以下、本発明の一実施形態に係るカチオ� ��化ヒアルロン酸および/またはその塩および その製造方法、ならびに、カチオン化ヒアル ロン酸および/またはその塩を用いた毛髪改� �剤、キューティクル修復剤、皮膚改質剤お� �び化粧料について詳細に説明する。なお、� �実施形態および後述する実施例において、� �%」は「質量%」を意味する。

 1.カチオン化ヒアルロン酸および/またはそ� ��塩
 本実施形態に係るカチオン化ヒアルロン酸� ��よび/またはその塩は、第四級アンモニウム 基含有基を有し、かつ、カチオン化度が0.15~0 .6である。ここで、カチオン化度が0.15未満で は、生体組織(例えば毛髪や皮膚)への吸着力� ��大幅に低下するため、満足な保湿効果が得� ��れなくなる恐れがある。一方、カチオン化� ��が0.6を超えるものは、毛髪に吸着するが満� ��な保湿効果や滑らかさが得られなくなる恐� ��がある。

 さらに良好な吸着性および保湿効果を両� ��させて、毛髪のぱさつき感・ざらつき感お� ��び皮膚のかさつき感をより少なくするため� ��は、本実施形態に係るカチオン化ヒアルロ� ��酸および/またはその塩のカチオン化度は、 0.15~0.4であることが好ましい。

 なお、本明細書において、毛髪が「ぱさ� ��く(dry)」とは、毛髪の水分が少なくて手触� �が良くないことをいい、毛髪が「ざらつく(r ough)」とは、毛髪がざらざらしていて手触り� ��良くないことをいい、皮膚が「ぱさつく(dry )」とは、皮膚の水分が少なくて手触りが良� �ないことをいう。

 1.1.第四級アンモニウム基含有基
 第四級アンモニウム基含有基は、第四級ア� ��モニウム基を少なくとも一部に有する基で� ��る。第四級アンモニウム基含有基は、例え� ��、下記一般式(1)で表される基であることが� ��きる。

    ・・・・・(1)

 (式中、R ¹ ~R ³ は独立して炭化水素基を表し、X ^- は1価の陰イオンを表す。)
 上記一般式(1)において、R ¹ ~R ³ で表される炭化水素基としては、例えば、直 鎖状または分岐状のアルキル基、不飽和炭化 水素基、および芳香族炭化水素基が挙げられ 、アルキル基であることがより好ましい。こ こで、アルキル基としては、炭素数1~30(好ま� ��くは炭素数1~6)のアルキル基が挙げられ、よ り好ましくは、メチル基、エチル基、n-プロ� ��ル基、イソプロピル基などの炭素数1~3のア� ��キル基である。

 また、上記一般式(1)において、X ^- で表される1価の陰イオンとしては、フッ素� �オン、臭素イオン、塩素イオン、ヨウ素イ� �ンなどのハロゲンイオンが挙げられる。

 第四級アンモニウム基含有基は、原料であ� ��ヒアルロン酸および/またはその塩(以下、� �原料ヒアルロン酸および/またはその塩」と� ��いう。)に含まれるカルボキシル基の水素原 子と置換することにより導入することができ る。すなわち、この場合、第四級アンモニウ ム基含有基は、本実施形態に係るカチオン化 ヒアルロン酸および/またはその塩に含まれ� �基(-C(=O)O-)の酸素原子に結合していることが� ��きる。なお、本実施形態に係るカチオン化� ��アルロン酸および/またはその塩において、 第四級アンモニウム基含有基が(-C(=O)O-)の酸� �原子に結合していることは、核磁気共鳴( ¹³ CNMR)スペクトルの化学シフトの解析により、� ��素原子が第四級アンモニウム基含有基と結� ��した-C(=O)O-基の炭素原子に由来するピーク� �存在により確認することができる。

 より具体的には、第四級アンモニウム基� ��有基は、原料ヒアルロン酸および/またはそ の塩のカルボキシル基(場合によってはさら� �水酸基)を、第四級アンモニウム基を含有す� ��カチオン化剤と反応させることにより得る� ��とができる。ここで、カチオン化剤は、下� ��一般式(3)で表される2,3-エポキシプロピルト リアルキルアンモニウムハライドおよび下記 一般式(4)で表される3-ハロゲノ-2-ヒドロキシ� ��ロピルトリアルキルアンモニウムハライド� ��しくはいずれか一方であることが好ましい� ��原料ヒアルロン酸および/またはその塩とカ チオン化剤との反応については、製造方法の 欄で後述する。

 ・・・・・(3)

 (式中、R ¹ ~R ³ は上記一般式(1)で定義した通りであり、Xは� �ロゲン原子を表す。)

   
 ・・・・・(4)

 (式中、R ¹ ~R ³ は上記一般式(1)で定義した通りであり、X、Y� ��独立してハロゲン原子を表す。)
 上記一般式(3)および(4)において、X、Yで表� �れるハロゲン原子としては、フッ素原子、� �素原子、塩素原子、ヨウ素原子が挙げられ� �。

 1.2.カチオン化度
 本実施形態に係るカチオン化ヒアルロン酸� ��よび/またはその塩のカチオン化度(第四級� �ンモニウム基含有基の置換度)は、まず、セ� ��ミクロケルダール法により、原料ヒアルロ� ��酸ナトリウムとカチオン化ヒアルロン酸の� ��素含有率を求め、この窒素含有率の増加分� ��基づいて、下記計算式から算出することに� ��り得ることができる。

 原料ヒアルロン酸ナトリウムの窒素含有率N _N (%)、カチオン化度(x)のカチオン化ヒアルロン 酸の窒素含有率N _S (%)とすると、窒素含有率の増加分(N _S ―N _N )とカチオン化度(x)の関係は次の式で表すこ� �ができる。
N _S ―N _N (%)
=[14x/(カチオン化ヒアルロン酸の二糖単位の� �子量)]×100
=[14x/(原料ヒアルロン酸ナトリウムの二糖単� �の分子量)+129.5x]×100
=[14x/(401.3+129.5x)]×100
 よって、カチオン化度(第四級アンモニウム 基含有基の置換度)は、下記式から求めるこ� �ができる。

 カチオン化度(x)=[(N _S ―N _N )×401.3]/[1400-129.5×(N _S ―N _N )]
 また、原料ヒアルロン酸が未知であるカチ� ��ン化ヒアルロン酸のカチオン化度は、上記� ��において、純度99%以上のヒアルロン酸ナト� ��ウムを原料ヒアルロン酸ナトリウムとみな� ��、上記式から求めることができる。

 1.3.特性
 本実施形態に係るカチオン化ヒアルロン酸� ��よび/またはその塩は、生体組織(例えば、� �髪,まつ毛,まゆ毛などの毛髪、ツメ、皮膚)� �の吸着性に優れている。本実施形態に係る� �チオン化ヒアルロン酸および/またはその塩� ��、生体組織の表面に塗布または接触して摂� ��させてもよいし、特に、頭髪、まつ毛、ま� ��毛などの毛髪や、顔、腕、手指、足、関節� ��どの皮膚への吸着性に優れているため、毛� ��や皮膚に塗布または接触させるのが好まし� ��。

 また、本実施形態に係るカチオン化ヒア� ��ロン酸および/またはその塩の平均分子量は 、毛髪や皮膚の改質効果および化粧料への配 合のしやすさの点で、800万~250万であるのが� �り好ましく、5万~150万であるのがさらに好ま しい。

 1.4.カチオン化ヒアルロン酸および/または� �の塩の構造
 本実施形態に係るカチオン化ヒアルロン酸� ��よび/またはその塩は、下記一般式(2)で表さ れる構造を有することができる。

   
 ・・・・・(2)

 (式中、R ⁴ ~R ⁹ は独立して、水素原子または第四級アンモニ ウム基含有基を表し(ただし、R ⁴ ~R ⁹ がいずれも水素原子を表す場合を除く。)、n� ��2 ~5000の数を示す。)
 上記一般式(2)において、R ⁴ ~R ⁹ で表される第四級アンモニウム基含有基とし ては、例えば、下記一般式(5)で表される基が 挙げられる。

 ・・・・・(5)

 (式中、R ¹ ~R ³ およびX ^- は上記一般式(1)で定義したとおりである。)
 R ¹ ~R ³ およびX ^- でそれぞれ表される基は例えば、上記一般式 (1)においてR ¹ ~R ³ およびX ^- でそれぞれ表される基として例示したもので あることができる。

 2.毛髪改質剤
 本発明の一実施形態に係る毛髪改質剤は、� ��記カチオン化ヒアルロン酸および/またはそ の塩を含有する。本実施形態に係る毛髪改質 剤に含まれる上記カチオン化ヒアルロン酸お よび/またはその塩のカチオン化度は0.15~0.6で あることが好ましく、0.15~0.4であることがよ� ��好ましい。カチオン化度が0.15未満では、毛 髪への吸着が不十分で、十分な保湿効果や滑 らかさが得られない恐れがある。カチオン化 度が0.6を超えるものは、毛髪に吸着するが満 足な保湿効果や滑らかさが得られなくなる恐 れがある。

 本実施形態に係る毛髪改質剤は例えば、� ��ューティクル修復剤として使用することが� ��きる。

 本実施形態に係る毛髪改質剤の態様とし� ��は、例えば、インバスタイプの毛髪用化粧� ��、アウトバスタイプの毛髪用化粧料が挙げ� ��れる。本発明において、「アウトバスバス� ��イプの毛髪用化粧料」とは、毛髪に付着さ� ��た後、洗い流さないタイプの化粧料をいい� ��例えば、原液タイプヘアトリートメント、� ��アクリーム、ヘアスタイリング、ヘアワッ� ��ス、ヘアジェル、ヘアフォーム(ヘアムース )、ヘアローション、ヘアスプレー、ヘアオ� �ル、ヘアトニック、養毛剤、パーマネント� �、マスカラ、アイライナー、アイブロウ等� �挙げられる。また、本発明において、「イ� �バスタイプの毛髪用化粧料」とは、毛髪に� �着させた後、洗い流すタイプの化粧料をい� �、例えば、シャンプー、リンス、リンス一� �型シャンプー、ヘアコンディショナー、ヘ� �トリートメント、ヘアパック、マスカラク� �ンジング、ヘアカラー前処理液、カラーリ� �グ液等が挙げられる。

 本実施形態に係る毛髪改質剤がアウトバス� ��イプの毛髪用化粧料に使用される場合、該� ��粧料に含まれるカチオン化ヒアルロン酸お� ��び/またはその塩のカチオン化度が0.15~0.4で� ��り、かつ、0.2%水溶液の動粘度が5~50mm ² /sであることが好ましい。上記カチオン化度� ��よび動粘度を有するカチオン化ヒアルロン� ��および/またはその塩をアウトバスタイプの 毛髪用化粧料に使用することにより、適度な 粘度を有し、かつ、毛髪への吸着力が優れて いるため、毛髪に潤いを付与し、感触を改善 し、かつ、洗い流さない状態において使用時 の毛髪のぱさつき感・ざらつき感を改善する ことができる。

