способ лечения метаболического синдрома X

область техники

изобретение относится к медицине, а конкретно к способу лечения метаболического синдрома X, включающего применение лекарственных средств.

предпосылки создания изобретения

метаболический синдром X - это комплекс взаимосвязанных нарушений углеводного и липидного обмена, а также механизмов регуляции артериального давления и функции эндотелия, обусловленный снижением чувствительности ткани к инсулину - инсулино- резистентностью [1].

по мнению ведущих исследователей мира, именно метаболический синдром X является основой для развития атеросклероза, ишемической и гипертонической болезни, сахарного диабета и ожирения.

в соответствии с эпидемиологическими исследованиями, проведенными в европе (воtпiа studу), заболевание 10 % населения с нормальной глюкозной толерантностью, 40 % с интолерантностью к глюкозе и 70 % больных сахарным диабетом (сд) 2 типа тесно связано с метаболическим синдромом X (синдромом инсулинорезистентности) [2].

основными из 12-ти составляющих патогенетических факторов метаболического синдрома X являются: инсулинорезистентность (снижение инсулинзависимой утилизации глюкозы тканями); гиперинсулинемия (компенсаторный механизм); нарушение толерантности к глюкозе, позже — нарушение углеводного обмена (гипергликемия натощак >5,5 ммоль/л); гипертриглицеридемия (>2,2 ммоль/л); низкий уровень холестерина липопротеинов высокой плотности (хс-лпвп) (XC <1 ммоль/л); ишемическая болезнь сердца; гипертензия и др. для диагностики метаболического синдрома X достаточно 2-3 его основных проявлений.

своевременная коррекция звеньев метаболического синдрома X дает возможность профилактики указанных его проявлений. по этой причине поиск средств, способных влиять на основные патогенетические звенья метаболического синдрома X, является наиболее актуальной проблемой современной медицины.

многочисленные исследования в этой области установили наличие тесной связи между резистентностью к инсулину и дефицитом секреции гормона, в соответствие с которой оба дефекта усиливают друг друга, особенно в случае выраженной гипергликемии [3]. в связи с изложенным, успешная терапия, направленная на снижение гипергликемии до достижения эугликемии (нормогликемии), будет одновременно воздействовать на два вышеуказанных метаболических дефекта. кроме того, основной целью терапии метаболических проявлений является не только коррекция симптомов дисгликемии путем снижения концентрации глюкозы в крови до нормы (5-6 ммоль/л натощак), а и коррекция симптомов дислипидемий, являющихся основным фактором развития микро- и макрососудистых осложнений. реализация этих задач на практике оказывается достаточно сложной проблемой, которая в настоящее время решается с помощью гипокалорийной диеты, перораль-

ных антидиабетических препаратов и инсулина. в месте с тем известная медикаметозная терапия не во всех случаях способна позитивно одновременно воздействовать на все патогенетические звенья метаболического синдрома X с получением надежных результатов. проведенными исследованиями по патентной и научно-медицинской литературе выявлен ряд способов лечения метаболического синдрома X и его проявлений.

известен способ лечения метаболического синдрома X, при котором применяют препараты производные тиазолидиндиона (троглитазон, розиглитазон и пиоглитазон), которые позитивно влияют на липидный и углеводный обмен [4], и сходные по фармакологическому действию к настоящему изобретению.

недостатком указанного известного способа являются такие побочные эффекты применяемых тиазолидиндионов как гепатотоксичность, отёки, инфекции верхних дыхательных путей, головная боль, анемия, дозозависимый прирост массы тела и др., что ограничивает их клиническое применение [5].

наиболее близким по фармакологическому действию из ближайших аналогов к предлагаемому изобретению является известный способ лечения метаболического синдрома X, предусматривающий введение субъекту терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции в виде приемлемой для введения лекарственной формы, содержащей активное вещество - из группы бигуанидов - метформин, в сочетании с одним и более фармацевтически приемлемыми эксципиентами, выбранный в качестве прототипа [6]. метформина гидрохлорид (Gluсорhаgе), как наиболее активный из препаратов класса бигуанидов, в терапии метаболического синдрома X имеет наибольшее применение. при лечении субъекту вводят препарат в суточной дозе от l,5г до 2-х г. метформин улучшает чувствительность тканей печени и

периферических тканей к инсулину, снижая при этом вес тела, однако не в полной мере обеспечивает снижение инсулинорезистентности.

вместе с тем, позитивное влияние метформина на проявления метаболического синдрома X сопровождается повышенным риском лактоцидоза, побочными эффектами со стороны желудочно-кишечного тракта, что также ограничивает его клиническое применение, особенно у лиц преклонного возраста с почечной недостаточностью и нарушенной функцией печени. указанные недостатки известного способа в целом приводят к недостаточной широте терапевтического индекса при относительно высокой токсичности и значительной дозе активного вещества - метформина. это приводит к снижению эффективности лечения с увеличением побочных эффектов медикаментозной терапии, а следовательно повышению затрат на лечение больных. все это существенно ограничивает возможность использования метформина у больных с метаболическим синдромом X.

краткое изложение сущности изобретения в основу изобретения поставлена задача усовершенствования способа лечения метаболического синдрома X, в котором за счет использования фармацевтической композиции с иным основным активным веществом, обеспечивается значительное уменьшение токсичности и дозы активного вещества, которые обусловливают увеличение широты терапевтического индекса, при достижении сопоставимого с прототипом по выраженности фармакологического действия, что позволит повысить эффективность лечения с уменьшением побочных эффектов медикаментозной терапии, а следовательно сократить затраты на лечение больных.

в результате использования заявляемого изобретения обеспечивается получение технического результата, заключающегося в

значительном уменьшении токсичности и дозы активного вещества, которые обусловливают увеличение широты терапевтического индекса, при обеспечении достижения сопоставимого с прототипом по выраженности фармакологического действия.

