La présente invention concerne l'utilisation d'un extrait végétal choisi dans le groupe formé par la famille des Balanitaceae et par le genre Vitellaria pour des compositions cosmétiques topiques ou orales, pharmaceutiques ou nutraceutiques à action amincissante iipolytique.

L'un des principaux objets de la présente invention consiste en la découverte, de façon surprenante et inattendue, d'extraits végétaux capables simultanément de stimuler la lipolyse et d'inhiber la différenciation adipocytaire, de sorte à optimiser l'action amincissante en utilisant deux voies biologiques et biochimiques différentes à partir d'un seul et même extrait végétal. Ainsi, les extraits végétaux choisis dans le groupe formé par la famille des Balanitaceae et par le genre Vitellaria stimulent la production de Zinc-alpha2-glycoprotéine (ZAG), un LMF ou facteur de mobilisation des lipides (ST RUSSELL Biochim. Biophys. Actu. 2004 1636 : 59-68) et inhibent l'activité de la Glucose-6- Phosphate Déshydrogénase (G6PDH), une enzyme qui intervient dans la conversion pré-adipocyte/adipocyte (LM SHANTZ et Al. PNAS 1989 ; 86 : 3852- 3856), comme déjà démontré dans le brevet EP0872244.

Une partie de la graisse du corps humain est stockée sous forme de triglycérides dans les cellules de l'hypoderme appelées adipocytes. L'amincissement accompagne une diminution de la graisse stockée dans les adipocytes. Les adipocytes sont des cellules très actives, elles jouent un rôle prépondérant dans le contrôle de l'équilibre énergétique de l'organisme. Les adipocytes assurent le métabolisme des graisses. L'anabolisme des graisses, la lipogénèse, se traduit par un processus de stockage des corps gras sous forme de triglycérides sous l'action de réactions enzymatiques à l'intérieur des adipocytes. La lipogénèse est régulée positivement par l'insuline et se fait soit par captage dans le sang des acides gras issus de lipoprotéines (chylomicrons ou de liproprotéines de très basse densité VLDL) et leur hydrolyse par la lipoprotéine lipase, soit par néosynthèse dans la cellule à partir du glucose. La lipogénèse conduit ainsi au stockage des graisses sous forme de triglycérides dans les adipocytes. Le catabolisme des graisses, la lipolyse, se traduit par une mobilisation des triglycérides et leur dégradation sous l'action d'enzyme, les triglycérides lipases. Elles sont activées par l'AMP cyclique. L'AMP cyclique est régulée par L'Adenylate Cyclase, cette dernière est, par ailleurs, réprimée par hydrolyse en 5ΆΜΡ via la Phosphodiestérase. La lipolyse conduit ainsi à la libération d'acides gras et au déstockage des adipocytes.

Si le métabolisme est déséquilibré dans le sens de la lipogénèse, il se produit alors dans les adipocytes une accumulation de triglycérides qui se traduit progressivement par un épaississement de l'hypoderme. La peau se déforme en surface de manière irrégulière et donne l'aspect « d'une peau d'orange ». Cette déformation est disgracieuse, elle affecte la silhouette, elle évolue en embonpoint et peut conduire à l'obésité.

Pour lutter contre cette adiposité différents axes ont été explorés et expérimentés pour moduler le métabolisme des graisses et privilégier la lipolyse, ou pour affecter la capacité de stockage des adipocytes.

Les différents axes sont :

- Soit le blocage du transport du glucose à l'intérieur de l'adipocyte.

- Soit l'inhibition des lipoprotéines lipases.

- Soit l'activation des triglycérides lipases (lipase hormonosensible), par stimulation de la production d'AMP cyclique sous contrôle de l'Adénylate

Cyclase, ou par inhibition de sont hydrolyse en bloquant la phosphodiestérase.

- Soit l'utilisation d'antagonistes des récepteurs du neuropeptide Y (NPY) dont l'implication dans la lipolyse a été démontrée (P. Valet, J. Clin. Invest., 1990, 85, 291-295).

- Soit l'utilisation d'antagonistes des récepteurs a2 adrénergiques ou des agonistes des récepteurs 33-adrénergiques pour stimuler la production d'AMP cyclique.

- Soit la prévention de la différenciation adipocytaire par stimulation de la G6PDH ou par inhibition des métalloprotéinases 2 et/ou 9 selon le brevet de CLARINS FR 286707A1. - Soit l'utilisation de modulateurs de l'Aquaporine adipeuse (AQPap) pour diminuer le volume des adipocytes et pour augmenter la sortie du glycérol selon le brevet L'OREAL FR 2863492A1. Les inventeurs de la présente invention ont maintenant découvert de façon surprenante et inattendue que les extraits végétaux choisis dans le groupe formé par la famille des Balanitaceae et par le genre Vitellaria agissent à la fois sur un agoniste, la ZAG, des récepteurs 3-adrénergiques, et sur la prévention de la différenciation adipocytaire par inhibition de l'activité de la G6PDH.

La différenciation adipocytaire consiste à transformer les pré-adipocytes, eux- mêmes issus des fibroblastes du derme, non fonctionnels sur le plan du contrôle du métabolisme lipidique, en adipocytes fonctionnels, c'est-à-dire capables de stocker les lipides par lipogénèse, et capables de les déstocker par lipolyse.

