La présente invention concerne les nouveaux dérivés de la (nitro-2 ou 8___.ino-2 bensy -2 tέtra ydro- 1,2,3,4 isoquinoléine einsi que leurs sels, leurs procédés de préparation, leur activité pharmacologique bloquante βt2 adrénergique et les compositions pharmaceutiques les renfermant.

Actuellement, de nombreuses molécules «. adrénolytiques ont été découvertes. Dépendent peu d'entre elles présentent une bonne sélectivité «__ adrénergique. La yohimbine, utilisée couramment comme substance de référence *_2 bloquante,par exemple, bien qu'elle ne possède qu'une faible affinité pour les récepteurs «i, présente d'autres effets qui en limitent l ^' utilisation thérapeutique.

C'est pourquoi, dans la présente invention, on s'est orienté vers la mise au point de molécules *2 bloquantes spécifiques. Les résultats de ces travaux ont permis, par modulation de la benzyl-2 isoquinoléine ( structure chimique différente de celle de la yohimbine). de sélectionner de nouveaux composés d'affinité «Î adrénergiques.

Les substances conformes à l'invention présentent égelement l'avantage d'être plus hvdrosolubles, plus stables et d'un prix de revient moins élevé que la yohimbine.

L ^' invention a pour objet les dérivés de la (nitro-2 ou amino-2 ben_:yl)-2

FEUILLE DE REMPLACEMENT

tétrahydro- 1.2.3.4 isoquinoléine einsi que leurs sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques, caractérisés en ce qu'ils répondent è. la formule générale I :

dans laquelle chacun des substituants RI, 12, R3. R4, R5. R6, R7 ou R8 peut représenter soit un atome d'hydrogène, soit un groupe alkyle linéaire ou ramifié ayant de préférence 1 à 4 atomes de carbone, soit un groupe alcoxy linéaire ou ramifié ayant de préférence 1 à 4 atomes de carbone, soit un groupe hydroxy ou les esters correspondants, soit un groupe phénoxy. soit un groupe ben2yloxγ , soit un pont méthylènedioxy (-0-CH2-G-) lorsque ce substituant est relié avec un carbone voisin, soit un halogène, soit un groupe nitré, soit une fonction aminé correspondant à une aminé primaire ou secondaire ou tertiaire ou un ammonium quaternaire; chacun des substituants R9 ou RIO peut représenter soit un atome d'hydrogène, soit un groupe allcyle linéaire ou ramifié ayant de préférence i à 4 atomes de carbone, soit un arylalkyle, soit une fonction a iné correspondant à une a iné primaire ou secondaire ou tertiaire ou un ammonium quaternaire, soit tous les deux un atome d'oxygène; chacun des substituants Rll ouR12 peut représenter soit un atome d'hydrogène, soit un groupe alkyle linéaire ou ramifié ayant de préférence 1 à 4 atomes de carbone;

RI 1 et R12 peuvent aussi ensemble former un atome d'oxygène;

R13 peut représenter soit un atome d'hydrogène, soit un groupe alkyle linéaire ou ramifié ayant de préférence 1 à.4 atomes de carbone; à l ^' exclusion du composé où RI = R4 = R5 = R7 = R8 = R9 = RIO = RI 1 = R12 = R13 ~ H . R2 = R3 = 0CH3 et R6 = CH3.

Dans la formule générale I et dans ce qui suit, le terme radical alkyle renferment de préférence 1 à 4 atomes de carbone désigne, par exemple, un radical mέthyle et le terme radical alcoxy représente, par exemple, un méthoxy.

L'atome d halogène peut être un atome soit de fluor, soit de chlore, soit de brome, soit d'iode.

Les substituants sur la tétrahydroisoquinoléine peuvent être en toutes positions

FEUILLE DE REMPLACEMENT

sur le noyau benzénique. mais de préférence en position 6 et 7 ou 6 ou 7. ce qui correspond à R3 et R2.

Les substituants sur le groupe amino-2 ou nitro-2 benzyle peuvent être en toutes positions sur le noyau benzénique, mais, de préférence , en position para et eta ou para ou meta ce qui correspond à R6 et R7. Les sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques ρβuvent,ρar exemple, être les sels formés avec l'acide chlorhydrique.

Parmi les produits, objets de l'invention, on peut citer les dérivés répondant à la formule I. ci-dessus, ainsi que leurs sels d'addition avec les sels minéraux ou organiques, caractérisés en ce que, dans ladite formule I, chacun des substituants R9 ou RIO peut représenter soit un atome d'hydrogène, soit un groupe méthyle, soit tous les deux un atome d'oxygène; chacun des substituants R2 ou R3 peut représenter soit un atome d'hydrogène, soit un groupe méthoxy. soit un groupe bensyloxy ; chacun des substituants R6 ou R7 peut représenter soit un atome d "hydrogène, soit un groupe méthoxy , soit un halogène; R2, R3 et/ou R6, R7 peuvent former un pont méthylènedioxy (- 0-CH2-0-); RI, R4, 5 et R8 représentent un atome d'hydrogène; R13 peut représenier soit un atome d'hydrogène, soit un méthyle pour donner le produit de formule II :

L ^' invention a aussi pour objet un procédé de préparation des dérivés, tels que définis par la formule I, ci-dessus, ainsi que leurs sels. Le composé II peut être obtenu selon les schémas suivants : 1er schéma de synthèse :

( III ) ( IV ) ( V)

^F --'~-~ D

chacun des substituants RI. R2, R3, R4. R5. R6. R7 ouR8 peut représenter soit un atome d'hydrogène, soit un groupe alkyle linéaire ou ramifié ayant de préférence 1 à 4 atomes de carbone, soit un groupe alcoxy linéaire ou ramifié ayant de préférence 1 à 4 atomes de carbone, soit un groupe hydroxy ou les esters correspondants, soit un groupe phέnoxy. soit un groupe benzyloxy. soit un pont méthyiènedioxy (-0-CH2-0-) lorsque ce substituant est relié avec un carbone voisin, soit un halogène, soit un groupe nitré, soit une fonction aminé correspondant à une aminé primaire ou secondaire ou tertiaire ou ammonium quaternaire; R9 peut représenter soit un atome d'hydrogène, soit un radical alkyle linéaire ou ramifié ayant de préférence 1 à 4 atomes de carbone, soit un arylalkyle, soit une fonction correspondant à une a iné primaire ou secondaire ou tertaire ou un ammonium quaternaire;

