本发明涉及紫杉醇 （Taxol ) 或多西紫杉醇 （Docetaxel ) 与胞壁酰二肽 （MDP ) 衍生物 形成的共缀物及其合成方法和在治疗癌症方面 的应用， 属于医药技术领域。 背景技术

紫杉醇 （Taxol ) 是从红豆杉属 {Tax brevifolia) 植物中分得的紫杉烷类化合物之一 ^[1] ， 经美国国立癌症研究院 （NCI) 筛选， 确定为抗肿瘤活性成分。起初的机理研究表明 ， 紫杉 醇属于有丝分裂抑制剂， 即促进癌细胞微管蛋白聚合同时抑制其解聚， 从而抑制癌细胞纺 锤体的形成， 使其生长过程停止于 G ₂ 期和 M期， 达到抗癌的目的 ^[2] 。 随后的机理研究表明， 紫杉醇也可以作为细菌脂多糖（LPS )的模拟物， 通过影响和改变免疫系统内巨噬细胞的功能 来达到抗肿瘤的功效， 如诱导巨噬细胞中的肿瘤坏死因子 -α ( TNF-α) 和白介素 - 1 ( IL- 1 ) 的表达 ^[3 ' ^4] 。 此外， 其还可以通过激活 MAP-2激酶， 促进酪胺酸磷酸化 ^[5 ' ^6] 等途径实现抗肿 瘤的功效。

胞壁酰二肽 (N-acetylmuramyl-L-alanyl-D-isoglutamine， MDP)是分支杆菌细胞壁肽聚糖中 具有免疫佐剂活性的最小有效结构单位 ^[7 ' ^8] ， 其预先或同时与抗原注入体内， 可增强机体对该 抗原的免疫应答或改变免疫应答类型。 另外， 胞壁酰二肽还具有其它的生物活性， 如非特异 性抗感染 (肺炎杆菌、 大肠杆菌、 绿脓杆菌、 单核细胞增多性李斯特菌、 白色念球菌等)、 非特异性抗肿瘤 (纤维肉瘤、 肝细胞瘤等)和免疫调节 ^[9 — ^13] 等。 研究表明， 非特异性的免疫增 强剂胞壁酰二肽可以协同细菌脂多糖 (LPS )大大提高激活巨噬细胞表达细胞因子的能力 ^[14 _ ^16] 。

因此本课题组推测， 紫杉醇与胞壁酰二肽共同作用也会产生类似的 协同机制， 并首次提 出将化疗药物紫杉醇与免疫增强剂胞壁酰二肽 进行化学连接， 合成一系列共缀物， 并以生物 学实验辅助验证其功效， 实现化学治疗与免疫治疗相结合抗肿瘤并抗肿 瘤转移的新思路 ^[17] 。

本课题组已申请的早期专利 ^[18] 保护了两类共缀物， 它们是通过将胞壁酰二肽分别连于紫 杉醇的 2'-位羟基 （2'-0-MTC， Figure 1 ) 或去 3'-N位苯甲酰基紫杉醇的 3'-位氨基 （3'-N-MTC， Figure 1 )形成的。 研究发现， 其中 2'-0-MTC共缀物在体外既保留了紫杉醇的抗癌活� ��， 又可 以显著协同小鼠巨噬细胞产生 TNF-o和 II- 1， 说明其可以潜在地抑制肿瘤的转移； 而 3'-N-MTC 共缀物的各项活性测试结果则表现不明显。 由此可以确定， 该类共缀物的最佳连接位点是 2'- 位羟基。 遗憾的是， 2'-0-MTC共缀物未能够在实验小鼠体内展示抗肿� ��转移的实验结果， 可 能与分子的理化性质或者药学性质有关。 为延续该新药设计理念， 本课题组对 2'-0-MTC类化 合物进行了系列优化， 简化了胞壁酰二肽类分子， 并使其在实验小鼠体内表现出显著的抗肿 瘤以及抗肿瘤转移的功效， 大大地提高了该类分子成为药物的可能性， 即本专利所需要保护 的全新研究成果。

Figure 1 本课题组已申请专利保护的两类共缀物 组成胞壁酰二肽 -紫杉醇共缀物的化疗药物部分-紫杉醇 （Taxol) 属于紫杉烷类抗肿瘤药 物， 而多西紫杉醇 （Docetaxel, Figure 2) 是该家族中另外一个重要的成员， 是紫杉醇的半合 成衍生物， 其对晚期乳腺癌、 非小细胞肺癌、 卵巢癌、 胰腺癌、 肝癌和头颈部肿瘤等均有效。 目前研究认为， 多西紫杉醇主要通过诱导细胞凋亡导致细胞死 亡， 其机制主要是促进微管聚 合形成稳定的微管聚合物并抑制解聚 ^[19] 以及抑制肿瘤细胞的有丝分裂和增殖 ^[¾)] 。 研究还发现 多西紫杉醇可以上调 Bax和下调 Bcl-2的蛋白表达并使肿瘤细胞停滞于 G2/ « ^21] 。 因此， 本专 利亦涉及将原共缀物中的化疗药物紫杉醇替换 成多西紫杉醇， 合成并研究多西紫杉醇与胞壁 酰二肽简化物形成的共 （MDC) ， 同样具有良好的抗肿瘤活性。

Figure 2 Docetaxel

组成胞壁酰二肽-紫杉醇共缀物的免疫增强剂� �分-胞壁酰二肽具有广泛生物学活性， 一经 被发现， 便引起了人们的极大兴趣。 但是， 胞壁酰二肽的一些副作用， 如免疫原引起的过敏 反应、 致热、 致炎、 促眠等限制了其在临床上的应用。 为了寻找活性较高， 副作用较低的化 合物， 化学家们合成了数百个胞壁酰二肽简化物或类 似物， 并对其进行了生物学活性方面的 研究。 L-苏氨酸-胞壁酰二肽是由 L-苏氨酸置换胞壁酰二肽分子中的 L-丙氨酸所得， 其免疫佐 剂活性强于胞壁酰二肽， 致热源性降低 100多倍， 作为疫苗佐剂使用时只激发和它一起服用的 抗原的免疫反应， 无激活巨噬细胞及非特异性抗感染作用， 能有效地将佐剂活性与其它副作 用分离， 是一个很理想的疫苗佐剂 ^[22] 。

Murabutide是由胞壁酰二肽分子内弓 I入亲脂性长链所得。 Murabutide能提高宿主免疫系统 的非特异性抗细菌、 抗病毒感染的能力， 能诱导集落刺激因子的活性， 而且人对 Murabutide有 很好的耐受性 ^[23 _ ^26] 。 与其它外源性的免疫调节剂相比， Murabutide是非热源性的 ^[23] ， 不会引起 炎性反应，能够协同选择性治疗细胞因子促进 辅助 TM细胞因子的释放 ^[27 ' ^28] 。此外， Murabutide 与 IFN-α或 IL-2联合给药， 能显著提高细胞因子的抗肿瘤活性， 提高 IFN-α的抗病毒和抗炎症的 功效 ^[29 ' 。 _Murabutide 还有调解巨噬细胞的功能 ^[31] 。 由于 Murabutide在体外能够协同 IFN-α发 挥功效， 因此还被应用于治疗慢性丙型肝炎 (HCV)

胞壁酰三肽磷脂酰乙醇胺（MTP-PE)是通过磷酸� �在胞壁酰二肽分子内引入亲脂性长链 所得。 MTP-PE能够活化单核细胞和巨噬细胞， 从而杀死肿瘤细胞。 MTP-PE包裹于脂质体 (L-MTP-PE)进行静脉注射时， 主要定向激活肺、 肝和脾巨噬细胞 ^[33] ， 其活性增强 10倍至数 百倍， 且致热源性大大降低。 经转移性黑素瘤患者静脉注射 2小时后， 血浆中肿瘤坏死因子提 高 16倍， 且能够有效提高血浆中新蝶吟及白介素水平 ^[34] 。

MDP-Lys (L18 ) 是通过赖氨酸在 MDP分子内引入亲脂性长链所得。 MDP-Lys (L18 ) 能 够提高诸如 CSFs、 IL-K IL-6和肿瘤坏死因子 （TNF-α) 等细胞因子的产生， 这些细胞因子在 调节造血系统中起着非常重要的作用 ^{[ 36]} 。 另外， MDP-Lys (L18 )还具有很强的抗感染、 抗 肿瘤作用 ^[37] 。

MDP-C是通过赖氨酸在胞壁酰二肽分子内弓 I入芳香共缀体系所得。 MDP-C可以通过诱导 巨噬细胞对 P388白血病细胞， 以及诱导杀伤性 T淋巴细胞 （CTLs) 对肥大细胞瘤 P815产生强 的细胞毒活性。研究还发现 MDP-C通过刺激小鼠骨髓树突状细胞（BMDCs)产生� ��胞因子 IL-2 和 IL-12 (白介素）， 以及通过激活杀伤性 T淋巴细胞产生 Y干扰素，可以作为强效免疫增强剂。 低剂量 MDP-C对 Concanavalin A(ConA)诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖有显著的协� �促进作用。此 外， MDP-C可以增加一些骨髓树突状细胞表面分子， 如 CDl lc，MHC I和 细胞粘附分子 -1的表 达。 在离体实验中， MDP-C还能通过产生抗体以及特异性的乙型肝炎� ��毒表面抗原 (HBsAg)T 细胞反应， 明显增强免疫系统对乙型肝炎病毒转基因小鼠 的 HBsAg反应 ^[38 ' ^39] 。

金刚烷胺酰胺二肽 （AdDP) 是胞壁酰二肽分子中二肽片段的羧基端与金刚 胺连接所得。 AdDP安全性好， 有抗病毒感染的作用。 与其它的 MDP类似物相比， 其生物利用度较高 ^[4 ° ^] 。 AdDP如果和蛋白免疫原以口服或腹膜的形式联� �给药，还能提高 BALB/c鼠和兔子的体液免疫

[41] _o

化学家们还合成或者从天然产物中分离了胞壁 酰二肽的一些无糖环类似物。 如 FK-156与 FK-565, 都具有相当的抗感染、 抗病毒及抗肿瘤功效 ^[42] 。

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本发明要解决的技术问题是提供一种具有抗肿 瘤和抗肿瘤转移协同作用的化合物。

本发明要解决的另一个技术问题是提供这种化 合物的制备方法。

本发明要解决的又一个技术问题是提供这种化 合物的药物组合物。

本发明要解决的再一个技术问题是提供这种化 合物在制备抗肿瘤和抗肿瘤转移协同作用 的药物中的应用。 为解决本发明的技术问题， 采用如下技术方案:

其中， 当 A为苯基时， B为乙酰氧基； 当 A为叔丁氧基时， B为羟基; n选自 2-12的自然数。 即 n选自 2，3，4，5，6，7，8，9，10，11，12的自然数。 优选的 n选自 2-10的自然数。 即 n选自 2，3，4，5，6，7，8，9，10的自然数。

更优选的 n选自 2-8的自然数。 即 n选自 2，3，4，5，6，7，8的自然数。

最有选的 n选自 2-5的自然数。 即 n选自 2，3，4，5的自然数。

X选自 C1-6烷烃基、 C1-6烯烃基、 含有杂原子的 C1-6烷烃基、 或者 X表示单键， 即 M 和酰基直接相连； 并且所述的杂原子选自氧原子、 硫原子、 氮原子。

优选的 X选自 C1-4烷烃基、 C1-4烯烃基、含有杂原子的 C1-4烷烃基、或者 X表示单键， 即 M和酰基直接相连； 并且所述的杂原子选自氧原子或硫原子。

更优选的 X选自 C1-3烷烃基、 C1-3烯烃基、 含有杂原子的 C1-3烷烃基、 或者 X表示单 键， 即 M和酰基直接相连； 并且所述的杂原子选自氧原子。 最优选的 X选自 -C=C -、 -CH ₂ -CH ₂ -、 -0-CH ₂ -、 单键。

M选自取代或非取代的芳基， 取代或非取代的杂芳基，

M环选自芳基、 杂芳基；

优选的芳基选自五-十四元芳基。

更优选的芳基选自五元芳基、 六元芳基、 九元稠环芳基、 十元稠环芳基、 十三元稠环芳基、 十四元稠环芳基。

所述的五元芳基选自

所述的六元芳基选自

所述的九元稠环芳基

所述的十元稠环芳基

优选的杂芳基选自含有 1-4个选自 N， 0或 S的杂原子的杂芳基。

更优选的杂芳基选自含有 1-4个选自 N， 0或 S的杂原子的五-十四元杂芳基；

进一步优选的杂芳基选自含有 1-4个选自 N， 0或 S的杂原子的五元杂环基、 含有 1-4个选自

N， 0或 S的杂原子的六元杂环基、 含有 1-4个选自 N， 0或 S的杂原子的八元稠杂环基、 含有

1-4个选自 N， 0或 S的杂原子的九元稠杂环基、 含有 1-4个选自 N， 0或 S的杂原子的十元稠 杂环基、 所述的含有 1-4个选自 N，0或 S的杂原子的五元杂环基选自:

有 -4个选自 N， O或 S的杂原子的六元杂环基选自：

-4个选自 Ν，0或 S的杂原子的八元杂环基选自:

所述的含有 1-4个选自 Ν，0或 S的杂原子的十元杂环基选自:

R表示一个或多个取代基， 可以和 M在任意可相连的位置连接，

R选自氢、取代或非取代的 C1-6直链或支链烷基、羟基、取代或非取代的 C1-6直链或支 链烷氧基、 巯基、 取代或非取代的 C1-6直链或支链烷硫基、 C1-6烷氧 C1-6烷基、 氨基、 取 代或非取代的 C1-6直链或支链烷氨基、 其中包括单烷氨基和双烷氨基、 醛基、 取代或非取代 的 C1-6直链或支链烷酰基、 羧基、 取代或非取代的 C1-6直链或支链烷酰氧基、 氨基甲酰基、 取代或非取代的 C1-6直链或支链烷酰胺基、 C2-6的烯烃、 卤素、 硝基、 氰基、

C1-6 直链或支链烷基上的取代基选自： 羟基、 巯基、 氨基、 醛基、 羧基、 氨基甲酰基、 卤素、 硝基、 氰基； 优选的 R选自氢、 取代或非取代的 C1-4直链或支链烷基、 羟基、 取代或非取代的 C1-4 直链或支链烷氧基、 C1-4烷氧 C1-4烷基、 巯基、 取代或非取代的 C1-4直链或支链烷硫基、 氨基、 取代或非取代的 C1-4直链或支链烷氨基、 其中包括单烷氨基和双烷氨基、 醛基、 取代 或非取代的 C1-4直链或支链烷酰基、 羧基、 取代或非取代的 C1-4直链或支链烷酰氧基、 氨 基甲酰基、 取代或非取代的 C1-4直链或支链烷酰胺基、 C2-4的烯烃、 卤素、 硝基、 氰基；

C1-4直链或支链烷基上的取代基选自： 羟基、 巯基、 氨基、 醛基、 羧基、 氨基甲酰基、 氟、 氯、 溴、 硝基、 氰基； 更优选的 R选自氢、 C1-4直链或支链烷基、 羟基、 C1-4直链或支链烷氧基、 巯基、 C1-4 直链或支链烷硫基、 氨基、 C1-4直链或支链烷氨基、 卤素、 硝基、 氰基； 最优选的 R选自氢、 羟基、 巯基、 氨基、 氟、 氯、 溴、 硝基、 氰基、 甲基、 乙基、 丙基、 异丙基、 甲氧基、 乙氧基、 丙氧基、 异丙氧基、； 优选的式 I所示的化合物包括但不限定于式 IA所示的化合物

IA

Ru表示一个或多个取代基， 可以和苯基在任意可相连的位置连接， 选自 H、 羟基、 巯基、 氨 基、 醛基、 羧基、 氨基甲酰基、 卤素、 硝基、 氰基、 C1-4烷基、 C1-4烷氧基、 C1-4烷氨基、 C1-4烷氧 C1-4烷基。 优选的式 I所示的化合物包括但不限定于式 IB所示的化合物

R ₁₂ 表示一个或多个取代基， 可以和噻吩基在任意可相连的位置连接， 选自 H、 羟基、 巯基、 氨基、 醛基、 羧基、 氨基甲酰基、 卤素、 硝基、 氰基、 C1-4烷基、 C1-4烷氧基、 C1-4烷氨基、 C1-4烷氧 C1-4烷基。 优选的式 I所示的化合物包括但不限定于式 IC所示的化合物

R ₁₃ 表示一个或多个取代基， 可以和苯基在任意可相连的位置连接， 选自 H、 羟基、 巯基、 氨 基、 醛基、 羧基、 氨基甲酰基、 卤素、 硝基、 氰基、 C1-4烷基、 C1-4烷氧基、 C 1-4烷氨基、 C1-4烷氧 C1-4烷基。

优选的式 I所示

ID

R ₁₄ 表示一个或多个取代基， 可以和喹啉基在任意可相连的位置连接， 选自 H、 羟基、 巯基、 氨基、 醛基、 羧基、 氨基甲酰基、 卤素、 硝基、 氰基、 C1-4烷基、 C1-4烷氧基、 C1-4烷氨基、 C1-4烷氧 C1-4烷基。

优选的式 I所示的化合物包括但不限定于式 IE所示的化合物

IE

R ₁₅ 表示一个或多个取代基， 可以和萘基在任意可相连的位置连接， 选自 H、 羟基、 巯基、 氨 基、 醛基、 羧基、 氨基甲酰基、 卤素、 硝基、 氰基、 C1-4烷基、 C1-4烷氧基、 C1-4烷氨基、 C1-4烷氧 C1-4烷基。 优选的式 I所

R ₂₁ 表示一个或多个取代基， 可以和苯基在任意可相连的位置连接， 选自 H、 羟基、 巯基、 氨 基、 醛基、 羧基、 氨基甲酰基、 卤素、 硝基、 氰基、 C1-4烷基、 C1-4烷氧基、 C1-4烷氨基、 C1-4烷氧 C1-4烷基。 本发明的 C1-6直链或支链烷基，优选的是 C1-4直链或支链烷基或 C2-5直链或支链烷基。 优选的 C1-6直链或支链烷基选自甲基、 乙基、 丙基、 异丙基、 正丁基、 异丁基、 叔丁基、 戊 基、 新戊基、 异戊基、 己基。 优选的是 C1-4直链或支链烷基选自甲基、 乙基、 丙基、 异丙基、 正丁基、 叔丁基； 优选的 C2-5直链或支链烷基选自乙基、 丙基、 异丙基、 正丁基、 叔丁基、 戊基、 异戊基。

本发明中取代或非取代的 C1-6直链或支链烷基上的取代基选自： 羟基、 巯基、 氨基、 醛 基、 羧基、 氨基甲酰基、 卤素、 硝基、 氰基； 本发明中取代或非取代的 Cl-4、 或 C1-4直链或支链烷基上的取代基选自： 羟基、 巯基、 氨基、 醛基、 羧基、 氨基甲酰基、 氟、 氯、 溴、 硝基、 氰基。

C2-6的烯烃是指具有 2-6个碳原子的直链或支链的烯烃， 例如乙烯基， 1一丙烯基、 2— 丙烯基、 1一丁烯基、 2—丁烯基、 1一戊烯基、 1一己烯基等。 优选 C2-4的烯烃

术语 "烷氧基"是指 -0-烷基。

术语 "卤素"是指氟、 氯、 溴、 碘。 优选氟、 氯原子。 最优选的 R-M-X-C0-基选自对氯肉桂酰基、 对羟基肉桂酰基、 对甲基肉桂酰基、 2,4- 二氟肉桂酰基、 3-氟 -4-氯肉桂酰基、 3-氯 -4-氟肉桂酰基、 4-氟肉桂酰基、 3-氟肉桂酰基、 3,4-二氟肉桂酰基、 2-喹啉酰基、 2-噻吩基丙烯酰基、 2-硝基 -4-氯苯甲酰基和 2-萘氧基乙 酰基。 以上优选化合物与酸形成的药学上可接受的盐 也构成本发明的一部分， 本发明中的化合 物分子中的碱性氮原子可以与酸形成盐， 只要是与碱能够成盐， 且是药学上可以接受的酸都 可以， 对此没有特别限制。 可列举盐酸、 氢溴酸、 硫酸、 磷酸、 硝酸等无机酸， 草酸、 富马 酸、 马来酸、 琥珀酸、 柠檬酸、 酒石酸、 甲磺酸和对甲苯磺酸等有机酸。 本发明提供了紫杉醇或多西紫杉醇与胞壁酰二 肽简化物的共缀物的合成方法， 具体步骤 如下：

1. 液相合成紫杉醇或多西紫杉醇 2'-0-烷烃二酸单酯；

2. 固相或液相合成胞壁酰二肽简化物；

3. 液相合成紫杉醇或多西紫杉醇与胞壁酰二肽简 化物的共缀物。

其中的紫杉醇或多西紫杉醇 2'-0-烷烃二酸单酯的液相合成方法的具体步骤� ��下：

1 ) 紫杉醇 2'-0-烷基二酸单酯的液相合成方法

( 1 ) 首先， 将紫杉醇， 烷烃二酸酐和 4-N，N-二甲基吡啶溶于吡啶中， 室温搅拌 4小时， 反应 完毕；

(2) 然后， 先后以乙酸乙酯稀释吡啶溶液， 以饱和硫酸铜溶液洗涤乙酸乙酯相， 以水洗涤乙 酸乙酯相；

(3 ) 最后， 分离乙酸乙酯相， 减压浓缩溶剂， 向少量残余液中加入大量水， 体系内析出白色 固体， 过滤， 冷冻干燥， 得到目标产物。

2) 多西紫杉醇 2'-0-烷烃二酸单酯的液相合成方法

( 1 ) 首先， 将多西紫杉醇， 烷烃二酸酐和 4-N，N-二甲基吡啶溶于 N，N -二甲基甲酰胺中， 室 温搅拌 2小时， 反应完毕； (2)然后，先后以二氯甲烷稀释 N N -二甲基甲酰胺溶液， 以 2N盐酸水溶液洗涤二氯甲烷相， 以水洗涤二氯甲烷相；

(3 ) 最后， 分离二氯甲烷相， 减压浓缩溶剂， 用少量甲醇溶解残余物， 再加入大量水， 体系 内析出白色固体， 过滤， 冷冻干燥， 得到目标产物。

其中的胞壁酰二肽简化物的固相和液相合成 方法包括下列具体步骤：

1 ) 固相合成方法

( 1 ) 合成氨基酸中间体 Fmoc-D-iso-Gln-OH

合成路线如下：

Fmoc-L-Ala-COOH和有机羧酸。 缩合反应完成后， 经充分洗搽树脂、 裂解树脂以及纯化产物 粗品等步骤， 得到各种胞壁酰二肽简化物。 反应中各种酰化过程为常规酰胺缩合反应， 通过 加入过量的反应试剂（氨基酸或有机羧酸）以 及强效缩合剂（如 HATU HBTU BOP PyBOP 等） 可以使各类缩合反应完全。 该法的特点是使有机羧酸的引入不受有机羧酸 的结构 （如芳 香与非芳香性、 直链与支链） 、 立体位阻、 理化性质、 电子效益、 环系与线性等因素的影响， 因此也可以将以上三中氨基酸替换为其它任意 天然及非天然氨基酸， 如

Fmoc-D-Lys(Boc)-COOH Fmoc-L-iso-Gln-COOH, Fmoc-L-Gln-COOH, Fmoc-D- Gln-COOH和 Fmoc-D-Ala-COOH

合成路线如下：

Fmoc― — @ ^a Fmoc-Lys (Boc)-CONH ~ φ Fmoc-D-iso-Gln -Lys (Boc)-CONH-@ a d a e

Fmoc-Ala-D-iso-Gln -Lys (Bo c)-CONH— RCO-Ala-D-iso-Gln -Lys (Boc)-CONH-

RCO-Ala-D-iso-Gln -Lys -CONH ₂ φ = ink Amide-Am Resin 反应试剂与条件： （a) 20% piperidine/DMF; rt, lh; (b) Fmoc-Lys(Boc)-OH, HOBt, DIC; r.t, 8h; (C) Fmoc-D-iso-Gln-OH, HOBt, DIC; r.t, 12h; (d) Fmoc-Ala-OH, HOBt, DIC; r.t, 8h; (e) organic aicd©, HOBt, DIC; r.t, 8h; (f) 90%TFA/H ₂ O, r.t., 2h. 2) 液相合成方法

( 1 ) 合成氨基酸中间体 Boc-D-Glu(Obzl)-NH ₂

合成路线如下：

a

H— D— Glu-OH ► H— D— Glu(OBzl)— OH

Boc— D— Glu(OBzl) ~ OH ► Boc— D— Glu(OBzl)― H ₂ 反应试剂与条件： （a) C ₆ H ₅ CH ₂ OH， BF ₃ -Et ₂ 0; r.t., 15h; (b) (Boc) ₂ 0， NaHC0 ₃ ; r.t., 20h; (c) HOSu, DCC，爾 ₃ ; -10°C, 1.5h.

(2) 合成氨基酸中间体 Boc-Lys(Z)-NH ₂

合成路线如下：

a

Boc— Lys(Z) ~~ OH ► Boc— Lys(Z) ~ NH ₂ 反应试剂与条件： （a) HOSu, DIC, NH ₃ ; -10°C, 1.5h.

( 3 ) 然后， 用活泼酯法先后合成二肽片段 B _OC -Ala-D-Glu(OBzl)-NH ₂ 和三肽片段

R-Ala-D-Glu(OBzl)-NH ₂ ，用氢溴酸的醋酸溶液或者其他酸性或者 碱性条件脱除三肽片段的 Bzl 保护基， 继续用活泼酯法合成四肽 R-Ala-D-i _S0 -Gln-Ly _S (Z)-NH _{2 ;}

(4)最后， 用三氟化硼乙醚、 三氟乙酸和乙硫醇混合溶液（体积比 9: 9： 2)脱除 Z保护基， 得到产物粗品， 纯化后得到胞壁酰二肽简化物。

反应试剂与条件： （a) 50%TFA/DCM; rt lh; (b) Boc-Ala-OH, HOSu, DIC; 0°C, 5h, r.t., 20h; (c) organic acid ©， HOSu, DIC; 0。C， 5h, r.t., 20h; (d) HBr/HOAc; r.t., 3h; (e) HOSu, DIC; 0。C， 5h, r.t., 20h; (f) BF ₃ -Et ₂ 0, TFA, EtSH(9:9:2); r.t. 2h.

其中胞壁酰二肽简化物与紫杉醇或多西紫杉 醇的共缀物的液相合成方法包括下列具体步骤 ： 1 ) 首先， 将紫杉醇或多西紫杉醇 2'-0-烷烃二酸单酯与特定摩尔比例 (2: 1-1:2)的 HOSu和 DIC 溶于二甲基亚砜或者 N，N-二甲级甲酰胺、或者 N-甲基吡咯烷酮等溶液中，可以在 -20°C-+50°C 温度范围内反应 1-10小时；

2) 然后， 将等摩尔比例的胞壁酰二肽简化物加入上述二 甲基亚砜、 或者 DMF、 或者 NMF等 溶液中， 用 N-甲基吗啉等弱碱性试剂将反应体系的 pH值调节至 6〜8， 继续反应 1-10小时， 反应完全后形成共缀物；

3 ) 最后， 向反应液中加入沉淀溶剂， 如水、 甲醇或乙醇等、 乙醚、 石油醚、 乙基丁基醚等析 出固体， 过滤， 粗品经纯化得到目标产物。

4) 纯化方法包括制备 HPLC法， 重结晶法。

合成路线如下：

反应试剂与条件： （a) anhydride, DMAP, r.t., 4h; (b) HOSu, EDC-HCl, DMSO, r.t., 20h; MDA derivatives, r.t., 12h.