La famille des Balanitaceae est représentée par un seul genre Balanites. Le genre Balanites est essentiellement représenté par les espèces Balanites aegyptiaca, Balanites maughamii et Balanites wilsoniana. Ces espèces sont des arbres et arbustes tropicaux absents en Amérique. Ils se caractérisent par leur teneur élevée en sapogénines notamment au niveau de leurs fruits entre 1 et 9%. Leurs graines sont oléagineuses. La famille des Balanitaceae trouve déjà des applications cosmétiques visant à diminuer la teneur en mélanine et plus généralement visant à éclaircir la peau comme démontré et publié par la demanderesse dans le brevet FR 0902932. Par conséquent, il n'a été révélé dans la littérature aucune utilisation d'au moins une plante appartenant à la famille Balanitaceae dans ou pour la préparation d'une composition topique ou orale destinée à mincir.

C'est justement ce type d'utilisation qui fait l'objet de la présente invention. Le genre Vitellaria appartient à la famille des Sapotaceae, ce genre n'est constitué que d'une seule espèce Vitellaria paradoxa CF. Gaertn. Il s'agit d'un arbre tropical africain, aussi appelé Karité ou Butyrospermum parkii. Ses graines sont oléagineuses, et fournissent le beurre de karité. Cette plante est très largement connue et utilisée dans diverses applications cosmétiques. Traditionnellement les femmes d'Afrique de l'ouest et d'Afrique centrale utilisent le beurre de karité de manière topique pour entretenir et hydrater leur peau et celle de leur bébé. Elles utilisent également ce beurre comme huile de massage pour décontracter les muscles et apaiser les articulations douloureuses. De manière plus originale à la saison sèche en période de vent, et plus particulièrement lorsque l'atmosphère est chargée de poussière, il est souvent observé que ces populations africaines s'enduisent l'intérieur des narines de beurre de karité pour éviter de tomber malade. Dans les produits dermo- cosmétiques, depuis très longtemps, le beurre de karité est un ingrédient largement utilisé dans les phases grasses des émulsions huile dans eau, les émulsions eau dans huile, les baumes ou les huiles cosmétiques. Par ailleurs, le brevet FR 2859103 déposé par SILAB décrit un actif notamment cosmétique issu du tourteau de karité ayant des propriétés anti-radicalaires et détoxifiantes ; le brevet FR 2912055 déposé par IDENOV LAB décrit un extrait de Karité riche en acide gallique participant à calmer l'irritation de la peau ; le brevet FR 2698785 déposé par THREL Jean-Noël montre qu'un extrait de karité permet de potentialiser un activateur de l'Adénylate Cyclase sur un modèle mélanocytaire de sorte à contribuer indirectement à la synthèse de mélanine ; dans le brevet FR 2676645 SILAB démontre que les insaponifiables de beurre de karité permettent d'améliorer l'efficacité des filtres solaires ; dans le brevet FR 2809011 SEDERMA décrit l'utilisation de beurre de karité en cosméto-textile sous forme encapsulé ; dans le brevet FR2779645 SEDERMA démontre l'utilisation de karité combiné à un extrait de café pour favoriser la cicatrisation et générer un effet apaisant sur la peau. Par conséquent, il n'a été révélé dans la littérature aucune utilisation d'au moins une plante appartenant au genre Vitellaria dans ou pour la préparation d'une composition topique ou orale destinée à mincir.

C'est justement ce type d'utilisation qui fait l'objet de la présente invention. Dans un premier mode de réalisation de l'invention, la composition est une composition cosmétique topique ou orale, pharmaceutique ou nutraceutique qui contient au moins une fraction végétale lipophile choisie dans le groupe formé par le genre Vitellaria comme agent actif contre l'adiposité.

Par agent actif contre l'adiposité, les inventeurs désignent un agent actif permettant de réduire le stock adipeux conduisant à un effet minceur. Par agent actif contre l'adiposité, les inventeurs désignent un agent actif pour mincir. Dans un deuxième mode de réalisation de l'invention, la composition est une composition cosmétique topique ou pharmaceutique qui contient au moins une fraction végétale lipohile choisie dans le groupe formé par la famille des Balanitaceae comme agent actif contre l'adiposité. Dans un troisième mode de réalisation de l'invention, la composition est une composition cosmétique topique ou orale, ou pharmaceutique qui contient comme agent actif minceur et lipolytique au moins une fraction végétale lipophile choisie dans le groupe formé par le genre Vitellaria.

Dans ce mode de réalisation, de préférence, ledit ou au moins l'un des agent(s) actif(s) minceur est un extrait lipophile de graines de végétal du genre Vitellaria espèce paradoxa présent dans la composition à une concentration exprimée en pourcentage en poids rapporté au poids total de la composition comprise entre 0.0001 et 10%, de préférence voisine de 0.05% selon l'extrait testé Dans un quatrième mode de réalisation de l'invention, la composition est une composition cosmétique topique ou pharmaceutique qui contient comme agent actif minceur et lipolytique au moins une fraction végétale lipophile choisie dans le groupe formé par la famille des Balanitaceae.

Dans ce mode de réalisation, de préférence, ledit ou au moins l'un des agent(s) actif(s) minceur est un extrait lipophile de graines de végétal de la famille des Balanitaceae de préférence genre Balanites espèce aegyptiaca présent dans la composition à une concentration exprimées en pourcentage en poids rapporté au poids total de la composition comprise, de préférence, entre 0.0001 et 10%, de préférence voisine de 0,5% selon l'extrait testé.

