Группа изобретений относится к медицинской микробиологии, фармацевтической промышленности, в частности к вакцинным препаратам, а именно, к вакцинам для лечения и профилактики стафилококковой инфекции, способов их изготовления, способов лечения и профилактики, и может быть использована для специфической иммунотерапии взрослых и детей, страдающих острой или хронической (в стадии обострения) стафилококковой инфекцией (фурункулез, гидраденит, панариций, флегмона, пиодермия, остеомиелит, мастит, воспалительные гинекологические, урологические, отоларингологические заболевания, ларинго-трахеиты, бронхиты, пневмонии и т.п.), больных с клиническими проявлениями хронической стафилококковой инфекции как альтернатива антибиотикам или как метод дополнительного лечения совместно с антибиотиками при септических состояниях, представляющих угрозу для жизни.

Известен штам Stahpylococcus aureus N°44 для изготовления иммунобиологических препаратов, изолированный из сердца теленка, больного пневмоэнтеритом, депонирован и который сохраняется в Депозитарии Государственного научно-контрольного института биотехнологии и штаммов микроорганизмов (г. Киев), регистрационный номер 541, Семья Micrococcacea, Род Stahpylococcus, Вид Stahpylococcus aureus [UA N° 115553 U, C12N 1/20, 2017].

Штамм Stahpylococcus aureus N°44 предназначен для использования в качестве одного из компонентов в технологии изготовления инактивированной вакцины для специфической профилактики стрептококковых, энтерококковых и стафилококковых инфекций животных (вакцина CCIT).

Вакцина CCIT предназначена для профилактического использования в ветеринарной медицине и не предназначена для применения в клинической медицине у людей. Штамм 44 Staphylococcus aureus не имеет указаний на степень чувствительности/устойчивости к антибиотикам.

Известна инактивированная стафилококковая вакцина для лечения мастита у коров [CN 101979089 С1, 2011].

Вакцина предназначена для использования в ветеринарной медицине для животных и не может быть использована в клинической практике для людей. Известна вакцина, в которой содержится только один депонированный штамм золотистого стафилококка, что значительно сужает его антигенный состав и, соответственно, иммунологический ответ на вакцинацию. Вакцина предназначена для применения у животных - морских млекопитающих и не предназначена для применения у людей [CN 108048364 С1, 2018.

Известна статья Никулина Ю.Ю. Биологические свойства бактерий рода Staphylococcus, выделенных от пациентов Днепропетровской клинической больницы им. И.И. Мечникова. Вестник Днепропетровского университета, 2011, вып.2, т.1, с.101-106. Дана оценка биологических свойств 494 штаммов бактерий рода Staphylococcus, выделенных из патологического материала от пациентов 15 отделений большой областной больницы г. Днепр, по сути - госпитальных штаммов и определение их чувствительности к антибиотикам различных фармгруп. Клинический материал для культуральных бактериологических исследований получали из ликвора, мочи, мокроты, из ран различного происхождения, носа, горла, глаз, влагалища. Выделенные штаммы не проходили процедуру депонирования. Авторы статьи изучали чувствительность выделенных штаммов стафилококков к различным антибиотикам с целью подбора тех препаратов, к которым бактерии, возбудители различных заболеваний, еще сохранили восприимчивость и не имели в виду создание и использование в лечебных целях стафилококковой вакцины.

Известна бесклеточная антистафилококковая вакцина для лечения хронической стафилококковой инфекции, отличающаяся содержанием термолабильних и термостабильных белковополисахаридной природы антигенов клеточной стенки S. aureus, использованием штаммов N 1991, 1986 S.aureus, характеризующихся высокой иммуногенностью: ED50=20-100 млн микробных клеток, слабой вирулентностью: PD50=0,5-2,0 млрд микробных клеток, низким содержанием белка, слабой аллергенной активностью [RU !N 95120818 А, А61К 39/116, 1998].

В состав вакцины входит только один стафилококк - золотистый, из-за чего она недостаточно эффективна.

Наиболее близкой к заявленной вакцине является вакцина против стафилококка - анатоксин стафилококковый, в которой активное вещество представлено токсином стафилококка (стерильный фильтрат бульонной культуры золотистого стафилококка, содержащего экзотоксин), предварительно частично инактивированным с помощью формалина и тепловой энергии. Анатоксин стафилококковый является стерильным фильтратом бульонной культуры золотистого стафилококка, содержащий экзотоксин, обезвреженный формалином. Кроме того, из препарата изъято микробную биомассу и все балластные белки, что делает его более очищенным. 1 мл суспензии содержит от 10 до 14 так называемых единиц связывания [htp://mednarodna.com.ua/9903-anatoksin- stafilokokkovyy.html] .

В анатоксине стафилококковом присутствует только ослабленный стафилококковый токсин, поэтому вакцина недостаточно эффективна. Анатоксин имеет недостаточно широкие функциональные возможности: возраст пациентов, которым назначают анатоксин, ограничен от 16 до 60 лет, то есть для детей он не предназначен. Анатоксин также может вызвать аллергические реакции.

