Das Interesse der Industrie an neuen Verfahren zur Gewinnung von physiologisch wichtigen Fettsäuren aus Naturölen, insbesondere von reinen höheren m-3-und (o-6 Fettsäuren, ist groß.

Der therapeutische Effekte von o-3-und co-6 Fettsäuren, wie z. B. Stearidonsäure (SDA), Eicosapentaensäure (EPA), Docosahexaensäure (DHA) oder deren Estern, wie den Ethylestern, zur Behandlung von Artheriosklerose, rheumatischen Beschwerden, Morbus Crohn ist bekannt. Zur Erzielung eines therapeutischen Effektes-einschließlich eines präventiven und kurativen Effektes-werden tägliche Dosen von etwa 1-2 g an reinen höheren ungesättigten Fettsäuren benötigt (Vgl.

P. Grimm, Ärztezeitschrift für Naturheilverfahren 35,3 (1994), S. 202 u. v. a.).

Die Gewinnung von ungesättigten Fettsäuren kann aus nativen Quellen, wie Naturölen, erfolgen. Besonders Fischöl weist einen hohen Gehalt an höheren ungesättigten Fettsäuren auf. Weiterhin ist ein hoher Gehalt an ungesättigten Fettsäuren in Algen (Vgl. B. W. Nichols et al., Phytochemistry, Vol. 88, pp. 1907 ff.

(1969) ; G. Ahlgren et al., J. Phycol. 28,37-50 (1992) ; A. Seto et al., JAOCS, Vol. 61, no. 5 (1984) S. 892 ff.) beschrieben. Zumeist sind jedoch solche Naturöle von eigentümlichem Geschmack und Geruch, welche durch Stoffe verursacht werden können, die in geringen Mengen vorliegen können (teilweise ppm Bereich).

Gerade der Einsatz von höheren c3-3-und co-6 Fettsäuren in Lebensmitteln und Pharmazie erfordert daher zur Erzielung einer hohen Akzeptanz beim Konsumenten bzw. Patienten die Verringerung oder die Beseitigung von Fremd-und Begleitstoffen, die für den Geruch und Geschmack verantwortlich sind (z. B. in Fischöl Amine etc.).

Bekannt ist die Verkapselung und die Verwendung des erhaltenen Pulvers in Back- und Teigwaren (H. Nielsen, J. Sci. Food Agric., 1992,59,559-562).

Dieses Verfahren ist jedoch aufwendig und daher kostspielig. Zudem ist von Nachteil, daß das derart erhaltene Pulver z. B. in Flüssigkeiten (Getränke etc.) aufgrund unerwünschter Trübung und schlechter Sensorik nur bedingt oder gar nicht einsetzbar ist.

Es ist daher wünschenswert die im Naturöl enthaltenden Fettsäuren derart bereitzustellen, daß diese direkt oder in einer verkapselten Form als Feststoff oder als Emulsion in Pharmazie und Lebensmitteln eingesetzt werden können, ohne dass die Nachteile vorbekannter Produkte zum Tragen kommen.

Im Stand der Technik werden derartige Naturöle oder deren Auszüge zur Reduzierung des Geruches entweder unter Vakuum erhitzt, um die leichtflüchtigen Stoffe zu entfernen oder einer sogenannten Bleichung unterzogen.

Hierzu werden sogenannte Bleicherden (Fullersche Erde, Aluminiumsilikate) zu 1-3 Gew.-% dem Fischöl zugesetzt und für 2 Stunden auf ca. 60°C erhitzt.

Anschließend wird die Bleicherde durch Filtration entfernt (Vgl. F. D. Gunstone et al.

(Ed.), The Lipid Handbook, London, (1994), S. 287 ff).

In der JP-A-10/338,621 wird ein Verfahren zur Herstellung eines Aerosols beschrieben, worin u. a. mittels MgO-Partikeln auf einer Silica-Oberfläche Gerüche aus der Luft entfernt werden, die durch leichtflüchtige Fettsäuren entstehen.

In der WO-A-98/13,138 werden Siliciumoxide mit einem geringen Anteil an leichtflüchtigen Stoffen im basischen pH beschrieben, die den Geruch von organischen Harzen vermindern. Vor allem der durch Fettsäureamide resultierende Geruch wird verringert.

