ANTECEDENTES DE LA INVENTION Una caracteristica comun entre las enfermedades neurodegenerati- vas amiloides es la deposition de fibrils de alto peso molecular con estructura de lamina-beta cruzada a partir del autoensamblaje de una de las aproximadamente veinte proteins humanas de las que se conoce su implicación en este tipo de afecciones (Kelly, J. W. Curr. Op. Struct. Biol., 6 (1996) 11; Kelly, J. W. Structure, 5 (1997) 595; Kelly, J. W. Curr. Op. Struct.

Biol., 5 (1998) 101; Lansbury, P. T. Biochemistry, 31 (1992) 6865; Sipe, J. D.

Ann. Rev. Biochem., 61 (1992) 947; Sipe, J. D. Crit. Rev. in Clin. Lab. Sci., 31 (1994) 325; y Blake, C. , Serpell, L. Structure, 4 (1996) 989).

En el caso concreto de la transtiretina (TTR) que se engloba en el grupo de proteins amiloides mencionado anteriormente, la deposition de fibrils de su variante nativa que se infiltran en el corazón parece ser la causa de la amiloidosis sistémica senil (cardiomiopatía) (Cornwell, G. C. , et al., Biochem. Biophys. Res. Commun., 154 (1988) 648). Análogamente, la deposition de alguna de entre sus 60 mutantes conocidas en un solo

residuo que hacen a la TTR mas amiloidiogénica, parece asociada a una serie de alteraciones que se conocen colectivamente como polineuropatias amiloides familiares (Jacobson, D. R. , et al.. Adv. Human Genetics, 20 (1991) 69). A diferencia de otros sfndromes neurodegenerativos, estas enfermedades no afectan al cerebro pero si a ciertos organos y al sistema nervioso periférico. Asi los pacientes afectados por estas enfermedades familiars presentan neuropatias perifericas y/o disfunciones organisas causadas por neurotoxicidad amiloidea y/o interferencia fisica con el funcionamiento normal de organos vitales que se manifiestan a edades tan tempranas como los 20 anos. En la actualidad, no existe ni se ha propuesto ningun tratamiento farmacol6gico para esta clase, de enfermedades amiloides siendo la unica intervencion terapeutica disponible y efectiva el transplante de hígado, organo en el que se biosintetiza la transtiretina.

Las enfermedades amiloides relacionadas con la transtiretina fueron unas de las primeras en las que se descubrió que transcurren a través de formation de fibrils originadas por un cambio conformacional en una proteina concreta. En su forma natural, la TTR esta organizada como un tetramer que eventualmente se disocia en sus monomers los cuales son capaces de autoasociarse en fibrils de unos 130 A de diámetro constituidas a su vez por protofilamentos, cada uno de ellos formados por una estructura plegada en lamina-beta cruzada (Serpell L. C. et al. J. Mol. Biol., 254 (1995) 113; y Kelly J. W., et al., Adv. Protein Chem., 50,161). Este conocimiento a nivel molecular de la formation de las fibrilas de TTR ha sido posible gracias a que esta amiloidosis ha podido ser estudiada in vitro ya que el medio acido es un desencadenante natural del proceso (Colon, W. , et al. in Transthyretin acid induced denaturation is required for amyloid fibril formation in vitro.

Eds. , Plenum Press, New York, 1991, p 99). Asf, mediante experimentos de desnaturalización ácida parcial de TTR en un medio que simula las condiciones presentes en el lisosoma (pH: 5,5), se ha concluido que las fibrils se generan a partir de intermedios conformacionales (intermedio

amiloidogenico) de las unidades monomericas de la transtiretina. Estas investigaciones han confirmado que en forma tetramérica la TTR no es amiloidogénica, pero que la disociación del tetramer en un monomer con un estructura terciaria alterada pero definida es la que da lugar a la formation de fibrils (Lai, Z. , et al., J. W. Biochemistry, 35 (1996) 6470; y Quintas, A. , et al., J. Biol. Chem., 274 (1999) 32943).

La transtiretina, zambien conocida como prealbumina, se encuentra en el plasma humano (3,6 pM) y en el liquido cefalorraquideo. Esta compuesta por 4 cadenas peptidicas identical de 127 aminoácidos ricas en estructura beta formando un dfmero de dtmeros cuya masa es de 55 kDa y cuya estructura es conocida por difraccion de rayos X (Blake, C. C. F. , et al., J. Mol. Biol., 121 (1978) 339; y Hamilton, J. A. , et al., J. Biol Chem, 268 (1993) 2416). Este tetramer se une y transporta a la hormona tiroxina y a la proteina de union al retinol. Estudios de difracción de rayos X han revelado zambien que la TTR presenta dos lugares de union para la tiroxina que tienen forma de embudo y estan bien definidos por las interfases dimero-dimero (Wojtczak, A. , et al., J. Biol. Chem., 267 (1992) 353; y Wojtczak, A. , et al., Acta Cryst., D52 (1996) 758). Es decir, cada tetramer puede unirse a dos moléculas de tiroxina. Esta union muestra cooperatividad negativa para la entrada de la segunda molécula de ligando.

Recientemente se ha demostrado que la forma tetramérica de la TTR puede ser estabilizada frente al medio acido inductor de amiloideogénesis mediante la union a pequenas moléculas organisas que mimetizan la estructura del ligando natural. Las pruebas de que estos ligands previenen la formacion de fibrils provienen unicamente de experimentos in vitro y ex vivo. Entre estas moléculas se encuentran moléculas de antiinflamatorios no esteroideos como el acido flufenamico (Peterson, S. A. , et al., Proc. Natl.

Acad. Sci. USA, 95 (1998) 12956) y el diflunisal (Baures, P. W. , et al., J. W.

Bioorg. Med. Chem. , 7 (1999) 1339), asi como moléculas de una serie de

principios activos de fármacos entre los que se encuentran flavonas, tetrahidroquinolinas, dihidropiridinas y benzodiacepinas (Baures, P. W. , et al., Bioorg. Med. Chem., 6 (1998) 1389) asi como derivados del acido antranilico (Oza, V. B. , et al. Bioorg. Med. Chem. Lett., 9 (1999) 1).

De un modo puramente empirico e intuitivo estos estudios han Ilegado a elucidar algunos requerimientos estructurales que deben tener los inhibidores de la disociación del tetramer de TTR que pueden resumirse como sigue: - Estructuras bifenilo, dibenzofurano, diaril eter, estilbeno y flavona pueden acomodarse en el sitio de union (Baures, P. W. , et al., J. W. Bioorg.

