BENZOTHIAZOLES ET 5-FLUORO-BENZIMIDAZOLES : PREPARATION, APPLICATION COMME MEDICAMENTS ET UTILISATION COMME INHIBITEURS

DE MET

La présente invention concerne de nouveaux dérivés de 6-(6-substitue- triazolopyridazine-sulfanyl) 5-fluoro-benzothiazoles et 5-fluoro- benzimidazoles, leur procédé de préparation, les nouveaux intermédiaires obtenus, leur application à titre de médicaments, les compositions pharmaceutiques les renfermant et la nouvelle utilisation de tels dérivés de 6- (6-substitue-triazolopyhdazine-sulfanyl) 5-fluoro-benzothiazoles et 5-fluoro- benzimidazoles.

La présente invention concerne plus particulièrement de nouveaux dérivés de 6-(6-substitue-triazolopyhdazine-sulfanyl) 5-fluoro-benzothiazoles et 5-fluoro- benzimidazoles présentant une activité anticancéreuse, via la modulation de l'activité de protéines, en particulier des kinases.

A ce jour, la plupart des composés commerciaux utilisés en chimiothérapie sont des cytotoxiques qui posent des problèmes importants d'effets secondaires et de tolérance par les patients. Ces effets pourraient être limités dans la mesure où les médicaments utilisés agissent sélectivement sur les cellules cancéreuses, à l'exclusion des cellules saines. Une des solutions pour limiter les effets indésirables d'une chimiothérapie peut donc consister en l'utilisation de médicaments agissant sur des voies métaboliques ou des éléments constitutifs de ces voies, exprimés majoritairement dans les cellules cancéreuses, et qui ne seraient pas ou peu exprimés dans les cellules saines. Les protéines kinase sont une famille d'enzymes qui catalysent la phosphorylation de groupes hydroxyle de résidus spécifiques de protéines tels que des résidus tyrosine, serine ou thréonine. De telles phosphorylations peuvent largement modifier la fonction des protéines : ainsi, les protéines kinases jouent un rôle important dans la régulation d'une grande variété de processus cellulaires, incluant notamment le métabolisme, la prolifération cellulaire, l'adhésion et la motilité cellulaire, la différentiation cellulaire ou la survie cellulaire, certaines protéines kinases jouant un rôle central dans l'initiation, le développement et l'achèvement des événements du cycle cellulaire. Parmi les différentes fonctions cellulaires dans lesquelles l'activité d'une protéine kinase est impliquée, certains processus représentent des cibles attractives pour traiter certaines maladies. Comme exemple, on peut citer notamment l'angiogénèse et le contrôle du cycle cellulaire et ainsi que celui de la prolifération cellulaire, dans lesquels les protéines kinases peuvent jouer un rôle essentiel. Ces processus sont notamment essentiels pour la croissance des tumeurs solides ainsi que d'autres maladies : notamment des molécules inhibitrices de telles kinases sont susceptibles de limiter des proliférations cellulaires non désirées telles que celles observées dans les cancers, et peuvent intervenir dans la prévention, la régulation ou le traitement de maladies neurodégénératives telles que la maladie d'Alzheimer ou encore l'apoptose neuronale.

La présente invention a pour objet de nouveaux dérivés dotés d'effets inhibiteurs vis-à-vis de protéines kinases. Les produits selon la présente invention peuvent ainsi notamment être utilisés pour la prévention ou le traitement de maladies pouvant être modulées par l'inhibition de protéines kinases.

Les produits selon la présente invention présentent notamment une activité anticancéreuse, via la modulation de l'activité de kinases. Parmi les kinases pour lesquelles une modulation de l'activité est recherchée, MET ainsi que des mutants de la protéine MET sont préférées.

La présente invention concerne également l'utilisation desdits dérivés pour la préparation d'un médicament destiné au traitement de l'homme. Ainsi, un des objets de la présente invention est de proposer des compositions ayant une activité anticancéreuse, en agissant en particulier vis- à-vis de kinases. Parmi les kinases pour lesquelles une modulation de l'activité est recherchée, MET est préférée. Dans la partie pharmacologique ci-après, il est montré dans des tests biochimiques et sur des lignées cellulaires, que les produits de la présente demande inhibent ainsi notamment l'activité d'autophosphorylation de MET et la prolifération des cellules dont la croissance dépend de MET ou de ses formes mutantes. MET, ou Hepatocyte Growth Factor Receptor, est un récepteur à activité tyrosine kinase exprimé en particulier par les cellules épithéliales et endothéliales. Le HGF, Hepatocyte Growth Factor, est décrit comme le ligand spécifique de MET. Le HGF est sécrété par les cellules mésenchymales et active le récepteur MET qui s'homodimérise. Par voie de conséquence, le récepteur s'autophosphoryle sur les tyrosines du domaine catalytique Y1230, Y1234 et Y1235.

La stimulation de MET par le HGF induit la prolifération, le scattering (ou dispersion), la motilité cellulaire, la résistance à l'apoptose, l'invasion et l'angiogénèse. MET de même que le HGF, sont retrouvés surexprimés dans de nombreuses tumeurs humaines et une grande variété de cancers. MET est aussi retrouvé amplifié dans des tumeurs gastriques et glioblastomes. De nombreuses mutations ponctuelles du gène MET ont aussi été décrites dans des tumeurs, en particulier dans le domaine kinase mais aussi dans le domaine juxtamembranaire et le SEMA domain. Surexpression, amplification ou mutations provoquent l'activation constitutive du récepteur et une dérégulation de ses fonctions.

La présente invention concerne ainsi notamment de nouveaux inhibiteurs de la protéine kinase MET et de ses mutants, pouvant être utilisés pour un traitement anti-prolifératif et anti-métastatique notamment en oncologie. La présente invention concerne également de nouveaux inhibiteurs de la protéine kinase MET et de ses mutants, pouvant être utilisés pour un traitement anti- angiogénique, notamment en oncologie.

La présente invention a pour objet les produits de formule (I):

dans laquelle

représente une liaison simple ou double

Ra représente un atome d'hydrogène ; un atome d'halogène ; un radical alcoxy éventuellement substitué par un atome de chlore, un radical hydroxyle ou un radical hétérocycloalkyle lui-même éventuellement substitué ; un radical -O-cycloalkyle, -O-hétérocycloalkyle; -NH-cycloalkyle et -NH- hétérocycloalkyle tous éventuellement substitués; un radical hétéroaryle éventuellement substitué; un radical phényle éventuellement substitué ; un radical NHCOalkyle ou NHCOcycloalkyle; ou un radical NR1 R2 tel que défini ci-après ;

X représente S, SO ou SO2, A représente NH ou S;

W représente un atome d'hydrogène ; un radical alkyle, cycloalkyle ou hétérocycloalkyle éventuellement substitués par alcoxy, hétérocycloalkyle ou NR3R4 ; ou le radical COR dans lequel R représente :

- un radical cycloalkyle ou un radical alkyle éventuellement substitué par un radical NR3R4, alcoxy, hydroxy, phényle, hétéroaryle, ou hétérocycloalkyle eux-mêmes éventuellement substitués ;

- un radical alcoxy éventuellement substitué par NR3R4, alcoxy, hydroxy ou par hétérocycloalkyle ; un radical O-phényle ou un radical O-(CH2)n-phényle, avec phényle éventuellement substitué et n représente un entier de 1 à 4 ;

- ou le radical NR1 R2 dans lequel R1 et R2 sont tels que l'un de R1 et R2 représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle et l'autre de R1 et R2 représente un atome d'hydrogène, un radical cycloalkyle ou un radical alkyle éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux identiques ou différents choisis parmi les radicaux hydroxyle, alcoxy, hétéroaryle, hétérocycloalkyle, NR3R4, phényle éventuellement substitué ou bien R1 et R2 forment avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un radical cyclique renfermant de 3 à 10 chaînons et éventuellement un ou plusieurs autres hétéroatomes choisi(s) parmi O, S, N et NH, ce radical y compris l'éventuel NH qu'il contient étant éventuellement substitué ; avec R3 et R4, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène, un radical alkyle, un radical cycloalkyle, un radical hétéroaryle ou un radical phényle tous éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux identiques ou différents choisis parmi les radicaux hydroxyle, alcoxy, hétéroaryle, hétérocycloalkyle, NH2, NHAIk, N(AI k)2 ou phényle éventuellement substitué; ou bien R3 et R4 forment avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un radical cyclique renfermant de 3 à 10 chaînons et éventuellement un ou plusieurs autres hétéroatomes choisi(s) parmi O, S, N et NH, ce radical y compris l'éventuel NH qu'il contient étant éventuellement substitué; tous les radicaux définis ci-dessus alkyle, cycloalkyle, hétérocycloalkyle, hétéroaryle et phényle ainsi que les radicaux cycliques que peuvent former

R1 et R2 ou R3 et R4 avec l'atome d'azote auquel ils sont liés, étant éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux choisis parmi les atomes d'halogène, les radicaux hydroxyle, oxo, alcoxy, NH2, NHaIk, N(alk)2 et les radicaux alkyle, cycloalkyle, hétérocycloalkyle, CH2-hétérocycloalkyle, phényle, CH2-phényle, hétéroaryle, CO-phényle et S-hétéroaryle, tels que dans ces derniers radicaux les radicaux alkyle, hétérocycloalkyle, phényle et hétéroaryle sont eux-mêmes éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux choisis parmi les atomes d'halogène et les radicaux hydroxyle, oxo, alkyle et alcoxy renfermant de 1 à 4 atomes de carbone, NH2, NHaIk et N(alk)2, lesdits produits de formule (I) étant sous toutes les formes isomères possibles racémiques, énantiomères et diastéréoisomères, ainsi que les sels d'addition avec les acides minéraux et organiques ou avec les bases minérales et organiques desdits produits de formule (I).

Dans les produits de formule (I), F représente un atome de fluor. La présente invention concerne notamment les produits de formule (I) dans lesquels Ra représente un atome d'hydrogène ; un atome d'halogène ; un radical alcoxy éventuellement substitué par un radical hétérocycloalkyle lui- même éventuellement substitué ; un radical hétéroaryle éventuellement substitué; un radical phényl éventuellement substitué ; un radical -O- cycloalkyle éventuellement substitué; O-hétérocycloalkyle éventuellement substitué; -NH-cycloalkyle éventuellement substitué; -NH-heterocycloalkyle éventuellement substitué; un radical -NHCOalkyle ou -NHCOcycloalkyle; ou un radical NR1 R2 tel que défini ci-dessus ou ci-après. les autres substituants desdits produits de formule (I) ayant l'une quelconque des significations indiquées ci-dessus ou ci-après.

La présente invention a pour objet les produits de formule (I) tels que définis ci-dessus ou ci-après dans laquelle , X et A ont les significations indiquées ci-dessus ou ci-après,

Ra représente un radical alcoxy éventuellement substitué par un atome de chlore, un radical hydroxyle ou un radical hétérocycloalkyle lui-même éventuellement substitué ; un radical -O-cycloalkyle; un radical -NHCOaIk; ou un radical -NR1 aR2a; tel que R1a et R2a représente un atome d'hydrogène, un radical cycloalkyle ou un radical alkyle éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux identiques ou différents choisis parmi les radicaux hydroxyle, alcoxy, hétéroaryle, hétérocycloalkyle, NR3R4 et phényle éventuellement substitué ; et W représente un atome d'hydrogène ; un radical alkyle éventuellement substitué par alcoxy, hétérocycloalkyle ou NR3R4 ; ou le radical COR dans lequel R représente :

- un radical cycloalkyle ou un radical alkyle éventuellement substitué par un radical NR3R4, alcoxy, hydroxy, phényle, hétéroaryle, ou hétérocycloalkyle eux-mêmes éventuellement substitués ;

- un radical alcoxy éventuellement substitué par NR3R4, alcoxy, hydroxy ou par hétérocycloalkyle ; un radical O-phényle ou un radical

O-(CH2)n-phényle, avec phényle éventuellement substitué et n représente un entier de 1 à 4 ;

- ou le radical NR1 R2 dans lequel R1 et R2 sont tels que l'un de R1 et R2 représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle et l'autre de R1 et R2 représente un atome d'hydrogène, un radical cycloalkyle ou un radical alkyle éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux identiques ou différents choisis parmi les radicaux hydroxyle, alcoxy, hétéroaryle, hétérocycloalkyle, NR3R4, phényle éventuellement substitué ou bien R1 et R2 forment avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un radical cyclique renfermant de 3 à 10 chaînons et éventuellement un ou plusieurs autres hétéroatomes choisi(s) parmi O, S, N et NH, ce radical y compris l'éventuel NH qu'il contient étant éventuellement substitué ; avec R3 et R4, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène, un radical alkyle, un radical cycloalkyle, un radical hétéroaryle ou un radical phényle, tous éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux identiques ou différents choisis parmi les radicaux hydroxyle, alcoxy, hétéroaryle, hétérocycloalkyle, NH2, NHAIk, N(Alk)2 ou phényle éventuellement substitué; ou bien R3 et R4 forment avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un radical cyclique renfermant de 3 à 10 chaînons et éventuellement un ou plusieurs autres hétéroatomes choisi(s) parmi O, S, N et NH, ce radical y compris l'éventuel NH qu'il contient étant éventuellement substitué; tous les radicaux définis ci-dessus hétérocycloalkyle, hétéroaryle et phényle ainsi que les radicaux cycliques que peuvent former R1 et R2 ou R3 et R4 avec l'atome d'azote auquel ils sont liés, étant éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux choisis parmi les atomes d'halogène, les radicaux hydroxyle, oxo, alcoxy, NH2, NHaIk, N(alk)2 et les radicaux alkyle, cycloalkyle, hétérocycloalkyle, CH2-hétérocycloalkyle, phényle, CH2-phényle, hétéroaryle, CO-phényle et S-hétéroaryle, tels que dans ces derniers radicaux les radicaux alkyle, hétérocycloalkyle, phényle et hétéroaryle sont eux-mêmes éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux choisis parmi les atomes d'halogène et les radicaux hydroxyle, oxo, alkyle et alcoxy renfermant de 1 à 4 atomes de carbone, NH2, NHaIk et N(alk)2, lesdits produits de formule (I) étant sous toutes les formes isomères possibles racémiques, énantiomères et diastéréoisomères, ainsi que les sels d'addition avec les acides minéraux et organiques ou avec les bases minérales et organiques desdits produits de formule (I).

La présente invention a pour objet les produits de formule (I) tels que définis ci-dessus ou ci-après dans laquelle , X et A ont les significations indiquées ci-dessus ou ci-après ;

Ra représente un radical alcoxy éventuellement substitué par un radical hétérocycloalkyle lui-même éventuellement substitué ; un radical NHCOaIk ou un radical NR1 aR2a; tel que R1 a et R2a représente un atome d'hydrogène, un radical cycloalkyle ou un radical alkyle éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux identiques ou différents choisis parmi les radicaux hydroxyle, alcoxy, hétéroaryle, hétérocycloalkyle, NR3R4 et phényle éventuellement substitué ; et W représente un atome d'hydrogène ; un radical alkyle éventuellement substitué par alcoxy, hétérocycloalkyle ou NR3R4 ; ou le radical COR dans lequel R représente :

- un radical cycloalkyle ou un radical alkyle éventuellement substitué par un radical NR3R4, alcoxy, hydroxy, phényle, hétéroaryle, ou hétérocycloalkyle eux-mêmes éventuellement substitués ;

- un radical alcoxy éventuellement substitué par NR3R4, alcoxy, hydroxy ou par hétérocycloalkyle ; un radical O-phényle ou un radical O-(CH2)n-phényle, avec phényle éventuellement substitué et n représente un entier de 1 à 4 ;

- ou le radical NR1 R2 dans lequel R1 et R2 sont tels que l'un de R1 et R2 représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle et l'autre de R1 et R2 représente un atome d'hydrogène, ou un radical alkyle éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux identiques ou différents choisis parmi les radicaux hydroxyle, alcoxy, hétéroaryle, hétérocycloalkyle, NR3R4, phényle éventuellement substitué ou bien R1 et R2 forment avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un radical cyclique renfermant de 3 à 10 chaînons et éventuellement un ou plusieurs autres hétéroatomes choisi(s) parmi O, S, N et NH, ce radical y compris l'éventuel NH qu'il contient étant éventuellement substitué ; avec R3 et R4, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène, un radical alkyle, un radical cycloalkyle, un radical hétéroaryle ou un radical phényle, tous éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux identiques ou différents choisis parmi les radicaux hydroxyle, alcoxy, hétéroaryle, hétérocycloalkyle ou NH2, NHAIk, N(Alk)2 ou bien R3 et R4 forment avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un radical cyclique renfermant de 3 à 10 chaînons et éventuellement un ou plusieurs autres hétéroatomes choisi(s) parmi O, S, N et NH, ce radical y compris l'éventuel NH qu'il contient étant éventuellement substitué; tous les radicaux définis ci-dessus hétérocycloalkyle, hétéroaryle et phényle ainsi que les radicaux cycliques que peuvent former R1 et R2 ou R3 et R4 avec l'atome d'azote auquel ils sont liés, étant éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux choisis parmi les atomes d'halogène, les radicaux hydroxyle, oxo, alcoxy, NH2, NHaIk, N(alk)2 et les radicaux alkyle, cycloalkyle, hétérocycloalkyle, CH2-hétérocycloalkyle, phényle, CH2-phényle, hétéroaryle, CO-phényle et S-hétéroaryle, tels que dans ces derniers radicaux les radicaux alkyle, hétérocycloalkyle, phényle et hétéroaryle sont eux-mêmes éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux choisis parmi les atomes d'halogène et les radicaux hydroxyle, oxo, alkyle et alcoxy renfermant de 1 à 4 atomes de carbone, NH2, NHaIk et N(alk)2, lesdits produits de formule (I) étant sous toutes les formes isomères possibles racémiques, énantiomères et diastéréoisomères, ainsi que les sels d'addition avec les acides minéraux et organiques ou avec les bases minérales et organiques desdits produits de formule (I).