In der CZ-A-278,992 wird ein Verfahren zur Erzielung eines geruchsfreien Pflanzenöls nach der Hydrierung beschrieben. Dabei werden 500 g hydriertes Pflanzenöl mit einer Mischung von 9g Bleicherde und lg Aktivkohle 15 min. gerührt.

In der WO-A-93/10,207 wird Fischöl mit einem milden Fischgeruch beschrieben. Dabei wird Fischöl (18% EPA, 12% DHA) mit Trisylsilica für 1 Stunde im Vakuum auf 80°C erhitzt. Die Mischung wird auf 40°C abgekühlt, Hexan wird hinzugefügt und diese Mischung wird durch ein Kieselgelbett filtriert. Das Filtrat wird destilliert, um das Hexan zu entfernen.

In der JP-A-01/272,510 wird ein Verfahren zur Herstellung eines geruchsfreien Lanolinfettsäureesters beschrieben. Dazu wird der Lanolinfettsäureester in einem unpolaren Lösemittel (Hexan) gelost und durch eine mit Silica gepackte Saute gegeben und das Lösemittel abdestilliert.

In der EP-A-298,293 wird zur Entfernung von unerwünschten Nebenprodukten aus Fischöl, das Fischöl in Hexan gelost und über eine Kieselgelsäule gepumpt. Dabei werden nichtverseifbare Anteile, oxidierte Triglyceride etc, reduziert. Über den Geruch nach der Behandlung wird keine Aussage gemacht.

Die JP-A-62/181,398 beschreibt die Herstellung eines geruchsfreien Marinöls. Das Marin61 wird in Hexan gelost und zusammen mit Silicateilchen für 2 Stunden bei 30°C erhitzt. Der Überstand wird abdestilliert und es wird ein Ot mit hohen Gehalten an EPA und DHA, die frei von Geruch sind, erhalten.

Die JP-A-60/043,119 beschreibt ebenfalls die Herstellung eines Ols frei von Fischgeruch. Dazu wird das 01 mit Streptococcus lactis vorbehandelt und diese Vormischung wird mit 4 bis 10 Teilen Öl für 60 min bei 35°C gerührt. Die festen Bestandteile werden entfernt, es wird neutralisiert und die Mischung mit 0,2% Aktivkohle und 2% Bleicherde bei Vakuum 30 min entfärbt.

In der DE-A-2,806,706 wird ein Pflanzenöl mit akzeptablem Geruch hergestellt.

Nach Hydrierung und Säurebehandlung wird durch ein Bett von granulierter Aktivkohle gepumpt. Ziel ist die Reduzierung des Phosphor-Gehaltes. Anschließend erfolgt Desodorierung durch Erhitzen im Vakuum.

In der DE-A-2,622,520 wird eine Apparatur zur kontinuierlichen Vorreinigung und Bleichung von Ölen beschrieben. Im Prinzip werden Phosphate, Wasser, Lösemittel, freie Säuren und der Geruch durch Bleicherde entfernt.

In der US-A-3,649,656 werden zur Verbesserung der Farbe und des Geruches dem Naturöl Additive aus Lignin, Calciumsilikate und/oder Magnesiumsilikate (0,05 Gew.-%) beigemengt.

In der DE-A-19638459 wird ein Verfahren zur Reinigung von Fetten und Ölen tierischen und vegetabilischen Ursprungs beschrieben. Dabei werden freie Fettsäuren, Geruchs-und Geschmacksstoffe mit Polyethylenglykol extrahiert.

In allen bekannten Verfahren ist von Nachteil, daß entweder das Naturöl mit Aktivkohle oder Bleicherden unter Qualitätseinbuße thermisch belastet wird oder gar in einem unpolaren Lösungsmittel-wie z. B. Hexan-gelost wird. Zumeist erfolgt eine Lösungsmittelextraktion. Dabei kann das Lösemittel nur mit hohem Aufwand praktisch vollständig entfernt werden.