所述的烷烃二酸、 烷烃二酸酐选自 C4-C14烷烃二酸、 C4-C14烷烃二酸酐。

本发明中的共缀物的制备方法条件比较温和， 反应时间简短， 收率稳定， 有利于采 用例如组合化学方法进行化合物库的合成， 这种采用组合化学方法合成化合物库的方法 亦属于本发明的范围。

本领域技术人员可对上述步骤进行变动以提高 收率， 他们可据本领域的基本知识确 定合成的路线， 如选择反应物， 溶剂和温度。 还可以通过使用各种常规保护基以避免副 反应的发生从而提高收率。 这些常见的反应可参考各类有关多肽合成化学 的书籍， 如 1 ) Gang LIU and Kit S. LAM, One-bead one-compound combinatorial l ibrary method"， Combinatorial Chemi stry, A Practical Approach, Edited by Hicham Fenniri, OXFORD University Press, 2000, Chapter 2, pp 33-50; 2 ) 刘刚， 萧晓毅等著， 《寻找新药研究 中的组合化学》，科学出版社， 2003，6月； 3) N. Leo Benoiton, Chemi stry of Peptide Synthesi s: publ i shed in 2005 by CRC press； 4) Miklos Bodanszky, Principles of Peptide Synthesis by Publi sher of Springer Verlag (Edition : 2ND/REV)。 上述的改动或变动均在本发明的 范围内。 本发明涉及本发明的共缀物在制备治疗和预防 各种肿瘤以及由其引起的各种癌症的药物 (剂)或者预防（剂） 中的应用。 所述的肿瘤选自黑色素瘤、 胃癌、肺癌、乳腺癌、 肾癌、肝癌、 口腔表皮癌、 宫颈癌、 卵巢癌、 胰腺癌、 前列腺癌、 结肠癌。 本发明因此还涉及含有治疗量本发明化合物的 药物， 和一种或多种药学上可接受载 体和 /或赋形剂的药物组合物。 载体包括如盐水， 缓冲盐水， 葡萄糖， 水， 甘油， 乙醇和 它们的结合， 下文更详细地论述。 如果需要， 该组合物还可以包含较小量的润湿剂或乳 化剂， 或 pH缓冲剂。 该组合物可以是液体溶液， 悬浮液， 乳剂， 片剂， 丸剂， 胶囊， 持 续释放制剂或粉末。 该组合物可以用传统的粘合剂和载体如三羧酸 甘油酯配制成栓剂。 口服制剂可以包括标准载体如药物品级的甘露 糖醇， 乳糖， 淀粉， 硬脂酸镁， 糖精钠， 纤维素和碳酸镁， 等等。 视需要制剂而定， 配制可以涉及混合， 制粒和压缩或溶解成分。 在另一个途径中， 该组合物可以配制成纳米颗粒。

使用的药物载体可以为固体或者液体。

载体或赋形剂可以是本领域已知的时间延迟材 料， 如单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘 油酯， 还可包括蜡， 乙基纤维素， 羟丙基甲基纤维素， 异丁烯酸甲酯等等。 当制剂用于 口服时， 公认 PH0SALPG- 50 ( phosphol ipi d与 1， 2-丙二醇浓缩， A. Nattermann & Ci e. GmbH) 中的 0. 01%吐温 80用于用于其他化合物的可接受的口服制剂的� ��制， 可以适应于 本发明各种化合物的配制。

给予本发明化合物时可以使用各式各样的药物 形式。 如果使用固体载体， 制剂可为 片剂， 被放入硬胶囊中的粉末或小药丸形式或锭剂或 糖锭形式。 固体载体的量在很大程 度上变化， 但是优选从约 25 mg到约 1 g。 如果使用液体载体， 制剂可为糖浆， 乳剂， 软 胶囊， 在安瓿或小瓶或非水的液体悬浮液中的无菌注 射溶液或悬浮液。

各种释放系统是已知的并且可用于化合物或其 各种制剂的给药， 这些制剂包括片剂， 胶囊， 可注射的溶液， 脂质体中的胶囊， 微粒， 微胶囊， 等等。 引入的方法包括但是不 局限于皮肤的， 皮内， 肌内， 腹膜内的， 静脉内的， 皮下的， 鼻腔内的、 肺的， 硬膜外 的， 眼睛的和 （通常优选的） 口服途径。 化合物可以通过任何方便的或者其它适当的途 径给药， 例如通过注入或快速浓注， 通过上皮的或粘膜途径 （例如， 口腔粘膜， 直肠和 肠粘膜， 等等） 吸收或通过负载药物的支架以及可以与其他生 物活性剂一起给药。 可以 全身或局部给药。 用于鼻， 支气管或肺疾病的治疗或预防时， 优选的给药途径为口服， 鼻给药或支气管烟雾剂或喷雾器。

附图说明

附图 1 MTC-220针对 60株人源肿瘤细胞株的 50%生长抑制浓度 （GI ₅₍₎ ) 和 50%杀伤细胞的 浓度 （LC ₅₀ )

附图 2 MTC-302针对 60株人源肿瘤细胞株的 50%生长抑制浓度 （GI ₅ c) 和 50%杀伤细胞的 浓度 （LC ₅₀ )

附图 3 MTC-213针对 60株人源肿瘤细胞株的 50%生长抑制浓度 （GI ₅ c) 和 50%杀伤细胞的 浓度 (LC ₅ o)

附图 4 MTC-219针对 60株人源肿瘤细胞株的 50%生长抑制浓度 （GI ₅ c) 和 50%杀伤细胞的 浓度 （LC ₅₀ )

附图 5 MTC-233针对 60株人源肿瘤细胞株的 50%生长抑制浓度 （GI ₅ c) 和 50%杀伤细胞的 浓度 （LC ₅₀ )

附图 6 MDC-400针对 60株人源肿瘤细胞株的 50%生长抑制浓度 （GI ₅ c) 和 50%杀伤细胞的 浓度 （LC ₅₀ )

附图 7 MTC-30K 302、 303和 304体外抗 10株肿瘤细胞的活性

附图 8 MTC-305, 306、 307和 308体外抗 10株肿瘤细胞的活性

附图 9 MDC-403 , 404和 405体外抗 10株肿瘤细胞的活性

附图 10 MDC-406, MDC-407和 408体外抗 10株肿瘤细胞的活性

附图 11 MTC-220对 MDA-MB-231荷瘤鼠体重的影响

附图 12 MTC-220对 MDA-MB-231荷瘤鼠肿瘤生长的抑制作用

附图 13 相同剂量 MTC-220不同给药方式对 MDA-MB-231荷瘤鼠肿瘤 RTV的影响 附图 14 相同剂量 MTC-220不同给药方式对 MDA-MB-231荷瘤鼠体重的影响

附图 15 MTC-220对 H460荷瘤鼠体重的影响

附图 16 MTC-220对 H460荷瘤鼠肿瘤生长的抑制作用

附图 17: MTC-220对 MCF-7荷瘤鼠肿瘤生长的抑制作用

附图 18 MTC-220对 MCF-7荷瘤鼠体重的影响

附图 19 MTC-220对 A549荷瘤鼠肿瘤生长的抑制作用

附图 20 MTC-220对 A549荷瘤鼠体重的影响

附图 21 : MTC-220对 H1975荷瘤鼠体重的影响

附图 22 MTC-220对 H1975荷瘤鼠肿瘤生长的抑制作用

附图 23 MTC-220抑制小鼠乳腺癌生长活性 （ 1 )

附图 24 MTC-220对乳腺癌小鼠体重的影响 （2) QZ

'zH8'01=r Ί 'HT)T8'e '(H"01 ' ^S 'ΗΙ)6Γ9 '(HO"/. 'zH8'01=r 'P 'HT)68 '(H"/. ¾17-8 P™ 0XT=f 'PP 'HT)01 '( ^q H-9 'Hl)ieX '(¾"9 Ί 'ΗΤ)39Ί '(H-S

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( 1 ) U^^ ^s i ⁹ l 1、Γ4$ 9Z图糊 a) ^ w ^ m i ^ ozz-om ςζ图糊 οεε· /ποζ OAV 13-H), 1.51(1H， m， 14-H _a )， 1.81(1H， m， 14-H _b )， 0.99(3H, s， 16-H), 1.02(3H, s， 17-H), 1.75(3H, s, 18-H), 1.49(3H, s， 19-H), 3.98(1H, d, J=10.2Hz, 20-H _a ), 4.02(1H, d, J=10.2Hz, 20-H _b ), 2.10(3H, s, 4-OCOCH3), 2.23(3H, s， IO-OCOCH3), 5.35(1H, d, J=10.8Hz, 2 -H), 5.54(1H, dd, J=10.8 and 10.2Hz, 3 -H), 9.21(1H, d, J=10.2Hz, 3'-NH), 7.49(2H, m， ph-o-H), 7.47(2H， m， ph-m-H), 7.54(1H， m， ph-p-H), 7.84(2H, d, J=10.2Hz, NBz-o-H), 7.43(2H, m， NBz-m-H), 7.19(1H, m， NBz-p-H), 7.97(2H, d, J=9.6Hz, OBz-o-H), 7.65(2H, m， OBz-m-H), 7.72(1H, m， OBz-p-H), 2.61(2H, t, J=7.2Hz, -CH ₂ -CH ₂ -COOH), 2.32(2H, m， -CH ₂ -CH ₂ -COOH), 12.23(1H, br.s, -CH ₂ -CH ₂ -COOH).

¹³ C-NMR( 150MHz, DMSO-d ₆ ): 76.7(1-C), 74.5(2-C), 46.1(3-C), 80.2(4-C), 83.6(5-C), 36.5(6-C), 70.4(7-C), 57.3(8-C), 202.3(9-C), 74.7(10-C), 133.3(11-C)， 139.4(12-C), 70.7(13-C), 34.4(14_C), 42.9(15-C), 26.3(16-C), 21.3(17-C), 13.8(18-C), 9.7(19-C), 75.2(20-C), 169.6(2-OCO), 169.6, 22.5(4-OCOCH ₃ ), 168.7， 20.6(10-OCOCH ₃ ), 169.0(1 -C), 74.7(2'-C)， 53.9(3 -C), 166.4(3 -NHCO), 137.3(ph-q-C), 127.6(ph-o-C), 128.3(ph-m-C), 131.4(ph-p-C), 129.9(NBz-q-C), 127.4(NBz-o-C), 128.6(NBz-m-C), 128.2(NBz-p-C), 134.3(OBz-q-C), 129.5(OBz-o-C), 128.6(OBz-m-C), 133.4(OBz-p-C), 172.9, 28.4, 30.9, 171.6(-CO-CH ₂ -CH ₂ -COOH).

IR: 3471.3(v _OH and VNH), 3065.2(V= _C -H), 2957.5(V _-C -H), 1717.3, 1642.0(v _c =o), 1602.4, 1579.8, 1525.9(v _c =c), 1487.4, 1370.4(5 _-C - _H ), 1241.4(v _C -o-c), 978.6, 904.7, 948.5, 776.0, 708.3(5= _CH ).

ESI-MS: 954.75 [M+H]+， 1929.13 [2M+Na] ⁺ .

HR-MS(TOF): 954.3552 [M+H]+， 976.3352 [M+Na] ⁺ , C ₅₁ H ₅₅ N0 ₁₇ .

实施例 2-3: 固相合成胞壁酰二肽简化物 MDA

实施例 2: 合成 Fmoc-D-iso-Gln-OH

合成路线如下:

反应试剂与条件： (a) r.t., 3d; (b) DCC, 0°C, 5h, r.t, 20h; (c) NH ₃ ; -10°C, 1.5h.

步骤一： 合成 Fmoc-D-Glu-OH

Fmoc— '^^COOH

H

将 29.4g ( l .Oeq) D构型谷氨酸 (H-D-Glu-OH)溶于丙酮 -水混合溶液 （体积比 1 : 1 ) 中， 冰浴条件下搅拌； 完全溶解后， 少量多次地加入 23.3g ( l . leq) NaHC0 ₃ , 然后， 缓缓加入 67.4g ( l.Oeq) Fmoc-OSu, 冰浴至室温搅拌 3天； 反应结束后， 冰浴条件下， 用 2N盐酸将溶 液体系的 PH值调至 2〜3， 减压蒸干反应体系中的丙酮溶液， 残余液用乙酸乙酯萃取 4次， 合并乙酸乙酯层， 无水硫酸镁干燥过夜， 过滤， 减压蒸干乙酸乙酯溶液， 残余物用乙酸乙酯 -环己烷重结晶， 得到 59.8g目标产物， 产率 81%。

步骤二： 合成 Fmoc-D-iso-Gln-OH

将 59.8g( 1.0eq)Fmoc-D-Glu-OH溶于无水 324mL的无水四氢呋喃中（浓度 =0.5mol/L)， 冰浴条件下搅拌， 缓缓加入 40.1g ( 1.2eq) DCC， 冰浴条件下反应 2小时， 室温继续反应 8 小时。 体系内析出大量白色沉淀 （DCU)， 过滤， 用少量四氢呋喃洗涤滤饼。 滤液置于氯化钠 冰盐浴内搅拌， 同时向体系内通入干燥无水的氨气， 15 分钟后， 体系内产生大量白色沉淀， 继续反应 1.5小时， 体系内停止产生白色沉淀， 反应结束。 静置 30分钟， 向溶液体系内加入 少量无水甲醇， 白色沉淀迅速溶解， 冰浴条件下， 用 2N盐酸将溶液体系的 pH值调至 2〜3； 减压蒸干溶剂， 残余液用乙酸乙酯溶解稀释， 依次用稀盐酸溶液， 饱和碳酸氢钠溶液和水溶 液萃取洗涤乙酸乙酯， 分离乙酸乙酯相， 无水硫酸镁干燥过夜， 过滤， 减压蒸干乙酸乙酯溶 液， 残余物用乙酸乙酯-环己烷重结晶， 得到 46.5g目标产物， 产率 78%， m.p.=204〜205°C， [a]=-4.2°(C= 10mg/mL,DMF)。

^-NMRCSOOMHz, DMSO): 7.88(2H, d, J=8.0Hz), 7.72(2H, m), 7.42(2H, m), 7.40(1H, m)， 7.40(1H, br.s), 7.32(2H, m， 7.02(1H, br.s),4.27(2H, m), 4.20(1H, m), 3.93(1H, dd, J=13.5 and 8.5Hz) _; 2.25(2H, m), 1.89(1H, m),.1.73(lH, m).

¹³ C-NMR ( 125MHz, DMSO): 173.9, 173.4, 155.9, 143.8, 140.7, 127.6, 127.0, 125.3, 120.0, 65.6， 53.8, 46.6, 30.4, 27.2.

ESI-MS: 369.03 [M+H]+， 759.98 [2M+Na] ⁺ .

HR-MS(TOF): 369.1448 [M+H]+， 759.2623 [2M+Na] ⁺ , C ₂₀ H ₂₀ N ₂ O ₅ . 实施例 3 : 胞壁酰

合成路线如下: Fmoc—— — @ ~ Fmoc-Lys (Boc)-CONH ~ @ , »■ Fmoc-D-iso-Gln -Lys (Boc)-CONH-0 ► Fmoc-Ala-D-iso-Gln -Lys (Bo c)-CONH— φ ~ RCO-Ala-D-iso-Gln -Lys (Boc)-CONH-© f _

► RCO-Ala-D-iso-Gln -Lys -CONH ₂ =Rink Amide-Am Resin 反应试剂与条件： （a) 20% piperidine/DMF; rt， lh; (b) Fmoc-Lys(Boc)-OH， HOBt, DIC; r.t, 8h; (C) Fmoc-D-iso-Gln-OH, HOBt, DIC; r.t, 12h; (d) Fmoc-Ala-OH, HOBt, DIC; r.t, 8h; (e) 4-chloro-cinnamic acid(R), HOBt, DIC; r.t, 8h; (f) 90%TFA/H ₂ O, r.t., 2h.

将 lOOg (0.88mmol/g， 1.0eq)Rink-Amide AM树脂放入固相反应器， 减压抽真空 1小时后， 加入 500mL严格无水的二氯甲烷溶胀 45分钟。 抽干二氯甲烷溶剂， 加入 500mL含 20% (体 积比） 哌啶的 N，N-二甲基甲酰胺溶液， 脱除树脂的 Fmoc保护基， 反应 1小时后， 抽干反应 液， 然后先后用 500mL N，N-二甲基甲酰胺和二氯甲烷洗涤树脂 6次， 抽干溶剂； 向反应器内 加入 61.8g ( 1.5 eq) Fmoc-Lys(Boc)-

COOH, 17.8g ( 1.5 eq) HOBt, 20.8mL ( 1.5 eq) DIC及 500mL N，N-二甲基甲酰胺溶剂， 向树 脂引入第一个氨基酸， 反应 8 小时后， 取少量树脂进行茚三酮法检测， 树脂未呈现蓝色， 阴 性， 说明反应完全， 抽干反应液， 加入 500mL含 20% (体积比） 哌啶的 N，N-二甲基甲酰胺溶 液， 脱除氨基酸的 Fmoc保护基， 反应 1小时后， 抽干反应液， 然后先后用 500mL N，N-二甲 基甲酰胺和二氯甲烷洗涤树脂 6 次， 抽干溶剂； 向反应器内加入 48.5g ( 1.5eq ) Fmoc-D-iso-Gln-COOH, 17.8g ( 1.5eq) HOBt, 20.8mL ( 1.5eq) DIC及 500mL N，N-二甲基甲 酰胺溶剂， 向树脂引入第二个氨基酸， 反应 12小时后， 取少量树脂进行茚三酮法检测， 树脂 未呈现蓝色， 阴性， 说明反应完全， 抽干反应液， 加入 500mL含 20% (体积比） 哌啶的 N，N- 二甲基甲酰胺溶液， 脱除氨基酸的 Fmoc保护基， 反应 1 小时后， 抽干反应液， 然后先后用 500mL N，N-二甲基甲酰胺和二氯甲烷洗涤树脂 6次，抽干溶剂； 向反应器内加入 41.0g ( 1.5eq) Fmoc-Ala-COOH, 17.8g ( 1.5eq) HOBt, 20.8mL ( 1.5eq) DIC及 500mL N，N-二甲基甲酰胺溶 剂， 向树脂引入第三个氨基酸， 反应 8 小时后， 取少量树脂进行茚三酮法检测， 树脂未呈现 蓝色， 阴性， 说明反应完全， 抽干反应液， 加入 500mL含 20% (体积比） 哌啶的 N，N-二甲基 甲酰胺溶液，脱除氨基酸的 Fmoc保护基，反应 1小时后，抽干反应液，然后先后用 500mL N，N- 二甲基甲酰胺和二氯甲烷洗涤树脂 6次， 抽干溶剂； 向反应器内加入 24.1g ( 1.5eq)对氯肉桂 酸， 17.8g ( 1.5eq) HOBt, 20.8mL ( 1.5eq) DIC及 500mL N，N-二甲基甲酰胺溶剂， 向树脂引 入第四个有机酸， 反应 8 小时后， 取少量树脂进行茚三酮法检测， 树脂未呈现蓝色， 阴性， 说明反应完全，抽干反应液，然后先后用 500mL N，N-二甲基甲酰胺和二氯甲烷洗涤树脂 6次， 抽干溶剂； 加入 90% (体积比） 的三氟乙酸水溶液， 裂解 2小时， 收集裂解液， 然后用 90% (体积比） 的三氟乙酸水溶液继续裂解 1小时， 收集裂解液， 最后用 200mL二氯甲烷洗涤树 脂， 滤液与裂解液合并， 减压蒸干溶剂， 冰浴条件下， 向少量残余液中加入大量无水乙醚， 体系内立刻析出白色固体， 静置小时， 取出上清液， 继续加入无水乙醚研磨洗涤白色固体， 反复多次， 过滤， 得到 39.8g目标产物粗品， 产率 89%。 将 39.8g目标产物粗品经 ODS柱层 析， 甲醇 -水梯度洗脱纯化， 将含目标产物的溶液合并， 减压蒸干溶剂， 冷冻干燥， 得到 35.8g 纯度为 98.5%的目标产物， m.p.=215〜217°C， [ a ]=+37.7°(C=11.05mg/mL, DMF)。

3 and 5-H), 7.39(1H, d, J=15.9Hz, 7-H), 6.75(1H， d, J=15.9Hz, 8-H), 8.39(1H, d, J=6.6Hz, 10-H), 4.38(1H, m， 11-H), 1.26(3H, m， 12-H), 8.21(1H， d, J=8.4Hz, 14-H), 4.14(1H， m， 15-H), 6.98(1H, s， 17-H _a )， 7.41(1H， s， 17-H _b ), 1.71(1H, m， 18-H _a ), 1.97(1H, m， 18-H _b )， 2.15(2H, t, J=7.2Hz, 19-H), 7.90(1H, d, J=8.4Hz, 21-H), 4.11(1H， m， 22-H), 7.10(1H, s， 24-H _a ), 7.30(1H, s， 24-H _b ), 1.46(1H， m， 25-H _a ), 1.63(1H, m， 25-H _b ), 1.27(2H, m， 26-H), 1.53(2H, m， 27-H), 2.73(2H, m， 28-H), 7.75(2H, br.s, 29-H).

¹³ C-NMR(150MHz, DMSO-d ₆ ): 134.0(1-C), 129.0(2 and 6-C), 129.2(3 and 5-C), 133.8(4-C), 137.6(7-C), 122.7(8-C), 164.7(9-C), 48.8(11-C), 18.1(12-C), 172.4(13-C), 52.2(15-C), 173.8(16-C), 27.7(18-C), 31.7(19-C), 171.6(20-C), 52.1(22-C), 173.3(23-C), 31.3(25-C), 22.4(26-C), 26.8(27-C), 38.7(28-C).

IR: 3282.3, 3202.2(v _OH and VNH), 3067.3(V= _C H), 2938.0(V _-ch ), 1609.5(V _-C =O), 1537.5, 1450.2(v _c =c), 1199.0, 1180.2, 1130.6(5 _-CH )， 972.4, 820.4, 799.4, 720.0(5= _CH and v _c-cl ).

ESI-MS: 509.60 [M+H]+， 1017.24 [2M+H] ⁺ .

HR-MS(TOF): 509.2292 [M+H]+， C ₂₃ H ₃₃ C1N ₆ 0 ₅ . 实施例 4-10: 液相合成胞壁酰二肽简化物 MDA

合成路线如下：

4-chloro-ci

反应试剂与条件：（a) HOSu, DIC, NH ₃ ; -10°C, 1.5h; (b) 50%TFA/DCM; rt lh; (c) HOSu, DIC; 0°C 5h, r.t" 20h; (d) 0。C, 5h, r.t" 24h; (e) HBr/HOAc; r.t" 3h; (f) BF ₃ -Et ₂ 0, TFA, EtSH(9:9:2); r.t. 2h. 实施例 4: 液相合成 Boe-D-Glu(OBzl)-NH ₂ 合成路线如下：

a b

H— D— Glu-OH ► H— D— Glu(OBzl) ~~ OH ► c

Boc— D— Glu(OBzl) ~ OH ► Boc— D— Glu(OBzl) ~~ NH ₂ 反应试剂与条件： （a) C ₆ H ₅ CH ₂ OH， BF ₃ -Et ₂ 0; r.t., 15h; (b) (Boc) ₂ 0， NaHC0 ₃ ; r.t., 20h; (c) HOSu,

DCC，爾 ₃ ; -10°C, 1.5h.

步骤一： 液相合成 H-D-Glu(0Bzl)-0H

将 29.1g ( l.Oeq) D构型谷氨酸 (H-D-Glu-OH)溶于 205.6mL ( lO.Oeq) 苯甲醇， 室温搅 拌， 缓慢加入 47.7mL(2.0eq)三氟化硼乙醚溶液， 10分钟后， 样品溶解。 15小时后， 反应结束， 向反应体系内加入 616.8mL (苯甲醇体积的 3倍）的四氢呋喃，搅拌均勾， 再缓慢加入 55.1mL 三乙胺溶液 (2.0eq)， 反应体系内析出大量白色粘稠状沉淀， 减压蒸干四氢呋喃， 冷却后， 加入 适量乙酸乙酯， 粘稠状沉淀呈现粉末状沉淀， 过滤， 充分抽干， 得到 36.6g 目标产物， 产率 78%, m.p.=174〜176°C。

步骤二： 液相合成 Boc-D-Glu(OBzl)-OH

将 36.6g ( l.Oeq) H-D-Glu(OBzl)-OH溶于 500mL二氧六环水溶液（体积比 1 : 1 ) 中， 先 后加入 67.3g (2.0eq) Boc酸酐和 25.3g (2.0eq)碳酸氢钠， 油浴加热助溶， 样品完全溶解后， 室温下反应 20小时。反应结束后，减压蒸干二氧六环溶剂� ��得到大量白色粘稠状固体，用 500mL 水稀释助溶， 搅拌 30分钟， 样品溶解。 冰浴条件下， 用 2N盐酸将溶液体系的 PH值调至 2〜 3， 体系内出现混浊， 静置 30分钟。 然后， 用乙酸乙酯萃取 5次， 分离并合并乙酸乙酯相， 无水硫酸镁干燥过夜， 过滤， 减压蒸干乙酸乙酯溶液， 得到 48.6g 目标产物 （黄色油状物）， 产率 96%。

步骤三: 液相合成 Boc-D-Glu(OBzl -NH ₂

将 48.6g ( l.Oeq) Boc-D-Glu(OBzl)-OH溶于四氢呋喃中， 先后加入 24.8g ( 1.5eq) HOSu 和 44.5g ( 1.5eq) DCC, 冰浴条件下反应 5小时， 室温继续反应 20小时。 体系内析出大量白 色沉淀 （DCU)， 过滤， 用少量四氢呋喃洗涤滤饼。 滤液置于氯化钠冰盐浴内搅拌， 同时向体 系内通入干燥无水的氨气， 15分钟后， 体系内产生大量白色沉淀， 继续反应 1.5小时， 体系 内停止产生白色沉淀， 反应结束。 过滤， 用少量四氢呋喃洗涤滤饼， 减压蒸干四氢呋喃， 得 到黄色油状物， 用适量乙酸乙酯溶解， 冰浴条件下， 用 2N盐酸将溶液体系的 pH值调至 7， 静置 30分钟。 然后依次用稀盐酸溶液， 饱和碳酸氢钠溶液和水溶液萃取洗涤乙酸乙酯 相， 分 离乙酸乙酯相， 无水硫酸镁干燥过夜， 过滤， 减压蒸干乙酸乙酯溶液， 残余物用乙酸乙酯-环 己烷重结晶，得到 34.2g目标产物，产率 75%， m.p.=122〜123 °C， [a]=-1.8°(C=9.8mg/mL, DMF)。

^-NMRpOOMHz, DMSO-de): 1.36(9H, s， -C(CH ₃ ) ₃ )， 6.82(1H, d, J=8.4Hz, 4-H), 3.86(1H, m， 5-H), 7.01(1H, s， 7-H _a )， 7.31(1H, s， 7-H _b )， 1.73(1H, m， 8-H _a )， 1.88(1H, m， 8-H _b )， 2.36(2H, t, J=7.2Hz, 9-H), 5.07(2H, s， 11-H), 7.25-7.39(5H, m， 12〜16-H).

¹³ C-NMR(125MHz, DMSO-d ₆ ): 28.1(1-C), 78.0(2-C), 155.3(3-C), 53.3(5-C), 173.5(6-C), 27.1(8-C), 30.2(9-C), 172.2(10-C), 65.4(11-C), 127.8(12 and 16-C), 128.4(13 and 15-C), 127.9(14-C).

ESI-MS: 337.75 [M+H] ⁺ , 673.32 [2M+H] ⁺ .