Med. Chem., 6 (1998) 1389). Analogous del acido flufenámico con estructura de acido antranilico son tambien buenos inhibidores (Oza, V. B. , et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 9 (1999) 1). En general, parece que el farmacóforo debe tener dos anillos aromáticos pudiendo ser uno de ellos bi- o triciclico. Uno de los anillos o fusion de anillos ocuparfa la parte externa del sitio de union (Baures, P. W. , et al., Bioorg. Med. Chem., 7 (1999) 1339).

- La presencia de un grupo acido carboxilico posiblemente optimiza la union a la TTR via interacción con la (s) Lys en position 15 (Baures, P. W. , et al., J. W. Bioorg. Med. Chem., 6 (1998) 1389). Este grupo acido puede zambien ser un fenol (Baures, P. W. , et al., Bioorg. Med. Chem. , 7 (1999) 1339).

La busqueda de inhibidores de la disociación de TTR iniciada mediante estos primeros trabajos no ha sido sistemática y tan s6lo se ha descubierto que el acido flufenámico es un buen inhibidor. Asi, por ejemplo, se han ensayado 79 compuestos descritos en Baures et al., Bioorg. Med.

Chem. , 6 (1998) 1389, y en Baures, P. W. , et al., Bioorg. Med. Chem., 7 (1999) 1339, todos ellos de origen comercial. Asimismo, se han sintetizado

una serie de productos (Oza, V. B. , Petrassi H. M. , Purkey H. E., Kelly, J. W.

Bioorg. Med. Chem. Lett., 9 (1999) 1) en base a los datos estructurales obtenidos mediante el ana ! isis por difracción de rayos X del complejo de la TTR y el acido flufenámico (Peterson, S. A., Klabunde, T. , Lashuel, H. A., Purkey, H., Sacchettini, J. C., Kelly, J. W. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 95 (1998) 12956).

Igualmente, en la solicitud de patente internacional WO 98/27972 se describen compuestos que estabilizan una proteina amiloidogenica como la TTR mediante la formation de un conjugado proteína-fármaco. Entre dichos compuestos se mencionan compuestos antiinflamatorios no esteroideos (AiNEs) y, entre ellos, el diflunisal. Tambien, AINES tales como el ibuprofeno, la indometacina y el sulindac sulfuro se han postulado y siguen investigándose como posibles agentes terapéuticos de los procesos de amiloidosis que ocurren en la enfermedad de Alzheimer (S. Wegen et al.

Nature, 414 (2001) 212-216) El uso del diflunisal, entre otros AINEs, como ligando selectivo de la TTR ya se había descrito en la patente estadounidense US 5714142, en este caso para aumentar la vida media en suero de agentes farmacológicamente activos.

Sin embargo, el uso del diflunisal para estabilizar la estructura tetramérica de la TTR y, por tanto, para el tratamiento de enfermedades neurodegenerativas asociadas a la formacion de fibrils amiloides, sigue presentando una serie de inconvenientes propios de los AINEs como son los efectos secundarios de tipo gastrointestinal y cardiovascular.

Asi pues, continua existiendo en el estado de la tecnica la necesidad de proporcionar agentes inhibidores de la disociación de TTR alternativos que sean mas eficaces y que presenten menores efectos secundarios.

Sorprendentemente, los presentes autores han descubierto que una serie de derivados yodados del diflunisal son potentes agentes antiamiloidogénicos con una eficacia superior a la del diflunisal y, por tanto, con menores efectos secundarios que este, al poder ser administrados en menores dosis.

Hasta ahora no se han descrito derivados del diflunisal yodados en el anillo salicilico. En la patente europea EP 0082404 se describen una serie de derivados de tipo ester del diflunisal, utiles como antiinflamatorios, analgesicos y antipireticos, entre los que no se encuentran los mencionados derivados yodados.

El objeto de la presente invencion, por tanto, es proporcionar potentes agentes inhibidores de la amiloidogénesis. mas eficaces y con menos efectos secundarios.

OBJETO DE LA INVENCION Un objeto de la presente invention es proporcionar nuevos compuestos inhibidores de la amiloidogénesis.

Otro objeto de la presente invention es proporcionar un procedimiento de preparación de dichos compuestos.

Otro objeto de la presente invention es proporcionar una composición farmacéutica que contiene dichos compuestos.

Por último, otro objeto de la presente invención es proporcionar el uso terapéutico de dichos compuestos en el tratamiento de enfermedades neurodegenerativas y otras enfermedades.

DESCRIPCION DE LAS FIGURAS La Figura 1 muestra un gráfico en el que se representa la velocidad de agregación, vo, frente a la concentración de inhibidor, [I], para un compuesto de la invencion, yododiflunisal, con respecto a dos compuestos de la técnica, diflunisal y difluinsal éster.

DESCRIPCION DETALLADA DE LA INVENTION La invención proporciona un compuesto de formula estructural (I) : (I) en la que Ri es un grupo-NRaRb, siendo Ra y Rb, independientemente, un atomo de hidrógeno o un grupo alquilo C1-C6 ; un grupo-ORc siendo Rc un atomo de hidrógeno o un grupo alquilo C1-C6 ; un glucosil; un polihidroxialquilo C1-C6 ; o un grupo-NH-CH (Rd) -COORe, siendo Rd una cadena lateral de uno de los 20 alfa-aminoácidos naturals en cualquiera de sus dos formas L o D enantioméricamente puras y Re un atomo de hidrógeno o un grupo alquilo Ci-Ce y R2 es un atomo de hidrógeno, un grupo alquilo C1-C6, un glicosilo ; un polihidroxialquilo C1-C6 ; un grupo-C (=O)-Rf, siendo Rf un grupo atqui ! o Ci-

C6 ; o un grupo-CH2-COO-Rg, siendo Rg un atomo de hidrógeno o un grupo alquilo C1-C6 ; y sales farmacéuticamente aceptables del mismo.

En la presente invencion, el termino"grupo glicosilo"se refiere a un radical obtenido por eliminación de un grupo OH de la function hemiacetal de un monosacárido, es decir un grupo de formula C6H11O5 o C6H10O6 Asimismo, el termino"grupo polihidroxialquilo C1-C6"se refiere a un grupo alquilo sustituido con varios grupos OH.

