LEUR UTILISATION MEDICALE

Domaine technique

La présente invention concerne une famille de composés analogues de la squalamine pour leur utilisation comme médicament, en particulier pour le traitement ou la prévention d’infections mycobactériennes, notamment de la tuberculose. La présente invention concerne également de nouveaux composés analogues de la squalamine, leur utilisation comme médicament, notamment pour le traitement ou la prévention d’infections bactériennes, fongiques, virales, parasitaires ou dans le traitement du cancer chez l’homme ou l’animal, ainsi que des compositions pharmaceutiques ou vétérinaires les comprenant. L’invention concerne enfin l’utilisation de ces nouveaux composés comme agent désinfectant et/ou décontaminant.

Etat de la technique antérieure

Les mycobactéries sont des bacilles aérobies dont la paroi, riche en lipides, leur confère une résistance aux agents antiseptiques et à certains antibiotiques. Parmi les mycobactéries, on trouve notamment celles responsables de la tuberculose : Mycobacterium tuberculosis et Mycobacterium africanum, présentes surtout en Afrique subsaharienne ; celles responsables de la lèpre : Mycobacterium leprae, et les mycobactéries atypiques comme Mycobacterium avium capable de causer des infections chez les patients infectés par le VIH (Virus de l’Immunodéficience Humaine).

Plus particulièrement, la tuberculose est une maladie infectieuse transmissible causée par Mycobacterium tuberculosis (bacille de Koch). Elle touche le plus souvent les poumons et se caractérise par une toux accompagnée d’expectorations, de douleurs thoraciques, de fièvre et de sueurs nocturnes [1] Elle représente l’une des pathologies infectieuses les plus mortelles au niveau mondial [2] Environ un tiers de la population mondiale est porteur de tuberculose latente [3] Ces personnes ont été infectées par le bacille mais ne sont pas malades et ne sont donc pas contagieuses. Pendant toute la durée de leur vie, ces sujets ont de 5% à 15% de risque de développer la tuberculose [3]

Le traitement de la tuberculose consiste généralement à administrer au patient malade une association de 4 médicaments antituberculeux pour une durée de 6 mois [1] L’observance, c’est-à-dire la capacité des patients infectés à respecter le traitement médical qui leur est prescrit, demeure cependant difficile dans la mesure où ce traitement s’étale sur une longue période de temps et nécessite une organisation particulière de la part du patient. De plus, le moindre écart par rapport au protocole médical prescrit peut avoir de graves conséquences et notamment entraîner l’inefficacité du traitement et/ou des rechutes du patient voire la sélection de souches résistantes au traitement initialement envisagé. Dans ces cas, il est alors nécessaire de rechercher de nouvelles alternatives de traitement antituberculeux de durée plus courte.

La squalamine, dont la structure est rappelée ci-dessous, est un aminostérol hydrosoluble isolé pour la première fois en 1993 par le Professeur Michael Zasloff Cette molécule a démontré de puissantes activités anti-angiogéniques et antimicrobiennes envers un large panel de bactéries comprenant des bactéries à Gram positif (+) ( Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis ), des bactéries à Gram négatif (-) ( Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli), des champignons ( Candida albicans) et des protozoaires [4-6]

Squalamine

La source naturelle de la squalamine est cependant limitée, et sa synthèse chimique complexe et coûteuse. De nouveaux composés aminostéroidiens dérivés de la squalamine ont ainsi été proposés en substitution de la squalamine [7] Ces molécules présentent des activités antibactériennes similaires à celles de la squalamine, notamment envers certaines bactéries à Gram positif (+) et certaines bactéries à Gram négatif (-). Elles agissent selon un mécanisme d’action physicochimique de type détergent en provoquant l’éclatement de la paroi des bactéries à Gram positif, ou en perturbant la membrane externe des bactéries à Gram négatif [8]

Ces composés aminostéroidiens, notamment les composés n°2 et n°3 divulgués dans l’article Ghodbane et coll. [9], présentent par ailleurs, contrairement à la squalamine, une activité sur les mycobactéries non-tuberculeuses comme M. abscessus, M. massiliense, M. chelonae, M. immunogenum, M. bolletii, M. avium avium, M. avium intracellulare et M. avium hominissuis.

Dans une lettre adressée à l’éditeur du journal Tuberculosis en 2013, Walker et Houston ont émis l’hypothèse que ces molécules pourraient être de potentiels agents antituberculeux [10]. Suite à cette lettre, l’activité antibactérienne de la squalamine ainsi que celle de certains de ses dérivés aminostéroidiens envers les mycobactéries, et notamment envers Mycobacterium tuberculosis, a été testée en 2013 par Ghodbane et coll. par la méthode du Bactec en milieu liquide [9] Les résultats de cette étude montrent qu’aucun des composés envisagés ne présente d’activité sur Mycobacterium tuberculosis (CMI > 100 pg/mL).

En 2015, Asmar et Drancourt ont testé l’efficacité de la squalamine comme composé actif dans un protocole de décontamination qui permettrait d’isoler Mycobacterium tuberculosis à partir de crachats, tout en éliminant les autres bactéries contaminantes [11] Mais cette molécule n’a pas pu éliminer tous les contaminants.

Suite à ce constat d’inefficacité de la squalamine envers le bacille de Koch, aucun autre dérivé de la squalamine n’a été décrit comme étant actif envers Mycobacterium tuberculosis.

Un autre exemple de mycobactérie dangereux pour l’homme et l’animal est Mycobacterium xenopi. Présente dans l’environnement et dans les réseaux de distribution d’eau, cette mycobactérie a été reconnue responsable d’épidémies d’infections osseuses chez plusieurs patients ayant subi une chirurgie à la clinique du sport entre 1988 et 1993 et dont l’opération avait impliqué l’utilisation d’un matériel chirurgical mal stérilisé et contaminé par cette bactérie [12]

L. Djouhri-Bouktab et al., J. Antimicrob. Chemother, 2011, 66, 1306-130 [13] divulgue l’utilisation pour la décolonisation cutanée de Staphylococcus aureus de la squalamine et de l’un de ses dérivés aminostérol dans lequel le groupement porteur de la fonction hydrogénosulfate a été remplacé par une chaîne polyamine comprenant 4 atomes d’azote.

WO 2011/067501 divulgue l’utilisation de la squalamine et de certains composés analogues pour une application par voie topique locale pour la décolonisation cutanéo- muqueuse de Staphylococcus aureus.

WO 2013/104849 divulgue l’utilisation de la squalamine et de certains composés analogues comme agent désinfectant, notamment à l’encontre de bactéries comme Staphylococcus aureus et Pseudomonas aeruginosa ou encore de levures comme Candida albicans.

WO 2016/142922 divulgue 1 ^‘ 'utilisation dans le traitement d’infections bactériennes, fongiques, virales, parasitaires et dans le traitement du cancer chez l’homme ou l’animal de composés dérivés de la squalamine dans lesquels le groupement hydroxyle a été remplacé par une fonction éther et dans lesquels le groupement hydrogénosulfate a été éliminé.

Aucun de ces documents ne divulgue l’utilisation d’un composé analogue de la squalamine comme médicament dans le traitement et/ou la prévention d’infections par une mycobactérie.

Il subsiste le besoin de proposer des composés qui soient actifs comme agents antibactériens contre les mycobactéries et notamment contre Mycobacterium tuberculosis et Mycobacterium xenopi, et dont la structure chimique soit différente de celle des composés actifs connus. En effet, des résistances aux antibiotiques connus apparaissent régulièrement. Il est important de disposer de nouvelles molécules pour répondre aux besoins des patients.

En particulier, il subsiste le besoin de proposer des composés qui puissent être utilisés pour prévenir ou traiter les infections mycobactériennes, notamment dues à Mycobacterium tuberculosis, et dont la structure est différente de celle des composés utilisés actuellement dans cette application.

Il subsiste également le besoin de fournir des composés qui puissent être utilisés comme agent désinfectant, stérilisant ou encore décontaminant pour réduire ou éliminer la contamination par des mycobactéries, notamment par Mycobacterium tuberculosis et par Mycobacterium xenopi, à la surface d’objets inertes.

De façon surprenante, on a découvert que certains composés aminostéroïdiens, en particulier certains dérivés de la squalamine, présentent une activité inhibitrice des mycobactéries, en particulier de Mycobacterium tuberculosis.

Résumé de l’invention

L’invention concerne tout d’abord un composé choisi parmi :

- les composés de formule (P) suivante, et

- leurs sels pharmaceutiquement acceptables,

dans laquelle Ri et R ₂ sont choisis, de manière indépendante, parmi les groupements de formule -(CR3R ₄ ) _n -[X-(CR5R6) _m ] _P -NR8R9 dans lesquels :

- n et m sont des entiers, identiques ou différents allant de 1 à 40,

- p est un entier allant de 0 à 4,

- X est un atome d’oxygène ou un groupement -NR ₇ -,

- les groupements R ₃ à R ₆ , identiques ou différents, sont choisis parmi : un atome d’hydrogène ; un groupement alkyle en C1-C12 ; un groupement aryle en C ₆ -C _l2 ,

- le groupement R ₇ est choisi, de manière indépendante, parmi un atome d’hydrogène, un groupement alkyle en Ci-C ₆ ou un groupement -(CH ₂ ) _S -NHR _I0 avec s un entier allant de 1 à 5 et Rio un atome d’hydrogène, un groupement alkyle en Ci- Ci ₂ ou un groupement aryle en C ₆ -Ci ₂ , et

- les groupements R etR ₉ , identiques ou différents, sont choisis parmi : un atome d’hydrogène ; un groupement alkyle en Ci-Ci ₂ ou R et R ₉ forment ensemble un groupement hétérocyclique, éventuellement substitué, comprenant de 5 à 20 atomes, m, X, R ₅ , R ₆ et R ₇ étant choisis de manière indépendante pour chaque unité -[X-

(CR ₅ R6)m]-,

- les groupements Ru et R _{| 2} , identiques ou différents, sont choisis parmi : un atome d’hydrogène ; un groupement alkyle en Ci-Ci ₂ ,

pour son utilisation comme médicament dans le traitement et/ou la prévention d’infections par une mycobactérie chez l’homme ou l’animal, de préférence chez l’homme.

De préférence, le composé selon l’invention est choisi parmi :

- les composés de formule (I) suivante, et

- leurs sels pharmaeutiquement acceptables,

dans laquelle Ri et R ₂ sont choisis, de manière indépendante, parmi les groupements de formule -(CR3R ₄ ) _n -[X-(CR5R6) _m ] _P -NR8R9 dans lesquels :

- n et m sont des entiers, identiques ou différents allant de 1 à 40,

- p est un entier allant de 0 à 4,

- X est un atome d’oxygène ou un groupement -NR ₇ -,

- les groupements R ₃ à R ₆ , identiques ou différents, sont choisis parmi : un atome d’hydrogène ; un groupement alkyle en C1-C12 ; un groupement aryle en C ₆ -C _l2 ,

- le groupement R ₇ est choisi, de manière indépendante, parmi un atome d’hydrogène, un groupement alkyle en Ci-C ₆ ou un groupement -(CH ₂ ) _S -NHR _I0 avec s un entier allant de 1 à 5 et Rio un atome d’hydrogène, un groupement alkyle en Ci- Ci ₂ ou un groupement aryle en C ₆ -Ci ₂ , et

- les groupements R etR ₉ , identiques ou différents, sont choisis parmi : un atome d’hydrogène ; un groupement alkyle en Ci-Ci ₂ ou R et R ₉ forment ensemble un groupement hétérocyclique, éventuellement substitué, comprenant de 5 à 20 atomes,

- les groupements Ru et R _{| 2} , identiques ou différents, sont choisis parmi : un atome d’hydrogène ; un groupement alkyle en Ci-Ci ₂ ,

m, X, R ₅ , R ₆ et R ₇ étant choisis de manière indépendante pour chaque unité -[X-

(CR ₅ R6)m]-.

