背景技术 橫达肝癸钠 （Fondapar inux Sodium )是第一个人工合成的凝血 酶 Xa因子选择性抑制剂， 于 2001年作为抗凝血药物上市销售， 化学 名称为： 甲基 0- (2 -脱氧 -6-0-碭酸基 -2 -碭酰胺基 - α -D -吡喃葡萄 糖）-（1→4) -0- ( β - D-吡喃葡萄糖醛酸) -（1→4) - 0- (2-脱氧- 3， 6-0- 二磺酸基 -2-磺酰胺基- a -D-吡喃葡萄糖） - (1→ 4) -0- (2-0-磺酸基- a -L-吡喃艾杜糖醛酸） _ (1→ 4) -2-脱氧 -6-0-橫酸基 -2-磺酰胺基- a _D-吡喃葡萄糖苷十钠盐， 分子量为 1728， 其化学结构如式 8所示：

8 磺达肝癸钠的结构有如下特征：磺达肝癸钠由 互不相同的五个单 糖片断通过 a或 β糖苷键依次连接而成，构成磺达肝癸钠的五� ��单糖 片段从右至左分别用字母 A、 B、 C、 D和 E表示， 其中片断4、 C和 E 是葡萄糖胺衍生物， 片断 B是艾杜糖醛酸衍生物， 片断 D是葡萄糖醛 酸衍生物。 磺达肝癸钠结构中， 存在游离的羟基、 硫酸化的羟基和硫 酸化的氨基， 因此， 在其合成设计中必须考虑使用合适的保护基， 以 达到以下要求： （1 )在糖苷键的形成反应过程中， 保护基应读在区域 选择性和立体选择性方面有利于形成正确的糖 苷键； ( 2 )保护基的选 择应该可以使得在需要的位置进行硫酸化， 同时其他羟基不被硫酸 化； （3)由于读化合物的合成路线非常长， 保护基的选择应读有利于 提高反应效率， 特别是糖苷化反应的选择性和产率。 现有技术中磺达 肝癸钠的合成步骤长、 操作繁瑣、 总收率低， 不利于进行工业化规模 生产。

在磺达肝癸钠的全合成过程中 DC二糖片段的合成尤其困难。 连 接 D片段和 C片段的糖苷键构型是 β构型，但是在进行连接 D片段和 C片段的糖苷化反应时却存在立体选择性问题� � 反应可能同时生成 α 糖苷化产物和 β糖苷化产物， 导致反应产率低、 产物分离纯化困难。 1984 年， Sinay 等人（ Sinay, P.； Jacquinet, J.； Peittou, M.； Duchaussoy, P.； Lederman, I.； Choay, J. Total synthesis of a heparin pentasaccharide fragment having high affinity for ant i thrombin. Ill, Carbohydrate Research, 1984, 132, C5-C9 ) 报道使用原料式 16化合物和式 Π化合物在昂贵的银盐作用下合成 DC二糖片段中间体式 18化合物， 该糖苷化反应奈件苛刻， 反应需要 进行六天时间， 产率仅有 50%, 产物分离纯化困难， 而且原料式 16 化合物的合成需要 14步化学反应； 美国专利 US4818816中也描述了 相同的结果。 1986 年， Kreuzer 等人 ( Kreuzer, M.； Thiem, J. Aufbau von ol igosacchar iden mi t glycosylf luor iden unter lewissaure-katalyse. Carbohydrate Research, 1986， 149, 347-361 )报道使用氟化糖苷式 19化合物和式 4化合物在当量的四氟 化钛作用下进行糖苷化反应合成 DC二糖片段中间体式 12化合物，产 率仅有 66%, 而且该反应需要使用大量昂贵且毒性较高的含 氟试剂。

1991年， Duchaussoy等人（ Duchaussoy, P.； Lei, P. S.； Petitou, M.； Synay, P.； Lormeau, J. C.； Choay, J. The first total synthesis of the anti thrombin III binding site of porcine mucosa heparin. Bioorg. Med. Chem. Lett. , 1991， 1， 99-102 ) 报道使用式 20化合物和式 4化合物在昂贵的银盐作用下合成 DC二糖 片段中间体式 21化合物， 其糖苷化反应条件苛刻， 产率仅有 51%, 而且反应的立体选择性 α/ β比例为 1/12， 产物分离纯化困难。

1991年， Petitou等人（ Petitou, M.； Jaurand, G.； Derrien, M.； Duchaus soy, P.； Choay, J. A new, highly potent, hepar in-1 ike pentasaccharide for f ragmen t containing a glucose residue instead of a glucosamine. Bioorg. Med. Chem. Lett. , 1991, 1, 95-98 )报道利用已有 β构型糖苷键连接的纤维二糖进行官能团及保 护基转化， 合成二糖片段中间体， 但其合成路线较长， 总产率低。 美 国专利 US7541445 中描述了将 2-0-苯甲酰基葡萄糖醛酸甲酯衍生物 与 C片段进行糖苷化反应，通过苯甲酰基的邻基� �与效应控制糖苷化 反应， 构建 DC二糖片段中的 β构型糖苷键， 然后将二糖片段中 2-0- 苯甲酰基葡萄糖醛酸甲酯衍生物通过三步化学 反应转化为 2-0-苄基 葡萄糖醛酸甲酯衍生物，但这些转化增加了许 多反应步骤， 给工业化 生产带来更多的困难。

1995年， Budes insky等人 ( Budesinsky, M.； Cerny, M.； Cerny, I.； Samek, S.； Trnka, T. Preparation of β -D-glucopyranosyl derivatives of 1, 6; 2, 3-and 1, 6; 3, 4-dianhydro- β -D-hexopyranoses and their 'H and ¹ C NMR spectra. Collect. Czech. Chem. Co隱 un. , 1995, 60, 311-323 艮道使用溴化糖苷式 22化合 物和式 4化合物进行糖苷化反应合成 DC二糖片段式 12化合物，但该 反应需要使用大量昂贵的银盐作为糖苷化反应 的活化剂。

