ANTECEDENTES DE LA INVENCION Los compuestos ()-4-hidroxi-4-fenilhexanamida (DL-HEPB), ()-3-hidroxi-3- fenilpentanamida (DL-HEPP) y ()-2-hidroxi-2-fenilbutiramida (DL-HEPA), presentan un amplio espectro de actividad anticonvulsionante. Ellos protegen a los ratones contra las convulsiones provocadas por el pentilenotetrazol, la bicuculina, la 4-aminopiridina, la tiosemicarbazida y el electrochoque máximo.

Ver Carvajal y cols., Biochem. Pharmacol. 13,1059 (1964 ?, Pérez-de-la-Mora y cols., Biochem. Pharmacol. 22,2635 (1973) y Meza-Toledo y cols., Arzneim.

Forsch. 40 (II), 1289 (1990). Tanto el DL-HEPB como el DL-HEPP también protegen a gatos y ratas contra el kindling hipocampal. Ver Solis y cols., Neurobiologia, Symposium Internacional, pp. 83-94, (1979) y Solís y cols., Arch.

Neurocien. (Méx.) 1,99 (1996). Además, el DL-HEPP protege a ratas contra el síndrome de abstinencia al ácido y-aminobutirico (GABA), éste es un modelo de epilepsia focal, el cual ha mostrado una resistencia extraordinaria a los antiepilépticos clásicos. Ver Brailowsky y cols., Epilepsy Res. 11,167 (1992). El DL-HEPP también produce una disminución significativa de las descargas focales en el modelo congénito de epilepsia tipo ausencias en la rata de Estrasburgo (GAERS), éste es un modelo de epilepsia generalizada no convulsiva, en el cual los antagonistas hacia los receptores GABAB presentan actividad anticonvulsionante. Ver Brailowsky y cols., citado arriba, Liu, y cols., Neurosci. 48,87 (1992), Marescaux y cols., Pharmacol. Commun. 2,57 (1992) y Froesti y cols., J. Med. Chem. 38,3313 (1995). En la búsqueda de nuevos compuestos con una actividad anticonvulsionante elevada, se sintetizó una serie nueva de hidroxiamidas halogenadas, las cuales presentaron una alta afinidad hacia el receptor GABAB además de una actividad anticonvulsionante bastante significativa.

DESCRIPCION DETALLADA Se sintetizaron compuestos con un átomo de cloro ó flúor en la posición para del anillo fenilo de una serie homótoga de fenil alcohol amidas. Los compuestos preparados son nombrados como : DL-2-hidroxi-2- (4'-clorofenil) butiramida (DL- Cl-HEPA, 1), DL-2-hidroxi-2- (4'-fluorofenil) butiramida (DL-F-HEPA, 2), DL-3- hidroxi-3- (4'-clorofenil) pentanamida (DL-CI-HEPP, 3), DL-3-hidroxi-3- (4'-fluoro- fenil) pentanamida (DL-F-HEPP, 4), DL-4-hidroxi-4- (4'-clorofenil) hexanamida (DL-CI-HEPB, 5), y DL-4-hidroxi-4- (4'-fluorofenil) hexanamida (DL-F-HEPB 6).

Los compuestos mencionados presentaron diferencias inesperadas en actividad anticonvulsionante con respecto a los compuestos no halogenados. Se utilizó la prueba del pentilenotetrazol para evaluar la actividad anticonvulsionante de cada compuesto. Como puede observarse en la Tabla 1, los compuestos 1,3 y 5 presentaron una actividad anticonvulsionante inusitadamente alta, siendo superior en dos a tres veces con respecto a la actividad que presentaron los compuestos no halogenados. En el ejemplo 4 de la parte inferior, se observó que los compuestos 2,4 y 6 también presentaron diferencias inesperadas en el tiempo de duración de su actividad anticonvulsionante, con respecto a la actividad de los compuestos no halogenados. Como puede observarse en la Tabla 2, a los tiempos de 4 h a 6 h posteriores a su administración, los compuestos 2,4 y 6 presentaron una actividad anticonvulsionante de dos a tres veces superior con respecto a la actividad de los compuestos no halogenados.

