卤代双去氧糖衍生物及其制备方法与应用 技术领域

本发明涉及药物化学， 具体涉及卤代双去氧糖衍生物及其制备方法与 应用。 背景技术

近 30年来，糖类物质的诸多生物学功能不断地被� ��示， 目前科学家们已经发现 许多糖类具有提高机体兔疫力、 杀菌、 抗癌等功效。 其中一类糖被命名为 2-去氧葡 萄糖， 其结构特點是糖环上 2位的 -OH被 H原子， 烷基， 氨基等官能团取代， 具有 抗癌功效。 1982年， George Tidmarsch等人就 2-DG (2-去氧葡萄糖） 的抗肿瘤功效 申请了 "Treatment of cance with 2-deoxyglucose"的专利 (U.S. Patent N0.6979675 目前， 去氧糖的研究已经延伸至多位去氧及其衍生物 方面， 在 2009年的最新的一 篇专利中 (NO.PCT/US2009 45157)就提及了 2位卤代去氧葡萄糖与甘露糖以及 3 位和 4位去氧甘露糖。 但是， 科学家们在研究去氧糖作用机理的时候发现， 单纯的 2-去氧葡萄糖在抗肿瘤方面功效并非很显著， 因此， 科学家们不断对其改进， 寻找 更易吸收， 抗肿瘤功效更高的去氧糖衍生物。

本发明人在大量研究中发现， 通过对去氧糖乙酰化及卤代等的結构改造， 能够 使其更易、更快地进入肿瘤细胞;同时还发现� � 1位羟基被卤代后， 形成的卤代去氧 糖功效明显增强（常见肿瘤细胞试验显强效） , 而且易于制备成衍生物。 在此基础 上本发明人进一步探索， 发现乙酰化去氧糖与氮芥、 鬼白毒素等具有抗肿瘤功效的 官能团结合后， 其疗效极大的提高， 并且发现其具有广谱抗肿瘤的功效， 不仅对常 见的癌种， 如： 胃癌、 食道癌、 胃癌、 肝癌、 胆囊癌、 直肠癌、 大肠癌、 结肠癌、 肺癌、 鼻咽癌、 摄护腺癌、 神经系统癌、 乳腺癌、 卵巢癌、 宫颈癌子宫癌等癌症疾 病有较好疗效， 而且对恶性黑色素瘤、 胰腺癌、 甲状腺未分化癌、 转移性骨恶性肿. 瘤、 白血病等高度恶性癌症具有突出疗效。 在对其作用机理的研究中， 发现此类化 合物进入癌细胞后， 在多种酶的作用下， 先脱去乙酰， 然后糖苷键断裂， 分裂出氧 糖与氮芥、 鬼臼毒素等， 同时作用于肿瘤细胞， 起到双重抗肿瘤的效果。 发明内容 本发明所要解決的技术問題在于克服上述不足 之处，研究设计对去 ft糖的結构改 造后， 使其具有双重抗肿瘤功效， 治疗范围更广， 对恶性黑色素瘤、 胰腺癌、 甲状 腺未分化癌、 转移性骨恶性肿瘤、 白血病等高度恶性癌症具有突出疗效。

本发明提供了一种卤代双去氧糖衍生物， 具有下列通式 I化合物：

或

Ri， R ₂ 分别为 H或 Br;

R ₃ ， R ₄ 分别为 OH或 0Ac。

本发明提供了一种通式 c化合物， 结构式如下:

Ri, R ₂ 分别为 H或 Br;

通式 c化合物包括 1、 2、 3、 4化合物， 结构式如下:

1

3

化合物 2、 3、 4， 均为白色粉末

熔点：

本发明提供了一种通 d化合物， 结构式如下:

d

Ri, R ₂ 分别为 H或 Br;

通式 d化合物包括化合物 5、 6、 7、 8，结构式如下:

化合物 5、 6、 7、 8均为白色粉末，

熔点：

化合物 5 6 7 8 熔点 （°C ) 120 109 125 113 旋光: 本发明提供了一种通式 e化合物， 结构式如下:

Ri» R ₂ 分别为 H或 Br;

通式 e化合物包括化合物 9、 10、 11、 12， 结构式如下:

9 10

化合物 9、 10、 11、 12均为白色粉末,

熔点：

本发明提供了一种通式 f化合物, 结构式如下:

f

Ri, R ₂ 分别为 H或 Br。 通式 f化合物包括化合物 13、 14， 其结构式如下:

本发明的另一目的是提供了上述卤代双去氧糖 衍生物的制备方法， 該方法 包括下列步骤：

反应式如下: 具体步骤如下：

(1)卤代双去氧葡萄糖溴 c的制备

以 2-去氧葡萄糖或 3-去氧葡萄糖 (a)为原料， 与醋酐（原料与醋酐摩 尔比 =1〜1. 5： 15〜20)在 15°C〜35°C下, 搅拌反应 2h - 5h，反应结束后, 用硅胶柱层析洗脱, 柱体积 100ml， 上柱量 1%, 流速 l〜2ml/min， 洗脱剂 为氯仿、 二氯甲垸、 二氯乙烷、 石油醚、 四氢呋喃或甲苯溶剂中的一种或 多种混合溶剂， 然后用无水溶剂氯仿、 二氯甲垸、 乙酸乙酯、 甲苯、 乙醇 或甲醇溶剂结晶， 重结晶， 得化合物 b;