HR-MS(TOF): 337.1754 [M+H]+， 359.1572 [M+Na] ⁺ , C ₁₇ H ₂₄ N ₂ 05. 实施例 5: 液相合成 Boc-Lys(Z)-N

将 38.0g ( 1.0eq) Boc-Lys(Z)-OH溶于四氢呋喃中，先后加入 13.8g ( 1.2eq) HOSu和 18.9ml ( 1.2eq)DIC,冰浴条件下反应 5小时，室温继续反应 20小时。体系内析出大量白色沉淀 (DIU)， 过滤， 用少量四氢呋喃洗涤滤饼。 滤液置于氯化钠冰盐浴内搅拌， 同时向体系内通入干燥无 水的氨气， 15分钟后， 体系内产生大量白色沉淀， 继续反应 1.5小时， 体系内停止产生白色 沉淀， 反应结束。 过滤， 用少量四氢呋喃洗涤滤饼， 减压蒸干四氢呋喃， 得到白色固体， 用 适量乙酸乙酯溶解， 冰浴条件下， 用 2N盐酸将溶液体系的 PH值调至 7， 静置 30分钟。 然后 依次用稀盐酸溶液， 饱和碳酸氢钠溶液和水溶液萃取洗涤乙酸乙酯 ， 分离乙酸乙酯相， 无水 硫酸镁干燥过夜，过滤，减压蒸干乙酸乙酯溶 液，残余物用乙酸乙酯-环己烷重结晶，得到 35.0g 目标产物， 产率 92%， m.p.=137〜138°C。

丽 R(300MHz, DMSO-de): 1.37(9H, br.s, 1-H), 6.71(1H, d, J=8.1Hz, 4-H), 3.79(1H, m， 5-H), 7.23(2H, br.s, 7-H), 1.28(2H, m， 8-H), 1.45(2H, m， 9-H), 1.58(2H, m， 10-H), 2.95(2H, m， 11-H), 6.93(1H, br.s, 12-H), 5.00(2H, s， 14-H), 7.22-7.39(5H, m， 16〜20-H).

ESI-MS: 380.71 [M+H] ⁺ , 759.50 [2M+H] ⁺ .

HR-MS(TOF): 380.2201 [M+H]+， 781.4102 [2M+Na] ⁺ , C ₁₉ H ₂₉ N ₃ 0 ₅ . 实施例 6: 液相合成二肽片段 Boc-Ala-D-Glu(OBzl)-NH ₂

将 16.9g ( l.Oeq) Boc-Ala-OH溶于四氢呋喃中， 先后加入 12.3g ( 1.2eq) HOSu和 16.9mL ( 1.2eq)DIC,冰浴条件下反应 5小时，室温继续反应 20小时。体系内析出大量白色沉淀 (DIU)， 过滤， 用少量四氢呋喃洗涤滤饼， 滤液 （Boc-Ala-OSu) 待用。

将 30g ( l.Oeq) Boc-D-Glu(OBzl)-NH ₂ 溶于 100mL的三氟乙酸二氯甲烷溶液 （体积比 1 : 1 )， 室温搅拌 1小时， 脱除 Boc保护基。 反应结束后， 减压蒸干三氟乙酸， 残余液用无水乙 醚反复研磨、 洗涤并蒸干， 最后溶于少量四氢呋喃中， 冰浴条件下用 N-甲基吗啉（NMM)将 溶液体系的 pH值调至 7〜8。然后将 Boc-Ala-OSu溶液少量多次地加入其中，冰浴条件� ��反应 5小时， 室温继续反应 24小时。 反应完全后， 减压蒸干溶剂， 残余物溶于适量乙酸乙酯中， 依次用稀盐酸溶液， 饱和碳酸氢钠溶液和水溶液萃取洗涤乙酸乙酯 相， 分离乙酸乙酯相， 无 水硫酸镁干燥过夜， 过滤， 减压蒸干乙酸乙酯溶液， 残余物用甲醇 -水重结晶， 并用大量无水 乙醚洗涤， 得到 29.4g目标产物， 产率 81%，m.p.=134〜135°C。

丽 R(300MHz, DMSO-de): 1.36(9H, br.s,. l-H), 7.92(1H, d, J=7.8Hz, 4-H), 4.17(1H， m， 5-H), 1.15(3H, d, J=7.2Hz, 6-H), 7.10(1H, d, J=6.6Hz, 8-H), 3.91(1H, m， 9-H), 7.18(1H， br.s, l l-H _a ) _; 7.31(1H, br.s, 11 -H _b ), 1.75(1H， m， 12-H _a ), 2.03(1H, m， 12-H _b ), 2.33(2H, t, J=7.5Hz, 13-H), 5.07(2H, s, 15-H), 7.31-7.40(5H, m， 17〜21-H).

ESI-MS: 408.71 [M+H]+， 815.44 [2M+H] ⁺ .

HR-MS(TOF): 408.2137 [M+H]+， 430.1955 [M+Na] ⁺ , C ₂ 。H ₂₉ N ₃ 0 ₆ . 实施例 7: 液相合成三

将 13.2g ( l.Oeq)对氯肉桂酸溶于四氢呋喃中， 先后加入 9.9g ( 1.2eq) HOSu和 13.6mL ( 1.2eq)DIC,冰浴条件下反应 5小时，室温继续反应 20小时。体系内析出大量白色沉淀 (DIU)， 过滤， 用少量四氢呋喃洗涤滤饼， 滤液 （Ac-OSu) 待用。

将 29.4g ( l.Oeq) Boc-Ala-D-Glu(OBzl)-NH ₂ 溶于 100mL的三氟乙酸二氯甲烷溶液 （体积 比 1 : 1 )， 室温搅拌 1小时， 脱除 Boc保护基。 反应结束后， 减压蒸干三氟乙酸， 残余液用无 水乙醚反复研磨、洗涤并蒸干，最后溶于少量 四氢呋喃中，冰浴条件下用 N-甲基吗啉（NMM) 将溶液体系 PH值调至 7〜8。然后将 Ac-OSu溶液少量多次地加入其中， 冰浴条件下反应 5小 时， 室温继续反应 24小时， 最后加热回流 2小时。 反应完全后， 静置 30分钟， 体系内产生 大量白色粘稠状沉淀， 过滤， 用少量四氢呋喃洗涤滤饼， 抽干后， 将所得固体溶于适量乙酸 乙酯中， 依次用稀盐酸溶液， 饱和碳酸氢钠溶液和水溶液萃取洗涤有机相， 分离乙酸乙酯相， 无水硫酸镁干燥过夜， 过滤， 减压蒸干乙酸乙酯溶液， 残余物用甲醇 -水重结晶， 并用大量无 水乙醚洗涤， 得到 26.8g目标产物， 产率 79%，m.p.=226〜228°C。

丽 R(300MHz, DMSO-de): 7.48(2H， d, J=8.7Hz, 2〜6-H)， 7.59(2H, d, J=8.7

Hz, 3—5-H), 7.39(1H, d, J=15.9Hz, 7-H), 6.76(1H， d, J=15.9Hz, 8-H), 8.39(1H, d, J=6.6Hz, 10-H), 4.38(1H, m， 11-H), 1.23(3H, d, J=6.9Hz, 12-H), 8.25(1H, d, J=8.1Hz, 14-H), 4.18(1H, m， 15-H), 7.16(1H， br.s, 17-H _a ), 7.31(1H, br.s, 17-H _b ), 1.78(1H， m， 18-H _a )， 2.05(1H, m， 18-H _b )， 2.38(2H, m， 19-H), 5.07(2H, s， 21-H), 7.31-7.36(5H, m， 23〜27-H).

ESI-MS: 472.33 [M+H]+， 943.17 [2M+H] ⁺ .

HR-MS(TOF): 472.1635 [M+H]+， 943.3174 [2M+H]+， C ₂₄ H ₂₆ C1N ₃ 0 ₅ . 实施例 8: 液相合成三

将 26.8g实施例 7中合成的三肽片段溶于氢溴酸的醋酸溶液中� � 室温搅拌 2小时， 脱除 Bzl保护基。 反应结束后， 将反应液倒入适量冰水中， 用 10%的 NaOH溶液将上述溶液的 pH 值调至 10~11， 用乙酸乙酯萃取水相。 然后， 用 10%的 HC1溶液将水相的 PH值调至 2~3， 再 用乙酸乙酯溶剂萃取水相 3次， 合并乙酸乙酯相， 用饱和的 NaCl溶液洗涤， 并用无水 Na ₂ S0 ₄ 干燥； 过滤、 减压蒸干溶剂至少量残余液， 加入乙醚， 体内析出大量白色固体， 过滤， 干燥 后称重得到 18.5g产物。 产率 85%。

^-NMRpOOMHz, DMSO-de): 7.45(2H, d, J=8.1Hz, 2〜6-H)， 7.56(2H, d, J=8.1

Hz, 3—5-H), 7.42(1H, d, J=15.3Hz, 7-H), 6.75(1H， d, J=15.3Hz, 8-H), 8.39(1H, d, J=6.6Hz, 10-H), 4.37(1H, m， 11-H), 1.25(3H, d, J=6.6Hz, 12-H), 8.21(1H, d, J=8.1Hz, 14-H), 4.16(1H, m， 15-H), 7.11(1H, br.s, 17-H _a ), 7.30(1H, br.s, 17-H _b ), 1.72(1H, m， 18-H _a ), 1.98(1H, m， 18-H _b ), 2.22(2H, m， 19-H), 12.25(1H, br.s, 21-H).

ESI-MS: 382.17 [M+H]+， 785.04 [2M+Na] ⁺ .

HR-MS(TOF): 382.1171 [M+H]+， 785.2073 [2M+Na] ⁺ , C ₁₇ H ₂ 。C1N ₃ 0 ₅ . 实施例 9: 液相合成

将 16.3g ( l.Oeq) 实施例 8 中脱去 Bzl保护的三肽片段溶于四氢呋喃中， 先后加入 5.9g ( 1.2eq) HOSu和 8.1mL ( 1.2eq) DIC， 冰浴条件下反应 5小时， 室温继续反应 20小时。 体 系内析出大量白色沉淀 （DIU)， 过滤， 用少量四氢呋喃洗涤滤饼， 滤液待用。 将 16.2g ( l.Oeq) Boc-Lys (Z) -NH ₂ 溶于 lOOmL的三氟乙酸二氯甲烷溶液（体积比 1： 1 )， 室温搅拌 1小时， 脱除 Boc保护基。 反应结束后， 减压蒸干三氟乙酸， 残余液用无水乙醚反 复研磨、 洗涤并蒸干， 最后溶于少量四氢呋喃中， 冰浴条件下用 N-甲基吗啉（NMM)将溶液 体系 pH值调至 7〜8。然后将上述滤液少量多次地加入其中， 冰浴条件下反应 5小时， 室温继 续反应 24小时。 反应体系内产生大量白色粘稠状沉淀， 过滤， 少量四氢呋喃洗涤滤饼， 抽干 后， 得到 14.6g目标产物， 产率 74%， m.p.=195〜196°C。

^-NMRpOOMHz, DMSO-d ₆ ): 7.47(2H， m， 2 and 6-H), 7.58(2H, m， 3 and 5-H), 7.38(1H, d, J=15.3Hz, 7-H), 6.79(1H, d, J=15.3Hz, 8-H), 8.45(1H, d, J=8.1Hz, 10-H), 4.40(1H, m， 11-H), 1.28(3H, m， 12-H), 8.29(1H, d, J=8.1Hz, 14-H), 4.19(1H, m， 15-H), 6.95(1H, s， 17 _a -H)， 7.41(1H， s, 17 _b -H), 1.71(1H, m， 18 _a -H)， 1.96(1H, m， 18 _b -H)， 2.14(2H, m， 19-H), 7.92(1H, m， 21-H), 4.12(1H, m: 22-H), 7.09(1H, s， 24 _a -H), 7.33(1H, m， 24 _b -H), 1.49(1H, m， 25 _a -H), 1.65(1H， m， 25 _b -H), 1.27(2H, m， 26-H), 1.53(2H, m， 27-H), 2.91(2H, m， 28-H), 6.91(1H, br.s, 29-H), 5.00(2H, s， 31-H), 7.20-7.38(5H _; m， 33〜37-H).

¹³ C-NMR(125MHz, DMSO-d ₆ ): 133.9(1-C), 129.0(2 and 6-C), 129.2(3 and 5-C), 133.8(4-C), 137.6(7-C), 122.8(8-C), 164.7(9-C), 48.9 (11-C), 18.1(12-C), 172.4(13-C), 52.1(15-C), 173.9(16-C), 27.6(18-C), 31.6(19-C), 171.5(20-C), 52.1(22-C), 173.3(23-C), 31.4(25-C), 22.7(26-C), 27.5(27-C), 38.7(28-C), 156.0(30-C), 65.1(31-C), 137.5(32-C), 127.7(33 and 37-C), 128.3(34 and 36-C), 127.0(35-C).

ESI-MS: 643.31 [M+H] ⁺ .

HR-MS(TOF): 643.2635 [M+H]+， 665.2451 [M+Na] ⁺ , C ₃₁ H ₃₉ C1N ₆ 0 ₇ . 实施例 10: 液相合成

将 14.6g 实施例 9 中的四肽片段溶于三氟化硼乙醚、 三氟乙酸和乙硫醇混合溶液 （体积 比 9: 9： 2)， 室温下搅拌 2小时， 反应完全， 减压蒸干溶剂， 冰浴条件下向残余液中加入大 量无水乙醚， 析出白色固体沉淀， 离心， 取出上清液， 再用大量无水乙醚反复研磨洗涤， 得 到 8.3g目标产物粗品， 产率 72%。 将 8.3g目标产物粗品经 ODS柱层析， 甲醇-水梯度洗脱纯 化， 将含目标产物的溶液合并， 减压蒸干溶剂， 冷冻干燥， 得到 6.8纯度为 98.5%的目标产物， m.p.=215〜217°C， [ a ]=+37.7°(C=11.05mg/ml, DMF)。

3 and 5-H), 7.39(1H, d, J=15.9Hz, 7-H), 6.75(1H， d, J=15.9Hz, 8-H), 8.39(1H, d, J=6.6Hz, 10-H), 4.38(1H, m， 11-H), 1.26(3H, m， 12-H), 8.21(1H， d, J=8.4Hz, 14-H), 4.14(1H， m， 15-H), 6.98(1H, s， 17-H _a )， 7.41(1H， s， 17-H _b ), 1.71(1H, m， 18-H _a ), 1.97(1H, m， 18-H _b )， 2.15(2H, t, J=7.2Hz, 19-H), 7.90(1H, d, J=8.4Hz, 21-H), 4.11(1H， m， 22-H), 7.10(1H, s， 24-H _a ), 7.30(1H, s， 24-H _b ), 1.46(1H， m， 25-H _a ), /u/u/〇 /Jss-onosild-ΗΠοί

> )∞n xop ε)Γ6Π ζ)∞π X3)06l0posn)3eeςeiMIH¾KHiMN™ :Z-*--...，

x91)∞ xsl)r¾ Χ3Π χ1)61 χοπ)6∞ x6)91 χ∞)Γ∞π χ Γ62e-----...

χοζ)9ζ χ S Χ3)ΓΚ χοΓει χοΓΚ X3S)9l χ61)Ίε Χ3∞1)9λλλλ-----·.. s0 Χ) e 6 Χ)91)96ΚίίιΛΛΛδΗν ΗΟ....- s9 οο∞I Ό∞π l OHSΛ . ESI-MS: 491.39 [M+H] 981.21 [2M+H]

HR-MS(TOF): 491.2597 [M+H]+ C ₂₃ H ₃₄ N ₆ 0, 实施例 12: 固相合成 -202

采用固相合成策略， 选用 Rink-Amide AM树脂 (负载量 0.88mmol/g)， 先后向树脂上引入 Fmoc-Lys(Boc)-COOH, Fmoc-D-iso-Gln-COOH, Fmoc-Ala-COOH和对甲基肉桂酸， 完成缩合 反应， 充分洗涤抽干树脂， 最后用 90% (体积比） 的三氟乙酸水溶液继续裂解 1 小时， 减压 蒸干溶剂， 冰浴条件下， 向少量残余液中加入大量无水乙醚， 体系内立刻析出白色固体， 过 滤， 得到目标产物粗品， 产率 86%。 粗品经 ODS柱层析， 冷冻干燥后， 得到纯度为 98.5%的 白色固体， m.p.=150 151 °C

丽 R(300MHz, DMSO-de): 2.30(3H, s, 1-CH ₃ )， 7.44(2H, d, J=8.1Hz, 2 and 6-H), 7.21(2H, d, J=8.1Hz, 3 and 5-H), 7.37(1H, d, J=15.9Hz, 7-H), 6.69(1H, d, J=15.9Hz, 8-H), 8.35(1H, d, J=6.6Hz, 10-H), 4.37(1H, m 11-H), 1.25(3H, m 12-H), 8.21(1H d, J=8.1Hz, 14-H), 4.12(1H, m 15-H), 6.99(1H, s, 17-H _a )， 7.32(1H, s, 17-H _b )， 1.73(1H, m 18-H _a )， 1.97(1H, m 18-H _b ), 2.16(2H, m 19-H), 7.90(1H, d, J=7.8Hz, 21-H), 4.10(1H, m 22-H), 7.11(1H, s, 24-H _a ), 7.34(1H, s, 24-H _b ), 1.49(1H, m 25-H _a ), 1.63(1H, m 25-H _b ), 1.28(2H, m 26-H), 1.51(2H, m 27-H), 2.74(2H, m 28-H), 7.80(2H, br.s, 29-H).

¹³ C-NMR(125MHz, DMSO-d ₆ ): 20.9(1-CH ₃ ), 139.0(2 and 6-C), 129.6(2 and 6-C), 127.5(3 and 5-C), 132.1(4-C), 139.3(7-C), 120.8(8-C), 165.2(9-C), 48.9(11-C), 18.0(12-C), 172.5(13-C), 52.2(15-C), 173.9(16-C), 27.6(18-C), 31.8(19-C), 171.7(20-C), 52.1(22-C), 173.4(23-C), 31.3(25-C), 22.4(26-C), 26.7(27-C), 38.7(28-C).

IR: 3278.8, 3199.9(v _OH and VNH), 3063.3(V= _C H), 2941.3(V _-ch ), 1656.3(V _C =O), 1540.7, 1452.5(v _c =c), 1202.2, 1184.1, 1135.3(5 _-CH ), 984.0, 835.8, 813.6, 800.7, 721.6(5= _CH ).

ESI-MS: 489.48 [M+H]+ 977.29 [2M+H] ⁺ .

HR-MS(TOF): 489.2819 [M+H]+ C ₂₄ H ₃₆ N ₆ 0 ₅ . 实施例 13 : 固相合成胞 二肽简化物 MDA-203

采用固相合成策略， 选用 Rink-Amide AM树脂 (负载量 0.88mmol/g)， 先后向树脂上引入 Fmoc-Lys(Boc)-COOH Fmoc-D-iso-Gln-COOH, Fmoc-Ala-COOH和 2 4-二氟肉桂酸， 完成 缩合反应， 充分洗涤抽干树脂， 最后用 90% (体积比） 的三氟乙酸水溶液继续裂解 1 小时， 减压蒸干溶剂， 冰浴条件下， 向少量残余液中加入大量无水乙醚， 体系内立刻析出白色固体， 过滤， 得到目标产物粗品， 产率 80%。 粗品经 ODS柱层析， 冷冻干燥后， 得到纯度为 98.5% 的白色固体， m.p.=189〜190°C。

丽 R(300MHz, DMSO-de): 7.35(1H, m， 2-H), 7.72(1H, dd, J=15.2 and 8.7Hz, 5-H), 7.18(1H, td, J=8.4 and 2.4Hz, 6-H), 7.44(1H, d, J=15.9Hz, 7-H), 6.82(1H, d, J=15.9Hz, 8-H), 8.51(1H， d, J=6.6Hz, 10-H), 4.40(1H, m， 11-H), 1.27(3H, d, J=7.2Hz„ 12-H), 8.24(1H, d, J=8.1Hz, 14-H), 4.17(1H， m， 15-H), 7.00(1H, s， 17-H _a )， 7.33(1H, s， 17-H _b ), 1.71(1H， m， 18-H _a ), 1.97(1H, m， 18-H _b )， 2.17(2H, t, J=7.8Hz, 19-H), 7.91(1H, d, J=8.4Hz, 21-H), 4.13(1H, m， 22-H), 7.07(1H, s, 24-H _a ), 7.32(1H, s， 24-H _b ), 1.49(1H, m， 25-H _a ), 1.64(1H， m， 25-H _b ), 1.29(2H, m， 26-H), 1.50(2H, m， 27-H), 2.75(2H, m， 28-H).

¹³ C-NMR(125MHz, DMSO-d ₆ ): 163.7(m, 1-C), 104.7(t, J=26.0Hz, 2-C), 159.6(m, 3-C), 118.5(m, 4-C), 130.6(m, 5-C), 112.4(d, J=18.4Hz, 6-C), 137.4(s, 7-C), 124.3(s, 8-C)， 164.7(s， 9-C), 48.9(11-C), 18.0(12-C), 172.2(13-C), 52.1(15-C), 173.2(16-C), 27.6(18-C), 31.7(19-C), 171.6(20-C): 52.0(22-C), 172.3(23-C), 31.3(25-C), 22.4(26-C), 26.8(27-C), 38.7(28-C).

IR: 3279.8, 3198.2(v _OH and VNH), 3066.7(V= _C H), 2939.5(V _-ch ), 1656.2(V _c = ₀ ), 1616.4, 1544.6， 1504.2, 1454.1(v _c =c), 1202.1, 1181.7， 1138.8(v _C - _F and 5 _-CH ), 967.5, 836.7, 800.7, 721.4(v _C -ci and

ESI-MS: 511.28 [M+H]+， 1021.02 [2M+H] ⁺ .

HR-MS(TOF): 511.2482 [M+H]+， C ₂₄ H ₃₆ N ₆ 0 ₅ . 实施例 14: 固相合成 二肽简化物 MDA-204

采用固相合成策略， 选用 Rink-Amide AM树脂 (负载量 0.88mmol/g)， 先后向树脂上引入 Fmoc-Lys(Boc)-COOH， Fmoc-D-iso-Gln-COOH, Fmoc-Ala-COOH和 2-氟 -4-氯肉桂酸， 完成 缩合反应， 充分洗涤抽干树脂， 最后用 90% (体积比） 的三氟乙酸水溶液继续裂解 1 小时， 减压蒸干溶剂， 冰浴条件下， 向少量残余液中加入大量无水乙醚， 体系内立刻析出白色固体， 过滤， 得到目标产物粗品， 产率 88%。 粗品经 ODS柱层析， 冷冻干燥后， 得到纯度为 98.5% 的白色固体， m.p.=149〜150°C。

^-NMRpOOMHz, DMSO-de): 7.54(1H, dd, J=10.8 and 1.8Hz, 2-H), 7.69(1H, t, J=8.7Hz, 5-H), 7.36(1H, dd, J=10.5 and 2.1Hz, 6-H), 7.44(1H， d, J=15.9Hz, 7-H), 6.87(1H， d, J=15.9Hz, 8-H) _; 8.57(1H， d, J=6.6Hz, 10-H), 4.40(1H, m， 11-H), 1.27(3H, d, J=7.2Hz„ 12-H), 8.27(1H, d, J=8.1Hz, 14-H), 4.13(1H, m， 15-H), 6.99(1H, s, 17-H _a )， 7.35(1H, s, 17-H _b ), 1.72(1H, m， 18-H _a ), 1.98(1H, m， 18-H _b )， 2.17(2H, t, J=7.8Hz, 19-H), 8.08(1H, d, J=8.1Hz, 21-H), 4.10(1H, m， 22-H), 7.12(1H, s, 24-H _a ), 7.32(1H, s， 24-H _b ), 1.49(1H, m， 25-H _a ), 1.64(1H， m， 25-H _b ), 1.29(2H, m， 26-H), 1.51(2H, m， 27-H), 2.74(2H, m， 28-H).

¹³ C-NMR(125MHz, DMSO-d ₆ ): 135. l(d, J=10.9Hz, 1-C), 117.2(d, J=25.8Hz, 2-C), 160.7(d, J=252.5Hz, 3-C), 122. l(d, J=11.6Hz, 4-C), 130.8(s, 5-C), 125.9(d, J=3.0Hz, 6-C), 137.3(m, 7-C), 125.8(d, J=6.3Hz, 8-C), 164.6(s, 9-C), 49.4(11-C), 18.5(12-C), 172.8(13-C), 52.7(15-C), 174.3(16-C), 28.1(18-C), 32.2(19-C), 172.1(20-C), 52.6(22-C), 173.8(23-C), 31.8(25-C), 22.9(26-C) _; 27.5(27-C), 38.7(28-C).

IR: 3358.7, 3284.3 , 3199.3(v _OH and vNH), 3067.3(v= _CH ), 2933.4(v _-CH ), 1654.7, 1642.5, 1642.5, 1622.9(v _-c =o), 1540.6, 1489.9, 1453.6(v _c =c), 1202.4, 1129.9(v _C - _F and 5 _-CH ), 978.2, 815.0, 720.6, 690.2(v _C -ci and 5= _CH ).

ESI-MS: 527.49 [M+H]+， 1053.17 [2M+H] ⁺ .

HR-MS(TOF): 527.2192 [M+H]+， C ₂₃ H ₃₂ C1FN ₆ 0 ₅ . 实施例 15: 固相合成胞 -205

采用固相合成策略， 选用 Rink-Amide AM树脂 (负载量 0.88mmol/g)， 先后向树脂上引入 Fmoc-Lys(Boc)-COOH， Fmoc-D-iso-Gln-COOH, Fmoc-Ala-COOH和 2-氯 -4-氟肉桂酸， 完成 缩合反应， 充分洗涤抽干树脂， 最后用 90% (体积比） 的三氟乙酸水溶液继续裂解 1 小时， 减压蒸干溶剂， 冰浴条件下， 向少量残余液中加入大量无水乙醚， 体系内立刻析出白色固体， 过滤， 得到目标产物粗品， 产率 86%。 粗品经 ODS柱层析， 冷冻干燥后， 得到纯度为 98.5% 的白色固体， m.p.=137〜138°C。

丽 R(300MHz, DMSO-de): 7.55(1H, dd, J=8.7 and 1.8Hz, 2-H), 7.77(1H, m， 5-H), 7.36(1H, m， 6-H), 7.66(1H， d, J=15.9Hz, 7-H), 6.79(1H, d, J=15.9Hz, 8-H), 8.47(1H， d, J=6.6Hz, 10-H), 4.42(1H, m， 11-H), 1.27(3H, d, J=6.9Hz, 12-H), 8.24(1H, d, J=8.4Hz, 14-H), 4.16(1H， m， 15-H), 7.00(1H, s, 17-H _a )， 7.31(1H, s, 17-H _b )， 1.72(1H, m， 18-H _a ), 1.99(1H, m， 18-H _b )， 2.17(2H, t, J=7.8Hz, 19-H), 7.91(1H, d, J=8.7Hz, 21-H), 4.13(1H, m， 22-H), 7.12(1H, s， 24-H _a ), 7.33(1H, s, 24-H _b ), 1.49(1H, m， 25-H _a ), 1.65(1H， m， 25-H _b ), 1.30(2H, m， 26-H), 1.52(2H, m， 27-H), 2.75(2H, br.s, 28-H), 7.79(2H, br.s, 29-H).

¹³ C-NMR(125MHz, DMSO-d ₆ ): 162.7(d, J=250.0Hz, 1-C), 115.9(d, J=21.6Hz, 2-C), 134.6(d, J=10.0Hz, 3-C), 129.9(d, J=3.8Hz, 4-C), 129.7(d, J=10.0Hz, 5-C), 117.7(d, J=25.1Hz, 3-C), 137.5(7-C), 125.4(8-C), 164.8(9-C), 49.3(11-C), 18.6(12-C), 172.1(13-C), 52.6(15-C), 174.2(16-C), 28.2(18-C), 32.2(19-C), 172.1(20-C), 52.5(22-C), 173.7(23-C), 31.8(25-C), 22.9(26-C), 27.2(27-C), 38.2(28-C).

