La présente invention est relative à de nouveaux dérivés d'amino-2 éthanethiol , à leurs pro¬ cédés de préparation et leur application en théra¬ peutique.

Les dérivés selon la présente invention sont des inhibiteurs d ' aminopeptidases , telles que l'amino- peptidase M, ou une aminopeptidase membranairβ puro- mycine-se ^' nsible , impliquées dans la dégradation des peptides opioïdes endogènes (C. ^' Gros et coll. , Bioche- mistry, 1985, __V; 2179 ; Giros et coll. olec. Pharma- col. 1986, 21, 281 ) .

Les composés susceptibles d'inhiber les ami¬ nopeptidases peuvent prolonger les effets de divers neuropeptides et plus particulièrement les peptides opioidβs endogènes. Ces composés sont donc suscepti¬ bles de remplacer les agents morphiniques dans tous leurs effets (analgésie, effets hormonaux, comportementaux, etc. ) , sans en avoir les graves inconvénients, en particulier au niveau des phénomènes d'accoutumance et de dépendance. On a maintenant trouvé des dérivés d'amino-2 éthanethiol possédant une telle activité.

Les dérivés selon l'invention répondent à la formule générale :

R-

CH, C - NHR, I

^R 1 ^{" S} I *

^R 2 dans laquelle

R. représente un groupe acyle aliphatique linéaire ou ramifié en C £_ à Cb_, éventuellement mono ou polyhalogéné, un groupe benzoyle ou phénacétyle pou¬ vant porter sur le reste phényle un à trois substi¬ tuants halogeno ou alkyle en C à C_, un groupement alcoxy (C, I à C0 _c ) carbonyle linéaire ou ramifié sauf

FEU.LLE DE RE!V.PLAŒ!Œî_T

lorsque R„ est un .gro.upe alkyle, un groupement phérιo>ry-OU beπzyloxy-Cctτbτ>nyle. un groupement alkyl (C à C ) carbamoyle, phénylcarbamoyle ou benzyl- carbamoyle, R ₂ représente un groupe alkyle en C_ à C _-Q linéaire ou ramifié, éventuellement mono ou polyha¬ logéné, un groupe phényle ou aralkyle (en C .i-C 4. ) pou- vant porter sur le reste phényle un à trois substitu¬ ants choisis parmi halogeno, hydroxy, méthoxy ou ben- zyloxy , un groupe indolyle, indolyl-méthyle, cycloal- kyl (en C— à C _e b)-alkyle (en C1. à C_) ou cycloalcenyl

(en C, à Cb_)alkyle (en C1. à C_3),

R_ repré_ _* eτι_,e un atome ό!'hydrogène ou un groupe méthyle, et R 4, représente un atome d'hydrogène ou un groupe méthyle.

Parmi les composés de formule I, définis ci-dessus, une classe préférée de composés comprend les dérivés dans lesquels R est un groupe acyle aliphatique (en C_ à o). <_κ>£.__Hnent acé.tyle, propionyle ou _xutyry_Le _t le groupe acetyle é.ant préféré, éveπ_uelleτrreτrt halogèn s ou un groupe phénoxy- , isobutoxy- ou tert-butoxy-car- bonyle, ou encore un groupe phényl-ou éthyl-carba- moyle,

R_ est un groupe alkyle linéaire ou ramifié

(en C-4. à C-o , un _^ groupe Jaenzyle <ou nénethyle et

R3_ " et R4. ont les significations données ci- dessus . A titre d'halogène on préfère particulière¬ ment le fluor.

L ' invention envisage , à titre de composés spéc_T-fiq.ues les dérivés -s u-Lva rtts :

P. F. ( ^* C)

/ forme /

1 CH ₃ C0- -CH ₂ -C ₆ H ₅ H H 192-4 ___ 2 CF ₃ C0- - ^C V ^C 6 ^H 5 H H 198-200 _TS2 3 C _e H _c NHC0- H H 212-4 _ ^" S7 b D ^"CH 2- ^C 6 ^H 5 4 C„H_NHCO- H H 198-200 CS1