La présente invention a pour objet les produits de formule (I) tels que définis ci-dessus dans laquelle

représente une liaison simple ou double

Ra représente un atome d'hydrogène ; un atome d'halogène ; un radical alcoxy éventuellement substitué par un radical hétérocycloalkyle lui-même éventuellement substitué ; un radical hétéroaryle éventuellement substitué; un radical phényl éventuellement substitué ; un radical NHCOalkyle ou NHCOcycloalkyle; ou un radical NR1 R2 tel que défini ci-après ;

X représente S, SO ou SO2, A représente NH ou S;

W représente un atome d'hydrogène ; un radical alkyle éventuellement substitué par alcoxy, hétérocycloalkyle ou NR3R4 ; ou le radical COR dans lequel R représente : - un radical cycloalkyle ou un radical alkyle éventuellement substitué par un radical NR3R4, alcoxy, hydroxy, phényle, hétéroaryle, ou hétérocycloalkyle eux-mêmes éventuellement substitués ;

- un radical alcoxy éventuellement substitué par NR3R4, alcoxy, hydroxy ou par hétérocycloalkyle ; un radical O-phényle ou un radical

O-(CH2)n-phényle, avec phényle éventuellement substitué et n représente un entier de 1 à 4 ;

- ou le radical NR1 R2 dans lequel R1 et R2 sont tels que l'un de R1 et R2 représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle et l'autre de R1 et R2 représente un atome d'hydrogène, un radical cycloalkyle ou un radical alkyle éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux identiques ou différents choisis parmi les radicaux hydroxyle, alcoxy, hétéroaryle, hétérocycloalkyle, NR3R4, phényle éventuellement substitué ou bien R1 et R2 forment avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un radical cyclique renfermant de 3 à 10 chaînons et éventuellement un ou plusieurs autres hétéroatomes choisi(s) parmi O, S, N et NH, ce radical y compris l'éventuel NH qu'il contient étant éventuellement substitué, avec R3 et R4, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène, un radical alkyle, un radical cycloalkyle, un radical hétérocycloalkyle, un radical hétéroaryle ou un radical phényle, tous éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux identiques ou différents choisis parmi les radicaux hydroxyle, alcoxy, hétéroaryle, hétérocycloalkyle, NH2, NHAIk, N(Alk)2 ou phényle éventuellement substitué; ou bien R3 et R4 forment avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un radical cyclique renfermant de 3 à 10 chaînons et éventuellement un ou plusieurs autres hétéroatomes choisi(s) parmi O, S, N et NH, ce radical y compris l'éventuel NH qu'il contient étant éventuellement substitué; tous les radicaux définis ci-dessus hétérocycloalkyle, hétéroaryle et phényle ainsi que les radicaux cycliques que peuvent former R1 et R2 ou R3 et R4 avec l'atome d'azote auquel ils sont liés, étant éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux choisis parmi les atomes d'halogène, les radicaux hydroxyle, oxo, alcoxy, NH2, NHaIk, N(alk)2 et les radicaux alkyle, cycloalkyle, hétérocycloalkyle, CH2-hétérocycloalkyle, phényle, CH2-phényle, hétéroaryle , CO-phényle et S-hétéroaryle, tels que dans ces derniers radicaux les radicaux alkyle, hétérocycloalkyle, phényle et hétéroaryle sont eux-mêmes éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux choisis parmi les atomes d'halogène et les radicaux hydroxyle, oxo, alkyle et alcoxy renfermant de 1 à 4 atomes de carbone, NH2, NHaIk et N(alk)2, lesdits produits de formule (I) étant sous toutes les formes isomères possibles racémiques, énantiomères et diastéréoisomères, ainsi que les sels d'addition avec les acides minéraux et organiques ou avec les bases minérales et organiques desdits produits de formule (I).

La présente invention qui concerne donc les produits de formule (I) tels que définis ci-dessus dans laquelle représente une liaison simple ou double, concerne donc précisément les produits de formule (I ¹ ) qui représentent les produits de formule (I) dans laquelle ^zzz ^ représente une liaison simple et les produits de formule (I") qui représentent les produits de formule (I) dans laquelle représente une liaison double. Ainsi tous les produits de formule (I) tels que définis ci-dessus ou ci-après représentent particulièrement des produits de formule (T) dans laquelle représente une liaison simple.

Les produits de formule (I) tels que définis ci-dessus ou ci-après représentent également des produits de formule (I") dans laquelle ^zzz ^ représente une liaison double.

La présente invention a pour objet les produits de formule (I) tels que définis ci-dessus ou ci-après dans laquelle ^zzz ^ , Ra et X ont les valeurs définies ci- dessus ou ci-après et :

A représente NH ou S; W représente un atome d'hydrogène ; un radical alkyle éventuellement substitué par alcoxy ou hétérocycloalkyle ; ou le radical COR dans lequel R représente :

- un radical cycloalkyle ou un radical alkyle éventuellement substitué par un radical NR3R4, alcoxy, hydroxy, phényle, hétéroaryle, ou hétérocycloalkyle eux-mêmes éventuellement substitués ;

- un radical alcoxy éventuellement substitué par NR3R4, alcoxy, hydroxy ou par hétérocycloalkyle ; un radical O-phényle ou un radical O-(CH2)n- phényle, avec phényle éventuellement substitué et n représente un entier de 1 à 4 ;

- ou le radical NR1 R2 , dans lequel R1 et R2 sont tels que l'un de R1 et R2 représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle et l'autre de R1 et R2 représente un atome d'hydrogène, un radical cycloalkyle ou un radical alkyle éventuellement substitué par NR3R4 ou par alcoxy , ou bien R1 et R2 forment avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un radical cyclique renfermant de 3 à 10 chaînons et éventuellement un ou plusieurs autres hétéroatomes choisi(s) parmi O, S, N et NH, ce radical y compris l'éventuel NH qu'il contient étant éventuellement substitué ; avec NR3R4 tel que R3 et R4, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène ou un radical alkyle ou bien R3 et R4 forment avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un radical cyclique renfermant de 3 à 10 chaînons et éventuellement un ou plusieurs autres hétéroatomes choisi(s) parmi O, S, N et NH, ce radical y compris l'éventuel NH qu'il contient étant éventuellement substitué ; les radicaux hétérocycloalkyle, hétéroaryle et phényle ainsi que les radicaux cycliques que peuvent former R1 et R2 ou R3 et R4 avec l'atome d'azote auquel ils sont liés, définis ci-dessus, étant éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux choisis parmi les atomes d'halogène, les radicaux hydroxyle, alcoxy, NH2, NHaIk, N(alk)2 et les radicaux alkyle, hétérocycloalkyle, CH2-hétérocycloalkyle, phényle, CH2-phényle, hétéroaryle, CO-phényle et S-hétéroaryle, tels que dans ces derniers radicaux, les radicaux alkyle, hétérocycloalkyle, phényle et hétéroaryle sont eux-mêmes éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux choisis parmi les atomes d'halogène et les radicaux hydroxyle, alkyle et alcoxy renfermant de 1 à 4 atomes de carbone, NH2, NHaIk et N(alk)2 ; lesdits produits de formule (I) étant sous toutes les formes isomères possibles racémiques, énantiomères et diastéréoisomères, ainsi que les sels d'addition avec les acides minéraux et organiques ou avec les bases minérales et organiques desdits produits de formule (I). La présente invention a ainsi pour objet les produits de formule (I) tels que définis ci-dessus dans laquelle ^zzz ^ , Ra, X, A et W ont l'une quelconque des valeurs définies ci-dessus ou ci-après, et le radical NR1 R2 est tel que l'un de R1 et R2 représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle et l'autre de R1 et R2 représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle éventuellement substitué par NR3R4 ou par alcoxy , ou bien R1 et R2 forment avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un radical cyclique renfermant de 3 à 10 chaînons et éventuellement un ou plusieurs autres hétéroatomes choisi(s) parmi O, S, N et NH, ce radical y compris l'éventuel NH qu'il contient étant éventuellement substitué ; tous les autres substituants ayant les définitions indiquées ci-dessus ; lesdits produits de formule (I) étant sous toutes les formes isomères possibles racémiques, énantiomères et diastéréoisomères, ainsi que les sels d'addition avec les acides minéraux et organiques ou avec les bases minérales et organiques desdits produits de formule (I). La présente invention a pour objet les produits de formule (I) tels que définis ci-dessus ou ci-après dans laquelle

représente une liaison simple ou double Ra représente un atome d'hydrogène ou bien un atome d'halogène ou bien un radical phényl éventuellement substitué,

X représente S, SO ou SO2 A représente NH ou S; W représente un atome d'hydrogène ou le radical COR dans lequel R représente :

- un radical cycloalkyle ou un radical alkyle éventuellement substitué par un radical phényle, hétéroaryle, NR3R4 ou hétérocycloalkyle eux- mêmes éventuellement substitués ; - un radical alcoxy éventuellement substitué par NR3R4, càd un radical

O-(CH2)n-NR3R4 ; un radical O-phényle ou un radical O-(CH2)n- phényle, avec phényle éventuellement substitué et n représente un entier de 1 à 4 ;

- ou le radical NR1 R2 dans lequel R1 et R2 sont tels que l'un de R1 et R2 représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle et l'autre de

R1 et R2 représente un radical cycloalkyle ou un radical alkyle éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux identiques ou différents choisis parmi les radicaux hydroxyle, alcoxy, hétéroaryle, hétérocycloalkyle, NR3R4, phényle éventuellement substitué ou bien R1 et R2 forment avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un radical cyclique renfermant éventuellement un ou plusieurs autres hétéroatomes choisi(s) parmi O, S, N et NH, ce radical y compris l'éventuel NH qu'il contient étant éventuellement substitué ; avec R3 et R4, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène, un radical alkyle, un radical cycloalkyle, un radical hétéroaryle ou un radical phényle éventuellement substitué ou bien R3 et R4 forment avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un radical cyclique renfermant éventuellement un ou plusieurs autres hétéroatomes choisi(s) parmi O, S, N et NH, ce radical y compris l'éventuel NH qu'il contient étant éventuellement substitué; tous les radicaux définis ci-dessus hétérocycloalkyle, hétéroaryle et phényle ainsi que les radicaux cycliques que peuvent former R1 et R2 ou R3 et R4 avec l'atome d'azote auquel ils sont liés, étant éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux choisis parmi les atomes d'halogène, les radicaux hydroxyle, oxo, alcoxy, NH2, NHaIk, N(alk)2 et les radicaux alkyle, cycloalkyle, CH2-hétérocycloalkyle, CH2-phényle, CO-phényle et S- hétéroaryle, tels que dans ces derniers radicaux les radicaux alkyle, hétérocycloalkyle, phényle et hétéroaryle sont eux-mêmes éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux choisis parmi les atomes d'halogène et les radicaux hydroxyle, oxo, alkyle et alcoxy renfermant de 1 à 4 atomes de carbone, NH2, NHaIk et N(alk)2, lesdits produits de formule (I) étant sous toutes les formes isomères possibles racémiques, énantiomères et diastéréoisomères, ainsi que les sels d'addition avec les acides minéraux et organiques ou avec les bases minérales et organiques desdits produits de formule (I).

Produits de formule (I) tels que définis ci-dessus ou ci-après dans laquelle , Ra et X ont les valeurs définies ci-dessus ou ci-après et :

A représente NH ou S;

W représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle ou le radical COR dans lequel R représente :

-un radical alkyle éventuellement substitué par OCH3 ou NR3R4 ; -un radical cycloalkyle

-un radical alcoxy éventuellement substitué par OCH3 ou NR3R4, càd un radical O-(CH2)n- OCH3 ou un radical O-(CH2)n-NR3R4, un radical O- phényle ou O-(CH2)n-phényle, avec phényle éventuellement substitué et n représente un entier de 1 à 2 ;

- ou le radical NR1 R2 , dans lequel R1 et R2 sont tels que l'un de R1 et R2 représente un atome d'hydrogène, un radical cycloalkyle ou un radical alkyle et l'autre de R1 et R2 représente un radical alkyle éventuellement substitué par NR3R4, ou bien R1 et R2 forment avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un radical cyclique renfermant éventuellement un ou plusieurs autres hétéroatomes choisi(s) parmi O, S, N et NH, ce radical y compris l'éventuel NH qu'il contient étant éventuellement substitué ; avec NR3R4 tel que R3 et R4, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène ou un radical alkyle ou bien R3 et R4 forment avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un radical cyclique renfermant éventuellement un ou plusieurs autres hétéroatomes choisi(s) parmi O, S, N et NH, ce radical y compris l'éventuel NH qu'il contient étant éventuellement substitué ; les radicaux phényle ainsi que les radicaux cycliques que peuvent former R1 et R2 ou R3 et R4 avec l'atome d'azote auquel ils sont liés, définis ci-dessus, étant éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux choisis parmi les atomes d'halogène, les radicaux hydroxyle, alcoxy, NH2, NHaIk, N(alk)2 et les radicaux alkyle, CH2-hétérocycloalkyle, , CH2-phényle, , CO-phényle et S-hétéroaryle, tels que dans ces derniers radicaux, les radicaux alkyle, hétérocycloalkyle, phényle et hétéroaryle sont eux-mêmes éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux choisis parmi les atomes d'halogène et les radicaux hydroxyle, alkyle et alcoxy renfermant de 1 à 4 atomes de carbone, NH2, NHaIk et N(alk)2 ; lesdits produits de formule (I) étant sous toutes les formes isomères possibles racémiques, énantiomères et diastéréoisomères, ainsi que les sels d'addition avec les acides minéraux et organiques ou avec les bases minérales et organiques desdits produits de formule (I). La présente invention a ainsi pour objet les produits de formule (I) tels que définis ci-dessus dans laquelle ^zzz ^ , Ra et X ont l'une quelconque des valeurs définies ci-dessus ou ci-après,

A représente NH ou S;

W représente un atome d'hydrogène ou le radical COR dans lequel R représente : un radical alkyle éventuellement substitué par NR3R4 ; un radical alcoxy éventuellement substitué par NR3R4, càd un radical O-(CH2)n-NR3R4, un radical O-phényle ou O-(CH2)n-phényle, avec phényle éventuellement substitué et n représente un entier de 1 à 2 ; ou le radical NR1 R2 , dans lequel R1 et R2 sont tels que l'un de R1 et

R2 représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle et l'autre de R1 et R2 représente un radical alkyle éventuellement substitué par NR3R4, ou bien R1 et R2 forment avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un radical cyclique renfermant éventuellement un ou plusieurs autres hétéroatomes choisi(s) parmi O, S, N et NH, ce radical y compris l'éventuel NH qu'il contient étant éventuellement substitué ; avec NR3R4 tel que R3 et R4, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène ou un radical alkyle ou bien R3 et R4 forment avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un radical cyclique renfermant éventuellement un ou plusieurs autres hétéroatomes choisi(s) parmi O, S, N et NH, ce radical y compris l'éventuel NH qu'il contient étant éventuellement substitué ; les radicaux phényle ainsi que les radicaux cycliques que peuvent former R1 et R2 ou R3 et R4 avec l'atome d'azote auquel ils sont liés, définis ci-dessus, étant éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux choisis parmi les atomes d'halogène, les radicaux hydroxyle, alcoxy, NH2, NHaIk, N(alk)2 et les radicaux alkyle, , CH2-hétérocycloalkyle, CH2-phényle, CO-phényle et S-hétéroaryle, tels que dans ces derniers radicaux, les radicaux alkyle, hétérocycloalkyle, phényle et hétéroaryle sont eux-mêmes éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux choisis parmi les atomes d'halogène et les radicaux hydroxyle, alkyle et alcoxy renfermant de 1 à 4 atomes de carbone, NH2, NHaIk et N(alk)2 ; lesdits produits de formule (I) étant sous toutes les formes isomères possibles racémiques, énantiomères et diastéréoisomères, ainsi que les sels d'addition avec les acides minéraux et organiques ou avec les bases minérales et organiques desdits produits de formule (I).

La présente invention a ainsi pour objet les produits de formule (I) tels que définis ci-dessus dans laquelle , X, A et W ont les significations indiquées ci-dessus ou ci-après, Ra représente un atome d'hydrogène ou bien un atome de chlore ou bien le radical :

avec Rb représente un atome d'halogène ou un radical S-hétéroaryle éventuellement substitué par un radical choisi parmi les atomes d'halogène et les radicaux hydroxyle, alkyle et alcoxy renfermant de 1 à 4 atomes de carbone, NH2, NHaIk et N(alk)2, lesdits produits de formule (I) étant sous toutes les formes isomères possibles racémiques, énantiomères et diastéréoisomères, ainsi que les sels d'addition avec les acides minéraux et organiques ou avec les bases minérales et organiques desdits produits de formule (I).

Concernant les radicaux cycliques que peuvent former R1 et R2 ou R3 et R4 avec l'atome d'azote auquel ils sont liés, ces radicaux renfermant éventuellement un ou plusieurs autres hétéroatomes choisi(s) parmi O, S, N et NH, avec l'éventuel S pouvant être éventuellement sous forme SO ou SO2; ces radicaux y compris l'éventuel NH qu'ils contiennent peuvent donc être éventuellement substitués notamment par un radical choisi parmi alkyle, alcoxy, cycloalkyle ou hétérocycloalkyle eux-mêmes éventuellement susbtitués par un ou plusieurs radicaux choisis parmi les atomes d'halogène et les radicaux alkyle, alcoxy, NH2, NHAIk ou N(Alk)2; Dans les produits de formule (I) et dans ce qui suit :

- le terme radical alkyle (ou AIk) désigne les radicaux, linéaires et le cas échéant ramifiés, méthyle, éthyle, propyle, isopropyle, butyle, isobutyle, sec- butyle, tert-butyle, pentyle, isopentyle, hexyle, isohexyle et également heptyle, octyle, nonyle et décyle ainsi que leurs isomères de position linéaires ou ramifiés : on préfère les radicaux alkyles renfermant de 1 à 6 atomes de carbone et plus particulièrement les radicaux alkyle renfermant de 1 à 4 atomes de carbone de la liste ci-dessus ; - le terme radical alcoxy désigne les radicaux linéaires et le cas échéant ramifiés, méthoxy, éthoxy, propoxy, isopropoxy, butoxy linéaire, secondaire ou tertiaire, pentoxy ou hexoxy ainsi que leurs isomères de position linéaires ou ramifiés : on préfère les radicaux alkoxy renfermant de 1 à 4 atomes de carbone de la liste ci-dessus ; - le terme atome d'halogène désigne les atomes de chlore, de brome, d'iode ou de fluor et de préférence l'atome de chlore, de brome ou de fluor.

