SÓDICA PURIFICADA

D E S C R I P C I Ó N

OBJETO DE LA INVENCIÓN

La presente invención se refiere a un nuevo método para el aislamiento y purificación de pravastatina sódica, a partir de un caldo de fermentación.

El objeto de la invención es proporcionar un procedimiento que permita la obtención de pravastatina sódica, a partir de un caldo de fermentación, de un modo sencillo, rápido y a la vez económico, obteniéndose con todo ello un producto final de alta calidad. Procedimiento que es de fácil escalado industrial y muy limpio desde el punto de vista medioambiental.

La presente invención se encuadra dentro del ámbito de la industria farmacéutica.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

La pravastatina es un compuesto bien conocido, perteneciente a la familia de las llamadas estatinas, que son compuestos inhibidores del enzima HMG-CoA reductasa. Este enzima actúa como un catalizador de la reacción de formación de ácido mevalónico, que es la etapa limitante de la biosíntesis de colesterol.

La pravastatina, denominada químicamente con el nombre de ácido 3,5-dihidroxi-7-[6-hidroxi-2-metil-8-(2-metilbutiriloxi)- 1 ,2,6,7,8,8a- hexahidro-l-naftil]heptanoico, se utiliza como agente antihipercolesterémico en forma de sal sódica, y presenta la siguiente fórmula:

La pravastatina fue aislada inicialmente de la orina canina como metabolito de la compactina en el transcurso de un estudio del metabolismo de compactina (Tanaka y cois.; resultados no publicados), y posteriormente elucidada estructuralmente. (Haruyama.H y cois; Chemical & Pharmaceutical

Bulletin (1986), 34(4), 1459).

Este compuesto también puede obtenerse por hidroxilación enzimática de la compactina, mediante el empleo de cepas de varios microorganismos, tal como muestra la patente US 4346227 de la compañía Sankyo, en la que además, se describen sus propiedades como inhibidor del enzima HMG-CoA reductasa.

Han sido publicados varios procedimientos de obtención de pravastatina sódica a partir de un caldo de fermentación. Así, en la patente US 4346227, la pravastatina se extrae del caldo de fermentación a pH ácido con acetato de etilo, separando previamente la biomasa por filtración. Al

extracto de pravastatina obtenido se le adiciona una cantidad catalítica de ácido trifluoro acético, se neutraliza con bicarbonato sódico y se concentra para obtener un residuo de pravastatina en su forma de lactona, que se purifica por HPLC.

En la patente US 5202029 se describe un proceso de purificación de un crudo de inhibidores de HMG-CoA reductasa mediante HPLC. Una vez que el inhibidor de HMG-CoA reductasa es eluido en la columna, se elimina parcialmente el eluyente y por adición de agua, se consigue su cristalización.

En otra patente US 6306629, una vez separada la biomasa, la pravastatina se adsorbe del caldo de fermentación por medio de una resina adsorbente polimérica, y posteriormente se lava y se eluye con acetona o metanol. Una vez concentrado el eluyente, se obtiene un residuo que se purifica por HPLC en fase reversa.

Un procedimiento de purificación de un crudo de inhibidores de HMG-CoA reductasa mediante cromatografía de desplazamiento, se describe en la patente US 6695969. El inhibidor de HMG-CoA reductasa se disuelve en una fase móvil y se siembra en una columna. Dicha columna se lava con una segunda fase móvil que desplaza al inhibidor de HMG-CoA reductasa a través de la columna. Se recogen fracciones que se analizan por HPLC y el inhibidor de HMG-CoA reductasa se obtiene por liofilización o recristalización.

Por otra parte, con la patente US 5616595 se proporciona un proceso para el aislamiento de distintos compuestos insolubles en agua, y que están presentes en un caldo de fermentación, mediante filtración tangencial.

El método anterior es aplicable a una gran variedad de

- A - compuestos, entre los que se encuentra la pravastatina. El caldo de fermentación se hace pasar a través de un filtro de forma cíclica, de modo que va perdiendo agua, hasta conseguir la concentración deseada. A continuación, el compuesto deseado se aisla del filtrado mediante extracción con un solvente, sometiéndolo posteriormente a un proceso de purificación.

En la patente US 6583295 se describe la preparación de una serie de sales de amina de inhibidores de HMG-CoA reductasa, entre ellos pravastatina, y su posterior conversión a sus sales farmacéuticamente aceptables o a sus formas de lactona. En los ejemplos de la patente, la pravastatina sódica se obtiene a partir de la sal de terc-butilamina, por disolución de dicha sal en solución etanólica de hidróxido sódico o en solución acuosa de carbonato sódico.

