苯并二噁垸类化合物、 包含其的组合物及应用 相关申请的交叉引用

本申请要求 2012年 5月 15 日递交的题为 "苯并二噁垸类化合物及应 用" 的中国专利申请第 201210150420.9号的优先权， 其全部内容援引加入 本申请。 技术领域

本发明属于药物化学领域， 具体涉及一种苯并二噁垸类化合物、 包含 该化合物的药物组合物以及其在治疗精神神经 疾病中的应用。 背景技术

抑郁症是世界第四大疾病。在我国抑郁症发病 率约为 3%-5%，预计 2020 年抑郁症将升至我国疾病总类的第 2位。

现在所有有效的抗抑郁药物的研发是基于 20世纪 60年代发现的两类 临床有效的药物： 三环类抗抑郁药物和单胺氧化酶抑制剂。 单胺假说认为： 抑郁症是由于人体内五羟色胺和去甲肾上腺素 的传递产生紊乱导致的。 在 这个假说的基础上， 认为三环类药物和单胺氧化酶抑制剂能增强体 内去甲 肾上腺素和五羟色胺的传递。 但是这两类药物还作用于胆碱、 肾上腺素以 及组胺， 因此会产生一系列的副作用。

五胺色胺再摄取抑制剂是近二十年来最主要的 抗抑郁药物， 它从三环 类药物发展而来， 比三环类药物更安全， 耐受性更好， 现已成为临床使用 的主流抗抑郁药物。 五胺色胺再摄取抑制剂抑制了突触间隙对五羟 色胺

(5-HT)的再摄取， 增加了突触间隙的五羟色胺浓度。 虽然五胺色胺再摄取 抑制剂与三环类抗抑郁药相比在安全性上有显 著改善， 但在疗效方面和起 效速度上并无显著改进。

起效延迟不仅降低抑郁症病人依从性， 还增加了其自杀危险性。 因此， 需要开发具有快起效速度的新型抗抑郁药物。 发明内容

一方面， 本发明涉及一 学上可接受的盐:

其中：

Ri 代表氢、 卤素、 未取代或被一个或多个选自卤素、 羟基、 d_ ₅ 垸 基和 CM垸氧基的基团相同或不同地取代的芳基、 未取代或被一个或多个 选自卤素和羟基的基团相同或不同地取代的 CM垸基、 或者未取代或被一 个或多个选自卤素和羟基的基团相同或不同地 取代的 CM垸氧基；

R ₂ 代表氢、 卤素、 未取代或被一个或多个选自卤素和羟基的基团 相 同或不同地取代的 d_ ₅ 垸基、 或者未取代或被一个或多个选自卤素和羟基 的基团相同或不同地取代的 CM垸氧基；

n 代表 1、 2或 3。

在通式 的化合物的某些实施方式中， 代表氢、 未取代或被一个或 多个选自卤素和 垸基相同或不同地取代的苯基、 或者未取代或被卤素 取代的 d_ ₃ 垸基； 代表氢、 卤素、 或者未取代或被卤素取代的 d_ ₃ 垸基; n代表 1或 2。

在通式 的化合物的某些实施方式中， 代表氢、 苯基、 甲基苯基、 乙基苯基、 甲基、 乙基或丙基； R ₂ 代表氢、 氟、 氯、 溴、 甲基、 乙基或丙 基； 且 n代表 1或 2。

在通式 的化合物的某些实施方式中， 代表氢、 苯基、 甲基苯基、 甲基或乙基； 代表氢、 氟、 氯、 甲基或乙基； 且 η代表 1或 2。

另一方面， 本发明涉及一种药物组合物， 其包括治疗有效量的本发明 的化合物和 /或其药学上可接受的盐以及药物学可接受的� �体和 /或赋形剂。

再一方面， 本发明涉及本发明的化合物和 /或其药学上可接受的盐在制 备用于预防或治疗神经精神类疾病的药物中的 应用。

又一方面， 本发明涉及治疗预防或治疗神经精神类疾病的 方法， 其包 括对患有神经精神类疾病的对象施用治疗有效 量的本发明的化合物和 /或 其药学上可接受的盐。 具体实施方式

一方面， 本发明涉及一 学上可接

Ri 代表氢、 卤素、 未取代或被一个或多个选自卤素、 羟基、 CM垸 基和 CM垸氧基的基团相同或不同地取代的芳基、 未取代或被一个或多个 选自卤素和羟基的基团相同或不同地取代的 CM垸基、 或者未取代或被一 个或多个选自卤素和羟基的基团相同或不同地 取代的 CM垸氧基；

R ₂ 代表氢、 卤素、 未取代或被一个或多个选自卤素和羟基的基团 相 同或不同地取代的 CM垸基、 或者未取代或被一个或多个选自卤素和羟基 的基团相同或不同地取代的 CM垸氧基；

n 代表 1、 2或 3。

除非另有指明， 否则在整个此说明书中以下术语将具有以下含 义。 本文使用的术语" CM垸基"是指具有 1、 2、 3、 4或 5个碳原子的直链 或支链的、饱和的一价烃基。 ₅ 垸基的实例包括甲基、 乙基、丙基、丁基、 戊基、 异丙基、 异丁基、 仲丁基、 叔丁基、 异戊基、 2-甲基丁基、 1-甲基丁 基、 1-乙基丙基、 1,2-二甲基丙基、 新戊基和 1 ,1-二甲基丙基。 优选地， d_ ₅ 垸基是甲基、 乙基或丙基。

类似地， 本文使用的术语" d_ ₃ 垸基"是指具有 1、 2或 3个碳原子的直 链或支链的、 饱和的一价烃基。 d_ ₃ 垸基的实例是甲基、 乙基、 丙基和异丙 基。

进一步地， 本发明通式 的化合物中的 CM垸基可选地被一个或多个 选自卤素和羟基的基团相同或不同地取代， 例如 卤代垸基和 d_ ₅ 羟垸 基。 优选地， d_ ₅ 卤代垸基是三氟甲基， 且 d_ ₅ 羟垸基是羟甲基。

本文使用的术语" CM垸氧基"是指式 -0-垸基表示的基团， 其中术语"垸 基"如上定义， 例如甲氧基、 乙氧基、 正丙氧基、 异丙氧基、 正丁氧基、 异 丁氧基、 叔丁氧基、 仲丁氧基、 戊氧基或异戊氧基。

进一步地， 本发明通式 的化合物中的 CM垸氧基可选地被一个或多 个选自卤素和羟基的基团相同或不同地取代， 例如 ₅ 卤代垸氧基和 d_ ₅ 羟垸氧基。优选地， 卤代垸基是三氟甲氧基， 且 d_ ₅ 羟垸氧基是羟甲氧 基。