RI peut représenter soit un atome d'hydrogène, soit un groupe alkyle linéaire ou ramifié ayant de préférence 1 à 4 atomes de carbone;

X(-) représente l'anion minéral ou organique en liaison avec l"32ote ammonium; à l'exception du produit où RI = R4 = R5 = R6 ≈ R7 = R8 = R9 = R13 = H. R2 = R3= 0CH3 et X (-) = OH;

Les conditions opératoires a) et b) signifient : a.) Réaction d'un dérivé de l'amino-2 bensaldéhvde (composé III) avec un dérivé d'un sel organique ou minéral de la dihydro-3.4 isoquinoléine (composé

IV). b)Rέduction du dérivé de la tétrahydro-5,6,1 ,1 a isoquino[l,2-b] quin8-.oiiniu__- obtenu (composé V) dissous dans le méthanol par le borohydrure <^e sodiijm pour obtenir le produit II sous forme de base. A partir de celui- ci, un disel est réalisé en présence d'un acide minéral ou organique.

2ème schéma de synthèse :

Le composé de structure V se transforme en milieu basique organique anhydre en dérivé VI à la condition que R9 et RI 3 soient un hydrogène :

FEUILLE DE REMPLACΕ.ï^UT

Chacun des substituants RI, R2, R3. R4, R5. R6. R7 ou R8 peut représenter soit un atome d'hydrogène, soit un groupe alkyle linéaire ou ramifié ayant de préférence 1 à 4 atomes de carbone, soit un groupe alcoxy lin« aire ou ramifié ayant de préférence 1 à 4 atomes de carbone, soit un groupe hydroxy ou les esters correspondants, soit un groupe phénoxy, soit un groupe benzyloxy , soit un pont méthylènedioxy (-0-CH2-0-) lorsque ce substituant est relié avec un carbone voisin, soit un halogène, soit un groupe nitré, soit une fonction aminé correspondant à une aminé primaire ou secondaire ou tertiaire ou un ammonium quaternaire; Les conditions opératoires c) et d) signifient : c) le composé V en milieu basique organique anhydre se transforme en composé VI. A partir de celui-ci, ls sei est réalisé en présence d'un acide minéral ou organique. d) Réduction ^' de la base du composé VI obtenu dissous dans le méthanol par le borohydrure de sodium pour obtenir le produit II sous forme de base. À partir de celui-ci, le bisel est réalisé en présence d'un acide minéral ou organique. La stucture VI a déjà été décrite par Villiam J. Houlihan, Robert E. Manning et Mountain lakes [Sendθ2- ander, Inc., U.S.3,542,782 (Cl 260-251)1 où RI, R4, R5 et R8 sont l'hydrogène; où chacun des substituants R2 o R3 peut représenter soit l'hydrogène, soit un groupe alkyle, soit un groupe alcoxy; où chacun des substituants R6 ou R7 peut représenter soit l'hydrogène, soit le fluor, soit le chlore, soit un groupe alkyle, soit un groupe alcoxy; les substituants R2, R3 ou/et R6, R7 peuvent former un pont méthylènedioxy (-0-CH2-0-). Mais la méthode de préparation, conforme à l'invention, est différente de celle publiée dans l'art antérieur.

3 è e schéma de synthèse

FEUILLE DE REMPLACEMENT

Les conditions opératoires e) et f ) signifient : e) Condensation d'un dérivé de la tétrahydro-1,2,3,4 isoquinoléine (composé VII ) avec un dérivé du bromure de nitro-2 benzyle (composé VIII) dans l'éthanol absolu en présence de CG3_ e.2 sec. A partir de celui-ci, le sel est réalisé en présence d'un acide minéral ou organique. f) Réduire la base du composé Ha par le zinc en milieu acide. La base du produit Ilb est transformé en disel avec un acide minéral ou organique. Chacun des substituants RI, R2, R3, R4, R5, R6, R7 ouR8 peut représenter soi un atome d'hydrogène, soit un groupe alkyle linéaire ou ramifié ayant de préférence 1 à 4 atomes de carbone, soit un groupe alcoxy linéaire ou ramifié ayant de préférence 1 à 4 atomes de carbone, soit un groupe hydroxy ou les esters correspondants, soit un groupe phénoxy, soit un groupe benzyloxy, soit un pont méthylènedioxy (-0-CH2-0-) lorsque ce substituant est relié avec ion carbone voisin, soit un halogène, soit un groupe nitré, soit une fonction amine correspondant à une amine primaire ou secondaire ou tertiaire ou un ammonium quaternaire;

R13 peut représenter soit un atome d'hydrogène, soit un groupe alkyle linéaire ou ramifié ayant de préférence 1 à 4 atomes de carbone, à l'exclusion du composé où RI = R4 = R5 - R7 = R8 = R13 = H et R2 = R3 = 0CH3 et R6 = CH3. Les dérivés, objets de la présente invention, possèdent d'intéressantes propriétés pharmacologiques ; ils ont une affinité pour les récepteurs «i et *__. et sont plus particulièrement sélectifs des récepteurs ~2 . L'invention concerne donc une activité *, adrénergique. L'invention va maintenant être décrite plus en détail dans les exemples donnés ci-après à titre non limitatif parmi lesquels:

EXEMPLE 1 : (Amino-2 diméthoχy-4,5 benzyl)-2 méthoχy-6 té trahydro- 1,2,3,4 isoquinoléine

(structure II, R3 =• R6 - R7 = 0CH3 et RI - R2 = R4 = R5 = R8 - H R9 = R10 = R13 = H)

Première étape : Synthèse du chlorure de tétrahydro-5,6,1 ,13a triméthoxy-3,10,11 isoquino [l,2-b]quina__olinium (Structure , R3 = R6 = R7 = 0CH3, RI = R2 = R4 = R5 = R8 = R9 = H R13 = H) Dans un ballon muni d'un tube à CaC12, dissoudre 1 g d'amino-6 vératraldéhyde (0,0055 mole) dans 20 mi d'éthanol absolu. Additionner 1,1 g de chlorhydrate de

FEUILLE DE REMPLACEMENT

méthoxy-6 dihydr 0-3.4 isoquinoléine (0,0055 mole) dissous dans un minimum d'éthanoi absolu. Laisser sous agitation pendant 1 heure. Le produit précipite lentement. Filtrer et laver àl'éthanol absolu. 1,75 g de cristaux oranges sont isolés (Rdt : 87 %)

- La structure de la molécule a été confirmée par des études spectrales :IR ( Br) et RMN (DMSO <_6>.