IR: 3279.8(v _OH and VNH), 3066.0(V= _C H), 2937.1(V _-ch ), 1776.1, 1656.3(v _c = ₀ ), 1537.0, 1489.0, 1452.2(v _c =c), 1238.1, 1201.1, 1181.0, 1135.6(v _C - _F and 5 _-CH ), 910.6, 835.5, 800.1, 721.3(v _C -ci and ESI-MS: 527.28 [M+H]+， 1075.00 [2M+Na] ⁺ .

HR-MS(TOF): 527.2201 [M+H]+， C ₂₃ H ₃₂ C1FN ₆ 0 _: 实施例 16: 固相合成胞 -206

采用固相合成策略， 选用 Rink-Amide AM树脂 (负载量 0.88mmol/g)， 先后向树脂上引入 Fmoc-Lys(Boc)-COOH, Fmoc-D-iso-Gln-COOH, Fmoc-Ala-COOH和 4-氟肉桂酸， 完成缩合反 应， 充分洗涤抽干树脂， 最后用 90% (体积比） 的三氟乙酸水溶液继续裂解 1 小时， 减压蒸 干溶剂， 冰浴条件下， 向少量残余液中加入大量无水乙醚， 体系内立刻析出白色固体， 过滤， 得到目标产物粗品， 产率 92%。 粗品经 ODS柱层析， 冷冻干燥后， 得到纯度为 98.5%的白色 固体， m.p.=218〜220°C。

^-NMRpOOMHz, DMSO-de): 7.26(2H, t, J=8.7Hz, 2 and 6-H), 7.63(2H, dd, J=8.4 and 5.7Hz, 3 and 5-H), 7.42(1H, d, J=15.9Hz, 7-H), 6.71(1H, d, J=15.9Hz, 8-H), 8.37(1H, d, J=6.6Hz, 10-H), 4.40(1H, m， 11-H), 1.27(3H, d, J=7.2Hz, 12-H), 8.21(1H, d, J=8.1Hz, 14-H), 4.15(1H， m， 15-H), 7.00(1H, s， 17-H _a )， 7.32(1H, s， 17-H _b )， 1.71(1H, m， 18-H _a ), 1.99(1H, m， 18-H _b ), 2.17(2H, t, J=7.8Hz, 19-H), 7.90(1H, d, J=8.1Hz, 21-H), 4.14(1H， m， 22-H), 7.12(1H, s， 24-H _a ), 7.32(1H, s， 24-H _b ), 1.49(1H, m， 25-H _a ), 1.64(1H， m， 25-H _b ), 1.29(2H, m， 26-H), 1.52(2H, m， 27-H), 2.76(2H, m， 28-H), 7.71(2H, br.s, 29-H).

¹³ C-NMR(125MHz, DMSO-d ₆ ): 163.2(d, J=245.8Hz, 1-C), 116.4(d, J=21.6Hz, 2 and 6-C), 130. l(d, J=8.5Hz, 3 and 5-C), 131.9(4-C), 138.3(7-C), 122.2(8-C), 165.3(9-C), 49.3(11-C), 18.5(12-C), 172.8(13-C), 52.6(15-C), 174.2(16-C), 27.2(18-C), 32.2(19-C), 172.1(20-C), 52.5(22-C), 173.7(23-C), 31.8(25-C), 22.9(26-C), 27.2(27-C), 38.5(28-C).

IR: 3278.5, 3198.1(v _OH and VNH), 3068.1(V= _C H), 2931.9(V _-ch ), 1672.8, 1639.9(v _c =o), 1614.9, 1539.4, 1509.6, 1451.7(v _c =c), 1201.7, 1134.3(v _C - _F and 5 _-CH ), 971.4, 831.4, 800.6, 721.0(5= _CH ).

ESI-MS: 493.25 [M+H]+， 1007.02 [2M+Na] ⁺ .

HR-MS(TOF): 493.2580 [M+H]+， 515.2381 [M+Na] ⁺ , C ₂₃ H ₃₃ FN ₆ 0 ₅ . 实施例 17: 固相合成胞 -207

采用固相合成策略， 选用 Rink-Amide AM树脂 (负载量 0.88mmol/g)， 先后向树脂上引入 Fmoc-Lys(Boc)-COOH, Fmoc-D-iso-Gln-COOH, Fmoc-Ala-COOH和 3-氟肉桂酸， 完成缩合反 应， 充分洗涤抽干树脂， 最后用 90% (体积比） 的三氟乙酸水溶液继续裂解 1 小时， 减压蒸 干溶剂， 冰浴条件下， 向少量残余液中加入大量无水乙醚， 体系内立刻析出白色固体， 过滤， 得到目标产物粗品， 产率 75%。 粗品经 ODS柱层析， 冷冻干燥后， 得到纯度为 98.5%的白色 固体， m.p.=195〜196°C。

^-NMRpOOMHz, DMSO-de): 7.21(1H, s， 2-H), 7.38(1H, m， 3-H), 7.41(1H， m， 5-H), 7.47(1H， m， 6-H), 7.47(1H， d, J=15.9Hz, 7-H), 6.79(1H, d, J=15.9Hz, 8-H), 8.39(1H, d, J=6.0Hz, 10-H), 4.38(1H, m， 11-H), 1.26(3H, d, J=6.9Hz, 12-H), 8.22(1H, d, J=7.5Hz, 14-H), 4.13(1H, m， 15-H), 6.97(1H, s, 17-H _a )， 7.30(1H, s, 17-H _b )， 1.65(1H, m， 18-H _a ), 1.97(1H, m， 18-H _b )， 2.15(2H, m， 19-H), 7.90(1H, d, J=8.4Hz, 21-H), 4.13(1H, m， 22-H), 7.01(1H, s， 24-H _a ), 7.30(1H, s， 24-H _b ), 1.48(1H， m， 25-H _a ), 1.65(1H， m， 25-H _b ), 1.28(2H, m， 26-H), 1.48(2H, m， 27-H), 2.72(2H, m， 28-H).

¹³ C-NMR(125MHz, DMSO-d ₆ ): 116.7(d, J=21.0Hz, 1-C), 162.9(d, J=242.3Hz, 2-C), 114.4(d, J=21.4Hz, 3-C), 137.9(d, J=7.8Hz, 4-C), 124.0(d, J=22.6Hz, 5-C), 131.4(6-C), 138.1(7-C), 124.0(8-C), 165.1(9-C), 49.3(11-C), 18.6(12-C), 172.8(13-C), 52.6(15-C), 174.3(16-C), 28.2(18-C), 32.2(19-C), 172.0(20-C), 52.5(22-C), 173.7(23-C), 31.8(25-C), 22.9(26-C), 27.2(27-C), 38.5(28-C).

IR: 3276.4, 3201.1(v _OH and VNH), 3069.1(V= _C H), 2938.1(V _-ch ), 1647.7(V _C =O), 1539.0, 1448.0, 1421.8(v _c =c), 1200.8, 1180.2, 1134. l(v _C - _F and 5 _-CH ), 972.1, 834.9, 798.7, 721.2(5= _CH ).

ESI-MS: 493.25 [M+H]+， 1007.09 [2M+Na] ⁺ .

HR-MS(TOF): 493.2582 [M+H]+， C ₂₃ H ₃₃ FN ₆ 0 ₅ . 实施例 18: 固相合成 二肽简化物 MDA-208

采用固相合成策略， 选用 Rink-Amide AM树脂 (负载量 0.88mmol/g)， 先后向树脂上引入 Fmoc-Lys(Boc)-COOH， Fmoc-D-iso-Gln-COOH, Fmoc-Ala-COOH和 3， 4-二氟肉桂酸， 完成 缩合反应， 充分洗涤抽干树脂， 最后用 90% (体积比） 的三氟乙酸水溶液继续裂解 1 小时， 减压蒸干溶剂， 冰浴条件下， 向少量残余液中加入大量无水乙醚， 体系内立刻析出白色固体， 过滤， 得到目标产物粗品， 产率 95%。 粗品经 ODS柱层析， 冷冻干燥后， 得到纯度为 98.5% 的白色固体， m.p.=139〜140°C。

^-NMRpOOMHz, DMSO-de): 7.66(1H, m， 3-H), 7.48(1H, m， 5-H), 7.45(1H, m， 6-H), 7.40(1H, d, J=15.9Hz, 7-H), 6.75(1H， d, J=15.9Hz, 8-H), 8.37(1H, d, J=6.9Hz, 10-H), 4.40(1H, m， 11-H), 1.27(3H, d, J=7.2Hz„ 12-H), 8.22(1H, d, J=7.8Hz, 14-H), 4.16(1H, m， 15-H), 700(1H, s, 17-H _a ), 7.33(1H, s， 17-H _b )， 1.71(1H, m， 18-H _a ), 1.97(1H, m， 18-H _b ), 2.17(2H, t, J=7.8Hz, 19-H), 7.90(1H, d, J=8.1Hz, 21-H), 4.13(1H, m， 22-H), 7.12(1H, s, 24-H _a ), 7.31(1H, s, 24-H _b ), 1.49(1H, m， 25-H _a ), 1.65(1H， m， 25-H _b ), 1.29(2H, m， 26-H), 1.52(2H, m， 27-H), 2.76(2H, m， 28-H) , 7.73(2H, br.s, 29-H).

¹³ C-NMR(150MHz, DMSO-d ₆ ): 149.3(dd, J=35.6 and 12.8Hz, 1-C), 151.2(dd, J=38.5 and 12.9Hz, 2-C), 118.6(d, J=17.5Hz, 3-C), 133.3(m, 4-C), 125. l(m, 5-C), 116.7(d, J=17.4Hz, 6-C), 137.3(s, 7-C), 123.8(s, 8-C)， 165.0(9-C), 49.3(11-C), 18.6(12-C), 172.8(13-C), 52.6(15-C), 174.3(16-C), 28.2(18-C), 31.8(19-C), 172.1(20-C), 52.5(22-C), 173.7(23-C), 31.8(25-C), 22.9(26-C), 27.2(27-C), 38.2(28-C).

IR: 3275.8, 3196.4(v _OH and VNH), 3064.8(V= _C H), 2938.1(V _-ch ), 1673.1(V _c = ₀ ), 1612.9, 1542.1, 1516.7, 1451.5(v _c =c), 1201.6, 1135.4(v _C - _F and 5 _-CH ), 969.3, 834.3, 800.6, 721.2(5= _CH )- ESI-MS: 511.30 [M+H]+， 1021.09 [2M+H] ⁺ .

HR-MS(TOF): 511.2479 [M+H]+， C ₂₃ H ₃₂ F ₂ N ₆ 0 ₅ . 实施例 19: 固相合成 二肽简化物 MDA-113

采用固相合成策略， 选用 Rink-Amide AM树脂 (负载量 0.88mmol/g)， 先后向树脂上引入 Fmoc-Lys(Boc)-COOH, Fmoc-D-iso-Gln-COOH, Fmoc-Ala-COOH和 2-喹啉羧酸， 完成缩合反 应， 充分洗涤抽干树脂， 最后用 90% (体积比） 的三氟乙酸水溶液继续裂解 1 小时， 减压蒸 干溶剂， 冰浴条件下， 向少量残余液中加入大量无水乙醚， 体系内立刻析出白色固体， 过滤， 得到目标产物粗品， 产率 80%。 粗品经 ODS柱层析， 冷冻干燥后， 得到纯度为 98.5%的白色 固体 MDA-113。 实施例 20: 固相合 二肽简化物 MDA-119

采用固相合成策略， 选用 Rink-Amide AM树脂 (负载量 0.88mmol/g)， 先后向树脂上引入 Fmoc-Lys(Boc)-COOH， Fmoc-D-iso-Gln-COOH, Fmoc-Ala-COOH和 2-噻吩基丙烯酸， 完成缩 合反应， 充分洗涤抽干树脂， 最后用 90% (体积比） 的三氟乙酸水溶液继续裂解 1 小时， 减 压蒸干溶剂， 冰浴条件下， 向少量残余液中加入大量无水乙醚， 体系内立刻析出白色固体， 过滤， 得到目标产物粗品， 产率 83%。 粗品经 ODS柱层析， 冷冻干燥后， 得到纯度为 98.5% 的白色固体 MDA-119。 实施例 21 : 固相合成 二肽简化物 MDA-130

采用固相合成策略， 选用 Rink-Amide AM树脂 (负载量 0.88mmol/g)， 先后向树脂上引入 Fmoc-Lys(Boc)-COOH， Fmoc-D-iso-Gln-COOH, Fmoc-Ala-COOH和 2-硝基 -4-氯苯甲酸， 完 成缩合反应， 充分洗涤抽干树脂， 最后用 90% (体积比） 的三氟乙酸水溶液继续裂解 1小时， 减压蒸干溶剂， 冰浴条件下， 向少量残余液中加入大量无水乙醚， 体系内立刻析出白色固体， 过滤， 得到目标产物粗品， 产率 81%。 粗品经 ODS柱层析， 冷冻干燥后， 得到纯度为 98.5% 的白色固体 MDA-130。 实施例 22: 固相合成胞 -133

采用固相合成策略， 选用 Rink-Amide AM树脂 (负载量 0.88mmol/g)， 先后向树脂上引入 Fmoc-Lys(Boc)-COOH, Fmoc-D-iso-Gln-COOH, Fmoc-Ala-COOH和 2-萘氧基乙酸， 完成缩合 反应， 充分洗涤抽干树脂， 最后用 90% (体积比） 的三氟乙酸水溶液继续裂解 1 小时， 减压 蒸干溶剂， 冰浴条件下， 向少量残余液中加入大量无水乙醚， 体系内立刻析出白色固体， 过 滤， 得到目标产物粗品， 产率 88%。 粗品经 ODS柱层析， 冷冻干燥后， 得到纯度为 98.5%的 白色固体 MDA-133。 实施例 23-35: 液相合成共缀物 MTC

实施例 23 : 液相合成共缀物 MTC-220

合成路线如下：

反应试剂与条件： （a) HOSu, EDC-HC1, DMSO, r.t., 20h; (b) MDA, DMSO, r.t., 12h.

9.53g ( l.Oeq)紫杉醇 2'-0-丁二酸单酯、 1.15g ( l.Oeq) HOSu和 1.92g ( l.Oeq) EDC-HC1 溶于二甲基亚砜中， 室温反应 20小时； 然后将 5.08g ( l.Oeq) 胞壁酰二肽衍生物 MDA少量 多次地加入二甲基亚砜中， 用 N-甲基吗啉将反应体系 pH值调节至 7〜8， 继续反应 12小时。 反应完全后， 向反应体系内加入大量水， 体系内析出白色固体， 过滤， 得到目标产物粗品， 经 ODS 柱层析纯化， 冷冻干燥， 得到 11.8g 固体， 产率 82%， m.p.=180〜181 °C， [ a ]=-9.8°(C=10.1mg/mL, DMF)。

DMSO-de): 4.63(1H, br.s, 1-OH), 5.42(1H, d, J=7.2Hz, 2-H), 3.58(1H, d, J=7.2Hz, 3-H), 4.90(1H, m， 5-H), 1.62(1H, m， 6-H _a )， 2.30(1H, m， 6-H _b )，4.12(lH， m， 7-H), 4.91(1H, m， 7-OH), 6.30(1H, s， 10-H), 5.82(1H, t, J=9.0Hz, 13-H), 1.46(1H, m， 14-H _a )， 1.79(1H, m， 14-H _b )， 1.00(3H, s， 16-H), 1.03(3H, s， 17-H), 1.77(3H, s， 18-H), 1.50(3H, s， 19-H), 3.99(1H, d, J=9.0Hz, 20-H _a ), 4.02(1H, d, J=9.0Hz, 20-H _b ), 2.24(3H, s， 4-OCOCH ₃ )， 2.11(3H, s， 10-OCOCH ₃ ), 5.34(1H, d, J=9.0Hz, 2'-H)， 5.54(1H, t, J=9.0Hz, 3 -H), 9.21(1H, d, J=9.0Hz, 3 -NH), 7.48(2H, m， ph-o-H), 7.46(2H, m， ph-m-H), 7.55(1H， t, J=7.2Hz, ph-p-H), 7.83(2H, m， NBz-o-H), 7.44(2H, m， NBz-m-H), 7.19(1H, m， NBz-p-H), 7.98(2H, d, J=7.2Hz, OBz-o-H), 7.66(2H, t, J=7.2Hz, OBz-m-H), 7.74(1H， t, J=7.2Hz, OBz-p-H), 2.61(2H, m， 22-H), 2.36(2H, t, J=7.2Hz, 23 -H), 7.82(1H, m， 25-H), 2.90(1H, m: 26-H _a ), 3.00(1H, m， 26-H _b ), 1.22(2H, m， 27-H), 1.32(2H, m， 28-H), 1.45(1H， m， 29-H _a ), 1.63(1H, m: 29-H _b ), 4.11(1H， m， 30-H), 6.96(1H, s, 32-H _a ), 7.30(1H, s, 32-H _b ), 7.87(1H， m， 33-H), 2.16(2H, t, J=7.2Hz, 35-H), 1.71(1H, m， 36-H _a ), 1.99(1H, m， 36-H _b ), 4.13(1H, m， 37-H), 7.10(1H, s， 39-H _a ), 7.30(1H, s, 39-H _b ), 8.21(1H, d, J=8.4Hz, 40-H), 4.40(1H, t, J=7.2Hz, 42-H), 1.28(3H, d, J=6.6Hz, 43 -H), 8.37(1H, d, J=7.2Hz, 44-H), 6.76(1H, d, J=15.6Hz, 46-H), 7.41(1H, d, J=15.6Hz, 47-H), 7.58(2H, d, J=9.0Hz, 49 and 53-H), 7.49(2H, d, J=9.0Hz, 50 and 52-H).

¹³ C-NMR( 150MHz, DMSO-d ₆ ): 76.7(1-C), 74.5(2-C), 46.1(3-C), 80.2(4-C), 83.6(5-C), 36.5(6-C), 70.4(7-C), 57.4(8-C)， 202.4(9-C), 74.7(10-C), 133.3(11-C)， 139.2(12-C), 70.7(13-C), 34.7(14_C), 42.9(15-C), 26.3(16-C), 21.4(17-C), 13.9(18-C), 9.8(19-C), 75.3(20-C), 165.2(2-OCO), 169.6, 22.5(4-OCOCH ₃ ), 168.8， 20.6(10-OCOCH ₃ ), 169.1(1 -C), 74.4(2'-C)， 54.0(3 -C), 166.4(3 -NHCO), 137.3(ph-q-C), 127.7(ph-o-C), 128.3(ph-m-C), 131.5(ph-p-C), 129.9(NBz-q-C) _; 127.4(NBz-o-C), 129.0(NBz-m-C), 128.2(NBz-p-C), 134.3(OBz-q-C), 129.6(OBz-o-C) _; 128.7(OBz-m-C), 133.5(OBz-p-C), 172.0(21-C), 28.8(22-C), 29.5(23-C), 170.0(24-C), 38.5(26-C) _; 28.5(27-C), 22.9(28-C), 31.6(29-C), 52.3(30-C), 173.9(31-C), 171.5(34-C), 31.7(35-C), 27.7(36-C) _; 52.1(37-C), 173.3(38-C), 172.3(41-C), 48.8(42-C), 18.1(43-C), 164.7(45-C), 122.7(46-C) _; 137.6(47-C), 133.8(48-C), 129.0(49 and 53-C), 129.2(50 and 52-C), 133.9(51-C).

IR: 3316.9(v _OH and VNH), 3066.0(V= _C H), 2935.0, 2873.1(v _-CH ), 1736.0, 1655.0(v _c =o), 1537.3， 1492.9(v _c =c), 1451.7, 1371.8(5 _-CH ), 1241.5(v _c-0-c )， 980.2, 906.6, 822.6, 776.2, 708.9(5 _=CH ).

ESI-MS: 1444.56 [M+H]+， 1466.46 [M+Na] ⁺ .

HR-MS(TOF): 1444.5645 [M+H]+， 1466.5475 [M+Na] ⁺ , C ₇₄ H ₈₆ C1N ₇ 0 ₂₁ .

实施例 24: 液相合成共缀 MTC-301

将 953mg( l.Oeq)紫杉醇 2'-0-丁二酸单酯、 115mg( 1.0eq)HOSu和 192mg( 1.0eq)EDC-HCl 溶于二甲基亚砜中， 室温反应 4 小时； 然后将 490mg ( l.Oeq) 胞壁酰二肽简化物 MDA-201 少量多次地加入二甲基亚砜中， 用 N-甲基吗啉将反应体系 pH值调节至 7〜8， 继续反应 4小 时。 反应完全后， 向反应体系内加入大量水， 体系内析出白色固体， 过滤， 得到目标产物粗 品， 经 ODS柱层析纯化， 冷冻干燥， 得到 U8g固体， 产率 83%， m.p.=179〜180°C。

'Η-丽 R(500MHz， DMSO-d ₆ ): 4.62(1H, br.s, 1-OH), 5.40(1H, d, J=7.0Hz, 2-H), 3.56(1H, d, J=7.0Hz, 3-H), 4.89(1H, m， 5-H), 1.62(1H, m， 6-H _a )， 2.31(1H, m， 6-H _b )，4.12(lH， m， 7-H), 4.92(1H, m， 7-OH), 6.28(1H, s， 10-H), 5.81(1H， t, J=7.5Hz, 13-H), 1.46(1H, m， 14-H _a )， 1.75(1H， m， 14-H _b ), 1.01(3H, s， 16-H), 1.04(3H, s， 17-H), 1.78(3H, s， 18-H), 1.48(3H, s， 19-H), 3.99(1H, d, J=8.5Hz, 20-H _a ), 4.00(1H, d, J=8.5Hz, 20-H _b ), 2.23(3H, s， 4-OCOCH ₃ )， 2.10(3H, s， 10-OCOCH ₃ ), 5.33(1H, d, J=9.0Hz, 2 -H), 5.52(1H, t, J=9.0Hz, 3 -H), 9.21(1H, d, J=8.5Hz, 3 -NH), 7.48(2H, d, J=7.5Hz, ph-o-H), 7.47(2H, d, J=7.5Hz, ph-m-H), 7.55(1H, t, J=7.5Hz, ph-p-H), 7.83(2H, m， NBz-o-H), 7.43(2H, m， NBz-m-H), 7.17(1H, m， NBz-p-H), 7.98(2H, d, J=7.5Hz, OBz-o-H), 7.65(2H, t, J=8.0Hz, OBz-m-H), 7.74(1H, t, J=7.5Hz, OBz-p-H), 2.72(2H, m， 22-H), 2.35(2H, t, J=7.0Hz, 23 -H), 7.82(1H, m， 25-H), 2.96(1H, m， 26-H _a ), 3.00(1H, m， 26-H _b ), 1.22(2H, m， 27-H), 1.32(2H, m， 28-H), 1.45(1H， m， 29-H _a ), 1.62(1H, m， 29-H _b ), 4.10(1H, m， 30-H), 6.96(1H, s， 32-H _a ), 7.30(1H, m， 32-H _b ), 7.86(1H， m， 33-H), 2.14(2H, t, J=8.0Hz, 35-H), 1.75(1H， m， 36-H _a ), 1.99(1H, m， 36-H _b ), 4.11(1H, m， 37-H), 7.10(1H, s， 39-H _a ), 7.30(1H, m， 39-H _b ), 8.19(1H, d, J=8.0Hz, 40-H), 4.36(1H, m， 42-H), 1.25(3H, d, J=7.0Hz, 43 -H), 8.22(1H, d, J=6.5Hz, 44-H), 6.51(1H, d, J=15.5Hz, 46-H), 7.32(1H, d, J=15.5Hz, 47-H), 7.46(2H, d, J=8.5Hz, 49 and 53-H), 6.78(2H, d, J=8.5Hz, 50 and 52-H), 9.85(1H, s， 51-OH). ^1J C-NMR(125MHz, DMSO-d ₆ ): 76.7(1-C), 74.5(2-C), 46.1(3-C), 80.3(4-C), 83.6(5-C) _; 36.5(6-C), 70.4(7-C), 57.4(8-C)， 202.4(9-C), 74.7(10-C), 133.3(11-C)， 139.2(12-C), 70.4(13-C) _; 34.7(14_C), 42.9(15-C), 26.3(16-C), 21.4(17-C), 13.9(18-C), 9.8(19-C), 75.3(20-C), 165.2(2-OCO) _: 169.6, 22.6(4-OCOCH ₃ ), 168.8， 20.7(10-OCOCH ₃ ), 169.2(1 -C), 74.4(2'-C)， 54.0(3 -C) _; 166.4(3 -NHCO), 137.4(ph-q-C), 127.7(ph-o-C), 128.3(ph-m-C), 131.5(ph-p-C), 129.9(NBz-q-C) _; 127.5(NBz-o-C), 129.0(NBz-m-C), 128.2(NBz-p-C), 134.3(OBz-q-C), 129.6(OBz-o-C) _; 128.7(OBz-m-C), 133.5(OBz-p-C), 172.0(21-C), 28.8(22-C), 29.5(23-C), 170.0(24-C), 38.5(26-C) _; 28.5(27-C), 22.9(28-C), 31.6(29-C), 52.4(30-C), 173.9(31-C), 171.6(34-C), 31.8(35-C), 27.7(36-C) _; 52.1(37-C), 173.3(38-C), 172.3(41-C), 48.8(42-C), 18.0(43-C), 164.7(45-C), 118.2(46-C) _; 137.4(47_C), 125.8(48-C), 127.5(49 and 53-C), 115.8(50 and 52-C), 158.9(51-C).

IR: 3324.4(v _OH and VNH), 3075.1(V= _C H), 1740.6, 1657.2(v _c =o), 1603.9, 1518.3, 1450.8(v _c =c) _: 1243.4(v _C -o-c), 980.6, 710.3(5= _CH ).

ESI-MS: 1426.31 [M+H]+， 1449.03 [M+Na+H] ²⁺ .

HR-MS(TOF): 1426.5974 [M+H]+， 1448.5786 [M+Na] ⁺ , C ₇₄ H ₈₇ N ₇ 0 ₂₂ .