En una realización preferente, los compuestos de la invención son compuestos de formula (I) en los que Ri se selecciona de entre: OH, NHa, OMe, OEt, o un grupo CH (Rd)-CORe, siendo Rd la cadena lateral de la glicina, la alanina, la leucina, la valina, el ácido aspártico o la asparagina y siendo Re H o un grupo alquilo Ci-Ce ; y R2 se selecciona entre: H, Me, glucosilo, un grupo-C (=O)-Rf, siendo Rf un grupo Me, Et, t-Bu; o un grupo- CH2-COO-Rg, siendo Rg un atomo de hidrógeno o un grupo t-Bu.

En otra realización preferente de la presente invencion, los compuestos de formula (I) se seleccionan de entre los siguientes compuestos: [1] acido 5- (2, 4-difluorofenil)-3-yodo-salicilico ; [2] 5- (2, 4-difluorofenil)-3-yodo-salicilato de etilo ; [3] 5- (2, 4-difluorofenil)-3-yodo-salicilato de metilo ; [4] 5- (2, 4-difluorofenil)-3-yodo-salicilamida ; [5] [2-aminocarbonil-4- (2, 4-difluorofenil)-6-yodo-fenoxi]-acetato de terc- butilo ; [6] acido [2-aminocarbonil-4- (2, 4-difluorofenil)-6-yodo-fenoxi] acetico ; [7] 1-O-ß-glucósido del ácido 5-(2,4-difluorofenil)-3-yodo-salicílico ; [8] 2', 4'-difluoro-4-metoxi-5-yodo- [1, 1'] bifenil-3-carboxilato de etilo ; [9] acido 2', 4'-difluoro-4-metoxi-5-yodo- [1, 1'] bifenil-3-carboxilico ;

[10] 2', 4'-difluoro-4-acetiloxi-5-yodo- [1, 1'] bifenil-3-carboxilato de etilo ; [11] acido 2', 4'-difluoro-4- (t-butilcarboniloxi)-5-yodo- [1, 1'] bifenil-3-carboxilico ; [12] acido 2', 4'-difluoro-4- (etilcarboniloxi)-5-yodo- [1, 1'] bifenil-3-carboxilico ; [13] ester etílico de la N- [5- (2, 4-difluorofenil)-3-yodo-saliciloil] glicina ; [14] N- [5- (2, 4-difluorofenil)-3-yodo-saliciloil] glicina ; [15] N- [5- (2, 4-difluorofenil)-3-yodo-saliciloil] alanina ; [16] N- [5- (2, 4-difluorofenil)-3-yodo-saliciloil] leucina ; [17] N- [5- (2, 4-difluorofenil)-3-yodo-saliciloil] serina; [18] N- [5- (2, 4-difluorofenil)-3-yodo-saliciloil] valina ; [19] acido N- [5- (2, 4-difluorofenil)-3-yodo-saliciloil]-aspartico ; [20] N- [5- (2, 4-difluorofenil)-3-yodo-saliciloil] asparagina.

Otro objeto de la presente invention es proporcionar un procedimiento de preparación de los compuestos de fórmula (I), caracterizado porque comprende una etapa de reaction del diflunisal o derivados del mismo con un reactivo de yodación.

La yodación del diflunisal o de compuestos derivados del diflunisal es obvia para cualquier experto en la materia quién seleccionará de forma adecuada tanto el compuesto de partida como el reactivo de yodación.

Asimismo, la preparación de derivados del diflunisal (ésteres, carboxamidas, sales, glucósidos, derivados de aminoácidos, etc. ) sera obvia para el experto. Por otro lado, el reactivo de yodación puede seleccionarse de entre: yodo elemental ; sales de yoduro tales como yoduro sódico o yoduro potasico ; sales de yodonio tales como cloruro de yodo; complejos de yodonio tales como el tetrafluoroborato de bis (piridina) yodonio (I) o el hexafluorofosfato de bis (sim-colidina) yodonio (I) ; y compuestos orgánicos de yodo tal como el diacetato de yodobenceno o la N-yodosuccinimida.

Asimismo, otro objeto de la presente invention es proporcionar zambien una composición farmacéutica que contiene un compuesto de la

invention y uno o mas excipientes farmacéuticamente aceptables.

Los excipientes farmacéuticamente aceptables serin aquellos excipientes de la técnica que permitan la formulacibn adecuada de la composición farmacéutica de la invencion. Dicha composición puede formularse para su administración oral, intravenosa, topica, rectal, subdermica, etc. Es decir, puede presentarse en forma de soluciones, comprimidos, cápsulas, implantes, etc. Asimismo, dicha formulación puede ser de liberation inmediata o de liberación controlada.

En cualquier caso, sera el facultativo el que determine la dosificación mas adecuada de la misma en function de la edad del paciente, su estado de salud general, su peso, y el tipo y extension de la enfermedad o trastorno a tratar.

Un objeto adicional de la presente invention es proporcionar los compuestos de la invencion para el tratamiento de enfermedades neurodegenerativas, incluyendo enfermedades neurodegenerativas amiloides, tales como enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Parkinson, enfermedad de Huntington, enfermedad de Creutzfeldt-Jakob, fibrosis cistica, diabetes de aparición tardia, enfermedad de las neuronas motoras, fiebre mediterránea, sindrome de Muckle-Wells, mieloma idiopático, cardiopatia amiloide, sindrome de Down, enfermedad de Kuru, sindrome de Gerstmann-Straussler-Schienker, depósitos valvulares de amieloide, amiloidosis en pacientes con dialysis, miositis con cuerpos de inclusion, depositors musculares de amieloide, anemia de Sickle Cell, amiloidosis sistémica primaria, amiloidosis sistémica senil, polineuropatia amiloide familiar 1, polineuropatia amiloide familiar III, angiopatía amiloide cerebral, hereditaria, amiloidosis relacionada con angiopatias, amiloidosis sistémica hereditaria finlandesa, diabetes de tipo II, carcinoma medular de tiroides, encefalopatia espongiforme, amiloidosis atrial, amiloidosis sistémica

hereditaria no neuropática, amiloidosis localizada por inyeccion, y amiloidosis renal hereditaria.

En una realización preferida de la presente invencion, los compuestos de la invención pueden emplearse zambien como medicamento nalyésico, antiinflamatorio, antipirético o antiagregante plaquetario para el tratamiento de enfermedades tales como artritis reumatoide, fiebres reumatoides, osteoartritis, dolores musculoesqueletales, sindrome del intestino inflamado, enfermedades de las arterias coronarias o trombosis postoperativas en venas profundas.

Los siguientes ejemplos pretenden ilustrar la invencion.