Deuxième étape : (amino-2 diméthoxy-4,5 benzyl)-2 méthoxy-6 tétrahydro- 1,2,3,4 isoquinoléine (Structure II, R3 = R6 = R7 = 0CH3 et RI = R2 = R4 = R5 = R8 = H

R9 = R10 = R13 = H)

Dans un erlenmeyer, dissoudie 1,75 g de chlorure de tétrahγdro-5,6,13 13a triméthoχy-3.10.11 isoquino [1.2-b ] quinθ2θlinium dans 20 ml de méthanol. Puis additionner par fractions successives 0,20 g de borohydrure de sodium. Laisser en contact sous agitation pendant 30 mn. Puis additionner 10 ml d'eau. Extraire au chloroforme. Sécher la phase chloroforπiique avec du sulfate de magnésium.

Filtrer.

Evaporer le filtrat. Reprendre le résidu par de l'éther éthylique. Le produit cristallise.0,80 g de cristaux sont isolés (Rdt : 50 %). - P∑ = 100 ^* C

- La structure de la molécule a été confirmée par études spectrales : IR (CHC13) et RMN (CDC13).

Préparation du dichlorhydrate

Dissoudre 0,80 g de base obtenue dans 5 ml de chloroforme. Additionner HC1 gazeux jusqu'à saturation. Laisser sous agitation dans un bain de glace pendant 30 mn. Additionner 1 ml d'éther éthylique anhydre. Le dichlorhydrate précipite. Filtrer. Sécher. Les cristaux fondent à 160°C.

EXEMPLE 2 : ( Amino-2 diméthoχy-4,5 benzyl)-2 diméthoxy-6,7 tétrahydro- 1,2,3,4 isoquinoléine ( structure II, R2 = R3 = R6 = R7 =0CH3 , RI = R4 - R5 = R8 = R9 - H et

R10 ≈ R13 ≈ H) Première étape : Synthèse du chlorure de tétral ydro-5,6,13,1 a tétraméthoχy-2.3.10.11 isoquino [1.2-b ]quina2olium ( Structure V, R2 = R3 = R6 = R7 = 0CH3, RI = R4 = R5 = R8 - R9 = H et R13 = H )

Elle est réalisée par réaction de amino-6 vératraldéhyde sur le chlorhydrate de

FEUILLE DE REMPLACEMENT

la dihydro-3,4 diméthoxy-6,7 isoquinoléine selon les conditions opératoires décrites à la première étape de l'exemple 1.

- Rdt : 86%

- PF : 264 °C - La structure de la molécule a été confirmée par des études spectrales : IR (KBr ) et RMN ( DMSO d6 ) Deuxième étape: ( Amino-2 diméthoχy-4,5 benzyl )-2 diméthoxy-6,7 .étrahvdro-1,2,3,4 isoquinoléine

( Structure II. R2 = R3 = R6 = R7 = 0CH3. RI = R4 = R5 = R8 = R9 = H e 10 = R13 = H)

Elle est réalisée de manière analogue à la deuxième étape de l'exemple 1.

- Rdt : 55%

- PF : 154°C

- La structure de la molécule a été confirmée par des études spectales : IR (KBr) et RMN (CDC13).

Préparation du dichlorhydrate

Il est réalisé de manière analogue à la deuxième étape de l'exemple 1. EXEMPLE 3 : (Amino-2 benzyl)-2 diméthoxy-6,7 tétrahydro- 1,2,3,4 isoquinoléine (Structurell, RI = R4 =R5 = R6 - R7 = R8 - R9 = RIO = R13 = H, R2 = R3 = 0CH3)

Première étape: Synthèse du chlorure de diméthoxy-2.3 tétrahydro-5.6.13.13a isoquino [1,2-b ] quinazolinium

(Structure V, R2 = R3 = 0CH3, RI = R4 = R5 = R6 = R7 = R8 = R9 = H R13 = H ) Dans un ballon muni d'un tube à CaC12. dissoudre 1 g d'amino-2 benzaldehyde (0,0033 mole) dans 75 ml d'éthanol absolu. Additionner 1,83 g de chlorhydrate de dihydro-3,4 diméthoxy-6,7 isoquinoléine (0,0083 mole) dissous dans un minimum d'éthanol absolu. Chauffer à ébuliition pendant une heure sous agitation. Laisser refroidir . Ajouter 5 ml d'éther éthylique anhydre, le produit précipite. Filtrer . Laver avec de l'alcool absolu. - Rdt .- 55% - PF = 260°C

- La structure de la molécule a été confirmée par des études spectrales : IR (KBr) et RMN (DMSO dé). Deuxième étape: (Amino-2 benzyl)-2 diméthoχy-6,7 tétrahydro- 1,2,3,4 isoquinoléine

FEUILLE DE REMPLACEMENT

(Structurell. RI =R4 =R5 - R6 =R7 = R8 =R9 ^« RIO ^» R13 ≈H. R2 =R3 = 0CH3) Elle est réalisée de manière analogue à la deuxième étape de l'exemple 1. - Rdt .- 50% - PF = 155°C - La structure de la molécule a été confirmée par des analyses spectrales : IR (KBr ) et RMN ( CDCl3 ). Préparation du dichlorhydrate

Il est réalisé de manière analogue à la deuxième étape de l'exemple 1. EXEMPLE 4 :(Diméthoxy-4.5 méthylamino-2 benzγi)-2 dimétho ^χ γ-6.7 tétrahydro- 1,2,3,4 isoquinoléine