Zudem weisen die im Handel erhältlichen aufgearbeiteten Ole üblicherweise Eigengeruch und Eigengeschmack auf. Lediglich die Intensität schwankt von Verfahren zu Verfahren.

Daher hat die Erfindung zur Aufgabe ein Verfahren zur Gewinnung eines geschmacks-und geruchsfreien Öls enthaltend höhere ungesättigte Fettsäuren, vorzugsweise ca-3-und-6 Fettsäuren, aus Naturölen bereitzustellen.

Unter höheren ungesättigten Fettsäuren werden insbesondere solche Fettsäuren verstanden, die drei oder mehr Doppelbindungen enthalten.

Die Aufgabe wird in überraschender Weise dadurch gelöst, daß das Naturöl über Aluminiumoxid als Adsorbens geführt wird (nachstehend erfindungsgemäßes Verfahren).

Daher betrifft das erfindungsgemäße Verfahren ebenfalls eine adsorptive Filtration und/oder eine lösemittelfreie Chromatographie von Naturölen an Aluminiumoxid.

Des weiteren kann das erfindungsgemäße Verfahren im weitesten übergeordneten Sinne als ein Reinigungsverfahren zur Beseitigung unerwünschter Fremd-und/oder Begleitstoffe, wie Geschmacks-und Geruchsstoffen, aus Naturölen verstanden werden.

Als geeignetes Adsorbens zur Beseitigung unerwünschter Fremd-und/oder Begleitstoffe des Naturöls erweist sich Aluminiumoxid mit einer Partikelgröße von 1- 1000 ßm, vorzugsweise 50-200 4m, welches aber nicht notwendiger Weise gemörsert, mit Säure und Base gewaschen oder angeätzt wird.

Da im erfindungsgemäßen Verfahren kein Lösungsmittel verwendet werden muß, ist die Biokompatibilität der geruch-und geschmackfreien Verfahrensprodukte gewährleistet, wodurch die Verwendung der Verfahrensprodukte in Pharmazie und als Lebensmittelzusatzstoff besonders geeignet ist.

Naturöle im Sinne dieser Erfindung sind solche aus nativen Quellen, mit einem naturlichen hohen Gehalt an ungesättigten Fettsäuren, insbesondere w-3-und w-6 Fettsäuren-mehrfach ungesättigt und mit mehr als 16 C-Kohlenstoffatomen, wie

EPA, DHA, DPA, Stearidonsäure 18 : 4, Arachidonsäure 20 : 4 und alpha-und gamma-Linolensäure 18 : 3.

Besonders bevorzugt als Ausgangsöl für das erfindungsgemäße Verfahren ist Fischöl. Ebenfalls einsetzbar sind Algenöle, Öle aus Pilze, Ole aus Mikroorganismen und Pflanzenöle. Zur allgemeinen Herstellung solcher Naturöle wird auf Gunstone supra S. 167 ff. und 253 ff. ; H. Franke et al., 15t European Workshop on Microalgea Biotechnology ; Bergholz-Rehbrücke, June 10-12,1992, S.

41 ff ; C. Ratledge et al. (Ed), Microbial Lipids, London (1994) S. 394 ff verwiesen.

In einer bevorzugten Ausführungsform wird das Naturöl mit Hilfe chromatographischer Verfahren fraktioniert (Vor-Fraktionierung) und Fraktionen enthaltend höhere Fettsäuren werden angereichert und dem erfindungsgemäßen Verfahren als Ausgangsöl zugeführt.

Bevorzugte chromatographische Verfahren sind solche der schonenden überkritischen Fluidchromatographie wie Chromatographie mit überkritischen Fluiden (SFC), beispielsweise mit Kohlendioxid, Extraktion mit überkritischen Fluiden (SFE) oder Gegenstrom SFE (cc-SFE), da eben solche besonders die Biokompatibilität der Produkte gewährleisten. Ebenso zur Fraktionierung von Naturölen geeignet ist insbesondere die HPLC sowie andere dem Durchschnittsfachmann bekannte Verfahren der Fraktionierung.

