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Title:
COMPOSITION FOR COATING AND ENCRUSTING INDUSTRIAL OR NON-INDUSTRIAL SEEDS FOR BIOLOGICAL CONTROL OF PHYTONEMATODE AND PHYTOPATHOGENIC SPECIES
Document Type and Number:
WIPO Patent Application WO/2020/047625
Kind Code:
A1
Abstract:
The present patent relates to a composition for coating and encrusting seeds of cultivated plants for biological control of phytonematode and phytopathogenic species and more specifically relates to a composition of Bacillus spp. with nematicidal and fungicidal effects to mitigate damage and to control phytonematode species. Particularly, the composition relates to a formulation with quantities of Bacillus subtilis or mutants thereof, Bacillus licheniformis or mutants thereof, or Bacillus amyloliquefaciens or mutants thereof, used in conjunction or in isolation, concomitantly with additives and excipients, in compositions for coating and encrusting seeds for biological control purposes and with nematicidal and fungicidal properties in cultivated plants.

Inventors:
MARTINS THALES FACANALI (BR)
BERNARDO EDUARDO ROBERTO DE ALMEIDA (BR)
Application Number:
PCT/BR2018/050423
Publication Date:
March 12, 2020
Filing Date:
November 14, 2018
Export Citation:
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Assignee:
AGRIVALLE BRASIL IND E COMERCIO DE PRODUTOS AGRICOLAS LTDA (BR)
International Classes:
A01N63/00
Domestic Patent References:
WO2012020014A12012-02-16
WO2018045063A12018-03-08
Foreign References:
US20030082165A12003-05-01
CN107858315A2018-03-30
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See also references of EP 3847891A4
Attorney, Agent or Firm:
BEERRE ASSESSORIA EMPRESARIAL LTDA (BR)
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Claims:
REIVI N D I CAÇÕ ES

1) "COMPOSIÇÃO PARA O RECOBRIMENTO E INCRUSTAÇÃO SEMENTES INDUSTRIAIS OU NÃO PARA O CONTROLE BIOLÓGICO DE FITONEMATÓIDES E FITOPATÓGENOS", mais precisamente trata-se de uma composição formulada a partir de um mix de Bacillus spp. com efeitos nematicidas e fungicidas na mitigação dos danos e controle de fitonematoides, caracterizado por composição idealizada para recobrimento e incrustação de sementes industriais ou não compreender microrganismos em unidades formadoras de colónia, u.f.c. e em qualquer concentração: bacillus subtilis - 1,0 x IO10 u.f.c./g; bacillus licheniformis - 1,0 x 1010 u.f.c./g; bacillus amyloliquenfacies - 1,0 x 106 u.f.c./g.

2) "COMPOSIÇÃO PARA O RECOBRIMENTO E INCRUSTAÇÃO SEMENTES

INDUSTRIAIS OU NÃO PARA O CONTROLE BIOLÓGICO DE FITONEMATÓIDES E FITOPATÓGENOS", de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por elementos da composição apresentarem as seguintes concentrações bacillus subtilis 1,0 a 20,0%; bacillus licheniformis 1,0 a 20,0%; bacillus amyloliquefaciens 1,0 a 10,0%; aditivos 1,0 a 20,0%; excipientes 95,0 a 10,0%.

3) "COMPOSIÇÃO PARA O RECOBRIMENTO E INCRUSTAÇÃO SEMENTES

INDUSTRIAIS OU NÃO PARA O CONTROLE BIOLÓGICO DE FITONEMATÓIDES E FITOPATÓGENOS", de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por aditivos serem dispersantes selecionados do grupo consistindo de polímeros iônicos solúveis em água, polímeros aniônicos solúveis em água e surfactantes selecionados do grupo consistindo de surfactantes aniônicos e surfactantes não iônicos e combinações entre eles.

4) "COMPOSIÇÃO PARA O RECOBRIMENTO E INCRUSTAÇÃO SEMENTES

INDUSTRIAIS OU NÃO PARA O CONTROLE BIOLÓGICO DE FITONEMATÓIDES E FITOPATÓGENOS", de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por excipientes serem do grupo que consiste em sílicas, talco, bentonita, carboidratos, carbonatos, derivados do leite (soro e leite em pó) e combinações entre eles.