998年, Ca el Ua等人 ( Kasuya, M. C.； Hatanaka, K.； The chemical synthesis of a cyclic oligosaccharide derivative with branching. Tetrahedron Lett. , 1998, 39, 9719— 9722 艮道使用 式 23化合物和式 4化合物进行糖苷化反应， 由于式 23化合物物的 2-位羟基保护基为苄基， 所以得到的产物是 α构型产物式 24化合物 和 β构型产物式 25化合物的混合物， 它们的比例为 20: 80。 β构型 产物式 25化合物可以用来合成 DC二糖片段中间体， 但由于上述 α / β混合物分离纯化困难， 该方法难以进行大量生产。

中国发明专利申请号为 CN201180047939. 8的文献公开了使用式 26化 合物和式 4化合物进行糖苷化反应合成 DC二糖片段中间体式 27化合 物， 但该反应原料式 26化合物的合成路线较长， 需要使用昂贵、 高 毒性的试剂，而且其中的缩醛保护基对糖苷化 反应中的酸性活化剂稳 定性差， 导致糖苷化反应产率低、 重现性差。

综上所述， 现有的 DC二糖中间体合成方法反应步骤多， 所用试 剂昂贵、 毒性大， 反应产率低， 分离纯化困难， 成本高， 给大规模制 备带来许多困难。

发明内容 本发明的目的之一在于提供一种如下所示的 DC二糖中间体式 2 化合物： 其中 R选自烷基酰基或芳酰基，同一分子式中的 R代表相同或不 同的基团；

优选地， R代表相同的基团；

更优选地， R选自乙酰基或苯甲酰基；

进一步优选地， R选自苯甲酰基。

本发明的另一个目的在于提供一种制备式（2 ) 化合物的方法， 其中包括以下三种方法：

方法 1 : 使式（ 3 )化合物和式（ 4 )化合物在活化剂存在下进行 糖苷化反应， 得到式（2 )化合物：

其中 R选自烷基酰基或芳酰基， 优选 R选自乙酰基或苯甲酰基， 同一分子式中的 R代表相同或不同的基团； 优选 R代表相同的基团， 进一步优选 R为苯甲酰基。

其中式（ 3 )化合物异头碳的立体构型为 a或 β或它们的混合物。 在一个实施方案中， 所述活化剂优选地选自三氟化硼乙醚络合 物、 三甲基硅基三氟甲熄蟥酸酯、 三乙基硅基三氟甲坑磺酸酯、 叔丁 基二甲基硅基三氟甲烷磺酸酯或三氟甲烷磺酸 中的一种或更多种。 在一个实施方案中， 所述糖苷化反应在溶剂存在下进行， 所述溶 剂优选地选自乙酸乙酯、 乙酸甲酯、 N， N-二甲基甲酰胺、 乙醚、 甲 基叔丁基醚、 四氢呋喃、 2 -甲基四氢呋喃、 二氧六环、 乙腈、 硝基甲 烷、 二氯甲炕、 1 , 2-二氯乙烷、 甲苯中的一种或者它们的任意混合 物。

方法 2: 使式（ 5 )化合物和式（ 4 )化合物在活化剂存在下进行 糖苷化反应， 得到式（2 )化合物：

5 4 2

其中 R选自烷基酰基或芳酰基， 优选 R选自乙酰基或苯甲酰基， 同一分子式中的 R代表相同或不同的基团； 优选 R代表相同的基团， 进一步优选 R为苯甲酰基。

其中式 （5 )化合物异头碳的立体构型为 a或 β或它们的任意混 合物。

在一个实施方案中， 所述活化剂优选地选自三氟化硼乙醚絡合 物、 三甲基硅基三氟甲烷磺酸酯、 三乙基硅基三氟甲燒磺酸酯、 叔丁 基二甲基硅基三氟甲坑磺酸酯、 三氟甲熄磺酸、 三氟甲熄磺酸酐、 三 氟甲熄磺酸银、 溴化锌或吡啶对甲苯磺酸盐中的一种或更多种 。

在一个实施方案中， 所述糖苷化反应在溶剂存在下进行， 所述溶 剂优选地选自乙酸乙酯、 乙酸甲酯、 Ν， Ν-二甲基甲酰胺、 乙醚、 甲 基叔丁基醚、 四氢呋喃、 2 -甲基四氢呋喃、 二氧六环、 乙腈、 硝基甲 烷、 二氯甲炕、 1 , 2-二氯乙烷、 甲苯中的一种或者它们的任意混合 物。

方法 3: 使式（ 6 )化合物和式（ 4 )化合物在活化剂存在下进行 糖苷化反应， 得到式（2 )化合物：

其中 R选自烷基酰基或芳酰基， 优选 R选自乙酰基或苯甲酰基， 同一分子式中的 R代表相同或不同的基团， 优选 R代表相同的基团， R ₂ 选自烷基或芳基， 优选 1 ₂ 为甲基， 乙基， 丙基， 丁基， 异丙基、 苯 基或对甲基苯基， 进一步优选 R为苯甲酰基。

其中式 （ 6 )化合物异头碳的立体构型为 α或 β或它们的任意混 合物。

在一个实施方案中， 所述活化剂选自 Ν- 代丁二酰亚胺、 三甲 基硅基三氟甲坑磺酸酯、三乙基硅基三氟甲熄 磺酸酯、叔丁基二甲基 硅基三氟甲烷磺酸酯、 三氟甲烷磺酸、 三氟甲烷磺酸银、 三氟甲烷磺 酸甲酯、 Ν-溴代丁二酰亚胺、 三氟甲烷磺酸甲酯、 二甲基甲硫基硫鑰 三氟甲烷磺酸盐、破縐二可力丁过氯酸盐或 鑰二可力丁三氟甲烷磺 酸盐中的一种或更多种。