Lo anterior fue particularmente inesperado basados en la naturaleza de ésos compuestos, y demuestra que existen diferencias inesperadas sustanciales en la actividad de los compuestos mencionados. Basados en el efecto protector de los compuestos de la invención contra las convulsiones producidas por el pentilenotetrazol, puede esperarse que sean efectivos en el tratamiento de la epilepsia tipo ausencias. Para las fenil alcohol amidas, se evaluó la inhibición de la unión especifica del R- [3H]-baclofén a los receptores GABAB, en membranas sinópticas crudas de cerebro de rata. Como se observa en a Tabla 1, las fenil alcohol amidas mostraron una alta afinidad hacia el receptor GABAB. Los compuestos 1 y 3 fueron tan potentes como el GABA y el R-baclofén y fueron los más potentes de los compuestos evaluados. Los compuestos DL-HEPA,

DL-HEPP y DL-HEPB fueron tan potentes como el DL-baclofén. Los compuestos 2,4 y 6 fueron menos activos que el DL-2-hidroxisaclofén. El compuesto 5, fue el menos activo de todas las series estudiadas. Se encontró una relación lineal entre los valores de pKi, en mol/l, y los valores de peso, en mol kg-'. para la actividad anticonvulsionante. de las amidas DL-HEPA. DL- HEPP, DL-HEPB y para los compuestos 1 y 3. La ecuación obtenida fue : pKi = 4.55 + 0.72 pDE5o, r = 0.92. Para los compuestos 2,4,5 y 6, no se observó ninguna relación entre los valores de pKi y los valores de pDE50 para la actividad anticonvulsionante. Adicionalmente, el R-baclofén (un agonista de los receptores GABAB) antagonizó muy eficientemente la actividad anticonvulsionante del DL-HEPP y del compuesto 3 (Fig. 5). Los resultados anteriores, así como la actividad protectora del DL-HEPP en el modelo de epilepsia denominado GAERS,, apoyan la noción de que algunas de las fenil alcohol amidas anticonvulsionantes son antagonistas del receptor GABAB. Ver Liu, y cols., Neurosci. 48,87 (1992), Marescaux y cols., Pharmacol. Commun.

2,57 (1992) y Brailowsky, y cols., citado arriba. A la fecha, se han sintetizado silo un número reducido de antagonistas hacia los receptores GABAB que penetren la barrera hematoencefálica, por ello su potencial terapeútico no se ha evaluado completamente. Los principales antagonistas conocidos hacia los receptores GABAB presentan en su estructura la cadena principal del GABA la cual está unida a sustituyentes hidrofóbicos. Adicionalmente, algunos de ellos contienen sustituciones isostéricas del grupo carboxilato del GABA por grupos fosfatos, fosforilos ó sulfatos que están unidos a sustituyentes hidrofóbicos. Ver Kerr y cols., Med. Res. Rev. 12,593 (1992), Bowery, Ann. Rev. Pharmacol.

Toxicol. 33,109 (1993) y Froestl y cols., J. Med. Chem. 38,3313 (1995). Los compuestos de ésta invención no están relacionados estructuralmente con los principales antagonistas conocidos hacia los receptores GABAB, y consecuentemente ellos representan una familia nueva de antagonistas hacia los receptores GABAB los cuales poseen actividad anticonvulsionante in vivo.

Por lo anterior, los compuestos de la invención poseen un mecanismo de acción novedoso que explica su actividad anticonvulsionante.

En los ejemplos siguientes, los puntos de fusión se determinaron en un aparato Electrotermal y no están corregidos. Los espectros de infrarrojo se obtuvieron

en un espectrómetro Perkin Elmer 1310. Los espectros de resonancia magnética nuclear de hidrógeno se realizaron en un espectrómetro Varian EM <BR> <BR> <BR> 360-L. Los valores de desplazamiento químico se indican en 6 (ppm); se utilizaron CDC13 y DMSO-d6 como disolventes y TMS como estándard interno.

Los análisis elementales fueron realizados por los laboratorios Galbraith, Inc., de Knoxville, TN (USA) y las diferencias obtenidas con respecto a los valores teóricos fueron de 0.5 %, con excepción de aigunos valores indicados.

EJEMPLO 1 Preparación DL-2-hidroxi-2-(4'-clorofenil)butiramida,DL-Cl-HEPA(1)la El compuesto 1 se obtuvo mediante una condensación entre la 4'- cloropropiofenona y el cianuro de sodio en medio ácido (Fig. 1).