本文使用的术语"芳基"优选理解为单价的芳族� ��环烃环，特别为具有 6 个碳原子的环 ("c ₆ 芳基")， 优选苯基。

进一步地， 本发明通式 的化合物中的芳基可选地被一个或多个选自 卤素、羟基、 CM垸基和 d_ ₅ 垸氧基的基团相同或不同地取代， 例如氯代苯 基、 氟代苯基、 羟基苯基、 甲基苯基、 乙基苯基、 丙基苯基、 异丙基苯基、 丁基苯基、 异丁基苯基、 甲氧基苯基、 乙氧基苯基、 丙氧基苯基、 异氧丙 基苯基、 丁氧基苯基和异氧丁基苯基。 优选地， 上述被取代的芳基是氯代 苯基、 氟代苯基、 羟基苯基、 甲基苯基、 乙基苯基、 甲氧基苯基和乙氧基 苯基。 更优选地， 上述被取代的芳基是氯代苯基、 氟代苯基、 甲基苯基、 乙基苯基和甲氧基苯基。

本文使用的术语 "卤素"是指氟、 氯、 溴或碘。

在一个实施方式中， 代表氢、 氟、 氯、 溴、 甲基、 乙基、 丙基、 丁 基、 正戊基、 异戊基、 新戊基、 三氟甲基、 羟甲基、 甲氧基、 乙氧基、 丙 氧基、 三氟甲氧基、 羟甲氟基、 苯基、 甲基苯基、 乙基苯基、 异丙基苯基、 甲氧基苯基、 氯代苯基或氟代苯基。 优选地， 代表氢、 苯基、 甲基苯基、 乙基苯基、 甲基、 乙基或丙基。

在一个实施方式中， R ₂ 代表氢、 氟、 氯、 溴、 甲基、 乙基、 丙基、 丁 基、 正戊基、 异戊基、 新戊基、 三氟甲基、 羟甲基、 甲氧基、 乙氧基、 丙 氧基、 三氟甲氧基或羟甲氟基。 优选地， 代表氢、 氟、 氯、 溴、 甲基、 乙基或丙基。

在一个实施方式中， n是 1、 2或 3， 优选 1或 2。

在一个实施方式中， 本发明的通式 的化合物或其药学上可接受的盐 选自以下组中：

1： 3-(2-(4-((2,3-二氢苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基)甲基)哌嗪 -1-基)乙基) -1H- 吲哚；

2： 5-氟 -3-(2-(4-((2,3-二氢苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基）甲基)哌嗪 -1-基)乙 基) -1H-吲哚； 3： 5-氯 -3-(2-(4-((2,3-二氢苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基）甲基)哌嗪 -1-基)乙 基) -1H-吲哚；

4： 3-(2-(4-((2,3-二氢苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基)甲基)哌嗪 -1-基)乙基) -5- 甲基 -1H-吲噪；

5： 3-(2-(4-((2,3-二氢 -2-甲基苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基）甲基)哌嗪 -1-基) 乙基) -1H-吲哚；

6： 5-氟 -3-(2-(4-((2,3-二氢 -2-甲基苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基)甲基)哌嗪 -1- 基)乙基) -1H-吲哚；

7： 5-氯 -3-(2-(4-((2,3-二氢 -2-甲基苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基)甲基)哌嗪 -1- 基)乙基) -1H-吲哚；

8： 3-(2-(4-((2,3-二氢 -2-甲基苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基）甲基)哌嗪 -1-基) 乙基) -5-甲基 -1H-吲哚；

9： 3-(2-(4-((2,3-二氢 -2-苯基苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基）甲基)哌嗪 -1-基) 乙基) -1H-吲哚；

10： 5-氟 -3-(2-(4-((2,3-二氢 -2-苯基苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基）甲基)哌嗪

-1-基)乙基) -1H-吲哚；

11： 5-氯 -3-(2-(4-((2,3-二氢 -2-苯基苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基）甲基)哌嗪 -1-基)乙基) -1H-吲哚；

12： 3-(2-(4-((2,3-二氢 -2-苯基苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基)甲基)哌嗪 -1-基) 乙基) -5-甲基 -1H-吲哚；

13： 3-(3-(4-((2,3-二氢苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基）甲基）哌嗪 -1-基）丙 基) -1H-吲哚；

14： 5-氟 -3-(2-(4-((2,3-二氢苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基)甲基)哌嗪 -1-基)丙 基) -1H-吲哚；

15： 5-氯 -3-(2-(4-((2,3-二氢苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基)甲基)哌嗪 -1-基)丙 基) -1H-吲哚；

16： 3-(2-(4-((2,3-二氢苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基)甲基)哌嗪 -1-基)丙基) -5- 甲基 -1H-吲哚；

17： 3-(2-(4-((2,3-二氢 -2-甲基苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基)甲基)哌嗪 -1-基) 丙基) -1H-吲哚； 18： 5-氟 -3-(2-(4-((2,3-二氢 -2-甲基苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基）甲基)哌嗪 -1-基)丙基) -1H-吲哚；

19： 5-氯 -3-(2-(4-((2,3-二氢 -2-甲基苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基）甲基)哌嗪 -1-基)丙基) -1H-吲哚；

20： 3-(2-(4-((2,3-二氢 -2-甲基苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基)甲基)哌嗪 -1-基) 丙基) -5-甲基 -1H-吲哚；

21： 3-(2-(4-((2,3-二氢 -2-苯基苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基)甲基)哌嗪 -1-基) 丙基) -1H-吲哚；

22： 5-氟 -3-(2-(4-((2,3-二氢 -2-苯基苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基）甲基)哌嗪 -1-基)丙基) -1H-吲哚；

23： 5-氯 -3-(2-(4-((2,3-二氢 -2-苯基苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基）甲基)哌嗪 -1-基)丙基) -1H-吲哚； 和

24： 3-(2-(4-((2,3-二氢 -2-苯基苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基)甲基)哌嗪 -1-基) 丙基) -5-甲基 -1H-吲哚； 以及

以及上述化合物的药学上可接受的盐。

本文使用的术语"药学上可接受的盐"指本发明� ��合物的相对无毒的、 无机酸或有机酸加成盐。例如，参见 S.M. Berge等人， "Pharmaceutical Salts," J. Pharm. Sci. 1977, 66, 1-19。

本发明化合物的药学上可接受的盐包括但不限 于选自以下组中的盐： 盐酸盐、 氢溴酸盐、 氢碘酸盐、 硝酸盐、 硫酸盐、 硫酸氢盐、 憐酸盐、 酸 式憐酸盐、 乙酸盐、 乳酸盐、 柠檬酸盐、 酒石酸盐、 马来酸盐、 富马酸盐、 甲磺酸盐、 葡糖酸盐、 糖二酸盐、 苯甲酸盐、 乙磺酸盐、 苯磺酸盐或对甲 苯磺酸盐。 优选地， 本发明化合物的药学上可接受的盐是盐酸盐。

