pour la Visualisation des Tissus Tumoraux

Demande de Brevet Parente

La présente demande de brevet revendique la priorité de la demande de brevet français numéro FR 16 63136 déposée le 22 décembre 2017. Le contenu de la demande de brevet français est incorporé par référence dans sa totalité.

Domaine de l'Invention

La présente invention concerne une émulsion de Lipiodol et de bleu patenté pour la visualisation de tissus hypervascularisés et/ou tumoraux in vivo, en particulier lors d'une ablation tumorale, comme la néphrectomie partielle.

Contexte de l'Invention

Le cancer du rein est le troisième cancer urologique le plus fréquent après le cancer de la prostate et le cancer de la vessie. L'Organisation Mondiale de la Santé liste plus de 50 différents types de cancer du rein. Le carcinome à cellules rénales (CCR) est le cancer du rein le plus commun chez les adultes (hommes et femmes confondus) et représente en moyenne 90% de toutes les tumeurs malignes rénales. Il a été estimé que, chaque année dans le monde, environ 209 000 nouveaux cas de CCR sont diagnostiqués, et le CCR cause 102 000 décès. L'incidence du carcinome à cellules rénales n'a cessé d'augmenter, et le taux de mortalité atteint aujourd'hui les 40%. Ce cancer est caractérisé par un manque de symptômes avant-coureurs, des manifestations cliniques diverses et une résistance à la chimiothérapie cytostatique classique et à la radiothérapie. Ainsi, la chirurgie (néphrectomie partielle ou élargie selon la taille, la localisation et le stade de la tumeur) reste le standard de prise en charge des formes localisées.

Avant la néphrectomie partielle coelioscopique, certaines équipes de chirurgie effectuent une embolisation tumorale sélective dans le but de limiter le saignement peropératoire. Cependant, il existe des difficultés de repérage de la tumeur lors de la chirurgie coelioscopique, notamment en cas de graisse périrénale adhérente (graisse dite "toxique", présente chez 30 à 40% des patients) ou de tumeur endorénale. Ces difficultés de repérage sont associées à une augmentation du temps opératoire, des saignements, des complications péri-opératoires et des exérèses tumorales incomplètes en marges non saines. Des moyens de repérage des tumeurs sont, dans ce contexte, nécessaires pour améliorer la qualité du geste chirurgical.

Des solutions ont été proposées pour améliorer le repérage péri-opératoire de la tumeur rénale comme: le repérage avec sonde échographique coelioscopique (Kaczmarek et al, Int. J. Urol., 2013, 20: 172-176; Kaczmarek et al, J. Endourol., 2013, 27: 1137- 1140); et l'utilisation de vert d'indocyanine et d'une caméra infra-rouge (Bjurlin et al., Curr. Urol. Rep., 2015, 16(4): 20, doi: 10.1007/sl 1934-015-0495-9). Cependant, ces techniques nécessitent un matériel coûteux.

Il existe donc toujours, dans l'art, un besoin de disposer de nouveaux outils, faciles à mettre en œuvre et peu coûteux, pour faciliter le repérage des tumeurs lors de la néphrectomie partielle coelioscopique.

Résumé de l'Invention

Les présents Inventeurs ont développé une solution de coloration, et plus spécifiquement une émulsion de Lipiodol et de bleu patenté, qui lorsqu'elle est injectée de manière ultrasélective dans l'artère rénale, permet la visualisation des tissus tumoraux dans le rein. En facilitant le repérage de la tumeur dans le cas d'une néphrectomie partielle coelioscopique, cette solution permet une exérèse tumorale satisfaisante en marges saines. De plus, cette coloration peut être avantageusement associée à une embolisation (obstruction de la même artère alimentant la tumeur), ce qui permet une ischémie de la tumeur et une diminution des saignements opératoires. Cette technique de coloration par voie endovasculaire, en plus d'être simple et rapide à mettre en œuvre, est peu coûteuse comparativement aux méthodes utilisées cliniquement.

En conséquence, dans un premier aspect, la présente invention concerne une émulsion de Lipiodol et de bleu patenté, pour son utilisation comme un agent de coloration dans la visualisation de tissus tumoraux et/ou hypervascularisés in vivo. Préférablement, émulsion est une émulsion huile dans eau, la phase aqueuse de l'émulsion huile dans eau étant le bleu patenté et la phase huileuse, le Lipiodol.

Dans certains modes de réalisation, l'émulsion huile dans eau comprend environ 60% de Lipiodol (v/v) et environ 40% de bleu patenté (v/v). Par exemple, l'émulsion comprend 67% de Lipiodol (v/v) et 33% de bleu patenté (v/v), ou 66% de Lipiodol (v/v) et 34% de bleu patenté (v/v), ou 65% de Lipiodol (v/v) et 35% de bleu patenté (v/v), ou 64% de Lipiodol (v/v) et 36% de bleu patenté (v/v), ou 63% de Lipiodol (v/v) et 37% de bleu patenté (v/v), ou 62% de Lipiodol (v/v) et 38% de bleu patenté (v/v), ou 61% de Lipiodol (v/v) et 39% de bleu patenté (v/v), ou 60% de Lipiodol (v/v) et 40% de bleu patenté (v/v), ou 59% de Lipiodol (v/v) et 41% de bleu patenté (v/v), ou 58% de Lipiodol (v/v) et 42% de bleu patenté (v/v), ou 57% de Lipiodol (v/v) et 43% de bleu patenté (v/v), ou 56% de Lipiodol (v/v) et 44% de bleu patenté (v/v), ou 55% de Lipiodol (v/v) et 45% de bleu patenté (v/v).

Dans certains modes de réalisation préférés, l'émulsion consiste en Lipiodol et bleu patenté.

Dans d'autre modes de réalisation préférés, l'émulsion comprend du Lipiodol, du bleu patenté et au moins un émulsifiant. L'émulsifiant peut être un tensioactif choisi parmi les tensioactifs non-ioniques, les tensioactifs ioniques (anioniques, cationiques et zwitterioniques), et leurs combinaisons compatibles.

L'émulsion peut en outre comprendre au moins un agent de formulation. Un agent de formulation peut être sélectionné parmi les agents stabilisants, les agents de texture (ou modificateurs de viscosité), les acides aminés, les acides gras et leur sels, les vitamines, les conservateurs, les substances antimicrobiennes, l'urée, etc ..

Dans certains modes de réalisation, la visualisation des tissus est effectuée dans le cadre d'une ablation tumorale coelioscopique. La tumeur peut être parenchymateuse abdomino-pel vienne ou thoracique (par exemple, cancer du rein, du foie, du pancréas, de la rate, du tube digestif, du poumon, de la prostate, de l'utérus, etc .), ganglionnaire, ou concerner les parties molles (par exemple, sarcome, etc .). Dans certains modes de réalisation, l'ablation tumorale est une néphrectomie partielle ou élargie. Dans d'autres modes de réalisation, l'ablation tumorale est une hépatectomie partielle.

