5-エ� �ル-5-ヘプテニル、5-エチル-6-ヘプテニル、2-� ��セニル、9-デセニル、8-メチル-2-ノネニル、 8-メチル-3-ノネニル、8-メチル-4-ノネニル、8- メチル-5-ノネニル、8-メチル-6-ノネニル、8-� �チル-7-ノネニル、8-メチル-8-ノネニル、3,7-� �メチル-2,6-オクタジエニル、2-ウンデセニル� ��10-ウンデセニル、9-メチル-2-デセニル、9-メ チル-8-デセニル、9-メチル-9-デセニル、2-ド� �セニル、11-ドデセニル、10-メチル-2-ウンデ� �ニル、10-メチル-9-ウンデセニル、10-メチル-1 0-ウンデセニル、2-トリデセニル、12-トリデ� �ニル、11-メチル-2-ドデセニル、11-メチル-10-� ��デセニル、11-メチル-11-ドデセニル、2-テト� ��デセニル、13-テトラデセニル、12-メチル-2-� ��リデセニル、12-メチル-11-トリデセニル、12- メチル-12-トリデセニル、2-ペンタデセニル、 14-ペンタデセニル、13-メチル-2-テトラデセニ ル、13-メチル-12-テトラデセニル、13-メチル-1 3-テトラデセニル、3,7,11-トリメチル-2,6,10-ド� ��カトリエニル、2-ヘキサデセニル、15-ヘキ� �デセニル、14-メチル-2-ペンタデセニル、14-� �チル-13-ペンタデセニル、14-メチル-14-ペンタ デセニル、2-ヘプタデセニル、16-ヘプタデセ� ��ル、15-メチル-2-ヘキサデセニル、15-メチル- 14-ヘキサデセニル、15-メチル-15-ヘキサデセ� �ル、2-オクタデセニル、17-オクタデセニル、 9,12-オクタデカジエニル、9,12,15-オクタデカ� �リエニル、9,11,13-オクタデカトリエニル、16- メチル-2-ヘプタデセニル、16-メチル-15-ヘプ� �デセニル、16-メチル-16-ヘプタデセニル、2-� �ナデセニル、18-ノナデセニル、17-メチル-2-� �クタデセニル、17-メチル-16-オクタデセニル� ��17-メチル-17-オクタデセニル、2-エイコセニ� ��、19-エイコセニル、5,8,11,14-イコサテトラエ ニル、18-メチル-2-ノナデセニル、18-メチル-17 -ノナデセニル、18-メチル-18-ノナデセニル、3 ,7,11,15-テトラメチル-2,6,10,14-ドデカテトラエ� ��ルなど)が挙げられ、好ましくはC _2-10 アルケニル基(例えばビニル、アリル、イソ� �ロペニル、2-メチル-1-プロペニル、3-ブテニ� ��、4-ペンテニル、3-メチル-2-ブテニル、3-メ� ��ル-3-ブテニル、5-ヘキセニル、4-メチル-2-ペ ンテニル、4-メチル-3-ペンテニル、4-メチル-4 -ペンテニル、6-ヘプテニル、5-メチル-2-ヘキ� ��ニル、5-メチル-3-ヘキセニル、5-メチル-4-ヘ キセニル、5-メチル-5-ヘキセニル、5-メチル-2 ,4-ヘキサジエニル、7-オクテニル、6-メチル-2 -ヘプテニル、6-メチル-3-ヘプテニル、6-メチ� ��-4-ヘプテニル、6-メチル-5-ヘプテニル、6-メ チル-6-ヘプテニル、8-ノネニル、9-デセニル� �3,7-ジメチル-2,6-オクタジエニルなど)が挙げ� ��れる。

 該「アルキニル基」の例としては、C _2-20 アルキニル基(例えばエチニル、1-プロピニル 、2-プロピニル、1-ブチニル、2-ブチニル、3-� ��チニル、1-メチル-2-プロピニル、1-ペンチニ ル、2-ペンチニル、3-ペンチニル、4-ペンチニ ル、1-メチル-3-ブチニル、2-メチル-3-ブチニ� �、1-ヘキシニル、2-ヘキシニル、3-ヘキシニ� �、4-ヘキシニル、5-ヘキシニル、1-ヘプチニ� �、2-ヘプチニル、3-ヘプチニル、4-ヘプチニ� �、5-ヘプチニル、6-ヘプチニル、2-オクチニ� �、3-オクチニル、4-オクチニル、5-オクチニ� �、6-オクチニル、7-オクチニル、2-ノニニル� �8-ノニニル、2-デシニル、9-デシニル、2-ウン デシニル、10-ウンデシニル、2-ドデシニル、1 1-ドデシニル、2-トリデシニル、12-トリデシ� �ル、2-テトラデシニル、13-テトラデシニル、 2-ペンタデシニル、14-ペンタデシニル、2-ヘ� �サデシニル、15-ヘキサデシニル、2-ヘプタデ シニル、16-ヘプタデシニル、2-オクタデシニ� ��、17-オクタデシニル、2-ノナデシニル、18-� �ナデシニル、2-エイコシニル、19-エイコシニ ルなど)が挙げられ、好ましくはC _2-8 アルケニル基(例えばエチニル、1-プロピニル 、2-プロピニル、2-ブチニル、3-ブチニル、2-� ��ンチニル、4-ペンチニル、2-ヘキシニル、5-� ��キシニル、2-ヘプチニル、6-ヘプチニル、2-� ��クチニル、7-オクチニルなど)が挙げられる� ��

 該「アリール基」の例としては、C _6-10 アリール基(例えばフェニル、o-トリル、m-ト� ��ル、p-トリル、2-、3-または4-ビフェニル、1- または2-ナフチル、アントリル、フェナント� ��ルなど)が挙げられ、好ましくはフェニル、 p-トリル、2-、3-または4-ビフェニル、1-また� �2-ナフチルなどが挙げられる。

 該「アラルキル基」の例としてはC _7-10 アラルキル基(例えばベンジル、1-フェネチル 、2-フェネチル、1-メチル-2-フェネチル、1-メ チル-1-フェネチル、1,1-ジメチル-2-フェネチ� �、1-フェニルプロピル、2-フェニルプロピル� ��3-フェニルプロピル、1-メチル-2-フェニルプ ロピル、2-メチル-2-フェニルプロピル、1-フ� �ニルブチル、2-フェニルブチル、3-フェニル� ��チル、4-フェニルブチル、1-フェニルペンチ ル、2-フェニルペンチル、3-フェニルペンチ� �、4-フェニルペンチル、5-フェニルペンチル� ��3-メチル-3-フェニルブチル、1,1-ジメチル-3-� ��ェニルプロピル、2,2-ジメチル-3-フェニルプ ロピル、1,1-ジメチル-4-フェニルブチル、2,2-� ��メチル-4-フェニルブチル、3,3-ジメチル-4-フ ェニルブチル、4-メチル-4-フェニルペンチル� ��1-メチル-5-フェニルペンチル、2-メチル-5-フ ェニルペンチル、3-メチル-5-フェニルペンチ� ��、4-メチル-5-フェニルペンチル、1-ナフチル メチル、2-ナフチルメチル、1-ナフチルエチ� �、2-ナフチルエチル、2-ビフェニルメチル、3 -ビフェニルメチル、4-ビフェニルメチル、1-� ��ントリルメチル、2-アントリルメチル、9-ア ントリルメチル、フェナントリルメチルなど )が挙げられ、好ましくはベンジル、2-フェネ チル、2-フェニルプロピル、3-フェニルプロ� �ル、2-メチル-2-フェニルプロピル、4-フェニ� ��ブチル、1-ナフチルメチル、2-ナフチルメチ ル、1-ナフチルエチル、2-ナフチルエチル、2- ビフェニルメチル、3-ビフェニルメチル、4-� �フェニルメチルなどが挙げられる。

 該「シクロアルキル基」の例としてはC _3-8 シクロアルキル基(例えばシクロプロピル、� �クロブチル、シクロペンチル、シクロヘキ� �ル、シクロヘプチル、シクロオクチルなど)� ��挙げられる。これらはさらにフェニル基な� ��のアリール基が縮合していてもよく、例え� ��インダニル、ベンゾシクロヘキシル、ベン� ��シクロヘプチル、ベンゾシクロオクチルな� ��が挙げられる。なかでも、好ましくはシク� ��ヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチ� ��、インダニル、ベンゾシクロヘプチルなど� ��挙げられる。

 また、このシクロアルキル基は、炭素数1 または2の直鎖状の原子鎖を介して架橋し、� �シクロ[2.2.1]ヘプチル、ビシクロ[2.2.2]オクチ ル、ビシクロ[3.2.1]オクチル、ビシクロ[3.3.1]� ��ニル、ビシクロ[3.2.2]ノニルなど(好ましく� �、炭素数1または2の直鎖状の原子鎖を介した 架橋を有するシクロヘキシルなど、さらに好 ましくは、ビシクロ[2.2.1]ヘプチルなど)の架� ��環式炭化水素残基を形成していてもよい。� ��た、アダマンチル基を形成していてもよい� ��

 該「シクロアルケニル基」の例としてはC _3-8 シクロアルケニル基(例えば2-シクロプロペニ ル、2-シクロブテニル、2-シクロペンテニル� �3-シクロペンテニル、2-シクロヘキセニル、3 -シクロヘキセニル、2-シクロヘプテニル、3-� ��クロヘプテニル、4-シクロヘプテニル、2-シ クロオクテニル、3-シクロオクテニル、4-シ� �ロオクテニルが挙げられる。これらはさら� �フェニル基などのアリール基が縮合してい� �もよく、例えばインデニル、ベンゾシクロ� �キセニル、ベンゾシクロヘプテニル、ベン� �シクロオクテニルなどが挙げられる。なか� �も好ましくは2-シクロヘキセニル、2-シクロ� ��プテニル、シクロオクチル、インデニルな� ��が挙げられる。

 R ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」の置換基としては、例えば(1)ニトロ基、 (2)オキソ基、(3)ハロゲン原子(例えば、フッ� �、塩素、臭素、ヨウ素等)、(4)シアノ基、(5)� ��チレン基、(6)置換されていてもよい低級ア� ��キル基、(7)置換されていてもよい低級アル� ��ニル基、(8)置換されていてもよい低級アル� ��ニル基、(9)置換されていてもよいアリール� ��、(10)置換されていてもよいアラルキル基、 (11)置換されていてもよいシクロアルキル基� �(12)低級ハロアルキル基、(13)エステル化もし くはアミド化されていてもよいカルボキシル 基、(14)チオカルバモイル基、(15)アシル基、( 16)アミジル基、(17)置換されていてもよい水� �基、(18)置換されていてもよいスルファニル� ��、(19)置換されていてもよいアルキルスルフ ィニル基、(20)置換されていてもよいアリー� �スルフィニル基、(21)置換されていてもよい� ��ルキルスルホニル基、(22)置換されていても よいアリールスルホニル基、(23)エステル化� �しくはアミド化されていてもよいスルホン� �基、(24)置換されていてもよいアミノ基、(25) ニトロ基で置換されていてもよいグアニジル 基、(26)置換されていてもよい複素環基、(27)� ��ルキレンジオキシ基、(28) イミノ基、(29)置 換されていてもよいシクロアルケニル基等が 挙げられ、これらの中から選択される1~6個の 置換基を置換可能な位置に有してもよい。

 R ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい 低級アルキル基」の「低級アルキル基」とし ては、例えば、メチル、エチル、n-プロピル� ��イソプロピル、ブチル、イソブチル、sec-ブ チル、tert-ブチルなどのC _1-4 アルキル基が挙げられる。

 該「低級アルキル基」の有していてもよい� ��換基としては、例えば、(1)ニトロ基、(2)オ� ��ソ基、(3)ハロゲン原子(例えば、フッ素、塩 素、臭素等)、(4)シアノ基、(5)メチレン基、(6 )低級アルキル基(例えば、メチル、エチル、n -プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブ� �ル、sec-ブチル、tert-ブチルなどのC _1-4 アルキル基)、(7)低級アルケニル基(例えば、� ��ニル、アリル(allyl)、イソプロペニル、1-ブ� ��ニル、2-ブテニル、3-メチル-2-ブテニル、3-� ��チル-3-ブテニル、1-ペンテニル、2-ペンテニ ルなどのC _2-5 アルケニル基)、(8)低級アルキニル基(エチニ� ��、プロパルギル、2-ブチニル、2-ペンチニル などのC _2-5 アルキニル基)、(9)アリール基(例えば、フェ� ��ル、2-、3-または4-トリル、1-または2-ナフチ ル、2-、3-または4-ビフェニルなどのC _2-12 アリール基)、(10)アラルキル基(例えば、ベン ジル、2-フェネチル、3-フェニルプロピル、1- または2-ナフチルメチル、2-、3-または4-ビフ� ��ニルメチルなどのC _7-13 アラルキル基)、(11)シクロアルキル基(例えば 、シクロプルピル、シクロブチル、シクロペ ンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、 シクロオクチルなどのC _3-8 シクロアルキル基)、(12)エステル化もしくは� ��ミド化されていてもよいカルボキシル基(例 えば、カルボキシル基、C _2-18 アルコキシカルボニル基(例えば、メトキシ� �ルボニル、エトキシカルボニル、プロポキ� �カルボニル、tert-ブトキシカルボニル、ヘキ シルオキシカルボニル、ドデシルオキシカル ボニル、ヘキサデシルオキシカルボニルなど )、C _2-18 アルケニルオキシカルボニル基(例えば、ア� �ル(allyl)オキシカルボニル、オクタ-2,6-ジエ� �ルオキシカルボニル、ドデカ-2,6,10-トリエニ ルオキシカルボニルなど)、アリールオキシ� �ルボニル基(例えば、フェノキシカルボニル� ��1-ナフトキシカルボニル、2-ナフトキシカル ボニルなど)、アラルキルオキシカルボニル� �(例えば、ベンジルオキシカルボニル、フェ� ��チルオキシカルボニル、3-フェニルプロポ� �シカルボニルなど)、カルバモイル基、前記� ��低級アルキル基、低級アルケニル基、シク� ��アルキル基、アリール基、アラルキル基お� ��び複素環基(後述するR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい 複素環基」同様のものなど)でN-モノ置換され たカルバモイル基、前記の低級アルキル基、 低級アルケニル基、シクロアルキル基、アリ ール基、アラルキル基および複素環基(後述� �るR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい 複素環基」と同様のものなど)でN,N-ジ置換さ� ��たカルバモイル基、環状アミノカルバモイ� ��基(例えば、N-ピロリジルカルボニル、N-イ� �ダゾリルカルボニル、N-ピペリジルカルボニ ル、N-ピペラジルカルボニル、N-メチル-N'-ピ� ��ラジルカルボニル、N-モルホリルカルボニ� �など))、(13)置換されていてもよい水酸基(例� ��ば、前記の低級アルキル基、低級アルケニ� ��基、シクロアルキル基、アリール基、アラ� ��キル基、エステル化もしくはアミド化され� ��いてもよいカルボキシル基で置換されてい� ��もよい水酸基、アルキルスルファニルチオ� ��ルボニルオキシ基(例えば、メチルスルファ ニルチオカルボニルオキシ、エチルスルファ ニルチオカルボニルオキシ、tert-ブトキシス� ��ファニルチオカルボニルオキシなど)、アラ ルキルスルファニルチオカルボニルオキシ基 (例えば、ベンジルスルファニルチオカルボ� �ルオキシなど)、N-イミダゾリルチオカルボ� �ルオキシ基、N-モルホリルチオカルボニルオ キシ基など)、(14)置換されていてもよいスル� ��ァニル基(例えば、スルファニル、アルキル スルファニル基(例えば、メチルスルファニ� �、エチルスルファニル、イソプロピルスル� �ァニル、tert-ブチルスルファニルなど)、ア� �ールスルファニル基(例えば、フェニルスル� ��ァニルなど)、アラルキルスルファニル基(� �えば、ベンジルスルファニルなど)など)、(15 )アルキルスルホニル基(例えば、メチルスル� ��ニル、エチルスルホニル、イソプロピルス� ��ホニル、ブチルスルホニルなど)、(16)アリ� �ルスルホニル基(例えば、ベンゼンスルフィ� ��ル、トルエンスルフィニルなど)、(17)置換� �れていてもよいアミノ基(例えば、アミノ基� ��アルキル基またはアラルキル基でモノまた� ��ジ置換されたアミノ基(例えば、メチルアミ ノ、エチルアミノ、イソプロピルアミノ、ジ メチルアミノ、ジエチルアミノ、エチルメチ ルアミノ、ベンジルアミノ、ベンジルメチル アミノなど)、アシルアミノ(例えば、ホルミ� ��アミノ、アセチルアミノ、プロピオニルア� ��ノ、ブチリルアミノ、イソブチリルアミノ� ��バレリルアミノ、イソバレリルアミノ、ピ� ��ロイルアミノ、ベンゾイルアミノ、フェナ� ��ルアミノなど)、アルコキシカルボニルアミ ノ(例えば、メトキシカルボニルアミノ、エ� �キシカルボニルアミノ、tert-ブトキシカルボ ニルアミノなど)、アリールオキシカルボニ� �アミノ(例えば、フェノキシカルボニルアミ� ��、ナフチルオキシカルボニルアミノ等)、ア ラルキルオキシカルボニルアミノ(例えば、� �ンジルオキシカルボニルアミノ、フェネチ� �オキシカルボニルアミノなど)、アルキルス� ��ホニルアミノ(例えば、メチルスルホニルア ミノ、エチルスルホニルアミノ、イソプロピ ルスルホニルアミノ、ブチルスルホニルアミ ノ等)、アリールスルホニルアミノ(例えばベ� ��ゼンスルホニルアミノ、ナフチルスルホニ� ��アミノなど)など)、(18)アルキレンジオキシ� ��(例えば、メチレンジオキシ、エチレンジオ キシなど)、(19)イミノ基などが挙げられ、こ� ��らの中から選択される1~4個の置換基を置換� ��能な位置に有してもよい。

