苯并异噻唑类化合物及在制备抗精神分裂症药 物中的应用 技术领域

本发明涉及具有抗精神病活性的苯并异噻唑类 化合物及其作为抗精神 分裂药物的应用。 背景技术

精神性疾病包括焦虑症、精神分裂症、双向情 感障碍等， 而精神分裂症 是精神疾病中最严重、 危害最大的一种， 是社会负担第 7大疾病。 其临床主 要表现为思维障碍 （思维散漫、 思维中断、 思维贫乏、 妄想等） 、 幻觉、 情 感障碍 （情感淡漠、 情感倒错） ， 行为障碍 （社交退缩、 行为怪异、 紧张性 兴奋、 木僵等） 及学习、 工作记忆缺失。 随着社会环境的恶化和生活压力的 与日俱增， 精神分裂症的发病率呈明显上升趋势。

现代医学认为精神分裂症是一种症候群，为病 因不明的一组症状和体征 的集合。 近十余载， 对于神经递质及受体的研究较为活跃， 并发现在部分精 神分裂症病人中由于中枢神经递质及受体功能 异常而影响神经内分泌， 亦将 上述研究成果用于临床及幵发新的治疗药物。 大量研究结果表明， 精神疾病 与中枢单胺类神经递质及受体功能失常有关， 而中枢多巴胺 (DA)系统和 5- 羟基色胺 (5-HT)系统与人体精神活动密切相关。研究表明 ， DA和 5-HT系统 功能紊乱易导致精神分裂症、 抑郁症、 躁狂症、 焦虑症、 帕金森氏病、 神经 性疼痛等多种神经精神类疾病。

目前， 临床上市抗精神病药物主要作用于 DA和 5-HT系统， 并按其作 用机制和作用靶点分为经典抗精神病药和非经 典抗精神病药， 前者主要作用 于 DA系统（D ₂ 受体拮抗剂）， 而后者主要作用于 DA系统和 5-HT系统（如 D ₂ /5-HT _2a 双重拮抗剂）。 目前临床一线用药以非经典抗精神病药为主， 经典 抗精神病药因其过度拮抗黑质-紋状体、 结节 -漏斗 D ₂ 受体， 易导致锥体外系 效应 (EPS)和高催乳素血症等副作用。 此外， 由于其单一作用于 DA系统， 因 而只对精神分裂症阳性症状有效， 对阴性症状、 认知障碍无效。 非经典抗精 神病药如齐拉西酮、利培酮、 阿立哌唑、喹硫平等， 在治疗阳性症状的同时， 对阴性症状亦有一定改善， 但对认知障碍无明显改善， 且均具相应副作用， 如 EPS概率偏高， 肥胖、 静坐不能， 失眠， 焦虑， 心脏毒性等。 因而目前尚 无一个上市药物在改善精神分裂症整体谱系的 同时， 有效降低上述副作用。 因此， 寻找高效低毒、 治疗谱宽的新型抗精神分裂药为抗精神病药物 研发的 崔占与 #1占。

多巴胺受体 Di、 D ₂ 、 D ₃ 、 D ₄ 和 D ₅ 五个亚型， 归属于两个家族， 即 家族： 包括 D^P D ₅ ， D ₂ 家族： 包括 D ₂ 、 D ₃ 、 D ₄ ， 目前研究较多的是 1¾受 体家族。 D ₂ 受体在中枢主要分布于黑质、 纹状体、 尾状核、 伏隔核及边缘系 统。 现有抗精神病药均通过拮抗 D ₂ 受体而发挥抗精神分裂症阳性症状的作 用。 D ₃ 受体与 D ₂ 受体具高度同源性， 脑内 D ₃ 受体主要分布于中脑皮层和边 缘系统， 阻断 D ₃ 受体不会产生锥体外系 (EPS)等副反应， 并且能够治疗僵住 症和改善患者认知功能。 因而选择性 D ₃ 受体拮抗剂作为抗精神分裂症药物 具有良好的应用前景。 但与 D ₂ 受体相比， D ₃ 受体 mRNA在脑内分布较少， 因而要求药物作用于 D ₂ 、 D ₃ 受体的同时， 应具有 D ₃ 受体选择性， 即对 D ₃ 的亲和力强于对 D ₂ 受体亲和力 10倍或更高， 以发挥僵住症、 认知改善等生 理效应。 大量研究结果表明， 5-HT _2A 受体拮抗剂可解除边缘系统 DA能神经 元的抑制， 以恢复 DA能神经元的正常功能， 从而改善阴性症状。

近年来， 5-HT _1A 受体对于减少精神分裂症药物的副作用、 提高认知功 能的改善作用越来越得到学术界的认同。 有研究表明， 5-HT _1A 的激动 （或部 分激动） 作用可以有效的减少因 D ₂ 过度阻断引起的 EPS等副作用； 在前额 叶皮质中， NMDA (N-甲基 -D-天冬氨酸）受体通道与 5-HT _1A 受体靶点相同， 因而作用于前额叶皮质 5-HT _1A 受体有利于改善认知功能；激动突触后 5-HT _1A 受体减少谷氨酸释放， 有利于改善阴性症状和认知功能。 5-HT _1A 的部分激动 作用与 D ₃ 的协同作用可在治疗剂量下将 EPS降低到观测水平以下。 因此， 同时作用于 D ₂ 、 D ₃ 、 5-11丁^和 5-HT _2A 受体， 并具有 D ₃ 选择性的新型抗精 神分裂新药成为目前抗精神分裂症药物开发的 新方向， 并为相关疾病的治疗 药物研发提供了思路。

Cariprazine ( RGH-188, 化学结构如下所示） 为 Forest Laboratories和 Gedeon Richter 公司联合开发的 D ₂ /D ₃ / 5-HT _1A 受体部分激动剂， 目前已于美 国完成 III期临床实验， 处于注册期， 其适应症包括精神分裂症、 躁狂症及和 抑郁症。 受体亲和力实验结果表明， Cariprazine对 D ₂ 、 D ₃ 、 5-HT _1A 受体具 强亲和力 （Ki值分别为 0.69nM、 0.085nM和 2.46nM) ， 对 5-HT _2A 受体具中 等强度亲和力， Ki值为 19nM， 其对 D ₃ /D ₂ 受体具一定的选择性。 体内实验 表明其对精神分裂症、 抑郁症和躁狂症疗效明确， 毒副作用低， 不易引起患 者体重增加等。 临床研究结果进一步表明 Caripmzine 对躁郁症有很好的疗 效， 若其能成功上市， 将首次实现躁郁症的单一药物治疗， 较好提高患者的 依从性， 避免抗精神分裂症药物与抗抑郁药物的联合用 药。

然而， 临床试验结果进一步显示， Caripmzine在 3mg/d和 4.5mg/d剂量 下患者 EPS发生率为 22%。 其原因可能因其过强的 D ₂ 受体亲和力及过度阻 断作用所引起， 此外， 亦可能因其对 5-HT _1A 受体的作用未能完全改善 13 ₂ 受 体的过度阻断。 在动物实验中 Caripmzine表现出较好的认知障碍改善作用， 但在临床患者中未能明确体现， 可能因其 D ₃ /D ₂ 受体选择性仍不够理想， 进 而未能体现出以 D ₃ 受体介导的认知功能改善作用。

Cariprazine(RG H-188)

Cariprazine的化学结构 发明内容

本发明需要解决的技术问题之一是公开一种苯 并异噻唑类化合物，以克 服现有药物如静坐不能、 EPS、僵住症等副作用及对认知障碍疗效差等缺 陷， 以满足临床应用的需要；

本发明需要解决的技术问题之二是公开上述化 合物作为在制备治疗精 神分裂症及相关神经精神类疾病药物中的应用 。

本发明所述的苯并异噻唑类化合物， 为具有如结构通式 （I ) 所示的化 合物或其几何异构体、 游离碱、 盐、 水合物或溶剂化物：

( I )

其中-

W为

R 、 R ₂ 分别代表杂芳基或取代杂芳基； '

n为 0、 1、 2或 3 , 优选的为 0或 1 ;

m为 0、 1或 2， 优选的为 0或 1 ;

R ₃ 代表。Γ ₄ 的烷基、 取代的 C^ 的烷基、 C ₃ ~C ₆ 的环烷基、 取代的 C ₃ 〜C ₆ 的环烷基、 苯基、 取代苯基、 苄基、 取代苄基、 杂芳基、 取代的杂芳 基、 杂芳甲基或取代杂芳甲基；

R ₄ 为氢原子或。Η ₄ 的烷基；

R ₅ 为苯基或取代苯基、 杂芳基或取代杂芳基。

其中， 、 R ₂ 代表的杂芳基选自呋喃基、 吡咯基、 噻吩基、 苯并呋喃 基、 吲哚基或苯并噻吩基；

、 代表的取代杂芳基的取代基选自卤素、 氰基、 C 的烷基碳酰 基、 硝基、 甲氧基或 C^CA的垸基；

代表的 Cr^ 的垸基可被 1~3个氟原子取代；

R ₃ 代表的取代环烷基上的取代基选自 的垸基；

R ₃ 代表的取代苯基、 取代苄基、 取代杂芳基或取代杂芳甲基的取代基 选自卤素、 d- 垸氧基、 硝基或 d~C ₂ 的垸基；

R ₃ 代表的杂芳基优选呋喃基、 噻吩基、 吡啶基或苯并呋喃基；

R ₃ 代表的杂芳甲基优选呋喃甲基、 噻吩甲基、 吡啶甲基、 苯并呋喃甲 基或苯并噻吩甲基；

R ₃ 代表的取代杂芳基的取代基优选卤素、 C _r C ₂ 垸氧基、 硝基或 d~C ₂ 的垸基取代的呋喃基、 噻吩基、 吡啶基或苯并呋喃基；

R ₃ 代表的取代杂芳甲基的取代基优选卤素、 CrC ₂ 垸氧基、硝基或 C C2 的垸基取代的呋喃甲基、 噻吩甲基、 吡啶甲基、 苯并呋喃甲基或苯并噻吩甲 基；

R ₅ 代表的杂芳基包括呋喃基、 吡咯基、 噻吩基、 吡啶基、 苯并呋喃基、 苯并噻吩基或吲哚基；

代表的取代苯基或取代杂芳基的取代基包括卤 素、 -C2垸氧基、 硝 基或 d~C ₂ 的烷基；

所述的水合物包括含 0.5~3分子的水合物；

所述的盐为含有药物上可接受的阴离子的盐， 如盐酸盐、 氢溴酸盐、氢 碘酸盐、 硝酸盐、 硫酸盐或硫酸氢盐、 磷酸盐或酸式磷酸盐、 醋酸盐、 乳酸 盐、 乳清酸盐、 柠檬酸盐、 酒石酸盐、 马来酸盐、 富马酸盐、 葡糖酸盐、 糖 二酸盐、 苯甲酸盐、 甲磺酸盐、 乙磺酸盐、 苯磺酸盐、 对甲苯磺酸盐、 棕榈 酸盐， 其中优选盐酸盐、 氢溴酸盐、 硫酸盐、 三氟醋酸盐、 酒石酸盐、 甲磺 酸盐或棕榈酸盐， 所述的盐优选另含 0.5~6分子的结晶水， 优选为盐酸盐、 溴氢酸盐、 硫酸盐、 三氟醋酸盐、 甲磺酸盐或棕榈酸盐；