EJEMPLOS DE PREPARACION <BR> <BR> <BR> Eiemplo 1<BR> <BR> <BR> <BR> <BR> Acido 5- (2, 4-difluorofenil)-3-vodo-salicilico Por yodación del acido 5- (2, 4-difluorofenil) salicilico (diflunisal) con el reactivo tetrafluoroborato de bis (piridina) yodonio (I) (Ipy2BF4) A una disolución de 200 mg (0,80 mmol) de diflunisal en 5 ml de diclorometano se anaden a temperatura ambiente 357 mg (1,2 mmol) de Ipy2BF4. Se deja en agitación hasta que se observa mediante HPLC (cromatografía liquida de alta resolución) que se ha consumido el producto de partida. Se diluye en diclorometano y se procede a aislar el producto

(work-up) por acidificación con acido HCI 1 N y extraction con diclorometano. Se reinen las fases organicas y se lavan con una disolución de tiosulfato sódico y después se seca en sulfato magnésico anhidro. Se elimina el disolvente a pression reducida y se obtienen un crudo de pureza 98% que se purifica mediante cromatografia en columna de gel de silice. Se obtienen 290 mg (96% de rendimiento) del producto deseado.

Ejemplo 2 Acido 5- (2, 4-difluorofenil)-3-vodo-salicilico Por yodación del ácido 5-(2,4-difluorofenil)salicílico (diflunisal) con el reactivo hexafluorofosfato de bis (2,4, 6-timetilpiridina) yodonio (I) (ICo112PF6) A una disolución de 200 mg (0,80 mmol) de diflunisal en 5 ml de diclorometano se anaden a temperatura ambiente 617 mg (1,2 mmol) de IC0112PF6-Se deja en agitación hasta que se observa mediante HPLC que se ha consumido el producto de partida. Se diluye en diclorometano y se procede a aislar el producto por acidificación con acido HCI 1 N y extraction con diclorometano. Se reunen las fases organisas y se lavan con una disolucion de tiosulfato sódico y después se seca en sulfato magnesico anhidro. Se elimina el disolvente a pression reducida y se obtienen un crudo de pureza 98% que se purifica mediante cromatografia en columna de gel de silice. Se obtienen 260 mg (86% de rendimiento) del producto deseado.

Eiemplo 3 Acido 5- (2, 4-difluorofenil)-3-vodo-salicilico

Por yodación del acido 5- (2, 4-difluorofenil) salicilico (diflunisal) con cloramina T (CAT) y yoduro sódico En un matraz de 25 ml se introducen 20 mg (0, 08 mmol) de diflunisal, 14 mg (0,093 mmol) de Nal y 30 mg (0,13 mmol) de CAT disueltos en 1040 pI de acetonitrilo y 52 pI de acido acetic. Se deja en agitation durante 1,5 h a temperatura ambiente. Se controla la reacci6n mediante HPLC hasta que se observa la desaparición del producto de partida y se observa un 96% de producto yodado. Posteriormente se acidifica la disolución hasta pH = 1,0 con una solution al 5% de HCI. A continuación se extrae con acetato de etilo. Se reunen las fases organicas y se lavan con una disolución de tiosulfato sódico y después se seca en sulfato magnésico anhidro. Se elimina el disolvente a pression reducida y se obtienen un crudo de pureza 98% que se purifica mediante cromatografia en columna de gel de silice. Se obtienen 25 mg (83% de rendimiento) del producto deseado.

Eiemplo 4 Acido 5- (2, 4-difluorofenil)-3-yodo-salicilico

Por yodación del acido 5- (2, 4-difluorofenil) salicilico (diflunisal) con yoduro sódico e hipoclorito sódico A una disolucion de 200 mg (0, 80 mmol) de diflunisal en 5 ml de metanol se anade a 0 °C un equivalente de yoduro sódico (165 mg, 1,1 mmol) y un equivalente de hidróxido sódico (32 mg). Una disolución al 4% de hipoclorito sódico se anade gota a gota sobre la disolución anterior durante 75 min manteniendo la temperatura entre 0-3 °C. Tras cada adición se observa un color rojizo que desaparece rápidamente. Se agita a esta temperatura durante una hora mas y se trata con una disolución acuosa al 20% de tiosulfato sódico. Se anade una disolución al 5% de HCI y se extrae con diclorometano. Tras su aislamiento, el producto se recristaliza.

Eiemplo 5 Acido 5- (2, 4-difluorofenil)-3-vodo-salicilico Por yodación del acido 5- (2, 4-difluorofenil) salicilico (diflunisal) con cloruro de yodo (ICI) A una disolución de 200 mg (0,80 mmol) de diflunisal en 5 ml de diclorometano se anade a temperatura ambiente 195 mg (1,2 mmol) de ICI en diclorometano (1 M). Se mantiene en agitation a temperatura ambiente durante 3 h y se procede a aislar el producto tal y como se escribe en el ejemplo 1.

Eiemplo 6 Acido 5- (2, 4-difluorofenil)-3-vodo-salicilico

Por yodación del acido 5- (2, 4-difluorofenil) salicilico (diflunisal) con yodo y SelectfluorTM.

A una disolución de 354 mg (1 mmol) de SelectfluorTM y 127 mg (0,5 mmol) de yodo en 10 ml de acetonitrilo se anaden 200 mg (0,80 mmol) de diflunisal y la reacción se agita a temperatura ambiente durante 3 h. Se trata con una disolución acuosa al 20% de tiosulfato sódico. Se anade una disolución al 5% de HCI y se extrae con diclorometano. Tras su aislamiento, el producto se recristaliza.

Eiemplo 7 Acido 5- (2, 4-difluorofenil)-3-vodo-salicilico Por yodación del acido 5- (2, 4-difluorofenil) salicilico (diflunisal) con N- yodosuccinimida (NIS) A una disolución de 200 mg (0, 8 mmol) de diflunisal en 4 ml de acetonitrilo y una cantidad catalitica de 18 lli (0,24 mmol, 0,3 eq) de acido trifluoroacético

se anade a temperatura ambiente 198 mg (0,88 mmol, 1,1 eq) de NIS. Se deja en agitation. Se evapora el disolvente a pression reducida, se diluye con diclorometano y se procede a aislar el producto tal como en el ejemplo 1.

Eiemplo 8 Acido 5- (2, 4-difluorofenil)-3-yodo-salicilico Por yodación del ácido 5-(2,4-difluorofenil)salicílico (diflunisal) con trifluoroacetato de talio y yoduro potásico.