 R ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい 低級アルケニル基」の「低級アルケニル基」 としては、例えば、ビニル、アリル(allyl)、� �ソプロペニル、1-ブテニル、2-ブテニル、3-� �チル-2-ブテニル、3-メチル-3-ブテニル、1-ペ� ��テニル、2-ペンテニルなどのC _2-5 アルケニル基が挙げられる。該「低級アルケ ニル基」の有していてもよい置換基としては 、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい 低級アルキル基」の有していてもよい置換基 と同様な数、同様のものが挙げられる。

 R ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい 低級アルキニル基」の「低級アルキニル基」 としては、例えば、エチニル、プロパルギル 、2-ブチニル、2-ペンチニルなどの低級アル� �ニル基などのC _2-5 アルキニル基が挙げられる。該「低級アルキ ニル基」の有していてもよい置換基としては 、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい 低級アルキル基」の有していてもよい置換基 と同様な数、同様のものが挙げられる。

 R ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい アリール基」の「アリール基」としては、例 えば、フェニル、2-、3-または4-トリル、1-ま� ��は2-ナフチル、2-、3-または4-ビフェニルな� �のC _2-12 アリール基が挙げられる。該「アリール基」 の有していてもよい置換基としては、前記の R ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい 低級アルキル基」の有していてもよい置換基 と同様な数、同様のものが挙げられる。

 R ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい アラルキル基」の「アラルキル基」としては 、例えば、ベンジル、2-フェネチル、3-フェ� �ルプロピル、1-または2-ナフチルメチル、2-� �3-または4-ビフェニルメチルなどのC _7-13 アラルキル基が挙げられる。該「アラルキル 基」の有していてもよい置換基としては、前 記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい 低級アルキル基」の有していてもよい置換基 と同様な数、同様のものが挙げられる。

 R ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい シクロアルキル基」の「シクロアルキル基」 としては、例えば、シクロプルピル、シクロ ブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、 シクロヘプチル、シクロオクチルなどのC _3-8 シクロアルキル基、ビシクロ[2.2.1]ヘプチル� �ビシクロ[2.2.2]オクチル、ビシクロ[3.2.1]オク チル、ビシクロ[3.3.1]ノニル、ビシクロ[3.2.2]� ��ニルおよびアダマンチルが挙げられる。該� ��シクロアルキル基」の有していてもよい置� ��基としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい 低級アルキル基」の有していてもよい置換基 と同様な数、同様のものが挙げられる。

 R ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「低級ハロアルキル基」 としては、例えば、フルオロメチル、ジフル オロメチル、トリフルオロメチル、2-フルオ� ��エチル、2,2-ジフルオロエチル、2,2,2-トリフ ルオロエチル、1,1,2,2-テトラフルオロエチル� ��1,1,2,2,2-ペンタフルオロエチル、3-フルオロ� ��ロピル、3,3-ジフルオロプロピル、3,3,3-トリ フルオロプロピル、2,2,3,3,3-ペンタフルオロ� �ロピル、4-フルオロブチル、4,4-ジフルオロ� �チル、4,4,4-トリフルオロブチル、3,3,4,4,4-ペ� ��タフルオロブチル、5-フルオロペンチル、5, 5-ジフルオロペンチル、5,5,5-トリフルオロペ� ��チル、4,4,5,5,5-ペンタフルオロペンチル、ク ロロメチル、ジクロロメチル、ブロモメチル などの1~6個のハロゲン基で置換された低級ア ルキル基等が挙げられる。

 R ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「エステル化もしくはア ミド化されていてもよいカルボキシル基」と しては、カルボキシル基、アルコキシカルボ ニル基、アルケニルオキシカルボニル基、ア リールオキシカルボニル基、アラルキルオキ シカルボニル基、カルバモイル基、N-モノ置� ��カルバモイル基、N,N-ジ置換カルバモイル基 が挙げられる。

 「アルコキシカルボニル基」としては、例� ��ば、メトキシカルボニル、エトキシカルボ� ��ル、プロポキシカルボニル、tert-ブトキシ� �ルボニル、ヘキシルオキシカルボニル、ド� �シルオキシカルボニル、ヘキサデシルオキ� �カルボニルなどのC _2-18 アルコキシカルボニル基が挙げられる。該「 アルコキシカルボニル基」は置換基を有して いてもよく、その置換基としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい 低級アルキル基」の有していてもよい置換基 と同様な数、同様のものが挙げられる。

 「アルケニルオキシカルボニル基」として� ��、例えばアリル(allyl)オキシカルボニル、オ クタ-2,6-ジエニルオキシカルボニル、ドデカ- 2,6,10-トリエニルオキシカルボニルなどのC _2-18 アルケニルオキシカルボニル基が挙げられる 。該「アルケニルオキシカルボニル基」は置 換基を有していてもよく、その置換基として は、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい 低級アルキル基」の有していてもよい置換基 と同様な数、同様のものが挙げられる。

 「アリールオキシカルボニル基」としては� ��例えばフェノキシカルボニル、1-ナフトキ� �カルボニル、2-ナフトキシカルボニル等が挙 げられる。該「アリールオキシカルボニル基 」は置換基を有していてもよく、その置換基 としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい 低級アルキル基」の有していてもよい置換基 と同様な数、同様のものが挙げられる。

 「アラルキルオキシカルボニル基」として� ��、例えばベンジルオキシカルボニル、フェ� ��チルオキシカルボニル、3-フェニルプロポ� �シカルボニルなどのアラルキルオキシカル� �ニル基が挙げられる。該「アラルキルオキ� �カルボニル基」は置換基を有していてもよ� �、その置換基としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい 低級アルキル基」の有していてもよい置換基 と同様な数、同様のものが挙げられる。

 「N-モノ置換カルバモイル基」の置換基と� �ては、例えば低級アルキル(例、メチル、エ� ��ル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イ� ��ブチル、tert-ブチル、ペンチル、ヘキシル� �)、低級アルケニル(例、ビニル、アリル(allyl )、イソプロペニル、プロペニル、ブテニル� �ペンテニル、ヘキセニル等)、シクロアルキ� ��(例、シクロプロピル、シクロブチル、シク ロペンチル、シクロヘキシル等)、アリール(� ��、フェニル、1-ナフチル、2-ナフチル)、ア� �ルキル(例、ベンジル、フェネチル等)、複素 環基(例えば後述するR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい 複素環基」と同様のもの等)等が挙げられる� �該低級アルキル、低級アルケニル、シクロ� �ルキル、アリール、アラルキル、複素環基� �置換基を有していてもよく、その置換基と� �ては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい 低級アルキル基」の有していてもよい置換基 と同様な数、同様のものが挙げられる。

 「N,N-ジ置換カルバモイル基」の置換基と は、窒素原子上に2個の置換基を有するカル� �モイル基を意味し、上記した「N-モノ置換カ ルバモイル」における置換基と同様のものが 挙げられる。また、2個の置換基が窒素原子� �一緒になって環状アミノを形成する場合も� �り、この様な場合の環状アミノカルバモイ� �としては、例えばN-ピロリジルカルボニル、 N-イミダゾリルカルボニル、N-ピペリジルカ� �ボニル、N-ピペラジルカルボニル、N-メチル- N'-ピペラジルカルボニル、N-モルホリルカル� ��ニルなどが挙げられる。

 R ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「アシル基」としては、 水素原子または前記の「N-モノ置換カルバモ� ��ル基」が窒素原子上に1個有する置換基とカ ルボニルとが結合したものが挙げられ、例え ばホルミル基、アセチル、プロピオニルなど の低級アルカノイル基、またはベンゾイル、 ナフトイルなどのアロイル基等が挙げられる 。

 R ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい 水酸基」の置換基としては、置換されていて もよい低級アルキル基、置換されていてもよ い低級アルケニル基、置換されていてもよい 低級アルキニル基、置換されていてもよいア リール基、置換されていてもよいアラルキル 基、置換されていてもよいシクロアルキル基 、エステル化もしくはアミド化されたカルボ キシル基、置換されていてもよいアルキルス ルファニルチオカルボニル基、置換されてい てもよいアラルキルスルファニルチオカルボ ニル基、置換されていてもよいアルキルスル ホニル基、置換されていてもよいアリールス ルホニル基、置換されていてもよいN-イミダ� ��リルチオカルボニル、置換されていてもよ� ��N-モルホリルチオカルボニル、水酸基の保� �基等が挙げられる。該「置換されていても� �い低級アルキル基」、「置換されていても� �い低級アルケニル基」、「置換されていて� �よい低級アルキニル基」、「置換されてい� �もよいアリール基」、「置換されていても� �いアラルキル基」、「置換されていてもよ� �シクロアルキル基」としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい 低級アルキル基」、「置換されていてもよい 低級アルケニル基」、「置換されていてもよ い低級アルキニル基」、「置換されていても よいアリール基」、「置換されていてもよい アラルキル基」、「置換されていてもよいシ クロアルキル基」と同様のものが挙げられる 。該「エステル化もしくはアミド化されたカ ルボキシル基」とは、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としてのエステル化もしくはアミ ド化されていてもよいカルボキシル基」から カルボキシル基を除いたものが挙げられる。 該「置換されていてもよいアルキルスルファ ニルチオカルボニル基」としては、例えばメ チルスルファニルチオカルボニル、エチルス ルファニルチオカルボニル、tert-ブトキシス� ��ファニルチオカルボニル等があげられ、該� ��置換されていてもよいアラルキルスルファ� ��ルチオカルボニル基」としては、ベンジル� ��ルファニルチオカルボニルオキシ等が挙げ� ��れ、該「置換されていてもよいアルキルス� ��ホニル基」としては、メチルスルホニル、� ��チルスルホニル、イソプロピルスルホニル� ��ブチルスルホニル等が挙げられ、該「置換� ��れていてもよいアリールスルホニル基」と� ��ては、ベンゼンスルホニル、p-トルエンス� �ホニル、m-トルエンスルホニル、o-トルエン� ��ルホニル等が挙げられる。該「置換されて� ��てもよいアルキルスルファニルチオカルボ� ��ル基」、「置換されていてもよいアラルキ� ��スルファニルチオカルボニル基」、「置換� ��れていてもよいアルキルスルホニル基」、� ��置換されていてもよいアリールスルホニル� ��」の有していてもよい置換基としては、前� ��のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい 低級アルキル基」の有していてもよい置換基 と同様な数、同様のものが挙げられる。「置 換されていてもよいN-イミダゾリルチオカル� ��ニル」、「置換されていてもよいN-モルホ� �ルチオカルボニル」の有していてもよい置� �基としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい 低級アルキル基」の有していてもよい置換基 と同様な数、同様のものが挙げられる。該「 水酸基の保護基」としては、例えば2-テトラ� ��ドロピラニル、トリメチルシリル、トリエ� ��ルシリル、tert-ブチルジフェニルシリル等� �挙げられる。

 R ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい スルファニル基」としては、例えば、スルフ ァニル基、メチルスルファニル、エチルスル ファニル、イソプロピルスルファニル、tert-� ��チルスルファニル等のアルキルスルファニ� ��基、フェニルスルファニル等のアリールス� ��ファニル基、ベンジルスルファニル等のア� ��ルキルスルファニル基等が挙げられる。該� ��置換されていてもよいスルファニル基」の� ��していてもよい置換基としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい 低級アルキル基」の有していてもよい置換基 と同様な数、同様のものが挙げられる。

 R ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい アルキルスルフィニル基」としては、例えば 、メチルスルフィニル、エチルスルフィニル 、イソプロピルスルフィニル等が挙げられる 。該「置換されていてもよいアルキルスルフ ィニル基」の有していてもよい置換基として は、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい 低級アルキル基」の有していてもよい置換基 と同様な数、同様のものが挙げられる。