- le terme radical cycloalkyle désigne un radical carbocyclique saturé renfermant 3 à 10 atomes de carbone et désigne ainsi notamment les radicaux cyclopropyle, cyclobutyle, cyclopentyle et cyclohexyle et tout particulièrement les radicaux cyclopropyl, cyclopentyle et cyclohexyle ;

- le terme radical hétérocycloalkyle désigne ainsi un radical carbocyclique monocyclique ou bicyclique, renfermant de 3 à 10 chaînons interrompu par un ou plusieurs hétéroatomes, identiques ou différents, choisis parmi les atomes d'oxygène, d'azote ou de soufre : on peut citer par exemple les radicaux morpholinyle, thiomorpholinyle, aziridyle, azétidyle, pipérazinyle, pipéridyle, homopipérazinyle, pyrrolidinyle, imidazolidinyle, pyrazolidinyle, tétrahydrofuranyle, tétrahydrothiényle, tétrahydropyrannyle, oxodihydropyridazinyle, ou encore oxétanyle ou thiétannyle tous ces radicaux étant éventuellement substitués ; on peut noter que ces radicaux hétérocycloalkyles peuvent comporter un pont formé à partir de deux chainons pour former par exemple un radical oxa-5-azabicyclo[2.2.1]heptane ou encore azaspiro[3.3]heptane ou d'autres cycles azabicyclo-alcanes ou azaspiro-alcanes. - les termes aryle et hétéroaryle désignent des radicaux insaturés ou partiellement insaturés, respectivement carbocycliques et hétérocycliques, monocycliques ou bicycliques, renfermant au plus 12 chaînons, pouvant éventuellement contenir un chaînon -C(O), les radicaux hétérocycliques contenant un ou plusieurs hétéroatomes identiques ou différents choisis parmi O, N, ou S avec N, le cas échéant, éventuellement substitué ;

- le terme radical aryle désigne ainsi des radicaux monocycliques ou bicycliques renfermant 6 à 12 chaînons tels que par exemple les radicaux phényle, naphtyle, biphényle, indényle, fluorényle et anthracényle, plus particulièrement les radicaux phényle et naphtyle et encore plus particulièrement le radical phényle. On peut noter qu'un radical carbocyclique contenant un chaînon -C(O) est par exemple le radical tétralone ;

- le terme radical hétéroaryle désigne ainsi des radicaux monocycliques ou bicycliques renfermant 5 à 12 chaînons : des radicaux hétéroaryles monocycliques tels que par exemple les radicaux thiényle tel que 2-thiényle et 3-thiényle, furyle tel que 2-furyle, 3-furyle, pyrannyle, pyrrolyle, pyrrolinyle, pyrazolinyle, imidazolyle, pyrazolyle, pyridyle tel que 2-pyhdyle, 3-pyhdyle et 4-pyhdyle, pyrazinyle, pyrimidinyle, pyridazinyle, oxazolyle, thiazolyle, isothiazolyle, diazolyle, thiadiazolyle, thiatriazolyle, oxadiazolyle, isoxazolyle tel que 3- ou 4-isoxazolyle, furazannyle, tétrazolyle libre ou salifié, tous ces radicaux étant éventuellement substitués parmi lesquels plus particulièrement les radicaux thiényle tel que 2-thiényle et 3-thiényle, furyle tel que 2-furyle, pyrrolyle, pyrrolinyle, pyrazolinyle, imidazolyle, pyrazolyle, oxazolyle, isoxazolyle, pyridyle, pyridazinyle, ces radicaux étant éventuellement substitués ; des radicaux hétéroaryles bicycliques tels que par exemple les radicaux benzothiényle tel que 3-benzothiényle, benzothiazolyle, quinolyle, isoquinolyle, dihydroquinolyle, quinolone, tétralone, adamentyl, benzofuryle, isobenzofuryle, dihydrobenzofuranne, éthylènedioxyphényle, thianthrényle, benzopyrrolyle, benzimidazolyle, benzoxazolyle, thionaphtyle, indolyle, azaindolyle, indazolyle, purinyle, thiénopyrazolyle, tétrahydroindazolyle, tétrahydrocyclopentapyrazolyle, dihydrofuropyrazolyle, tétrahydropyrrolopyrazolyle, oxotétrahydropyrrolopyrazolyle, tétrahydropyranopyrazolyle, tétrahydropyridinopyrazolyle ou oxodihydropyridino-pyrazolyle, tous ces radicaux étant éventuellement substitués ;

Comme exemples de radicaux hétéroaryles ou bicycliques, on peut citer plus particulièrement les radicaux pyrimidinyle, pyridyle, pyrrolyle, azaindolyle, indazolyle ou pyrazolyle, éventuellement substitués par un ou plusieurs substituants identiques ou différents comme indiqué ci-dessus. Le ou les radicaux carboxy des produits de formule (I) peuvent être salifiés ou estérifiés par les groupements divers connus de l'homme du métier parmi lesquels on peut citer, par exemple :

- parmi les composés de salification, des bases minérales telles que, par exemple, un équivalent de sodium, de potassium, de lithium, de calcium, de magnésium ou d'ammonium ou des bases organiques telles que, par exemple, la méthylamine, la propylamine, la triméthylamine, la diéthylamine, la triéthylamine, la N,N-diméthyléthanolamine, le tris (hydroxyméthyl) amino méthane, l'éthanolamine, la pyridine, la picoline, la dicyclohexylamine, la morpholine, la benzylamine, la procaïne, la lysine, l'arginine, l'histidine, la N-méthylglucamine,

- parmi les composés d'estérification, les radicaux alkyle pour former des groupes alcoxy carbonyle tel que, par exemple, méthoxycarbonyle, éthoxycarbonyle, tert-butoxycarbonyle ou benzyloxycarbonyle, ces radicaux alkyles pouvant être substitués par des radicaux choisis par exemple parmi les atomes d'halogène, les radicaux hydroxyle, alcoxy, acyle, acyloxy, alkylthio, amino ou aryle comme, par exemple, dans les groupements chlorométhyle, hydroxypropyle, méthoxyméthyle, propionyloxyméthyle, méthylthiométhyle, diméthylaminoéthyle, benzyle ou phénéthyle.

Les sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques des produits de formule (I) peuvent être, par exemple, les sels formés avec les acides chlorhydrique, bromhydrique, iodhydrique, nitrique, sulfurique, phosphorique, propionique, acétique, trifluoroacétique, formique, benzoïque, maléique, fumarique, succinique, tartrique, citrique, oxalique, glyoxylique, aspartique, ascorbique, les acides alcoylmonosulfoniques tels que par exemple l'acide méthanesulfonique, l'acide éthanesulfonique, l'acide propanesulfonique, les acides alcoyldisulfoniques tels que par exemple l'acide méthanedisulfonique, l'acide alpha, bêta-éthanedisulfonique, les acides arylmonosulfoniques tels que l'acide benzènesulfonique et les acides aryldisulfoniques. On peut rappeler que la stéréoisomérie peut être définie dans son sens large comme l'isomérie de composés ayant mêmes formules développées, mais dont les différents groupes sont disposés différemment dans l'espace, tels que notamment dans des cyclohexanes monosubstitués dont le substituant peut être en position axiale ou équatoriale, et les différentes conformations rotationnelles possibles des dérivés de l'éthane. Cependant, il existe un autre type de stéréoisomérie, dû aux arrangements spatiaux différents de substituants fixés, soit sur des doubles liaisons, soit sur des cycles, que l'on appelle souvent isomérie géométrique ou isomérie cis- trans. Le terme stéréoisomères est utilisé dans la présente demande dans son sens le plus large et concerne donc l'ensemble des composés indiqués ci-dessus.

Les radicaux cycliques que peuvent former d'une part R1 et R2 avec l'atome d'azote auquel ils sont liés et d'autre part R3 et R4 avec l'atome d'azote auquel ils sont liés, sont éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux choisis parmi ceux indiqués ci-dessus pour les éventuels substituants des radicaux hétérocycloalkyle càd un ou plusieurs radicaux choisis parmi les atomes d'halogène, les radicaux hydroxyle, oxo, alcoxy, NH2; NHaIk, N(alk)2, et les radicaux alkyle, hétérocycloalkyle, CH2- hétérocycloalkyle, phényle, CH2-phényle, hétéroaryle, et CO-phényle, tels que dans ces derniers radicaux les radicaux alkyle, hétérocycloalkyle et phényle sont eux-mêmes éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux choisis parmi les atomes d'halogène et les radicaux hydroxyle, oxo, alkyle et alcoxy renfermant de 1 à 4 atomes de carbone, NH2; NHaIk et N(alk)2,

Les radicaux cycliques que peuvent former d'une part R1 et R2 avec l'atome d'azote auquel ils sont liés et d'autre part R3 et R4 avec l'atome d'azote auquel ils sont liés, sont notamment éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux identiques ou différents choisis parmi les atomes d'halogène et les radicaux alkyle, hydroxyle, alcoxy, CH2-pyrrolidinyle, CH2- phényle, hétéroaryle, et phényle, dans lesquels les radicaux alkyle, pyrrolidinyle et phényle sont eux-mêmes éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux identiques ou différents choisis parmi les atomes d'halogène et les radicaux alkyle, hydroxyle, oxo et alcoxy .

Les radicaux hétérocycloalkyle tels que définis ci-dessus représentent notamment les radicaux azépanyle, morpholinyle et pyrrolidinyle, pipéridyle, et pipérazinyle eux-mêmes éventuellement substitués, tels que définis ci- dessus ou ci-après.

Lorsque NR1 R2 ou NR3R4 forme un cycle comme défini ci-dessus, un tel cycle aminé peut être choisi notamment parmi les radicaux pyrrolidinyle, pyrazolidinyle, pyrazolinyle, pipéridyle, azépinyle, morpholino ou pipérazinyle, ces radicaux étant eux-mêmes éventuellement substitués comme indiqué ci- dessus ou ci-après : par exemple par un ou plusieurs radicaux identiques ou différents choisis parmi les atomes d'halogène et les radicaux alkyle, hydroxyle, alcoxy, phényle et CH2-phényle, les radicaux alkyle ou phényle étant eux-mêmes éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux identiques ou différents choisis parmi les atomes d'halogène et les radicaux alkyle, hydroxyle et alcoxy .

Le cycle NR1 R2 ou NR3R4 peut plus particulièrement être choisi parmi les radicaux pyrrolidinyle, morpholino éventuellement substitué par un ou deux radicaux alkyle ou pipérazinyle éventuellement substitué sur le second atome d'azote par un radical alkyle, phényle, ou et CH2-phényle, eux-mêmes éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux identiques ou différents choisis parmi les atomes d'halogène et les radicaux alkyle, hydroxyle et alcoxy.

La présente invention a notamment pour objet les produits de formule (I) dans laquelle A représente NH , les substituants Ra, X et W étant choisis parmi toutes les valeurs définies pour ces radicaux ci-dessus ou ci-dessous, lesdits produits de formule (I) étant sous toutes les formes isomères possibles racémiques, énantiomères et diastéréoisomères, ainsi que les sels d'addition avec les acides minéraux et organiques ou avec les bases minérales et organiques desdits produits de formule (I).

La présente invention a notamment pour objet les produits de formule (I) dans laquelle A représente S, les substituants Ra, X et W étant choisis parmi toutes les valeurs définies pour ces radicaux ci-dessus ou ci-dessous, lesdits produits de formule (I) étant sous toutes les formes isomères possibles racémiques, énantiomères et diastéréoisomères, ainsi que les sels d'addition avec les acides minéraux et organiques ou avec les bases minérales et organiques desdits produits de formule (I).

Notamment la présente invention concerne les produits de formule (I) répondant à la formule (la) ou (Ib) :

dans lesquelles , Ra et W sont choisis parmi toutes les significations indiquées ci-dessus ou ci-après, lesdits produits de formule (la) et (Ib) étant sous toutes les formes isomères possibles racémiques, énantiomères et diastéréoisomères, ainsi que les sels d'addition avec les acides minéraux et organiques ou avec les bases minérales et organiques desdits produits de formule (la) et (Ib).

La présente invention concerne donc particulièrement les produits de formule

(I) tels que définis ci-dessus ou ci-après dans laquelle ^zzz ^ représente une liaison simple répondant aux produits de formule (V) :

les substituants Ra, X, A et W sont choisis parmi toutes les significations indiquées ci-dessus ou ci-après, lesdits produits de formule (V) étant sous toutes les formes isomères possibles racémiques, énantiomères et diastéréoisomères, ainsi que les sels d'addition avec les acides minéraux et organiques ou avec les bases minérales et organiques desdits produits de formule (V).

La présente invention concerne donc particulièrement les produits de formule

(I) tels que définis ci-dessus ou ci-après dans laquelle ^zzz ^ représente une liaison double répondant aux produits de formule (I") :

dans laquelle les substituants Ra, X, A et W sont choisis parmi toutes les significations indiquées ci-dessus ou ci-après, lesdits produits de formule (I") étant sous toutes les formes isomères possibles racémiques, énantiomères et diastéréoisomères, ainsi que les sels d'addition avec les acides minéraux et organiques ou avec les bases minérales et organiques desdits produits de formule (I").

La présente invention concerne donc particulièrement les produits de formule

(la) tels que définis ci-dessus ou ci-après dans laquelle ^zzz ^ représente une liaison simple répondant aux produits de formule (Ia') :

dans lesquelles Ra et W sont choisis parmi toutes les significations indiquées ci-dessus ou ci-après, lesdits produits de formule (l'a) étant sous toutes les formes isomères possibles racémiques, énantiomères et diastéréoisomères, ainsi que les sels d'addition avec les acides minéraux et organiques ou avec les bases minérales et organiques desdits produits de formule (l'a). La présente invention concerne donc particulièrement les produits de formule

(la) tels que définis tels que définis ci-dessus ou ci-après dans laquelle ^zzz ^ représente une liaison double répondant aux produits de formule (l"a) :

dans lesquelles Ra et W sont choisis parmi toutes les significations indiquées ci-dessus ou ci-après, lesdits produits de formule (l"a) étant sous toutes les formes isomères possibles racémiques, énantiomères et diastéréoisomères, ainsi que les sels d'addition avec les acides minéraux et organiques ou avec les bases minérales et organiques desdits produits de formule (l"a). La présente invention concerne donc particulièrement les produits de formule

(Ib) tels que définis ci-dessus ou ci-après dans laquelle ^zzz ^ représente une liaison simple répondant aux produits de formule (l'b) :

dans lesquelles Ra et W sont choisis parmi toutes les significations indiquées ci-dessus ou ci-après, lesdits produits de formule (l'b) étant sous toutes les formes isomères possibles racémiques, énantiomères et diastéréoisomères, ainsi que les sels d'addition avec les acides minéraux et organiques ou avec les bases minérales et organiques desdits produits de formule (l'b).

La présente invention concerne donc particulièrement les produits de formule

(Ib) tels que définis ci-dessus ou ci-après dans laquelle représente une liaison double répondant aux produits de formule (l"b) :

dans lesquelles Ra et W sont choisis parmi toutes les significations indiquées ci-dessus ou ci-après, lesdits produits de formule (l"b) étant sous toutes les formes isomères possibles racémiques, énantiomères et diastéréoisomères, ainsi que les sels d'addition avec les acides minéraux et organiques ou avec les bases minérales et organiques desdits produits de formule (l"b).

Lorsque dans les produits de formule (I), Ra représente le radical :

Rb est notamment en position para.

Lorsque Rb défini ci-dessus représente un atome d'halogène, Rb représente notamment fluor.

La présente invention a tout particulièrement pour objet les produits de formule (I) tels que définis ci-dessus répondant aux formules suivantes :

- 1 -(6-{[6-(cyclohexyloxy)[1 ,2,4]thazolo[4,3-b]pyridazin-3-yl]sulfanyl}-5-fluoro- 1 ,3-benzothiazol-2-yl)-3-[2-(morpholin-4-yl)éthyl]urée

(5-fluoro-6-{[6-(4-fluorophényl)[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-3-yl]sulfanyl}- 1 ,3-benzothiazol-2-yl)carbamate de 2-méthylpropan-2-yle - 5-fluoro-6-{[6-(4-fluorophényl)[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-3-yl]sulfanyl}- 1 ,3-benzothiazol-2-amine

- 1 -(5-fluoro-6-{[6-(4-fluorophényl)[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-3-yl]sulfanyl}- 1 ,3-benzothiazol-2-yl)-3-[2-(morpholin-4-yl)éthyl]urée

1 -(6-{[6-(cyclopropylamino)[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-3-yl]sulfanyl}-5- fluoro-1 ,3-benzothiazol-2-yl)-3-[2-(morpholin-4-yl)éthyl]urée

1 -(6-{[6-(cyclohexylamino)[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-3-yl]sulfanyl}-5- fluoro-1 ,3-benzothiazol-2-yl)-3-[2-(morpholin-4-yl)éthyl]urée

- 2-(4-cyclopropylpipérazin-1 -yl)-N-{6-[(6-éthoxy[1 ,2,4]thazolo[4,3-b]pyridazin- 3-yl)sulfanyl]-5-fluoro-1 ,3-benzothiazol-2-yl}acétamide - N-(6-{[6-(cyclobutyloxy)[1 ,2,4]thazolo[4,3-b]pyridazin-3-yl]sulfanyl}-5-fluoro- 1 ,3-benzothiazol-2-yl)-2-(4-cyclopropylpipérazin-1 -yl)acétamide

N-{6-[(6-éthoxy[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-3-yl)sulfanyl]-5-fluoro-1 ,3- benzothiazol-2-yl}-2-(4-éthylpipérazin-1-yl)acétamide

- N-(6-{[6-(cyclobutyloxy)[1 ,2,4]thazolo[4,3-b]pyridazin-3-yl]sulfanyl}-5-fluoro- 1 ,3-benzothiazol-2-yl)-2-(4-éthylpipérazin-1 -yl)acétamide

2-(4-cyclopropylpipérazin-1 -yl)-N-(5-fluoro-6-{[6-(oxétan-3- yloxy)[1 ,2,4]thazolo[4,3-b]pyridazin-3-yl]sulfanyl}-1 ,3-benzothiazol-2- yl)acétamide 2-(4-cyclopropylpipérazin-1 -yl)-N-(5-fluoro-6-{[6-(tétrahydrofuran-3- yloxy)[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyπdazin-3-yl]sulfanyl}-1 ,3-benzothiazol-2- yl)acétamide ainsi que les sels d'addition avec les acides minéraux et organiques ou avec les bases minérales et organiques desdits produits de formule (I).

La présente invention a encore pour objet tout procédé de préparation des produits de formule (I) tels que définis ci-dessus

La présente invention a ainsi pour objet tout procédé de préparation des produits de formule (I) tels que définis ci-dessus dans lesquels A représente NH.

La présente invention a ainsi pour objet tout procédé de préparation des produits de formule (I) tels que définis ci-dessus dans lesquels A représente S .