本发明还涉及如本文公开的化合物的其它形式 ， 其包括但不限于水合 物、 溶剂合物和前药。

本发明的化合物可以水合物或溶剂合物的形式 存在， 其中本发明的化 合物包含作为所述化合物晶格的结构要素的极 性溶剂， 特别是例如水、 甲 醇或乙醇。 极性溶剂特别是水的量可以化学计量比或非化 学计量比存在。 在化学计量溶剂合物例如水合物的情况下， 可能分别是半溶剂合物或水合 物、 一溶剂合物或水合物等。 本发明的前药包括这样的化合物， 其本身可具有生物活性或无生物活 性， 但在体内停留期间转化 (例如通过代谢或水解)为本发明的化合物。

本发明的苯并二噁垸类化合物可包含一个或多 个不对称中心， 视期望 的各种取代基的位置和性质而定。不对称碳原 子可以 (R)或 (S)构型存在， 在 具有一个不对称中心的情况下得到外消旋混合 物， 并且在具有多个不对称 中心的情况下得到非对映异构体混合物。

环上的取代基还可以顺式或反式形式存在。 预期所有的此类构型 (包括 对映异构体和非对映异构体)均包括于本发明� �范围内。

优选的本发明的苯并二噁垸类化合物是产生更 期望的生物活性的那些 化合物。 本发明的苯并二噁垸类化合物的分离的、 纯净的或部分纯化的异 构体和立体异构体、 或者外消旋混合物或非对映异构体混合物均包 括于本 发明范围内。 此类物质的纯化和分离可通过本领域已知的标 准技术实现。

本发明还包括本发明化合物的所有可能的立体 异构体， 其是单一立体 异构体或所述异构体的任意比例的任意混合物 的形式。 可通过任何适合的 现有技术， 例如色谱法， 特别是例如手性色谱法实现本发明化合 立体异构体， 例如单一对映异构体， 或单一非对映异构体的分离。

可采用如下通用合成方法制

具体而言， 在步骤 (1)中： 在三苯基膦催化下， 用四溴化碳溴化式 (A) 所示的 3-乙基 /丙基吲哚醇类衍生物， 以制备 3-溴乙基 /丙基吲哚类衍生物， 其中式 (A)化合物可采用文献 Org. Lett. 6 (2004) 79-82报导的方法制备； 在步骤 (2)中：将式 (B)所示的化合物 (3位取代的苯并二噁垸甲醇)和对甲 苯磺酰氯溶于诸如吡啶的溶剂中， 在室温下搅拌， 反应生成磺酸酯， 其中式

(B)所示的化合物可采用文献 J. Med. Chem. 36(1993) 1520-1528报导的方法 制备；

在步骤 (3)中： 将所述磺酸酯与哌嗪溶于诸如乙醇的溶剂中， 升温并回 流， 以制备苯并二噁垸甲基哌嗪类衍生物； 和

在步骤 (4)中：将苯并二噁垸甲基哌嗪类衍生物和 3-溴乙基 /丙基吲哚溶 于诸如乙腈的溶剂中， 加入碳酸钾和碘化钾， 回流， 以获得目标产物。

更具体地， 本发明包括以下本文实施例部分中制备本发明 化合物的方 法。

本发明的化合物或其药学上可接受的盐可在全 身和 /或局部起作用。 根 据需要， 本发明的化合物或其药学上可接受的盐可通过 适合的方法施用， 其包括但不限于口服、 注射、 胃肠外施用、 局部施用、 直肠施用、 经皮施 用等。

根据不用施用途径， 可将本发明的化合物或其药学上可接受的盐配 制 为所需的施用形式， 包括但不限于片剂、 散剂、 胶囊剂、 溶液、 混悬液、 栓剂、 贴剂、 颗粒剂、 膏剂、 洗液等。 这可以通过现有技术的方法完成。 例如， 可以通过将本发明的化合物或其药学上可接受 的盐与药学上适合的 辅料混合来完成。 可用于本发明的药学上适合的辅料的实例包括 但不限于 溶剂、 乳化剂、 分散剂、 润湿剂、 粘结剂、 稳定剂、 着色剂和气味和 /或味 道掩蔽剂。

本发明的化合物或其药学上可接受的盐还可与 其它已知的治疗神经精 神类疾病的药物组合使用。 本领域已知的治疗神经精神类疾病的药物包括 例如利培酮、 阿立哌唑、 氨磺必利、 氟西汀、 阿普唑仑、 咪达唑仑、 西酞 普 ^等。 因此， 另一方面， 本发明还涉及一种药物组合物， 其包括治疗有效量 的本发明的化合物和 /或其药学上可接受的盐、 和可选地其它已知的治疗神 经精神类疾病的药物、 以及药学上适合的辅料。

在一个实施方式中， 本发明的药物组合物包括治疗有效量的本发明 的 化合物和 /或其药学上可接受的盐以及药学上适合的辅� �。

本发明的药物组合物每单位剂量可包含约 0.01 mg到 1000 mg， 优选 l .O mg到 300 mg， 更优选 10 mg 1 150 mg, 最优选 100 mg的本发明的化 合物和 /或其药学上可接受的盐。或者，基于本发明� �药物组合物的总重量， 本发明的药物组合物应包含至少 0.5 wt%， 优选 4 wt%至 70 wt%， 更优选 10 wt%到 50 wt%， 最优选 30 wt%的本发明的化合物和 /或其药学上可接受 的盐。

本发明药物组合物中所含的本发明的化合物或 其药学上可接受的盐的 剂量取决于疾病或病症的类型和严重性， 以及对象的特征， 例如一般健康、 年龄、 性别、 体重和药物耐受性。 本领域技术人员能够根据这些或其它因 素来确定适当的本发明的活性化合物剂量。 通常所用的中枢神经系统药物 的有效剂量是技术人员熟知的， 其每日总剂量通常在约 0.05mg到 2000mg 之间。

本发明的又一方面是提供一种本发明的化合物 和 /或其药学上可接受 的盐在制备用于预防或治疗神经精神类疾病的 药物中的应用。

本文使用的术语 "治疗"包括克服、 缓解、 减轻、 解除或改善疾病或 病症。 在某些情况下， 术语 "治疗"也包括 "预防"。

本文使用的术语 "神经精神类疾病"是指神经类疾病与精神类疾� ��的 总称。 示例性的神经精神类疾病包括但不限于精神障 碍、 焦虑症、 人格障 碍、 抑郁症、 狂躁症、 偏头痛、 癫痫或痉挛性障碍、 儿童期障碍、 帕金森 病、 认知障碍、 神经变性、 神经毒性和局部缺血。 优选地， 本发明中的神 经精神类疾病是抑郁症。