5) "COMPOSIÇÃO PARA O RECOBRIMENTO E INCRUSTAÇÃO SEMENTES

INDUSTRIAIS OU NÃO PARA O CONTROLE BIOLÓGICO DE FITONEMATÓIDES E FITOPATÓGENOS", de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por composição ser empregada, não se limitando a formulação em pó molhável, emulsões, suspensões concentradas e grânulos.

6) "COMPOSIÇÃO PARA O RECOBRIMENTO E INCRUSTAÇÃO SEMENTES

INDUSTRIAIS OU NÃO PARA O CONTROLE BIOLÓGICO DE FITONEMATÓIDES E FITOPATÓGENOS", de acordo com a reivindicação 1, caraterizado por uso dos componentes da composição poderem ser separados, particularmente, bacillus subtilis e seus mutantes, bacillus licheniformis e seus mutantes e bacillus amyloliquefaciens e seus mutantes no processo de revestimento e incrustação de sementes para o manejo fitossanitário de fitonematóides e fitopatógenos, a ser aplicada durante o tratamento industrial ou não de sementes.

7) "COMPOSIÇÃO PARA O RECOBRIMENTO E INCRUSTAÇÃO SEMENTES

INDUSTRIAIS OU NÃO PARA O CONTROLE BIOLÓGICO DE FITONEMATÓIDES E FITOPATÓGENOS", de acordo com a reivindicação 1, caraterizado por uso dos componentes da composição poderem ser separados, particularmente, bacillus subtilis e seus mutantes, bacillus licheniformis e seus mutantes e bacillus amyloliquefaciens e seus mutantes no processo de revestimento e incrustação de sementes para o manejo fitossanitário de fitonematóides e fitopatógenos, durante o tratamento industrial ou não de sementes.

8) "COMPOSIÇÃO PARA O RECOBRIMENTO E INCRUSTAÇÃO SEMENTES INDUSTRIAIS OU NÃO PARA O CONTROLE BIOLÓGICO DE FITONEMATÓIDES E FITOPATÓGENOS", de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por composição ser empregada no controle de fitonematóides, não se limitando a Pratylenchus brachyurus, Pratylenchus zea, Meloidogyne incógnita, Meloidogyne javanica, Heterodera glycines, Rotylenchulus reniformis, Pratylenchus coffea, Meloidogyne exigua, Helicotilechus dihystera, dentre outros.

9) "COMPOSIÇÃO PARA O RECOBRIMENTO E INCRUSTAÇÃO SEMENTES INDUSTRIAIS OU NÃO PARA O CONTROLE BIOLÓGICO DE FITONEMATÓIDES E FITOPATÓGENOS", de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por composição ser empregada no controle de fitopatógenos, não se limitando a Rhizoctonia solani, Fusarium solani, Fusarium oxysporum, Fusarium gromineorum, Fusarium semitectum, Colletotrichum gloeosporioides, Colletotrichum truncatum, Colletotrichum lindemuthianum, Macrophomna phaseolina, Sclerotinia sclerotiorum, Botrytis cinerea, Penicillium digitatum, dentre outros.

10) "COMPOSIÇÃO PARA O RECOBRIMENTO E INCRUSTAÇÃO SEMENTES INDUSTRIAIS OU NÃO PARA O CONTROLE BIOLÓGICO DE FITONEMATÓIDES E FITOPATÓGENOS", de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por composição ser empregada no revestimento e incrustação de plantas cultivadas, não se limitando a Brachiaria spp. (Brachiaria brizantha, Brachiaria decumbens, Brachiaria humidicola, Brachiaria mutica, Brachiaria ruziziensis, Brachiaria arreda, Brachiaria dictyneura), Panicum spp. (Panicum maximum), Sorghum spp., Pennisetum americanum, Glycine max, Zea mays, Gossypium hirsutum, hortaliças (Solanum lycopersicum, Allium cepa, Lactuca sativa, Daucus carota, Capsicum annuum), florestais (Eucaiyptus spp., Tectona grandis, F!evea brasiliensis, Pinus sp.), Nicotiana tabacum, ornamentais, Crotalaria spp. (Crotalaria juncea, Crotalaria spectabilis, Crotalaria ochroleuca, Crotalaria paulina, Crotalaria breviflora).

Description:
"COMPOSIÇÃO PARA O RECOBRIMENTO E INCRUSTAÇÃO SEMENTES INDUSTRIAIS OU NÃO PARA O CONTROLE BIOLÓGICO DE FITONEMATÓIDES E FITOPATÓGENOS".