Precaución : Se libera cianuro de hidrógeno ! A una mezcla agitada conteniendo : 4'-cíoropropiofenona (22.61 g, 0.1342 moles), cianuro de sodio (16.4 g, 0.3347 moles), 6ter etilico (80 ml) y agua (100 ml), se le adicionó HCI al 37 % (28 mi, 0.34 moles). La temperatura se mantuvo entre 2 y 5 °C durante la adición la cual requirió de 2 h. Posteriormente, la agitación se continuó durante 5 h adicionales a una temperatura de 10 a 15 °C. Entonces, la fase etérea se separó y se le adicionó agua (20 ml), para disolver las sales. Después, la solución acuosa se extrajo con 3 porciones de 50 ml de éter. Los extractos etéreos combinados se concentraron a presión reducida de 20-30 mm de Hg. El aceite residual se enfrió, se le adicionó HCI al 37 % (32 ml) y se saturó a 5-10 °C con HCI (g), manteniéndose a temperatura ambiente durante 18 h, apareciendo un precipitado. El exceso de HCI se removio haciendo fluir aire a través de la solución. El precipitado se filtró y se recristalizó con benceno obteniéndose 15.1 g (52.7 %) de 1, p. f. 122-123 °C; RMN-1H (CDCl3/DMSO-d6) # : 0.9 (t, 3H,-CH3), 2.1 (m, 2H,-CH2-), 5.4 (s, 1H,-OH), 6.6 (bs, 1H,-NH-), 7.1 (bs, 1H, -NH-), 7.3 (d, 2H, H fenil), 7.6 (d, 2H, H fenilo) ; IR (KBr) : 3470, 3280, 1661 cm-1. Anal. (C10H12NO2Cl) : C, H, N, O, Cl.

EJEMPLO 2 Preparac/bn de la DL-2-hidroxi-2-(4'-fluorofenil) butiramida, DL-F-HEPA (2) El compuesto 2 se obtuvo mediante una condensación entre la 4'- fluoropropiofenona y el cianuro de sodio en medio ácido (Fig. 1).

Precaución : Se libera cianuro de hidrógeno ! A una mezcla agitada conteniendo : 4'-fluoropropiofenona (101.84 g, 0.67 moles), cianuro de sodio (82 g, 1.67 moles), éter etilico (80 ml) y agua (100 ml), se le adicionó HCI al 37 % (140 ml, 1.7 moles). La temperatura se mantuvo entre 2 y 5 °C durante la adición la cual requirió de 2.5 h. Posteriormente, la agitación se continuó durante 5 h adicionales a una temperatura de 10 a 15 °C. Entonces, la fase etérea se separó y se le adicionó agua (100 ml), para disolver las sales.

Después, la solución acuosa se extrajo con 4 porciones de 50 mi de éter. Los extractos etéreos combinados se concentraron a presión reducida de 20-30 mm de Hg. El aceite residual se enfrió, se le adicionó HCI al 37 % (160 ml) y se saturó a 5-10 °C con HCI (g), mahteniéndose a temperatura, ambiente durante 18 h, apareciendo un precipitado. El exceso de HCI se removió haciendo fluir aire a través de la solución. El precipitado se filtró y se recristalizó con benceno <BR> <BR> <BR> obteniéndose 66.2 g (50.2 %) de 2, p. f. 109-110 °C ; RMN-1H (CDCl3/DMSO-d6) 6 : 0.9 (t, 3H,-CH3), 2.1 (q, 2H,-CH2-), 5.2 (s, 1H,-OH), 6.2 (bs, 1H,-NH-), 6.9- 7.3 (bs, 1H,-NH-), 6.9-7.3 (m, 2H, H fenilo), 7.5-7.9 (m, 2H, H fenilo); IR (KBr) : 3350,3160,1650 cm-1. Anal. (C, oH, 2N02F) : C, H, N, O, F. : EJEMPLO 3 Preparación DL-3-hidroxi-3-(4'-clorofenil)pentanamida,DL-Cl-HEPP(3)la El compuesto 3 se preparó mediante una condensación entre el bromoacetato de etilo y la 4'-cloropropiofenona, en presencia de zinc, formándose el hidroxiéster 3a, el cual al tratarse con hidróxido de amonio condujo a la amida 3 (Fig. 2).

