本発明の態様である陰荷電基を持つ低分� ��薬物含有ナノ粒子は、陰荷電基を持つ低分� ��薬物を金属イオンにより疎水化し、この疎� ��化した薬物をポリL-乳酸又はポリ(L-乳酸/グ� ��コール酸)共重合体、及びポリDL-又はL-乳酸- ポリエチレングリコールブロック共重合体又 はポリ(DL-又はL-乳酸/グリコール酸)-ポリエチ レングリコールブロック共重合体と作用させ ることにより得られる。また、界面活性剤を 配合してもよく、界面活性剤を配合すること により、生成したナノ粒子を安定化すること ができる。

 本発明の陰荷電基を持つ低分子薬物含有ナ� ��粒子は、ナノ粒子を形成するために使用す� ��生分解性高分子として、L異性体であるポリ L-乳酸又はポリ(L-乳酸/グリコール酸)共重合� �を使用することをひとつの特徴とする。
 ポリ-L-乳酸はポリ-DL-乳酸に比し、有機溶媒 への溶解性が異なり、また結晶性が高いこと が知られている。本発明では、ポリ-L-乳酸を 、ポリDL-又はL-乳酸-ポリエチレングリコール ブロック共重合体又はポリ(DL-又はL-乳酸/グ� �コール酸)-ポリエチレングリコールブロック 共重合体と共に混合しナノ粒子を形成させる ことにより、ポリ-L-乳酸の水相での結晶化を 抑止し、安定に分散可能なナノ粒子を調製す ることができる。
 ポリ-L-乳酸は、アセトンに不溶性であるた� ��、その溶解性を上げるために、アセトン/ジ オキサンあるいはアセトン/テトラヒドロフ� �ンの混合液を使用して、ナノ粒子を調製し� �。

 上記の陰荷電基を持つ低分子薬物含有ナ� ��粒子は、界面活性剤を配合していてもよく� ��界面活性剤を配合することにより、生成し� ��ナノ粒子を安定化し、粒子間の凝集を抑止� ��ることができる。

 上記により提供される本発明の陰荷電基� ��持つ低分子薬物含有ナノ粒子は、静脈注射� ��製剤、局所注射用製剤、点鼻剤、点眼剤、� ��入剤、噴霧剤などの非経口投与用製剤とす� ��ことにより、投与することができる。

 本発明が提供する陰荷電基を持つ低分子薬� ��含有ナノ粒子は、以下のとおり作製するこ� ��ができる。
 すなわち、陰荷電基を持つ低分子薬物と金� ��イオンを、有機溶媒又は含水有機溶媒の溶� ��中で混合して疎水性薬物とし、この混合液� ��にポリL-乳酸又はポリ(L-乳酸/グリコール酸) 共重合体、さらにポリDL-又はL-乳酸-ポリエチ レングリコールブロック共重合体又はポリ(DL -又はL-乳酸/グリコール酸)-ポリエチレングリ コールブロック共重合体を加えて攪拌し、こ の溶液を水中に添加、拡散することにより調 製することができる。

 また、ポリL-乳酸又はポリ(L-乳酸/グリコ� ��ル酸)共重合体、さらにポリDL-又はL-乳酸-ポ リエチレングリコールブロック共重合体又は ポリ(DL-又はL-乳酸/グリコール酸)-ポリエチレ ングリコールブロック共重合体を溶媒に溶解 した溶液と、陰荷電基を持つ低分子薬物の水 溶液、及び金属イオン水溶液を同時に加えて 混合しても同様のナノ粒子を調製することが できる。

 ポリDL-又はL-乳酸-ポリエチレングリコー� ��ブロック共重合体又はポリ(DL-又はL-乳酸/グ リコール酸)-ポリエチレングリコールブロッ� ��共重合体をナノ粒子の表面修飾剤として用� ��ることで、ポリL-乳酸又はポリ(L-乳酸/グリ� ��ール酸)共重合体の水相における結晶化を抑 制し、その結果、粒子の大きさが均一で安定 なナノ粒子を得ることができる。

 使用される金属イオンとしては、亜鉛イ� ��ン、鉄イオン、銅イオン、ニッケルイオン� ��ベリリウムイオン、マンガンイオン、コバ� ��トイオンのいずれかであり、それらの水溶� ��金属塩の1種又は2種以上が使用される。そ� �なかでも好ましくは亜鉛イオン、鉄イオン� �あり、塩化亜鉛、塩化鉄などが好ましく使� �できる。