Les produits selon l'invention peuvent être préparés à partir de méthodes conventionnelles de chimie organique. Les schémas 1 , 2, 2bis, 3, 4, 5 et 6 ci- dessous sont illustratifs des méthodes utilisées pour la préparation des produits de formule (I). A ce titre, il ne saurait constituer une limitation de la portée de l'invention, en ce qui concerne les méthodes de préparation des composés revendiqués. Les produits de formule (I) tels que définis ci-dessus selon la présente invention peuvent ainsi notamment être préparés selon les procédés décrits dans les schémas 1 , 2, 2bis, 3, 4, 5 et 6 ci-dessous.

La présente invention a ainsi également pour objet le procédé de préparation de produits de formule (I) selon le schéma 1 tel que défini ci-après. La présente invention a ainsi également pour objet le procédé de préparation de produits de formule (I) selon le schéma 2 tel que défini ci-après.

La présente invention a ainsi également pour objet le procédé de préparation de produits de formule (I) selon le schéma 2bis tel que défini ci-après. La présente invention a ainsi également pour objet le procédé de préparation de produits de formule (I) selon le schéma 3 tel que défini ci-après

La présente invention a ainsi également pour objet le procédé de préparation de produits de formule (I) selon le schéma 4 tel que défini ci-après La présente invention a ainsi également pour objet le procédé de préparation de produits de formule (I) selon le schéma 5 tel que défini ci-après

La présente invention a ainsi également pour objet le procédé de préparation de produits de formule (I) selon le schéma 6 tel que défini ci-après

De même que, parmi les produits de formule (I) tels que définis ci-dessus dans laquelle représente une liaison simple ou double, on définit les produits de formule (V) qui représentent les produits de formule (I) dans laquelle représente une liaison simple et les produits de formule (I") qui représentent les produits de formule (I) dans laquelle ^zzz ^ représente une liaison double, de même pour les intermédiaires de synthèse tels que définis ci-après de formules (a), (b), (c), (d), (e) et (f) dans laquelle ^zzz ^ représente une liaison simple ou double, on définit les composés de formules (a ¹ ), (b ¹ ), (c ¹ ), (d ¹ ), (e ¹ ) et (f) dans laquelle ^zzz ^ représente une liaison simple, et les composés de formules (a"), (b"), (c"), (d"), (e") et (f) dans laquelle — représente une liaison double.

Schéma 1 : synthèses de dérivés benzimidazoles de formules (1 a"), (1 b"), (1 "c), (1d"), (1e"), (1 a ¹ ), (1 b ¹ ), (1 C) ₁ (Id ¹ ) et (1e ¹ )

Dans le schéma 1 ci-dessus, le substituant , Ra a les significations indiquées ci-dessus pour les produits de formule (V) et (I"), et les groups CONR1 R2,

COR6 et COR7, qui constituent W, peuvent prendre les valeurs de W tels que définis ci-dessus pour les produits de formule (I ¹ ) et (I"), quand W≠H

Dans le schéma ci-dessus 1 , les benzimidazoles de formule générale (1 a"), (1 b"), (1 c"), (1d") et (1 e") ainsi que leurs analogues réduits de formule générale (1a ¹ ), (1 b ¹ ), (1 c'),(1cT) et (1 e ¹ ) peuvent être préparés à partir de la 3,6-dichloro[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazine commerciale de formule (S)..

Les composés (E) peuvent être obtenus par les voies décrites dans le schéma 3, ci-dessous.

Les composés (G) peuvent être obtenus, par exemple, par réaction de 2- fluoro-4-nitro-5-amino-benzènethiol de formule (F) sur les composés de formule (E). Le composé de formule (F) peut être obtenu par introduction de la fonction thiol sur le dérivé 2-nitro-4,5-difluoroaniline (Q) (composé commercial), par exemple, en présence de thioacétate de potassium dans un solvant tel la N, N-diméthylformamide, à une température voisine de 20 ⁰ C.

Les composés (H") tels que représentent une liaison double peuvent être obtenus, par exemple, par réduction avec du fer (0) des composés de formule (G), dans un solvant tel le méthanol, en présence d'acide acétique, à une température voisine de 70 ⁰ C.

Les composés (H') tels que représentent une liaison simple peuvent être obtenus, par exemple, par réduction avec du zinc (0) des composés de formule (G), en présence d'acide acétique, à une température voisine de 20 ⁰ C.

Plus particulièrement, les carbamates de formule générale (1 a ¹ ) et (1a") peuvent être préparés notamment comme décrit dans le brevet WO03028721A2, mais à partir respectivement d'un 2-fluoro-4,5-diamino phényl sulfure de formule (H') et (H") et d'une pseudo thio-urée de formule (J), en présence d'acide acétique et dans un solvant protique tel le méthanol, à une température voisine de 80 ⁰ C.

Plus particulièrement, les benzimidazoles de formule générale (1 b') et (1 b") peuvent être préparés respectivement par réaction d'une aminé NHR1 R2 de formule (R) (avec R1 et R2 tels que définis ci-dessus) sur un carbamate de formule (1 a ¹ ) et (1 a"), par exemple en présence d'un solvant aprotique tel la 1 -méthyl-2-pyrrolidinone. La réaction est effectuée, par exemple, une température voisine de 120°C, dans un tube scellé sous microondes. Plus particulièrement, les 2-amino benzimidazoles de formule générale (1 c') et (1c") peuvent être préparés par exemple, par réaction du bromure de cyanogène sur un composé de formule respectivement (H') et (H"), en présence d'un solvant protique tel l'éthanol. La réaction est effectuée une température voisine de 80 ⁰ C. Plus particulièrement, les carbamates générale de formule (1d') et (1d") peuvent être obtenus par réaction avec un chlorocarbonate de formule (O) (X=CI) sur un composé de formule générale respectivement (1 c') et (1c"), par exemple dans un solvant tel le tétrahydrofurane, en présence d'une base telle l'hydrogénocarbonate de sodium, à une température voisine de 20°C. Plus particulièrement, les carboxamides (1 e') et (1 e") peuvent être obtenus respectivement à partir des aminés de formule générale (1 c') et (1 c")

- par réaction des aminés (1 c ¹ ) et (1c") avec un chlorure d'acide de formule (P) (X = Cl), en présence, par exemple, d'un solvant tel la pyridine, à une température voisine de 20°C. -par réaction des aminés (1 c ¹ ) et (1c") avec un anhydride d'acide de formule (P) (X= OCOR7), en présence, par exemple, d'un solvant tel la pyridine à une température voisine de 20 ⁰ C.

- par couplage des aminés (1 c') et (1 c") avec un acide de formule (P) (X=OH) dans les conditions, par exemple, décrites par D. D . DesMarteau; V. Montanari (Chem Lett, 2000 (9), 1052), en présence de 1- hydroxybenzothazole et de 1 -(3-diméthylaminopropyl)-3-éthylcarbodiimide et en présence d'une base telle la triéthylamine, à une température voisine de 40 ⁰ C.

Schéma 2 : Synthèse de dérivés benzothiazoles de formules (2a'), (2b'), (2c ¹ ), (2d'), (2a)', (2b ¹ ), (2c ¹ ), (2d')

Dans le schéma 2 ci-dessus, le substituant Ra a les significations indiquées ci-dessus pour les produits de formule (I ¹ ) et (I") et les groupes CONR1 R2, COR6 et COR7, qui constituent W, peuvent prendre les valeurs de W tels que définis ci-dessus pour les produits de formule (I ¹ ) et (I"), quand W≠H.

Dans le schéma 2 ci-dessus, les benzothiazoles de formule générale (2a"), (2b"), (2c") et (2d") ainsi que leurs analogues réduits de formule générale (2a ¹ ), (2b ¹ ), (2c ¹ ) et (2d') peuvent être préparés à partir du thiocyanate de 2- amino-5-fluoro-1 ,3-benzothiazol-6-yle (K).

commercial

K Dans le schéma 2 ci-dessus, le thiocyanate de 2-amino-5-fluoro-1 ,3- benzothiazol-6-yle (K) peut être préparé à partir de la 3-fluoroaniline de la manière décrite par K, Papke et R, Pohloudek-Fabini dans Pharmazie ; GE; 22, 5 1967, P229-233

Les carbamates de formule générale (L1 ) peuvent être obtenus, par exemple, par réaction avec un chlorocarbonate de formule (O) (X=CI) sur le thiocyanate de 2-amino-5-fluoro-1 ,3-benzothiazol-6-yle (K), dans un solvant tel le tétrahydrofurane, en présence d'une base telle l'hydrogénocarbonate de sodium, à une température voisine de 20 ⁰ C.

Les composés de formule générale (L2) peuvent être obtenus, par exemple, par réaction des carbamates de formule (L1 ) où R6=phényle, avec des aminés NHR1 R2 de formule (R) (avec R1 et R2 tels que définis ci-dessus), en présence d'un solvant aprotique tel le tétrahydrofurane, à une température voisine de 20 ⁰ C. Les urées (2b ¹ ) et (2b") peuvent être obtenues, par exemple, respectivement à partir des carbamates (2a ¹ ) et (2a") où R6=phényle, de la même manière que les urées (L2) sont obtenues par réaction d'aminés sur les carbamates de type (L1 ).

Les composés de formule générale (L3) peuvent être obtenus par exemple :

- par réaction d'un chlorure d'acide de formule (P) (X = Cl) sur le thiocyanate de 2-amino-5-fluoro-1 ,3-benzothiazol-6-yle (K), en présence, par exemple, d'un solvant tel la pyridine, à une température voisine de 20 ⁰ C.

-par réaction d'un anhydride d'acide de formule (P) (X= OCOR7) sur le thiocyanate de 2-amino-5-fluoro-1 ,3-benzothiazol-6-yle (K), en présence, par exemple, d'un solvant tel la pyridine à une température voisine de 20 ⁰ C. - par couplage du thiocyanate de 2-amino-5-fluoro-1 ,3-benzothiazol-6-yle

(K) avec un acide de formule (P) (X=OH) dans les conditions, par exemple, décrites par D. D . DesMarteau; V. Montanari (Chem Lett, 2000 (9), 1052), en présence de 1-hydroxybenzotriazole et de 1 -(3- diméthylaminopropyl)-3-éthylcarbodiimide et en présence d'une base telle la théthylamine, à une température voisine de 40°C.

De la même manière que les carboxamides (L3) peuvent être obtenues par acylation de l'aminé (K), les carboxamides (2c') et (2c") peuvent être obtenues respectivement à partir des aminés (2d') et (2d").

Schéma 2bis : Voies de synthèse des dérivés glycinamide (2c') et (2c")

Dans le schéma 2bis ci-dessus le substituant R7 peut prendre la signification d'un groupe aminométhyl. Ces glycinamides (2c72c") peuvent être obtenus par couplage des aminés (2d') et (2d") avec un acide glycidique (P') en utilisant les méthodes décrites ci-dessus pour les acides (P) (X=OH).

Les acides glycidiques (P') peuvent être préparés à partir de l'acide bromoacétique et des aminés HNR3R4 selon des conditions similaires à celles décrites par D. T. Witiak et.al.; J. Med. Chem. 1985,28, 1228.

Alternativement, les aminés (2d') et (2d") peuvent être traitées avec le chlorure de chloroacétyle en présence d'une base telle la pyridine, triéthylamine ou N-méthylmorpholine, dans un solvant tel le dichlorométhane à une température voisine de 0 ⁰ C à 20 ⁰ C. Les alpha-chloroacétamides (2e'/2e") ainsi formés peuvent réagir avec des aminés de type HNR3R4, tels que définis ci-dessus, dans un solvant tel la pyridine à une température voisine de 20 ⁰ C, pour donner les dérivés (2c'/2c") tels que définis dans le schéma 2bis ci-dessus.

Les composés de formule générale (M1 ), (M2) et (M3) peuvent être obtenus, par exemple, par réduction de composés de formule générale (L1 ), (L2), (L3) avec du DL-dithiotréitol, en présence de dihydrogénocarbonate de sodium, dans un solvant tel l'éthanol et à une température voisine de 80°C.

Le composé de formule générale (N) peut être préparé in situ par réduction du composé de formule (K), par exemple avec du borohydrure de sodium dans un solvant tel la N, N-diméthylformannide, en présence d'une base telle la théthylamine et à une température voisine de 95°C ou comprise entre 20 ⁰ C et 95°C, ou, alternativement, par exemple avec du DL-dithiotréitol, en présence de dihydrogénocarbonate de sodium, dans un solvant tel l'éthanol et à une température voisine de 80 ⁰ C.

Plus particulièrement, les benzothiazoles de formule générale (2d') et (2d") peuvent être également préparés respectivement à partir de carbamates de formule (2a ¹ ) et (2a ¹ ) où R6 = t-butyle par réaction, par exemple, avec de l'acide trifluoro acétique dans un solvant tel le dichlorométhane, à une température voisine de 20 ⁰ C.

Réciproquement, les benzothiazoles de formule générale (2a ¹ ) et (2a") peuvent être également préparés à partir de benzothiazoles de formule respectivement (2d') et (2d"), par exemple, par réaction avec un chlorocarbonate de formule (O) (X=CI), dans un solvant tel le tétrahydrofurane, en présence d'une base telle l'hydrogénocarbonate de sodium, à une température voisine de 20°C.

Plus particulièrement, les benzothiazoles de formule générale (2a"), (2b"), (2c") et (2d") ainsi que leurs analogues réduits de formule générale (2a'), (2b'), (2c') et (2d') peuvent être préparés par exemple : 1 ) soit par couplage d'un composé de formule (E) avec des dérivés (M1 ),

(M2) et (M3) et (N) engendré in situ par réduction des dérivés (L1 ), (L2), (L3) et (K) par le borohydrure de sodium, dans un solvant tel la N, N- diméthylformamide et en présence d'une base telle la théthylamine, à une température voisine de 95°C ou bien comprise entre 50 ⁰ C et 95°C. 2) soit par couplage des dérivés (M1 ), (M2) et (M3) isolés et d'un composé de formule (E), en présence de borohydrure de sodium dans un solvant tel la N, N-diméthylformamide et en présence d'une base telle la triéthylamine, à une température voisine de 95°C.

3) soit par couplage des dérivés isolés (M1 ), (M2) et (M3) et d'un composé de formule (E) dans les conditions, par exemple, décrites par U. Schopfer et coll (Tetrahedron, 2001 , 57, 3069) en présence de n-tributyl phosphine, de tert-butylate de potassium, de tris(dibenzylideneacetone)dipalladium (0) et de bis(2- diphénylphosphinophényl)ether dans un solvant tel le toluène à une température voisine de 110 ⁰ C

4) soit par couplage d'un composé de formule (E) avec des dérivés (M1 ), (M2) et (M3) et (N) engendré in situ par réduction des dérivés (L1 ), (L2), (L3) et (K) en présence de DL-dithiotréitol et de dihydrogénocarbonate de sodium, dans un solvant tel l'éthanol et à une température voisine de 80 ⁰ C.

Les conditions réductrices 1 ) et 2) peuvent donner des produits de formule

(2a), (2b), (2c) et (2d) tels que ^zzz ^ représentent une liaison simple ou double alors que les conditions 3) et 4) donnent des produits de formule (2a),

(2b), (2c) et (2d) tels que représentent une liaison double.. Schéma 3 : Voies de synthèse des dérivés triazolopyridazine de formule (E)

NHCOR ₇

Dans le schéma 3 ci-dessus, les substituants Ra, R1 et R2 ont les significations indiquées ci-dessus pour les produits de formule (I ¹ ) et (I"). Le substituant R7 représente un radical alkyle ou cycloalkyle. Le substituant R8 représente : - soit un radical alkyle éventuellement substitué par un atome de chlore, un radical hydroxyle ou un radicale hétérocycloalkyle lui-même éventuellement substitué,

- soit un radical cyclolkyle Les composés de formule (E) peuvent être obtenus, par exemple, comme indiqué dans le schéma 3 ci-dessus, à partir de la 3,6- dichloro[1 ,2,4]thazolo[4,3-b]pyridazine commerciale de formule (S).

Plus particulièrement, les composés de formule (E) où Ra représente un radical OR8 peuvent être obtenus par le traitement de la 3,6- dichloro[1 ,2,4]thazolo[4,3-b]pyridazine (S) à une température voisine de 80 ⁰ C et dans un solvant tel la N,N-diméthylformamide avec un alcoolate de formule (U), lui-même obtenu par traitement de l'alcool correspondant par une base telle l'hydrure de sodium à une température voisine de 0 ⁰ C à 20 ⁰ C.

Plus particulièrement, les composés de formule (E) où Ra représente un radical NRiR ₂ peuvent être obtenus par le traitement de la 3,6- dichloro[1 ,2,4]thazolo[4,3-b]pyhdazine (S) avec une aminé de formule (R), à une température voisine de 20°C et dans un solvant tel la N ₁ N- diméthylformamide ou, dans le cas NR1 R2 est NH2, avec de l'ammoniaque aqueux, dans un solvant tel le dioxanne, dans un tube scellé, à une température comprise entre 70 ⁰ C et 90°C .

Plus particulièrement, les composés de formule (E) où Ra représente un radical NHCOR7 peuvent être obtenus par réaction d'un composé de formule générale (E) avec Ra = NH2 avec un composé de formule (P) comme décrit pour les composés de formule générale (L3), (1e ¹ ) et (1 e"). Plus particulièrement, les composés de formule (E) où Ra représente un radical aryle ou hétéroaryle peuvent être obtenus, par exemple :

- à partir des acides boroniques de formule (B), en présence d'hydroxyde de barium octahydrate et de (1 ,1 '-bis (diphénylphosphino)ferrocène) di-chloropalladium (II) dans un solvant tel, par exemple, la N,N-diméthylefornnannide, à une température voisine de 80 ⁰ C.

- ou alternativement, à partir des esters boroniques de formule (V), en présence de dichloro bis (triphénylphosphine) de palladium dans un solvant tel, par exemple, le 1 ,2-diméthoxyéthane, en présence d'une base telle la soude 1 N, à une température voisine de 80 ⁰ C .

Schéma 4 : Synthèse des dérivés benzothiazoles de formule (2e ¹ ) et (2e")

conditions réductrices

Selon le schéma 4 ci-dessus, les benzothiazoles de formule générale (2e ¹ ) et (2e") peuvent être préparés respectivement à partir des composés de formule (2a ¹ ) et (2a").

Dans le schéma 4 ci-dessus, le substituant OR6 représente préférentiellement O-t-Butyl. Le substituant R9 représente un radical alkyle, cycloalkyle ou hétérocycloalkyle éventuellement substitués par un radical alcoxy, hétérocycloalkyle ou NR3R4 (R3 et R4 tels que définis ci-dessus).