Existen, por otro lado, varios métodos de aislamiento de pravastatina a partir de un caldo de fermentación de la cepa de Mortierella maculata, que aparecen descritos en la patente US 6682913. El caldo de fermentación, una vez que ha sido filtrado, se carga en una resina de intercambio aniónico de tipo básico fuerte. Tras su elución en la columna, la pravastatina se extrae a pH ácido con acetato de etilo o acetato de isobutilo. Posteriormente, se produce la lactonización por adición de una cantidad catalítica de ácido trifluoroacético. Tras recristalización de la forma lactona de pravastatina, se forma la sal sódica por adición de hidróxido sódico y se purifica en una columna de cromatografía de exclusión molecular HP-20. Tras eluirse de la columna con una mezcla de acetona y agua, finalmente se aisla pravastatina sódica por liofilización.

Alternativamente, tras la extracción del caldo a pH ácido, la pravastatina puede convertirse en su correspondiente sal de amina secundaria por adición de una amina adecuada. Tras recristalizarse, esta sal de amina de pravastatina es transformada en sal sódica por adición de etóxido sódico.

Mediante recristalización o liofilización se obtiene pravastatina sódica.

Otra opción para la obtención de la pravastatina sódica, tras la extracción del caldo a pH ácido, consiste en re-extraer la pravastatina contenida en la fase orgánica de acetato de etilo o acetato de butilo, en forma de sal sódica por contacto con una solución acuosa alcalina. Una posterior purificación por cromatografía en resina adsorbente de tipo no iónico permite que la pravastatina sódica obtenida sea de elevada pureza.

En la patente EPl 190087 se describen métodos de aislamiento de pravastatina similares a los de la patente anterior, con la diferencia de que se refieren a caldos de fermentación de la cepa de Micromonospora. La pravastatina se separa del caldo de fermentación por adsorción en una resina aniónica o bien por extracción con un solvente orgánico inmiscible en agua, seguida de su conversión en su forma de lactona o en una sal de amina secundaria o bien por purificación del extracto alcalino acuoso obtenido a partir del extracto orgánico procedente del caldo de fermentación, mediante cromatografía en una resina no iónica.

Otro proceso de aislamiento de pravastatina sódica a partir de un caldo de fermentación, se describe en la patente US 6444452. Dicho proceso consiste en obtener una solución acuosa u orgánica enriquecida de pravastatina y por adición de hidróxido amónico o amoniaco respectivamente, obtener sal de amonio de pravastatina, que se purifica por recristalización. Esta sal amónica de pravastatina se disuelve posteriormente en agua, se extrae pravastatina con acetato de isobutilo a pH ácido, y se convierte en pravastatina sódica por re-extracción con una solución acuosa de hidróxido sódico. El exceso de iones sodio se elimina por tratamiento de la solución acuosa de pravastatina sódica con una resina de intercambio catiónico insoluble en agua, por ejemplo, con una resina catiónica acida débil, Amberlita IRC-50. Finalmente, el aislamiento de pravastatina sódica se

produce por liofilización o por recristalización.

La solicitud de patente WO 0232847 describe un método de purificación de una solución acuosa de pravastatina sódica, denominado ^" salting out ^" . El caldo de fermentación se extrae a pH ácido con acetato de etilo y se re-extrae por contacto con una solución acuosa de hidróxido sódico.

A la solución acuosa de pravastatina sódica así obtenida, se le añaden diversas sales inorgánicas, por ejemplo, sulfato, nitrato, o acetato amónico o bien cloruro sódico y se calienta la mezcla resultante a 20 - 60° C. Tras dejar enfriar a 0 ^o C se logra la precipitación de pravastatina sódica con una pureza de alrededor del 90%.

Por su parte, la solicitud de patente WO 0232848 proporciona otro método de aislamiento y purificación de pravastatina sódica a partir de un caldo de fermentación. El procedimiento consiste en separar el micelio y adicionar al caldo filtrado una base inorgánica, por ejemplo hidróxido sódico, y calentar a reflujo a pH básico. A continuación, se lleva a cabo una extracción de pravastatina a pH ácido utilizando acetato de propilo o acetato de butilo. La fase orgánica enriquecida se re-extrae con una solución acuosa de hidróxido sódico a pH 8 - 9. A esta fase acuosa de pravastatina sódica se le añade un ácido inorgánico y se calienta a una temperatura de entre 20 y 50° C y a pH entre 2 y 5. Mediante cristalización posterior se aisla pravastatina sódica de alta pureza.