поставленная задача достигается тем, что в способе лечения метаболического синдрома X у млекопитающих субъектов, предусматривающего введение субъекту терапевтически эффективного количества не менее одной фармацевтической композиции в виде приемлемой для введения лекарственной формы, содержащей активное вещество в сочетании с одним и более фармацевтически приемлемыми эксципиентами, согласно изобретению, нуждающемуся субъекту в зависимости от состояния, веса и возраста, вводят, предпочтительно перорально, основную фармацевтическую композицию в индивидуальных лекарственных формах, в качестве основного активного вещества основной фармацевтической композиции используют (±)-циc-3-(2'- бензимидазолил)- 1,2,2- триметилциклопентанкарбоновую кислоту или её оптически активные изомеры формулы

или её/их физиологически приемлемые соли, которую выбирают в суточной дозе от 25 мг до 750 мг, или вводят указанную основную фармацевтическую композицию в раздельных лекарственных формах в суточной дозе от 200 мг до 750 мг, в сочетании с по меньшей мере одним дополнительным антидиабетическим лекарственным средством, содержащим не менее одно активное вещество, преимущественно метформин, от одного до трех раз в сутки, при этом дополнительное анти-

диабетическое лекарственное средство, содержащее метформин в комбинации с любым иным антидиабетическим активным веществом в одной общей индивидуальной лекарственной форме, используют в виде комбинированного препарата, вместе с тем дозы антидиабетических лекарственных средств вводят в количествах от 60% и ниже от их начальной суточной дозы. кроме того:

- в качестве оптически активных изомеров основного активного вещества основной фармацевтической композиции используют (+)-циc-3-

(2'-бeнзимидaзoлил)-l,2,2- триметйлциклопентанкарбоновую кислоту или её физиологически приемлемые соли;

- в качестве оптически активных изомеров основного активного вещества основной фармацевтической композиции используют (-)-циc-з- (2'-бeнзимидaзoлил)-l,2,2-тpимeтилциклo пeнтaнкapбoнoвyю кислоту или её физиологически приемлемые соли;

- в качестве физиологически приемлемых солей основного активного вещества основной фармацевтической композиции используют соли, полученные путем взаимодействия кислот или оснований органической или неорганической природы с основным активным веществом формулы 1;

- дополнительное иное антидиабетическое лекарственное средство выбирают из группы, включающей метформин, сульфонилмочевину, метиглинид, ингибитор глюкозидазы, глюкагоноподобный пептид 1 (GLP- 1), инсулин, сенситайзер инсулина, преимущественно глитазон, ингибитор дипептилпептидазы IV (DPP IV), преимущественно ситаглиптин;

- дополнительное любое иное антидиабетическое активное вещество, содержащееся в комбинированном препарате с метформином, выбирают из группы, включающей ингибитор глюкозидазы, преимущественно акарбоза, метиглинид, преимущественно репаглинид, сульфонилмочевину, преиму-

щественно глибурид, тиазолидиндион, преимущественно розиглитазон, ингибитор DPP IV, преимущественно ситаглиптин;

- млекопитающим субъектом является человек; - для введения основной фармацевтической композиции перорально используют лекарственную форму в виде таблеток с покрытием или без покрытия, шипучих таблеток, желатиновых капсул, микрокапсул, суспензий и растворов, а также иных лекарственных форм с пролонгированным высвобождением; - для введения основной фармацевтической композиции ректально ее используют в виде суппозиториев;

- терапевтически эффективные количества основного активного вещества основной фармацевтической композиции в индивидуальных лекарственных формах для введения человеку выбирают, предпочтительно в дозе от 125 мг до 250 мг;

- основную фармацевтическую композицию в индивидуальных лекарственных формах вводят человеку в суточной дозе, предпочтительно от 500 мг до 750 мг, а после достижения эугликемии - в суточной дозе, предпочтительно от 200 мг до 400 мг, от одного до трех раз в сутки; - основную фармацевтическую композицию вводят человеку раздельно в сочетании с дополнительным антидиабетическим лекарственным средством в виде индивидуальных пероральных лекарственных форм или в виде инъекций;

- основную фармацевтическую композицию при ее введении в сочетании с дополнительным антидиабетическим лекарственным средством, вводят человеку в суточной дозе, предпочтительно от 375 мг до 750 мг, от одного до трех раз в сутки;

- при введение нуждающемуся субъекту указанных в п.l формулы изобретения фармацевтических композиций как в виде монотерапии, так и при комбинированной терапии несколькими антидиабетическими

средствами, их используют для лечения таких проявлений метаболического синдрома X, как инсулинорезистентность, нарушенные толерантность к глюкозе, гипертриглицеридемия, сниженный уровень холестерина липопротеинов высокой плотности, повышенный уровень холестерина липопротеинов низкой плотности и кардио-васкулярные осложнения.

использование при лечении метаболического синдрома X в качестве основного активного вещества основной фармацевтической композиции (±)-циc-3-(2'-бeнзимидaзoлил) - 1,2,2-тpимeтилциклoпeнтaнкapбoнoвoй кислоты или её оптически активных изомеров формулы 1, или её/их физиологически приемлемых солей, позволяет по сравнению с прототипом значительно (в 14 раз) уменьшить токсичность и дозу (в 2 раза) активного вещества, которые обусловливают увеличение широты терапевтического индекса (в 30 раз), что подтверждено проведенными экспериментальными исследованиями.

механизм специфического действия основной фармацевтической композиции реализуется за счет торможения проявлений метаболического синдрома X, а именно, снижения инсулинорезистентности посредством улучшения утилизации глюкозы периферическими тканями, уменьшения продукции глюкозы печенью, улучшения толерантности к глюкозе, а также снижения кардио-васкулярных рисков посредством снижения гипертриглицеридемии, повышенного уровня свободных жирных кислот и атерогенной фракции липопротеинов низкой плотности. подробное описание изобретения

предлагаемый способ лечения метаболического синдрома X осуществляют в зависимости от состояния, веса и возраста нуждающегося млекопитающего субъекта, включая человека, обезьян, собак и т.д., применением предложенной в п.l формулы изобретения основной фармацевтической композиции, используемой как в виде монотерапии, так

и в виде комбинированной терапии - основной фармацевтической композиции в сочетании с одним или несколькими антидиабетическими лекарственными средствами, выпускаемыми промышленностью. согласно данному изобретению, предлагаемый способ лечения метаболического синдрома X с одним или несколькими его проявлениями у млекопитающих субъектов предусматривает применение основной фармацевтической композиции в индивидуальных лекарственных формах, в качестве основного активного вещества которой, используют (±)-циc-з- (2'-бeнзимидaзoлил)-l,2,2-тpимeтилциклo пeнтaнкapбoнoвyю кислоту или её оптически активные изомеры формулы

, или её/их физиологически приемлемые соли, которую выбирают в суточной дозе от 25 мг до 750 мг. терапевтически эффективные количества основного активного вещества для введения человеку, содержащейся в индивидуальной лекарственной форме, выбирают, предпочтительно в дозе от 125 мг до 250 мг.