(Structure II , R2 - R3 - R6 - R7 = 0CH3, R9 » CH3 et RI - R4 - R5 ^» R8 - H R10 =R13 = H) Première étape : Synthèse du chlorure de méthyl-13 tétraméthoxy-2.3.10.11 tétrahydro-5.6,13,13a isoquino [i,2-b ] quinazoliniu (Structure V ,R2 = R3 - R6 = R7 ≈ 0CH3, R9 - CH3, RI * R4 - R5 - H

R8 = R 13 = H). Dans un ballon surmonté d'un réfrigérant muni d'un tube à CaCl2. dissoudre 1 g de dimέthoxy-4,5 méthylamino-2 benzaldehyde (0,0051 mole) dans 20 ml d'éthanol absolu. Puis additionner 1,17 g de chlorhydrate de diméthoxy-6,7 dihydro-3,4 isoquinoléine (0,0051 mole). Chauffer à ébullition pendant 1/2 h sous agitation. Le produit précipite lentement en refroidissant. Filtrer et laver à l'éthanol absolu. 1,20 g de cristaux orange sont isolés (Rdt : 55 %). - PF = 264 °C

- La structure de la molécule a été confirmée par des analyses spectrales : IR (KBr) et RMN (DMSO d6).

Deuxième étape : (diméthoxy -4,5 méthγlamino-2 benzyl)-2 diméthoxy-6,7 tétrahydro- 1,2,3,4 isoquinoléine. (Structure II, R2 ≈ R3 = R6 * R7 = 0CH3, R9 = CH3 et R1 = R4 = R5 ≈ R8 = R10 ≈ R13 = H). Elle est réalisée de manière analogue à la deuxième étape de l'exemple 1. - Rdt : 55 %

- PF = 172° C (Basa)

- La structure de la molécule a été confirmée par études spectrales : IR (KBr) et RMN (CDC13). Préparation du dichlorhydrate

Il est réalisé de manière analogue à la deuxième étape de l'exemple 1.

FEUILLE DE REMPLACEMENT

EXEMPLE 5: (Amino-2 diméthoxy-4. benzyl)-2 tétrahγdro-1, 2.3.4 isoquinoléine

(Structure II. R6 = R7 = 0CH3, RI = R2 = R3 - R4 = R5 = R8 = H R9 = R10 = R13 = H) Première étape : Synthèse du picrate de diméthoxy-10.11 té rahydro-5.6. 13. 1 a isoquino [l,2-b]quinazolinium

(Structure V, R6 = R7 = 0CH3, RI = R2 = R3 = R4 = R5 = RS = R9 = H R13 = H) Elle est réalisée par réaction de l'amino-6 vératraldéhyde sur le picrate de dihydro-3,4 isoquinoléine selon les conditions opératoires décrites à la première étape de l'exemple 1.

- Rdt : 95 % - PF : 210°C

- La structure de la molécule a été confirmée par études spectrales IR (KBr) et RMN (CDC13).

Deuxième étape : Synthèse de ladiméthoxy-10,11 dihγdro-5,68H-isoquino [1,2-b ] quina∑oline.

(Structure VI, R6 = R7 = OCH3 RI = R2 = R3 = R = R5 = R8 = H. Dissoudre le produit obtenu lors de la première étape dans un minimum de pyridine anhydre séchέe sur KOH. Chauffer à ebullition sous agitation. Puis additionner de la triéthylamine séchée sur KOH. Laisser sous agitation pendant Ih à ebullition. Evaporer sous pression réduite. Reprendre le résidu par de l'eau, alcaliniser par de la soude et extraire au chloroforme. Evaporer la. phase chloroformique séchée sur sulfate de magnésium. Reprendre le résidu par un minimum d'éthanol absolu et précipiter le produit avec de l'éther éthylique. Eiltrer et laver. - Rdt : 65 % - PF : 151°C

- La structure de la molécule a été confirmée par des études spectrales IR (KBr) et RMN (CDCI3).

Préparation du chlorhydrate

Dissoudre la base obtenue dans du chloroforme. Additionner de l'HCl gazeux jusqu'à saturation. Laisser sous agitation dans un bain de glace. Le chlorhydrate précipite. Filtrer. Sécher. Troisième étape : (Amino-2 diméthoxy-4,5 benzγl)-2 tétrahydro-1, 2, , isoquinoléine.

FEUILLE DE REMPLACEMENT

(Structure II. R6 = R7 = 0CH3. RI = R2 = R3 ~ R4 = R5 ~ R8 = H

R9 = R10 = R13 = H )

Dissoudre dans un erlenmeyer la base du produit obtenu, lors de la deuxième étape précédente, dans du méthanol, puis opérer d'une manière analogue à la deuxième étape de l'exemple 1 ; le dichlorhydrate est réalisé de manière analogue à la deuxième étape de l'exemple 1.

- Rdt : 95 %

- PF = 106 °C (base)

- La structure de la molécule a été confirmée par des études spectrales IR (KBr) et RMN (CDC13).

EXEMPLE 6 : ( Chlo o-4 nitro-2 benzγD-2 tétrahydro- 1,2, 3, isoquinoléine (Structure II, R7 = Cl, RI = R2 = R3 = R4 = R5 * R6 = R8 - R13 ^« H, R9 = R10 = 0) Additionner 10 ml d'éthanol absolu à 2,1 g de bromure de chloro-4 nitro-2 bensyle dans un erlenmeyer. Puis ajouter 1,1 g de tétrahydroisoquinoléine base. Laisser sous agitation pendant une heure . Le produit précipite. Filtrer et laver à l'alcool absolu. Recristalliser dans l'alcool à 95°.

- Rdt : 42 % - PF = 101° C

- La structure de la molécule a été confirmée par des études spectrales IR (KBr) et RMN (CDC13).

Préparation du chlorhydrate :

Dissoudre la base obtenue dans du chloroforme. Additionner de l'HCl gazeux jusqu'à saturation. Laisser sous agitation dans un bain de glace. Le chlorhydrate précipite. Filtrer. Sécher.