 本実施形態に係る毛髪改質剤がインバスタ� ��プの毛髪用化粧料に使用される場合、該化� ��料に含まれるカチオン化ヒアルロン酸およ� ��/またはその塩のカチオン化度が0.4~0.6であ� �、かつ、0.2%水溶液の動粘度が1~20mm ² /sであることが好ましい。上記カチオン化度� ��よび動粘度を有するカチオン化ヒアルロン� ��および/またはその塩をインバスタイプの毛 髪用化粧料に使用することにより、毛髪への 吸着力が非常に優れているため、毛髪に潤い を付与し、感触を改善し、かつ、洗い流した 後において使用時の毛髪のぱさつき感・ざら つき感を改善することができる。

 カチオン化ヒアルロン酸および/またはそ の塩の水溶液の動粘度は、ウベローデ粘度計 (柴田科学器械工業株式会社製)を用いて測定� ��ることができる。この際、流下秒数が200~100 0秒になるような係数のウベローデ粘度計を� �択する。また、測定は30℃の恒温水槽中で行 ない、温度変化のないようにする。

 ウベローデ粘度計により測定された前記水� ��液の流下秒数と、ウベローデ粘度計の係数� ��の積により、動粘度(単位:mm ² /s)を求めることができる。

 3.皮膚改質剤
 本発明の一実施形態に係る皮膚改質剤は、� ��記カチオン化ヒアルロン酸および/またはそ の塩を含有する。本実施形態に係る皮膚改質 剤に含まれる上記カチオン化ヒアルロン酸お よび/またはその塩のカチオン化度は0.15~0.6で あることが好ましく、0.3~0.6であることがよ� �好ましい。カチオン化度が0.15未満では、皮� ��への吸着が不十分で、十分な保湿効果や滑� ��かさが得られない恐れがある。カチオン化� ��が0.6を超えるものは、皮膚に吸着するが満� ��な保湿効果や滑らかさが得られなくなる恐� ��がある。本実施形態に係る皮膚改質剤の態� ��としては、例えば、皮膚用化粧料が挙げら� ��る。上記カチオン化度を有するカチオン化� ��アルロン酸および/またはその塩を皮膚用化 粧料に使用することにより、適度な粘度を有 し、かつ、皮膚への吸着力が優れているため 、皮膚に潤いを付与し、感触を改善し、かつ 、皮膚のかさつき感を改善することができる 。本実施形態に係る皮膚用化粧料の態様とし ては、例えば、洗顔料、洗浄料、化粧水(例� �ば、美白化粧水)、クリーム(例えば、バニシ ングクリーム、コールドクリーム)、乳液、� �容液、パック(例えば、ゼリー状ピールオフ� ��イプ、ペースト状拭き取りタイプ、粉末状� ��い流しタイプ)、クレンジング、ファンデー ション、口紅、リップクリーム、リップグロ ス、リップライナー、頬紅、シェービングロ ーション、アフターサンローション、デオド ラントローション、ボディローション(ハン� �ケアローション、フットケアローションを� �む)、ボディオイル、石鹸、入浴剤が挙げら� ��る。

 4.化粧料
 本発明の一実施形態に係る化粧料は、上記� ��髪改質剤または皮膚改質剤を含有する。本� ��施形態に係る化粧料は、上記カチオン化ヒ� ��ルロン酸および/またはその塩を保湿剤とし て含有することができる。また、本実施形態 に係る化粧料は、上記カチオン化ヒアルロン 酸および/またはその塩を通常、0.001~5%含有す る。含有量が0.001%未満では、満足な保湿効果 や滑らかさが得られないため、使用時の毛髪 のぱさつき感・ざらつき感および皮膚のかさ つき感を改善することができない恐れがある 。含有量が5%を超えると、粘度が高くなりす� ��毛髪や皮膚全体に伸ばしにくくなる恐れが� ��る。

 本実施形態に係る化粧料の態様は特に限� ��されないが、例えば、毛髪用化粧料、皮膚� ��化粧料、爪用化粧料が挙げられる。

 毛髪用化粧料としては、上述したインバ� ��タイプの毛髪用化粧料およびアウトバスタ� ��プの毛髪用化粧料が挙げられる。

 皮膚用化粧料としては、上述した事例な� ��が挙げられる。

 爪用化粧料としては、例えば、ネイルト� ��ートメント、ネイルリムーバーが挙げられ� ��。

 本実施形態に係る化粧料によれば、上記� ��チオン化ヒアルロン酸および/またはその塩 を含有することにより、生体組織への吸着性 に優れているため、優れた保湿効果を発揮す ることができる。特に、上記カチオン化ヒア ルロン酸および/またはその塩を含有するこ� �により、表面がマイナスに帯電している生� �組織(例えば毛髪や皮膚)への吸着性に優れて いる。このため、特に毛髪の損傷部への親和 性が良好である。

 また、本実施形態に係る化粧料によれば� ��上記カチオン化ヒアルロン酸および/または その塩を含有することにより、適度な粘度に 調整されているため、使用時の毛髪のぱさつ き感・ざらつき感および皮膚のかさつき感を 改善することができる。

 したがって、本実施形態に係る化粧料に� ��れば、上記カチオン化ヒアルロン酸および/ またはその塩を含有することにより、毛髪や 皮膚に潤いを与えることができ、かつ、例え ば毛髪のぱさつき感・ざらつき感や皮膚のか さつき感などを改善することができる。

 本実施形態に係る化粧料にはさらに、以� ��の成分が配合されていてもよい。前記成分� ��しては、例えば、カチオン化多糖類(例えば 、カチオン化ヒドロキシエチルセルロース、 カチオン化グアーガム、カチオン化澱粉、カ チオン化ローカストビーンガム、カチオン化 デキストラン、カチオン化キトサン、カチオ ン化ハチミツ等)、アニオン界面活性剤(例え� ��、アルキルベンゼンスルホン酸塩、ポリオ� ��シアルキンアルキル硫酸エステル塩、アル� ��ル硫酸エステル塩、オレフィンスルホン酸� ��、脂肪酸塩、ジアルキルスルホコハク酸塩� ��)、非イオン界面活性剤(例えば、ポリオキ� �エチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチ� �ン硬化ヒマシ油誘導体等)、陽イオン界面活� ��剤(例えば、アルキルトリメチルアンモニウ ム塩、ジアルキルジメチルアンモニウム塩、 アルキルピリジニウム塩、塩化ステアリルト リメチルアンモニウム等)、両性界面活性剤(� ��えば、アルキルベタイン、アルキルアミド� ��ロピルベタイン、イミダゾリニウムベタイ� ��、卵黄レシチン、大豆レシチン等)、油分(� �えば、シリコーン、シリコーン誘導体、流� �パラフィン、スクワラン、ミツロウ、カル� �バロウ、オリーブ油、アボガド油、ツバキ� �、ホホバ油、馬油等)、保湿剤(例えば、ヒア ルロン酸ナトリウム、加水分解ヒアルロン酸 、アセチル化ヒアルロン酸、ヒアルロン酸ジ メチルシラノール、セラミド、フィトグリコ ーゲン、加水分解卵殻膜、トレハロース、グ リセリン、アテロコラーゲン、ソルビトール 、マルチトール、1,3-ブチレングリコール等)� ��高級脂肪酸(例えば、ラウリン酸、ベヘニン 酸、パルミチン酸、ステアリン酸、イソステ アリン酸、オレイン酸等)、高級アルコール(� ��えば、セチルアルコール、ステアリルアル� ��ール、ベヘニルアルコール、イソステアリ� ��アルコール、バチルアルコール等)、多価ア ルコール(例えば、グリセリン、ジグリセリ� �、プロピレングリコール、ポリエチレング� �コール、ペンチレングリコール等)、増粘剤( 例えば、セルロースエーテル、カルボキシビ ニルポリマー、キサンタンガム、パルミチン 酸デキストリン等)、両性高分子樹脂化合物(� ��えば、ベタイン化ジアルキルアミノアルキ� ��アクリレート共重合体等)、カチオン性高分 子樹脂化合物(例えば、ビニルピロリドン/ジ� ��チルアミノエチルメタクリレート共重合体� ��チオン化物、ポリジメチルジアリルアンモ� ��ウムハライド型カチオン性ポリマー等)、防 腐剤(例えば、メチルパラベン、エチルパラ� �ン、ブチルパラベン、プロピルパラベン、� �ェノキシエタノール等)、酸化防止剤(例えば 、トコフェノール、BHT等)、金属封鎖剤(例え� ��、エデト酸塩、エチドロン酸塩等)、紫外線 吸収剤(例えば、ベンゾフェノン誘導体、パ� �アミノ安息香酸誘導体、メトキシ桂皮酸誘� �体等)、紫外線反射剤(例えば、酸化チタン、 酸化亜鉛等)、タンパク質加水分解物(例えば� ��ケラチンペプチド、コラーゲンペプチド、� ��豆ペプチド、コムギペプチド、ミルクペプ� ��ド、シルクペプチド、卵白ペプチド等)、ア ミノ酸(例えば、アルギニン、グルタミン酸� �グリシン、アラニン、ヒドロキシプロリン� �システイン、セリン、L-テアニン等)、天然� �エキス(クジンエキス、カジルエキス、テン� ��カエキス、海草エキス、ユーカリエキス、� ��ーヤルゼリーエキス、ローズマリーエキス� ��ブナの木エキス等)、その他の機能性成分(� �エンザイムQ10、アルブチン、ポリクオタニ� �ム―51、エラスチン、白金ナノコロイド、パ ルミチン酸レチノール、パンテノール、アラ ントイン、ジラウロイルグルタミン酸リシン ナトリウム等)、リン脂質ポリマー、香料、� �素が挙げられる。

 5.カチオン化ヒアルロン酸および/またはそ� ��塩の製造方法
 本発明の一実施形態に係るカチオン化ヒア� ��ロン酸および/またはその塩の製造方法は、 原料ヒアルロン酸および/またはその塩を塩� �性含水媒体中でカチオン化剤と反応させる� �程を含む。これにより、カチオン化度が0.15~ 0.6であるカチオン化ヒアルロン酸および/ま� �はその塩を得ることができる。

 本実施形態に係るカチオン化ヒアルロン� ��および/またはその塩の製造方法によれば、 例えば、原料ヒアルロン酸および/またはそ� �塩を水に溶解させてカチオン化剤と反応さ� �る場合と比較して、製造工程の効率を高め� �ことができる。

 5.1.カチオン化剤と反応させる工程
 本実施形態に係るカチオン化ヒアルロン酸� ��よび/またはその塩の製造方法において、原 料ヒアルロン酸および/またはその塩を塩基� �含水媒体中でカチオン化剤と反応させる工� �では、原料ヒアルロン酸および/またはその� ��は、塩基性含水媒体中に分散させた状態で� ��チオン化剤と反応させることが好ましい。� ��なわち、上記工程では、原料ヒアルロン酸� ��よび/またはその塩の大部分が塩基性含水媒 体に溶解しないで存在した状態において、原 料ヒアルロン酸および/またはその塩をカチ� �ン化剤と反応させる。このように、原料ヒ� �ルロン酸および/またはその塩を塩基性含水� ��体中に分散させた状態でカチオン化剤と反� ��させることにより、製造工程の効率を高め� ��カチオン化剤の加水分解の進行を改善する� ��とができる。