化合物 b与 HBr以摩尔比为 1〜1. 5： 3. 5〜5，在增加 0. 5〜lkPa的情况 下， 反应温度为 20'C〜5°C， 搅拌反应 10h〜18h， 用硅胶柱层析洗脱， 柱 体积 100ml , 上柱量 1%， 流速 1- 2ml/min， 洗脱剂为氯仿、 二氯甲垸、二氯 乙垸、 石油醚、 四氢呋喃或甲 溶剂中的一种或多种混合溶剂， 根据流出 液的旋光不同分离 α、 β两种构型， 然后通过无水溶剂氯仿、 二氯甲垸、 乙酸乙酯、 甲笨、 乙醇或甲醇溶剂结晶， 重结晶， 得化合物 C ;

(2) 卤代双去氧葡萄糖溴与氮芥、 鬼臼毒的合成反应

1 ) 卤代双去氧葡萄糖溴与 XI [Ν ' , N' -双-（2-氯乙基） ]-磷酸二酰胺的 合成反应

以化合物 c与化合物 XI [Ν' ， N' -双-（2-氯乙基） ] -磷酸二酰胺（化 合物 c与化合物 XI的摩尔比 =1 : 1. 2〜1. 5)为原料， 溶剂为四氢呋喃、 二 氯甲烷、 .氯仿或乙酸乙酯， 以 Ag ₂ C0 ₃ 或 CuS0 ₄ 作催化剂（催化剂与化合物 c 的摩尔比 =0. 05 ). 1 : 1 )， 反应温度为 15'C〜35°C， 搅拌反应 5h- 10h, 用 柱层析洗脱柱体积 100ml , 上柱量 1%， 流速 l-2ml/min， 洗脱剂为氯仿、二 氯甲垸、 二氯乙烷、 石油醚、 四氢呋喃或甲苯溶剂中的一种或多种混合溶 剂， 根据流出液的旋光不同分离 α、 β两种构型， 然后通过无水溶剂氯仿、 二氯甲烷、 乙酸乙酯、 甲苯、 乙醇或 甲醇溶剂结晶， 重结晶， 得化合物山

2) 卤代双去氧葡萄糖溴与 Χ2 Ν-双-氯乙基-磷酸酰胺的合 反应

以化合物 c与化合物 Χ2 Ν-双 -氯乙基-磷酸酰胺为原料（化合物 c与 化合物 Χ2的摩尔比 1: 1. 2〜1. 5)， 溶剂为四氢呋喃、二氯甲烷、氯仿或乙 酸乙酯，以 Ag2C03或 CuS04作催化剂（催化剂与化合物 c的摩尔比 =0. 05〜 0. 1: 1 )， 反应温度为 20'C〜40°C， 搅拌反应 5h- 10h, 用柱层析洗脱柱体 积 lOOml, 上柱量 1%， 流速 l-2ml/inin， 洗脱剂为氯仿、二氯甲烷、二氯乙 烷、 石油醚、 四氢呋喃或甲苯溶剂中的一种或多种混合溶剂 ， 根据流出液 的旋光不同分离0、 β两种构型， 然后通过无水溶剂氯仿、 二氯甲垸、 乙 酸乙酯、 甲苯、 乙醇或甲醇溶剂结晶， 重结晶， 得化合物 e; 化合物 9〜12 都属于 e通式化合物。

3) 卤代双去氧葡萄糖溴与 X3 4'-去甲基表鬼臼毒素的合成反应

以化合物 c与化合物 X3 4'-去甲基表鬼臼毒素为原料（化合物 C与化 合物 X3的摩尔比 =1 : 1. 8〜2. 2)， 溶剂为四氢呋喃、 二氯甲垸、 氯仿或乙 酸乙酯，以三氟化硼乙醚作催化剂 (催化剂与化合物 c的摩尔比 =0. 1〜0. 15： 1 )， 在 0〜30°C条件下， 搅拌反应 12h- 15h， 用柱层析洗脱柱体积 100ml， 上柱量 1%， 流速 l_2ml/min， 洗脱剂为氯仿、 二氯甲垸、 二氯乙垸、 石油 醚、 四氢呋喃、 甲苯等溶剂中的一种或混合溶剂， 然后通过无水溶剂氯仿、 二氯甲垸、 乙酸乙酯、 甲苯、 乙醇或甲醇溶剂结晶， 重结晶， 得化合物^ 本发明的又一目的是提供上述卤代双去氧糖衍 生物在制备抗癌药物中的应 本发明具体提供了化合物 1-14在制备抗？ 药物中的应用。

