La présente invention concerne de nouveaux dérivés indoles, leur procédé de préparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent.

Les composés de la présente invention sont nouveaux et présentent des caractéristiques pharmacologiques très intéressantes concernant les récepteurs mélatoninergiques.

De nombreuses études ont mis en évidence ces dix dernières années le rôle capital de la mélatonine (N-acétyl-5-méthoxytryptamine) dans de nombreux phénomènes physio- pathologiques ainsi que dans le contrôle des rythmes circadiens. Toutefois, elle possède un temps de demi-vie assez faible dû à une rapide métabolisation. Il est donc très intéressant de pouvoir mettre à la disposition du clinicien des analogues de la mélatonine, métaboliquement plus stables et présentant un caractère agoniste ou antagoniste, dont on peut attendre un effet thérapeutique supérieur à celui de l'hormone elle-même.

Outre leur action bénéfique sur les troubles du rythme circadien (J. Neurosurg. 1985, 63, pp. 321-341) et du sommeil (Psychopharmacology, 1990, 100, pp. 222-226), les ligands du système mélatoninergique possèdent d'intéressantes propriétés pharmacologiques- sur le système nerveux central, notamment anxiolytiques et antipsychotiques (Neuropharmacology of Pineal Sécrétions, 1990, 8 (3-4), pp. 264-272), analgésiques (Pharmacopsychiat., 1987, 20, pp. 222-223), ainsi que pour le traitement des maladies de Parkinson (J. Neurosurg. 1985, 63, pp. 321-341) et d'Alzheimer (Brain Research, 1990, 528, pp. 170-174). De même, ces composés ont montré une activité sur certains cancers (Melatonin - Clinical Perspectives, Oxford University Press, 1988, pp. 164-165), sur l'ovulation (Science 1987, 227, pp. 714-720), sur le diabète (Clinical Endocrinology, 1986, 24, pp. 359-364), et dans le traitement de l'obésité (International Journal of Eating Disorders, 1996, 20 (4), pp. 443-446). Ces différents effets s'exercent par l'intermédiaire de récepteurs spécifiques de la mélatonine. Des études de biologie moléculaire ont montré l'existence de plusieurs sous- types réceptoriels pouvant lier cette hormone (Trends Pharmacol. ScL, 1995, 16, p. 50). Certains de ces récepteurs ont pu être localisés et caractérisés pour différentes espèces, dont les mammifères.

Les composés de la présente invention, outre leur nouveauté, montrent une très forte affinité pour les récepteurs de la mélatonine.

La présente invention concerne plus particulièrement les composés de formule (I) :

dans laquelle :

R représente un groupement alkyle (C ₁ -C ₆ ) linéaire ou ramifié, un groupement cycloalkyle (C ₃ -C ₈ ), ou un groupement cycloalkyle (C ₃ -C ₈ ) alkyle (C ₁ -C ₆ ) linéaire ou ramifié,

leurs énantiomères et diastéréoisomères, ainsi que leurs sels d'addition à une base pharmaceutiquement acceptable.

Parmi les bases pharmaceutiquement acceptables, on peut citer à titre non limitatif l'hydroxyde de sodium, l'hydroxyde de potassium, la triéthy lamine, la tertbuty lamine, etc..

R représente avantageusement un groupement alkyle (C ₁ -C ₆ ) linéaire ou ramifié et, plus particulièrement, les groupements méthyle, éthyle et propyle.

De manière préférée, l'invention concerne les composés qui sont : • le N-[3-hydroxy-2-(5-méthoxy-lH-indol-3-yl)propyl]acétamide,

• le N-[(2i?)-3-hydroxy-2-(5-méthoxy-lH-indol-3-yl)propyl]acéta mide, '

• et le N-[(2S)-3-hydroxy-2-(5-méthoxy-lH-indol-3-yl)propyl]acétam ide.

Les sels d'addition à une base pharmaceutiquement acceptable des composés préférés de l'invention font partie intégrante de l'invention.