при лечении метаболического синдрома X с использованием основной фармацевтической композиции в индивидуальных лекарственных формах человеку вводят ее, предпочтительно перорально, в суточной дозе, предпочтительно от 500 мг до 750 мг, а после достижения эугликемии - в суточной дозе, предпочтительно от 200 мг до 400 мг, от одного до трех раз в сутки.

в зависимости от состояния субъекта, а также от числа проявлений метаболического синдрома X, при лечении используют комбинированную терапию, при которой вводят указанную основную фармацевтическую

композицию, предпочтительно перорально, в суточной дозе от 200 мг до 750 мг в раздельных лекарственных формах в сочетании с по меньшей мере одним дополнительным антидиабетическим лекарственным средством, содержащим не менее одно активное вещество, преимущественно метформин, от одного до трех раз в сутки, при этом дополнительное антидиабетическое лекарственное средство, содержащее метформин в комбинации с любым иным антидиабетическим активным веществом в одной общей индивидуальной лекарственной форме, используют в виде комбинированного препарата. вместе с тем, дозы антидиабетических лекарственных средств вводят в более низких количествах в зависимости от состояния, веса и возраста нуждающегося субъекта.

соединение формулы I или её оптически активные изомеры как основания могут быть преобразованы в соль известным путём присоединения кислоты неорганической или органической природы реакцией эквивалентных количеств соединения формулы I или её оптически активных изомеров в известном инертном растворителе. подходящими кислотами неорганической или органической природы для этой реакции являются те, которые образуют с соединением формулы I или её оптически активными изомерами физиологически приемлемые соли. таким образом, можно использовать минеральные кислоты, например галогенводородные кислоты, или органические кислоты, в частности алифатические, алициклические, аралифатические, ароматические или гетероциклические одноосновные или полиосновные карбоновые кислоты и другие.

соединение формулы I или её оптически активные изомеры как кислоты могут быть также преобразованы в соль известным путём присоединения неорганического или органического основания реакцией эквивалентных количеств соединения формулы I или её оптически

и активных изомеров в известном инертном растворителе. подходящими основаниями неорганической или органической природы для этой реакции являются те, которые образуют с соединением формулы I или её оптически активными изомерами физиологически приемлемые соли. таким образом, можно использовать натрия гидроксид, калия гидроксид, производные бигуанида, диметиламин, триэтаноламин, морфолин и другие.

фармацевтическую композицию по данному изобретению предпочтительно вводят перорально, хотя не исключается применение других методов введения, например, таких как ректальное введение.

для перорального введения фармацевтическая композиция по данному изобретению в индивидуальной лекарственной форме может быть представлена в виде желатиновых капсул, шипучих таблеток, таблеток с покрытием или без покрытия, микрокапсул либо форм с пролонгированным высвобождением. в составе фармацевтической композиции для перорального применения используются известные фармацевтически приемлемые эксципиенты, такие как наполнители, связующие, скользящие, разрыхляющие и другие вещества, в количестве примерно от 1 до 80 вес. %. количественный и качественный состав указанных эксципиентов определяется экспериментальным путем, а производство лекарственных форм осуществляется по известной специалистам в данной области технологии.

лечение метаболического синдрома X с использованием основной фармацевтической композиции в сочетании с дополнительным иным антидиабетическим лекарственным средством в раздельных лекарственных формах предусматривает выбор лекарственного средства из группы, включающей метформин, сульфонилмочевину, метиглинид, ингибитор глюкозидазы, глюкагоноподобный пептид 1 (GLP-I), инсулин, сенситайзер инсулина, преимущественно глитазон, ингибитор дипептилпептидазы IV (DPP IV), преимущественно ситаглиптин. а допол-

нительное любое иное антидиабетическое активное вещество, содержащееся в комбинированном препарате с метформином, выбирают из группы, включающей ингибитор глюкозидазы, преимущественно акарбоза, метиглинид, преимущественно репаглинид, сульфонилмочевину, преимущественно глибурид, тиазолидиндион, преимущественно розиглитазон, ингибитор DPP IV, преимущественно ситаглиптин. при этом, основную фармацевтическую композицию вводят человеку раздельно в сочетании с дополнительным антидиабетическим лекарственным средством в виде индивидуальных пероральных лекарственных форм или в виде инъекций в суточной дозе, предпочтительно от 375 мг до 750 мг, от одного до трех раз в сутки.

дозы дополнительных антидиабетических лекарственных средств указанных выше, которые применяются в сочетании с основной фармацевтической композицией по данному изобретению, предпочтительно вводить в более низких дозах, предпочтительно в количествах от 60% и ниже от их начальной суточной дозы, как предписано в общепринятой медицинской практике для лечения метаболического синдрома X и связанных с ним осложнений. применение основной фармацевтической композиции в сочетании с дополнительным антидиабетическим лекарственным средством, используемых в индивидуальных лекарственных формах, повышает эффективность коррекции проявлений метаболического синдрома X и связанного с ним нарушенного углеводного обмена, в сравнении с тем результатом, который получался бы в результате лечения каждым из этих лекарственных средств по отдельности.