实施例 25: 液相合成共 -302

将 953mg( l.Oeq)紫杉醇 2'-0-丁二酸单酯、 115mg( 1.0eq)HOSu和 192mg( 1.0eq)EDC-HCl 溶于二甲基亚砜中， 室温反应 4 小时； 然后将 488mg ( l.Oeq) 胞壁酰二肽简化物 MDA-202 少量多次地加入二甲基亚砜中， 用 N-甲基吗啉将反应体系 pH值调节至 7〜8， 继续反应 4小 时。 反应完全后， 向反应体系内加入大量水， 体系内析出白色固体， 过滤， 得到目标产物粗 品， 经 ODS柱层析纯化， 冷冻干燥， 得到 1.09g固体， 产率 77%， m.p.=172〜174°C。

^-NMRCSOOMHz, DMSO-d ₆ ): 4.63(1H, br.s, 1-OH), 5.40(1H, d, J=7.0Hz, 2-H), 3.56(1H, d, J=7.0Hz, 3-H), 4.89(1H, m， 5-H), 1.62(1H, m， 6-H _a )， 2.31(1H, m， 6-H _b )，4.12(lH， m， 7-H), 4.91(1H, m， 7-OH), 6.28(1H, s， 10-H), 5.81(1H， t, J=9.5Hz, 13-H), 1.46(1H， m， 14-H _a )， 1.79(1H, m， 14-H _b )， 0.98(3H, s， 16-H), 1.01(3H, s， 17-H), 1.75(3H, s， 18-H), 1.48(3H, s， 19-H), 3.99(1H, d, J=8.0Hz, 20-H _a ), 4.01(1H， d, J=8.0Hz, 20-H _b ), 2.23(3H, s， 4-OCOCH ₃ )， 2.09(3H, s， 10-OCOCH ₃ ), 5.34(1H, d, J=9.0Hz, 2'-H)， 5.52(1H, t, J=9.0Hz, 3 -H), 9.21(1H, d, J=8.5Hz, 3 -NH), 7.49(2H, m， ph-o-H), 7.48(2H, m， ph-m-H), 7.55(1H, d, J=7.5Hz, ph-p-H), 7.85(2H, m， NBz-o-H), 7.46(2H, m， NBz-m-H), 7.18(1H, m， NBz-p-H), 7.97(2H, d, J=8.0Hz, OBz-o-H), 7.65(2H, d, J=7.5Hz, OBz-m-H), 7.72(1H, d, J=7.0Hz, OBz-p-H), 2.60(2H, m， 22-H), 2.36(2H, m， 23 -H), 7.84(1H， m， 25-H), 2.91(1H, m， 26-H _a ), 2.96(1H, m， 26-H _b ), 1.22(2H, m， 27-H), 1.32(2H, m， 28-H), 1.44(1H， m， 29-H _a ), 1.62(1H, m， 29-H _b ), 4.11(1H， m， 30-H), 6.96(1H, s， 32-H _a ), 7.30(1H, m， 32-H _b ), 7.86(1H， m， 33-H), 2.16(2H, m， 35-H), 1.75(1H， m， 36-H _a ), 1.99(1H, m， 36-H _b ), 4.12(1H, m， 37-H), 7.10(1H, s, 39-H _a ), 7.22(1H, m， 39-H _b ), 8.21(1H, d, J=8.0Hz, 40-H), 4.37(1H, m， 42-H), 1.28(3H, d, J=7.0Hz _; 43 -H), 8.31(1H, d, J=6.5Hz, 44-H), 6.68(1H, d, J=15.5Hz, 46-H), 7.43(1H, d, J=l 6.0Hz, 47-H), 7.57(1H， m， 49 and 53-H), 7.49(1H, m， 50 and 52-H), 2.31(3H, m， 51-CH ₃ ).

¹³ C-NMR(125MHz, DMSO-d ₆ ): 76.7(1-C), 74.5(2-C), 46.1(3-C), 80.2(4-C), 83.6(5-C): 36.5(6-C), 70.4(7-C), 57.4(8-C 202.4(9-C), 74.7(10-C), 133.3(11-C 139.4(12-C), 70.7(13-C): 34.7(14_C), 42.9(15-C), 26.3(16-C), 21.4(17-C), 13.9(18-C), 9.8(19-C), 75.3(20-C), 165.2(2-OCO) _; 169.7, 22.6(4-OCOCH ₃ ), 168.8， 20.7(10-OCOCH ₃ ), 169.1(1 -C), 74.6(2'-C 54.0(3 -0), 166.4(3 -NHCO), 137.4(ph-q-C), 127.7(ph-o-C), 128.3(ph-m-C), 131.5(ph-p-C), 129.9(NBz-q-C): 127.5(NBz-o-C), 129.0(NBz-m-C), 128.3(NBz-p-C), 134.3(OBz-q-C), 129.6(OBz-o-C): 128.7(OBz-m-C), 133.5(OBz-p-C), 172.0(21-C), 28.8(22-C), 29.5(23-C), 170.0(24-C), 38.5(26-C): 28.7(27-C), 23.0(28-C), 31.6(29-C), 52.3(30-C), 173.9(31-C), 171.5(34-C), 31.7(35-C), 27.7(36-C): 52.1(37-C), 173.3(38-C), 172.4(41-C), 48.8(42-C), 18.1(43-C), 165.1(45-C), 120.8(46-C): 137.4(47_C), 132.1(48-C), 129.6(49 and 53-C), 128.7(50 and 52-C), 138.9(51-C), 20.9(51-CH ₃ ).

IR: 3324.5(v _OH and VNH), 3066.3(V= _C H), 2938.3(V _-ch ), 1740.3, 1724.1, 1657.2(v _c =o), 1603.9, 1535.1, 1451.8(v _c =c), 1242.8(v _C -o-c), 981.3, 709.7(5= _CH ).

ESI-MS: 1424.33 [M+H]+， 1446.55 [M+Na] ⁺ .

HR-MS(TOF): 1424.6184 [M+H]+， 1446.5996 [M+Na] ⁺ , C ₇₅ H ₈₉ N ₇ 0 ₂₁ .

实施例 26: 液相合成共 -303

将 953mg( l.Oeq)紫杉醇 2'-0-丁二酸单酯、 115mg( 1.0eq)HOSu和 192mg( 1.0eq)EDC-HCl 溶于二甲基亚砜中， 室温反应 4 小时； 然后将 510mg ( l.Oeq) 胞壁酰二肽简化物 MDA-203 少量多次地加入二甲基亚砜中， 用 N-甲基吗啉将反应体系 pH值调节至 7〜8， 继续反应 4小 时。 反应完全后， 向反应体系内加入大量水， 体系内析出白色固体， 过滤， 得到目标产物粗 品， 经 ODS柱层析纯化， 冷冻干燥， 得到 1.29g固体， 产率 89%， m.p.=178〜180°C。

R(500MHz， DMSO-de): 4.62(1H, br.s, 1-OH), 5.40(1H, d, J=7.0Hz, 2-H), 3.56(1H, d, J=7.0Hz, 3-H), 4.91(1H, m， 5-H), 1.62(1H, m， 6-H _a 2.31(1H, m， 6-H _b ), 4.13(lH, m， 7-H), 4.92(1H, m， 7-OH), 6.28(1H, s， 10-H), 5.80(1H, t, J=7.5Hz, 13-H), 1.45(1H， m， 14-H _a 1.77(1H， m， 14-H _b 0.98(3H, s， 16-H), 1.01(3H, s， 17-H), 1.75(3H, s， 18-H), 1.48(3H, s， 19-H), 3.98(1H, d, J=8.0Hz, 20-H _a ), 4.00(1H, d, J=8.0Hz, 20-H _b ), 2.23(3H, s， 4-OCOCH ₃ 2.10(3H, s， 10-OCOCH ₃ ), 5.33(1H, d, J=9.0Hz, 2'-H 5.52(1H, t, J=9.0Hz, 3 -H), 9.21(1H, d, J=8.5Hz, 3 -NH), 7.48(2H, m， ph-o-H), 7.46(2H, m， ph-m-H), 7.55(1H， t, J=7.5Hz, ph-p-H), 7.82(2H, m， NBz-o-H), 7.44(2H, m， NBz-m-H), 7.18(1H, m， NBz-p-H), 7.97(2H, d, J=7.5Hz, OBz-o-H), 7.67(2H, m， OBz-m-H), 7.72(1H, d, J=8.0Hz, OBz-p-H), 2.60(2H, m， 22-H), 2.36(2H, m， 23 -H), 7.82(1H, m， 25-H), 2.90(1H, m， 26-H _a ), 2.96(1H, m， 26-H _b ), 1.22(2H, m， 27-H), 1.32(2H, m， 28-H), 1.45(1H， m， 29-H _a ), 1.62(1H, m， 29-H _b ) _; 4.11(1H， m， 30-H), 7.06(1H, s， 32-H _a ), 7.29(1H, m， 32-H _b ), 7.87(1H， m， 33-H), 2.14(2H, m， 35-H), 1.75(1H， m， 36-H _a ), 2.06(1H, m， 36-H _b ), 4.13(1H, m， 37-H), 7.11(1H， s, 39-H _a ), 7.29(1H, m， 39-H _b ), 8.23(1H, d, J=8.5Hz, 40-H), 4.40(1H, m， 42-H), 1.27(3H, m， 43 -H), 8.47(1H， d, J=6.5Hz, 44-H), 6.89(1H, d, J=17.0Hz, 46-H), 7.41(1H， d, J=16.0Hz, 47-H), 7.34(1H, td, J=11.5 and 2.0Hz, 50-H), 7.17(1H， m， 52-H), 7.74(1H， m， 53-H).

¹³ C-NMR(125MHz, DMSO-d ₆ ): 76.7(1-C), 74.5(2-C), 46.1(3-C), 80.2(4-C), 83.6(5-C), 36.5(6-C), 70.4(7-C), 57.4(8-C)， 202.4(9-C), 74.7(10-C), 133.3(11-C)， 139.6(12-C), 70.7(13-C), 34.7(14_C), 42.9(15-C), 26.3(16-C), 21.4(17-C), 13.9(18-C), 9.8(19-C), 75.3(20-C), 165.2(2-OCO), 169.7, 22.6(4-OCOCH ₃ ), 168.8， 20.7(10-OCOCH ₃ ), 169.1(1 -C), 74.6(2'-C)， 54.0(3 -C), 166.4(3 -NHCO), 137.4(ph-q-C), 127.7(ph-o-C), 128.3(ph-m-C), 131.5(ph-p-C), 129.9(NBz-q-C), 127.5(NBz-o-C), 129.0(NBz-m-C), 128.2(NBz-p-C), 134.3(OBz-q-C), 129.6(OBz-o-C), 128.7(OBz-m-C), 133.5(OBz-p-C), 172.0(21-C), 28.8(22-C), 29.5(23-C), 170.0(24-C), 38.5(26-C), 28.7(27-C), 23.0(28-C), 31.6(29-C), 52.3(30-C), 173.9(31-C), 171.5(34-C), 31.7(35-C), 27.7(36-C), 52.1(37-C), 173.3(38-C), 172.3(41-C), 48.9(42-C), 18.1(43-C), 164.6(45-C), 124.4(s, 46-C), 137.4(s _; 47-C), 118.5(m, 48-C), 161.7(m, 49-C), 104.6(t, J=26.1Hz, 50-C), 163.7(m, 51-C), 112.4(d, J=19.9Hz, 52-C), 130.5(m, 53-C).

IR: 3309.5(v _OH and VNH), 3067.0(V= _C H), 2945.0(V _-ch ), 1722.0, 1653.8(v _c =o), 1531.1, 1451.5(v _c =c), 1239.9(v _C -o-c), 977.1, 708.3(5= _CH ).

ESI-MS: 1446.03 [M+H] ⁺ , 1468.26 [M+Na] ⁺ .

HR-MS(TOF): 1446.5877 [M+H]+， 1468.5646 [M+Na] ⁺ , C ₇₄ H ₈₅ F ₂ N ₇ 0 ₂₁

实施例 27: 液相合成共缀 MTC-304

将 953mg( l.Oeq)紫杉醇 2'-0-丁二酸单酯、 115mg( 1.0eq)HOSu和 192mg( 1.0eq)EDC-HCl 溶于二甲基亚砜中， 室温反应 4 小时； 然后将 526mg ( l.Oeq) 胞壁酰二肽简化物 MDA-204 少量多次地加入二甲基亚砜中， 用 N-甲基吗啉将反应体系 pH值调节至 7〜8， 继续反应 4小 时。 反应完全后， 向反应体系内加入大量水， 体系内析出白色固体， 过滤， 得到目标产物粗 品， 经 ODS柱层析纯化， 冷冻干燥， 得到 1.26g固体， 产率 86%， m.p.=179〜180°C。

'Η-丽 R(500MHz， DMSO-d ₆ ): 4.63(1H, br.s, 1-OH), 5.40(1H, d, J=7.5Hz, 2-H), 3.56(1H, d, J=7.0Hz, 3-H), 4.91(1H, m， 5-H), 1.62(1H, m， 6-H _a )， 2.31(1H, m， 6-H _b )，4.12(lH， m， 7-H), 4.91(1H, m， 7-OH), 6.28(1H, s， 10-H), 5.80(1H, t, J=9.0Hz, 13-H), 1.45(1H， m， 14-H _a ), 1.78(1H, m， 14-H _b ), 0.98(3H, s， 16-H), 1.01(3H, s， 17-H), 1.77(3H, s， 18-H), 1.48(3H, s， 19-H), 3.98(1H, d, J=8.0Hz, 20-H _a ), 4.01(1H， d, J=8.0Hz, 20-H _b ), 2.23(3H, s， 4-OCOCH ₃ )， 2.10(3H, s， 10-OCOCH ₃ ), 5.33(1H, d, J=9.0Hz, 2'-H)， 5.52(1H, t, J=9.0Hz, 3 -H), 9.21(1H, d, J=8.5Hz, 3 -NH), 7.48(2H, m， ph-o-H), 7.45(2H, m， ph-m-H), 7.55(1H, m， ph-p-H), 7.84(2H， m， NBz-o-H), 7.44(2H, m， NBz-m-H), 7.16(1H, m， NBz-p-H), 7.97(2H, d, J=7.0Hz, OBz-o-H), 7.66(2H, m， OBz-m-H), 7.74(1H, d, J=7.5Hz, OBz-p-H), 2.61(2H, m， 22-H), 2.35(2H, m， 23 -H), 7.84(1H， m， 25-H), 2.91(1H, m， 26-H _a ), 2.96(1H, m， 26-H _b ), 1.21(2H, m， 27-H), 1.32(2H, m， 28-H), 1.45(1H， m， 29-H _a ), 1.62(1H, m， 29-H _b ), 4.11(1H, m， 30-H), 6.96(1H, s， 32-H _a ), 7.30(1H, m， 32-H _b ), 7.87(1H， m， 33-H), 2.14(2H, m， 35-H), 1.75(1H， m， 36-H _a ), 1.98(1H, m， 36-H _b ), 4.13(1H, m， 37-H), 7.10(1H, s， 39-H _a ), 7.30(1H, m， 39-H _b ), 8.23(1H, d, J=8.0Hz, 40-H), 4.40(1H, m， 42-H), 1.29(3H, m 43 -H), 8.51(1H, d, J=6.5Hz, 44-H), 6.85(1H， d, J= 16.0Hz, 46-H), 7.43(1H, d, J=16.0Hz, 47-H), 7.54(1H， m， 50-H), 7.35(1H, dd, J=8.5 and 2.0Hz, 52-H), 7.71(1H， m， 53-H).

¹³ C-NMR(125MHz, DMSO-d ₆ ): 76.7(1-C), 74.5(2-C), 46.1(3-C), 80.2(4-C), 83.6(5-C), 36.5(6-C), 70.4(7-C), 57.4(8-C)， 202.3(9-C), 74.7(10-C), 133.3(11-C)， 139.4(12-C), 70.7(13-C), 34.4(14_C), 42.9(15-C), 26.3(16-C), 21.4(17-C), 13.9(18-C), 9.7(19-C), 75.2(20-C), 165.2(2-OCO), 169.6, 22.5(4-OCOCH ₃ ), 168.7， 20.6(10-OCOCH ₃ ), 169.1(1 -C), 74.7(2'-C)， 54.0(3 -C), 166.4(3 -NHCO), 137.3(ph-q-C), 127.6(ph-o-C), 128.3(ph-m-C), 131.4(ph-p-C), 129.9(NBz-q-C), 127.4(NBz-o-C), 129.0(NBz-m-C), 128.1(NBz-p-C), 134.2(OBz-q-C), 129.5(OBz-o-C), 128.6(OBz-m-C), 133.5(OBz-p-C), 172.0(21-C), 28.8(22-C), 29.5(23-C), 170.0(24-C), 38.5(26-C), 28.7(27-C), 22.9(28-C), 31.6(29-C), 52.3(30-C), 173.9(31-C), 171.5(34-C), 31.7(35-C), 27.7(36-C), 52.1(37-C), 173.2(38-C), 172.2(41-C), 48.9(42-C), 18.0(43-C), 164.4(45-C), 125.3(m, 46-C), 137.3(m, 47-C), 122. l(d, J=11.8Hz, 48-C), 160.2(d, J=252.6Hz, 49-C), 116.7(d, J=25.5Hz, 50-C), 134.6(d, J= 10.9Hz, 51-C), 125.4(s, 52-C), 130.3(s, 53-C).

IR: 3324.5(v _OH and VNH), 3066.4(V= _C H), 2939.7(V _-ch ), 1739.5, 1724.2, 1657.7(v _c =o), 1604.5, 1534.2, 1451.8(v _c =c), 1242.6(v _C -o-c), 981.6, 708.7(5= _CH ).

ESI-MS: 1462.59 [M+H]+， 1484.93 [M+Na] ⁺ .

HR-MS(TOF): 1462.5540 [M+H]+， 1484.5361 [M+Na] ⁺ , C ₇₄ H ₈₆ C1FN ₇ 0 ₂₁ .

实施例 28: 液相合成共 -305

将 953mg( l.Oeq)紫杉醇 2'-0-丁二酸单酯、 115mg( 1.0eq)HOSu和 192mg( 1.0eq)EDC-HCl 溶于二甲基亚砜中， 室温反应 4 小时； 然后将 526mg ( l.Oeq) 胞壁酰二肽简化物 MDA-205 少量多次地加入二甲基亚砜中， 用 N-甲基吗啉将反应体系 pH值调节至 7〜8， 继续反应 4小 时。 反应完全后， 向反应体系内加入大量水， 体系内析出白色固体， 过滤， 得到目标产物粗 品， 经 ODS柱层析纯化， 冷冻干燥， 得到 U8g固体， 产率 81%， m.p.=171〜172°C。

^-NMRCSOOMHz, DMSO-d ₆ ): 4.63(1H, br.s, 1-OH), 5.40(1H, d, J=7.0Hz, 2-H), 3.56(1H, d, J=7.0Hz, 3-H), 4.91(1H, m， 5-H), 1.62(1H, m， 6-H _a )， 2.31(1H, m， 6-H _b )，4.12(lH， m， 7-H), 4.92(1H, m， 7-OH), 6.28(1H, s， 10-H), 5.80(1H, t, J=9.0Hz, 13-H), 1.46(1H， m， 14-H _a )， 1.77(1H， m， 14-H _b )， 0.98(3H, s， 16-H), 1.01(3H, s， 17-H), 1.75(3H, s， 18-H), 1.48(3H, s， 19-H), 3.99(1H, d, J=8.0Hz, 20-H _a ), 4.02(1H, d, J=8.0Hz, 20-H _b ), 2.23(3H, s， 4-OCOCH ₃ )， 2.10(3H, s， 10-OCOCH ₃ ), 5.34(1H, d, J=9.0Hz, 2'-H)， 5.52(1H, t, J=9.0Hz, 3 -H), 9.21(1H, d, J=8.5Hz, 3 -NH), 7.48(2H, m， ph-o-H), 7.47(2H, m， ph-m-H), 7.55(1H, m， ph-p-H), 7.84(2H， m， NBz-o-H), 7.44(2H, m， NBz-m-H), 7.18(1H, m， NBz-p-H), 7.97(2H, d, J=7.5Hz, OBz-o-H), 7.66(2H, m OBz-m-H), 7.74(1H, m， OBz-p-H), 2.58(2H, m， 22-H), 2.33(2H, t, J=7.0Hz, 23 -H), 7.82(1H, m， 25-H), 2.91(1H, m， 26-H _a ), 2.96(1H, m， 26-H _b ), 1.23(2H, m， 27-H), 1.33(2H, m， 28-H), 1.45(1H， m， 29-H _a ), 1.62(1H, m， 29-H _b ), 4.11(1H, m， 30-H), 6.96(1H, s， 32-H _a ), 7.30(1H, m， 32-H _b ), 7.86(1H， m， 33-H), 2.15(2H, t, J=8.0Hz, 35-H), 1.71(1H， m， 36-H _a ), 1.99(1H, m， 36-H _b ), 4.13(1H, m， 37-H), 7.12(1H, s， 39-H _a ), 7.30(1H, m， 39-H _b ), 8.25(1H, d, J=8.5Hz, 40-H), 4.41(1H， m， 42-H), 1.28(3H, d, J=7.0Hz, 43 -H), 8.45(1H， d, J=6.5Hz, 44-H), 6.77(1H, d, J=16.0Hz, 46-H), 7.66(1H， d, J=16.0Hz, 47-H), 7.54(1H， m， 50-H), 7.33(1H, td, J=8.5 and 1.5Hz, 52-H), 7.76(1H， m， 53-H).

¹³ C-NMR(125MHz, DMSO-d ₆ ): 76.7(1-C), 74.5(2-C), 46.1(3-C), 80.2(4-C), 83.6(5-C), 36.5(6-C), 70.4(7-C), 57.4(8-C)， 202.4(9-C), 74.7(10-C), 133.3(11-C)， 139.4(12-C), 70.7(13-C), 34.7(14_C), 42.9(15-C), 26.3(16-C), 21.4(17-C), 13.9(18-C), 9.8(19-C), 75.3(20-C), 165.2(2-OCO), 169.7, 22.6(4-OCOCH ₃ ), 168.8， 20.7(10-OCOCH ₃ ), 169.1(1 -C), 74.6(2'-C)， 54.0(3 -C), 166.4(3 -NHCO), 137.4(ph-q-C), 127.7(ph-o-C), 128.3(ph-m-C), 131.5(ph-p-C), 129.9(NBz-q-C), 127.5(NBz-o-C), 129.1(NBz-m-C), 128.3(NBz-p-C), 134.3(OBz-q-C), 129.6(OBz-o-C), 128.7(OBz-m-C), 133.5(OBz-p-C), 172.0(21-C), 28.8(22-C), 29.5(23-C), 170.0(24-C), 38.5(26-C), 28.7(27-C), 23.0(28-C), 31.6(29-C), 52.3(30-C), 173.9(31-C), 171.5(34-C), 31.7(35-C), 27.7(36-C), 52.1(37-C), 173.2(38-C), 172.2(41-C), 48.8(42-C), 18.2(43-C), 164.2(45-C), 124.9(46-C), 137.4(47_C), 128.8(48-C), 134.3(49-C), 115.4(d, J=21.5Hz, 50-C), 162.2(d, J=249.1Hz, 51-C), 117.2(d, J=25.1Hz, 52-C), 129.9(53-C).

IR: 3315.4(v _OH and VNH), 3069.3(V= _C H), 2935.0(V _-ch ), 1722.8, 1656.5(v _c = ₀ ), 1601.8, 1534.3, 1451.5(v _c =c), 1239.3(v _C -o-c), 978.5, 709.7(5= _CH ).

ESI-MS: 1462.89 [M+H]+， 1484.21 [M+Na] ⁺ .

HR-MS(TOF): 1462.5541 [M+H]+， 1484.5350 [M+Na] ⁺ , C ₇₄ H ₈₅ C1FN ₇ 0 ₂₁ .

实施例 29: 液相合成共缀物 MTC-306

将 953mg( l.Oeq)紫杉醇 2'-0-丁二酸单酯、 115mg( 1.0eq)HOSu和 192mg( 1.0eq)EDC-HCl 溶于二甲基亚砜中， 室温反应 4 小时； 然后将 492mg ( l.Oeq) 胞壁酰二肽简化物 MDA-206 少量多次地加入二甲基亚砜中， 用 N-甲基吗啉将反应体系 pH值调节至 7〜8， 继续反应 4小 时。 反应完全后， 向反应体系内加入大量水， 体系内析出白色固体， 过滤， 得到目标产物粗 品， 经 ODS柱层析纯化， 冷冻干燥， 得到 1.24g固体， 产率 87%， m.p.=176〜178°C。

R(500MHz， DMSO-de): 4.61(1H， br.s, 1-OH), 5.41(1H， d, J=6.0Hz, 2-H), 3.56(1H, d, J=5.5Hz, 3-H), 4.91(1H, m， 5-H), 1.62(1H, m， 6-H _a 2.30(1H, m， 6-H _b 4.11(lH， m， 7-H), 4.91(1H, m， 7-OH), 6.28(1H, s， 10-H), 5.81(1H， m， 13-H), 1.49(1H, m， 14-H _a ), 1.82(1H, m， 14-H _b ), 0.99(3H, s, 16-H), 1.01(3H, s， 17-H), 1.76(3H, s， 18-H), 1.49(3H, s， 19-H), 3.99(1H, d, J=5.5Hz, 20-H _a ), 4.00(1H, d, J=5.5Hz, 20-H _b ), 2.23(3H, s， 4-OCOCH ₃ 2.10(3H, s, 10-OCOCH ₃ ), 5.33(1H, d, J=8.5Hz, 2'-H 5.52(1H, t, J=8.5Hz, 3 -H), 9.20(1H, d, J=8.0Hz, 3 -NH), 7.48(2H, m， ph-o-H), 7.46(2H, m， ph-m-H), 7.52(1H, m， ph-p-H), 7.84(2H， m， NBz-o-H), 7.43(2H, m， NBz-m-H), 7.19(1H, m， NBz-p-H), 7.98(2H, d, J=7.5Hz, OBz-o-H), 7.67(2H, m， OBz-m-H), 7.72(1H, m， OBz-p-H), 2.59(2H, m， 22-H), 2.35(2H, m， 23 -H), 7.81(1H， m， 25-H), 2.91(1H, m， 26-H _a ), 2.96(1H, m， 26-H _b ), 1.22(2H, m， 27-H), 1.32(2H, m， 28-H), 1.45(1H， m， 29-H _a ), 1.62(1H, m， 29-H _b ), 4.11(1H _; m， 30-H), 6.94(1H, s， 32-H _a ), 7.28(1H, m， 32-H _b ), 7.85(1H， m， 33-H), 2.15(2H, m， 35-H), 1.76(1H, m， 36-H _a ), 1.98(1H, m， 36-H _b ), 4.13(1H, m， 37-H), 7.09(1H, s， 39-H _a ), 7.28(1H, m， 39-H _b ), 8.20(1H, d, J=7.5Hz, 40-H), 4.40(1H, m， 42-H), 1.26(3H, m， 43 -H), 8.35(1H, d, J=4.5Hz, 44-H), 6.79(1H, d, J=15.5Hz, 46-H), 7.40(1H, d, J=15.5Hz, 47-H), 7.81(2H, m， 49 an 53-H), 7.39(2H, m， 50 snd 52-H).

¹³ C-NMR(125MHz, DMSO-d ₆ ): 76.7(1-C), 74.5(2-C), 46.1(3-C), 80.2(4-C), 83.6(5-C), 36.5(6-C), 70.4(7-C), 57.4(8-C 202.3(9-C), 74.7(10-C), 133.3(11-C 139.4(12-C), 70.7(13-C), 34.7(14_C), 42.9(15-C), 26.3(16-C), 21.4(17-C), 13.9(18-C), 9.7(19-C), 75.3(20-C), 165.2(2-OCO), 169.6, 22.5(4-OCOCH ₃ ), 168.8， 20.6(10-OCOCH ₃ ), 169.1(1 -C), 74.7(2'-C 54.0(3 -C), 166.4(3 -NHCO), 137.3(ph-q-C), 127.6(ph-o-C), 128.3(ph-m-C), 131.5(ph-p-C), 129.9(NBz-q-C), 127.4(NBz-o-C), 129.0(NBz-m-C), 128.3(NBz-p-C), 134.2(OBz-q-C), 129.5(OBz-o-C), 128.6(OBz-m-C), 133.5(OBz-p-C), 172.0(21-C), 28.8(22-C), 29.5(23-C), 170.0(24-C), 38.5(26-C), 28.7(27-C), 23.0(28-C), 31.6(29-C), 52.3(30-C), 173.9(31-C), 171.5(34-C), 31.7(35-C), 27.7(36-C), 52.1(37-C), 173.2(38-C), 172.3(41-C), 48.9(42-C), 18.1(43-C), 164.5(45-C), 123.5(s, 46-C), 137.4(s _; 47-C), 133.5(s, 48-C), 130.9(d, J=8.3Hz, 49 and 53-C), 116.2(d, J=21.2Hz, 50 and 52-C), 162.4(d, J=242.4Hz, 51-C).