本发明的化合物可包括， 但不限于下面所述优选的化合物：

I I 反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ ]异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基)呋喃 -2-碳酰胺、

1-2 反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ |异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基)噻吩 -2-碳酰胺、

1-3 反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ί/]异噻唑 -3-基）哌嗪 -1-基）乙基)环己基) -1H- 吡咯 -2-碳酰胺、

1-4 反式 -Ν-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基）哌嗪 -1-基）乙基)环己基 )-lH- 吲哚 -2-碳酰胺、

1-5 反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基)苯并 呋喃 -2-碳酰胺、

1-6 反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ ]异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基)苯并 [b]噻吩 -2-碳酰胺、

1-7 反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基 )-5-氰 基 -呋喃 -2-碳酰胺、

1-8 反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [c ]异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基 )-3-叔 丁基呋喃 -2-碳酰胺、

1-9 反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基 )-5-甲 基 -1H-吡咯 -2-碳酰胺、

1-10 反式 5-乙酰基 -N-(4-(2-(4- (苯并 [if]异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环 己基)呋喃 -2-碳酰胺、 Ml 反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基）哌嗪 -1-基）乙基)环己基 )-3- 甲基噻吩 -2-碳酰胺、

1-12 反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基）哌嗪 -1-基）乙基)环己基 )-3- 溴噻吩 -2-碳酰胺、

1-13 反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ ]异噻唑 -3-基）哌嗪 -1-基）乙基)环己基 )-3- 甲基苯并 [b]噻吩 -2-碳酰胺、

1-14 反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基）哌嗪 -1-基）乙基)环己基 )-3- 氯苯并 [6]噻吩 -2-碳酰胺、

1-15 反式 -Ν-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪- 1-基）乙基)环己基 )-5- 硝基 -1H-吲哚 -2-碳酰胺、

1-16 反式 -Ν-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑- 3-基）哌嗪 -1-基）乙基)环己基 )-5- 甲氧基苯并呋喃 -2-碳酰胺、

1-17 反式 -Ν-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基）哌嗪 -1-基）乙基）环己 基) -2- (噻吩 -2-基)乙酰胺、

1-18 反式 -Ν-(4-(2-(4- (苯并 [cf]异噻唑 -3-基）哌嗪 -1-基）乙基）环己 基) -2- (苯并呋喃 -3-基）乙酰胺、

1-19 顺式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ί ]异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基)呋喃 -2-碳酰胺、

1-20 顺式 -Ν-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基)噻吩 -2-碳酰胺、

1-21 顺式 -Ν-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基) -1H- 吡咯 -2-碳酰胺、

1-22 顺式 -Ν-(4-(2-(4- (苯并 [ίί]异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基) -1H- 吲哚 -2-碳酰胺、

1-23 顺式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ ]异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基)乙基)环己基)苯并 呋喃 -2-碳酰胺、

I- 24 顺式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基)苯并 [b]噻吩 -2-碳酰胺、

II - 1 反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基)噻吩 -2-磺酰胺、 II -2 反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [£/]异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基 )-lH- 吡咯 -3-磺酰胺、

II -3 反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 W异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基)乙基)环己基)呋喃 -2-磺酰胺、

II -4 反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基)乙基)环己基)苯并

[δ]噻吩 -2-磺酰胺、

- II -5 反式 -Ν-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基)苯并 呋喃 -2-磺酰胺、

II -6 反式 -Ν-(4-(2-(4- (苯并 [ ]异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基) -1H- 吲哚 -3-磺酰胺、

II -7 反式 -Ν-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基）哌嗪 -1-基）乙基)环己基 )-5- 氰基呋喃 -2-磺酰胺、

II -8 反式 -Ν-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基）哌嗪 -1-基）乙基)环己基 )-5- 氯呋喃 -2-磺酰胺、

II -9 反式 -Ν-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基）哌嗪 -1-基）乙基)环己基 )-5- 甲基呋喃 -2-磺酰胺、

11 -10 反式 -Ν-(4-(2-(4- (苯并 异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基 )-5- 叔丁基噻吩 -2-磺酰胺、

II -U 反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基)乙基)环己基 )-5- 氯苯并 [δ]噻吩 -2-磺酰胺、

11 -12 反式 -Ν-(4-(2-(4- (苯并 Μ异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基 )-5- 氰基苯并 [b]噻吩 -2-磺酰胺、

11 -13 反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基 )-5- 甲基苯并 [b]噻吩 -2-磺酰胺、

11 -14 反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基 )-5- 硝基苯并 [δ]噻吩 -2-磺酰胺、

11 -15 反式 -Ν-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基 )-5- 甲氧基苯并呋喃 -2-磺酰胺、

11 -16 顺式 -Ν-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基）噻 吩 -2-磺酰胺、 II -17 顺式 -N-(4-(2-(4-(苯并 [J]异噻唑 -3-基）哌嗪 -1-基）乙基）环己 基) -1H-吡咯 -3-磺酰胺、

11 -18 顺式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基)呋 喃 -2-磺酰胺、

11 -19 顺式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ ]异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基)苯 并 [b]噻吩 -2-磺酰胺、

11 -20 顺式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基)苯 并呋喃 -2-磺酰胺、

II -21 顺式 -N-(4-(2-(4-(苯并 [ ]异噻唑 -3-基）哌嗪 -1-基）乙基）环己 基) -1H-吲哚 -3-磺酰胺、

11 -22 顺式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基）哌嗪 -1-基）乙基)环己基 )-5- 甲基呋喃 -2-磺酰胺、

ΠΙ-1 反式 -(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基)氨基甲 酸甲酯、

ΠΙ-2 反式 -(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基)氨基甲 酸乙酯、

ΙΠ-3 反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基)氨基 甲酸异丁酯、

ΙΠ-4 反式 -(4-(2-(4- (苯并 W异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基)乙基)环己基)氨基甲 酸环丙酯、

ΠΙ-5 反式 -(4-(2-(4- (苯并 [rf]异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基)氨基甲 酸环己酯、

ΠΙ-6 反式 -(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基)氨基甲 酸苯酯、

ΠΙ-7 反式 -(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基)氨基甲 酸 -3-甲氧基苯酯、

ΠΙ-8 反式 -(4-(2-(4- (苯并 [ί ]异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基)乙基)环己基)氨基甲 酸 -2-甲基苯酯、

ΙΠ-9 反式 -(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基)乙基)环己基)氨基甲 酸 -4-氯苯酯、 m-10 反式 -(4-(2-(4- (苯并 [ ]异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基)氨基 甲酸 -4-硝基苯酯、

m-11 反式 -(4-(2-(4- (苯并 [J]异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基)氨基 甲酸苄酯、

ΠΙ-12 反式 -(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基)氨基 甲酸苯并呋喃 -2-甲酯、

ΠΙ-13 反式 -(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基)氨基 甲酸噻吩 -2-甲酯、

ΠΙ-14 顺式 -(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基)氨基 甲酸甲酯、

m-15 顺式 -(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基)氨基 甲酸乙酯、

ΙΠ-16 顺式 -(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基）哌嗪 -1-基）乙基)环己基)氨基 甲酸苄酯、

IV-1 反式 -1-(4-(2-(4- (苯并 [ ]异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基)乙基)环己基 )-3-苯 基脲、

IV-2 反式 -1-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基) -3-苯 乙基脲、

IV-3 反式 -1-(4-(2-(4- (苯并 [ ]异噻唑 -3-基）哌嗪 -1-基）乙基）环己 基) -3- (吡啶 -3-基)脲、

IV-4 反式 -1-(4-(2-(4- (苯并 [ί/]异噻唑 -3-基）哌嗪 -1-基）乙基）环己 基) -3- (呋喃 -2-基)脲、

IV-5 反式 -1- (苯并 [b]噻吩 -2-基) -3-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪 -1- 基)乙基)环己基)脲、

IV-6 反式 -3-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基 )-1-甲 基 -1-苯基脲、

IV-7 反式 -3-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基)乙基)环己基 )-1-丁 基 -1-苯基脲、

IV-8 反式 -3-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基)乙基)环己基 )-1-甲 基 -1- (噻吩 -2-基)脲、 IV-9 反式 -l-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基）哌嗪 -1-基）乙基）环己 基) -3-(3-甲氧基苯基)脲、

IV-10 反式 -1-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基）哌嗪 -1-基）乙基）环己 基) -3-(3-硝基苯基)脲、

IV-11 反式 -1-(4-(2-(4- (苯并 [ ]异噻唑 -3-基）哌嗪 -1-基）乙基）环己基 )-3 苄基脲、

IV-12 顺式 -1-(4-(2-(4- (苯并 [ί/]异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基 )-3- 苯基脲

IV-13 顺式 -1-(4-(2-(4- (苯并 [c/]异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基 )-3- 苄基脲或

IV-14 顺式 -1-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基）哌嗪 -1-基）乙基）环己 基) -3- (呋喃 -2-基)脲。

上述优选化合物结构如下表所示:

S9I08I/ 0Z OAV

有效量的结构通式 (1)所示的化合物或其几何异构体、 游离碱、 盐、 水合物或 溶剂化物和医学上可接受的载体；

所述的载体是指药学领域常规的药物载体，如 稀释剂、赋形剂（比如水） 等， 填充剂如淀粉、 蔗糖、 乳糖、 微晶纤维素等， 粘合剂如纤维素衍生物、 明胶和聚乙烯吡咯烷酮等， 润湿剂如甘油等， 表面活性剂如十六垸醇等， 崩 解剂如碳酸钙、 交聚维酮、 羟基乙酸淀粉钠等， 润滑剂如滑石粉、 硬脂酰富 马酸钠、 硬脂酸钙和镁等。

可采用本领域公知的方法，将治疗有效量的本 发明的化合物与一种或多 种药学上可接受的载体相混合， 制备成常规的固体制剂如片剂、 粉剂、 颗粒 剂、 胶囊或针剂等。 其中活性成分的含量为 0.1%〜99.5% (重量比） 。