EXEMPLE 7 : (Amino-2 chloro-4 benzyl)-2 tétrahydro- 1, , 3, isoquinoléine (Structure II, R7 = Cl, RI = R2 = R3 ~ R4 = R5 = R6 = R8 = H , R9 = R10 = R13 = H) Dans un ballon muni d'un réfrigérant, dissoudre 1 g de ( chloro-4 nitιo-2 benzyl)-2 té rahydro- 1,2,3,4 isoquinoléine dans 10 ml d'acide chlorhydrique à

20 %. Ajouter 1 g de zinc en poudre. Laisser sous agitation à reflux pendant 2 h.

Filtrer l'excès de zinc à chaud et laisser refroidir. Le dichlorhydrate du produit aminé précipite. Filtrer, alcaliniser par de la soude diluée et extraire la base avec du chloroforme.

Sécher sur sulfate de magnésium. Evaporer le chloroforme.

PLACEMENT

- Rdt : 72 %

- PF = 100° C

- La structure de la molécule a été confirmée par des études spectrales IR (KBr) et RMN (CDC13). EXEMPLE 8: ( Chloro-4 nitro-2 bensγD-2 méthoxy-6 tétrahydro- 1,2.3.4 isoquinoléine)

( Structure II, RI - R2 - R4 = R5 = R6 ≈ R8 = R13 - H, R3 - 0CH3, R7 = Cl, R9 = R1Û = 0) Additionner 10 ml d'éthanol absolu à 2.1g de bromure de chloro-4 nitro-2 benzyle dans un erlenmeyer. Puis ajouter 1,2g de méthoxy-6 tétrahydro- 1,2,3,4 isoquinoléine base. Laisser sous agitation pendant une heure. Le produit précipite. Filtrer et laver à l'alcool absolu. Recristalliser dans l'alcool à 95°. - Rdt: 45% - PE - 170°C

- La structure de la molécule a été confirmée par des études spectrales IR (0X13) et RMN (CDC13).

Préparation du chlorhydrate :

Le chlorhydrate est obtenu de la même manière que celle décrite dans l'exemple 6.

EXEMPLE 9: (Amino-2 chloro-4 benzγl)-2 méthoxy-6 tétrahydr 0-1.2.3.4 isoquinoléine

( Structure II, R7 = Cl, R3 - 0CH3. RI - R2 = R4 = R5 - R6 - R8 - H R9 = R10 = R13 = H ) Dans un ballon muni d'un réfrigérant, dissoudre ig de ( chloro-4 nitro-2 benzyl)-2 mέthoxy-6 tétra ydro-1,2,3,4 isoquinoléine dans 10 ml d'acide acétique à 20%. Ajouter lg de zinc en poudre. Laisser sous agitation pendant 2 heures. Filtrer l'excès de zinc . Evaporer le maximum de solvant puis extraire au chloroforme après avoir alcaliniser en large excès par de l'ammoniaque diluée. Sécher sur sulfate de magnésium. Evaporer le chloroforme .

Le dichlorhydrate est réalisé de manière analogue à la deuxième étape de l'exemple 1.

- Rdt : 75%

- PF = 160°C ( dichlorhydrate ) - La structure de la molécule a été confirmée par des études spectrales IR (KBr) et RMN ( DMSO <_6 ).

FEUILLE DE REPΛPLACEM NT

Dans le but d'illustrer l'invention, de façon non limitative, des résultats de l'étude pharmacologique qui ont été menée en rapport avec ces substances sont exposées.

Afin de faciliter l'exposé, les produits, objets de l'invention, sont identifiés par le nom de code ISK et les chlorhydrates des substances testées, cités dans ce qui suit, sont identifiés par les noms de code suivants: ISK4 pour T(amino-2 diméthoxγ-4.5 benzyl)-2 diméthoxγ-6.7 tétrahydro- 1,2.3.4 isoquinoléine; ISK7 pour l' (amino-2 diméthoxγ-4,5 benzyl)-2 méthoxy-6 tétrahydro- 1,2,3,4 isoquinoléine;

, ISK17 pour l' (amino-2 benzyl)-2 diméthoxγ-6,7 tétrahydro- 1.2,3.4 isoquinoléine; ISK18 pour l' (amino-2 diméthoxy-4.5 ben2yi)-2 tétrahydro- 1,2,3,4 isoquinoléine; ISK23 pour la (diméthoxy-4,5 méthylamino-2 benzyl)-2 diméthoxy-6,7 tétrahydro- 1 ,2,3,4 isoquinoléine; ISK24 pour la (chioro-4 nitro-2 bensγl)-2 tétrahydro- 1.2.3.4 isoquinoléine; ISK25 pour l' (amino-2 chloro-4 benzyi)-2 tétrahydro- 1,2,3,4 isoquinoléine; ISK31 pour 1" (amino-2 chloro-4 benzyl)-2 méthoxy-6 tétrahydro- 1,2,3,4 isoquinoléine;

Les études pharmacologiques réalisées sur les produits ISK sont décrites ci-dessous et expliquées avec référence aux dessins schématiques annexés, dans lesquels; la figure 1 représente l'antagonisme de TISK7 vis-à-vis du BHT 920 (dichlorhydrate d'allyl-6 amino-2 tétrahydro-5.6.7,8 4H-thia∑olo .4.5-d l azéρine) sur aorte de rat; 5 la figure 2 représente l'antagonisme entre l'ISK7,la yohimbine ou la prazosine et la clonidine sur le canal déférent de rat stimulé électriquement; et la figure 3 représente l'antagonisme entre TISK7, la yohimbine ou la prazosine et l hényléphrine sur la concentration du canal déférent de rat.