L'invention s'étend également au procédé de préparation du composé de formule (I) caractérisé en ce que l'on utilise comme produit de départ le composé de formule (II) :

que l'on soumet à l'action du 3-nitroacrylate d'éthyle pour conduire, par addition de Michael, au composé de formule (III) :

que l'on réduit par hydrogénation catalytique, en présence de l'anhydride d'acyle de formule RCO-O-COR dans laquelle R est tel que défini dans la formule (I), pour conduire au composé de formule (IV) : - A -

dans laquelle R est tel que défini précédemment,

que l'on soumet à une réduction en présence d'un hydrure, pour conduire au composé de formule (I),

qui peut être purifié selon une technique classique de séparation, que l'on transforme, si on le souhaite, en ses sels d'addition à une base pharmaceutiquement acceptable et dont les isomères optiques peuvent être séparés sur colonne chirale selon une technique classique de séparation.

L'étude pharmacologique des dérivés de l'invention a montré qu'ils étaient atoxiques, doués d'une forte affinité sélective pour les récepteurs de la mélatonine et possédaient d'importantes activités sur le système nerveux central et, en particulier, on a relevé des propriétés thérapeutiques sur les troubles du sommeil, des propriétés antidépressives, anxiolytiques, antipsychotiques, analgésiques ainsi que sur la microcirculation, qui permettent d'établir que les produits de l'invention sont utiles dans le traitement du stress, des troubles du sommeil, de l'anxiété, des dépressions saisonnières ou de la dépression majeure, des pathologies cardiovasculaires, des pathologies du système digestif, des insomnies et fatigues dues aux décalages horaires, de la schizophrénie, des attaques de panique, de la mélancolie, des troubles de l'appétit, de l'obésité, de l'insomnie, des troubles psychotiques, de l'épilepsie, du diabète, de la maladie de Parkinson, de la démence sénile, des divers désordres liés au vieillissement normal ou pathologique, de la migraine, des pertes de mémoire, de la maladie d'Alzheimer, ainsi que dans les troubles de la circulation cérébrale. Dans un autre domaine d'activité, il apparaît que dans le traitement, les produits de l'invention peuvent être utilisés dans les dysfonctionnements sexuels, qu'ils possèdent des propriétés d'inhibiteurs de l'ovulation, d'immunomodulateurs et qu'ils sont susceptibles d'être utilisés dans le traitement des cancers.

Les composés seront utilisés de préférence dans les traitements de la dépression majeure, des dépressions saisonnières, des troubles du sommeil, des pathologies cardiovasculaires, des pathologies du système digestif, des insomnies et fatigues dues aux décalages horaires, des troubles de l'appétit et de l'obésité.

Par exemple, les composés seront utilisés dans le traitement de la dépression majeure, des dépressions saisonnières et des troubles du sommeil.

La présente invention a également pour objet les compositions pharmaceutiques contenant au moins un composé de formule (I) seul ou en combinaison avec un ou plusieurs excipients pharmaceutiquement acceptables.

Parmi les compositions pharmaceutiques selon l'invention, on pourra citer, plus particulièrement celles qui conviennent pour l'administration orale, parentérale, nasale, per ou transcutanée, rectale, perlinguale, oculaire ou respiratoire et notamment les comprimés simples ou dragéifiés, les comprimés sublinguaux, les sachets, les paquets, les gélules, les glossettes, les tablettes, les suppositoires, les crèmes, les pommades, les gels dermiques, et les ampoules buvables ou injectables.

Les compositions pharmaceutiques citées précédemment illustrent l'invention mais ne la limitent en aucune façon.

La posologie varie selon le sexe, l'âge et le poids du patient, la voie d'administration, la nature de l'indication thérapeutique, ou des traitements éventuellement associés et s'échelonne entre 0,01 mg et 1 g par 24 heures en une ou plusieurs prises.