IR: 3310.1(v _OH and VNH 3063.6(V= _C H), 2939.5(V _-ch ), 1740.5, 1724.1, 1658.2(v _c =o), 1582.5, 1536.0, 1450.0(v _c =c), 1243.5(v _C -o-c), 978.0, 779.7, 709.5(5= _CH ).

ESI-MS: 1429.41 [M+2H] ²⁺ , 1451.54 [M+Na+H] ^{2 +} .

HR-MS(TOF): 1428.5950 [M+H]+， 1450.5743 [M+Na] ⁺ , C ₇₄ H ₈₆ FN ₇ 0 ₂₁ .

实施例 30: 液相合成共缀物 -307

将 953mg( l.Oeq)紫杉醇 2'-0-丁二酸单酯、 115mg( 1.0eq)HOSu和 192mg( 1.0eq)EDC-HCl 溶于二甲基亚砜中， 室温反应 4 小时； 然后将 492mg ( l.Oeq) 胞壁酰二肽简化物 MDA-207 少量多次地加入二甲基亚砜中， 用 N-甲基吗啉将反应体系 pH值调节至 7〜8， 继续反应 4小 时。 反应完全后， 向反应体系内加入大量水， 体系内析出白色固体， 过滤， 得到目标产物粗 品， 经 ODS柱层析纯化， 冷冻干燥， 得到 1.21g固体， 产率 85%， m.p.=167〜168°C。

^-NMRCSOOMHz, DMSO-d ₆ ): 4.63(1H, br.s, 1-OH), 5.40(1H, d, J=7.0Hz, 2-H), 3.56(1H, d, J=7.0Hz, 3-H), 4.91(1H, m， 5-H), 1.62(1H, m， 6-H _a )， 2.30(1H, m， 6-H _b )，4.12(lH， m， 7-H), 4.92(1H, m， 7-OH), 6.28(1H, s， 10-H), 5.81(1H， t, J=7.5Hz, 13-H), 1.46(1H, m， 14-H _a )， 1.78(1H, m， 14-H _b ), 0.98(3H, s， 16-H), 1.01(3H, s， 17-H), 1.77(3H, s， 18-H), 1.48(3H, s， 19-H), 3.98(1H, d, J=8.5Hz, 20-H _a ), 4.01(1H， d, J=8.5Hz, 20-H _b ), 2.23(3H, s， 4-OCOCH ₃ )， 2.09(3H, s， 10-OCOCH ₃ ), 5.32(1H, d, J=9.0Hz, 2'-H)， 5.52(1H, t, J=9.0Hz, 3 -H), 9.21(1H, d, J=8.5Hz, 3 -NH), 7.48(2H, m， ph-o-H), 7.44(2H, m， ph-m-H), 7.55(1H， t, J=7.5Hz, ph-p-H), 7.84(2H， m， NBz-o-H), 7.43(2H, m， NBz-m-H), 7.19(1H, m， NBz-p-H), 7.97(2H, d, J=7.0Hz, OBz-o-H), 7.65(2H, t, J=8.0Hz, OBz-m-H), 7.72(1H, t, J=7.5Hz, OBz-p-H), 2.60(2H, m， 22-H), 2.35(2H, t, J=7.0Hz, 23 -H), 7.82(1H, m， 25-H), 2.90(1H, m， 26-H _a ), 3.00(1H, m， 26-H _b ), 1.22(2H, m， 27-H), 1.33(2H, m， 28-H), 1.46(1H， m， 29-H _a ), 1.62(1H, m， 29-H _b ), 4.11(1H, m， 30-H), 6.96(1H, s, 32-H _a ), 7.32(1H, m， 32-H _b ), 7.87(1H， m， 33-H), 2.15(2H, t, J=8.0Hz, 35-H), 1.71(1H, m， 36-H _a ), 1.99(1H, m， 36-H _b ), 4.13(1H, m， 37-H), 7.11(1H， s， 39-H _a ), 7.30(1H, m， 39-H _b ), 8.22(1H, d, J=8.0Hz, 40-H), 4.40(1H, m， 42-H), 1.26(3H, d, J=7.0Hz, 43-H), 8.37(1H, d, J=6.5Hz, 44-H), 6.79(1H, d, J=l 6.0Hz, 46-H), 7.49(1H, d, J=16.0Hz, 47-H), 7.38(1H, m， 49-H), 7.22(1H, m， 51-H), 7.47(1H， m， 52-H), 7.41(1H， m， 53-H).

¹³ C-NMR(125MHz, DMSO-d ₆ ): 76.7(1-C), 74.5(2-C), 46.1(3-C), 80.2(4-C), 83.6(5-C), 36.5(6-C), 70.4(7-C), 57.4(8-C)， 202.4(9-C), 74.7(10-C), 133.3(11-C)， 139.4(12-C), 70.7(13-C), 34.7(14_C), 42.9(15-C), 26.3(16-C), 21.4(17-C), 13.9(18-C), 9.8(19-C), 75.3(20-C), 165.2(2-OCO), 169.7, 22.6(4-OCOCH ₃ ), 168.8， 20.6(10-OCOCH ₃ ), 169.1(1 -C), 74.4(2'-C)， 54.0(3 -C), 166.4(3 -NHCO), 137.5(ph-q-C), 127.7(ph-o-C), 128.3(ph-m-C), 131.5(ph-p-C), 129.9(NBz-q-C), 127.5(NBz-o-C), 129.0(NBz-m-C), 128.2(NBz-p-C), 134.3(OBz-q-C), 129.6(OBz-o-C), 128.7(OBz-m-C), 133.5(OBz-p-C), 172.0(21-C), 28.8(22-C), 29.5(23-C), 170.0(24-C), 38.5(26-C), 28.5(27-C), 23.0(28-C), 31.6(29-C), 52.3(30-C), 173.9(31-C), 171.5(34-C), 31.7(35-C), 27.7(36-C), /u/u/〇 /Jss-onosild Οεεζ-ΗΠοίAV sl xo 991 χοε Γ∞1 χοζ Γ1 χο∞ε)Γε1 χοε)Γeλλ-----.

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p xo>9 Χ x3030ol)S ν∞91 χ30399S691 e¾A¾--..... 166.4(3 -NHCO), 137.4(ph-q-C), 127.7(ph-o-C), 128.3(ph-m-C), 131.5(ph-p-C), 129.9(NBz-q-C), 127.5(NBz-o-C), 129.0(NBz-m-C), 128.2(NBz-p-C), 134.3(OBz-q-C), 129.6(OBz-o-C), 128.7(OBz-m-C), 133.5(OBz-p-C), 172.0(21-C), 28.8(22-C), 29.5(23-C), 170.0(24-C), 38.5(26-C), 28.5(27-C), 23.0(28-C), 31.6(29-C), 52.3(30-C), 173.9(31-C), 171.5(34-C), 31.7(35-C), 27.7(36-C), 52.1(37-C), 173.3(38-C), 172.3(41-C), 48.8(42-C), 18.2(43-C), 164.7(45-C), 123.3(s, 46-C), 137.4(s _; 47-C), 133.3(m, 48-C), 118.6(m, 49-C), 151.2(m, 50-C), 149.3(m, 51-C), 116.7(m, 52-C), 125. l(m, 53-C).

IR: 3306.6(v _OH and VNH), 3066.4(V= _C H), 2932.6(V _-ch ), 1739.8, 1720.2 1658.2(v _c = ₀ ), 1535.1, 1518.5, 1450.2(v _c =c), 1274.4, 1243.6(v _C - ₀ -c), 979.7, 775.8， 709.5(5 _=CH ).

ESI-MS: 1446.25 [M+H]+， 1468.77 [M+Na] ⁺ .

HR-MS(TOF): 1446.5861 [M+H]+， 1468.5651 [M+Na] ⁺ , C ₇₄ H ₈₅ F ₂ N ₇ 0 ₂₁ .

实施例 32: 液相合成共 -213

将 953mg( l.Oeq)紫杉醇 2'-0-丁二酸单酯、 115mg( 1.0eq)HOSu和 192mg( 1.0eq)EDC-HCl 溶于二甲基亚砜中， 室温反应 4小时； 然后将 499mg ( l.Oeq)胞壁酰二肽简化物 MDA-113少 量多次地加入二甲基亚砜中， 用 N-甲基吗啉将反应体系 pH值调节至 7〜8， 继续反应 4小时。 反应完全后， 向反应体系内加入大量水， 体系内析出白色固体， 过滤， 得到目标产物粗品， 经 ODS柱层析纯化， 冷冻干燥， 得到 1.18g固体， 产率 82%， m.p.=167〜168°C。

丽 R(600MHz， DMSO-de): 4.64(1H， br.s, 1-OH), 5.40(1H, d, J=7.2Hz, 2-H), 3.56(1H, d, J=7.2Hz, 3-H), 4.91(1H, m， 5-H), 1.62(1H, m， 6-H _a )， 2.31(1H, m， 6-H _b ), 4.13(lH, m， 7-H), 4.92(1H, m， 7-OH), 6.28(1H, s， 10-H), 5.81(1H， t, J=9.0Hz, 13-H), 1.45(1H， m， 14-H _a ), 1.79(1H, m， 14-H _b ), 0.98(3H, s， 16-H), 0.99(3H, s， 17-H), 1.76(3H, s， 18-H), 1.51(3H, s， 19-H), 3.98(1H, d, J=8.4Hz, 20-H _a ), 4.01(1H， d, J=8.4Hz, 20-H _b ), 2.22(3H, s， 4-OCOCH ₃ )， 2.09(3H, s， 10-OCOCH ₃ ), 5.34(1H, d, J=9.0Hz, 2 -H), 5.52(1H, t, J=9.0Hz, 3 -H), 9.20(1H, d, J=9.0Hz, 3 -NH), 7.48(2H, d, J=7.8Hz, ph-o-H), 7.46(2H, m， ph-m-H), 7.55(1H， t, J=7.8Hz, ph-p-H), 7.82(2H, m， NBz-o-H), 7.43(2H, m， NBz-m-H), 7.17(1H， m， NBz-p-H), 7.97(2H, d, J=7.8Hz, OBz-o-H), 7.65(2H, t, J=7.8Hz, OBz-m-H), 7.72(1H, t, J=7.8Hz, OBz-p-H), 2.61(2H, m， 22-H), 2.35(2H, t, J=7.2Hz, 23 -H), 7.82(1H, m， 25-H), 2.90(1H, m， 26-H _a ), 2.98(1H, m， 26-H _b ), 1.22(2H, m， 27-H), 1.32(2H, m， 28-H), 1.45(1H， m， 29-H _a ), 1.64(1H， m， 29-H _b ), 4.11(1H， m， 30-H), 6.96(1H, s, 32-H _a ), 7.29(1H, s, 32-H _b ), 7.87(1H， m， 33-H), 2.11(2H, t, J=7.2Hz, 35-H), 1.71(1H， m， 36-H _a ), 1.99(1H, m， 36-H _b ), 4.19(1H, m， 37-H), 7.09(1H, s, 39-H _a ), 7.29(1H, s, 39-H _b ), 8.16(1H， d, J=8.4Hz, 40-H), 4.62(1H, m， 42-H), 1.27(3H, d, J=6.6Hz, /3/:/〇 /J8s-onosil£ Οεεζ-ΗΠοίAV

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IR: 3331.9(v _OH and VNH), 2963.6, 2936.7(v _-CH ), 1739.2, 1712.5, 1649.9(v _c =o), 1538.4, 1452.3, 1438.2(v _c =c), 1370.7, 1243.8, 1172.5, 1144.1(5 _-CH ), 980.0, 833.2, 706.6(5= _CH ).

ESI-MS: 1417.21 [M+2H] ²⁺ .

HR-MS(TOF): 1416.5542 [M+H]+， 1438.5365 [M+Na] ⁺ , C ₇₂ H ₈₅ N ₇ 0 ₂₁ S.

实施例 34: 液相合成共缀 MTC-230

将 953mg( l.Oeq)紫杉醇 2'-0-丁二酸单酯、 115mg( 1.0eq)HOSu和 192mg( 1.0eq)EDC-HCl 溶于二甲基亚砜中， 室温反应 4 小时； 然后将 553mg ( l.Oeq) 胞壁酰二肽简化物 MDA-130 少量多次地加入二甲基亚砜中， 用 N-甲基吗啉将反应体系 pH值调节至 7〜8， 继续反应 4小 时。 反应完全后， 向反应体系内加入大量水， 体系内析出白色固体， 过滤， 得到目标产物粗 品， 经 ODS柱层析纯化， 冷冻干燥， 得到 1.28g固体， 产率 86%， m.p.=172〜173 °C。

'Η-丽 R(600MHz， DMSO-d ₆ ): 4.62(1H, br.s, 1-OH), 5.40(1H, d, J=7.2Hz, 2-H), 3.56(1H, d, J=7.2Hz, 3-H), 4.90(1H, m， 5-H), 1.62(1H, m， 6-H _a )， 2.31(1H, m， 6-H _b )，4.12(lH， m， 7-H), 4.91(1H, m， 7-OH), 6.28(1H, s， 10-H), 5.81(1H， t, J=9.0Hz, 13-H), 1.51(1H， m， 14-H _a )， 1.79(1H, m， 14-H _b )， 0.98(3H, s， 16-H), 0.99(3H, s， 17-H), 1.75(3H, s， 18-H), 1.48(3H, s， 19-H), 3.98(1H, d, J=7.8Hz, 20-H _a ), 4.00(1H, d, J=7.8Hz, 20-H _b ), 2.23(3H, s， 4-OCOCH ₃ )， 2.09(3H, s， 10-OCOCH ₃ ), 5.33(1H, d, J=7.8Hz, 2'-H)， 5.52(1H, t, J=9.0Hz, 3 -H), 9.20(1H, d, J=9.0Hz, 3 -NH), 7.48(2H, m， ph-o-H), 7.43(2H, m， ph-m-H), 7.55(1H, t, J=7.8Hz, ph-p-H), 7.83(2H, m， NBz-o-H), 7.42(2H, m， NBz-m-H), 7.18(1H， m， NBz-p-H), 7.98(2H, d, J=7.2Hz, OBz-o-H), 7.66(2H, t, J=7.2Hz, OBz-m-H), 7.72(1H, t, J=7.2Hz, OBz-p-H), 2.60(2H, m， 22-H), 2.35(2H, m， 23 -H), 7.82(1H, m， 25-H), 2.91(1H, m， 26-H _a ), 2.96(1H, m， 26-H _b ), 1.22(2H, m， 27-H), 1.30(2H, m， 28-H), 1.44(1H， m， 29-H _a ), 1.62(1H, m， 29-H _b ), 4.11(1H, m， 30-H), 6.95(1H, s， 32-H _a ), 7.29(1H, s， 32-H _b ), 7.87(1H， m， 33-H), 2.17(2H, t, J=7.8Hz, 35-H), 1.72(1H, m， 36-H _a ), 1.97(1H, m， 36-H _b ), 4.12(1H, m， 37-H), 7.09(1H, s， 39-H _a ), 7.29(1H, s, 39-H _b ), 8.16(1H， d, J=7.8Hz, 40-H), 4.46(1H， m， 42-H), 1.30(3H, d, J=6.6Hz, 43 -H), 8.52(1H, d, J=6.6Hz, 44-H), 7.70(1H, m， 47-H), 7.84(1H， m， 48-H), 8.97(1H, m， 50-H).

¹³ C-NMR( 150MHz, DMSO-d ₆ ): 76.7(1-C), 74.5(2-C), 46.1(3-C), 80.2(4-C), 83.6(5-C), 36.5(6-C), 70.4(7-C), 57.4(8-C 202.4(9-C), 74.7(10-C), 133.3(11-C 139.4(12-C), 70.7(13-C) _; 34.7(14_C), 42.9(15-C), 26.3(16-C), 21.5(17-C), 13.9(18-C), 9.8(19-C), 75.3(20-C), 165.2(2-OCO) _: 169.6, 22.5(4-OCOCH ₃ ), 169.6, 20.6(10-OCOCH ₃ ), 169.1(1 -C), 74.4(2'-C 54.0(3 -C) _; 166.4(3 -NHCO), 137.4(ph-q-C), 127.7(ph-o-C), 128.7(ph-m-C), 131.5(ph-p-C), 129.9(NBz-q-C) _; 127.4(NBz-o-C), 129.0(NBz-m-C), 128.3(NBz-p-C), 134.3(OBz-q-C), 129.5(OBz-o-C) _; 128.6(OBz-m-C), 133.5(OBz-p-C), 172.0(21-C), 28.8(22-C), 29.5(23-C), 170.0(24-C), 38.5(26-C) _; 28.7(27-C), 22.9(28-C), 31.5(29-C), 52.4(30-C), 173.9(31-C), 171.6(34-C), 31.7(35-C), 27.8(36-C) _; 52.1(37-C), 173.1(38-C), 173.2(41-C), 48.8(42-C), 19.7(43-C), 164.4(45-C 131.5(46-C) _; 130.6(47-C), 134.5(48-C), 147.7(49-C 124.0(50-C), 149.7(51-C).

IR: 3277.6(v _OH and VNH), 3065.0(V= _C H), 2973.2, 2936.4(v _-CH ), 1719.3, 1646.9, 1629.8(v _c =o) _: 1537.1, 1452.0(v _c =c), 1350.0, 1240.9, 1151.2(5 _-CH 978.4, 895.0, 706.3(5= _CH )-

ESI-MS: 1463.70 [M+H]+.

HR-MS(TOF): 1463.5293 [M+H]+， 1485.5120 [M+Na] ⁺ , C ₇₂ H ₈₃ C1N ₈ 0 ₂₃ .

实施例 35: 液相合成共 -233

将 953mg( l.Oeq)紫杉醇 2'-0-丁二酸单酯、 115mg( 1.0eq)HOSu和 192mg( 1.0eq)EDC-HCl 溶于二甲基亚砜中， 室温反应 4 小时； 然后将 528mg ( l.Oeq) 胞壁酰二肽简化物 MDA-133 少量多次地加入二甲基亚砜中， 用 N-甲基吗啉将反应体系 pH值调节至 7〜8， 继续反应 4小 时。 反应完全后， 向反应体系内加入大量水， 体系内析出白色固体， 过滤， 得到目标产物粗 品， 经 ODS柱层析纯化， 冷冻干燥， 得到 U7g固体， 产率 80%， m.p.= 155〜156°C。

R(600MHz， DMSO-de): 4.61(1H， br.s, 1-OH), 5.40(1H, d, J=7.2Hz, 2-H), 3.56(1H, d, J=7.2Hz, 3-H), 4.90(1H, m， 5-H), 1.62(1H, m， 6-H _a 2.31(1H, m， 6-H _b 4.12(lH， m， 7-H), 4.91(1H, m， 7-OH), 6.28(1H, s， 10-H), 5.81(1H， t, J=9.0Hz, 13-H), 1.48(1H， m， 14-H _a ), 1.79(1H, m， 14-H _b ), 0.98(3H, s， 16-H), 0.99(3H, s， 17-H), 1.75(3H, s， 18-H), 1.49(3H, s， 19-H), 3.98(1H, d, J=8.4Hz, 20-H _a ), 4.00(1H, d, J=8.4Hz, 20-H _b ), 2.22(3H, s， 4-OCOCH ₃ 2.09(3H, s， 10-OCOCH ₃ ), 5.33(1H, d, J=9.0Hz, 2'-H 5.52(1H, t, J=9.0Hz, 3 -H), 9.19(1H, d, J=9.0Hz, 3 -NH), 7.48(2H, m， ph-o-H), 7.43(2H, m， ph-m-H), 7.56(1H, m， ph-p-H), 7.83(2H, m， NBz-o-H), 7.42(2H, m， NBz-m-H), 7.18(1H, m， NBz-p-H), 7.97(2H, d, J=7.2Hz, OBz-o-H), 7.66(2H, m， OBz-m-H), 7.72(1H, m， OBz-p-H), 2.60(2H, m， 22-H), 2.35(2H, t, J=7.2Hz, 23 -H), 7.82(1H, m， 25-H), 2.90(1H, m， 26-H _a ), 2.96(1H, m， 26-H _b ), 1.22(2H, m， 27-H), 1.33(2H, m， 28-H), 1.44(1H， m， 29-H _a ), 1.62(1H, m， 29-H _b ), 4.11(1H, m， 30-H), 6.94(1H, s， 32-H _a ), 7.37(1H, s， 32-H _b ), 7.87(1H， m， 33-H), 2.15(2H, t, J=7.8Hz, 35-H), 1.70(1H, m， 36-H _a ), 1.97(1H, m， 36-H _b ), 4.12(1H, m， 37-H), 7.09(1H, s， 39-H _a ), 7.32(1H, s, /u/u/ /Jss-onosild οεεζ-ΗποίΑν

#10∞ ¾-.

asl∞lds=.. J=7.8Hz, OBz-m-H), 7.71(1H, d, J=7.8Hz, OBz-p-H), 1.37(9H, s, -C(CH ₃ ) ₃ 2.50(2H, m: -CH ₂ -CH ₂ -COOH) , 2.60(2H, m， -CH ₂ -CH ₂ -COOH), 12.23(1H, br.s, -C¾-C¾-COOH .

¹³ C-NMR( 150MHz, DMSO-d ₆ ): 76.8(1-C 74.8(2-C), 46.0(3-C), 80.3(4-C), 83.7(5-C): 36.5(6-C), 70.8(7-C), 56.9(8-C), 209.3(9-C), 73.7(10-C), 135.9(11-C), 136.8(12-C), 71.7(13-C): 34.7(14_C), 42.9(15-C), 26.4(16-C), 20.8(17-C), 13.7(18-C), 9.8(19-C), 75.4(20-C), 165.3(2-OCO) _; 169.5, 22.5(4-OCOCH ₃ ), 168.3(l'-C), 75.1(2'-C 57.4(3 -C), 155.2(3 -NHCO), 78.5， 28.1(-C(CH ₃ ) ₃ ): 137.4(ph-q-C), 127.4(ph-o-C), 128.5(ph-m-C), 128.0(ph-p-C), 130.0(OBz-q-C), 129.5(OBz-o-C) _; 128.7(OBz-m-C), 133.4(OBz-p-C), 171.5， 28.4， 28.5， 172.9(-CO-CH ₂ -CH ₂ -COOH).

ESI-MS: 930.31 [M+Na] ⁺ .

HR-MS(TOF): 930.3507 [M+Na] ⁺ , C ₄₇ H ₅₇ N0 ₁₇ .

实施例 37-43: 液相合成共缀物 MDC

实施例 37: 液相合成 -400

将 90.7mg ( l.Oeq)多西紫杉醇 2'-0-丁二酸单酯、 11.5mg ( l.Oeq) HOSu和 19.2mg ( l.Oeq) EDC-HCl溶于二甲基亚砜中， 室温反应 4 小时； 然后将 50.8mg ( l.Oeq) 胞壁酰二肽简化物 MDA少量多次地加入二甲基亚砜中， 用 N-甲基吗啉将反应体系 pH值调节至 7〜8， 继续反应 4小时。 反应完全后， 向反应体系内加入大量水， 体系内析出白色固体， 过滤， 得到目标产物 粗品， 经 ODS柱层析纯化， 冷冻干燥， 得到 124mg固体， 产率 89%， m.p.=180〜181 °C。

'Η- R(600MHz， DMSO-de): 4.41(1H， br.s, 1-OH), 5.39(1H, d, J=6.6Hz, 2-H), 3.62(1H, d, J=6.6Hz, 3-H), 4.89(1H, d, J=10.2Hz, 5-H), 1.66(1H， m， 6-H _a ), 2.26(1H, m， 6-H _b 4.04(lH， m， 7-H) _; 5.07(1H, s， 10-H), 5.77(1H， t, J=9.0Hz, 13-H), 1.64(1H， m， 14-H _a 1.82(1H, dd, J=15.6 and 9.0Hz, 14-H _b 0.96(3H, s， 16-H), 0.97(3H, s， 17-H), 1.68(3H, s， 18-H), 1.50(3H, s， 19-H), 3.99(1H, m， 20-H _a ), 4.01(1H, d, J=9.0Hz, 20-H _b ), 2.22(3H, s， 4-OCOCH ₃ 5.04(1H, m， 2 -H), 5.06(1H, m， 3 -H), 7.86(1H, m， 3 -NH), 7.30(2H, m， ph-o-H), 7.35(2H, d, J=7.8Hz, ph-m-H), 7.16(1H， t, J=7.2Hz, ph-p-H), 7.97(2H, d, J=7.8Hz, OBz-o-H), 7.64(2H, t, J=7.8Hz, OBz-m-H), 7.71(1H， t, J=7.2Hz, OBz-p-H), 1.36(9H, s， -C(CH ₃ ) ₃ 2.59(2H, m， 22-H), 2.36(2H, m， 23 -H), 7.83(1H, m， 25-H), 2.92(1H, m， 26-H _a ), 3.00(1H, m， 26-H _b ), 1.21(2H, m， 27-H), 1.27(2H, m， 28-H), 1.52(1H, m， 29-H _a ) _; 1.63(1H, m， 29-H _b ), 4.11(1H， m， 30-H), 6.96(1H, s， 32-H _a ), 7.30(1H, s， 32-H _b ), 7.90(1H, m， 33-H), 2.15(2H, m， 35-H), 1.72(1H, m， 36-H _a ), 1.99(1H, m， 36-H _b ), 4.13(1H, m， 37-H), 7.02(1H, s， 39-H _a ), 7.30(1H, s, 39-H _b ), 8.29(1H, m， 40-H), 4.38(1H, m， 42-H), 1.26(3H, d, J=6.6Hz, 43-H), 8.38(1H, d, J=6.6Hz, 44-H), 6.75(1H， d, J=16.2Hz, 46-H), 7.37(1H, d, J=16.3Hz, 47-H), 7.57(2H, d, J=8.4Hz, 49 and 53-H), 7.46(2H, d, J=8.4Hz, 50 and 52-H).

¹³ C-NMR( 150MHz, DMSO-d ₆ ): 76.8(1-C)， 74.8(2-C), 46.1(3-C), 80.3(4-C), 83.7(5-C) _; 36.5(6-C), 70.7(7-C), 57.0(8-C), 209.3(9-C), 73.7(10-C), 136.0(11-C), 136.8(12-C), 71.1(13-C) _; 34.7(14_C), 42.9(15-C), 26.5(16-C), 20.8(17-C), 13.6(18-C), 9.8(19-C), 75.3(20-C), 165.3(2-OCO) _: 169.6, 22.5(4-OCOCH ₃ ), 168.9(1 -C), 75.0(2'-C)， 55.1(3 -C), 155.2(3 -NHCO), 78.5， 28.1(-C(CH ₃ ) ₃ ) _: 137.5(ph-q-C), 127.4(ph-o-C), 128.5(ph-m-C), 128.0(ph-p-C), 130.0(OBz-q-C), 129.6(OBz-o-C) _: 128.7(OBz-m-C), 133.4(OBz-p-C), 171.9(21-C), 28.9(22-C), 29.6(23-C), 170.0(24-C), 38.5(26-C) _; 28.9(27-C), 23.0(28-C), 31.4(29-C), 52.1(30-C), 174.1(31-C), 171.6(34-C), 31.7(35-C), 27.7(36-C) _; 52.4(37-C), 173.4(38-C), 172.3(41-C), 48.8(42-C), 18.1(43-C), 164.7(45-C)， 122.7(46-C) _; 137.6(47-C), 133.8(48-C), 129.0(49 and 53-C), 129.2(50 and 52-C), 134.0(51-C).

IR: 3320.6(v _OH and VNH), 2976.8, 2933.5(v _-CH ), 1739.7, 1658.6(v _c =o), 1531.5, 1496.5， 1452.4(v _c =c), 1246.2(v _C -o-c), 983.5, 707.9(5= _CH ).

ESI-MS: 1398.14 [M+H]+， 1420.32 [2M+Na] ⁺ .