Dans un premier temps, l'affinité des produits pour les récepteurs -?α et P, 0 adrénergi ues du cortex cérébral de rat est déterminée,

La prazosine [ ³ H] , antagoniste spécifique des récepteurs de type *l et la yohimbine [^R ] , antagoniste spécifique des récepteurs de type «.2 sont utilisées comme ligands radioactifs. La préparation des homogénats de cortex cérébral se fait à partir de rats mâles

FEUILLE DE REMPLACEMENT

¥istar de 12 semaines. Après décapitation, les cerveaux sont rapidement prélevés et disséqués . Les tissus sont homogénéisés à l'aide d'un ultra-turrex dans un tampon Tris-HCl 50 M pH 7.5 et centrifugés à 40.000 g pendant 10 minutes. Le culot est repris dans du tampon et recentrifugé de même. L'ensemble des manipulations se fait à une température inférieure à 4" C. Le culot final est homogénéisé dans le tampon d'incubation maintenu dans la glace fondante (tris-HCl 50 mM pH 7,5) de façon à obtenir une dilution finale du tissu cortical de 1/100 (p/v), ce qui correspond à environ 0,5 mg de protéines pa mi. 1 ml de suspension tissulaire est incubé en présence d'une concentration donnée de radioligend (0,2 nM pour la prazosine [ ³ H ] et 2 nM pour la yohimbine [ H]) et de diverses concentrations de la molécule étudiée dans un volume final de 2ml. (Les activités spécifiques des radioligands sont de 0.37 -1.11 TBq. m ol ^" * pour la. prazosine [ ³ HL et de 2,59-3,33 TBq. mmol ^"1 pour la yohimbine [ ³ H]). Les tubes sont incubés à 2 ^c C pendant 30 minutes pour la prazosine [ ³ HL et 20 minutes pour la yohimbine [ ³ Hl rapidement filtrés sous vidϋ sur filtres de dénomination commerciale ¥hatman GF/B et fabriqués ver ¥hatman. Ces filtres sont rincés 4 fois avec 5 ml de tampon d'incubation conservé dans de la glace. La. radioactivité retenue sur les filtres est comptée par scintillation liquide. La fixation non spécifique du ligand radioactif est évaluée en présence de 10 j«M de phentolamine.

A partir des courbes d'inhibition de la fixation spécifique d'un ligand à son récepteur par des quantités croissantes d'un produit non radioactif on détermine la constante d ^' inhibition (Ki) de ce produit. Ces valeurs du i sont calculées d'après Cheng et Prussof (Biochem. Pharmacol. 1973, 22, 099-3108). Dans le tableau ci-dessous sont consignés les Ki (nM) de quelques composés à titre non limitatif, pour les sites de liaison de la prazosine [ ³ H] et de la yohimbine [ ³ H]. D'autre part, le composé ISK 7 ne présente aucune affinité pour les sites de liaison dudexetimide [ ³ H] (récepteur dopaminergiq e D2), de l kétansérine [ ³ H] (récepteur εérotonergique), de la pyrilamine [ ³ H] (récepteur histaminique Hl) et de lanitrendipine [ ³ H ] (Moqueur de l'influx caicique). Donc, les produits ISK sont revendiqués pour leur activité pharmacologique sélective des récepteurs «, adrénergiques et plus particulièrement pour leur spécificité *2 / o adrénergique.

ÎΓΓ_.Γυ..Î _ ^» __._ π_.° ^: ~*.~? ^-— r»« ^p - _ α _•_.«_.- •. -_._ _ ___. ^«É . re-__._..-LACΞ_tô£MT

05295

Prazosine C ³ H] Yohimbine [ ³ H_ K _D • 10,2πM»

Composés et codes (K _Q - 0,14πH) (

.»• C ./K, α. K, nM K _} nM

ISK ₄ (Structure II : R.»R ₃ «Rg«R ₇ "0C.. 2900 + 400 310 i 110 0,28 ₁ « ₄ ^« R ₅ » g*H _g . _]0 . ₁₃ =H

ISK ₇ (Structure II : R ₃ »Rg»R-.»0CH.) 990 +_ 5Q 63 + 20 0,06 R]'R-*R ₄ » _s « g«H

^R 9 ^*R 10' ^R 13" ^H

ISK--. (Structure II : R ₂ « ₃ ^« 0CH 3400 + 300 1700 *_ 300 .0,50

ISK-g (Structure II : 3220 + 70 220 + 75 0,07

ISK ₂₃ (Structure II : > 10000 2665 _+ 400

IS _Z4 (Structure II : R-..Cl,Rg*R ₁₀ -0 > 30000 2740 + 1020

IS _Z5 (Structure II : R ₇ -C1,R _g - - ₀ -H > 30000 1400 +_ 375

ISK,. (Structure II : 1800 + 330 155 + 35 .11.6

Prazosine 0,15 + 0.03 370 + 50 2467

Yohimbine 350 + 30 17 + 4 0,05

Ces résultats représentent la valeur de 3 expériences au moins + écart type â la moyenne.

Dans un deuxième temps, l'antagonisme des produits ISK vis vis de l ^' effet contracturant du BHT 920 sur aorte de rat est démontré. L'antegonisme de l'ISK 7 vis à vis de l'effet contracturant du BHT 920

(dichlorhydrate d'allyl-6 amino-2 tétrahydro-5,6,7,8 H-thi82θlo [4,5-d ] azépine)

(agoniste _{Λ 2} adrénergique) sur aorte de rat est pris comme exemple.

Il y a antagonisme lorsqu'une substance est capable de s ^' opposer partiellement ou totalement aux effets d'une substance agoniste. L'aorte de rats femelles Vistβr prélevée rapidement est recueillie dans une solution de Krebs contenant : NaCl 120 mM ; KC14,8 mM ; NaHC0325 mM ^; glucose

10 mM ; C8.C12 1 _. 25 mM ; Mg S04 1,19 mM ; KH2 P04 1,14 mM.

FEUJLLE DE REMPLACEMENT

L'aorte débarrassée des tissus conjonctifs et adipeux est découpée en anneaux d'une longueur d' 1 mm environ.