Se agita en un matraz una mezcla de 20,6 g de trifluoroacetato de talio (TTFA, 31,9 mmol) y acido trifluoroacético (TFA, 50 ml) hasta que el TTFA se disuelve. Esta disolucion se anade a temperatura ambiente a un matraz que contiene 51 g (205 mmol) de diflunisal y se agita durante 30 min. A la mezcla se anade lentamente una disolución de yoduro potásico (KI, 40,9 g, 245,6 mmol) en 120 ml de agua. Una vez finalizada la reacción se procede a aislar el producto. Primero se anade metabisulfito sódico (NaS205,5, 01 g, 26,4 mmol) para reducir las especies de TI (III) a TI (I) y posteriormente una disolucion de hidróxido sódico para neutralizar el TFA. Se extrae con diclorometano y la fase organic se lava con agua y se seca sobre sulfato magnésico. Se evapora el disolvente a pression reducida y se obtiene un crudo de un 96% de pureza que se purifica mediante cromatografia en columna de gel de silice empleando los eluyentes apropiados.

Eiemplo 9 5-(2, 4-difluorofenil)-3-vodo-salicilato de etilo

Se introducen en un matraz bajo atmósfera inerte 11,5 ml de alcohol etilico y 2,9 ml de cloruro de tionilo (SOC12) Se deja en agitation durante 15 min y se introducen 1,67 g (4,56 mmol) de acido 5- (2, 4-difluorofenil)-3-yodo-salicilico.

Se mantiene la agitation a temperatura ambiente hasta que no se observa evoluci6n por HPLC. Se evapora el disolvente a pression reducida y se procede a la extraction con acetato de etilo. Se obtiene un crudo de pureza 97% que se purifica mediante cromatografía en columna de gel de silice.

Eiemplo 10 5-(2,4-difluorfenil)-3-yodo-salicilato de etilo Se enfria a 0 °C una solution de acido 5-(2,4-difluorofenil)-3-yodo-salicílico (1,69 g, 4,61 mmol) en etanol (20 ml) y se hace pasar borboteando una corriente de gas clorhidrico anhidro durante 5 min. La disolucion se calienta a reflujo durante 4 h y se enfría a temperatura ambiente, los disolventes se evaporan a pression reducida. EI residuo se disuelve en diclorometano y se procede a aislar el producto. Se purifica el crudo de reaction por cromatografia en columna de gel de silice empleando hexano/acetato de etilo (7: 3) como eluente.

Eiemplo 11 5-(2, 4-difluorofenil)-3-yodo-salicilato de metilo

Se introducen en un matraz bajo atmósfera inerte 11,5 ml de metanol y 2,9 mi de cloruro de tionilo (SOC12). Se deja en agitation durante 15 min y se introduce 1,67 g (4,56 mmol) de acido 5- (2, 4-difluorofenil)-3-yodo-salicilico.

Se mantiene la agitacion a temperatura ambiente hasta que no se observa evoluci6n por HPLC. Se evapora el disolvente a pression reducida y se procede a la extracción con acetato de etilo. Se obtiene un crudo de pureza 97% que se purifica mediante cromatografia en columna de gel de silice.

Ejemplo 12 5-(2, 4-difluorofenil)-3-yodo-salicilamida Se mezcla 1 g (2,66 mmol) del ácido 5-(2, 4-difluorofenil)-3-yodo-salicílico con 0,738 g (4,01 mmol) de pentafluorofenol en 20 ml de acetonitrilo. Se anaden a 0 °C 10 ml de N, N-diisopropilcarbodiimida y se mantiene en agitation. Se disuelven en agua 0,634 g de bicarbonato amónico. Se observa la desaparición del producto de partida por HPLC y el crudo se

diluye con agua y se extrae con diclorometano. La fase organic se seca sobre sulfato magnesico y se purifica en columna de gel de silice, utilizando como eluyentes cloroformo metanol en polaridad ascendente empezando por una proportion (v/v) de (40: 1) hasta (10: 1).

Eiemoto 13 [2-aminocarbonil-4-(2,4-difluorofenil)-6-yodo-fenoxi]oacetat o de terc-butilo A una suspension de carbonato de cesio (10,4 g, 0,032 mmol) y 2,4 g (0,0064 mol) de la amida 5- (2, 4-difluorofenil)-3-yodo-salicilamida en 50 ml de DMF se anade cloroacetato de terc-butilo (1,2 g, 0,008 mmol). La reaction se agita durante 30 min a temperatura ambiente y se vierte sobre una disolucion fria de acido clorhidrico 1 N y se extrae con acetato de etilo.

Se combinan las fases organisas y se secan sobre sulfato magnésico. Tras eliminar el disolvente por evaporación a pression reducida se obtiene un crudo que se purifica mediante cromatografia en columna ultrarrápida en gel de silice. Se obtiene el derivado deseado con un 90% de rendimiento.

Eiemplo 14 Acido r2-aminocarbonil-4- (2, 4-difluorofenil)-6-vodo-fenoxilacetico

Método A: Se obtiene por reaction del éster del ejemplo 13 con acido trifluoroacético. Tras unos minutos en agitation a temperatura ambiente se evapora en corriente de nitrogen el acido trifluoroacético residual y se extrae con acetato de etilo.

Método B Se obtiene por hidrólisis del éster del ejemplo 13 en este caso con acido clorhidrico. EI ester (400 mg, 0,817 mmol) se disuelve en 40 ml de una mezcla al 50% (v/v) de isopropanol y THF. Se anaden 2 ml de una disolucion 1 N de HCI. La reaction se agita durante 2 h a temperatura ambiente Se diluye con agua y se extrae con acetato de etilo.

Eiemplo 15 1-O-ß-Glucósido del ácido 5-(2,4-difluorofenil)-3-yodo-salicílico A-40 °C y bajo atmósfera de nitrogen se anaden gota a gota 506 ul (4 mmol) de una disolución del complejo de trifluoruro de boro eterato (BF3. Et2O) en diclorometano a una disolución de 200 mg (0,80 mmol) del compuesto fenólico, el ácido 5-(2, 4-difluorofenil)-3-yodo-salicílico, y de 985 mg (2 mmol) del 1-tricloroacetimidato de 2,3, 4, 6-tetra-O-acetil- glucopiranosilo en diclorometano. La mezcla se agita hasta que no se observa producto de partida por TLC (cromatografia de capa fina). EI exceso de BF3. Et20 se destruye con bicarbonato sódico. Se diluye con diclorometano y se lava con agua. La fase organic se seca sobre sulfato

magnesico y se elimina el disolvente a pression reducida. EI producto final se purifica mediante cromatografia en columna de gel de silice. EI derivado protegido se somete a una saponificación en metanol con una cantidad catalitica de metóxido sódico (reaccion de Zemplen). Se acidifica en frio la reaction una vez finalizada y se extrae con diclorometano. Se procede a aislar el producto como es usual.

