本发明属于制药技术领域， 具体涉及一种用于治疗乳腺炎、 乳腺增生 的药物的检测方法， 特别是涉及一种用于治疗乳腺炎、 乳腺增生的胶嚢剂， 例如乳癖舒胶嚢的检测方法。 背景技术

乳癖舒胶嚢由瓜蒌皮、 蒲公英、 丹参、 赤芍、 土贝母、 柴胡、 延胡索七 味中药材组成， 具有协同作用， 符合中药组方原则， 能够达到标本兼治的目 的。 该制剂结合中西医对乳腺炎、 乳腺增生发病机理的认识， 吸收了经典古 方之精华， 具有舒肝解郁， 化痰散结之功效， 用于治疗肝气郁结， 毒瘀互 阻所致的乳腺炎、 乳腺增生。 在全国各地医院临床应用过程中， 证明其具 有显著的临床疗效， 深得广大医务工作者和患者的信任。

在现有的乳癖舒胶嚢的检测方法中， 对丹参、 赤芍、 土贝母进行了薄层 色谱（TLC )鉴别， 而未制定成份延胡索的薄层色谱（TLC )鉴别方法。 为 进一步控制该产品的质量， 需要对该产品的质量控制方法进行完善， 从而更 进一步保证该产品的质量和疗效。 发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足， 提供一种用于治疗乳腺炎、 乳腺 增生的药物的检测方法， 该检测方法能够有效控制药物的质量， 从而更好地 满足医疗需要。

本发明的目的是采用如下技术方案来实现的。

一种用于治疗乳腺炎、 乳腺增生的药物的检测方法， 该检测方法包括 采用薄层色谱法检测所述药物中的延胡索， 其中， 所述薄层色谱的条件包 括： 采用硅胶 G薄层板和体积比为 6~12： 1-5 , 优选为 9： 2的 A、 B混合 溶液作为展开剂， 其中所述 A溶液选自苯、 曱苯、二氯曱苯、氯仿和乙醚， 优选为曱苯； 所述 B溶液选自乙酸乙酯、 曱酸乙酯、 丙酮、 乙醇和曱醇， 优选为丙酮。

上述检测方法中， 所述展开剂为体积比为 6~12： 1-5 , 优选为 9： 2 的曱苯-丙酮。 上述检测方法中， 采用薄层色谱法检测所述药物中的延胡索包括 如下 步骤：

( 1 )取所述药物加入曱醇， 超声， 滤过， 滤液过氧化铝柱， 残渣加 水溶解， 加浓氨溶液调至碱性， 用乙醚振摇提取， 蒸干， 残渣加曱醇溶解， 作为供试品溶液；

( 2 )取延胡索乙素对照品， 加曱醇制成对照品溶液；

(3) 吸取上述溶液各 2~5μ1, 分别点于同一薄层色谱板上， 体积比 为 6~12： 1-5, 优选为 9： 2的曱苯 -丙酮作为展开剂， 展开， 取出， 晾干， 检视。

优选地， 采用薄层色谱法鉴定所述药物中的延胡索包括 如下步骤：

( 1 )取药物内容物 3g, 加曱醇 50ml, 超声处理 30分钟， 滤过， 滤 液过内径为 1.5cm, 柱高为 5cm的氧化铝柱， 流出液蒸干， 残渣加水 10ml 使溶解， 加浓氨溶液调至碱性， 用乙醚振摇提取 3 次， 每次 10ml, 合并 乙醚液， 蒸干， 残渣加曱醇 lml使溶解， 作为供试品溶液；

(2)取延胡索乙素对照品， 加曱醇制成每 lml含 0.5mg的溶液， 作为 对照品溶液；

(3) 吸取上述溶液各 2~5μ1, 分别点于同一用 l%w/v氢氧化钠溶液 制备的硅胶 G薄层板上， 以体积比为 9: 2的曱苯 -丙酮为展开剂， 展开， 取出， 晾干， 置于碘缸中 3分钟后取出， 挥尽板上吸附的碘后， 置 365nm 的紫外光灯下检视。