_ 5 ^CH 2- ^C 6 ^H 5 5 C_H_0-CO- ^• CH ₂ -CH(CH ₃ ) ₂ H H 194 TS 3 b 5 6 C_H_NHCO- CH ₂ -CH(CH ₃ ) ₂ H H 218 ZTS7 b 5

7 ⁽ CH ₃ ⁾ ₂ CHCH ₂ OCO ^~ < ^CH ₂ ^} 2~ ^C 6 ^H 5 H H 75-77 £RS7

8 CH ₃ -CO- -C ₆ H ₅ H H 186-7 £RSI

9 CH ₃ C0- -CH ₂ -C ₆ H ₄ pF H H 199-201 ZTRS7

10 C_H_IMHCO- -CH(CH_)_ H H 136 _TRS7

11 C H NHCO- -CH H H 195 ZTRS7 CH -CH

12 (CH ₃ ) ₃ COCO- -CH ₂ -C ₆ H ₅ H H 168 £S2

13 CH CO- -CH -CH H H 178 RS7

14 C _c H _c NHCO- -CH -CH -CH., H H 192 _7SJ b 5 Z _! 3

15 CF ₃ CO- "CH ₂ -C ₆ H_ H CH ₃ 147-9 £S7 16 CH ₃ CO- -(CH ₂ )_-CH ₃ H H 207-9 ZTRS7

17 C_H_NHCO- -(CH ₂ ) ₅ -CH ₃ H H 203 ZTS7

18 CgH _g NHCO- -(CH ₂ ) ₃ -CH ₃ H H 176 Z7S7

19 ^CF 3 ^{C0- "C(CH} 3 ⁾ 3 H H 155 £RS7 20 CH ₃ C0- -CH ₂ -C(CH ₃ ) ₃ H H 194 £RS7

21 C ₂ H ₅ C0- " H ₂ -C ₆ H ₅ H H 172 CS2

22 C ₆ H ₅ CO- " H ₂ -C ₆ H ₅ H H 164 £S7

23 pFC ₆ H ₄ -CO- -CH ₂ -CH(CH ₃ ) ₂ H H 170 _ ^" S7

N ^* R R ₄ P.F.CO

/ forme /

24 C _g H ₅ -CH ₂ C0- -CH ₂ -C ₈ H ₄ pF H 166 _ ^" SI7

29 C _∑ H NHCO- -CH ₂ -,' RS _7 184

30 C_H_.NHC0- -CH ₂ -CH(CH ₃ ) ₂ CH. ZTRS 1 191

D 5

31 CH C0- ^"CH 2~\ /~ ^{0H CH} 3 ^H CRS 7 215

33 -CgHgNHCO- ~ ^CH ₂ ~ ^C 6 ^H 5 ^CH 3 ^H ^^ ^ ^Tθ7

34 CH ₃ CO- -CH - - OCH ₃ H H ΓRS _r 197

5 CgH _g NHCO- « H C RS Υ 191

Les composés de formule I ont en général au moins un atome de carbone asymétrique. Ils peuvent donc exister sous forme de mélange racémique ou sous forme de stéréoisomère. Tous ces composés entrent dans le cadre de la présente invention. Les synthèses dé¬ crites ci-aprés peuvent utiliser le composé racémique ou l'un des énantiomères comme substance de départ. Quand on utilise dans le mode opératoire de synthèse la substance de départ racémique, on peut séparer les stéréoisomères obtenus dans le produit par des procé¬ dés classiques de chromatographie ou de cristallisa¬ tion fractionnée. En général, le stéréoisomère cor¬ respondant a l' aminoacide naturel constitue la forme préférée. Les composés de formule I peuvent former des sels qui font également partie de cette invention. Les sels formés de manière classique comprennent les sels d'addition d'acide que l'on forme par réaction avec divers acides minéraux et organiques, par exemple, les halohydrates , le sulfate, le nitrate, le borate, le phosphate, l'oxalate, le tartrate, le maléate, le ci¬ trate, l'acétate, l'ascorbate, le succinate, le ben- zènesulfonate , le méthanesulfonate , la cyclohexane sulfonate et le toluènesulfonate . Les composés de la présente invention peu¬ vent être préparés par les divers procédés définis ci-après .

Les composés de formule I peuvent être préparés à partir d ' aminα-alcools connus de formule suivante :

I 3

HO - CH„ - C - NH„ II

2 , 2

^R 2 dans laquelle R et R_ ont la même signification que dans la formule I.

Les amino-alcools (II) peuvent le cas éché- airt être préparés- âr paxrtir-d'amiτto-acides correspon¬ dants (connus), après estérification ou non, par ré¬ duction de la fonction carbonyle en fonction alcool au moyen de LiAlH 4, dans le tétrahydro uranne (THF) anhy- dre.