In einer weiteren bevorzugten Ausführungsform werden die in den Naturölen enthaltenden Fettsäuren in Lipiden und Lipoiden nach bekannten Verfahren umgeestert (Vgl. N. Nagle et al., Applied Biochemistry and Biotechnology, Vol.

24/25,1990, S. 355 ff ; M. Piorreck et al., Phytoochemistry, Vol. 23, No. 2, S. 207 ff, 1984, W. W. Christie ; Gas Chromatography and Lipids, Oily Press, 1989, S. 64 ; Gunstone supra S. 394). Es werden Fettsäurealkylester, vorzugsweise Fettsäureethylester erhalten, welche über Fraktionierung oder direkt dem erfindungsgemäßen Verfahren zugeführt werden.

Ein weiterer Gegenstand der Erfindung ist eine Vorrichtung oder eine funktionelle Anordnung bestehend mindestens aus einem Vorratsreservoir welches über eine Pumpe mit einer Säule enthaltend Aluminiumoxid als Adsorbens verbunden ist mit anschließender Fraktionierung.

Eine Ausführungsform der erfindungsgemäßen Vorrichtung wird in Figur 1 darge- stellt. Darin bedeuten (1) ein Vorratsgefäß ; (2) eine Pumpe ; (3) eine Saute mit Adsorbens ; (4) ein Umschaltventil ; (5) Gefäß (e) zum Auffangen der Eluate.

Zur Durchführung des erfindungsgemäßen Verfahrens mittel der in Figur 1 abgebildeten prinzipiellen funktionellen Anordnung wird Säule (3) (z. B. Länge : 35 cm, i. D. 2,5 cm) mit Aluminiumoxid gefüllt, vorzugsweise Alumina Super l-Qualität (Teilchendurchmesser 63-200 um)-ohne weitere Vorbehandlung. Mit Hilfe einer Pumpe (2) wird das Ausgangsöl (hier z. B : Fischöl) direkt über die Saule gepumpt.

Der von der Pumpe aufzubringende Druck hängt von der Viskosität des Ols und vom Fluß ab. Der Fluß beträgt 0,1 bis 15 Säulenvolumina/h, vorzugsweise jedoch 3 Säulenvolumina/h. Das erha) tene Öt wird über ein Umschaltventil (4) geleitet und in verschiedenen Fraktionen (5) (a), (5) (b) etc. aufgefangen und zwar werden vorzugsweise solche Fraktionen freigegeben mit einer Peroxidzahl von 0 bis 10, besonders bevorzugt kleiner 5, mit einer Säurezahl von 0 bis 2, besonders bevorzugt kleiner 1, mit einem Anisidinwert von 0 bis 30 besonders bevorzugt kleiner 20 (siehe Beispiel 5).

Das erhaltene Öl ist völlig frei von Eigengeruch oder Eigengeschmack des Naturels und ist nahezu farblos ; der Geruch wird von Testpersonen fruchtig und apfelartig oder neutral beschrieben.

Im Verlauf des erfindungsgemäßen Verfahrens erfolgt keine Änderung des Fettsäurespektrums, vielmehr werden die Fremd-und Begleitstoffe irreversibel am Adsorbens retardiert.

In einer weiteren bevorzugten Ausführungsform erfolgt das erfindungsgemäße Verfahren im Rahmen eines chromatographischen Verfahren ohne Lösungsmittel, wie in Figur 1 als Kurzweg-Säulenchromatographie beschrieben und erläutert.

Ganz besonders bevorzugt wird das erfindungsgemäße Verfahren als Radial- Säulenchromatographie mit dünner Schichtdicke durchgeführt. Bevorzugt sind Schichtdicken von 1 bis 50 cm, besonders bevorzugt 3 bis 35 cm und ganz besonders bevorzugt ist eine Schichtdicke von 30 cm. Großtechnisch kann die Radial-Säulenchromatographie beispielsweise im Rahmen eines ARCF-Verfahrens (Adsorptive Radial Coloumn Filtration, Firma Sepragen Emmen, Netherlands) ausgeführt werden.