本发明进行了上述化合物的急性毒性及抗癌 药效实验如下：

1. 化合物 1-14 (实施例 1-8制备）的急性毒性实验（LD50)结果。化合物 1-14 毒性较低

2. 抗肿瘤生物活性体外筛选实验

化合物 1-14对人黑色素瘤细胞 M14的生长抑制作用：

化合物 1-14对人胰腺癌细胞 PC- 3的生长抑制作用：

化合物 1-14对甲状腺未分化瘤细胞 TA-K的生长抑制作用：

化合物 1-14对人鼻咽癌母系细胞 CNE- 2Z的生长抑制作用：

化合物 1-14对人肺癌细胞 A549的生长抑制作用：

化合物 1-14对于人结肠癌细胞 HT-29的生长抑制作用：

化合物 1-14对于人肝癌细胞 Bel- 7402的生长抑制作用:

化合物 1-14对于人胃癌细胞 BGC-803的生长抑制作用：

化合物 1-14对于人食道癌细胞 CaEs-17的生长抑制作用：

化合物 1-14对于人乳腺癌细胞 MCF-7的生长抑制作用：

化合物 1-14对于人卵巢癌细胞 A2780的生长抑制作用：化合^ 1 1-14对于人

• 膀胱癌细胞 EJ的生长抑制作用：

化合物 1-14对于人脑胶质细胞癌细胞的生长抑制作用� �化合物 1-14对于人 白血病细胞 K562的生长抑制作用：

化合物 1-14对于以上几种肿瘤细胞的生长抑制作用均� �强效。

另外， 本发明较好的效果在于化合物 3、 5、 7、 10、 12、 14对小鼠移植瘤的抑 制作用: 分别对 B16恶性黑色素瘤、 AsPc人胰腺癌、 05- 732人骨肉瘤、'人甲状 腺未分化瘤细胞 TA- K、 MX- 1人乳腺癌以及 MGC人胃癌进行抗癌实验。化合物 3、

5、 7、 10、 12、 14对小鼠移植瘤的作用效果明显， 尤其是恶性黑色素瘤、 胰腺 癌、 人骨肉瘤、 甲状腺未分化癌、 乳腺癌、 胃癌。

本发明以去氧糖为原料， 合成化合物 1-14, 由于所有化合物糖环都是乙酰 化的疏水性质的酯类物质, 易于结晶。 化学上和酶学上均相对稳定， 进入人体 后通过被动扩散作用， 无需消耗能量即被癌细胞吸收， 在癌细胞内通过酯酶， 酰基化酶及糖苷酶的作用下放出抗癌因子双去 氧糖、 氮芥与鬼臼毒， 达到双重 抗肿瘤的效果。 本发明人在制备化合物的过程中发现去氧糖通 过乙酰化和溴化 后， 化合物更易被吸收， 而且抗肿瘤效果明显优于去氧糖。 另外化合物去乙酰 基后也有明显抗肿瘤效果， 但是结晶比较困难， 所以优选结构为乙酰化的化合 物。

本发明化合物均可以与适宜的赋形剂相结合， 按照常规方法制备成口服给药的 内服剂型及非口服给药的注射剂和外用剂型。 如口服给药的片剂、胶囊剂、颗粒剂、 口服液、 注射液、 粉针剂、 贴剂或霜剂。

本发明化合物可用与 治疗恶性黑色素瘤、胰腺癌、 甲状腺未分化癌、转移性骨 恶性肿瘤、 白血病、 淋巴癌、 骨瘤、 软骨肉瘤、 前列腺癌、 食道癌、 胃癌、肝癌、 胆囊癌、 直肠癌、 大肠癌、 结肠癌、 肺癌、 鼻咽癌、 摄护腺癌、 神经系统癌、 乳腺 癌、 卵巢癌、 宫颈癌子宫癌等癌症疾病。 具体实施方式

实施例 1 化合物 1、 2的制备

取 2-去氧葡萄糖 10g， 醋酐 85ml。 在反应器中先加入 85ml醋酐， 控制温度在 20'C ; 分步加入 2-去氧葡萄糖， 温度不超过 30°C， 搅拌反应 3小时， 用氯仿萃取， 结晶得四乙酰 -2-去氧葡萄糖纯品： 13. 8g

取四乙酰 -2-去氧葡萄糖 10g， HBr气体 0.088mol。在密闭容器中，先加入 CH2CI2 与四乙酰 -2-去氧葡萄糖， 待四乙酰 -2-去氧葡萄糖全部溶解， 控温于 25°C， 通 HBr 气体，加压（0.7kPa ),搅拌反应 15小时，纯化结晶，得三乙酰 -2-去氧葡萄糖溴 8.3g。 用硅胶柱层析法分离 α、 β两种构型， 用二氯甲烷： 甲醇 =80: 20洗脱剂洗脱， 根 据流出液的旋光不同分离 α、 β两种构型， 得 ct型（化合物 1 ) 2. 4g， β型 （化合 物 2 ) 3. 2gc