 R ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい アリールスルフィニル基」としては、例えば 、ベンゼンスルフィニル、トルエンスルフィ ニル等が挙げられる。該「置換されていても よいアリールスルフィニル基」の有していて もよい置換基としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい 低級アルキル基」の有していてもよい置換基 と同様な数、同様のものが挙げられる。

 R ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい アルキルスルホニル基」としては、例えば、 メチルスルホニル、エチルスルホニル、イソ プロピルスルホニル、ブチルスルホニル等が 挙げられる。該「置換されていてもよいアル キルスルホニル基」の有していてもよい置換 基としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい 低級アルキル基」の有していてもよい置換基 と同様な数、同様のものが挙げられる。

 R ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい アリールスルホニル基」としては、例えば、 ベンゼンスルホニル、トルエンスルホニル、 ナフチルスルホニル等が挙げられる。該「置 換されていてもよいアリールスルホニル基」 の有していてもよい置換基としては、前記の R ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい 低級アルキル基」の有していてもよい置換基 と同様な数、同様のものが挙げられる。

 R ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「エステル化もしくアミ ド化されてもよいスルホン酸基」としては、 例えば、スルホン酸基、スルホン酸メチル、 スルホン酸エチル、スルホン酸アミド、N-メ� ��ルスルホン酸アミド等が挙げられる。

 R ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい アミノ基」としては、アミノ基、アルキル基 またはアラルキル基でモノまたはジ置換され たアミノ基、アシルアミノ、アルコキシカル ボニルアミノ、アリールオキシカルボニルア ミノ、アラルキルオキシカルボニルアミノ、 アルキルスルホニルアミノあるいはアリール スルホニルアミノ等が挙げられる。

 「アルキル基またはアラルキル基でモノま� ��はジ置換されたアミノ基」としては、例え� ��メチルアミノ、エチルアミノ、イソプロピ� ��アミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ� ��エチルメチルアミノ、ベンジルアミノ、ベ� ��ジルメチルアミノ等が挙げられる。該「ア� ��キル基またはアラルキル基でモノまたはジ� ��換されたアミノ基」は置換基を有していて� ��よく、その置換基としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい 低級アルキル基」の有していてもよい置換基 と同様な数、同様のものが挙げられる。

 「アシルアミノ」としては、例えばホルミ� ��アミノ、アセチルアミノ、プロピオニルア� ��ノ、ブチリルアミノ、イソブチリルアミノ� ��バレリルアミノ、イソバレリルアミノ、ピ� ��ロイルアミノ、ベンゾイルアミノ、フェナ� ��ルアミノ等が挙げられる。該「アシルアミ� ��」は置換基を有していてもよく、その置換� ��としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい 低級アルキル基」の有していてもよい置換基 と同様な数、同様のものが挙げられる。

 「アルコキシカルボニルアミノ」としては� ��例えばメトキシカルボニルアミノ、エトキ� ��カルボニルアミノ、tert-ブトキシカルボニ� �アミノ等が挙げられる。該「アルコキシカ� �ボニルアミノ」は置換基を有していてもよ� �、その置換基としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい 低級アルキル基」の有していてもよい置換基 と同様な数、同様のものが挙げられる。

 「アリールオキシカルボニルアミノ」とし� ��は、例えばフェノキシカルボニルアミノ、� ��フチルオキシカルボニルアミノ等が挙げら� ��る。該「アリールオキシカルボニルアミノ� ��は置換基を有していてもよく、その置換基� ��しては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい 低級アルキル基」の有していてもよい置換基 と同様な数、同様のものが挙げられる。

 「アラルキルオキシカルボニルアミノ」と� ��ては、例えばベンジルオキシカルボニルア� ��ノ、フェネチルオキシカルボニルアミノ等� ��挙げられる。該「アラルキルオキシカルボ� ��ルアミノ」は置換基を有していてもよく、� ��の置換基としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい 低級アルキル基」の有していてもよい置換基 と同様な数、同様のものが挙げられる。

 「アルキルスルホニルアミノ」としては、� ��えばメチルスルホニルアミノ、エチルスル� ��ニルアミノ、イソプロピルスルホニルアミ� ��、ブチルスルホニルアミノ等が挙げられる� ��該「アルキルスルホニルアミノ」は置換基� ��有していてもよく、その置換基としては、� ��記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい 低級アルキル基」の有していてもよい置換基 と同様な数、同様のものが挙げられる。

 「アリールスルホニルアミノ」としては、� ��えばベンゼンスルホニルアミノ、ナフチル� ��ルホニルアミノ等が挙げられる。該「アリ� ��ルスルホニルアミノ」は置換基を有してい� ��もよく、その置換基としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい 低級アルキル基」の有していてもよい置換基 と同様な数、同様のものが挙げられる。

 R ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい 複素環基」としては、例えば、脂肪族単環式 含窒素複素環基、芳香族単環式含窒素複素環 基、縮合含窒素複素環基、含酸素単環式ある いは縮合複素環基、含硫黄単環式あるいは縮 合複素環基等が挙げられる。

 「脂肪族単環式含窒素複素環基」としては� ��例えばアジリジニル、アゼチジニル、ピロ� ��ジニル、イミダゾリジニル、ピラゾリジニ� ��、オキサゾリジニル、イソキサゾリジニル� ��チアゾリジニル、イソチアゾリジニル、ピ� ��リジル、ピペラジル、ピラジニル、モルホ� ��ル、チオモルホリル、オキサジニル、チア� ��ニル、アゼピニル、ジアゼピニル、オキサ� ��ピニル、チアゼピニル等が挙げられる。該� ��脂肪族単環式含窒素複素環基」は置換基を� ��していてもよく、その置換基としては、前� ��のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい 低級アルキル基」の有していてもよい置換基 と同様な数、同様のものが挙げられる。

 「芳香族単環式含窒素複素環基」としては� ��例えばピロリル、イミダゾリル、ピラゾリ� ��、オキサゾリル、イソキサゾリル、チアゾ� ��ル、イソチアゾリル、トリアゾリル、オキ� ��ジアゾリル、チアジアゾリル、テトラゾリ� ��、ピリジル、ピリダジニル、ピリミジニル� ��ピラジニル、トリアジニル等が挙げられる� ��該「芳香族単環式含窒素複素環基」は置換� ��を有していてもよく、その置換基としては� ��前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい 低級アルキル基」の有していてもよい置換基 と同様な数、同様のものが挙げられる。

 「縮合含窒素複素環基」としては、例えば� ��ンゾピロリジニル、ベンゾイミダゾリジニ� ��、ベンゾピラゾリジニル、ベンゾオキサゾ� ��ジニル、ベンゾイソキサゾリジニル、ベン� ��チアゾリジニル、ベンゾイソチアゾリジニ� ��、ベンゾピペリジル、ベンゾピペラジル、� ��ンゾピラジニル、ベンゾモルホリル、ベン� ��チオモルホリル、ベンゾオキサジニル、ベ� ��ゾチアジニル、ベンゾアゼピニル、ベンゾ� ��アゼピニル、ベンゾオキサゼピニル、ベン� ��チアゼピニル、インドリル、イソインドリ� ��、1H-インダゾリル、ベンゾイミダゾリル、� ��ンゾオキサゾリル、ベンゾイソオキサゾリ� ��、ベンゾチアゾリル、ベンゾイソチアゾリ� ��、1H-ベンゾトリアゾリル、ベンゾオキサジ� ��ゾリル、ベンゾチアジアゾリル、キノリル� ��イソキノリル、キナゾリニル、キノキサリ� ��ル、ナフチリジニル、プリニル、プテリジ� ��ル、カルバゾリル、カルボリニル、アクリ� ��ニル、フェノキサジニル、フェノチアジニ� ��、フェナジニル、インドリジニル、ピロロ� ��リダジニル、ピロロピリミジニル、ピロロ� ��ラジニル、ピロロピリジル、イミダゾピリ� ��ジニル、イミダゾピリミジニル、イミダゾ� ��ラジニル、イミダゾピリジル、チエノピリ� ��ジニル、チエノピリミジニル、チエノピラ� ��ニル、チエノピリジル、チアゾロピリダジ� ��ル、チアゾロピリミジニル、チアゾロピラ� ��ニル、チアゾロピリジル、ピリダゾピリダ� ��ニル、ピリダゾピリミジニル、ピリダゾピ� ��ジニル、ピリダゾピリジル、トリアゾロピ� ��ジル等が挙げられる。該「縮合含窒素複素� ��基」は置換基を有していてもよく、その置� ��基としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい 低級アルキル基」の有していてもよい置換基 と同様な数、同様のものが挙げられる。

 「含酸素単環式あるいは縮合複素環基」と� ��ては、例えばオキシラニル、オキセタニル� ��オキソラニル、ジオキソラニル、フリル、� ��ラニル、テトラヒドロピラニル、ジオキサ� ��ル、ベンゾフラニル、イソベンゾフラニル� ��ベンゾピラニル、イソベンゾピラニル、ベ� ��ゾジオキサニル、7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘ� ��チル) 、9-オキサビシクロ[3.3.1]ノニル等が� ��げられる。該「含酸素単環式あるいは縮合� ��素環基」は置換基を有していてもよく、そ� ��置換基としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい 低級アルキル基」の有していてもよい置換基 と同様な数、同様のものが挙げられる。

 「含硫黄単環式あるいは縮合複素環基」と� ��ては、例えばチエニル、チオキソラニル、� ��トラヒドロチオピラニル、ジチアニル、ベ� ��ゾチエニル等が挙げられる。該「含硫黄単� ��式あるいは縮合複素環基」は置換基を有し� ��いてもよく、その置換基としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい 低級アルキル基」の有していてもよい置換基 と同様な数、同様のものが挙げられる。

 R ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「アルキレンジオキシ基 」としては、例えば、メチレンジオキシ、エ チレンジオキシ等が挙げられる。

 R ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい シクロアルケニル基」としてはC _3-8 シクロアルケニル基(例えば2-シクロプロペニ ル、2-シクロブテニル、2-シクロペンテニル� �2-シクロヘキセニル、3-シクロヘキセニル、2 -シクロヘプテニル、3-シクロヘプテニル、2-� ��クロオクテニル、4-シクロオクテニルなど)� ��挙げられる。該「シクロアルケニル基」の� ��していてもよい置換基としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい 低級アルキル基」の有していてもよい置換基 と同様な数、同様のものが挙げられる。

 R ² で表される「置換されていてもよい複素環基 」としては、前記のR ² で表される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい 複素環基」と同様のものが挙げられる。

 R ³ 、R ⁴ で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」としての炭化水素基としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」としての炭化水素と同様のものが挙げら れる。好ましくは、C _1-6 アルキル基、C _6-10 アリール基、C _7-10 アラルキル基等が挙げられる。

 R ³ 、R ⁴ で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」の置換基としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」の置換基と同様な数、同様なものが挙げ られる。

 R ³ 、R ⁴ で示される「置換されていてもよい複素環基 」は、前記のR ² で表される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい 複素環基」と同様のものが挙げられる。

 「R ³ 、R ⁴ がともにそれらが結合している窒素原子と一 緒になって表す置換されていてもよい含窒素 複素環」としての含窒素複素環の例としては 、炭素原子以外に酸素原子、硫黄原子、窒素 原子等から選ばれたヘテロ原子が1~4個含まれ ても良い3~8員環の単環性複素環またはこれら に環構造の縮合した2環性または3環性縮合複� ��環基などが挙げられる。中でも好ましい例� ��5~7員環の含窒素複素環が挙げられる。特に� ��ましい例としては、アゼピニル、ピペリジ� ��、ピペラジル、N-メチルピペラジル、ピロ� �ジル、モルホリル、などが挙げられる。

 「R ³ 、R ⁴ がともにそれらが結合している窒素原子と一 緒になって表す置換されていてもよい含窒素 複素環」の置換基としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」の置換基と同様な数、同様なものが挙げ られる。

 R ¹ としては、-SR ² (R ² は水素原子、置換されていてもよい炭化水素 基または置換されていてもよい複素環基を示 す)が好ましく、なかでもR ² が置換されていてもよい炭化水素基であるも のが好ましい。とりわけ-SR ² において、R ² が置換されていてもよいアルキル基(置換さ� �ていてもよいC _1-8 アルキル基)、置換されていてもよいアルケ� �ル基(置換されていてもよいC _2-8 アルケニル基)、置換されていてもよいアラ� �キル基(置換されていてもよいC _7-10 アラルキル基)、置換されていてもよいシク� �アルキル基(置換されていてもよいC _3-8 シクロアルキル基)であるものが好ましい。� �に-SR ² において、R ² が置換されていてもよいC _1-8 アルキル基であるものがより好ましく、とり わけハロゲン原子で置換されていてもよいC _4-8 アルキル基であるものが好ましい。

 R ⁵ で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」としての炭化水素基としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」としての炭化水素基と同様のものが挙げ られる。好ましくは、C _1-12 アルキル基、C _2-12 アルケニル基、C _2-12 アルキニル基、C _6-10 アリール基、C _7-10 アラルキル基、C _3-8 シクロアルキル基、C _3-8 シクロアルケニル基等が挙げられる。なかで も、C _1-8 アルキル基、C _2-8 アルケニル基、C _6-10 アリール基、C _7-10 アラルキル基、C _3-8 シクロアルキル基、C _3-8 シクロアルケニル基が好ましい。とりわけ、 C _1-6 アルキル基が好ましく、メチル、エチル、プ ロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル 、sec-ブチル、tert-ブチル、ペンチル、イソペ ンチル、2-メチルブチル、ヘキシル、イソヘ� ��シル、2-エチルブチル、1,1-ジメチルブチル� ��2,2-ジメチルブチル、3,3-ジメチルブチル、2, 2-ジメチルペンチル、3,3-ジメチルペンチルが 好ましい。

 R ⁵ で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」の置換基としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」の置換基と同様の数、同様のものが挙げ られる。

 R ⁵ で示される「アシル基」とは、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」の置換基としての「アシル基」と同様の ものが挙げられる。

 R ⁵ で示される「エステル化もしくはアミド化さ れていてもよいカルボキシル基」とは、前記 のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」の置換基としての「エステル化もしくは アミド化されていてもよいカルボキシル基」 と同様のものが挙げられる。なかでもメトキ シカルボニル、エトキシカルボニル、プロポ キシカルボニル、tert-ブトキシカルボニル、� ��キシルオキシカルボニル、ドデシルオキシ� ��ルボニル、ヘキサデシルオキシカルボニル� ��どのC _2-18 アルコキシカルボニル基が好ましい。

 R ⁵ で示される「置換されていてもよい複素環基 」とは、前記のR ² で示される「置換されていてもよい複素環基 」と同様のものが挙げられる。

 R ⁶ で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」としての炭化水素基としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」としての炭化水素基と同様のものが挙げ られる。好ましくは、C _1-8 アルキル基、C _2-8 アルケニル基、C _6-10 アリール基、C _7-10 アラルキル基等が挙げられる。なかでも、C _1-6 アルキル基、フェニル基、ベンジル基等が好 ましい。