Avantageusement, la bactérie responsable de l’infection définie ci-dessus est choisie parmi Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium africanum, Mycobacterium abscessus, Mycobacterium massiliense, Mycobacterium chelonae, Mycobacterium immunogenum, Mycobacterium bolletii, Mycobacterium avium avium, Mycobacterium avium intracellulare, Mycobacterium avium hominissuis et Mycobacterium xenopi, de préférence choisie parmi Mycobacterium tuberculosis et Mycobacterium africanum, encore plus préférentiellement est Mycobacterium tuberculosis.

De préférence, dans les groupements Ri et R ₂ , 1 < n + m x p < 50, plus préférentiellement 5 < n + m x p < 20, encore plus préférentiellement l0 £ n + m x p < 15.

De préférence, les groupements Ri et R ₂ sont identiques.

Préférentiellement, les groupements R ₃ à R ₆ sont choisis, de manière indépendante, parmi un atome d’hydrogène et un groupement alkyle en Ci-Ci ₂ , de préférence en C i -C i o .

Encore plus préférentiellement, les groupements R ₃ à R<5 sont des atomes d’hydrogène.

Selon un mode de réalisation, p est strictement supérieur à 0 dans l’un au moins des groupements Ri et R _2.

Selon une première variante de ce mode de réalisation, X représente un atome d’oxygène.

De préférence, selon cette variante, l’un au moins des groupements -NHRi et - NHR ₂ est choisi parmi :

Selon une seconde variante de ce mode de réalisation, X représente un groupement de formule -NR ₇ -, de préférence X représente un groupement -NH-.

De préférence, selon cette variante, l’un au moins des groupements -NHRi et - NHR ₂ est choisi parmi :

Selon un mode de réalisation préféré, p est égal à 0 dans Ri et dans R ₂ .

Selon un mode de réalisation, les groupements R et R ₉ forment, ensemble, un groupement hétérocyclique, éventuellement substitué, comprenant de 5 à 20 atomes.

De préférence, selon ce mode de réalisation, l’un au moins des groupements - NHRi et -NHR ₂ est choisi parmi :

Selon un mode de réalisation préféré, R et R ₉ sont choisis, de manière indépendante, parmi un atome d’hydrogène et un groupement alkyle en Ci-Ci ₂ .

Selon une première variante de ce mode de réalisation, les groupements R et R ₉ sont des atomes d’hydrogène.

Selon une seconde variante de ce mode de réalisation, l’un au moins des groupements R et R ₉ est un groupement alkyle en Ci-Ci ₂ , de préférence R et R ₉ sont deux groupements alkyle en Ci-Ci ₂ .

Selon un mode de réalisation particulier, le composé selon l’invention est sous la forme d’un sel hydrosoluble, de préférence sous la forme d’un sel de chlorhydrate, de bromhydrate, de triflate, de phosphate, de lactate, de succinate, de sulfate ou de dichloroacétate.

Avantageusement, le composé selon l’invention est choisi parmi les composés de formule (1), (2), (3), (4) et (5) suivantes :

L’invention a également pour objet l’utilisation d’un composé tel que défini ci- dessus et de manière détaillée ci-dessous pour la préparation d’un médicament destiné à la prévention et/ou au traitement d’une infection par une mycobactérie chez l’homme ou l’animal.

L’invention concerne également un procédé de fabrication d’un médicament destiné à prévenir et/ou à traiter une infection par une mycobactérie, ledit procédé comprenant :

1) la fourniture d’un composé tel que défini ci-dessus et de manière détaillée ci- dessous, et

2) son introduction dans un support pharmaceutiquement acceptable. L’invention a également pour objet l’utilisation d’un composé tel que défini ci- dessus et de manière détaillée ci-dessous comme agent désinfectant et/ou décontaminant d’un objet matériel inerte à l’encontre d’agents contaminants choisis parmi les mycobactéries. Un autre objet de l’invention concerne un procédé de traitement thérapeutique, curatif ou préventif, d’infections par une mycobactérie chez un patient humain ou animal, de préférence humain, ce procédé comprenant :

1) la fourniture d’un composé tel que défini ci-dessus et de manière détaillée ci- dessous, éventuellement sous la forme d’une composition pharmaceutique, et 2) l’administration dudit composé au patient. L’invention concerne également un composé choisi parmi les sels de sulfate et/ou de dichloroacétate des composés de formule (P) suivante :

dans laquelle Ri et R ₂ sont choisis, de manière indépendante, parmi les groupements de formule -(CR3R ₄ ) _n -[X-(CR5R6) _m ] _P -NR8R9 dans lesquels :

- n et m sont des entiers, identiques ou différents allant de 1 à 40,

- p est un entier allant de 0 à 4,

- X est un atome d’oxygène ou un groupement -NR ₇ -,

- les groupements FL à FL, identiques ou différents, sont choisis parmi : un atome d’hydrogène ; un groupement alkyle en C1-C12 ; un groupement aryle en C ₆ -C _l2 ,

- le groupement R ₇ est choisi, de manière indépendante, parmi un atome d’hydrogène, un groupement alkyle en Ci-C ₆ ou un groupement -(CH ₂ ) _S -NHR _I0 avec s un entier allant de 1 à 5 et Rio un atome d’hydrogène, un groupement alkyle en Ci- Ci ₂ ou un groupement aryle en C ₆ -Ci ₂ , et

- les groupements FL etR ₉ , identiques ou différents, sont choisis parmi : un atome d’hydrogène ; un groupement alkyle en Ci-Ci ₂ ou FL et R ₉ forment ensemble un groupement hétérocyclique, éventuellement substitué, comprenant de 5 à 20 atomes,

- les groupements Ru et R _{| 2} , identiques ou différents, sont choisis parmi : un atome d’hydrogène ; un groupement alkyle en Ci-Ci ₂ ,

m, X, R ₅ , R ₆ et R ₇ étant choisis de manière indépendante pour chaque unité -[X-

(CR ₅ R6)m]-.

Cet ensemble de composés est noté (PA).

De préférence, les composés (PA) sont choisis parmi les sels de sulfate et/ou de dichloroacétate des composés de formule (I) suivante :

dans laquelle Ri et R ₂ sont choisis, de manière indépendante, parmi les groupements de formule -(CR3R ₄ ) _n -[X-(CR5R6) _m ] _P -NR8R9 dans lesquels :

- n et m sont des entiers, identiques ou différents allant de 1 à 40,

- p est un entier allant de 0 à 4,

- X est un atome d’oxygène ou un groupement -NR ₇ -,

- les groupements R ₃ à R ₆ , identiques ou différents, sont choisis parmi : un atome d’hydrogène ; un groupement alkyle en Ci-Ci ₂ ; un groupement aryle en C ₆ -Ci ₂ ,

- le groupement R ₇ est choisi, de manière indépendante, parmi un atome d’hydrogène, un groupement alkyle en Ci-C ₆ ou un groupement -(CH ₂ ) _S -NHR _I0 avec s un entier allant de 1 à 5 et Rio un atome d’hydrogène, un groupement alkyle en Ci- Ci ₂ ou un groupement aryle en C ₆ -Ci ₂ , et

- les groupements R etR ₉ , identiques ou différents, sont choisis parmi : un atome d’hydrogène ; un groupement alkyle en Ci-Ci ₂ ou R et R ₉ forment ensemble un groupement hétérocyclique, éventuellement substitué, comprenant de 5 à 20 atomes,

- les groupements Ru et R _{| 2} , identiques ou différents, sont choisis parmi : un atome d’hydrogène ; un groupement alkyle en Ci-Ci ₂ ,

m, X, R ₅ , R ₆ et R ₇ étant choisis de manière indépendante pour chaque unité -[X-

(CR ₅ R6)m]-.

De préférence, dans les composés (PA), les groupements R et R ₉ sont des atomes d’hydrogène.

Plus préférentiellement, dans les composés (PA), les groupements Ri et R ₂ répondent à la formule -(CH ₂ ) _n -NH ₂ avec n un entier allant de 1 à 40, de préférence de 8 à 30, plus préférentiellement de 10 à 15. L’invention a également pour objet un composé choisi parmi :

- les composés de formule (P) suivante, et

- leurs sels pharmaceutiquement acceptables,

dans laquelle Ri et R ₂ sont choisis, de manière indépendante, parmi les groupements de formule -(CR3R ₄ ) _n -[X-(CR5R6) _m ] _P -NR8R9 dans lesquels :

- n et m sont des entiers, identiques ou différents allant de 1 à 40,

- p est un entier allant de 0 à 4,

- X est un atome d’oxygène ou un groupement -NR ₇ -,

- les groupements FL à FL, identiques ou différents, sont choisis parmi : un atome d’hydrogène ; un groupement alkyle en C1-C12 ; un groupement aryle en C ₆ -C _l2 ,

- le groupement R ₇ est choisi, de manière indépendante, parmi un atome d’hydrogène, un groupement alkyle en Ci-C ₆ ou un groupement -(CH ₂ ) _S -NHR _I0 avec s un entier allant de 1 à 5 et Rio un atome d’hydrogène, un groupement alkyle en Ci- Ci ₂ ou un groupement aryle en C ₆ -Ci ₂ , et

- les groupements FL etR ₉ , identiques ou différents, sont choisis parmi : un atome d’hydrogène ; un groupement alkyle en Ci-Ci ₂ ou FL et R ₉ forment ensemble un groupement hétérocyclique, éventuellement substitué, comprenant de 5 à 20 atomes,

- les groupements Ru et R _{| 2} , identiques ou différents, sont choisis parmi : un atome d’hydrogène ; un groupement alkyle en Ci-Ci ₂ ,

m, X, R ₅ , R ₆ et R ₇ étant choisis de manière indépendante pour chaque unité -[X-

(CRsRejm]-,

dans laquelle l’un au moins des groupements FL et R ₉ est différent d’un atome d’hydrogène.

Cet ensemble de composé est noté (PB). De préférence, les composés (PB) sont choisis parmi :

- les composés de formule (I) suivante, et

- leurs sels pharmaceutiquement acceptables,

dans laquelle Ri et R ₂ sont choisis, de manière indépendante, parmi les groupements de formule -(CR3R ₄ ) _n -[X-(CR5R6) _m ] _P -NR8R9 dans lesquels :

- n et m sont des entiers, identiques ou différents allant de 1 à 40,

- p est un entier allant de 0 à 4,

- X est un atome d’oxygène ou un groupement -NR ₇ -,

- les groupements R ₃ à R ₆ , identiques ou différents, sont choisis parmi : un atome d’hydrogène ; un groupement alkyle en C1-C12 ; un groupement aryle en C ₆ -C _l2 ,

- le groupement R ₇ est choisi, de manière indépendante, parmi un atome d’hydrogène, un groupement alkyle en Ci-C ₆ ou un groupement -(CH ₂ ) _S -NHR _I0 avec s un entier allant de 1 à 5 et Rio un atome d’hydrogène, un groupement alkyle en Ci- Ci ₂ ou un groupement aryle en C ₆ -Ci ₂ , et

- les groupements R etR ₉ , identiques ou différents, sont choisis parmi : un atome d’hydrogène ; un groupement alkyle en Ci-Ci ₂ ou R et R ₉ forment ensemble un groupement hétérocyclique, éventuellement substitué, comprenant de 5 à 20 atomes,

- les groupements Ru et R _{| 2} , identiques ou différents, sont choisis parmi : un atome d’hydrogène ; un groupement alkyle en Ci-Ci ₂ ,

m, X, R ₅ , R ₆ et R ₇ étant choisis de manière indépendante pour chaque unité -[X-

(CR ₅ R6)m]-,

dans laquelle l’un au moins des groupements R et R ₉ est différent d’un atome d’hydrogène. De préférence, dans les composés (PA) et/ou (PB), les groupements Ri et R ₂ sont identiques.