化合物 1: 熔点 =83°C~85°C、 旋光 =+5° 。

化合物 2: 熔点 =78°C~80'C、 旋光 =-26°

元素分析： - 化合物 分子式 C H N 实测值 30. 45% 3. 52%

计算值 31. 91% 3. 72%

实测值 . 31. 18% 3. 62%

2 C ₁₀ H ₁₄ 0 ₅ Br ₂ - 计算值 31. 91% 3. 72%

实施例 2化合物 3、 4的制备

取 3-去氧葡萄糖 10g, 醋酐 85ml。 在反应器中先加入 85ral醋酐， 控制温度在 15'C ; 分步加入 3-去氧葡萄糖，温度不超过 25°C，搅拌反应 4小时， 用二氯甲垸萃 取， 用甲醇结晶得四乙酰 -2-去氧葡萄糖纯品： 11. 3g

取四乙酰 -3-去氧葡萄糖 10g, HBr气体 0.088mol。在密闭容器中，先加入 CH2CI2 与四乙酰 -3-去氧葡萄糖， 待四乙酰 -3-去氧葡萄糖全部溶解， 控温于 20Ό , 通 HBr 气体，加压（0.8kPa)，搅拌反应 15小时，纯化结晶，得三乙酰 -3-去氧葡萄糖溴 7.8g。 用硅胶柱层析法分离 α、 β两种构型， 用二氯甲垸： 甲醇 =80: 20洗脱剂洗脱， 根 据流出液的旋光不同分离 α、 β两种构型， 得 α型（化合物 3 ) 2. 7g， β型 (化合 物 4 ) 2. 3g„

化合物 3: 熔点 =88°C~89°C、 旋光 =-23°

化合物 4: 熔点 =81°C~83°C、 旋光 =-50°

元素分析:

化合物 分子式 C Η Ν

实测值 30. 67% 3. 89%

3 C ₁₀ H"0 ₅ Br ₂ - 计算值 31. 91% 3. 72%

实

取三乙酰- 2-去氧葡萄糖溴 10g，化合物 XI 14go在反应器中，先加入四氢呋喃、 二氯甲垸（V/V=l : 2) ，然后再加入化合物 XI， 待其完全溶解， 加入催化剂 CuS0 ₄ ， 用二氯甲垸溶解三乙酰- 2-去氧葡萄糖溴并滴加到反应器中， 温度控制在 30°C， 搅 拌反应 8小时。 反应结束后， 用蒸馏水洗涤 3~5遍 ， 甲醇结晶得纯品 4.7g。 用硅 胶柱层析法分离 α、 β两种构型， 用乙酸乙酯： 甲醇 =70: 30洗脱剂洗脱， 根据流 出液的旋光不同分离 α、 β两种抅型， 得 a型（化合物 5 ) 1. 5g， P型 （化合物 6) 化合物 5: 熔点 =119'C~120'C、 旋光 =+144°

化合物 6: 熔点 =108°C~110°C、 旋光 =--121°

元素分析：

化合物 分子式 C Η Ν

实测值 32. 26% 4. 78% 5. 67%

5 I i4ri2 J7l 2r 丄 2。Γ

计算值 32. 62% 4. 66% 5. 44% 实测值 32. 45% 4. 66% 5. 23%

计算值 32. 62% 4. 66% 5. 44% 实施例 4化合物 7、 8的制备

取三乙酰 -3-去氧葡萄糖溴 lOg, 化合物 XI 14g。 在反应器中, 先加入四氢呋 喃、二氯甲烷（V/V=l: 2)，然后再加入化合物 XI，待其完全溶解，加入催化剂 CuS0 ₄ ， 用二氯甲浣溶解兰乙酰 -3-去氧葡萄糖溴并滴加到反应器中， 温度控制在 18'C， 搅 拌反应 8小时。 反应结束后， 用蒸镏水洗涤 3〜 5遍 ， 甲醇结晶得纯品 3.8g。 用硅 胶柱层析法分离《、 6两种构型， 用二氯甲垸： 甲醇 =75: 25洗脱剂洗脱， 根据流 出液的旋光不同分离 α、 β两种构型， 得 a型（化合物 7) 1. 9g, β型（化合物 8) 1. 2gp ：

化合物 5: 熔点 =123。C~126°C、 旋光 =+105。

化合物 6: 熔点 =112°C~114°C、 旋光 = 101°

元素分析:

化合物 分子式 C H N

实测值 32. 99% 4. 89% 5. 49%

7 u π N ΡΠ r*

计算值 32. 62% 4. 66% 5. 44% 实测值 32. 21% 4. 92% 5. 65%

8 u π N PP1

计算值 32. 62% 4. 66% 5. 44% 实施例 5化合物 9、 10的制备

取三乙酰 -2-去氧葡萄糖溴 10g， 化合物 X2 15g。 在反应器中， 先加入三乙胺、 二氯甲垸（V/V=l: 5)，然后再加入， 待其完全溶解， 加入催化剂 CuS0 ₄ , 用二氯甲 垸溶解三乙酰 -2-去氧葡萄糖溴并滴加到反应器中， 温度 g制在 20。C， 搅拌反应 8 小时。 反应结束后， 用蒸馏水洗涤 3〜5遍 ， 甲醇结晶得纯品 5.6g。 用硅胶柱层析 法分离 α 、 β两种构型， 用二氯甲垸： 甲醇 =70: 30洗脱剂洗脱， 根据流出液的旋 光不同分离 α 、 3两种构型， 得 α型（化合物 9) 3. 5g， β型 （化合物 10) 1. 4g。 化合物 9: 熔点 =116°C~118°C、 旋光 =+58°