CAMPO TÉCNICO DA I NVENÇÃO

[1] Trata a presente patente de invenção de uma composição para o recobrimento e incrustação sementes industriais ou não para o controle biológico de fitonematóides e fitopatógenos, mais particularmente trata-se de uma composição formulada a partir de um mix de Bacillus spp. com efeitos nematicidas e fungicidas na mitigação dos danos e controle de fitonematóides, não se limitando à Pratylenchus brachyurus, Pratylenchus zea, Meloidogyne incógnita, Meloidogyne javanica, Heterodera glycines, Rotylenchulus reniformis, Pratylenchus coffea, Meloidogyne exígua, Helicotilechus dihystera e fitopatógenos, não se limitando à Rhizoctonia solani, Fusarium solani, Fusarium oxysporum, Fusarium graminearum, Fusarium semitectum, Colletotrichum gloeosporioides, Colletotrichum truncatum, Colletotrichum lindemuthianum, Macrophomna phaseolina, Sclerotinia sclerotiorum, Botrytis cinerea, ' Penicillium digitatum’, em adição aos polímeros e/ou componentes do revestimento/incrustação de sementes das plantas cultivadas, não se limitando a Brachiaria spp. ('Brachiaria brizantha, Brachiaria decumbens, Brachiaria humidicola, Brachiaria mutica, Brachiaria ruziziensis, Brachiaria arrecta, Brachiaria dictyneura), Panicum spp. (Panicum maximum ), Sorghum spp., Pennisetum americanum, Glycine max, Zea mays, Gossypium hirsutum, hortaliças (Solanum lycopersicum, Allium cepa, Lactuca sativa, Daucus carota, Capsicum annuum Group), florestais (Eucalyptus spp., Tectona grandis, Hevea brasiliensis, Pinus sp.), Nicotiana tabacum, ornamentais, Crotalaria spp. ( Crotalaria juncea, Crotalária spectabilis, Crotalaria ochroleuca, Crotalaria paulina, Crotalaria breviflora) utilizados no tratamento de sementes de forma industrial ou não. Pertencente ao setor técnico de biotecnologia, essa composição amplia a eficiência no recobrimento e incrustação e específica desses microrganismos por utilizar mecanismos de ação diferentes e complementares. Particularmente, a composição trata de uma formulação utilizando Bacillus subtilis e seus mutantes, Bacillus licheniformis e seus mutantes, e Bacillus amyloliquefaciens e seus mutantes. HISTÓRICO DA INVENÇÃO

[2] No atual cenário agrícola mundial, os ganhos de produção têm sido, muitas vezes, vinculados a aumentos gradativos de produtividade sem que ocorra um aumento na área agricultável. Esses aumentos de produtividade vêm sendo obtidos por meio de avanços significativos nas técnicas de cultivo, utilização de variedades mais adaptadas a fatores bióticos e abióticos, adequação do requerimento nutricional das plantas e, não obstante, pela mitigação dos danos causados por pragas agrícolas.

[3] Dentre esses avanços, o controle de pragas e doenças ainda é visto como o maior desafio na manutenção da produtividade das culturas. Diversas técnicas podem ser empregadas, com maior ou menor grau de eficácia, mas, de maneira geral, o uso de defensivos químicos continua sendo o método mais utilizado.

[4] Entretanto, para o controle de fitonematoides e fitopatógenos no solo, o uso de defensivos químicos tem mostrado, muitas vezes, resultados insatisfatórios. A maior parte desse problema decorre do uso indiscriminado e excessivo dessas moléculas, que, frequentemente tem ocasionado problemas de intoxicação humana e/ou animal, concomitantemente a contaminação do meio ambiente. Esses eventos têm levado a um aumento da percepção pública contrário ao uso de nematicidas químicos e consequentemente, a uma busca incessante para técnicas de manejo mais seguras ou alternativas.

[5] Assim, controles alternativos para fitonematoides e fitopatógenos vêm sendo empregados sempre que possível, mas, adversidades inerentes à biologia desses organismos, costumam inviabilizar o uso de algumas técnicas. Por exemplo, variedades de cultivares resistentes são raramente disponíveis, enquanto que, rotação de cultura costuma ser inviável, devido aos custos económicos ou a grande gama de hospedeiros para algumas espécies (Bird et al., 2003).