 上記の反応に使用される溶媒としては、� ��セトン、アセトニトリル、エタノール、メ� ��ノール、プロパノール、ジメチルホルムア� ��ド、ジメチルスルホキシド、ジオキサン、� ��トラヒドロフランなどの有機溶媒、あるい� ��これらの含水溶媒であり、アセトン、ジメ� ��ルホルムアミド、ジオキサン、テトラヒド� ��フランが好ましい。

 陰荷電基を持つ低分子薬物は、上記の金� ��イオンと結合して疎水化され易いように分� ��内にリン酸基、硫酸基又はカルボキシル基� ��有していることが好ましく、また分子量が1 ,000以下であることが好適である。

 そのような陰荷電基を持つ低分子薬物とし� ��は、種々の薬物を挙げることができるが、� ��かでも水溶性の抗炎症性ステロイド、非ス� ��ロイド性抗炎症薬、プロスタグランジン又� ��その誘導体、抗微生物薬、又は抗癌薬が好� ��であり、より具体的には、リン酸ベタメタ� ��ン、リン酸デキサメタゾン、リン酸プレド� ��ゾロン、リン酸ヒドロコルチゾン、コハク� ��プレドニゾロン、コハク酸ヒドロコルチゾ� ��などの抗炎症性ステロイド;ロキソプロフェ ン、イブプロフェン、ケトプロフェン、ジク ロフェナック、フェンブフェンなどの非ステ ロイド性抗炎症薬;プロスタグランジンE ₁ 、プロスタグランジンE ₂ 又はその誘導体;バンコマイシン、コハク酸� �ロラムフェニコール、ラタモキセフ、セフ� �ロム、リン酸クリンダマイシン、カルモナ� �などの抗微生物薬;ビンクリスチン、ビンブ� ��スチンなどの抗癌薬などが挙げられるが、� ��れらに限定されるものではない。

 ポリDL-又はL-乳酸-ポリエチレングリコー� ��ブロック共重合体(DL-体をPDLLA-PEG、L-体をPLLA -PEGということもある)又はポリ(DL-又はL-乳酸/ グリコール酸)-ポリエチレングリコールブロ� ��ク共重合体(DL-体をPDLLGA-PEG、L-体をPLLGA-PEGと いうこともある)は、ポリDL-乳酸(PDLLAという� �ともある)若しくはポリL-乳酸(PLLAということ もある)又はポリ(DL-乳酸/グリコール酸)共重� �体(PDLLGAということもある)若しくはポリ(L-乳 酸/グリコール酸)共重合体(PLLGAということも� ��る)(これらの重合体をブロックAという)とポ リエチレングリコール(PEGということもある)( ブロックBという)とを、エチレンジメチルア� ��ノプロピルカルボジイミドなどの縮合剤の� ��とで反応させることにより、生成すること� ��できるが、市販されている同様のブロック� ��重合体を使用してもよい。

 ブロック共重合体の構成としてはA-Bタイ� ��、A-B-Aタイプ、B-A-Bタイプのいずれであって も本発明の目的を達成することができる。ま た、これらのブロック共重合体の重量平均分 子量は3,000~30,000であることが好ましい。

 また、本発明の陰荷電基を持つ低分子薬� ��含有ナノ粒子は、ポリDL-又はL-乳酸-ポリエ� ��レングリコールブロック共重合体又はポリ( DL-又はL-乳酸/グリコール酸)-ポリエチレング� ��コールブロック共重合体に対するポリL-乳� �又はポリ(L-乳酸/グリコール酸)共重合体の混 合比を高くすると、大きなナノ粒子が生成さ れ、かつ薬物のナノ粒子への封入率が増加す る傾向にある。