In einer bevorzugten Ausführungsform können Fettsäureethylester weiter an bestimmten Fettsäuren und/oder Fettsäuregruppen aufkonzentriert werden. Dies kann mittels einer Harnstofffä) tung erfo ! gen. Man erhält dann ein Ausgangsöl, daß ca. 45% EPA und ca. 75% omega-3-Fettsäureethylester enthalt (Hierbei handelt es sich um typische Werte bei einer Harnstofffättung mit Fischöl).

Beispielsweise werden bei einer SFC Trennung von Fischöl typischerweise folgende Produkte erhalten : SDA mit Gehalten 30-40%, EPA mit Gehalten 85-95%, DHA mit Gehalten von 50-70%, Summe der omega-3-Fettsäuren größer als 90%.

Ein weiterer Gegenstand der Erfindung betrifft die Verwendung der biokompatiblen Verfahrungsprodukte als Lebensmittelzusatzstoffe und deren Verwendung in der Pharmazie. Die erhaltenen Ole (Verfahrensprodukte) können entweder direkt oder nach einer weiteren Verarbeitung (Pulver, Emulsion, Derivatisierung) als Lebensmittel und/oder Lebensmittelzusatzstoffe sowie in der Pharmazie eingesetzt werden. Formulierungen zur Applikation können sein solche wie Kapsel, Dragee etc.

Die nachfolgenden Beispiel dienen zur näheren Erläuterung der Erfindung, ohne die Erfindung auf diese Beispiele einzuschränken.

Beispiele : Beispiel 1 : Fettsäureethylester (Gehalt omega-3-Fettsäureethylester > 90%), das mittels konventioneller Bleichung vorgereinigt wurde, wurde mit dem erfindungsgemäßen Verfahren aufgereinigt.

Es wurden 0,621 kg dieses Produktes über eine Säule mit 0,195 kg Api203 (Schichtdicke ca. 30 cm) gegeben. Man erhielt 0,426 kg Fettsäureethylester. Dies entspricht einer Ausbeute von 68,6%. Dauer : ca. 52 min. Es wurden ca. 0,63 kg Fettsäureethylester gepumpt, Differenzmenge befand sich in der Säule.

Das Verhältnis von eingesetzter Olmenge (kg) zu eingesetztem Au203 (kg) beträgt 3,2 : 1.

Beispiel 2 : Fettsäureethylester (Gehalt omega-3-Fettsäureethylester > 90%), das mittels konventioneller Bleichung vorgereinigt wurde, wurde mit dem beanspruchten Verfahren aufgereinigt.

Es wurden 0,567 kg dieses Produktes über eine Säule mit 0,196 kg Al2O3 (Schichtdicke ca. 30 cm) gegeben. Man erhielt 0,371 kg Fettsäureethylester. Dies entspricht einer Ausbeute von 65,4%. Dauer : ca. 48 min.

Das Verhältnis von eingesetzter Ölmenge (kg) zu eingesetztem Au203 (kg) beträgt 2,9 : 1.

Beispiel 3 : Ein Fettsäureethylesterprodukt (Gehalt omega-3-Fettsäureethylester > 90%), das mittels SFC gewonnen wurde, wurde mit dem erfindungsgemäßen Verfahren aufgereinigt.

Es wurden 1,812 kg dieses Produktes über eine SAule mit 0,196 kg Api203 (Schichtdicke ca. 30 cm) gegeben. Man erhielt 1,534 kg Fettsäureethylester. Dies entspricht einer Ausbeute von 84,6%. Dauer : ca. 2,5 Stunden.

Das Verhältnis von eingesetzter Olmenge (kg) zu eingesetztem Al203 (kg) beträgt 9,3 : 1.

Beispiel 4 : Adsorptive Filtration und/oder Chromatographie mit geringer Schichtdicke Auf einer Nutsche (Durchmesser 9,3 cm) wurde ein Bett von ca. 3 cm (entspricht Schichtdicke) ca. 216 g Aluminiumoxid aufgeschüttet. 400 g Fischöl (66% DHA) wurden mittels Vakuum durch die Nutsche gesaugt. Man erhielt 311,9 g Fettsäureethylester. Dies entspricht einer Ausbeute von 78,0%.

Beispiel 5.