HR-MS(TOF): 1398.5791 [M+H]+， 1420.5609 [M+Na] ⁺ , C ₇₀ H ₈₈ ClN ₇ O ₂₁ .

实施例 38: 液相合成 -403

将 90.7mg ( l.Oeq)多西紫杉醇 2'-0-丁二酸单酯、 11.5mg ( l.Oeq) HOSu和 19.2mg ( l.Oeq) EDC-HC1溶于二甲基亚砜中， 室温反应 4 小时； 然后将 51mg ( l.Oeq) 胞壁酰二肽简化物 MDA-203少量多次地加入二甲基亚砜中， 用 N-甲基吗啉将反应体系 pH值调节至 7〜8， 继续 反应 4 小时。 反应完全后， 向反应体系内加入大量水， 体系内析出白色固体， 过滤， 得到目 标产物粗品，经 ODS柱层析纯化，冷冻干燥，得到 114mg固体，产率 80%， m.p.=165〜166°C。

丽 R(500MHz， DMSO-de): 4.45(1H， br.s, 1-OH), 5.44(1H， d, J=6.0Hz, 2-H), 3.64(1H, d, J=6.0Hz, 3-H), 4.89(1H, m， 5-H), 1.66(1H， m， 6-H _a )， 2.25(1H, m， 6-H _b ), 4.03(lH, m， 7-H), 5.09(1H, s, 10-H), 5.80(1H, m， 13-H), 1.64(1H， m， 14-H _a )， 1.82(1H, m， 14-H _b ), 0.96(3H, s， 16-H), 0.96(3H, s, 17-H), 1.68(3H, s， 18-H), 1.52(3H, s， 19-H), 3.99(1H, m， 20-H _a ), 4.01(1H， m， 20-H _b ), 2.22(3H, s, 4-OCOCH ₃ ), 5.04(1H, m， 2 -H), 5.06(1H, m， 3 -H), 7.86(1H, m， 3 -NH), 7.31(2H, m， ph-o-H), 7.38(2H, m， ph-m-H), 7.19(1H, m， ph-p-H), 7.99(2H, d, J=6.5Hz, OBz-o-H), 7.66(2H, m， OBz-m-H), 7.72(1H, m， OBz-p-H), 1.39(9H, s, -C(CH ₃ ) ₃ )， 2.62(2H, m， 22-H), 2.39(2H, m， 23 -H), 7.83(1H, m， 25-H), 3.01(2H, br.s, 26-H), 1.21(2H, m， 27-H), 1.29(2H, m， 28-H), 1.52(1H, br.s, 29-H _a ), 1.63(1H, br.s, 29-H _b ), 4.14(1H， m， 30-H), 6.96(1H, s， 32-H _a ), 7.31(1H, s， 32-H _b ), 7.90(1H, m: 33-H), 2.17(2H, m， 35-H), 1.70(1H, m， 36-H _a ), 1.99(1H, m， 36-H _b ), 4.13(1H, m， 37-H), 7.02(1H, s, 39-H _a ), 7.30(1H, s， 39-H _b ), 8.22(1H, m， 40-H), 4.38(1H, m， 42-H), 1.26(3H, m， 43 -H), 8.47(1H， d, J=6.0Hz, 44-H), 6.82(1H, d, J=16.0Hz, 46-H), 7.37(1H, m， 47-H), 7.18(lH，m， 51-H), 7.70(1H, m， 53-H).

¹³ C-NMR(125MHz, DMSO-d ₆ ): 77.2(1-C), 75.2(2-C), 46.4(3-C), 80.8(4-C), 84.2(5-C), 36.9(6-C), 71.2(7-C), 57.4(8-C)， 209.3(9-C), 74.2(10-C), 136.0(11-C), 136.8(12-C), 71.2(13-C), 35.2(14-C), 43.3(15-C), 26.9(16-C), 21.2(17-C), 14.1(18-C)， 10.3(19-C), 75.3(20-C), 165.1(2-OCO) _; 170.5, 22.9(4-OCOCH ₃ ), 168.9(1 -C), 75.0(2'-C)， 55.6(3 -C), 155.2(3 -NHCO), 79.0, 28.1(-C(CH ₃ ) ₃ ), 137.5(ph-q-C), 127.9(ph-o-C), 128.5(ph-m-C), 128.0(ph-p-C), 130.0(OBz-q-C), 129.2(OBz-o-C), 128.7(OBz-m-C), 133.4(OBz-p-C), 172.0(21-C), 28.6(22-C), 29.3(23-C), 170.0(24-C), 39.0(26-C), 28.6(27-C), 23.4(28-C), 31.4(29-C), 52.1(30-C), 174.1(31-C), 171.6(34-C), 31.7(35-C), 27.7(36-C), 52.6(37-C), 173.7(38-C), 172.3(41-C), 49.4(42-C), 18.5(43-C), 164.7(45-C)， 122.7(46-C), 137.6(47-C), 118.5(m, 48-C), 161.7(m, 49-C), 104.6(m, 50-C), 163.7(m, 51-C), 112.4(m, 52-C), 130.5(m, 53-C).

IR: 3323.9(v _OH and VNH), 2977.6, 2937.6(v _-CH ), 1739.5, 1659.3(v _c =o), 1532.5, 1504.2, 1452.5(v _c =c), 1368.2, 1272.7, 1246.8, 1161.2, 1069.2(5 _-CH ), 983.0, 852.5, 708.8(5= _CH ).

ESI-MS: 1400.98 [M+H]+， 1422.43 [M+Na] ⁺ .

HR-MS(TOF): 1400.6008 [M+H]+， 1422.5824 [M+Na] ⁺ , C ₇ 。H ₈₇ F ₂ N ₇ 0 ₂₁ .

实施例 39 : 液相合成共 -404

将 90.7mg ( l .Oeq)多西紫杉醇 2'-0-丁二酸单酯、 11.5mg ( l .Oeq) HOSu和 19.2mg ( l .Oeq) EDC-HC1溶于二甲基亚砜中， 室温反应 4 小时； 然后将 52.6mg ( l .Oeq) 胞壁酰二肽简化物 MDA-204少量多次地加入二甲基亚砜中， 用 N-甲基吗啉将反应体系 PH值调节至 7〜8， 继续 反应 4 小时。 反应完全后， 向反应体系内加入大量水， 体系内析出白色固体， 过滤， 得到目 标产物粗品，经 ODS柱层析纯化，冷冻干燥，得到 116mg固体，产率 82%， m.p.=175〜176°C。

丽 R(500MHz， DMSO-de): 4.42(1H, br.s, 1-OH), 5.41(1H， d, J=7.0Hz, 2-H), 3.65(1H, d, J=7.0Hz, 3-H), 4.90(1H, m， 5-H), 1.63(1H, m， 6-H _a )， 2.28(1H, m， 6-H _b )，4.05(lH， m， 7-H), 5.09(1H, s, 10-H), 5.78(1H， t, J=8.5Hz, 13-H), 1.63(1H, m， 14-H _a ), 1.83(1H, m， 14-H _b ), 0.99(3H, s， 16-H), 1.02(3H, s， 17-H), 1.68(3H, s， 18-H), 1.51(3H, s， 19-H), 4.00(1H, m， 20-H _a ), 4.02(1H, m， 20-H _b ), 2.23(3H, s， 4-OCOCH3), 5.02(1H, m， 2 -H), 5.09(1H, m， 3 -H), 7.86(1H， m， 3 -NH), 7.30(2H, m， ph-o-H), 7.37(2H, m， ph-m-H), 7.18(1H, m， ph-p-H), 7.99(2H, d, J=7.5Hz, OBz-o-H), 7.65(2H, m， OBz-m-H), 7.71(1H, m， OBz-p-H), 1.36(9H, s, -C(CH ₃ ) ₃ )， 2.61(2H, m， 22-H), 2.37(2H, m， 23 -H), 7.83(1H, m， 25-H), 3.00(1H, m， 26-H _a ), 3.01(1H, m， 26-H _b ), 1.20(2H, m， 27-H), 1.29(2H, m， 28-H), 1.52(1H, m， 29-H _a ), 1.63(1H, m， 29-H _b ), 4.11(1H， m， 30-H), 6.96(1H, s， 32-H _a ), 7.30(1H, s， 32-H _b ), 7.88(1H， m， 33-H), 2.16(2H, m， 35-H), 1.74(1H， m， 36-H _a ), 2.00(1H, m， 36-H _b ), 4.13(1H, m， 37-H), 7.01(1H, s， 39-H _a ), 7.30(1H, s， 39-H _b ), 8.24(1H, d, J=8.5Hz, 40-H), 4.40(1H, m， 42-H), 1.28(3H, m， 43 -H), 8.51(1H, d, J=7.0Hz, 44-H), 6.86(1H, d, J=l 6.0Hz, 46-H), 7.38(1H, d, J=16.0Hz, 47-H), 7.54(1H， dd, J=11.0 and 2.0Hz, 50-H), 7.37(1H, m， 52-H), 7.71(1H， m， 53-H).

¹³ C-NMR(125MHz, DMSO-d ₆ ): 76.8(1-C)， 75.3(2-C), 46.4(3-C), 80.8(4-C), 84.2(5-C), 36.9(6-C), 71.2(7-C), 57.4(8-C)， 209.8(9-C), 74.2(10-C), 136.5(11-C), 137.3(12-C), 71.5(13-C), 35.2(14-C), 42.6(15-C), 26.9(16-C), 21.3(17-C), 14.1(18-C)， 10.3(19-C), 75.5(20-C), 165.7(2-OCO) _; 169.4, 23.4(4-OCOCH ₃ ), 168.9(1 -C), 75.3(2 -C), 55.6(3 -C), 155.7(3 -NHCO), 79.0, 28.2(-C(CH ₃ ) ₃ ), 137.3(ph-q-C), 127.4(ph-o-C), 128.4(ph-m-C), 128.0(ph-p-C), 130.8(OBz-q-C), 129.0(OBz-o-C), 128.4(OBz-m-C), 133.7(OBz-p-C), 172.0(21-C), 28.9(22-C), 29.3(23-C), 170.0(24-C), 38.5(26-C), 28.6(27-C), 22.9(28-C), 32.1(29-C), 52.7(30-C), 174.4(31-C), 172.0(34-C), 32.2(35-C), 28.1(36-C), 52.8(37-C), 173.6(38-C), 172.3(41-C), 49.4(42-C), 18.5(43-C), 164.9(45-C), 122.2(46-C), 138.0(47-C), 122. l(d, J=11.8Hz, 48-C), 160.7(d, J=252.5Hz, 49-C), 117.3(d, J=28.8Hz, 50-C), 130.3(d, J= 10.9Hz, 51-C), 125.2(s, 52-C), 130.4(s, 53-C).

IR: 3324.6(v _OH and VNH), 2977.0, 2935.8(v _-CH ), 1739.5, 1660.5(v _c =o), 1533.3, 1452.6(v _c =c), 1368.2, 1269.0, 1248.3, 1162.0, 1070.6(5 _-CH ), 984.2, 856.3, 708.8(5= _CH ).

ESI-MS: 1416.05 [M+H] ⁺ , 1438.05 [M+Na] ⁺ .

HR-MS(TOF): 1416.5693 [M+H]+， 1438.5511 [M+Na] ⁺ , C ₇ 。H ₈₇ C1FN ₇ 0 ₂₁ .

实施例 40: 液相合成 -405

将 90.7mg ( l.Oeq)多西紫杉醇 2'-0-丁二酸单酯、 11.5mg ( l.Oeq) HOSu和 19.2mg ( l.Oeq) EDC-HC1溶于二甲基亚砜中， 室温反应 4 小时； 然后将 52.6mg ( l.Oeq) 胞壁酰二肽简化物 MDA-205少量多次地加入二甲基亚砜中， 用 N-甲基吗啉将反应体系 pH值调节至 7〜8， 继续 反应 4 小时。 反应完全后， 向反应体系内加入大量水， 体系内析出白色固体， 过滤， 得到目 标产物粗品， 经 ODS柱层析纯化， 冷冻干燥， 得到 99mg固体， 产率 70%， m.p.=174〜175°C。

丽 R(500MHz， DMSO-de): 4.42(1H, br.s, 1-OH), 5.41(1H， d, J=7.0Hz, 2-H), 3.65(1H, d, J=7.0Hz, 3-H), 4.90(1H, m， 5-H), 1.64(1H， m， 6-H _a )， 2.28(1H, m， 6-H _b )，4.05(lH， m， 7-H), 5.09(1H, s, 10-H), 5.80(1H, t, J=8.5Hz, 13-H), 1.63(1H, m， 14-H _a )， 1.83(1H, m， 14-H _b )， 0.99(3H, s， 16-H), 1.02(3H, s， 17-H), 1.70(3H, s， 18-H), 1.51(3H, s， 19-H), 4.00(1H, m， 20-H _a ), 4.02(1H, m， 20-H _b ), 2.25(3H, s， 4-OCOCH3), 5.09(1H, m， 2 -H), 5.09(1H, m， 3 -H), 7.86(1H， m， 3 -NH), 7.31(2H, m， ph-o-H), 7.35(2H, m， ph-m-H), 7.19(1H, t, J=7.0Hz, ph-p-H), 8.00(2H, d, J=7.5Hz, OBz-o-H), 7.65(2H, m， OBz-m-H), 7.71(1H, m， OBz-p-H), 1.36(9H, s, -C(CH ₃ ) ₃ )， 2.59(2H, m， 22-H), 2.36(2H, m， 23 -H), 7.87(1H， m， 25-H), 3.00(1H, m， 26-H _a ), 3.01(1H, m， 26-H _b ), 1.20(2H, m， 27-H), 1.29(2H, m， 28-H), 1.52(1H, m， 29-H _a ), 1.63(1H, m， 29-H _b ), 4.11(1H， m， 30-H), 6.97(1H, s， 32-H _a ), 7.32(1H, s, 32-H _b ), 7.88(1H， m， 33-H), 2.16(2H, m， 35-H), 1.72(1H, m， 36-H _a ), 1.99(1H, m， 36-H _b ), 4.13(1H, m， 37-H), 7.11(1H， s， 39-H _a ), 7.31(1H, s， 39-H _b ), 8.25(1H, d, J=8.0Hz, 40-H), 4.38(1H, m， 42-H), 1.26(3H, m， 43 -H), 8.45(1H， d, J=7.0Hz, 44-H), 6.79(1H, d, J=16.0Hz, 46-H), 7.38(1H, d, J=l 6.0Hz, 47-H), 7.56(1H， dd, J=9.0 and 3.0Hz, 50-H), 7.33(1H, m， 52-H), 7.75(1H， m， 53-H).

¹³ C-NMR(125MHz, DMSO-d ₆ ): 77.3(1-C), 75.3(2-C), 46.4(3-C), 80.8(4-C), 84.2(5-C), 36.9(6-C), 71.2(7-C), 57.0(8-C), 209.3(9-C), 74.2(10-C), 136.5(11-C), 137.3(12-C), 71.6(13-C), 35.2(14-C), 43.3(15-C), 26.9(16-C), 21.2(17-C), 14.1(18-C)， 10.3(19-C), 75.9(20-C), 165.7(2-OCO), 170.0, 22.9(4-OCOCH ₃ ), 169.4(l'-C), 75.5(2'-C)， 55.5(3 -C), 155.7(3 -NHCO), 78.9, 28.2(-C(CH ₃ ) ₃ ), 137.3(ph-q-C), 127.9(ph-o-C), 129.0(ph-m-C), 129.1(ph-p-C), 130.5(OBz-q-C), 130.0(OBz-o-C), 129.1(OBz-m-C), 133.6(OBz-p-C), 172.0(21-C), 29.3(22-C), 30.1(23-C), 170.4(24-C), 38.5(26-C), 28.6(27-C), 23.4(28-C), 32.1(29-C), 52.6(30-C), 174.4(31-C), 172.3(34-C), 32.2(35-C), 26.9(36-C), 52.8(37-C), 173.7(38-C), 172.7(41-C), 49.3(42-C), 18.7(43-C), 164.7(45-C)， 125.4(46-C), 133.9(47-C), 129.2(48-C), 134.6(49-C), 115.8(d, J=21.6Hz, 50-C), 162.7(d, J=249.6Hz, 51-C), 117.6(d, J=24.9Hz, 52-C), 129.6(53-C).

IR: 3316.8(v _OH and VNH), 2977.3, 2938.6(v _-CH ), 1739.5, 1659.2(v _c =o), 1533.0, 1490.7(v _c =c), 1368.3, 1241.6, 1161.7， 1068.6(5 _-CH ), 982.1, 858.0, 708.6(5= _CH ).

ESI-MS: 1416.52 [M+H]+， 1438.42 [M+Na] ⁺ .

HR-MS(TOF): 1416.5725 [M+H]+， 1438.5523 [M+Na] ⁺ , C ₇ 。H ₈₇ C1FN ₇ 0 ₂₁ .

实施例 41 : 液相合成 -406

将 90.7mg ( l .Oeq)多西紫杉醇 2'-0-丁二酸单酯、 11.5mg ( l .Oeq) HOSu和 19.2mg ( l .Oeq) EDC-HC1溶于二甲基亚砜中， 室温反应 4 小时； 然后将 49.2mg ( l .Oeq) 胞壁酰二肽简化物 MDA-206少量多次地加入二甲基亚砜中， 用 N-甲基吗啉将反应体系 PH值调节至 7〜8， 继续 反应 4 小时。 反应完全后， 向反应体系内加入大量水， 体系内析出白色固体， 过滤， 得到目 标产物粗品，经 ODS柱层析纯化，冷冻干燥，得到 125.6mg固体，产率 91%， m.p.=162〜163 °C。

'Η-丽 R(500MHz， DMSO-d ₆ ): 4.41(1H， br.s, 1-OH), 5.42(1H, d, J=7.0Hz, 2-H), 3.65(1H, d, J=7.0Hz, 3-H), 4.90(1H, m， 5-H), 1.66(1H， m， 6-H _a )， 2.25(1H, m， 6-H _b ), 4.03(lH, m， 7-H), 5.09(1H, s, 10-H), 5.80(1H, t, J=8.5Hz, 13-H), 1.64(1H， m， 14-H _a ), 1.82(1H, m， 14-H _b ), 0.99(3H, s， 16-H), 0.99(3H, s， 17-H), 1.68(3H, s， 18-H), 1.50(3H, s， 19-H), 3.99(1H, m， 20-H _a ), 4.01(1H, m， 20-H _b ), 2.22(3H, s， 4-OCOCH3), 5.09(1H, m， 2 -H), 5.09(1H, m， 3 -H), 7.86(1H， m， 3 -NH), 7.30(2H, m， ph-o-H), 7.35(2H, m， ph-m-H), 7.16(1H, t, J=7.0Hz, ph-p-H), 7.99(2H, d, J=7.5Hz, OBz-o-H), 7.65(2H, m， OBz-m-H), 7.71(1H, m， OBz-p-H), 1.36(9H, s, -C(CH ₃ ) ₃ )， 2.55(2H, m， 22-H), 2.34(2H, m， 23 -H), 7.83(1H, m， 25-H), 3.01(2H, br.s, 26-H), 1.21(2H, m， 27-H), 1.27(2H, m， 28-H), 1.52(1H, m， 29-H _a ), 1.64(1H， m， 29-H _b ), 4.11(1H， m， 30-H), 6.97(1H, s， 32-H _a ), 7.31(1H, s， 32-H _b ), 7.86(1H, m， 33-H), 2.17(2H, m， 35-H), 1.79(1H, m， 36-H _a ), 2.00(1H, m， 36-H _b ), 4.15(1H， m， 37-H), 7.11(1H， s, 39-H _a ), 7.31(1H, s， 39-H _b ), 8.22(1H, d, J=8.0Hz, 40-H), 4.38(1H, m， 42-H), 1.26(3H, m， 43 -H), 8.35(1H, d, J=8.0Hz, 44-H), 6.71(1H， d, J=l 6.0Hz, 46-H), 7.38(1H, d, J=16.0Hz, 47-H), 7.87(2H, m: 49 an 53-H), 7.38(2H, m， 50 snd 52-H).

¹³ C-NMR(125MHz, DMSO-d ₆ ): 77.3(1-C), 75.3(2-C), 46.4(3-C), 80.7(4-C), 84.2(5-C), 36.9(6-C), 71.2(7-C), 57.4(8-C)， 209.8(9-C), 74.2(10-C), 136.5(11-C), 137.2(12-C), 71.6(13-C), 35.1(14-C), 43.3(15-C), 26.9(16-C), 21.2(17-C), 14.1(18-C)， 10.3(19-C), 75.9(20-C), 165.8(2-OCO): 170.0, 22.9(4-OCOCH ₃ ), 169.4(l'-C), 75.5(2'-C)， 55.5(3 -C), 155.7(3 -NHCO), 79.0, 28.5(-C(CH ₃ ) ₃ ), 137.9(ph-q-C), 127.9(ph-o-C), 129.2(ph-m-C), 128.5(ph-p-C), 130.5(OBz-q-C), 130.1(OBz-o-C), 129.3(OBz-m-C), 133.6(OBz-p-C), 172.3(21-C), 29.3(22-C), 30.0(23-C), 170.5(24-C), 38.7(26-C), 29.2(27-C), 23.4(28-C), 32.1(29-C), 52.6(30-C), 174.4(31-C), 172.0(34-C), 32.2(35-C), 28.2(36-C), 52.8(37-C), 173.7(38-C), 172.8(41-C), 49.3(42-C), 18.6(43-C), 165.3(45-C), 122.3(46-C), 137.9(47-C), 133.9(48-C), 131.9(m, 49 and 53-C), 116.4(d, J=21.8Hz, 50 and 52-C), 163.2(d, J=245.3Hz, 51-C).

IR: 3318.8(v _OH and VNH), 2977.6, 2938.0(v _-CH ), 1659.3(v _c =o), 1535.1, 1511.9, 1452.6(v _c =c), 1368.5, 1246.7, 1160.7, 1069.1(5 _-CH ), 983.0, 832.9, 708.1(5= _CH ).

ESI-MS: 1382.00 [M+H]+， 1404.60 [M+Na] ⁺ .

HR-MS(TOF): 1382.6064 [M+H]+， 1404.5900 [M+Na] ⁺ , C ₇ 。H ₈₈ FN ₇ 0 ₂₁ .

实施例 42 : 液相 -407

将 90.7mg ( l .Oeq)多西紫杉醇 2'-0-丁二酸单酯、 11.5mg ( l .Oeq) HOSu和 19.2mg ( l .Oeq)

EDC-HCl溶于二甲基亚砜中， 室温反应 4 小时； 然后将 49.2mg ( l .Oeq) 胞壁酰二肽简化物 /u/u/〇 /Jss-onosild-ΗΠοί

/u/u/〇 /Jss-onosild-ΗΠοί

1sf≠ ί。o,T5 Soa〜 ^ 。-

x3)r χο )∞Ό∞ χοε) 9z)r Χ31)Γ0osn)3eΑΑiMIHiMeHiMN : ¾------，

x2)9 χπ)92 ίΗ)Γ χ6)∞§ x∞) χ Γΐ χ9)0ε λλλ-----...

(030 Χέ6 Χ)Γ01 Χ∞1)Γ 1 Χέ χ XC2) χ l)r- Pw，χ3)3∞ζ XOOS(。2 x030S ¾0¾HNA^¾<-'國-....

Χ3Ο)ΟΌ2 χ3Ο)02 xo¾}∞n χο¾}Γ6Π χο)6Π>qo∞2ΗΗλ0ΖΖdδ?bd----------..

χο9ζ)∞ε χο Όΐ χοΓοίΓ6ζ Χ3)ετ1 xO)6 χ3Ο)Γ6Πλλ;λHΗdZδΖ------.