Les carbamates de formule générale (T') et (T") peuvent être obtenus respectivement par réaction de carbamates de formule générale (2a ¹ ) et (2a") avec R6=tBu préférentiellement, par exemple, avec des halogénures d'alkyle de formule (W), dans un solvant tel la N,N-diméthylfornnannide, en présence d'hydrure de sodium, à une température comprise entre 20 et 90 ⁰ C.

Les benzothiazoles de formule générale (2e ¹ ) et (2e") peuvent également être préparés à partir des composés de formule (L1 ), avec de préférence R6=tBu, via les composés de formule (T) et (T").

Plus particulièrement, les composés de formule générale (2e ¹ ) et (2e") peuvent être obtenus respectivement par traitement des composés (T) et (T") isolés, par exemple, avec de l'acide trifluoroacétique, dans un solvant tel le dichlorométhane, à une température voisine de 20 ⁰ C, Alternativement, les composés de formule générale (2e") peuvent être obtenus directement par réaction des composés de formule (L4) et (E), via le composé (T") formé in situ, par exemple, en présence de DL-dithiotréitol et de dihydrogénocarbonate de sodium, dans un solvant tel l'éthanol et à une température voisine de 80°C, suivi éventuellement d'un traitement in situ à l'acide trifluoroacétique à 20 ⁰ C si nécessaire.

L4

Les carbamates de formule générale (L4) peuvent être obtenus par réaction de carbamates de formule générale (L1 ), par exemple, avec des halogénures d'alkyle de formule (W), dans un solvant tel la N,N-diméthylformamide, en présence d'hydrure de sodium, à une température comprise entre 20 et 90°C.

Schéma 5 : Synthèse des dérivés benzothiazoles de formule (2e') et (2e")

Alternativement, selon le schéma 5 ci-dessus, les benzothiazoles de formule générale (2e") peuvent être préparés à partir des composés de formules (L6) et (E), par exemple, en présence de DL-dithiotréitol et de dihydrogénocarbonate de sodium, dans un solvant tel l'éthanol et à une température voisine de 80 ⁰ C.

Les benzothiazoles de formule générale (2e ¹ ) peuvent être préparés à partir des composés de formule (2e"), selon les méthodes décrites ci-dessous pour la préparation des composés (I ¹ ) à partir des composés (I"). Les composés de formules (L6) peuvent être préparés à partir du dérivé 2- bromo benzothiazole (L5) par traitement avec un dérivé NH2R9, par exemple, dans un solvant tel le tétrahydrofurane, à une température voisine de 20 ⁰ C. Le substituant R9 représente un radical alkyle ou cycloalkyle éventuellement substitué par un radical alcoxy, hétérocycloalkyle ou NR3R4 (R3 et R4 tels que définis ci-dessus).

Les composés de formules (L5) peuvent être préparés à partir du thiocyanate de 2-amino-5-fluoro-1 ,3-benzothiazol-6-yle (K), par exemple, par traitement avec un nitrite d'alkyle et du bromure cuivreux dans un solvant tel l'acétonitrile, à une température voisine de 0-20°C, selon la méthode décrite par Jagabandhu Das et. al. dans J. Med. Chem. 2006, 49, 6819-6832.

Schéma 6 Autres voies de synthèses de dérivés réduits de formules (T)

Selon le schéma 6 ci-dessus, les benzothiazoles de formule générale (I ¹ ) peuvent également être préparés, à partir des composés de formule (I"), par réduction, par exemple, avec du borohydrure de sodium, dans un solvant tel l'éthanol, à une température voisine de 80 ⁰ C ou bien par réduction avec du zinc (0) en présence d'acide acétique, à une température voisine de 20 ⁰ C.

Alternativement les composés (V) peuvent également être préparés, à partir des composés de formule (E') par couplage avec les composés de type M1 , M2, M3 ou N, obtenus en tant qu'intermédiaires par réduction des composés L1 , L2, L3 ou K in situ, comme décrit ci-dessus au schéma 2. Les composés de type M1 , M2 ou M3 peuvent aussi être isolés et utilisés pour le couplage avec (E'). Les composés (E') peuvent être obtenus à partir des composés de formule (E) par réduction, par exemple, par réduction avec du zinc (0) en présence d'acide acétique, à une température voisine de 20°C.

Alternativement les composé (I') peuvent également être préparés à partir d'autres composés (I') par transformation du groupement W en groupement W de même nature que défini ci-dessus pour W et selon le type de réactions défini au schéma 2 : les transformations de 2d'/2d " en 2a'/2a" et en 2c'/2c", les transformation de 2a'/2a" en 2d'/2d" et en 2b'/2b".

Dans les composés de formule générale (I) tels que définis ci-dessus, on peut oxyder le soufre S en sulfoxyde SO ou sulfone SO2 selon les méthodes connues de l'homme du métier et en protégeant, si nécessaire, les groupements éventuellement réactifs par les groupements protecteurs appropriés.

Parmi les produits de départs de formule, B, D, J, K, O, P, P', Q, R, S, U, V, W certains sont connus et peuvent être obtenus soit commercialement, soit selon les méthodes usuelles connues de l'homme du métier, par exemple à partir de produits commerciaux.

Il est entendu pour l'homme du métier que, pour la mise en œuvre des procédés selon l'invention décrits précédemment, il peut être nécessaire d'introduire des groupements protecteurs des fonctions amino, carboxyle et alcool afin d'éviter des réactions secondaires.

La liste suivante, non exhaustive, d'exemples de protection de fonctions réactives peut être citée :

- les groupements hydroxyle peuvent être protégés par exemple par les radicaux alkyle tels que tert-butyle, thméthylsilyle, tert-butyldiméthylsilyle, méthoxyméthyle, tétrahydropyrannyle, benzyle ou acétyle,

- les groupements amino peuvent être protégés par exemple par les radicaux acétyles, trityle, benzyle, tert-butoxycarbonyle, BOC, benzyloxycarbonyle, phtalimido ou d'autres radicaux connus dans la chimie des peptides,

Les fonctions acide peuvent être protégées par exemple sous forme d'esters formés avec les esters facilement clivables tels que les esters benzyliques ou ter butyliques ou des esters connus dans la chimie des peptides.

On trouvera une liste de différents groupements protecteurs utilisables dans les manuels connus de l'homme du métier et par exemple dans le brevet BF 2 499 995. On peut noter que l'on peut soumettre, si désiré et si nécessaire, des produits intermédiaires ou des produits de formule (I) ainsi obtenus par les procédés indiqués ci-dessus, pour obtenir d'autres intermédiaires ou d'autres produits de formule (I), à une ou plusieurs réactions de transformations connues de l'homme du métier telles que par exemple : a) une réaction d'estérification de fonction acide, b) une réaction de saponification de fonction ester en fonction acide, c) une réaction de réduction de la fonction carboxy libre ou estérifié en fonction alcool, d) une réaction de transformation de fonction alcoxy en fonction hydroxyle, ou encore de fonction hydroxyle en fonction alcoxy, e) une réaction d'élimination des groupements protecteurs que peuvent porter les fonctions réactives protégées, f) une réaction de salification par un acide minéral ou organique ou par une base pour obtenir le sel correspondant, g) une réaction de dédoublement des formes racémiques en produits dédoublés, lesdits produits de formule (I) ainsi obtenus étant sous toutes les formes isomères possibles racémiques, énantiomères et diastéréoisomères.

Les réactions a) à g) peuvent être réalisées dans les conditions usuelles connues de l'homme du métier telles que, par exemple, celles indiquées ci- après.

a) Les produits décrits ci-dessus peuvent, si désiré, faire l'objet, sur les éventuelles fonctions carboxy, de réactions d'estérification qui peuvent être réalisées selon les méthodes usuelles connues de l'homme du métier.

b) Les éventuelles transformations de fonctions ester en fonction acide des produits décrits ci-dessus peuvent être, si désiré, réalisées dans les conditions usuelles connues de l'homme du métier notamment par hydrolyse acide ou alcaline par exemple par de la soude ou de la potasse en milieu alcoolique tel que, par exemple, dans du méthanol ou encore par de l'acide chlorhydrique ou sulfurique. La réaction de saponification peut être réalisée selon les méthodes usuelles connues de l'homme du métier, telles que par exemple dans un solvant tel que le méthanol ou l'éthanol, le dioxane ou le diméthoxyéthane, en présence de soude ou de potasse.

c) Les éventuelles fonctions carboxy libre ou estérifié des produits décrits ci- dessus peuvent être, si désiré, réduites en fonction alcool par les méthodes connues de l'homme de métier : les éventuelles fonctions carboxy estérifié peuvent être, si désiré, réduites en fonction alcool par les méthodes connues de l'homme du métier et notamment par de l'hydrure de lithium et d'aluminium dans un solvant tel que par exemple le tétrahydrofuranne ou encore le dioxane ou l'éther éthylique.

Les éventuelles fonctions carboxy libre des produits décrits ci-dessus peuvent être, si désiré, réduites en fonction alcool notamment par de l'hydrure de bore.

d) Les éventuelles fonctions alcoxy telles que notamment méthoxy des produits décrits ci-dessus peuvent être, si désiré, transformées en fonction hydroxyle dans les conditions usuelles connues de l'homme du métier par exemple par du tribromure de bore dans un solvant tel que par exemple le chlorure de méthylène, par du bromhydrate ou chlorhydrate de pyridine ou encore par de l'acide bromhydrique ou chlorhydrique dans de l'eau ou de l'acide trifluoro acétique au reflux.

e) L'élimination de groupements protecteurs tels que par exemple ceux indiqués ci-dessus peut être effectuée dans les conditions usuelles connues de l'homme de métier notamment par une hydrolyse acide effectuée avec un acide tel que l'acide chlorhydrique, benzène sulfonique ou para-toluène sulfonique, formique ou trifluoroacétique ou encore par une hydrogénation catalytique.

Le groupement phtalimido peut être éliminé par l'hydrazine. f) Les produits décrits ci-dessus peuvent, si désiré, faire l'objet de réactions de salification par exemple par un acide minéral ou organique ou par une base minérale ou organique selon les méthodes usuelles connues de l'homme du métier : une telle réaction de salification peut être réalisée par exemple en présence d'acide chlorhydrique par exemple ou encore d'acide tartrique, citrique ou méthane sulfonique, dans un alcool tel que par exemple l'éthanol ou le méthanol .

g) Les éventuelles formes optiquement actives des produits décrits ci-dessus peuvent être préparées par dédoublement des racémiques selon les méthodes usuelles connues de l'homme du métier.

Les produits de formule (I) tels que définis ci-dessus ainsi que leurs sels d'addition avec les acides présentent d'intéressantes propriétés pharmacologiques notamment en raison de leurs propriétés inhibitrices de kinases ainsi qu'il est indiqué ci-dessus. Les produits de la présente invention sont notamment utiles pour la thérapie de tumeurs.

Les produits de l'invention peuvent également ainsi augmenter les effets thérapeutiques d'agents anti-tumoraux couramment utilisés.

Ces propriétés justifient leur application en thérapeutique et l'invention a particulièrement pour objet à titre de médicaments, les produits de formule (I) telle que définie ci-dessus, lesdits produits de formule (I) étant sous toutes les formes isomères possibles racémiques, énantiomères et diastéréoisomères, ainsi que les sels d'addition avec les acides minéraux et organiques ou avec les bases minérales et organiques pharmaceutiquement acceptables desdits produits de formule (I).

L'invention a tout particulièrement pour objet, à titre de médicaments, les produits de formule (I) tels que définis ci-dessus répondant aux formules suivantes : - 1 -(6-{[6-(cyclohexyloxy)[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-3-yl]sulfanyl}-5-fluoro- 1 ,3-benzothiazol-2-yl)-3-[2-(morpholin-4-yl)éthyl]urée

(5-fluoro-6-{[6-(4-fluorophényl)[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyπdazin-3-yl]sulfanyl}- 1 ,3-benzothiazol-2-yl)carbamate de 2-méthylpropan-2-yle - 5-fluoro-6-{[6-(4-fluorophényl)[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-3-yl]sulfanyl}- 1 ,3-benzothiazol-2-amine

- 1 -(5-fluoro-6-{[6-(4-fluorophényl)[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-3-yl]sulfanyl}- 1 ,3-benzothiazol-2-yl)-3-[2-(morpholin-4-yl)éthyl]urée

1 -(6-{[6-(cyclopropylamino)[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyπdazin-3-yl]sulfanyl}-5- fluoro-1 ,3-benzothiazol-2-yl)-3-[2-(morpholin-4-yl)éthyl]urée

1 -(6-{[6-(cyclohexylamino)[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyπdazin-3-yl]sulfanyl}-5- fluoro-1 ,3-benzothiazol-2-yl)-3-[2-(morpholin-4-yl)éthyl]urée

- 2-(4-cyclopropylpipérazin-1 -yl)-N-{6-[(6-éthoxy[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin- 3-yl)sulfanyl]-5-fluoro-1 ,3-benzothiazol-2-yl}acétamide - N-(6-{[6-(cyclobutyloxy)[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-3-yl]sulfanyl}-5-fluoro- 1 ,3-benzothiazol-2-yl)-2-(4-cyclopropylpipérazin-1 -yl)acétannide

N-{6-[(6-éthoxy[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-3-yl)sulfanyl]-5-fluoro-1 ,3- benzothiazol-2-yl}-2-(4-éthylpipérazin-1-yl)acétannide

- N-(6-{[6-(cyclobutyloxy)[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-3-yl]sulfanyl}-5-fluoro- 1 ,3-benzothiazol-2-yl)-2-(4-éthylpipérazin-1 -yl)acétamide

2-(4-cyclopropylpipérazin-1 -yl)-N-(5-fluoro-6-{[6-(oxétan-3- yloxy)[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyπdazin-3-yl]sulfanyl}-1 ,3-benzothiazol-2- yl)acétamide

2-(4-cyclopropylpipérazin-1 -yl)-N-(5-fluoro-6-{[6-(tétrahydrofuran-3- yloxy)[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyπdazin-3-yl]sulfanyl}-1 ,3-benzothiazol-2- yl)acétamide ainsi que les sels d'addition avec les acides minéraux et organiques ou avec les bases minérales et organiques pharmaceutiquement acceptables desdits produits de formule (I).

L'invention concerne aussi des compositions pharmaceutiques contenant à titre de principe actif l'un au moins des produits de formule (I) tels que définis ci-dessus ou un sel pharmaceutiquement acceptable de ce produit ou un prodrug de ce produit et, le cas échéant, un support pharmaceutiquement acceptable.

L'invention s'étend ainsi aux compositions pharmaceutiques contenant à titre de principe actif l'un au moins des médicaments tels que définis ci-dessus.

De telles compositions pharmaceutiques de la présente invention peuvent également, le cas échéant, renfermer des principes actifs d'autres médicaments antimitotiques tels que notamment ceux à base de taxol, cis- platine, les agents intercalants de l'ADN et autres. Ces compositions pharmaceutiques peuvent être administrées par voie buccale, par voie parentérale ou par voie locale en application topique sur la peau et les muqueuses ou par injection par voie intraveineuse ou intramusculaire.

Ces compositions peuvent être solides ou liquides et se présenter sous toutes les formes pharmaceutiques couramment utilisées en médecine humaine comme, par exemple, les comprimés simples ou dragéifiés, les pilules, les tablettes, les gélules, les gouttes, les granulés, les préparations injectables, les pommades, les crèmes ou les gels ; elles sont préparées selon les méthodes usuelles. Le principe actif peut y être incorporé à des excipients habituellement employés dans ces compositions pharmaceutiques, tels que le talc, la gomme arabique, le lactose, l'amidon, le stéarate de magnésium, le beurre de cacao, les véhicules aqueux ou non, les corps gras d'origine animale ou végétale, les dérivés paraffiniques, les glycols, les divers agents mouillants, dispersants ou émulsifiants, les conservateurs. La posologie usuelle, variable selon le produit utilisé, le sujet traité et l'affection en cause, peut être, par exemple, de 0,05 à 5 g par jour chez l'adulte, ou de préférence de 0,1 à 2 g par jour.

La présente invention a également pour objet l'utilisation des produits de formule (I) tels que définis ci-dessus ou de sels pharmaceutiquement acceptables de ces produits pour la préparation d'un médicament destiné à l'inhibition de l'activité d'une protéine kinase.

La présente invention a également pour objet l'utilisation de produits de formule (I) tels que définis ci-dessus pour la préparation d'un médicament destiné au traitement ou à la prévention d'une maladie caractérisée par le dérèglement de l'activité d'une protéine kinase.

Un tel médicament peut notamment être destiné au traitement ou à la prévention d'une maladie chez un mammifère.

La présente invention a également pour objet l'utilisation définie ci-dessus dans laquelle la protéine kinase est une protéine tyrosine kinase.

La présente invention a également pour objet l'utilisation définie ci-dessus dans laquelle la protéine tyrosine kinase est MET ou ses formes mutantes.

La présente invention a également pour objet l'utilisation définie ci-dessus dans laquelle la protéine kinase est dans une culture cellulaire. La présente invention a également pour objet l'utilisation définie ci-dessus dans laquelle la protéine kinase est dans un mammifère.

La présente invention a notamment pour objet l'utilisation d'un produit de formule (I) tel que défini ci-dessus pour la préparation d'un médicament destiné à la prévention ou au traitement de maladies liées à une prolifération non contrôlée.

La présente invention a particulièrement pour objet l'utilisation d'un produit de formule (I) tel que défini ci-dessus pour la préparation d'un médicament destiné au traitement ou à la prévention d'une maladie choisie dans le groupe suivant : troubles de la prolifération de vaisseaux sanguins, troubles fibrotiques, troubles de la prolifération de cellules 'mesangial', désordres métaboliques, allergies, asthmes, thromboses, maladies du système nerveux, rétinopathie, psoriasis, arthrite rhumatoïde, diabète, dégénérescence musculaire et cancers. La présente invention a ainsi tout particulièrement pour objet l'utilisation d'un produit de formule (I) tel que défini ci-dessus pour la préparation d'un médicament destiné au traitement ou à la prévention de maladies en oncologie et notamment destiné au traitement de cancers.