Préférentiellement, dans les composés (PA) et/ou (PB), p est égal à 0 dans Ri et dans R ₂ .

Avantageusement, dans les composés (PA) et/ou (PB), les groupements R ₃ à R<5 sont des atomes d’hydrogène.

Préférentiellement, dans les composés (PA) et/ou (PB), les groupements Ri et R ₂ sont choisis, de manière indépendante, parmi les groupements de formule -(CH ₂ ) _n - NR R ₉ avec n un entier allant de 1 à 40, de préférence de 5 à 30, plus préférentiellement de 10 à 15.

Avantageusement, les composés (PA) sont choisis parmi les composés de formule (2) ou (3) suivantes :

De préférence, les groupements R ₈ et R ₉ des composés (PB) sont choisis de manière indépendante parmi les groupements alkyles en Ci-Ci _2, de préférence en Ci- Cio, plus préférentiellement en Ci-C ₈ , encore plus préférentiellement en Ci-C _4, avantageusement R ₈ et R ₉ sont des groupements méthyle.

Plus préférentiellement, les groupements Ri et R ₂ des composés (PB) répondent à la formule -(CH ₂ ) _n -N(R’) ₂ avec : - R’ un groupement alkyle C1-C12, de préférence en C1-C10, plus préférentiellement en Ci-C ₈ , encore plus préférentiellement en C1-C4, et avantageusement est un groupement méthyle, et

- n un entier allant de 1 à 40, de préférence de 8 à 30, plus préférentiellement de 10 à 15.

Avantageusement, les composés (PB) sont choisis parmi les composés de formule (4) ou (5) suivantes :

L’invention a également pour objet les composés (PA) et/ou les composés (PB) pour leur utilisation comme médicament, de préférence pour la prévention et/ou le traitement d’infections bactériennes, fongiques, virales, parasitaires ou le traitement du cancer chez l’homme ou l’animal, plus préférentiellement pour la prévention et/ou le traitement d’infections bactériennes, encore plus préférentiellement pour la prévention ou le traitement d’infections au Staphylococcus aureus.

De préférence, les composés (PA) et/ou les composés (PB) sont utilisés comme médicament dans un traitement préventif ou prophylactique préopératoire visant à prévenir une infection bactérienne postopératoire chez un patient porteur sain auquel on va faire subir une opération chirurgicale.

Avantageusement, les composés (PA) et/ou (PB) sont administrés par application topique locale pour la décolonisation bactérienne cutanéo-muqueuse, de préférence pour la décolonisation sur la muqueuse nasale de Staphylococcus aureus.

L’invention concerne également une composition pharmaceutique comprenant au moins :

- un composé choisi parmi les composés (PA) et/ou (PB) définis ci-dessus et de manière détaillée ci-dessous, et

- un excipient pharmaceutiquement acceptable.

De préférence, l’excipient pharmaceutiquement acceptable est choisi parmi les excipients lipophiles, de préférence parmi : la vaseline, la lanoline, les esters de glycérol, les macrogols, les esters d’acides gras et de macrogols.

L’invention concerne également l’utilisation d’un composé choisi parmi les composés (PA) et/ou (PB) définis ci-dessus et de manière détaillée ci-dessous pour la préparation d’un médicament utilisable pour la prévention et/ou dans le traitement d’infections bactériennes, fongiques, virales, parasitaires ou dans le traitement du cancer chez l’homme ou l’animal, plus préférentiellement pour la prévention et/ou dans le traitement d’infections bactériennes, encore plus préférentiellement pour la prévention ou le traitement d’une infection au Staphylococcus aureus.

L’invention concerne également un procédé de fabrication d’un médicament destiné à prévenir et/ou à traiter une infection bactérienne, fongique, virale ou parasitaire ou à traiter le cancer chez l’homme ou l’animal, ledit procédé comprenant :

1) la fourniture d’un composé choisi parmi les composés (PA) et/ou les composés (PB) définis ci-dessus et de manière détaillée ci-dessous, et

2) son introduction dans un support pharmaceutiquement acceptable. L’invention a également pour objet une composition désinfectante et/ou décontaminante comprenant au moins :

- un composé choisi parmi les composés (PA) et/ou les composés (PB) définis ci- dessus et de manière détaillée ci-dessous, et

- un support adapté pour une application à un objet matériel inerte.

L’invention concerne en outre l’utilisation d’un composé choisi parmi les composés (PA) et/ou (PB) définis ci-dessus et de manière détaillée ci-dessous comme agent désinfectant et/ou décontaminant d’un objet matériel inerte, de préférence de matériel chirurgical.

De préférence, dans le cadre d’une utilisation comme agent désinfectant et/ou décontaminant, ledit composé est formulé sous la forme d’une solution aqueuse.

L’invention concerne enfin un procédé de traitement thérapeutique, curatif ou préventif, d’un patient humain ou animal, de préférence humain, ce procédé comprenant :

1) la fourniture d’un composé choisi parmi les composés (PA) et/ou les composés (PB) définis ci-dessus et de manière détaillée ci-dessous, éventuellement sous la forme d’une composition pharmaceutique, et

2) l’administration dudit composé au patient.

Description détaillée

L’expression « consiste essentiellement en » suivie d’une ou plusieurs caractéristiques, signifie que peuvent être inclus dans le procédé ou la composition de l’invention, outre les composants ou étapes explicitement énumérés, des composants ou des étapes qui ne modifient pas significativement les propriétés et caractéristiques de l'invention.

L’expression « compris entre X et Y » inclut les bornes, sauf mention contraire explicite. Cette expression signifie donc que l’intervalle visé comprend les valeurs X, Y et toutes les valeurs allant de X à Y. Définitions

Par « groupement alkyle », on entend au sens de l’invention un groupement hydrocarboné saturé, linéaire, ramifié ou cyclique.

Par « groupement aryle », on entend au sens de l’invention un système aromatiqe hydrocarboné, mono ou bicyclique. Parmi les groupements aryles, on peut notamment citer les groupements phényle ou naphtyle.

Par « groupement hétérocyclique », on entend au sens de l’invention un groupement hydrocarboné mono-, ou bi-cylique, saturé, insaturé ou aromatique comprenant un ou plusieurs hétéroatomes tels que O, N ou S.

Par « composé hydrosoluble » on entend au sens de l’invention un composé qui à température ambiante présente une solubilité supérieure ou égale à 0,1 % en masse par rapport à un volume d’eau donné.

L’expression « pharmaceutiquement acceptable » se réfère, au sens de l’invention, à des composés, compositions et/ou formes de dosage qui sont, dans la portée d’un jugement médical valable, adaptés pour une utilisation en contact avec les cellules des humains et des animaux sans toxicité, irritation, réponse allergique indue et similaires, et sont proportionnés à un rapport avantage/risque raisonnable.

Par « animal », on entend, de préférence, au sens de l’invention un mammifère, de préférence choisi parmi les animaux domestiques et d’élevage, plus préférentiellement choisi parmi le chat, le chien et le cheval.

Les composés

L’invention concerne les composés de formule (P) suivante et leurs sels pharmaceutiquement acceptables,

dans laquelle les groupements Ri et R ₂ sont choisis, de manière indépendante, parmi les groupements de formule -(CR3R4) _n -[X-(CR5R6) _m ] _P -NR8R ₉ dans lesquels :

- n et m sont des entiers, identiques ou différents allant de 1 à 40,

- p est un entier allant de 0 à 4,

- X est un atome d’oxygène ou un groupement -NR ₇ -,

- les groupements R ₃ à R ₆ , identiques ou différents, sont choisis parmi : un atome d’hydrogène ; un groupement alkyle en C1-C12 ; un groupement aryle en C ₆ -C _l2 ,

- le groupement R ₇ est choisi, de manière indépendante, parmi un atome d’hydrogène, un groupement alkyle en Ci-C ₆ ou un groupement -(CH ₂ ) _S -NHR _I0 avec s un entier allant de 1 à 5 et Rio un atome d’hydrogène, un groupement alkyle en Ci- Ci ₂ ou un groupement aryle en C ₆ -Ci ₂ , et

- les groupements R etR ₉ , identiques ou différents, sont choisis parmi : un atome d’hydrogène ; un groupement alkyle en Ci-Ci ₂ ; un groupement aryle en C ₆ -Ci ₂ ou R et R ₉ forment ensemble un groupement hétérocyclique, éventuellement substitué, comprenant de 5 à 20 atomes,

- les groupements Ru et R _{| 2} , identiques ou différents, sont choisis parmi : un atome d’hydrogène ; un groupement alkyle en Ci-Ci ₂ ,

m, X, R ₅ , R ₆ et R ₇ étant choisis de manière indépendante pour chaque unité -[X-

(CR ₅ R6)m]-.

Selon une première variante, les composés selon l’invention sont choisis parmi les composés de formule (P’) suivante et leurs sels pharmaceutiquement acceptables,

dans laquelle les groupements Ri et R ₂ sont choisis, de manière indépendante, parmi les groupements de formule -(CR3R4) _n -[X-(CR5R6) _m ] _P -NR8R ₉ dans lesquels :

- n et m sont des entiers, identiques ou différents allant de 1 à 40,

- p est un entier allant de 0 à 4, - X est un atome d’oxygène ou un groupement -NR ₇ -,

- les groupements R ₃ à R ₆ , identiques ou différents, sont choisis parmi : un atome d’hydrogène ; un groupement alkyle en C ₁ -C ₁₂ ; un groupement aryle en C ₆ -Ci ₂ ,

- le groupement R ₇ est choisi, de manière indépendante, parmi un atome d’hydrogène, un groupement alkyle en Ci-C ₆ ou un groupement -(CH ₂ ) _S -NHR _I0 avec s un entier allant de 1 à 5 et Rio un atome d’hydrogène, un groupement alkyle en Ci- C _l2 ou un groupement aryle en C ₆ -Ci ₂ , et

- les groupements R etR ₉ , identiques ou différents, sont choisis parmi : un atome d’hydrogène ; un groupement alkyle en C ₁ -C ₁₂ ; un groupement aryle en C ₆ -Ci ₂ ou R et R ₉ forment ensemble un groupement hétérocyclique, éventuellement substitué, comprenant de 5 à 20 atomes,

m, X, R ₅ , R ₆ et R ₇ étant choisis de manière indépendante pour chaque unité -[X-

(CR ₅ R6)m]-. Selon une seconde variante, les composés selon l’invention sont choisis parmi les composés de formule (P) et leurs seuls pharmaceutiquement acceptables dans lesquels les groupements Ru et R ₁₂ représentent tous deux un groupement méthyle.