Dans certains modes de réalisation, l'émulsion est administrée par voie endovasculaire, et préférablement par voie intra-artérielle.

Dans certains modes de réalisation, l'injection de l'émulsion est effectuée en combinaison avec une embolisation de la tumeur. Plus spécifiquement, l'embolisation est effectuée après l'administration de l'émulsion et avant l'ablation tumorale.

Dans ce même aspect, la présente invention concerne l'utilisation d'une émulsion de Lipiodol et de bleu patenté, telle que décrite ici, pour visualiser des tissus tumoraux et/ou hypervascularisés in vivo. La présente invention concerne aussi une émulsion de Lipiodol et de bleu patenté, telle que décrite ici.

La présente invention concerne également un kit pour son utilisation dans la visualisation de tissus tumoraux et/ou hypervascularisés in vivo, le kit comprenant du Lipiodol et du bleu patenté contenus dans des récipients individuels et, éventuellement un dispositif permettant la préparation d'une émulsion telle que décrite ici, ou comprenant une émulsion de Lipiodol et de bleu patenté, telle que décrite ici, aliquotée dans différents récipients et, éventuellement un dispositif d'injection de émulsion. Un kit selon l'invention peut en outre comprendre un agent d'embolisation. Une description plus détaillée de certains modes de réalisation préférés de l'invention est donnée ci-dessous.

Description Détaillée de l'Invention

Comme mentionné ci-dessus, la présente invention concerne une composition pour son utilisation comme agent de coloration dans la visualisation de tissus tumoraux et/ou hypervascularisés in vivo. La composition trouve en particulier application au cours d'une ablation tumorale, en particulier une ablation tumorale coelioscopique.

I - Emulsion de Lipiodol et de Bleu Patenté

Une composition selon l'invention est une émulsion de Lipiodol et de bleu patenté.

Emulsion

Tel qu'utilisé ici, le terme "émulsion" a son sens connu dans l'art et désigne une dispersion, plus ou moins stable, sous forme de petites gouttelettes, d'un premier liquide dans un second liquide qui, à température ambiante (20-25°C), n'est pas miscible au premier liquide. Par une opération spécifique (agitation, mélange, ajout d'agents actifs, etc .), ces deux liquides constituent un mélange intime ayant un aspect macroscopiquement homogène, mais microscopiquement hétérogène. Les deux liquides sont appelés phases. La phase discontinue est dispersée, sous forme de petites gouttelettes, dans la phase continue. Une émulsion est thermodynamiquement instable mais peut présenter une stabilité cinétique. Pour qu'une émulsion soit durable (c'est-à- dire stable dans le temps après préparation), il est généralement nécessaire d'utiliser un émulsifiant. L'émulsion selon l'invention est, plus spécifiquement, une émulsion de type huile dans eau. Les termes "émulsion huile dans eau " et "émulsion H/E" sont indifféremment utilisés ici et désignent une émulsion qui est composée d'une phase huileuse (ou phase grasse, lipophile ou organique) dispersée dans une phase aqueuse (ou phase hydrophile). La phase huileuse d'une émulsion H/E selon l'invention est composée de Lipiodol et la phase aqueuse de bleu patenté.

Les émulsions sont classées selon la taille des gouttelettes (ou particules) qui les composent en: macroémulsions, miniémulsions et microémulsions. Dans les macroémulsions (également appelées émulsions), les particules ont une taille moyenne (ou diamètre moyen) de plus d' 1 micromètre (par exemple entre 5 et 100 μιη). Les miniémulsions (encore appelées nanoémulsions) sont obtenues en mélangeant deux liquides non-miscibles en présence d'un tensioactif par exemple par ultrasonification ou homogénéisation à haute pression. La taille moyenne des particules d'une miniémulsion est de moins d' 1 micromètre (par exemple entre 0,1 et 1 μιη ou entre 20 à 200 nm). Contrairement aux macroémulsions et aux miniémulsions, les microémulsions sont thermodynamiquement stables. Elles contiennent, en plus des deux liquides non- miscibles et du tensioactif, un co-tensioactif. Une microémulsion apparaît comme une solution transparente, alors qu'une macroémulsion ou une miniémulsion apparaît comme laiteuse. Les émulsions huile dans eau selon l'invention peuvent être des macroémulsions, des miniémulsions ou des microémulsions.

Lipiodol

Tel qu'utilisé ici, le terme "Lipiodol" a son sens connu dans l'art et désigne un composé liposoluble mis au point en 1901 (Bonnemain et Guerbet, Revue d'Histoire de la Pharmacie, 1995, 305: 159-170) et aujourd'hui réputé pour avoir plusieurs applications en tant que produit de contraste, véhicule, éluant de médicaments anti-cancéreux et agent d'embolisation vasculaire transitoire.

Le Lipiodol est une solution d'esters d'éthyle d'acides gras iodés d'huile d' œillette. L'huile d' œillette est extraite de graines de pavot (Papaver somniferum var. nigrum). Le Lipiodol est préparé par saponification (c'est-à-dire par hydrolyse alcaline) d'huile d' œillette, ce qui libère des acides gras non-saturés (l'acide linoléique principalement, ainsi que l'acide oléique et l'acide linolénique), qui sont ensuite iodés avec du monochlorure d'iode, puis estérifiés avec de l'éthanol. (Wolff, Medicine, 2001, 80: 20- 36) Le Lipiodol comprend, en poids par volume (p/v), entre 33% et 54% d'iode sous forme d'esters d'éthyle d'acides gras iodés d'huile d'œillette.

Ainsi, tel qu'utilisé ici, le terme " Lipiodol" désigne toute solution d'esters d'éthyle d'acides gras iodés d'huile d'œillette comprenant entre 33% et 54% d'iode (p/v), bornes incluses, c'est-à-dire entre 33 g et 54 g d'iode sous forme d'esters d'éthyle d'acides gras iodés d'huile d'œillette par 100 ml de produit final, ou encore entre 330 mg et 540 mg d'iode sous forme d'esters d'éthyle d'acides gras iodés d'huile d'œillette par ml de produit final. Dans certains modes de réalisation préférés, le terme "Lipiodol" désigne, en particulier, le médicament commercialisé par Guerbet (Roissy, France) sous le nom de Lipiodol ^® Ultra-Fluide. Lipiodol ^® Ultra-Fluide est une solution injectable comprenant 48% (p/v) d'iode sous forme d'esters éthyliques d'acides gras iodés d'huile d'œillette (c'est-à-dire 480 mg/ml). La viscosité de Lipiodol ^® Ultra-Fluide est de 70 centipoises à 15°C, et de 25 centipoises à 37°C, et sa densité relative est de 1,280 à 15°C. Lipiodol ^® Ultra-Fluide est utilisé en radiologie diagnostique dans des indications incluant le diagnostic des lésions hépatiques, l'hystérosalpingographie et la lympho graphie. Il est également utilisé en radiologie interventionnelle pour le traitement par chimio- embolisation trans-artérielle conventionnelle (cTACE) du carcinome hépatocellulaire multinodulaire, dans lequel Lipiodol ^® Ultra- Fluide est utilisé pour ses propriétés d'agent de contraste, de véhicule de substances actives et d'agent d'embolisation.