Le schéma réactionnel général est le suivant On fait réagir le N-trifluoroacétyl-imida- zole sur un amino-alcool de formule R _

I

H N - C - CH . OH I I i ^{Z R} 2 ti_mjs laquelle £ et R ont la mèrne que dans la formule I , pour obtenir le dérivé trifluoro- acétylé de formule

^R Iτ ³ CF„ - C - NH - C - CH„0H III ³ 11 I ²

0 R ₂ dans laquelle R et ont la même signification que dans la formule I, on fait réagir sur ce dernier le chlorure de tosyle pour obtenir un composé protégé de

•formule

'a

CF, - C - NH - C - CH.OTS IV

3 _|| ι 2 0 R ₂ dans laquelle R eT R ont la même signification que dans la formule I et TS représente le groupe tosyle, on - ait réagir ce dernier avec l'acide ttiioa-cétique OU trifluorothioacétique en présence d'une base forte pour obtenir le dérivé thioacétylé de formule

^R 3

CF_ - C - NH - C - CH. - S - R" , V ³ || J 2 1

dans laquelle R et R ont la même signification que

dans la formule I, et R' représente un groupe acetyle ou trifluoroacétyle _; puis , soit on réalise la déprotection du groupe amino du composé V au moyen d'acide chlorhydrique ga- zeux pour obtenir les composés de formule I dans la¬ quelle est un groupe acetyle ou trifluoroacétyle et R, est H.

- soit on réalise la double déprotection des groupes amino et thio du composé V au moyen d'acide chlorhydrique gazeux pour obtenir un aminoéthaπethiol de formule

I 3

NH_ - C - CH - SH VI

' i ^

^R 2 dans laquelle et R_ ont la même signification que dans la formule I , et on fait réagir sur ce dernier un dérivé fonctionnel correspondant au radical R pour obtenir un composé de formule I dans laquelle R con¬ serve sa signification sauf acetyle et trifluoroacé- tyle et R, est H, 4 puis le cas échéant on fait réagir les composés de formule I dans laquelle R, est H avec le

4 formaldéhyde et on réduit la base de Schiff ainsi obtenue pour obtenir les composés de formule I dans laquelle R 4. est CH_J .

Les trois premières étapes du schéma pré¬ cédent sont relatives à la protection de la fonction aminé, et à l'introduction et la protection du groupe thio. Les conditions de ces réactions ont été longue- ment étudiées dans la littérature. La quatrième étape concernant la déprotection du groupe thio et/ou amino des composés (V), peut être réalisée dans une solution d'acide chlorhydrique gazeux dans l'alcool methylique à une température d'environ -20 à + 5 ^* C et sous cou¬ rant de gaz neutre tel que l'argon.

Les composés de formule I dans laquelle R est un groupe -acyle autre que aoétyle ou tri luoro¬ acétyle, peuvent être préparés à partir de l'acyl- thio-3-éthane-amino-tboc correspondant, par hydrolyse par HC1 gazeux dans le dioxanne entre environ -10" et 0 ^* C sous argon.

Les- composés de formule I dans laquelle R. est un groupe carbamoyle peuvent être préparés par réaction des aminoéthanethiols (VI ) avec les isocya- nates correspondant à R dans un solvant polaire tel que le diméthylfor amide (DMF) à une température d'en¬ viron 0 ^* C. les composés»de -Formule I dans laquelle R 4. -

CH peuvent être préparés de la façon suivante. Les composés de formule I dans laquelle R, - H sont proté- gés sur le thiol par un reste acyle. Ils sont formylés à température ambiante par le formaldéhyde pour donner la base de Schiff correspondante qui est alors réduite par un hydrure tel que LiAlH 4.. Les exemples ci-après sont donnés à titre d ' -l us ratior- „jd__s px_.cé,dé_î de prép__r-at on _e_ compo¬ sées, selon la présent -invention.

Exemple 1. Chlorhydrate d ' acétyl-thio-2 benzyl-1 ami- no-1 éthane S _7

On ajoute lentement à 0 ^* . sous agitation, 43 .g .de tri^luoxo_-j=élyl--im__ a_-αle et _ID g de jrhloxiixe de tosyle dans 212 τnl de pyridine à une solution de 36 g de L-amino-1 benzyl-1 éthanol dans la pyridine sèche. Après une nuit de contact, le produit est ex¬ trait par du chlorure de méthylène, puis évaporé et recristallisé dans le methanol. On obtient 69 g d'un pxodΛ_it de point -de -fusion = 146 ^* „ qui est le tosylate de trifluoroacétylamino-1 benzyl-1 éthanol. Le rende-

ment de cette étape est de 75Z. A une solution refroi¬ die à 0 ^* de 9 g de ce composé, dans 20 ml de D.M.F. , on ajoute 3,5 g d'acide thioacétique mélangé avec 2,25 g de KOH dans 2,3 ml de DMF sec. Après une nuit de contact, on précipite par 58 ml d'eau déminéralisée, on filtre le précipité et on recristallise dans le me¬ thanol. On obtient ainsi avec un rendement de 707. le trifluoroacétylamino- 1 benzyl-1 acétylthio-2 éthane de point de fusion = 116 ^* . On prépare ensuite une solution de HC1 anhy¬ dre dans du dioxanne (4N) = 100 ml. On ajoute à -5" sous argon 5,60 g du dérivé trifluoroacétylamino- 1 benzyl-1 acétylthio-2 éthane, obtenu précédemment.