Avantageusement, les composés selon l’invention sont choisis parmi

- les composés de formule (I) suivante,

- leurs énantiomères, et

- les sels pharmaceutiquement acceptables de ces composés,

dans laquelle les groupements Ri et R ₂ sont choisis, de manière indépendante, parmi les groupements de formule -(CR ₃ R ₄ ) _n -[X-(CR ₅ R ₆ ) _m ] _P -NR ₈ R ₉ dans lesquels :

- n et m sont des entiers, identiques ou différents allant de 1 à 40, - p est un entier allant de 0 à 4,

- X est un atome d’oxygène ou un groupement -NR ₇ -,

- les groupements R ₃ à R ₆ , identiques ou différents, sont choisis parmi : un atome d’hydrogène ; un groupement alkyle en Ci-Ci ₂ ; un groupement aryle en C ₆ -Ci ₂ ,

- le groupement R ₇ est choisi, de manière indépendante, parmi un atome d’hydrogène, un groupement alkyle en Ci-C ₆ ou un groupement -(CH ₂ ) _S -NHR _I0 avec s un entier allant de 1 à 5 et Rio un atome d’hydrogène, un groupement alkyle en Ci- C _l2 ou un groupement aryle en C ₆ -C _l2 , et

- les groupements R etR ₉ , identiques ou différents, sont choisis parmi : un atome d’hydrogène ; un groupement alkyle en C1-C12 ; un groupement aryle en C ₆ -Ci2 ou R et R ₉ forment ensemble un groupement hétérocyclique, éventuellement substitué, comprenant de 5 à 20 atomes,

- les groupements Ru et R _l2 , identiques ou différents, sont choisis parmi : un atome d’hydrogène ; un groupement alkyle en C1-C12,

m, X, R ₅ , R ₆ et R ₇ étant choisis de manière indépendante pour chaque unité -[X-

(CR ₅ R6)m]-.

Plus avantageusement, les composés selon l’invention sont choisis parmi :

- les composés de formule (I), et

- leurs sels pharmaceutiquement acceptables.

Selon une première variante, les composés selon l’invention sont choisis parmi :

- les composés de formule (G) suivante,

- leurs énantiomères, et

- les sels pharmaceutiquement acceptables de ces composés,

dans laquelle les groupements Ri et R ₂ sont choisis, de manière indépendante, parmi les groupements de formule -(CR3R4) _n -[X-(CR5R6) _m ] _p -NR8R ₉ dans lesquels :

- n et m sont des entiers, identiques ou différents allant de 1 à 40,

- p est un entier allant de 0 à 4,

- X est un atome d’oxygène ou un groupement -NR ₇ -,

- les groupements R ₃ à R ₆ , identiques ou différents, sont choisis parmi : un atome d’hydrogène ; un groupement alkyle en Ci-Ci ₂ ; un groupement aryle en C ₆ -C _l2 ,

- le groupement R ₇ est choisi, de manière indépendante, parmi un atome d’hydrogène, un groupement alkyle en Ci-C ₆ ou un groupement -(CH ₂ ) _S -NHR _I0 avec s un entier allant de 1 à 5 et Rio un atome d’hydrogène, un groupement alkyle en Ci- Ci ₂ ou un groupement aryle en C ₆ -Ci ₂ , et

- les groupements R etR ₉ , identiques ou différents, sont choisis parmi : un atome d’hydrogène ; un groupement alkyle en Ci-Ci ₂ ; un groupement aryle en C ₆ -Ci ₂ ou R et R ₉ forment ensemble un groupement hétérocyclique, éventuellement substitué, comprenant de 5 à 20 atomes,

m, X, R ₅ , R ₆ et R ₇ étant choisis de manière indépendante pour chaque unité -[X-

(CR ₅ R6)m]-.

Plus avantageusement, les composés selon l’invention sont choisis parmi :

- les composés de formule (G), et

- leurs sels pharmaceutiquement acceptables.

Selon une seconde variante, les composés selon l’invention sont choisis parmi les composés de formule (I), leurs énantiomères et leurs sels pharmaceutiquement acceptables dans lesquels les groupements Ru et R _ï2 représentent tous deux un groupement méthyle.

Selon un premier mode de réalisation, les composés selon l’invention sont choisis parmi les sels de sulfate et/ou de dichloroacétate des composés de formule (P) définie ci-dessus.

Cet ensemble de composés est désigné (PA). Avantageusement, selon ce premier mode de réalisation, les composés selon l’invention sont choisis parmi les sels de sulfate et/ou de dichloroacétate :

- des composés de formule (I) telle que définie ci-dessus, et

- de leurs énantiomères.

Cet ensemble de composés est désigné (IA).

Plus avantageusement, selon ce premier mode de réalisation, les composés selon l’invention sont choisis parmi les sels de sulfate et/ou de dichloroacétate des composés de formule (I) telle que définie ci-dessus.

Cet ensemble de composés est désigné (IA’).

Selon un second mode de réalisation, les composés selon l’invention sont choisis parmi :

- les composés de formule (P) définie ci-dessus dans laquelle l’un au moins des groupements R et R ₉ est différent d’un atome d’hydrogène, et

- leurs sels pharmaceutiquement acceptables.

Cet ensemble de composés est désigné (PB).

Avantageusement, selon ce second mode de réalisation, les composés selon l’invention sont choisis parmi :

- les composés de formule (I) telle que définie ci-dessus dans laquelle l’un au moins des groupements R et R ₉ est différent d’un atome d’hydrogène,

- leurs énantiomères, et

- les sels pharmaceutiquement acceptables de ces composés.

Cet ensemble de composés est désigné (IB).

Plus avantageusement, selon ce second mode de réalisation, les composés selon l’invention sont choisis parmi :

- les composés de formule (I) telle que définie ci-dessus dans laquelle l’un au moins des groupements R et R ₉ est différent d’un atome d’hydrogène, et

- leurs sels pharmaceutiquement acceptables.

Cet ensemble de composés est désigné (IB’). Les sels de sulfate et/ou de dichloroacétate des composés de formule (P) (composés (PA)), ainsi que les composés de formule (P), éventuellement sous la forme de sels pharmaceutiquement acceptables, dans laquelle l’un au moins des groupements Rs et R ₉ est différent d’un atome d’hydrogène (composés (PB)), sont nouveaux et constituent en eux-mêmes un objet de l’invention, ainsi que les compositions les comprenant, notamment les compositions pharmaceutiques ou les compositions désinfectantes les comprenant.

Les caractéristiques techniques présentées ci-après constituent des variantes et des modes de réalisation préférés des composés de formule (P) et de formule (I) définies ci- dessus. Elles constituent, en particulier, des variantes et des modes de réalisation préférés des composés (PA), (IA), (IA’), (PB), (IB) et (IB’) définis ci-dessus. Elles constituent également des variantes et modes de réalisation préférés des compositions, procédés et utilisations qui seront décrits ci-après.

Selon un mode de réalisation préféré, les groupements Ri et R ₂ sont identiques.

Lorsque l’un au moins des groupements FL à R ₆ est choisi parmi les groupements alkyle en C ₁ -C ₁₂ , de préférence, le ou les groupements alkyle sont linéaires ou ramifiés, encore plus préférentiellement linéaires.

Lorsque l’un au moins des groupements R ₃ à R ₆ est choisi parmi les groupements alkyle en C ₁ -C ₁₂ , de préférence, le ou les groupements alkyle en C ₁ -C ₁₂ sont choisis parmi les groupements alkyle en C ₁ -C ₁₀ , plus préférentiellement en Ci-C ₆ , et encore plus préférentiellement en C ₁ -C ₄ .

En particulier, lorsque l’un au moins des groupements R ₃ à R< ₅ est choisi parmi les groupements alkyle en C ₁ -C ₄ , il est, de préférence, choisi parmi les groupements méthyle, éthyle, propyle, n-butyle et isobutyle.

Lorsque l’un au moins des groupements R ₃ à R ₆ est choisi parmi les groupements aryle en C ₆ -Ci ₂ , de préférence, le ou les groupements aryle en C ₆ -Ci ₂ sont des groupements phényle.

Les groupements R ₃ à R< ₅ sont, de préférence, choisis, de manière indépendante, parmi un atome d’hydrogène et un groupement alkyle en C ₁ -C ₁₂ . Avantageusement, l’un au moins des groupements R ₃ à R ₆ est un atome d’hydrogène.

Avantageusement, les groupements R ₃ et R4 sont identiques, encore plus préférentiellement R ₃ et R4 sont l’atome d’hydrogène.

Avantageusement, les groupements R5 et R ₆ sont identiques, encore plus préférentiellement R5 et R _é sont l’atome d’hydrogène.

Avantageusement encore, les groupements R ₃ à R ₆ sont tous identiques, encore plus préférentiellement les groupements R ₃ à R _é représentent tous un atome d’hydrogène.

Selon un premier mode de réalisation, p est strictement supérieur à 0 dans l’un au moins des groupements Ri et R ₂ .

Avantageusement, selon ce mode de réalisation, p est choisi parmi 1, 2 et 3.

De préférence, selon ce mode de réalisation, Ri et R ₂ sont identiques.

De préférence, selon ce mode de réalisation, n est un entier allant de 1 à 20, plus préférentiellement de 1 à 10, encore plus préférentiellement de 1 à 5.

De préférence, m est un entier allant de 1 à 20, plus préférentiellement de 1 à 10, encore plus préférentiellement de 1 à 5, m étant choisi de manière indépendante pour chaque unité -[X-(CR5Ré) _m ]-·

De préférence, m est le même pour toutes les unités -[X-(CR5R6) _m ]-·

De préférence, X est le même pour toutes les unités -[X-(CR5R6) _m ]-·

De préférence, les groupements R5 et R ₆ sont les mêmes pour toutes les unités -

[X-(CR ₅ R6)m]-.

Avantageusement, R 5 = R ₆ = H.

Lorsque p > 0, selon une première variante, X représente un atome d’oxygène.

De préférence, selon cette première variante, l’un au moins des groupements - NHRi et -NHR ₂ est choisi parmi :

Lorsque p > 0, selon une seconde variante, X représente un groupement de formule -NR ₇ -, R ₇ étant tel que défini ci-dessus. De préférence, selon cette seconde variante, R ₇ représente un atome d’hydrogène, un alkyle en C ₁ -C ₃ ou un groupement -(CH ₂ ) _S NHR _I0 , avec s un entier allant de 2 à 4 et Rio un atome d’hydrogène, un groupement alkyle en C ₁ -C ₁₂ ou un groupement aryle en C ₆ -C ₁₂ .

Encore plus préférentiellement, selon cette seconde variante, R ₇ représente un atome d’hydrogène, un groupement méthyle ou un groupement -(CH ₂ ) _S NH ₂ , avec s = 2 ou 3.

De préférence, selon cette seconde variante, l’un au moins des groupements - NHRi et -NHR ₂ est choisi parmi :

Selon un mode de réalisation préféré, p est égal à 0 dans l’un au moins de Ri et

R ₂ .

Avantageusement, p est égal à 0 dans Ri et dans R ₂ .

Lorsque p = 0 dans l’un au moins des groupements Ri et R _2. ce dernier répond à la formule :

-(CR ₃ R ₄ ) _n -NR ₈ R ₉

n, R ₃ , R ₄ , R ₈ et R ₉ étant tels que définis ci-dessus.

De préférence, selon ce mode de réalisation, Ri et R ₂ sont identiques et répondent à la formule -(CR ₃ R ₄ ) _n -NR ₈ R9.

De préférence, selon ce mode de réalisation, n est un entier allant de 5 à 30, plus préférentiellement de 8 à 20, encore plus préférentiellement de 10 à 15. De préférence, selon ce mode de réalisation, R ₃ et R ₄ représentent l’atome d’hydrogène.

Dans les composés de l’invention, les groupements R et R ₉ , identiques ou différents, sont choisis parmi : un atome d’hydrogène ; un groupement alkyle en Ci- Ci ₂ ; un groupement aryle en C ₆ -Ci2 ou R et R ₉ forment ensemble un groupement hétérocyclique comprenant de 5 à 7 atomes, ledit groupement hétérocycle, éventuellement substitué, comprenant de 5 à 20 atomes.