вводимую дозу основной фармацевтической композиции, а также дополнительных антидиабетических лекарственных средств, вводимых в сочетании с ней в индивидуальных лекарственных формах, тщательно подбирают в соответствии с возрастом, весом и состоянием нуждающегося

субъекта, а также в соответствии со способом применения (монотерапий или комбинированной терапии), лекарственной формы, схемой приема и ожидаемым результатом. дополнительное антидиабетическое лекарственное средство метформин, относится к метформину или к его физиологически приемлемой соли, такой как гидрохлорид, метформина фумарат (2:1) и метформина сукцинат (2:1); гидробромид, п-хлорфеноксиацетат или эмбонат и другие известные соли метформина моно- и двухосновных карбоновых кислот, все эти соли в целом называются метформин. предпочтительно, чтобы метформин, применяемый в сочетании с фармацевтическими композициями по данному изобретению, представлял собой солянокислую соль метформина, а именно метформин гидрохлорид, выпускаемый промышленностью под названием Gluсорhаgе T. дополнительное антидиабетическое лекарственное средство может представлять собой также ингибитор глюкозидазы, такой как акарбоза, ваглибоза, миглитол, которые можно принимать в виде раздельной пероральной лекарственной формы или в виде одной общей с метформином лекарственной форме. дополнительное антидиабетическое лекарственное средство может представлять собой меглитинид, например репаглинид (рrоdiп T, Nоvо Nоrdisk) или натеглинид (Stаrliх T, Nоvаrtis), которые можно применять в виде раздельной пероральной лекарственной формы или в виде одной общей с метформином лекарственной форме. дополнительное антидиабетическое лекарственное средство сульфонилмочевина относится к таким препаратам, например, как глибурид, глимепирид и др. производные сульфонилмочевины, которые можно применять в виде раздельной пероральной лекарственной формы или в виде одной общей с метформином или розиглитазоном, пиоглитазоном и репаглинидом лекарственной форме.

дополнительное антидиабетическое лекарственное средство тиазолидиндион относится к розиглитазону, пиоглитазону или троглитазону, которые можно применять в виде раздельной пероральной лекарственной формы или в виде одной общей с метформином или глибуридом лекарственной форме.

дополнительное антидиабетическое лекарственное средство также может представлять собой инсулин или глюкагоноподобный пептид 1

(GLP-I), такой как GLP-I (1-36) амид, GLP-I (7-36) амид, GLр-i (7-37), которые можно вводить с помощью инъекции или трансдермальным, или трансбуккальным методом.

дополнительное антидиабетическое лекарственное средство - GLP- пептиды также можно вводить в сочетании с основной фармацевтической композицией по данному изобретению в виде раздельных пероральных защечных препаратов или назально.

дополнительное антидиабетическое лекарственное средство может также представлять собой ингибиторы DPP-IV, такие, например, как ситаглиптин и др., которые можно применять в виде раздельной или в виде одной общей с метформином лекарственной форме. промышленная применимость

ниже на примерах представлены преимущества предлагаемого способа лечения метаболического синдрома X по данному изобретению, доказательства его осуществления и получения технического результата.

влияние фармацевтической композиции на показатели глюкозного гомеостаза у крыс с метаболическим синдромом X, (X±S _x )(n=5), представлено в таблице 1. влияние фармацевтической композиции на активность ферментов печени у крыс с метаболическим синдромом X, (X±S _X ),

(n=5), представлено в таблице 2. влияние фармацевтической композиции на показатели липидного обмена у крыс с метаболическим синдромом X, (X±S _X ), (n=5), представлено в таблице 3. показатели липидного обмена в сыворотке

крови кролей с метаболическим синдромом X ₅ (X±S _X ) ₅ (n=5), представлены в таблице 4. показатели липидного обмена в сыворотке крови кролей с метаболическим синдромом X ₅ (XiS _x ), (n=5), представлены в таблице 5. параметры острой токсичности основной фармацевтической композиции при однократном пероральном введении крысам представлены в таблице 6.

пример 1. исследование влияния основной фармацевтической композиции на показатели глюкозного гомеостаза у крыс с метаболическим синдромом X при их лечении. исследование проведено на 20 половозрелых крысах самцах линии вистар. модель метаболического синдрома X индуцировали хроническим введением фруктозы (200 мг/л с питьевой водой в течение 6 недель) [7]. принято считать, что высокая концентрация фруктозы может нарушать ранние этапы трансдукции инсулинового сигнала, а именно процессы фосфорилирования инсулинового рецептора и инсулин-рецепторного субстрата (IRS-I) [8]. основную фармацевтическую композицию в виде (±)-фopмы, ее солянокислой соли и (-)-фopмы соединения формулы 1, в раздельных лекарственных формах вводили животным перорально с помощью зонда в дозе 25 мг на 1 кг массы тела животного в виде водной суспензии с Tвинoм-80 или водного раствора, комбинированный препарат метформина с глибуридом (глибомет) вводили в дозе 50 мг на 1 кг массы тела животного также перорально в указанных условиях в раздельной лекарственной форме, а препарат-прототип метформин (Gluсорhаgе) - в дозе 50 мг на 1 кг массы тела животного вводили также перорально в указанных условиях на протяжении 4 недель, начиная с 3 недели эксперимента, как в индивидуальной лекарственной форме, так и в сочетании с (±)-фopмoй соединения формулы 1 в раздельных лекарственных формах. контрольной группе животных в соответствии с аналогичной схемой вводили плацебо -3-5% тонко дисперстную водную эмульсию Tвинa-80. состояние глюкозного гомеостаза подопытных