Известен способ получения анатоксина стафилококкового очищенного жидкого для специфической иммунотерапии больных стафилококковой инфекцией, включающий перевод токсина в анаформу с помощью обработки формальдегидом, очистки анатоксина путем обработки сухим хлоридом натрия, осаждения трихлоруксусной кислотой, сепарацию, растворение осадка в 0,9% -ном растворе хлорида натрия, обработку этиловым спиртом, отделения осадка центрифугированием и растворения в 0,9%-ном растворе хлорида натрия до содержания 12 ЕС в 1 мл при остаточном формальдегиде не более 0,003 % [RU 2169580 Cl, А61К 39/085, 2001].

Известен также способ получения стафилококковой анатоксин-вакцины, включающий детоксикацию экзо-, эндо- и суперэнтеротоксинов в суспензии с автоклавированными стафилококками раствором формалина, сорбцию на гидроксиде алюминия, стерилизацию. Детоксикацию стафилококковых токсинов проводят двумя детоксикаторами - сначала 0,2%-ным раствором формалина в течение 7-9 суток при 40- 45°С, а затем 0,6±0,1%-ным раствором этония в течение 7-9 суток при 40-45°С, при этом концентрацию инактивированных токсинов с микроорганизмами увеличивают вдвое путем декантации 50±5% надосадочной жидкости [RU N°2008115050 А, А61К 39/085, 2009].

В обоих аналогах способа при получении стафилококковой анатоксин-вакцины используют формальдегид, что снижает иммуногенный эффект вакцины и иммунологические и положительные клинические ответы после вакцинации.

Известен способ изготовления вакцины, ассоциированной против эшерихиоза, стрептококкоза и стафилококкоза крупного рогатого скота, включающий получение антигенов с последующим их смешиванием, внесение адъюванта, при этом проводят отбор патологического материала от больного и павшего крупного рогатого скота из местного эпизоотического очага, потом из отобранного патологического материала готовят суспензию и дальше делают посев на дифференциально-диагностически� � среды, после чего выделяют клетки чистых культур возбудителя эшерихиоза Escherichia coli, стрептококкоза Streptococcus pneumoniae и стафилококкоза Staphylococcus aureus, потом отдельно выращивают клетки чистых культур возбудителей эшерихиоза, стрептококкоза и стафилококкоза в мясо-пептонном бульоне с добавлением глюкозы до 0,2%-ной концентрации с титром 4-5 млрд микробных клеток в 1 см ³ , после этого отдельно инактивируют клетки чистых культур возбудителей эшерихиоза, стрептококкоза и стафилококкоза формалином до 0,4-0,5%-ной конечной концентрации при температуре 37 °С в течение 72-96 часов при периодическом перемешивании, затем смешивают клетки чистых культур возбудителей эшерихиоза Escherichia coli, стрептококкоза Streptococcus pneumoniae и стафилококкоза Staphylococcus aureus в равных соотношениях, затем в смесь инактивированных клеток чистых культур вносят адъювант - гидроокись алюминия в количестве 20% к объему, тщательно смешивают, а перед фасовкой тщательно перемешивают конечный продукт [RU 2538158 Cl, А61К 39/188, 2015].

Этот способ предназначен для использования в ветеринарной медицине и не используется для лечения людей, не рекомендуется для использования в научно- исследовательских и производственных учреждениях и для клинического применения.

В способе изготавливается ассоциированная вакцина, содержащая возбудители трех распространенных болезней крупного рогатого скота (кишечную палочку, стрептококки и стафилококки), что уменьшает антигенную нагрузку каждого из них в одной дозе вакцины и предназначено для одновременного лечения эшерихиоза, стрептококкоза и стафилококкоза.

Возбудители заболеваний, используемые для изготовления указанной вакцины, получают от больных и павших животных (крупный рогатый скот) в «местных эпизоотических очагах», что неуместно для лечения гнойно-септических заболеваний у детей и взрослых. Для инактивации культур бактерий используют формалин, а как адъювант - гидроокись алюминия, составляющего 1/5 часть объема вакцины, существенно, что повышает уровень аллергогенности готового продукта при возможном использовании такой вакцины у людей.