[6] A formação de palhada para o sistema de plantio direto, tem-se tornado uma alternativa viável para a diminuição dos fitonematoides e de algumas doenças, pois a grande parte das braquiárias utilizadas neste sistema possuem resistência a maioria dos fitonematoides (com exceção de Pratylenchus brachyurus - Boletim de pesquisa da soja 2010 - FMT) e não são hospedeiras a algumas doenças presentes nas principais espécies de plantas cultivadas para alimentação humana.

[7] Nesse contexto, o controle biológico de fitonematoides e fitopatógenos utilizando microrganismos vem sendo considerado uma opção viável, tanto para tratamento de sementes das culturas de interesse, como para tratamento de sementes de pastagens para formação de palhada. Sua principal vantagem, frente as demais tecnologias, recai na possibilidade de explorar modos de ação diferentes dos defensivos químicos (Zucchi et ai. 2008). De fato, mecanismo de ação como antagonismo e parasitismo estão sendo largamente empregados em produtos comerciais.

[8] Antagonismo costuma ser o modo de ação predominante de bactérias contra os fitonematoides. Além do efeito direto na mortalidade dos fitonematoides, esses compostos nematicidas podem apresentar ação direta na eclosão de ovos ou mobilidade dos nematoides e, efeitos indiretos, como alteração dos exudatos radiculares ou indução de resistência também são observados (Sikora & Hoffmann- Hergarten, 1992; Hasky-Gdnther et al. 1998).

[9] O uso de bactérias como agentes de controle biológico tem se mostrado uma alternativa promissora no sistema produtivo (Hallmann et al. 2004), como, por exemplo para Meloidogyne graminicola, onde Bacillus megaterium reduziu em 40% a penetração e formação de galhas desse fitonematoides nas raízes de arroz, além de diminuir em 60% sua migração para rizosfera e reduzir em 60% a eclosão de ovos (Sikora & Padgham 2007).

[10] Segundo Da Silva et al. (2007) o uso de Bacillus subtilis para o controle de Pratylenchus brachyurus foi tão bom quanto o tratamento químico utilizando Abamectina, apresentando populações extremamente baixas destes fitonematoides no solo, cerca de 1 fitonematoide/cm 3 de solo, reduzindo em torno de 90% esta população frente ao tratamento testemunha. Outros resultados nesta linha de pesquisa, utilizando também Bacillus subtilis para tratamento de sementes é evidenciado por Da Silva et al. (2007), mostrando que esta alternativa de manejo proporcionou reduções na ordem de 50,06% da população de Pratylenchus spp. 30 dias após a semeadura, agregando 18% em produtividade.

[11] Resultados semelhantes foram encontrados por Higaki (2012) utilizando Bacillus subtilis para controle de Rotylenchulus reniformis e Pratylenchus brachyurus em algodoeiro. O tratamento com o microrganismo apresentou reduções superiores a 50% na população desses fitonematóides nas raízes da cultura. Outro dado interessante relatado pelo autor, foi que as plantas tratadas com tal microrganismos apresentaram incrementos de massa fresca de raízes e na parte aérea na ordem de 36 e 47%, respectivamente, frente ao tratamento testemunha. De acordo com Araújo et ai. (2008), os mecanismos de ação responsáveis pela promoção de crescimento em plantas podem estar ligados inicialmente à inibição direta do patógeno e pela indução de resistência sistémica, dentre outras. Muitas vezes é difícil reconhecer os mecanismos e relacioná-los à promoção direta de crescimento, visto que mais de um mecanismo é produzido pela bactéria.

[12] Para o controle biológico de fitopatógenos em plantas agricultáveis, Cook & Baker (1983) relatam que a caracterização de efetividade desta prática de manejo é a redução da soma de inoculo ou das atividades determinantes da doença, provocada por um patógeno, realizada por ou através de um ou mais organismos que não o homem. Tendo em vista esse conceito de ação, Bettiol et al. (2008) relatam que o uso de Bacillus subtilis tem obtido sucesso para controlar o oídio (causado pelo fungo Uncinula necato) e a podridão-cinzenta (causado pelo fungo Botrytis cinerea) da uva e em outras culturas há vários anos no Chile. Segundo Mattos (2010), o uso da mistura de B. subitilis e B. licheniformis, proporcionou reduções significativas da incidência do bolor verde, causado pelo fungo Penicillium digitatum, em frutos de pós colheita da laranja "pera".