 R ⁶ で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」の置換基としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」の置換基と同様の数、同様のものが挙げ られる。

 R ⁶ で示される「アシル基」とは、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」の置換基としての「アシル基」と同様の ものが挙げられる。

 R ⁶ で示される「エステル化もしくはアミド化さ れていてもよいカルボキシル基」とは、前記 のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」の置換基としての「エステル化もしくは アミド化されていてもよいカルボキシル基」 と同様のものが挙げられる。

 R ⁶ で示される「置換されていてもよい複素環基 」とは、前記のR ² で表される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい 複素環基」と同様のものが挙げられる。

 R ⁵ とR ⁶ とが一緒になって形成する環状炭化水素また は複素環としては、炭素原子以外に窒素原子 、酸素原子、硫黄原子等から選ばれた原子を 1~3個含んでもよい、飽和または不飽和の、5~8 員環の単環式炭素環または複素環、あるいは これらを含む2環式縮合炭素環または複素環� �どが挙げられる。例えば、シクロアルキル(� ��えば、シクロペンチル、シクロヘキシル、� ��クロヘプチルなど)、シクロアルケニル(例� �ば、シクロペンテニル、シクロヘキセニル� �シクロヘキサジエニル、シクロヘプテニル� �ど)、芳香族炭化水素環(例えば、フェニル、 ナフチルなど)、含酸素環(例えば、フリル、� ��キソラニル、テトラヒドロピラニル、オキ� ��ピニル、ベンゾフラニル、ベンゾピラニル� ��ど)、含窒素環(例えば、ピロリジル、ピペ� �ジル、ピリジル、アゼピニル、インドリル� �キノリニル、ベンゾアゼピニルなど)、含硫� ��環(例えばチエニル、テトラヒドロチオピラ ニル、ベンゾチエニルなど)などが挙げられ� �中でもシクロヘキシル、シクロペンテニル� �シクロヘキセニル、フェニルなどが特に好� �しい。R ⁵ とR ⁶ とが一緒になって形成する環状炭化水素また は複素環は置換基を有していてもよく、その 置換基としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」の置換基と同様の数、同様のものが挙げ られる。

 R ⁵ としては、置換されていてもよい炭化水素基 、シアノ基、アシル基、エステル化もしくは アミド化されていてもよいカルボキシル基ま たは置換されていてもよい複素環基が好まし く、特に置換されていてもよい炭化水素基が 好ましい。なかでも、C _1-12 アルキル基、C _2-12 アルケニル基、C _2-12 アルキニル基、C _6-10 アリール基、C _7-10 アラルキル基、C _3-8 シクロアルキル基、C _3-8 シクロアルケニル基等が好ましい。とりわけ 、C _1-8 アルキル基、C _2-8 アルケニル基、C _6-10 アリール基、C _7-10 アラルキル基、C _3-8 シクロアルキル基、C _3-8 シクロアルケニル基が好ましい。特に、C _1-6 炭化水素基、とりわけ、C _1-6 アルキル基が好ましく、メチル、エチル、プ ロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル 、sec-ブチル、tert-ブチル、ペンチル、イソペ ンチル、2-メチルブチル、ヘキシル、イソヘ� ��シル、2-エチルブチル、1,1-ジメチルブチル� ��2,2-ジメチルブチル、3,3-ジメチルブチルが� �ましい。

 R ⁶ としては、置換されていてもよい炭化水素基 が好ましい。なかでも、C _1-8 アルキル基、C _2-8 アルケニル基、C _6-10 アリール基、C _7-10 アラルキル基等が好ましい。特に、C _1-6 炭化水素基、とりわけ、C _1-6 アルキル基(メチル、エチル、プロピル、イ� �プロピル、ブチル、イソブチル、sec-ブチル� ��tert-ブチル、ペンチル、イソペンチル、2-メ チルブチル、ヘキシル、イソヘキシル、2-エ� ��ルブチル、1,1-ジメチルブチル、2,2-ジメチ� �ブチル、3,3-ジメチルブチル等、特にメチル� ��エチル)等が好ましい。

 また、R ⁵ とR ⁶ とが一緒になって置換されていてもよいベン ゼン環、置換されていてもよいシクロヘキセ ン環を形成する化合物も好ましい例として挙 げられる。

 R ⁷ で示される「置換されていてもよい水酸基」 の置換基としては、例えば、置換されていて もよい炭化水素基、置換されていてもよいア ルキルスルホニル基、置換されていてもよい アリールスルホニル基、置換されていてもよ いアルキルカルボニル基、置換されていても よいアリールカルボニル基等が挙げられる。 R ⁷ で示される「置換されていてもよい水酸基」 のなかでも、水酸基が好ましい。

 R ⁷ で示される「置換されていてもよい水酸基」 の置換基としての置換されていてもよい炭化 水素基の「炭化水素基」としては、C _1-8 アルキル基、C _2-8 アルケニル基、C _6-10 アリール基、C _7-10 アラルキル基等が挙げられる。なかでも、C _1-6 アルキル基、ベンジル基等が好ましい。「置 換されていてもよい水酸基」の置換基として の置換されていてもよい炭化水素基の置換基 としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」の置換基と同様の数、同様のものが挙げ られる。

 R ⁷ で示される「置換されていてもよい水酸基」 の置換基としての置換されていてもよいアル キルスルホニル基、置換されていてもよいア リールスルホニル基の例としては、例えば置 換されていてもよいC _1-4 アルキルスルホニル基、置換されていてもよ いベンゼンスルホニル基等が挙げられ、なか でもメタンスルホニル基、トリフルオロメタ ンスルホニル基、ベンゼンスルホニル基、ト ルエンスルホニル基等が好ましい。

 R ⁷ で示される「置換されていてもよい水酸基」 の置換基としての置換されていてもよいアル キルカルボニル基、置換されていてもよいア リールカルボニル基としては、例えば置換さ れていてもよいC _1-4 アルキルカルボニル基、置換されていてもよ いベンゾイル基等が挙げられ、なかでもアセ チル基、プロピオニル基、ベンゾイル基等が 好ましい。

 R ⁷ で示される「置換されていてもよい水酸基」 の置換基としての置換されていてもよいアル キルスルホニル基、置換されていてもよいア リールスルホニル基、置換されていてもよい アルキルカルボニル基および置換されていて もよいアリールカルボニル基の置換基として は、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」の置換基と同様の数、同様のものが挙げ られる。

 R ⁸ およびR ⁹ で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」としての炭化水素基としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」としての炭化水素基と同様のものが挙げ られる。好ましくは、C _1-8 アルキル基、C _2-8 アルケニル基、C _6-10 アリール基、C _7-10 アラルキル基等が挙げられる。なかでも、C _1-6 アルキル基、フェニル基、ベンジル基等が好 ましい。

 R ⁸ およびR ⁹ で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」の置換基としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」の置換基と同様の数、同様のものが挙げ られる。

 R ⁵ とR ⁸ とが一緒になって形成する環状炭化水素また は複素環としては、炭素原子以外に窒素原子 、酸素原子、硫黄原子等から選ばれた原子を 1~3個含んでもよい、飽和または不飽和の、5~8 員環の単環式炭素環または複素環、あるいは これらを含む2環式縮合炭素環または複素環� �どが挙げられる。例えば、シクロアルキル(� ��えば、シクロペンチル、シクロヘキシル、� ��クロヘプチルなど)、シクロアルケニル(例� �ば、シクロペンテニル、シクロヘキセニル� �シクロヘキサジエニル、シクロヘプテニル� �ど)、芳香族炭化水素環(例えば、フェニル、 ナフチルなど)、含酸素環(例えば、フリル、� ��キソラニル、テトラヒドロピラニル、オキ� ��ピニル、ベンゾフラニル、ベンゾピラニル� ��ど)、含窒素環(例えば、ピロリジル、ピペ� �ジル、ピリジル、アゼピニル、インドリル� �キノリニル、ベンゾアゼピニルなど)、含硫� ��環(例えばチエニル、テトラヒドロチオピラ ニル、ベンゾチエニルなど)などが挙げられ� �中でもシクロヘキセニル、フェニルなどが� �に好ましい。R ⁵ とR ⁸ とが一緒になって形成する環状炭化水素また は複素環は置換基を有していてもよく、その 置換基としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」の置換基と同様の数、同様のものが挙げ られる。

 R ⁸ とR ⁹ とが一緒になって形成する環状炭化水素また は複素環としては、炭素原子以外に窒素原子 、酸素原子、硫黄原子等から選ばれた原子を 1~3個含んでもよい、飽和または不飽和の、5~8 員環の単環式炭素環または複素環、あるいは これらを含む2環式縮合炭素環または複素環� �どが挙げられる。例えば、シクロアルキル(� ��えば、シクロペンチル、シクロヘキシル、� ��クロヘプチルなど)、シクロアルケニル(例� �ば、シクロペンテニル、シクロヘキセニル� �シクロヘキサジエニル、シクロヘプテニル� �ど)、芳香族炭化水素環(例えば、フェニル、 ナフチルなど)、含酸素環(例えば、フリル、� ��キソラニル、テトラヒドロピラニル、オキ� ��ピニル、ベンゾフラニル、ベンゾピラニル� ��ど)、含窒素環(例えば、ピロリジル、ピペ� �ジル、ピリジル、アゼピニル、インドリル� �キノリニル、ベンゾアゼピニルなど)、含硫� ��環(例えばチエニル、テトラヒドロチオピラ ニル、ベンゾチエニルなど)などが挙げられ� �。R ⁸ とR ⁹ とが一緒になって形成する環状炭化水素また は複素環は置換基を有していてもよく、その 置換基としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」の置換基と同様の数、同様のものが挙げ られる。

 R ⁸ およびR ⁹ としては、置換されていてもよい炭化水素基 が好ましい。なかでも、C _1-8 アルキル基、C _2-8 アルケニル基、C _6-10 アリール基、C _7-10 アラルキル基等が好ましい。とりわけ、C _1-6 アルキル基、フェニル基、ベンジル基等が好 ましい。

 R ¹⁰ は、水素原子、-ZR ¹⁵ または-P(O)R ¹⁶ R ¹⁷ を示す。

 -ZR ¹⁵ のR ¹⁵ で表される「置換されていてもよい炭化水素 基」の炭化水素基としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」としての炭化水素基と同様のものが挙げ られる。好ましくは、C _1-12 アルキル基、C _2-12 アルケニル基、C _2-12 アルキニル基、C _6-10 アリール基、C _7-10 アラルキル基、C _3-8 シクロアルキル基、C _3-8 シクロアルケニル基等が挙げられる。なかで も、C _6-10 アリール基、C _7-10 アラルキル基、C _3-8 シクロアルキル基等が好ましい。

 R ¹⁵ で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」の置換基としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」の置換基と同様の数、同様のものが挙げ られる。なかでも、置換されていてもよいC _1-4 アルキル基、置換されていてもよいC _2-4 アルケニル基、フッ素、塩素、臭素などのハ ロゲン原子、C _1-4 アルコキシ基、C _1-4 ハロアルキル基、カルボキシル基、カルボキ サミド基などが挙げられ、特に好ましい置換 基の例としては、メチル基、エチル基、プロ ピル基、イソプロピル基、ビニル基、フッ素 、塩素、臭素、メトキシ基、エトキシ基など が挙げられる。

 -ZR ¹⁵ のR ¹⁵ で表される「置換されていてもよい複素環基 」とは、前記のR ² で表される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい 複素環基」と同様のものが挙げられる。なか でも置換されていてもよいチエニル基、置換 されていてもよいキノリル基、置換されてい てもよいベンゾオキサジアゾリル基、置換さ れていてもよいピリジル基、置換されていて もよいベンゾチアジアゾリル基、置換されて いてもよいベンゾチエニル基、置換されてい てもよいオキサゾリジニル基、置換されてい てもよいベンゾジオキサニル基、置換されて いてもよいジベンゾフラニル基、モルホリル 基が好ましく、特に置換されていてもよいチ エニル基、置換されていてもよいベンゾチア ジアゾリル基、置換されていてもよいピリジ ル基が好ましい例として挙げられる。

 Zは-SO ₂ -、-SO-、-CONR ¹⁸ SO ₂ -(R ¹⁸ はC _1-6 アルキル)、-CONR ¹⁹ -(R ¹⁹ はC _1-6 アルキル)または-CO-を示す。R ¹⁸ およびR ¹⁹ で表されるC _1-6 アルキルとしては、例えば、メチル、エチル 、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブ チル、sec-ブチル、tert-ブチル、ペンチル、ヘ キシル等が挙げられる。

 R ¹⁶ およびR ¹⁷ で表される「置換されていてもよい炭化水素 基」としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」としての炭化水素基と同様のものが挙げ られる。好ましくは、C _1-12 アルキル基、C _2-12 アルケニル基、C _2-12 アルキニル基、C _6-10 アリール基、C _7-10 アラルキル基、C _3-8 シクロアルキル基、C _3-8 シクロアルケニル基等が挙げられる。なかで も、C _1-6 アルキル基、C _6-10 アリール基、C _7-10 アラルキル基等が好ましい。特に、メチル、 エチル、フェニル、ベンジルなどが好ましい 。

 R ¹⁶ およびR ¹⁷ で表される「置換されていてもよい炭化水素 基」の置換基としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」の置換基と同様の数、同様のものが挙げ られる。

 R ¹⁶ およびR ¹⁷ で表される「置換されていてもよい水酸基」 としては、例えば、置換されていてもよい炭 化水素基が挙げられる。

 R ¹⁶ およびR ¹⁷ で表される「置換されていてもよい水酸基」 の置換基としての置換されていてもよい炭化 水素基の「炭化水素基」としては、C _1-8 アルキル基、C _2-8 アルケニル基、C _6-10 アリール基、C _7-10 アラルキル基等が挙げられる。なかでも、C _1-6 アルキル基、C _6-10 アリール基、C _7-10 アラルキル基等が好ましい。特に、メチル、 エチル、プロピル、ブチル、フェニル、ベン ジル等が好ましい。「置換されていてもよい 水酸基」の置換基としての置換されていても よい炭化水素基の置換基としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」の置換基と同様の数、同様のものが挙げ られる。

 R ¹⁶ およびR ¹⁷ で表される「置換されていてもよい水酸基」 としては、C _1-6 アルキル基、C _6-10 アリール基等で置換された水酸基が好ましい 。

 R ¹⁶ およびR ¹⁷ で表される「置換されていてもよいアミノ基 」としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 」の置換基としての「置換されていてもよい アミノ基」と同様のものが挙げられる。好ま しくは、メチル、エチル、フェニル、ベンジ ル等が挙げられる。