Lorsque l’un au moins des groupements R et R ₉ est choisi parmi les groupements alkyle en Ci-Ci ₂ , de préférence, le ou les groupements alkyle sont linéaires ou ramifiés, encore plus préférentiellement linéaires.

Lorsque l’un au moins des groupements R et R ₉ est choisi parmi les groupements alkyle en Ci-Ci ₂ , de préférence, le ou les groupements alkyle en Ci-Ci ₂ sont choisis parmi les groupements alkyle en Ci-Cio, plus préférentiellement en Ci-C ₆ , et encore plus préférentiellement en Ci-C ₄ .

En particulier, lorsque l’un au moins des groupements R et R ₉ est choisi parmi les groupements alkyle en Ci-C ₄ , il est, de préférence, choisi parmi les groupements méthyle, éthyle, propyle, n-butyle et isobutyle.

Lorsque l’un au moins des groupements R à R ₉ est choisi parmi les groupements aryle en C ₆ -Ci ₂ , de préférence, le ou les groupements aryles en C ₆ -Ci2 sont des groupements phényle.

Lorsque les groupements R et R ₉ forment ensemble un groupement hétérocyclique, éventuellement substitué, comprenant de 5 à 20 atomes, de préférence, le groupement hétérocyclique est constitué d’atomes de carbone, d’azote, d’oxygène et d’hydrogène, plus préférentiellement d’atomes de carbone, d’azote et d’hydrogène.

De préférence, le groupement hétérocyclique est constitué d’un hétérocycle comprenant de 5 à 7 chaînons (atomes de cycle), ledit hétérocycle étant éventuellement substitué par un groupement -(CH ₂ ) _q -NH ₂ , avec q un entier allant de 1 à 5.

Avantageusement, selon cette variante, le groupement -NR _¾ R ₉ est choisi parmi :

Plus avantageusement, selon cette variante, l’un au moins des groupements NHRi et -NHR ₂ est choisi parmi :

Avantageusement, les groupements R et R ₉ sont choisis, de manière indépendante, parmi un atome d’hydrogène Selon un mode de réalisation préféré, l’un au moins des groupements Ri et R ₂ répond à la formule -(CH ₂ ) _n -NRsR9 dans laquelle :

- n est un entier allant de 1 à 40, de préférence de 8 à 30, plus préférentiellement de 10 à 20, encore plus préférentiellement de 10 à 15

- R et R ₉ sont choisis, de manière indépendante, parmi un atome d’hydrogène et un groupement alkyle en Ci-Ci ₂ , de préférence parmi un atome d’hydrogène ou un groupement alkyle en Ci-C ₄ , encore mieux parmi un atome d’hydrogène et un groupement méthyle. Avantageusement, selon ce mode de réalisation préféré, les groupements Ri et R ₂ sont identiques.

Avantageusement, les groupements Ru et R _{i 2} sont identiques.

Selon une première variante, l’un au moins des groupements Ru et R _{l 2} est un atome d’hydrogène.

De préférence, selon cette variante, les groupements Ru et R _{l 2} représentent tous deux un atome d’hydrogène.

Selon une seconde variante, l’un au moins des groupements Ru et R _{i 2} est choisi parmi les groupements alkyle en Ci-Ci ₂ .

De préférence, selon cette seconde variante l’un au moins des groupements Ru et R _I2 est choisi parmi les groupements alkyle en Ci-C ₆ , plus préférentiellement parmi les groupements alkyle en C ₁ -C ₃ , encore plus préférentiellement il s’agit d’un groupement méthyle.

De préférence, selon cette seconde variante, les groupements Ru et R _{i 2} représentent tous deux un groupement alkyle en Ci-Ci ₂ , plus préférentiellement Ru et R _I2 représentent tous deux un groupement méthyle.

Selon un mode de réalisation particulier, les composés selon l’invention sont sous la forme de sels pharmaceutiquement acceptables.

Par « sels pharmaceutiquement acceptables », on entend au sens de l’invention des sels d’addition d’acides inorganiques ou organiques, pharmaceutiquement acceptables des composés de formule (P) et/ou (I) définies ci-dessus, notamment choisis parmi les composés (PA), (IA), (IA’), (PB), (IB) et/ou (IB’). Ces sels incluent notamment des sels d'addition acides, c'est-à-dire des sels d'acide organique ou minéral d'un composé comportant une fonction basique telle qu'une fonction aminée. Ces sels peuvent être préparés in situ pendant l'isolement final et/ou la purification des composés. En particulier, les sels d'addition acide peuvent être préparés en faisant réagir séparément le composé purifié avec un acide organique ou inorganique et en isolant le sel ainsi formé. Parmi les exemples de sels d'addition acide on trouve les sels bromhydrate, chlorhydrate, sulfate, bisulfate, phosphate, nitrate, acétate, oxalate, valérate, oléate, palmitate, stéarate, laurate, borate, benzoate, lactate, phosphate, tosylate, citrate, maléate, fumarate, succinate, tartrate, iodate, notamment obtenus par réaction avec l’iodate de méthyle, naphthylate, mésylate, glucoheptanate, lactobionate, sulfamates, malonates, salicylates, propionates, méthylène -bis-hydroxynaphtoates, notamment méthylène-bis-(2-hydro-3naphthoate), acide gentisique, iséthionates, di-p- toluoyltartrates, methanesulfonates, éthanesulfonates, benzenesulfonates, p- toluènesulfonates, cyclohexyl sulfamates et quinatelaurylsulfonates, et analogues (voir par exemple S.M. Berge et al. « Pharmaceutical Salts » J. Pharm. Sci, 66, p.1 - 19 (1977)). De préférence, selon ce mode de réalisation particulier, les sels pharmaceutiquement acceptables sont choisis parmi les sels hydrosolubles.

Plus préférentiellement, selon ce mode de réalisation particulier, les composés selon l’invention sont sous la forme de sels de chlorhydrate, de bromhydrate, de triflate, de phosphate, de lactate, de succinate, de sulfate et/ou de dichloroacétate, de préférence sous la forme de sels de sulfate et/ou de dichloroacétate.

Parmi les composés selon l’invention, on peut notamment citer le composé de formule (1) suivante :

Selon un premier mode de réalisation avantageux, les composés selon l’invention sont choisis parmi les sels de sulfate et/ou de dichloroacétate des composés de formule (P) définie ci-dessus (composés (PA)), de préférence parmi les composés (IA) définis précédemment, encore plus préférentiellement parmi les composés (IA’) définis ci- dessus.

De préférence, selon ce mode de réalisation, les groupements R et R ₉ sont des atomes d’hydrogènes. De préférence, selon ce mode de réalisation, le composé selon l’invention comprend au moins un atome d’azote quatemisé, plus préférentiellement au moins deux atomes d’azote quatemisés.

Avantageusement, toujours selon ce mode de réalisation, l’ensemble des atomes d’azote présents dans le composé selon l’invention sont quatemisés.

De préférence, selon ce mode de réalisation, les groupements Ri et R ₂ sont identiques et représentent un groupement de formule -(CH ₂ ) _n -NH ₂ , avec n un entier allant de 1 à 40, de préférence de 5 à 30, plus préférentiellement de 8 à 20, encore plus préférentiellement de 10 à 15.

Avantageusement, selon ce mode de réalisation, n = 12.

Plus avantageusement, selon ce mode de réalisation, les composés selon l’invention sont choisis parmi les composés de formules (2) et (3) suivantes :

Selon un second mode de réalisation avantageux, les composés selon l’invention sont choisis parmi les composés de formule (P) définie ci-dessus, éventuellement sous la forme de sels pharmaceutiquement acceptables, dans laquelle l’un au moins des groupements R et R ₉ est différent d’un atome d’hydrogène (composés (PB)), de préférence parmi les composés (IB) définis ci-dessus, encore plus préférentiellement parmi les composés (IB’) définis ci-dessus. De préférence, selon ce second mode de réalisation, les groupements Ri et R ₂ répondent à la formule -(CH ₂ ) _n -NR8R9 dans laquelle :

- n est un entier allant de 1 à 40, de préférence de 5 à 30, plus préférentiellement de 8 à 20, encore plus préférentiellement de 10 à 15, et

- R et R ₉ sont choisis, de manière indépendante, parmi un atome d’hydrogène et un groupement alkyle en Ci-Ci ₂ , étant entendu que l’un au moins des groupements R et R ₉ est différents d’un atome d’hydrogène.

Selon une première variante, l’un des groupements R et R ₉ est un atome d’hydrogène et l’autre est un groupement alkyle en Ci-Ci ₂ .

Selon une seconde variante préférée, les groupements R et R ₉ sont choisis, de manière indépendante, parmi les groupements alkyle en Ci-Ci ₂ .

De préférence, selon cette seconde variante, les groupements R et R ₉ sont identiques.

Avantageusement, selon ce mode de réalisation, les groupements Ri et R ₂ sont identiques et représentent un groupement de formule -(CH ₂ ) _n -NR ₈ R ₉ dans laquelle :

- n est un entier allant de 1 à 40, de préférence de 5 à 30, plus préférentiellement de 8 à 20, encore plus préférentiellement de 10 à 15, et

- Rs et R ₉ sont identiques et représentent un groupement alkyle en Ci-Ci ₂ , de préférence en Ci-Cio, plus préférentiellement en Ci-C ₆ , et encore plus préférentiellement en Ci-C ₄ .

De préférence, Rs et R ₉ sont identiques et sont choisis parmi les groupements méthyle, éthyle, propyle, n-butyle et iso-butyle, encore plus préférentiellement est un groupement méthyle.

Avantageusement, selon ce second mode de réalisation, n = 12.

Encore plus avantageusement, selon ce mode de réalisation, le composé selon l’invention est choisi parmi les composés de formule (4) ou (5) suivantes :

Composition pharmaceutique

Les composés selon l’invention, peuvent être incorporés dans un excipient pharmaceutiquement acceptable pour former une composition pharmaceutique ou vétérinaire.

Une composition pharmaceutique ou vétérinaire selon l’invention comprend au moins :

- un composé selon l’invention, et

- un excipient pharmaceutiquement acceptable.

Selon un mode de réalisation particulier, les compositions pharmaceutiques ou vétérinaires selon l’invention peuvent comprendre un composé antibiotique distinct des composés de l’invention. Notamment, elles peuvent comprendre un composé choisi dans la famille des bêtalactamines (pénicillines / céphalosporines), des aminosides, des macro lides, des polypeptides, des sulfamides, des quinolones, des nitro-imidazoles et leurs dérivés, des dérivés des nitrofuranes, des dérivés du noyau benzyl-pyrimidine, des tétracyclines ou des phénicoles et leurs dérivés.

Les compositions pharmaceutiques ou vétérinaires selon l’invention peuvent également comprendre un deuxième composé qui présente une activité antiparasitaire, notamment un antipaludéen.

Les compositions pharmaceutiques ou vétérinaires selon l'invention peuvent se présenter sous des formes solides ou liquides, destinées par exemple à l'administration par voie parentérale (intraveineuse, intramusculaire, sous cutanée), orale ou topique.

Elles seront donc présentées sous la forme de solutés ou de suspensions injectables, notamment ingérables ou buvables, sous la forme de comprimés nus ou enrobés, de dragées, de capsules, de gélules, de pilules, de cachets, de poudres, de granulés, de suppositoires, de capsules rectales ou encore d’aérosol. Lorsque les compositions pharmaceutiques ou vétérinaires selon l’invention sont sous la forme de solutés ou de suspensions injectables, elles peuvent alors être conditionnées dans des flacons mono-doses ou multi-doses.