Los procedimientos de obtención de pravastatina descritos en las distintas patentes anteriormente expuestas son difíciles de implantar a nivel industrial, dado que suponen el empleo de columnas cromatográficas de HPLC y, a menudo, de volúmenes elevados de solvente, lo que supone un alto coste económico.

También surgen problemas con el caldo de fermentación de

partida, ya que como es bien sabido en el campo de trabajo a que pertenece la invención, los caldos de fermentación contienen una gran cantidad de sustancias, necesarias para el proceso de fermentación, que, sin embargo, constituyen potenciales impurezas de los principios activos. Además, los caldos de fermentación, generalmente presentan concentraciones muy bajas del principio activo, lo que obliga al tratamiento de grandes volúmenes de caldo y dificulta el posterior aislamiento de los principios activos.

Parte del problema se resuelve mediante la aplicación de sucesivas operaciones de extracción y re-extracción, para obtener soluciones orgánicas o acuosas enriquecidas de los principios activos, lográndose a la vez la eliminación parcial de impurezas contenidas en el caldo de fermentación. Sin embargo, habitualmente se requieren operaciones posteriores de purificación mediante métodos cromatográficos o aislamiento de productos intermedios para la obtención de un principio activo de la calidad requerida en la industria farmacéutica.

DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN

El procedimiento para la obtención de pravastatina sódica purificada a partir de un caldo de fermentación que la invención propone, resuelve de forma plenamente satisfactoria la problemática anteriormente expuesta, en los diferentes aspectos comentados. Se trata de un método sencillo, que puede ser fácilmente adaptado a escala industrial y que no ocasiona problemas de tipo medioambiental.

Concretamente, el procedimiento objeto de la presente invención, comprende la formación de una solución acuosa enriquecida de pravastatina a partir de un caldo de fermentación, la obtención y aislamiento de pravastatina sódica cruda o de pravastatina calcica, y su conversión en pravastatina sódica

purificada, como se puede apreciar en el siguiente esquema:

Caldo de fermentación

Miceli Extracto orgánico

Solución acuosa enriquecida

Pravastatina sód iica Pravas Itatina calcica cruda

Pravastatina sódica purificada

El procedimiento que la invención proporciona comienza con la formación de una solución acuosa enriquecida de pravastatina a partir de un caldo de fermentación. Para ello, se ajusta el caldo de fermentación de pravastatina a pH básico, preferentemente entre 8,5 y 9,5, mediante el empleo de una disolución acuosa de una base inorgánica, por ejemplo hidróxido sódico. Una vez ajustado el pH, se procede a la adición de un coagulante de tipo poliamina, preferentemente catiónico y de un floculante de tipo poliacrilamida catiónico o aniónico. La adición del coagulante es opcional y puede realizarse también con anterioridad al ajuste de pH del caldo de fermentación.

Tras la adición de un coagulante y de un floculante, y después de un breve período de agitación, se logra la separación del caldo de fermentación, mediante centrifugación. Se obtiene un efluente libre de partículas sólidas y se logra la separación del micelio del caldo con un rendimiento de recuperación de pravastatina superior al 97%, lográndose además la eliminación de impurezas poco polares inmiscibles en medio acuoso.

La clarificación del caldo de fermentación mediante el uso de coagulantes y floculantes y la consiguiente centrifugación presenta importantes ventajas competitivas con respecto a otros métodos de separación del micelio, tales como la filtración convencional, por ejemplo, mediante un filtro prensa. Dichas ventajas son: reducción en los tiempos de separación sólido - líquido, con un caudal de caldo de 10.000 1/h, mayores rendimientos en la separación, superiores al 97 %, y obtención de un caldo filtrado más limpio, lo que favorece la extracción posterior del caldo con un disolvente orgánico, ya que se evita la formación de emulsiones en la interfase líquido - líquido.

Una vez realizada la operación de separación del micelio, se procede a ajustar el caldo a pH ácido, preferentemente entre 3,5 y 5,5, mediante el empleo de ácidos inorgánicos u orgánicos, preferentemente inorgánicos, y más preferentemente ácido clorhídrico, ácido sulfúrico o ácido fosfórico. La pravastatina se extrae del caldo acidificado ^" mediante üή ^~ disolvente con un alto rendimiento, de modo que se obtiene una solución orgánica del compuesto. El disolvente empleado es un disolvente orgánico inmiscible en agua, tal como esteres alquílicos de ácido carboxílico, hidrocarburos halogenados y cetonas, tales como acetato de etilo, acetato de propilo, acetato de butilo, cloruro de metileno y metil isobutil cetona. Los disolventes preferidos son acetato de etilo y metil isobutil cetona.