在一个实施方案中， 所述糖苷化反应在溶剂存在下进行， 所述溶 剂选自乙酸乙酯、 乙酸甲酯、 Ν, Ν-二甲基甲酰胺、 乙醚、 甲基叔丁 基醚、 四氢呋喃、 2-甲基四氢呋喃、 二氧六环、 乙腈、 硝基甲烷、 二 氯甲烷、 1 , 2-二氯乙烷、 甲苯中的一种或者它们的任意混合物。 在一个优选的实施方案中， 本发明提供了一种如下所示的 DC二 糖中间体式 1化合物 2， 3, 4， 6-四 -0-苯甲酰基- β _D-吡喃葡萄糖- （1 → 4 -1, 6: 2, 3 -双脱水- β _D-吡喃甘露糖。

本发明还提供了一种式 1化合物 2, 3,4,6_四-0_苯甲酰基_β-D_ 吡喃葡萄糖_ (1→ 4)-1， 6: 2， 3-双脱水- β _D-吡喃甘露糖的制备方 法：使式 9化合物五 -0-苯甲酰基 -α / β -D-吡喃葡萄糖和式 4化合物 1, 6: 2, 3-双脱水- β -D-吡喃甘露糖在活化剂存在下进行糖苷化反应 ， 得到式 1化合物 2, 3, 4, 6-四 -0-苯甲酰基- β -D-吡喃葡萄糖- (1→4) -1, 6: 2, 3 -双脱水- β _D-吡喃甘露糖，

该反应在溶剂存在下进行， 可在乙酸乙酯、 乙酸甲酯、 N， N-二甲 基甲酰胺、 乙醚、 甲基叔丁基醚、 四氢呋喃、 2-甲基四氢呋喃、 二氧 六环、 乙腈、 硝基甲烷、 二氯甲炕、 1, 2-二氯乙炕、 甲苯中的一种 或者它们的混合溶剂中进行， 所述活化剂选自三氟化硼乙醚絡合物、 三甲基硅基三氟甲熄磺酸酯、 三乙基硅基三氟甲熄磺酸酯、叔丁基二 甲基硅基三氟甲熄磺酸酯或三氟甲焼磺酸中的 一种或几种。

其中，式 9化合物五- 0-苯甲酰基 -α/ β-D-吡喃葡萄糖可参考文 献 ( Barrientos, A. G.； Fuente, J. M.； Rojas, T. C.； Fern a ndez, A.； Penad e s, S. Gold glyconanopar t icles: synthetic polyvalent 1 igands mimicking glycoca lyx-1 ike surf aces as tools for glycobiological studieds. Chemistry - A European Journal, 2003, 9， 1909-1921 ) 的方法制备， 式 4化合物 1， 6: 2, 3 -双脱水- β _D-吡 喃甘露糖可参考文献（Ganguli, A. R. S.； Coward, J. L : β Selectivity in the synthesis of 3-substi tuted, 4-methyl umbel 1 iferone glycosides of ^acetyl glucosamine and chi tobiose. Tetrahedron: As mmetry, 2005, 16, 411 424)的方法 制备。

在另一个优选的实施方案中， 本发明还提供了另一种式 1化合物 2, 3,4,6-四- 0-苯甲酰基- β-D-吡喃葡萄糖- (1→4) -1, 6: 2, 3-双脱 水- β _D-吡喃甘露糖的制备方法： 使式 10化合物 2, 3, 4, 6-四 -0-苯 甲酰基 -α / β -D-吡喃葡萄糖苷基三氯乙腈亚胺酯和式 4 化合物 1,6: 2, 3-双脱水- β -D-吡喃甘露糖在活化剂存在下进行糖苷化反应 ， 得到式 1化合物 2, 3, 4， 6-四 -0-苯甲酰基- β -D-吡喃葡萄糖- (1→4) -1, 6: 2 3 -双脱水- β _D-吡喃甘露糖，

该反应在溶剂存在下进行， 可在乙酸乙酯、 乙酸甲酯、 N, N-二甲 基甲酰胺、 乙醚、 甲基叔丁基醚、 四氢呋喃、 2-甲基四氢呋喃、 二氧 六环、 乙腈、 硝基甲烷、 二氯甲烷、 1, 2-二氯乙烷、 甲苯中的一种 或者它们的混合溶剂中进行， 所述活化剂选自三氟化硼乙醚絡合物、 三甲基硅基三氟甲熄磺酸酯、 三乙基硅基三氟甲熄磺酸酯、叔丁基二 甲基硅基三氟甲熄磺酸酯、 三氟甲焼磺酸、 三氟甲坑磺酸酐、 三氟甲 熄磺酸银、 溴化锌或吡啶对甲苯磺酸盐中的一种或几种。

其中， 式 10化合物 2， 3， 4， 6-四 -0-苯甲酰基 -α/ β-D-吡喃葡萄 糖苷基三氯乙腈亚胺酯可参考文献（Barrientos, A. G.； Fuente, J. M.； Rojas, T. C.； Fernandez, A.； Penad e s, S. Gold

gl conanopar t icles: synthetic polyvalent 1 igands mimicking glycocalyx-1 ike surfaces as tools for glycobiological s tudieds. Chemistry - A European Journal, 2003, 9, 1909-1921; Mbadugha, B. N. A.； Menger, F. M. Sugar/ s teroid/ sugar conjugates: sensitivity of lipid binding to sugar structure. Organic Letters, 2003, 5, 4041-4044; Ekholm, F. S.； Eklund, P.； Leino, R. A short semi—synthesis and complete

NMR-spectroscopic characterization of the naturally occurring 1 ignan glycoside matairesinol 4, 4' -&Ϊ-0- β -D-diglucos ide. Carbohydrate Research, 2010, 345, 1963 1967)的方法制备。