本发明的化合物可通过口服、 注射等方式施用于需要这种治疗的患者。 用于口服时， 可将其制备成常规的固体制剂如片剂、 粉剂或胶囊等； 用于注 射时，可将其制备成注射液。本发明的施用量 可根据用药途径、患者的年龄、 体重、 性别、 所治疗疾病的类型和严重程度等进行变化， 其剂量可以是

1.5-500mg/kg体重 /天。

本发明的化合物可采用如下三种合成通法进行 合成，通法一适用于反式 化合物合成， 通法二则适用于顺式化合物的合成， 通法三用于化合物 IV的合 成。此外， 本发明还参照 WO2010070370和 WO2011073705报道的方法合成 Cariprazine(RGH-188)的盐酸盐， 用于体内外活性筛选的对照样品。

通法一、

化合物 5与相应的碳酰氯或磺酰氯或羧酸反应， 即制得目标化合物， 以 1-1 为例：

其中起始原料 6 参照文献 Journal of Medicinal Chemistry, 1977, 20(2): 279~290的方法制备， 通过保护基变换得中间体 7， 从中间体 7到化合物 11 的反应与通法一相同。 通过顺式化合物 1 1 与相应的碳酰氯或磺酰氯或羧酸 反应亦可制得相应目标产物， 具体合成方法见各化合物制备实施例。

通法三、 IV类化合物的合成

m为 0~2的整数， 为氢原子或 d~C ₄ 的烷基， R ₅ 为芳基或卤素、 d-C ₂ 烷 氧基、 硝基或 d~C ₂ 的垸基取代的芳基。

其中起始原料 12为中间体 5或中间体 11， 中间体 5以通法一制备， 中 间体 11按照通法二制备。 通过 12与三光气反应生成异氰酸酯， 再加入到氨 基化合物的异丙醇溶液中， 一锅法制备目标产物， 具体合成方法见 IV类化合 物的制备实施例。

药理研究结果表明， 本发明所述苯并异噻唑类化合物（I )对多巴胺 D ₃ 、

5- HT _1A 受体均具强亲和力， 对 D ₂ 受体具强或中等强度的亲和力， 且该类化 合物具有良好的 D ₃ /D ₂ 受体选择性， 其中优选化合物 D ₃ /D ₂ 受体选择性在

6- 100倍范围内， 预示该类化合物不易产生僵住症等副作用及认 知障碍改善 作用。 令人惊奇的是， 该类化合物同时还具有强的 5-HT _2A 受体亲和力， 与 目前市售及在研的抗精神分裂症药物相比， 该作用机制可克服目前同类研究 药物对 D ₂ 过度阻断所致的副作用， 从而将抗精神分裂症药物的副作用降到 低水平， 同时进一步改善精神分裂症阴性症状。 因而， 本发明所述苯并异噻 唑类化合物相对于目前上市及在研的抗精神分 裂症药物， 具有显著的治疗效 果。

本发明涉及所述苯并异噻唑类化合物可能对多 种神经精神类疾病具有 改善和治疗作用， 可用于精神分裂症、 抑郁症、 焦虑症、 药物滥用、 躁狂症、 老年痴呆、 神经性疼痛或帕金森氏病等的治疗， 尤其是精神分裂症的治疗。

体外受体结合试验表明， 本发明所涉及的大多数化合物对多巴胺 D ₃ 、 5-HT _1A 、 5-HT _2A 受体具强亲和力 （Ki<10nmol或更低） ， 对多巴胺 D ₂ 受体 具有强或中等强度亲和力 (Ki<30nmol)， 体现出良好的 D ₃ /D ₂ 受体选择性， 代 表化合物如 1-6对 D ₃ /D ₂ 受体选择性达 52倍， 优于阳性药 RGH-188 (选择性 为 8倍） ， 具有深入研究价值。

动物体内模型试验结果显示， 上述化合物能显著改善阿朴吗啡模型、 MK-801 模型小鼠的相关症状。 而上述作用靶点和动物模型与多巴胺能系统 等紊乱所致的神经系统疾病尤其是精神分裂症 密切相关， 因此， 本发明所述 化合物对精神分裂症具治疗作用。

化合物安全性及药代动力学研究表明，权利要 求中所述化合物均口服吸 收良好， 急性毒性低于 RGH-188 , 治疗窗口较宽， 药代动力学特性符合成药 性要求， 具备作为新型抗精神神经性疾病药物幵发的价 值。

综上， 本发明的苯并异噻唑类化合物对多巴胺 D ₃ 受体具高亲和力， 代 表化合物 D ₃ /D ₂ 受体选择性良好， 表明该类化合物较少产生静坐不能、 锥体 外系反应 （这些副作用均由 D ₂ 受体过度阻断引起） 、 僵住症等副作用， 具 有潜在的改善认知障碍的作用。此外，本发明 的系列化合物对 5-HT _1A 、5-HT _2A 受体具强亲和力， 进一步表明其具抗精神分裂症阴性症状和认知 功能改善的 作用， 扩大了抗精神分裂症的治疗谱。 动物体内试验结果表明， 1-1 等代表 化合物显著改善阿朴吗啡模型、 MK-801 模型小鼠的相关精神分裂症症状， 因而本发明涉及的化合物具良好的抗精神分裂 症作用。 药代动力学及安全性 初步研究表明， 该系列化合物口服吸收较好， 急性毒性较低 (LD ₅ o>2000mg/Kg), 优于 RGH-188 (LD _5G =760mg/Kg)， 细菌回复突变试验结 果均为阴性。 因而， 本发明化合物具有显著的成药性， 更易于作为新型抗精 神神经性疾病药物的使用， 相当于现有技术， 本发明具有新颖性、 创造性和 实质的科学进步。

下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述 ，但发明的实施方式不限 于此。

实施例 1

反式 _ _N _ ₍₄ _(2-(4- (苯并 [ί/]异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基)呋喃 -2-碳 酰胺 (1-1)及其盐的制备

(1) 反式 -Ν-叔丁氧羰基 -4-氨基环己基乙醇 (2)的制备

将反式 -Ν-叔丁氧羰基 -4-氨基环己基乙酸 (128.5 _g ,0.5mol)、lL二氯甲 垸加入到 2L四口瓶中， 冰浴冷却到 0°C， 滴入三乙胺 (1.25mol)， 缓慢滴加氯 甲酸异丙酯 (0.6mol)， 温度不超过 5 °C， 加毕， 室温搅拌 3h， 冷至 5 °C , 加入 500mL冷水， 搅拌 0.5h, 分液， 有机层以饱和食盐水洗涤 (400ml l)， 蒸干， N ₂ 保护下， 向残余物中加入 1L 无水 THF， 温度降至 0°C， 分批缓慢加入 KBH ₄ (0.5mol), 温度不超过 5°C， 加毕， 室温搅拌 3h， 冷却至 5 °C以下， 缓 慢滴加饱和氯化铵溶液至无气泡产生， 体系减压浓缩近干， 加入水 (400mL)、 二氯甲烷 (500mL)分配， 有机层依次以饱和 Na ₂ C0 ₃ 水溶液、 水、 饱和食盐水 洗涤， 蒸干， 得中间体反式 -N-叔丁氧羰基 -4-氨基环己基乙醇 (2)， 直接用于 下一步反应。

(2) 甲磺酸 （反式 -N-叔丁氧羰基 -4-氨基环己基乙醇） 酯 (3)的制备

将反式 -N-叔丁氧羰基 -4-氨基环己基乙醇 (2)(48.6g, 0.2mol)、 三乙胺

(0.6mol)和二氯甲垸 (500mL)加入到 2L 四口瓶中， 冰浴条件下冷却至 0°C， 缓慢滴加甲烷磺酰氯 (0.24mol)的二氯甲垸溶液 (200mL)， 加毕， 室温搅拌 4h， 反应液依次以水 (300mLx2)、 1%的氢氧化钠水溶液 (300ml 2)、水 (300mLx l)、 饱和食盐水 (300mLx l)洗涤， 蒸干， 以 95%的乙醇重结晶， 得 52.1g类白色 固体， 收率 81%。

(3) 中间体反式 -N-4-(2-(4- (苯并 [d]异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基 氨基甲酸叔丁酯 (4)的制备

将中间体 (3)(32.1g, O.lmol) . 3- (哌嗪 -1-基）苯并 [d]异噻唑（19.9g, 0.09mol)、 无水碳酸钾 (37.3g, 0.27mol)禾卩 DMF(500mL)加入到 1L单口瓶中， 60'C条件下反应过夜， 过滤， 滤饼以 DMF洗涤 (60mLx2)， 合并滤液， 蒸干， 残余物以无水乙醇重结晶， 得 24.8g中间体 4, 收率 62%。

(4) 中间体反 -4-(2-(4- (苯并 [d]异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基)乙基)环己胺 (5)的 制备

将 4(50mmol)、 二氯甲烷 (200mL)加入到 500mL三口瓶中， 缓慢滴 加三氟乙酸 (35mL)， 室温搅拌过夜， 体系依次以水 (200mLx2)、 5%碳酸钠溶 液 (150mLx2)、 饱和食盐水（200mLx l )洗涤， 有机层蒸干， 得 15.8g白色固 体， 收率 91.7%。

(5) 目标化合物 1-1的制备

将化合物 5(0.23mmol)、 三乙胺 (0.75mL)和二氯甲垸 (20mL)加入到 50mL三口瓶中，冰浴冷却至 0Ό ,缓慢滴加呋喃 -2-甲酰氯 (0.28mmol)的二氯 甲垸溶液， 加毕室温搅拌 4h， 体系依次以饱和 Na ₂ C0 ₃ 水溶液 (5mLx l)、 水 (5mLx l)、 饱和食盐水 (5mLx l)洗涤， 蒸干， 残余物以 95%乙醇重结晶， 得 0.08g白色固体 1-1， 收率 79.4% NMR(DMSO-^,5:ppm):0.98-l .07(m,2H,A-H), 1.16- 1.38(m,3H,A-H), 1.49-1.50( m,2H,A-H),1.75-1.78(m,4H,A-H),2.75(t,2H,J=7.6Hz,N-CH ₂ ),3.03-3.13(m,4H,pi perazine-CH ₂ ),3.63-3.68(m,4H,piperazine-CH ₂ ),3.76-3.77(m,lH,A-H),6.59(dxd, lH,J=8.0Hz,4.0Hz,Ar-H),7.06(d,lH,J=4.0Hz,Ar-H),7.46(t,lH,J=8 .0Hz,Ar-H),7. 58(t,lH,J=8.0Hz,Ar-H),8.03-8.08(m,2H,Ar-H),8.23(d,lH,J=8.0Hz ,Ar-H).