La siguiente operación para conseguir la formación de la solución acuosa enriquecida de pravastatina, es la re-extracción de la solución orgánica por contacto con una solución acuosa básica, en forma de sal alcalina o amónica. La base empleada es un hidróxido alcalino o hidróxido amónico, preferentemente hidróxido sódico. El pH de la solución acuosa básica ha de estar comprendido entre 8 y 13, preferentemente entre 9 y 11. La pravastatina se extrae preferentemente en forma de sal sódica, lográndose a la vez, la eliminación de potenciales impurezas orgánicas no polares.

Por último, el extracto acuoso se concentra hasta obtener una solución acuosa enriquecida de pravastatina. Esta concentración del extracto acuoso se realiza por destilación parcial a vacío de agua, de modo que se consigue también la eliminación de un volumen residual de disolvente orgánico.

El procedimiento propuesto por la invención, continúa con una etapa para la obtención y aislamiento de pravastatina sódica cruda o de pravastatina calcica a partir de la solución acuosa enriquecida de pravastatina anteriormente obtenida.

Generalmente, en compuestos que contienen un grupo ácido carboxílico capaz de formar sales, tal como la pravastatina, el proceso para el aislamiento de una sal determinada de dicho compuesto, con una buena pureza, es dificultoso. Particularmente complicado es el aislamiento ^" del ^" principio activo en medio acuoso, dado que, por lo general las sales de metales alcalinos y amónicas son solubles en agua. Por ello la formación y el aislamiento de sales amónicas o sales de amina, utilizadas habitualmente para purificar pravastatina, se realiza a partir de una fase orgánica enriquecida del compuesto.

El extracto acuoso enriquecido de pravastatina de la presente invención, obtenido a partir de un caldo de fermentación, puede extraerse con un disolvente orgánico inmiscible en agua, para obtener una solución orgánica enriquecida de pravastatina. Los disolventes empleados para la extracción son esteres alquílicos de ácido carboxílico, hidrocarburos halogenados y cetonas, tales como acetato de etilo, acetato de propilo, acetato de butilo, cloruro de metileno y metil isobutil cetona. Los disolventes preferidos son acetato de etilo y metil isobutil cetona. La extracción se realiza tras un ajuste a pH ácido, preferentemente entre 3,5 y 5,5, mediante el empleo de ácidos inorgánicos u orgánicos, preferentemente inorgánicos, y más preferentemente ácido clorhídrico, ácido sulfúrico o ácido fosfórico.

Se ha comprobado que a partir de la solución orgánica enriquecida, puede obtenerse pravastatina sódica cruda de buena pureza por adición de una solución de sal sódica de ácido carboxílico en alcohol de bajo peso molecular, preferentemente una solución de octanoato sódico en metanol. Después de varias horas de maduración a baja temperatura, preferentemente, entre 0 ^o C y 10° C, se obtiene pravastatina sódica cruda por filtración, mediante un filtro prensa, por ejemplo.

Alternativamente a la obtención de pravastatina sódica cruda, puede obtenerse y aislarse pravastatina calcica directamente a partir de la solución acuosa enriquecida de pravastatina. Mediante adición de una solución acuosa de cloruro calcico a la solución acuosa enriquecida de pravastatina, logra aislarse pravastatina calcica de buena pureza. El módo ele obtención de la sal calcica de pravastatina es sencillo, dado que precipita en medio acuoso y se aisla fácilmente por filtración, por ejemplo mediante un filtro prensa. La sal calcica de pravastatina puede ser utilizada como intermedio para la obtención de pravastatina sódica de pureza adecuada.

El procedimiento descrito en la invención finaliza con la obtención

de pravastatina sódica purificada a partir de la pravastatina sódica cruda o de la pravastatina calcica obtenidas.

Para ello la pravastatina sódica cruda o la pravastatina calcica se suspenden en agua y, tras ajustar la disolución a pH ácido, la pravastatina se extrae con un disolvente orgánico inmiscible en agua, preferentemente con acetato de etilo o metil isobutil cetona. El ajuste de la disolución a pH ácido, preferentemente entre 3,5 y 5,5, se realiza mediante el empleo de ácidos inorgánicos u orgánicos, preferentemente inorgánicos, y más preferentemente ácido clorhídrico, ácido sulfúrico o ácido fosfórico.