化合物 10: 熔点 =104°C~106°C、 旋光 =-78°

元素分析：

化合物 分子式 , C Η Ν

实测值 25. 47% 4. 67% 2. 92%

9

计算值 25. 70% 4. 71% 3. 00% 实测值 25. 36% 4. 57% 3. 12%

10 p L/i4iul22nW8 Νl ΡrΠ_丄 2θΓ

计算值 25. 70% 4. 71% 3. 00% 实施 』6化合物 11、 12的制备

取三乙酰 -3-去氧葡萄糖溴 10g， 化合物 X2 15g„在反应器中， 先加入三乙胺、 二氯甲垸 (V/V=l : 5)，然后再加入， 待其完全溶解， 加入催化剂 CuS0 ₄ ， 用二氯甲 烷溶解三乙酰 -3-去氧葡萄糖溴并滴加到反应器中， 温度控制在 24'C， 搅拌反应 9 小时。 反应结束后， 用蒸馏水洗涤 3~5遍 ， 甲醇结晶得纯品 4.6g。 用硅胶柱层析 法分离 α 、 β两种构型， 用二氯甲烷： 甲醇 =75: 25洗脱剂洗脱， 根据流出液的旋 光不同分离 α 、 β两种构型， 得 α型 (化合物 11 ) 1. 8g， P型 （化合物 12) 2. 2g。 化合物 11: 熔点 =117°C~119°C、 旋光 =-5°

化合物 12: 熔点 =106'C~109。C、 旋光 =-128°

元素分析:

化合物 分子式 C Η Ν

实测值 25. 12% 4. 83% 2. 88%

计算值 25. 70% 4. 71% 3. 00%

12 u D l 实测值 25. 82% 4. 66% 2. 93%

计算值 25. 70% 4. 71% 3. 00% 实施例 7化合物 13的制备

取三乙酰- 2-去氧葡萄糖溴 10g， 化合物 X3 。 在反应器中， 先加入二氯甲烷， 然后再加入， 待其完全溶解， 加入催化剂 Ag ₂ C0 ₃ ， 用二氯甲垸溶解三乙酰 -2-去氧葡 萄糖溴并滴加到反应器中， 温度控制在 25°C， 搅拌反应 8小时。 反应结束后， 用蒸 馏水洗涤 3〜5遍 ， 甲醇结晶得纯品 5.5g。

化合物 13： 熔点 =106°C~108。C、 旋光 =-85°

元素分析：

化合物 分子式 C H N

实测值 54. 65% 5. 06%

计算值 54. 71% 5. 15%

实施例 8化合物 14的制备

取三乙酰 -3-去氧葡萄糖溴 10g， 化合物 X3。 在反应 ¾！中， 先加入二氯甲垸，然 后再加入， 待其完全溶解， 加入催化剂 A _g2 C0 ₃ , 用二氯甲烷溶解三乙酰- 3 -去氧葡萄 糖溴并滴加到反应器中， 温度控制在 20Ό , 搅拌反应 8小时。 反应结束后， 用蒸馏 水洗涤 3〜5遍 ， 甲醇结晶得纯品 5.8g。

化合物 14: 熔点 =120。C~122°C、 旋光 =+57°

元素分析：

化合物 分子式 C Η Ν

实测值 54. 45% 4. 98%

14

计算值 54. 71% 5. 15% 实施例 9化合物 1-14 (实施例 1-8制备） 的急性毒性实验 (LD50) 结果。

1 ) 小鼠 ig给药后结果: LD50 (mg/kg)

2) 小鼠 ip腹腔注射给药后结果： LD50 (mg/kg) 8 9 10 11 12 13 14

301. 4 307. 2 315. 6 322. 6 306. 4 298. 7 300. 2

3)抗肿瘤生物活性体外筛选实验

筛选方法： 四氮唑盐（MTT还原法）

磺酰罗丹明 B (SRB蛋白染色法）

作用时间： 72小时

结果评定： 无效： 10— ol/L<85% _;

弱效： 10 ol/L 85%或 l(Traol/L〉50%

强效： l(Tmol/L 85%或 l(T ⁷ mol/L〉50%

实施例 10化合物 1-14在制备抗癌药物中的应用。

本发明进行了上述制备化合物 1-14的急性毒性及抗癌药效实验如下： 化合物 1-14对于人鼻咽癌母系细胞 CNE-2Z、人肺癌细胞 A549、人结肠癌细 胞 HT-29、 人肝癌细胞 Bel-7402、 人大肠癌细胞 HCE8693、 人胃癌细胞 BGC- 803、人食道癌细胞 CaEs-17、人乳腺癌细胞 MCF_7、人卵巢癌细胞 A2780、 人胰腺癌细胞 PC-3、 人膀胱癌细胞 EJ、 人脑胶质细胞癌细胞 TG-905、 人白 血病细胞 K562、 人黑色素瘤细胞 M14、 甲状腺未分化瘤细胞 TA-K等肿瘤细 胞生长抑制作用， 结果如下： 化合物 1-14对人黑色素瘤细胞 M14的生长抑制作用:

6 100 100 94.3 68.7 11.3 强效

7 100 100 100 72.2 15.6 强效

8 100 100 93.2 73.3 13.4 强效

9 100 100 96.1 68.4 15.6 强效

10 100 100 100 59.7 13.4 强效

11 100 100 100 76.5 23.2 强效

12 100 100 100 74.3 12.1 强效

13 100 100 100 72.1 13.3 强效

14 100 100 98.5 68.3 16.7 强效 化合物 1-14对人胰腺癌细胞 PC-3的生长抑制作用：

浓度 评价 样品编 10 10" ⁵ 1(Γ 10- ⁷

号

1 100 100 100 74.6 12.5 强效

2 100 100 99.6 73.2 13.6 强效

3 100 100 100 70.8 14.8 强效

4 100 100 100 69.5 14.9 强效

100 100 100 73.4 14.7 强效

6 100 100 100 69.3 12.5 强效

7 100 100 100 70.1 13.6 强效

8 100 100 100 72.3 13.4 强效'

9 100 100 96.1 69.1 15.9 强效

10 100 100 100 69.2 12.7 强效

. 11 100 100 100 71.3 13.8 强效

12 100 100 96.5 72.3 15.8 强效

13 100 100 100 71.4 13.7 强效

14 100 100 98.7 65.2 15.7 强效 化合物 1-14对甲状腺未分化瘤细胞 TA-K的生长抑制作用:

7 100 100 100 69.2 13.4 强效

8 100 100 98.7 68.9 15.6 强效

9 100 100 98.8 68.7 15.5 强效

10 100 100 100 70.5 13.8 强效

11 100 100 100 71.4 12.5 强效

12 100 100 100 71.8 14.9 强效

13 100 100 100 69.5 15.6 强效

14 100 100 100 68.3 16.8 强效 化合物 1-14对人肺癌细胞 A549的生长抑制作用：

浓度 评价 样品编 10- ⁴ 10" ⁵ 10"* 10- ⁷ 10" ⁸

号

1 100 100 100 69.7 13.6 强效

2 100 100 100 70.8 13.8 强效

3 100 100 100 70.9 15.7 强效

4 100 100 100 69.3 16.2 强效

5 100 100 100 72.5 14.5 强效

6 100 100 100 69.8 15.3 強效

7 100 100 100 69.5 14.1 强效

8 100 100 100 72.9 13.8 强效

9 100 100 100 71.4 15.7 强效

10 100 100 100 69.5 14.2 强效

11 100 100 100 68.7 13.4 强效

12 100 100 100 70.4 14.9 强效

13 100 100 100 69.9 15.1 强效

14 100 100 100 68.7 15.7 强效 化合物 1-14对于人结肠癌细胞 HT-29的生长抑制作用： 浓度 评价 样品编 1( 10 ^→ ΐ(Τ It)- ⁷ 10" ⁸

号

1 100 100 100 68.5 15.5 强效

2 100 100 99.9 71.2 14.8 强效

3 100 100 100 70.5 13.9 强效

4 100 100 100 69.7 16.9 强效

5 100 100 100 71.3 14.8 强效

6 100 100 98.7 68.8 15.8 强效

7 100 100 99.6 69.6 14.6 强效

8 100 100 100 71.4 15.5 强效

9 100 100 100 71.6 15.9 强效

10 100 100 100 68.5 14.7 强效

11 100 100 100 68.9 14.8 强效

12 100 100 100 71.7 14.5 强效

13 100 100 98.8 68.5 15.6 强效

14 100 100 100 68.3 14,9 强效 化合物 1-14对于人肝癌细胞 Bel-7402的生长抑制作用：

浓度 评价 样品编 10" ⁴ 10^ 1(Τ 10— ⁷ 10— ⁸

号

1 100 100 100 68.3 13.6 强效

2 100 100 100 69.5 13.8 强效

3 100 100 100 67.4 15.7 强效

4 100 100 100 68.5 16.2 强效

5 100 100 100 67.9 14.5 强效

6 100 100 99.6 72.2 15.3 强效

7 100 100 100 68.5 14.1 強效 8 100 100 100 71.4 13.8 强效

9 100 100 98.9 68.7 15.7 强效

10 100 100 97.8 69.1 14.2 强效

11 100 100 100 68.0 13.4 强效

12 100 100 100 71.2 14.9 强效

13 100 100 100 69.7 15.1 强效

14 100 100 100 68.8 15.7 强效 化合物 1-14对于人大肠癌细胞 HCE8693的生长抑制作用：

浓度 评价 样品编 10" ⁴ 10" ⁵ 10" ⁶ 10 10" ⁸

号

1 100 100 100 69.8 15.8 强效

2 100 100 100 72.5 14.9 强效

3 100 100 100 69.1 13.9 强效

4 100 100 100 71.5 14.8 强效

5 100 100 100 68.3 15.9 强效

6 100 100 100 71.4 15.5 强效

7 100 100 100 69.7 14.6 强效

8 100 100 100 64:4 14.5 强效 .