 分散させる工程においては、例えば、粉� ��状の原料ヒアルロン酸および/またはその塩 を塩基性含水媒体に添加して攪拌させること により行なうことができる。ここで、粉末状 のヒアルロン酸および/またはその塩はほと� �ど溶解することなく、塩基性含水媒体中に� �散される。

 ここで、反応条件(時間、温度等)を調整� �ることにより、カチオン化の度合いを調整� �ることができる。

 また、反応時間は通常0.1~6時間であり、� �応時間が0.1時間未満であると、カチオン化� �十分に進行せず、一方、反応時間が6時間を� ��えると、反応温度によっては、得られるヒ� ��ルロン酸および/またはその塩が結着して固 まる場合がある。

 5.1.1.原料ヒアルロン酸および/またはその塩
 原料ヒアルロン酸および/またはその塩は一 般に、鶏冠、臍の緒、眼球、皮膚、軟骨等の 生物組織、あるいはストレプトコッカス属の 微生物等のヒアルロン酸生産微生物を培養し て得られる培養液等を原料として、これらの 原料から抽出(さらに必要に応じて精製)して� ��られるものである。

 原料ヒアルロン酸および/またはその塩の 平均分子量は通常、800~300万であり、100万~200� ��であるのが好ましい。前記平均分子量の原� ��ヒアルロン酸を用いることにより、好まし� ��は平均分子量800~250万、より好ましくは5万~1 50万のカチオン化ヒアルロン酸を得ることが� ��きる。

 原料ヒアルロン酸および/またはその塩と しては、当該粗抽出物および精製物のいずれ を用いてもよいが、精製物、具体的にはヒア ルロン酸および/またはその塩の純度が90%(質� ��比)以上のものが好ましい。純度が90%以上の 原料ヒアルロン酸および/またはその塩を原� �として用いた場合、保存中に色調や風味の� �化の原因となり難いため、安定な化粧料が� �られる。

 5.1.2.加熱温度
 原料ヒアルロン酸および/またはその塩とカ チオン化剤との反応は、加熱下で行なうこと ができる。より具体的には、粉末状の原料ヒ アルロン酸および/またはその塩を、塩基性� �水媒体中に攪拌しながら添加して得られた� �散媒を加熱することができる。あるいは、� �基性含水媒体を予め加熱し、これに原料ヒ� �ルロン酸および/またはその塩を添加し、温� ��を保持してもよい。

 ここで、塩基性含水媒体の加熱温度は70� �以下であるのが好ましい。塩基性含水媒体� �70℃以下に加熱することにより、1時間以内� �加熱により、目的のカチオン化度を有する� �チオン化ヒアルロン酸および/またはその塩� ��得ることができる。ここで、加熱温度が70� �を超えると、得られるカチオン化ヒアルロ� �酸および/またはその塩に結着や褐変が生じ� ��ことがある。また、塩基性含水媒体の加熱� ��度は30~70℃であるのがより好ましい。

 例えば、塩基性含水媒体の加熱温度を30~6 0℃にすることにより、1時間以内の加熱によ� ��、カチオン化度が0.15~0.4であるカチオン化� �アルロン酸および/またはその塩を得ること� ��できる。また、例えば、塩基性含水媒体の� ��熱温度を60~70℃にすることにより、1時間以� ��の加熱により、カチオン化度が0.4~0.6である カチオン化ヒアルロン酸および/またはその� �を得ることができる。

 5.1.3.カチオン化剤
 使用可能なカチオン化剤としては例えば、� ��記一般式(3)で表される2,3-エポキシプロピル トリアルキルアンモニウムハライド(グリシ� �ルトリアルキルアンモニウム塩)および上記� ��般式(4)で表される3-ハロゲノ-2-ヒドロキシ� �ロピルトリアルキルアンモニウムハライド� �の第四級アンモニウム基を含有するカチオ� �化剤が挙げられる。かかるカチオン化剤は� �独でも、あるいは二種以上を組み合わせて� �用してもよい。

 なお、カチオン化剤の具体例としては、2 ,3-エポキシプロピルトリアルキルアンモニウ ムハライドとして、例えば、グリシジルトリ メチルアンモニウムクロリド,グリシジルト� �エチルアンモニウムクロリド,グリシジルト� ��プロピルアンモニウムクロリド,グリシジル ジメチルオクチルアンモニウムクロリド,グ� �シジルジメチルデシルアンモニウムクロリ� �,グリシジルジメチルラウリルアンモニウム� ��ロリド,グリシジルジメチルステアリルアン モニウムクロリド等が挙げられる。

 また、3-ハロゲノ-2-ヒドロキシプロピル� �リアルキルアンモニウムハライドとしては� �例えば、3-クロロ-2-ヒドロキシプロピルトリ メチルアンモニウムクロリド,3-クロロ-2-ヒド ロキシプロピルトリエチルアンモニウムクロ リド,3-クロロ-2-ヒドロキシプロピルトリプロ ピルアンモニウムクロリド,3-クロロ-2-ヒドロ キシプロピルジメチルオクチルアンモニウム クロリド,3-クロロ-2-ヒドロキシプロピルジメ チルデシルアンモニウムクロリド,3-クロロ-2- ヒドロキシプロピルジメチルラウリルアンモ ニウムクロリド,3-クロロ-2-ヒドロキシプロピ ルジメチルステアリルアンモニウムクロリド 等が挙げられる。

 なかでも、カチオン化剤は、3-クロロ-2-� �ドロキシプロピルトリメチルアンモニウム� �ロリドおよびグリシジルトリメチルアンモ� �ウムクロリドもしくはいずれか一方である� �とが好ましい。

 カチオン化剤の使用量は、所望するカチ� ��ン化度により任意に選択することができる� ��、ヒアルロン酸1質量部に対し、カチオン化 剤0.5~4質量部であることが好ましく、1~3質量� ��であることがさらに好ましい。カチオン化� ��が0.5質量部未満では、カチオン化が十分に� ��行しない恐れがある。カチオン化剤が4質量 部を超えると、ヒアルロン酸が反応液中に溶 解してしまい、精製工程のハンドリングが悪 くなる恐れがある。

 本実施形態に係るカチオン化ヒアルロン� ��および/またはその塩の製造方法によれば、 原料ヒアルロン酸および/またはその塩を塩� �性含水媒体中で、第四級アンモニウム基含� �基を含有するカチオン化剤と反応させる工� �を含むことにより、ヒアルロン酸および/ま� ��はその塩に含まれるカルボキシル基の水素� ��子を優先して、第四級アンモニウム基含有� ��と置換させることにより、第四級アンモニ� ��ム基を優先してカルボニル基に結合させる� ��とができる。

 5.1.4.塩基性含水媒体
 本発明において、含水媒体は、水を含む、� ��アルロン酸および/またはその塩の分散媒体 のことをいう。含水媒体に使用できる媒体は 、ヒアルロン酸および/またはその塩の溶解� �が低いことが好ましい。含水媒体に使用で� �る媒体は特に限定されないが、例えば液体� �あって、水に溶解する性質を有し、かつ、� �粧料の製造工程において使用できるものが� �ましい。含水媒体に使用できる媒体として� �、例えば、アルコール系媒体(例えば、メタ� ��ール、エタノール、n-プロパノール、2-プロ パノールなど)、ケトン系媒体(例えば、アセ� ��ン、メチルエチルケトンなど)、テトラヒド ロフラン、アセトニトリル等を挙げることが でき、これらを単独でまたは組み合わせて使 用することができる。このうち、沸点の低さ および価格の点で、アルコール系媒体である ことが好ましく、炭素数1~3の低級アルコール であることがより好ましく、エタノールであ ることがさらに好ましい。

 含水媒体の全量に対する水の割合は10~40� �量%が好ましい。上記水の割合が40容量%を超� ��ると、ヒアルロン酸および/またはその塩が 分散状態を維持できず、含水媒体に溶解する ため、カチオン化が十分に進行しない恐れが あるうえに、液の粘度が上昇して攪拌が困難 になる場合があり、一方、含水量が10容量%未 満であると、カチオン化が進行しづらい場合 がある。

 塩基性含水媒体は、含水媒体に塩基を添� ��することにより得ることができる。塩基と� ��ては、特に限定されないが、化粧料の製造� ��おいて使用できるものが好ましい。塩基と� ��ては、例えば、水酸化ナトリウム、水酸化� ��リウムを例として挙げることができる。塩� ��の添加量は特に定めるものではないが、塩� ��の添加量が少ないと、ヒアルロン酸および/ またはその塩のカチオン化が進まず、製造効 率が低下することがある。一方、塩基の添加 量が多過ぎると、ヒアルロン酸および/また� �その塩のカチオン化および加水分解が促進� �れるため、目的のカチオン化度および分子� �に調整することが困難となることがある。

 5.2.固形物を溶解させる工程
 本実施形態に係るカチオン化ヒアルロン酸� ��よび/またはその塩の製造方法においては、 前記反応させる工程の後、ナトリウム塩およ びカリウム塩またはいずれか一方を前記反応 液に添加して、該反応液中の固形物を溶解さ せる工程をさらに含むことができる。ここで 、固形物は主に、カチオン化反応によって生 じた主生成物(カチオン化ヒアルロン酸およ� �/またはその塩)である。

 反応液中のナトリウム塩およびカリウム� ��またはいずれか一方の濃度は、5~20%である� �とが好ましい。ナトリウム塩およびカリウ� �塩またはいずれか一方の濃度が5%未満では、 次の沈殿物を得る工程で沈殿ができない恐れ がある。20%を超えると、次の沈殿物を得る工 程で、カチオン化ヒアルロン酸と一緒にナト リウム塩またはカリウム塩が沈殿してしまう 恐れがある。

 5.3.沈殿物を得る工程
 本実施形態に係るカチオン化ヒアルロン酸� ��よび/またはその塩の製造方法においては、 固形物を溶解させる工程の後、前記固形物を 溶解させた前記反応液にアルコールを添加し て、沈殿物を得る工程をさらに含むことがで きる。また、アルコールとしては例えば、メ タノール、エタノールが挙げられ、エタノー ルが好ましい。ここで、沈殿物は、カチオン 化反応によって生じた主生成物(カチオン化� �アルロン酸および/またはその塩)である。す なわち、固形物を溶解させる工程の後、前記 固形物を溶解させた前記反応液にアルコール を添加して、沈殿物(カチオン化ヒアルロン� �および/またはその塩)を得ることにより、残 存するカチオン化剤およびナトリウム塩また はカリウム塩と分離して、カチオン化ヒアル ロン酸および/またはその塩を得ることがで� �る。

 沈殿物を得た後、必要に応じて、カチオ� ��化ヒアルロン酸および/またはその塩が溶解 しにくい溶媒(例えば、含水アルコール)で沈� ��物を洗浄してもよい。その後、沈殿物を乾� ��することにより、精製されたカチオン化ヒ� ��ルロン酸および/またはその塩を得ることが できる。