De préférence, les compositions pharmaceutiques ou vétérinaires selon l’invention se présentent sous la forme de solutés ou de suspensions ingérables ou buvables, de comprimés nus ou enrobés, de gélules ou encore d’aérosol.

De façon avantageuse, la composition pharmaceutique ou vétérinaire selon l'invention comprend également un ou plusieurs ingrédients additionnels bien connus de l'homme du métier tels que notamment, les agents liants, les agents de granulation, les lubrifiants, les colorants, les charges, les émulsifiants, les minéraux, les agents de pelliculage, les sels, les stabilisants, les tampons ou les vitamines. Les stabilisants comprennent les substances qui ont tendance à augmenter la durée de conservation de la composition tels que les conservateurs, les émulsifiants, les épaississants, les gaz d'emballage, les gélifiants, les humectants, les séquestrants, les synergistes ou les stabilisants.

Pour l'usage parentéral, l'eau, les solutés aqueux, le sérum physiologique, les solutés isotoniques sont les véhicules les plus commodément utilisés. Pour l'usage percutané, notamment sur la peau, les muqueuses ou le poil, en particulier pour les solutions à verser de type « pour-on » ou « spot-on » en médecine vétérinaire, les excipients usuels sont des solvants aqueux, alcooliques, polaires ou non, qui favorisent le passage transcutané, tel que l'eau, l'alcool benzylique, les huiles végétales et minérales, les agents de remise en suspension, les antioxydants, les tensioactifs, notamment un mélange constitué d’alcool benzylique et/ou de labrasol et/ou de laurate de propylène glycol, à titre d'agent de pénétration peut être utilisé.

La posologie peut varier dans des limites importantes (0,05 mg à 1000 mg) en fonction de l’indication thérapeutique et de la voie d’administration, ainsi que de l’âge et du poids du sujet.

Selon un mode de réalisation particulier, l’excipient pharmaceutiquement acceptable est choisi parmi les excipients lipophiles.

L’excipient lipophile est, de préférence, choisi parmi la vaseline, la lanoline, les esters de glycérol, les macrogols, les esters d’acides gras et de macrogols et leurs mélanges. De préférence, selon ce mode de réalisation, la composition pharmaceutique ou vétérinaire selon l’invention se présente sous la forme d’une lotion, d’une crème, d’une pommade ou encore d’un onguent.

Une telle composition pharmaceutique est particulièrement adaptée à une utilisation par voie topique locale pour une décolonisation bactérienne cutanéo- muqueuse, notamment de la muqueuse nasale.

Une composition pharmaceutique ou vétérinaire selon l’invention comprend, de préférence, de 0,01 à 10% en masse, de préférence de 0,5 à 5% en masse, et plus préférentiellement de 1 à 5% en masse d’au moins un composé selon l’invention, par rapport à la masse totale de la composition pharmaceutique ou vétérinaire.

Applications thérapeutiques

L’ensemble des composés de l’invention présente un intérêt pour la prévention et/ou le traitement d’une infection par une mycobactérie.

L’invention a ainsi pour objet les composés selon l’invention, éventuellement sous la forme d’une composition pharmaceutique ou vétérinaire telle que définie ci- dessus, pour leur utilisation comme médicament dans le traitement et/ou la prévention d’infections par une mycobactérie chez l’homme ou l’animal, de préférence chez l’homme.

L’invention a également pour objet un procédé de traitement thérapeutique, curatif ou préventif, d’infections par une mycobactérie chez un patient humain ou animal, de préférence humain, ce procédé comprenant :

1) la fourniture d’un composé selon l'invention, éventuellement sous la forme d’une composition pharmaceutique telle que définie ci-dessus, et

2) l’administration dudit composé au patient selon au moins l’une des voies d’administration définies précédemment.

L’invention concerne également l’utilisation d’un composé selon l’invention pour la préparation d’un médicament destiné à la prévention et/ou au traitement d’une infection par une mycobactérie chez l’homme ou l’animal, de préférence chez l’homme.

L’invention a également pour objet un procédé de préparation d’un médicament destiné à prévenir et/ou à traiter une infection par une mycobactérie, ledit procédé comprenant : 1) la fourniture d’un composé selon l’invention, et

2) l’introduction dudit composé dans un support pharmaceutiquement acceptable.

La mycobactérie responsable de l’infection est, de préférence choisie parmi

Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium africanum, Mycobacterium abscessus, Mycobacterium massiliense, Mycobacterium chelonae, Mycobacterium immunogenum, Mycobacterium bolletii, Mycobacterium avium avium, Mycobacterium avium intracellulare, Mycobacterium avium hominissuis et Mycobacterium xenopi, de préférence choisie parmi Mycobacterium tuberculosis et Mycobacterium africanum, encore plus préférentiellement Mycobacterium tuberculosis.

L’invention concerne aussi les sels de sulfate et/ou de dichloroacétate des composés de formule (P) (composés (PA)) et/ou les composés de formule (P), éventuellement sous la forme de sels pharmaceutiquement acceptables, dans laquelle l’un au moins des groupements R et R ₉ est différent d’un atome d’hydrogène (composés (PB)), éventuellement sous la forme d’une composition pharmaceutique ou vétérinaire telle que définie ci-dessus, pour leur utilisation comme médicament.

L’invention concerne plus particulièrement les composés (PA) et/ou les composés (PB) tels que définis ci-dessus pour leur utilisation comme médicament pour la prévention et/ou le traitement d’infections bactériennes, fongiques, virales, parasitaires ou le traitement du cancer chez l’homme et/ou l’animal.

Les composés (PA) et/ou les composés (PB) selon l’invention sont particulièrement efficaces pour la prévention et/ou le traitement d’infections bactériennes, notamment par Staphylococcus aureus.

L’invention a également pour objet un procédé de traitement thérapeutique, curatif ou préventif, d’un patient humain ou animal, de préférence humain, ce procédé comprenant :

1) la fourniture d’un composé choisi parmi les composés (PA) et les composés (PB), éventuellement sous la forme d’une composition pharmaceutique telle que définie ci-dessus, et

2) l’administration dudit composé au patient selon au moins l’une des voies d’administration définies précédemment. Les composés (PA) et/ou les composés (PB) selon l’invention sont particulièrement adaptés pour une application topique locale pour la décolonisation bactérienne cutanéo-muqueuse.

Par « application topique locale », on entend au sens de l’invention une procédure consistant à appliquer le composé sur la peau ou sur une muqueuse, ledit composé étant formulé en lotion, crème, onguent, pâte, pommade ou aérosol, dans le cas d’une application par voie nasale ou buccale.

Les composés (PA) et/ou les composés (PB) selon l’invention sont, de préférence, appliqués sur la muqueuse nasale. Ces composés peuvent toutefois être envisagés pour une application à différents endroits sur la peau, notamment au niveau des plis cutanés et, plus particulièrement, au niveau des aisselles.

Selon un mode de réalisation particulier, les composés (PA) et/ou les composés (PB) selon l’invention sont utilisés dans un traitement préventif ou prophylactique préopératoire visant à prévenir une infection bactérienne postopératoire chez un patient porteur sain auquel on va faire subir une opération chirurgicale.

De préférence, selon ce mode de réalisation particulier, les composés (PA) et/ou les composés (PB) selon l’invention sont utilisés pour prévenir une infection par Staphylococcus aureus.

L’invention concerne également l’utilisation de composés (PA) et/ou de composés (PB) selon l’invention pour la préparation d’un médicament.

L’invention concerne plus particulièrement l’utilisation de composés (PA) et/ou de composés (PB) pour la préparation d’un médicament utilisable pour la prévention et/ou dans le traitement d’infections bactériennes, fongiques, virales, parasitaires ou dans le traitement du cancer chez l’homme ou l’animal, de préférence pour la prévention ou dans le traitement d’infections bactériennes.

L’invention vise également un procédé de fabrication d’un médicament, ledit procédé comprenant :

1) la fourniture d’au moins un composé choisi parmi les composés (PA) et les composés (PB), et

2) l’introduction dudit composé dans un support pharmaceutiquement acceptable.

Le médicament est, de préférence, destiné à prévenir et/ou à traiter une infection bactérienne, fongique, virale ou parasitaire ou à traiter le cancer chez l’homme ou l’animal, plus préférentiellement destiné à prévenir et/ou à traiter une infection bactérienne, notamment par Staphylococcus aureus.

Utilisation comme agent désinfectant et/ou décontaminant

Les composés selon l’invention sont également efficaces comme agents désinfectants et/ou décontaminants à l’encontre d’agents contaminants choisis parmi les mycobactéries.

Les composés selon l’invention sont particulièrement efficaces à l’encontre de Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium africanum et Mycobacterium xenopi.

Par « agent désinfectant et/ou décontaminant », on entend au sens de l’invention un composé susceptible de tuer et/ou d’inactiver et/ou de stopper le développement de micro-organismes tels que des bactéries, des virus et des protozoaires.

Contrairement à un agent antiseptique destiné à être appliqué sur le corps humain ou animal ou encore d’un agent antibiotique destiné à être administré à l’intérieur du corps humain ou animal, un agent désinfectant et/ou décontaminant a pour objectif de désinfecter et/ou de décontaminer un objet matériel inerte.

Il existe des normes européennes NF EN 1040 (pour les bactéries) et EN 1275 (pour les levures) pour qualifier un composé chimique comme agent désinfectant chimique d'usage dans les secteurs pharmaceutique, médical, dentaire, vétérinaire, agro- alimentaire, industriel, et pour un usage domestique ou en collectivité. Selon les normes en vigueur un agent désinfectant doit tuer 99,999% des germes ciblés soit une diminution de 5 log en partant d’un inoculum de l0 ⁸ cfu/ml bactéries gram + et gram - S. aureus et P. aeruginosa et de 99,99% pour les champignons soit une diminution de 4 log en partant d'un inoculum de l0 ⁸ cfu/ml champignons (A niger et C. albicans ).

Les sels de sulfate et/ou de dichloroacétate des composés de formule (P) (composés (PA)) et/ou les composés de formule (P), éventuellement sous la forme de sels pharmaceutiquement acceptables, dans laquelle l’un au moins des groupements R et R ₉ est différent d’un atome d’hydrogène (composés (PB)) sont également efficaces comme agents désinfectants et/ou décontaminants à l’encontre d’agents contaminants choisis parmi les bactéries, les champignons, les virus et les parasites. Les composés (PA) et/ou les composés (PB) selon l’invention sont, en particulier, efficaces comme agents désinfectants et/ou décontaminants à l’encontre de bactéries, notamment à l’encontre de Staphylococcus aureus.

Les composés selon l’invention sont notamment adaptés à la désinfection et/ou la décontamination d’objets utilisés notamment dans les secteurs de l’alimentation, l’habitat, le transport, ainsi que les secteurs médicaux, notamment pharmaceutique ou diagnostic, dentaire, chirurgical, afin de garantir la stérilité des instruments utilisés.

On peut citer plus particulièrement :

- les ustensiles pour l’alimentation dans les collectivités et notamment pour l’alimentation des nourrissons comme les biberons, tétines, sucettes, ...

- les instruments chirurgicaux tels que les scalpels, prothèses chirurgicales, broches, ...

- les dispositifs médicaux tels que les lentilles de contact oculaire, et dispositifs endoscopiques tels que les sondes, endoscopes, masques respiratoires, ...

- les dispositifs d’administration de compositions pharmaceutiques tels que des nébuliseurs.