ESI-MS:439[M+H ⁺ ]

(6) 目标化合物 1-1盐酸盐的制备

将化合物 I-l(1.0mmol)、 5%盐酸（l .Ommol)和甲醇（10mL)加入到 50mL 单口瓶中， 室温下搅拌 lh， 反应液澄清。 体系蒸千， 加入 5mL异丙醇搅拌 3h， 析出白色固体， 过滤， 滤饼烘干， 95%乙醇重结晶， 得 0.42g白色固体， 收率 88.1%。

元素分析： C ₂₄ H ₃ QN ₄ 0 ₂ S'HC1 (理论值％： C 60.68， H 6.58 , N 1 1.79； 实验值％: C 60.46, H 6.79, N 11.54 ) 。

(7) 目标化合物 1-1氢溴酸盐的制备

以化合物 I-l(1.0mmol)、 5%氢溴酸 (l.Ommol)为原料，按照 1-1盐酸盐的 制备方法， 得 0.45g白色固体， 收率 86.9%。

元素分析: C ₂₄ H ₃₀ N ₄ O ₂ S-HBr (理论值％: C 55.49， H 6.01， N 10.78； 实验值％： C 55.62, H 5.91 , N 10.89) 。

(8) 目标化合物 1-1硫酸盐的制备

以化合物 I-l(0.5mmol)、 5%硫酸 (0.25mmol)为原料， 按照 1-1盐酸盐的 制备方法， 得 0.14g白色固体， 收率 57.5%。

元素分析：。 ₂ 4¾ ₀ !^ ₄ 0 ₂ 8'1/2112804 (理论值％ _: C 59.11， H 6.41 , N 11.49； 实验值％： C 59.30, H 6.25 , N 1 1.28 ) 。

(9) 目标化合物 1-1甲磺酸盐的制备

以化合物 I-l(lmmol)、 甲磺酸 (lmmol)为原料， 按照 1-1盐酸盐的制备 方法， 得 0.41g白色固体， 收率 76.7%。

元素分析： C ₂₄ H ₃₀ N ₄ O ₂ S CH ₄ O ₃ S (理论值％: C 56.16， H 6.41 , N 10.48； 实验值％: C 56.01 , H 6.29, N 10.62 ) 。

实施例 2

反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基)乙基)环己基)噻吩 -2-碳 酰胺 (1-2)及其盐的制备

以中间体 5(0.29mmol)、 噻吩 -2-甲酰氯 (0.35mmol)为原料， 按照化合物 1-1的制备方法， 得目标化合物 I-2 0.09g， 收率 66.7%。

1H NMR(DMSO-^,S:ppm): 0.99-1.07(m,2H,A-H),l .l 1-1.18(m,5H,A-H),l.78-1.86(m,4H,A-H),2.39(t,2H,J=7 .8Hz,N-CH ₂ ),2.59-2.64(m ₅ 4H,piperazine-CH ₂ ),3.44-3.49(m,4H,piperazine-CH ₂ ), 3.62-4.70(m,lH,A-H),7.38(dxd,lH,J=8.0Hz,4.0Hz,Ar-H),7.44(t,l H,J=7.6Hz,Ar- H),7.56(t,lH,J=7.6Hz,Ar-H),7.71(d,lH,J=4.0Hz,Ar-H),8.04-8.07 (m,2H,Ar-H),8. 21(d,lH,J=8.0Hz,Ar-H).

ESI-MS:455[M+H ⁺ ]

化合物 1-2甲磺酸盐的制备

以化合物 I-2(0.1mmol)和甲磺酸 (O. lmmol)为起始原料， 采用化合物 1-1 盐酸盐的合成方法， 得 0.05g白色固体， 收率 90.2%。

元素分析： C ₂ 4H ₃ QN ₄ OS2'CH ₄ 0 ₃ S (理论值％： C 54.52 , H 6.22 , N 10.17; 实验值％： C 54.39, H 6.41 , N 10.02 ) 。

化合物 1-2甲磺酸盐半水合物的制备

将化合物 I-2(0.1mmol)、 甲磺酸 (0.1mmol)、 水（lmL)和甲醇 (20mL)加入 到 50mL单口瓶中， 室温下搅拌 lh， 反应液澄清。将反应液蒸干， 得油状物， 加入 5mL异丙醇搅拌 2h， 析出白色固体， 过滤， 滤饼烘干， 95%乙醇重结 晶， 得 0.046g白色固体， 收率 82.3%。

元素分析: C ₂₄ H ₃₀ N ₄ OS ₂ CH ₄ O ₃ S- 1 /2H ₂ 0 (理论值％： C 53.64, H 6.30, N 10.01 ; 实验值％： C 53.82 , H 6.19, N 10.30 ) 。

实施例 3

反式 _ _N _(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基) -1H-吡咯

-2-碳酰胺 (1-3)及其盐的制备

将化合物 5(0.52mmol)、 P比咯 -2-甲酸 (0.44mmol)禾卩 CH ₂ Cl ₂ (20mL) 加入 到 50mL三口瓶中， 冰浴冷却至 0°C， 缓慢滴加 4-二甲氨基吡啶 (0.35mmol) 和 1-乙基- ( 3-二甲基氨基丙基）碳酰二亚胺盐酸盐 (0.52mmol)的二氯甲烷溶 液，加毕室温搅拌 19h,体系依次以饱和 Na ₂ CO _K溶液 (5mLx2)、水 (5mLxl)、 饱和食盐水 (5mLx l)洗涤， 蒸干， 残余物以 95%乙醇重结晶， 得 0.12g 白色 固体 1-3， 收率 62.5%。

1H NMR(DMSO-^,5:ppm):

1.00-1.06(m,2H,A-H), 1.19-1.32(m,3H,A-H), 1.43-1.47(m,2H,A-H), 1.48- 1.81(m, 4H,A-H),2.66(t,2H,J=7.4Hz,N-CH ₂ ),2.88-2.91(m,4H,piperazine-CH ₂ ),3.52-3.53( m,4H,piperazine-CH ₂ )3.63-3.66(m,lH,A-H),6.04-6.06(dxd,lH,J=3.2Hz,J=2.4Hz ,Ar-H),6.75-6.77(m,lH,Ar-H),6.81-6.82(m,lH,Ar-H),7.45(t,lH,J =8.0Hz,Ar-H),7 .57(t,lH,J=8.0Hz,Ar-H),8.05-8.08(m,2H,Ar-H).

ESI-MS:438[M+H ⁺ ]

化合物 1-3氢溴酸盐的制备

以化合物 I-3(0.1mmol)和 5%氢溴酸 (O.lmmol)为起始原料， 采用化合物 1-1盐酸盐的合成方法， 得 0.04g白色固体， 收率 91.3%。

元素分析: C ₂₄ H ₃₁ N ₅ OS'HBr (理论值％ _: C 55.59， H 6.22, N 13.51； 实 验值％： C 55.68 , H 6.07, N 13.76) 。

实施例 4

反式 - (4- (苯并 [ ]异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基) -1H-吲哚 -2-碳酰胺 (1-4)的制备

以中间体 5(0.58mmol)、吲哚 -2-甲酸 (0.48mmol)为原料， 按照化合物 1-3 的制备方法， 得目标化合物 I-4 0.09g， 收率 38.5%。

1H NMRCDMSO-c ⁶ ^： pm)：

1.05-1.11 (m,2H,A-H), 1.24-1.45(m,5H,A-H),1.81-1.90(m,4H,A-H),2.41 (t,2H,J=7 .8Hz,N-CH ₂ ),2.60-2.62(m,4H,piperazine-CH ₂ ),3.45-3.47(m,4H,piperazine-CH ₂ ), 3.76-3.78(m,lH,A-H),7.02-7.05(m,lH,Ar-H),7.12(s,lH,Ar-H),7.1 6-7.20(m,lH,A r-H),7.42-7.46(m,2H,Ar-H),7.54-7.60(m,2H,Ar-H),8.00-8.05(m,2 H,Ar-H).

ESI-MS:488[M+H ⁺ ]

实施例 5

反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基)苯并呋喃 -2-碳酰胺 (1-5)及其盐的制备

以中间体 5(1.0mmol)、 苯并呋喃 -2-甲酰氯 (l.lmmol)为原料， 按照化合 物 1-1的制备方法， 得目标化合物 I-5 0.39g， 收率 80.7%。

1H NMR(DMSO-^,6:ppm): 1.07-1.12(m,2H,A-H),1.25-1.46(ra,5H,A-H),1.83-1.91(m,4H,A-H) ,2.44(t,2H,J=7 .8Hz,N-CH ₂ ),2.61-2.62(m,4H,piperazine-CH ₂ ),3.46-3.48(m,4H,piperazine-CH ₂ ), 3.77-3.79(m,lH,A-H),7.11 -7.13(m,3H, Ar-H),7.20(s, lH,Ar-H),7.32-7.34(m,2H,A r-H),7.51-7.53(m,lH,Ar-H),7.78-7.80(m,lH,Ar-H),8.22-8.25(m,l H,Ar-H).

ESI-MS:489[M+H ⁺ ] '«1) '8- Sr8'(H-JV'ZH0'8=f'Hri)8 (H-JV'H^ra)6 8 (H-JV' ^z H0'8=f'

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1.05-1.09(m,2H,A-H),1.22-1.40(m,4H,A-H),1.78-1.85(m,5H,A- H),2.41(t,2H,J-7 .8Hz,N-CH ₂ ),2.55(s,3H,A-H),2.62-2.64(m,4H,piperazine-CH ₂ ),3.46-3.48(m,4H, piperazine-CH ₂ ),3.74-3.77(m,lH,A-H),7.09(d,lH,J=8.0Hz,Ar-H),7.20(m,2 H,Ar- H),7.33-7.34(m,2H,Ar-H),7.52-7.54(m,2H,Ar-H),8.17-8.21(m,lH, Ar-H).

ESI-MS:519[M+H ⁺ ]

实施例 14

反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基 )-3-氯苯并

[b]噻吩 -2-碳酰胺 (1-14)的制备

以中间体 5(1.0mmol)、 3-氯苯并 [b]噻吩 -2-甲酰氯（1.2mmol)为原料， 按 照化合物 1-1的制备方法， 得目标化合物 1-14 0.44g, 收率 81.6%。

1.09-1.14(m,2H,A-H), 1.25-1.44(m,4H,A-H),l .82-1.89(m,5H,A-H),2.45(t,2H,J=7

.6Hz,N-CH ₂ ),2.66-2.68(m,4H,piperazine-CH ₂ ),3.49-3.50(m,4H,piperazine-CH ₂ ), 3.77-3.80(m,lH,A-H),7.21(d,lH,J=8.0Hz,Ar-H),7.34(m,2H,Ar-H), 7.46-7.48(m,2

H, Ar-H),7.67-7.69(m,2H,Ar-H),8.32-8.34(m,lH,Ar-H).