A. Preparación del DL-3-hidroxi-3- (4'-clorofenil) pentanoato de etilo (3a) A una solución agitada que contenía : 4'-cloropropiofenona (50.55 g, 0.3 moles), bromoacetato de etilo (34.3 g, 0.206 moles), benceno (40 ml) y éter etílico (10 ml), se le adicionó zinc activado (20.92 g, 0.32 moles) durante un período de 1.5 h y se reflujó durante 5 h. La mezcla de reacción se hidrolizó con H2SO4 al 10 % (200 ml) y la capa orgánica se lavó sucesivamente con : H2SO4 al 5 % (100 ml), Na2CO3 al 10 % (25 ml), H2SO4 al 5 % (25 ml) y agua (50 ml). La capa orgánica se separó y las soluciones acidas combinadas se extrajeron con dos porciones de 50 mi de éter etílico cada una. Los extractos etéreos y la capa orgánica separada inicialmente se reunieron, se secaron sobre MgS04, se

filtraron y se concentraron. El residuo se destin6 fraccionadamente a presión reducida obteniéndose 51.2 g (96.9 %) de 3a, p. eb. 164-165 °C/18 mm Hg ; RMN-1H (CDCI3) 8 : 0.8 (t, 3H,-CH3), 1.2 (q, 3H,-COO-CH2CH3), 1.8 (q, 2H,- CH2Me), 3.0 (m, 2H,-CH2-), 4.1 (q, 2H,-COOCH2Me), 4.4. (s, 1H,-OH), 7.4 (d, 3H, H fenil), 7.9 (d, 1H, H fenilo); IR (CHCl3) 3465,1708 cm-1 B. Preparación de la DL-3-Hidroxi-3- (4'-clorofenil) pentanamida (3) Una mezcla que contenía : compuesto 4a (49 g, 0.191 moles), etanol (200 ml) y hidróxido de amonio al 28 % (200 ml) se enfrió a 0 °C y se saturó con amoníaco gaseoso. El matraz se tapó con un tapón de caucho y se mantuvo a temperatura ambiente durante 27 días. Después, la mezcla de reacción se enfrió, se adicionó NaCl sótido (15 g) y se extrajo con cuatro porciones de 150 ml de éter etilico. Los extractos etéreos reunidos se secaron con Na2SO4, se filtraron y se concentraron a sequedad. El residuo obtenido se lavó con n- hexano y se recristalizó con agua obteniéndose 19.2 g (44.2 %) de 3, p. f. 99- 100 °C ; RMN-1H (CDCl3) # : 0.8 (t, 3H, -CH3), 1.7 (q, 4H, -CH2Me), 2.7 (s, 2H,- <BR> <BR> <BR> <BR> <BR> CH2-CO-), 4.3 (s, 1H,-OH), 5.9 (bs, 2H,-NH2), 7.2 (s, 4H, H fenilo) ; IR (KBr) : 3440,3140,1661 cm-1. Anal. (C11-H14NO2Cl) : C, H, N, O, Cl.

EJEMPLO 4 Preparacíón de la DL-3-hidroxi-3- (4'-fluorofenil) pentanamida, DL-F-HEPP (4) El compuesto 4 se preparó mediante una condensación entre el sodio acetonitrilo y la 4'-fluoropropiofenona, formándose el nitrilo 4a, el cual al tratarse con peróxido de hidrógeno en medio alcalin produjo 4 (Fig. 3).

A. Preparación del DL-3-Hidroxi-3- 4'-fluorofenil) pentanonitrilo (4a) A una mezcla agitada que contenia sodamida (23.4 g, 0.6 moles) en amoníaco líquido (200 ml) (preparada a partir de sodio (13.8 g, 0.6 moles)), se le adicionó una solución de acetonitrilo (24.6 g, 0.6 moles) disuelto en tetrahidrofurano (600 ml), durante un período de 20 min y se continuó la agitación por 35 min adicionales. Posteriormente, se agregó la 4'-fluoropropiofenona (91.2 g, 0.6 moles) solubilizada en tetrahidrofurano (600 ml), y se agitó durante 20 min.

Después la mezcla de reacción se virtió en una suspensión de cloruro de amonio (80 g) en amoníaco líquido (200 ml). Se dejó evaporar el amoníaco y el residuo sólido se trató con HCI 3N (400 ml) y se extrajo con dos porciones de

150 ml de tetrahidrofurano cada una. Después, los extractos orgánicos reunidos se secaron y se concentraron. El residuo se recristalizó con hexano obteniéndose 69.5 g (60 %) de 4a, p. f. 76-77 °C; RMN-1H (CDCI3) â : 0.8 (t, 3H, -CH3), 2.0 (q, 2H,-CH2Me), 2.6 (s, 1H,-CH2CN), 2.8 (s, 1H,-OH), 6.9-7.2 (m, 2H, H fenil), 7.2-7.4 (m, 2H, H fenilo); IR (KBr) 3410,2240 cm-1.