[13] O gênero Bacillus spp. é reconhecidamente um excelente produtor de compostos antimicrobianos (Huang & Chang, 1975; Baker et al., 1983; Motomura & Hirooka, 1996) e a constatação da produção de substâncias inibidoras aos fitopatógenos, produzidas por diversos isolados de Bacillus spp., é especialmente importante para o entendimento dos mecanismos de ação desses microrganismos para o antagonismo. As bactérias antagónicas, a exemplo de B. subtilis, de modo geral agem significativamente por antibiose e, ocasionalmente, por parasitismo e competição. Dessa forma, o controle da doença pode ser efetivo devido às substâncias produzidas e, não apenas pela introdução massal dos agentes de biocontrole (Arras & Arru, 1997). Microrganismos que agem por antibiose, geralmente têm amplo espectro de ação, de forma que na inibição dos fungos a produção de substâncias tóxicas é mais efetiva do que qualquer outro mecanismo de ação envolvido.

[14] Apesar dessas vantagens, a maioria dos produtos existentes baseiam-se na premissa de explorar um único microrganismo para controlar fitonematoides. Conforme relatado, alguns agentes de controle biológico possuem mais de um mecanismo de ação, os quais podem atuar direta ou indiretamente nos fitonematoides e fitopatógenos alvos. Entretanto, associações entre os diversos agentes de biocontrole, ampliam o espectro de ação desses microrganismos contra fitonematoides e fitopatógenos, ainda é pouco explorado.

ANÁLISE DO ESTADO DA TÉCNICA

[15] Em pesquisa realizada em bancos de dados especializados foi encontrado um documento referente ao controle biológico de fitonematoides e fitopatógenos, tal como, o documento de n Q . PI 0605722-5 que trata de uso de produtos do processamento de sementes de abóbora (Cucurbita spp.) e de mamão ( Carica papaya) para o controle de fitonematoides e outros fitopatógenos e insetos de solo. O presente pedido de patente de invenção consiste na utilização de produtos de processamento de sementes, de abóbora (Cucurbita spp.) e de mamão (Carrica papaya) para o controle de fitonematoides e outros fitopatógenos e insetos de solo, mais particularmente, consiste em preparações precursoras de pesticidas, na forma de farinhas, farelos ou extratos de sementes de abóbora e de mamão, introduzidas no solo juntas ou separadamente, de forma similar aos fertilizantes granulados, diretamente ou misturadas com carreadores como vermiculita, polímeros a base de amido, ou carreadores orgânicos como sabugos de milho moídos, fibra de caco, fibra de pinus e outros, para otimizar suas propriedades de manuseio, e os extratos podem ser aplicados ao solo na forma de rega. Microrganismos de controle biológico de nematóides, como fungos nematófagos, rizobactérias, bactérias endofiticas e 'Pasteuria penetrans ', podem ser adicionados na formulação para aumentar a eficiência de controle. Essa invenção, composta de produtos naturais e biodegradáveis, será aplicada no setor agrícola para substituir pesticidas altamente tóxicos sem riscos para seres humanos e o meio ambiente.

[16] Apesar do referido documento apresentar solução para controle biológico de fitonematoides e fitopatógenos, o mesmo se difere do composto ora inovado, e, portanto, não apresenta anterioridade em relação a composição ora requerida garantindo, assim, que a mesmo atenda aos requisitos legais de patenteabilidade.

OBJETIVOS DA INVENÇÃO

[17] Assim, o objetivo da presente invenção é aplicar composições efetivas no recobrimento e incrustação de sementes para o controle de fitonematoides e fitopatógenos, atuando no controle da pragas alvo em adição nos polímeros e/ou componentes do revestimento/incrustação de sementes das plantas cultivadas, não se limitando a Brachiaria spp. (Brachiaria brizantha, Brachiaria decumbens, Brachiaria humidicola, Brachiaria mutica, Brachiaria ruziziensis, Brachiaria arreda, Brachiaria di yneura), Panicum spp. (Panicum maximum), Sorghum spp., Pennisetum americanum, Glycine max, Zea mays, Gossypium hirsutum, hortaliças (Solanum lycopersicum, Allium cepa, Lactuca sativa, Daucus carota, Capsicum annuum ), florestais (Eucalyptus spp., Tectona grandis, Hevea brasiliensis, Pinus sp.), Nicotiana tabacum, ornamentais, Crotalaria spp. ( Crotalaria juncea, Crotalaria spedabilis, Crotalaria ochroleuca, Crotalaria paulina, Crotalaria breviflora) utilizados no tratamento de sementes de forma industrial ou não. Essa composição envolve o recobrimento e incrustação de sementes e o uso de Bacillus spp. para controle de fitonematoides e fitopatógenos.