El extracto orgánico de pravastatina puede, opcionalmente decolorarse con carbón activo y lavarse con una disolución acuosa salina, preferentemente con cloruro sódico. Se continúa el proceso con la adición de una solución de sal sódica de ácido carboxílico en alcohol de bajo peso molecular, preferentemente una solución de octanoato sódico en metanol, observándose la precipitación de pravastatina sódica. Después de varias horas de maduración, preferentemente entre 3 y 8 horas, a baja temperatura, preferentemente, entre 0 ^o C y 10° C, finalmente se aisla la pravastatina sódica purificada por filtración.

La pravastatina sódica purificada de la presente invención puede ser recristalizada para obtener pravastatina sódica de calidad farmacéutica, mediante alguno de los métodos conocidos en el arte, como por ejemplo, recristalizacióñ en una mezcla de etanól y ^" acetato ^" dé etilo, o ^" récristalizaciórT por adición de acetato de etilo a una disolución de pravastatina sódica en etanol y agua.

DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS

Para complementar la descripción que se está realizando y con objeto de ayudar a una mejor comprensión de las características del invento, de acuerdo con un ejemplo preferente de realización práctica del mismo, se acompaña como parte integrante de dicha descripción, una hoja única de planos en la que con carácter ilustrativo y no limitativo y en su única figura, aparece una representación de un espectro de difracción de Rayos X de pravastatina sódica purificada obtenida según un ejemplo de realización de la presente invención.

EJEMPLOS DE REALIZACIÓN DE LA INVENCIÓN

Los ejemplos siguientes ilustran las realizaciones preferentes de la presente invención y no pretenden en absoluto limitar el alcance de la misma.

Ejemplo 1: Obtención de pravastatina sódica cruda a partir de un caldo de fermentación.

A partir de un volumen inicial de 7 m ³ de caldo de fermentación de pravastatina se diluye con 4 m ³ de agua y se le añaden 105 1 de coagulante. El caldo es ajustado a pH 9,5 por adición de hidróxido sódico al 10%, y a continuación se añade una solución de floculante y se elimina la biomasa por centrifugación, obteniéndose 14 m ³ de caldo.

El caldo se ajusta a pH 3,5 con ácido clorhídrico al 10% y se extrae con 3500 1 de metil isobutil cetona. El extracto orgánico de pravastatina es re-extraído por contacto con 1050 1 de una solución acuosa de hidróxido sódico a pH 9,5. El extracto acuoso se destila a vacío hasta obtener una solución acuosa enriquecida de pravastatina.

A continuación, la solución acuosa enriquecida se ajusta a pH 4

con ácido clorhídrico y se extrae con 600 1 de metil isobutil cetona. La fase orgánica se lava con una solución saturada de cloruro sódico y se decanta. Sobre la fase orgánica se añade una solución de 11,5 Kg de octanoato sódico disueltos en 100 1 de metanol y se completa la mezcla con la adición de 500 1 de metil isobutil cetona. La mezcla se enfría a 5 ^o C y se mantiene en maduración durante 5 horas. Tras este período, se filtra la mezcla y el producto obtenido se lava con 50 1 de metil isobutil cetona. Tras secarse a vacío a 50° C, se obtienen 21,5 Kg de pravastatina sódica cruda.

Ejemplo 2: Obtención de pravastatina calcica a partir de un caldo de fermentación.

Se parte de un volumen inicial de 5.000 mi de caldo de fermentación de pravastatina, que es ajustado a pH 9,5 por adición de hidróxido sódico. A continuación, se adiciona un coagulante de tipo poliamina y un floculante de tipo poliacrilamina y se elimina la biomasa por centrifugación.

Seguidamente, el caldo obtenido se ajusta a pH 4 con ácido clorhídrico y se extrae con 2.000 mi de acetato de etilo. El extracto orgánico de pravastatina es re-extraído por contacto con 350 mi de solución acuosa de hidróxido sódico a pH 9,5. El extracto acuoso se destila a vacío hasta obtener una solución enriquecida de pravastatina.

A la solución acuosa enriquecida de pravastatina se le añaden 10 g de cloruro calcico. Tras 4 horas de agitación a 15° C, se obtiene un sólido que se filtra y se seca a vacío a 50° C. Se obtienen 17 g de pravastatina calcica.

Ejemplo 3: Obtención de pravastatina sódica purificada a partir de pravastatina calcica.