Chaque anneau est installé dans une cuve à organe de 10 ml contenant du liquide de Krebs à 37°, oxygéné par du carbogène (93 % 02 et 5 % C02) et relié à un capteur isométrique de dénomination commerciale Statham et fabriqué par Gould inc. Médical Product Division, sous une tension de base de 2 g. L'enregistrement des contractions est réalisé par un polygraphe de dénomination commerciale Beckman et fabriqué par Beckman. Après une période de repos (Ih) entrecoupée de lavages, une première relation effet-concentration est établie en étudiant la contraction provoquée par l'adjonction dans la cuve de concentrations croissantes de BHT 920. Après une nouvelle période de repos entrecoupée de lavages (30 min) où l'organe revient à la tension initiale, l'antagoniste est mis en contact avec le vaisseau pendant 10 minutes ; puis une nouvelle relation effet-concentration avec le BHT 920 est établie. Dans des expériences préliminaires, il a été établi que la première et la deuxième relation effet-concentration de l'agoniste sont identiques en l'absence d'antagoniste. Par contre la présence d'ISK 7 provoque un déplacement sur la droite de la courbe effet-concentration de l'agoniste sans dépression du maximum. Le déplacement augmente avec la concentration d" ISK 7. Ceci démontre que cette substance est antagoniste du BHT 920. La constante de dissociation apparente de l'ISK 7. calculée à partir des expériences illustrée sur la figure 1 pour un antagonisme compétitif suivant Eurchgott R.F. (in Catechoiamines, éd. by Blaschl o et Muscholl, Springer-Verlag, Berlin, 1972 pp. 283-335) est de 1.2 x 10 ^{" 7} M pour les deux concentrations utilisées. Cette valeur est comparable à la valeur du Ki obtenue sur les sites de liaison «2 adrénergiques. Ces résultats montrent que l'ISK 7 est un «, Moqueur. La figure 1 représente en abscisse -log(BHT 920) en moles et en ordonnée la contraction en pourcentage de la contraction maximale ; la courbe (1) représente la courbe effet-concentration du BHT en abscence d'ISK 7 et les courbes (2) et (3) en présence de respectivement 10 ^{" •} et 10 ^'6 moles d'ISK 7. Par analogie structurale des produits ISK avec TISK7, nous revendiquons pour les dérivés, objet de la présente invention, l'activité antagoniste v-2 adrénergique.

Dans un troisième temps, l' effet de l' ISK 7 sur les récepteurs od et «2 adrénergiques du canal déférent isolé de rat est comparé à des substances de référence., la prazosine et la yohimbine.

FEU _. LLE DE R£SVîP A -C_. -.ESV_ NT

L'effet sur les récepteurs de type od est mis en évidence par inhibition compétitive de la contraction induite par addition de phényiéphrine (agoniste sélectif od ) au liquide de survie, sur les récepteurs de type «2 par un antagonisme compétitif avec l'effet inhibiteur de la clonidine (agoniste sélectif «2) sur la réponse de l'organe à la stimulation dans un champ électrique, suivant la méthode décrite par Starke (Naunyn-Schmiedeberg's Arch. Pharmac, 1972, 273, 11-23).

Les canaux déférents de rats mâles Wistar de 12 semaines sont prélevés. Chaque canal déférent est placé dans une cuve à organe de 50ml remplie d'une solution de Krebs contenant: NaCl 118mM; KC1 4,7mM; CaCl22,5mM; KH2P04 l,2mM; MgS04 l,2mM; NaHC0325mM; glucose 12,5-nM.

Le liquide de survie est maintenu à 37 °C oxygéné par du carbogène (95 % 02 et 5% C02). Chaque organe est relié à un capteur isométrique de dénomination commerciale Statham et fabriqué par Gould inc. Médical product Division^ous une tension de base de 0,5g. L'enregistrement des contractions est réalisé par un poiygraphe de dénomination commerciale Beckman et fabriqué par Be eman. Pour la caractérisation de i 'effet « bloqυeur, le canal déférent est stimulé électriquement par des impulsions rectangulaires de 2msec de durée, de 30 volts, à la fréquence de 0,2 Hz délivrées par un stimulateur de dénomination commerciale Bioscience (StimiUator 100) et fabriqué par Palmer. Après une période de repos de 20-30 minutes, des concentrations croissantes de clonidine sont ajoutées au milieu de survie toutes les 2 minutes. Cela permet d'établir la relation entre effet et concentration de clonidine.Aρrès la réalisation de deux courbes cumulatives effet-concentration successives séparées par une période de repos de 20 minutes, l'antagoniste est mis en contact avec l'organe isolé pendant 10 minutes et une nouvelle relation effet-concentration est déterminée. Dans des expériences préliminaires, il a été établi que la deuxième et la troisième relation effet-concentration avec l'agoniste sont identiques en l'absence d'antagoniste. Pour la caractérisation de l'effet od Moqueur, l'organe est stimulé par la phényiéphrine la stimulation du canal déférent de rat produit une réponse contractile rapide (le maximum de la contraction est atteint en 30 secondes). Après une période de repos de 30 minutes, des concentrations croissantes de phényiéphrine sont ajoutées dans la cuve à organe toutes les 30 secondes. Une première relation effet-concentration est établie. Après un lavage et une nouvelle période de repos de 15 minutes où l'organe revient à la tension initiale.

FEUI E DE REMP ACEMENT .

une deuxième relation effet-concentration est effectuée. L'antagoniste est mis au contact du tissu revenu à sa tension de base après lavage et une troisième relation effet concentration est déterminée. Dans des expériences préliminaires il a été établi que la deuxième et la troisième relation effet-concentration de l'agoniste sont identiques en l'absence d'antagoniste.

L'évaluation quantitative de l'antagonisme est effectuée par le calcul du pÀ2 selon Arunia shanaet Schild (Br. J. Pharmacol. Chemother. , 1959,14, 8-58). La constante de dissociation apparente ( ), calculée selon Furchgott , est le rapport entre la concentration molaire d'antagoniste et le rapport de doses equiactives d'agoniste (en présence et en l'absence d'antagoniste) -1. Cette constante est calculée lorsque la détermination du pA2 n'est pas possible (quand la pente de la relation de Schild est différente de 1 ).