Les exemples suivants illustrent l'invention et ne la limitent en aucune façon. Les produits de départ utilisés sont des produits connus ou préparés selon des modes opératoires connus. Les structures des composés, décrits dans les exemple, ont été déterminées selon les techniques spectroscopiques usuelles (infrarouge, RMN, spectrométrie de masse...).

Les préparations suivantes conduisent à des intermédiaires de synthèse utiles dans la préparation des composés de l'invention.

Préparation 1 : 2-Iodo-3-nitropropionate d'éthyle

50,8 g (200 mmol) de diiode et 70 ml (640 mmol) d'acrylate d'éthyle sont dissous dans 600 ml d'éther diéthylique. Cette solution est agitée pendant 15 minutes puis refroidie à 0 °C. Extemporanément, 61 ml (800 mmol) d'acide nitrique (65 % technique) sont ajoutés goutte à goutte sur 45 g de cuivre en copeaux pour former du dioxyde d'azote qui est mis à buller dans la solution d'éther maintenue à 0 °C. Le bullage doit s'effectuer sur une période de 45 minutes puis la solution est agitée 1 heure à 0 °C et, enfin, 5 heures à température ambiante. La phase organique est lavée avec une solution saturée en thiosulfate de sodium puis séchée sur MgSO ₄ anhydre et évaporée. Après élimination des produits secondaires par évaporation sous pompe à vide poussé, le produit du titre est obtenu sous la forme d'une huile rouge. Sp_ectr_omé_trie de_masse : m/z = 274,0 (M+H) ⁺ ; 296,0 (M+Na) ⁺

Préparation 2 : 3-Nitroacrylate d'éthyle

Sous argon, 820 mg (3 mmol) du composé de la Préparation 1 sont solubilisés dans 10 ml d'éther diéthylique. A cette solution, sont ajoutés 370 mg (4,5 mmol) d'acétate de sodium. Le mélange est porté à reflux et agité pendant 3 heures. Après ajout de 10 ml d'éther diéthylique, la phase organique est lavée successivement avec 20 ml d'une solution saturée en thiosulfate de sodium, 20 ml d'une solution aqueuse en carbonate de sodium et 20 ml d'une solution aqueuse en chlorure de sodium. La phase organique récupérée est séchée sur MgSO ₄ anhydre puis évaporée. Le produit du titre est obtenu sans autre purification sous la forme d'une huile rouge. Spβçtrométrie de masse : m/z = 146,0 (M+H) ⁺

Exemple 1 : JV-[3-Hydroxy-2-(5-méthoxy-l/y-indol-3-yl)propyl]acétamide

Stade A : 2-(5-Méthoxy-lH-indol-3-yl)-3-nitropropionate d'éthyle

Dans 150 ml d'acétonitrile, 1,70 g (4,5 mmol) de chlorure de cérium (III) heptahydrate, 675 mg (4,5 mmol) de iodure de sodium et 7,5 g de silice sont agités pendant une nuit à température ambiante. L'acétonitrile est ensuite évaporé sous pression réduite. A ce mélange, sont ajoutés 2,21 g (15 mmol) de 5-méthoxyindole et 2,18 g (15 mmol) du composé de la Préparation 2. Le milieu réactionnel est agité vigoureusement pendant 18 heures à température ambiante. De l'éther diéthylique est ensuite ajouté et le brut est filtré sur célite. Après évaporation, le résidu est purifié par chromatographie sur gel de silice (acétate d'éthyle / éther de pétrole 3 / 7) pour donner le produit du titre sous la forme d'une huile jaune. Sjιectrqmétrie_de_masse : m/z = 293,0 (M+ H) ⁺