Parmi ces cancers, on s'intéresse au traitement de tumeurs solides ou liquides, au traitement de cancers résistant à des agents cytotoxiques

Les produits de la présente invention cités peuvent notamment être utilisés pour le traitement de tumeurs primaires et/ou de métastases en particulier dans les cancers gastriques, hépatiques, rénaux, ovariens, du colon, de la prostate, du poumon (NSCLC et SCLC), les glioblastomes, les cancers de la thyroïde, de la vessie, du sein, dans les mélanomes, dans les tumeurs hématopoiétiques lymphoïdes ou myéloïdes, dans les sarcomes, dans les cancers du cerveau, du larynx, du système lymphatique, cancers des os et du pancréas.

La présente invention a aussi pour objet l'utilisation des produits de formule (I) telle que définie ci-dessus pour la préparation de médicaments destinés à la chimiothérapie de cancers.

De tels médicaments destinés à la chimiothérapie de cancers peuvent être utilisés seuls ou en en association.

Les produits de la présente demande peuvent notamment être administrés seuls ou en association avec de la chimiothérapie ou de la radiothérapie ou encore en association par exemple avec d'autres agents thérapeutiques.

De tels agents thérapeutiques peuvent être des agents anti-tumoraux couramment utilisés. Comme inhibiteurs de kinases, on peut citer la butyrolactone, le flavopiridol et la 2(2-hydroxyéthylamino)-6-benzylamino-9-méthylpuhne appelée olomucine.

La présente invention a encore pour objet à titre de produits industriels nouveaux, les intermédiaires de synthèse de formules M1 , M2, M3 et N tels que définis ci-dessus et rappelés ci-après :

dans lesquels les groupes CONR1 R2, COR6 et COR7, qui constituent W, peuvent prendre les valeurs de W tels que définies ci-dessus pour les produits de formule (I ¹ ) et (I"), quand W≠H.

Les exemples suivants qui sont des produits de formule (I) illustrent l'invention sans toutefois la limiter.

Partie expérimentale

La nomenclature des composés de cette présente invention a été effectuée avec le logiciel ACDLABS version 11.0.

Four micro-onde utilisé :

Biotage, lnitiator EXP-EU, 300W max, 2450MHz

Les spectres de RMN 1 H à 400 MHz et 1 H à 300 MHz ont été effectués sur spectromètre BRUKER AVANCE DRX-400 ou BRUKER AVANCE DPX-300 avec les déplacements chimiques (δ en ppm) dans le solvant diméthylsulfoxide-d6(DMSO-d6) référencé à 2,5ppm à la température de

303K.

Les spectres de Masse ont été réalisés soit par analyse:

- LC-MS-DAD-ELSD ( MS=Waters ZQ ) - LC-MS-DAD-ELSD ( MS=Platform II Waters Micromass)

- UPLC-MS-DAD-ELSD (MS=Quattro Premier XE Waters) DAD longueur d'onde considérée λ=210-400 nm

ELSD : Sedere SEDEX 85 ; nebulisation temperature=35°C ;nebulisation pressure=3,7 bars

Exemple 1 :

1-(6-{[6-(cyclohexyloxy)[1,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-3 -yl]sulfanyl}-5- fluoro-1,3-benzothiazol-2-yl)-3-[2-(morpholin-4-yl)éthyl]ur ée a) Le 1 -(6-{[6-(cyclohexyloxy)[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-3-yl]sulfanyl}- 5-fluoro-1 ,3-benzothiazol-2-yl)-3-[2-(morpholin-4-yl)éthyl]urée peut être préparé de la manière suivante : à travers un mélange de 230mg de N,N"-[disulfanediylbis(5-fluoro-1 ,3- benzothiazole-6,2-diyl)]bis{3-[2-(morpholin-4-yl)éthyl]uré e} dans 15cm ³ d'éthanol, on fait barboter un courant d'argon pendant 5 minutes. On ajoute ensuite 3mg de dihydrogénophosphate de potassium dans 0,1 cm ³ d'eau, 310mg de DL-dithiothréitol et 170mg de 3-chloro-6- (cyclohexyloxy)[1 ,2,4]thazolo[4,3-b]pyridazine (1 e). Le mélange réactionnel est chauffé à 80 ⁰ C pendant 44h, puis concentré à sec sous pression réduite. On reprend le résidu dans de l'eau contenant du bicarbonate de sodium et on extrait avec de l'acétate d'éthyle. La phase organique est concentrée sous pression réduite. Le solide blanc obtenu est purifié sur silice par dépôt solide en éluant avec un gradient dichlorométhane/(dichlorométhane 38 / méthanol 17 / ammoniaque 2) de 95/5 à 75/25. On obtient ainsi 253mg de 1 -(6-{[6- (cyclohexyloxy)[1 ,2,4]thazolo[4,3-b]pyridazin-3-yl]sulfanyl}-5-fluoro-1 ,3- benzothiazol-2-yl)-3-[2-(morpholin-4-yl)éthyl]urée sous forme d'une poudre blanche dont les caractéristiques sont les suivantes : SPECTRE RMN 1 H NMR (400 MHZ, DMSO-cfe) δ ppm 1.12 - 1.31 (m, 3 H) 1.32 - 1.44 (m, 2 H) 1.44 - 1.55 (m, 1 H) 1.56 - 1.67 (m, 2 H) 1.73 - 1.88 (m, 2 H) 2.35 - 2.45 (m, 6 H) 3.21 - 3.27 (m, 2 H) 3.59 (t, J=4.4 Hz, 4 H) 4.57 - 4.77 (m, 1 H) 6.75 (t, J=4.9 Hz, 1 H) 7.01 (d, J=9.8 Hz, 1 H) 7.53 (d, J=10.3 Hz, 1 H) 8.00 (d, J=7.3 Hz, 1 H) 8.27 (d, J=9.8 Hz, 1 H) 10.99 (br. s., 1 H)

SPECTRE DE MASSE : Waters UPLC-SQD : MH+ m/z=573+ ; MH- =571 - b) Le N,N"-[disulfanediylbis(5-fluoro-1 ,3-benzothiazole-6,2-diyl)]bis{3-[2- (morpholin-4-yl)éthyl]urée} peut être préparé de manière suivante : à 322mg de (5-fluoro-6-thiocyanato-1 ,3-benzothiazol-2-yl)carbamate de phényle dans 10cm ³ de tétrahydrofurane à 20 ⁰ C, on ajoute 0,24 cm ³ de 2- (morpholin-i-yl)éthanamine et 0,39cm ³ de triethylamine. Le milieu réactionnel est chauffé à 60 ⁰ C pendant 5h. La solution brune limpide obtenue est évaporée à sec sous pression réduite. Le résidu est chromatographié sur Biotage Isolera Four 12/25 (KP-SIL, 60A ; 32-63 μM) en éluant avec un gradient dichlorométhane/(dichlorométhane 38 / méthanol 17 / ammoniaque 2) de 99/1 à 75/25. On obtient ainsi 231 mg de N,N"-[disulfanediylbis(5-fluoro- 1 ,3-benzothiazole-6,2-diyl)]bis{3-[2-(morpholin-4-yl)éthyl]u rée}, sous forme d'une poudre blanchâtre dont les caractéristiques sont les suivantes : SPECTRE DE MASSE : Waters UPLC-SQD : MH+ m/z=711 + ; MH- =709- c) le (5-fluoro-6-thiocyanato-1 ,3-benzothiazol-2-yl)carbamate de phényle peut être préparé de manière suivante : à 451 mg de thiocyanate de 2-amino-5-fluoro-1 ,3-benzothiazol-6-yle dans 5cm ³ de pyridine, on ajoute à 20°C, 0,75cm ³ de chlorocarbonate de phényle. Après 5,5h, la suspension jaune est concentrée à sec sous pression réduite. Le résidu est chromatographié sur Biotage Quad 12/25 (KP-SIL, 60A ; 32-63 μM) en éluant avec un gradient de 100% dichlorométhane à dichlorométhane/méthanol 90/10. On obtient ainsi 570mg de (5-fluoro-6- thiocyanato-1 ,3-benzothiazol-2-yl)carbamate de phényle sous forme d'une poudre beige dont les caractéristiques sont les suivantes : SPECTRE DE MASSE : Waters ZQ : MH+ m/z=346+ d) le thiocyanate de 2-amino-5-fluoro-1 ,3-benzothiazol-6-yle peut être préparé de la manière décrite par K. Papke, et R. Pohloudek-Fabini dans Pharmazie ; GE; 22, 5 1967, p229-233 e) Le 3-chloro-6-(cyclohexyloxy)[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazine peut être préparé de la manière suivante : à une solution de 3,18g de cyclohexanol dans 30cm ³ de tétrahydrofurane, à 0 ⁰ C sous argon, sont ajoutés 762mg d'hydrure de sodium à 60% dans l'huile. Après 15min d'agitation, on ajoute 3g de 3,6-dichloro[1 ,2,4]triazolo[4,3- b]pyridazine (commercial). On agite la suspension marron pendant 22h en laissant revenir progressivement à 20 ⁰ C. Le mélange réactionnel est versé sur de l'eau glacée et le mélange est extrait à l'acétate d'éthyle. Après concentration, de la phase organique, à sec sous vide, on obtient une huile brune. Le résidu huileux est chromatographié sur Biotage Quad 12/25 (KP- SIL, 60A ; 32-63 μM) en éluant avec un gradient de cyclohexane /acétate d'éthyle de 95/5 à 65/35. On obtient ainsi 2,7g de 3-chloro-6- (cyclohexyloxy)[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyhdazine sous forme de poudre jaunâtre dont les caractéristiques sont les suivantes :

SPECTRE DE MASSE: LC/MS Electrospray sur WATERS UPLC - SQD: MH+ = 253+

Exemple 2:

(5-fluoro-6-{[6-(4-fluorophényl)[1,2,4]triazolo[4,3-b]py ridazin-3- yl]sulfanyl}-1 ,3-benzothiazol-2-yl)carbamate de 2-méthylpropan-2-yle a) Le (5-fluoro-6-{[6-(4-fluorophényl)[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-3- yl]sulfanyl}-1 ,3-benzothiazol-2-yl)carbamate de 2-méthylpropan-2-yle peut être préparé d'une manière similaire à l'exemple 1a mais à partir de 131 mg de (5-fluoro-6-thiocyanato-1 ,3-benzothiazol-2-yl)carbamate de 2- méthylpropan-2-yle, de 10cm ³ d'éthanol dégazé, de 4mg de dihydrogénophosphate de potassium dans 0,2cm ³ d'eau, de 186mg de DL- dithiothréitol et de 100mg de 3-chloro-6-(4-fluorophényle)-1 ,2,4-triazolo[4,3- b]pyridazine, après 42h à 80 ⁰ C. On obtient ainsi 33mg de (5-fluoro-6-{[6-(4- fluorophényl)[1 ,2,4]thazolo[4,3-b]pyridazin-3-yl]sulfanyl}-1 ,3-benzothiazol-2- yl)carbamate de 2-méthylpropan-2-yle, sous forme d'une poudre blanche dont les caractéristiques sont les suivantes :

SPECTRE RMN 1 H NMR (400 MHz, DMSO-cfe) δ ppm 1.50 (s, 9 H) 7.40 (t, J=8.8 Hz, 2 H) 7.65 (d, J=10.3 Hz, 1 H) 8.02 (d, J=9.8 Hz, 1 H) 8.10 (dd, J=8.8, 5.4 Hz, 2 H) 8.26 (d, J=IA Hz, 1 H) 8.50 (d, J=9.8 Hz, 1 H) 11.97 (br. s., 1 H) SPECTRE DE MASSE : Waters UPLC-SQD : MH+ m/z=513+ ; MH- =511 - b) Le (5-fluoro-6-thiocyanato-1 ,3-benzothiazol-2-yl)carbamate de 2- méthylpropan-2-yle peut être préparé d'une manière de la manière suivante : à 300mg de thiocyanate de 2-amino-5-fluoro-1 ,3-benzothiazol-6-yle dans 5cm ³ de dichlorométhane et 0,45cm ³ de triethylamine à 20 ⁰ C, sont ajoutés 41 mg de diméthylamino pyridine et 348mg de Di-tert-butyl dicarbonate. Après 3h à 20 ⁰ C, on coule le mélange réactionnel sur de l'eau, on décante le dichlorométhane et on extrait la phase aqueuse avec de l'acétate d'éthyle. On concentre les phases organiques réunies sous pression réduite. Le résidu solide jaune est lavé à l'éther et séché sous vide. On obtient ainsi 343mg de (5-fluoro-6-thiocyanato-1 ,3-benzothiazol-2-yl)carbamate de 2-méthylpropan- 2-yle, sous forme d'une poudre jaune dont les caractéristiques sont les suivantes : SPECTRE DE MASSE: LC/MS Electrospray sur WATERS UPLC - SQD: MH+ = 324+ c) Le 3-chloro-6-(4-fluorophényle)-1 ,2,4-thazolo[4,3-b]pyridazine peut être préparé de la manière suivante : un mélange de 4,16g d'acide 4-fluorophényle boronique, 9,37g d'hydroxyde de barium octahydrate, 2,20g de [1 ,1 '-bis (diphénylphosphino)ferrocène]di- chloropalladium (II) en complexe avec du dichlorométhane (1 :1 ) et 5,1g de

3,6-dichloro[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyhdazine commerciale dans 40cm ³ de N, N- diméthylformamide contenant 10cm ³ d'eau est chauffé dans un bain à 80°C, pendant 1 ,5h. La suspension marron-beige obtenue est refroidie à 20 ⁰ C puis versée sur environ 200cm ³ d'eau. L'insoluble est essoré et lavé successivement à l'eau et, à l'éther puis séché sous vide à 20°C. Le solide beige résultant est empâté dans du dichlorométhane, essoré et séché sous vide à 20 ⁰ C. On obtient ainsi 1 ,24g de 3-chloro-6-(4-fluorophényle)-1 ,2,4- triazolo[4,3-b]pyridazine. Aux liqueurs mères combinées sont ajoutés 30g de silice et le mélange est évaporé à sec sous vide. Ce résidu est déposé sur un lit de 10g de silice dans un filtre à verre frite et on élue au dichlorométhane. On récupère ainsi 1 ,60g additionnel de 3-chloro-6-(4-fluorophényle)-1 ,2,4- triazolo[4,3-b]pyhdazine, dont les caractéristiques sont les suivantes : SPECTRE DE MASSE : LC-MS-DAD-ELSD : MH+ m/z=249+

Exemple 3:

5-fluoro-6-{[6-(4-fluorophényl)[1,2,4]triazolo[4,3-b]pyr idazin-3- yl]sulfanyl}-1,3-benzothiazol-2-amine

Le 5-fluoro-6-{[6-(4-fluorophényl)[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-3-yl]sulfanyl}- 1 ,3-benzothiazol-2-amine peut être préparé de la manière suivante : à un mélange de 157mg de (5-fluoro-6-{[6-(4-fluorophényl)[1 ,2,4]triazolo[4,3- b]pyridazin-3-yl]sulfanyl}-1 ,3-benzothiazol-2-yl)carbamate de 2-méthylpropan- 2-yle dans 5 cm ³ de dichlorométhane à 20 ⁰ C, on rajoute progressivement 0,9cm ³ d'acide trifluoro-acétique (à 10% d'anisole) sur 24h, jusqu'à disparition du produit de départ. On concentre le mélange réactionnel sous pression réduite. Le résidu est purifié par chromatographie sur Biotage Quad 12/25 (KP-SIL, 6OA; 32-63μm) en éluant avec un gradient de 100:0 à 50:50 de dichlorométhane / (dichlorométhane :38 / méthanol :17 / ammoniaque :2). On obtient ainsi 67mg de 5-fluoro-6-{[6-(4-fluorophényl)[1 ,2,4]triazolo[4,3- b]pyridazin-3-yl]sulfanyl}-1 ,3-benzothiazol-2-amine sous forme d'une poudre beige dont les caractéristiques sont les suivantes :

SPECTRE RMN 1 H NMR (400 MHz, DMSO-cfe) δ ppm 7.26 (d, J=10.3 Hz, 1 H) 7.41 (t, J=8.8 Hz, 2 H) 7.84 (s, 2 H) 7.94 - 8.06 (m, 2 H) 8.11 (dd, J=8.8, 5.4 Hz, 2 H) 8.48 (d, J=9.8 Hz, 1 H) SPECTRE DE MASSE : Waters UPLC-SQD : MH+ m/z=413+ ; MH- =411 -

Exemple 4: 1-(5-fluoro-6-{[6-(4-fluorophényl)[1,2,4]triazolo[4,3-b]pyr idazin-3- yl]sulfanyl}-1,3-benzothiazol-2-yl)-3-[2-(morpholin-4-yl)ét hyl]urée a) Le 1 -(5-fluoro-6-{[6-(4-fluorophényl)[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-3- yl]sulfanyl}-1 ,3-benzothiazol-2-yl)-3-[2-(morpholin-4-yl)éthyl]urée peut être préparé de la manière suivante : à travers une solution de 217mg de N,N"-[disulfanediylbis(5-fluoro-1 ,3- benzothiazole-6,2-diyl)]bis{3-[2-(morpholin-4-yl)éthyl]uré e} (1b) dans 10cm ³ d'éthanol, on fait barboter un courant d'argon pendant 5 minutes. On ajoute ensuite 3mg de dihydrogénophosphate de potassium dans 0,1 cm ³ d'eau, 282mg de DL-dithiothréitol et 152mg de 3-chloro-6-(4-fluorophényle)-1 ,2,4- triazolo[4,3-b]pyhdazine . Le milieu réactionnel est chauffé à 80 ⁰ C pendant 40hpuis concentré à sec sous pression réduite. Le résidu est purifié sur silice par dépôt solide en éluant avec un gradient de 100% dichlorométhane à 75/25 dichlorométhane/(dichlorométhane 38 / méthanol 17 / ammoniaque 2). On obtient ainsi 104mg de 1 -(5-fluoro-6-{[6-(4-fluorophényl)[1 ,2,4]triazolo[4,3- b]pyridazin-3-yl]sulfanyl}-1 ,3-benzothiazol-2-yl)-3-[2-(morpholin-4- yl)éthyl]urée sous forme d'une poudre beige dont les caractéristiques sont les suivantes : SPECTRE RMN 1 H NMR (400 MHz, DMSO-cfe) δ ppm 2.28 - 2.47 (m, 6 H) 3.30 (m masqué, 2 H) 3.50 - 3.67 (m, 4 H) 6.76 (br. s., 1 H) 7.40 (t, J=8.8 Hz, 2 H) 7.57 (d, J=10.0 Hz, 1 H) 8.02 (d, J=9.8 Hz, 1 H) 8.10 (dd, J=8.9, 5.3 Hz, 2 H) 8.21 (d, J=7.3 Hz, 1 H) 8.50 (d, J=9.5 Hz, 1 H) 11.01 (s, 1 H) SPECTRE DE MASSE : Waters UPLC-SQD : MH+ m/z=569+ ; MH- =567-