Eiemplo 16 2',4'-difluoro-4-methoxyi-5-yodo-[1,1']bifenil-3-carboxilato de etilo Etapa 1-Preparacion del 2', 4'-difluoro-4-metoxi-f1, 1'1bifenil-3-carboxilato de etilo Método A Este compuesto bifenilico se prepara mediante una reaction de acoplamiento cruzado de Suzuki catalizada por Pd (0) a partir del acido borónico correspondiente y un bromo-o yododerivado.

En primer lugar se prepara el bromoderivado que es ex acid 5- bromo-2-metoxibenzoato de etilo. Este se obtiene en dos pasos de sintesis a partir del aldehido comercial 5-bromo-o-anisaldehido, que primero se trata con una disolución permanganato para obtener el

correspondiente acido carboxilico y posteriormente se procede a la esterificación del mismo, mediante la formacion in situ del correspondiente cloruro de acido por reaction con cloruro de tionilo y reaction con el etanol.

Reaction de Suzuki : A una disolución en dioxano de 190 mg (1,21 mmol, 1 eq) de acido 2, 4-difluorofenilboronico, se anaden 1,15 ml (2,29 mmol, 2 eq) de una disolución acuosa 2N de carbonato de sodio y 17 mg (0,111 mmol, 0,096 eq) del catalizador de Pd (0), la tetraquis (trifenil) fosfina paladio (0), y finalmente 300 mg (1,16 mmol) del bromoderivado (5-bromo-2-metoxibenzoato de etilo). Se calienta a reflujo durante 2 h. Se deja enfriar y se filtra el catalizador a través de una columna de gel de silice. Se diluye con diclorometano y se extrae con agua. Tras aislar el producto como es usual, se obtienen 330 mg de un crudo de alta pureza (95% por HPLC).

Método B En este caso se obtiene por reaction de Williamson (preparacion de eteres asimétricos) a partir del éster etílico del diflunisal y yoduro de metilo en presencia de carbonato de cesio en acetonitrilo.

Etapa 2-Preparacion del 2', 4'-difluoro-4-methoxi-5-yodo-[1,1']bifenil-3- carboxilato de etilo Por yodación del producto obtenido en la etapa 1, el 2', 4'-difluoro-4- metoxi- [1, 1'] bifenil-3-carboxilato de etilo, con el reactivo Ipy2BF4

A 0 °C a una disolucion de 200 mg (0,684 mmol) del 2', 4'-difluoro-4- metoxi-5-yodo- [1, 1'] bifenil-3-carboxilato de etilo en 5 ml de diclorometano y un 10% de acido trifluoroacético (500 pI) se anaden 305 mg (0, 821 mmol, 1,2 eq) de tetrafluoroborato de bis (piridina) yodonio (I) (Ipy2BF4). Se deja calentar en agitation a temperatura ambiente hasta que se observa mediante HPLC que se ha consumido el producto de partida. Se diluye en diclorometano y se procede a aislar el producto por acidificación con acido HCI 1 N y extraction con diclorometano. Se reunen las fases organicas y se lavan con una disolución de tiosulfato sódico y después se seca en sulfato magnésico anhidro. Se elimina el disolvente a pression reducida y se obtienen un crudo de pureza 98% que se purifica mediante cromatografia en columna de gel de silice. Se obtienen 260 mg (90% de rendimiento) del producto deseado.

Eiemplo 17 Acido 2'. 4'-difluoro-4-metoxi-5-vodo-f . 1'lbifenil-3-carboxilico Este compuesto se obtiene por saponificación del ester del ejemplo anterior (Ejemplo 16) (2', 4'-difluoro-4-metoxi-5-yodo- [1, 1'] bifenil-3-carboxilato de etilo). Se disuelve ex ester (200 mg, 0,48 mmol) en 20 ml de etanol y una disolucion 2,5 N de NaOH durante 2 h. Tras enfriar la mezcla se acidifica con acido clorhidrico y se extrae con diclorometano. Tras aislar el producto, se obtiene un crudo que se recristaliza en una mezcla de cloroformo/hexano.

Eiemplo 18 2', 4'-difluoro-4-acetiloxi-5-yodo-[1,1']bifenil-3-carboxilato de etilo

Se calienta una mezcla de 500 mg (1,24 mmol) del 5- (2, 4-difluorofenil)-3- yodo-salicilato de etilo (Ejemplo 10) en 12 ml de piridina y 3 mi de anhidrido acetic en un bano de agua durante 20 min. La mezcla se deja enfriar y se vierte sobre hielo y el producto se extrae con diclorometano. Después de secar la fase organic y tras la evaporación a presi6n reducida del disolvente el crudo se recristaliza.

Eiemplo 19 Acido 2',4'-difluoro-4-(t-butilcarboniloxi)-5-yodo-[1,1']bifenil-3 -carboxílico Se anaden 0,928 g (0,0067 mmol) de cloroformiato de n-butilo a una mezcla de 2,5 g (0,0061 mmol) de acido 5- (2, 4-difluorofenil)-3-yodo-salicilico en 6 ml de benceno y 1,728 g (0,014 mmol) de dimetilanilina. Se agita la mezcla a temperatura ambiente durante 3 h. Se anade hielo y una disolucion 2,5 N de HCI. Se extrae con diclorometano y se seca la fase organic sobre sulfato

magnésico. Se evapora el disolvente a pression reducida y el crudo se recristaliza en una mezcla de cloroformo/hexano.

Eiemplo 20 Acido 2',4'-difluoro-4-(etilcarboniloxi)-5-yodo-[1,1']bifenil-3-ca rboxílico Se anaden 0,928 g (0,0086 mmol) de cloroformiato de etilo a una mezcla de 2,5 g (0,0061 mmol) de ácido 5- (2, 4-difluorofenil)-3-yodo-salicilico en 6 ml de benceno y 1,728 g (0,014 mmol) de dimetilanilina. Se agita la mezcla a temperatura ambiente durante 3 h. Se anade hielo y una disoluci6n 2,5 N de HCI. Se extrae con diclorometano y se seca la fase organic sobre sulfato magnésico. Se evapora el disolvente a pression reducida y el crudo se recristaliza en una mezcla de cloroformo-hexano.