Quel que soit le mode de réalisation, la composition nutraceutique, pharmaceutique ou cosmétique orale contient à chaque fois au moins un agent actif formé d'un extrait végétal lipophile de graines du genre Vitellaria espèce paradoxe, incorporé dans un véhicule nutraceutiquement ou pharmaceutiquement acceptable compatible avec une ingestion orale, présent dans la composition à une concentration exprimée en pourcentage en poids rapporté au poids total de la composition comprise, de préférence, entre 0.0001 et 100%, de préférence voisine de 1 % selon l'extrait testé.

La composition peut comprendre en outre tout additif usuellement utilisé dans le domaine cosmétique oral, nutraceutique ou pharmaceutique, tel que des séquestrants, des anti-oxydants, des conservateurs, des charges, des électrolytes, des humectants, des colorants, des bases ou des acides usuels, des minéraux, des arômes, des huiles essentielles, des actifs nutraceutiques ou pharmaceutiques, des lubrifiants, des édulcorants, des vitamines, des acides gras essentiels, des huiles végétales ou minérales, des agents sucrants. Bien entendu, l'homme du métier veillera à choisir ce ou ces éventuels composés complémentaires et/ou leur quantité de manière telle que les propriétés avantageuses de la composition selon l'invention ne soient pas ou substantiellement pas altérées. Ces additifs peuvent être présents dans la composition à raison de 0% à 99.9999% en poids par rapport au poids total de la composition.

Quel que soit le mode de réalisation, la composition topique contient à chaque fois au moins un agent actif formé d'un extrait végétal, tel que mentionné ci- dessus incorporé dans un véhicule pharmaceutiquement ou cosmétiquement acceptable compatible avec une application topique. La composition peut comprendre en outre tout additif usuellement utilisé dans le domaine cosmétique topique ou pharmaceutique, tel que des séquestrants, des antioxydants, des filtres solaires, des conservateurs, des charges, des électrolytes, des humectants, des colorants, des bases ou des acides usuels, des minéraux, des parfums, des huiles essentielles, des actifs cosmétiques, des hydratants, des vitamines, des acides gras essentiels, des huiles végétales ou minérales, des silicones ou leurs dérivés, des sphingolipides, des composés auto- bronzants, des agents apaisants et protecteurs de la peau. Bien entendu, l'homme du métier veillera à choisir ce ou ces éventuels composés complémentaires et/ou leur quantité de manière telle que les propriétés avantageuses de la composition selon l'invention ne soient pas ou substantiellement pas altérées. Ces additifs peuvent être présents dans la composition à raison de 0% à 99.9999% en poids par rapport au poids total de la composition.

La composition cosmétique topique ou pharmaceutique de contrôle de la lipolyse et de la différenciation adipocytaire est applicable par voie topique et se présente sous la forme d'huile ou de lotion ou de gel ou d'émulsion huile dans eau ou d'émulsion eau dans huile ou de crème.

La composition cosmétique orale, nutraceutique ou pharmaceutique de contrôle de la lipolyse et de la différenciation adipocytaire est ingérable sous forme de sirop, de gélule, de poudre, d'ampoule, de solution buvable, d'huile, d'émulsion huile dans eau ou eau dans huile, de pâte, de chocolat ou de biscuit.

La composition pharmaceutique de contrôle de la lipolyse et de la différenciation adipocytaire selon l'invention peut se présenter sous forme injectable. La forme injectable de contrôle se présente sous la forme de lotion ou de gel ou d'émulsion huile dans eau ou eau dans huile ou d'huile.

L'invention a encore pour objet un procédé de contrôle de la lipolyse et de la différenciation adipocytaire à des fins cosmétiques pour mincir chez un mammifère comprenant au moins une étape d'administration parentérale d'une quantité efficace d'un extrait de végétal lipophile choisi dans le groupe formé par la famille des Balanitaceae et par le genre Vitellaria. Des exemples de formulation ci-dessous permettent d'illustrer les compositions selon l'invention sans toutefois en limiter la portée. Des exemples illustrant l'activité de stimulation de la production de Zinc-alpha2-glycoprotéine (ZAG) et d'inhibition de l'activité de la Glucose-6-Phosphate Déshydrogénase (G6PDH) des différentes compositions selon l'invention sont également décrits, ainsi que des exemples illustrant l'activité de stimulation de la lipolyse. Dans les compositions ci-après, les proportions des différents constituants sont exprimées en pourcentage en poids par rapport au poids total de la composition.

Exemple 1 :

Un exemple de composition cosmétique topique amincissante se présentant sous forme de crème et contenant un extrait lipohile de Balanites, en particulier de Balanites aegyptiaca va être décrit.