B. Preparación DL-3-Hidroxi-3-(4'-fluorofenil)pentanamida(4)la <BR> <BR> <BR> Compuesto 4a (57.9 g, 0.3 moies), peróxido de hidrógeno al 18.1 % (315 ml, 1.6769 moles), etanol absoluto (150 ml) y NaOH 6N (15 ml), se mezclaron cuidadosamente y se agitaron : durante 10 h manteniendo, la temperatura entre 40-50 °C. Después la mezcla de reacción se neutralizó con H2SO4 al 5 % y se extrajo con cuatro porciones de 50 mi de éter etílico cada una. Los extractos etéreos reunidos se concentraron a sequedad y el residuo se recristalizó con <BR> <BR> <BR> benceno obteniéndose 49.1 g (77.6 %) de 4, p. f. 86-87 °C; RMN-1H (CDCI3) 6 : 0.8 (t, 3H,-CH3), 1.8 (q, 4H,-CH2Me), 2.7 (s, 2H,-CH2-CO-), 5.0 (s, 1 H,-OH), <BR> <BR> <BR> 5.7 (bs, 1H,-NH-), 6.9-7.2 (bs, 1H,-NH-), 6.9-7.6 (m, 4H, H fenilo) ; IR (KBr) : 3340,3160, 1645 cm-1. Anal. (C11H14NO2F) : C, H, N, O, F.

EJEMPLO 5

Preparación de la DL-4-hidroxi-4- (4'-clorofenil) hexanamida, DL-CI-HEPB (5) El compuesto 5 se preparo mediante una condensación entre la 4'- cloropropiofenona y el succinato de dietilo, en presencia de hidruro de sodio, seguida por una ciclización bajo condiciones ácidas para producir la DL-5-etil-5- (4'-clorofenil) butirolactona (5a). El tratamiento de ésta con amoníaco bajo presión produjo 5 (Fig. 4).

A. laDL-5-etil-5-(4'-clorofenil)butirolactona(5a)de A una solución que contenia : 4'-cloropropiofenona (25.27 g, 0.15 moles), benceno (150 ml), succinato de dietilo (78.3 g, 0.45 moles), bajo una atmósfera de nitrógeno, se le adicionó hidruro de sodio (10.8 g, 0.45 moles) y etanol absoluto (2.2 ml). La mezcla de reacción se agitó durante 2.5 h en un baño con hielo. Después se acidificó con ácido acético (42 ml), se dituyó con agua (70 ml) y se extrajo con cuatro porciones de 50 mi de 6ter etílico cada una. Se separó la fase orgánica y la solución acuosa se extrajo con 4 porciones de 50 ml de 6ter etílico. Las fases orgánicas reunidas se lavaron con una solución de

Na2CO3 al 5 %. La solución alcalina se acidiftcó con H2SO4 al 98 % y se extrajo con dos porciones de 50 ml de éter etílico cada una. La fracción etérea de la fase acida se reunió con la extraída de la fase alcalina, se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se evaporaron a sequedad. El residuo aceitoso obtenido (42 g), está compuesto principaimente por productos de condensación.

Este producto aceitoso, ácido acético glacial (120 ml), HBr al 48 % (80 ml) y agua (40 ml), se reflujaron durante 26 h. Después, la mezcla de reacción se concentró a presión reducida, se diluyó con agua (100 rñ !) y se extrajo con 4 porciones de 50 ml de éter etilico cada una. Las fases orgánicas reunidas se lavaron con una solución de NaHC03 al 5 % y la fase etérea se guardó. La fase alcalina se acidificó con H2SO4 al 98 % y se extrajo con dos porciones de 50 ml de éter etílico cada una. Las fases orgánicas combinadas se concentraron y el residuo obtenido se trató otra vez con HBr como se mencionó previamente. La fracción etérea de éste segundo tratamiento se reunió con la solución etérea separada inicialmente de ia reacción original. Estas se lavaron con una solución acuosa saturada de NaCI, se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron. Et residuo se destiló fraccionadamente a presión reducida <BR> <BR> <BR> obteniéndose 21.5 g (63. 9 %) de 5a, p. eb. 192-193 °C / 15 mm Hg; RMN-1 H (CDCl3) 6 : 0.8 (t, 3H, -CH3), 1.9 (q, 2H,-CH2Me), 2.5 (m, 4H, -CH2-CH2-), 7.3 (s, 4H, H fenilo); IR (CHCl3) : 1765 cm-1.