上述检测方法中， 采用薄层色谱法检测所述药物中的延胡索包括 如下 步骤：

( 1 )取所述药物加入曱醇， 超声， 滤过， 滤液过氧化铝柱， 残渣加 水溶解， 加浓氨溶液调至碱性， 用乙醚振摇提取， 蒸干， 残渣加曱醇溶解， 作为供试品溶液；

(2)取延胡索对照药材， 以与供试品溶液相同的方法制成对照药材 溶液；

( 3 )取延胡索乙素对照品， 加曱醇制成对照品溶液；

(4) 吸取上述溶液各 2~5μ1, 分别点于同一薄层色谱板上， 体积比 为 6~12： 1-5, 优选为 9： 2的曱苯 -丙酮作为展开剂， 展开， 取出， 晾干， 检视。

优选地， 采用薄层色谱法检测所述药物中的延胡索包括 如下步骤： ( 1 )取药物内容物 3g, 加曱醇 50ml, 超声处理 30分钟， 滤过， 滤 液过内径为 1.5cm, 柱高为 5cm的氧化铝柱， 流出液蒸干， 残渣加水 10ml 使溶解， 加浓氨溶液调至碱性， 用乙醚振摇提取 3 次， 每次 10ml, 合并 乙醚液， 蒸干， 残渣加曱醇 lml使溶解， 作为供试品溶液；

( 2 )取延胡索对照药材 lg, 以与供试品溶液相同的方法制成对照药 材溶液；

( 3 )取延胡索乙素对照品， 加曱醇制成每 lml含 0.5mg的溶液， 作为 对照品溶液；

( 4 ) 吸取上述溶液各 2 ~ 5μ1, 分别点于同一用 l%w/v氢氧化钠溶液 制备的硅胶 G薄层板上， 以体积比为 9: 2的曱苯 -丙酮为展开剂， 展开， 取出， 晾干， 置于碘缸中 3分钟后取出， 挥尽板上吸附的碘后， 置 365nm 的紫外光灯下检视。

上述检测方法中， 所述药物可以是乳癖舒胶嚢， 该胶嚢由瓜蒌皮、 蒲 公英、 丹参、 赤芍、 土贝母、 柴胡、 延胡索组成， 其配比如下：

瓜蒌皮 400-500重量份、 蒲公英 400-500重量份、 丹参 200-250重量份、 赤芍 200-250重量份、 土贝母 100-180重量份、 柴胡 100-150重量份、 延胡 索 100-150重量份；

优选的配比如下： 瓜蒌皮 450 重量份、 蒲公英 450重量份、 丹参 225 重量份、赤芍 225重量份、土贝母 150重量份、柴胡 135重量份、延胡索 135 重量份。

乳癖舒胶嚢一个处方量 （即制 1000粒） 的配比如下： 瓜蒌皮 450 g、 蒲公英 450g、 丹参 225 g、 赤芍 225 g、 土贝母 150 g、 柴胡 135 g、 延胡索 135 g。

上述乳癖舒胶嚢的制备方法如下：

以上七味，取延胡索粉碎成细粉；丹参、赤芍 加 95 %乙醇回流提取二次， 每次 2小时， 合并乙醇提取液， 滤过， 滤液回收乙醇并浓缩成相对密度为 1.36 ( 60°C ) 的稠膏， 瓜蒌皮等其余五味加水煎煮三次， 第一次 2小时， 第二次 1.5小时， 第三次 1小时， 合并煎液， 滤过， 滤液减压浓缩成相对 密度为 1.36 ( 60°C )的稠膏， 合并上述稠膏， 加入延胡索细粉， 搅拌均匀， 真空干燥， 粉碎成细粉， 装入胶嚢， 即得。

在一个具体实施方案中， 本发明提供一种治疗乳腺炎、 乳腺增生药物， 例如上述乳癖舒胶嚢的检测方法， 该检测方法包括采用薄层色谱法鉴定所 述药物中的延胡索， 其中， 采用薄层色谱法鉴定所述药物中的延胡索包括 如下步骤：