 上述の固形物を溶解させる工程および沈� ��物を得る工程は複数回繰り返して行なって� ��よい。

 6.実施例
 次に、本発明を以下の実施例、比較例およ� ��試験例に基づき、さらに詳細に説明する。� ��お、本発明はこれらに限定されるものでは� ��い。なお、動粘度の測定は、上述した方法� ��より行なわれた。

 6.1.実施例1(本発明のカチオン化ヒアルロン� ��の調製)
 1L容ビーカーに、ヒアルロン酸ナトリウム(� ��ユーピー株式会社製、平均分子量200万)20g、 5%水酸化ナトリウム20mL、80%含水エタノール180 mL、およびグリシジルトリメチルアンモニウ� ��クロリド(GTA(有効成分約80%、水分約20%))30mL� �添加し、撹拌子を用いて撹拌しながら、40℃ で1時間反応させた。

 次に、デカンテーションにより液を除去� ��て、固形物(カチオン化ヒアルロン酸を含む )を得た。

 次いで、食塩水400mLを加え、固形物を溶� �させた。固形物が完全に溶解したことを確� �した後、エタノール600mLを添加して、カチオ ン化ヒアルロン酸を沈殿させた。デカンテー ションにより液を除去した後、80%含水エタノ ール500mLを添加して15分間撹拌し、さらに、� �水エタノールをデカンテーションにより除� �して沈殿物を得た。この操作を3回繰り返し� ��沈殿物に残存するカチオン化剤(GTA)および� �塩を除去した。

 次いで、遠心分離処理を行なうことによ� ��含水エタノールをさらに除去した後、真空� ��燥機を用いて、60℃にて減圧で5時間加熱乾� ��を行った。

 これにより、白色粉末のカチオン化ヒアル� ��ン酸20.5gを得た。このカチオン化ヒアルロ� �酸の窒素含有率を測定し、上述の計算式に� �って求めたカチオン化度は0.27であった。ま� ��、このカチオン化ヒアルロン酸の0.2%(W/W)水� ��液を調製し、30℃における動粘度を測定し� �ところ、13.3mm ² /sであった。

 なお、実施例1において、エタノールの添 加による沈殿処理を行わなかった場合、大量 のカチオン化剤がカチオン化ヒアルロン酸中 に残存した。

 6.2.実施例2(本発明のカチオン化ヒアルロン� ��の調製)
 1L容ビーカーに、ヒアルロン酸ナトリウム(� ��ユーピー株式会社製、平均分子量130万)20g、 5%水酸化ナトリウム20mL、65%含水エタノール180 mL、およびグリシジルトリメチルアンモニウ� ��クロリド(GTA(有効成分約80%、水分約20%))30mL� �添加し、撹拌子を用いて撹拌しながら、60℃ で1時間反応させた。

 次に、デカンテーションにより液を除去� ��て、固形物(カチオン化ヒアルロン酸を含む )を得た。

 次いで、食塩水400mLを加え、固形物を溶� �させた。固形物が完全に溶解したことを確� �した後、エタノール600mLを添加して、カチオ ン化ヒアルロン酸を沈殿させた。デカンテー ションにより液を除去した後、80%含水エタノ ール500mLを添加して15分間撹拌し、さらに、� �水エタノールをデカンテーションにより除� �して沈殿物を得た。この操作を3回繰り返し� ��沈殿物に残存するカチオン化剤(GTA)および� �塩を除去した。

 次いで、遠心分離処理を行なうことによ� ��含水エタノールをさらに除去した後、真空� ��燥機を用いて、60℃にて減圧で5時間加熱乾� ��を行った。

 これにより、白色粉末のカチオン化ヒアル� ��ン酸21.3gを得た。このカチオン化ヒアルロ� �酸の窒素含有率を測定し、上述の計算式に� �って求めたカチオン化度は0.48であった。ま� ��、このカチオン化ヒアルロン酸の0.2%(W/W)水� ��液を調製し、30℃における動粘度を測定し� �ところ、2.3mm ² /sであった。

 6.3.実施例3~20(カチオン化ヒアルロン酸の調� ��)
 カチオン化剤の量、反応時間、使用する水� ��化ナトリウムの量、含水媒体中の水の含有� ��、および反応温度を表1の通りとしたほかは 、実施例1と同様の方法にて、実施例3~20のカ� ��オン化ヒアルロン酸を調製した。各実施例3 ~20で得られたカチオン化ヒアルロン酸のカチ オン化度および動粘度を表1に示した。なお� �表1において、反応液中でカチオン化ヒアル� ��ン酸の結着が全く生じなかった場合を「S」 、反応液中でカチオン化ヒアルロン酸の結着 がほとんど生じなかった場合を「A」、反応� �中でカチオン化ヒアルロン酸の結着が少量� �じた場合を「B」、反応液中でカチオン化ヒ� ��ルロン酸の結着が相当量生じた場合を「C」 として示した。

 表1を参照すると、カチオン化剤の使用量 が80mlである場合(実施例7)、反応時間が9時間� ��超える場合(実施例12)、および反応温度が70� ��である場合(実施例20)、カチオン化は進行す るものの、反応液の状態が悪かった。

  一例として、実施例18のカチオン化ヒアル ロン酸の ¹³ CNMRスペクトル(観測周波数100.5MHz、内部標準� �質:DSS(0ppm)、溶媒:重水)を図7に示す。一方、� ��較対照として、カチオン化度0であるヒアル ロン酸(キユーピー株式会社製、平均分子量20 0万)の ¹³ CNMRスペクトルを図8に示す。

 図7および図8の ¹³ CNMRスペクトルにおいて、170~180ppmに存在する� ��ークは、(カチオン化)ヒアルロン酸の-C(=O)O- 基の炭素原子を示すピークであると考えられ る。

 図7に示すように、カチオン化ヒアルロン酸 の ¹³ CNMRスペクトルにおいて、図8のヒアルロン酸� ��はないピークが176ppm付近に確認された(図7� �おいて丸で囲まれたピーク)。このことから� ��実施例18のカチオン化ヒアルロン酸の(-C(=O)O -)の酸素原子には第四級アンモニウム基含有� ��が結合していることが確認された。

 6.4.比較例(カチオン化ヒアルロン酸の調製)
 6.4.1.比較例1
 1L容ビーカーに、ヒアルロン酸ナトリウム(� ��ユーピー株式会社製、平均分子量130万)20g、 5%水酸化ナトリウム15mL、80%含水エタノール190 mL、およびグリシジルトリメチルアンモニウ� ��クロリド(GTA(有効成分約80%、水分約20%))4mLを 添加し、撹拌子を用いて撹拌しながら、40℃� ��1時間反応させた。

 次に、デカンテーションにより液を除去� ��て、固形物(カチオン化ヒアルロン酸)を得� �。

 次いで、食塩水400mLを加え、固形物を溶� �させた。固形物が完全に溶解したことを確� �した後、エタノール600mLを添加して、カチオ ン化ヒアルロン酸を沈殿させた。デカンテー ションにより液を除去した後、80%含水エタノ ール500mLを添加して15分間撹拌した後、含水� �タノールをデカンテーションにより除去し� �沈殿物を得た。この操作を3回繰り返し、沈� ��物に残存するカチオン化剤(GTA)および食塩� �除去した。

 次いで、遠心分離処理を行なうことによ� ��含水エタノールをさらに除去した後、真空� ��燥機を用いて、60℃にて減圧で5時間加熱乾� ��を行った。

 これにより、白色粉末のカチオン化ヒアル� ��ン酸19.5gを得た。このカチオン化ヒアルロ� �酸の窒素含有率を測定し、上述の計算式に� �って求めたカチオン化度は0.03であった。ま� ��、このカチオン化ヒアルロン酸の0.2%(W/W)水� ��液を調製し、30℃における動粘度を測定し� �ところ、20.5mm ² /sであった。

 6.4.2.比較例2
 1L容ビーカーに、ヒアルロン酸ナトリウム(� ��ユーピー株式会社製、平均分子量130万)20g、 5%水酸化ナトリウム14mL、65%含水エタノール190 mL、およびグリシジルトリメチルアンモニウ� ��クロリド(GTA(有効成分約80%、水分約20%))4mLを 添加し、撹拌子を用いて撹拌しながら、60℃� ��1時間反応させた。

 次に、デカンテーションにより液を除去� ��て、固形物(カチオン化ヒアルロン酸)を得� �。

 次いで、食塩水400mLを加え、固形物を溶� �させた。固形物が完全に溶解したことを確� �した後、エタノール600mLを添加して、カチオ ン化ヒアルロン酸を沈殿させた。デカンテー ションにより液を除去した後、80%含水エタノ ール500mLを添加して15分間撹拌した後、含水� �タノールをデカンテーションにより除去し� �沈殿物を得た。この操作を3回繰り返し、沈� ��物に残存するカチオン化剤(GTA)および食塩� �除去した。

 次いで、遠心分離処理を行なうことによ� ��含水エタノールをさらに除去した後、真空� ��燥機を用いて、60℃にて減圧で5時間加熱乾� ��を行った。

 これにより、白色粉末のカチオン化ヒアル� ��ン酸19.7gを得た。このカチオン化ヒアルロ� �酸の窒素含有率を測定し、上述の計算式に� �って求めたカチオン化度は0.10であった。ま� ��、このカチオン化ヒアルロン酸の0.2%(W/W)水� ��液を調製し、30℃における動粘度を測定し� �ところ、17.5mm ² /sであった。

 6.4.3.比較例3
 1L容ビーカーに、ヒアルロン酸ナトリウム(� ��ユーピー株式会社製、平均分子量130万)20g、 5%水酸化ナトリウム20mL、85%含水エタノール180 mL、およびグリシジルトリメチルアンモニウ� ��クロリド(GTA(有効成分約80%、水分約20%))40mL� �添加し、撹拌子を用いて撹拌しながら、70℃ で1時間反応させた。次に、デカンテーショ� �により液を除去して、固形物(カチオン化ヒ� ��ルロン酸)を得た。

 次いで、食塩水400mLを加え、固形物を溶� �させた。固形物が完全に溶解したことを確� �した後、エタノール600mLを添加して、カチオ ン化ヒアルロン酸を沈殿させた。デカンテー ションにより液を除去した後、80%含水エタノ ール500mLを添加して15分間撹拌した後、含水� �タノールをデカンテーションにより除去し� �沈殿物を得た。この操作を3回繰り返し、沈� ��物に残存するカチオン化剤(GTA)および食塩� �除去した。

 次いで、遠心分離処理を行なうことによ� ��含水エタノールをさらに除去した後、真空� ��燥機を用いて、60℃にて減圧で5時間加熱乾� ��を行った。

 これにより、白色粉末のカチオン化ヒアル� ��ン酸17.7gを得た。このカチオン化ヒアルロ� �酸の窒素含有率を測定し、上述の計算式に� �って求めたカチオン化度は0.82であった。ま� ��、このカチオン化ヒアルロン酸の0.2%(W/W)水� ��液を調製し、30℃における動粘度を測定し� �ところ、1.3mm ² /sであった。