Il s’agit plus particulièrement d’objets, notamment rigides, en matériau polymère plastique ; matériau inorganique ou minéral ; matériau métallique, notamment en acier ; ou encore matériau composite.

On peut également citer le domaine du transport, notamment les brancards et garnitures intérieures de véhicules, notamment d’ambulances, ou encore le domaine de l’habitat ou du transport pour un usage domestique ou en collectivité, notamment les objets d’habitation comme les meubles et les objets immeubles tels que les sols, murs, conduites d’eau, sièges, poignées de porte, brancards.

Composition désinfectante et/ou décontaminante

Les composés selon l’invention peuvent par exemple être utilisés sous la forme d’une composition désinfectante et/ou décontaminante.

Une composition désinfectante et/ou décontaminante comprend au moins :

- un composé selon l’invention, et

- un support adapté à une application à un objet matériel inerte. La composition désinfectante et/ou décontaminante peut éventuellement comprendre un ou plusieurs excipients appropriés. De tels excipients sont bien connus de l’homme du métier qui saura les choisir et les adapter en fonction de l’application envisagée.

Selon une première variante, la composition désinfectante et/ou décontaminante se présente sous la forme d’une composition hydrosoluble, de préférence sous la forme d’un comprimé soluble dans l’eau.

Une telle composition est avantageuse en ce qu’elle permet de réduire le volume de produit à transporter et/ou stocker.

La composition hydrosoluble, notamment le comprimé, consiste alors en une portion adaptée à être dissoute ou solubilisée dans un volume donné de solvant, notamment de l’eau, afin d’obtenir une composition désinfectante et/ou décontaminante sous la forme d’une solution ou d’une dispersion.

Selon une seconde variante, la composition désinfectante et/ou décontaminante se présente sous la forme d’une solution et/ou d’une dispersion dans un solvant liquide.

De préférence, le solvant liquide est choisi parmi les solvants liquides volatiles, plus préférentiellement parmi l’eau et les alcools.

Plus préférentiellement, le solvant liquide est l’eau.

La teneur en composé selon l’invention dans la composition désinfectante et/ou décontaminante est, de préférence, d’au moins 3 mmol.L ¹ (mM), plus préférentiellement de 3 à 250 mM.

Selon un mode de réalisation particulier, la composition désinfectante et/ou décontaminante est contenue dans un substrat comme par exemple une lingette imprégnée d’une solution ou dispersion telles que définies ci-dessus.

Les différents modes de réalisation, variantes, les préférences et les avantages décrits ci-dessus pour chacun des objets de l’invention s’appliquent à tous les objets de l’invention et peuvent être pris séparément ou en combinaison.

L'invention est illustrée par les exemples suivants donnés à titre non limitatif. Partie expérimentale :

1. Synthèse des composés

Les composés (1), (2), (3), (4) et (5) ont été synthétisés selon les protocoles suivants.

Synthèse du composé (1)

Le composé (1), représenté ci-dessous, a été synthétisé selon le protocole décrit dans Djouhri-Bouktab L, Vidal N, Rolain JM, Brunel JM. Synthesis of new 3,20- bispolyaminosteroid squalamine analogues and évaluation of their antimicrobial activities. J Med Chem. 2011 Oct ; 54(20):74l7-2l [8]

Synthèse du composé (2)

Le composé (2), représenté ci-dessous, a été synthétisé à partir du composé (1) obtenus ci-dessus selon le protocole suivant :

100 mg (0,12 mM) du composé (1) sont dissous dans 1 mL d’acide sulfurique H ₂ S0 ₄ pur (CAS N° : 7664-93-9). La solution obtenue est ensuite placée dans un bain à ultrasons (Branson Ultrasonic) maintenu à une température de 35°C pendant 3 heures. Au mélange refroidi à une température de 5°C sont ajoutés 2 mL d’éthanol (CAS N° : 64-17-5). La solution obtenue est ensuite conservée toute une nuit au congélateur à une température de -l8°C. La solution est ensuite filtrée et le solide surnageant isolé. Au surnageant sont ensuite ajoutés 2 mL d’éthanol. La solution obtenue est ensuite placée dans un bain à ultrasons maintenu à une température de 35°C pendant 3 heures, avant d’être refroidie à une température de -20°C pendant toute une nuit. La fraction solide obtenue est finalement filtrée et placée au dessiccateur sous vide en présence de sulfate de magnésium MgS0 ₄ (CAS N° : 7487-88-9). 30 mg du composé (2) sont finalement obtenus.

Synthèse du composé (3)

Le composé (3), représenté ci-dessous, a été synthétisé à partir du composé (1) obtenus ci-dessus selon le protocole suivant :

100 mg (0,12 mM) du composé (1) sont dissous dans un volume minimum d’éthanol (environ 3 mL). A cette solution sont ajoutés 12 équivalents molaires d’acide dichloroacétique. Le mélange obtenu est ensuite placé dans un bain ultrasons maintenu à une température de 50°C pendant 4 heures. Le solvant est ensuite évaporé au moyen d’une pompe à vide afin de recueillir un résidu solide.

Le résidu solide obtenu est ensuite dissous dans 2 ml d’éthanol. 2 ml d’éther éthylique (CAS N° : 60-29-7) sont ensuite ajoutés à la solution obtenue qui est ensuite placée toute une nuit au congélateur à une température de -l8°C. La fraction solide obtenue est ensuite filtrée et placée au dessiccateur sous vide en présence de sulfate de magnésium MgS0 ₄ . Cette série d’opération est répétée une fois.

75 mg du composé (3) sont finalement obtenus.

Synthèse du composé (4)

Le composé (4), représenté ci-dessous, a été synthétisé à partir du composé (1) obtenu ci-dessus selon le protocole suivant :

Le composé (1) est mis à réagir avec de l’acide chlorhydrique selon un ratio molaire composé (1) : acide chlorhydrique égal à 1 :4. Le chlorhydrate du composé (1) ainsi obtenu (75 mg, 9.10-5 mol) est dissous dans de l’eau (5 mL). Du carbonate de potassium (200 mg, 1,4 mmol) est ensuite ajouté à la composition aqueuse obtenue qui est laissée à réagir pendant 30 minutes. Le produit obtenu est ensuite extrait par un mélange dichlorométhane/acétate d’éthyle selon un ratio volumique 2 :8. La phase organique recueillie est ensuite séchée au sulfate de sodium anhydre Na ₂ S0 ₄ , puis filtrée et enfin concentrée sous pression réduite. Le solide obtenu (9.10-5 mol) est ensuite dissous dans 200 pL d’acide formique (88% en solution aqueuse) et 200 pL de formaldéhyde (en solution aqueuse) avant d’être chauffé à 80°C et placé sous agitation pendant 24 h. Après refroidissement à température ambiante, le mélange réactionnel est dilué avec de l'eau puis traité avec du carbonate de potassium afin de rendre le milieu basique (pH 10). Le produit obtenu est ensuite extrait par un mélange dichlorométhane/acétate d’éthyle selon un ratio volumique 2 :8. La phase organique résultante est ensuite lavée avec de la saumure puis séchée au sulfate de sodium anhydre Na ₂ S0 ₄ avant d’être concentrée sous pression réduite. Le produit brut est ensuite purifié par chromatographie sur colonne de silice (éluant : dichlorométhane/méthanol/ammoniaque selon un ratio volumique 7 :3 :l). Le produit (4) est obtenu avec un rendement de 58 %.

Synthèse du composé (5)

Le composé (5), représenté ci-dessous, a été synthétisé à partir du composé (1) obtenu ci-dessus selon le protocole suivant :

Le composé (1) est mis à réagir avec de l’acide chlorhydrique selon un ratio molaire composé (1) : acide chlorhydrique égal à 1 :4. Le chlorhydrate du composé (1) ainsi obtenu (75 mg, 9.10 ⁵ mol) est dissous dans de l’eau (5 mL). Du carbonate de potassium (200 mg, 1,4 mmol) est ensuite ajouté à la composition aqueuse obtenue qui est laissée à réagir pendant 30 minutes. Le produit obtenu est ensuite extrait par un mélange dichlorométhane/acétate d’éthyle selon un ratio volumique 2 :8. La phase organique recueillie est ensuite séchée au sulfate de sodium anhydre Na ₂ S0 ₄ , puis filtrée et enfin concentrée sous pression réduite. Le solide obtenu (9.10 ⁵ mol) est ensuite dissous dans 2 mL d’acide formique (88% en solution aqueuse, > 400 équivalents) et 2.5 mL de formaldéhyde (en solution aqueuse, >400 équivalents) avant d’être chauffé à 80°C et placé sous agitation pendant 24 h. Après refroidissement à température ambiante, le mélange réactionnel est dilué avec de l'eau puis traité avec du carbonate de potassium afin de rendre le milieu basique (pH 10). Le produit obtenu est ensuite extrait par un mélange dichlorométhane/acétate d'éthyle selon un ratio volumique 2 :8. La phase organique résultante est ensuite lavée avec de la saumure puis séchée au sulfate de sodium anhydre Na ₂ S0 ₄ avant d’être concentrée sous pression réduite. Le produit brut est ensuite purifié par chromatographie sur colonne de silice (éluant : Acétate d’éthyle puis méthanol puis dichlorométhane/méthanol/ammoniaque selon un ratio volumique 7 :3 : l). Le produit (5) est obtenu avec un rendement de 75%.

RMN 1H (250MHz) : 0.72-0.98 (m, 12H), 1.02-1.28 (m, 10H), 1.29-1.98 (m, 29H),

1.98-2.18 (m, 3H), 2.37-2.46 (m, 8H), 2.12-2.34 (m, 2H), 2.69-2.89 (m, 12H), 2.91- 3.51 (m, 10H), 3.59-3.64 (m, 1H), 3.95-4.10 (m, 1H), 5.31-5.38 (m, 1H). 2. Evaluation de l’activité antituberculeuse

L’activité antituberculeuse de la squalamine, de la rifampicine et des composés (1), (2), (3) et (4) synthétisés ci-dessus a été évaluée. La rifampicine est un antibiotique bien connu pour son activité antituberculeuse. Elle constitue ici un comparatif.

La squalamine est étudiée comme comparatif.

Les composés (1), (2), (3) et (4) sont selon l’invention.

Matériel et méthodes :

L’activité antituberculeuse des composés est évaluée par détermination de la concentration minimale inhibitrice (CMI) de chacun des composés selon la méthode de micro-dilution en plaque.

Plusieurs suspensions de Mycobacterium tuberculosis H37Rv sont tout d’abord préparées par incubation des colonies, à 37°C et sous agitation constante à 300 tours/min pendant 7 jours, dans un mélange comprenant :

- 100 mL de milieu de Middlebrook 7H9 liquide,

- 0,5 ml de Tween 80,

- 0,5 ml de Glycerol, et

- 100 ml d’un mélange OADC (8,5 g/L de chlorure de sodium, 20,0 g/L de dextrose, 50,0 g/L d’albumine bovin, 0,03 g/L de catalase et 0,6 mL/L d’acide oléique) disponible commercialement sous la référence BBL™ Middlebrook OADC Enrichment.

Le jour de l’expérience, la turbidité de la suspension est ajustée à 1 McLarland par l’introduction de milieu 7H9.

Pour chacun des composés à étudier, 8 solutions de concentration décroissante sont préparées par dilutions successives d’une solution de base dans le milieu 7H9 au moyen d’une plaque 96-puits organisée sous la forme de 12 colonnes de 8 puits chacune. Par soucis de simplification, chacune des colonnes est associée à un composé spécifique et chaque ligne à une concentration précise. Pour chaque colonne, le premier puit comprend ainsi la solution la plus concentrée et le dernier puit la solution la moins concentrée. Les solutions ainsi préparées présentent respectivement une concentration égale à 100 - 50 - 25 - 12.5 - 6.25 - 3.125 - 1.56 - 0.78 pg/mL.