本发明的再一方面是提供一种使用有效量的本 发明的化合物和 /或其 药学上可接受的盐来预防或治疗神经精神类疾 病的方法， 其包括对患有神 经精神类疾病的对象施用治疗有效量的本发明 的化合物或其药学上可接受 的盐。 本文使用的术语 "对象"包括哺乳动物， 优选人。

体外受体结合试验表明， 本发明所涉及的衍生物对 5-羟色胺转运蛋白 (SERT)和 5-HT _1A 受体具有较高的亲和力。 动物试验结果显示， 这类化合物 在急性治疗中， 能明显减少小鼠不动时间， 因此本发明涉及的化合物具有 起效时间快的优点， 且对神经精神类疾病， 尤其对抑郁症有治疗作用。 实施例

下面的实施例只是以说明为目的的而不作为本 发明的限制。

实施例 1

3-(2-(4-((2,3-二氢苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基)甲基)哌嗪小基)乙基) -1H-吲 哚（化合物 1)

1) 0.025mol的三苯基膦溶于 80ml干燥的乙腈中， 滴加 0.02mol 3-(2- 羟基乙基) -1H-吲哚的乙腈 (75ml)溶液。 然后， 滴加 0.027mol四溴化碳的乙 腈 (25ml)溶液，在常温下搅拌 3小时，除去溶剂，柱层析，得 3-(2-溴乙基 )-1Η- 吲哚， 其为淡黄色油状物。

2) 1.98g (2,3-二氢苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基)甲醇溶于 30ml干燥的吡啶 中， 降温至 0°C， 加入 6.9g对甲苯磺酰氯， 搅拌， 在室温下反应 18小时。 反应完成后， 反应液用 300ml乙醚稀释， 用稀盐酸洗涤， 水洗， 有机层用 无水硫酸镁干燥， 除去乙醚得白色固体， 柱层析 (石油醚： 乙酸乙酯 =4: 1), 得 (2,3-二氢苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基)甲基 4-甲基苯基磺酸酯，其为黄色油状

3) 2.24g (2,3-二氢苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基)甲基 4-甲基苯基磺酸酯溶于 20ml乙醇， 加入 11.9g哌嗪， 升温回流反应， 反应 36小时， 反应完成后， 除去溶剂， 剩余物加入 50ml重量浓度为 2.5%的氢氧化钠溶液， 用三氯甲 垸萃取， 有机层用无水硫酸镁干燥， 除去溶剂得到黄色油状液， 冷却后得 1-((2,3-二氢苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基）甲基)哌嗪， 其淡黄色固体， 熔点： 213-216。C (盐酸盐)。

4) 0.4g 1-((2,3-二氢苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基)甲基)哌嗪溶于 10ml无水 乙腈， 加入 0.5g 3-(2-溴乙基) -IH-吲哚， 0.9g无水碳酸钾， 0.35g碘化钾， 升温回流， 反应 10小时。 降温， 过滤， 滤液除溶剂得粗品， 粗品柱层析 (石 油醚： 乙酸乙酯 =1 : 1， 体积比)， 得目标化合物。

熔点： 238°C， （盐酸盐， 分解)。

-NMR (DMSO-d6) δ 10.97 (s, IH), 7.63-7.02 (m, 5H), 6.94-6.82 (m,

4H), 4.55-4.32 (m, 2H), 4.07-3.98 (m, IH), 3.74-3.29 (m, 12H), 3.20-3.09 (m, 2H);

MS (ESI) m/z 378.1 ([M+H]+)。 实施例 2

5-氟 -3-(2-(4-((2,3-二氢苯并 [b] [1,4]二噁垸 -3-基）甲基）哌嗪 - 1-基）乙 基) -1H-吲哚 (化合物 2)

将 3-(2-羟基乙基) -1H-吲哚换为 3-(2-羟基乙基) -5-氟 -1H-吲哚， 按实施 例 1的方法制备目标化合物。

熔点： 223°C， （盐酸盐， 分解)。

'H-NMR (DMSO-d6) δ 11.10 (s, IH), 7.48-7.30 (m, 3H), 6.99-6.83 (m, 5H), 4.72-4.31 (m, 2H), 4.08-4.00 (m, IH), 3.88-3.28 (m, 12H), 3.22-3.08 (m, 2H)

MS (ESI) m/z 396.1 ([M+H] ⁺ )。 实施例 3

5-氯 -3-(2-(4-((2,3-二氢苯并 [b] [1,4]二噁垸 -3-基）甲基）哌嗪 - 1-基）乙 基) -1H-吲哚 (化合物 3)

将 3-(2-羟基乙基) -1H-吲哚换为 3-(2-羟基乙基) -5-氯 -1H-吲哚， 按实施 例 1的方法制备目标化合物。

熔点： 225°C， （盐酸盐， 分解)。

-NMR (DMSO-d6) δ 11.20 (s, IH), 7.72-7.08 (m, 4H), 6.96-6.85 (m, 4H), 4.67-4.31 (m, 2H), 4.08-4.00 (m, IH), 3.88-3.28 (m, 12H), 3.20-3.12 (m, 2H)

MS (ESI) m/z 412.0 ([M+H]+)。 实施例 4

3-(2-(4-((2,3-二氢苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基)甲基)哌嗪 -1-基)乙基) -5-甲 基 -1H-吲哚 (化合物 4)

将 3-(2-羟基乙基) -1H-吲哚换为 3-(2-羟基乙基) -5-甲基 -1H-吲哚， 按实 施例 1的方法制备目标化合物。

熔点： 226°C， （盐酸盐， 分解)；

^-NMR (DMSO-d6) δ 10.85 (s, IH), 7.41-7.18 (m, 3H), 6.96-6.85 (m, 5H), 4.72-4.31 (m, 2H), 4.08-4.00 (m, IH), 3.88-3.28 (m, 12H), 3.26-3.03 (m, 2H), 2.39 (s, 3H);

MS (ESI) m/z 392.1 ([M+H] ⁺ )。 实施例 5

3-(2-(4-((2,3-二氢 -2-甲基苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基）甲基)哌嗪 -1-基)乙 基) -1H-吲哚 (化合物 5)

将 (2,3-二氢苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基）甲醇换为 (2,3-二氢 -2-甲基苯并

[b][l,4]二噁垸 -3-基)甲醇， 按实施例 1的方法制备目标化合物。

熔点： 234°C， （盐酸盐， 分解)；

-NMR (DMSO-d6) δ 10.97 (s, IH), 7.63-7.23 (m, 5H), 6.96-6.85 (m, 4H), 4.49-4.41 (m, IH), 4.21-4.15 (m, IH), 3.88-3.28 (m, 12H), 3.22-3.10 (m, 2H), 1.37-1.20 (m, 3H);