L'extrait lipohile végétal utilisé est issu des graines oléagineuses de Balanites. Ces graines sont traitées, en particulier décoquées afin de séparer la coque de l'amande. L'amande est ensuite délipidée de préférence par pressage à froid ou à chaud des amandes, ou par extraction avec un solvant apolaire tel que, entre autres, l'hexane, ou par extraction au C02 supercritique afin de séparer la fraction lipidique des amandes. Cette fraction lipidique subit, soit selon un premier mode d'extraction, une extraction avec un solvant alcoolique polaire comme entre autres l'éthanol ou le méthanol contenant entre 0.01 % et 10% d'eau, et préférentiellement entre 3 et 6 % d'eau, soit, selon un second mode d'extraction, une extraction à l'eau en état supercritique. Selon le premier mode d'extraction, par décantation, le surnageant de cette extraction contient la fraction active de l'extrait lipohile selon l'invention et peut intégrer la composition à une concentration comprise, de préférence, dans la plage 0.001 % à 10%, selon le second mode d'extraction, l'extrait directement obtenu contient la fraction active de l'extrait lipohile selon l'invention et peut intégrer la composition à une concentration comprise, de préférence, dans la plage 0.001 % à 1 %. Selon l'un quelconque mode d'extraction, l'extrait obtenu peut ainsi être directement intégré dans la composition cosmétique topique ou, selon le premier mode d'extraction, peut être séché par sublimation du solvant alcoolique polaire, notamment sous vide afin d'obtenir un extrait concentré dépourvu de solvant. Selon l'un quelconque mode d'extraction, l'extrait concentré, dépourvu de solvant, est un liquide plus ou moins épais ou visqueux qui peut figer à température ambiante, il est lipophile et s'incorpore dans la phase grasse ou huileuse de la composition. Cet extrait concentré est intégré dans la composition à une concentration comprise, de préférence, dans la plage 0.001 % à 1 %.

La composition peut présenter une formulation telle que suit :

Ingrédients %

Eau QSP

Gomme de Xanthane 0,7

Glyceryl Stéarate 4,3

Alcool ceterarylique et glucoside 2

cetearylique

Huile de sésame 6

Huile de tournesol 5

Dicaprylyl carbonate 3

Huile de jojoba 1

Glycérine 1

Acide sorbique 0,35

Benzoate de sodium 0,5

Vitamine E 0,2

Parfum 0,5

Extrait lipophile Balanites aegyptiaca 0,5

testé Exemple 2 :

Un exemple de composition cosmétique « anti-poche » en contour des yeux se présentant sous forme de sérum et contenant un extrait lipohile de Vitellaria, en particulier de Vitellaria paradoxa va être décrit. L'extrait lipohile végétal utilisé est issu des graines oléagineuses de Vitellaria. Ces graines sont traitées, en particulier décoquées afin de séparer la coque de l'amande. L'amande est ensuite délipidée de préférence après broyage mécanique, par exemple, par pressage à froid ou à chaud des amandes, ou par extraction avec un solvant apolaire tel que, entre autres, l'hexane, ou par extraction au C02 supercritique afin d'isoler la fraction lipidique des amandes en tout ou partie. Cette fraction lipidique subit alors, soit une extraction avec un solvant alcoolique polaire, selon un premier mode d'extraction, comme entre autres l'éthanol ou le méthanol contenant entre 0.01% et 10% d'eau, et préférentiellement entre 3 et 6 % d'eau, soit une extraction à l'eau en état supercritique, selon un second mode d'extraction. Par décantation, le surnageant selon le premier mode d'extraction, ou le produit directement extrait selon le second mode d'extraction, contient la fraction active de l'extrait lipohile selon l'invention. Selon l'un quelconque mode d'extraction, l'extrait obtenu peut ainsi être directement intégré, avec ou sans solvant, à la composition cosmétique ou, selon le premier mode d'extraction, peut être séché par sublimation du solvant alcoolique polaire, notamment sous vide, afin d'obtenir un extrait concentré dépourvu de solvant. L'extrait concentré, dépourvu de solvant, selon le premier mode d'extraction ou l'extrait direct selon le second mode d'extraction, est un liquide plus ou moins épais ou visqueux qui peut figer à température ambiante, il est liposoluble et s'incorpore dans la phase grasse ou huileuse de la composition. Cet extrait concentré selon le premier mode d'extraction ou l'extrait direct selon le second mode d'extraction, est intégré dans la composition à une concentration, de préférence, comprise dans la plage 0.0001 % à 3%. La composition peut présenter une formulation telle que suit :

Exemple 3 : Un exemple de composition nutraceutique amincissante se présentant sous forme de poudre et contenant un extrait lipohile de Vitellaria, en particulier de Vitellaria paradoxa va être décrit. Selon l'invention, selon la réglementation européenne actuelle en vigueur, seul un extrait lipohile de Vitellaria paradoxa peut faire l'objet d'une composition nutraceutique. L'extrait lipohile végétal utilisé est issu des graines oléagineuses de Vitellaria. Ces graines sont traitées, en particulier décoquées afin de séparer la coque de l'amande. L'amande est ensuite délipidée de préférence après broyage mécanique, par exemple, par pressage à froid ou à chaud des amandes, ou par extraction avec un solvant apolaire tel que, entre autres, l'hexane, ou par extraction au C02 supercritique afin d'isoler la fraction lipidique des amandes en tout ou partie. Cette fraction lipidique subit alors, soit une extraction avec un solvant alcoolique polaire, selon un premier mode d'extraction, comme entre autres l'éthanol ou le méthanol contenant entre 0.01% et 10% d'eau, et préférentiellement entre 3 et 6 % d'eau, soit une extraction à l'eau en état supercritique, selon un second mode d'extraction. Par décantation, le surnageant selon le premier mode d'extraction, ou le produit directement extrait selon le second mode d'extraction, contient la fraction active de l'extrait lipohile selon l'invention. Selon l'un quelconque mode d'extraction, l'extrait obtenu peut ainsi être directement intégré, avec ou sans solvant, à la composition cosmétique ou, selon le premier mode d'extraction, peut être séché par sublimation du solvant alcoolique polaire, notamment sous vide, afin d'obtenir un extrait concentré dépourvu de solvant. L'extrait concentré, dépourvu de solvant, selon le premier mode d'extraction ou l'extrait direct selon le second mode d'extraction, est un liquide plus ou moins épais ou visqueux qui peut figer à température ambiante, il est liposoluble et s'incorpore dans la phase grasse ou huileuse de la composition. Cet extrait concentré selon le premier mode d'extraction ou l'extrait direct selon le second mode d'extraction, est intégré dans la composition à une concentration, de préférence, comprise dans la plage 0.0001 % à 3%.