Dans certains modes de réalisation de l'invention, le terme "Lipiodol", tel qu'utilisé ici, désigne toute solution d'esters d'éthyle d'acides gras iodés d'huile d'œillette ayant la même composition et les mêmes propriétés (viscosité, densité, etc ..) que Lipiodol ^® Ultra-Fluide.

D'une façon générale, le terme "Lipiodol", tel qu'utilisé ici, désigne toute solution d'esters d'éthyle d'acides gras iodés d'huile d'œillette comprenant entre 33% et 54% d'iode (p/v) sous forme d'esters éthyliques d'acides gras iodés d'huile d'œillette (par exemple 33%, 34%, 35%, 36%, 37%, 38%, 39%, 40%, 41%, 42%, 43%, 44%, 45%, 46%, 47%, 48%, 49%, 50%, 51%, 52%, 53%, ou 54%), en particulier 48% d'iode (p/v) sous forme d'esters éthyliques d'acides gras iodés d'huile d'œillette. Une telle solution peut avoir une viscosité de 70 centipoises à 15°C, et de 25 centipoises à 37°C, et une densité relative de 1,280 à 15°C.

Bleu Patenté

Les termes "bleu patenté" et "bleu patenté V" sont utilisés ici de façon interchangeable. Ils désignent un composé chimique hydrosoluble de couleur bleu-foncé appartenant à la famille des colorants dérivés du triphénylméthane, qui lorsqu'il est utilisé comme colorant alimentaire, est connu sous le nom de E131. Le bleu patenté existe sous forme de sel de sodium (C ₂₇ H ₃₁ N ₂ Na0 ₇ S ₂ ) et sous forme de sel de calcium (C ₂₇ H ₃₁ N ₂ 07S2) ₂ Ca), mais la forme utilisée en médecine est le sel monosodique du N-[4- [[4-(diéthylamino)phényl] (5-hydroxy-2,4-disulfophényl)méthylène]-2,5-cyclohexadien - l-ylidene]-N-éthyl-, hydroxide.

Le bleu patenté V a reçu une AMM (Autorisation de Mise sur le Marché) pour une utilisation par voie intr a- artérielle pour le repérage des territoires vasculaires. Il est également utilisé en cancérologique comme colorant dans la technique du ganglion sentinelle. Un ganglion sentinelle est le premier ganglion lymphatique recevant la lymphe drainée d'une région où l'on suspecte la présence d'un cancer.

Dans certains modes de réalisation de l'invention, le terme "bleu patenté", tel qu'utilisé ici, désigne le médicament commercialisé par Guerbet (Roissy, France) sous le nom de Bleu Patenté V Sodique Guerbet 2,5%. Le Bleu Patenté V Sodique Guerbet 2,5% est une solution injectable comprenant 2,5 g de bleu patenté pour 100 mL de solution (la solution comprenant 0,60 g de chlorure de sodium, 0,05 g d'hydrogénophosphate de sodium dodécahydraté, et q.s.p. d'eau pour préparations injectables pour 100 mL). Le Bleu Patenté V Sodique Guerbet 2,5% a un pH compris entre 6,3 et 7,6 et une osmolalité de 250 mosm/kg H ₂ 0. Dans certains modes de réalisation de l'invention, le terme "bleu patenté", tel qu'utilisé ici, désigne toute solution aqueuse de bleu patenté V ayant la même composition et les mêmes propriétés (pH, osmolalité, etc ..) que Bleu Patenté V Sodique Guerbet 2,5%.

D'une façon générale, le terme "bleu patenté", tel qu'utilisé ici, désigne une solution aqueuse de bleu patenté V (numéro CAS: 20262-76-4) dilué à environ 2,5% p/v, c'est-à-dire environ 2,5 g de bleu patenté V par 100 mL de produit final ou encore environ 25 mg de bleu patenté V par mL de produit final). Le terme "environ 2,5% p/v ", tel qu'utilisé ici, correspond à un pourcentage en poids par volume de 2, 2,1, 2,2, 2,3, 2,4, 2,5, 2,6, 2,7, 2,8, 2,9 ou 3 g de bleu patenté V par 100 mL de produit final ou 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, ou 30 mg de bleu patenté V par mL de produit final. La solution aqueuse de bleu patenté a un pH compris entre 6,3 et 7,6. Composition de VEmulsion Huile dans Eau

Une émulsion huile dans eau selon l'invention est une émulsion de Lipiodol et de bleu patenté (tels que définis ci-dessus), dans laquelle le Lipiodol est dispersé sous forme de petites gouttelettes dans le bleu patenté.

Une émulsion huile dans eau selon l'invention comprend, ou consiste en, environ 60% (v/v) de Lipiodol et environ 40% (v/v) de bleu patenté. En d'autres termes, la phase aqueuse (le bleu patenté) d'une émulsion huile dans eau selon l'invention représente environ 40% (v/v) de émulsion et la phase huileuse (le Lipiodol) représente environ 60% (v/v) de l'émulsion. Le terme "environ 60% (v/v)", tel qu'utilisé ici, désigne n'importe quel pourcentage en volume/volume compris entre 67% et 55%, bornes incluses. Le terme "environ 40% (v/v)" tel qu'utilisé ici, désigne n'importe quel pourcentage en volume/volume compris entre 33% et 45%, bornes incluses, sachant que la somme du pourcentage (v/v) de Lipiodol et du pourcentage (v/v) de bleu patenté doit être de 100%.

Ainsi par exemple, l'émulsion H/E selon l'invention peut comprendre 67% de Lipiodol (v/v) et 33% de bleu patenté (v/v), 66% de Lipiodol (v/v) et 34% de bleu patenté (v/v), ou 65% de Lipiodol (v/v) et 35% de bleu patenté (v/v), ou 64% de Lipiodol (v/v) et 36% de bleu patenté (v/v), ou 63% de Lipiodol (v/v) et 37% de bleu patenté (v/v), ou 62% de Lipiodol (v/v) et 38% de bleu patenté (v/v), ou 61% de Lipiodol (v/v) et 39% de bleu patenté (v/v), ou 60% de Lipiodol (v/v) et 40% de bleu patenté (v/v), ou 59% de Lipiodol (v/v) et 41% de bleu patenté (v/v), ou 58% de Lipiodol (v/v) et 42% de bleu patenté (v/v), ou 57% de Lipiodol (v/v) et 43% de bleu patenté (v/v), ou 56% de Lipiodol (v/v) et 44% de bleu patenté (v/v), ou 55% de Lipiodol (v/v) et 45% de bleu patenté (v/v). Dans certains modes de réalisation préférés, l'émulsion comprend 60% de Lipiodol (v/v) et 40% de bleu patenté (v/v). Dans d'autres modes de réalisation préférés, l'émulsion consiste en 60% de Lipiodol (v/v) et 40% de bleu patenté (v/v).