 6.4.4.比較例4
 実施例1において、ヒアルロン酸を含水エタ ノールではなく、水に分散、溶解し、カチオ ン化を実施したところ、ゲル化を生じ、乾燥 することができず、カチオン化ヒアルロン酸 粉末を得ることができなかった。

 6.5.試験例1(毛髪吸着量の測定)
 本試験例においては、上記実施例1~24および 比較例1~3に記載した方法と同様の方法にて調 製された、所定のカチオン化度を有するヒア ルロン酸について、毛髪吸着量を測定した。

 6.5.1.試料
 毛髪吸着量を測定するにあたり、同一人物� ��人毛黒髪(株式会社ビューラックスから入手 )を使用した。

 本試験例においては、カチオン化度がそ� ��ぞれ0.03(比較例1)、0.10(比較例2)、0.21(実施例 16)、0.33(実施例18)、0.41(実施例11)、0.56(実施例 4)、0.82(比較例3)のカチオン化ヒアルロン酸を 使用した。比較対照として、カチオン化され ていないヒアルロン酸ナトリウム(キユーピ� �株式会社製、平均分子量:約150万)を用いた。

 6.5.2.試験方法
 6.5.2-1.ダメージ毛の作成
 以下の手順にてダメージ毛を作成した。

 人毛黒髪(株式会社ビューラックスから入 手)をPOE(2)ラウリル硫酸トリエタノールアミ� �1%水溶液に1分間浸漬した。

 次に、この人毛黒髪を水で洗浄し、タオ� ��ドライ後、ウエスパーで水分を除去し、ド� ��イヤーで乾燥させた(洗浄処理)。

 次に、得られた人毛黒髪について、以下� ��手順にてブリーチ処理を行った。まず、5%� �酸化水素水と2.5%アンモニア水とを1:1で混合� ��てブリーチ液を調製し、このブリーチ液に� ��毛黒髪を30℃で20分間浸漬させた(ブリーチ� �理)。

 次いで、上記洗浄処理およびブリーチ処� ��を10回繰り返した。以上の手順により、ダ� �ージ毛を作成した。

 6.5.2-2.ダメージ毛への吸着処理
 各試料を用いて濃度0.005%の試料水溶液を調� ��した(各試料につき2検体を作成した)。次に� ��この試料水溶液約1mLを抜き取り、0.45μmメン ブレンフィルターでろ過して、処理前のHPLC� �定用サンプルとした。

 次いで、ホールピペットにて10mLの試料水 溶液を蓋付き試験管に取り、上記手順で作成 されたダメージ毛1gを精秤し、このダメージ� ��1gを恒温水槽に入れた試験管中の試料水溶� �に10分間浸漬させた。

 続いて、毛髪を入れたままの試験管から� ��試料水溶液約1mLを抜き取り、0.45μmメンブレ ンフィルターでろ過し、処理後のHPLC測定用� �ンプルとした。

 6.5.2-3.HPLC測定
 (i)HPLCの測定原理
 毛髪はマイナスに帯電しているのに対して� ��カチオン化ヒアルロン酸はプラスに帯電し� ��いる。このため、カチオン化ヒアルロン酸� ��毛髪に電気的に引き寄せられ吸着するため� ��試料水溶液中のカチオン化ヒアルロン酸の� ��度が低下する。この濃度低下量をHPLCにて測 定し、以下の式により、毛髪への吸着量を算 出することができる。

 (ii)HPLC分析条件
 カラム        :TSKガードカラムPWXL + TS KゲルGMPW×2
 カラム温度      :40℃
 測定波長       :210nm
 流速         :0.8mL/分
 試料注入量      :100μL
 分析時間       :40分
 移動相        :0.003mol/L リン酸緩衝液-0 .15mol/L NaCl(pH7.0)
 フォトダイオードアレイ:日本ウォーターズ 社製、996フォトダイオードアレイ
 HPLCシステム   :日本ウォーターズ社製、26 90セパレーションモジュール

 6.5.2-4.毛髪吸着量の測定方法
 (i)検量線の作成
 濃度既知の試料水溶液から、ピーク面積と� ��料濃度との相関を示す検量線を求め、試料� ��に検量線を作成した。

 (ii)試料水溶液中の試料濃度の算出
 (i)で求めた検量線から試料水溶液中の試料� ��度を算出し、処理前後における試料水溶液� ��の試料量を求めた。なお、試料水溶液中の� ��料量は、毛髪を浸漬させた試験管中10mL中の 試料量を算出し、毛髪1gに対する吸着量を算� ��した。

 6.5.3.試験結果
 6.5.3-1.毛髪吸着量
 HPLCの測定結果を図1に示した。図1によれば� ��カチオン化ヒアルロン酸(HA)のカチオン化度 に比例して、毛髪への吸着量が増える傾向が 確認された。また、カチオン化ヒアルロン酸 のカチオン化度が0.15未満である場合、吸着� �が比較的少ないことが明らかになった。そ� �理由として、カチオン化ヒアルロン酸のカ� �オン化度が0.15未満である場合、毛髪に引き� ��せられる力が弱いため、カチオン化ヒアル� ��ン酸が毛髪に十分に吸着しないためである� ��推察される。

 6.6.試験例2(毛髪での官能評価)
 6.6.1.ダメージ毛の作成
 以下の手順にてダメージ毛を作成した。

 人毛黒髪(株式会社ビューラックスから入 手)をPOE(2)ラウリル硫酸トリエタノールアミ� �1%水溶液に1分間浸漬した。

 次に、この人毛黒髪を水で洗浄し、タオ� ��ドライ後、ウエスパーで水分を除去し、ド� ��イヤーで乾燥させた(洗浄処理)。

 次に、得られた人毛黒髪について、以下� ��手順にてブリーチ処理を行った。まず、5%� �酸化水素水と2.5%アンモニア水とを1:1で混合� ��てブリーチ液を調製し、このブリーチ液に� ��毛黒髪を30℃で20分間浸漬させた(ブリーチ� �理)。

 次いで、上記洗浄処理およびブリーチ処� ��を10回繰り返した。以上の手順により、ダ� �ージ毛を作成した。

 6.6.2.評価方法(アウトバスタイプの毛髪用化 粧料)
 本試験例においては、カチオン化度がそれ� ��れ0.03(比較例1)、0.10(比較例2)、0.21(実施例16) 、0.33(実施例18)、0.41(実施例11)、0.56(実施例4)� ��0.82(比較例3)のカチオン化ヒアルロン酸を使 用した。比較対照として、カチオン化度が0� �あるヒアルロン酸ナトリウム(キユーピー株� ��会社製、平均分子量:約150万)を評価試料と� �て用いた。

 (i)まず、カチオン化ヒアルロン酸および� ��チオン化されていないヒアルロン酸を用い� ��、1%試料水溶液(0.15g/15mL、中試験管)を調製� �た。

 (ii)次いで、各1%試料水溶液に、上記6.6.1.� ��作成したダメージ毛の毛束を浸漬させた。� ��の1%試料水溶液を25℃で5分間放置後、試料� �から毛束を取り出しドライヤーで乾燥させ� �。

 (iii)5名の成人男女によって、処理後の各� ��束の手触りを評価した。評価は、同一サン� ��ルについて2回繰り返してブラインドで行な い、計10回(No.1~10)の独立した評価試験とした� ��

 親指と人指し指とで毛束を軽く挟み、根� ��から毛先まで指を動かした時の感触が、対� ��(蒸留水処理)と比較して良いかどうかを評� �した。感触としては、保湿感・滑らかさ・� �さつき感・ざらつき感の点で総合的に評価� �た。また、本試験例で用いたダメージ毛は� �毛先に近い部分ほどぱさついた(ざらついた) 手触りがあったため、その部分にも注意して 評価した。点数の付け方を表2に示す。

 6.6.3.評価方法(インバスタイプの毛髪用化粧 料)
 本試験例においては、評価試料(カチオン化 ヒアルロン酸またはヒアルロン酸ナトリウム )として6.6.2.で使用したものと同様のものを� �いた。

 (i)まず、カチオン化ヒアルロン酸および� ��チオン化されていないヒアルロン酸を用い� ��、1%試料水溶液(0.15g/15mL、中試験管)を調製� �た。

 (ii)次いで、各1%試料水溶液に、上記6.6.1.� ��作成したダメージ毛の毛束を浸漬させた後� ��この1%試料水溶液を40℃(恒温水槽)で5分間放 置した。次いで、1%試料水溶液から毛束を取� ��出し、流水で洗い流し、タオルドライした� ��、ドライヤーで乾燥させた。この工程(ii)を 3回繰り返した。

 (iii)評価は、6.6.2.の(iii)と同様に行った。 点数の付け方を表3に示す。

 6.6.4.評価結果
 評価結果を表4および表5に示す。なお、評� �基準は以下の通りとした。

  S:平均2点以上
  A:平均1点以上2点未満
  B:平均0点以上1点未満
  C:平均0点未満

 表4において、「S」の評価となった4つの� ��料(カチオン化度がそれぞれ0.21(実施例16)、0 .33(実施例18)、0.41(実施例11)、0.56(実施例4)の� �チオン化ヒアルロン酸)に関しては、対照に� ��べて保湿感があり手触りが滑らかであった� ��けでなく、髪のまとまりが確認できた。特� ��、0.21(実施例16)、0.33(実施例18)、0.41(実施例1 1)の試料では、9割以上の評価者が非常に高い 保湿感や滑らかさを感じた。これに対して、 対照であるカチオン化度が0、0.03(比較例1)、0 .10(比較例2)の試料では、保湿感が得られず毛 髪がぱさつき、広がってしまっていた。0.82(� ��較例3)の試料では、満足な保湿感や滑らか� �が得られずにざらつきがみられた。したが� �て、カチオン化度が0.15~0.4である本発明のカ チオン化ヒアルロン酸は、アウトバスタイプ の毛髪用化粧料での使用により好適であるこ とが理解できる。

 表5において、「S」の評価となった4つの� ��料(カチオン化度がそれぞれ00.21(実施例16)、 0.33(実施例18)、0.41(実施例11)、0.56(実施例4)の� ��チオン化ヒアルロン酸)に関しては、対照に 比べて保湿感があり手触りが滑らかであった だけでなく、髪のまとまりが確認できた。特 に、0.41(実施例11)、0.56(実施例4)の試料では、 9割以上の評価者が非常に高い保湿感や滑ら� �さを感じた。これに対して、対照であるカ� �オン化度が0、0.03(比較例1)、0.10(比較例2)の� �料では、保湿感が得られず毛髪がぱさつき� �広がってしまっていた。0.82(比較例3)の試料� ��は、満足な保湿感や滑らかさが得られずに� ��らつきがみられた。したがって、カチオン� ��度が0.4~0.6である本発明のカチオン化ヒアル ロン酸は、インバスタイプの毛髪用化粧料で の使用により好適であることが理解できる。