 R ¹⁶ およびR ¹⁷ としては、C _1-6 アルキル基、C _6-10 アリール基、C _1-6 アルキル基で置換された水酸基、C _6-10 アリール基で置換された水酸基等が好ましく 、特にメチル、エチル、フェニル、ベンジル 、メチルで置換された水酸基、エチルで置換 された水酸基、フェニルで置換された水酸基 等が好ましい。

 R ¹⁰ としては-ZR ¹⁵ (ZおよびR ¹⁵ は前記と同意義を示す)が好ましい。なかで� �、Zが-SO ₂ -または-CO-であり、R ¹⁵ が置換されていてもよいアリール基、置換さ れていてもよいアラルキル基、置換されてい てもよい複素環基であるものが好ましい。と りわけ、Zが-SO ₂ -または-CO-であり、R ¹⁵ が置換されていてもよいC _6-10 アリール基、置換されていてもよいC _7-10 アラルキル基、置換されていてもよい複素環 基であるものが好ましい。特に、Zが-SO ₂ -であり、R ¹⁵ がメチル基、エチル基、プロピル基、イソプ ロピル基、ビニル基、フッ素、塩素、臭素、 メトキシ基、エトキシ基などで置換されてい てもよいフェニル基、ベンジル基、チエニル 基、ベンゾチアジアゾリル基、またはZが-CO-� ��あり、R ¹⁵ がメチル基、エチル基、プロピル基、イソプ ロピル基、ビニル基、フッ素、塩素、臭素、 メトキシ基、エトキシ基などで置換されてい てもよいピリジル基等が好ましい。

 R ¹¹ は、水素原子または置換されていてもよい炭 化水素基を示す。R ¹¹ で表される「置換されていてもよい炭化水素 基」の炭化水素基としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」としての炭化水素基と同様のものが挙げ られる。好ましくは、C _1-6 アルキル基、C _2-6 アルケニル基、C _7-10 アラルキル基等が挙げられる。なかでも、C _1-6 アルキル基、ベンジル基等が好ましく、特に C _1-4 アルキル基等が好ましい。R ¹¹ で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」の置換基としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」の置換基と同様の数、同様のものが挙げ られる。

 R ¹¹ としては、水素原子が好ましい。
 R ¹⁰ とR ¹¹ が一緒になって形成してもよい含窒素複素環 とは、すなわち、式
で表される部分構造が、
〔式中、B環は置換されていてもよい5~8員環� �示す〕で表される5~8員の含窒素複素環であ� �ものを意味する。より具体的には、式
〔式中、R ¹⁷ は前記と同意義を、B ¹ 環~B ¹² 環はさらに置換基を有していてもよい含窒素 複素環を示す〕で表される環を意味する。な お、B ¹ 環~B ¹² 環が有していてもよい置換基とは、前記のR ¹⁵ で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」が有していてもよい置換基と同様のもの を意味する。

 R ¹⁰ とR ¹¹ が一緒になって形成してもよい含窒素複素環 としては、式
〔式中、B ² 環およびB ³ 環はさらに置換基を有していてもよい含窒素 複素環を示す〕で表される6または7員の含窒� ��複素環が好ましい。

 R ¹² およびR ¹³ で表される「置換されていてもよい炭化水素 基」の炭化水素基としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」としての炭化水素基と同様のものが挙げ られる。好ましくは、C _1-12 アルキル基、C _2-12 アルケニル基、C _2-12 アルキニル基、C _6-10 アリール基、C _7-10 アラルキル基、C _3-8 シクロアルキル基、C _3-8 シクロアルケニル基等が挙げられる。なかで も、C _1-12 アルキル基、C _2-12 アルケニル基、C _7-10 アラルキル基が好ましい。R ¹² およびR ¹³ で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」の置換基としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」の置換基と同様の数、同様のものが挙げ られる。

 R ¹² およびR ¹³ がともにそれらが結合している窒素原子と一 緒になって示す置換されていてもよい含窒素 複素環の例としては前記の「R ³ 、R ⁴ がともにそれらが結合している窒素原子と一 緒になって表す置換されていてもよい含窒素 複素環」の含窒素複素環と同様のものが挙げ られる。特に好ましい例としては、ピペリジ ル、ピペラジル、N-メチルピペラジル、ピロ� ��ジル、モルホリルなどが挙げられる。

 「R ¹² 、R ¹³ がともにそれらが結合している窒素原子と一 緒になって表す置換されていてもよい含窒素 複素環」の置換基としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」の置換基と同様な数、同様なものが挙げ られる。

 R ¹² としては、水素原子、C _1-12 アルキル基、C _2-12 アルケニル基、C _2-12 アルキニル基、C _6-10 アリール基、C _7-10 アラルキル基、C _3-8 シクロアルキル基、C _3-8 シクロアルケニル基等が好ましい。とりわけ 、C _1-12 アルキル基、C _2-12 アルケニル基、C _7-10 アラルキル基が好ましい。

 R ¹³ としては、水素原子が好ましい。

 R ¹⁴ で表される「置換されていてもよい炭化水素 基」の炭化水素基としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」としての炭化水素基と同様のものが挙げ られる。好ましくは、C _1-12 アルキル基、C _2-12 アルケニル基、C _2-12 アルキニル基、C _6-10 アリール基、C _7-10 アラルキル基、C _3-8 シクロアルキル基、C _3-8 シクロアルケニル基等が挙げられる。なかで も、C _1-4 アルキル基、C _7-10 アラルキル基が好ましい。R ¹⁴ で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」の置換基としては、前記のR ² で示される「置換されていてもよい炭化水素 基」の置換基と同様の数、同様のものが挙げ られる。R ¹⁴ で表される-ZR ¹⁵ は、R ¹⁰ で表される-ZR ¹⁵ と同様のものが挙げられる。

 R ¹⁴ としては、置換されていてもよい炭化水素基 が好ましい。なかでも、C _1-12 アルキル基、C _2-12 アルケニル基、C _2-12 アルキニル基、C _7-10 アラルキル基、C _3-8 シクロアルキル基、C _3-8 シクロアルケニル基等が好ましく、とりわけ 、C _1-6 アルキル基、C _7-10 アラルキル基が好ましい。
が好ましく、なかでも
とりわけ
が好ましい。
が好ましく、なかでも
が好ましい。

 化合物(I)としては、式
〔式中、各記号は前記と同意義を示す〕で表 される化合物〔化合物(I’)〕が好ましく用い られる。なかでも、R ¹ が、-SR ² 、

 R ² が、それぞれ置換されていてもよいC _1-8 アルキル基、C _2-8 アルケニル基、C _7-10 アラルキル基またはC _3-8 シクロアルキル基(好ましくは、ハロゲン原� �で置換されていてもよいC _4-8 アルキル基)、

 R ⁵ が、それぞれ置換されていてもよいC _1-12 アルキル基、C _2-12 アルケニル基、C _2-12 アルキニル基、C _6-10 アリール基、C _7-10 アラルキル基、C _3-8 シクロアルキル基またはC _3-8 シクロアルケニル基(好ましくはC _1-12 アルキル基)、

 R ⁶ が、それぞれ置換されていてもよいC _1-8 アルキル基、C _2-8 アルケニル基、C _6-10 アリール基またはC _7-10 アラルキル基(好ましくはC _1-6 アルキル基)、

 R ¹⁰ が、-SO ₂ -R ¹⁵ 、

 R ¹⁵ が、それぞれ置換されていてもよいC _6-10 アリール基、C _7-10 アラルキル基または5~6員複素環基(好ましく� �、C _1-6 アリール基および/またはハロゲン原子でそ� �ぞれ置換されていてもよいフェニル基、ベ� �ジル基、チエニル基またはベンゾチアジア� �リル基)、および

 R ¹¹ が、水素原子である化合物が好ましく用いら れる。

 上記化合物(I)の塩としては、薬理学的に� ��容される塩が好ましく、例えば無機塩基と� ��塩、有機塩基との塩、無機酸との塩、有機� ��との塩、塩基性または酸性アミノ酸との塩� ��どが挙げられる。

 無機塩基との塩の好適な例としては、例� ��ばナトリウム塩、カリウム塩などのアルカ� ��金属塩;カルシウム塩、マグネシウム塩など のアルカリ土類金属塩;ならびにアルミニウ� �塩、アンモニウム塩などが挙げられる。

 有機塩基との塩の好適な例としては、例� ��ばトリメチルアミン、トリエチルアミン、� ��リジン、ピコリン、エタノールアミン、ジ� ��タノールアミン、トリエタノールアミン、� ��シクロヘキシルアミン、N,N'-ジベンジルエ� �レンジアミンなどとの塩が挙げられる。

 無機酸との塩の好適な例としては、例え� ��塩酸、臭化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸な� ��との塩が挙げられる。

 有機酸との塩の好適な例としては、例え� ��ギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、フマル酸� ��シュウ酸、酒石酸、マレイン酸、クエン酸� ��コハク酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、� ��ンゼンスルホン酸、p-トルエンスルホン酸� �どとの塩が挙げられる。

 塩基性アミノ酸との塩の好適な例として� ��、例えばアルギニン、リジン、オルニチン� ��どとの塩が挙げられ、酸性アミノ酸との塩� ��好適な例としては、例えばアスパラギン酸� ��グルタミン酸などとの塩が挙げられる。

 化合物(I)は、水和物であってもよく、非� ��和物であってもよい。また、本発明で用い� ��れる化合物(I)は、骨格中に1つの不斉炭素を 持ちうるため2種の光学異性体が存在し得る� �、それらの各異性体、およびそれらの混合� �も本発明に含まれる。またその置換基に不� �炭素、不飽和結合を有する場合も同様に立� �異性体、幾何異性体を生ずるが、それらの� �異性体、およびそれらの混合物も本発明に� �まれる。

 化合物(I)は、その構造中に硫黄原子を有� ��、これらは酸化剤(例、過酸化水素またはm-� ��ロロ過安息香酸など)を用いて常法に従い酸 化されていてもよく、スルホキシド、スルホ ン化された化合物も本発明に含まれる。化合 物(I)は、その構造中または置換基にアミド、 イミド、アミジノ、グアニジノあるいはウレ イド基を有することがあるが、これらはその 2重結合が異性化した共鳴構造をとる場合が� �るが、これら共鳴構造化合物も本発明に含� �れる。

 化合物(I)は、WO 02/92606号公報に記載の方� ��またはこれに準じた方法により製造できる� ��工程(1)において使用可能なイミダゾチアジ� ��誘導体の例としては、担体と結合可能とな� ��ように末端にカルボキシル基が導入された� ��5-[[(1Z)-5,6-ジメチル-3-オキソ-1-([[4-(トリフル オロメチル)フェニル]スルホニル]イミノ)-2,3- ジヒドロ-1H-イミダゾ[5,1-c][1,4]チアジン-8-イ� �]スルファニル]ペンタン酸が挙げられる。当 該化合物は、WO 02/92606号公報の実施例21-10記� ��の方法またはこれに準じた方法により製造� ��きる。

 工程(1)として、(i)被験物質非存在下にお� ��る固相化イミダゾチアジン誘導体とHsp90と� �結合量と、(ii)被験物質存在下における固相� ��イミダゾチアジン誘導体とHsp90との結合量� �測定し、比較する場合の例を以下に記載す� �。

 まず、適当な緩衝液中で、Hsp90と種々の� �度の被験物質とを混合し、一定時間反応さ� �る。被験物質がHsp90との結合性を有する場合 には、被験物質とHsp90の複合体が形成される� ��次いで当該混合液に固相化イミダゾチアジ� ��誘導体を添加し、一定時間反応させる。こ� ��反応においては、被験物質との複合体を形� ��していないHsp90が固相化イミダゾチアジン� �導体と結合する。反応終了後、緩衝液で固� �化イミダゾチアジン誘導体を洗浄し、イミ� �ゾチアジン誘導体と結合していないHsp90を除 去する。洗浄後の固相化イミダゾチアジン誘 導体と緩衝液を混合した後、熱処理して、イ ミダゾチアジン誘導体に結合したHsp90を緩衝� ��中に溶出する。被験物質非存在下でも上記� ��同様の操作を行い、溶出液を得る。

 次いで、溶出液をSDSポリアクリルアミド� ��ル電気泳動に供し、泳動終了後にゲルを染� ��すると、イミダゾチアジン誘導体に結合し� ��Hsp90がバンドとして検出される。被験物質� �存在下および被験物質存在下で得られたHsp90 のバンド(Hsp90の蛋白質量)を比較する。被験� �質非存在時よりも被験物質存在時で得られ� �Hsp90の蛋白質量が少ない場合、当該被験物質 はHsp90とイミダゾチアジン誘導体との結合性� ��対する阻害活性を有する、すなわち、Hsp90� �合活性を有する、と判断できる。

 次に、工程(1)として、(i)被験物質非存在� ��における固相化Hsp90とラベル化イミダゾチ� �ジン誘導体の結合量と、(ii)被験物質存在下� ��おける固相化Hsp90とラベル化イミダゾチア� �ン誘導体の結合量とを測定し、比較する場� �の例を以下に記載する。

 まず、放射性同位元素としてトリチウム� ��用いてイミダゾチアジン誘導体をラベルし� ��ラベル化イミダゾチアジン誘導体を得る。� ��当な緩衝液中で、シンチレーターを含有す� ��ビーズに結合させた固相化Hsp90と、ラベル� �イミダゾチアジン誘導体および種々の濃度� �被験物質とを混合し、一定時間反応させる� �被験物質がHsp90との結合性を有する場合には 、被験物質は固相化Hsp90に結合する。一方、� ��験物質と結合していない固相化Hsp90にはラ� �ル化イミダゾチアジン誘導体が結合する。� �応終了後、固相化Hsp90に結合したラベル化イ ミダゾチアジン誘導体の放射活性を、シンチ レーターカウンターを用いて測定し、被験物 質非存在下および被験物質存在下で得られた 放射活性を比較する。被験物質非存在時より も被験物質存在時での放射活性が少ない場合 、当該被験物質はHsp90とイミダゾチアジン誘� ��体との結合性に対する阻害活性を有する、� ��なわち、Hsp90結合活性を有する、と判断で� �る。

 上記の方法の他、本発明の工程(1)として� ��、表面プラズモン共鳴測定により、固相化H sp90と被験物質の結合量を測定する工程を含� �ものが挙げられる。具体的には、例えば、� �面プラズモンセンサー(ビアコア社製 ビア� �ア3 0 0 0等) のセンサーチップ表面に、Hsp9 0を固定化後、チップ表面に適当な緩衝液に� �解した被験物質を流したときの表面プラズ� �ンの変化を測定することにより、Hsp90結合活 性を有する被験物質を選抜する。

 工程(1)においてHsp90結合活性を有する被� �物質を選抜し、該被験物質を更に工程(2)お� �び(3)に供することにより、優れた細胞保護� �を得ることができる。