On laisse agiter 1 h à température ambiante. On chasse le dioxanne. Le résidu pâteux obtenu est re¬ pris à l'éther anhydre. On essore, sèche sous vide et on obtient 4,50 g de produit, qui correspond au chlo¬ rhydrate de 1 ' acétylthio-2 benzyl-1 amino-1 éthane. Point de fusion = 192 - 194 ^* . Analyse élémentaire : spectres I.R..R.M.N. et C.C. M. corrects.

Exemple 2. Chlorhydrate de trifluoroacétylthio-2 ben- zyl-1 amino-1 éthane C S 1 Le tosylate du trifluoroacétyl-amino- 1 ben- zyl-1 éthanol obtenu au cours de la préparation du dérivé de l'exemple 1 est traité dans les mêmes condi¬ tions que précédemment (0 ^* dans le D.M.F. ) , mais par 10 g d'acide trifluorothioacétique (au lieu d'acide thioacétique) en présence de KOH.

On obtient le dérivé trifluoroacétyl-amino- 1 benzyl-1 trifluoroacétythio-2 éthane qui est hydrolyse comme dans les conditions de l'exemple précédent par une solution d ' HC1 gazeux dans le dioxanne à -5 ^* sous

argon.. Après 2h de contact à température ambiante, on charsse le solvant- et" on xβprβπ dans " étirer anhydre. On essore, sèche sous vide et on obtient le chlorhy¬ drate attendu. Point de fusion = 198-200".

Analyse et spectres corrects. Pouvoin. rotatoire : lévogyre. Exemple 3. Chlorhydrate de phénylcarbamoyl-thio-2 ben- zyl-1 amino-1 éthane L~ S JT . A une .solution d'acide chlorhydrique gazeux dans l'alcool methylique (environ 4N, soit 10 ml), refroidi à 0" sous un courant d'argon, on ajoute 5 g _iu produit oirte i . ans l'exemple 1 , à savoir le tri- fluoroacétylamino-1 benzyl-1 acétylthio-2 éthane. Le mélange est rapidement homogène. On laisse la tempé¬ rature remonter à 20"C, puis on porte à 45-50 ^* C pen¬ dant 3 h. On chasse le solvant sousvide. On obtient après séchage prolongé sous vide 2,90 g de produit de point de fusion = 172-174 ^* . qui est le chlorhydrate de L-phényl-alanine-thiol TS 7.C.C.M. (CH ₂ C1 ₂ /CH ₃ 0H/CH ₃ _ -CÛOH - ZÛ/2ÙJ1J_

Spectres 1. . , "RiW.N. et analyse élémentaire corrects .

Pouvoir rotatoire : lévogyre. On dissout 5 g de ce chlorhydrate dans 75 ml de D.M.F. sec. On refroidit à 0 ^* et on coule goutte à goutte ,2,68 ml (.2,95 g. de pheny -isocyanate.

On revient à température ambiante et laisse agiter 24 h. Le mélange devient homogène assez rapi- dément. On évapore le D.M.F. On obtient un résidu vis¬ queux qui se met en poudre après agitation avec de l'éther. On essore, lave à l'éther et sèche sous vide. On .obtient 7 _> -6 g de pxodtrit ïlrnc.

Point de fusion = 212-214 ^* .

Spectres I.R..R.M.N. et analyses élémentai¬ res corrects.

Exemple . Chlorhydrate d ' éthyl-carbamoyl-thio-2 ben- zyl-1 amino-1 éthane _ ^" S J

Ce produit est préparé de la même façon que l'exemple 3, mais on remplace le phényl-isocyanate par 1' éthylisocyanate. On obtient dans les mêmes condi¬ tions un produit blanc cristallisé.

Point de fusion = 198-200 ^* .

Exemple 5. Chlorhydrate de phénoxycarbonylthio-2 iso- butyl-1 amino-1 éthane ZT S _7

Ce composé est préparé à partir de L-leuci- ne-thiol, dont la synthèse est la suivante :

13,30 g de L-leucinol sont ajoutés à un équivalent, (13,20g) de benzyloxycarbonate et à 2 équivalents de chlorure de tosyle dans 20 ml de pyri¬ dine (37,5g) et maintenus en, contact sous agitation pendant 2 h à température ambiante. On obtient 32 g de tosylate de benzyloxycarbamoyl-1 isobutyl-1 éthanol, dont le point de fusion est 92 ^* C. A ce dérivé, on ajoute 30 g d'acide thioa¬ cétique avec 25 g de KOH dans 25 ml de D.M.F. sec et on laisse en contact 12 h à température ambiante. On précipite par l'eau déiodée et on filtre. On recris- tallise dans le CH OH. On obtient 18 g de Z-amiπo-1 isobutyl-1 thioacétyl-2 éthane dont le point de fusion est 56 ^* C.