MS (ESI) m/z 392.1 ([M+H] ⁺ )。 实施例 6

5-氟 -3-(2-(4-((2,3-二氢 -2-甲基苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基)甲基)哌嗪 -1-基) 乙基) -1H-吲哚 (化合物 6)

将 (2,3-二氢苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基）甲醇换为 (2,3-二氢 -2-甲基苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基)甲醇， 并将 3-(2-羟基乙基) -1H-吲哚换为 3-(2-羟基乙 基) -5-氟 -1H-吲哚， 按实施例 1的方法制备目标化合物。

熔点： 232°C， （盐酸盐， 分解)。

-NMR (DMSO-d6) δ 11.10 (s, IH), 7.48-7.30 (m, 3H，), 6.99-6.83 (m, 5H), 4.49-4.41 (m, IH), 4.21-4.15 (m, IH), 3.88-3.28 (m, 12H), 3.22-3.09 (m 2H), 1.38-1.21 (m, 3H);

MS (ESI) m/z 411.1 ([M+H] ⁺ )。 实施例 7

5-氯 -3-(2-(4-((2,3-二氢 -2-甲基苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基)甲基)哌嗪 -1-基) 乙基) -1H-吲哚 (化合物 7)

将 (2,3-二氢苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基）甲醇换为 (2,3-二氢 -2-甲基苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基)甲醇， 并将 3-(2-羟基乙基) -1H-吲哚换为 3-(2-羟基乙 基) -5-氯 -1H-吲哚， 按实施例 1的方法制备目标化合物。

熔点： 234°C， （盐酸盐， 分解)。

-NMR (DMSO-d6) δ 11.19 (s, IH), 7.70-7.07 (m, 4H), 6.93-6.81 (m, 4H), 4.47-4.40 (m, IH), 4.20-4.12 (m, IH), 3.88-3.28 (m, 12H), 3.16-3.02 (m, 2H), 1.37-1.20 (m, 3H);

MS (ESI) m/z 426.1 ([M+H] ⁺ )。 实施例 8

3-(2-(4-((2,3-二氢 -2-甲基苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基）甲基)哌嗪 -1-基)乙 基) -5-甲基 -1H-吲哚 (化合物 8)

将 (2,3-二氢苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基）甲醇换为 (2,3-二氢 -2-甲基苯并

[b][l,4]二噁垸 -3-基)甲醇， 并将 3-(2-羟基乙基) -1H-吲哚换为 3-(2-羟基乙 基) -5-甲基 -1H-吲哚， 按实施例 1的方法制备目标化合物。

熔点： 221°C， （盐酸盐， 分解)。

^-NMR (DMSO-d6) δ 10.83 (s, IH), 7.4-7.18 (m, 3H), 6.99-6.83 (m, 5H), 4.49-4.41 (m, IH), 4.21-4.15 (m, IH), 3.88-3.28 (m, 12H), 3.19-3.08 (m, 2H), 2.39 (s, 3H), 1.38-1.21 (m, 3H);

MS (ESI) m/z 406.1 ([M+H] ⁺ )。 实施例 9

3-(2-(4-((2,3-二氢 -2-苯基苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基）甲基)哌嗪 -1-基)乙 基) -1H-吲哚 (化合物 9)

将 (2,3-二氢苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基）甲醇换为 (2,3-二氢 -2-苯基苯并 [b][l,4]二噁垸 3-基)甲醇， 按实施例 1的方法制备目标化合物。

熔点： 213°C， （盐酸盐， 分解)。

-NMR (DMSO-d6) δ 10.98 (s, IH), 7.66-7.18 (m, 8H), 7.14-6.83 (m, 6H), 5.17-5.09 (m, IH), 4.83-4.63 (m, IH), 3.88-3.28 (m, 12H), 3.26-3.11 (m, 2H);

MS (ESI) m/z 454.3 ([M+H] ⁺ )。 实施例 10

5-氟 -3-(2-(4-((2,3-二氢 -2-苯基苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基)甲基)哌嗪 -1-基) 乙基) -1H-吲哚 (化合物 10)

将 (2,3-二氢苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基）甲醇换为 (2,3-二氢 -2-苯基苯并

[b][l,4]二噁垸 3-基)甲醇， 并将 3-(2-羟基乙基) -1H-吲哚换为 3-(2-羟基乙 基) -5-氟 -1H-吲哚， 按实施例 1的方法制备目标化合物。

熔点： 205°C， （盐酸盐， 分解)。

^-NMR (DMSO-d6) δ 11.10 (s, IH), 7.64-7.29 (m, 8H), 7.10-6.83 (m, 5H), 5.17-5.09 (m, IH), 4.83-4.63 (m, IH), 3.88-3.28 (m, 12H), 3.25-3.10 (m, 2H);

MS (ESI) m/z 472.2 ([M+H] ⁺ )。 实施例 11

5-氯 -3-(2-(4-((2,3-二氢 -2-苯基苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基)甲基)哌嗪 -1-基) 乙基) -1H-吲哚 (化合物 11)

将 (2,3-二氢苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基）甲醇换为 (2,3-二氢 -2-苯基苯并 [b][l,4]二噁垸 3-基)甲醇， 并将 3-(2-羟基乙基) -1H-吲哚换为 3-(2-羟基乙 基) -5-氯 -1H-吲哚， 按实施例 1的方法制备目标化合物。

熔点： 219°C， （盐酸盐， 分解)。 Ή-NMR (DMSO-d6) δ 11.08 (s, IH), 7.61-7.24 (m, 8H), 7.11-6.82 (m, 5H), 5.17-5.09 (m, IH), 4.83-4.63 (m, IH), 3.88-3.28 (m, 12H), 3.26-3.11 (m, 2H);

MS (ESI) m/z 488.2 ([M+H] ⁺ )。 实施例 12

3-(2-(4-((2,3-二氢 -2-苯基苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基）甲基)哌嗪 -1-基）乙 基 )_5-甲基 -1H-吲哚 (化合物 12)

将 (2,3-二氢苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基）甲醇换为 (2,3-二氢 -2-苯基苯并 [b][l,4]二噁垸 3-基)甲醇， 并将 3-(2-羟基乙基) -1H-吲哚换为 3-(2-羟基乙 基) -5-甲基 -1H-吲哚， 按实施例 1的方法制备目标化合物。

熔点： 203°C， （盐酸盐， 分解)。

-NMR (DMSO-d6) δ 11.10 (s, IH), 7.61-7.10 (m, 8H), 7.11-6.82 (m, 5H), 5.17-5.09 (m, IH), 4.83-4.63 (m, IH), 3.88-3.28 (m, 12H), 3.18-3.10 (m, 2H), 2.38 (s, 3H);