Bestimmung der Säurezahl, Peroxidzahl, Anisidinwerte a) Arbeitsvorschrift zur Bestimmung der Peroxidzahl (POZ) (Methode nach Wheeler ; aus : DGF-Einheitsmethoden, Deutsche Einheitsmethoden zur Untersuchung von Fetten, Fettprodukten, Tensiden und verwandten Stoffen, Hrsg. : Deutsche Gesellschaft für Fettwissenschaft e. V., Münster, Wissenschaftliche Verlagsge- sellschaft mbH Stuttgart, 1989 C-VI 6a (84)) ; vgl. IUPAC method 2.501 (1985), AOCS method Cd 8-53 (AOCS, 1987)

Etwa 10 g Probe wurden auf i 0,1 mg genau eingewogen und in 30 ml Eisessig und Chloroform (Verhältnis 3 + 2 Volumenteile) gemischt unter Umschwenken gelöst.

Nach Zugabe von 0,5 ml einer gesättigten Kaliumiodid-Lösung (10 g KJ + 10 g H20) wurde genau 60 s lang kräftig geschüttelt und anschließend im Dunkeln aufbewahrt.

Unmittelbar danach wurde die Lösung mit 30 ml Wasser verdünnt und das ausgeschiedene lod mit der 0,01 M Natriumthiosulfat-Maßlösung titriert. Die etwa 1 % ige Stärke-Lösung wurde vor Beginn der Titration zugegeben.

In gleicher Weise wurde ein Blindversuch durchgeführt, bei dem nicht mehr als 0,1 ml Maßlösung verbraucht werden sollten.

Auswertung : (a-b) *N -----------*1000POZ= E a Verbrauch der Maßlösung im Hauptversuch in ml b Verbrauch der Maßlösung im Blindversuch in ml N Titer der verwendeten Maßlösung in mol/l E Probeneinwaage in g b.) Arbeitsvorschrift zur Bestimmung der Saurezahl (SZ) (Stand März 1995) (Vgl. DGF-Einheitsmethoden supra : C-V 2 (81) ; IUPAC method 2.201 (1985) ; AOCS method Ca 5a-40 (AOCS, 1978) Es wurden 5-10 g Probe auf 0,1 % genau eingewogen, die Einwaage ist probenspezifisch zu wählen. Zu diesem Zweck wurde von jeder Probe erst nur eine Einwaage (ca. 7,5 g) angesetzt und bei einer"Schnelltitration"der Verbrauch an Maßlösung festgestellt. Sollte der Verbrauch in keinem vernünftigen Bereich liegen, wurden die nächsten Einwaagen in die entsprechende Richtung verändert, d. h. bei extrem hohem Verbrauch wird die Einwaage verringert und umgekehrt.

Die Einwaage wurde in etwa 50 ml LM-Gemisch gelöst (LM-Gemisch : Ethanol (100 Vol.-% ig) und Diethylether (Verhältnis 1 : 1 Volumenteil), welches mit 0,1 mol/I <BR> <BR> <BR> Phenolphthalein(1%iginEthanol)neutralisiertKaliumhydroxid-Ma #lösunggegen wird) anschließend mit einigen Tropfen Phenolphthalein-Lösung versetzt und mit Kaliumhydroxid-Ma#lösung bis zur bleibenden Rotfärbung titriert.

Auswertung : a*N*56,1 ----------------SZ= E a Verbrauch an Kaliumhydroxid-Ma#lösung in ml N Titer der Maßlösung in mol/l E Probeneinwaage in g 56,1 Molare Masse von KOH Bei mineralsäurefreien Proben kann aus der SZ der prozentuale Gehalt an freien Fettsäuren (FFA) wie folgt berechnet werden : <BR> <BR> <BR> <BR> <BR> <BR> Zur angenäherten Berechnung wird die molare Masse (M) von der blsäure (M = 282) zugrundegelegt.

EPA (M= 302,5) DHA (M= 328,5) FFA (%) = SZ * (282/561) c) Bestimmung der Anisidin Zahl :

Die Bestimmung erfolgte nach Europäisches Arzneibuch, Deutscher Apotheker Verlag, Stuttgart ; Govi-Verlag-Pharmazeutischer Verlag GmbH, Eschborn, Nachtrag 1998 ; 1998,1250 ; S. 540ff Die Bestimmung mußte so schnell wie möglich und unter Ausschluß direkter Lichteinwirkung durchgeführt werden.