Este proceso comienza a partir de 50 g de pravastatina calcica obtenida anteriormente. Se le añaden 1000 mi de acetato de etilo y 250 mi de agua y se ajusta el pH de la mezcla a 3,5 con ácido fosfórico. Tras una hora de agitación, se separa por decantación la fase orgánica, que contiene pravastatina.

La solución de pravastatina en acetato de etilo preparada anteriormente, se lava con 200 mi de una solución saturada de cloruro sódico, se decolora con carbón activo y se filtra. A continuación, se añaden sobre la fase orgánica 19,5 g de octanoato sódico disueltos en 200 mi de metanol y se completa con la adición de 1000 mi más de acetato de etilo.

La mezcla se deja enfriar a 5 ^o C y se mantiene en maduración durante un periodo de 4 horas aproximadamente. Transcurrido este tiempo, se filtra el sólido obtenido y se seca a vacío. Finalmente se obtienen 40 g de pravastatina sódica purificada.

Ejemplo 4: Obtención de pravastatina sódica cruda a partir de un caldo de fermentación.

El proceso comienza con ajustar un volumen inicial de 5.000 mi de caldo de fermentación de pravastatina a pH 9,5 por adición de hidróxido sódico. A continuación, se adiciona un coagulante de tipo poliamina y un floculante de tipo poliacrilamina y se elimina la biomasa por centrifugación.

El caldo obtenido se filtra, se ajusta a pH 4 con ácido fosfórico y se extrae con 2.000 mi de acetato de etilo. Este extracto orgánico de pravastatina es re-extraído por contacto con 350 mi de solución acuosa de hidróxido sódico a pH 9,5. El nuevo extracto acuoso se destila a vacío hasta obtener una solución enriquecida de pravastatina.

A la solución acuosa enriquecida se le añaden 350 mi de acetato de etilo y se ajusta a pH 4 con ácido clorhídrico. A continuación se separa la fase orgánica, se decolora con carbón activo y se filtra. Sobre esta solución se añaden 8 g de octanoato sódico disueltos en 80 mi de metanol y se completa la mezcla con la adición de 500 mi de acetato de etilo. La mezcla se enfría a

5 ^o C y se mantiene en maduración durante 4 horas. Tras este período, se filtra el sólido obtenido y se seca a vacío. Se obtienen 16 g de pravastatina sódica cruda.

Ejemplo 5: Obtención de pravastatina sódica purificada a partir de pravastatina sódica cruda.

Se toma una muestra de 15O g de pravastatina sódica cruda a la que se le añaden 2250 mi de acetato de etilo y 450 mi de agua, posteriormente se ajusta el pH de la disolución a 3,4 con ácido clorhídrico. Tras 15 minutos de agitación, se separa por decantación la fase orgánica, que contiene pravastatina.

La solución de pravastatina en acetato de etilo obtenida se decolora con 15 g de carbón activo, se filtra y se lava con 375 mi de cloruro sódico al 25 %. A continuación, se añaden sobre la fase orgánica 67,5 g de octanaoato sódico disueltos en 675 mi de metanol y se diluye la solución con la adición de 4500 mi más de acetato de etilo.

La mezcla se deja enfriar a 10° C y se mantiene en maduración durante un tiempo de aproximadamente 8 horas. Tras este período, se filtra el sólido obtenido y se seca a vacío. Se obtienen de este modo 100 g de pravastatina sódica purificada.

Ejemplo 6: Obtención de pravastatina sódica de calidad farmacéutica a partir de pravastatina sódica purificada.

Una vez obtenida la pravastatina sódica purificada, según el ejemplo anterior, se disuelven 10 g de la misma en 20 mi de etanol y 10 mi de agua, y la disolución resultante se decolora con carbón activo, posteriormente se lava con 5 mi de una mezcla de etanol y agua, y se filtra.

A continuación, se calienta la disolución clarificada a 50° C y se le añaden 420 mi de acetato de etilo, manteniendo la mezcla en agitación durante un periodo de una hora aproximadamente.

Transcurrido este tiempo, se enfría la disolución manteniéndola a una temperatura de 10° C y se somete a un periodo de maduración durante 2 horas. Seguidamente, se filtra el sólido obtenido y finalmente se seca a vacío a 50° C. Como resultado final se obtienen 6,7 g de pravastatina sódica de calidad farmacéutica.

A la pravastatina sódica obtenida se la somete a un análisis espectroscópico, cuyo espectro de difracción de Rayos X queda representado en la figura que acompaña a esta descripción.