 工程(2)では、ヒートショック蛋白質の発� ��誘導活性を有する被験物質の選抜を目的と� ��て、被験物質のヒートショック蛋白質発現� ��導活性を測定する。

 ヒートショック蛋白質の発現誘導活性の� ��定は、ヒートショック蛋白質またはヒート� ��ョック蛋白質をコードするmRNAを指標として 、ヒートショック蛋白質の発現能を有する細 胞あるいは、細胞抽出物の系を用いて測定す ることができる。工程(2)の好ましい例として は、ヒートショック蛋白質の発現能を有する 細胞を用いて被験物質のヒートショック蛋白 質発現誘導活性を測定する工程が挙げられる 。工程(2)におけるヒートショック蛋白質とは 、例えば、Hsp40、Hsp70及びHsp90から選択される 1種以上である。

 工程(2)として、ヒートショック蛋白質の� ��現能を有する細胞を用いて被験物質のヒー� ��ショック蛋白質発現誘導活性を測定する場� ��の例を以下に記載する。

 ヒートショック蛋白質の発現能を有する� ��胞としてはHsp70の発現能を有するヒト正常� �節軟骨細胞を使用する。まず、増殖培地中� �単層培養により増殖させた後に、多穴プレ� �トに播種してさらに培養する。被験物質お� �びIL-1βを加え、一定時間培養する。培養終� �後、緩衝液でプレートを洗浄し、次いで細� �溶解用緩衝液を添加する。セルスクレーパ� �を用いて細胞残渣をプレートより乖離した� �、細胞溶解用緩衝液を回収する。回収した� �胞溶解用緩衝液を、サンプル用緩衝液と混� �して95℃で5分間熱処理した後、SDSポリアク� �ルアミド電気泳動を行う。泳動終了後、ゲ� �内の蛋白質をニトロセルロース膜に吸着さ� �、1次抗体として抗Hsp70抗体を、2次抗体とし� ��Horseradish peroxidase標識抗マウスIgG抗体を用� �たウエスタンブロット法によって、Hsp70の蛋 白質量を測定する。

 IL-1βの刺激存在下でヒト正常関節軟骨細� ��中のHsp70の蛋白質量を増加させる被験物質� �、ヒートショック蛋白質発現誘導活性を有� �ると判断することができる。

 ところで、Hsp90/HSF-1複合体を分離する活� �を有する化合物は、ヒートショック蛋白質� �発現を誘導することが知られている(非特許� ��献1)。従って、工程(2)における被験物質の� �ートショック蛋白質発現誘導活性は、被験� �質のHsp90/HSF-1複合体に対する分離活性を測定 することにより測定できる。

 HSF-1は、熱ショック転写因子(heat shock fac tor-1)を意味し、Hsp90と複合体を形成するもの� ��あれば特に限定されない。

 HSF-1としては、各種動物、特にヒト由来� �ものが使用できる。ヒトHSF-1としては、例え ば、ヒトHSF-1(GenBank accession No. NP_005517)が使� ��できる。また、本発明のHSF-1には、HSF-1蛋白 質の塩、修飾されたHSF-1蛋白質も含まれる。

 工程(2)としてHsp90/HSF-1複合体に対する分� �活性を測定する場合の例を以下に記載する� �

 まず、ヒト正常関節軟骨細胞を、蛋白質� ��解酵素阻害剤を含有する緩衝液で溶解した� ��、溶解液を遠心分離し、得られた上清をHsp9 0/HSF-1複合体を含有するライセートとして使� �する。適当な緩衝液で希釈した上記ライセ� �トに、被験物質または緩衝液を添加して一� �時間反応させる。被験物質がHsp90/HSF-1複合体 に対する分離活性を有する場合は、Hsp90とHSF- 1が解離する。次いで、反応液に抗Hsp90抗体ま たはコントロール抗体を添加し、免疫沈降反 応を行う。反応系にHsp90/HSF-1複合体が存在す� ��場合は、抗Hsp90抗体/Hsp90/HSF-1複合体が形成� �れる。また、反応系にHSF-1と解離したHsp90が� ��在する場合は、抗Hsp90抗体/Hsp90複合体が形� �される。

 次いで、プロテインA/Gアガロースを添加� ��て一定時間反応させ、抗体をプロテインA/G� ��ガロースに吸着させる。次いで遠心分離に� ��ってプロテインA/Gアガロースを回収し、緩� ��液で洗浄した後、サンプル用緩衝液と混合� ��て5分間熱処理する。プロテインA/Gアガロー スに結合した蛋白質が溶出されるので、溶出 液をSDSポリアクリルアミド電気泳動に供する 。

 泳動終了後、ゲル内の蛋白質をニトロセ� ��ロース膜に吸着させ、1次抗体として抗HSF-1� ��体又は抗Hsp90抗体を、2次抗体としてHorseradis h peroxidase標識抗IgG抗体を用いたウエスタン� �ロット法を行い、Hsp90およびHSF-1の蛋白質を� ��ンドとして検出する。 被験物質非存在下� �よび被験物質存在下で検出される蛋白質の� �ンド(蛋白質量)を比較する。被験物質非存在 時よりも被験物質存在時でのHSF-1の蛋白質量� ��少ない場合、被験物質はHsp90/HSF-1複合体に� �する分離活性を有する、すなわち、ヒート� �ョック蛋白質発現誘導活性を有する、と判� �できる。

 工程(2)においてヒートショック蛋白質の� ��現誘導活性を有する被験物質を選抜し、該� ��験物質を更に工程(1)および(3)に供すること� ��より、優れた細胞保護剤を得ることができ� ��。

 工程(3)では、Hsp90クライアント蛋白質の� �解誘導活性を有する被験物質の選抜を目的� �して、被験物質のHsp90クライアント蛋白質分 解誘導活性を測定する。

 Hsp90クライアント蛋白質分解誘導活性の� �定は、クライアント蛋白質の発現能を有す� �細胞あるいは、細胞抽出物の系を用いて測� �することができる。工程(3)の好ましい例と� �ては、例えば、(i)被験物質非存在下におけ� �細胞内のHsp90クライアント蛋白質量と、(ii)� �験物質存在下における細胞内のHsp90クライア ント蛋白質量とを測定し、比較する工程が挙 げられる。

 Hsp90クライアント蛋白質は、細胞内での� �定な存在や正常な機能のためにHsp90と複合体 を形成する性質を有する蛋白質であれば特に 限定されず、例えば、Glucocorticoid receptor、Akt 及びcycline dependent kinase 4から選択される1種 以上が挙げられる。Glucocorticoid receptor(グル� �コルチコイド レセプター)としては、各種� �物、特にヒト由来のもの、例えば、ヒトGluco corticoid receptor(GENBANK Accession No. AAB20466)が挙 げられる。

 Aktは、セリン/スレオニンキナ-ゼの一種(E C 2.7.11.1)である。Aktとしては、各種動物、特 にヒト由来のもの、例えば、ヒトAkt(GENBANK Ac cession No. NP_001014432)が挙げられる。

 cycline dependent kinase 4(サイクリン依存性� ��ナーゼ4)は、サイクリンDと複合体を形成す� ��ことにより活性化されるキナーゼである。c ycline dependent kinase 4としては、各種動物、� �にヒト由来のもの、例えば、ヒトcycline depen dent kinase 4(GENBANK Accession No. NP000066)が挙げ� ��れる。さらにHsp90クライアント蛋白質とし� �は、EGF-R(epidermal growth factor receptor)、IGF1R(in sulin-like growth factor I receptor)、RIP(receptor-inte racting protein)などが挙げられる。

 Hsp90クライアント蛋白質量は例えば、Hsp90 クライアント蛋白質に対する抗体を用いたウ エスタンブロット法により測定することがで きる。

 工程(3)として(i)被験物質非存在下におけ� ��細胞内のHsp90クライアント蛋白質量と、(ii)� ��験物質存在下における細胞内のHsp90クライ� �ント蛋白質量とを測定し、比較する場合の� �を以下に記載する。

 まず、ヒト正常関節軟骨細胞を培地に懸� ��し、多穴プレートに播種して、一定時間培� ��する。この培養細胞を、Hsp90のクライアン� �蛋白質の発現能を有する細胞として使用す� �。次いで、培養液に被験物質を添加して、� �胞を一定時間培養する。培養終了後、細胞� �緩衝液で1回洗浄し、細胞溶解用緩衝液を添� ��して、セルスクレーパーを用いて細胞残渣� ��プレートより乖離した後、この細胞溶解用� ��衝液を回収する。回収した細胞溶解用緩衝� ��をサンプル用緩衝液と混合して熱処理した� ��、マルチゲル(第一化学薬品社製)を用いたSD Sポリアクリルアミド電気泳動に供する。

 泳動終了後、ゲル内の蛋白質をニトロセ� ��ロース膜に吸着させて、ウエスタンブロッ� ��法でクライアント蛋白質をバンドとして検� ��する。クライアント蛋白質がGlucocorticoid rec eptor、Akt及びcycline dependent kinase 4である場� �は、ウエスタンブロット法では、それぞれ� �蛋白質に対する抗体を1次抗体として使用す� ��。2次抗体としてHorseradish peroxidase標識抗IgG� ��体を使用する。

 被験物質非存在下および被験物質存在下� ��検出される蛋白質のバンド(蛋白質量)を比� �する。被験物質非存在下および被験物質存� �下でのクライアント蛋白質の蛋白質量に実� �的な差異がない場合、クライアント蛋白質� �分解誘導活性を示さないと判断できる。一� �、被験物質非存在時よりも被験物質存在時� �のクライアント蛋白質の蛋白質量が少ない� �合、被験物質はHsp90クライアント蛋白質の分 解誘導活性を有すると判断できる。

 工程(3)においてHsp90クライアント蛋白質� �解誘導活性を示さない被験物質を選抜し、� �被験物質を更に工程(1)および(2)に供するこ� �により、優れた細胞保護剤を得ることがで� �る。

 本発明においては、各工程を実施する順� ��は特に限定されない。また、2つあるいは3� �の工程を同時に実施してもよい。また、工� �(2)および(3)は、蛋白質の発現能を有する細� �を用いて実施することが好ましい。具体的� �は、工程(2)がヒートショック蛋白質の発現� �を有する細胞を用いて被験物質のヒートシ� �ック蛋白質発現誘導活性を測定する工程で� �り、かつ工程(3)がHsp90クライアント蛋白質の 発現能を有する細胞を用いて被験物質のHsp90� ��ライアント蛋白質分解誘導活性を測定する� ��程であることが好ましい。

 また、本発明の細胞保護剤のスクリーニ� ��グ方法は、被験物質に対して以下の工程(1)~ (4)を実施する方法であってもよい。(1)被験物 質とHsp90との結合性を測定する工程、(2)被験� ��質のヒートショック蛋白質発現誘導活性を� ��定する工程、(3)被験物質のHsp90クライアン� �蛋白質分解誘導活性を測定する工程、およ� �(4)Hsp90結合活性及びヒートショック蛋白質発 現誘導活性を示し、Hsp90クライアント蛋白質� ��解促進活性を示さない被験物質を選抜する� ��程;

 工程(1)~(3)の目的および実施の形態は上記 と同様である。各工程を実施する順序は特に 限定されない。また、工程(1)~(3)の2つあるい� ��3つの工程を同時に実施してもよい。工程(4) は、工程(1)~(3)の測定結果に基づいて、Hsp90結 合活性及びヒートショック蛋白質発現誘導活 性を示し、Hsp90クライアント蛋白質分解促進� ��性を示さない被験物質を選抜する工程であ� ��。

 本発明のスクリーニング方法により、細� ��傷害性が弱いか又は細胞傷害性を示さない� ��優れた細胞保護剤、すなはち、「Hsp90結合� �性及びヒートショック蛋白質発現誘導活性� �示し、Hsp90のクライアント蛋白質分解促進活 性が弱いか又は該活性を示さない細胞保護剤 」或いは「Hsp90結合活性及びHsp90/HSF-1複合体� �離活性を示し、Hsp90のクライアント蛋白質分 解促進活性が弱いか又は該活性を示さない細 胞保護剤」を得ることができる。当該細胞保 護剤は、例えば、心疾患(例、心筋症、心不� �、狭心症、心筋梗塞など)、神経疾患(例、パ ーキンソン病、アルツハイマー病、トリプレ ットリピート病、プリオン病、筋萎縮性側策 硬化症小脳変性、色素性網膜炎など)、脳疾� �(例、脳梗塞など)、中枢神経感染症(例、HIV� �炎、細菌性髄膜炎など)、外傷性疾患(例、脊 髄損傷、脳損傷など)、脱随疾患(例、多発性� ��化症など)、骨・関節疾患(例、骨粗鬆症、� �形関節症、慢性関節リウマチなど)、腎疾患( 例、虚血性急性腎不全、溶血性尿毒症症候群 、急性尿細管壊死、水腎症、糸球体腎炎、糖 尿病性腎症、移植拒絶腎など)、肝疾患(例、� ��イルス性肝炎、アルコール性肝炎など)、皮 膚疾患、骨髄異形成疾患(例、再生不良性貧� �など)、自己免疫性疾患(例、全身性エリテマ トーデス、アトピー性皮膚炎など)、癌性疾� �(例、乳癌、精巣腫瘍、卵巣癌、食道癌、肺� ��、腎臓癌、肝臓癌、非小細胞肺癌、前立腺� ��、胃癌、膀胱癌、子宮頸部癌、結腸癌、直� ��癌、膵臓癌、胸腺腫など)、代謝性疾患(例� �糖尿病、高脂血症、動脈硬化など)または炎� ��性疾患(例、下垂体膿瘍、甲状腺炎、腹膜炎 、クローン病、潰瘍性大腸炎、結節性紅斑な ど)の予防・治療剤として有用である。

〔細胞保護剤のスクリーニング用キット〕
 本発明は、上記スクリーニング方法のため� ��好適に用いることができるスクリーニング� ��キット、特に、Hsp90結合活性及びヒートシ� �ック蛋白質発現誘導活性を示し、Hsp90クライ アント蛋白質分解促進活性を示さない細胞保 護剤のスクリーニング用キットを提供する。

 スクリーニング用キットの一例は、(1)Hsp9 0、(2)ヒートショック蛋白質発現誘導活性の� �定用試薬、(3)イミダゾチアジン誘導体、お� �び(4)Hsp90クライアント蛋白質の定量用試薬を 含むものである。Hsp90は、固相化されていて� ��よい。ヒートショック蛋白質は特に限定さ� ��ないが、Hsp40、Hsp70及びHsp90から選択される1 種以上であることが好ましい。ヒートショッ ク蛋白質発現誘導活性の測定用試薬としては 、例えば、ヒートショック蛋白質またはヒー トショック蛋白質をコードするmRNAの、定量� �または検出用試薬が挙げられ、具体的には� �えば、ヒートショック蛋白質に対する抗体� �エライザキットに含まれる試薬、mRNA測定試� ��、Heat shock elementを用いたレポーターアッ� �イ用試薬などが挙げられる。イミダゾチア� �ン誘導体は、固相化されていてもよい。Hsp90 クライアント蛋白質は特に限定されないが、 Glucocorticoid receptor、Akt及びcycline dependent kina se 4から選択される1種以上であることが好ま しい。また、Hsp90クライアント蛋白質の定量� ��試薬としては、Hsp90クライアント蛋白質に� �する抗体が好ましい。スクリーニング方法� �蛋白質の発現能を有する細胞を用いる方法� �ある場合、当該スクリーニング用キットは� �さらに、(5)ヒートショック蛋白質の発現能� �有する細胞、および(6)Hsp90クライアント蛋白 質の発現能を有する細胞を含むことが好まし い。