取药物内容物 3g, 加曱醇 50ml, 超声处理 30分钟， 滤过， 滤液过氧化 铝柱（内径 1.5cm, 柱高 5cm ) , 流出液蒸干， 残渣加水 10ml使溶解， 加浓 氨溶液调至碱性， 用乙醚振摇提取 3 次， 每次 10ml, 合并乙醚液， 蒸干， 残渣加曱醇 lml使溶解， 作为供试品溶液。 另取延胡索对照药材 lg, 同法制成对照药材溶液。

再取延胡索乙素对照品， 加曱醇制成每 lml含 0.5mg的溶液， 作为对照 品溶液。

照薄层色谱法（ 《中国药典》 2010版一部附录 VI B )试验， 吸取上述 三种溶液各 2 ~ 5μ1, 分别点于同一用 l%w/v氢氧化钠溶液制备的硅胶 G薄 层板上， 以曱苯 -丙酮（9: 2 )为展开剂， 展开， 取出， 晾干， 置碘虹中约 3分钟后取出， 挥尽板上吸附的碘后， 置紫外光灯（ 365nm ) 下检视。

上述检测方法中， 供试品色谱中， 在与对照药材和对照品色谱相应的位 置上，显相同颜色的荧光斑点。上述鉴定方法 阴性无干扰，样品重性形良好， 可以作为鉴别乳癖舒胶嚢中延胡索的依据。

本发明确定了延胡索薄层鉴别的检测方法，且 经过方法学考察证明本方 法灵敏度高， 重复性好， 且阴性对照无干扰， 整个试验过程可操作性强， 可 以作为控制本品内在质量的指标之一。

与现有技术相比， 本发明了增加了延胡索的薄层色谱鉴定， 此方法阴性 无干扰， 样品重现性良好， 可以作为鉴别乳癖舒胶嚢中延胡索的依据。

本发明通过对治疗乳腺炎、 乳腺增生药物， 例如乳癖舒胶嚢中多种成分 进行检测， 能够有效控制乳癖舒胶嚢的质量， 使乳癖舒胶嚢质量达到稳定可 控， 从而更好地满足医疗的需要。 附图说明

以下， 结合附图来详细说明本发明的实施方案 ， 其中：

图 1是乳癖舒胶嚢中延胡索的薄层色谱鉴定图 , 其中， 1表示延胡索 阴性样品； 2-4表示三批供试品； 5表示延胡索对照 ,药材； 6表示延胡索乙 素对照品；

图 2是乳癖舒胶嚢中延胡索的薄层色谱鉴定图 , 其中， 1表示延胡索 阴性样品； 2-4表示三批供试品； 5表示延胡索对照 ,药材； 6表示延胡索乙 素对照品。 实施发明的最佳方式

下面通过实施例详细说明本发明， 应当理解， 下述实施例仅用于说明 本发明， 而不以任何方式限制本发明的范围。 实施例 1乳癖舒胶嚢的处方及制备方法

处方： 瓜蒌皮 450 g、 蒲公英 450g、 丹参 225 g、 赤芍 225 g、 土贝母 150 g、 柴胡 135 g、 延胡索 135 g。 上述乳癖舒胶嚢的制备方法如下：

以上七味，取延胡索粉碎成细粉；丹参、赤芍 加 95 %乙醇回流提取二次， 每次 2小时， 合并乙醇提取液， 滤过， 滤液回收乙醇并浓缩成相对密度为 1.36 ( 60°C ) 的稠膏， 瓜蒌皮等其余五味加水煎煮三次， 第一次 2小时， 第二次 1.5小时， 第三次 1小时， 合并煎液， 滤过， 滤液减压浓缩成相对 密度为 1.36 ( 60°C )的稠膏， 合并上述稠膏， 加入延胡索细粉， 搅拌均匀， 真空干燥， 粉碎成细粉， 装入胶嚢， 即得。 实施例 2乳癖舒胶嚢中延胡索的薄层色谱鉴定

1、 试验条件： 双槽展开缸（上海信谊） ； 硅胶 G (薄层色谱用， 青 岛海洋化工厂） ； 羧曱基纤维素钠 （国药集团化学试剂有限公司） ； 薄层 板自制， 厚度 0.3mm。 其余试剂均为分析纯。