животных оценивали по таким показателям: гликемии, инсулинемии и внутрибрюшинного теста толерантности к глюкозе (вбттг) (зг на 1 кг массы тела животного). площадь под гликемическими кривыми (AUC - аrеа шidеr сurvе) при проведении вбттг рассчитывали с помощью компьютерной программы «Mathlab». базальную инсулинемию определяли радиоиммунологическим методом «двoйныx aнтитeл» с помощью наборов «pиo-иHC-пг- ¹²⁵ I» (беларусь). коэффициент чувствительности к инсулину рассчитывали с помощью короткого инсулинового теста [9]. статистический анализ полученных результатов проводили методами вариационной статистики с помощью стандартных пакетов программ ехеl (версия 7), вiоstаt и Stаtistiса (Stаt. Sоft. Iпс, USA). сравнение двух групп с нормальным разделением осуществляли с применением параметрического классического t-критерия стьюдента для независимых выборок и модифицированного t-критерия стьюдента с разделительными оценками дисперсий. расхождение результатов считали статистически достоверными при p<0,05. содержание и использование лабораторных животных соответствовало «Oбщeэтичecким принципам экспериментов на живoтныx». в результате проведенного исследования установлено, что 6-ти недельное введение экспериментальным животным фруктозы в указанной выше дозе приводит к развитию у них инсулинорезистентности. об этом свидетельствует установленный коэффициент чувствительности тканей к инсулину у экспериментальных животных, которым вводили фруктозу и плацебо. данный коэффициент в этой группе животных был снижен практически в три раза в сравнении с аналогичным коэффициентом группы животных интактного контроля (табл.l). подтверждением достижения индукции метаболического синдрома X является гиперинсулинемия, а также увеличение AUC при проведении теста толерантности к углеводам в группе животных, которым вводили фруктозу и плацебо (табл.l). кроме того, развитие инсулино-

резистентности у животных экспериментальной группы, которым вводили фруктозу и плацебо, подтверждено трехкратным увеличением активности ключевого фермента глюконеогенеза - глюкoзo-6-фocфaтaзы в гомогенатах печени крыс (тaбл.2).

установлено, что введение животным с индуцированным фруктозой метаболическим синдромом X основной фармацевтической композиции по данному изобретению в дозе 25 мг/кг массы тела, в том числе как в сочетании с метформином, так и комбинированным препаратом, содержащим метформин и глибурид, используемых в раздельных лекарственных формах, приводит к увеличению коэффициента чувствительности тканей к инсулину в данных группах животных более, чем в 2 раза, в сравнении с группой животных, которым вводили фруктозу и плацебо (табл.l). позитивное влияние основной фармацевтической композиции по данному изобретению на снижение инсулино- резистентности подтверждено также снижением показателя гиперинсулинемии, улучшением толерантности к глюкозе (снижение AUC при проведении вбттг) (табл.l) и снижением активности глюкозо-б- фосфатазы (снижение продукции глюкозы печенью) (тaбл.2) в группе животных, которым вводили основную фармацевтическую композицию в дозе 25 мг на 1 кг массы тела в том числе как в сочетании с метформином, так и с комбинированным препаратом, содержащим метформин и глибурид, в раздельных лекарственных формах в сравнении с группой животных, которым вводили фруктозу и плацебо (табл.l). сопоставимый по выраженности указанный выше фармакологический эффект характерен и для препарата-прототипа метформина. кроме того, введение животным с индуцированным фруктозой метаболическим синдромом X основной фармацевтической композиции по данному изобретению в дозе 25 мг на 1 кг массы тела не приводит к изменению физиологического показателя базальной гликемии.

преимуществом лечения метаболического синдрома X с использованием основной фармацевтической композиции по данному изобретению перед метформином является более низкая - в 2 раза доза основной фармацевтической композиции, которая обеспечивает достижение терапевтического эффекта (25 мг/кг — для основной фармацевтической композиции и 50 мг/кг - для метформина). таким образом, полученные результаты свидетельствуют об эффективности лечения метаболического синдрома X с ипользованием основной фармацевтической композиции по данному изобретению в том числе и в сочетании с метформином или комбинированным препаратом, содержащим метформин и любое иное антидиабетическое активное вещество, используемых в раздельных лекарственных формах для лечения метаболического синдрома X у млекопитающих субъектов, а именно снижения инсулинорезистентности посредством улучшения утилизации глюкозы периферическими тканями, уменьшения продукции глюкозы печенью и улучшения толерантности к глюкозе, не изменяя при этом показатель нормогликемии.

пример 2. исследование влияния основной фармацевтической композиции на показатели липидного обмена у крыс с метаболическим синдромом X при их лечении. исследование проведено на 20 половозрелых крысах самцах линии вистар. модель метаболического синдрома X индуцировали хроническим введением фруктозы (200 мг/л с питьевой водой в течение 6 недель) [7]. основную фармацевтическую композицию по данному изобретению в указанном примере 1 виде и метформин как в индивидуальной лекарственной форме, так и в виде комбинированного препарата с глибуридом в раздельных лекарственных формах вводили животным в условиях и дозах, описанных выше (пример 1). развитие у экспериментальных животных метаболического синдрома X и нарушение липидного обмена, обусловленных введением фруктозы,

оценивали по показателям неэстерифицированных жирных кислот (нэжк) и триглицеридов. концентрацию нэжк в сыворотке крови определяли фотоколориметрически [10], а уровень триглицеридов - спектрофотометрически [11]. известно, что повышенный уровень нэжк угнетает утилизацию глюкозы периферическими тканями, способствует развитию инсулиновой резистентности, стимулирует глюконеогенез в печени, снижает чувствительность печени к инсулину [12] и является основным стимулом продукции атерогенных липопротеинов низкой плотности [13], что в конечном итоге обусловливает развитие сердечнососудистых патологий. в результате проведенных исследований установлено, что хроническое введение фруктозы приводит к повышению уровня нэжк более чем в 6 раз и уровня триглицеридов в экспериментальной группе животных, которым вводили фруктозу и плацебо, относительно к аналогичным показателям контрольной группы животных (табл.з). это является подтверждением достижения индукции метаболического синдрома X с дислипидемией у экспериментальных групп животных, которым вводили фруктозу. введение животным с индуцированным фруктозой метаболическим синдромом X основной фармацевтической композиции по данному изобретению в том числе и в сочетании с метформином или комбинированным препаратом, содержащим метформин и глибурид, в раздельных лекарственных формах в дозе 25 мг на 1 кг массы тела приводит к достоверному снижению показателей нэжк и триглицеридов в данной группе животных. аналогичный по степени выраженности терапевтический эффект наблюдался и в группе животных с метаболическим синдромом X, которым вводили метформин, но в дозе 50 мг на кг массы тела (табл.з). преимуществом лечения метаболического синдрома X с использованием основной фармацевтической композиции по данному изобретению перед метформином является более низкая - в 2 раза доза фармацевтической

композиции, которая обеспечивает достижение максимального терапевтического эффекта (25 мг на 1 кг массы тела - для основной фармацевтической композиции и 50 мг на 1 кг массы тела - для метформина). полученные результаты свидетельствуют об эффективности лечения метаболического синдрома X с использованием основной фармацевтической композиции по данному изобретению у млекопитающих субъектов в том числе и в сочетании с метформином или комбинированным препаратом, содержащим метформин или любое иное антидиабетическое активное вещество, в раздельных лекарственных формах для снижения кардио-васкулярных рисков посредством ослабления таких факторов метаболического синдрома X как гипертриглицеридемия и повышенный уровень свободных жирных кислот.