La composition peut présenter une formulation telle que suit : Pulpe d'acérola déshydratée 99% Extrait lipohile Vitellaria paradoxa testé 1 %

Exemple 4 :

Un exemple de composition nutraceutique amincissante se présentant sous forme de chocolat noir et contenant un extrait lipohile de Vitellaria, en particulier de Vitellaria paradoxa va être décrit. Selon l'invention, selon la réglementation européenne actuelle en vigueur, seul un extrait lipohile de Vitellaria paradoxa peut faire l'objet d'une composition nutraceutique.

L'extrait lipohile végétal utilisé est issu des graines oléagineuses de Vitellaria. Ces graines sont traitées, en particulier décoquées afin de séparer la coque de l'amande. L'amande est ensuite délipidée de préférence après broyage mécanique, par exemple, par pressage à froid ou à chaud des amandes, ou par extraction avec un solvant organique apolaire tel que, entre autres, l'hexane, ou par extraction au C02 supercritique afin d'isoler la fraction lipidique des amandes en tout ou partie. Cette fraction lipidique subit alors, soit une extraction avec un solvant alcoolique polaire, selon un premier mode d'extraction, comme entre autres l'éthanol ou le méthanol contenant entre 0.01 % et 10% d'eau, et préférentiellement entre 3 et 6 % d'eau, soit une extraction à l'eau en état supercritique, selon un second mode d'extraction. Par décantation, le surnageant selon le premier mode d'extraction, ou le produit directement extrait selon le second mode d'extraction, contient la fraction active de l'extrait lipohile selon l'invention. Selon l'un quelconque mode d'extraction, l'extrait obtenu peut ainsi être directement intégré, avec ou sans solvant, à la composition cosmétique ou, selon le premier mode d'extraction, peut être séché par sublimation du solvant alcoolique polaire, notamment sous vide, afin d'obtenir un extrait concentré dépourvu de solvant. L'extrait concentré, dépourvu de solvant, selon le premier mode d'extraction ou l'extrait direct selon le second mode d'extraction, est un liquide plus ou moins épais ou visqueux qui peut figer à température ambiante, il est liposoluble et s'incorpore dans la phase grasse ou huileuse de la composition. Cet extrait concentré selon le premier mode d'extraction ou l'extrait direct selon le second mode d'extraction, est intégré dans la composition à une concentration, de préférence, comprise dans la plage 0.0001 % à 100%.

La composition peut présenter une formulation telle que suit : Poudre de Cacao

Beurre de Cacao

Extrait feuilles Stevia rebaudiana

Extrait lipohile Vitellaria paradoxa testé Comme l'illustrent les résultats d'activité ci-après, les compositions contenant des extraits de Balanites aegyptiaca (Balanitaceae) et Vitellaria paradoxa (Sapotaceae) sont des compositions qui induisent le destockage des graisses chez les mammifères. Ce destockage s'explique par stimulation de la lipolyse par le fait de l'augmentation de production de Zinc-alpha 2-glycoprotéine (ZAG), un L F ou facteur de mobilisation des lipides qui en se liant sur les récepteurs β3 adrenergiques des adipocytes modifie une protéine G de sorte à activer l'Adénylate Cyclase. L'Adénylate Cyclase transforme alors ΑΤΡ en AMPc qui active une protéine kinase. Cette protéine kinase active une lipase qui dégrade le triacylglycerol stocké en acides gras. La ZAG active ainsi la cascade enzymatique qui conduit à la lipolyse. La ZAG stimule donc la lipolyse de manière directe en surexprimant l'AMPc. Ce destockage des graisses s'explique également par inhibition de la différenciation des pré-adipocytes par inhibition de la Glucose 6 phosphodihydrogénase (G6PDH).

Les utilisations de ces compositions sont diverses et variées.

Selon un premier mode d'application, en applications topiques, les extraits selon l'invention peuvent être utilisés dans les produits amincissants, lipolytiques, anti-cellulites, raffermissants, toniques, anti-poches sous les yeux, et plus généralement dans les produits destinés à améliorer et affiner la silhouette, le visage et le buste. Ces compositions peuvent être sous forme de capsules collées sur des fibres textiles de vêtements amincissants ou de textiles imprégnés de capsules en contact avec la peau ou de polymères imprégnés de capsules en contact avec la peau, de capsules intégrées dans des produits de massage, d'huiles de massage, d'émulsion huile dans eau, d'émulsion eau dans huile, de sérum, de lotion, de gel, de savon, dans les produits dermocosmétiques, dans les produits de maquillage, comme co-actifs dans les produits raffermissants, tenseurs et anti-âges.