B. Preparación de la DL-4-hidroxi-4- (4'-clorofenil) hexanamida (5) Una mezcla de 5a (20 g, 0.0891 moles) y amoníaco líquido (100 ml), se calentó en una bomba Parr a 100-105 °C (68 atm) durante 2 h. Se eliminó el exceso de amoníaco y el residuo sótido se recristalizó con agua obteniéndose 7.0 g (32.5 %) de 5, p. f. 106-107 °C; RMN-1H (CDCI3/DMSO-d6) 8 : 0.8 (t, 3H, -CH3), 1.9 (q, 2H,-CH2Me), 2.1 (s, 4H,-CH2-CH2-), 4.9 (s, 1H,-OH), 6.1 (bs, 1 H,-NH-), 6.7 (bs, 1H, -NH-), 7.4 (s, 4H, H fenilo); IR (KBr) : 3320,3150,1675 cm-1.

Anal. (C12H16NO2Cl) : C, H, N, Cl (calculado 13.24 %, encontrado 13.93 %).

EJEMPLO 6 Preparación DL-4-hidroxi-4-(4'-fluorofenil)hexanamida,DL-F-HEPB(6)la El compuesto 6 se preparó mediante una condensación entre la 4'- fluoropropiofenona y el succinato de dietilo, en presencia de hidruro de sodio, seguida por una ciclización bajo condiciones ácidas para producir la DL-5-etil-5-

(4'-fluorofenil) butirolactona (6a). El tratamiento de ésta con amoníaco bajo presión produjo 6 (Fig. 4).

A. Preparación de la DL-5-etii 5- (4'-fluorofenil) butirolactona (6a) A una solución que contenía: 4'-fluoropropiofenona (15.2 g, 0.1 moles), benceno (100 ml), succinato de dietilo (52.2 g, 0.3 moles), bajo una atmósfera de nitrógeno, se le adicionó hidruro de sodio (7.2 g, 0.3 moles) y etanol absoluto (1.5 ml). La mezcla de reacción se agitó durante 2.5 h en un baño con hielo.

Después se acidificó con ácido acético (21 ml), se diluyó con agua (50 ml) y se extrajo con cuatro porciones de 50 ml de 6ter etilico cada una. Se separó la fase orgánica y la solución acuosa se extrajo con 4 porciones de 50 ml de 6ter etilico. Las fases orgánicas reunidas se lavaron con una solución de Na2CO3 al 5 %. La solución alcalina se acidificó con H2SO4 al 98 % y se extrajo con dos porciones de 50 ml de 6ter etilico cada una. La fracción etérea de la fase acida se reunió con la extrada de la fase alcalin, se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se evaporaron a sequedad. El residuo aceitoso obtenido (23.2 g), est6 compuesto principalmente por productos de condensación. Este producto aceitoso, ácido acético glacial (80 ml), HBr al 48 % (53 ml) y agua (27 ml), se reflujaron durante 26 h. Después, la mezcla de reacción se concentró a presión reducida, se diluyó con agua (100 ml) y se extrajo con 4 porciones de 50 ml de 6ter etilico cada una. Las fases orgánicas reunidas se lavaron con una solución de NaHCO3 al 5 % y la fase etérea se guardó. La fase alcalin se acidificó con H2SO4 al 98 % y se extrajo con dos porciones de 50 ml de éter etilico cada una.

Las fases orgánicas combinadas se concentraron y el residuo obtenido se trató otra vez con HBr como se mencionó previamente. La fracción etérea de éste segundo tratamiento se reunió con la solución etérea separada inicialmente de la reacción original. Estas se lavaron con una solución acuosa saturada de NaCl, se secaron sobre sefiltraronyseconcentraron.Elanhidro, <BR> <BR> <BR> residuo se destiló fraccionadamente a presión reducida obteniéndose 16.5 g (79.3 %) de 6a, p. eb. 164-165 °C/7 mm Hg; RMN-1H (CDCl3) # : 0. 8 (t, 3H,- CH3), 2.0 (q, 2H,-CH2Me), 2.5 (s, 4H,-CH2-CH2-), 6.9-7.5 (m, 4H, H fenilo) ; IR (CHC13) : 1760 cm-'.