пример 3. исследование влияния основной фармацевтической композиции на показатели липидного обмена у кролей с метаболическим синдромом X при их лечении. исследование проведено на 20 половозрелых кролях самцах породы «шиншиллa» с метаболическим синдромом X с дисгликемией, который индуцировали внутрибрюшинным введением дитизона экспериментальным животным в дозе 35 мг на 1 кг массы тела [14]. основную фармацевтическую композицию в указанном выше виде (пример 1) вводили кролям перорально ежедневно в дозе 25 мг на 1 кг массы тела на протяжении 2-х месяцев, комбинированный препарат метформина с глибуридом (глибомет) вводили в дозе 50 мг на 1 кг массы тела животного также перорально в виде водной суспензии с Tвинoм-80 в раздельной лекарственной форме, а препарат-прототип метформин как в индивидуальной лекарственной форме, так и в сочетании с основной фармацевтической композицией в раздельных лекарственных формах вводили кролям в дозе 50 мг на 1 кг массы тела по аналогичной схеме. состояние глюкозного гомеостаза у экспериментальных животных оценивали каждый месяц по динамике базальной гликемии, а также по

показателям инсулинемии и ввттг (внутривенный тест толерантности к глюкозе, 500 мг/кг массы тела) согласно методикам, указанным в примере 1. состояние липидного обмена у экспериментальных животных оценивали по концентрациям нэжк [10], триглицеридов [11] и общего холестерина [15] в сыворотке крови. концентрацию холестерина липопротеинов высокой плотности (хс-Jшвп) определяли ферментативным методом с помощью стандартных наборов фирмы «Boeringer-Mannheim Gтb diagnostica» (германия). холестерин липопротеинов низкой плотности (XC-J и IHl 1) и атерогенный индекс рассчитывали по соответствующим формулам Friеdеwаld W.т. [16] и герасимова е.н. [17]. выбор указанной выше модели дислипидемии на фоне хронической инсулиновой недостаточности обусловлен тем, что хроническая гипергликемия на протяжении 2-х месяцев у кролей, индуцированная дитизоном, приводит к выраженным нарушениям структурно-функционального состояния почек и позволяет использовать данную модель для воссоздания диабетической дислипидемии на фоне дисгликемии [18]. кроме того, долгосрочная инсулиновая недостаточность обусловленная введением млекопитающим субъектам дитизона, приводит к образованию атерогенных токсичных комплексов с цинком [14], что в конечном итоге приводит к развитию сердечно-сосудистых патологий. также известно, что хроническая гипергликемия способна вызывать количественные и качественные изменения в составе липидов и липопротеинов, которые являются причиной ускоренного атеросклероза. в результате проведенных исследований установлено, что хроническое в течение 2-х месяцев введение кролям дитизона, приводит к развитию у них выраженной инсулиновой недостаточности, обусловленной нарушением углеводного обмена, а также атерогенных изменений, характерных для метаболического синдрома X. подтверждением этому является оценка липидного профиля кролей экспериментальной группы, которым вводили

дитизон и плацебо, в сравнении с контрольной группой животных (табл. 4 и 5).

установлено, что содержание общего холестерина, триглицеридов и атерогенной фракции хс-лпнп в сыворотке крови кролей, которым вводили дитизон и плацебо, были существенно выше, а содержание XC- лпвп - значительно ниже в сравнении с указанными показателями контрольной группы животных, что способствовало увеличению атерогенного индекса в 3 раза в группе животных с метаболическим синдромом X (тaбл.4). в условиях инсулиновой недостаточности также отмечается ослабленное угнетение активности гормон-чувствительной липазы, которая в свою очередь приводит к повышению гидролиза триглицеридов в жировой ткани и накоплению нэжк в печени.

увеличение содержания нэжк является основным стимулом для продукции атерогенных липопротеинов низкой плотности [13]. в результате проведенных исследований установлено, что у экспериментальных кролей, которым вводили дитизон и плацебо, концентрация нэжк повышена в 6 раз в сравнении с контрольной группой животных (тaбл.4), что также свидетельствует о достижении нарушения липидного обмена у млекопитающих субъектов при введении дитизона. позитивное влияние основной фармацевтической композиции по данному изобретению на липидный обмен кролей с метаболическим синдромом X, в том числе и в сочетании с метформином или комбинированным препаратом, содержащим метформин и глибурид, введенное животным в дозе 25 мг на 1 кг массы тела в раздельных лекарственных формах в течение 2-х месяцев, подтверждено значительным снижением показателей уровня триглицеридов, нэжк и общего холестерина в сыворотке крови экспериментальной группы животных, которым вводили дитизон и основную фармацевтическую композицию в указанных выше дозах, в сравнении с группой животных, которым вводили дитизон и