Pour être efficaces, et compte-tenu de la rémanence de leur activité, les produits cosmétiques non rincés comprenant ces actifs sont à utiliser préférentiellement au minimum deux fois par semaine en cure de trois mois. Les compositions cosmétiques rincées comprenant ces actifs sont à utiliser préférentiellement au minimum deux fois par jour, en cure de trois mois.

Les produits cosmétiques comprenant ces actifs peuvent être utilisés chaque jour.

Selon un second mode d'application, Per os, dans le domaine nutraceutique, seul l'extrait lipophile de Vitellaria paradoxa peut être utilisé de manière « alimentaire » compte tenu de la réglementation européenne actuelle, et donc incorporer des compositions amincissantes selon l'invention. Selon le second mode d'application, l'extrait lipohile de Vitellaria paradoxa selon l'invention peut incorporer des compositions amincissantes, ou contre l'adiposité, nutraceutiques et pharmaceutiques. Ces compositions peuvent être sous forme de poudres, de gels, de lotions, de pâtes, de gommes, de chocolats, de gélules, de capsules, d'émulsions huile dans eau, d'émulsion eau dans huile, d'huiles ou d'ampoules.

Selon un troisième mode d'application, par injection, dans le domaine pharmaceutique, les extraits selon l'invention peuvent incorporer des compositions injectables. Ces compositions peuvent être sous formes de poudres à diluer extemporanément, de gel, de lotion, de sérum, d'émulsion huile dans eau ou eau dans huile.

Les extraits retenus pour la démonstration sont des extraits issus d'une extraction hydroalcoolique de la fraction lipidique des graines des végétaux, puis concentrés par évaporation sous vide de l'éthanol et de l'eau au moyen d'un système « rotavapor ».

Ainsi, l'extrait lipohile de la fraction lipidique des graines de Balanites aeqyptiaca présente une composition telle que suit : Fraction lipidique de la graine 50% Ethanoi 96° 50%

La composition étant exprimée en pourcentage en poids par rapport au poids total de ladite composition.

Cet extrait est maintenu sous agitation à l'obscurité pendant 4 heures à température ambiante. Cet extrait est mis à décanter à l'obscurité à température ambiante pendant 24 heures. Le surnageant est récupéré.

Le surnageant est alors concentré par évaporation de l'éthanol 96° dans un système « rotavapor » à 40°c, sous vide. L'extrait concentré résultant est appelé dans ce qui suit « EXTRAIT LIPOHILE BALANITES AEGYPTIACA TESTE ».

L'extrait lipohile de la fraction lipidique des graines de Vitellaria paradoxa présente une composition telle que suit :

Fraction lipidique de la graine 50%

Ethanoi 96° 50%

La composition étant exprimée en pourcentage en poids par rapport au poids total de ladite composition.

Cet extrait est maintenu sous agitation à l'obscurité pendant 4 heures à température ambiante. Cet extrait est mis à décanter à l'obscurité à température ambiante pendant 24 heures. Le surnageant est récupéré.

Le surnageant est alors concentré par évaporation de l'éthanol 96° dans un système « rotavapor » à 40°c, sous vide. L'extrait concentré résultant est appelé dans ce qui suit « EXTRAIT LIPOHILE VITELLARIA PARADOXA TESTE ».

Les résultats ci-après illustrent l'effet dose des actifs « EXTRAIT LIPOHILE BALANITES AEGYPTIACA TESTE » et « EXTRAIT LIPOHILE VITELLARIA PARADOXA TESTE » pour leur capacité à moduler la production de ZAG dans un modèle de kératinocytes épidermiques humains normaux adultes. Des monocouches de kératinocytes humains normaux ont été obtenues en cultivant des cellules issues d'une plastie abdominale réalisée chez une femme de 45 ans. Les kératinocytes ont été incubés pendant 48 heures à 37°C, sous atmosphère humide et à 5% de CO2, en absence (Témoin) ou en présence de dexaméthasone à 10μ ( produit de référence ) ou en présence de concentrations croissantes des actifs à l'essai. Ces concentrations (V/V) sont exprimées en volume de l'actif par rapport au volume total du milieu d'incubation dans lequel l'actif est stabilisé.

« EXTRAIT LIPOHILE BALANITES AEGYPTIACA TESTE » = SNHBCO2 : SNHBCO2 → 0.001 ; 0.005 ; 0.01 % (VA/)

« EXTRAIT LIPOHILE VITELLARIA PARADOXA TESTE » = SNBKSTBF : SNBKSTBF → 0.001 ; 0.005 ; 0.01 % (V/V)

L'« EXTRAIT LIPOHILE BALANITES AEGYPTIACA TESTE » = SNHBCO2 est d'abord dilué à 50% dans du DMSO (VA/), pour être ainsi dilué dans le milieu de culture. L'« EXTRAIT LIPOHILE VITELLARIA PARADOXA TESTE » = SNBKSTBF est d'abord dilué à 10% du DMSO (P/V), pour être ainsi dilué dans le milieu de culture.