Stade B : 3-Acétamido-2-(5-méthoxy-llî-indol-3-yl)propionate d'éthyle

Sous une pression de 60 psi d'hydrogène, 2,14 g (7,3 mmol) du composé obtenu au Stade A, 1,2 g (14,6 mmol) d'acétate de sodium et 400 mg de nickel de Raney® en suspension dans 60 ml d'anhydride acétique sont agités pendant 15 heures à 50 °C. Après filtration sur célite, la solution est lentement piégée avec une solution saturée de carbonate de sodium puis avec du carbonate de sodium solide. Le milieu est extrait avec de l'acétate d'éthyle, lavé une fois avec une solution saturée de bicarbonate de sodium et deux fois avec de l'eau. Après séchage sur MgSO ₄ anhydre et évaporation, le produit du titre est obtenu sous la forme d'un solide blanc. Point de 'Jusion : 117 ⁰ C

^~ N-[3-Hydroxy-2-(5-méthoxy-lH-indol-3-yl)propyl]acéta mide

Sous argon, 800 mg (2,6 mmol) du composé obtenu au Stade B sont dissous dans 10 ml de tétrahydrofurane fraîchement distillé. A ce mélange à 0 °C, sont ajoutés par portions 200 mg (5,2 mmol) d'hydrure d'aluminium et de lithium. En fin d'addition, le bain de glace est retiré. Après 20 minutes d'agitation, le mélange est refroidi à 0 °C puis piégé avec de l'eau. Le milieu est extrait au dichlorométhane, lavé deux fois avec une solution saturée de chlorure de sodium et une fois avec de l'eau. Après séchage sur MgSO ₄ anhydre et évaporation, le résidu est purifié par chromatographie sur gel de silice (acétate d'éthyle / méthanol 40 / 1) pour donner le composé du titre sous la forme d'une poudre blanche. Point de Ju_siqn : 140 ⁰ C Exemple 2 : N-[(2R)-3-hydroxy-2-(5-méthoxy-l//-indol-3-yl)propyl]acéta mide

L'énantiomère R a été obtenu par séparation sur colonne préparative chirale. Exemple 3 : Λ ^r -[(2S)-3-hydroxy-2-(5-méthoxy-l//-indol-3-yl)propyl]a cétamide

L'énantiomère S a été obtenu par séparation sur colonne préparative chirale.

ETUDE PHARMACOLOGIQUE

EXEMPLE A : Etude de la toxicité aiguë

La toxicité aiguë a été appréciée après administration orale à des lots de 8 souris (26 ± 2 grammes). Les animaux ont été observés à intervalles réguliers au cours de la première journée et quotidiennement pendant les deux semaines suivant le traitement. La DL 50, entraînant la mort de 50 % des animaux, a été évaluée et a montré la faible toxicité des composés de l'invention.

EXEMPLE B : Test de la nage forcée

Les composés de l'invention sont testés dans un modèle comportemental, le test de la nage forcée.

L'appareil est constitué d'un cylindre en plexiglas rempli d'eau. Les animaux sont testés individuellement pendant une session de 6 minutes. Au début de chaque test, l'animal est placé au centre du cylindre. Le temps d'immobilisation est enregistré. Chaque animal est jugé immobile quand il cesse de se débattre, et reste à la surface de l'eau, immobile, ne faisant seulement que les mouvements lui permettant de maintenir la tête hors de l'eau.

Après administration 40 minutes avant le début du test, les composés de l'invention diminuent de façon significative la durée d'immobilisation attestant de leur activité antidépressive.

EXEMPLE C : Etude de liaison aux récepteurs MTi et MT ₂ de la mélatonine

Les expériences de liaison aux récepteurs MTi ou MT ₂ sont réalisées en utilisant la 2-[ ¹²⁵ I]-iodomélatonine comme radioligand de référence. La radioactivité retenue est déterminée à l'aide d'un compteur à scintillation liquide.

Des expériences de liaison compétitive sont ensuite réalisées en triple, avec les différents composés à tester. Une gamme de concentrations différentes est testée pour chaque composé. Les résultats permettent de déterminer les affinités de liaison des composés testés (Kj).

Ainsi, les valeurs de Kj trouvées pour les composés de l'invention attestent d'une liaison pour l'un ou l'autre des sites de liaisons mélatoninergiques, ces valeurs étant < 10 μM. A titre d'exemple, le composé obtenu dans l'Exemple 1 présente un Kj(MT ₁ ) de 49.1 nM, et un K ₁ (MT ₂ ) de 5.7 nM.