Dans certains modes de réalisation, l'émulsion H/E selon l'invention consiste en Lipiodol et bleu patenté, tels que décrits ici. Dans d'autres modes de réalisation, l'émulsion H/E selon l'invention comprend du Lipiodol et du bleu patenté (tels que décrits ici), et au moins un émulsifiant. En effet, pour qu'une émulsion soit durable (c'est-à-dire stable dans le temps après préparation), il est généralement nécessaire d'utiliser un émulsifiant. Les termes "émulsifiant" et "émulsionnant" sont utilisés ici de façon interchangeable. Ils désignent un agent qui facilite la dispersion d'une phase dans l'autre et qui stabilise une émulsion permettant ainsi de maintenir le système à l'état dispersé pendant un temps plus long qu'en l'absence d' émulsifiant, toutes choses étant égales par ailleurs. Dans le contexte de l'invention, un émulsifiant doit, en plus de stabiliser l'émulsion selon l'invention, (1) être compatible avec les autres ingrédients de l'émulsion, (2) ne pas interférer avec la stabilité et l'efficacité des ingrédients de l'émulsion, (3) être physiquement et chimiquement stable dans l'émulsion et (4) être non-toxique pour le sujet/patient à la concentration à laquelle il est administré.

Les émulsifiants sont le plus souvent des tensioactifs, mais peuvent également être des particules solides (émulsions de Pickering), des polymères synthétiques ou des macromolécules biologiques.

Tel qu'utilisé ici, le terme "tensioactif désigne une molécule amphiphile, c'est-à- dire qui présente deux parties de polarité différente, dont l'une est hydrophile (soluble ou dispersible dans la phase aqueuse) et l'autre est lipophile (soluble ou dispersible dans la phase huileuse), et qui est capable de s'absorber aux interfaces, et donc de diminuer la tension interfaciale phase aqueuse/phase huileuse. Les tensioactifs sont également appelés agents de surface et surfactants. En règle générale, le tensioactif doit présenter une bonne affinité pour la phase continue: l'obtention d'une émulsion de type huile dans eau nécessite un tensioactif à caractère plutôt hydrophile et inversement une émulsion de type eau dans huile fera appel à un tensioactif à caractère lipophile. Les tensioactifs sont caractérisés par la valeur de leur HLB (Hydrophobic Lipophilic Balance ou balance hydrophile-lipophile). La HLB est bien connue de l'homme du métier et est décrite par exemple dans "The HLB System: A time-saving guide to Emulsifier Sélection" (ICI Americas Inc., 1988). Pour les tensioactifs émulsionnants, la HLB est généralement de 3 à 8 pour la préparation des émulsions E/H et de 8 à 18 pour la préparation des émulsions H/E. Ainsi, dans le cas de l'émulsion H/E de la présente invention, l'homme du métier saura sélectionner un tensioactif parmi les tensioactifs à HLB haute, c'est-à-dire à HLB comprise entre 8 et 18, ou préférablement supérieure à 10, ou une combinaison de tensioactifs (c'est-à-dire deux, ou plus de deux, tensioactifs) dont la HLB combinée est comprise entre 8 et 18, ou préférablement supérieure à 10. La HLB peut être déterminée par la méthode de Griffin (J. Soc. Cosmetic Chemists, 1949, 311: 1) ou par la méthode de Davies (Proceedings of the International Congress of Surface Activity, 1957, 426-438). Ainsi, un émulsifiant contenu dans une émulsion H/E selon l'invention peut être choisi parmi les tensioactifs non-ioniques, les tensioactifs ioniques (anioniques, cationiques, et zwitterioniques), et leurs combinaisons compatibles.

Des exemples de tensioactifs non-ioniques incluent, sans limitation, les esters d'acides gras (mono- et di-glycérides d'acides gras), les éthers de polyéthylène glycol, les esters de polyéthylène glycol, les éthers de polyoxyéthylène, les huiles de ricin hydrogénées de polyoxyéthylène, les esters d'acides gras de polyoxyéthylène, les esters de sorbitane, les polysorbates (ou esters de sorbitol et d'acides gras), les esters d'acides gras du saccharose, les esters d'acides gras de polyglycérol, et leurs combinaisons. Des exemples de tensioactifs non-ioniques commerciaux incluent, sans limitation, ceux connus sous le nom de Triton™ X, Pluronic ^® , Tween ^® ou Montanax ^® , Crémophor ^® , Brij ^® et Span ^® .

Des exemples de tensioactifs anioniques incluent, sans limitation, les sels d'acides carboxyliques, les alkyles sulfates, les sulfonates, et les lipoaminoacides. Des exemples de tensioactifs cationiques incluent, sans limitation, les sels d'ammonium quaternaires. Des exemples de tensioactifs zwitterioniques incluent, sans limitation, les bétaïnes et les phospholipides (comme les phosphatidylcholines, les phosphatidyléthanolamines, les phosphatidylsérines, les phosphatidylglycérols, etc .). Les phospholipides peuvent également être des phospholipides d'origine naturelle, et en particulier des phosphatidylcholines d'origine naturelle, comme par exemple les lécithines (tels que les lécithines d'œufs, de jaunes d'œufs, de soja, etc...).

La quantité de tensioactif(s) présente dans une émulsion H/E selon l'invention est telle que la stabilité de émulsion est maintenue pour la période de temps désirée et satisfaisante pour l'utilisateur. Dans une macroémulsion, le pourcentage en tensioactif est généralement inférieur à 5% en poids par rapport au poids du produit final (p/p). Dans une miniémulsion, le pourcentage en tensioactif est généralement compris entre 5% et 10% (p/p). Dans une microémulsion, le pourcentage en tensioactif(s) est généralement supérieur à 10% (p/p). Une émulsion huile dans eau selon l'invention peut, en outre, comprendre au moins un autre additif ou agent de formulation sélectionné parmi les agents stabilisants, les agents de texture (ou modificateurs de viscosité), les acides aminés (comme par exemple la phénylalanine, l'alanine, la leucine, l'isoleucine, la glycine, la sérine, et la taurine), les acides gras ou leur sels (comme des acides gras contenant entre 8 et 22 atomes de carbones, comme par exemple l'acide pélargonique, l'acide oléique, ou l'acide linoléique), des vitamines comme les vitamines liposolubles (par exemple la vitamine E, etc ..) et les vitamines hydrosolubles (par exemple l'acide ascorbique, la vitamine B6, etc .), les conservateurs, les substances antimicrobiennes, l'urée, etc .. De tels additifs ou agents de formulation sont bien connus dans l'art et l'homme du métier sait sélectionner les agents de formulation pour obtenir une émulsion e huile dans eau administrable à l'homme ("Remington's Pharmaceutical Sciences", E.W. Martin, 18 ^th Ed., 1990, Mack Publishing Co.: Easton, PA and "Encyclopedia of Pharmaceutical Technology" , 1988, J. Swarbrick, and J.C. Boylan (Eds.), Marcel Dekker, Inc: New York).