10 pL de la suspension de Mycobacterium tuberculosis calibrée à 1 McLarland sont ensuite ajoutés à 90 pL de chacune des solutions préparées ci-dessus. Le volume final de chaque puit est alors de 100 pL et la concentration bactérienne d’environ 10 ⁵ cfu/mL dans chaque puit.

Des puits de contrôle négatif (milieu de culture seul) et de contrôle de croissance (inoculum + milieu de culture) sont également intégrés sur la plaque 96-puits.

La plaque 96-puits est ensuite mise en incubation à 37°C.

Après 5 jours d’incubation, la concentration minimale inhibitrice (CMI) de chacun des composés est évaluée par analyse spectrophotométrique suite à l’ajout d’iodonitrotetrazolium dans chacun des puits. L’iodonitrotétrazolium est un colorant vital responsable d’une coloration violacée du milieu en présence de bactéries vivantes.

L’expérience est répétée de manière à obtenir 3 séries de résultats.

Sur chaque plaque, chaque composé est représenté deux fois (2 colonnes différentes).

La mesure de la CMI de chacun des composés a ainsi été réalisée 6 fois au total. Résultats :

Les résultats obtenus sont donnés dans le tableau 1 suivant.

Tableau 1 : Activité antibactérienne contre Mycobacterium tuberculosis

La rifampicine, utilisée comme contrôle, est bien active envers Mycobacterium tuberculosis et présente une CMI inférieure à 0,78 pg/mL.

La squalamine présente une CMI comprise entre 50 et 100 pg/mL. La squalamine n’est donc pas active envers Mycobacterium tuberculosis.

Les composés (1), (2), (3) et (4) selon l’invention présentent une CMI comprise entre 3,125 et 6,25 pg/mL.

Les composés (1), (2), (3) et (4) sont donc actifs envers Mycobacterium tuberculosis.

3. Evaluation de l’activité antibactérienne contre Staphylococcus aureus a) Evaluation in vitro de l’activité inhibitrice des composés (1), (2), (3), (4) et (5) contre Staphylococcus aureus L’activité antibactérienne contre Staphylococcus aureus de la squalamine, de la muporicine, de la vancomycine et des composés (1), (2), (3), (4) et (5) synthétisés ci- dessus a été évaluée.

La mupirocine et la vancomycine sont des antibiotiques connus pour leur activité antibactérienne contre Staphylococcus aureus. Elles constituent ici des comparatifs.

La squalamine est étudiée comme comparatif.

Les composés (1), (2), (3), (4) et (5) sont selon l’invention.

Matériel et méthodes :

L’activité antibactérienne des composés contre Staphylococcus aureus est évaluée par détermination de la concentration minimale inhibitrice (CMI) de chacun des composés selon la méthode de micro -dilution en plaque détaillée ci-dessous.

Le protocole de préparation des plaques est similaire à celui décrit ci-dessus dans le cadre de l’évaluation de l’activité antituberculeuse des composés à l’exception de :

- le milieu de culture Middlebrook 7H9 est remplacé par le milieu Mueller Hinton II Broth, ajusté en fonction des ions calcium et magnésium. Ce produit est disponible commercialement auprès de la société Becton Dickinson.

- l’expérience est réalisée 3 fois à partir de 3 souches bactériennes distinctes : o S. aureus ATCC 25923 (sensible à la méthicilline), notée ci-après MSSA,

o S. aureus CF Marseille CSUR P 102 (résistante à la méthicilline), notée ci-après MRSA, et

o S. aureus CSUR P 1946 (résistante à la méthicilline et à la mupirocine), notée ci-après Mup-R.

- pour chacune des cultures bactériennes, l’inoculum est préparé comme suit : la suspension bactérienne est ajustée à 0.5 McFarland puis diluée au 1 :20. 10 pF de cette suspension sont ensuite ajoutés dans chacun des puits pour obtenir un volume total de 100 pF pour chacun des puits (90 pF de solution antibactérienne + 10 pF de suspension bactérienne). Fa concentration bactérienne de chaque puit est égale à 5.10 ⁵ cfu/mF.

- le temps d’incubation est réduit à 24h.

Résultats : Les résultats obtenus sont donnés dans le tableau 2 suivant.

Tableau 2 : Activité antibactérienne in vitro contre Staphylococcus aureus

La vancomycine, utilisée comme contrôle, est bien active contre l’ensemble des souches Staphylococcus aureus et présente une CMI comprise entre 0.78 et 1.56 pg/mL sur toutes les souches testées.

La muporicine, utilisée comme contrôle, est bien active contre les souches MSSA et MRSA et présente vis-à-vis de ces deux souches une CMI égale à 0,39 pg/mL. Les essais réalisés confirment par ailleurs que la souche Mup-R est bien résistante à la muporicine (CMI > 100 pg/mL).

La squalamine et les composés (1), (2), (3), (4) et (5), selon l’invention présentent une CMI égale à 3,125 pg/mL pour toutes les souches testées.

Les composés (1), (2), (3), (4) et (5), ainsi que la squalamine, sont donc actifs contre l’ensemble des souches Staphylococcus aureus étudiées. b) Evaluation in vivo de l’activité inhibitrice du composé (5) contre Staphylococcus aureus

L’efficacité d’une pommade à base de vaseline comprenant 1% en masse du composé (5) préparé ci-dessus est évaluée dans un modèle de colonisation cutanée de Staphylococcus aureus résistant à la mupirocine (CSUR P 1946). Protocole :

Des souris sont rasées au niveau de leur région dorsale pour obtenir une zone dépourvue de poils. 10 pL d’une suspension bactérienne calibrée à 10 ⁷ cfu/mL est ensuite déposée sur la peau rasée des souris.

lh après le dépôt, les souris sont divisées en 2 groupes :

- les souris du premier groupe reçoivent une application unique de la pommade préparée ci-dessus, et

- les souris du deuxième groupe reçoivent une application unique de vaseline (groupe témoin).

Le dénombrement bactérien (= la concentration en bactéries à la surface de la peau des souris) est déterminé avant l’application de la pommade (t ₀ ) et 30 minutes après l’application de la pommade (t ₃₀ ) par écouvillonnage cutané et mise en culture sur gélose Chapman.

La réduction du compte bactérien est enfin calculée en faisant la différence entre le dénombrement bactérien mesuré à t ₃₀ et le dénombrement bactérien mesuré à to.

Résultats :

Les résultats obtenus sont présentés dans le tableau 3 suivant.

Tableau 3 : Activité antibactérienne in vivo contre Staphylococcus aureus du composé (4b)

* comparatif

Une réduction du compte bactérien égale à 0,7 log cfu/mL est observée dans le groupe ayant reçu une dose de vaseline (échantillon témoin).

Une réduction du compte bactérien égale 1,8 log cfu/mL est observée dans le groupe ayant reçu une dose de la pommade à base du composé (5).

Une différence significative de 1 log est ainsi constatée entre le groupe de souris ayant reçu l’application de la pommade à base du composé (5) et le groupe témoin. Ces résultats démontrent qu’une application unique du composé (5) permet de réduire le compte bactérien de Staphylococcus aureus avec une différence significative de 1 log par rapport au groupe témoin et ce dès les 30 premières minutes suivant l’application de la pommade. Cette rapidité d’action en dose unique constitue une supériorité par rapport à la mupirocine qui est administrée à raison de 2 applications par jour pendant 5 jours pour la décolonisation nasale de Staphylococcus aureus en clinique.

Ces résultats démontrent également la supériorité du composé (5) par rapport à l’art antérieur et plus spécifiquement par rapport au composé ASD-2 testé dans l’article de référence [13] et représenté ci-dessous. Dans cet article, l’activité antibactérienne du composé ADS-2 contre Staphylococcus aureus est évaluée in vivo selon un protocole analogue à celui détaillé ci-dessus. Les résultats présentés démontrent que 30 minutes après l’application d’une pommade à base du composé ASD-2, le compte bactérien est identique à celui obtenu avec le groupe témoin. Le composé ASD-2, contrairement au composé (5) selon l’invention, ne permet pas de réduire signifîcativement le compte bactérien initial en seulement 30 minutes.

4. Cytotoxicité

La toxicité des composés (1), (2), (3) et (5) synthétisés ci-dessus sur des cellules ovariennes de hamsters de Chine (cellules CHO pour « Chinese Hamster Ovary » en anglais) est évaluée selon le protocole défini ci-dessous.

Protocole :

Les cellules CHO sont ensemencées en plaque 24-puits avec une concentration de 80 000 cellules/puits dans 500 pL d’un milieu frais contenant du sérum de veau fœtal (SVF) puis incubées l6h à 37°C sous une atmosphère humide comprenant 5% en volume de dioxyde de carbone C0 ₂ .

Après incubation, les cellules sont traitées avec l’un des composés (1), (2), (3) ou (5) synthétisés ci-dessus avec et sans bioactivation métabolique (S9). La toxicité de chacun des composés, avec et sans bioactivation cellulaire, est évaluée à 3 concentrations différentes. 3 puits par concentration et par composé testé sont réalisés de manière à obtenir 3 séries de résultats.

Un contrôle négatif (solvant) et un contrôle positif ont également été inclus.

Les cellules sont ensuite placées 3h à 37°C sous atmosphère humide comprenant 5% en volume de dioxyde de carbone C0 ₂ .

Après exposition, la viabilité des cellules est mesurée à l’aide d’un compteur automatisé de viabilité cellulaire (Luna FL®).

Résultats :

Les résultats obtenus sont présentés dans le tableau 4 ci-dessous.

Tableau 4 : Viabilité de cellules CHO exposées à différentes concentrations en composés (1), (2), (3) et (5) avec et sans bioactivation métabolique (S9)

En l’absence d’activation métabolique

Les essais réalisés à une concentration égale à 0,5 ou 1 pg/n îL ne permettent pas de discriminer les différents composés.

A une concentration égale à 5 pg/mL, une toxicité de l’ordre de 35% est observée pour le composé (1), tandis qu’une toxicité inférieure à 12%, voire même une absence de toxicité, est observée avec les composés (2), (3) et (5).

Avec activation métabolique

Les essais réalisés à une concentration égale à 1 ou 5 pg/m L ne permettent pas de discriminer les différents composés.

A une concentration égale à 10 pg/m L, une toxicité de l’ordre de 30% est observée pour le composé (1), tandis qu’une toxicité inférieure à 5%, voire même une absence de toxicité, est observée avec les composés (2), (3) et (5).

Ces résultats montrent ainsi que les composés (2), (3) et (5) présentent une cytotoxicité sur cellules CHO significativement inférieure à celle du composé (1).

BIBLIOGRAPHIE

(1) Organisation Mondiale de la Santé (OMS), Tuberculose [lien internet]

Disponible au :

http://www.who.int/fr/news-room/fact-sheets/detaiiytuberculo sis

(2) Mjid M, Cherif J, Ben Salah N, Toujani S, Ouahchi Y, Zakhama H, et al.

Épidémiologie de la tuberculose. Rev Pneumol Clin. 2015 Apr l;7l(2— 3):67— 72.

(3) Getahun H, Matteelli A, Chaisson RE, Raviglione M. Latent Mycobacterium tuberculosis Infection. Campion EW, editor. N Engl J Med. 2015 May 28;372(22):2127-35.

(4) Moore KS, Wehrli S, Roder H, Rogers M, Forrest JN, McCrimmon D, et al.

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