 また、本発明のスクリーニング用キット� ��別な例は、(1)Hsp90/HSF-1複合体、(2)Hsp90、(3)Hsp 90の定量用試薬、(4)イミダゾチアジン誘導体� ��および(5)Hsp90クライアント蛋白質の定量用� �薬、を含むものである。Hsp90の定量用試薬と しては、Hsp90に対する抗体が好ましい。スク� ��ーニング方法が蛋白質の発現能を有する細� ��を用いる方法である場合、当該スクリーニ� ��グ用キットは、さらに(6)Hsp90クライアント� �白質の発現能を有する細胞を含むことが好� �しい。

〔スクリーニング方法、またはスクリーニン グ用キットを用いて得られる物質〕
 本発明は、上記のスクリーニング方法、ま� ��はスクリーニング用キットを用いて得られ� ��、Hsp90結合活性及びヒートショック蛋白質� �現誘導活性を示し、Hsp90クライアント蛋白質 分解促進活性を示さない物質を提供する。該 物質とは、例えば、ペプチド、タンパク、非 ペプチド性化合物、合成化合物、抗体、核酸 、ワクチン、発酵生産物、細胞抽出液、植物 抽出液、動物組織抽出液、血漿などである。 該物質は、ペプチド、タンパク、非ペプチド 性化合物または合成化合物の塩であってもよ い。該物質は、そのままで細胞保護剤あるい は医薬として使用することができる。また、 該物質と他の成分との混合物を、細胞保護剤 あるいは医薬として使用することができる。

 本発明のスクリーニング方法またはスク� ��ーニング用キットを用いて得られる物質と� ��ては、前記式(I)のイミダゾチアジン誘導体� ��挙げられる。該イミダゾチアジン誘導体と� ��ては、例えば、N-[(1Z)-5,6-ジメチル-3-オキソ- 8-[(4,4,5,5,5-ペンタフルオロペンチル)スルファ ニル]-2,3-ジヒドロ-1H-イミダゾ[5,1-c][1,4]チア� �ン-1-イリデン]-4-メチルベンゼンスルホンア� ��ド)が挙げられる。

 なお、本発明のスクリーニング方法の工� ��(1)が、Hsp90とイミダゾチアジン誘導体との� �合性に対する被験物質の阻害活性を測定す� �工程を含むものであり、当該イミダゾチア� �ン誘導体として前記式(I)の化合物またはそ� �塩を使用する場合、スクリーニング方法に� �いて使用した当該イミダゾチアジン誘導体� �たはその塩自体は、「本発明のスクリーニ� �グ方法またはスクリーニング用キットを用� �て得られる物質」からは除かれる。

〔細胞保護剤および医薬〕
 本発明は、上記スクリーニング方法、また� ��スクリーニング用キットを用いて得られる� ��Hsp90結合活性及びヒートショック蛋白質発� �誘導活性を示すが、Hsp90クライアント蛋白質 分解誘導活性を示さない物質を含有してなる 細胞保護剤、および該細胞保護剤を含有して なる医薬を提供する。

 上記細胞保護剤および医薬は、各種疾患� ��特に臓器傷害が関与する疾患および炎症の� ��防・治療剤として有用である。疾患とは、� ��えば、心疾患(例、心筋症、心不全、狭心症 、心筋梗塞など)、神経疾患(例、パーキンソ� ��病、アルツハイマー病、トリプレットリピ� ��ト病、プリオン病、筋萎縮性側策硬化症小� ��変性、色素性網膜炎など)、脳疾患(例、脳� �塞など)、中枢神経感染症(例、HIV脳炎、細菌 性髄膜炎など)、外傷性疾患(例、脊髄損傷、� ��損傷など)、脱随疾患(例、多発性硬化症な� �)、骨・関節疾患(例、骨粗鬆症、変形関節症 、慢性関節リウマチなど)、腎疾患(例、虚血� ��急性腎不全、溶血性尿毒症症候群、急性尿� ��管壊死、水腎症、糸球体腎炎、糖尿病性腎� ��、移植拒絶腎など)、肝疾患(例、ウイルス� �肝炎、アルコール性肝炎など)、皮膚疾患、� ��髄異形成疾患(例、再生不良性貧血など)、� �己免疫性疾患(例、全身性エリテマトーデス� ��アトピー性皮膚炎など)、癌性疾患(例、乳� �、精巣腫瘍、卵巣癌、食道癌、肺癌、腎臓� �、肝臓癌、非小細胞肺癌、前立腺癌、胃癌� �膀胱癌、子宮頸部癌、結腸癌、直腸癌、膵� �癌、胸腺腫など)、代謝性疾患(例、糖尿病、 高脂血症、動脈硬化など)または炎症性疾患(� ��、下垂体膿瘍、甲状腺炎、腹膜炎、クロー� ��病、潰瘍性大腸炎、結節性紅斑など)などで ある。

 上記細胞保護剤および医薬は、公知の方� ��によって医薬組成物とし、種々の剤形で、� ��記疾患の予防・治療剤などとして、哺乳動� ��(例、ヒト、サル等)に経口的または非経口� �に投与しうる。具体的には、上記化合物を� �薬学的に許容される担体と混合し、錠剤、� �剤、顆粒剤、カプセル剤、シロップ剤、乳� �、懸濁剤などとして経口投与、または、注� �剤、坐剤または舌下錠などとして、静脈内� �皮下および筋肉内などに非経口投与する。� �た、舌下錠、マイクロカプセル等の徐放製� �として、舌下、皮下および筋肉内などに投� �してもよい。

 上記薬学的に許容される担体としては、� ��剤素材として慣用の各種有機あるいは無機� ��体物質が用いられ、賦形剤、滑沢剤、結合� ��、崩壊剤、溶剤、溶解補助剤、懸濁化剤、� ��張化剤、緩衝剤、無痛化剤などとして配合� ��れる。また必要に応じて、防腐剤、抗酸化� ��、着色剤、甘味剤などの製剤添加物を用い� ��こともできる。

 上記医薬組成物に含まれる有効成分(上記 スクリーニング方法、またはスクリーニング 用キットを用いて得られる、Hsp90結合活性及� ��ヒートショック蛋白質発現誘導活性を示す� ��、Hsp90クライアント蛋白質分解誘導活性を� �さない物質)の投与量は、症状の程度;投与対 象の年齢、性別、体重;投与の時期、間隔、� �薬製剤の性質、調剤、種類;有効成分の種類� ��どによって異なり、特に限定されない。例� ��ば、当該医薬組成物を心不全などの治療に� ��いる場合は、通常、成人に対して一日につ� ��該有効成分を、約0.1~100mg、好ましくは約1.0~ 50mg、より好ましくは約1.0~20mg投与すればよい 。

 以下に、本発明のスクリーニング方法を� ��に詳しく説明する。

(参考例1)
1.被験物質の調製
 以下(i)~(v)の反応を行い、被験物質としてイ ミダゾチアジン誘導体(化合物名:N-[(1Z)-5,6-ジ� ��チル-3-オキソ-8-[(4,4,5,5,5-ペンタフルオロペ� ��チル)スルファニル]-2,3-ジヒドロ-1H-イミダ� �[5,1-c][1,4]チアジン-1-イリデン]-4-メチルベン� ��ンスルホンアミド 、以下「化合物A」とい� ��)を合成した。

(i)N-[(4Z)-5-(ジクロロメチレン)-2-オキソイミダ ゾリジン-4-イリデン]-4-メチルベンゼンスル� �ンアミドの合成:
 2-アミノ-3,3-ジクロロアクリロニトリル(31.9� �g, 0.233 mol、純正化学社製)をジエチルエー� �ル(300 ml、以下エーテルと略すことがある。 )に溶解し、室温で撹拌しながらp-トルエンス ルホニルイソシアネート(36.0 ml,  0.233 mol、 純度98%、東京化成社製)を滴下後、室温で14時 間撹拌した。生成した沈澱物を濾取し、ジエ チルエーテルで洗浄後、乾燥して標題化合物 の淡黄色の粉末を得た。
¹ H NMR (CDCl ₃ -DMSO-d6=9:1):δ 2.44 (3H, s), 7.34 (2H, d, J= 8.2  Hz), 7.90 (2H, d, J= 8.2 Hz), 8.19 (1H, brs), 10.2  (1H, br).
元素分析値:C ₁₁ H ₉ N ₃ O ₃ SCl ₂ として
計算値(%): C, 39.54; H, 2.71; N, 12.57; S, 9.60;� �Cl, 21.22.
実測値(%): C, 39.62; H, 2.48; N, 12.66; S, 9.63;� �Cl, 21.00.

(ii)3-[[(5Z)-5-[[(4-メチルフェニル)スルホニル]� �ミノ]-2-オキソイミダゾリジン-4-イリデン](� �ルファニル)メチルスルファニル]プロパン酸 エチルの合成: 上記(i)で合成したN-[(4Z)-5-(ジ� ��ロロメチレン)-2-オキソイミダゾリジン-4-イ リデン]-4-メチルベンゼンスルホンアミド(45.5  g, 0.136 mol)に炭酸カリウム(65.8 g, 0.476 mol) にN,N-ジメチルホルムアミド(450 ml、以下DMFと 略すことがある。)を加え、室温で撹拌しな� �ら3-メルカプトプロピオン酸エチル(35.9 ml,  0.272 mol)を約2時間かけて滴下した。反応混合 物を室温で12時間撹拌し、さらに80℃で7時間� ��拌した。反応液を濃縮乾固後、残渣に2N塩� �(340 ml)およびメタノール(100 ml)を加えて混� �し、生成した沈澱物を濾取し、50%メタノー� �水およびエタノールで洗浄後、乾燥して標� �化合物の橙褐色の粉末を得た。
¹ H NMR (DMSO-d6): δ 1.18 (3H, t, J= 7.1 Hz), 2.33� �(3H, s), 2.63 (2H, t, J= 7.1 Hz), 3.30 (1H, s),  3.32 (2H, t, J= 7.1 Hz), 4.07 (2H, q, J= 7.1 Hz),  7.28 (2H, d, J= 8.1 Hz), 7.74 (2H, d, J= 8.1 Hz ), 8.75 (1H, brd, J= 2 Hz), 9.61 (1H, brs).
元素分析値: C ₂₁ H ₂₇ N ₃ O ₇ S ₃ として
計算値(%): C, 47.62; H, 5.14; N, 7.93; S, 18.16.
実測値(%): C, 47.51; H, 4.84; N, 8.19; S, 18.12.

(iii)3-[[(1Z)-5,6-ジメチル-1-[[(4-メチルフェニル) スルホニル]イミノ]-3-オキソ-2,3-ジヒドロ-1H-� ��ミダゾ[5,1-c][1,4]チアジン-8-イル]スルファニ ル]プロパン酸エチルの合成:
 上記(ii)で合成した3-[[(5Z)-5-[[(4-メチルフェ� �ル)スルホニル]イミノ]-2-オキソイミダゾリ� �ン-4-イリデン](スルファニル)メチルスルフ� �ニル]プロパン酸エチル(40 g, 純度約50%、約4 3 mmol)をTHF(600 ml)に溶解し、3-クロロ-2-ブタ� �ン(9.1 ml, 86 mmol)およびトリエチルアミン(35 .8 ml, 0.258 mol)を加えて室温で1.5時間撹拌後� ��8時間加熱還流した。反応液を濃縮後、残渣 を酢酸エチル(600 ml)で希釈し、2%炭酸水素ナ� ��リウム水溶液、水、0.1N塩酸、水および飽和 食塩水で洗浄後、硫酸ナトリウムで乾燥し、 減圧下濃縮乾固して標題化合物を含む褐色油 状物を得た。

 上記の褐色油状物をトルエン(580 ml)および� ��水酢酸(11.4 ml)に溶解し、p-トルエンスルホ� ��酸1水和物(8.98 g, 47 mmol)を加えて100℃で2時 間加熱撹拌した。反応液を濃縮後、残渣を酢 酸エチル(700 ml)で希釈し、水で四回および飽 和食塩水で洗浄後、硫酸ナトリウムで乾燥し た。溶媒を減圧下に溜去し、残渣にメタノー ルを加え、生成した沈澱物を濾取し、メタノ ールで洗浄後、乾燥して標題化合物の赤紫色 粉末を得た。
¹ H NMR (CDCl ₃ ): δ 1.27 (3H, t, J= 7.2 Hz), 1.79 (3H, brq, J=� �0.8 Hz), 2.26 (3H, brq, J= 0.8 Hz), 2.42 (3H, s),  2.70 (2H, t, J= 7.5 Hz), 3.20 (2H, t, J= 7.5 Hz ), 4.17 (2H, q, J= 7.2 Hz), 7.29 (2H, d, J= 8.3  Hz), 7.84 (2H, d, J= 8.3 Hz), 9.61 (1H, br).
元素分析値:C ₂₀ H ₂₃ N ₃ O ₅ S ₃  として
計算値(%): C, 49.88; H, 4.81; N, 8.72; S, 19.97.
実測値(%): C, 49.78; H, 5.03; N, 8.68; S, 20.00.

(iv)N-[(1Z)-8-メルカプト-5,6-ジメチル-3-オキソ-2 ,3-ジヒドロ-1H-イミダゾ[5,1-c][1,4]チアジン-1-� �リデン]-4-メチルベンゼンスルホンアミドを� ��下の方法により合成した。
 上記(iii)で合成した3-[[(1Z)-5,6-ジメチル-1-[[(4 -メチルフェニル)スルホニル]イミノ]-3-オキ� �-2,3-ジヒドロ-1H-イミダゾ[5,1-c][1,4]チアジン-8 -イル]スルファニル]プロパン酸エチル(5.00 g,  10.4 mmol)をTHF(50 ml)およびメタノール(50 ml)� ��溶解し、水酸化カリウム(2.74 g, 41.5 mmol)を 加えて室温で45分間撹拌した。反応液に1N塩� �(42 ml)を加えて混和し、室温で30分間撹拌し� ��。生成した沈澱物を濾取し、50%メタノール� ��で洗浄後、乾燥して標題化合物の赤色粉末� ��得た。
¹ H NMR (CDCl ₃ -DMSO-d6=9:1): δ 1.81 (3H, s), 2.42 (3H, d, J= 0.5  Hz), 2.45 (3H, s), 7.35 (2H, d, J= 8.1 Hz), 7.88  (2H, d, J= 8.3 Hz), 12.82 (2H, br).
元素分析値:C ₁₅ H ₁₅ N ₃ O ₃ S ₃  として
計算値(%): C, 47.22; H, 3.96; N, 11.01; S, 25.22.
実測値(%): C, 47.20; H, 3.90; N, 10.73; S, 25.19.