ESI-MS:539[M+H ⁺ ]

实施例 15

反式 _ _N _(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基）哌嗪 -1-基）乙基）环己基 )-5-硝基 -1H-吲哚 -2-碳酰胺 (1-15)的制备

以中间体 5(0.58mmol)、 5-硝基 -1H-吲哚 -2-甲酸 (0.48mmol)为原料， 按 照化合物 1-3的制备方法， 得目标化合物 1-15 0.1 lg, 收率 41.2%。

1H NMR(DMSO-^,6:ppm):

I .1 1-1.17(m,2H,A-H),l .29- 1.50(m,5H， A-H), 1.85-1.94(m,4H,A-H),2.46(t,2H,J=7 .6Hz,N-CH ₂ ),2.65-2.67(m,4H,piperazine-CH ₂ ),3.51-3.53(m,4H,piperazine-CH ₂ ), 3.82-3.84(m,lH,A-H),7.49(d,lH,J=8.0Hz,Ar-H),7.52(s,lH,Ar-H), 7.61-7.63(m,2 H,Ar-H),7.82(d,lH,J=8.4Hz,Ar-H),8.10-8.12(m,2H,Ar-H),8.64(s, lH,Ar-H).

ESI-MS:533[M+H ⁺ ]

实施例 16

反式 _ _N _ ₍₄ _ ₍₂ _ ₍₄ _ (苯并 W异噻唑 _ ₃ _基)哌嗪小基）乙基)环己基 )_ ₅ _甲氧基 'm)9r8-£r8'(H-JV'HI' ^s )I6' (H-JV'HI'iw)乙 8·乙 -W/(H- ^J V'HI'm)z 乙 -Ο Ζ Η- ιν¾ζ'πι) ε·乙 -οε'ζ Η-ιν'Ηε' ¹¹¹ )^·乙 -60' (H-V'H 'S)乙 OV(H-V'HI'IK)乙 ζ/ε-νε

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ESI-MS:503[M+H ⁺ ]

实施例 19

顺式— _N — (4_ ₍₂ _ ₍₄ - (苯并 [ 异噻唑— ₃ -基)哌嗪小基）乙基)环己基)呋喃 _ ₂ -碳 酰胺 (1-19)及其盐的制备

(1) 中间体 7的制备

将顺式 -4-乙酰氨基环己乙酸 (6)(1.0mol)、 95%乙醇（1L)、 浓盐酸 (300mL)加入到 2mL单口瓶中回流过夜， 蒸干，残余物中加入 500mL无水乙 醇， 蒸干， 加入三乙胺 (300mL)中和， 加入丙酮 1.5L, 体系冷却至 0Ό后， 缓慢滴加叔丁氧甲酸酐 (1.2mol)的丙酮溶液， 搅拌 30h， 蒸干， 残余物以 80% 乙醇 (250mL)搅拌过滤， 滤饼以水洗涤， 得中间体 7 203g, 收率 78.7%。

(2) 中间体 11的制备

由中间体 7制备中间体 11， 其方法与通法一中原料 1制备中间体 5 的方法相同。

(3) 1-19的制备

以中间体 ll(0.1mol)、 呋喃 -2甲酰氯 (0.12mol)为原料， 按照化合物 1-1的制备方法， 得目标化合物 1-19 32.06g， 收率 73.1%。

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NMR(DMSO- ,6:ppm): l .03-1.12(m,2H,A-H),l .21-1.53(m,3H,A-H),l .54-1.55( m,2H,A-H),l.80-1.83(m,4H,A-H),2.81(t,2H,J=7.6Hz,N-CH ₂ ),3.08-3.18(m,4H,pi perazine-CH ₂ ),3.68-3.73(m,4H,piperazine-CH ₂ ),3.80-3.81 (m,lH,A-H),6.63(dxd, lH,J-8.0Hz,4.0Hz,Ar-H),7.11(d,lH,J=4.0Hz,Ar-H),7.50(t,lH,J=8 .0Hz,Ar-H),7. 62(t,lH,J-8.0Hz,Ar-H),8.07-8.12(m,2H,Ar-H),8.28(d,lH,J=8.0Hz ,Ar-H).

ESI-MS:439[M+H ⁺ ]

(4) 化合物 1-19盐酸盐的制备

以化合物 I-19(lmmol)、 5%盐酸 (lmmol)为原料，按照化合物 1-1盐酸盐 的制备方法， 得 0.40g白色固体， 收率 83.9%。

元素分析： C ₂₄ H ₃ 。N40 ₂ S'HC1 (理论值％： C 60.68, H 6.58， N 11.79； 实验值％： C 60.77, H 6.36, N 1 1.91 ) 。

实施例 20

顺式 _ _N _ ₍₄ _ ₍₂ _ ₍₄ _ (苯并 [ 异噻唑 _ ₃ _基)哌嗪小基）乙基)环己基)噻吩 _ ₂ -碳 ν'ΗΙ'«ι)Ζ^· εΓΖ (Η-·ΐν'Η 5)8Γ Η-·ΐν'Ηΐ'«ι)Π·乙 -60·Ζ (Η-ν'ΗΓ« 98·ε-ε8·ε

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ESI-MS:491 [M+H ⁺ ]

化合物 Π -16氢溴酸盐的制备

以化合物 Π -16 (0.1mmol)、 5%氢溴酸 (O.lmmol)为原料， 按照 1-1盐酸 盐的制备方法， 得 0.05g白色固体， 收率 90.5%。

元素分析： C ₂₃ H ₃ QN ₄ 0 ₂ S ₃ 'HBr (理论值％： C 48.33 , H 5.47， N 9.80; 实验值％: C 48.17, H 5.65 , N 10.02) 。

实施例 41

顺式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ ]异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基 )-lH-吡咯

-3-磺酰胺（11 -17)的制备

以中间体 ll(1.0mmol)、 吡咯 -3-磺酰氯（1.2mmol)为原料， 按照化合物

1- 1的制备方法， 得目标化合物 11 -17 0.28g, 收率 58.5%。

1H NMR(DMSO- ,6:ppm): 1.04-1.19(m,2H,A-H),l .31-1.38(m,3H,A-H),l .66-1.71(m,2H,A-H),1.78-1.83(m,

4H,A-H),2.78(t,2H',J=7.8Hz,N-CH ₂ ),3.06-3.08(m, 1 H,A-H),3.23 -3.26(m,4H,piper azine-CH ₂ )3.54-3.57(m,4H,piperazine-CH ₂ ),6.20-6.22(d,lH,J=.4.0Hz,Ar-H),6.9

2- 6.94(m,2H,Ar-H),7.57(t,lH,J=8.0Hz,Ar-H),7.66(t,lH,J=8.0Hz,Ar -H),8.13-8.1 6(m,2H,Ar-H).

ESI-MS:474[M+H ⁺ ]

实施例 42

顺式 _ _N _ ₍₄ _(2-(4- (苯并 [t/]异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基)呋喃 -2-磺 酰胺（II -18)的制备

以中间体 ll(1.0mmol)、 呋喃 -2-磺酰氯（1.2mmol)为原料， 按照化合物 1-1的制备方法， 得目标化合物 11 -18 0.31g， 收率 66.1%。

0.96-1.01(m,2H,A-H),l .20-1.28(m,3H,A-H),l .58-1.63(m,2H,A-H),l .68-1.73(m, 4Η,Α-Η),2·71 (t,2H, J=7.8Hz,N-CH ₂ )，2.97-3.01 (m, 1 H,A-H),3.13-3.17(m,4H,piper azine-CH ₂ ),3.44-3.47(m,4H,piperazine-CH ₂ ),7.23(t,lH,J=4.0Hz,Ar-H),7.55(t,lH ,J=8.0Hz,Ar-H),7.68-7.71(m,2H,Ar-H),7.93(d,lH,J-4.0Hz,Ar-H), 8.12-8.18(m,2 H,Ar-H).

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将化合物 IV-1 (1.0mmol)、对甲苯磺酸 (1.0mmol)、水 (2mL)和甲醇 (20mL) 加入到 50mL单口瓶中， 室温下搅拌 1.5h， 反应液澄清。 将反应液蒸干， 得 油状物， 加入 lOmL异丙醇搅拌 5h， 析出白色固体， 过滤， 滤饼烘干， 95% 乙醇重结晶， 得 0.47g白色固体， 收率 68.1%。

元素分析: C ₂ 6H ₃₃ N ₅ OS-C ₇ H80 ₃ S ·3Η ₂ 0 (理论值％: C 57.45， Η 6.87， Ν 10.15； 实验值％： C 57.68 , Η 6.61 , Ν 10.34 ) 。

实施例 64

反式 -1-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基 )-3-苯乙基 脲 (IV-2)的制备

以中间体 5(1.0mmol)、 苯乙胺 (2.0mmol)为原料， 按照化合物 IV-1 的制 备方法， 得目标化合物 IV-2 0.41g， 收率 83.8%。

1H NMR(DMSO-c^,6:ppm): 0.92-1.09(m,3H,A-H),1.22-1.24(m,2H,A-H),1.36-1.37(m,2H,A-H), 1.71-1.84(m, 4H,A-H),2.37(t,2H,J=7.8Hz,N-CH ₂ ),2.44(t,2H,J=8.0Hz,A-H),2.57-2.60(m,4H,pi perazine-CH ₂ ),3.30-3.32(m,lH,A-H),3.42-3.45(m,4H,piperazine-CH ₂ ),3.86(t,2H, J=8.0Hz,A-H),7.19-7.25(m,3H,Ar-H),7.27-7.31(m,2H,Ar-H)7.40(t ,lH,J=8.0Hz, Ar-H),7.53(t,l H,J=8.0Hz,Ar-H),8.01-8.04(m,2H, Ar-H) .

ESI-MS:492[M+H ⁺ ]

实施例 65

反式 -l-(4-(2-(4- (苯并 [ ]异噻唑 -3-基）哌嗪- 1-基）乙基）环己基 )-3- (吡啶 -3-基)脲 (IV-3)的制备

以中间体 5(1.0mmol)、 3-氨基吡啶 (2.0mmol)为原料， 按照化合物 IV-1 的制备方法， 得目标化合物 IV-3 0.27g， 收率 58.1%。

1H NMR(DMSO-^,5:ppm):

0.98-1.15(m,3H, A-H), 1.29- 1.31 (m,2H,A-H),l .42- 1.43 (m,2H, A-H), 1.78-1.90(m, 4H,A-H),2.42(t,2H,J=7.8Hz,N-CH ₂ ),2.63-2.66(m,4H,piperazine-CH ₂ ),3.36-3.38( m,lH,A-H),3.49-3.52(m,4H,piperazine-CH ₂ ),7.32(dxd,lH,J=8.4Hz,J=8.0Hz,Ar- H),7.53(t,lH,J=8.0Hz,Ar-H),7.67(t,lH,J-8.0Hz,Ar-H),7.92-7.94 (m,2H,Ar-H),8. 16-8.20(m,2H,Ar-H),8.82(s, lH,Ar-H).