A la fin de la période d'incubation, la ZAG est quantifiée dans les milieux de culture à l'aide d'un kit ELISA sensible et spécifique, et les protéines contenues dans les lysats cellulaires sont quantifiées par une méthode spectrocolorimétrique faisant appel au bleu de Coomassie (Bradford M. 1976 Anal. Biochem., 72, 248-254). Les résultats sont donnés sous la forme d'un rapport « ng de ZAG / mg de protéines totales du tapis cellulaire » (moyennes +/- la déviation standard, S.D.). La significativité statistique des différences observées entre les conditions « contrôle » et « produit de référence » ou « DMSO » est évaluée par un test de Student (Student t-test ; p < 0.05). La significativité statistique des différences observées entre les conditions « contrôle » et « produit à l'essai », est évaluée produit par produit, par une analyse de la variance à un facteur (One Way ANOVA), suivie, lorsque cela est nécessaire, d'un test de Holm-Sidak ou de Dunn's (p < 0.05). Les résultats présentés dans la figures 1 concernent les actifs « EXTRAIT LIPOHILE BALANITES AEGYPTIACA TESTE » et « EXTRAIT LIPOHILE VITELLARIA PARADOXA TESTE » et montrent que dans les conditions expérimentales retenues après 48 heures d'incubation, les actifs « EXTRAIT LIPOHILE BALANITES AEGYPTIACA TESTE » et « EXTRAIT LIPOHILE VITELLARIA PARADOXA TESTE » induisent une augmentation significative de la production kératinocytaire de ZAG. Ces résultats sont validés par le fait que la dexaméthasone à 10μ , utilisée comme produit de référence, augmentait significativement, de manière attendue, la production kératinocytaire de ZAG.

- "SNHBCO2" à 0,005 % → + 42,3 % (p<0,05)

- "SNHBCO2" à 0,01 % → + 30,1 % (p<0,05) - "SNBKSTBF" à 0,005 % → + 14,5 % (p<0,05)

- "SNBKSTBF" à 0,01 % → + 55,7 % (p<0,05)

- "Dexaméthasone" à 10 μΜ → + 27 % (p<0,05)

Les résultats ci-après illustrent l'effet dose des actifs « EXTRAIT LIPOHILE BALANITES AEGYPTIACA TESTE » et « EXTRAIT LIPOHILE VITELLARIA PARADOXA TESTE » pour leur capacité à moduler l'activité de la G6PDH dans un modèle IN VITRO acellulaire. La Glucose-6-Phosphate Deshydrogénase utilisée provient de la société SIGMA-ALDRICH. La G6PDH est incubée avec une solution de glucose, d'ATP, de NAD et d'hexokinase, en présence ou non des actifs à l'essai :

Hexokinase

Glucose + ATP ► Glucose-6-Phosphate + ADP

G6PDH

G6PD + NAD ► 6-PHOSPHOGLUCONATE + NADH

La variation de l'absorbance à 340 nm est directement proportionnelle à l'activité de la G6PDH. La solution de G6PDH est incubée pendant 5 minutes à température ambiante en présence des substrats, et en absence (tampon seul) ou en présence d'EDTA (produit de référence) ou de concentrations croissantes des actifs.

« EXTRAIT LIPOHILE BALANITES AEGYPTIACA TESTE » = SNHBC02 : SNHBC02 → 0.001 ; 0.005 ; 0.01 ; 0.05 ; 0.1 ; 0.5 et 1 % (VA/)

Ces concentrations (VA/) sont exprimées en volume de l'actif par rapport au volume total du milieu d'incubation dans lequel l'actif est stabilisé.

« EXTRAIT LIPOHILE VITELLARIA PARADOXA TESTE » = SNBKSTBF : SNBKSTBF → 0.001 ; 0.005 ; 0.01 ; 0.05 ; 0.1 ; 0.5 et 1 % (P/V)

Ces concentrations (PAZ) sont exprimées en poids de l'actif par rapport au volume total du milieu d'incubation dans lequel l'actif est stabilisé.

Un « blanc produit » est réalisé en absence de G6PDH, pour chacune des concentrations des produits testés afin de tenir compte d'une éventuelle absorbance à 340 nm des actifs à l'essai.

L'« EXTRAIT LIPOHILE BALANITES AEGYPTIACA TESTE » = SNHBCO2 est d'abord dilué à 50% dans du DMSO (VA/), pour être ainsi dilué dans le milieu de culture. L'« EXTRAIT LIPOHILE VITELLARIA PARADOXA TESTE » = SNBKSTBF est d'abord dilué à 10% du DMSO (P V), pour être ainsi dilué dans le milieu de culture.

L'amplitude de la réaction enzymatique est évaluée après 5 minutes d'incubation en présence de substrat et des produits à l'essai, par spectrocolorimétrie en faisant lecture de l'absorbance des milieux réactionnels à 340 nm. Pour chaque concentration testée, l'effet du produit à l'essai sur l'activité de la G6PDH est calculé selon la formule suivante : Q , [ DO;*; en présence de . ^" inhibiteur _χ 100

I DOse sa absence de 1 mlnbitew

Les résultats sont donnés sous la forme de pourcentage d'activité de la G6PDH par rapport au témoin (moyennes +/- la déviation standard, S.D.). La significativité statistique des différences observées entre les conditions « contrôle » et « produit de référence » ou « DMSO 1 %» est évaluée par un test de Student (Student t-test ; p < 0.001 ) et par une analyse de la variance à un facteur (One Way ANOVA), suivie d'un test de Holm-Sidak (p : < 0.05). La significativité statistique des différences observées entre les conditions « contrôle » et « produit à l'essai », est évaluée produit par produit, par une analyse de la variance à un facteur (One Way ANOVA), suivie, lorsque cela est nécessaire, d'un test de Holm-Sidak (p < 0.05).