Lorsqu'elles se présentent sous forme de compositions pharmaceutiques stockées, les émulsions selon l'invention peuvent être sous forme d'unités de prise. Sous cette forme, la préparation est subdivisée en doses unitaires contenant des quantités appropriées de l'émulsion, par exemple, pour une visualisation donnée. La forme d'unité de prise peut être une préparation emballée, l'emballage contenant des quantités données d' émulsion dans des fioles ou des ampoules.

Préparation de VEmulsion Huile dans Eau

Une émulsion H/E selon l'invention peut être préparée par n'importe quelle méthode appropriée connue dans l'art, la méthode de préparation n'étant pas un facteur limitant de l'invention.

D'une façon générale, la préparation d'une émulsion comprend deux étapes successives: d'abord une étape de dispersion-mélange, que l'on appelle pré- émulsification, qui conduit à une simple mise en suspension des gouttelettes de la phase dispersée dans la phase continue (gouttes de l'ordre de 100 μιη), puis une étape dite d'homogénéisation dont le but est de réduire la taille des gouttes de façon à conférer à l'émulsion les propriétés requises et à la stabiliser. Dans certains modes de réalisation, l'émulsion H/E selon l'invention est préparée juste avant administration au patient, par exemple par simple mélange des deux phases à l'aide d'un robinet trois voies reliant une première seringue contenant le Lipiodol et une deuxième seringue contenant le bleu patenté. Comme décrit dans les exemples ci- dessous, le mélange (étape de pré-émulsion) est réalisé en faisant passer à l'aide du robinet trois voies, le bleu patenté vers le Lipiodol, puis en réalisant plusieurs allers- retours (par exemple, 20) en un temps très court (par exemple 15 secondes) (étape d'homogénéisation).

Dans d'autres modes de réalisation, l'émulsion H/E selon l'invention est préparée, puis stockée avant d'être administrée au patient. Dans ce cas, la préparation d'une émulsion selon l'invention peut se dérouler comme suit: les phases aqueuse et huileuse sont tout d'abord mises à la même température (généralement température ambiante - 20- 25°C) et l'émulsifiant est généralement ajouté à la phase continue (ici la phase aqueuse, c'est-à-dire le bleu patenté); la phase discontinue (ici la phase huileuse, c'est-à-dire le Lipiodol) est dispersée au sein de la phase aqueuse avec des tailles de gouttelettes assez grossières (étape de pré-émulsification); puis une homogénéisation est ensuite effectuée permettant la réduction de la taille des gouttelettes. Enfin, lors d'une étape de refroidissement, on peut ajouter à l'émulsion le ou les additifs ou agents de formulation. Alternativement, le ou les additifs ou agents de formulation peuvent être ajoutés à l'une et/ou l'autre des phases avant pré-émulsification (le ou les additifs hydrophiles étant ajoutés à la phase aqueuse, et le ou additifs lipophiles étant ajoutés à la phase huileuse).

Dans une préparation industrielle, l'étape de pré-émulsification est généralement réalisée à l'aide de turbines assurant la dispersion de la phase discontinue au sein de la phase continue. L'étape d'homogénéisation, quant à elle, est réalisée à l'aide d'homogénéisateurs, tels que les systèmes rotor-stator (comme les moulins colloïdaux), les homogénéisateurs haute pression, les systèmes à ultrasons, et les membranes microcanaux.

Il est important de préciser qu'une émulsion selon l'invention, qui est destinée à être injectée in vivo, doit être stérile. La stérilisation peut se faire par un traitement thermique (par exemple dans un autoclave) ou par des rayonnements ionisants (rayonnement β, rayonnement γ). Alternativement, les émulsions peuvent être préparées à partir de composants stériles dans des conditions strictes d'asepsie et être stérilisées par filtration. La filtration permet de plus d'obtenir des tailles de gouttelettes de phase dispersée inférieures à la taille du filtre utilisé.

En fonction de la situation (préparation juste avant administration au patient ou préparation pour stockage ou encore préparation en quantités industrielles) et des propriétés désirées de l'émulsion, l'homme du métier sait sélectionner la méthode et les conditions de préparation les plus adaptées.

Propriétés de VEmulsion Huile dans Eau

Une émulsion huile dans eau selon l'invention qui est destinée à être injectée doit, en plus d'être stérile, avoir un pH proche de la neutralité et être proche de l'isotonicité (c'est-à-dire avoir une pression osmotique similaire à celui du sang/plasma - entre 270 et 300 mosm/kg ou /L.

Dans les modes de réalisation où l'émulsion selon l'invention n'est pas préparée immédiatement avant administration, l'émulsion doit être physiquement stable. Une émulsion physiquement stable est une émulsion qui peut être stockée dans des conditions appropriées données (par exemple température, sous vide, etc ..) pendant au moins 1 semaine, 2 semaines, 3 semaines, 1 mois, 2 mois, 3 mois, 4 mois, 5 mois, 6 mois, 9 mois, 12 mois, 15 mois, 18 mois, 24 mois ou 36 mois, sans qu'une augmentation significative de la taille moyenne des gouttelettes dispersées ne soit observable.

Une émulsion huile dans eau selon l'invention peut être caractérisée par la taille des gouttelettes de la phase dispersée (ou granulométrie), par la concentration de l'émulsion, et/ou par le rapport d'indice de réfraction entre la phase continue et la phase dispersée, ainsi que par sa viscosité.

II - Utilisation de l'Emulsion Huile dans Eau

Une émulsion H/E selon l'invention est une solution de coloration de tissus hypervascularisés et/ou tumoraux in vivo. L'invention peut, en particulier, s'appliquer à la visualisation de toute tumeur solide, dont l'ablation, au moins partielle, est possible. Dans certains modes de réalisation, la tumeur solide est une tumeur hypervascularisée. Selon l'invention, l'administration de l'émulsion, au patient, est effectuée préférablement par voie intr a- artérielle. Tel qu'utilisé ici, le terme "sujet" désigne un être humain ou un animal, en particulier un mammifère (par exemple un primate, un chien, un chat, une chèvre, un cheval, un porc, une souris, un rat, un lapin, et analogues) qui peut développer une tumeur solide. Dans certains modes de réalisation préférés de la présente invention, le sujet est un être humain. Dans ces modes de réalisation, le sujet est souvent appelé "individu". Le terme "individu" ne désigne pas un âge particulier, et englobe donc les enfants, les adolescents et les adultes. Le terme "patient" est plus particulièrement utilisé ici lorsque l'individu est atteint d'une tumeur solide.