L'hydrolyse de ce composé par HC1 gazeux dans CH.0H sous courant d'argon à 0 ^* se fait dans les mêmes conditions que celles décrites pour l'obtention du chlorhydrate de L-phénylalanine-thiol.

Ce dérivé est additionné de chlorure de ben- zyloxycarbonyle en solution dans la soude aqueuse pen¬ dant 30 mn à température ambiante. On obtient le com¬ posé du titre avec un rendement de 712. Point de fusion ≈ 194 ^* C.

Exemple •:_,. ^" Chlorh rate de phénylcart.amoy thio-2 iso- butyl-1 amino-1 éthane C S J

Ce composé est préparé selon l'exemple 3 à partir du chlorhydrate de L-leucine-thiol dont la pré¬ paration est décrite dans l'exemple 5.

Point de fusion = 218 ^* C.

Exemple 7. Chlorhydrate de isobutoxycarbonyl-thio-2 (phényl-2 éthyl)-1 amino-1 éthane £ R,S _7.

Ce produit est préparé à partir de l'homo- phénylalanine-thiol _T R . S _7 préparé de façon analogue u phenyl—-alanine-thiol_ Le chlorhydrate d'homophényl- alanine-thiol _ R. S 57 est traité dans les conditions décrites pour l'obtention de l'exemple 5, en prenant pour groupement protecteur du thiol 1' iso-butoxycarb- amate ( 1 équivalent) . On obtient un produit cris¬ tallisé blanc dont le point de fusion = 75-77 ^* .

Exemple 8. Chlorhydrate d ' acétyl-thio-2 phényl-1 amino- 1 éthane C R , S 1

Ce produit est -préparé dans-le* conditions décrites pour l'obtention de l'exemple 1, à partir du phényl-glycine-thiol C R . S 57, lui-même obtenu comme le phényl-alanine-thiol décrit précédemment. Point de fusion = 186-187 ^* .

Exemple g.. Chloxhydrate d 'acétyl-thio-2 p- fluorophényl-méthyl-1 amino-1 éthane __TR , S 57 Ce produit est préparé selon les conditions décrites pour l'obtention de l'exemple 1 , à partir du p-fluoro-phényl-alanine-thiol , lui-même obtenu comme le phényl-.alanine- hiol d ^' écrit, ci-dessus. Point de fusion = 189-201 ^* .

Exemple 10. Chlorhydrate de phénylcarbamoyl-thio-2 isopropyl-1 amino-1 éthane d R , S 57

Ce dérivé est obtenu selon l'exemple 3 à partir du chlorhydrate de L-valine-thiol dont la préparation est la suivante :

1 équivalent de L-valinol est agité pendant 12 h à température ambiante avec 1 équivalent de tri- fluoroacétyl-imidazole et 2 équivalents de chlorure de tosyle dans la pyridine sèche. On extrait par chlorure de méthylène. On évapore à sec et on recristallise dans le methanol. Le produit de la réaction est traité par l'acide thioacétique et la KOH dans le D.M.F. pen¬ dant 12 H et à température ambiante, pour donner le trifluoroacétyl-amino-1 isopropyl-1 acétyl-thio-2 éthane. L'hydrolyse par HC1 gazeux dans le CH ₃ 0H à 0 ^* sous argon se fait dans les mêmes conditions que celle du chlohydrate de L-phényl-alanine-thiol et aboutit à la formation avec un rendement global de 117. du chlo- rhydrate de L-valine-thiol. A partir de ce dernier on obtient le composé du titre de la même manière que 1' exemple 3.

Point de fusion = 136 ^* . Exemple 11. Chlorhydrate de éthyl-carbamoyl-thio-2 (methyl-1 )-propyl-1 amino-1 éthane _ ^" R , S 57

Ce produit est synthétisé selon les condi¬ tions décrites pour l'obtention du dérivé de l'exemple 4, à partir de 1' iso-leucine-thiol, lui-même obtenu comme le leucine-thiol décrit précédemment. Produit blanc cristallisé.

Point de fusion = 195 ^* . Exemple 12. Chlorhydrate de tert-butoxycarbonyl-thio-2 benzyl-1 amino-1 éthane € S

Ce composé est obtenu comme le produit de

J. ex.e p±θ 5, en remplaçant le chlorure de .benzyloxy- carbonyle par un équivalent de chlorure de tertbu- toxy-carbonyle.

Point de fusion ≈ 68 ^* .