Известен способ получения стафилококковой вакцины для лечения гнойных инфекций, включающий выращивание шести-восьми штаммов гноеродных стафилококков в жидкой питательной среде и стерилизацию биомассы. Культивирование шести-восьми штаммов гноеродных стафилококков, идентифицированных как Staphylococcus aureus, осуществляют порознь в течение 14-16 дней при температуре 37°С, затем культивируют порознь при температуре 3-5 °С в течение 6-8 суток, после чего полученный материал смешивают и сразу автоклавируют при температуре 115-125°С в течение 15-40 мин. [RU 2421240 С1,А61К 39/085, 2011]. Несмотря на декларацию, что полученная указанным способом стафилококковая вакцина может быть использована для профилактики и лечения гнойных инфекций у животных и человека, в описании данные об использовании этой вакцины у людей полностью отсутствуют. А именно:

- иммуногенный эффект вакцины, в частности, проверяли на кроликах;

- положительный эффект применения приведен на основании лечения животных с маститом в одном из животноводческих хозяйств Приволжского района Самарской области;

- дозировки вакцины приведены для животных и не предназначены для использования у людей;

- в вакцине использовали 6 штаммов стафилококка золотистого, выделенных от больных животных, что вряд ли уместно для лечения гайморита, конъюнктивита, бронхита, вагинита, простатита, пиелонефрита и др. у детей и взрослых.

Наиболее близким к заявляемому способу изготовления вакцины является способ получения стафилококковой вакцины для лечения гнойных инфекций, включая выращивание культур стафилококков в жидкой питательной среде и стерилизацию биомассы. Культивирование шести-восьми штаммов гноеродных стафилококков, идентифицированных как Staphylococcus aureus, осуществляют порознь в течение 14-16 дней при температуре 37 °С, затем культивируют порознь при температуре 3-5°С в течение 6-8 суток, после чего полученный материал смешивают и сразу автоклавируют при температуре 115-125°С в течение 15-40 мин. [RU °2009 136 113 А, А61К 39/085, 2011].

Использование только одного вида стафилококка - золотистого, содержащего 6-8 штаммов, сужает спектр действия и клиническую эффективность полученной вакцины.К тому же, получают такую стафилококковую вакцину достаточно долго - 24 суток.

Наиболее близким к заявляемому способу лечения является способ лечения путем введения анатоксина стафилококкового очищенного жидкого подкожно в область нижнего угла лопатки, поочередно в правую и левую стороны при каждой последующей инъекции. Полный курс лечения включает 7 инъекций препарата, осуществляют через 2 дня, в следующих нарастающих дозах: 0,1 - 0,3 - 0,5 - 0,7 - 0,9 - 1,2 - 1,5 мл. При быстром клиническом эффекте курс терапии по усмотрению лечащего врача может быть сокращен до 5 инъекций. Лечение анатоксином стафилококковым очищенным жидким может проводиться параллельно с общей и местной терапией, кроме сывороточных антистафилококковых препаратов, таких как антистафилококковый иммуноглобулин и антистафилококковая плазма [https://tabletki.ua/ Анатоксин-стафилококковый/] .

Так как в анатоксине стафилококковом присутствует только ослабленный стафилококковый токсин, вакцина недостаточно эффективна. Вакцинацию анатоксином стафилококковым делают только взрослым. Кроме того, при такой вакцинации возможны аллергические реакции.

В основу изобретения поставлена задача создания инактивированной жидкой стафилококковой вакцины, которая бы имела широкие функциональные возможности, эффективно лечила гнойно-воспалительные заболевания стафилококковой этиологии без аллергических реакций.

Вторая задача, поставленная в основу изобретения, это создание способа получения инактивированной стафилококковой жидкой вакцины, который бы расширил спектр действия и клиническую эффективность вакцины, а также уменьшил срок ее получения.

Третья задача, поставленная в основу изобретения, - создание способа лечения стафилококковой инфекции путем введения инактивированной стафилококковой жидкой вакцины для расширения функциональных возможностей, эффективного лечения гнойно- воспалительные заболевания стафилококковой этиологии без аллергических реакций.

Поставленную задачу решают тем, что инактивированная стафилококковая жидкая вакцина, включающая золотистый стафилококк (Staphylococcus aureus), согласно изобретению, содержит не менее 21-го штамма 3-х видов стафилококков, а именно: не менее 15 штаммов золотистого стафилококка (Staphylococcus aureus), 3 штаммов гемолитического стафилококка (Staphylococcus haemolyticus) и 3 штаммов эпидермального стафилококка (Staphylococcus epidermidis), в том числе штаммы бактерий с разной степенью антибиотикорезистентности, депонированные в Депозитарии Института микробиологии и вирусологии Национальной академий наук Украины:

Staphylococcus aureus депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7684;

Staphylococcus aureus депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7684,

Staphylococcus aureus депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7756;

Staphylococcus aureus депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7665;

Staphylococcus aureus депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7666

Staphylococcus aureus депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7782

Staphylococcus aureus депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7786;

Staphylococcus haemolyticus депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7712; Staphylococcus haemolyticus депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7731; Staphylococcus haemolyticus депонирован под регистрационным номером- ИМВ В-7766; Staphylococcus epidermidis депонирован под регистрационным номером - ИМВ В-7763.