在另一个优选的实施方案中， 本发明还提供了一种式 1 化合物 2, 3,4,6-四- 0-苯甲酰基- β-D-吡喃葡萄糖- (1→4) -1, 6: 2, 3-双脱 水 - β -D-吡喃甘露糖的制备方法： 使式 11 化合物和式 4 化合物 1, 6: 2, 3-双脱水- β -D-吡喃甘露糖在活化剂存在下进行糖苷化反应 ， 得到式 1化合物 2, 3, 4， 6-四 -0-苯甲酰基- β -D-吡喃葡萄糖- (1→4) -1, 6: 2, 3 -双脱水- β _D-吡喃甘露糖， 其中， 式 11化合物中 R ₂ 选自烷基或芳基， R ₂ 优选自甲基， 乙基， 丙基， 丁基， 异丙基、 苯基， 对甲基苯基等。

该反应在溶剂存在下进行， 可在乙酸乙酯、 乙酸甲酯、 N， N-二甲 基甲酰胺、 乙醚、 甲基叔丁基醚、 四氢呋喃、 2-甲基四氢呋喃、 二氧 六环、 乙腈、 硝基甲烷、 二氯甲炕、 1, 2-二氯乙炕、 甲苯中的一种 或者它们的混合溶剂中进行， 所述活化剂选自 N- 代丁二酰亚胺、 三甲基硅基三氟甲熄磺酸酯、 三乙基硅基三氟甲熄磺酸酯、叔丁基二 甲基硅基三氟甲熄磺酸酯、 三氟甲焼磺酸、 三氟甲坑磺酸银、 三氟甲 烷磺酸甲酯、 N-溴代丁二酰亚胺、 三氟甲烷磺酸甲酯、 二甲基甲硫基 硫鑰三氟甲熄磺酸盐、 鑰二可力丁过氯酸盐或 鑰二可力丁三氟甲 烷磺酸盐中的一种或几种。

其中， 式 11化合物可参考文献（Balavoine, G.； Berteina, S.； Gref , A.； Fischer, J.； Lubineau, A. Thioglycos ides as potential glycosyl donors in electrochemical glycosylation reactions, part 1: their preparation and reactivity toward simple alcohols. Journal of Carbohydra te Chemistry, 1995, 14, 1217 1236; Sail, D.； Kovac, P. Benzoylated ethyl 1-thioglycosides: direct preparation from per-O-benzoyla ted sugars. Carbohydra te Research, 2012, 357, 47-52)的方法制备。

在另一个优选的实施方案中， 本发明还提供了一种式 7化合物 β -D-吡喃葡萄糖- (1→ 4) - 1， 6: 2, 3-双脱水- β _D-吡喃甘露糖的制备方 法： 使式 1化合物 2， 3， 4, 6-四- 0-苯甲酰基 - β -D-吡喃葡萄糖- （1→ 4) -1 , 6: 2 , 3-双脱水- β -D-吡喃甘露糖在碱性试剂作用下进行水解 四个苯甲酰基， 得到式 7化合物： 其中， 碱性试剂选自氢氧化钠、 氢氧化钾、 甲醇钠、 乙醇钠、 三 乙胺、 氨、 肼， 反应溶剂选自水， 甲醇、 乙醇或它们的混合物。

在另一个优选的实施方案中， 本发明还提供了一种式 12 化合物 2 , 3, 4， 6-四- 0-乙酰基- β - D-吡喃葡萄糖-（1→4) - 1， 6: 2, 3-双脱水- β -D-吡喃甘露糖的制备方法：使式 1 3化合物五 -0-乙酰基 _ α / β -D- 吡喃葡萄糖和式 4化合物 1， 6: 2, 3-双脱水- β -D-吡喃甘露糖在活化 剂存在下进行糖苷化反应， 得到式 12化合物 2, 3, 4, 6-四 -0-乙酰基- β -D-吡喃葡萄糖- (1→4) _1，6: 2，3-双脱水_ _0-吡喃甘露糖，

13 12

读反应在溶剂存在下进行， 可在乙酸乙酯、 乙酸甲酯、 Ν， Ν-二 甲基甲酰胺、 乙醚、 甲基叔丁基醚、 四氢呋喃、 2 -甲基四氢呋喃、 二 氧六环、 乙腈、 硝基甲炕、 二氯甲垸、 1， 2 -二氯乙烷、 甲苯中的一 种或者它们的混合溶剂中进行， 所述活化剂选自三氟化硼乙醚络合 物、 三甲基硅基三氟甲熄蟥酸酯、 三乙基硅基三氟甲坑磺酸酯、 叔丁 基二甲基硅基三氟甲坑磺酸酯、 三氟甲熄磺酸、 三氟甲熄磺酸酐、 三 氟甲熄磺酸银、 溴化锌或吡啶对甲苯磺酸盐中的一种或几种。

其中， 式 13化合物五 -0-乙酰基 -α/ β -D-吡喃葡萄糖可参考文 献（Sudibya, H. G.； Ma, J.； Dong, X.； Ng, S.； Li, L.. J. ； Liu, X. W.； Chen, P. Interfacing glycosylated carbon-nano tube-network devices with living cells to detect dynamic secretion of biomolecules. Angewandte Chemie, International Edition, 2009, 48， 2723 2726 ) 的方法制备。

在另一个优选的实施方案中， 本发明还提供了一种式 12 化合物

2， 3， 4， 6-四 -0 -乙酰基- β - D-吡喃葡萄糖 _(1→4)- 1， 6: 2, 3 -双脱水- β -D-吡喃甘露糖的制备方法： 使式 14化合物 2, 3, 4, 6-四 -0-乙酰基 _α / β -D-吡喃葡萄糖苷基三氯乙腈亚胺酯和式 4化合物 1, 6: 2, 3-双 脱水 -β -D-吡喃甘露糖在活化剂存在下进行糖苷化反应 ， 得到式 12 化合物 2, 3, 4, 6-四- 0-乙酰基 -β -D-吡喃葡萄糖- (1→4) -1, 6: 2, 3- 双脱水- β -D-吡喃甘露糖，