MS (ESI) m/z 468.3 ([M+H] ⁺ )。 实施例 13

3-(3-(4-((2,3-二氢苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基)甲基)哌嗪小基)丙基) -IH-吲 哚 (化合物 13)

将 3-(2-羟基乙基 )-m-吲哚换为 3-(3-羟基丙基 )-m-吲哚， 按实施例 1 的方法制备目标化合物。

熔点： 244°C， （盐酸盐， 分解)。

^-NMR (DMSO-d6) δ 10.87(s, IH), 7.54-7.02 (m, 5H), 6.94-6.82 (m, 4H), 4.72-4.29 (m, 2H), 4.07-3.98 (m, IH), 3.74-3.29 (m, 10H), 3.27-3.10 (m, 2H), 2.75 (t, 2H, J=14.8Hz), 2.16-2.04 (m, 2H);

MS (ESI) m/z 392.1 ([M+H] ⁺ )。 实施例 14

5-氟 -3-(2-(4-((2,3-二氢苯并 [b] [1,4]二噁垸 -3-基）甲基）哌嗪 - 1-基）丙 基) -IH-吲哚 (化合物 14)

将 3-(2-羟基乙基 )-1Η-吲哚换为 3-(3-羟基丙基) -5-氟 -1H-吲哚， 按实施 例 1的方法制备目标化合物。

熔点： 252°C， （盐酸盐， 分解)。

-NMR (DMSO-d6) δ 10.98 (s, IH), 7.36-7.26 (m, 3H，), 6.99-6.83 (m,

5H), 4.68-4.29 (m, 2H), 4.08-4.00 (m, IH), 3.74-3.22 (m, 10H), 3.26-3.03 (m, 2H), 2.72 (t, 2H, J=14.8Hz), 2.13-2.01 (m, 2H);

MS (ESI) m/z 410.1 ([M+H] ⁺ )。 实施例 15

5-氯 -3-(2-(4-((2,3-二氢苯并 [b] [1,4]二噁垸 -3-基）甲基）哌嗪 - 1-基）丙 基) -1H-吲哚 (化合物 15)

将 3-(2-羟基乙基 )-1Η-吲哚换为 3-(3-羟基丙基) -5-氯 -1H-吲哚， 按实施 例 1的方法制备目标化合物。

熔点： 247°C， （盐酸盐， 分解)。

-NMR (DMSO-d6) δ 11.10 (s, IH), 7.60-7.05 (m, 4H), 6.95-6.83 (m, 4H), 4.66-4.29 (m, 2H), 4.06-3.99 (m, IH), 3.88-3.28 (m, 10H), 3.24-3.06 (m, 2H), 2.72 (t, 2H, J=14.8Hz), 2.13-2.01 (m, 2H);

MS (ESI) m/z 426.0 ([M+H]+)。 实施例 16

3-(2-(4-((2,3-二氢苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基)甲基)哌嗪 -1-基)丙基) -5-甲 基 -1H-吲哚 (化合物 16)

将 3-(2-羟基乙基) -1H-吲哚换为 3-(3-羟基丙基) -5-甲基 -1H-吲哚， 按实 施例 1的方法制备目标化合物。

熔点： 244°C， （盐酸盐， 分解)。

-NMR (DMSO-d6) δ 10.72 (s, IH), 7.32-7.13 (m, 3H), 6.96-6.85 (m, 5H), 4.71-4.30 (m, 2H), 4.07-3.99 (m, IH), 3.84-3.28 (m, 10H), 3.24-3.12 (m, 2H), 2.73 (t, 2H, J=14.8Hz), 2.13-2.01 (m, 2H), 2.39 (s, 3H);

MS (ESI) m/z 406.1 ([M+H] ⁺ )。 3-(2-(4-((2,3-二氢 -2-甲基苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基）甲基)哌嗪 -1-基)丙 基) -1H-吲哚 (化合物 17)

将 (2,3-二氢苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基）甲醇换为 (2,3-二氢 -2-甲基苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基)甲醇， 并将 3-(2-羟基乙基) -1H-吲哚换为 3-(3-羟基丙 基) -1H-吲哚， 按实施例 1的方法制备目标化合物。

熔点： 240°C， （盐酸盐， 分解)。

-NMR (DMSO-d6) δ 10.86 (s, IH), 7.54-7.07 (m, 4H), 6.98-6.82 (m, 5H), 4.48-4.39 (m, IH), 4.21-4.12 (m, IH), 3.88-3.28 (m, 10H), 3.23-3.09 (m, 2H), 2.75 (t, 2H, J=14.8Hz), 2.15-2.01 (m, 2H), 1.38-1.18 (m, 3H);

MS (ESI) m/z 406.1 ([M+H] ⁺ )。 实施例 18

5-氟 -3-(2-(4-((2,3-二氢 -2-甲基苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基)甲基)哌嗪 -1-基) 丙基) -1H-吲哚 (化合物 18)

将 (2,3-二氢苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基）甲醇换为 (2,3-二氢 -2-甲基苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基)甲醇， 并将 3-(2-羟基乙基) -1H-吲哚换为 3-(3-羟基丙 基) -5-氟 -1H-吲哚， 按实施例 1的方法制备目标化合物。

熔点： 249°C， （盐酸盐， 分解)。

-NMR (DMSO-d6) δ 11.00 (s, IH), 7.37-7.26 (m, 3H), 6.99-6.83 (m,

5H), 4.49-4.41 (m, IH), 4.21-4.15 (m, IH), 3.88-3.28 (m, 10H), 3.26-3.05 (m, 2H), 2.72 (t, 2H, J=14.8Hz), 2.14-2.02 (m, 2H), 1.36-1.20 (m, 3H);

MS (ESI) m/z 424.1 ([M+H] ⁺ )。 实施例 19

5-氯 -3-(2-(4-((2,3-二氢 -2-甲基苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基)甲基)哌嗪 -1-基) 丙基) -1H-吲哚 (化合物 19)

将 (2,3-二氢苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基）甲醇换为 (2,3-二氢 -2-甲基苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基)甲醇， 并将 3-(2-羟基乙基) -1H-吲哚换为 3-(3-羟基丙 基) -5-氯 -1H-吲哚， 按实施例 1的方法制备目标化合物。 熔点： 245°C， （盐酸盐， 分解)。

-NMR (DMSO-d6) δ 11.10 (s, IH), 7.60-7.05 (m, 4H), 6.99-6.83 (m 4H), 4.47-4.41 (m, IH), 4.21-4.15 (m, IH), 3.88-3.28 (m, 10H), 3.23-3.05 (m 2H), 2.73 (t, 2H, J=14.8Hz), 2.14-2.02 (m, 2H), 1.38-1.21 (m, 3H);