B. Preparac/on de la DL-4-hidroxi-4-(4'-fluorofenil) hexanamida (6)

Una mezcla de 6a (104 g, 0.5 moles) y amoníaco liquido (200 ml), se calent en una bomba Parr a 100-105 °C (68 atm) durante 2 h. Se eliminó el exceso de <BR> <BR> <BR> amoníaco y el residuo sólido se recristalizó con agua obteniéndose 73.9 g (65.7 %) de 6, p. f. 97-98 °C; RMN-'H (CDC13/DMSO-d6) 6 : 0.8 (t, 3H, -CH3), 1.9 (m, 6H,-CH2Me and-CH2-CH2-), 5.0 (s, 1H,-OH), 6.8 (bs, 1 H,-NH-), 7-7.7 (bs, 1H,-NH-), 7-7.7 (m, 4H, H fenilo) ; IR (KBr) : 3310,3150,1660 cm-1. Anal.

(C12H16NO2F) : C, H, N, F.

EJEMPLO 7 Actividad anticonvulsionante A. Métodos generales Se utilizaron ratones albino macho de la cepa CD-1 (Instituto Nacional de Virología, México D. F.), de 18 a 25 g de peso, los cuales se colocaron en jaulas en grupos de 20. Los ratones se mantuvieron a temperatura ambiente (20-24 °C), con agua y croquetas (marca Blue Bonnet) ad libitum, con un ciclo de 12-h luz-oscuridad (la luz se encendía a las 6.00 a. m.). Los compuestos 2, 4,6, DL-HEPA, DL-HEPP y DL-HEPB, fueron disueltos en agua, mientras que los compuestos 1,3 y 5 se disolvieron en una solución de polietilénglicol 400 al 30 % en agua. La via de administración de todos tos compuestos fue intraperitoneal (i. p.). Se determinó la dosis de pentilenotetrazol que produjo convulsiones y muerte en 100 % de los ratones (CDioo) y ésta se utilizó en las evaluaciones realizadas. El valor de CDioc obtenido para el pentilenotetrazol fue de 100 mg kg-1. Para cada compuesto, se revalu6 et tiempo óptimo de actividad anticonvulsionante antes de determinar las curvas dosis-respuesta. Para éstas últimas, el pentilenotetrazol se administró via i. p., 100 mg Rg~, a 5 grupos de 10-20 ratones que habían previamente recibido los compuestos, y la supresión de los ataques clónicos y de la muerte se consideró el punto final de la evaluación. El vehículo fue inactivo en todas las pruebas realizadas. Las DE50 y los intervalos de confianza al 95 % fueron calculados por el método de Litchfield and Wilcoxon (Tabla 1). Ver Litchfield y cols., J. Pharmacol. Exp.

Ther. 96,99 (1949).

Tabla 1

COMPUESTO kg-1)Ki~SEMb)(mg PTZa)µmol/l 16(12-20)c)0.030DL-Cl-HEPA,1 0.001 49(43-56)15.38~1.742DL-F-HEPA,2 # DL-HEPA 61 (55-68 0.075 0. 010 DL-CI-HEPP, 3 20 (19-22) 0.031 0.007 # DL-F-HEPP, 4 43 (34-54 7.297 0.730 DL-HEPP 54 48-61 0.082 0.005 DL-Cl-HEPB, (23-31)20.92~2.35126 DL-F-HEPB, 6 46 (41-51) 7. 578 1.758 DL-HEPB 56 (51-61 0.099 0.020 0.045~0.007GABA--- 0.070~0.009R-Baclofén--- 0.124~0.015DL-Baclofén--- DL-2-Hidroxi-saclofén --- 2. 814 0.546

a) Ataques provocados por el pentilenotetrazol (PTZ) en ratones. b) Constantes de inhibición errores estándard de las medias. c) intervalos de confianza al 95 %.

B. Duración de la actividad anticonvulsionante.

A grupos de 15 a 30 ratones se les administraron los compuestos 2,4,6, DL- HEPA, DL-HEPP y DL-HEPB (100 mg kg'i. p.) y se evaluó a diferentes tiempos la protección contra las convulsiones y muerte provocadas por el pentilenotetrazol, a dosis de 100 mg kg-1 i. p..

Tabla 2 % Protección Compuesto 0.5 h2h3h4h6h1 DL-HEPA 937 657 6711 500 357 257 DL-F-HEPA, 2 91~196~690~070~14100~0 DL-HEPP 956 88. 90 6014 557 4014 b DL-F-HEPP, 4 78~471~275~7b)b) 70~040~1433~925~715~7DL-HEPB95~7 DL-F-HEPB,100~075~781.8~045~750~14100~0

a) Media SD. b) No evaluado.