В противоположность анатоксину стафилококковому, где присутствует только ослабленный стафилококковый токсин, в заявленной вакцине присутствует антигенный комплекс из цельных нежизнеспособных клеток термически инактивированных бактерий, корпускулярные термолабильные и термостабильные белковополисахаридные антигены клеточной стенки стафилококков и неослабленные стафилококковые токсины (преимущественно эндотоксины), что повышает иммуногенный эффект вакцины и усиливает иммунологический и положительный клинический эффект после вакцинации.

Вакцина может применяться как взрослым, так и детям, начиная с грудного возраста, что расширяет ее функциональные возможности.

В прототипе возможно развитие аллергических реакций при применении вакцины, а в заявленной вакцине аллергических реакций нет, более того, вакцина оказывает гипоаллергенный эффект с существенным снижением повышенных до лечения уровней IgE.

Вторую поставленную задачу решают тем, что в способе изготовления инактивированной стафилококковой жидкой вакцины, включающем выращивание культуры стафилококков на твердой питательной среде, инактивацию в автоклаве, согласно изобретению, вакцину готовят не менее чем из 21-го производственного клинического штамма 3-х различных видов стафилококков, выделенных при бактериологическом исследовании биологических субстратов, из мазков с кожи и слизистых оболочек: Staphylococcus aureus - 15 штаммов, Staphylococcus haemolyticus - 3 штамма, Staphylococcus epidermidis - 3 штамма определенной локации, выделенных при различных острых и хронических воспалительных заболеваниях бактериальной этиологии, агаровую культуру бактерий смывают с поверхности твердой питательной среды апирогенной дистиллированной водой и помещают в стерильные емкости, а для устранения примесей питательной среды штаммы бактерий отмывают дистиллированной водой путем центрифугирования при 1500-3000 об/мин. в течение 10-15 минут, выливая надосадочную жидкость, полученный осадок биомассы культуры бактериологического штамма, выращенного порознь, суспендируют в апирогенной дистиллированной воде для инъекций и стандартизируют, причем штаммы микроорганизмов берут в равных количествах, стандартизированную суспензию штаммов инактивируют в автоклаве при температуре 115- 125 °С и давлении 1 атм. в течение 15-40 минут, 15-40 минут, в емкости с инактивированными бактериями добавляют в равных количествах препарат эмбрионального происхождения, или физиологический раствор, или воду для инъекций и получают суспензию микробных клеток, для контроля стерильности образцы вакцины высевают на питательный бульон, посевы инкубируют в термостате при температуре 35- 40°С в течение 24-48 часов, и при отсутствии роста добавляют консервант и разливают вакцину в стерильные ампулы.

В способе используют 24-часовую агаровую культуру.

В качестве препарата эмбрионального происхождения используют эрбисол или инфламафертин.

Штаммы бактерий отмывают дистиллированной водой путем трехкратного центрифугирования.

Осадок стандартизируют в соответствии со стандартом МАК Фарленд (McF) с оптической плотностью 1,0, что соответствует 3 млрд (3,0* 10 ^л 9) микробных клеток в 1 мл.

В способе получают суспензию микробных клеток 1,5 млрд (1,5*10 ^Л 9) в 1 мл готовой вакцины.

Разливают вакцину в ампулы по 1 мл.

Разлитые и запаянные ампулы проверяют на герметичность, этикетируют и упаковывают по 10 ампул для вакцинации, оставляя по 2 ампулы каждой серии для контроля.

Использование в способе трех видов стафилококков - золотистого, гемолитического и эпидермального вместо одного - золотистого в прототипе и не менее 21 штамма в противоположность 6-8 штаммам в прототипе позволяет расширить спектр действия и клиническую эффективность полученной вакцины.

Вакцину получают в течение 24 часов, а в прототипе - 24 суток.

Третью поставленную задачу решают тем, что в способе лечения стафилококковой инфекции инактивированной стафилококковой жидкой вакциной, включающем введение вакцины подкожно в область нижнего угла лопатки, поочередно в правую и левую стороны при каждой последующей инъекции в соответствующих нарастающих дозах, согласно изобретению, курс лечения составляет 10-12 инъекций, при этом сначала осуществляют 6-7 инъекций, а после интервала в 3 недели - еще 4-5 инъекций с учетом возраста и массы тела пациентов.

Для детей весом до 10 кг иммунизацию стафилококковой вакциной осуществляют по схеме: 0,1 - 0,2 - 0,3 - 0,4 - 0,5 - 0,5 - 0,5 мл в 1-й, 3-й, 5-й, 7-й, 9-й, 14-й и 19-й дни лечения, а через 3 недели после седьмой инъекции - через день по схеме: 0,1 - 0,2 - 0,3 - 0,4 - 0,5 мл.