ESI-MS:465[M+H ⁺ ]

实施例 66

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注射用水 95mg

制备方法： 将活性成分溶解于注射用水， 混合均匀， 过滤， 将所获得的 溶液在无菌条件下分装于安瓿瓶中， 每瓶 10mg， 活性成分含量为 0.5mg/瓶。

实施例 79

多巴胺 D ₂ 受体结合试验

1、 实验材料：

( 1 ) D ₂ 受体细胞转染：

本实验用含有 D ₂ 受体蛋白基因的质粒载体转染 HEK293细胞，使用磷 酸钙转染法， 并从转染后的细胞中， 通过含 G418的培养液培养， 以及挑选 细胞单克隆和放射性配基结合实验， 最终获得能稳定表达 D ₂ 受体蛋白的稳 定细胞株。

( 2 ) 受体结合实验材料：

同位素配基 [ ³ H]Spiperone(113.0Ci/mmol)； 购 自 Sigma 公司 ； (+) spiperone,购自 RBI公司； GF/B玻璃纤维滤纸，购自 Whatman公司； Tris 进口分装； PPO、 POPOP购自上海试剂一厂；脂溶性闪烁液。 Beckman LS-6500 型多功能液体闪烁计数仪。

2、 实验方法：

( 1 ) 细胞：

用含以上各种基因的重组病毒分别感染 HEK-293细胞， 48-72小时后受 体蛋白在膜上大量表达， 将细胞 lOOOrpm离心 5min后弃培液， 收胞体， 保 存于 -20Ό冰箱内备用。 实验时用 Tris-HCl反应缓冲液 (pH=7.5)重悬。

(2)受体竞争结合实验：

将待测化合物与放射性配基各 2(^L及 16(^L受体蛋白加入反应试管 中， 使受试化合物及阳性药物终浓度均为 l(^mol/L， 30°C水浴孵育 50min 后， 即刻移至冰浴终止其反应； 在 Millipore细胞样品收集器上， 经过 GF/C 玻璃纤维滤纸快速抽滤， 并用洗脱液 (50mMTris-HCl, pH7.5) 3mL> 3次， 用 微波 5~6min烘干，将滤纸移入 0.5mL离心管中，加入 500μΙ脂溶性闪烁液。 避光静置 30min以上， 计数测定放射性强度。 按以下公式计算各化合物对同 位素配基结合的抑制率百分率： 抑制率 (I%)= (总结合管 CPM-化合物 CPM) I (总结合管 CPM-非特异 结合管 CPM) χ 100。/ _ο 。

化合物每次实验做双复管， 进行两次单独实验。

抑制率高于 95%的化合物进行一系列浓度的受体结合试验， 确定半数抑 制量 （IC ₅ 。， 抑制 50% [1H]-Spiper _One 与 D ₂ 受体结合所需化合物浓度） 。 每 浓度测定两副管， 每个化合物进行两次独立试验。

Ki= IC ₅₀ /(1+[L]/K _D ) ( Ki: 药物与受体的亲和力， L: 放射性配体浓度， K _D : 放射性配体与受体的亲和力值）

D ₂ 受体结合试验结果如下表 1所示。 表 1化合物对 D ₂ 受体亲和力 (Ki: nmol)

II - 1 0.43 ΙΠ-5 I I .84

II -2 3.07 ΙΠ-6 3.19 试验结果表明： 1-1等化合物对多巴胺 D ₂ 受体具强或中等强度亲和力。 实施例 80

多巴胺 D ₃ 受体结合试验

实 验 方 法 参 照 Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics2010,333(1): 328进行。 以 [ ³ H]methyl-spiperone (0·3ηΜ)作为配体， 用 (+)-布他拉莫 (ΙΟμΜ)测定非特异性结合， 在人重组13 ₃ 受体 （在 CHO细胞中 表达） 上进行结合测定。

D ₃ 受体亲和力实验结果见表 2。 表 2化合物对 D ₃ 受体亲和力 (Ki: nmol)

编号 Ki值 Ki ft Ki值

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0.043 4.30

0.57 0.74 结果表明： 1-1 等化合物对 D ₃ 受体均具强亲和力， 与阳性药 RGH-188 相当，结合实施例 79的结果，本系列化合物对 D ₃ /D ₂ 受体亦具良好的选择性。

实施例 81

5-HT _1A 受体结合试验

1、 实验材料：

5-HT _1A 受体同位素配基 [1H].8-OH-DPAT(购 自 PE 公司）， (+)5-hydroxytrptamine (购自 Sigma公司）， GF/B玻璃纤维滤纸（购自 Whatman 公司） ， 脂溶性闪烁液： PPO， POPOP (购自上海试剂一厂） ， 甲苯 （购自 国药集团化学试剂有限公司）. ， Tris进口分装。 细胞： 用基因重组稳定表达 5-HT _1A 受体的 HEK-293 细胞， 用 DMEM+10%血清的细胞培养液培养 3-5后， 用 PBS收细胞， 将细胞用 -4度 3000转离心 10分钟后弃上清液， 收胞体， 存于 -80度冰箱保存。 实验时用 Ό ₁ Binding Buffer(pH7.4)重悬。

2、 实验方法：

粗筛测定每个化合物 10umol/L浓度对 [ ³ H] 8-OH-DPAT与 5-HT _1A 受体 结合的竞争抑制率；

抑制率高于 95%的化合物进行一系列浓度的受体结合试验， 确定半数抑 制量（IC50,抑制 50%[1H] 8-OH-DPAT与 5-HT _1A 受体结合所需化合物浓度）。 每浓度测定两副管， 每个化合物进行两次独立试验。

总结合管 [ ³ H].8-OH-DPAT 20μΙ

Όι Binding Buffer 20μL·

细胞 160μ

非特异管 [ ³ H].8-OH-DPAT 20μΙ

5-HT(10" ⁴⁾ ) 20μL

细胞 \ 60μ

待测物管 [ ³ H].8-OH-DPAT 20μL

待测物 20μL

细胞 160μί 以上反应管混匀后， 转移至 30度水浴 （1 小时） ， 取出立即置于冰浴 中， 用 Harvest抽滤（冰冷的 Tris淋洗液抽 5次） ， 滤膜用中火 8分钟烘干， 移入 0.5mL离心管中， 加闪烁液， 静置 30分钟后测数据。

1%= (总结合 CPM-待测物 CPM ) I (总结合 CPM-非特异 CPM) 100% Ki= IC ₅₀ /(1+[ ]/^) ( Ki: 药物与受体的亲和力， L: 放射性配体浓度， K _D : 放射性配体与受体的亲和力值）

5-HT _1A 受体结合试验结果如下表 3所示。 表 3 化合物对 5-HT _IA 受体亲和力 (Ki:nmol) 4 7.60 -6 17.15 9.30 8.96 -7 6.08 0.79

6 3.54 -8 3.96 2.63 7 4.01 -9 2.10 1.76 8 10.23 10 7.09 2.55 9 1.78 11 18.37 0.97

0 5.19 12 1.99 2.14 1 2.84 13 8.66 3.65

2 3.62 14 12.75 8.03 3 4.07 15 7.19 1.79 4 9.02 16 4.48 2.64

8.45 17 6.71 14.81

6 6.20 18 2.54 4.60 7 0.98 19 7.03 10.79 8 7.55 nnnnnnnnnnnnnfflfflmmmffln nnn 20 5.19 3.92 9 1.37 21 8.50 2.88

20 3.06 22 2.02 9.07 21 3.78 -1 1.14 5.30 22 6.95 -2 0.20 5.14 23 5.48 -3 4.72 4.83 24 10.1 1 -4 3.95 6.09 -1 3.30 -5 1.69

' -2 7.58 -6 0.58 实验结果表明， 1-1等化合物对 5-HT _1A 受体均具强亲和力， 与 RGH-188 相当。

实施例 82

5-HT _2A 受体结合试验

1、 实验材料

( 1 ) 5-HT _2A 细胞转染：

本实验用含有 5-111^^受体蛋白基因的质粒载体转染 HEK293细胞， 使 用磷酸钙转染法， 并从转染后的细胞中， 通过含 G418的培养液培养， 以及 挑选细胞单克隆和放射性培基结合实验， 最终获得能稳定表达 5-HT _2A 受体 蛋白的稳定细胞株。

( 2) 受体结合实验材料：

同位素配基 [ ³ H]-Ketanserin(67.0Ci/mmol)， 购自 PerkinElmer 公司； (+) spiperone,购自 RBI公司； GF/B玻璃纤维滤纸，购自 Whatman公司； Tris 进口分装； PPO、 POPOP购自上海试剂一厂；脂溶性闪烁液。 Beckman LS-6500 型多功能液体闪烁计数仪。

2、 实验方法

用含以上各种基因的重组病毒分别感染 HEK-293细胞， 48-72小时后受 体蛋白在膜上大量表达， 将细胞 lOOO rpm离心 5 min后弃培液， 收胞体， 保 存于 -20°C冰箱内备用。 实验时用 Tris-HCl反应缓冲液 （PH 7.7 ) 重悬。

受体竞争结合实验： 将待测化合物与放射性配基各 lOul及 80ul受体蛋 白加入反应试管中， 使受试化合物及阳性药物终浓度均为 lOumol/L, 37Ό水 浴孵育 15 min后， 即刻移至冰浴终止其反应； 在 Millipore细胞样品收集器 上，经过 GF/B玻璃纤维滤纸快速抽滤，并用洗脱液 (50 mM Tris-HCl, PH 7.7) 3 ml X 3次，用微波炉 8〜9 rnin烘干， 将滤纸移入 0.5 ml离心管中， 加入 500 ul脂溶性闪烁液。避光静置 30ΠΠΠΠΠΠΠΠΠΠΠΠΠ ΠΠΠΠΠΠ rnin以上， 计数测定放射性强度。按以下公式 计算各化合物对同位素配基结合的抑制率百分 率：

抑制率 (1%)= (总结合管 CPM-化合物 CPM) /总结合管 CPM-非特异结 合管 CPM) X 100%

化合物每次实验做两复管， 进行两次单独实验。

抑制率高于 95%的化合物进行一系列浓度的受体结合试验， 确定半数抑 制量（IC ₅ Q，抑制 50% [ ³ H]-Ketanserin与 5-HT _2A 受体结合所需化合物浓度）。 每浓度测定两副管， 每个化合物进行两次独立试验。