9 100 100 98.9 69.2 15.4 强效

10 100 100 97.8 70.1 13.8 强¾

11 100 100 100 68.8 13.7 强效

12 100 100 100 70.5 14.5 强效

13 100 100 100 68.9 13.4 强效

14 100 100 100 72.3 15.9 强效 化合物 1-14对于人胃癌细胞80(：-803的生长抑制作用： 浓度 评价 样品编 10" ⁴ 10" ⁵ ΐ(Γ lo 10" ⁸ 号

1 100 100 100 70.2 15.5 强效

2 100 100 100 71.3 16.3 强效

3 100 100 99.6 68.2 14.8 强效

4 100 100 100 70, 5 14.1 强效

5 100 100 100 68.9 13.6 强效

6 100 100 98.9 68.4 15.2 强效

7 100 100 100 66.9 14.9 强效

8 100 100 100 65.8 13.6 强效

9 100 100 100 68.2 12.7 强效

10 100 100 98.8 72.2 14.6 强效

11 100 100 100 68.0 16.3 强效 .

12 100 100 100 71.4 16.2 强效

13 100 100 97.4 68.3 13.8 强效

14 100 100 100 70.5 15.4 强效 化合物 1-14对于人食道癌细胞 CaEs-17的生长抑制作用:

10 100 100 97.9 71.4 16.2 强效

11 100 100 100 67.8 16.9 强效

12 100 100 100 72.5 14.5 强效

13 100 100 100 69.5 18.6 强效

14 100 100 100 72.7 15.8 强效 化合物 1-14对于人乳腺癌细胞 MCF-7的生长抑制作用：

浓度 评价 样品编 10- ⁴ 10" ⁵ 10^ If)- ⁷ 10" ⁸

号

1 100 100 100 71.8 11.2 强效

2 100 100 99.8 68.8 14.7 强效

3 100 100 100 65.3 13.6 强效

4 100 100 100 67.2 15.3 强效

5 100 100 100 68.6 16.8 强效

6 100 100 100 69.6 12.8 强效

7 100 100 100 71.3 13.6 强效

8 100 100 100 66.8 12.6 强效

9 100 100 99.6 65.2 15.3 强效

10 100 100 100 68.8 14.8 强效

11 100 100 100 69.4 12.3 强效

12 100 100 100 70.7 14.8 强效

13 100 100 98.7 68.3 12.7 强效

14 100 100 100 70.5 16.1 强效 化合物 1-14对于人卵巢癌细胞 A2780的生长抑制作用：

浓度 . 评价 样品编 10— ⁴ 10" ⁵ io^ 10 1(Γ ⁸ 号

1 100 100 100 71.8 16.2 强效

2 100 100 100 72.8 17.4 强效

3 100 100 100 74.3 13.8 强效

4 100 100 100 70.2 15.8 强效

5 100 100 100 69.6 16.7 强效

6 100 100 100 71.3 13.5 强效

7 100 100 100 72.5 14.9 强效

8 100 100 100 69.7 14.7 强效

9 100 100 100 68.4 16.4 强效

10 100 100 100 69.5 15.3 强效

11 100 100 100 69.9 16.2 强效

12 100 100 100 72.3 15.9 强效

13 100 100 100 71.4 14.8 强效

14 100 100 100 72.8 15.3 强效 化合物 1-14对于人膀胱癌细胞 EJ的生长抑制作用:

10 100 100 98.3 69.8 15.9 强效

11 100 100 100 67.8 13.6 强效

12 100 100 99. & 70.5 16.9 强效

13 100 100 100 70.7 14.5 强效

14 100 100 97.6 68.7 15.7 强效 化合物 1-14对于人脑胶质细胞癌细胞的生长抑制作用� � 浓度 评价 样品编 10" ⁴ 10" ⁵ 10^ If)- ⁷ 1(Τ