14 12 该反应在溶剂存在下进行， 可在乙酸乙酯、 乙酸甲酯、 Ν, Ν-二 甲基甲酰胺、 乙醚、 甲基叔丁基醚、 四氢呋喃、 2 -甲基四氢呋喃、 二 氧六环、 乙腈、 硝基甲烷、 二氯甲烷、 1, 2 -二氯乙烷、 甲苯中的一 种或者它们的混合溶剂中进行， 所述活化剂选自三氟化硼乙醚絡合 物、 三甲基硅基三氟甲熄蟥酸酯、 三乙基硅基三氟甲坑磺酸酯、 叔丁 基二甲基硅基三氟甲坑磺酸酯、 三氟甲熄磺酸、 三氟甲熄磺酸酐、 三 氟甲熄磺酸银、 溴化锌或吡啶对甲苯磺酸盐中的一种或几种。

其中， 式 14化合物 2， 3， 4， 6-四 -0-乙酰基 -α/ β-D-吡喃葡萄糖 苷基三氯乙腈亚胺酯可参考文献（ Ban, L.； Mrksich, M. On-chip synthesis and label—free assays of oligosaccharide arrays. Angewandte Che le, International Edition, 2008, 47, 3396 3399 ； Blattner, R. ; Furneaux, R. H. ; Pakulski, Z.

1, 3-Dideoxynoj ir imycin-3-yl glycosides of β - (1→ 3) - and β - (1 → 6) -1 inked gluco-ol igosaccha rides. Carbohydrate Research, 2006, 341, 2115-2125 ) 的方法制备。

在另一个优选的实施方案中， 本发明还提供了一种式 12 化合物

2, 3, 4, 6-四- 0-乙酰基- β - D-吡喃葡萄糖-（1→4)- 1, 6: 2, 3-双脱水- β -D-吡喃甘露糖的制备方法： 使用式 15 化合物和式 4 化合物 1, 6: 2, 3-双脱水- β -D-吡喃甘露糖在活化剂存在下进行糖苷化反应 ， 得到式 12化合物 2, 3, 4, 6-四- 0-乙酰基 - β -D -吡喃葡萄糖- （1→4) -1, 6: 2, 3 -双脱水- β _D-吡喃甘露糖，

15 12

其中， 式 15化合物中 R ₂ 选自烷基或芳基， R ₂ 优选自曱基、 乙基、 丙 基、 丁基、 异丙基、 苯基、 对甲基苯基等； 读反应在溶剂存在下进行， 可在乙酸乙酯、 乙酸甲酯、 N， N-二 甲基甲酰胺、 乙醚、 甲基叔丁基醚、 四氢呋喃、 2 -甲基四氢呋喃、 二 氧六环、 乙腈、 硝基甲炕、 二氯甲垸、 1， 2 -二氯乙烷、 甲苯中的一 种或者它们的混合溶剂中进行， 所述活化剂选自 N- 代丁二酰亚胺、 三甲基硅基三氟甲烷磺酸酯、 三乙基硅基三氟甲烷磺酸酯、叔丁基二 甲基硅基三氟甲熄磺酸酯、 三氟甲焼磺酸、 三氟甲坑磺酸银、 三氟甲 烷磺酸甲酯、 N-溴代丁二酰亚胺、 三氟甲熄磺酸甲酯、 二甲基甲硫基 硫鑰三氟甲熄磺酸盐、 鑰二可力丁过氯酸盐或 鑰二可力丁三氟甲 燒磺酸盐中的一种或几种。

式 15化合物可参考文献（Zhang, F.； Zhang, W.； Zhang, Y.；

Curran, D. P.； Liu, G. Synthesis and applications of a 1 ight-f luorous glycosyl donor. Journa 1 of Organic Chemistry, 2009, 74, 2594-2597; Houdier, S.； Vottero, P. J. A. Synthesis of benzylated eye loi soma 1 tot etraose. Car bo hydra te Research, 1993, 248, 377-384 ) 的方法制备。

式 7 化合物 _0_吡喃葡萄糖-(1→4)_1，6: 2，3_双脱水_ _0_吡 喃甘露糖和式 12化合物 2, 3, 4, 6-四 -0-乙酰基 -β-D-吡喃葡萄糖-（1 →4) -1, 6: 2, 3 -双脱水- β _D -吡喃甘露糖可以参考文献（ Boeckel, C. A. A.； Beetz, T.； Vos, J. N.； Jong, A. J. M. ; Aelst, S. F. V.； Bosch, R. H.； Mertens, J. M. R. ; Vlugt, F. A.； Synthesis of a pentasaccharide corresponding to the anti thrombin III binding fragment of heparin. Journal of Carbohydrate Chemistry, 1985， 4， 293 321; Petitou, M. ; Jaurand, G. ; Derrien, M.； Duchaussoy, P.; Choay, J. A new, highly potent, hepar in-1 ike pentasaccharide for fragment containing a glucose residue instead of a glucosamine. Bioorg. Med. Chem. Lett. , 1991, 1, 95-98; Boeckel, C. A. A.； Petitou, M. Angeiv. Chem. Int. Ed. Engl. , 1993, 32, 1671-1690. ) 的方法应用到蟥达肝癸钠等类 肝素化合物的合成中， 化学转化过程如下所示：

本发明在提供了 DC二糖中间体及其制备方法的同时， 还提供了 该类二糖中间体在制备肝素、 类肝素化合物中的用途。

本发明所述的类肝素化合物为包含肝素五糖等 在内的具有肝素 类似结构的一类化合物。

优选地， 所述类肝素化合物为肝素五糖。

进一步优选地 , 所述肝素五糖是磺达肝癸钠。 本发明的技术方案具有以下至少一项优点：

本发明克服了现有技术中的不足和缺点， 反应条件温和， 所用试 剂廉价、 毒性低； 而且本发明所用的糖苷化反应产率高， 立体选择性 好， 反应产物均为单一的 β构型产物， 未发现 α构型产物生成， 其分 离纯化也可通过重结晶方法进行； 本发明工艺路线筒短， 操作过程筒 便， 成本低廉， 中间体可以通过重结晶方法进行纯化， 适合于工业化 规模制备。 其中合成式 12化合物的反应立体选择性高， 分离纯化筒 单， 较现有文献公开的方法更好； 合成式 1化合物的反应立体选择性 高， 后处理筒单， 产率高。 具体实施方式 实施例一： 2， 3， 4， 6-四 -0-乙酰基 - β _D_吡喃葡萄糖- （1 ^→ 4) -1, 6: 2, 3-双脱水- β -D-吡喃甘露糖的制备