Eiemplo 21 Ester etilico de la N-f5-(2, 4-difluorofenil)-3-yodo-saliciloill-qlicina Etapa 1-Preparacion del ester etílico de la N-f5- (2, 4- difluorofenil) saliciloill-glicina

En un matraz se introducen 500 mg (1,998 mmol) de diflunisal y 270 mg (1,99 mmol) de HOBt disueltos en la minima cantidad de diclorometano. A temperatura ambiente se anaden a la mezcla 206 mg (1,99 mmol) del ester etílico de la glicina (H-Gly-OEt) y por ultimo se anaden 412 mg (2 mmol) de DCC (diciclohexilcarbodiimida) disueltos en la minima cantidad de diclorometano. La reaction se dejo en agitation a temperatura ambiente EI proceso se control6 por HPLC observindose la desaparición total del producto de partida tras una hora de reacci6n. Se elimina el disolvente a pression reducida y se redisuelve en acetato de etilo observándose la precipitación de la urea correspondiente que se filtra. El crudo de reaction se purifica en columna de gel de silice con una mezcla de eluyentes hexano/acetato de etilo (75: 25). Se obtienen 381 mg de producto puro deseado con un rendimiento del 35%.

Etapa 2-Preparacion del ester etilico de la N-f5- (2, 4-difluorofenil)-3-vodo- saliciloill-alicina A una disolucion de 200 mg (0,596 mmol) del compuesto de la etapa 1 (ester etilico de la N- [5- (2, 4-difluorofenil) saliciloil] glicina) en 5 ml de diclorometano se anade a temperatura ambiente 266 mg (0,715 mmol)

de tetrafluoroborato de bis (piridina) yodonio (I) (Ipy2BF4). Se deja en agitation hasta que se observa mediante HPLC que se ha consumido el producto de partida. Se diluye en diclorometano y se procede a aislar el producto por acidificación con acido HCI 1 N y extraction con diclorometano. Se reunen las fases organicas y se lavan con una disolucion de tiosulfato sodico y después se seca en sulfato magnésico anhidro. Se elimina el disolvente a presi6n reducida y se obtiene un crudo de pureza 98% que se purifica mediante cromatografia en columna de gel de silice. Se obtienen 240 mg (87% de rendimiento) del producto deseado.

Eiemplo 22 Ester etilico de la N-f5- (2, 4-difluorofenil)-3-vodo-saliciloillglicina En un matraz se introducen 500 mg (1,32 mmol) de acido 5- (2, 4- difluorofenil)-3-yodo-salicilico (del Ejemplo 1) y 270 mg (1,99 mmol) de HOBt disueltos en la minima cantidad de diclorometano. A temperatura ambiente se anaden a la mezcla 163 mg (1,58 mmol) del ester etílico de la glicina (H- Gly-OEt) y, por ultimo, se anaden 272 mg (1,32 mmol) de DCC disueltos en la minima cantidad de diclorometano. La reaction se dejo en agitation a temperatura ambiente El proceso se control6 por HPLC observándose la desaparición total del producto de partida tras una hora de reacci6n. Se elimina el disolvente a pression reducida y se redisuelve en acetato de etilo observándose la precipitacion de la urea correspondiente que se filtra. El crudo de reaction se purifica en columna de gel de silice con una mezcla de eluyentes hexano/acetato de etilo (75: 25). Se obtienen 400 mg (75% de

rendimiento) de producto puro deseado.

Ejemplo 23 N-f 5- (2, 4-difluorofenil)-3-vodo-saliciloillglicina A una disolución del éster del Ejemplo 22 (480 mg, 1,19 mmol) en 5 ml de dioxano acuoso (v/v 1: 1) se anade hidróxido de litio (0,038 mg, 0,92 mmol) y se agita bajo atmósfera de nitrogen durante 12 h. La mezcla se concentra a pression reducida, se diluye con agua (10 ml) y se acidifica con una disolución 0,5 M de acido clorhfdrico, y se extrae con acetato de etilo. Las fases organicas se reunen y se lavan con agua saturada de cloruro sódico y se secan sobre sulfato sódico. Se elimina el disolvente a pression reducida y se obtiene un crudo del 98% de pureza que se purifica mediante cromatografía en columna de gel de silice.

Eiemplo 24 N-f5- (2, 4-difluorofenil)-3-vodo-saliciloillglicina Se disuelven 0,124 g (0,31 mmol) de producto puro (ester del Ejemplo 22)

en una mezcla ternaria (THF: MeOH : H20) (3: 1: 1) y se le adiciona a 0 °C y gota a gota una disolución acuosa 0,1 N de LiOH. Posteriormente se deja a temperatura ambiente durante 20 min, cuando la reaction ha finalizado se acidifica con HCI 1 N hasta pH = 2 y se realizan 3 extracciones con acetato etilo y cloroformo. Las fases organisas se reunen y se lavan con agua saturada de cloruro sódico y se secan sobre sulfato sódico. Se elimina el disolvente a pression reducida y se obtiene un crudo del 98% de pureza que se purifica mediante cromatografía en columna de gel de silice.

Ejemplo 25 N-f5- (2, 4-difluorofenil ?-3-vodo-saliciloillalanina Partiendo del precursor ester metilico (obtenido mediante un procedimiento analog al descrito en el Ejemplo 22 partiendo del ester etilico de la alanina) por saponificación tal como se describe en el Ejemplo 23 o en el Ejemplo 24.

Eiemplo 26 N-f 5- (2, 4-difluorofenil)-3-vodo-saliciloill-leucina

Partiendo del precursor ester metilico (obtenido mediante un procedimiento análogo al descrito en el Ejemplo 22 partiendo del ester et) ! ico de la leucina) por saponificación tal como se describe en el Ejemplo 23 o en el Ejemplo 24.

Eiemplo 27 N-r5-(2, 4-difluorofenil)-3-vodo-saliciloill-serina Partiendo del precursor ester metilico (obtenido mediante un procedimiento analog al descrito en el Ejemplo 22 partiendo del éster etílico de la serina) por saponificación tal como se describe en el Ejemplo 23 o en el Ejemplo 24.

Ejemplo 28 N-f5- (2, 4-difluorofenil)-3-yodo-saliciloill-valina Partiendo del precursor ester metilico (obtenido mediante un procedimiento análogo al descrito en el Ejemplo 22 partiendo del ester et) tic de la valina) por saponificación tal como se describe en el Ejemplo 23 o en el Ejemplo 24.