 以上の結果から、カチオン化度が0.15~0.6� �ある本発明のカチオン化ヒアルロン酸を使� �することにより、ぱさついた(ざらついた)ダ メージヘアに潤いを与えて滑らかな手触りに できることが確認された。

 6.7.試験例3(毛髪の走査型電子顕微鏡写真撮� ��)
 本試験例においては、カチオン化度が0.33(� �施例18)のカチオン化ヒアルロン酸を評価試� �として使用し、比較対照として蒸留水を使� �して、6.6.3.の(i)および(ii)と同様の方法にて� ��ダメージ毛に対する処理を行なった。

 カチオン化度が0.33(実施例18)のカチオン� �ヒアルロン酸を用いて処理された毛髪の走� �型電子顕微鏡写真を図2(倍率200倍)および図4( 倍率750倍)に示す。また、蒸留水を用いて処� �された毛髪の走査型電子顕微鏡写真を図3(倍 率200倍)および図5(倍率750倍)に示す。

 図2および図4の写真では、毛髪のキュー� �ィクルの剥離が少なく、毛髪表面が比較的� �らかになっているのが確認できる。一方、� �3および図5の写真では、毛髪のキューティク ルが不規則に剥離して、毛髪表面に凹凸が生 じているのが確認できる。

 ダメージ毛を指先で触ると通常、ざらつ� ��を感じる。これに対して、ダメージ毛に対� ��てカチオン化ヒアルロン酸を用いた処理に� ��り得られた毛髪は、滑らかな感触を有する� ��図2~図5の写真の比較から、毛髪の感触の差� ��、キューティクル状態の差が影響している� ��とが推察される。すなわち、ダメージ毛は� ��ューティクルの剥離が生じているため、ざ� ��ついた手触りを有するのに対して、カチオ� ��化ヒアルロン酸を用いた処理により得られ� ��毛髪は、キューティクルの剥離が修復され� ��いるため、滑らかな手触りを有すると考え� ��れる。

 カチオン化ヒアルロン酸によって、滑ら� ��な手触りの毛髪を生じるメカニズムは以下� ��(i)および(ii)のように推察される。

 (i)まず、カチオン化ヒアルロン酸が、毛� ��の剥離したキューティクル間に入り込む。� ��こで、カチオン化ヒアルロン酸はカチオン� ��されていないヒアルロン酸と比較して、よ� ��正に帯電しているため、カチオン化されて� ��ないヒアルロン酸と比較して、通常負に帯� ��している毛髪表面のキューティクル間によ� ��速やかに入り込むことができる。

 (ii)次に、カチオン化ヒアルロン酸同士の 水素結合により、剥離したキューティクルが 下層のキューティクルに引き寄せられ、キュ ーティクル同士が接着することにより、キュ ーティクル層が整えられる結果、毛髪が滑ら かな手触りとなる。

 6.8.試験例4(皮膚吸着量の測定および官能評� ��)
 本試験例においては、上記実施例1~24に記載 した方法と同様の方法にて調製された、所定 のカチオン化度を有するヒアルロン酸につい て、皮膚吸着量を測定した。

 6.8.1.試料
 本試験例においては、カチオン化度がそれ� ��れ0.03(比較例1)、0.21(実施例16)、0.33(実施例18 )、0.56(実施例4)、0.82(比較例3)のカチオン化ヒ アルロン酸を使用した。比較対照として、カ チオン化されていないヒアルロン酸ナトリウ ム(キユーピー株式会社製、平均分子量:約60� �)を用いた。

 6.8.2.試験方法
 6.8.2-1.試料水溶液の調製
 ヒアルロン酸1%を含有した試料水溶液を調� �した。

 6.8.2-2.ヒアルロン酸の皮膚への塗布
 前腕部の7cm×7cmの範囲内に試料水溶液0.5mLを 載せ、均一に塗布されるように指で広げ、3� �間静置後、塗布部分を流速3L/分の流水で10秒 間洗い流し、塗布部分を自然乾燥した。

 6.8.2-3.官能評価
 乾燥肌などの肌荒れに悩んでいる5名の成人 男女(21~50歳)によって、皮膚への塗布後の保� �感と手触りの滑らかさを評価した。評価は� �同一サンプルについて2回繰り返してブライ� ��ドで行ない、計10回(No.1~10)の独立した評価� �験とした。

 指で触れた時の感触が、対照(蒸留水処理 )と比較して良いかどうかを評価した。感触� �しては、保湿感・滑らかさ・かさつき感の� �で総合的に評価した。点数の付け方を表6に� ��す。

 6.8.2-4.ヒアルロン酸の皮膚からの回収
 塗布部分に粘着テープを密着させゆっくり� ��剥がし、ヒアルロン酸を粘着テープに吸着� ��せる。次に、粘着テープを50mLの遠沈管に入 れ、クロロホルム/メタノール(1:1)混液20mLを� �いて、粘着テープからヒアルロン酸を分離� �た。さらに、等量の蒸留水を加えて攪拌後� �遠心分離を行い、水相部を回収した。得ら� �た水相部を減圧蒸留した後、蒸留水1mLを加� �溶解し、0.45μmメンブレンフィルターでろ過� ��たものを、HPLC測定用サンプルとした。

 6.8.2-5.HPLC分析条件
 (i)HPLCの測定原理
 カラム        :TSKガードカラムPWXL + TS KゲルGMPW×2
 カラム温度      :40℃
 測定波長       :210nm
 流速         :0.8mL/分
 試料注入量      :100μL
 分析時間       :40分
 移動相        :0.003mol/L リン酸緩衝液-0 .15mol/L NaCl(pH7.0)
 フォトダイオードアレイ:日本ウォーターズ 社製、996フォトダイオードアレイ
 HPLCシステム   :日本ウォーターズ社製、26 90セパレーションモジュール

 6.8.2-6.皮膚吸着量の算出方法
 (i)検量線の作成
 濃度既知の試料水溶液から、ピーク面積とH PLC測定用サンプル中のヒアルロン酸量との相 関を示す検量線を求め、試料毎に検量線を作 成した。

 (ii)試料水溶液中の試料濃度の算出
 (i)で求めた検量線からHPLC測定用サンプル中 のヒアルロン酸量を求めた。

 6.8.3.試験結果
 6.8.3-1.官能評価
  評価結果を表7に示す。なお、表7において 、評価基準は以下の通りとした。

  S:平均2点以上
  A:平均1点以上2点未満
  B:平均0点以上1点未満
  C:平均0点未満

 表7において、「S」の評価となった3つの� ��料(カチオン化度がそれぞれ0.21(実施例16)、0 .33(実施例18)、0.56(実施例4)のカチオン化ヒア� ��ロン酸)に関しては、対照に比べて手触りが 滑らかで、皮膚への高い保湿効果が確認され た。特に、0.33(実施例18)、0.56(実施例4)の試料 では、8割以上の評価者が非常に高い保湿感� �滑らかさを感じた。これに対して、対照で� �るカチオン化度0や0.03(比較例1)の試料では、 皮膚への吸着感がなく、保湿感や滑らかさに 欠けた。0.82(比較例3)の試料では、皮膚への� �着感はあるが、満足な保湿感や滑らかさが� �られずにかさついた。

 以上の結果から、カチオン化度が0.15~0.6� �ある本発明のカチオン化ヒアルロン酸を使� �することにより、皮膚に保湿感を与えて滑� �かな手触りにできることが確認された。

 6.8.3-2.皮膚吸着量
 HPLCの測定結果を図6に示した。図6によれば� ��カチオン化ヒアルロン酸(HA)のカチオン化度 に比例して、皮膚への吸着量が増える傾向が 確認された。また、カチオン化ヒアルロン酸 のカチオン化度が0.15未満である場合、吸着� �が比較的少ないことが明らかになった。そ� �理由として、カチオン化ヒアルロン酸のカ� �オン化度が0.15未満である場合、皮膚に引き� ��せられる力が弱いため、カチオン化ヒアル� ��ン酸が皮膚に十分に吸着しないためである� ��推察される。

 6.9.試験例6(化粧料の調製)
 本試験例では、化粧料として、以下に記す� ��方にて、実施例1で得られたカチオン化ヒア ルロン酸を配合したインバスタイプの毛髪用 化粧料(シャンプー)を調製した。

  カチオン化ヒアルロン酸(実施例1)     � �      0.1%
  ポリオキシエチレン(2)ラウリルエーテル� �酸ナトリウム 11.0%
  ヤシ油脂肪酸アミドプロピルベタイン  � �         4.0%
  ヤシ油脂肪酸モノエタノールアミド              2.0%
  エデト酸ナトリウム              � �     0.1%
  安息香酸ナトリウム              � �     0.2%
  香料、色素、防腐剤              � �       適量
  精製水                       � �    残量
 本試験例によれば、実施例1で得られたカチ オン化ヒアルロン酸を配合することにより、 毛髪への吸着性に優れたシャンプーを得るこ とができた。

 6.10.試験例7(化粧料の調製)
 本試験例では、化粧料として、以下に記す� ��方にて、実施例2で得られたカチオン化ヒア ルロン酸を配合したインバスタイプの毛髪用 化粧料(リンス)を調製した。

  カチオン化ヒアルロン酸(実施例2)     � �   0.3%
  セトステアリルアルコール               2.0%
  POE(5)セチルエーテル             1.0 %
  グリセリン                    � �3.0%
  1,3-ブチレングリコール            � �5.0%
  シリコーン油                     3.0%
  小麦加水分解物                 � � 1.0%
  ヒドロキシステアリン酸           � �   0.5%
  2-エチルヘキサン酸セチル          � �  1.0%
  塩化ジステアリルジメチルアンモニウム         0.2%
  ベヘン酸ジメチルアミノプロピルアミド         0.5%
  香料、色素、防腐剤              � �    適量
  精製水                       � � 残量
 本試験例によれば、実施例2で得られたカチ オン化ヒアルロン酸を配合することにより、 毛髪への吸着性に優れたリンスを得ることが できた。

 6.11.試験例8(化粧料の調製)
 本試験例では、化粧料として、以下に記す� ��方にて、実施例1で得られたカチオン化ヒア ルロン酸を配合したインバスタイプの毛髪用 化粧料(リンス一体型シャンプー)を調製した� ��

  カチオン化ヒアルロン酸(実施例1)     � �    0.2%
  イミダゾリウムベタイン型両性界面活性� �       16.0%
  ヤシ油脂肪酸ジエタノールアミド     � �      4.0%
  塩化ステアリルトリメチルアンモニウム          2.0%
  N-ラウロイル-N-メチル-β-アラニンナトリ� �ム  1.0%
  シリコーン誘導体                    1.0%
  ポリオキシエチレンアルキルポリアミン          1.0%
  香料、色素、pH調整剤             � �    適量
  精製水                       � �  残量
 本試験例によれば、実施例1で得られたカチ オン化ヒアルロン酸を配合することにより、 毛髪への吸着性に優れたリンス一体型シャン プーを得ることができた。

 6.12.試験例9(化粧料の調製)
 本試験例では、化粧料として、以下に記す� ��方にて、実施例2で得られたカチオン化ヒア ルロン酸を配合したインバスタイプの毛髪用 化粧料(ヘアコンディショナー)を調製した。