2、 试验步骤： 取 20110513、 20110514、 20110615三种不同批次乳癖 舒胶嚢 （购自西安千禾药业有限责任公司， 其组成、 配比和制备方法如实 施例 1所示） 内容物 3g, 加曱醇 50ml, 超声处理 30分钟， 滤过， 滤液过 氧化铝柱（内径 1.5cm, 柱高 5cm ) , 流出液蒸干， 残渣加水 10ml使溶解， 加浓氨溶液调至碱性， 用乙醚振摇提取 3 次， 每次 10ml, 合并乙醚液， 蒸干， 残渣加曱醇 lml使溶解， 作为供试品溶液。

另取延胡索对照药材 lg, 同法制成对照药材溶液。

再取延胡索乙素对照品， 加曱醇制成每 lml含 0.5mg的溶液， 作为对照 品溶液。

再取按乳癖舒胶嚢处方比例和工艺制备的不含 延胡索的阴性样品， 同 供试品溶液的制法制成阴性对照溶液。

照薄层色谱法 （中国药典 2010年版一部附录 VI B ) 试验， 吸取上述 溶液各 2 ~ 5μ1, 分别点于同一用 l%w/v氢氧化钠溶液制备的硅胶 G薄层 板上， 以曱苯 -丙酮 （9: 2 ) 为展开剂， 展开， 取出， 晾干， 置碘缸中约 3分钟后取出， 挥尽板上吸附的碘后， 置紫外光灯 （ 365nm ) 下检视， 结 果如图 1所示。

结果显示， 三批供试品色谱中， 在与对照药材色谱相应的位置上， 显 相同颜色的荧光斑点。而阴性样品色谱中，在 与对照药材色谱相应位置上， 未显相同颜色的荧光斑点， 阴性无干扰。 说明方中其它药味不影响延胡索 的检出， 因此， 可以作为鉴别乳癖舒胶嚢中延胡索的依据。 实施例 3乳癖舒胶嚢中延胡索的薄层色谱鉴定

1、 试验条件： 双槽展开缸（上海信谊） ； 硅胶 G (薄层色谱用， 青 岛海洋化工厂） ； 羧曱基纤维素钠 （国药集团化学试剂有限公司） ； 薄层 板自制， 厚度 0.3mm。 其余试剂均为分析纯。

2、 试验步骤： 取乳癖舒胶嚢 （购自西安千禾药业有限责任公司） 内 容物 3g, 加曱醇 50ml, 超声处理 30分钟， 滤过， 滤液过氧化铝柱（内径 1.5cm, 柱高 5cm ) , 流出液蒸干， 残渣加水 10ml使溶解， 加浓氨溶液调 至碱性， 用乙醚振摇提取 3 次， 每次 10ml, 合并乙醚液， 蒸干， 残渣加 曱醇 lml使溶解， 作为供试品溶液。

另取延胡索对照药材 lg, 同法制成对照药材溶液。

另取延胡索乙素对照品，加曱醇制成每 lml含 0.5mg的溶液，作为对照 品溶液。

再取按乳癖舒胶嚢处方比例和工艺制备的不含 延胡索的阴性样品， 同 供试品溶液的制法制成阴性对照溶液。

照薄层色谱法 （中国药典 2010年版一部附录 VI B ) 试验， 吸取上述 溶液各 2μ1,分别点于同一用 l%w/v氢氧化钠溶液制备的硅胶 G薄层板上， 以曱苯 -丙酮 （6: 1 ) 为展开剂， 展开， 取出， 晾干， 置碘缸中约 3分钟 后取出， 挥尽板上吸附的碘后， 置紫外光灯 （ 365nm ) 下检视。

结果显示， 供试品色谱中， 在与对照药材色谱相应的位置上， 显相同 颜色的荧光斑点。 而阴性样品色谱中， 在与对照药材色谱相应位置上， 未 显相同颜色的荧光斑点， 阴性无干扰。 说明方中其它药味不影响延胡索的 检出， 因此， 可以作为鉴别乳癖舒胶嚢中延胡索的依据。 实施例 4乳癖舒胶嚢中延胡索的薄层色谱鉴定