Le terme "intra- artérielle", lorsqu'il est utilisé ici pour caractériser une méthode d'administration, désigne un procédé dans lequel une injection ou une perfusion est effectuée dans une artère qui mène à l'organe cible. Cette voie d'administration est bien connue dans les diagnostics par injection de substances radio-opaques pour visualisation par imagerie, radiographie, etc ., ou encore dans les chimiothérapies du cancer par ciblage d'un organe précis (chimiothérapie intra-artérielle). Dans le contexte de l'invention, l'administration intra-artérielle est effectuée en injectant sélectivement l'émulsion dans l'artère nourricière de la tumeur après cathétérisme ultrasélectif. Les artères qui peuvent être utilisées pour l'administration d'une émulsion selon l'invention sont, par exemple, les artères rénales (qui vascularisent les reins), l'artère hépatique (qui vascularise le foie et les voies biliaires ainsi qu'une partie de l'estomac), l'artère gastroduodénale (qui vascularise une partie de l'estomac, du duodénum et du pancréas), l'artère mésentérique supérieure (qui vascularise l'intestin depuis la partie inférieure du duodénum jusqu'à l'angle colique gauche, ainsi que le pancréas), l'artère mésentérique inférieure (qui vascularise le côlon descendant, l'angle colique gauche, le côlon iliaque et sigmoïde), l'artère gastrique gauche (qui vascularise une partie de l'estomac), l'artère splénique (qui vascularise la rate, une partie de l'estomac et une partie du pancréas), les artères pulmonaires (qui délivrent un sang pauvre en oxygène aux deux poumons), l'artère utérine (qui vascularise l'utérus et les deux tiers médiaux de la trompe utérine), ou tout autre artère pouvant alimenter potentiellement une tumeur solide.

Tel qu'utilisé ici, le terme "tumeur solide" désigne une grosseur plus ou moins volumineuse due à une multiplication excessive de cellules, cancéreuses ou non. Les tumeurs solides cancéreuses, comme les carcinomes ou les sarcomes, repérables par un amas de cellules localisé, se distinguent des leucémies ou des lymphomes, où les cellules cancéreuses sont en circulation dans le sang, ne constituant pas de masse solide. Les cancers solides représentent 90% des cancers humains. Des exemples de tumeurs solides cancéreuses, primitives ou secondaires (métastases), parenchymateuses ou mésenchymateuses, incluent, sans limitation, les cancers du rein, du foie, du pancréas, de la rate, du tube digestif, du poumon, des voies biliaires, de la prostate, de l'utérus, du sein, des ganglions lymphatiques, des parties molles (sarcome), etc ..

Tel qu'utilisé ici, le terme "tumeur hypervascularisée" désigne une tumeur dont l'irrigation sanguine est exagérément développée. Des exemples de tumeurs hypervascularisées incluent, sans limitation, les cancers du rein, du foie, du pancréas, de la rate, du tube digestif, du poumon, des voies biliaires, de la prostate, de l'utérus, du sein, des ganglions lymphatiques, des parties molles (sarcomes), etc ..

Les émulsions H/E selon l'invention sont particulièrement utiles dans le cas d'ablations coelioscopiques ou laparoscopiques. Les termes "coelioscopie" et "laparoscopie", sont utilisés ici de façon interchangeable. Ils désignent une technique chirurgicale mini-invasive pratiquée au niveau de l'abdomen, qui est rendue possible par l'utilisation d'une petite caméra (appelée "coelioscope") et d'instruments de chirurgie adaptés, introduits dans l'abdomen à travers de petites incisions. Les avantages des interventions coelioscopiques sont multiples et ont été maintes fois prouvés par comparaison avec les techniques classiques de chirurgie comme la laparotomie (ouverture de l'abdomen par incision). Ces avantages incluent notamment: une diminution de la douleur post-opératoire, une diminution du risque infectieux, une diminution du risque de complication pariétales, une diminution du risque d'adhérences dans le péritoine, une diminution de la durée d'hospitalisation, une reprise plus rapide des activités par le patient, et des cicatrices de plus petite taille. En oncologie, la coelioscopie trouve application en chirurgie viscérale, en particulier pour la cholécystectomie (ablation de la vésicule biliaire en cas de tumeur de la vésicule biliaire ou des voies biliaires), la sigmoïdectomie (ablation de la partie terminale du gros intestin (le sigmoïde) en cas de cancer du côlon gauche), la splénectomie (ablation de la rate en cas de cancer de la rate) la gastrectomie (ablation de l'estomac, en totalité ou en partie, pour un cancer de l'estomac); en urologie, en particulier pour la néphrectomie (ablation partielle ou élargie en cas de cancer du rein), et la prostatectomie (ablation de la prostate en cas de cancer); en gynécologie, en particulier pour l'hystérectomie (ablation totale ou partielle de l'utérus en cas de cancer de l'endomètre ou du col de l'utérus); et en chirurgie thoracique (ablation de tumeur pulmonaire). Dans certains modes de réalisation, une émulsion selon l'invention est utilisée pour visualiser les tissus tumoraux chez un patient souffrant d'un cancer du rein lors d'une néphrectomie coelioscopique partielle ou élargie.

Dans certains modes de réalisation, une émulsion selon l'invention est utilisée pour visualiser les tissus tumoraux chez un patient souffrant d'un cancer du foie lors d'une ablation coelioscopique. Le cancer du foie le plus fréquent est le carcinome hépatocellulaire ou hépatocarcinome. L'ablation partielle du foie est une opération chirurgicale qui consiste à retirer la partie du foie sur laquelle la tumeur s'est développée. On parle de résection chirurgicale ou encore d'hépatectomie partielle. Elle est contre- indiquée dans le cas d'hypertension portale importante, c'est-à-dire de pression du sang trop élevée dans la veine porte, qui augmente le risque de complications.

Dans certains modes de réalisation, l'administration d'une émulsion selon l'invention est suivie par une embolisation, plus spécifiquement une embolisation de l'artère utilisée pour l'administration de l'émulsion. Tel qu'utilisé ici, le terme "embolisation" désigne une intervention thérapeutique consistant à obstruer une artère, par exemple en lui injectant un produit, afin d'arrêter l'apport sanguin à la tumeur. Les produits ou agents d' embolisation sont de plusieurs natures: des matériaux liquides ou semi-liquides qui se solidifient (colles biologiques ou éthanol), des microparticules solides (billes) et des spires métalliques (coils). En fonction de la nature et de la localisation de la tumeur ainsi que de l'effet d' embolisation désiré (effet transitoire ou définitif), l'homme du métier sait sélectionner l'agent d' embolisation le plus adapté.