Для детей весом 11-20 кг иммунизацию стафилококковой вакциной осуществляют по схеме: 0,1 - 0,3 - 0,5 - 0,6 - 0,7 - 0,7 - 0,7 мл в 1-й, 3-й, 5-й, 7-й, 9-й, 14-й и 19-й дни лечения, а через 3 недели после седьмой инъекции - через день по схеме: 0,2 - 0,4 - 0, 5 - 0,6 - 0,8 мл. Для детей весом 21-30 кг иммунизацию стафилококковой вакциной осуществляют по схеме: 0,1 - 0,3 - 0,5 - 0,7 - 0,9 - 0,9 - 0,9 мл в 1-й, 3-й, 5-й, 7-й, 9-й, 14-й и 19-й дни лечения, а через 3 недели после седьмой инъекции - через день по схеме: 0,2 - 0,4 - 0, 6 - 0,8 - 1,0 мл.

Для детей весом 31 -40 кг иммунизацию стафилококковой вакциной осуществляют по схеме: 0,1 - 0,3 - 0,5 - 0,7 - 0,9 - 1,0 - 1,0 мл в 1-й, 3-й, 5-й, 7-й, 9-й, 14-й и 19-й дни лечения, а через 3 недели после седьмой инъекции - через день по схеме: 0,3 - 0,5 - 0, 7 - 0,9 - 1,0 мл.

Для взрослых весом 45-80 кг иммунизацию стафилококковой вакциной осуществляют по схеме: 0,1 - 0,5 - 0,7 - 0,9 - 1,0 - 1,0 - 1,0 мл в 1-й, 3-й, 5-й, 7-й, 9-й, 14-й и 19-й дни лечения, а через 3 недели после седьмой инъекции - через день по схеме: 0,3 - 0,7

- 0, 9 - 1,0 - 1,0 мл.

Для взрослых весом 80-120 кг иммунизацию стафилококковой вакциной осуществляют по схеме: 0,1 - 0,5 - 0,7 - 0,9 - 1,0 - 1,0 - 1,5 мл в 1-й, 3-й, 5-й, 7-й, 9-й, 14-й и 19-й дни лечения, а через 3 недели после седьмой инъекции - через день по схеме: 0,3 - 0,7

- 0, 9 - 1,0 - 1,5 мл.

Для взрослых весом более 120 кг иммунизацию стафилококковой вакциной осуществляют по схеме: 0,1 - 0,5 - 1,0 - 1,0 - 1,5 - 1,5 - 2,0 мл в 1-й, 3-й, 5-й, 7-й, 9-й, 14-й и 19-й дни лечения, а через 3 недели после седьмой инъекции - через день по схеме: 0,3 - 0,7

- 1,0 - 1,5 - 2,0 мл.

Заявленную вакцину применяют при острой или хронической (в стадии обострения) стафилококковой инфекции (фурункулез, гидраденит, панариций, флегмона, пиодермия, остеомиелит, мастит, воспалительные гинекологические, урологические, отоларингологические заболевания, ларинго-трахеиты, бронхиты, пневмонии, бронхиальная астма и т.п.), у больных с клиническими проявлениями хронической стафилококковой инфекции в качестве альтернативы антибиотикам или как метод дополнительного лечения совместно с антибиотиками при септических состояниях, представляющих угрозу для жизни.

В противоположность лечению анатоксином стафилококковым, где присутствует только ослабленный стафилококковый токсин, в заявленном способе лечения присутствуют цельные клетки инактивированных нежизнеспобных бактерий, корпускулярные термолабильны и термостабильные белковополисахаридные антигены клеточной стенки стафилококков и неослабленные стафилококковые токсины (преимущественно эндотоксины), что повышает иммуногенный эффект лечения и усиливает иммунологический и положительный клинический эффект после вакцинации. Вакцину можно применять как взрослым, так и детям, что расширяет ее функциональные возможности.

Вакцина СтафилоПримавак не имеет побочных действий. Возможны только местные (гиперемия, отечность и болезненность в месте введения) и общие (повышение температуры тела, сыпь на коже, как проявление бактериальной токсикодермии) реакции на введение вакцины. Такие реакции носят естественный физиологический характер и обусловлены активацией местного иммунитета (в месте введения вакцины) и общего иммунного ответа с выделением токсинов из бактерий, против которых направлена конкретная вакцина СтафилоПримавак, за счет быстрого разрушения бактерий после их иммунного распознавания настроенной иммунной системой.

При применении вакцины СтафилоПримавак развитие аллергических реакций отсутствует, более того, вакцина оказывает гипоаллергенный эффект с существенным снижением повышенных до лечения уровней IgE.

Заявленная инактивированная стафилококковая жидкая вакцина СтафилоПримавак включает не менее 21 штамма стафилококков 3-х разных видов, а именно: золотистый стафилококк (Staphylococcus aureus) - 15 штаммов, гемолитический стафилококк (Staphylococcus haemolyticus) - 3 штамма, и эпидермальный стафилококк (Staphylococcus epidermidis ) - 3 штамма определенной локации, выделенные при различных острых и хронических воспалительных заболеваниях бактериальной этиологии у детей и взрослых.