1、 试验条件： 双槽展开缸（上海信谊） ； 硅胶 G (薄层色谱用， 青 岛海洋化工厂） ； 羧曱基纤维素钠 （国药集团化学试剂有限公司） ； 薄层 板自制， 厚度 0.3mm。 其余试剂均为分析纯。

2、 试验步骤： 取乳癖舒胶嚢 （购自西安千禾药业有限责任公司） 内 容物 3g, 加曱醇 50ml, 超声处理 30分钟， 滤过， 滤液过氧化铝柱（内径 1.5cm, 柱高 5cm ) , 流出液蒸干， 残渣加水 10ml使溶解， 加浓氨溶液调 至碱性， 用乙醚振摇提取 3 次， 每次 10ml, 合并乙醚液， 蒸干， 残渣加 曱醇 lml使溶解， 作为供试品溶液。

另取延胡索对照药材 lg, 同法制成对照药材溶液。

另取延胡索乙素对照品， 加曱醇制成每 lml含 0.5mg的溶液， 作为对照 品溶液。

再取按乳癖舒胶嚢处方比例和工艺制备的不含 延胡索的阴性样品， 同 供试品溶液的制法制成阴性对照溶液。 照薄层色谱法 （中国药典 2010年版一部附录 VI B ) 试验， 吸取上述 溶液各 5μ1,分别点于同一用 l%w/v氢氧化钠溶液制备的硅胶 G薄层板上， 以曱苯 -丙酮 （12: 5 ) 为展开剂， 展开， 取出， 晾干， 置碘缸中约 3分 钟后取出， 挥尽板上吸附的碘后， 置紫外光灯 （ 365nm ) 下检视。

结果显示， 在与对照品色谱相应的位置上， 显相同颜色的荧光斑点。 而阴性样品色谱中， 在与对照品色谱相应位置上， 未显相同颜色的荧光斑 点， 阴性无干扰。 说明方中其它药味不影响延胡索的检出， 因此， 可以作 为鉴别乳癖舒胶嚢中延胡索的依据。 实施例 5乳癖舒胶嚢中延胡索的薄层色谱鉴定 (对照试验）

1、 试验条件： 双槽展开缸（上海信谊） ； 硅胶 G (薄层色谱用， 青 岛海洋化工厂） ； 羧曱基纤维素钠 （国药集团化学试剂有限公司） ； 薄层 板自制， 厚度 0.3mm。 其余试剂均为分析纯。

2、 试验步骤： 取乳癖舒胶嚢 （购自西安千禾药业有限责任公司） 内 容物 3g, 加曱醇 50ml, 超声处理 30分钟， 滤过， 滤液过氧化铝柱（内径

1.5cm, 柱高 5cm ) , 流出液蒸干， 残渣加水 10ml使溶解， 加浓氨溶液调 至碱性， 用乙醚振摇提取 3 次， 每次 10ml, 合并乙醚液， 蒸干， 残渣加 曱醇 lml使溶解， 作为供试品溶液。

另取延胡索对照药材 lg, 同法制成对照药材溶液。

另取延胡索乙素对照品， 加曱醇制成每 lml含 0.5mg的溶液， 作为对照 品溶液。

再取按乳癖舒胶嚢处方比例和工艺制备的不含 延胡索的阴性样品， 同 供试品溶液的制法制成阴性对照溶液。

照薄层色谱法 （中国药典 2010年版一部附录 VI B ) 试验， 吸取上述 溶液各 5μ1,分别点于同一用 l%w/v氢氧化钠溶液制备的硅胶 G薄层板上， 以曱苯 -丙酮（15: 0.5 )为展开剂， 展开， 取出， 晾干， 置碘缸中约 3分 钟后取出， 挥尽板上吸附的碘后， 置紫外光灯 （ 365nm ) 下检视， 结果如 图 2所示。

结果显示， 供试品色谱中， 在与对照药材及对照品溶液色谱相应的位 置上， 未显相同颜色的荧光斑点， 且不具有实验特征， 与我们设计的思想 差异明显。 因此， 不能作为展开剂使用。