L'administration d'une l'émulsion selon l'invention se fait en une quantité ou dose diagnostiquement efficace. L'expression "quantité diagnostiquement efficace", telle qu'utilisée ici, désigne une quantité qui est suffisante pour atteindre le ou les objectifs désirés, comme par exemple une visualisation satisfaisante des tissus tumoraux d'un organe cible lors d'une ablation coelioscopique. La dose d'émulsion peut varier en fonction de la nature et de la localisation de la tumeur, ainsi que de l'âge, du poids et/ou de l'état de santé du patient. D'une manière générale, la dose à administrer par voie intra- artérielle peut être comprise entre 0,2 ml et 10 ml d'émulsion H/E selon l'invention, par exemple, 0,2 ml, 0,3 ml, 0,4 ml, 0,5 ml, 0,6 ml, 0,7 ml, 0,8 ml, 0,9 ml, 1 ml, 2 ml, 3 ml, 4 ml, 5 ml, 6 ml, 7 ml, 8 ml, 9 ml, ou 10 ml, et ne doit pas dépasser 15 ml, par exemple 11 ml, 12 ml, 13 ml, 14 ml ou 15 ml. D'une manière générale, l'homme du métier sait que la dose à administrer doit être diminuée proportionnellement chez l'enfant et chez les personnes présentant une insuffisance pondérale, et il sait arrêter l'administration de la dose en cas de stagnation du flux dans l'artère, afin d'éviter un reflux de l'émulsion vers une artère non cible. L'homme du métier est de plus capable, sans expérimentation exagérée et en se basant sur ses connaissances personnelles et son expérience, déterminer une quantité diagnostiquement efficace pour une situation et un patient donnés.

III - Kits Pharmaceutiques

La présente invention vise également des kits comprenant du matériel utile pour la réalisation d'une méthode de visualisation de tissus tumoraux et/ou hypervascularisés selon l'invention. Ainsi, dans certains modes de réalisation, un kit selon l'invention contient du Lipiodol et du bleu patenté (tels que décrits ici) dans des récipients individuels. Dans d'autres modes de réalisation, un kit selon l'invention comprend une émulsion H/E (telle que décrite ici) aliquotée dans différents récipients.

Les récipients peuvent être des flacons, des ampoules, des tubes à essai, ou des seringues pré-remplies, qui peuvent être en verre, en plastique, en résine, etc .. Les récipients peuvent être transparents, ou alternativement être opaques ou colorés pour prévenir ou réduire l'exposition directe de leur contenu à la lumière.

Dans certains modes de réalisation, un kit selon l'invention peut en outre contenir au moins un émulsifiant. Le kit peut en outre contenir au moins un additif ou agent de formulation choisi parmi les agents stabilisants, les agents de texture, les acides aminés, les acides gras ou leurs sels, les vitamines, les conservateurs, les substances antimicrobiennes, l'urée, et leurs combinaisons. Le ou les additifs ou agents de formulation contenus dans le kit peuvent être fournis sous forme solide (par exemple sous forme lyophilisée) ou sous forme liquide. Un milieu de reconstitution des ingrédients lyophilisés peut également être inclus dans un kit.

Lorsque le kit comprend du Lipiodol et du bleu de patenté contenus dans des récipients individuels, le kit peut en outre comprendre un dispositif pour préparer une émulsion avant administration au patient. Le dispositif peut être, par exemple, des seringues, et/ou un robinet trois voies. Le kit peut également comprendre un dispositif pour administrer une émulsion selon l'invention. Un kit selon l'invention peut aussi comprendre des instructions pour mettre en œuvre une méthode de coloration selon l'invention.

Un kit selon l'invention peut également comprendre une notice sous la forme prescrite par une agence gouvernementale régulant la préparation, la vente et l'utilisation de produits biologiques.

A moins qu'ils ne soient définis d'une autre manière, tous les termes techniques et scientifiques utilisés ici ont la même signification que celle couramment comprise par un spécialiste ordinaire du domaine auquel appartient cette invention. De même, toutes les publications, demandes de brevet, tous les brevets et toutes autres références mentionnés ici sont incorporés par référence.

Les exemples suivants et les figures sont présentés pour illustrer certains modes de réalisation des procédures décrites ci-dessus et ne doivent en aucun cas être considérés comme une limite à la portée de l'invention.

Exemples

Les exemples suivants décrivent certains modes de réalisation de la présente invention. Cependant, il est entendu que les exemples ne sont présentés qu'à titre illustratif seulement et ne limitent en aucun cas la portée de l'invention.

Légendes des Figures

Figure 1: Vue coelioscopique. Repérage d'une tumeur rénale ayant été colorée par une émulsion selon l'invention, après dissection de la graisse péri-rénale.

Figure 2: Vue coelioscopique. Exérèse chirurgicale de la tumeur colorée.

Figure 3: Vue coelioscopique de la tumeur colorée ayant été complètement réséquée par le chirurgien, juste avant extraction.

Exemple 1: Caractérisation d'une Emulsion Selon l'Invention

Préparation d'une Emulsion

Le Lipiodol (Lipiodol ^® Ultra Fluide, Guerbet, Roissy, France) est aspiré à l'aide d'une seringue de 3 mL (en une quantité représentant 60% v/v du produit final). Le bleu patenté (Bleu Patenté V Sodique Guerbet 2,5%, Guerbet, Roissy, France) est aspiré dans une seconde seringue de 3 mL (en une quantité représentant 40% v/v du produit final). Les deux seringues sont reliées entre elles à l'aide d'un robinet trois voies. Le mélange est réalisé en faisant passer à l'aide du robinet trois voies le bleu patenté vers le Lipiodol ^® , puis 20 allers -retours sont effectués en moins de 15 secondes.

Caractérisation de VEmulsion

Les caractérisations ont été menées systématiquement sur trois préparations différentes.

L'émulsion est de type huile dans eau (la phase aqueuse étant représentée par le bleu patenté et la phase huileuse par le Lipiodol). Sa conductivité (Consort C561, Turnhout, Belgique), est de 2,59+0,10 mS/cm. L'émulsion est stable moins de 10 minutes à température ambiante, c'est-à-dire que deux phases distinctes sont observées 10 minutes après préparation de l'émulsion. La conservation entre 2 et 8°C n'améliore pas cette stabilité mais ralentit le processus de sédimentation du Lipiodol, puisqu' après 24 heures de stockage, la sédimentation est moins importante à 4°C qu'à 25°C. La chaleur accélère le processus de séparation de phase.

Une étude de libération du bleu patenté à partir de l'émulsion a été réalisée dans un tampon PBS (phosphate buffer saline) à pH 7,2. Un millilitre (1 mL) de l'émulsion a été déposé dans un Float-a-Lyzer G2 dont un seuil de rétention est de 100 kDa (Spectrum Labs, Breda, Pays Bas). Le Float-a-Lyzer G2 a été placé dans un bain marie (900 mL) thermostaté à 37°C sous agitation magnétique pendant deux heures. Le profil de libération obtenu montre une libération constante pendant les 40 premières minutes. Après 120 minutes d'étude, 75 ± 6 % du bleu patenté a été libéré dans le tampon PBS.

La viscosité dynamique de l'émulsion a été mesurée grâce à un viscosimètre Malvern Kinexus® (Worcestershire, UK), et piloté par le logiciel rSpace for Kinexus®. Le mobile utilisé est à géométrie conique dont l'angle est de 2° et le diamètre de 5 cm. L'émulsion présente une viscosité de 230 mPas.s à 25oC avec un comportement rhéofludifiant.