  カチオン化ヒアルロン酸(実施例2)     � �   0.5%
  ステアリルアルコール                 4.0%
  セタノール                    � �1.5%
  ヒドロキシエチルウレア           � �   1.0%
  ジメチコン                    � �2.0%
  加水分解シルク                 � � 1.0%
  1,3-ブチレングリコール            � �1.0%
  グリセリン                    � �3.0%
  2-エチルヘキサン酸セチル          � �  2.0%
  ミリスチン酸イソセチル           � �   0.4%
  L-アルギニン                   0 .1%
  ポリオキシエチレン(4)ステアリルエーテ� �     1.0%
  ステアリン酸ジメチルアミノプロピルア� �ド      1.5%
  安息香酸ナトリウム              � �  0.3%
  香料、防腐剤                       適量
  精製水                       � � 残量
 本試験例によれば、実施例2で得られたカチ オン化ヒアルロン酸を配合することにより、 毛髪への吸着性に優れたヘアコンディショナ ーを得ることができた。

 6.13.試験例10(化粧料の調製)
 本試験例では、化粧料として、以下に記す� ��方にて、実施例2で得られたカチオン化ヒア ルロン酸を配合したインバスタイプの毛髪用 化粧料(ヘアパック)を調製した。

  カチオン化ヒアルロン酸(実施例2)     � �1.0%
  セチルアルコール               2. 0%
  ステアリルアルコール              2.0%
  ステアリン酸硬化ヒマシ油            2.0%
  ミリスチン酸イソプロピル            1.0%
  臭化ステアリルトリメチルアンモニウム      3.0%
  塩化ジステアリルジメチルアンモニウム      2.0%
  1,3-ブチレングリコール         10.0%
  香料、防腐剤                    適量
  精製水                      残 量
 本試験例によれば、実施例2で得られたカチ オン化ヒアルロン酸を配合することにより、 毛髪への吸着性に優れたヘアパックを得るこ とができた。

 6.14.試験例11(化粧料の調製)
 本試験例では、化粧料として、以下に記す� ��方にて、実施例1で得られたカチオン化ヒア ルロン酸を配合したアウトバスタイプの毛髪 用化粧料(原液タイプヘアトリートメント)を� ��製した。

  カチオン化ヒアルロン酸(実施例1)     � �2.0%
  防腐剤                      適 量
  精製水                      残 量
 本試験例によれば、実施例1で得られたカチ オン化ヒアルロン酸を配合することにより、 毛髪への吸着性に優れた原液タイプヘアトリ ートメントを得ることができた。

 6.15.試験例12(化粧料の調製)
 本試験例では、化粧料として、以下に記す� ��方にて、実施例1で得られたカチオン化ヒア ルロン酸を配合したアウトバスタイプの毛髪 用化粧料(ヘアクリーム)を調製した。

  カチオン化ヒアルロン酸(実施例1)  0.5%
  ステアリン酸             2.0%
  ミツロウ               2.0%
  ワセリン               7.0%
  流動パラフィン           40.0%
  シリコンオイル            0.2%
  モノステアリン酸ソルビタン      1.0%
  ポリオキシエチレンセチレンエーテル  1 .5%
  トリエタノールアミン         1.0%
  1,3-ブチレングリコール      3.0%
  ポリグリコールアミン縮合物      2.0%
  防腐剤                  適量
  精製水                  残量
 本試験例によれば、実施例1で得られたカチ オン化ヒアルロン酸を配合することにより、 毛髪への吸着性に優れたヘアクリームを得る ことができた。

 6.16.試験例13(化粧料の調製)
 本試験例では、化粧料として、以下に記す� ��方にて、実施例1で得られたカチオン化ヒア ルロン酸を配合したアウトバスタイプの毛髪 用化粧料(ヘアワックス)を調製した。

  カチオン化ヒアルロン酸(実施例1)     � �0.5%
  イソステアリン酸PEG-20グリセリル    3.0 %
  ステアリン酸グリセリル           � �2.0%
  マイクロクリスタリンワックス          4.0%
  カルナウバロウ                3.0 %
  ベヘニルアルコール              3 .0%
  ステアリン酸                 1.0%
  ミネラルオイル                2.0 %
  水添ポリイソブテン              2 .0%
  フェニルトリメチコン              3.0%
  ジメチコン                  1.0%
  プロピルパラベン               0. 1%
  PVP                    1.0%
  プロピレングリコール              5.0%
  防腐剤                      適 量
  精製水                      残 量
 本試験例によれば、実施例1で得られたカチ オン化ヒアルロン酸を配合することにより、 毛髪への吸着性に優れたヘアワックスを得る ことができた。

 6.17.試験例14(化粧料の調製)
 本試験例では、化粧料として、以下に記す� ��方にて、実施例2で得られたカチオン化ヒア ルロン酸を配合したアウトバスタイプの毛髪 用化粧料(ヘアジェル)を調製した。

  カチオン化ヒアルロン酸(実施例2)     � �1.0%
  ポリビニルピロリドン              2.0%
  グリセリン                  5.0%
  エタノール                 20.0%
  ポリオキシエチレンオクチルドデシルエ� �テル  1.0%
  水酸化ナトリウム                  適量
  香料、キレート剤                  適量
  精製水                      残 量
 本試験例によれば、実施例2で得られたカチ オン化ヒアルロン酸を配合することにより、 毛髪への吸着性に優れたヘアジェルを得るこ とができた。

 6.18.試験例15(化粧料の調製)
 本試験例では、化粧料として、以下に記す� ��方にて、実施例2で得られたカチオン化ヒア ルロン酸を配合したアウトバスタイプの毛髪 用化粧料(ヘアフォーム(ヘアムース))を調製� �た。

  カチオン化ヒアルロン酸(実施例2)     � �3.0%
  ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油     � �    適量
  シリコーン油                 5.0%
  ジプロピレングリコール           � �7.0%
  エチルアルコール              15.0 %
  香料、防腐剤                    適量
  精製水                      残 量
 本試験例によれば、実施例2で得られたカチ オン化ヒアルロン酸を配合することにより、 毛髪への吸着性に優れたヘアフォームを得る ことができた。

 6.19.試験例16(化粧料の調製)
 本試験例では、化粧料として、以下に記す� ��方にて、実施例1で得られたカチオン化ヒア ルロン酸を配合したアウトバスタイプの毛髪 用化粧料(ヘアローション)を調製した。

  カチオン化ヒアルロン酸(実施例1)     � �1.0%
  ポリビニルピロリドン              4.0%
  エチルアルコール              30.0 %
  シリコーン誘導体               0. 5%
  グリセリン                  2.0%
  香料、防腐剤                    適量
  精製水                      残 量
 本試験例によれば、実施例1で得られたカチ オン化ヒアルロン酸を配合することにより、 毛髪への吸着性に優れたヘアローションを得 ることができた。

 6.20.試験例17(化粧料の調製)
 本試験例では、化粧料として、以下に記す� ��方にて、実施例1で得られたカチオン化ヒア ルロン酸を配合したアウトバスタイプの毛髪 用化粧料(ヘアカラー前処理液)を調製した。

  カチオン化ヒアルロン酸(実施例1)     � �0.5%
  イミダゾリニウムベタイン            1.0%
  ケラチン加水分解物              0 .5%
  グリシン                   0.5%
  POEラウリルエーテル            0.5%
  精製水                      残 量
 本試験例によれば、実施例1で得られたカチ オン化ヒアルロン酸を配合することにより、 毛髪への吸着性に優れたヘアカラー前処理液 を得ることができた。

 6.21.試験例18(化粧料の調製)
 本試験例では、化粧料として、以下に記す� ��方にて、実施例1で得られたカチオン化ヒア ルロン酸を配合したアウトバスタイプの毛髪 用化粧料(カラーリング剤)を調製した。

  カチオン化ヒアルロン酸(実施例1)     � �0.5%
  ベンジルアルコール              8 .0%
  クエン酸                   1.0%
  エタノール                 15.0%
  黒色401号                0.05%
  褐色201号                0.13%
  水酸化ナトリウム                  適量
  精製水                      残 量
 本試験例によれば、実施例1で得られたカチ オン化ヒアルロン酸を配合することにより、 毛髪への吸着性に優れたカラーリング剤を得 ることができた。

 6.22.試験例19(化粧料の調製)
 本試験例では、化粧料として、以下に記す� ��方にて、実施例1で得られたカチオン化ヒア ルロン酸を配合したアウトバスタイプの毛髪 用化粧料(パーマ液第2液)を調製した。

  カチオン化ヒアルロン酸(実施例1)     � �0.5%
  臭素酸ナトリウム               5. 0%
  シリコーンエマルション           � �1.0%
  クエン酸                   0.1%
  クエン酸ナトリウム              0 .5%
  精製水                      残 量
 本試験例によれば、実施例1で得られたカチ オン化ヒアルロン酸を配合することにより、 毛髪への吸着性に優れたパーマ液第2液を得� �ことができた。

 6.23.試験例20(化粧料の調製)
 本試験例では、化粧料として、以下に記す� ��方にて、実施例1で得られたカチオン化ヒア ルロン酸を配合したアウトバスタイプの毛髪 用化粧料(水系マスカラ)を調製した。

  カチオン化ヒアルロン酸(実施例1)     � �0.5%
  イソプロピルアルコール           � �5.0%
  1,3-ブチレングリコール          5.0%
  水酸化カリウム                0.1 %
  酸化亜鉛                   0.1%
  顔料                     2.0%
  デキストリン                14.0%
  香料、防腐剤                    適量
  精製水                      残 量
 本試験例によれば、実施例1で得られたカチ オン化ヒアルロン酸を配合することにより、 毛髪への吸着性に優れた水系マスカラを得る ことができた。

 6.24.試験例21(化粧料の調製)
 本試験例では、化粧料として、以下に記す� ��方にて、実施例1で得られたカチオン化ヒア ルロン酸を配合した洗顔料を調製した。

  カチオン化ヒアルロン酸(実施例1)     � �1.0%
  グリセリン                  15.0%
  ポリエチレングリコール400         5. 0%
  ラウリン酸                  5.0%
  ミリスチン酸                 8.0%
  パルミチン酸                 9.0%
  ステアリン酸                18.0%
  ラウロイルメチルタウリンナトリウム  � �   4.0%
  脂肪酸モノグリセリド              1.5%
  モノラウリン酸ポリグリセリル          1.0%
  水酸化カリウム                1.0 %
  リナロール                    � ��量
  精製水                      残 量
 本試験例によれば、実施例1で得られたカチ オン化ヒアルロン酸を配合することにより、 皮膚への吸着性に優れた洗顔料を得ることが できた。

 6.25.試験例22(化粧料の調製)
 本試験例では、化粧料として、以下に記す� ��方にて、実施例1で得られたカチオン化ヒア ルロン酸を配合した化粧水を調製した。