将 4. 6克五 -0-乙酰基 - α / β _D_吡喃葡萄糖和 1. 0克 1 , 6: 2, 3- 双脱水 - β -D-吡喃甘露糖溶解于 100 毫升二氯甲烷中， 降温至零下 20度， 加入 1. 9毫升三氟化硼乙醚， 然后将反应体系自然升温至室 温， 搅拌直至反应完全， 加入少量三乙胺淬灭反应， 用碳酸氢钠饱和 溶液洗涤， 分液， 有机相用无水硫酸钠干燥， 减压浓缩， 粗产品用快 速柱层析纯化， 得产品 2，3，4，6_四_0_乙酰基- _0-吡喃葡萄糖_ (1 →4) -1, 6: 2, 3-双脱水 -β-D-吡喃甘露糖 2. 1克， 产率 64%。

1H NMR (400 MHz, CDC13)： δ 5.69 (d, J= 2.8 Hz, 1 H)， 5. 24 (t, / = 9.6 Hz, 1 H) , 5. 10 (t, / = 9.6 Hz, 1 H) , 5. 03 (t, / = 8.4 Hz, 1 H), 4.77 (d， / = 8.0 Hz, 1 H) , 4.43 (d, / = 5. 2 Hz, 1 H) , 4.26 (dd, J, = 12.4 Hz, 7 ₂ = 5.2 Hz, 1 H)， 4.16 (d, J = 12.4 Hz, 1 H), 3.93 (s, 1 H), 3.77-3.71 (m, 3 H) , 3.47 (s, 1 H) , 3.30 (d, /= 2.4 Hz, 1 H) , 2.09 (s, 3 H) , 2.07 (s, 3 H) , 2.04 (s, 3 H) , 2.02 (s 3 H); 13C NMR (100 MHz, CDC13): δ 170.5, 170.2, 169.3, 169.2, 100.2, 97.6, 74.7， 72.6, 72.1, 71.8， 71.2, 68.2， 65.6， 61.8， 54. 5, 48.1, 20.7, 20.6, 20. 5, 20.5; ESI-MS m/z 475.2 [M+H ⁺ ] . 实施例二： 2, 3, 4, 6-四 -0-苯甲酰基- β _D-吡喃葡萄糖-（1→ 4) -1, 6: 2, 3-双脱水- β -D-吡喃甘露糖的制备 将 7. 3克五 -0-苯甲酰基 -α/ β -D-吡喃葡萄糖和 1. 0克 1, 6: 2, 3- 双脱水 - β -D-吡喃甘露糖溶解于 100 毫升二氯甲烷中， 降温至零下 20度， 加入 1. 3毫升三氟化硼乙醚， 然后将反应体系自然升温至室 温， 搅拌直至反应完全， 加入少量三乙胺淬灭反应， 用碳酸氢钠饱和 溶液洗涤， 分液， 有机相用无水硫酸钠干燥， 减压浓缩， 粗产品用快 速柱层析纯化， 得产品 2, 3, 4, 6-四 -0-苯甲酰基- β -D-吡喃葡萄糖- (1→4) - 1，6: 2，3_双脱水 _β- D -吡喃甘露糖 2.4克， 产率 47%。 'Η NMR (400 MHz, CDC1 ₃ ): δ 8.01 7.26 (m, 20 H) , 5.94 (t, J = 9.6 Hz, 1 H) , 5.68 (t, J = 9.6 Hz, 1 H) , 5.64 (d, / = 2.8 Hz, 1 H) , 5.58 (dd, = 9.6 Hz, = 8.0 Hz, 1 H) , 5.17 (d, / = 8. 0 Hz, 1 H), 4.69 (dd, J, = 12 Hz, = 2.8 Hz, 1 H)， 4.49 (dd, = 12 Hz, J ₂ = 5.6 Hz, 1 H) , 4.42 (d, / = 6 Hz, 1 H) , 4.22 (m, 1 H), 3.97 (s， 1 H) , 3.60 (m, 2 H)， 3.41 (t, / = 3.2 Hz, 1 H) , 3.34 (d, /= 3.2 Hz, 1 H); ¹³ C丽 R (100 MHz, CDC13): δ 166.1, 165.8, 165.2， 165. 0, 133.6, 133.4, 133. 3, 133.2, 129.9， 129.8, 129. 7， 129.6， 129.5, 129.1， 128.7, 128.6， 128. 5, 128. 3, 100.8, 97. 5, 75. 1, 72.8, 72.6, 72.1, 71.8, 69.6, 65.9, 62.9, 54.6, 48.1; ESI— MS m/r. 111.9 [M+H+]。 实施例三： 2, 3, 4, 6-四 -0_乙酰基 - β _D_吡喃葡萄糖- （1→ 4) -1, 6: 2, 3-双脱水- β -D-吡喃甘露糖的制备

将 3.5 克对甲基苯基 -2， 3, 4， 6-四- 0-乙酰基 -1-硫代- a / β -D- 吡喃葡萄糖苷和 1.0克 1, 6: 2, 3-双脱水- β -D-吡喃甘露糖溶解于 100 毫升二氯甲烷， 加入 5. 0克 4Α分子筛。 将反应溶液冷却至零下 30 度， 加入 1.7克 代丁二酰亚胺和 0.07毫升三氟甲熄磺酸， 自然升 温至 0°C反应。 待反应完全后加入饱和碳酸氢钠水溶液淬灭反 应， 分 液， 有机相中用 1.0M硫代硫酸钠水溶液洗涤， 分液， 有^ ¾用无水 硫酸钠干燥， 減压浓缩，粗产品用快速柱层析纯化，得产品 2, 3, 4, 6- 四- 0-乙酰基- β - D_吡喃葡萄糖- (1→ 4) -1, 6: 2, 3 -双脱水- β _D -吡 喃甘露糖 2. 7克， 产率 82%。 实施例四： 2, 3, 4, 6-四 - 0_乙酰基 - β _D_吡喃葡萄糖- (1→ 4) -1, 6: 2, 3 -双脱水- β _D-吡喃甘露糖的制备