号

1 100 100 100 69.8 16.7 强效

2 100 100 98.6 67.3 15.8 强效

3 100 100 98.9 70.5 15.6 强效

4 100 100 96.5 67.5 14.6 强效

5 100 100 100 68.8 17.2 强效

6 100 100 99.6 69.3 17.8 强效

7 100 100 98.7 70.5 16.3 强效

8 100 100 98.9 69.6 15.8 强效

9 100 100 99.5 69.2 13.2 强效

10 100 100 98.7 65.4 11.3 强效

11 100 100 100 68.2 13.5 强效

12 100 100 100 72.8 11.7 强效

13 100 100 100 67.7 14.2 强效

14 100 100 100 69.7 16.7 强效 化合物 1-14对于人白血病细胞 K562的生长抑制作用： 浓度 评价

'样品编 10" ⁴ 10" ⁵ 1(Τ 10 10" ⁸ 号

1 100 100 100 65.9 11.4 强效

2 100 100 100 69.7 12.3 强效

3 100 100 100 68.3 10.6 强效

4 100 100 100 67.9 16.6 强效

5 100 100 100 68.9 15.6 强效

6 100 100 100 65.2 13.2 强效

7 100 100 100 62.5 13.4 强效

8 100 100 100 67.8 12.8 强效

9 100 100 68.2 14.5 强效

10 100 100 100 69.3 13.6 强效

11 100 100 100 65.7 13.9 强效

12 100 100 100 69.8 11.2 强效

13 100 100 100 71.3 11.5 强效

14 100 100 100 69.2 13.9 强效

^述试验结東显 ¾ ^化合物 1-14对于人鼻咽癌母系细胞 CNE- 2Z、 人肺癌细胞 A549、 人结肠癌细胞 HT- 29、 人肝癌细胞 Bel-7402、 人大肠癌细胞 HCE8693、 人胃 癌细胞 BGC-803、人食道癌细胞 CaEs- 17、人乳腺癌细胞 MCF- 7、人卵巢癣细胞 A2780、 人胰腺癌细胞 PC-3、 人脍胱癌细胞 EJ、 人脑胶质细胞癌细胞 TG-905、 人白血病细 胞 K562、人黑色素瘤细胞 Μ14、甲状腺未分化瘤细胞 ΤΑ-Κ等肿瘤细胞生长抑制作用 均为强效。

实施例 11 化合物 3、 5、 7、 10、 12、 14对小鼠移植瘤的抑制作用：

化合物 3、 5、 7、 10、 12、 14 (实施例 2、 3、 4、 5、 6、 8制备） 以 125mg/kg 给药， 空白对照组给予生理盐水， 阳性对照组 CTX，给药体积均为 0.4ml/20g。每天 给药一次，供给药 7天，给药结束两天后处死动物。分别对 B16恶性黑色素瘤、 AsPc 人胰腺癌、 05- 732人骨肉瘤、人甲状腺未分化瘤细胞 TA- K、 MX- 1人乳腺癌以及 MGC 人胃癌进行抗癌实验。

实验数据如下： B16恶性黑色素瘤

5 125 18.3 18.6 0.7 0.4 74.9

7 125 18.3 18.4 0.5 0.3 81.3

10 125 18.3 18； 3 0.6 0.4 78.4

12 125 18.2 18.4 0.5 0.5 75.1

14 125 18.3 18.5 0.8 0.1 72.3

CTX 45 18.3 18.6 0.7 0.6 73.9 人甲状腺未分化瘤细胞 TA-K

剂量 体重

组别 瘤重 SD 抑瘤率

(mg/kg) 起始 结束

对照组 125 18.3 19.8 2.7 0.2

3 125 18.2 18.3 0.7 0.4 73.2

5 125 18.3 18.6 0.6 0.3 76.6

7 125 18.3 18.4 0.4 0.5 84.2

10 125 18.3 18.3 0.8 0.1 71.2

12 125 18.2 18.4 0.6 0.5 75.8

14 125 18.3 18.5 0.6 0.7 76.2

CTX 45 18.3 18.6 0.6 0.3 77.4

MX-1人乳腺癌

剂量 体童

组别 瘤重 SD 抑瘤率

(mg/kg) 起始 结束

对照组 125 18.3 19.8 2.5 0.5

3 125 18.2 18.3 0.6 0.3 75.8

5 125 18.3 18.6 0.4 0.4 83.6

7 125 18.3 18.4 0.5 0.5 80.8

10 125 18.3 18.3 0.7 0.3 73.2

12 125 18.2 18.4 0.4 0.2 82.1

14 125 18.3 18.5 0.6 0.4 76.3 CTX 45 18.3 18.6 0.4 0.5 84.5

MGC人胃癌 剂量 体重

组别 瘤重 SD 抑瘤率

(mg/kg) 起始 结束

对照组 125 18.3 19.8 2.6 0.6

3 125 18.2 18.3 0.7 0.3 72.5

5 125 18.3 18.6 0.6 0.4 75.7

7 125 18.3 18.4 0.4 0.2 83.8

10 125 18.3 18.3 0.6 0.5 73.2

12 125 18.2 18.4 0.5 0.7 80.5

14 125 18.3 18.5 0.7 0.5 71.9

CTX 45 18.3 18.6 0.5 0.6 81.2 上述试验结果显示化合物 3、 5、 7、 10、 12、 14 (实施例 2、 3、 4、 5、 6、 8制 备）在 125mg/kg浓度情况下， 対 B16恶性黑色素瘤、 AsPc人胰腺癌、 05-732人骨 肉瘤、 人甲状腺未分化瘤细胞 TA-K、 MX-1人乳腺癌以及 MGC人胃癌抑瘤率良好。