DESCRIÇÃO RESUMIDA DA INVENÇÃO

[18] A presente invenção refere-se ao uso efetivo de uma composição para o recobrimento e incrustação contendo quantidades de ' Bacillus subtilis ' ou seus mutantes, ' Bacillus licheniformis' ou seus mutantes, ' Bacillus amyloliquenfacies ' ou seus mutantes, concomitantemente com aditivos e excipientes, em composições biológicas com propriedades nematicidas e fungicidas para o controle de fitonematóides e fitopatógenos em plantas adicionados no revestimento/incrustação do tratamento de sementes de forma industrial e não.

VANTAGENS OBTIDAS

[19] O uso da composição para o recobrimento e incrustação de sementes cultivadas, tratadas industrialmente ou não, contendo Bacillus spp. adicionados aos polímeros e/ou componentes do revestimento/incrustação de sementes tratadas industrialmente ou não, assim obtida, oferece as seguintes vantagens:

- Oferece vantagem no processo por facilitar a secagem e melhorar os aspectos físicos das misturas no processo de recobrimento e incrustação;

- Favorece desenvolvimento das plantas cultivados, propiciando incrementos no parâmetros de crescimento radículas e foliar;

- Apresenta ser uma alternativa ao uso de nematicidas químicos, vindo ao encontro do interesse da sociedade para produtos mais ecologicamente seguros;

- Apresenta ser uma alternativa ao uso de fungicidas químicos, vindo ao encontro do interesse da sociedade para produtos mais ecologicamente seguros;

- Explora uma gama maior de mecanismos de ação contra fitonematóides, garantindo, assim, uma maior eficiência;

- Explora uma gama maior de mecanismos de ação contra fitopatógenos, garantindo, assim, uma maior eficiência;

- Diminui a seleção de fitonematóides resistentes a produtos químicos;

- Diminui a seleção de fitopatógenos resistentes a produtos químicos;

- Possui facilidade operacional para o emprego da tecnologia no tratamento de semente de forma industrial ou não;

- É capaz de ser empregado nos constituintes do revestimento/incrustação de sementes de, Brachiaria spp. (Brachiaria brizantha, Brachiaria decumbens, Brachiaria humidicola, Brachiaria mutica, Brachiaria ruziziensis, Brachiaria arreda, Brachiaria di yneura), Panicum spp. (Panicum maximum), Sorghum spp., Pennisetum americanum, Glycine max, Zea mays, Gossypium hirsutum, hortaliças (Solanum lycopersicum, Allium cepa, Lactuca sativa, Daucus carota, Capsicum annuum ), florestais ( Eucalyptus spp., Tectona grandis, Hevea brasiliensis, Pinus sp.), Nicotiana tabacum, ornamentais, Crotalaria spp. ( Crotalaria juncea, Crotalaria spectabilis, Crotalaria ochroleuca, Crotalaria paulina, Crotalaria breviflora) no tratamento industrial ou não.

[20] A abrangência da presente patente de invenção, não deve ser limitada aos exemplos de aplicação, mas sim, aos termos definidos nas reivindicações e seus equivalentes.

DESCRIÇÃO DA INVENÇÃO

[21] A presente patente de invenção se refere à "COMPOSIÇÃO PARA O RECOBRIMENTO E INCRUSTAÇÃO SEMENTES INDUSTRIAIS OU NÃO PARA O CONTROLE BIOLÓGICO DE FITON EMATÓIDES E FITOPATÓGENOS", mais precisamente trata-se de composição para o recobrimento e incrustação de sementes para controle biológico de fitonematóides e fitopatógenos.