Инактивированную стафилококковую жидкую вакцину СтафилоПримавак получают следующим образом.

Вакцину готовят из производственных клинических штаммов стафилококков, не менее чем с 21-го штамма 3-х различных видов различной локации, ранее выделенных при бактериологическом исследовании биологических субстратов (мокроты, слизи из носа, мочи, слезы, сока простаты, выделений из влагалища и др.), смывов, мазков со слизистых оболочек, гнойных очагов и с кожи пациентов при различных острых и хронических воспалительных заболеваниях бактериальной этиологии у детей и взрослых, а именно: Staphylococcus aureus - 15 штаммов, Staphylococcus haemolyticus - 3 штамма, Staphylococcus epidermidis - 3 штамма, в том числе и штаммы бактерий с разной степенью антибиотикорезистентности, депонированные в Депозитарии Института микробиологии и вирусологии Национальной академии наук Украины:

Staphylococcus aureus, штамм 776, изолированный из зева больного лакунарной ангиной 1.11.2017 г., депонирован 17.01.2018 г. под регистрационным номером ИМВ В- 7684, резистентность к антибиотикам - 10%;

Staphylococcus aureus, штамм 627, изолированный из мокроты больного бронхиальной астмой 18.04.2018 г., депонирован 07.05.2018 г. под регистрационным номером ИМВ В-7756, резистентность - 0%;

Staphylococcus aureus, штамм 681, изолированный из абсцесса 27.09.2017 г., депонирован 26.10.2018 г. под регистрационным номером ИМВ В-7665, резистентность - 10%;

Staphylococcus aureus, штамм 308, изолированный из мочи больного хроническим пиелонефритом 27.09.2017 г., депонирован 26.10.2017 г. под регистрационным номером ИМВ В-7666, резистентность - 0%;

Staphylococcus aureus, штамм 834, изолированный из мокроты больного хроническим бронхитом 26.09.2018 г., депонирован 31.10.2018 г. под регистрационным номером ИМВ В-7782, резистентность - 10%;

Staphylococcus aureus, штамм 487, изолированный из мокроты ребенка с муковисцедозом 03.10.2018 г., депонирован 31.10.2018 г. под регистрационным номером ИМВ В-7786, резистентность - 20%;

Staphylococcus haemolyticus, штамм 908, изолированный из уретры и сока простаты больного хроническим уретропростатитом 13.12.2017 г., депонирован 23.03.2018 г. под регистрационным номером ИМВ В-7712, резистентность - 20%;

Staphylococcus haemolyticus, штамм 502, изолированный из мочи больной хроническим циститом 20.02.2018 г., депонирован 23.03.2018 г. под регистрационным номером ИМВ В-7731, резистентность - 0%;

Staphylococcus haemolyticus, штамм 579, изолированный из носа больного хроническим гайморитом 23.05.2018 г., депонирован 31.10.2018 г. под регистрационным номером ИМВ В-7766, резистентность - 0%;

Staphylococcus epidermidis, штамм 116, изолированный из кожи больного пиодермией и фурункулезом 25.04.2018 г., депонирован 14.05.2018 г. под регистрационным номером ИМВ В-7763, резистентность - 0%.

При изготовлении вакцины используют не менее 21-го клинического патогенного штамма стафилококков 3-х видов определенной локации, выделенных при бактериологическом обследовании пациентов с локализованными бактериальными заболеваниями различных органов и систем: носа, глотки, слизистой оболочки ротовой полости, языка, десен, зубов, глаз, трахеи, бронхов, легких, органов мочеполовой системы, кожи и т.д.

При изготовлении вакцины используют не менее 21-го клинического патогенного штамма стафилококков 3-х видов с разной степенью резистентности к существующим антибиотикам (от 0% резистентности - чувствительные ко всем антибиотикам, и до 100% резистентности - госпитальные не чувствительны ко всем антибиотикам штаммы).

24-часовую агаровую культуру бактерий, каждый штамм которых культивируют порознь, смывают с поверхности твердой питательной среды апирогенной дистиллированной водой (вода для инъекций) и помещают в стерильные емкости. Для устранения примесей питательной среды штаммы бактерий отмывают дистиллированной водой путем трехкратного центрифугирования при 1500-3000 об/мин. в течение 10-15 минут. Надосадочную жидкость выливают. Полученный осадок культуры бактериологического штамма суспендируют в апирогенной дистиллированной воде для инъекций и стандартизируют в соответствии со стандартом МАК Фарленд (McF) с оптической плотностью 1,0, что соответствует 3 млрд (3,0*10 ^л 9) микробных клеток в 1 см ³ (1 мл). Штаммы микроорганизмов берут в равных количествах для получения такой же конечной концентрации - суммарно 3 млрд (3,0*10 ^Л 9) микробных клеток в 1 мл. Стандартизированную суспензию штаммов инактивируют в автоклаве при температуре 115-125°С и давлении 1 атм. в течение 15-40 минут. В емкости с инактивированными бактериями добавляют в равных количествах Эрбисол (или другой препарат эмбрионального происхождения, например, Инфламафертин) или физиологический раствор или воду для инъекций, или другой растворитель согласно с производственным техническим регламентом и получают суспензию микробных клеток 1,5 млрд (1,5*10 ^л 9) в 1 мл готовой вакцины. Для контроля стерильности образцы вакцины высевают на питательный бульон. Посевы инкубируют в термостате при температуре 37°С в течение 24-48 часов. При отсутствии роста добавляют консервант и другие ингредиенты согласно производственному техническому регламенту и разливают вакцину по 1 мл в стерильные ампулы. Разлитые и запаянные ампулы проверяют на герметичность, этикетируют и упаковывают по 10 ампул для вакцинации, оставляя по 2 ампулы каждой серии для контроля.