EXEMPLE D : Action des composés de l'invention sur les rythmes circadiens d'activité locomotrice du rat

L'implication de la mélatonine dans l'entraînement, par l'alternance jour/nuit, de la plupart des rythmes circadiens physiologiques, biochimiques et comportementaux a permis d'établir un modèle pharmacologique pour la recherche de ligands mélatoninergiques. Les effets des molécules sont testés sur de nombreux paramètres et, en particulier, sur les rythmes circadiens d'activité locomotrice qui représentent un marqueur fiable de l'activité de l'horloge circadienne endogène.

Dans cette étude, on évalue les effets de telles molécules sur un modèle expérimental particulier, à savoir le rat placé en isolement temporel (obscurité permanente).

Protocole expérimental Des rats mâles âgés de un mois sont soumis dès leur arrivée au laboratoire à un cycle lumineux de 12 heures de lumière par 24 heures (LD 12 : 12).

Après 2 à 3 semaines d'adaptation, ils sont placés dans des cages équipées d'une roue reliée à un système d'enregistrement afin de détecter les phases d'activité locomotrice et de suivre ainsi les rythmes nycthéméraux (LD) ou circadiens (DD). Dès que les rythmes enregistrés témoignent d'un entraînement stable par le cycle lumineux

LD 12 : 12, les rats sont mis en obscurité permanente (DD).

Deux à trois semaines plus tard, lorsque le libre-cours (rythme reflétant celui de l'horloge endogène) est clairement établi, les rats reçoivent une administration quotidienne de la molécule à tester.

Les observations sont réalisées grâce à la visualisation des rythmes d'activité :

- entraînement des rythmes d'activité par le rythme lumineux, - disparition de l'entraînement des rythmes en obscurité permanente,

- entraînement par l'administration quotidienne de la molécule ; effet transitoire ou durable.

Un logiciel permet :

- de mesurer la durée et l'intensité de l'activité, la période du rythme chez les animaux en libre cours et pendant le traitement, - de mettre éventuellement en évidence par analyse spectrale l'existence de composants circadiens et non circadiens (ultradiens par exemple).

Résultats

II apparaît clairement que les composés de l'invention permettent d'agir de façon puissante sur le rythme circadien via le système mélatoninergique.

EXEMPLE E : Test des cages claires/obscures

Les composés de l'invention sont testés dans un modèle comportemental, le test des cages claires/obscures, qui permet de révéler l'activité anxiolytique des molécules.

L'appareil est composé de deux boîtes en polyvinyle couvertes de Plexiglas. L'une de ces boîtes est obscure. Une lampe est placée au-dessus de l'autre boîte donnant une intensité lumineuse au centre de celle-ci d' approximativement 4000 lux. Un tunnel opaque en plastique sépare la boîte claire de la boîte sombre. Les animaux sont testés individuellement pendant une session de 5 minutes. Le plancher de chaque boîte est nettoyé entre chaque session. Au début de chaque test, la souris est placée dans le tunnel, face à la boîte sombre. Le temps passé par la souris dans la boîte éclairée et le nombre de transitions à travers le tunnel sont enregistrés après la première entrée dans la boîte sombre. Après administration des composés 30 minutes avant le début du test, les composés de l'invention augmentent de façon significative le temps passé dans la cage éclairée ainsi que le nombre des transitions, ce qui montre l'activité anxiolytique des dérivés de l'invention.

EXEMPLE F : Composition pharmaceutique

Formule de préparation pour 1000 comprimés dosés à 5 mg de N-[3-hydroxy-2-

(5-méthoxy-l//-indol-3-yl)propyl]acétamide (Exemple 1) 5 g

Amidon de blé 20 g

Amidon de maïs 20 g

Lactose 30 g Stéarate de magnésium 2 g

Silice 1 g

Hydroxypropylcellulose 2 g