(v)N-[(1Z)-5,6-ジメチル-3-オキソ-8-[(4,4,5,5,5-ペ ンタフルオロペンチル)スルファニル]-2,3-ジ� �ドロ-1H-イミダゾ[5,1-c][1,4]チアジン-1-イリデ� ��]-4-メチルベンゼンスルホンアミド (化合物 A)の合成:

 v-1:
 反応試薬として、メタンスルホン酸 4,4,5,5, 5-ペンタフルオロペンチルエステルを合成し� ��。まず、4,4,5,5,5-ペンタフルオロ-1-ペンタノ ール(1.00 g, 5.61 mmol)のテトラヒドロフラン(2 0.0 ml)溶液に、メタンスルホニル クロリド(0 .652 ml, 8.42 mmol)とトリエチルアミン(1.57 ml,� �11.2 mmol)を氷冷下順次加えた。反応混合物を 室温で3時間かき混ぜた後、1N塩酸を加えて酢 酸エチルで抽出した。抽出液を水洗、乾燥(Mg SO ₄ )後、溶媒を減圧下に留去して題記化合物を� �状物として得た。
赤外吸収スペクトル(IR) (KBr) ν: 3031, 2946, 9 12, 743 cm ^-1 .
¹ H-NMR (CDCl ₃ ):δ 1.98-2.35 (4H, m), 3.05 (3H, s), 4.32 (2H, t,� �J=5.6 Hz).

 v-2:
 上記(iv)で得られたN-[(1Z)-8-メルカプト-5,6-ジ メチル-3-オキソ-2,3-ジヒドロ-1H-イミダゾ[5,1-c ][1,4]チアジン-1-イリデン]-4-メチルベンゼン� �ルホンアミド(29.8 g, 78.1 mmol)と炭酸カリウ� ��(16.2 g, 0.117 mol)のN,N-ジメチルホルムアミ� �(400 ml)の懸濁液に、上記(v-1)で得られたメタ ンスルホン酸 4,4,5,5,5-ペンタフルオロペンチ ル エステル(24.0 g, 93.7 mmol)のN,N-ジメチル� �ルムアミド(100 ml)溶液を加えた。反応混合� �を80℃で2時間加熱した後、1N塩酸を加えて酢 酸エチルで抽出した。抽出液を水洗、乾燥(Mg SO ₄ )後、溶媒を減圧下に留去して化合物Aを暗赤� ��結晶として得た。酢酸エチル-ジエチルエー テルから再結晶して融点190-192℃の暗赤色結� �として化合物Aを得た。
赤外吸収スペクトル(IR) (KBr) ν: 3208, 2934, 1 753, 1663, 1624, 1566, 1497 cm ^-1 .
¹ H-NMR (CDCl ₃ ):δ 1.79 (3H, d, J=1.0 Hz), 1.90-2.22 (4H, m), 2.2 7 (3H, d, J=1.2 Hz), 2.42 (3H, s), 3.01 (2H, t, J =6.8 Hz), 7.29 (2H, d, J=8.0 Hz), 7.84 (2H, d, J=8 .4 Hz), 9.62 (1H, bs).
元素分析値: C ₂₀ H ₂₀ N ₃ O ₃ S ₃ F ₅ として
計算値(%): C, 44.35; H, 3.72; N, 7.76; S, 17.76.
実測値(%): C, 44.32; H, 3.69; N, 7.44; S, 17.67.

 化合物Aを、N,N-dimethylformamide (DMF)に溶解� �た溶解液を目的に応じて適切な緩衝液等で� �釈し、実施例記載の測定法に使用した。

2.対照化合物
 対照化合物として、既知のHsp90阻害薬であ� �ゲルダナマイシン(([18S- (4E,5Z,8R*,9R*,10E,12R*,13 S*,14R*,16S*)]-9-[(aminocarbonyl)oxy]-13-hydroxy- 8,14,19-t rimetoxy-4,10,12,16-tetramethyl-2-azabicyclo[16.3.1.]docosa-  4,6,10,18,21- pentan- 3,20,22trion)を使用した。ゲ ルダナマイシン(以下「GA」という)は、Sigma社 製「商品名:Geldanamycin from Streptomyces hygroscopi cus」を使用した。

(参考例2)
 実施例1において使用するため、固相化イミ ダゾチアジン誘導体を調製した。

(1)イミダゾチアジン誘導体の調製
 以下(i)~(iv)の反応を行い、末端にカルボキ� �ル基を導入したイミダゾチアジン誘導体(化� ��物名:5-[[(1Z)-5,6-ジメチル-3-オキソ-1-([[4-(ト� �フルオロメチル)フェニル]スルホニル]イミ� �)-2,3-ジヒドロ-1H-イミダゾ[5,1-c][1,4]チアジン- 8-イル]スルファニル]ペンタン酸、以下「化� �物B」という)を合成した。

(i)5-[[(1Z)-5,6-ジメチル-1-[[(4-メチルフェニル)� �ルホニル]イミノ]-3-オキソ-2,3-ジヒドロ-1H-イ ミダゾ[5,1-c][1,4]チアジン-8-イル]スルファニ� �]ペンタン酸エチルの合成:
 参考例1の(iv)で得られたN-[(1Z)-8-メルカプト- 5,6-ジメチル-3-オキソ-2,3-ジヒドロ-1H-イミダ� �[5,1-c][1,4]チアジン-1-イリデン]-4-メチルベン� ��ンスルホンアミド(500 mg, 1.31 mmol)と炭酸カ リウム(272 mg, 1.97 mmol)のN,N-ジメチルホルム� ��ミド(5.00 ml)の懸濁液に、5-ブロモ吉草酸 � �チルエステル(0.259ml, 1.57 mmol)のN,N-ジメチル ホルムアミド(5.00 ml)溶液を加えた。反応混� �物を80℃で30分間加熱した後、1N塩酸を加え� �酢酸エチルで抽出した。抽出液を水洗、乾� �(MgSO ₄ )後、溶媒を減圧下に留去して題記化合物を� �成した。酢酸エチル-ジエチルエーテルから� ��結晶して融点162-164℃の暗赤色結晶を得た。
赤外吸収スペクトル(IR) (KBr) ν: 3221, 2980, 2 936, 1732, 1663, 1564 cm ^-1 . ¹ H-NMR (CDCl ₃ ):δ 1.27 (3H, t, J=7.2 Hz), 1.67-1.82 (4H, m), 1.7 9 (3H, d, J=1.0 Hz), 2.26 (3H, d, J=1.2 Hz), 2.28- 2.38 (2H, m), 2.42 (3H, s), 2.88-2.98 (2H, m), 4.14  (2H, q, J=7.2 Hz), 7.29 (2H, d, J=8.0 Hz), 7.85  (2H, d, J=8.4 Hz), 9.61 (1H, bs).
元素分析値: C ₂₂ H ₂₇ N ₃ O ₅ S ₃ として
計算値(%): C, 51.85; H, 5.34; N, 8.24; S, 18.87.
実測値(%): C, 51.68; H, 5.29; N, 8.16; S, 18.42.

(ii)5-[(1-アミノ-5,6-ジメチル-3-オキソ-3H-イミ� �ゾ[5,1-c][1,4]チアジン-8-イル)スルファニル]ペ ンタン酸エチルの合成:
 上記(i)で得られた5-[[(1Z)-5,6-ジメチル-1-[[(4-� ��チルフェニル)スルホニル]イミノ]-3-オキソ- 2,3-ジヒドロ-1H-イミダゾ[5,1-c][1,4]チアジン-8-� ��ル]スルファニル]ペンタン酸エチル(1.34 g,  2.63 mmol)とギ酸アンモニウム(1.75 g, 26.3 mmol) のエタノール(26.0 ml)の懸濁液を80℃で17時間� ��熱した後、水を加えて酢酸エチルで抽出し� ��。抽出液を水洗、乾燥(MgSO ₄ )後、溶媒を減圧下に留去した。残留物をシ� �カゲルカラムクロマトグラフィーに付し、n- ヘキサン-酢酸エチル(10:1, v/v)で溶出して題� �化合物を暗赤色結晶として得た。酢酸エチ� �-ジエチルエーテルから再結晶して融点92.0-94 .0℃の暗赤色結晶を得た。
赤外吸収スペクトル(IR) (KBr) ν: 3405, 3283, 3 115, 2978, 2936, 1723, 1634, 1665, 1537 cm ^-1 .
¹ H-NMR (CDCl ₃ ):δ 1.26 (3H, d, J=6.9 Hz), 1.70-1.84 (4H, m), 1.7 4 (3H, s), 2.26 (3H, s), 2.32-2.40 (2H, m), 2.88-2. 98 (2H, m), 4.14 (2H, q, J=6.9 Hz), 7.51 (2H, bs).
元素分析値: C ₁₅ H ₂₁ N ₃ O ₃ S ₂ として
計算値(%): C, 49.92; H, 5.87; N, 11.64; S, 17.77.
実測値(%): C, 49.94; H, 5.79; N, 11.41; S, 17.72.

(iii)5-[[(1Z)-5,6-ジメチル-3-オキソ-1-([[4-(トリフ ルオロメチル)フェニル]スルホニル]イミノ)-2 ,3-ジヒドロ-1H-イミダゾ[5,1-c][1,4]チアジン-8-� �ル]スルファニル]ペンタン酸エチルの合成:
 水素化ナトリウム(230 mg, 5.74 mmol)(60%油性)� ��テトラヒドロフラン(10.0 ml)の懸濁液に、上 記(ii)で得られた5-[(1-アミノ-5,6-ジメチル-3-オ キソ-3H-イミダゾ[5,1-c][1,4]チアジン-8-イル)チ� ��]ペンタン酸エチル(1.02 g, 2.87 mmol)のテト� �ヒドロフラン(5.00 ml)溶液を加え、氷冷下5分 間かき混ぜた。これに4-(トリフルオロメチル )ベンゼンスルホニル クロリド(1.40 g, 5.74 m mol)のテトラヒドロフラン(5.00 ml)溶液を加え� ��さらに室温で1時間かき混ぜた。反応混合物 に1N塩酸を加えて酢酸エチルで抽出した。抽� ��液を水洗、乾燥(MgSO ₄ )後、溶媒を減圧下に留去して題記化合物を� �赤色結晶として得た。酢酸エチル-ジエチル� ��ーテルから再結晶して融点146-148℃の暗赤色 結晶を得た。
赤外吸収スペクトル(IR) (KBr) ν: 3235, 2984, 2 936, 1759, 1738, 1663, 1620, 1559 cm ^-1 .
¹ H-NMR (CDCl ₃ ):δ 1.26 (3H, d, J=7.2 Hz), 1.70-1.78 (4H, m), 1.8 0 (3H, d, J=1.2 Hz), 2.28 (3H, d, J=0.9 Hz), 2.31- 2.38 (2H, m), 2.94-3.00 (2H, m), 4.14 (2H, q, J=7.2  Hz), 7.77 (2H, d, J=8.7 Hz), 8.11 (2H, d, J=9.0  Hz), 9.61 (1H, bs).
元素分析値: C ₂₂ H ₂₄ N ₃ O ₅ S ₃ F ₃ として
計算値(%): C, 46.88; H, 4.29; N, 7.46; S, 17.07.
実測値(%): C, 46.86; H, 4.17; N, 7.62; S, 17.16.

(iv)5-[[(1Z)-5,6-ジメチル-3-オキソ-1-([[4-(トリフ� ��オロメチル)フェニル]スルホニル]イミノ)-2, 3-ジヒドロ-1H-イミダゾ[5,1-c][1,4]チアジン-8-イ ル]スルファニル]ペンタン酸(化合物B)の合成:
 上記(iii)で得られた5-[[(1Z)-5,6-ジメチル-3-オ� ��ソ-1-([[4-(トリフルオロメチル)フェニル]ス� �ホニル]イミノ)-2,3-ジヒドロ-1H-イミダゾ[5,1-c ][1,4]チアジン-8-イル]スルファニル]ペンタン� ��エチル(1.05 g, 1.86 mmol)のエタノール(10.0 ml )及びテトラヒドロフラン(10.0 ml)溶液に、1N� �酸化ナトリウム水溶液(5.59 ml)を加えた。反� ��混合物を室温で1時間かき混ぜた後、溶媒を 減圧下に留去した。残渣に1N塩酸を加えて、� ��酸エチルで抽出した。抽出液を水洗、乾燥( MgSO ₄ )後、溶媒を減圧下に留去して題記化合物(747� �mg, 75%)を暗赤色結晶として得た。酢酸エチ� �-ジエチルエーテルから再結晶して融点191-193 ℃の暗赤色結晶として化合物Bを得た。
赤外吸収スペクトル(IR) (KBr) ν: 3700-2400, 312 5, 2928, 1725, 1663, 1599, 1557 cm ^-1 .
¹ H-NMR (CDCl ₃ ):δ 1.70-1.83 (4H, m), 1.80 (3H, d, J=1.2 Hz), 2.2 8 (3H, d, J=1.2 Hz), 2.37-2.45 (2H, m), 2.94-3.02 ( 2H, m), 7.77 (2H, d, J=8.1 Hz), 8.11 (2H, d, J=8.4  Hz), 9.69 (1H, bs).
元素分析値: C ₂₀ H ₂₀ N ₃ O ₅ S ₃ F ₃ として
計算値(%): C, 44.85; H, 3.76; N, 7.85; S, 17.96.
実測値(%): C, 44.39; H, 4.04; N, 7.83; S, 17.66.

(2)イミダゾチアジン誘導体の固相化
 イミダゾチアジン誘導体(化合物B)の固相化� ��以下の方法により行った。まず、化合物Bを 100 mMとなるように85%のN,N-dimethylformamide (DMF)� ��溶解した。次いで2 mlの上記溶解液に、20 m gの1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)-carbodiimide hydrochr oride (EDC)と1 mlのAF-アミノトーヨーパール650( 東ソー社製)を添加し、pHを5.0に調整した後、 室温で一日攪拌して化合物B のカルボキシル 基とAF-アミノトーヨーパール650のアミノ基を 反応させた。反応終了後、AF-アミノトーヨー パール650担体を85% DMFで洗浄し、これに570 μ lの0.2 M sodium acetateと285 μlのglacial acetic ac idを添加して0℃に30分間保持した後、285μlのg lacial acetic acidを添加して25℃でさらに30分間 保持した。この担体を水と0.1 N NaClで繰り返 し洗浄した後、Binding Bufferで平衡化したもの を、固相化イミダゾチアジン誘導体(以下「� �相化化合物B」という)として、実施例におい て使用した。