Les résultats présentés dans la figure 2 concernent les actifs « EXTRAIT LIPOHILE BALANITES AEGYPTIACA TESTE » et « EXTRAIT LIPOHILE VITELLARIA PARADOXA TESTE » et montrent que dans les conditions expérimentales retenues après 5 minutes d'incubation, les actifs « EXTRAIT LIPOHILE BALANITES AEGYPTIACA TESTE » et « EXTRAIT LIPOHILE VITELLARIA PARADOXA TESTE » inhibent significativement l'activité de la G6PDH. Ces résultats sont validés par le fait que l'EDTA à 5 mM, utilisé comme produit de référence, inhibait significativement, de manière attendue, la réaction enzymatique après 5 minutes d'incubation.

- "SNHBCO2" à 0,005 % → - 39 % (p<0,05)

- "SNHBCO2" à 0,01 % → - 47,8 % (p<0,05) - "SNBKSTBF" à 0,01 % → - 35,5 % (p<0,05)

- "SNBKSTBF" à 0,05 % → - 74,3 % (p<0,05)

- "EDTA" à 5 μΜ → - 83 % (p<0,05)

Les résultats ci-après illustrent l'effet dose des actifs « EXTRAIT LIPOHILE BALANITES AEGYPTIACA TESTE » et « EXTRAIT LIPOHILE VITELLARIA PARADOXA TESTE » pour leur capacité à moduler l'activité lipolytique dans un modèle d'adipocytes humains normaux adultes en suspension. Des adipocytes humains ont été dissociés à partir d'une plastie abdominale réalisée chez une femme de 62 ans, puis incubés en présence ou non des actifs à l'essai. Les adipocytes ont été incubés 2 heures à 37°C, sous agitation, en absence (milieu incubation seul) ou en présence des produits de référence, ou de concentrations croissantes des produits à l'essai Les kératinocytes ont été incubés pendant 48 heures à 37°C, sous atmosphère humide et à 5% de CO2, en absence (Témoin) ou en présence de dexaméthasone à 10μΜ ( produit de référence ) ou en présence de concentrations croissantes des actifs à l'essai.

« EXTRAIT LIPOHILE BALANITES AEGYPTIACA TESTE » = SNHBCO2 :

SNHBCO2 → 0.001 ; 0.01 ; 0.1 % (P/V)

Ces concentrations (PA ) sont exprimées en poids de l'actif par rapport au volume total du milieu d'incubation dans lequel l'actif est stabilisé.

« EXTRAIT LIPOHILE VITELLARIA PARADOXA TESTE » = SNBKSTBF : SNBKSTBF → 0.001 ; 0.01 ; 0.1 % (P/V)

Ces concentrations (PA ) sont exprimées en poids de l'actif par rapport au volume total du milieu d'incubation dans lequel l'actif est stabilisé.

SNHBCO2 est préparé à partir d'une solution mère à 50% dans du DMSO (VA/), pour être alors dilué directement dans le milieu de culture, avec une concentration maximale de DMSO de 0.01 % (VA/). SNBKSTBF est préparé à partir d'une solution mère à 10% dans du DMSO (PA/), pour être alors dilué directement dans le milieu de culture, avec une concentration maximale de DMSO de 1 % (VA/).

Les activateurs de références utilisés vis-à-vis de l'activité lipolytique sur adipocytes sont la caféine et la théophylline à 10 ^"4 M.

A la fin de la période d'incubation, les acides gras non estérifiés (AGNE) sont quantifiés dans les milieux d'incubation à l'aide d'une technique spectrophotométrique sensible et spécifique.

Les résultats sont donnés sous la forme de concentrations (en μΜ) d'AGNE présents dans les milieux d'incubation des adipocytes (moyennes +/- la dérivation standard, S.D.). La significativité statistique des différences observées entre les conditions « contrôle » et « produit de référence » est évaluée par un test de Student (Student t-test, p< 0.001 ). La significativité statistique des différences observées entre les conditions « Témoin » et « Produits à l'essai », est évaluée produit par produit, par une analyse de la variance à un facteur (One Way ANOVA), suivie, lorsque cela est nécessire d'un test de Holm-Sidak (p< 0.05).

Les résultats présentés dans la figure 3 concernent les actifs « EXTRAIT LIPOHILE BALA ITES AEGYPTIACA TESTE » et « EXTRAIT LIPOHILE VITELLARIA PARADOXA TESTE » et montrent que dans les conditions expérimentales retenues après 2 heures d'incubation à 37°C, les actifs « EXTRAIT LIPOHILE BALANITES AEGYPTIACA TESTE » et « EXTRAIT LIPOHILE VITELLARIA PARADOXA TESTE » augmentent significativement la lipolyse. Ces résultats sont validés par le fait que la caféine et la Théophylline, utilisées comme produits de référence, augmentaient significativement, de manière attendue, la libération d'AGNE dans les milieux d'incubation des adipocytes en suspension.

- "SNHBCO2" à 0,01 % → + 34 % (p<0,05)

- "SNHBCO2" à 0,1 % → + 64 % (p<0,05)

- "SNBKSTBF" à 0,001 % → + 60 % (p<0,05)

- "SNBKSTBF" à 0,01 % → + 70 % (p<0,05) - "Caféine" à 10 ^"4 M → + 67 % (p<0,001 )

- "Théophylline" à 1(T* → + 125 % (p<0,001 )