[22] Segundo a presente invenção, a composição é idealizada para o recobrimento e incrustação de sementes industriais ou não para o controle biológico de fitonematóides e fitopatógenos compreendem os microrganismos, mas não se limita a uma concentração final de (em unidades formadoras de colónia, u.f.c.):

- Bacillus subtilis - 1,0 x 10 10 u.f.c./g

- Bacillus licheniformis - 1,0 x 10 10 u.f.c./g

- Bacillus amyloliquenfacies - 1,0 x 106 u.f.c./g

[23] Os isolados foram identificados e classificados pela Coleção Brasileira de Microrganismos de Ambiente e Indústria (CBMAI/UN ICAMP), onde encontram-se depositados.

[24] A composição apresenta as seguintes concentrações:

[25] Os aditivos podem ser, mas não se limita a dispersantes selecionados do grupo consistindo de polímeros iônicos solúveis em água, polímeros aniônicos solúveis em água, surfactantes selecionados do grupo consistindo de surfactantes aniônicos e surfactantes não iônicos e combinações entre eles.

[26] Os excipientes podem ser, não se limitando a, do grupo que consiste em: sílicas, talco, bentonita, carboidratos, carbonatos, caseína, soro de leite e derivados de leite e combinações entre eles.

[27] A composição deve ser empregada como formulação em pó molhável. Entretanto, outras formulações contendo esses microrganismos, tais como, emulsões, suspensões concentradas, grânulos, etc. também podem ser utilizadas.

EXEMPLOS DE OBTENÇÃO

[28] Uma composição contendo 7,0% de Bacillus subtilis, 7,0% de Bacillus licheniformis, 4,5% de Bacillus amyloliquefaciens, 3,0% de polímero de estireno acrílico, 1,0% surfactante aniônico e 67,5% de inerte foi formulada para avaliar sua eficiência no controle de fitonematóides e fitopatógenos. Os exemplos abaixo ilustram o uso dessa composição:

[29] Exemplo 1: Utilização de uma composição biológica no tratamento industrial de sementes de braquiárias incrustadas para controle de Pratylenchus brachyurus.

Objetivo

[30] Avaliar o efeito, em condições de campo, de sementes de Brachiaria spp. incrustadas com uma composição biológica em populações de Pratylenchus brachyurus e possíveis incrementos nas plantas, utilizando o tratamento de semente.

Material e Métodos

[31] Delineamento experimental: blocos inteiramente casualizados, com seis tratamentos e cinco repetições. As plantas foram dispostas em seis fileiras de 6 m de comprimento cada e espaçamento de 50 cm entre linhas, sendo a parcela útil constituída pelas quatro fileiras centrais, totalizando 10 m 2 .

[32] Tratamentos e forma de aplicação: As sementes de braquiária utilizadas para realização do ensaio foram das espécies B. ruziziensis e B. brizantha CV BRS Piatõ previamente incrustadas e tratadas com a composição biológica, sementes, incrustradas sem a composição biológica e sementes nuas, sem incrustação. As sementes foram semeadas manualmente no sulco de plantio. Aos 90 dias após a semeadura (DAS), as plantas foram cuidadosamente retiradas, preservando todo o sistema radicular, e acondicionadas em sacos plásticos juntamente com o solo obtido da rizosfera. A parte aérea foi separada do sistema radicular para obtenção do peso fresco e peso seco da parte aérea. Em seguida, os sistemas radiculares foram lavados cuidadosamente em água corrente, as raízes mantidas sobre papel filtro até a eliminação do excesso de água e posteriormente pesadas, obtendo-se o peso fresco das raízes dessas amostras. Após a avaliação, as raízes foram cortadas em pedaços de aproximadamente 1,0 cm e trituradas por 10 segundos em água com o auxílio de um liquidificador, de acordo com o método de Coolen & D'Herde (1972). Para obter a população do solo, utilizou-se o método de flutuação e centrifugação, conforme descrito por Jenkins (1964). A quantificação de P. brachyurus, em cada suspensão, foi realizada com o auxílio de câmara de Peters e microscópio biológico. Após obtenção dos dados, determinou-se o número de P. brachyurus/grama de raiz, número de espécimes por 100 cm 3 de solo e número total de nematoides (solo + raiz). Para obter a eficácia relativa dos tratamentos avaliados (%controle), considerou-se os valores médios do número de nematoides obtidos por grama de raiz na testemunha (semente sem incrustação) como 100%, conforme proposto por Abbott (1925).