Exemple 5:

1-(6-{[6-(cyclopropylamino)[1,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazi n-3-yl]sulfanyl}- 5-fluoro-1,3-benzothiazol-2-yl)-3-[2-(morpholin-4-yl)éthyl] urée a) Le 1 -(6-{[6-(cyclopropylamino)[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-3- yl]sulfanyl}-5-fluoro-1 ,3-benzothiazol-2-yl)-3-[2-(morpholin-4-yl)éthyl]urée peut être préparé d'une manière similaire à l'exemple 1 a mais à partir de 203mg de N,N"-[disulfanediylbis(5-fluoro-1 ,3-benzothiazole-6,2-diyl)]bis{3-[2- (morpholin-4-yl)éthyl]urée} (1b) dans 5cm ³ d'éthanol dégazé, de 5mg de dihydrogénophosphate de potassium dans 0,5cm ³ d'eau, de 265mg de DL- dithiothréitol et de 120mg de 3-chloro-N-cyclopropyl[1 ,2,4]triazolo[4,3- b]pyridazin-6-amine, après 18h à 80 ⁰ C. Le milieu réactionnel est refroidi à 20 ⁰ C et le précipité est essoré puis lavé avec de l'éthanol. On obtient ainsi 198mg de 1 -(6-{[6-(cyclopropylamino)[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-3- yl]sulfanyl}-5-fluoro-1 ,3-benzothiazol-2-yl)-3-[2-(morpholin-4-yl)éthyl]urée sous forme d'une poudre blanche-crème dont les caractéristiques sont les suivantes : SPECTRE RMN 1 H NMR (400 MHz, DMSO-cfe) δ ppm 0.32 - 0.45 (m, 2 H) 0.59 - 0.73 (m, 2 H) 2.51 - 2.56 (m masqué, 1 H) 3.11 (br. s., 2 H) 3.19 - 3.29 (m masqué, 2 H) 3.43 - 3.62 (m, 4 H) 3.64 - 3.81 (m, 2 H) 3.98 (m, J=10.5 Hz, 2 H) 6.77 (d, J=9.8 Hz, 1 H) 7.22 (br. s., 1 H) 7.55 (d, J=10.3 Hz, 1 H) 7.70 (d, J=2.7 Hz, 1 H) 7.93 (d, J=9.8 Hz, 1 H) 8.14 (d, J=7.3 Hz, 1 H) 10.12 (br. s., 1 H) 11.39 (br. s., 1 H)

SPECTRE DE MASSE : Waters ZQ : MH+ m/z=530+ ; MH- =528- b) Le 3-chloro-N-cyclopropyl[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-6-amine peut être préparé d'une manière similaire à l'exemple 1e mais à partir de 1 cm ³ de cyclopropylamine et de 2g de 3,6-dichloro[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazine (commercial) dans 20cm ³ de N,N-diméthylformamide contenant 2,5cm ³ de triéthylamine, à 20°C pendant 18h. On obtient ainsi 1 ,83g de 3-chloro-N- cyclopropyl[1 ,2,4]thazolo[4,3-b]pyridazin-6-amine sous forme d'une poudre blanche dont les caractéristiques sont les suivantes : SPECTRE DE MASSE : Waters ZQ : Temps de rétention Tr (min) = 2,66 ; MH+ m/z=210+ ; MH- =208-

Exemple 6:

1-(6-{[6-(cyclohexylamino)[1,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin -3-yl]sulfanyl}-5- fluoro-1,3-benzothiazol-2-yl)-3-[2-(morpholin-4-yl)éthyl]ur ée a) Le 1 -(6-{[6-(cyclohexylamino)[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-3- yl]sulfanyl}-5-fluoro-1 ,3-benzothiazol-2-yl)-3-[2-(morpholin-4-yl)éthyl]urée peut être préparé d'une manière similaire à l'exemple 1 a mais à partir de 226mg de N,N"-[disulfanediylbis(5-fluoro-1 ,3-benzothiazole-6,2-diyl)]bis{3-[2-

(morpholin-4-yl)éthyl]urée} (1b) dans 5cm ³ d'éthanol dégazé, de 5mg de dihydrogénophosphate de potassium dans 0,5cm ³ d'eau, de 265mg de DL- dithiothréitol et de 160mg de 3-chloro-N-cyclohexyl[1 ,2,4]triazolo[4,3- b]pyÏ€dazin-6-amine, après 18h à 80°C. Le milieu réactionnel est refroidi à 20 ⁰ C et le précipité est essoré puis lavé avec de l'éthanol. On obtient ainsi 189mg de 1 -(6-{[6-(cyclohexylamino)[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-3- yl]sulfanyl}-5-fluoro-1 ,3-benzothiazol-2-yl)-3-[2-(morpholin-4-yl)éthyl]urée sous forme d'une poudre blanche-crème dont les caractéristiques sont les suivantes : SPECTRE RMN 1 H NMR (400 MHz, DMSO-cfe) δ ppm 1.00 - 1.32 (m, 5 H)

1.47 - 1.69 (m, 3 H) 1.79 (d, J= 11.5 Hz, 2 H) 2.36 - 2.46 (m, 6 H) 3.22 - 3.28 (m, 2 H) 3.32 - 3.42 (m, 1 H) 3.59 (t, J=4.4 Hz, 4 H) 6.75 (br. s., 1 H) 6.78 (d, J=10.0 Hz, 1 H) 7.25 (d, J=7.1 Hz, 1 H) 7.50 (d, J=10.3 Hz, 1 H) 7.90 (d, J=9.8 Hz, 1 H) 7.95 (d, J=7.3 Hz, 1 H) 10.97 (br. s., 1 H) SPECTRE DE MASSE : Waters UPLC-SQD : MH+ m/z=572+ ; MH- =570- b) Le 3-chloro-N-cyclohexyl[1 ,2,4]thazolo[4,3-b]pyridazin-6-amine peut être préparé d'une manière similaire à l'exemple 1e mais à partir de 3,4cm ³ de cyclohexylamine et de 5g de 3,6-dichloro[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazine (commercial) dans 50cm ³ de N,N-diméthylformamide contenant 11 ,2cm ³ de triéthylamine, à 20°C pendant 18h puis 4h à 50 ⁰ C. On obtient ainsi 4,45g de 3-chloro-N-cyclohexyl[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-6-amine sous forme d'une poudre blanche dont les caractéristiques sont les suivantes : SPECTRE DE MASSE : Waters UPLC-SQD : Temps de rétention Tr (min) = 0,86 ; MH+ m/z=252+ ; MH- =250-

Exemple 7:

2-(4-cyclopropylpipérazin-1-yl)-N-{6-[(6-éthoxy[1,2,4]t riazolo[4,3- b]pyridazin-3-yl)sulfanyl]-5-fluoro-1,3-benzothiazol-2-yl}ac étamide a) Le 2-(4-cyclopropylpipérazin-1 -yl)-N-{6-[(6-éthoxy[1 ,2,4]triazolo[4,3- b]pyridazin-3-yl)sulfanyl]-5-fluoro-1 ,3-benzothiazol-2-yl}acétamide peut être préparé d'une manière similaire à l'exemple 2a mais à partir de 189mg de thiocyanate de 2-{[(4-cyclopropylpipérazin-1 -yl)acétyl]amino}-5-fluoro-1 ,3- benzothiazol-6-yle (7b), de 5cm ³ d'éthanol dégazé, de 5mg de dihydrogénophosphate de potassium dans 0,1 cm ³ d'eau, de 222mg de DL- dithiothréitol et de 96mg de 3-chloro-6-éthoxy[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyhdazine (7c), après 21 , 5h à 90 ⁰ C. On obtient ainsi 114mg de 2-(4- cyclopropylpipérazin-1 -yl)-N-{6-[(6-éthoxy[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-3- yl)sulfanyl]-5-fluoro-1 ,3-benzothiazol-2-yl}acétamide, sous forme d'une poudre blanche dont les caractéristiques sont les suivantes : Spectre RMN 1 H (400 MHz, δ en ppm, DMSO-d ₆ ) : 0,27 (m, 2 H) ; 0,39 (m, 2 H) ; 1 ,27 (t, J=7,1 Hz, 3 H) ; 1 ,61 (m, 1 H) ; 2,42 à 2,58 (m partiellement masqué, 8 H) ; 3,32 (s, 2 H) ; 4,24 (q, J=7,1 Hz, 2 H) ; 7,06 (d, J=9,8 Hz, 1 H) ; 7,68 (d, J=10,0 Hz, 1 H) ; 8,22 (d, J=7,1 Hz, 1 H) ; 8,28 (d, J=9,8 Hz, 1 H) SPECTRE DE MASSE : Waters UPLC-SQD : [M+H]+ : m/z 529 ; [M-H]- : m/z 527 b) Le thiocyanate de 2-{[(4-cyclopropylpipérazin-1 -yl)acétyl]amino}-5- fluoro-1 ,3-benzothiazol-6-yle peut être préparé de la manière suivante : un mélange de 1 ,34g du sel de potassium de l'acide (4-cyclopropylpipérazin- 1 -yl)acétique (7d) dans 10cm ³ d'un solution 2N de chlorure d'hydrogène dans l'éther est agité pendant 1 h à 20 ⁰ C. La suspension résultante est évaporée à sec sous vide. Au résidu blanc obtenu sont ajoutés, à 20°C, 15cm ³ de pyridine, 226mg de thiocyanate de 2-amino-5-fluoro-1 ,3-benzothiazol-6-yle (1d) et 1 ,92g de chlorhydrate de N-(3-dimethylaminopropyl)N'- éthylcarbodiimide. Après 2,5h, le milieu réactionnel marron est évaporé à sec. Le résidu huileux est repris dans de l'eau. Le précipité formé est filtré, puis le filtrat aqueux est extrait avec un mélange 90 :10 d'acétate d'éthyle et de méthanol. Le précipité filtré est repris dans l'acétate d'éthyle puis combiné avec la phase organique. La solution résultante est séchée sur sulfate de magnésium, filtrée puis évaporé à sec sous vide. Le résidu marron est purifié sur SPOT II par chromatographie sur cartouche de silice (SVF D26 Si60 ; 15- 40 μM ; 25g) en éluant avec un gradient de 97,4 : 2,6 à 90 :10 de dichlorométhane / méthanol. On obtient ainsi 191 mg de thiocyanate de 2-{[(4- cyclopropylpipérazin-1 -yl)acétyl]amino}-5-fluoro-1 ,3-benzothiazol-6-yle sous forme d'une poudre jaune dont les caractéristiques sont les suivantes : SPECTRE DE MASSE : Waters ZQ : Temps de rétention Tr (min) = 2,75 ; [IvRH] ₊ : m/z 392 ; [M-H]- : m/z 390 c) Le 3-chloro-6-éthoxy[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazine peut être préparé d'une manière similaire à l'exemple 1e mais à partir de 19,7g d'une solution d'éthylate de sodium à 21 % dans l'éthanol et de 10g de 3,6- dichloro[1 ,2,4]thazolo[4,3-b]pyhdazine (commercial) dans 100cm ³ de dioxane, après reflux pendant 7h. On obtient ainsi 9,6g de 3-chloro-6- éthoxy[1 ,2,4]thazolo[4,3-b]pyhdazine sous forme d'une poudre beige dont les caractéristiques sont les suivantes : SPECTRE DE MASSE : Waters ZQ : Temps de rétention Tr (min) = 2,89 ; [M+H] ₊ : m/z 199 d) Le sel de potassium de l'acide (4-cyclopropylpipérazin-1 -yl)acétique peut être préparé d'une manière similaire aux conditions décrites par D. T. Witiak et.al.; J. Med. Chem. 1985,28, 1228, mais avec 1g d'acide bromoacétique et 3g de chlorhydrate de 4-cyclopropylpipérazine. On obtient ainsi 2,66g du sel de potassium de l'acide (4-cyclopropylpipérazin-1 - yl)acétique sous forme d'une poudre beige dont les caractéristiques sont les suivantes : SPECTRE DE MASSE : Waters UPLC-SQD : Temps de rétention Tr (min) = 0,10 ; [M+H] ₊ : m/z 185

Exemple 8:

N-(6-{[6-(cyclobutyloxy)[1,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-3 -yl]sulfanyl}-5- fluoro-1,3-benzothiazol-2-yl)-2-(4-cyclopropylpipérazin-1-y l)acétamide a) Le N-(6-{[6-(cyclobutyloxy)[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-3-yl]sulfanyl}- 5-fluoro-1 ,3-benzothiazol-2-yl)-2-(4-cyclopropylpipérazin-1 -yl)acétamide peut être préparé d'une manière similaire à l'exemple 2a mais à partir de 266mg de thiocyanate de 2-{[(4-cyclopropylpipérazin-1 -yl)acétyl]amino}-5-fluoro-1 ,3- benzothiazol-6-yle (7b) de 5cm ³ d'éthanol dégazé, de 5mg de dihydrogénophosphate de potassium dans 0,1 cm ³ d'eau, de 315mg de DL- dithiothréitol et de 153mg de 3-chloro-6-(cyclobutyloxy)[1 ,2,4]triazolo[4,3- b]pyridazine (8b), après 24h à 90 ⁰ C. On obtient ainsi 180mg de N-(6-{[6- (cyclobutyloxy)[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-3-yl]sulfanyl}-5-fluoro-1 ,3- benzothiazol-2-yl)-2-(4-cyclopropylpipérazin-1-yl)acétamid e sous forme d'une poudre blanche dont les caractéristiques sont les suivantes : Spectre RMN 1 H (400 MHz, δ en ppm, DMSO-d ₆ ) : 0,22 à 0,30 (m, 2 H) ; 0,36 à 0,44 (m, 2 H) ; 1 ,52 à 1 ,65 (m, 2 H) ; 1 ,69 à 1 ,81 (m, 1 H) ; 1 ,95 à 2,11 (m, 2 H) ; 2,19 à 2,30 (m, 2 H) ; 2,43 à 2,58 (m partiellement masqué, 8 H) ; 3,32 (s, 2 H) ; 4,86 (m, 1 H) ; 7,05 (d, J=9,8 Hz, 1 H) ; 7,70 (d, J=10,3 Hz, 1 H) ; 8,15 (d, J=7,3 Hz, 1 H) ; 8,29 (d, J=10,0 Hz, 1 H) ; 10,15 à 14,69 (m très étalé, 1

H) SPECTRE DE MASSE : Waters ZQ : [M+H] ₊ : m/z 555 ; [M-H]- : m/z 553 b) Le 3-chloro-6-(cyclobutyloxy)[1 ,2,4]thazolo[4,3-b]pyhdazine peut être préparé d'une manière similaire à l'exemple 1e mais à partir de 10,4cm ³ de cyclobutanol, de 3,17g d'hydrure de sodium à 60% dans l'huile et de 10g de 3,6-dichloro[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyhdazine (commercial) dans 100cm ³ de tétrahydrofuranne. On obtient ainsi 9g de 3-chloro-6- (cyclobutyloxy)[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazine sous forme d'une poudre beige dont les caractéristiques sont les suivantes :

Spectre RMN 1 H (400 MHz, δ en ppm, DMSO-d ₆ ) : 1 ,63 à 1 ,96 (m, 2 H) ; 2,07 à 2,24 (m, 2 H) ; 2,41 à 2,52 (m partiellement masqué, 2 H) ; 4,95 à 5,34 (m, 1 H) ; 7,10 (d, J=9,8 Hz, 1 H) ; 8,28 (d, J=9,8 Hz, 1 H)

Exemple 9:

N-{6-[(6-éthoxy[1,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-3-yl)sulf anyl]-5-fluoro-1,3- benzothiazol-2-yl}-2-(4-éthylpipérazin-1-yl)acétamide a) Le N-{6-[(6-éthoxy[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-3-yl)sulfanyl]-5-fluoro- 1 ,3-benzothiazol-2-yl}-2-(4-éthylpipérazin-1 -yl)acétamide peut être préparé d'une manière similaire à l'exemple 2a mais à partir de 353mg de thiocyanate de 2-{[(4-éthylpipérazin-1 -yl)acétyl]amino}-5-fluoro-1 ,3-benzothiazol-6-yle (9b), de 10cm ³ d'éthanol dégazé, de 5mg de dihydrogénophosphate de potassium dans 0,1 cm ³ d'eau, de 430mg de DL-dithiothréitol et de 185mg de 3-chloro-6-éthoxy[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazine (7c), après 21 h à 90 ⁰ C. On obtient ainsi 259mg de N-{6-[(6-éthoxy[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-3- yl)sulfanyl]-5-fluoro-1 ,3-benzothiazol-2-yl}-2-(4-éthylpipérazin-1 -yl)acétamide, sous forme d'une poudre blanchâtre dont les caractéristiques sont les suivantes : Spectre RMN 1 H (400 MHz, δ en ppm, DMSO-d ₆ ) : 0,98 (t, J=7,1 Hz, 3 H) ;

1.27 (t, J=7,1 Hz, 3 H) ; 2,31 (q, J=7,1 Hz, 2 H) ; 2,35 à 2,44 (m, 4 H) ; 2,48 à 2,58 (m partiellement masqué, 4 H) ; 3,33 (s, 2 H) ; 4,24 (q, J=7,1 Hz, 2 H) ; 7,06 (d, J=9,8 Hz, 1 H) ; 7,69 (d, J=10,3 Hz, 1 H) ; 8,23 (d, J=7,3 Hz, 1 H) ;

8.28 (d, J=9,8 Hz, 1 H) ; 12,16 (m étalé, 1 H) SPECTRE DE MASSE : Waters UPLC-SQD : [M+H]+ : m/z 517 ; [M+2H]2+ : m/z 259 (pic de base) ; [M-H]- : m/z 515 b) Le thiocyanate de 2-{[(4-éthylpipérazin-1-yl)acétyl]amino}-5-fluoro-1 ,3- benzothiazol-6-yle peut être préparé d'une manière similaire à l'exemple 7b mais à partir de 4,6g d'acide (4-éthylpipérazin-1 -yl)acétique (commercial ou bien le sel de potassium de l'acide (4-éthylpipérazin-1 -yl)acétique peut aussi être préparé de manière similaire aux conditions décrites par D. T. Witiak et al. à l'exemple 7d), de 1g de thiocyanate de 2-amino-5-fluoro-1 ,3- benzothiazol-6-yle (1d) et de 8,51g de chlorhydrate de N-(3- dimethylaminopropyl)N'-éthylcarbodiimide dans 50cm ³ de pyridine. On obtient ainsi 714mg de thiocyanate de 2-{[(4-éthylpipérazin-1 -yl)acétyl]amino}-5- fluoro-1 ,3-benzothiazol-6-yle, sous forme d'une poudre jaune dont les caractéristiques sont les suivantes :