Иммунизацию вакциной СтафилоПримавак назначают при острой стафилококковой инфекции у новорожденных, детей грудного и старшего возраста, взрослых при поражениях кожи и слизистых оболочек, органов носоротоглотки, глаз, дыхательных путей, мочевыводящих путей и половых органов, костей и суставов (остеомиелит, гнойный артрит, в том числе - после установки искусственных суставов), а также при других гнойно-воспалительных заболеваниях стафилококковой этиологии (парапроктит, бартолинит, гангрена Фурнье и др.) подкожно (под лопатку) курсом из 12 инъекций (вакцинация - 7 инъекций, после интервала в 3 недели ревакцинация - еще 5 инъекций) с учетом возраста и массы тела пациентов по следующим схемам:

Срок годности вакцины СтафилоПримавак составляет 24 месяца.

Изобретение не ограничивается изготовлением жидкой вакцины. Вакцина может также быть изготовлена в виде сублингвальных сосательных таблеток, капсул для приема внутрь, капель в нос или спрея, вагинальных свечей-суппозиториев, мази, раствора для орошения слизистых оболочек.

Изобретение поясняется примерами лечения.

Пример 1

Ребенок К., 7 лет, родители обратились в клинику в июне 2018 г. на плановую очередную консультацию, девочка закончила 1-й класс, жалоб нет, клинически здорова. Первый раз обратились в клинику около 1,5 лет назад. Был установлен диагноз: хроническая стафилококковая инфекция: носительство в носоглотке, хронический риносинусит с частыми затяжными насморками, заложенностью носа, аденоиды I-II ст., хронический тонзиллит с рецидивирующими ангинами, повторные эпизоды отита в отдаленном и ближайшем анамнезе, рецидивирующие ларинготрахеиты и бронхиты с обструктивным синдромом с настойчивым приступообразным коклюшеподобным кашлем, частые простудные заболевания. Повторные многократные предыдущие курсы лечения антибиотиками (более 14-15 раз, в том числе с учетом чувствительности выделенных при бакпосевах из носоглотки штаммов Staphylococcus aureus) с грудного возраста давали кратковременный клинический эффект с последующими все более ранними рецидивами заболевания. За 1,5 года наблюдения и лечения в клинике были проведены 2 курса иммунизации вакциной СтафилоПримавак (суммарно - 22 инъекции), и два курса - поливалентной вакциной РинодентаПримавак по 10 инъекций каждый в возрастной дозировке.

Пример 2

Женщина Н., 33 года, обратилась в клинику с жалобами на рецидивирующий в течение 3 лет фурункулез различной локализации: на лице, на туловище, под мышками (гидрадениты), на ягодицах; в момент обращения: 2 свежих не вскрывшихся фурункула на лобке и карбункул - на ягодице. Ранее более 10 раз проводили хирургическое вскрытие фурункулов и карбункулов. Неоднократные курсы лечения антибиотиками, переливание крови из вены в ягодицу, назначение пивных дрожжей, ультрафиолетового и лазерного облучения крови, озонотерапия и другие усилия давали лишь кратковременный клинический результат. В день обращения в клинику была назначена иммунизация вакциной СтафилоПримавак по стандартной схеме в возрастной дозировке сначала - 7 инъекций, а через 3 недели - ревакцинация еще из 5 инъекций (суммарно 12 инъекций). На 2-3-й день после начала вакцинации фурункулы и карбункул раскрылись, быстро очистились и затянулись. В процессе вакцинации появился еще один фурункул на животе, не глубокий и с более быстрым циклом развития и произвольным вскрытием. В течение 2 месяцев наблюдения после окончания ревакцинации было несколько эпизодов появления поверхностных микрофурункулов (по типу пиодермии) и одного фурункула-эквивалента (без нагноения и расплавления подкожной клетчатки). В связи с чем был проведен дополнительный второй курс иммунизации вакциной СтафилоПримавак (тоже из 12 инъекций, суммарно - 24). Катамнез: в течение следующих 2-х лет наблюдения рецидивов фурункулеза больше не было. Пример 3