  カチオン化ヒアルロン酸(実施例1)     � �0.2%
  ヒアルロン酸ナトリウム           � �0.2%
  加水分解ヒアルロン酸              0.2%
  オクタン酸セチル               0. 3%
  メトキシ桂皮酸オクチル           0 .15%
  酢酸トコフェロール              0 .1%
  EMALEX RWIS-158(イソステアリン酸PEG-58水添ヒ マシ油)2.0%
  Eldew PS-306(ラウロイルグルタミン酸ジ(オ� �チルドデシル/フィトステリル/ベヘニル))                 0.5%
  ブチルパラベン                0.1 %
  メチルパラベン                0.2 %
  1,3-ブチレングリコール          5.0%
  精製水                      残 量
 本試験例によれば、実施例1で得られたカチ オン化ヒアルロン酸を配合することにより、 皮膚への吸着性に優れた化粧水を得ることが できた。

 6.26.試験例23(化粧料の調製)
 本試験例では、化粧料として、以下に記す� ��方にて、実施例1で得られたカチオン化ヒア ルロン酸を配合した美白化粧水を調製した。

  カチオン化ヒアルロン酸(実施例1)     � �0.1%
  アセチル化ヒアルロン酸           � �0.1%
  アルブチン                  2.0%
  エラスチン                  0.1%
  コラーゲンペプチド              0 .1%
  エタノール                  9.0%
  ホホバ油                   0.1%
  ポリオキシエチレンメチルグルコシド  � �   1.0%
  ジイソステアリン酸ポリグリセリル        0.2%
  クエン酸                   0.1%
  クエン酸ナトリウム              0 .2%
  グリチルリチン酸ジカリウム        � � 0.1%
  エデト酸三ナトリウム              0.1%
  プロピルパラベン              0.05 %
  ブチルパラベン               0.05%
  メチルパラベン                0.1 %
  ペンチレングリコール              3.0%
  塩酸アルギニン                0.1 %
  4-メトキシサリチル酸カリウム       � �1.0%
  パラメトキシ桂皮酸2-エチルヘキシル     0.01%
  香料                       適� ��
  精製水                      残 量
 本試験例によれば、実施例1で得られたカチ オン化ヒアルロン酸を配合することにより、 皮膚への吸着性に優れた美白化粧水を得るこ とができた。

 6.27.試験例24(化粧料の調製)
 本試験例では、化粧料として、以下に記す� ��方にて、実施例1で得られたカチオン化ヒア ルロン酸を配合した乳液を調製した。

  カチオン化ヒアルロン酸(実施例1)     � �0.3%
  ポリクオタニウム-51            0.1%
  プロピレングリコール              7.9%
  トレハロース                0.03%
  セラミド                   0.1%
  ミネラルオイル                3.0 %
  トリオクタノイン               1. 5%
  スクワラン                  1.0%
  ステアリン酸                 0.5%
  セテアリルアルコール              0.5%
  ラノリン                   0.3%
  パラフィン                  0.2%
  ステアリン酸ソルビタン           � �1.4%
  テトラオレイン酸ソルベース-30        1.0%
  ポリソルベート60              0.8%
  メチルパラベン                0.2 %
  プロピルパラベン               0. 1%
  エタノール                 0.01%
  フェノキシエタノール                適量
  カルボマー                  0.1%
  水酸化カリウム                0.1 %
  BHT                   0.02%
  トコフェロール                 � �適量
  EDTA-2ナトリウム           0.02%
  精製水                      残 量
 本試験例によれば、実施例1で得られたカチ オン化ヒアルロン酸を配合することにより、 皮膚への吸着性に優れた乳液を得ることがで きた。

 6.28.試験例25(化粧料の調製)
 本試験例では、化粧料として、以下に記す� ��方にて、実施例1で得られたカチオン化ヒア ルロン酸を配合したパック(ゼリー状ピール� �フタイプ)を調製した。

  カチオン化ヒアルロン酸(実施例1)     � �1.5%
  ポリ酢酸ビニルエマルジョン        � �17.0%
  ポリビニルアルコール            11 .0%
  ソルビトール                 5.0%
  ポリエチレングリコール400         5. 0%
  ホホバ油                   3.0%
  スクワラン                  2.5%
  POEソルビタンモノステアリン酸エステル    1.0%
  酸化チタン                  4.0%
  タルク                    8.0%
  エタノール                  8.0%
  ベルガモット                    適量
  パラベン                     � �量
  精製水                      残 量
 本試験例によれば、実施例1で得られたカチ オン化ヒアルロン酸を配合することにより、 皮膚への吸着性に優れたパック(ゼリー状ピ� �ルオフタイプ)を得ることができた。

 6.29.試験例26(化粧料の調製)
 本試験例では、化粧料として、以下に記す� ��方にて、実施例1で得られたカチオン化ヒア ルロン酸を配合したバニシングクリームを調 製した。

  カチオン化ヒアルロン酸(実施例1)     � � 0.4%
  スクワラン                  11.0%
  ジメチコン                   1.0 %
  ベヘニルアルコール              � �3.0%
  ラウロイルグルタミン酸ジオクチルドデ� �ル    2.0%
  EMALEX GMS-50(ステアリン酸グリセリル(SE)) 8 .0%
  EMALEX 805(ステアリン酸PEG-5)      2.0%
  コエンザイムQ10              0.03%
  白金ナノコロイド               0. 01%
  プロピルパラベン                 0.1%
  プロピレングリコール               5.0%
  メチルパラベン                 0 .2%
  尿素                      5.0%
  精製水                       � ��量
 本試験例によれば、実施例1で得られたカチ オン化ヒアルロン酸を配合することにより、 皮膚への吸着性に優れたバニシングクリーム を得ることができた。

 6.30.試験例27(化粧料の調製)
 本試験例では、化粧料として、以下に記す� ��方にて、実施例1で得られたカチオン化ヒア ルロン酸を配合したクレンジングクリームを 調製した。

  カチオン化ヒアルロン酸(実施例1)     � �   0.5%
  ミネラルオイル                 � �30.0%
  パラフィン                    � �3.0%
  ミツロウ                       2.0%
  オクタン酸セチル                  25.0%
  ベヘニルアルコール              � �  5.0%
  ステアリン酸グリセリル           � �   1.0%
  EMALEX 600di-ISEX(ジイソステアリン酸PEG-12) 3 .0%
  EMALEX 620(ステアレス-20)           1.0 %
  酢酸トコフェロール              � �  0.1%
  プロピルパラベン                  0.15%
  ステアロイルグルタミン酸Na             0.4%
  1,3-ブチレングリコール            � �3.0%
  メチルパラベン                 � �0.15%
  キサンタンガム                 � �10.0%
  精製水                       � � 残量
 本試験例によれば、実施例1で得られたカチ オン化ヒアルロン酸を配合することにより、 皮膚への吸着性に優れたクレンジングクリー ムを得ることができた。

 6.31.試験例28(化粧料の調製)
 本試験例では、化粧料として、以下に記す� ��方にて、実施例1で得られたカチオン化ヒア ルロン酸を配合したファンデーションを調製 した。

  カチオン化ヒアルロン酸(実施例1)     � �0.2%
  エタノール                 10.0%
  メントール                 0.02%
  グリセリン                  5.0%
  BG                     3.0%
  ジメチコン                  2.0%
  トリオクタノイン               2. 0%
  ジメチルPABAオクチル           0.5%
  オキシベンゾン               0.05%
  カルボマー                  0.3%
  シリカ                    0.2%
  AMP                    0.2%
  メチルパラベン               0.16%
  フェノキシエタノール                適量
  トコフェロール               0.02%
  EDTA-2ナトリウム           0.01%
  精製水                      残 量
 本試験例によれば、実施例1で得られたカチ オン化ヒアルロン酸を配合することにより、 皮膚への吸着性に優れたファンデーションを 得ることができた。

 6.32.試験例29(化粧料の調製)
 本試験例では、化粧料として、以下に記す� ��方にて、実施例1で得られたカチオン化ヒア ルロン酸を配合したリップクリームを調製し た。

  カチオン化ヒアルロン酸(実施例1)     � �0.6%
  マイクロクリスタリンワックス          1.5%
  セレシン                  12.0%
  スクワラン                 10.0%
  デカメチルテトラシロキサン        � �10.0%
  リンゴ酸ジイソステアリル            5.0%
  キャンデリラロウ               2. 0%
  ワセリン                   8.0%
  ヒドロキシステアリン酸グリセリル        2.0%
  酢酸トコフェロール              0 .3%
  メントール                 0.05%
  トコフェロール                 � �適量
  流動パラフィン                 � �適量
  精製水                      残 量
 本試験例によれば、実施例1で得られたカチ オン化ヒアルロン酸を配合することにより、 皮膚への吸着性に優れたリップクリームを得 ることができた。

 6.33.試験例30(化粧料の調製)
 本試験例では、化粧料として、以下に記す� ��方にて、実施例1で得られたカチオン化ヒア ルロン酸を配合したシェービングローション を調製した。

  カチオン化ヒアルロン酸(実施例1)     � �0.5%
  ヒアルロン酸ジメチルシラノール     � �  0.1%
  エタノール                 58.0%
  メントール                  0.1%
  プロピレングリコール              2.0%
  グリチルリチン酸二カリウム        � �0.05%
  香料                     0.1%
  精製水                      残 量
 本試験例によれば、実施例1で得られたカチ オン化ヒアルロン酸を配合することにより、 皮膚への吸着性に優れたシェービングローシ ョンを得ることができた。

 6.34.試験例31(化粧料の調製)
 本試験例では、化粧料として、以下に記す� ��方にて、実施例1で得られたカチオン化ヒア ルロン酸を配合したアフターサンローション を調製した。

  カチオン化ヒアルロン酸(実施例1)     � � 0.5%
  エタノール                 11.04%
  BG                     4.16%
  オウゴンエキス                 � � 適量
  ステアリルアルコール              0.72%
  アボカド油                  0.72%
  ステアリン酸                 0.02 %
  オリザノール                     適量
  ポリソルベート                0.2 3%
  PPG-6デシルテトラデセス-20       0.2%
  オクトキシノール-3             0.08 %
  メチルパラベン                0.1 4%
  プロピルパラベン               0. 07%
  カルボマー                  0.13%
  PVP                       適量
  水酸化カリウム                0.0 4%
  EDTA-2ナトリウム            0.01%
  トコフェロール                 � � 適量
  精製水                       � ��量
 本試験例によれば、実施例1で得られたカチ オン化ヒアルロン酸を配合することにより、 皮膚への吸着性に優れたアフターサンローシ ョンを得ることができた。

 6.35.試験例32(化粧料の調製)
 本試験例では、化粧料として、以下に記す� ��方にて、実施例1で得られたカチオン化ヒア ルロン酸を配合した入浴剤を調製した。

  カチオン化ヒアルロン酸(実施例1)     � �0.2%
  オクタン酸セチル              43.8 %
  オクチルドデセス-10            8.0%
  ブチルパラベン                0.2 %
  メチルパラベン                0.1 %
  グリセリン                  2.0%
  精製水                      残 量
 本試験例によれば、実施例1で得られたカチ オン化ヒアルロン酸を配合することにより、 皮膚への吸着性に優れた入浴剤を得ることが できた。