Untersuchungslösung a : 0,500 g Probe wurden in Isooctan zu 25,0 ml gelöst.

Untersuchungslösung b : 5,0 ml der Untersuchungslösung a wurden mit 1,0 ml des p-Anisidin Reagenz (2,5g p-Anisidin in 1 I Essigsäure 98%) versetzt, geschüttelt und unter Lichtschutz aufbewahrt.

Referenzlösung : 5,0 ml Isooctan wurden mit 1,0 ml des p-Anisidin Reagenz versetzt, geschüttelt und unter Lichtschutz aufbewahrt.

Messung : UVNIS Shimadzu UV 160 Die Absorption der Untersuchungslösung a wurde gegen Isooctan als Kompensationsflüssigkeit bei 350 nm gemessen.

Genau 10 min nach der Herstellung von Untersuchungslösung b wurde die Absorption dieser Lösung bei 350 nm gegen die Referenztösung als Kompensationsflüssigkeit gemessen.

Auswertung : Die Anisidinzahl wird nach folgender Formel berechnet :

25 x (1, 2 Ab-Aa) m Ab = Absorption der Untersuchungslösung b bei 350 nm Aa = Absorption der Untersuchungslösung a bei 350 nm m = Probeneinwaage in g für die Untersuchungslösung a Für die Naturöle gemä# den Beispielen 1 bis 4 ergaben sich bei Durchführung der in den Beispielen gemafß 5 a)-c) beschriebenen Messungen die folgenden Werte : Parameter Bsp. 1 Bsp. 1 Bsp. 2 Bsp. 2 Bsp. 3 Bsp. 3 Bsp. 4 Bsp. 4 Al S1 Al S1 Al S1 Al S1 POZ 0, 62 n. n. n. n. 1, 6 1, 1 1, 5 13, 1 3, 3 Anisidin 39, 2 0, 5 58, 1 1, 38 5, 6 0, 3 2, 01 1, 13 SZ 0, 91 0, 07 2, 89 0, 12 0, 7 0, 1 0, 39 0, 19 Farbe 0, 21 0, 1 0, 22 0, 002 0, 02 0, 002 0,016 0,00 (430 nm) Geschmack ++-+-++- Geruch ++ ++ + ++

Tabelle : Analysenwerte vor und nach Aufreinigung der beschriebenen Beispiele ++ : deutlicher Fischgeruch oder deutlicher Fischgeschmack + : leichter Fischgeruch oder leichter Fischgeschmack - kein Fischgeruch oder kein Fischgeschmack n. n. : nicht nachweisbar POZ : Peroxidzahl AI : Ausgangsöl Anisidin : p-Anisidinwert S1 : aufgereinigtes Öl SZ : Säurezahl

Wie aus der Tabelle zu entnehmen ist werden auch freie Säuren entfernt und der Anisidinwert und Peroxidzahl gesenkt. Der gemessene Peroxidwert hängt bei kleinen Werten (nahe 1) von der Effektivität des Fraktionierungssystems ab, d. h. wie effektiv das Eindringen von Luft verhindert werden kann.

Nach Beendigung des Verfahrens kann das auf dem Säulenmaterial verbliebene Öl mit einem Lösemittel, wie z. B. Hexan, aber vorzugsweise mit überkritischem oder flüssigem C02 von der Säule eluiert werden. Dieses Öl kann erneut zur Aufreinigung benutzt werden.

Polare Lösemittel wie z. B. Ethanol sind weniger geeignet, da teilweise adsorbierte Stoffe wieder eluiert werden können.

Im Text verwendete Abkürzungen : DHA Docosahexaensäure (22 : 6) EPA Eicosapentaensäureethylester (20 : 5) SDA Stearidonsäureethylester (18 : 4) FAEE Fettsäureethylester SFE Extraktion mit überkritischen Fluiden SFC Chromatographie mit überkritischen Fluiden cc-SFE Gegenstrom-SFE