MS (ESI) m/z 440.1 ([M+H] ⁺ )。 实施例 20

3-(2-(4-((2,3-二氢 -2-甲基苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基）甲基)哌嗪 -1-基)丙 基) _5-甲基 -1H-吲哚 (化合物 20)

将 (2,3-二氢苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基）甲醇换为 (2,3-二氢 -2-甲基苯并

[b][l,4]二噁垸 -3-基)甲醇， 并将 3-(2-羟基乙基) -1H-吲哚换为 3-(3-羟基丙 基) -5-甲基 -1H-吲哚， 按实施例 1的方法制备目标化合物。

熔点： 239°C， （盐酸盐， 分解)。

-NMR (DMSO-d6) δ 10.73 (s, IH), 7.43-7.16(m, 3H，)， 7.05-6.83 (m, 5H), 4.49-4.41 (m, IH), 4.21-4.15 (m, IH), 3.88-3.28 (m, 10H), 3.29-3.03 (m 2H), 2.73 (t, 2H, J=14.8Hz), 2.39 (s, 3H), 2.14-2.02 (m, 2H), 1.38-1.21 (m, 3H);

MS (ESI) m/z 420.1 ([M+H] ⁺ )。 实施例 21

3-(2-(4-((2,3-二氢 -2-苯基苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基）甲基)哌嗪 -1-基)丙 基) -1H-吲哚 (化合物 21)

将 (2,3-二氢苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基）甲醇换为 (2,3-二氢 -2-苯基苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基)甲醇， 按实施例 1的方法制备目标化合物。

熔点： 214°C， （盐酸盐， 分解)。

-NMR (DMSO-d6) δ 10.98 (s, IH), 7.63-7.15 (m, 8H), 7.11-6.82 (m, 6H), 5.17-5.09 (m, IH), 4.83-4.63 (m, IH), 3.88-3.28 (m, 10H), 3.23-3.08 (m, 2H), 2.74 (t, 2H, J= 14.8Hz),2.14-2.02 (m, 2H);

MS (ESI) m/z 468.3 ([M+H] ⁺ )。 实施例 22

5-氟 -3-(2-(4-((2,3-二氢 -2-苯基苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基)甲基)哌嗪 -1-基) 丙基) -1H-吲哚 (化合物 22)

将 (2,3-二氢苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基）甲醇换为 (2,3-二氢 -2-苯基苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基)甲醇，将 3-(2-羟基乙基) -1H-吲哚换为 3-(3-羟基丙基) -5- 氟 -1H-吲哚按实施例 1的方法制备目标化合物。

熔点： 234°C， （盐酸盐， 分解)。

^-NMR (DMSO-d6) δ 10.97 (s, IH), 7.61-7.24 (m, 8H), 7.11-6.82 (m, 5H), 5.17-5.09 (m, IH), 4.83-4.63 (m, IH), 3.88-3.28 (m, 10H), 3.14-3.04 (m, 2H), 2.70 (t, 2H, J=14.8Hz), 2.10-1.96 (m, 2H);

MS (ESI) m/z 486.3 ([M+H]+)。 实施例 23

5-氯 -3-(2-(4-((2,3-二氢 -2-苯基苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基)甲基)哌嗪 -1-基) 丙基) -1H-吲哚 (化合物 23)

将 (2,3-二氢苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基）甲醇换为 (2,3-二氢 -2-苯基苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基)甲醇，将 3-(2-羟基乙基) -1H-吲哚换为 3-(3-羟基丙基) -5- 氯 -1H-吲哚按实施例 1的方法制备目标化合物。

熔点： 228°C， （盐酸盐， 分解)。

^-NMR (DMSO-d6) δ 11.08 (s, IH), 7.61-7.24 (m, 8H), 7.11-6.82 (m,

5H), 5.17-5.09 (m, IH), 4.83-4.63 (m, IH), 3.88-3.28 (m, 10H), 3.22-3.03 (m, 2H), 2.72 (t, 2H, J=14.8Hz), 2.10-1.96 (m, 2H)；

MS (ESI) m/z 502.2 ([M+H] ⁺ )。 实施例 24

3-(2-(4-((2,3-二氢 -2-苯基苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基）甲基)哌嗪 -1-基)丙 基 )_5-甲基 -1H-吲哚 (化合物 24)

将 (2,3-二氢苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基）甲醇换为 (2,3-二氢 -2-苯基苯并 [b][l,4]二噁垸 -3-基)甲醇，将 3-(2-羟基乙基) -1H-吲哚换为 3-(3-羟基丙基) -5- 甲基 -1H-吲哚按实施例 1的方法制备目标化合物。 熔点： 221°C， （盐酸盐， 分解)。

^-NMR (DMSO-d6) δ 10.71 (s, IH), 7.61-7.10 (m, 8H), 7.11-6.82 (mH), 5.17-5.09 (m, IH), 4.83-4.63 (m, IH), 3.88-3.28 (m, 10H), 3.22-3.10 (mH), 2.70 (t, 2H, J=14.8Hz) 2.11-1.92 (m, 2H), 2.38 (s, 3H);

MS (ESI) m/z 482.3 ([M+H] ⁺ )。 表 1 实施例 1-24制备的优选化合物的结构式

96SS.0/CT0ZN3/X3d I LOL iOZ OAV B部分： 药理方面的实施例

实施例 25

5HT^受体颗粒的制备：

大鼠断头， 迅速取脑皮层 (冰上操作）。 加入 3ml 匀浆液 (0.05M 的 Tris-HCl缓冲液， 含 0.1%的抗坏血酸、 ΙΟμηι优降宁和 4mM CaCl ₂ )， 匀浆， 然后加入 5ml匀浆液， 于 37°C温育 10min。温育完后重新平衡， 在 12000r， 4°C离心 20 min， 弃上清液， 加入 5ml匀浆液， 用旋涡混合器混匀， 离心， 重复三次， 离心完毕， 弃上清液， 将沉淀 (包含 5HT _1A 颗粒)于 -80°C储存备 用。

受体结合实验材料：

同位素配基 ³ H-8-OH-DPAT (67.0Ci/mmol), 购自 PerkinElmer公司； 5-HT, 购自 RBI公司； GF/C玻璃纤维滤纸， 购自 Whatman公司； 2,5-二 苯基噁唑 (PPO)、 1,4-双 (5-苯基 -2-噁唑基)苯 (POPOP)购自上海试剂一厂。 Beckman LS-6500型多功能液体闪烁计数仪。

实验方法：

(1)取包含 5-HT _1A 受体颗粒的沉淀物， 加入适量的匀浆液 (同上)， 用匀 浆机分散均匀， 制备 50ml混悬液， 备用。

(2)各反应管分别加入上述混悬液 10( L， 匀浆液 10( L。

(3)总结合管 (TB)加入 ΙΟΟμΙ^匀浆液， 非特异性结合管 (ΝΒ)加入 5-ΗΤ ΙΟΟμΙ (；终浓度 10— ⁵ Μ)， 各受试化合物特异性结合管 (SB)加入 ΙΟΟμΙ^受试化 合物 (终浓度 10— ⁵ Μ) _;