C. Antagonismo de/clorhidrato de R-baclofén sobre la actividad anticonvulsionante del compuesto 3 y del DL-HEPP.

A tres grupos de 10 ratones se les administró por separado ya sea el compuesto 3 (25 mg kg-1 i. p.) ó el DL-HEPP (100 mg kg-'i. p.), y después se les inyectó a cada grupo el clorhidrato de R-baclofén a diferentes dosis (5-25 mg kg-'i. p.). Se evaluó, a los 30 min, la protection contra las convulsiones y muerte provocadas por el pentilenotetrazol (100 mg kg-'i. p.) (Fig. 5).

A tres grupos controles de 10 ratones se les administró por separado ya sea el clorhidrato de R-baclofén (25 mg kg-'i. p.), el DL-HEPP (100 mg kg~'i. p.) ó ei compuesto 3 (25 mg kg-l i. p.), y se evaluó, a los 30 min, la protección contra las convulsiones y muerte provocadas por el pentilenotetrazol (100 mg kg-1 i. p.) (Fig. 5). En las evaluaciones fannacológicas realizadas el clorhidrato de R- baclofén no presentó actividad anticonvulsionante, a dosis de 25 mg kg-1, contra las convulsiones y muerte provocadas por el pentilenotetrazol. Se determinó la mortalidad en tres grupos controles de 10 ratones a los cuales se les administró por separado las combinaciones ya sea del DL-HEPP (100 mg kg-1 i. p.) ó del compuesto 3 (25 mg kg-1 i. p.), con el clorhidrato de R-baclofén (25 mg kg-1 i.p.).

No se observó ninguna muerte en los grupos controles de ratones, a los cuales se les administraron las combinaciones del clorhidrato de R-baclofén con el compuesto 3 ó con el DL-HEPP.

EJEMPLO 8 Expenmentos de unión con el R-H]-baclofén A. Métodos generales Se utilizaron ratas Wistar macho (CINVESTAV-IPN, México D. F.), de 120 a 180 g de peso, las cuales se colocaron en jaulas en grupos de 20. Las ratas se mantuvieron a temperatura ambiente (20-24 °C), con agua y croquetas (marca Purina Chow) ad libitum, con un ciclo de 12-h luz-oscuridad (la luz se encendía a las 7.00 a. m.). Tanto las fenil alcohol amidas así como los compuestos estándard utilizados en el ensayo, se disolvieron en una solución de Tris-HCI 50 mmoi/l-CaCi2 2.5 immola, pH 7.4. porlasfenilalcoholamidasdelauniónespecíficadelR-[3H]-B.Inh ibición baclofén, a los receptores GABAs, de membranas sinápticas de cerebro de rata Las membranas sinópticas crudas fueron preparadas a partir de cerebro de rata y los experimentos de unión fueron realizados por triplicado de acuerdo esencialmente al método publicado previamente. Ver Bowery et al., Br. J.

Pharmacol. 78,191 (1983). Se determinó la concentración de cada compuesto que redujo el 50 % de la unión específica del R- [3H]-baclofén (IC5o). Se analizaron los resultados de los datos de ya sea 2 ó 3 experimentos independientes realizados por triplicado. Se obtuvieron los valores de IC50 a

partir de las curvas de desplazamiento utilizando un análisis de regresión no lineal. Ver programa PRISMA, versión 1.0, Graph Pad Software Inc., San Diego, CA (USA). Posteriormente, los vatores de ICso se utilizaron para calcular las constantes de inhibición (Ki) (Tabla 1). Ver Cheng et al., Biochem.

Phannacol. 22,3099 (1973) y Bowery et al., citado arriba.

Puesto que la ley de patentes en México no permite patentar el uso de nuevos compuestos con actividad farmacológica, en las reivindicaciones de la presente solicitud de patente, se incluye el uso de las fenil alcohol amidas como anticonvulsionantes.

Será entendido que la descripción precedente ejemplifica preferentemente lo más importante de la invención, y que la invención no está limitada a las formas específicas mostradas. Por ejemplo, varios derivados de los compuestos ilustrados pueden realizarse por los métodos descritos. Estas y otras modificaciones pueden realizarse a partir de la invención sin alejarse de la esfera de aplicación de la misma, tal y como se expresa en las reivindicaciones adjuntas.