Resultados e Discussão

[33] Os resultados obtidos para peso fresco de parte aérea e raízes aos 90 DAS não apresentaram diferenças estatísticas com a utilização de sementes incrustadas, independente da espécie avaliada (Tabela 1). Contudo, em ambas as espécies testadas, os valores de peso de parte aérea e de raiz foram superiores quando as sementes foram incrustadas com a formulação biológica, promovendo maior produção de forragem quando comparadas àquelas que não receberam. Tal incremento é mais destacado na forrageira B. brizantha CV BRS Piatõ, que apresentou ganhos entre 40 e 55% para a massa seca da parte aérea e radicular, respectivamente, em relação ao tratamento sem a incrustação e a composição biológica. Analisando comparativamente as sementes incrustadas, a que recebeu a composição biológica também apresentou incremento na massa seca de raiz e parte aérea, estas na ordem de 46 e 40%, respectivamente.

[34] - Tabela 1. Peso de parte aérea (g) e raiz (g) aos 90 DAS, utilizando sementes de braquiária submetidas a diferentes tratamentos nas sementes.

DAS - dias após a semeadura; BR- B. ruziziensis; BP B. brizantha CV BRS Piatã.

[35] Avaliando-se o número total de nematoides no solo juntamente com as raízes e número de nematoides por gramas de raiz, não foram observadas diferenças significativas entre os tratamentos (Tabela 2). Contudo, vale salientar que o tratamento de sementes incrustadas em B. ruziziensis com a composição biológica foi capaz de reduzir a população de nematoides de 39 e 50% em relação aos tratamentos sementes sem incrustação e sementes incrustadas, respectivamente, Analisando a quantidade de nematoides por grama de raiz, vemos que as sementes incrustadas que receberam a composição biológica apresentaram redução superior a 50% em ambas as espécies estudadas, dados que corroboram com Da Silva et ai. (2007) e Higaki (2012). Um fato interessante e que pode ser notado neste estudo é que a espécie B. brizantha CV BRS Piatã apresentou uma massa de raízes superior a espécie B. ruziziensis e apresentou uma 58% menos nematoides por grama de raiz no tratamento com a composição biológica, indicando que o nematoide está ocasionando danos e afetando a produção de raízes nestas duas espécies de forrageiras estudadas.

[36] - Tabela 2. Avaliação do número de nematoides em solo e raízes utilizando sementes de braquiária submetidas a diferentes tratamentos nas sementes.

BR- B. ruziziensis;BP B. brizantha CV BRS Piatd.

[37] Com base nos resultados obtidos pode-se comprovar que o tratamento de sementes de B. ruziziensis BP B. brizantha CV BRS Piatõ incrustadas com a formulação biológica controla P. brachyurus, podendo ser recomendado no manejo integrado deste nematoide na cultura.

Conclusões

[38] O uso de Bacillus spp. adicionados aos polímeros e/ou componentes do revestimento/incrustação de sementes tratadas industrialmente, mostra-se uma alternativa viável para o manejo de Pratylenchus brachyurus. Ainda, além da diversidade de mecanismos de ação desses microrganismos específicos, essa formulação biológica amplia os efeitos benéficos desses agentes de controle na mitigação dos danos causados por esse fitonematóide.

[39] A composição para controle biológico de fitonematoides e fitopatógenos deverá seguir o seguinte fluxo de eventos:

- Matéria prima: as matérias primas que irão compor o produto deverão ser recebidas e manipuladas por pessoas treinadas;

- Mistura: as matérias primas deverão ser pesadas e misturadas seguindo o procedimento operacional padrão (POP) nas proporções indicadas;

- Amostragem: após a mistura, deverão ser retiradas amostras para verificação e certificação das garantias do produto. Deve-se analisar número de unidades formadoras de colónias (u.f.c.)/g de produto; - Envase: o produto formulado que se apresentar dentro das especificações de garantia deverão ser envasados em frascos plásticos de 1,0; 5,0 e 10,0 kg, previamente rotulados. Os frascos/ pouchs são selados e fechados;

- Armazenagem: os frascos/ pouchs são acomodados em pallets e armazenados em local seco, arejado e protegido da luz, permanecendo nessa condição até ser despachado.

[40] O presente invento poderá ser aplicado tanto via sulco de plantio, via barra, como tratamento de sementes ou mesmo tratamento de semente industrial por sementeiras para o controle de fitonematoides e fitopatógenos. O método de aplicação deverá ser analisado caso a caso e dependerá das condições técnicas e necessidade de cada produtor.

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