Exemple 13. Chlorhydrate d ' acétyl-thio-2 éthyl-1 ami- no-1 éthane

Préparé comme le dérivé de l'exemple 1, à partir de 1' homo-alanine-thiol. Point de fusion - 178 ^* .

Exemple 14. Chlorhydrate de phényl-carbamoyl-thio-2 -ρxopyl-1 .amino-1 ét an» ^* _7 S_7

Ce composé est obtenu de façon identique à l'exemple 3, en partant du chlorhydrate de L-amino-1 propyl-1 thio-2 éthane, de point de fusion = 145 ^* .

Le dérivé attendu est obtenu avec un rende¬ ment global de 12% et un point de fusion = 192 ^* .

Exemple 15. Chlorhydrate de trifluoro-acétyl-thio-2 Λenz -1 mét ylβmino-î éthane £ ^" S 57

Le dérivé de l'exemple 2 est traité par ΗCHO pour former une base de Schiff, réduite par LiAlH 4, à température ambiante. Recristallisation dans l'éther. Produit blanc cristallisé.

Spectre I.R., R.M.N. et analyses corrects. Poin - e -fusion ~ 1.47-1.43 ^* -.

Exemple 16. Chlorhydrate d ' acétyl-thio-2 hexyl-1 ami- no-1 éthane £ ^" R . S _7

Préparé selon l'exemple 1, à partir de l'he- xyl-1 amino-1 éthanethiol-2.

Point de -fusion ≈ 2-7.-2Q9".

Exemple 17. Chlorhydrate de phényl-carbamoyl-thio-2 hexyl-1 amino-1 éthane £ ^" S 2

Préparé de façon identique à l'exemple 3 à partir de l'heillxyl-1 amino-1 éthanethiol-2. Point de fusion = 203 ^* .

Exemple 18. Chlorhydrate de phényl-carbamoyl-thio-2 butyl-1 amino-1 éthane £ ^" S J

Préparé de façon identique à l'exemple 3, à partir du L-norleucine-thiol.

Point de fusion = 176 ^* .

Exemple 19. Chlorhydrate de trifluoro-acétyl-thio-2 tertbutyl-1 amino-1 éithane £ ^" R,S J Ce produit est obtenu de façon identique au dérivé de l'exemple 2, à partir du tertbutyl-glycine- thiol / R,S /.

Point de fusion = 155 ^* .

Exemple 20. Chlorhydrate d ' acétylthio-2 (diméthyl-2.2 propyl)-1 amino-1 éthane C R , S J

Préparé selon l'exemple 1 , à partir du tertbutyl-alanine-thiol.

Produit blanc cristallisé. Point de fusion = 194 ^* C.

Exemple 21. Chlorhydrate de propionyl-thio-2 benzyl-1 amino-1 éthane C S 57

Il est préparé par action du chlorure d'a- cide propionique sur le chlorhydrate de phényl-ala- nine-thiol, dont la synthèse est décrite au cours de la préparation de l'exemple 2. Le chlorure d'acide propionique est ajouté peu à peu à 0 ^* dans le D.M.F. Agitation à température ambiante pendant 12 heures.

Evaporation. Séchage sous vide. Recristallisation dans é er-

Point de fusion = 172 ^* .

Exemple 22. Chlorhydrate de benzoyl-thio-2 benzyl-1 amino-1 éthane C S 1

Préparé de la même manière que le composé de l'exemple 21, mais avec le chlorure de benzoyle.

Point de fusion = 164 ^* .

Exemple 23. Chlorhydrate de p-fluorobenzoylthio-2 iso- butyl-1 amino-1 éthane C R , S J

Il peut -être préparé dans les conditions dé¬ crites pour l'obtention du dérivé de l'exemple 2 à partir du chlorhydrate de L-leucine-thiol décrit dans la préparation de l'exemple 5.

Exemple 24. Chlorhydrate de phényl-acétyl-thio-2 p-fluoro-phényl-méthyl- 1 amino-1 éthane LZ R , S _7 Ce produit est préparé comme décrit ci-des¬ sus par action du chlorure d'acide phényl-acétique sur le chlorhydrate de- p-*fluoxo- henyl-alanine- hiol, dont la synthèse est décrite au cours de la préparation de 1' exemple 2. Point de fusion = 166 ^* .

Exemple 25. Chlorhydrate de (triméthyl-2, 4, 6 benzoyl- thloy-2 benzy ^' 1-1 aιn_τro- ^" 4 éthane C S _

Il peut être préparé selon l'exemple 21, mais avec le chlorure de l'acide triméthyl-2 , , 6 benzoique.

Point de fusion = 181 ^* .