Ki= IC ₅₀ /(1+[I]/^) ( Ki: 药物与受体的亲和力， 放射性配体浓度， K _D : 放射性配体与受体的亲和力值）

5-HT _2A 受体结合试验结果如下表 4所示。 表 4 化合物对 5-HT _2A 受体亲和力 (Ki:nmol)

编号 K: 编号 Ki 编号 Ki值 1-1 0.23 -3 0.44 III-7 1.42 1-2 0.15 -4 0.88 III-8 4.96 1-3 0.29 0.69 III-9 8.01 1-4 0.64 -6 1.47 III- 10 12.50 1-5 0.86 -7 2.10 III- 11 0.37 1-6 0.72 -8 1.96 III- 12 2.58 1-7 1.03 -9 2.01 III- 13 0.60 1-8 2.55 -10 5.58 III- 14 1.23 1-9 1.28 -11 3.39 III- 15 0.89 1-10 3.79 -12 5.20 III- 16 0.76 1-11 2.01 -13 0.93 IV- 1 0.83 1-12 2.89 -14 4.62 IV -2 4.21 1-13 4.90 -15 1.29 IV-3 0.49 1-14 3.52 -16 0.50 IV-4 1.04 1-15 2.65 -17 1.01 IV-5 8.93 1-16 1.12 -18 0.74 IV-6 2.36 1-17 1.02 -19 2.05 IV-7 10.69 1-18 1.87 -20 1.83 IV-8 1.07 1-19 0.98 -21 3.97 IV-9 2.84

24 2.00 -4 2.28 1.82

0.30 1.63

2 1.06 -6 0.66 实验结果表明， 1-1等化合物对 5-HT _2A 受体具强亲和力。

综合上述体外受体结合实验结果： 1-1等化合物对 5-HT _1A 、 D ₃ 受体具强 亲和力 (Ki<10nmol)， 亲和力特性与 RGH-188相似， 且对 5-HT _2A 受体亦表现 出强的亲和力， 明显优于 RGH-188 ; 该类化合物对 D ₂ 受体具强或中等强度 亲和力， 多数化合物对 D ₃ /D ₂ 的选择性大于 10倍， 较 RGH- 188 (选择性低 于 10倍） 为优， 提示该类化合物具潜在同时改善认知障碍的作 用， 且毒副 作用亦可能低于 RGH-188。

优选化合物对四个受体亲和力结果总结于下表 5中。 表 5 1-1等化合物和 RGH-188对 D ₂ 、 D ₃ 、 5-HT _1A 、 5-111^受体亲和 力 (Ki: nmol

-1 2.90 0.13 1.30 0. ,23 II -16 1.75 0.23 4.48 0.50-2 0.19 0.056 1.10 0. ,15 II -17 2.94 0.093 6.71 1.01-3 0.21 0.31 0.52 0. 29 Π -18 1.22 5.37 2.54 0.74-4 0.43 0.029 7.60 0. .64 11 -19 1.78 1.70 7.03 2.05-5 0.32 0.078 8.96 0. .86 II -20 6.40 2.01 5.19 1.83-6 1.81 0.035 3.54 0. .72 II -21 1.01 0.92 8.50 3.97-7 4.65 3.21 4.01 1. .03 11 -22 2.09 1.44 2.02 1.65-8 18.71 2.78 10.23 2. .55 III-l 1.18 0.10 1.14 1.16-9 2.57 1.43 1.78 1 .28 ΙΙΙ-2 0.71 0.058 0.20 0.53-10 5.04 6.98 5.19 3, .79 ΙΠ-3 8.67 0.093 4.72 3.09-1 1 4.81 0.37 2.84 2. .01 ΙΠ-4 3.26 1.81 3.95 2.28-12 3.15 1.02 3.62 2. ,89 ΙΙΙ-5 1 1.84 4.30 1.69 1.63-13 1.78 1.42 4.07 4 .90 ΠΙ-6 3.19 0.74 0.58 0.66-14 9.43 2.86 9.02 3 .52 ΙΠ-7 1.93 1.05 2.10 1.42-15 21.34 4.03 8.45 2 .65 ΙΠ-8 2.07 8.49 3.93 4.96-16 1.05 1.87 6.20 1 .12 ΙΠ-9 4.33 11.58 5.12 8.01-17 0.27 0.10 0.98 1 .02 III- 10 12.41 7.12 9.30 12.50-18 0.23 0.18 7.55 1 .87 III- 11 1.60 0.061 0.79 0.37-19 0.82 0.25 1.37 0 .98 III- 12 5.73 6.53 2.63 2.58-20 1.20 0.19 3.06 0 .57 III- 13 2.54 0.95 1.76 0.60-21 2.96 0.84 3.78 0 .81 III- 14 2.26 0.087 2.55 1.23-22 1.90 0.071 6.95 1 .33 III- 15 1.97 0.46 0.97 0.89-23 1.73 1.04 5.48 1 .78 III- 16 0.98 1.03 2.14 0.76-24 10.75 3.80 10.1 1 2. .00 IV-1 1.06 1.42 3.65 0.83 I I ϊ TA Ti I I I Tl Tl Ti Tl I T I I -1 I I 111

-1 0.43 0.043 3.30 0 30 IV -2 9.15 3.81 8.03 4.21

-2 3.07 0.57 7.58 1 06 IV-3 0.88 0.068 1.79 0.49

-3 1.98 0.062 2.87 0 44 W-4 0.80 1.04 2.64 1.04

-4 1.69 1.03 5.79 0 88 IV-5 6.77 10.02 14.81 8.93

-5 0.58 0.085 10.64 0 69 IV-6 1.45 0.13 4.60 2.36

-6 3.62 2.76 17.15 1 47 IV-7 14.82 8.22 10.79 10.69

-7 8.54 8.19 6.08 2 10 IV-8 0.92 5.80 3.92 1.07

-8 10.75 4.51 3.96 1 96 IV-9 3.01 2.71 2.88 2.84

-9 7.38 1.73 2.10 2 01 IV-10 3.64 4.15 9.07 5.01

10 17.12 7.09 7.09 5 58 IV-1 1 1.40 0.18 5.30 0.91

11 9.76 3.60 18.37 3 39 IV-12 1.86 2.05 5.14 2.40

12 8.82 1.99 1.99 5 20 IV- 13 1.02 0.67 4.83 1.27

13 4.50 0.85 8.66 0 93 IV-14 2.07 2.30 6.09 1.82

RGH-1

14 0.78

6.49 9.37 0.09 2.16

12.75 4 62 20.50

88

1 -15 3.03 2.18 7.19 1.29 实施例 83

化合物体内抗精神分裂活性试验

1、 阿扑吗啡模型：

( 1 ) 阿扑吗啡诱导小鼠精神分裂症实验模型建立

近交系 C57BL/6小鼠 96只， 雌雄各半， 按体重均衡随机分为 8组： 空白 对照组， 模型对照组， 权利要求所述化合物梯度剂量组 (0.12、 0.22、 0.35、 0.40、 0.90mg'kg— ^和 RGH-188(0.40 mg-kg ¹ ), 灌胃给药。 模型对照组灌胃给 予相同体积的溶剂。 给予受试药后 30分钟， 用浓度为 10.0mg_kg— ¹ 的阿扑吗啡 溶液（溶于 0.1%的抗坏血酸中） ， 按 10.0 mL'kg— ¹ 小鼠体重进行腹腔注射诱导 建立小鼠精神分裂症实验模型。

( 2) 刻板行为学观察

小鼠给予阿扑吗啡后， 分别观察记录第 6-10、 11-15、 16-20、 21-25、 26-30、 31-35、 36-40、 41-45、 46-50、 51-55、 56-60分钟时的前 30秒内小鼠 是否出现竖尾和爬壁等刻板行为， 并按以下标准进行评分： 0分， 在 30秒内 无上述行为出现 （t<l秒） ； 1分， 在 30秒内出现不连续的中度的上述行为 ( 1秒 <t<3秒） ； 2分， 在 30秒内出现连续的强的上述行为 （t > 3秒） 。 计 算 60分钟内小鼠出现竖尾和爬壁等刻板行为的总� ��。 ED ₅ 。计算按照公式：

模型对照组刻板运动计分 -给药组刻板运动计分

改善率: : 100ο/ο , 作回归方程， 计算得

模型对照组刻板运动计分

到。

( 3 ) 给药及给药后观察

给药当天称重， 按照体重确定给药量。 给药和测试过程中， 要记录动物 的临床反应症状。 ( 4 ) 统计方法

全部数据以 f ±SD表示， 用 SPSS 17.0软件统计包处理， 进行两个样本均 数比较的 III

t 666检验及单因素方差分析， 以？<0.05为显著性差异。

( 5 ) 实验结果

具体结果见表 6〜表 8。 表 6 化合物 1-6单次口服给药对 Apo.诱导小鼠精神分裂症模型总刻板 运动的影响 组别 η 刻板运动评分 改善率（％) 空白对照组 12 0.17 士 0.39

26.3

模型对照组 12 士 5.26"

3

RGH-188组 12 0.40 6.41 3.16 75.64

1-6 23.0

组 12 0.12 8.32 12.59

2

1-6组 15.5

12 0.22 士 6.25 41.07

2

12 0.35 5.48 士 4.61 ^# 79.48 12 0.40 4.01 士 3.65 ^# 84.80 12 0.90 0.71 士 0.94 97.29 与空白对照组比较： Ρ<0.05， ** Ρ<0.01 ; 与模型对照组比较： Ρ<0.05 , PO.01

采用相同方法， 经过对给药计量的合理设定，测得化合物 1-1、 1-4、 1-22 在该模型下对小鼠刻板运动的抑制情况， 具体如表 7所示。 表 7 化合物 1-1、 1-4、 1-6、 1-22单次口服给药对 Apo.诱导小鼠精神分 裂症模型总刻板运动的抑制 (ED ₅₀ )

化合物 ED ₅₀ (mg/Kg)

1-1 0.28

1-4 0.37

1-6 0.23

1-22 0.59

采用同样的方法， 经过对给药计量的合理设定， 测得 n、 m、 I 系列化 合物在该模型下对小鼠刻板运动的抑制情况， 具体如表 8所示。 表 8 其它系列代表化合物在该模型下的 ED ₅₀ 值

化合物 ED _5Q (tng/Kg) 化合物 ED ₅ 。(mg/Kg) π-ι 0.20 m-ii o.io 本试验结果表明：

①、 与空白对照组比较， 模型对照组总刻板运动显著增加 (P<0.01)， 说 明阿扑吗啡诱导小鼠产生精神分裂症症状。

②、 与模型对照组比较， 阳性药 RGH-188、 权利要求中所述化合物均 能显著降低小鼠刻板行为， 而阿扑吗啡诱导精神分裂症模型为精神分裂症 阳 性症状的经典模型， 因而本发明系列化合物具良好抗精神分裂症阳 性症状作 用。