Ребенок Маричка, родители которой обратились в клинику в декабре 2008 г., когда ребенку было 3 месяца, с жалобами на неоформленные испражнения зеленого цвета со слизью, плохой сон, сучение ножками, беспокойность. Из кала, носа и глотки были выделены идентичные штаммы Staphylococcus aureus. Было проведено местное лечение носоглотки и дисбактериоза кишечника, после чего состояние ребенка временно улучшилось. Но уже в ближайшее время в возрасте 6 месяцев сначала на коже лица, а затем очень быстро сплошь на туловище и конечностях появилась сыпь, которая была верифицирована специалистами как атопический дерматит (генетически детерминированный) с элементами мокнущей экземы. При бактериологическом исследовании повторно из носоглотки и кала и дополнительно из разных пораженных участков кожи и из мочи были выделены идентичны штаммы Staphylococcus aureus. Уровень общего IgE повысился с 2 до 110 МЕ/мл (возрастная норма - до 10 МЕ/мл). Были проведены 2 курса иммунизации стафилококковой вакциной СтафилоПримавак (каждый - по 10 инъекций). В течение 6 месяцев отмечена положительная клиническая динамика: кожа полностью очистилась от элементов сыпи до 12-го месяца жизни ребенка. Уровень общего IgE снизился до 19 МЕ/мл. В течение следующих 10 лет наблюдения (25.09.2019 г. ребенку исполнилось 11 лет) рецидивов атопического дерматита больше не было, кожа ребенка остается гладкой, диеты не придерживалась, ограничений в питании и режиме жизни не было.

Пример 4

Ребенок Асхаб, был впервые осмотрен в клинике 27.08.2012, когда родители привезли его в Киев из г.Махачкала (Дагестан), в возрасте 1 года 6 месяцев с установленным ранее в г.Москва диагнозом «Гипер-IgE синдром». Синдром гипериммуноглобулинемии Е (или синдром Джоба), симптомы которого начинаются с возраста младенца, считается наследственным заболеванием, при котором имеет место комбинированный гуморально-клеточный иммунодефицит (Т- и В -клеток) с тяжелыми стафилококковыми поражениями кожи (фурункулы, абсцессы, флегмоны кожи, и т.п.) в сочетании с тотальным эозинофильным дерматитом с ошеломляющим зудом кожи. В течение года (с 6 месяцев до обращения в клинику в Киеве) ребенок находился под наблюдением и неоднократно проходил соответствующее протокольное лечение с многократным назначением различных антибиотиков в Москве, с почти полным отсутствием положительного клинического результата: состояние ребенка ухудшалось^ стафилококковая болезнь с гнойными осложнениями прогрессировала, а уровень общего IgE за год вырос с 1470 до 2510 МЕ/мл. Главная жалоба родителей была на постоянно рецидивирующий тотальный фурункулез лица, головы, туловища и конечностей. Полиэтиологические очаги хронической бактериальной инфекции были обнаружены в носоглотке (с доминированием Staphylococcus aureus) и в почках (с доминированием энтерококков и клебсиеллы). Кроме того, дополнительно было установлено внутриутробное инфицирование цитомегаловирусом, который оставался в активной форме, что было главным провоцирующим фактором для такого агрессивного поведения бактериальных инфекций. Ни одного изъяна иммунитета выявлено не было: 23.08.2012 г. уровень Т-клеток составлял 59% или 3537.05* 10 ^б /л клеток (выше нормы), В-клеток - 6% или 359.7* 10 ⁶ /л (в пределах нормы); IgA -0,58 г/л, IgM -1.24 г/л, IgG - 10.2 г/л. Уровень общего IgE составлял на момент начала лечения в клинике 2250 МЕ/мл. За 2 года (до августа 2014 г.) были проведены 3 курса иммунизации стафилококковой вакциной, суммарно из 35-и инъекций, и 4 курса иммунизации бактериальными ауто- и поливалентными вакцинами. С сентября 2014 г. рецидивы фурункулеза прекратились, на 21.06.2015 г. (дата очередного посещения клиники) родители отмечали редкое появление микрофурункулов и фурункулов-эквивалентов, а с 2016 г. эпизоды гнойного поражения кожи вовсе прекратились, хотя еще 2 года беспокоили приступы гнойных лакунарных ангин (как дополнительное проявление хронической стафилококковой инфекции). За это время дополнительно была проведена иммунизация стафилококковой вакциной СтафилоПримавак из 12 инъекций (суммарно - 47). Последнее посещение клиники состоялось 12 января 2018 г.: ребенок клинически здоров, проявления «гипер-IgE синдрома» отсутствуют, уровень развития соответствует возрасту, состояние клеточного и гуморального иммунитета даже активировано, уровень общего IgE заметно снизился и составлял 491 МЕ/мл. Последний звонок - на Новый 2019 г.: жалоб на здоровье ребенка у родителей нет.