(4)各反应管分别加入放射性配体 ³ H-8-OH-DPAT ΙΟμΙ^各反应管均设 3 个平行管， 加样时各管置于冰上)；

(5)将各反应管 37°C温孵 10 min， 反应完毕， 结合的配基通过 GF/C玻 璃纤维滤纸减压快速过滤，洗涤，将滤片取出 放到 3ml闪烁杯中，加入 2ml 的甲苯闪烁液 (PPO 2.5 g和 POPOP 0.05 g溶于 500 mL甲苯)并混匀；

(6)将闪烁瓶放入液闪计数仪计数。

抑制率 (1 %)= (总结合管 cpm—化合物 cpm)/ (总结合管 cpm _非特异 结合管 cpm)x l00%

化合物每次实验做三个平行试样。 实验结果见表 2。 实施例 26

SERT受体颗粒的制备：

大鼠断头， 迅速取脑皮层 (冰上操作）。 加入 3ml 匀浆液 (0.05M 的 Tris-HCl缓冲液， 含 NaC1 120mM， KC1 5mM)匀浆， 然后加入 5ml匀浆液， 于 23 °C孵化 10min， 孵化完后试管用天平调整重量， 在 12000r， 4°C离心 20 min， 弃上清液， 加入 5ml匀浆液， 用旋涡混合器混匀， 离心， 重复三 次， 离心完毕， 弃上清液， 将沉淀 (包含 SERT颗粒)于 -80°C储存备用。

受体结合实验材料：

同位素配基 [ ³ H]-paroxetine， 购自 PerkinElmer公司； paroxetine, 购自 Sigma-aldrich公司； GF/C玻璃纤维滤纸， 购自 Whatman公司； 2,5-二苯基 噁唑 (PPO)、 1,4-双 (5-苯基 -2-噁唑基）苯 (POPOP)购自上海试剂一厂。

Beckman LS-6500型多功能液体闪烁计数仪。

实验方法：

(1)取包含 SERT受体颗粒的沉淀物，加入适量的匀浆液 (同上)，用匀浆 机分散均匀， 制备 50ml混悬液， 备用；

(2)各反应管分别加入上述混悬液 10( L， 匀浆液 10( L _;

(3)总结合管 (TB)加入 ΙΟΟμΙ 匀浆液， 非特异性结合管 (ΝΒ)加入 paroxetine ΙΟΟμΙ^终浓度 10— ⁵ Μ)， 各受试化合物特异性结合管 (SB)加入 ΙΟΟμΙ受试化合物 (；终浓度 10— ⁵ Μ) _;

4)各反应管分别加入放射性配体 ³ H-paroxetine ΙΟμΙ^各反应管均设 3 个平行管， 加样时各管置于冰上)；

(5)将各反应管 23 °C温孵 60min， 反应完毕， 结合的配基通过 GF/C玻 璃纤维滤纸减压快速过滤，洗涤，将滤片取出 放到 3ml闪烁杯中，加入 2ml 的甲苯闪烁液 (PPO 2.5 g和 POPOP 0.05 g溶于 500 mL甲苯)并混匀；

(6)将闪烁瓶放入液闪计数仪计数。

抑制率 (1 %)= (总结合管 cpm—化合物 cpm)/ (总结合管 cpm _非特异 结合管 cpm)x l00%

化合物每次实验做三个平行试样。 实验结果见表 2。

体外实验结果表明化合物 1和 6对两种受体 (5111^和 SERT)均具有较 强的亲和力。 表 2 化合物对各受体的 IC

实施例 27

小鼠悬尾实验

实验动物及试剂：

健康昆明种小鼠， 雌雄各半， 体重 (20±2)g， 由南京青龙山动物养殖中 心提供。 氟西汀， Sigma-aldrich公司；

实验方法：

实验前几天筛选出体重合格的小鼠并分组。 第一天， 将小鼠放到杠杆 上 6min， 记录从 2min-6min内的不动时间， 筛选出不动时间在 60s〜180s 的小鼠， 并设立 60s〜90s、 90s〜120s、 120s〜180s三个层次。 然后把各个 层次小鼠进行随机分组， 每组 10只， 设立空白对照组、 阳性对照组和受试 药各给药组。 第二天， 小鼠灌胃给药 lh后， 将小鼠放到杠杆上 6min， 记 录后 4min的不动时间。

不动标准： 是指小鼠在杠杆上静止停止挣扎或呈现荡秋千 状态。

计算各组小鼠不动时间的平均值， 结果用 "均值 ±标准差"表示， 将给药 组的结果与对照组进行 t检验以评价受试药物是否存在抗抑郁性，以 PO.05 为有显著性差异。 实验结果见表 3。

通过实验观察到，化合物 1和 6灌胃给药 80mg/kg不动时间显著减少。 与空白相比较， 化合物 1的不动时间减少 63.4%, 其作用效果优于氟西汀， 化合物 6的不动时间减少 54.4%， 其作用效果与氟西汀相当。

C部分： 组合物实施例

实施例 28

片剂： 乳糖 lOOmg

聚维酮 K30 9 mg

羧甲淀粉钠 12 mg

二氧化硅 2.5mg

硬脂酸镁 1.5mg 原辅料过 80 目筛备用， 称量活性成分、 微晶纤维素、 乳糖、 聚维酮 K30, 加入到高速混合制粒机中， 低速搅拌混合均匀， 加入适量纯化水， 低 速搅拌， 高速切割制粒， 湿颗粒 60°C干燥 3h， 24目筛整粒， 加入羧甲淀粉 钠、 二氧化硅和硬脂酸镁， 混合， 旋转压片机压片。 实施例 29

胶囊剂 （230mg)

原辅料过 80目筛备用， 称取活性成分、 乳糖、 淀粉、 聚维酮 K30, 加 入到高速混合制粒机中， 低速搅拌混合均匀， 加入适量纯化水， 低速搅拌， 高速切割制粒， 湿颗粒 60°C干燥 3h， 24目筛整粒， 加入二氧化硅和硬脂酸 镁， 混合， 胶囊灌装机填充胶囊。 本领域技术人员使用前文所述信息和本领域可 获得的信息能够最大限 度地使用本发明。 本领域技术人员会认识到可改变所公开的结构 、 材料、 组合物和方法来实施本发明而不偏离本文列出 的本发明的精神或范围， 并 且认为此类改变属于本发明范围之内。 实施例中描述的化合物预期对本发 明具有代表性， 并且应理解本发明的范围不受限于所述实施例 的范围。