 本発明の陰荷電基を持つ低分子薬物含有ナ� ��粒子おいて、さらに塩基性低分子化合物を� ��合することにより薬物のナノ粒子への封入� ��が増加し、10%程度まで封入することができ� ��。
 このような塩基性低分子化合物としては(ジ メチルアミノ)ピリジン、ピリジン、ピペリ� �ン、ピリミジン、ピラジン、ピリダジン、� �ノリン、キヌクリジン、イソキノリン、ビ� �(ジメチルアミノ)ナフタレン、ナフチルアミ ン、モルホリン、アマンタジン、アニリン、 スペルミン、スペルミジン、ヘキサメチレン ジアミン、プトレシン、カダベリン、フェネ チルアミン、ヒスタミン、ジアザビシクロオ クタン、ジイソプロピルエチルアミン、モノ エタノールアミン、ジエタノールアミン、ト リエタノールアミン、エチルアミン、ジエチ ルアミン、トリエチルアミン、メチルアミン 、ジメチルアミン、トリメチルアミン、トリ エチレンジアミン、ジエチレントリアミン、 エチレンジアミン、トリメチレンジアミン等 を挙げることができ、好ましくは、2級又は3� ��アミン類であり、ジエタノールアミンが特� ��好ましい。

 かくして調製された陰荷電基を持つ低分� ��薬物含有ナノ粒子に界面活性剤を配合して� ��よく、界面活性剤を配合することにより、� ��成したナノ粒子を安定化し、かつ粒子間の� ��集を抑制することができる。したがって、� ��ノ粒子を含有する製剤の製剤化工程にとっ� ��好ましいものとなる。

 使用される界面活性剤としては、ホスフ� ��チジルコリン、ポリオキシエチレン(20)ソル ビタンモノオレート、ポリオキシエチレン(20 )ソルビタンモノラウレート、ポリオキシエ� �レン(20)ソルビタンモノステアレート、ポリ� ��キシエチレン(20)ソルビタンモノパルミテー ト、ポリオキシエチレン(20)ソルビタントリ� �レート、ポリオキシエチレン(80)オクチルフ� ��ニルエーテル、ポリオキシエチレン(20)コレ ステロールエステル、脂質-ポリエチレング� �コール、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油� �び脂肪酸-ポリエチレングリコール共重合体� ��をあげることができ、これらの界面活性剤� ��ら選択される1種又は2種以上を使用するの� �好ましい。

 本発明が提供する陰荷電基を持つ低分子薬� ��含有ナノ粒子にあっては、その粒子の直径� ��20~300nmの範囲内であり、好ましくは50~200nmで あり、それぞれの薬物が目的とするターゲッ ト患部に依存して、その粒子径を決定するこ とができる。
 例えば、薬物を関節炎、癌、閉塞性動脈硬� ��症などに使用する場合には、50~200nmの粒径� �有するナノ粒子を静脈注射することが好ま� �い。この粒径は、PDLLA-PEG若しくはPLLA-PEG又は PDLLGA-PEG若しくはPLLGA-PEGを溶解する溶媒、好� �しくはアセトン又はジオキサンの量を調節� �ることにより調整することができ、アセト� �又はジオキサンの量を多くすることにより� �さな粒径のナノ粒子が得られる。また、ナ� �粒子の粒径が大きくなるほど薬物の封入率� �高くなる傾向にある。

 かくして調製した本発明の陰荷電基を持� ��低分子薬物含有ナノ粒子は、ナノ粒子の溶� ��又は懸濁液を、遠心分離、限外濾過、ゲル� ��過、フィルター濾過、ファイバー透析など� ��操作により適宜精製した後、凍結乾燥して� ��得、保存される。

 その際、凍結乾燥した製剤を再懸濁して� ��与できるようにするため安定化剤及び/又は 分散化剤を加えて凍結乾燥されることが好ま しく、そのような安定化剤、分散化剤として はショ糖、トレハロース、カルボキシメチル セルロースナトリウムなどが好ましく使用さ れる。

 本発明が提供する陰荷電基を持つ低分子� ��物含有ナノ粒子は、静脈注射用製剤、局所� ��射用製剤、点鼻剤、点眼剤、吸入剤、噴霧� ��などの非経口投与用製剤の医薬品として使� ��され、なかでも静脈注射用製剤とすること� ��、当該ナノ粒子の特性、効果をより良く発� ��することができる。

 これらの非経口投与用製剤の調製に使用� ��れる基剤、その他の添加剤成分としては、� ��剤学的に許容され、使用されている各種基� ��、成分を挙げることができる。具体的には� ��生理食塩水、単糖類、二糖類、糖アルコー� ��類、多糖類などの糖類;ヒドロキシエチルセ ルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、 メチルセルロースなどの高分子添加剤;イオ� �性又は非イオン性界面活性剤;などが剤型に� ��じて適宜選択され、使用することができる� ��