Exemple 26. Chlorhydrate d ' acétyl-thio-2 (indolyl-3 méthyl)-1 amino-1 éthane _ ^" R , S 7

Ce produit est préparé à partir du tryp- tophane-thiol C R , S , selon l'exemple 1.

Point de fusion = 208 ^* .

Exemple 27. Chlorhydrate d ' acétyl-thio-2 (naphtyl- 1-méthyl)-1 amino-1 éthane _ R,S 7

Ce produit est préparé à partir de l'alpha- naphtyl-alanine-thiol , selon l'exemple 1.

Point de fusion, = 212 ^* .

Exemple 28. Chlorhydrate de phényl-carbamoyl-thio-2 cyclopentyl-méthyl- 1 amino-1 éthane C R , S 7 II peut être préparé de façon identique à l'exemple 3, à partir du β>- cyclopentyl-DL-alanine- thiol.

Point de fusion = 182 ^* .

Exemple 29 Chlorhydrate d'éthyl-carbamoyl-thio-2

( cyclopentén-3-yl méthyD-1 amino-1 éthane ZT R . S 1

Ce produit est préparé de façon identique aux exemples 4 et 11 , à partir de la (1-cyclopen- tenyU - alanine-thiol .

Point de fusion = 184 ^* .

Exemple 30. Chlorhydrate de phényl-carbamoyl-thio-2 isobutyl-1 méthyl-1 amino-1 éthane ZTR.S 7

Préparé de façon identique à l'exemple 3, à partir du méthyl-leucine-thiol.

Point de fusion = 191 ^* .

Exemple 31. Chlorhydrate d ' acétyl-thio-2 méthyl-1 p-hydroxybenzyl- 1 méthyl-1 amino-1 éthane R , S T

Préparé comme J." exemple 1, à partir du me¬ thyl-tyrosine-thiol.

Point de fusion = 215 ^* .

Exemple 32. Chlorhydrate d ' cétyl-thιo-2 méthyl-1 (indolyl-3-méthyl)-1 amino-1 éthane Z_ ^~ R.S_7 ^"

Préparé comme -ci-dessus, à partir du mét- hyl-tryptophane-thiol.

Point de fusion = 220 ^* .

Exemple 33. Chlorhydrate de phényl-carbamoyl-thio-2 méthyl-1 benzyl-1 amino-1 éthane ZT R . S 1

Pxépaxé le *Façon identique a l'exemple 3, à partir de méthyl-phényl-alanine-thiol. Point de fusion = 187 ^* .

Exemple 34. Chlorhydrate d " acétyl-thio-2 p-méthoxy- benzyl-1 amino-1 éthane TR.ST ^{^}

Préparé comme l'exemple 1 , à partir du p-méthoxy-tyrosine-thiol.

Poin -de -fusion - 137 ^* .

Exemple 35. Chlorhydrate de phényl-carbamoyl-thio-2 p-benzyloxy-benzyl-1 amino-1 éthane ZT R , S T Préparé de façon identique à l'exemple 3, à partir du para-benzyloxy-phényl-alanine-thiol. oint de fusion — 131 ^* _

Les résultats des études biologiques et pharmacologiques rapportées ci-après mettent en évidence les intéressantes propriétés des dérivés de 1' invention .

La présente invention . a donc- encore pour objet un médicament ayant des propriétés inhibitrices

d ' aminopeptidases , notamment analgésique, antidépress¬ ive, antisecrétoire gastro-intestinale, caractérisée en ce qu'il contient à titre de principe actif un com¬ posé de formule I ou un sel d'addition avec un acide ou une base pharmaceutiquement acceptable de ce com¬ posé .

A - Etude biologique

1 ) Inhibition de l'activité aminiopeptidasique de mem¬ branes de cerveau de rat.

Les membranes de striatum sont préparées et l'activité aminopeptidasique mesurée en utilisant la

5 3

(Met ) enképhaline- H (40 nM) comme . substrat , suivant le protocole décrit par Gros et al. ( Biochemistry , 1985 , 2.4 , 281 ) .

Les inhibiteurs sont préincubés 30 minutes avec les membranes et l'activité mesurée (en présence d'un inhibiteur d ' enképhalinase , le Thiorphan, à 2 μM) , après une incubation de 15 minutes à 37 ^* C.

Le tableau 1 donne les valeurs des concen¬ trations inhibitrices 507 des divers composés. Tableau 1

COMPOSES CI_ _Q (nM)

3 15

4 35

5 20 7 7

6 9 20

17 10

25 15

27 30

33 5

35 5

2) Protection des enkephalines endogènes libérées par dèpαlarisation de coupé ^e s"de cerveau -de rat.