плацебо (тaбл.4). выраженность антиатерогенных свойств основной фармацевтической композиции по данному изобретению сопоставима с выраженностью указанных свойств препарата-прототипа - метформина. вместе с тем, преимуществом основной фармацевтической композиции по данному изобретению перед метформином является доза основной фармацевтической композиции, которая способствует достижения максимального терапевтического эффекта и, которая в 2 раза ниже дозы метформина (25 мг на 1 кг массы тела для новой фармацевтической композиции и 50 мг на 1 кг массы тела для метформина). подтверждением антиатерогенных свойств основной фармацевтической композиции по данному изобретению, которую вводили кролям с нарушенным липидным обменом в дозе 25 мг на 1 кг массы тела, является также существенное снижение показателя XC-J и шi I и повышение антиатерогенной фракции хс-лпвп в сыворотке крови кролей данной группы, в сравнении в аналогичными показателями групп экспериментальных животных, которым вводили дитизон и плацебо или дитизон и метформин (тaбл.4). повышение антиатерогенной фракции хс-лпвп в сыворотке крови кролей, которым вводили основную фармацевтическую композицию по данному изобретению в дозе 25 мг на 1 кг массы тела в течение 2-х месяцев, позволило значительно снизить атерогенный индекс в данной группе животных в сравнении с атерогенным индексом в группах животных, которым вводили дитизон и плацебо или дитизон и метформин в указанных выше дозах (тaбл.4). полученные результаты свидетельствуют об эффективности лечения метаболического синдрома X с использованием основной фармацевтической композиции по данному изобретению у млекопитающих субъектов в том числе и в сочетании с метформином или комбинированным препаратом, содержащим метформин или любое иное антидиабетическое активное вещество, в раздельных лекарственных формах для снижения кардиоваскулярных рисков, обусловленных метабо-

лическим синдромом X, посредством снижения гипертриглицеридемии, повышенных уровней свободных жирных кислот и атерогенной фракции холестерина липопротеинов низкой плотности, а также повышения уровня холестерина липопротеинов высокой плотности.

пример 4. исследование острой токсичности основной фармацевтической композиции. острую токсичность основной фармацевтической композиции по данному изобретению изучали на беспородных белых крысах-самцах согласно методическим рекомендациям [19]. основную фармацевтическую композицию по данному изобретению вводили экспериментальным животным натощак однократно перорально (принудительно через зонд) в 1 % крахмальном растворе. время наблюдения за экспериментальными животными составляло 2 недели. на протяжении этого периода учитывались выживаемость, летальность, наличие признаков интоксикации и реакции на раздражители. среднесмертельные дозы основной фармацевтической композиции по данному изобретению рассчитывали по методу литчфилда и уилкоксона [20], используя пробит-анализ кривых летальности.

признаки острого отравления при внутрижелудочном введении экспериментальным животным характеризовались первые 15 минут повышенной возбудимостью, которая сменялась угнетением, адинамией, сужением зрачков, отказом от пищи, пилоэрекцией. гибель животных от более высоких доз наступала в течение первого часа после введения фармацевтической композиции. от доз ниже 10 000 мг на 1 кг массы тела смерть экспериментальных животных наступала в течение первых суток опыта в боковом положении. выжившие крысы уже на третьи сутки эксперимента ничем не отличались от контрольной группы животных. полученные данные свидетельствуют о том, что основная фармацевтическая композиция по данному изобретению при пероральном введении относится к классу малотоксичных веществ. среднесмертельная

доза (LD _5O ) основной фармацевтической композиции по данному изобретению при пероральном введении крысам-самцам составляет 14 900 мг на кг массы тела (9100 ± 20700). среднесмертельная доза (LDsо) препарата-прототипа метформина у крыс при пероральном введении составляет 1000 мг на 1 кг массы тела [21]. преимущества основной фармацевтической композиции по данному изобретению перед препаратом-прототипом метформином очевидны при сравнении широты их терапевтических индексов (LD ₅ o/ED _5O ), которая для фармацевтической композиции по данному изобретению превышает аналогичный показатель для метформина в 30 раз (для фармацевтической композиции составляет 596, а для метформина 20) (тaбл.6).

таким образом, заявленный способ лечения метаболического синдрома X, при его использовании, позволяет значительно (в 14 раз) уменьшить токсичность и дозу (в 2 раза) активного вещества, которые обусловливают увеличение широты терапевтического индекса (в 30 раз) в сравнении с прототипом, что подтверждено вышеприведенными исследованиями.

это позволит повысить эффективность лечения проявлений метаболического синдрома X, таких как инсулинорезистентность, нарушенная толерантность к глюкозе, гипертриглицеридемия, сниженный уровень холестерина липопротеинов высокой плотности, повышенный уровень холестерина липопротеинов низкой плотности и кардио- васкулярные осложнения со снижением количества побочных эффектов и их проявлений, что значительно сокращает затраты на лечение больных.

источники информации.

1. зимин ю.в. происхождение, диагностическая концепция и клиническое значение синдрома инсулинорезистентности или метаболического синдрома X // кардиология. - 1998. - Nsб. - с. 71-81.

2. Zimmеt р., Shаw J., аlbеrti к.G. рrеvепtiпg туре 2 diаbеtеs апd thе dуsmеtаbоliс sупdrоmе iп thе rеаl wоrld: а rеаlistiс viеw // Diаbеtiс меdiсiпе.- 2003. - VoI. 20, Nsз. - P. 693-702. 3. Kahn S. E. Thе rеlаtivе сопtributiоп оf iпsuliп rеsistапсе апd bеtа-сеll dуsfuпсtiоп tо thе раthорhуsiоligу оf туре 2 diаbеtеs // Diаbеtоlоgiа. — 2003. - VoL 46, хsl. - р. 3-20.

4. An апtidiаbеtiс thiаzоlidiпеdiопе is а high аffmitу ligапd fоr реrохisоmе рrоlifеrаtоrs асtivаtеd rесерtоr (PPAR) / J.м. Lеhmапп, L.B. мооrе, т.а. Smith-оlivеr еt аl. // J. вiоl. сhеm. - 1995. - VoI. 270. - P. 12953-12956.

5. Frеid J., еvеritt D., воsсiа J. Rоsiglitаzопе апd hераtiс fаilurе // аппuаl Iпtеrпаl меdiсiпе. - 2000. - VoI. 132. - P. 164-165.

6. ноwlеtt H.C., ваilеу CJ. а risk-bепеfit аssеssmепt оf mеtfоrmiп iп туре 2 diаbеtеs mеllitus // Drug Sаfеtу. - 1999. - VoI. 20, JVsб. - P. 489-503 (прототип).