χ9ε)Γ∞ζ Χέ xool 1 χο0ε)9¾ χοέιτε χ∞ζ) S Χ3)Γ----·

¾Γ χsl χέ χέ χέΓ6 χοέτι χο∞ε) χέ∞λλλλλ-. 892 χ) χ)69ε6ζ9611)∞0 LLςιΛΛ ΛΛν。?。。∞ ....- (s)6Ί86 g)e9n Π ΠHv。 ..-

级范围内， 而半数致死浓度 (LC ₅ )都大于 10μΜ。 实验结果参见附图 1-6

本发明的化合物 MTC-301、 MTC-302、 MTC-303、 MTC-304、 MTC-305、 MTC-306、 MTC-307、 MDC-308、 MDC-403、 MDC-404、 MDC-405、 MDC-406、 MDC-407和 MDC-408 针对 10个人源肿瘤细胞株进行了体外实验筛选研究� �� 同样， 这些共缀物也保持在与紫杉醇或 者多西紫杉醇相同的 50%抑制浓度 （IC ₅ 。）。 实验结果参见附图 7-10。 体内活性测试部分

实施例 45: MTC-220对人乳腺癌 MDA-MB-231裸鼠异种移植瘤生长抑制作用

实验材料及受试物：

1 MTC-220, 为无色、 澄清液体， 分别标示为 1.0mg/mL、 1.5mg/mL、 2.0mg/mL浓度， 无 菌分装后直接使用。 贮存于 4°C。 给药剂量组分别设为：10mg/kg、 15mg/kg、 及 20mk/kg， 给药体积为 0. 2mL/20g。

2 紫杉醇注射液 北京协和药厂产品，批准文号：国药准字 H10980069产品批号： 080704,规 格 5mL: 30mg。

3 Taxol+ MDA [标示 P 0.54mg/mL ( 0.001M) + T 0.9mg/mL(0.001M)]由委托方配制， 无菌 分装后直接使用。 贮存于 4Ό。 实验设计为各按 0. 2mL/20kg给药。

4 MDA [标示 P 0.54mg/mL ( 0.001M) , 实施例 10]为无色、 澄清液体， 由委托方配制， 无 菌分装后直接使用。 贮存于 4°C。

瘤 株：人乳腺癌高转移株 MDA-MB-231裸小鼠移植瘤，荷瘤鼠引自北京中美� �科生物技术（北 京）有限公司， 本实验室传代保存。

动 物： BALB/c nu 小鼠， 早， 4〜5 周龄。 中国医学科学院实验动物所提供。 合格证号

SCXK (京） 2005-0013。

词养设施：中国医学科学院药物研究所实验 动物中心 SPF级动物实验室。合格证号： SYSK (京），

2004-0001

实验方法：

选择肿瘤生长良好， 全身状况较好荷瘤动物， 颈椎脱臼处死。 无菌条件下取出瘤块， 用手术 刀切割成直径 2-3皿的瘤块， 套管针接种于裸小鼠腋后皮下。 肿瘤自然生长。 11天后开始分组 给药。将瘤体积偏大的数只裸鼠挑出后， 用游标卡尺测量肿瘤长、 宽径， 按瘤体积大小分层分组。

共设 8个观察组，每组 6〜8只动物。设阴性对照组； 紫杉醇注射液 24mg/kg间断给药组， MTC-220 10mg1¾、 15mg¾g、 20mgkg三剂量组； MDA液注射组和 Taxol+ MDA ¾¾射组。 以上 7 组动物肿瘤体积基本相同，平均值约 140mm ³ 大小。将另外数只瘤体积偏大的小鼠设为 MTC-220 30mg/kg组，平均瘤体积 340 mm ³ 。 即日开始， 分别按动物体重， 每日 1次腹腔注射各药液。

设分组给药日为 Dl， 每 3天测量动物肿瘤长、 宽径及体重 1次。 除紫杉醇对照组间断给药 4次， MTC-220 30mg/kg组连续给药 12次后停药观察外， 其余各组均连续给药 24次。 末次给 药后 24小时结束实验。 实验结束时将动物断颈椎处死， 剥离肿瘤， 称瘤重， 计算药物对肿瘤生长抑制率。 用 t检 验法比较各组动物肿瘤重量、 肿瘤体积、 RTV等指标差别的统计学意义。

计算方法及公式略。

抗肿瘤活性的评价指标为相对肿瘤增殖率 T/C (%)

疗效评价标准： T/C(%)>40为无效；

T/C(%)¾≡40, 并经统计学处理 P<0.05为有效。

实验结果：

在实验观察过程中， 阴性对照组小鼠体重呈缓慢逐渐增长势， 与分组开始时相比， 平均 体重增加 3.5g。 紫杉醇对照组在间断给药情况下， 体重基本维持在动物毒副反应可以耐受的 范围。 MTC-220 30mg/kg 12次给药组在连续 12天给药期间，动物体重基本维持在分组时水� ��， 但停药后逐渐增加， 实验结束时与开始时相比平均增加 2.6g。 与总剂量相同的 MTC-220 15mg/kg 24次给药组体重增长相仿 （后者 2.7g)。 而 MTC-220 20mg/kg连续给药 24天组动物 体重与阴性对照组相比体重增长较少， 为 1.9g。 T( 0.9mg/mL )+P (0.54mg/mL)组动物体重在连 续给药早期与紫杉醇给药组相近， 但随给药进行， 小鼠毒副反应逐渐明显， 表现有腹部膨胀、 少动、 体重下降等， 连续给药 20天时， 该组小鼠死亡 2/3。

由动物肿瘤生长曲线可见， MDA液 [标示为 P (0.54mg/mL)]给药组小鼠肿瘤生长速度与 阴性对照组相比有一定减缓， 肿瘤相对增殖率（T/C) 83.5%。 MTC-220 10mg/kg、 15mg/kg和 20mg/kg 给药对动物肿瘤增长速度呈现明显剂量反应关 系。 实验结束时三组抑瘤率分别为 37.3%, 57.4%和 72.2%, 肿瘤相对增殖率分别为 70.0%， 39.5%和 29.4%。 其中 15mg/kg组和 20mg/kg组可评价为有效。

MTC-220 30mg/kg连续 12次给药， 总剂量与 15mg/kg连续 24次给药相同， 尽管在实验 开始时该组肿瘤体积偏大， 但该组肿瘤在给药期间呈逐渐减小趋势， 停药后增长速度亦极为 缓慢。 实验结束时比较， MTC-220 30mg/kg组抑瘤率明显增加 （后者 57. 4， 前者 >87%)， 肿 瘤相对增殖率 （T/C值） 明显下降 （后者 37.5%， 前者 6.16%)。 MTC-220 30mg/kg连续 12次 给药组与 20mg/kg连续 24次给药组相比， 用药量有所减少， 但抑瘤率有所增加， 肿瘤相对增 殖率（T/C值）亦明显下降， 而小鼠体质较好。 提示早期对荷瘤鼠给予适当剂量的药物， 不仅 可较好地控制肿瘤增长， 对减少用药剂量， 缩短疗程， 减轻毒副反应均有一定作用。

实验结论： MTC-220 10mg/kg, 15mg/kg和 20mg/kg连续 24次对荷人乳腺癌 MDA-MB-231 裸鼠腹腔注射给药， MDA-MB-231 肿瘤生长受到明显抑制， 抑瘤效果与给药剂量明显相关。 本批实验中 15mg/kg和 20mg/kg剂量给药疗效评价可判断为有效。

MTC-220 30mg/kg连续 12次给药， 对 MDA-MB-231肿瘤生长抑制作用非常明显， 停药 后肿瘤增长缓慢， 动物体质恢复较好。 与相同总量给药的 15mg/kg组相比疗程缩短， 抑瘤作 用明显增强。 实验结果参见附图 11-14和附表 1-2。

附表 1 : MTC-220对 MDA-MB-231裸鼠异种移植瘤作用 （1 ) 动物数 （只） 体重 (g) 瘤 重 抑瘤率 组 另 J 开始 结束 开始 结束 (g) (%) 阴性对照组 7 7 19.0土 1.14 22.5±1. 92 2.84±1.205 紫杉醇 8 8 17.7土 1.50 19.5±0. 94 0.43土 0.416*** 84.9

24mg/kgX4

MTC-220 6 6 17.4土 1.47 20.6±1. 64 1.78±1.016 37.3

10mg/kgx24

MTC-220 6 6 17.9土 0.88 20.6±0. 91 1.21±0.813* 57.4

15mg/kgx24

MTC-220 7 7 17.0土 1.11 18.9±1. 58 0.79土 0.654** 72.2

20mg/kgx24

MTC-220 6 6 17.5土 1.09 20.1±0. 98 0.37土 0.413*** >87.0

30mg/kg l2

Taxol+MDA 6 2 17.4土 1.09 19.2±0. 05 0.77±0.440 72.9

X24

MDA X24 6 6 18.5土 1.05 21.4±0. 90 1.98±0.744 30.3

*： P<0.05， 与阴性对照组比较

**： P<0.01， 与阴性对照组比较

*** P<0.001， 与阴性对照组比较

附表 2: MTC-220对 MDA-MB-231裸鼠异种移植瘤作用 （2)

肿瘤体积 （mm ³ ) T/C 组 另 J 开始 结束 RTV (%) 性对照组 138±48.4 2388± 1073.6 18.03±6.108

紫杉醇 17.64

133±39.8 422 ±404.6 3.18土 2.735***

24mg/kgX4

MTC-220 70.00

135±70.6 1655 ±929.4 12.62±5.924

10mg/kgX24

MTC-220 39.49

148±80.5 967±590.4 7.12±4.064**

15mg/kgX24

MTC-220 25.40

133±57.6 642±482.3 4.58土 2.456***

20mg/kgX24

MTC-220 6.16

340±58.4 391 ±480.5 1.11±1.366***

30mg/kgX12

Taxol+MDA X24 136±40.7 1093 ±343.3 11.70±0.299* 64.9

MDA X24 141+61.1 1898±775.4 15.06±5.292 83.5

*: P<0.05, 与阴性对照组比较 ** : P<0. 01， 与阴性对照组比较

***： P<0. 001， 与阴性对照组比较 实施例 46: MTC-220对人肺癌 H460裸鼠异种移植瘤生长抑制作用

实验材料及受试物：

MTC-220: 由委托方配制， 分别标示为 0.5mg/mL、 l.Omg/mL, 2.0mg/mL浓度， 为无色、 澄 清液体。 无菌分装后直接使用。 贮存于 4°C。

紫杉醇注射液： 北京协和药厂产品， 批准文号： 国药准字 H10980069, 产品批号：

080704,规格 5mL: 30mg。 溶媒 （含 5%DMS0和 5%聚氧乙烯蓖麻油

(Cremphor EL) 的生理盐水混合液） 无菌分装后直接使用。 贮存 于 4°C。

瘤 株： 人肺癌 H460， 细胞引自 ATCC， 本实验室传代保存。 经体外细胞培养， 接种于裸小鼠 成瘤后传代使用。

动 物： BALB/c nu 小鼠， 早， 4〜5 周龄。 中国医学科学院实验动物所提供。 合格证号

SCXK (京） 2005-0013。

词养设施：中国医学科学院药物研究所实验 动物中心 SPF级动物实验室。合格证号： SYSK (京），

2004-0001 实验方法： 选择肿瘤生长良好， 全身状况较好荷瘤动物， 颈椎脱臼处死。 无菌条件下取出瘤块， 用手术刀切割成直径 2-3皿的瘤块， 套管针接种于裸小鼠腋后皮下。 肿瘤自然生长， 8天后平均 体积达 130mm ³ 大小。 用游标卡尺测量肿瘤长、 宽径， 按瘤体积大小分层分组。

实验共设 5个观察组，每组 8只动物。设溶媒为阴性对照组； MTC-22051^、 10mgkg、20mgkg 三剂量组， 即日开始， 分别按动物体重， 以 0.2ml/20g体积腹腔注射， 每日 1次。 阳性对照紫 杉醇注射液组 以紫杉醇 24mg/kg剂量每隔 3天给药 1次， 分组当日亦开始给药。

设分组给药日为 Dl， 紫杉醇对照组间断给药共 4次。 MTC-220各组连续给药共 25次。 末次给药后 24小时结束实验。

实验过程中， 每 3天测量动物肿瘤长、 宽径及体重 1次。参考有关文献提供的方法计算肿 瘤体积 （TV) 及相对肿瘤体积 （RTV)， 绘制肿瘤体积生长变化图。

实验结束时将动物断颈椎处死， 剥离肿瘤， 称瘤重， 计算药物对肿瘤生长抑制率。 用 t检 验法比较各组动物肿瘤重量、 肿瘤体积、 RTV等指标差别的统计学意义。

计算公式为：

对照组平均瘤重-治疗组平均瘤重

肿瘤抑制率 （％) = X 100

对照组平均瘤重

肿瘤体积 (TV) Ηέ Χ宽 ² /2。 相对肿瘤体积 (RTV) 的计算公式为： V t/V o

(其中 V 0为分笼给药时测量所得 TV， V t为以后每次测量时的 TV。 ）

抗肿瘤活性的评价指标为相对肿瘤增殖率 T/C (%)，

治疗组（T) RTV

T/C (%) = X 100

阴性对照组 （C) RTV

疗效评价标准： T/C(%)>40为无效；

T/C(%)¾≡40, 并经统计学处理 P<0.05为有效。

实验结果： 观察显示： 在实验观察的 25天中， 阴性对照组动物体重逐渐增加， 一般状态无明 显改变。 H460肿瘤生长速度较快， 与开始分组时瘤体积相比， 阴性对照组实验结束时相对肿 瘤体积 （RTV) 平均值达 33.3。

阳性对照紫杉醇注射液组以 24mg/kg剂量 2次给药， 即表现对 H460肿瘤生长的抑制作 用， 随给药次数增多， 抑瘤率逐渐增加。 与阴性对照组比较， 第 4 次给药后， 肿瘤抑制率达 65%。 停药后维持 1周左右， 疗效作用逐渐减弱。 实验结束统计， 瘤重抑制率 61%， 肿瘤相对 增殖率 （T/C) 35.6%, 与阴性对照组统计学差异显著， 疗效作用明显。 实验同时观察到， 紫 杉醇 24mg/kg间断给药 2次后， 动物开始消痩， 体重逐渐减轻， 以平均低于开始分组时 2g的 水平维持， 停药 1周后， 体重有所恢复。

MTC-220 10mg/kg和 5mg/kg给药二组小鼠体重在实验前 20天与阴性对照组基本相仿， 随 给药继续， 该 2组体重较阴性对照组有所减轻。 MTC-220 5mg/kg剂量连续给药 25天， 肿瘤体积 增长速度与阴性对照组差别不明显。 lOmg/kg剂量连续给药 2周后， H460肿瘤体积测量值较阴性 对照开始出现差别， 实验结束时， 10mg/kg剂量组瘤体积抑制率 18.8%。 瘤重抑制率 17.3%。

MTC-220 20mg/kg剂量给药 10天，肿瘤体积测量值与阴性对照开始出现差� ��，随给药继续， 肿瘤增长速度减缓，抑瘤率逐渐增加。至实验 结束时， 瘤重抑制率 52.9%，肿瘤相对增殖率（T/C) 50.1%, 与阴性对照组统计学差别明显。 实验结果参见附图 15-16和附表 3-4。

附表 3 : MTC-220对 H460肿瘤生长抑制作用总结 （1 )

动物数 （只） 体重 (g) 瘤 重 抑瘤率 组 另 J 开始 结束 开始 结束 (g) (%) 阴性对照组 8 8 18.3土 0.71 22.6土 1.30 2.98土 0.626

MTC-220 8 8 18.0土 0.95 21.9土 U0 2.91土 0.695 2.15

5mg/kgx25

MTC-220 8 8 18.2土 0.70 21.4±1.15 2.46土 0.624 17.3

10mg/kgx25

MTC-220 8 6 17.8土 1.10 18.9土 2.49 1.40土 0.466** 52.9

20mg/kgx25

紫杉醇注射液 8 8 18.9土 1.28 18.6±1.41 U 6土 0.410** 61.0 24mg/kgx4

**： P<0.05， 与阴性对照组比较

附表 4: MTC-220对 H460肿瘤生长抑制作用总结 （2)

肿瘤体积 （mm ³ ) T/C 组 另 J 开始 结束 RTV (%) 阴性对照组 133土 39.1 4032土 751.0 33.3±13.21

MTC-220 5mg/kgx25 125土 36.8 3737土 591.0 32.0土 8.27 96.2

MTC-220 10mg/kgx25 125土 43.0 3274土 797.0 27.7土 6.81 83.1

MTC-220 20mg/kgx25 123土 44.6 1963土 641.9 16.7土 9.93** 50.1 紫杉醇注射液

130土 36.7 1583土 507.2 11.9土 3.16** 35.6 24mg/kgx4

**： P<0.05， 与阴性对照组比较

实验结论： 以 MTC-220 5mg/kg、 10mg/kg, 20mg/kg剂量连续对人肺癌 H460荷瘤鼠腹腔 注射给药 25天， 样品对 H460肿瘤生长显示一定抑制作用， 抑瘤效果与给药剂量相关。 其中 20mg/kg剂量组于实验结束时瘤重抑制率 52.9%， 相对肿瘤增殖率 50.1%， 与阴性对照组统计 学差别明显。 实施例 47: 裸鼠异种移植瘤对 MTC-220其他敏感株筛选结果

实验目的： 了解 MTC-220对人乳腺癌、 肺癌、 卵巢癌等肿瘤细胞株裸鼠异种移植瘤的体内作 用， 筛选对 MTC-220能表现较好疗效的敏感株， 同时观察于给药过程中裸鼠出现 的反应。

实验动物： BALB/c mi小鼠均来源于中国医学科学院实验动物所繁� ��场， 合格证号同前。 细 胞 株： 实验所用肿瘤细胞株多为本实验室传代补充， 部分引自 ATCC等。

包括： 人乳腺癌 MX-1和 MCF-7。

人卵巢癌 A2780和人卵巢透明细胞癌 ES-2

人肺癌 H1975和 A549等。

实验方法：

1 仅设阴性对照和 MTC-220给药 1组。

2 基本方法同实施例 52，实施例 53， 在以下各个实验总结中不作具体描述。

3 给药剂量及疗程系取前期实验摸索出的， 能确切产生疗效， 疗程最短的剂量一 30mg/kg/日， 每批实验给药最多 12天。

实验结果（1 ) ： MTC-220给药后， 动物所荷 MCF-7肿瘤进行性缩小。 于给药 10次时均已很 小， 遂停药观察。又一周后该组肿瘤陆续消失。 继续观察 3周， 无肿瘤发现。 唯乳腺癌 MCF-7 肿瘤生长速度缓慢， 自接种后 50余日观察， 阴性对照组肿瘤体积仅不足 600mm ³ 大小。 考虑 实验结果明确， 终止观察。 体重变化见附图， 给药对动物体重有一定影响， 给药期间体重呈减轻势。 停药后动物体 重增加， 与阴性对照组变化基本平行。 实验结果参见附图 17-18和附表 5-6。 附表 5 : 试验前后体重及实验结束 MCF-7肿瘤瘤重 （1 )

动物数 （只） 体重 （g) 瘤 重 抑瘤率 组 别 开始 结束 开始 结束 （g) ( %) 阴性对照组 6 5 19.4土 1.72 22.7土 1.21 0.558±0.275

MTC-220 6 6 20.8±1.14 23.3土 1.22 0** 100

30mg/kg l2

**： P<0.05 附表 6: 试验前后 MCF-7肿瘤瘤体积 （2)

肿瘤体积 （mm ³ ) T/C 组 另 J 开始 结束 RTV (%) 阴性对照组 136土 73.1 573土 286.4 5.29土 1.432

MTC-220

142土 73.5 0 Q** 0

30mg/kg l2

**： P<0.05

实验结果 （2) ： MTC-220给药期间， A549肿瘤逐渐缩小， 但无消失。 停药 1周后， 1只小 鼠肿瘤消失。 给药组平均肿瘤体积在停药 2周时间内基本保持停药时大小， 无增长。

体重变化见附图， 给药对动物体重有明显影响， 给药期间体重进行性减轻。 停药数日后 仍有下降， 停药 1周后 1只小鼠死亡， 其他动物体重逐渐恢复。 实验结果参见附图 19-20和附 表 7-8。 附表 7： 试验前后体重及实验结束 A549肿瘤瘤重 （ 1 )

动物数 （只） 体重 （g) 瘤 重 抑瘤率 组 别 开始 结束 开始 结束 （g) ( %) 阴性对照组 ~ 6 24.1土 1.90 29.3土 1.82 0.31土 0.100

MTC-220 6 5 25.2±1.31 26.3±1.51 0.062土 0.041" 79.9 30mg/kg l2

**： P<0.05 附表 8 : 试验前后 A549肿瘤瘤体积 （2)

肿瘤体积 （mm ³ ) T/C

组 别 开始 结束 RTV (%) 阴性对照组 93土 29.5 268土 100.5 2.87土 0.562

MTC-220

95土 27.7 74土 55.2 0.67土 0.411** 23.3**

30mg/kg X 12

**： P<0.05 实验结果（3 ) ： MTC-220给药对肺癌 H1975肿瘤生长显示非常明显抑制作用， 给药期间受试 物组肿瘤平均体积逐渐缩小， 部分小鼠肿瘤消失。 实验结果参见附图 21-22和附表 9-10。 附表 9： 试验前后体重及实验结束 H1975肿瘤瘤重 （ 1 )

动物数 （只） 体重 (g) 瘤 重 抑瘤率 组 另 J 开始 结束 开始 结束 (g) (%) 阴性对照组 7 7 23.8土 1.43 27.2土 1.23 1.91土 0.909

MTC-220 7 5 24.1土 1.20 26.6土 0.76 0.13土 0.103** 93.1

30mg/kg l2

**： P<0.05 附表 10： 试验前后 H1975肿瘤瘤体积 （2)

肿瘤体积 （mm ³ ) T/C 组 另 J 开始 结束 RTV (%)

阴性对照组 117土 60.0 1490土 621.2 13.08土 2.541

MTC-220

135±50.6 127土 106.1 0.66土 0.464** 5.0

30mg/kg l2

**： P<0.05

MTC-220抗肿瘤瘤谱筛选结论：

应用 MTC-220对人乳腺癌、 肺癌、 卵巢癌等多个裸鼠异种移植瘤进行筛选的预实 验结果 显示， 将 MTC-220以 30mg/kg剂量连续腹腔注射 10〜12次， 样品对筛选实验选用的肿瘤生 长显示强度不同的抑制作用。

实验观察到， MTC-220对乳腺癌 MX-1抑制作用微弱，对卵巢癌 A2780和 ES-2肿瘤显示 一定抑制作用， 但均未达有效标准。 对乳腺癌 MCF-7、 肺癌 A549和 H1975肿瘤， MTC-220 显示非常明显的治疗效果。 观察可见： 在 MTC-220的敏感瘤株， 给药过程中荷瘤鼠肿瘤体积 逐渐缩小， 停药后继续缩小， 部分小鼠肿瘤消失。其中在肺癌 A549和 H1975模型实验结束时 抑瘤率均达 80%以上， 肿瘤相对增殖率（T/C)值均在 30%以下， 并与阴性对照组呈现明显统 计学差别。 MTC-220对乳腺癌 MCF-7肿瘤生长表现非常显著的抑制作用， 连续给药 10次， 受试物组肿瘤完全消退。 结论： MTC-220对乳腺癌及肺癌抗肿瘤作用强，特别是� � MDA-MB-231 , MCF-7, H460, 以及 H1975和 A549等肿瘤株移植瘤最为敏感。 实施例 48: MTC-220抗小鼠乳腺癌自然转移

小鼠乳腺癌细胞株（4T1，ATCC CRL2539) 由中科院生物物理所梁伟教授馈赠。 细胞培养 在含有 10%胎牛血清 （Hyclone Corp, USA) 、 1%谷氨酰胺与 1%青一链霉素的 1640培养基 (Gibco) 中。

收集对数生长期的 4T1细胞， 调节细胞浓度为 2x l0 ⁶ /mL。 取雌性 BALB/c小鼠， 于右侧 腹部第 4乳腺脂肪垫内接种 4T1细胞， 剂量为 2x l0 ⁵ /0.1mL。 接种后第 5天 ， 将小鼠随机分 为 5组， 每组 8只， 分别腹腔注射 Taxol (3mg/kg)， MTC-220 (2.5mg/kg， 5mg/kg， lOmg/kg )或 对照溶媒， 每天一次。 从接种后第 9 天始， 每隔两天用游标卡尺测量肿瘤长径和短径， 以公 式： （1/2)χ长径 χ(短径) ² 计算肿瘤大小。 接种后第 28天结束给药， 颈椎脱白法处死小鼠， 称体 重。 解剖取出肿瘤、 脾脏、 肺脏， 称重。 将肺脏放入 Bouin's固定液固定 24h， 计数肺表面转 移结节数。 以 Mann-Whitney U检验对肺转移结节数进行统计学检验。

结果可见， MTC-220可显著降低 4T1小鼠肺转移灶结节数， 与溶媒对照组相比具有统计 学意义 (p<0.01)， 且具有剂量依赖性。 而 Taxol组小鼠肺转移灶结节数均未见明显改善。 与溶 媒对照组相比， MTC-220及 Taxol均可显著抑制原发瘤的生长。在实验过程� ��，未见 MTC-220 明显的毒副作用。 实验结果参见附图 23-25和附表 11。 附表 11： MTC-220抗小鼠乳腺癌自然转移活性 瘤重 肺重 肺转移灶 组别

(g) (mg) 结节数

Vehicle 1.08土 0.3 163土 11 39土 13

TAXOL(3mg/kg) 0.80*土 0.2 190土 49 41.2土 9

MTC-220(2.5mg/kg) 0.84*土 0.2 153土 18 ₁₈ .广 土 ₃

MTC-220(5.0mg/kg) 0.77*土 0.2 160土 15 13.3" ^{ΔΔν ν} ±5

MTC-220(10mg/kg) 0.71"土 0.2 147* ^{Δ ν} ±17 10.6" ^{ΔΔν ν} ±3 与溶媒对照组相比： "Ρ<0.01， *Ρ<0.05;

与紫杉醇组相比： ^ΔΔ Ρ<0.01， ^Δ Ρ<0.05; 实施例 49： MTC-220抗小鼠肺癌自然转移

Lewis肺癌保种的 C57B1/6小鼠， 颈椎脱臼法处死后， 解剖取出肿瘤， 无菌条件下制备肿 瘤细胞悬液 ( 5>< 10 ⁶ 个/ mL)。 另取 24只 C57B1/6小鼠腋窝皮下接种瘤液， 0.2mL/只 ( Ι χ ΙΟ ⁶ 个瘤细胞）。 接种后第 3天， 将小鼠随机分为 3组， 每组 8只， 分别腹腔注射 Taxol (6mg/kg), MTC-220 (10mg/kg )及对照溶媒， 每天一次。 自接种后第 7天始， 每隔两天用游标卡尺测量肿 瘤长径和短径， 以公式： （1/2)χ长径 χ(短径) ² 计算肿瘤大小。 接种后第 18天结束给药， 颈椎脱 臼法处死小鼠， 称体重。 解剖取出肿瘤、 脾脏、 肺脏， 称重。 将肺脏放入 Bouin's固定液固定 24h， 计数肺表面转移结节数。 以 Mann- Whitney U检验对肺转移结节数进行统计学检验。

结果可见， MTC-220可显著降低 LLC小鼠肺转移灶结节数， 与溶媒对照组相比具有统计 学意义 (p<0.05)，而 Taxol组小鼠肺转移灶结节数未见明显改善。与� ��媒对照组相比， MTC-220 及 Taxol均可显著抑制原发瘤的生长。 在实验过程中， 未见 MTC-220明显的毒副作用， 小鼠 体重呈增长趋势。 实验结果参见附图 26-28和附表 12。 附表 12: MTC-220抗小鼠 Lewis肺癌自然转移活性

瘤重 肺转移灶

组别 肺重 (mg)

(g) 结节数

Vehicle 5.75土 1.6 205土 121 31.4土 11

TAXOL (6mg/kg) 4.21*土 1.1 161土 27 24.9土 9

MTC-220 lOmg/kg 3.84*土 1.4 152土 37 16.5* ^Δν 土 9 与溶媒对照组相比： **Ρ<0.01， *Ρ<0.05;

与紫杉醇组相比： ^ΔΔ Ρ<0.01， ^Δ Ρ<0.05. 实施例 50: MTC-220抗小鼠 Lewis肺癌人工转移

Lewis肺癌保种的 C57B1/6小鼠， 颈椎脱臼处死后， 解剖取出肿瘤， 无菌条件下制备肿瘤 细胞悬液（1.5χ 10 ⁶ 个 / mL)。 另取 50只 C57B1/6小鼠尾静脉注射该瘤液， 0.2mL/只 （3χ 10 ⁵ 个 瘤细胞）。 接种后第 2天， 将小鼠随机分为 5组， 每组 10只， 分别腹腔注射 Taxol (3mg/kg), MTC-220 (2.5mg/kg, 5mg/kg or lOmg/kg；)及对照溶液。连续给药 28天后结束给药，颈椎脱臼法 处死小鼠， 称体重。 解剖取出脾脏、 肺脏， 称重。 将肺脏放入 Bouin's固定液固定 24h， 计数 肺表面转移结节数。 以 Mann- Whitney U检验对肺转移结节数进行统计学检验。

结果可见， MTC-220可显著降低 LLC小鼠肺转移灶结节数， 与溶媒对照组相比具有统计 学意义， 且具有剂量依赖性。 而 Taxol组小鼠肺转移灶结节数未见明显改善。 实验结果参见附 图 29和附表 13。

附表 13 : MTC-220 抗小鼠 Lewis 肺癌转移活性

组别 体重 肺重 肺转移灶

(g) (mg) 结节数

Vehicle 19.3土 1.3 397土 301 35.0土 21

TAXOL (3mg/kg) 17.Γ土 2.8 497土 491 38.5土 28 MTC-220 (2.5mg/kg) 19.0±1.9 334土 217 16.4 ±1

MTC-220 ( 5mg/kg) 18.4土 2.3 492土 353 15.0*土 7 MTC-220 ( lOmg/kg) 17.4**土1.5 393土 326 11.8"土 6.8 与溶媒对照组相比： **P<0.01， *P<0.05 实施例 51: MTC-220单次给药毒性实验 实验方法：

参照国家食品药品监督管理局颁布的 《细胞毒类抗肿瘤药物非临床研究技术指导原 则》、 《化学药物急性毒性研究技术指导原则》，以 最大给药剂量法进行 ICR小鼠静脉注射 MTC-220 单次给药毒性试验。 实验结果：

在以 l ^.Sn^kg— ¹ 的剂量给动物静脉注射 MTC-220后， 给药组部分动物自主活动减少， 个别动物出现跳跃症状， 约 lOmin恢复； 溶媒组 （环氧蓖麻油： DMSO:生理盐水 =5:5:90， 体积比） 及对照组未见异常。 经 14天连续观察， 各组动物行为、 自主活动及体征表现均正 常， 且无一死亡。

各给药组、溶媒组动物体重与对照组相比较无 显著性差异。解剖学检査：各组动物心脏、 肝脏、 脾脏、 肺脏、 肾脏、 胃肠等诸脏器均未见异常改变。

实验结论：

以 l CSmgAg 给 ICR小鼠单次尾静脉注射 MTC-220后， 未见动物出现明显毒性症状及 死亡情况，故认为该供试品 ICR小鼠静脉注射的 MTD值大于其最大给药剂量（l CSn^k^ 以上药理学实验结果以及单剂量毒性实验结果 证明， 紫杉烷类抗肿瘤试剂与胞壁酰二肽 简化物的共缀物的设计思路正确， 是一类安全的新化合物， 可开发为新型抗肿瘤及抗肿瘤转 移双功能的新药。