Les coupes de globus pallidus sont prépa¬ rées, préincubées pendant 30 minutes en présence des composés à essayer (et de 2 μM de Thiorphan), dépola¬ risées par 50mM de K durant 5 minutes et la récupé-

5 ration de (Met- ) βnkephaline libérée dans le milieu, évaluée suivant le protocole décrit par Giros et al.

(Mol. Pharmacol. , 1986, .29., 281) . Les résultats sont rassemblés ci-dessous.

Tableau 2

CONDITIONS TAUX DE RECUPERATTON (2)

Thiorphan seul 15 Thiorphan + composé 3 (5 μH ) 95 Thiorphan + composé 7 (5 μM) 101 10 Thiorphan +

+ comfijas 33 (S μM ) 33 3

3) Inhibition du métabolisme des enkephalines endo- gènes in vivo.

L'effet des composés a été apprécié par l'é¬ valuation . u taux - du tripeptide Jyx-Gly-jGly, un métabolite caxactéxistique des enkephalines, dans le striatum de souris (Llorens-Cortes et al. , Eur. J. Pharmacol. , 1985, 119. 183).

Les souris ont été sacrifiées 45 minutes après administration des composés à la dose de 50 umoles/Kg (i-v.)»

Les résultats sont rassemblés dans le tableau 3 ci-après.

Ta blea u 3

TRAITEMENT TAUX DE TYR-GLY-GLY STRIATAL

(pmoles/mg protéines)

Soluté physiologique 4,0 - 0,3

Composé n ^* 3 8,5 - 0,9

Composé n ^* 7 7,9 - 0,8 Composé n ^* 33 9,1 - 0,7

B - Etude pharmacologique

L'étude pharmacologique des produits décrits ci-dessus a permis de mettre en évidence un effet an¬ talgique et antidiarrheique et une action potentialis- atrice des effets d'une enkephaline la Met-enképha- line .

Les épreuves pharmacologiques réalisées ont été les suivantes :

I - Toxicité aigύe

La détermination de la mortalité chez la souris est observée à la suite de l'administration unique par voie intra-veineuse de doses croissantes des composés à tester. La DL__ pour tous les composés étudiés est

_o supérieure à 100 mg/kg/iv.

II - Activité analgésique

( 1 ) Test de la plaque chauffante chez la souris

* Réflexe de lechement de la patte et de saut par une souris déposée sur une plaque chauffée à 55 ^* C selon la méthode de J. Jacob et coll. (Arch. Int. Pharmacodyn. 122. 287-300, 1959 : 133. 296-300, 1961). a) Potentialisation de l'effet antalgique de la Met-Enképhaline.

Une dose subactive de Met-Enképhaline (1 ug) administrée par voie intracérébroventriculaire est si- gnificativement potentialisée-200 à 4007. -(p<0,05) par les composés 1 , 3, 6, 7 et 17, à la dose de 10 mg/kg/- iv. On mesure l'augmentation du temps de lechement par rapport aux animaux traités pax la Met—enkephaline seule . Cet effet est totalement antagonisé pax la

Naloxone. b) Effet analgésique propre des dérivés.

Il est mesuré en évaluant l'augmentation (7.) du temps de latence du saut des animaux ayant reçu une dose de 10 mg/kg/sc. des produits n ^* 1 , 3, 12 et 18. L'augmentation VΛX _^ S de 150 à £LQ2_ Elle est -signific¬ ative (p. 0,01 à T_ ,D_ ) et est antagonisèe par une injection préalable de Naloxone (10 mg/kg/S .ent. ) . L'e fet est potentialisé par l'administration d'un inhibiteur d ' enképhalinase comme l'acétorphan (1 mg/kg i . v . ) .

" III - Ε et antidiarrheique - rat Test à l'huile de ricin selon la méthode de Niemegeers et Janssen (Arz. Forshung, 1974, _£4_. 1622- 1636) .

Des rats sont protégés significativement (p<D-.0S„) contre l'hypersécrétion intestinale induite par l'huile de ricin (1 ml) après administration orale

de doses variant de 5 à 15 g/kg des produits 1 , 2, 3, 5 et 6. Cet effet est antagonisé par la Naloxone, in¬ jectée préalablement à la dose de 10 mg/kg sous-cuta¬ né .

Les résultats des essais pharmacologiques relatés ci-dessus permettent d'envisager l'application thérapeutique des composés de l'invention, notamment comme analgésiques. psychotropes et antisécrétoires gastro-intestinaux.

L'invention concerne donc également les compositions pharmaceutiques contenant un composé de formule I associé à un véhicule ou excipient, pharma- ceutiquement acceptable. Les médicaments peuvent être présentés en particulier sous forme de comprimés, am¬ poules injectables ou suppositoires, à des doses va¬ riant de 10 à 500 mg par prise.