SPECTRE DE MASSE : Waters UPLC-SQD : Temps de rétention Tr (min) = 0,59 ;[M+H]+ : m/z 380 ; [M-H]- : m/z 378

Exemple 10: N-(6-{[6-(cyclobutyloxy)[1,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-3-yl ]sulfanyl}-5- fluoro-1,3-benzothiazol-2-yl)-2-(4-éthylpipérazin-1-yl)acà ©tamide a) Le N-(6-{[6-(cyclobutyloxy)[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-3-yl]sulfanyl}- 5-fluoro-1 ,3-benzothiazol-2-yl)-2-(4-éthylpipérazin-1 -yl)acétannide peut être préparé d'une manière similaire à l'exemple 2a mais à partir de 355mg de (5- fluoro-6-thiocyanato thiocyanate de 2-{[(4-éthylpipérazin-1 -yl)acétyl]amino}-5- fluoro-1 ,3-benzothiazol-6-yle (9b), de 10cm ³ d'éthanol dégazé, de 5mg de dihydrogénophosphate de potassium dans 0,1 cm ³ d'eau, de 430mg de DL- dithiothréitol et de 210mg de 3-chloro-6-(cyclobutyloxy)[1 ,2,4]triazolo[4,3- b]pyridazine (8b), après 21 h à 90 ⁰ C. On obtient ainsi 232mg de N-(6-{[6- (cyclobutyloxy)[1 ,2,4]thazolo[4,3-b]pyridazin-3-yl]sulfanyl}-5-fluoro-1 ,3- benzothiazol-2-yl)-2-(4-éthylpipérazin-1-yl)acétamide, sous forme d'une poudre blanche dont les caractéristiques sont les suivantes : Spectre RMN 1 H (400 MHz, δ en ppm, DMSO-d ₆ ) : 0,98 (t, J=7,1 Hz, 3 H) ; 1 ,51 à 1 ,66 (m, 1 H) ; 1 ,74 (m, 1 H) ; 1 ,95 à 2,10 (m, 2 H) ; 2,19 à 2,27 (m, 2 H) ; 2,31 (q, J=7,1 Hz, 2 H) ; 2,39 (m, 4 H) ; 2,54 (m, 4 H) ; 3,33 (s, 2 H) ; 4,86 (m, 1 H) ; 7,05 (d, J=9,8 Hz, 1 H) ; 7,70 (d, J=10,3 Hz, 1 H) ; 8,15 (d, J=7,2 Hz, 1 H) ; 8,29 (d, J=9,8 Hz, 1 H) ; 12,20 (m étalé, 1 H) SPECTRE DE MASSE : Waters UPLC-SQD : [M+H]+ : m/z 543 ; [M+2H]2+ : m/z 272 (pic de base); [M-H]- : m/z 541

Exemple 11 :

2-(4-cyclopropylpipérazin-1-yl)-N-(5-fluoro-6-{[6-(oxét an-3- yloxy)[1,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-3-yl]sulfanyl}-1,3-ben zothiazol-2- yl)acétamide a) Le 2-(4-cyclopropylpipérazin-1 -yl)-N-(5-fluoro-6-{[6-(oxétan-3- yloxy)[1 ,2,4]thazolo[4,3-b]pyridazin-3-yl]sulfanyl}-1 ,3-benzothiazol-2- yl)acétamide peut être préparé d'une manière similaire à l'exemple 2a mais à partir de 346mg de thiocyanate de 2-{[(4-cyclopropylpipérazin-1- yl)acétyl]amino}-5-fluoro-1 ,3-benzothiazol-6-yle (7b), de 10cm ³ d'éthanol dégazé, de 5mg de dihydrogénophosphate de potassium dans 0,1 cm ³ d'eau, de 407mg de DL-dithiothréitol et de 200mg de 3-chloro-6-(oxétan-3- yloxy)[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazine (11b), après 22h à 90 ⁰ C. On obtient ainsi 238mg de 2-(4-cyclopropylpipérazin-1 -yl)-N-(5-fluoro-6-{[6-(oxétan-3- yloxy)[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-3-yl]sulfanyl}-1 ,3-benzothiazol-2- yl)acétamide, sous forme d'une poudre blanche dont les caractéristiques sont les suivantes :

Spectre RMN 1 H (400 MHz, δ en ppm, DMSO-d ₆ ) : 0,22 à 0,29 (m, 2 H) ; 0,36 à 0,42 (m, 2 H) ; 1 ,60 (m, 1 H) ; 2,43 à 2,60 (m partiellement masqué, 8 H) ; 3,32 (s, 2 H) ; 4,48 (m, 2 H) ; 4,71 (m, 2 H) ; 5,36 à 5,46 (m, 1 H) ; 7,20 (d, J=9,8 Hz, 1 H) ; 7,71 (d, J=10,3 Hz, 1 H) ; 8,06 (d, J=7,3 Hz, 1 H) 8,38 (d, J=9,8 Hz, 1 H) ; 12,15 (m étalé, 1 H)

SPECTRE DE MASSE : Waters UPLC-SQD : [M+H]+ : m/z 557 ; [M+2H]2+ : m/z 279 (pic de base); [M-H]- : m/z 555 b) Le 3-chloro-6-(oxétan-3-yloxy)[1 ,2,4]thazolo[4,3-b]pyhdazine peut être préparé d'une manière similaire à l'exemple 1e mais à partir de 1 ,96g d'oxétan-3-ol , de 634mg d'hydrure de sodium à 60% dans l'huile et de 2g de 3,6-dichloro[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazine (commercial) dans 20cm ³ de tétrahydrofurane. On obtient ainsi 2,04g de 3-chloro-6-(oxétan-3- yloxy)[1 ,2,4]thazolo[4,3-b]pyridazine sous forme d'une poudre blanchâtre dont les caractéristiques sont les suivantes :

SPECTRE DE MASSE : Waters UPLC-SQD : Temps de rétention Tr (min) = 0,41 ; [M+H]+ : m/z 227

Exemple 12: Rac-2-(4-cyclopropylpipérazin-1-yl)-N-(5-fluoro-6-{[6-(tét rahydrofuran-3- yloxy)[1,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-3-yl]sulfanyl}-1,3-ben zothiazol-2- yl)acétamide a) Le rac-2-(4-cyclopropylpipérazin-1 -yl)-N-(5-fluoro-6-{[6-

(tétrahydrofuran-3-yloxy)[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-3-yl]sulfanyl}-1 ,3- benzothiazol-2-yl)acétamide peut être préparé d'une manière similaire à l'exemple 2a mais à partir de 325mg de thiocyanate de 2-{[(4- cyclopropylpipérazin-1 -yl)acétyl]amino}-5-fluoro-1 ,3-benzothiazol-6-yle (7b), de 10cm ³ d'éthanol dégazé, de 5mg de dihydrogénophosphate de potassium dans 0,1 cm ³ d'eau, de 385mg de DL-dithiothréitol et de 200mg de rac-3- chloro-6-(tétrahydrofuran-3-yloxy)[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazine (12b), après 18h à 90 ⁰ C. On obtient ainsi 206mg de rac-2-(4-cyclopropylpipérazin-1 -yl)-N- (5-fluoro-6-{[6-(tétrahydrofuran-3-yloxy)[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-3- yl]sulfanyl}-1 ,3-benzothiazol-2-yl)acétamide, sous forme d'une poudre blanche dont les caractéristiques sont les suivantes : Spectre RMN 1 H (400 MHz, δ en ppm, DMSO-d ₆ ) : 0,19 à 0,30 (m, 2 H) ; 0,36 à 0,43 (m, 2 H) ; 1 ,60 (m, 1 H) ; 1 ,91 à 2,02 (m, 1 H) ; 2,07 à 2,22 (m, 1 H) ; 2,42 à 2,60 (m partiellement masqué, 8 H) ; 3,32 (s, 2 H) ; 3,60 à 3,84 (m, 4 H) ; 5,27 (m, 1 H) ; 7,08 (d, J=9,8 Hz, 1 H) ; 7,70 (d, J=10,0 Hz, 1 H) ; 8,14 (d, J=7,3 Hz, 1 H) ; 8,31 (d, J=9,8 Hz, 1 H) ; 12,17 (m étalé, 1 H) SPECTRE DE MASSE : Waters UPLC-SQD : [M+H]+ : m/z 571 ; [M-H]- : m/z 569 b) Le rac-3-chloro-6-(tétrahydrofuran-3-yloxy)[1 ,2,4]triazolo[4,3- b]pyridazine peut être préparé d'une manière similaire à l'exemple 1e mais à partir de 2,33g de rac-tétrahydrofuran-3-ol, de 634mg d'hydrure de sodium à 60% dans l'huile et de 2g de 3,6-dichloro[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazine (commercial) dans 20cm ³ de tétrahydrofurane. On obtient ainsi 2,09g de rac- 3-chloro-6-(tétrahydrofuran-3-yloxy)[1 ,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazine sous forme d'une poudre beige dont les caractéristiques sont les suivantes : SPECTRE DE MASSE : Waters UPLC-SQD : Temps de rétention Tr (min) = 0,49 ; [M+H]+ : m/z 241

Exemple 13 : Composition pharmaceutique

On a préparé des comprimés répondant à la formule suivante :

Produit de l'exemple 1Ï„ 0,2 g

Excipient pour un comprimé terminé à 1 g (détail de l'excipient : lactose, talc, amidon, stéarate de magnésium). Exemple 14 : Composition pharmaceutique

On a préparé des comprimés répondant à la formule suivante :

Produit de l'exemple 6 0,2 g Excipient pour un comprimé terminé à 1 g

(détail de l'excipient : lactose, talc, amidon, stéarate de magnésium).

Les exemples 1 et β sont pris à titre d'exemples de préparation pharmaceutique, cette préparation pouvant être réalisée si désiré avec d'autres produits en exemples dans la présente demande.

Partie pharmacologique :

Protocoles expérimentaux

I) Expression et Purification de MET, domaine cytoplasmique

Expression en Baculovirus: L'ADN recombinant His-Tev-MET (956-1390) en pFastBac(lnvitrogen) est transfecté dans des cellules d'insectes et après plusieurs étapes d'amplification virale, le stock de baculovirus final est testé pour l'expression de la protéine d'intérêt.

Après infection pendant 72h à 27°C avec le virus recombinant, les cultures de cellules SF21 sont récoltées par centrifugation et les culots cellulaires sont stockés à -80 ⁰ C.

Purification :

Les culots cellulaires sont remis en suspension dans le tampon de lyse (tampon A [50 mM HEPES, pH 7.5, 250 mM NaCI, Glycérol 10%, TECP 1 mM ]; + cocktail d'inhibiteurs de protéases Roche Diagnostics sans EDTA, réf 1873580), agités à 4°C jusqu'à homogénéité, puis lysés mécaniquement en utilisant un appareil de type « Dounce ».

Après centrifugation, le surnageant de lyse est incubé 2h à 4°C avec de la résine Nickel Chelate (His-Trap 6 Fast Flow ™, GE HealthCare). Après lavage avec 20 volumes de Tp A, la suspension est packée dans une colonne, et les protéines sont éluées par un gradient de tampon B (TpA + 290 mM imidazole).

Les fractions contenant la protéine d'intérêt au vu de l'analyse électrophorétique (SDS PAGE) sont rassemblées, concentrés par Ultrafiltration (cut-off 1OkDa) et injectées sur une colonne de chromatographie d'exclusion (Superdex â„¢ 200 , GE HealthCare) équilibrée en tampon A . Après clivage enzymatique du tag Histidine, la protéine est réinjectée sur une nouvelle colonne de chromatographie IMAC Nickel Chelate (His-Trap 6 Fast Flow â„¢, GE HealthCare) équilibrée en Tampon A. Les fractions éluées par un gradient de tampon B et contenant la protéine d'intérêt après électrophorèse (SDS PAGE), sont finalement rassemblées et conservées à -80 ⁰ C. Pour la production de protéine autophosphorylée, les fractions précédentes sont incubées 1 h à température ambiante après ajout d'ATP 2mM, MgCI2 2mM, et Na3VO4 4mM. Après arrêt de la réaction avec 5mM d'EDTA, le mélange réactionnel est injecté sur une colonne de dessalage HiPrep (GE HealthCare) préalablement équilibré en tampon A + Na3VO4 4mM, les fractions contenant la protéine d'intérêt (analyse SDS PAGE) sont rassemblées et stockées à -80 ⁰ C. Le taux de phosphorylation est vérifié par spectrométrie de masse (LC-MS), et par peptide mapping.

II) Tests A et B

A) Test A : Essai HTRF MET en format 96 puits

Dans un volume final de 50μl de réaction enzymatique, MET 5nM final est incubé en présence de la molécule à tester (pour une gamme concentration finale de 0,17 nM à 10 μM, DMSO 3% final) en tampon MOPS 1 OmM pH 7.4 , DTT 1 mM, Tween 20 0.01 %. La réaction est initiée par la solution substrats pour obtenir les concentrations finales de poly-(GAT) 1 μg/ml, ATP 10μM et MgCI2 5mM. Après une incubation de 10 min à température ambiante, la réaction est arrêtée par un mix de 30 μl pour obtenir une solution finale d' Hepes 5OmM pH 7.5, fluorure de potassium 50OmM, BSA 0,1 % et EDTA 133mM en présence de 80ng Streptavidine 61 SAXLB Cis-Bio Int. et 18ng anti-Phosphotyrosine Mab PT66-Europium Cryptate par puits. Après 2 heures d' incubation à température ambiante, la lecture est faite à 2 longueur d' ondes 620nm et 665 nm sur un lecteur pour la technique TRACE / HTRF et le % d' inhibition est calculé d' après les ratios 665/620.

Les résultats obtenus par ce test A pour les produits de formule (I) en exemples dans la partie expérimentale sont tels que IC50 inférieure à 50OnM et notamment à 10OnM.

B) Test B : Inhibition de l'autophosphorylation de MET ; technique ELISA (pppY1230,1234,1235) a) Lysats cellulaires : Ensemencer les cellules MKN45 en plaque 96 puits (CeII coat BD polylysine) à 20 000 cellules/puits sous 200μl en milieu RPMI +

10%SVF + 1 % L-glutamine. Laisser adhérer 24h à l'incubateur.

Les cellules sont traitées le lendemain de l'ensemencement avec les produits à 6 concentrations en duplicate pendant 1 h. Au moins 3 puits contrôles sont traités avec la même quantité de DMSO finale. Dilution des produits : Stock à 1 OmM dans le DMSO pur - Gamme de 1 OmM à 30μM avec un pas de 3 en DMSO pur - Dilutions intermédiaires au 1/50 dans du milieu de culture puis prélèvement de 10μl ajoutés directement aux cellules (200μl) : gamme finale de 10000 à 3OnM.

A la fin de l'incubation, éliminer délicatement le surnageant et faire un rinçage avec 200μl de PBS. Puis mettre 10Oμl de tampon de lyse directement dans les puits sur la glace et incuber à 4°C pendant 30minutes. Tampon de lyse : 1 OmM Tris,HCI pH7.4, 10OmM NaCI, 1 mM EDTA, 1 mM EGTA, 1 % Triton X- 100, 10% glycerol, 0.1 % SDS, 0.5% deoxycholate, 2OmM NaF, 2mM Na3VO4, 1 mM PMSF et cocktail anti protéases. Les 10Oμl de lysats sont transférés dans une plaque en polypropylène fond en V et l'ELISA est réalisé de suite ou la plaque est congelée à -80 ⁰ C.

b) ELISA PhosphoMET BioSource Kit KHO0281 Dans chaque puits de la plaque du kit, ajouter 70μl de tampon de dilution du kit + 30μl_ de lysat cellulaire ou 30μl de tampon de lyse pour les blancs. Incuber pendant 2h sous agitation douce à température ambiante.

Rincer 4 fois les puits avec 400μl de tampon de lavage du kit. Incuber avec 10Oμl d'Anticorps anti-phospho MET pendant 1 h à température ambiante.

Rincer 4 fois les puits avec 400μl de tampon de lavage du kit. Incuber avec 100 μl d'Anticorps anti-lapin HRP pendant 30 minutes à température ambiante (sauf pour les puits chromogen seul).

Rincer 4 fois les puits avec 400μl de tampon de lavage du kit. Mettre 100μl_ de chromogen et incuber 30minutes dans le noir à température ambiante.

Arrêter la réaction avec 10Oμl de solution stop. Lire sans tarder à 45OnM 0,1 seconde au Wallac Victor plate reader.

C) Test C : Mesure de la prolifération cellulaire par puise de 14C-thymidine Les cellules sont ensemencées dans des plaques Cytostar 96 puits sous 180μl pendant 4 heures à 37°C et 5% CO2 : Les cellules HCT116 à raison de 2500 cellules par puits dans du milieu DMEM + 10% sérum de veau fœtal + 1 % de L-Glutamine et les cellules MKN45 à raison de 7500 cellules par puits dans du milieu RPMI + 10% sérum de veau fœtal + 1 % de L-Glutamine. Après ces 4 heures d'incubation, les produits sont ajoutés sous 10μl en solution 20 fois concentrée selon la méthode de dilution citée pour l'ELISA. Les produits sont testés à 10 concentrations en duplicate de 1000OnM à 0,3nM avec un pas de 3.

Après 72h de traitement, ajouter 10μl de 14C-thymidine à 10μCi/ml pour obtenir 0,1 μCi par puits. L'incorporation de 14C-thymidine est mesurée sur un Micro-Beta (Perkin-Elmer) après 24 heures de puise et 96h de traitement.

Toutes les étapes de l'essai sont automatisées sur les stations BIOMEK 2000 ou TECAN. Les résultats obtenus par ce test B pour les produits de formule (I) en exemples dans la partie expérimentale sont tels que IC50 inférieure à 10microM et notamment à i microM.

Les résultats obtenus pour les produits en exemples dans la partie expérimentale sont donnés dans le tableau de résultats pharmacologiques ci- après, comme suit : pour le test A, le signe + correspond à inférieur à 50OnM et le signe ++ correspond à inférieur e 10OnM. pour le test B le signe + correspond à inférieur à 50OnM et le signe ++ correspond à inférieur e 10OnM. pour le test C le signe + correspond à inférieur à 10microM et le signe ++ correspond à inférieur e I microM.

Tableau de résultats pharmacologiques :