Enfin, une étude microscopique (Nikon Eclipse E400 POL, Buckinghamshire, UK), a été réalisée. La granulométrie de l'émulsion a été déterminée grâce au logiciel Archimed® v5.4.1. Juste après formulation, l'émulsion est homogène et présente une taille de globules de l'ordre de 5 à 10 μιη. Exemple 2: In vivo Data

Matériels et Méthodes

De février 2016 à juin 2016, 10 patients ont été opérés en utilisant une technique selon l'invention, à savoir la localisation de la tumeur rénale par injection ultra- sélective intra- artérielle d'une émulsion de Lipiodol et de bleu patenté, puis embolisation de la tumeur immédiatement avant la néphrectomie partielle laparoscopique. La procédure de localisation pré- opératoire a été effectuée lorsque le chirurgien et le radiologique ont estimé que la tumeur n'était pas susceptible d'être visualisée pendant la laparoscopie, sur la base des propriétés endophytiques de la tumeur et la présence suspectée de graisse périrénale adhérente en cas d'IMC élevé. Tous les 10 patients ont été traités dans une salle d'opération équipée d'un système d'angiographie (Discovery IGS 730, GE Healthcare). Toute la procédure a été effectuée sous anesthésie générale. Les patients ont tout d'abord été placés dans une position décubitus dorsal et le radiologue a procédé à l'embolisation. Un cathéter a été inséré dans l'artère fémorale. L'artère rénale a été cathétérisée et l'artériographie rénale 3D a été réalisée pour identifier la vascularisation tumorale de manière précise. Une cathétérisation supersélective des deux artères segmentaires qui alimentent la tumeur a été réalisée au moyen d'un microcathéter coaxial de 2,7F (Progreat, Terumo Europe, Leuven, Belgique).

Pour la coloration de la tumeur, émulsion a été préparée par le radiologue, comme décrit dans l'Exemple 1. En moyenne, un volume de 0,6 mL de l'émulsion a été doucement injecté dans l'une des artères tumorales de manière à éviter un reflux dans les artères rénales saines. Puis, une embolisation sélective a été effectuée de manière à épargner le plus de tissu rénal possible, en utilisant des microcoils (spires métalliques) fibrés (VortX, Boston Scientifics) ou de la colle (N-butyl-2-cyanoacrylate Glubran 2, GEM Sri, Viareggio, Italie) diluée 1:5 (v/v) dans du Lipiodol. Une dernière artériographie 3D a été réalisée pour contrôler la dévascularisation tumorale et confirmer la préservation du parenchyme rénal. Ensuite, les patients ont été positionnés en décubitus latéral afin d'effectuer la laparoscopie, qui a été réalisée sans isoler le hile rénal. Le colon n'a pas été détaché et le fascia de Gerota a été incisé immédiatement. L'excision de la tumeur a été réalisée sans provoquer de saignements artériels et tout saignement veineux a été contrôlé en appliquant un courant bipolaire puis un agent hémostatique (Floseal). La pièce opératoire a été extraite dans un sac de prélèvement. Résultats

Les caractéristiques démographiques, radiologiques, et chirurgicales des 10 patients sont présentées dans le Tableau 1 ci-dessous.

Six (6) hommes et quatre (4) femmes constituent le groupe des 10 patients, avec un âge moyen de 58,8 ans (41 à 71 ans). L'IMC moyen était de 25,15 (20,1 à 31,25). La taille moyenne des tumeurs était de 2,66 cm (15 à 3,5) avec un score de complexité tumorale faible pour 2 (20%) patients et moyen pour 8 (80%) patients. L'émulsion de coloration n'a pas eu d'incidence sur le diagnostic pathologique, qui a révélé une tumeur maligne chez 9 patients et une tumeur bénigne (oncocytome) chez 1 patient. La durée opératoire radiologique, comprenant l'injection de l'émulsion et l'embolisation, était de 50 minutes en moyenne (extrêmes: 35 minutes et 75 minutes). L'injection de l'émulsion a été possible dans tous les cas, et l'embolisation a réussi chez tous les patients. La tumeur a été correctement colorée et visualisée par le chirurgien chez 9 des 10 patients. Dans le cas restant, l'échec peut être expliqué par le fait que l'émulsion n'a pu être injectée que dans l'une des deux artères segmentaires tumorales. Aucune complication post-embolisation et aucune réaction allergique n'ont été observées.

Lors de la néphrectomie partielle, le volume moyen de saignement a été de 117 mL (extrêmes: 10 mL - 500 mL). Trois (3) patients présentaient de la graisse périrénale adhérente, et 8 patients avaient une tumeur endophytique. La durée opératoire moyenne était de 80,9 minutes (extrêmes: 50 minutes - 105 minutes).

Dans tous les cas, les suites opératoires ont été simples, avec une durée moyenne d'hospitalisation de 3,9 jours (extrêmes: 3 jours - 5 jours).

L'analyse pathologique a confirmé les marges chirurgicales négatives pour toutes les tumeurs.

Tableau 1. Caractéristiques démographies, radiologiques, et chirurgicales des patients.

a ChRCC: carcinome à cellules chromophobes du rein

b RCC: carcinome à cellules claires du rein

c RO: rénal oncocytome

d PRCC: carcinome à cellules papillaires du rein

6 CDC: carcinome des tubes collecteurs de Bellini

Discussion La localisation des tissus tumoraux rénaux par coloration lors de la néphrectomie partielle avec embolisation supersélective artérielle est un nouveau concept dans le traitement du cancer du rein. Au cours de embolisation supersélective artérielle, une cathétérisation des artères segmentaires qui alimentent la tumeur est effectuée. Le microcathéter est placé très proche de la tumeur, ce qui permet de cibler l'injection du colorant directement à la tumeur, afin d'améliorer la localisation tumorale par le chirurgien.

Dans tous les cas (10 patients), l'injection de l'émulsion de Lipiodol et de bleu patenté a été possible et bien tolérée, et n'a provoquée aucune réaction allergique. Les tumeurs étaient correctement colorées au moment de la néphrectomie partielle coelioscopique dans 90% des cas, et rapidement localisées par le chirurgien. De ce fait, la durée de la chirurgie elle-même s'en est trouvée considérablement réduite même dans les cas de tumeurs endophytiques et/ou de la présence de graisse périrénale adhérente. En effet, dans la présente étude, la durée opératoire moyenne de la procédure était de 80,9 minutes alors que la durée moyenne d'une procédure de néphrectomie partielle robotiquement assistée est de 153 minutes selon une revue extensive de la littérature (Peyronnet et al, Ann. Surg. Oncol., 2016, 23(13): 4277-4273). De même, les saignements étaient moins importants (117 mL en moyenne) dans la présente étude comparés aux saignements (275 mL en moyenne) observés lors d'une néphrectomie partielle classique (Peyronnet et al, Ann. Surg. Oncol., 2016, 23(13): 4277-4273).

La coloration et visualisation des tissus tumoraux grâce à l'émulsion de Lipiodol et de bleu patenté apparaît donc comme un outil particulièrement efficace dans son utilisation dans la néphrectomie partielle avec embolisation supersélective artérielle, en particulier dans le cas de tumeurs endophytiques et/ou de présence de graisse adhérente périrénale.