③、在相同计量下 (0.40mg/Kg)， 化合物 1-6对小鼠刻板行为的改善率优 于 RGH-188 , 表明 1-6的体内活性优于 RGH-188。

2、 M -801模型：

( 1 ) MK-801诱导小鼠精神分裂症实验模型的建立

近交系 C57BL/6小鼠 80只， 雌雄各半， 按性别和体重均衡随机分为 8组： 空白对照组， 模型对照组， RGH-188(0.05mg/Kg)对照组、 权利要求所述所述 化合物梯度剂量组 (0.02、 0.03、 0.05、 0.09、 0.15mg/kg)。 每只动物于实验前 一天放入隔音箱适应 30min， 第二天给予受试物 30min后， 用浓度为 0.025mg/mL的 MK-801溶液，按 10.0 mL/kg小鼠体重进行腹腔注射诱导建立小 鼠精神分裂症实验模型， 空白对照组腹腔注射同体积的生理盐水。

( 2 ) 旷场跑动行为学观察

小鼠给予 MK-801后， 立即放入隔音箱， 观察记录 60min内小鼠自主活动 的总路程。

改善率 = (模型对照组活动总路程-给药组活动总路程） I (模型对照组 活动总路程） * 100%

ED _5C 根据上述公式， 作回归方程， 计算得到。

( 3 ) 实验观察

给予受试物当天称重， 按照体重确定剂量。 实验过程中， 记录动物的临 床反应症状。

( 4 ) 统计方法 全部数据以 3f ±SD表示， 用 SPSS 17.0软件统计包处理， 进行两个样本均 数比较的 t检验及单因素方差分析， 以 PO.05为显著性差异。

( 5 ) 实验结果

具体结果见表 9〜表 11。 表 9 单次口服给予 1-6对 MK-801诱导小鼠精神分裂症模型旷场运动总 路程的影响（3F±SD) 组别 动物数 自主活动总路程 改善率 （％)

(只） J *■■■■ (cm)

正常对照组 10 - 101 12.28士 3186.36

模型对照组 10 - 28896.87±6547.22**

RGH-188组 10 0.05 15847.04±7432.19 45.16

1-6组 10 0.02 19482.27±11047.75 32.58

1-6组 10 0.03 17280.33±9364.31 40.20

1-6组 10 0.05 1 1145.52±6988.56 ^# 61.43

1-6组 10 0.09 7796.38±4382.94 ^M 73.02

1-6组 10 0.15 3360.71±734.45 ^## 88.37 与正常对照组比较：* ?<0.05，*^<0.01 _; 与模型对照组比较： ^# P<0.

P<0.01 表 10化合物 1-1、 1-4、 1-6、 1-22单次口服给药对 MK-801诱导小鼠精 神分裂症模型旷场运动总路程的影响 (ED ₅₀ )

化合物 ED ₅₀ (mg/Kg)

1-1 0.052

1-4 0.073

1-6 0.038

1-22 0.062

采用相同的方法， 经过对给药计量的合理设定， 测得测得 n、 m、 I 系 列代表化合物在该模型下对小鼠旷场运动的影 响。 表 11 其它系列代表化合物在该模型下的 ED

①、与空白对照组相比， 腹腔注射 MK-801能成功诱导小鼠旷场运动距 离显著增加， 说明 MK-801能造成小鼠精神分裂症症状。 ②、 与模型组相比， RGH-188 组、 权利要求中所述化合物均能明显改 善小鼠的旷场运动总路程， 由于 MK-801诱导的旷场运动模型为精神分裂症 阴性症状的常用模型， 故而本发明系列化合物具良好抗精神分裂症阴 性症状 作用。

③、在相同剂量下 (0.05mg/Kg)， 化合物 1-6对小鼠旷场运动的改善率较

RGH-188为优， 说明该模型下 1-6的活性优于 RGH-188。

实施例 84

化合物 1-1、 1-4、 1-6、 1-22急性毒性实验

( 1 ) 实验方案

①、观察其口服给予 ICR小鼠 RGH-188、 1-1等化合物后动物出现的毒 性征状和死亡情况， 比较其急性毒性。

②、 溶媒配制： 称取适量吐温 -80， 用去离子水稀释至浓度为 5 % (g/v) 吐温 -80。

③、 给药制剂： 分别称取所需的供试品， 用 5 %吐温 80溶液配制成浓 度为 6.25、 12.50、 25.00、 50.00和 100.00mg/mL (分别相当于 125、 250、 500、

1000、 2000 mg/kg) 混悬液。

④、 给药途径： 供试品及溶媒对照组 （0.5 %吐温 -80 ) 的给药途径均为 经口给予。

⑤、 给药频率： 单次给药， 给药前均隔夜禁食。

⑥、 给药容量： 20mL/Kg。

一般征状观察： 给药当天于第一次给药后约 0.5、 1、 2、 4、 6小时分别 观察 1次； 观察期第 2〜6天， 每天观察 2次， 上、 下午各 1次。 观察内容 包括但不限制于： 一般状况、 行为活动、 步态姿势、 眼、 口、 鼻、 胃肠道、 皮肤被毛、 泌尿生殖道。

( 2 ) 统计分析

体重数据以均数士标准差表示， 并采用组间比较采用 Leven^s检验和 单因素方差分析， 如果显示有差异， 再采用 Dunnet t检验。

( 3 ) 实验结果见表 12

表 12 化合物 1-1、 1-4、 1-6、 1-22及 RGH-188单次口服给药急性毒性 实验结果 受试物 LD ₅₀ (mg/Kg)

1-1 1670mg/Kg

1-4 >2000mg/Kg

1-6 >2000mg/Kg

^ Π ffl π π π 1-22 1530mg/ g

u 353 1 RGH-188 760mg/Kg

结果表明： 上述受试物中 1-4、 1-6 LD ₅ o均大于 2000mg/kg， 急性毒性远 远低于 RGH-188(760mg/kg)， 1-1、 1-22 的 LD ₅₀ 值分别为为 1670mg/Kg 和 1530mg/Kg， 安全性较 RGH-188好。

实施例 85

π、 m、 I 代表化合物急性毒性实验

( 1 ) 采用实施例 81的方法研究 n、 m、 IV代表化合物的急性毒性。

( 2 ) 实验结果见表 13

表 13 II、 ΙΠ、 IV代表化合物及 RGH-188单次口服给药急性毒性实验 结果

受试物 LDs ₀ (mg/Kg) 受试物 LD ₅ Q(mg/KgT~

>2000mg/Kg 14 1080mg/Kg >2000mg/ g -3 >2000mg/Kg 1 105mg/Kg -6 1390 mg/Kg 1860mg/Kg 11 >2000mg/Kg >2000mg/Kg RGH-188 760mg/Kg

1240mg/Kg

结果表明： 上述受试物中 11 -1、 11 -3、 m-3、 IV-3、 IV-11 LD ₅ o均大于 2000mg/Kg, 急性毒性远远低于 RGH-188(760mg/Kg)， 11 -5、 11 -17、 ΠΙ-11、 ΠΙ-14、 IV-6 LD ₅ Q值分别为 1 105mg/Kg、 1860mg/Kg、 1240mg/Kg、 1080mg/Kg 和 1390 mg/Kg, 安全性较 RGH-188好。

实施例 86

化合物 1-1、 1-4、 1-6、 1-22细菌回复突变实验

用组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌回复突变 试验研究 1-1、 RGH-188 等化合物是否引起基因突变， 以评价其潜在的致突变性。

( 1 ) 配制方法

临用前准确称取 0.0303g供试品， 在无菌、 超声的条件下使其完全溶解 在一定容量的溶剂 DMSO中， 配制成 100000.0 g/mL的最高浓度的溶液， 再按 l :2(v/v)的比例稀释成 33333.0、 1 1 111.0、 3704.0、 1235.0、 412.0、 137.0、 46.0及 15.0 g/mL共 9个浓度的溶液。

( 2) 阴性对照物 DMSO (3) 阳性对照物

无代谢活化系统 （-S9) 有代谢活化系统 （+S9) 名称 厂家 批号 名称 厂家 批号 终浓度 - Aldric 09213B 4 xgl

2

1 ^Α98 芴 h A 孔 —5基 15216JA 。' ^{6 g/} 蒽 h 孑 L

^ _{Λ 1 Λη &} t^ e- 043K00 0.4 μξ/ 2-氨基 Aldric 0.6

TA100 叠風钢 Sigma 子〔。 _^ 15216JA , ^e h 孑 L

(4) 试验菌株

鼠伤寒沙门氏菌组氨酸营养缺陷型突变株 TA98及 TA100,购自 MolTox 公司， 批号分别为 4367D及 4370D

(5) 代谢活化系统

代谢活化系统 (S9)购自 MolTox公司， 规格为 2 mL/瓶， 批号为 2548 蛋白含量为 38.5 mg/mL,是经多氯联苯 (Aroclor 1254)以 500mg/kg诱导的 SD 雄性大鼠的肝匀浆。

临用前 S9与辅酶 II、葡萄糖 -6-磷酸等组成肝微粒体酶系（S9混合液）。 (6) 正式试验

正式试验由有或无代谢活化系统两组平行实验 组成。采用标准平皿掺入 法， 将 500 μL含有 0.6%琼脂、 0.5%NaCl 0.5 mM生物素和 0.5 mM组氨酸 的融溶的顶层培养基与下列物质混合：

20 供试品溶液 （或阴 /阳性对照物）

25 过夜培养菌液

100 yL S9混合液或 0.2M磷酸钠缓冲液 (ρΗ=7·4)

将混合物摇匀后平铺在预先制备好的 V-B底层培养基上， 室温凝固， 置 37Ό培养箱倒置培养 72小时后观察结果。 正式试验中每个菌株均设阴性 及阳性对照组， 各组均平行培养 2孔 /组。

(7) 实验结果

化合物 1-1 1-4 1-6 1-22及 RGH-188所有测试剂量无论在无 S ₉ 或加 S ₉ 实验系统中， 均未引起任何菌落回变数明显增加， 所有受试化合物 Ames 试验阴性。

实施例 87

n m IV代表化合物细菌回复突变试验 (1) 采用实施例 87的方法进行化合物 11-1、 11-3、 11-5、 11-17、 ΠΙ-3、 m-ii、 m-i4、 i -3、 iv-6、 iv-ii细菌回复突变实验

(2) 实验结果

化合物 11-1、 11-3、 11-5、 11-17、 ΙΠ-3、 ΠΙ-11、 ffl-14. IV -3、 IV -6、 IV-11及 RGH-188所有测试剂量无论在无 S ₉ 或加 S ₉ 实验系统中， 均未引起 任何菌落回变数明显增加， 所有受试化合物 Ames试验阴性。