Eiemplo 29 #cido N-[5-(2,4-difluorofenil)-3-yodo-saliciloil]-aspártico

Partiendo del precursor ester metílico (obtenido mediante un procedimiento análogo al descrito en el Ejemplo 22 partiendo del ester etilico del acido aspártico) por saponificación tal como se describe en el Ejemplo 23 o en el Ejemplo 24.

Eiemplo 30 N-f 5- (2. 4-difluorofenil)-3-vodo-saliciloill-asparagina Partiendo del precursor ester metílico (obtenido mediante un procedimiento analog al descrito en el Ejemplo 22 partiendo del ester etílico de la asparagina) por saponificación tal como se describe en el Ejemplo 23 o en el Ejemplo 24.

EJEMPLO DE ACTIVIDAD Ensayo de actividad inhibidora de amiloidogenesis in vitro.

Los compuestos de esta invention se han evaluado en un ensayo

turbidiométrico cuyos principales caracteristicas son las siguientes: 1) uso del mutante Y78F (tirosina78 reemplazada por fenilalanina) altamente amiloidogenico para incrementar la sensibilidad ; 2) ensayo cinético monitorizando la formation de fibrils (por incremento de la absorbancia a 340 nm en el tiempo) durante 1 h y 30 min para determinar la velocidad inicial de formation de fibrils ; 3) formato del ensayo en microplacas de 96 pocillos para el análisis rápido de varias muestras simultáneamente y a varias concentraciones de inhibidor; 4) calcul de parámetros de inhibition de cada inhibidor a partir de las curvas de velocidad inicial de formation de fibrils frente a la concentración de inhibidor.

Protocolo : Los compuestos a ensayar como inhibidores se disuelven en DMSO a concentración 1,5 mM. La disolucion de trabajo se prepara por dilution 1 a 4 de la anterior en una mezcla agua/DMSO (2: 1). La disolucion de proteina (mutante Y78F hTTR) es 4 mg/ml de proteína (pureza mayor del 95%) en fosfato sodico 20 mM, cloruro potásico 100 mM, pH 7,6. EI tampon de incubation es fosfato sódico 10 mM, cloruro potásico 100 mM, EDTA 1 mM, pH 7,6. EI tampon de dilution es acetato sódico 400 mM, cloruro potasico 100 mM, EDTA 1 mM, pH 4,2. EI protocolo de ensayo para un inhibidor es el siguiente: se dispensan 20 lli de la disolución de proteina en 7 pocillos de una microplaca de 96 pocillos. Diferentes volumens de la disolución de trabajo del inhibidor se anaden a cada uno de los pocillos para obtener concentraciones finales de 0 a 40 I1M. Seguidamente se anade a cada

pocillo el tampon de incubation hasta un volumen final de 100 µl. La microplaca se incuba a 37 °C dentro del lector de microplacas provisto de termostatación y agitacion. La incubation se extiende por 30 min a 37 °C con agitación durante 15 segundos cada minuto. Seguidamente se adicionan 100 µl de tampon de dilution a cada pocillo, y la mezcla se incuba a 37 °C con agitation durante 15 segundos cada minuto en el lector de microplacas y se monitoriza la absorbancia a 340 nm durante 1 hora y 30 minutos a intervals de 1 minuto. Los datos de absorbancia frente al tiempo para cada pocillo se recogen y se analizan con el programa Microsoft Excel.

Todos los ensayos se realizan por duplicado.

Calculons : 1.-Velocidad inicial de formation de fibrils. De las lecturas de absorbancia a 340 nm con el tiempo de incubation para cada pocillo se calcula la velocidad inicial de formation de fibrils como la pendiente de la zona lineal inicial de la curva. Asi se obtiene la velocidad de agregación a cada concentración de inhibidor.

2.-Velocidad de agrepación frente a la concentración de inhibidor. Las velocidades de agregación frente a la concentración de inhibidor siguen un comportamiento de decaimiento exponencial que se ajusta a la ecuación : vo = A + B. e donde vo es la velocidad de agregación (en unidades de absorbancia por hora) y [I] la concentración de inhibidor en IlM.

En la Figura 1 se muestra la variation de la velocidad de agregación, vo, con respecto a la concentración de inhibidor, [I], para un compuesto de la invencion, yododiflunisal, con respecto a dos compuestos de la técnica,

diflunisal y diflunisal ester.

Los parámetros ajustados son: A (en unidades de absorbancia por hora), velocidad residual de agregación a alta concentración de inhibidor; B (en unidades de absorbancia por hora), amplitud o maxima disminución de la velocidad de agregacion ; y C (en uM-1) la constante exponencial. A+B es la velocidad de agregación en ausencia de inhibidor (velocidad de agregación maxima). De estos parámetros se extraen los parámetros que caracterizan a cada inhibidor en cuanto a su capacidad y eficiencia de inhibir la formación de fibrils : -IC50 : concentración de inhibidor (, uM) a la que la velocidad de agregación es la mitad que en ausencia de inhibidor; -T : pendiente inicial de la curva vo frente [I], que refleja la sensibilidad del proceso de agregación al inhibidor. A mayores valores de, mayor efecto inhihidor del compuesto a tiempos iniciales de formation de fibrils ; - RA (%) = (1-A/ (A+B))-100 : % de reduction de la velocidad de agregación a concentración alta de inhibidor respecto a la velocidad en ausencia de inhibidor.

De acuerdo con este ensayo, un buen inhibidor es aquel que posee una IC50 baja, un valor T alto, y un valor RA (%) cercano a 100%.

Los resultados se muestran en la Tabla 1. En ella se dan los valores de los parámetros mencionados para el diflunisal y derivados, yodados y sin yodar. Como puede verse, los compuestos yodados presentan una actividad claramente mejorada con respecto a los compuestos sin yodar.

Tabla 1. Diflunisal y derivados: efecto de la yodación

Inhibidor Estructura ICo \p RA (tM) (UA-h-'-tM- Diflunisal coon oH 12, 9 0, 036 84 F Iododiflunisal coon F-OH 4, 5 0, 100 97 .. _. Diflunisal cooMe metil 6ster F-Q-60H >100 0, 011 24 F Iododiflunisal cooMe metil éster F + OH 16, 7 0, 027 98 F I Diflunisal coNHs amida F<OH >100 0 009 10 F Iododiflunisal coNH2 amida F C OH 11, 7 0, 041 84 F I Diflunisal F I ° glicina N'COOH >100 0, 011 28 OU Iododiflunisal F 0 glicina N'COOH 11, 2 0, 040 100 H