La figure 2 montre que l'effet inhibiteur de la clonidine sur la réponse contractile du canal déférent stimulé est entagonisé par l'ISK 7 et les substances de référence (yohimbine et prazosine). L'ISK 7, la yohimbine et la prazosine produisent un déplacement vers la droite des courbes effet-concentration de l'agoniste sans diminution de l'effet maximal de ce dernier. Les trois schémas de la figure 2 représentent l'antagonisme de l'ISK 7 ( fig_2.A, aux concentrations de 0; 100; 300; 1000; 3000nM),de la prazosine ( fig.2.B, aux concentrations 0; 1000; 3000; lOOOOnM) ou de la yohimbine ( fig.2.C, aux concentrations 0; 30; 100; 300; lOOOnM) en fonction du -log (clonidine) en moles sur le canal déférent de rat stimulé électriquement. L'effet (inhibition de la réponse contractile) est exprimé en pourcentage de l'effet maximal .Ce déplacement augmente avec la concentration des antagonistes. Les valeurs de ρA2 pour les récepteurs α adrénergiques présynaptiques de l ^' ISK 7 et de la yohimbine sont calculées et consignées dans le tableau ci-dessous. t i

.antagonisme avaσ ta olonldlnat antagonisme avec la l sur la réponse à la l p ényIβphr1na substances. stimulation έlectrlqua ι

1 pA, t pente 1 pA, 1 pente

1 t i

ISK7 t 8.7 1 1.05 1 5.54 (a) ι

Yohimbine i 7.59 l 1.15 1 β.OΘ 1 0.85

Prazosine ι B.14 (a) 1 8.34 1 o.gg

FEUILLE DE REMPLACEMENT

Pour ces deux substances, la relation de Schild est linéaire avec une pente non significativement différente de 1. Dans le cas de la prazosine, la pente de la relation de Schild est très différente de 1, la constante de dissociation apparente KD est calculée dans ce cas. La figure 3 montre qu'en présence d'ISK 7, de yohimbine ou de prazosine, les courbes effet-concentration de phényiéphrine sont déplacées vers la droite sans dépression du maximum . Les trois schémas de la figure 3 représentent en abscisse -iog(ρhényléphrine) en moles et en ordonnée la contraction en pourcentage de la contraction maximale en présence respectivement de ISK 7 (fig-3.A, aux concentrations de 0; 1; 3; 10 et 30jιM ), de la yohimbine (fig.3-B, aux concentrations de C; 0,3; 1; 3; IOJIM) , de la prazosine (fig.3.C, aux concentrations de 0; 3; 10; 30; lOOnM). Le déplacement augmente avec les concentrations d'antagoniste. Les valeurs de ρA2 sont calculées et consignées dans le tableau ci-dessus. La relation de Schild est linéaire avec une pente de 0,99 pour la prazosine et de 0,85 pour la yohimbine. Dans le cas de l'ISK 7 la pente de la relation de Schild est très différente de 1; c'est la constante de dissociation apparente KD qui est calculée.

Les résultats exposés ci-dessus montrent que l'ISK 7 est un antagoniste de type «2 adrénergique sélectif sur le canal déférent isolé de rat . Ces résultats sont en accord avec ceux obtenus sur l'aorte isolée de rat puisque le pA2 de l'ISK 7 est respectivement de 6,7 sur le canal déférent et de 6,9 sur l'aorte. Ils confirment, en outre, à l'aide d'une méthode pharmacologique qui permet la caractérisation fonctionnelle des récepteurs, les conclusions de l'étude biochimique de la compétition entre l'ISK 7 et les ligands «,-adrénergiqυes, réalisée à l'aide des techniques de liaison spécifique.

En effet, la présente invention montre que l'ISK 7 n'inhibe l'effet de l'agoniste od adrénergique, la phényiéphrine, qu'à concentrations très sensiblement plus élevées que les concentrations auxquelles U inhibe compétitivement l'effet de l'agoniste « sélectif, la clonidine. L'action « bloquante de l'ISK 7 ainsi mise en évidence est habituellement interprétée comme une action pré-jonctionnelle se traduisant par la levée de l'inhibition exercée par l'activation des récepteurs <*2 sur la libération de noradrénaline provoquée par la stimulation électrique des terminaisons sympathiques. Les applications thérapeutiques de l'invention sont celles qui découlent du blocage des récepteurs «2 adrénergiques. Par exemple, on sait qu'il existe des

, _ . _. FEU _. LLE DE REMPLACEMENT ^

récepteurs de cette nature au niveau du système nerveux central, au niveau des muscles lisses vasculaires, au niveau des plaquettes sanguines, au niveau du pancréas endocrine et au niveau du procès ciliaire.

Le blocage de ces récepteurs «2 adrénergiques peut entraîner des modifications des transmissions catécholaminergiques au niveau du système nerveux central, une diminution de l'effet vasoconstricteur des catéchoiamines au niveau des muscles lisses vasculaires, une inhibition de l'agrégation des plaquettes sanguines, une régulation de la sécrétion d'insuline par le pancréas endocrine et de ce fait un effet hypoglycémiant, une diminution de la pression intra-oculaire au niveau du procès ciliaire. Les indications thérapeutiques correspondantes peuvent être notamment la dépression mentale, certaines hypertensions artérielles, certains troubles de l'hémostase, certains diabètes et le traitement du glaucome.

La présente invention a, par conséquent, également pour objet, les médicaments, caractérisés en ce qu'ils contiennent les nouveaux dérivés de l'(amino-2 ou nitro-2 benzyl)-2 tétrahydro-1,2,3,4 isoquinoléine de formule I, comme principes actifs. En particulier, ces médicaments peuvent être préférentieliement utilisés dans les applications suivantes: dans la dépression mentale, les principes actifs agissant par modifications des transmissions catécholaminergiques; dans certaines hypertensions artérielles, les principes actifs agissant par inhibition de l'effet vasoconstricteur des catéchoiamines; dans certains troubles de l'hémostase, les principes actifs inhibant l'agrégation des plaquettes sanguines; dans certains diabètes, les principes actifs régulant la sécrétion d'insuline et la glycémie; dans le glaucome, les principes actifs diminuant la pression intra-oculaire.

Bien entendu, la présente invention ne se limite nullement aux indications et aux applications décrites. D'autres indications et applications sont possibles, ainsi que les modifications aux indications et aux applications décrites, sans sortir pour autant du domaine de l'invention.

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