将 3. 8 克对甲基苯基 -2， 3, 4， 6-四- 0-乙酰基 -1-硫代- a / β -D- 吡喃葡萄糖苷和 1. 0克 1， 6: 2， 3-双脱水- β -D-吡喃甘露糖溶解于 100 毫升二氯甲烷， 加入 5. 0克 4Α分子筛。 将反应溶液冷却至零下 30 度， 加入 3. 1克 代丁二酰亚胺和 0. 25毫升三甲基硅基三氟甲熄磺 酸酯， 自然升温至 0°C反应。 待反应完全后加入饱和碳酸氢钠水溶液 淬灭反应， 分液， 有机相用 1. 0 M硫代硫酸钠水溶液洗涤， 分液， 有 机相用无水硫酸钠干燥， 减压浓缩， 粗产品用快速柱层析纯化， 得产 品 2, 3, 4, 6-四- 0-乙酰基 - β -D-吡喃葡萄糖- (1→4) -1 , 6: 2, 3-双脱 水- β -D-吡喃甘露糖 3. 0克， 产率： 91%。 实施例五： 2， 3， 4, 6-四 -0 -苯甲酰基- β _D_吡喃葡萄糖- （1→4) -1, 6: 2, 3-双脱水- β -D-吡喃甘露糖的制备 将 5. 8 克对甲基苯基 -2, 3, 4, 6-四 -0-苯甲酰基 -1 -硫代 - c / β -D-吡喃葡萄糖苷和 1. Q克 1， 6: 2, 3-双脱水- β -D-吡喃甘露糖溶解于 100毫升二氯甲烷， 加入 5. 0克 4Α分子筛。 将反应溶液冷却至零下 30度， 加入 1.7克 代丁二酰亚胺和 0.07毫升三氟曱烷磺酸， 自然 升温至 0 反应。 待反应完全后加入饱和碳酸氢钠水溶液淬灭反 应， 分液， 有机相用 1.0M硫代硫酸钠水溶液洗涤， 分液， 有^ 目用无水 硫酸钠干燥， 减压浓缩，粗产品用快速柱层析纯化，得产品 2， 3, 4， 6- 四- 0-苯甲酰基 - β -D-吡喃葡萄糖- (1→4) - 1, 6: 2, 3-双脱水 - β - D- 吡喃甘露糖 4.6克， 产率 92%。 实施例六： 2， 3， 4, 6-四 -0 -苯甲酰基- β _D_吡喃葡萄糖- （1→ 4) -1, 6: 2, 3 -双脱水- β _D-吡喃甘露糖的制备 将 2.9 克对甲基苯基 _2， 3， 4， 6_四- 0 -苯甲酰基 _1 -硫代 -α / β _D-吡喃葡萄糖苷和 0.54克 1, 6: 2, 3-双脱水- β -D-吡喃甘露糖溶解 于 90毫升甲苯， 加入 3.0克 4Α分子筛。 将反应溶液冷却至零下 30 度， 加入 1.7克 代丁二酰亚胺和 0.07毫升三氟甲烷磺酸， 自然升 温至 o°c反应。 待反应完全后加入饱和碳酸氢钠水溶液淬灭反 应， 分 液， 有机相用 1. 0M硫代硫酸钠水溶液洗涤， 分液， 有机相用无水硫 酸钠干燥， 减压浓缩， 粗产品用快速柱层析纯化， 得产品 2, 3, 4, 6- 四- 0-苯甲酰基 - β -D-吡喃葡萄糖- (1→4) - 1, 6: 2， 3-双脱水 - β - D- 吡喃甘露糖 2.1克， 产率 78%。 实施例七： 2， 3， 4， 6-四-0_乙酰基- _0_吡喃葡萄糖- （1 ^→ 4) -1, 6: 2, 3 -双脱水- β _D-吡喃甘露糖的制备 将 5.9克 2, 3, 4, 6-四 -0-乙酰基 _α/ β _D-吡喃葡萄糖苷基三氯 乙腈亚胺酯和 1.2克 1, 6: 2, 3-双脱水- β -D-吡喃甘露糖溶解于 100 毫升二氯甲烷。 将反应溶液冷却至零下 20度， 加入 1.48毫升三氟化 硼乙醚。 待反应完全后加入饱和碳酸氢钠水溶液淬灭反 应， 分液， 有 机相用 1.0Μ硫代硫酸钠水溶液洗涤， 分液， 有机相用无水硫酸钠干 燥， 减压浓缩， 粗产品用快速柱层析纯化， 得产品 2， 3,4， 6-四 -0-乙 酰基 _β- D-吡喃葡萄糖- （1→4) - 1，6:2，3-双脱水 -β-D-吡喃甘露糖 3.5克， 产率： 89%。 实施例八： 2，3，4，6-四-0_乙酰基- _0_吡喃葡萄糖- （1→ 4) -1, 6: 2, 3-双脱水- β -D-吡喃甘露糖的制备 将 3.2克 2, 3, 4, 6-四 _0_乙酰基 _α/ β _D-吡喃葡萄糖苷基三氯 乙腈亚胺酯和 0.85克 1, 6: 2, 3-双脱水- β -D-吡喃甘露糖溶解于 70 毫升乙腈。 将反应溶液冷却至零下 20度， 加入 0.7毫升三氟化硼乙 醚。 待反应完全后加入饱和碳酸氢钠水溶液淬灭反 应， 分液， 有机相 用 1.0 Μ硫代硫酸钠水溶液洗涤， 分液， 有机相用无水硫酸钠干燥， 减压浓缩， 粗产品用快速柱层析纯化， 得产品 2, 3, 4, 6-四 -0-乙酰基 -β-D-吡喃葡萄糖- (1→4) _1， 6: 2， 3-双脱水 -β-D-吡喃甘露糖 1.73 克， 产率： 62%。 实施例九： 2，3，4，6-四-0_乙酰基- _0_吡喃葡萄糖- （1→ 4) -1, 6: 2, 3-双脱水- β -D-吡喃甘露糖的制备 将 5.9克 2, 3, 4, 6-四 -0-乙酰基 _α/ β _D-吡喃葡萄糖苷基三氯 乙腈亚胺酯和 1.2克 1， 6: 2， 3-双脱水- β -D-吡喃甘露糖溶解于 100 毫升二氯甲烷， 加入 5. Q克 4Α分子筛。 将反应溶液冷却至零下 20 度， 加入 0.25毫升三甲基硅基三氟甲熄磺酸酯。 待反应完全后加入 饱和碳酸氢钠水溶液淬灭反应， 分液， 有机相用 1.0Μ硫代硫酸钠水 溶液洗涤， 分液， 有机相用无水硫酸钠干燥， 减压浓缩， 粗产品用快 速柱层析纯化， 得产品 2， 3，4， 6_四_0_乙酰基- _0-吡喃葡萄糖_ (1 →4) -1,6: 2, 3_双脱水 -β-D-吡喃甘露糖 3.4克， 产率： 86%。 实施例十： 2, 3, 4,6-四 -0 -苯甲酰基- β _D_吡喃葡萄糖- （1→ 4) -1, 6: 2, 3-双脱水- β -D-吡喃甘露糖的制备