7. Lеvi в., Werman M. Lопg tеrm fruсtоsе сопsumрtiоп ассеlеrаtеs glусаtiоп апd sеvеrаl аgе-rеlаtеd vаriаblеs iп mаlе rаts // S. Nutritiоп. - 1998. - VoI. 128. - P. 1442 - 1449.

8. веzеrrа R.M., Uепо M., Silvа м.S. еt аl. а high fruсtоsе diеt аffесts thе еаrlу stерs оf iпsuliп асtiоп iп musсlе апd livеr оf rаts // S. Nutritiоп. - 2000. -

VoL 130, JSToIO. - P. 1531 - 1535.

9. Thе shоrt iпsuliп tоlеrапсе tеst fоr dеtеrmiпаtiоп оf iпsuliп sепsitivitу: а соmраrisоп with еuglусаеmiс сlаmр / а. аkiпmоkuп, P. Sеlbу, к. Rаmаiуа еt аl. // Diаbеt. меd. - 1992. - VoL 9, No 5. - P. 432 - 437. 10. Dumсоmbе W.с. Thе соlоrimеtriс miсrо-dеtеrmiпаtiоп оf lопg-сhаiп fаttу асids // вiосhеm. J. - 1963. - VoL 188, Xa 1. - P. 7 - 10.

11. Flеtсhеr MJ. еstimаtiоп оf thе triасуlglусеrоls iп thе sегаm // CHn. сhim. асtа. - 1968. VoL 22. - P. 393.

12. Sаlоrапtа с, коivistо V., Widеп E. еt аl. сопtributiоп оf musсlе апd нvеr tо gluсоsе-fаttу асids сусlе iп humапs // Am. J. рhуsiоl. - 1993. - VoI.

264. - P. E599 - E605.

13. Betteridge DJ. LDL hеtеrоgепеitу: imрliсаtiопs fоr аthеrоgепiсitу iп insulin resistance and NIDDM // Diаbеtоlоgiа. - 1995. VoI. 40 (Suррl. 2). - P. S149 - S151.

14. окаmоtо H. Rеgulаtiоп оf рrоiпsuliп sупthеsis iп рапсrеаtiс islеts апd а пеw аsресt tо iпsuliп-dерепdепt diаbеtеs // моlес. сеll. вiосhеm. - 1981. — VoI. 3. - P. 43 - 61.

15. колб B.г., камышников в.с. клиническая биохимия. - минск: беларусь, 1982. - 432 с.

16. Friеdеwаld W.T., Lеvу R.I., Frеdriсksоп D. S. еstimаtiоп оf thе сопсепtrаtiоп оf lоw-dепsitу liрорrоtеiп сhоlеstеrоl iп рlаsmа, withоut usе оf thе рrераrаtivе ultrасепtrifugе // сliп. сhеm. - 1972. - VoI. 18, Ni. 6. - P. 499 - 502. 17. герасимова е.н. дислипопротеидемия и гормоны в плазме крови мужчин 40-59 лет // дислипопротеидемии и ишемическая болезнь сердца. - M.: медицина, 1980. - с. 83 - 102.

18. Vitamin E dеlауs diаbеtiс перhrораthу dеvеlорmепt / N. Gоrbепkо, V. роltоrасk, а. Glаdkiсh еt аl. // вlас Sеа Diаb. мееtiпg, Isrапbul, осt. 30 ^th - Nоv. l ^st , 1997. - Istапbul (тurkеу), 1997. - P. D-48.

19. фармакологический скрининг новых физиологически активных веществ // методические рекомендации. - киев. - 1985. - 24 с.

20. беленький M. л. элементы количественной оценки фармакологического эффекта (2-е изд.). JI.: медгиз (ленинградское отделение). - 1963. - 152 с.

21. The Merck Index (13), 2001, Monograph Ns 5963, P. 1061.

таблица 1

влияние фармацевтической композиции на показатели глюкозного гомеостаза у крыс с метаболическим синдромом X, (X±S _x )(n=5)

продолжение табл.l

примечания: Pi - отклонение вероятно относительно группы

«интaктный контроль)); P ₂ - отклонение вероятно относительно группы

«фpyктoзa + плaцeбo»; P ₃ - отклонение вероятно относительно группы «фpyктoзa + метформин)).

таблица 2

влияние фармацевтической композиции на активность ферментов печени у крыс с метаболическим синдромом X, (X±S _X ), (n=5)

продолжение тaбл.2

примечания: P ₁ - отклонение вероятно относительно группы

«интaктный контроль)); P ₂ - отклонение вероятно относительно группы

«фpyктoзa + плaцeбo»; P ₃ - отклонение вероятно относительно группы «фpyктoзa + метформин)).

таблица 3

влияние фармацевтической композиции на показатели липидного обмена у крыс с метаболическим синдромом X, (X±S _X ), (n=5)

продолжение табл.з

примечания: Pi - отклонение вероятно относительно группы «интaктный кoнтpoль»; P ₂ - отклонение вероятно относительно группы «фpyктoзa + плaцeбo»; P ₃ - отклонение вероятно относительно группы «фpyктoзa + мeтфopмин».

таблица 4

показатели липидного обмена в сыворотке крови кролей с метаболическим синдромом X ₅ (X±S _X ), (n=5)

примечания: P ₁ - достоверность изменений в сравнении с группой «интaктный контроль)); P ₂ - достоверность изменений в сравнении с группой «дитизoн + плацебо)); P ₃ - достоверность изменений в сравнении с группой « дитизон + метформин)).

таблица 5

показатели липидного обмена в сыворотке крови кролей с метаболическим синдромом X, (X±S _X ), (n=5)

примечания: P ₁ - достоверность изменений в сравнении с группой «интaктный контроль)); P ₂ - достоверность изменений в сравнении с группой « дитизон + плацебо)); P ₃ - достоверность изменений в сравнении с группой «дитизoн + мeтфopмин».

таблица 6

параметры острой токсичности основной фармацевтической композиции при однократном пероральном введении крысам