将 5.0克 2, 3, 4, 6 -四- 0-苯甲酰基 _α/ β -D-吡喃葡萄糖苷基三 氯乙腈亚胺酯和 0.65 克 1,6: 2， 3-双脱水 -β-D-吡喃甘露糖溶解于 100毫升二氯甲烷。 将反应溶液冷却至零下 20度， 加入 0.83毫升三 氟化硼乙醚。待反应完全后加入饱和碳酸氢钠 水溶液淬灭反应 ,分液， 有机相用 1.0M硫代硫酸钠水溶液洗涤， 分液， 有机相用无水硫酸钠 干燥， 减压浓缩， 粗产品用快速柱层析纯化， 得产品 2, 3, 4, 6-四 -0- 苯甲酰基 -β-D-吡喃葡萄糖- (1→4) _1，6: 2， 3 -双脱水 -β -D-吡喃甘 露糖 2.9克， 产率： 89%。 实施例十一： 2, 3, 4, 6-四 -0-苯甲酰基- β -D-吡喃葡萄糖- （1→ 4) -1, 6: 2, 3 -双脱水- β _D-吡喃甘露糖的制备

将 7. 0克 2, 3, 4, 6 -四- 0-苯甲酰基- α / β -D-吡喃葡萄糖苷基三 氯乙腈亚胺酯和 1.0克 1， 6: 2， 3-双脱水- β -D-吡喃甘露糖溶解于 100 毫升二氯甲烷。 将反应溶液冷却至零下 20度， 加入 0.2克三氟甲烷 續酸。 待反应完全后加入饱和碳酸氢钠水溶液淬灭反 应， 分液， 有机 相用无水硫酸钠干燥， 减压浓缩， 粗产品用快速柱层析纯化， 得产品 2, 3, 4, 6-四- 0-苯甲酰基- β-D-吡喃葡萄糖- (1→4) -1, 6: 2, 3-双脱 水- β _D-吡喃甘露糖 4.3克， 产率： 86%。 实施例十二： β _D_吡喃葡萄糖- （1→ 4) -1， 6: 2, 3 -双脱水- β _D -吡 喃甘露糖的制备

将 1.0 克 2, 3, 4, 6 -四- 0-苯甲酰基- β -D-吡喃葡萄糖- (1→4) -1， 6: 2， 3-双脱水 - β -D-吡喃甘露糖与 20 毫升无水甲醇混合， 加入 0.04 克甲醇钠， 室温搅拌至反应完全。 加入稀盐酸淬灭反应， 减压 浓缩。 粗品用快速柱层析纯化， 得产品 β -D-吡喃葡萄糖- （1→4) _1，6: 2，3_双脱水_ _0-吡喃甘露糖0. 39克， 产率： 92%。

'Η NMR (400 MHz, D ₂ 0)： δ 5.85 (d, 7= 2.4 Hz, 1 H) , 4.70 (d, /= 7.6 Hz, 1 H) , 4.67 (m, 1 H) , 4.23(s, 1 H) , 3.91 (dd, J _} = 12.8 Hz, Λ = 2. 0 Hz, 1 H) , 3.78-3.71 (m, 3 H) , 3.65 (t, / = 3.6 Hz, 1 H), 3.53-3.42 (m, 4 H)， 3.33(m, 1 H); ¹³ C NMR (100 MHz, D ₂ 0) : 5102.3， 97.1, 76.0, 75.6, 74.0, 73.0, 72.1， 69. 5, 65. 3, 60.6, 54.2, 48.4; E SI-MS m/z. 329.1 [M+Na ⁺ ]。 实施例十三： β -D-吡喃葡萄糖- （1→4) - 1，6: 2，3_双脱水 -β -D -吡 喃甘露糖的制备

将 1.0 克 2， 3， 4, 6 -四 -0-苯甲酰基 -β -D-吡喃葡萄糖- (1→4) -1, 6: 2, 3-双脱水- β -D-吡喃甘露糖溶解于 10毫升无水甲醇和 10毫 升四氢呋喃的混合溶液中， 加入 1.0 Μ氢氧化钠水溶液 10毫升， 搅 拌至反应完全。 加入稀盐酸淬灭反应， 减压浓缩。 粗品用快速柱层析 纯化， 得产品 β -D-吡喃葡萄糖- （1→4) - 1，6: 2，3_双脱水 - β -D -吡 喃甘露糖 Q. 35克， 产率 83%。